TW202509035A

TW202509035A - Ｊａｋ抑制劑化合物及晶型

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Publication number: TW202509035A
Application number: TW113117443A
Authority: TW
Inventors: 劉世嵐; 張詩宜
Original assignee: 大陸商上海岸闊醫藥科技有限公司
Priority date: 2023-05-12
Filing date: 2024-05-10
Publication date: 2025-03-01
Also published as: WO2024235149A1

Abstract

本發明關於一種化合物或其晶型，以及其製備方法，用途和包含該化合物或其晶型的醫藥組成物，該化合物或醫藥組成物用作JAK抑制劑前藥，該JAK抑制劑可以包括託法替尼。

Description

JAK抑制劑化合物及晶型

本發明關於生物醫藥領域，具體的關於一種化合物及其晶型，該化合物能夠用於JAK抑制劑的前藥，本發明還關於該化合物或其晶型的用途。

託法替尼是一種JAK抑制劑，可有效抑制JAK1和JAK3的活性，現有研究中表明，託法替尼對類風濕性關節炎關節炎、潰瘍性結腸炎、銀屑病等多種發炎相關疾病有良好的治療效應。另一方面，現有技術中也揭露了使用託法替尼治療一些抗腫瘤劑所引起的副作用。但現有的託法替尼在臨床應用上存在一些弊端：其水溶性、脂溶性低，不利於皮膚製劑的開發。

因此，亟需開發新的化合物，以解決現有的託法替尼存在的問題，以滿足目前製劑開發中的用藥需求。

本發明提供了一種新的化合物，可用於JAK抑制劑的前藥，本發明也關於該化合物的晶型。本發明所製備的不同的化合物的晶型可藉助其特徵X射線粉末衍射(XRPD)圖譜、差示掃描量熱測試(DSC)曲線等手段進行鑑定並與其他晶型區分。本發明提供的化合物或其晶型具有良好的穩定性，純度高，結晶性好，且能適用於生產與保存。

一方面，本發明提供了式(I)的化合物，其結構式為：

在某些實施例中，該式(I)的化合物包括其晶型、可藥用鹽、生物活性代謝物、溶劑化物、水合物、外消旋體、對映體或立體異構物。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型A，

在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°和11.3±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型A進一步在6.8±0.2°、15.7±0.2°、17.0±0.2°、17.6±0.2°、19.6±0.2°、20.6±0.2°、21.2±0.2°、23.9±0.2°和24.7±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型A，

其在120.7±1℃處具有吸熱峰。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型B，

在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在7.0±0.2°、7.8±0.2°和21.1±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型B進一步在14.0±0.2°、11.2±0.2°、19.6±0.2°、17.5±0.2°、28.2±0.2°、20.5±0.2°、26.2±0.2°、20.9±0.2°和19.8±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型B，

其在95.1±1℃和113.4±1℃處具有吸熱峰。

另一方面，本發明還提供了一種醫藥組成物，其包括所述式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，以及視需要地藥學上可接受的載體。

另一方面，本發明書也提供了該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，或該醫藥組成物作為JAK抑制劑前藥的應用。

另一方面，本發明書也提供了該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，或該醫藥組成物在製備藥物中的用途，該藥物用於預防和/或治療疾病和/或病症。

在某些實施方式中，該疾病和/或病症包括受試者與抗腫瘤劑相關的疾病或病症。

在某些實施方式中，該與抗腫瘤劑相關的疾病或病症包括與施用抗腫瘤劑相關的皮疹。

在某些實施方式中，該疾病和/或病症包括皮膚疾病或病症和/或皮下組織疾病或病症。

在某些實施例中，該皮膚疾病或病症包括免疫性皮膚疾病或病症。

在某些實施方式中，該皮膚疾病或病症包括異位性皮膚炎、斑禿或銀屑病。

在某些實施方式中，該藥物的給藥形式包含乳膏、洗劑、凝膠、軟膏、油膏、噴劑、脂質體製劑、擦劑和/或氣霧劑。

在某些實施方式中，該藥物中還包括一種或多種其他活性成分。

另一方面，本發明也提供了一種預防和/或治療疾病和/或病症的方法，其包括向有需要的受試者施用該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，或該醫藥組成物。

另一方面，本發明還提供了藥物組合或試劑盒，其包括：1)抗腫瘤劑；以及2)該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B或該的醫藥組成物。

在某些實施方式中，該藥物組合或試劑盒也包括緩衝液。

在某些實施方式中，該藥物組合或試劑盒也包括賦形劑。

在某些實施方式中，該藥物組合或試劑盒中該的組分1)與該組分2)彼此不混合。

所屬技術領域中具有通常知識者能夠從下文的詳細描述中輕鬆洞察到本發明的其它方面和優勢。下文的詳細描述中僅顯示和描述了本發明的示例性實施方式。如所屬技術領域中具有通常知識者將認識到的，本發明的內容使得所屬技術領域中具有通常知識者能夠對所公開的具體實施方式進行改動而不脫離本發明所關於發明的精神和範圍。相應地，本發明的附圖和說明書中的描述僅是示例性的，而非為限制性的。

本發明所關於的發明的具體特徵如所附權利要求書所顯示。藉由參考下文中詳細描述的示例性實施方式和附圖能夠更好地理解本發明所關於發明的特徵和優勢。對圖式簡要說明如下：

第1圖顯示的是本發明該式(I)的化合物的Form A晶型的XPRD譜圖。

第2圖顯示的是本發明該式(I)的化合物的Form A晶型的DSC譜圖。

第3圖顯示的是本發明該式(I)的化合物的Form B晶型的XPRD譜圖。

第4圖顯示的是本發明該式(I)的化合物的Form B晶型的DSC譜圖。

第5圖顯示的是本發明該靶向治療劑引起皮疹的大鼠左側、背部和右側的照片。

第6圖顯示的是本發明本發明實施例3-27的對照組、給藥組大鼠皮疹的代表性照片。

第7圖顯示的是本發明實施例3-27的部分對照組、給藥組皮疹等級結果。

第8圖顯示的是本發明實施例28-30的部分對照組、給藥組皮疹等級結果。

第9圖顯示的是本發明實施例31-44的部分對照組、給藥組皮疹等級結果。

第10圖顯示的是本發明實施例45-48的部分對照組、給藥組皮疹等級結果。

以下由特定的具體實施例說明本發明發明的實施方式，所屬技術領域中具有通常知識者可由本說明書所揭露的內容輕鬆了解本發明發明的其他優點及效果。

[術語定義]

在本發明中，術語“晶型(crystal form)”、“多晶型”、“多晶型物(polymorphs)”、“晶體變化形式(crystal modification)”、“結晶變化形式(crystalline modification)”、“多晶型形式”和“結晶形式(crystalline form)”被理解為是同義的，在本發明中通常是指化合物或複合物的固體晶體形式，包括但不限於，單組分或者多組成晶體，和/或化合物的多晶型、溶劑化物、水合物、包合物、共晶、鹽、鹽的溶劑化物、鹽的水合物。

可用所屬技術領域中具有通常知識者所熟知的技術檢測、鑑定、分類和定性多晶型物，這些技術例如但不限於：差示掃描量熱(DSC)、熱重分析法(TGA)、X-射線粉末衍射法(XRPD)、單晶X射線繞射法、振動光譜法、溶液量熱法、固態核磁共振(SSNMR)、傅立葉轉換-紅外光譜(FT-IRspectrum)法、拉曼光譜(Ramanspectrum)法、熱載台光學顯微術、掃描電子顯微鏡(SEM)、電子晶體學、以及定量分析、粒度分析(PSA)、表面區域分析、溶解度和溶出速度。晶型(Polymorphism)可以描繪成具體的化合物以不同晶體變化形式結晶同時維持相同化學結構式的能力。給定物質的多晶型物為化學等同的，其含有以相同方式互相鍵合的相同原子，但它們的晶體變化形式不同，這會影響一種或多種物理性質，諸如溶出速率(dissolution rate)、熔點、堆積密度(bulk density)、穩定性、流動性質等。這類數據的圖形表示可發生小的變化(例如峰相對強度和峰位置)，原因是諸如儀器響應變化和樣品濃度及純度變化的因素，這對於所屬技術領域中具有通常知識者是公知的。儘管如此，所屬技術領域中具有通常知識者能夠比較本發明圖中的圖形數據和對未知晶型產生的圖形數據，並可確認兩組圖形數據是否表徵相同的晶型。

除非另有說明，當本發明提及光譜或以圖形形式出現的數據(例如，XRPD、FT-IR和NMR譜)時，術語“峰”通常是指本領域的普通技術人員可識別的非背景噪音造成的峰或其它特殊特徵。

如同在X射線粉末衍射(XRPD)領域中所熟知的，對任何指定的晶型而言，獲得X-射線粉末衍射圖時所用裝置、濕度、溫度、粉末晶體的取向以及其它參數均可能引起衍射圖中峰的外觀、強度和位置的一些變異性。例如，請參閱The United States Pharmacopeia#23，National Formulary#18，1843-1844頁，1995。在目前的情況中，±0.2°2θ峰位的變異性考慮到了這些可能的變化，而不會妨礙所示晶型的明確鑑定。晶型的鑑別可以基於任意獨特的差別峰(以°2θ單位計)或其組合，典型地是更顯著的峰。因此，在一些實施方案中，本發明的結晶化合物的特徵在於具有某些峰值位置的XRPD圖，具有與本發明附圖中提供的XRPD圖實質上相同的特徵。本發明所用儀器狀況，衍射峰位置可存在±0.2°的誤差容限。例如，與本發明提供的第1圖“基本一致”的X-射線粉末衍射圖可與附圖中的XRPD圖相同，或更可能其可稍微不同。這樣的XRPD圖可不必要顯示本發明所呈現的衍射圖中的每個峰，和/或可顯示由於在獲得數據時關於的條件差異而導致的該峰的外觀、強度或位移的輕微變化。所屬技術領域中具有通常知識者通過比較它們的XRPD圖，能夠確定結晶化合物的樣品是否具有與本發明所揭露的晶型相同的晶型或不同的晶型。類似地，所屬技術領域中具有通常知識者能夠確定給出的得自XRPD圖的衍射峰位置(以°2θ表示)是否在與本發明呈現的數值大致相同的位置。在本發明的上下文中，X-射線粉末衍射圖中的2θ值均以度(°)為單位。

同樣，如差示掃描量熱(DSC)領域中所熟知的，DSC曲線的熔融峰高取決於樣品的製備和測試儀器條件等許多相關的因素，而峰位置對實驗細節相對不敏感。因此，在一些實施方案中，本發明的結晶化合物的特徵在於具有特徵峰位置的DSC圖，具有與本發明附圖中提供的DSC圖實質上相同的性質。依本試驗所用儀器狀況，熔融溫度存在±3℃，±4℃或±5℃的誤差容許值。

X-射線粉末衍射圖、DSC曲線圖“實質上相同”或“基本上相同”通常是指X-射線粉末衍射圖、DSC曲線圖中至少有約50%，或至少約 60%，或至少約70%，或至少約80%，或至少約90%，或至少約95%，或至少約99%的峰值顯示在圖中。

本發明的晶體的純度可以藉由，例如已知方法諸如X-射線粉末衍射學、熱分析等來測定。本發明的晶體或混合晶體的純度不需要是100%，並且可以不低於約60%，不低於約70%，或不低於約80%，或不低於約90%，或不低於約95%，或不低於約98%。且在該範圍內的純度可以保證品質。

本發明所用的術語“約”和“大約”通常是指在給定的值或範圍的±10%以內，適當地在±5%以內，特別是在±1%以內。或者，對於本領域普通技術人員而言，術語“約”和“大約”通常表示在平均值的可接受的標準誤差範圍內。

術語“醫藥組成物”通常表示一種或多種本發明該化合物或其生理學上/藥學上可以接受的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，其他組分例如生理學上/藥學上可接受的輔料、賦形劑、稀釋劑、輔助劑、媒介物，以及附加治療劑。醫藥組成物的目的是促進化合物對生物的給藥。

如本發明所述，本發明藥學上可接受的組成物還包含藥學上可接受的輔料，這些輔料，例如像本發明所應用的，包括任何溶劑，固體賦形劑，稀釋劑，粘合劑，崩解劑，或其他液體賦形劑，分散劑，矯味劑或懸浮劑，表面活性劑，等滲劑，增稠劑，乳化劑，防腐劑，固體黏合劑或潤滑劑，等等，適合特有的目標劑型。以下文獻所描述的：In Remington：The Science and Practice of Pharmacy，21st edition，2005，ed.D.B.Troy，Lippincott Williams&Wilkins，Philadelphia，and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，eds.J.Swarbrick and J..Boylan，1988-1999，Marcel Dekker，New York，綜合此處文獻的內容，表明不同的輔料可應用於藥學上可接受的組成物的製劑和它們公知的製備方法。除了任何常規的輔料與本發明的化合物不相容的範圍，例如所產生的任何不良的生物效應或與藥學上可接受的組成物的任何其他組分以有害的方式產生的相互作用，它們的用途也是本發明所考慮的範圍。

[發明詳述]

化合物及其晶型、醫藥組成物、藥物組合或試劑盒

一方面，本發明提供一種化合物，該化合物包含式(I)所示的結構(式(I)的化合物)，

在本發明中，該化合物還可包含該式(I)的化合物的類似物。例如，該化合物的結構可以為式(I)的結構進行取代基的替換而得到的。例如，該取代基的替換可以為所屬技術領域中具有通常知識者所熟知的常規替換。例如，在進行該取代基的替換後，所屬技術領域中具有通常知識者仍能預期該新的化合物結構能夠與本發明該的式(I)的化合物具有相似或相近的技術效果。

在本發明中，術語“式(I)”可以稱為“式(I)化合物”，“式(I)所示的化合物”。這樣的術語也被定義為包括式(I)化合物的所有形式，包括水合物、溶劑合物、異構體、結晶和非結晶形式、同晶型、多晶型和代謝物。例如，式(I)化合物或其藥學上可接受地鹽，可以未溶劑化和溶劑化地形式存在。當溶劑或水的結合力較強時，配合物具有明確地化學計量，其不受濕度影響。但是，當溶劑或水的結合力較弱時，例如在通道溶劑化物和吸濕性化合物中，水/溶劑的含量將取決於濕度和乾燥條件，在這種情況下，非化學計量是常態。

“式(I)化合物”可具有不對稱碳原子。在本發明中，式(I)化合物的碳-碳鍵可用實線，實心楔形或點狀楔形表示。使用實線描繪與不對稱碳原子的鍵表示包括該碳原子上的所有可能的立體異構體(例如特定對映異構體，外消旋混合物等)。本發明的化合物可能包含一個以上的不對稱碳原子。在這些化合物中，使用實線表示與不對稱碳原子的鍵意在表明所有可能的立體異構體應包括在內。例如，除非另有說明，否則意指式(I)化合物可以對映體和非對映體或作為外消旋體和混合物存在。表示使用實線描繪與式(I)化合物中一個或多個不對稱碳原子的鍵，以及使用實心或虛線楔形描述與同一化合物中其他不對稱碳原子的鍵表明存在非對映異構體的混合物。

本發明的化合物可以以包合物或其他配合物的形式存在。在本發明的範圍內包括複合物，例如包合物，藥物-宿主包合物複合物，其中與上述溶劑化物相反，藥物和主體以化學計量或非化學計量的量存在。也包括式(I)的配合物，其含有兩種或更多種可以化學計量或非化學計量的有機和/或無機組分。所得的絡合物可以被電離，部分被電離或未被電離。

式(I)的立體異構體包括順式和反式異構體，光學異構體，例如R和S對映異構體，非對映異構體，幾何異構體，旋轉異構體，構象異構體和互變異構體，式(I)化合物，包括表現出一種以上類型異構性的化合物；及其混合物(例如外消旋體和非對映體對)。也包括其中抗衡離子具有旋光性的酸加成鹽或鹼加成鹽，例如D-乳酸酯或L-賴氨酸，或外消旋體，例如DL-酒石酸酯或DL-精氨酸。

當任何外消旋物結晶時，可能有兩種不同類型的晶體。第一類是上述外消旋化合物(真正的外消旋體)，其中產生了一種均質形式的晶體，其中含有等莫耳量的兩種對映異構體。第二類是外消旋混合物或團聚體，其中以等摩爾量產生兩種形式的晶體，每種形式包含單一對映體。

式(I)的化合物可以表現出互變異構現象和結構異構現象。例如，式(I)的化合物可以幾種互變異構形式存在，包括烯醇和亞胺形式，以及酮和烯胺形式，以及幾何異構體及其混合物。所有這些互變異構形式都包括在式(I)的化合物的範圍內。互變異構體以互變異構體的混合物形式存在於溶液中。在固體形式中，通常一個互變異構體占主導。即使可以描述一個互變異構體，本發明也包括式(I)的化合物的所有互變異構體。

本發明也包括同位素標記的化合物，其與式(I)的化合物中該相同，但其一個或多個原子被具有不同於自然界已發現的原子質量或質量數的原子取代。可加入式I(或式II、式III)化合物的同位素包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限於：²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F和³⁶Cl。某些同位素標記的式I(或式II、式III)化合物，例如其中加入放射性同位素(如³H和¹⁴C)，由於其易於製備和可檢測性，可用於藥物和/或底物組織分佈測定。較重的同位素如²H，由於其較大的代謝穩定性，例如在體內半衰期延長或劑量要求降低，可以提供某些治療上的優勢。同位素標記的式I(或式II、式III)化合物通常可藉由以同位素標記的試劑取代非同位素標記的試劑來製備。

本發明的化合物可以以衍生自無機或有機酸的鹽的形式使用。某些化合物由於具有一種或多種鹽的物理性質，具有如在不同溫度和濕度下增強的藥物穩定性，或在水/油中的所需溶解度的優勢。在某些情況下，化合物的鹽也可以用作化合物的分離，純化和/或解析的助劑。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型A，

在某些實施例中，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A還可以在6.8±0.2°、15.7±0.2°、17.0±0.2°、17.6±0.2°、19.6±0.2°、20.6±0.2°、21.2±0.2°、23.9±0.2°和24.7±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在6.8±0.2°、8.2±0.2°和11.3±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和15.7±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和17.0±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和17.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和19.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和20.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和21.2±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和23.9±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°、11.3±0.2°和24.7±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在6.8±0.2°、8.2±0.2°、11.3±0.2°、15.7±0.2°和17.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在6.8±0.2°、8.2±0.2°、11.3±0.2°、15.7±0.2°、17.0±0.2°和17.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型A可以在差示掃描量熱測試中顯示在約120.7±1℃處具有吸熱峰。例如，該式(I)的化合物的晶型A可以在差示掃描量熱測試中顯示在約120.73℃處具有吸熱峰。

例如，該式(I)的化合物的晶型A在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°和11.3±0.2°的2θ角處顯示特徵峰，且該式(I)的化合物的晶型A在差示掃描量熱測試中顯示在約120.7±1℃處具有吸熱峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型A的X射線粉末衍射圖可以與第1圖基本上相同。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型A的DSC圖譜可以基本上與第2圖相同。

另一方面，本發明書也提供了式(I)的化合物的晶型B，

在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°和21.1±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

在某些實施例中，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B可以進一步在14.0±0.2°、11.2±0.2°、19.6±0.2°、17.5±0.2°、28.2±0.2°、20.5±0.2°、26.2±0.2°、20.9±0.2°和19.8±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和14.0±0.2°2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和11.2±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和19.6±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和17.5±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和28.2±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和20.5±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和26.2±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和20.9±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°和19.8±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。

例如，在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°、21.1±0.2°、14.0±0.2°、11.2±0.2°、19.6±0.2°、17.5±0.2°、28.2±0.2°、20.5±0.2°、26.2±0.2°、20.9±0.2°和19.8±0.2° 2θ角處顯示特徵峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型B可以在差示掃描量熱測試中顯示在95.1±1℃和113.4±1℃處具有吸熱峰。例如，該式(I) 的化合物的晶型B可以在差示掃描量熱測試中顯示在約95.08℃和約113.37℃處具有吸熱峰。

例如，該式(I)的化合物的晶型B在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°和21.1±0.2°的2θ角處顯示特徵峰，且該式(I)的化合物的晶型B在差示掃描量熱測試中顯示在95.1±1℃和113.4±1℃處具有吸熱峰。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型B的X射線粉末衍射圖可以基本上與第3圖相同。

在某些實施例中，該式(I)的化合物的晶型B的DSC圖譜可以基本上與第4圖相同。

在本發明中，該式(I)的化合物可以是一種JAK抑制劑前藥。例如，該JAK抑制劑可以是託法替尼。

另一方面，本發明還提供了醫藥組成物，其包含本發明該的式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，以及視需要地藥學上可接受的載體。

另一方面，本發明書也提供了藥物組合或試劑盒，其包括：1)EGFR抑制劑；以及2)該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B或該醫藥組成物。

在本發明中，該藥物組合或試劑盒亦可包括緩衝液。

在本發明中，該藥物組合或試劑盒還可包括賦形劑。

在本發明中，該藥物組合或試劑盒中的該組分1)可以與該組分2)彼此不混合。

在本發明中，該藥物組合試劑盒中的該組分2)基本上不影響該組分1)的治療效果。

在本發明中，該“基本上不影響”可以指，與單獨使用該抗腫瘤劑/該EGFR抑制劑的治療效果相比，使用該藥物組合或試劑盒的2)中的該化合物或其藥學上可接受的鹽和1)中的該抗腫瘤劑/EGFR抑制劑的治療效果相當，或不產生顯著的劣勢。例如，對任意的受試者，與單獨使用該抗腫瘤劑/EGFR抑制劑的治療效果相比，使用該藥物組合或試劑盒的2)中的該式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽和1)中的該抗腫瘤劑/EGFR抑制劑導致的腫瘤體積減少的程度是相同的，或者，減少的程度不小於約5%、不小於約4%、不小於約3%、不小於約2%、不小於約1%、不小於約0.5%、不小於約0.1%、不小於約0.01%、不小於約0.001%或更小。

方法、用途

另一方面，本發明書也提供了該式(I)的化合物，該式(I)的化合物的晶型A，該式(I)的化合物的晶型B，或該醫藥組成物作為JAK抑制劑前藥的應用。例如，該JAK抑制劑可以是託法替尼。

本發明中使用的術語“預防”通常是指預防疾病或其一種或多種症狀的發作，復發或擴散。在本發明中“預防”可以與“預防性治療”互換使用。在某些實施方案中，“預防”通常是指在症狀發作之前，在有或沒有本發明所述的其他藥物的情況下，向患有本發明所述的疾病或病症的患者提供本發明所述的藥物的治療。

本發明中使用的術語“治療”通常是指消除或改善疾病，或與疾病相關的一種或多種症狀。在一些實施方式中，治療通常是指通過向患有這種疾病的患者施用一種或多種治療劑而使得疾病消除或緩解。在一些實施方式中，“治療”可以是在特定疾病的症狀發作後，在其他治療劑存在或不存在的情況下施用藥物。

本發明中使用的術語“受試者”通常是指需要診斷、預後、改善、預防和/或治療疾病的人或非人類動物(包括哺乳動物)，特別是那些需要JAK抑制劑治療或預防的人受試者。

在一些實施方式中，該受試者可以是人類或非人類哺乳動物。非人類哺乳動物可以包括任何除人之外的哺乳動物物種，例如家畜動物(例如，牛、豬、羊、雞、兔或馬)，或囓齒類動物(例如，大鼠和小鼠)，或靈長類動物(例如，大猩猩和猴子)，或家養動物(例如，狗和貓)。

抗腫瘤劑相關的疾病或病症

在本發明中，該疾病和/或病症可以包括由施用抗腫瘤劑引起的疾病和/或病症。

在一些實施方式中，該受試者可以包括癌症患者。

例如，該癌症患者可以曾經、正在和/或將來被施用抗腫瘤劑。

在一些實施方式中，在施用了本發明的化合物後，受試者該的抗腫瘤劑相關的疾病或病症的嚴重程度得到了緩解。在一些實施方式中，在施用了本發明的化合物後，受試者的該EGFR功能異常引起的皮疹的嚴重程度得到了緩解。在一些實施方式中，該緩解可以是依據NCI-CTCAE V5.0的分級標準進行判斷的，例如，該受試者的上皮組織疾病的嚴重程度從5級降低至1級(例如，5級降至4級、5級降至3級、5級降至2級，4級降至3級、4級降至2級、4級降至1級、3級降至2級、3級降低至1級或2級降低至1級)。在一些實施方式中，該緩解通常可以指該受試者的該EGFR功能異常引起的皮疹的發作或發展被延遲。

在一些實施方案中，向需要受試者施用有效量的本發明所述的化合物，能夠使得受試者的皮疹的嚴重程度從5級降低至1級(例如，5級降低至4級、5級降至3級、5級降至2級、4級降至3級、4級降至2級、4級降至1級、3級降至2級、3級降至1級或2級降低至1級)。

在本發明中，該疾病和/或病症可以包括皮膚疾病和/或病症。

在本發明中，該抗腫瘤劑相關的疾病或病症包括與腫瘤劑相關的副作用。例如，該抗腫瘤劑相關的疾病或病症可以指該疾病或病症由施用一種或多種抗腫瘤劑後引起，該疾病或病症在施用該抗腫瘤劑之後產生或加重。

在沒有預防或治療實施的情況下，該疾病或病症會在該抗腫瘤劑施用約1小時後、約2小時後、約3小時後、約4小時後、約5小時後、約6小時後、約7小時後、約8小時後、約9小時後、約10小時後、約11小時後、約12小時後、約1天後、約2天後、約4天後、約7天後、約2週後、約3週後、約1個月後、約2個月後或更久後出現或加重。

例如，該抗腫瘤劑相關的疾病或病症可以包括與抗腫瘤劑相關的脫髮症、與抗腫瘤劑相關的體臭、與抗腫瘤劑相關的大皰性皮膚炎、與抗腫瘤劑相關的皮膚乾燥、與抗腫瘤劑相關的濕疹、與抗腫瘤劑相關的多形性紅斑、與抗腫瘤劑相關的紅皮病、與抗腫瘤劑相關的脂肪萎縮症、與抗腫瘤劑相關的髮色改變、與抗腫瘤劑相關的毛髮質地異常、與抗腫瘤劑相關的多毛症(hirsutism)、與抗腫瘤劑相關的多汗症(hyperhidrosis)、與抗腫瘤劑相關的角化過度症、與抗腫瘤劑相關的肥大症(hypertrichosis)、與抗腫瘤劑相關的少汗症(hypohidrosis)、與抗腫瘤劑相關的脂肥大、與抗腫瘤劑相關的指甲改變、與抗腫瘤劑相關的指甲變色、與抗腫瘤劑相關的指甲流失、與抗腫瘤劑相關的指甲隆起、與抗腫瘤劑相關的皮膚疼痛、與抗腫瘤劑相關的手足綜合症、與抗腫瘤劑相關的光敏感性、與抗腫瘤劑相關的搔癢症、與抗腫瘤劑相關的紫斑、與抗腫瘤劑相關的痤瘡樣皮疹、與抗腫瘤劑相關的斑丘疹、與抗腫瘤劑相關的頭皮疼痛、與抗腫瘤劑相關的皮膚萎縮、與抗腫瘤劑相關的皮膚色素沉著過多(skin hyperpigmentation)、與抗腫瘤劑相關的皮膚色素減退(skin hypopigmentation)、與抗腫瘤劑相關的皮膚硬結、與抗腫瘤劑相關的皮膚潰瘍、與抗腫瘤劑相關的Stevens-Johnson綜合症、與抗腫瘤劑相關的皮下氣腫、與抗腫瘤劑相關的毛細血管擴張、與抗腫瘤劑相關的中毒性表皮壞死、與抗腫瘤劑相關的皮疹和/或蕁麻疹。

例如，該抗腫瘤劑相關的疾病或病症可以包括EGFR異常相關的疾病或病症。例如，該EGFR異常相關的疾病或病症可以包括EGFR異常相關的皮疹。

在本發明中，該抗腫瘤劑可以包括小分子化合物、小分子偶聯物、蛋白質(例如抗體)和/或多核苷酸(例如DNA或RNA)。

例如，該抗腫瘤劑可以為靶向治療劑。

例如，該靶向治療劑可以包括小分子化合物。例如，該靶向治療劑可以包括抗體或其抗原結合片段。例如，該抗體可以包括單株抗體、多特異性抗體、嵌合抗體、人源化抗體、全人源抗體和/或抗體藥物偶聯物。例如，該抗原結合片段可以包括Fab’、F(ab)2、Fv片段、F(ab’)₂、scFv、di-scFv和/或dAb。例如，該靶向治療劑可以針對腫瘤細胞內部、細胞表面和/或腫瘤微環境中的分子。例如，該靶向治療劑可以針對腫瘤細胞的蛋白質和/或核酸分子。例如，該靶向治療劑可以針對腫瘤抗原。例如該靶向治療劑可以標靶EGFR、ALK、MEK、VEGFR、FGFR、PDGFR、ABL、BTK、KIT、AKT、TORC、HER2、HER3、HER4、PI3K、CDK、JAK、ROS1、RET、MET、KRAS、BRAF、BCRP、NTRK、RAS、MSI、PR/ER、BCR/ABL、HDAC、FAK、PYK2、CD20、PD-L1和/或BRCA1/2，或它們的突變體。

例如，該靶向治療劑可以包括荷爾蒙療法、訊號傳導抑制劑、基因表現調節劑、細胞凋亡誘導劑、血管生成抑制劑和/或毒素遞送分子。

例如，該靶向治療劑可以為酪胺酸激酶抑制劑。例如，該靶向治療劑可以為EGFR抑制劑、MEK抑制劑、ALK抑制劑、BTK抑制劑、PI3K抑制劑、AKT抑制劑、VEGFR抑制劑、mTOR抑制劑、HDAC抑制劑、KIT抑制劑、FGFR抑制劑、FAK抑制劑、BCRP抑制劑、EGFR/cMET抑制劑和/或SRC抑制劑，以及它們的組合。

例如，該靶向治療劑可以為EGFR抑制劑。例如，該EGFR抑制劑包括小分子EGFR抑制劑、特異性結合EGFR的蛋白大分子、抑制EGFR蛋白表達的RNAi和/或抑制EGFR蛋白表達的反義寡核苷酸。例如，該小分子EGFR抑制劑包括與EGFR可逆結合的小分子EGFR抑制劑、與EGFR不可逆結合的小分子EGFR抑制劑和/或特異性結合突變型EGFR的小分子EGFR抑制劑。例如，該EGFR抑制劑包括西妥昔單抗、吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼、Sapitinib、阿法替尼、拉帕替尼、凡德替尼、來那替尼、brigatinib、帕尼單抗、耐昔妥珠單抗、尼妥珠單抗、Tesevatinib、艾力替尼、席栗替尼、Rociletinib、卡奈替尼、AZD3759、YZJ-0318、萘普替尼、Naquotinib、PF-06747775、SPH1188-11、Poziotinib、依吡替尼、Varlitinib、艾氟替尼、HM61713、CK-101、吡咯替尼、萊洛替尼、HS-10296、AP32788、西莫替尼、GMA204、Virlitinib、Yinlitinib、那扎替尼、諾司替尼、奧莫替尼、奧希替尼、達克替尼、艾維替尼、EAI045、Lazertinib、Alflutinib、Mobocertinib、Savolitinib、Almonertinib、Trastuzumab、Tepotinib、Irbinitinib、Cemiplimab、Pyrotinib、Dacomitinib、Neratinib、Olmutinib、Mereletinib、Bosutinib、Icotinib、Vandetanib、 Lapatinib、Befotertinib、Poziotinib、Larotinib、BPI-7711、SKLB-1028、Famitinib、Dovitinib和/或Zorifertinib。

例如，該靶向治療劑可以為VEGFR抑制劑。例如，該VEGFR抑制劑選自下組：Sulfatinib、Anlotinib hydrochloride、Tivozanib、Lenvatinib、Apatinib、Intedanib、Ponatinib、Axitinib、Vandetanib、Pazopanib hydrochloride和/或Sorafenib。

例如，該靶向治療劑可以為FGFR抑制劑。

例如，該靶向治療劑可以為ALK抑制劑。

例如，該靶向治療劑可以為mTOR抑制劑。例如，該靶向治療劑可以為mTORC抑制劑。例如，該靶向治療劑可以為mTORC1抑制劑。例如，該靶向治療劑可以為mTORC2抑制劑。例如，該mTOR抑制劑選自下組：zotarolimus、sirolimus、everolimus和/或temsirolimus。

例如，該靶向治療劑可以為BTK抑制劑。例如，該BTK抑制劑選自下組：Orelabrutinib、Tirabrutinib hydrochloride、Zanubrutinib、Acalabrutinib、Ibrutinib、Dasatinib、Pirtobrutinib、Tolebrutinib、Rilzabrutinib、Fenebrutinib和/或Evobrutinib。

例如，該靶向治療劑可以為MEK抑制劑。例如，該MEK抑制劑可以選自下組：Selumetinib sulfate、Binimetinib、Cobimetinib、Trametinib和/或GSK-1120212。

例如，該靶向治療劑可以為PI3K抑制劑。例如，該PI3K抑制劑可以選自下組：Umbralisib、Alpelisib、Duvelisib、Copanlisibhydrochloride、Idelalisib、Zandelisib、Buparlisib、Enzastaurin hydrochloride、Paxalisib、Leniolisib、Rigosertib、Dactolisib、Nortriptyline和/或Parsaclisib。

例如，該靶向治療劑可以為AKT抑制劑。例如，該AKT抑制劑可以為Ipatasertib。

例如，該靶向治療劑可以為EGFR/cMET抑制劑。

例如，該靶向治療劑可以為BRAF抑制劑。例如，該BRAF抑制劑可以選自下組：Tepotinib、Dabrafenib、Vemurafenib和/或encorafenib。

例如，該靶向治療劑可以包括BRAF抑制劑和MEK抑制劑。例如，該靶向治療劑可以包括Dabrafenib和Trametinib。

例如，該靶向CD20的治療劑可以為Rituximab。

例如，該靶向治療劑可以包括EGFR抑制劑。例如，該靶向治療劑可以不包括EGFR抑制劑。

例如，該抗腫瘤劑可以為免疫治療劑。例如，該免疫治療劑能夠改變受試者體內的免疫應答。例如，該免疫治療劑能夠增強受試者體內的免疫應答。例如，該免疫治療劑可以為免疫檢查點抑制劑、經修飾的免疫細胞和/或疫苗。例如，該免疫治療劑可以為抗體。例如，該免疫治療劑可以為PD-1抑制劑、PD-L1抑制劑和/或CTLA-4抑制劑。

例如，該抗腫瘤劑可選自下組：afatinib、dacomitinib、osimertinib、EAI045、gefitinib、almonertinib、pyrotinib、brigatinib、neratinib、olmutinib、bosutinib、icotinib、vandetanib、lapatinib、alflutinib、BPI-7711、mobocertinib、dovitinib、zorifertinib、varlitinib、orelabrutinib、 tirabrutinib、zanubrutinib、acalabrutinib、ibrutinib、dasatinib、pirtobrutinib、tolebrutinib、rilzabrutinib、fenebrutinib、evobrutinib、selumetinib、binimetinib、cobimetinib、trametinib、regorafenib、GSK-1120212、alpelisib、duvelisib、copanlisib、idelalisib、nortriptyline、inavolisib、dactolisib、apitolisib、parsaclisib、buparlisib、rigosertib、enzastaurin、paxalisib、leniolisib、ipatasertib、zotarolimus、sirolimus、everolimus、temsirolimus、sorafenib、apatinib、lenvatinib、sunitinib、cabozantinib、axitinib、nintedanib、brivanib、vatalanib、fruquintinib、dabrafenib、vemurafenib、encorafenib、pazopanib、crizotinib、panobinostat、erlotinib、rituximab、panitumumab、cetuximab、Ticilimumab、Erfonrilimab、BA-3071、MEDI-5752、defactinib、Zalifrelimab、Cadonilimab、BCD-217、ipilimumab、Tremelimumab、Quavonlimab、atezolizumab、durvalumab、Camrelizumab、Tislelizumab、Sintilimab、Toripalimab、pembrolizumab、nivolumab、Amivantamab、MCLA-129、EMB-01、LY3164530、Roche Glycart anti-EGFR/cMet、Genentech Anti-met/EGFR、Samsung Anti-EGFR/cMet、Merck serono Anti-cmet/egfr和GB263，以及它們的組合。

在本發明中，該抗腫瘤劑相關的疾病或病症可以包括由兩種或兩種以上該抗腫瘤劑併用相關的疾病或病症。在本發明中，該疾病或病症可以包括由該抗腫瘤劑與一種或多種其他療法聯合使用相關的疾病或病症。在本發明中，該疾病或病症可以包括與EGFR異常相關的疾病或病症。在本發明中，該疾病或病症可以包括與EGFR異常相關的皮疹。

EGFR功能異常相關的皮疹

在本發明中，該疾病或病症可以包括EGFR功能異常相關的皮疹。在本發明中，術語“EGFR”通常是指表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor)，也稱為ErbB1或HER1，其是由c-erbB1原癌基因編碼的170kDa的跨膜糖蛋白。EGFR是受體酪胺酸激酶(RTK)的人類表皮生長因子受體(HER)家族的成員，該家族還包括HER2(ErbB2)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)。EGFR訊號藉由配體結合引發，隨後藉由誘導受體與其他ErbB家族成員的構象變化、同二聚化或異二聚化、以及受體的反式自磷酸化等(參見，Ferguson等人，Annu Rev Biophys，37：353-73，2008)，來啟動訊號傳導級聯，最終影響多種細胞功能(例如，細胞增殖和存活)。EGFR的表達或其激酶活性的增加與一系列人類癌症有關(參見，Mendelsohn等人，Oncogene 19：6550-6565，2000；GrUnwald等人，J Natl Cancer Inst 95：851-67，2003；Mendelsohn等人，Semin Oncol 33：369-85，2006)。已知在眾多癌症，如腦膠質瘤、乳癌、卵巢癌、子宮頸癌等發現了EGFR的表達升高。

在某些情況中，該EGFR功能異常相關的皮疹包括與EGFR被抑制相關的皮疹。本發明中，術語“EGFR被抑制”包括任何原因導致的(例如，由治療引起的或由受試者自身身體狀況造成的)EGFR活性、表達或數量的降低。在一些實施方式中，EGFR被抑制通常是指EGFR的活性或數量降低至少10%。在一些實施方式中，EGFR被抑制通常是指EGFR的活性或數量降低至少20%、40%、50%、80%、90%、95%或更多。在一些實施方式中，所述的降低是與同類受試者(例如，同樣的正常人或同類型的患者)中的標準值相比較的。在一些實施方式中，所述的降低是與相同受試者一段時間之前的數值相比較的。

在某些情況中，EGFR被抑制是由於施用了EGFR抑制劑。在本發明中，術語“EGFR抑制劑”通常是指本領域中已知的或將來發現的任何EGFR抑制劑，包括任何當其被施用至受試者時，導致了受試者中與EGFR活性相關的生物活性的抑制(包括任何EGFR與其天然配體結合產生的下游生物效應的抑制)的任何物質。在一些實施方式中，EGFR抑制劑包括在治療癌症過程中任何能夠阻斷EGFR活性或其任何下游生物效應的試劑。

可以藉由本領域公知的方法來確定或篩選EGFR抑制劑，例如藉由檢測施用受試化合物之後EGFR表現水平的變化。檢測EGFR的表達水平可以藉由本領域公知的方法，例如，免疫組織化學方法、PCR、RT-PCR、原位雜交、Southern blot，Western blot，Northern blot、分光光度法和ELISA等。

例如，該EGFR抑制劑可以被用於對該受試者進行癌症治療。在本發明中，術語“癌症”通常是指任何由腫瘤或惡性細胞生長、增殖或轉移所介導，並引發實體腫瘤和非實體瘤(例如，白血病)的醫學狀況。

例如，EGFR抑制劑可以藉由與EGFR受體細胞內結構域直接結合阻斷其激酶活性；或佔據了EGFR受體的配體結合位點或其一部分，使得EGFR受體與其天然配體無法接近而導致其生物活性降低或被阻斷；或藉由調節EGFR多肽的二聚化或調節EGFR多肽與其他蛋白的相互作用，增加EGFR的泛素化和內吞降解，進而降低EGFR活性。

例如，EGFR抑制劑可以是EGFR的非特異性抑制劑，即，該等抑制劑除了抑制EGFR之外，還抑制其它的目標蛋白。

例如，EGFR抑制劑直接作用於EGFR蛋白或編碼EGFR蛋白的核酸。在一些實施方式中，EGFR抑制劑直接作用於EGFR蛋白。在本發明中當使用術語“直接作用於”來形容抑制劑與目標蛋白時，通常是指抑制劑與目標蛋白之間能夠直接的、不需要通過其它分子的結合(包括共價結合和非共價結合)。

例如，EGFR抑制劑可以是小分子EGFR抑制劑、特異性結合EGFR的蛋白大分子(例如，抗體或其抗原結合片段)或抑制EGFR蛋白表現的RNAi或反義寡核苷酸。例如，EGFR抑制劑可以是小分子EGFR抑制劑或特異性結合EGFR的蛋白大分子(例如，抗體或其抗原結合片段)。

在本發明中，術語“核酸”通常是指由單體核苷酸組成的多核苷酸分子。核酸包括核糖核酸(RNA)、去氧核糖核酸(DNA)、單股核酸(ssDNA)、雙股核酸(dsDNA)、小幹擾核糖核酸(siRNA)和微RNA(miRNA)。多核苷酸的其他非限制性實例包括基因、基因片段、外顯子、內含子、信使RNA(mRNA)、轉移RNA、核醣體RNA、核酶、cDNA、shRNA、單鏈短或長RNA、重組多核苷酸、支鏈多核苷酸、質粒、載體、任何序列的分離的DNA、對照區、任何序列的分離的RNA、核酸探針和引子。核酸可以是直鏈或環狀的。

在本發明中，術語“RNAi”通常是指RNA幹擾技術，是外源或內源雙股RNA分子或小分子RNA藉由靶向mRNA並將其特異性降解而抑制基因的表達或翻譯的過程。

在本發明中，術語“寡核苷酸”通常是指核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)或其任何模擬物或結構修飾的核酸的低聚物或聚合物。該術語包括由天然存在的核鹼基、糖和共價核苷(主鏈)間鍵組成的寡核苷酸，以及具有類似功能的非天然存在的寡核苷酸。

在本發明中，術語“反義寡核苷酸”通常是指具有允許與目標核酸的對應區域或片段至少一部分地雜交的核鹼基序列的單鏈寡核苷酸。

在本發明中，術語“小分子EGFR抑制劑”可以包括與EGFR可逆結合的小分子EGFR抑制劑(例如，吉非替尼、厄洛替尼、Sapitinib和埃克替尼)，與EGFR不可逆結合的小分子EGFR抑制劑(例如，阿法替尼、Dacomitinib、拉帕替尼(Lapatinib，如Tykerb®、GW572016 GlaxoSmithKline)、凡德替尼(Vandetanib，如ZACTIMATM，ZD6474)、樂伐替尼、卡奈替尼、伐利替尼和來那替尼)和/或特異性結合突變型EGFR的小分子EGFR抑制劑(例如，奧希替尼、那扎替尼、諾司替尼、奧莫替尼、艾維替尼和EAI045)。

特異性結合EGFR的蛋白大分子可以是針對EGFR的抗體、抗體變體、融合蛋白、衍生物或其片段。在一些實施例中，特異性結合EGFR的蛋白大分子是特異性結合EGFR的抗體或其抗原結合片段。

本發明中所使用的術語“特異性結合”當用於形容EGFR抑制劑時通常是指：在複雜混合物中此EGFR抑制劑可辨識EGFR，該抑制劑與EGFR的結合常數為其與其他非特異性結合蛋白的結合常數的至少2倍。

在某些情況中，該EGFR抑制劑可以與一種或多種其他癌症治療法聯用。該其他癌症治療法可以是本領域中常規用於治療癌症的方法，例如細胞毒抗癌劑、免疫治療抗癌劑或荷爾蒙治療抗癌劑。如本發明，用於癌症治療的藥物也可以與放射治療或手術組合使用。在一些實施方式中，在將EGFR抑制劑和其他抗癌劑組合使用的情況下，它們可以同時施用於受試者，或以一定間隔分開施用。

在本發明案中，該與EGFR功能異常相關的皮疹可以是與EGFR被抑制相關的皮疹。在本發明中，該與EGFR功能異常相關的皮疹可以是與EGFR抑制劑相關的皮疹。在本發明中，該與EGFR功能異常相關的皮疹可以是在施用EGFR抑制劑之後發生的皮疹。

在本發明中，該與EGFR功能異常相關的皮疹可以包括與EGFR功能異常相關的尋常痤瘡(acne vulgaris)、與EGFR功能異常相關的丘疹性皮疹(papulopustular rash)與EGFR功能異常相關的玫瑰痤瘡(acne rosacea)、與EGFR功能異常相關的搔癢性皮疹(pruritus rash)、與EGFR功能異常相關的痤瘡樣皮疹(acneiform rash)、與EGFR功能異常相關的蜂窩性組織炎(cellulitis)、與EGFR功能異常相關的萊姆病(Lyme disease)、與EGFR功能異常相關的過敏反應(allergic reaction)、與EGFR功能異常相關的化膿性汗腺炎(hidradenitis suppurativa)、與EGFR功能異常相關的麻疹(hives)、與EGFR功能異常相關的皮膚炎(dermatitis)、與EGFR功能異常相關的乳痂(cradle cap)、與EGFR功能異常相關的紫斑(purpura)、與EGFR功能異常相關的玫瑰糠疹(pityriasis rosea)、與EGFR功能異常相關的紅斑(erythema)、與EGFR 功能異常相關的帶狀皰疹(shingles)、與EGFR功能異常相關的瘀傷(bruise)和/或與EGFR功能異常相關的黃瘤(xanthelasma)、與EGFR功能異常相關的黑色素瘤(melanoma)、與EGFR功能異常相關的基底細胞癌(basal cell carcinoma)、與EGFR功能異常相關的鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma)、與EGFR功能異常相關的卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、與EGFR功能異常相關的環形紅斑離心(erythema annulare centrifugum)、與EGFR功能異常相關的毛囊炎、與EGFR功能異常相關的濾泡性丘疹、與EGFR功能異常相關的乾燥疾病、與EGFR功能異常相關的乾燥性濕疹和/或與EGFR功能異常相關的乳頭膿皰疹。

皮膚疾病和/或病症

在本發明中，該疾病和/或病症可以包括皮膚疾病或病症。例如，施用本發明所述的化合物的患者可以為患有皮膚疾病的患者。本發明中的皮膚疾病或病症通常是指發生在皮膚和皮膚附屬器官疾病或病症。在本發明中，該皮膚疾病或病症可以是由各種原因引起的。例如，該皮膚疾病或病症可以是由抗腫瘤劑引起的，也可以不是由抗腫瘤劑引起的。例如，該皮膚疾病或病症可以是感染引起的；例如，該皮膚疾病或病症可以是不同藥物的副作用引起的；例如，該皮膚疾病或病症可以是免疫系統異常引起的；例如，該皮膚疾病或病症可以是神經損傷引起的；或者，該皮膚疾病或病症也可以是由其他因素引起的。例如，該皮膚疾病或病症包括免疫性皮膚疾病。例如，該皮膚疾病或病症包括異位性皮膚炎、斑禿或銀屑病。例如，該皮膚疾病或病症可以包括皮下組織疾病或病症。例如，該皮膚疾病或病症可以包括脫髮症、體臭、大皰性皮膚炎、皮膚乾燥、濕疹、多形性紅斑、紅皮病、脂肪萎縮症、髮色改變、毛髮質地異常、多毛症(hirsutism)、多汗症(hyperhidrosis)、角化過度症、肥大症(hypertrichosis)、少汗症(hypohidrosis)、脂肥大、指甲改變、指甲變色、指甲流失、指甲隆起、皮膚疼痛、手足綜合症、光敏感性、搔癢症、紫斑、痤瘡樣皮疹、斑丘疹、頭皮疼痛、皮膚萎縮、皮膚色素沉著過多(skin hyperpigmentation)、皮膚色素減退(skin hypopigmentation)、皮膚硬結、皮膚潰瘍、Stevens-Johnson綜合症、皮下氣腫、毛細血管擴張、中毒性表皮壞死、皮疹和/或蕁麻疹。

例如，該皮膚疾病或病症可以是皮疹。

本發明中使用的術語“皮疹”通常是指會影響皮膚顏色、外觀或紋理的皮膚變化。皮疹可以只局限於在身體的一部分，或影響整個皮膚。皮疹還可以包括蕁麻疹。該皮疹可以是免疫性皮疹和/或非免疫性皮疹。

例如，該皮疹的病理表現可包括皮膚表皮生長和/或分化的明顯改變、角質細胞終末分化的改變在、受影響和未受影響的皮膚中都可以看到緻密的角膜塑形和表皮角質化不全、皮脂腺及/或毛囊漏斗的損傷、有或無感染跡象、表皮屏障受損、表皮角膜下裂、細胞激素產生、發炎細胞浸潤(如嗜中性球、淋巴球)、細菌感染、毛細血管擴張、色素沉澱和/或緻密的上皮發炎性通透性。

例如，該皮疹的臨床表現可以為紅斑、皮膚乾燥、搔癢、鱗狀的斑塊、壓痛、灼熱感、裂痕、膿皰、濾泡、潰瘍、膿瘍、紅色凸起和/或膿性病灶。

例如，該皮疹的發生部位可以是表皮，例如，包括皮膚的脂溢性區域。例如，該皮疹的發生部位可以包括頭皮、臉部、頸部、胸部、上背部、四肢、下背部、腹部、臀部、牙周區域、腹部、手掌、腳掌、指甲和/或黏膜。

在本發明中，該皮疹可以包括尋常痤瘡(acne vulgaris)、丘疹性皮疹(papulopustular rash)、玫瑰痤瘡(acne rosacea)、瘙癢性皮疹(boil)、痤瘡樣皮疹(acneiform rash)、蜂窩性組織炎(cellulitis)、萊姆病(Lyme disease)、過敏反應(allergic reaction)、化膿性汗腺炎(hidradenitis suppurativa)、麻疹(hives)、皮膚炎(dermatitis)、乳痂(cradle cap)、紫斑(purpura)、玫瑰糠皮疹(pityriasis rosea)、紅斑(erythema)、帶狀皰疹(shingles)、瘀傷(bruise)和/或黃瘤(xanthelasma)、黑色素瘤(melanoma)、基底細胞癌(basal cell carcinoma)、鱗狀細胞癌症(squamous cell carcinoma)、卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、環形紅斑離心(erythema annulare centrifugum)、毛囊炎、濾泡性丘疹、乾燥症、乾燥性濕疹和/或乳頭膿皰疹。

不欲被任何理論所限，下文中的實施例僅是為了闡釋本發明發明的各個技術方案，而不用於限製本發明發明的範圍。

實施例

實施例1 化合物的製備

化合物2：2-[tert-butoxycarbonyl(methyl)amino]ethyl cyclopropanecarboxylate的製備

將化合物1[tert-butyl N-(2-hydroxyethyl)-N-methyl-carbamate(50g,2.85mmol,1eq)]和三乙胺(57.8g,571mmol,79.4mL,2.0eq)加入500mL的二氯甲烷中，氮氣保護下滴加cyclopropanecarbonyl chloride(44.7g,428mmol,38.9mL,1.5eq)維持在攝氏0~5度。滴完畢後繼續攪拌2小時。以TLC檢測化合物消耗完畢(Petroleum ether：Ethyl acetate=3：1,R_f=0.03)。反應混合物加入200mL水淬滅反應，分液後有機相用200mL的水洗滌後，真空濃縮得到黃色油狀物的麤品(50g)。用核磁確認¹H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ(ppm)：4.18(br s,2H),3.46(br s,2H),2.92(br s,3H),1.57-1.64(m,1H),1.46(s,9H),0.98-1.04(m,2H),0.87(br d,J=4.0Hz,2H).

化合物3：(methylamino)ethyl cyclopropanecarboxylate)的製備

攝氏0度下，將化合物2(50g,206mmol,1.0eq)加入300mL的二氯甲烷和100mL的三氟醋酸的混合溶劑中。攪拌2小時後，減壓旋蒸濃縮得到50g化合物3的麤品。

化合物6：(4-nitrophenyl)4-[[(3R,4R)-1-(2-cyanoacetyl)-4-methyl-3-piperidyl]-methyl-amino]pyrrolo[2,3-d]pyrimidine-7-carboxylate的製備

將託法替尼(100g,3200mmol,1.0eq)加入二氯甲烷(1000mL)和三乙胺(64.8g,640mmol,89.1mL,2.0eq)的混合溶液中，再加入對硝基苯酚碳酸脂(96.8g,480mmol,1.5eq)。反應混合物在攝氏20度攪拌3小時。LCMS偵測反應物消失，化合物6生成MSI：(M+H)+,478.3。

Compound A的製備

將化合物3(36.0g,251mmol,1eq)和化合物6(120g,251mmol,1eq)加入二氯甲烷中(800mL)，再加入三乙胺(127g,1.26mol,175mL,5.0eq)，室溫攪拌10小時。LCMS檢測化合物6消耗完畢。加入2L的乙酸乙酯稀釋淬滅反應，用水洗滌(2L×5)。分離有機相並用無水硫酸鈉乾燥。減壓旋蒸濃縮得到麤品，用矽膠色譜柱純化得到目標物Compound A(105g，產率)。結構用核磁和LCMS表徵。¹H NMR：(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm)：8.18-8.25(m,1H),7.33(br d,J=3.6Hz,1H),6.80(br s,1H),4.85(br s,1H),4.21-4.37(m,1H),3.89-4.21(m,4H),3.40-3.86(m,5H),3.28(s,3H),2.84-3.13(m,3H),2.31-2.44(m,1H),1.67-1.90(m,1H),1.50-1.66(m,2H),1.02(br d,J=7.2Hz,3H),0.75-0.93(m,4H)。LCMS：(M+H)⁺,482.2。

實施例2 Compound A的晶型研究

對Compound A進行晶型研究，在實施例1的工藝路線下，使用常用溶劑和各種結晶方法進行多晶型篩選，方法包括緩慢揮發、4-8℃晶漿、室溫晶漿、50℃晶漿、反溶劑添加、反反溶劑添加、冷卻結晶、氣液擴散、氣固擴散、水汽應激、聚合物誘導、研磨、循環升降溫、快速熔融冷卻和緩慢熔融冷卻，得到兩種主要晶型Form A和Form B。

Form A的X射線衍射圖譜見1圖。Form A的特徵峰位置如表1所示。From A的DSC圖譜見第2圖。結果顯示，Form A在120.73℃處有吸熱峰。

稱取約20mg起始樣品(Compound A)溶於0.1mL乙腈中以獲得澄清溶液。然後將此溶液放入裝有3mL揮發性反溶劑甲基叔丁基醚的20mL小瓶中。用瓶蓋密封20mL小瓶，並保持在室溫下，以便有足夠的時間讓有機蒸氣與溶液相互作用。氣液擴散3天后，未獲得固體，轉室溫開蓋揮發2天后，獲得結晶態固體，即Compound A的晶型Form B。

Form B的X-射線繞射圖譜如第3圖，其DSC譜圖如第4圖，其特徵峰位置如表2所示。結果顯示，Form B在95.08℃和113.37℃處有吸熱峰。

實施例3 本發明的化合物體外酶學抑制活性

利用LanceUltra Assay方法測試本發明的化合物和託法替尼對JAK標靶(JAK1、JAK2、JAK3、TYK2)的抑制活性。

1.化合物稀釋液的製備本發明的化合物和託法替尼起始濃度為10μM，5倍稀釋成10個濃度梯度。轉移200nL化合物到384孔板中。將200μL 100% DMSO分別加入到兩個空的孔中作為Max孔和Min孔。

2.激酶反應與終止1)將激酶加入激酶緩衝液(50mM HEPES，pH 7.5；10mM MgCl2；0.01% BSA；0.01% Tween-20；2mM DTT)，形成酶溶液；2)轉移10μL上述酶溶液到384孔板反應孔中，陰性對照孔加入激酶緩衝液，室溫孵育10分鐘。3)將底物和ATP等試劑加入激酶緩衝液，形成底物溶液；4)轉移10μL的底物溶液到384孔板反應孔中；5)室溫反應60分鐘；6)配製2倍含抗體的終止反應液。在384孔反應板中加入20μL終止反應液，室溫放置60分鐘。

3.數據讀取及分析1)採用Envision 2104 Multilabel Reader讀取螢光數值。2)計算抑制百分率。並使用XLFit進行曲線擬合分析得出IC50值。

4.實驗結果如表3所示：

實施例4-49本發明的化合物在大鼠靶向治療劑引起的皮疹模型的藥效學研究

建構大鼠動物皮疹模型。向6週雌性SD大鼠每日給予靶向治療劑，若干天后，大鼠的背部大面積出現皮疹(照片如第5圖)。出現皮疹的部位沒有左右的差異，兩側出現皮疹的程度相似，與在人體上的病症相接近。因此，大鼠是非常好的用於模擬靶向治療劑引起皮疹的動物模型。

在大鼠動物模型上驗證本發明的化合物局部外用軟膏預防小分子靶向治療劑產生皮疹的實驗

SD大鼠飼養適應一週(約200g)後，將大鼠分成每組10隻。實驗前一天將大鼠的後背的毛髮用電動剃髮刀剃除乾淨，然後進行給藥實驗。靶向治療劑溶解在適當的溶劑中，對所有大鼠進行灌胃/注射給藥，給藥方式、劑量如表3所示。實驗分為給藥組和對照組。大鼠給予靶向治療劑後，對給藥組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹本發明的化合物軟膏(濃度如表4所示，約0.5g)；對照組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹對應的空白軟膏(約0.5g)；塗藥後用固定筒將大鼠固定約4小時，4小時後放出大鼠，並用清水擦去塗藥部位殘留藥物，放回鼠籠正常飼養。

靶向治療劑的給藥頻率如表4所示，本發明的化合物軟膏及空白軟膏每天塗抹一次。每日重複給予靶向治療劑和塗抹軟膏的實驗，直到對照組出現明顯的皮疹，此時將給藥組皮疹等級低於對照組皮疹等級的大鼠隻數計算為有效抑制皮疹大鼠的只數。

表4列出了各種靶向治療劑和本發明的化合物軟膏的動物實驗組合，以及相應的實驗結果(其中，相對緩解率欄的數值=給藥組皮疹低於對照組皮疹等級的大鼠只數/給藥組大鼠的總數量×100%)。

第6圖顯示了表4中對照組、給藥組中典型大鼠的左側、背部和右側的照片。第7圖顯示了實驗終點時部分給藥組和對照組的皮疹等級結果。

從表4和第6-7圖的結果可以看出：本發明的化合物軟膏能夠有效預防小分子靶向治療劑所引起的皮疹。

在大鼠動物模型上驗證本發明的化合物局部外用軟膏預防抗體類靶向治療劑產生皮疹的實驗

SD大鼠飼養適應一週(約200g)後，將大鼠分成每組10隻。實驗前一天將大鼠的後背的毛髮用電動剃髮刀剃除乾淨，然後進行給藥試驗。實驗分為給藥組和對照組。抗體類靶向治療劑給藥頻次、劑量、注射速度見表5。實驗過程中，給藥組每天對大鼠背部(約3cm*3cm)塗抹本發明的化合物軟膏，對照組對大鼠背部(約3cm*3cm)塗相應的空白軟膏(約0.5g)，塗藥後用固定筒將大鼠固定4小時，4小時後放出大鼠並用清水擦去塗藥部位殘留藥物，放回鼠籠正常飼養。本發明的化合物軟膏和空白軟膏每日塗抹一次，直到對照組出現明顯的皮疹。統計實驗終點時給藥組皮疹等級低於對照組皮疹等級的大鼠隻數計算為有效抑制皮疹大鼠的只數。

表5列出了各種抗體類靶向治療劑和本發明的化合物軟膏的動物實驗組合，以及相應的實驗結果(其中，相對緩解率欄的數值=給藥組皮疹等級低於對照組皮疹等級的大鼠只數/給藥組大鼠的總數量×100%)。

第8圖顯示了實驗終點時給藥組和對照組的皮疹等級。

從表4和第8圖的結果可以看出：本發明的化合物軟膏能夠有效預防抗體類靶向治療劑所引起的皮疹。

在大鼠動物模型上驗證本發明的化合物局部外用軟膏治療小分子靶向治療劑產生皮疹的實驗

SD大鼠飼養適應一週(約200g)後，將大鼠分成每組10隻。實驗前一天將大鼠的後背的毛髮用電動剃髮刀剃除乾淨，然後進行給藥實驗。靶向治療劑溶解在適當的溶劑中，對所有大鼠進行灌胃/注射給藥，給藥方式、劑量如表5所示。每日持續給藥實驗，直至所有大鼠均出現皮疹的症狀，此時開始進行治療實驗。實驗分為給藥組和對照組。大鼠給予靶向治療劑後，對給藥組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹本發明的化合物軟膏(濃度如表5所示，約0.5g)；對照組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹對應的空白軟膏(約0.5g)；塗藥後用固定筒將大鼠固定約4小時，4小時後放出大鼠，並用清水擦去塗藥部位殘留藥物，放回鼠籠正常飼養。

靶向治療劑的給藥頻率如表6所示，本發明的化合物和空白軟膏每天塗藥一次。每日重複給予靶向治療劑和塗抹軟膏的實驗，將實驗終點時給藥組皮疹等級低於對照組皮疹等級的大鼠隻數計算為有效抑制皮疹大鼠的隻數。

表6列出了各種靶向治療劑和本發明的化合物軟膏的動物實驗組合，以及相應的實驗結果(其中，相對緩解率欄的數值=給藥組皮疹低於對照組皮疹等級的大鼠只數/給藥組大鼠的總數量×100%)。

第9圖顯示了實驗終點時對照組和給藥組的皮疹等級結果。

從表6和第9圖的結果可以看出：本發明的化合物局部外用軟膏能夠有效的治療小分子靶向治療劑所引起的皮疹。

在大鼠動物模型上驗證本發明的化合物局部外用軟膏治療抗體類靶向治療劑產生皮疹的實驗

SD大鼠飼養適應一週(約200g)後，將大鼠分成每組10隻。實驗前一天將大鼠的後背的毛髮用電動剃髮刀剃除乾淨，然後進行給藥試驗。抗體類靶向治療劑給藥頻次、劑量、注射速度如表7；連續給藥2到3週至所有大鼠均出現皮疹的症狀，此時開始進行治療實驗。實驗分為給藥組和對照組。大鼠給予抗體類靶向治療劑後，對給藥組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹本發明的化合物軟膏(濃度如表6所示，約0.5g)；對照組大鼠的背部(約3cm*3cm)塗抹對應的空白軟膏(約0.5g)；塗藥後用固定筒將大鼠固定約4小時，4小時後放出大鼠，並用清水擦去塗藥部位殘留藥物，放回鼠籠正常飼養。

重複抗體類靶向治療劑和本發明的化合物軟膏/空白軟膏塗抹實驗，將實驗終點時給藥組大鼠皮疹等級低於對照組大鼠皮疹等級的大鼠隻數計算為有效治療皮疹大鼠的隻鼠。

表7列出了各種抗體類靶向治療劑和本發明的化合物軟膏的動物實驗組合，以及相應的實驗結果(其中，相對緩解率欄的數值=給藥組皮疹等級低於對照組皮疹等級的大鼠只數/給藥組大鼠的總數量×100%)。

第10圖顯示了實驗終點時給藥組和對照組的皮疹等級結果。

從表7和第10圖結果可以看出：本發明的化合物軟膏能夠有效的治療抗體類靶向治療劑所引起的皮疹。

實施例50本發明的化合物局部給藥在小鼠皮膚接觸性遲髮型變態反應試驗的藥效學研究

鼠皮膚接觸性遲髮型變態反應(DTH)被認為是臨床接觸性皮膚炎及其他T-淋巴細胞介導的皮膚免疫疾病的有效模型，如異位性皮膚炎、斑禿、銀屑病等。鼠DTH與這些皮膚免疫疾病有多種共同特徵，包括免疫浸潤、伴隨發炎細胞因子的增加和角化細胞的過度增殖。

在0天和第1天，通過在小鼠脫毛的背部局部給予抗原二硝基氟苯(DNFB)對Balb/c小鼠進行致敏。在第5天，使用工程測微計測量耳朵的厚度，記錄並作為基線耳厚度。然後局部給予動物的兩隻耳朵總共20μL 0.2%濃度DNFB(10μL給予內耳廓和10μL給予外耳廓)進行攻擊。攻擊後24-72小時，再次測量耳朵厚度作為實驗終點耳厚度。在整個致敏期和攻擊期(-1天至第7天)或攻擊前或整個攻擊期(通常為第4天至第7天)對右耳正反兩面均勻塗抹本發明的化合物局部外用軟膏於進行治療，將左耳正反兩面均勻塗抹空白軟膏，計算腫脹度和腫脹率。

腫脹度=終點時單側耳厚度-基線同側厚度；腫脹率=腫脹度/基線耳厚度*100%

與空白軟膏側相比，本發明的化合物軟膏側耳腫脹率減少20%或以上認為是有效緩解。

從表8結果可以看出：不同濃度的本發明的化合物軟膏均能降低耳腫脹，顯示局部施用本發明的化合物軟膏能夠有效的緩解小鼠皮膚接觸性遲髮型變態反應。

取小鼠耳組織進行福馬林固定和石蠟包埋製備耳切片，通過耳部皮膚病理學和發炎細胞浸潤分析顯示，空白軟膏側耳組織表皮呈現不同程度的基質細胞增生、增厚、發炎性細胞浸潤等異位性皮膚炎相關病理變化。本發明的化合物軟膏側耳組織中這些症狀減輕，發炎細胞浸潤明顯減少。進一步說明本發明的化合物局部外用可以有效緩解小鼠皮膚接觸性遲髮型變態反應。

實施例51：本發明的化合物在人類血漿中藥物動力學研究

測試化合物和對照工作溶液：用495μL DMSO(工作溶液濃度：100μM，100% DMSO)稀釋5μL化合物和對照(除了丙胺太林溴化物)儲備液(10mM在二甲基亞砜(DMSO)中)。溴化丙胺太林工作溶液：以495μL H2O稀釋5μL溴化丙胺原液(10mM在二甲基亞砜(DMSO)中)(工作溶液濃度：100μM，1% DMSO)

混合的冷凍血漿在實驗前在37℃水浴中解凍。將血漿以4000rpm離心5分鐘，如果有凝塊則去除。使用Apricot自動化工作站，將98μL/孔的空白血漿加入所有96孔反應板中。(空白，T0和T120)。使用Apricot自動化工作站為除空白以外的所有反應板添加2μL/孔工作溶液(100μM)。所有含有化合物和血漿混合物的反應板均在37℃的水浴中孵育。反應板在37℃下孵育，並啟動計時器。孵育結束時，加入400μL終止液(200ng/mL甲苯磺丁脲和200ng/mL拉貝洛爾乙腈溶液)沉澱蛋白。徹底混合。將每個板密封並搖晃20分鐘。搖晃後，將每個板以4000rpm和4℃離心20分鐘。離心後，使用Apricot自動化工作站將50μL上清液轉移至100μL HPLC水中。在LC-MS/MS分析之前，將每個生物分析板密封並搖晃10分鐘

使用以下等式計算在血漿中溫育後測試化合物的藥物留存率或生成率：

藥物留存率或生成率(%)=100 x(指定孵育時間的藥物反應/T0時間的藥物反應)其中藥物是分析物與內標(IS)的峰面積比指定的孵育時間點為T0(0分鐘)、T120(120分鐘)

從上述結果可以看出，Compound A在血漿中可以轉化為JAK激酶抑制劑託法替尼。

實施例52：本發明案的化合物溶解度研究

先將10mg樣品加入0.2mL的相應溶劑中，並在whatman瓶中室溫下振盪24小時後進行採樣。通過紫外線檢測，並通過三點標準曲線(1、20、200微摩爾)進行校準。通過濃度換算得到溶解度。

從上述結果看出，託法替尼的水溶性和脂溶性很低，而Compound A化合物相較於託法替尼有較好的水溶性和脂溶性，為藥物製劑的設計提供了更好的設計空間。

實施例53：本發明的化合物在皮膚中藥物動力學研究

人類特異性皮膚S9分數(最終蛋白質濃度為1mg/mL)，0.1M磷酸鹽緩衝液pH 7.4和測試化合物(最終底物濃度為1μM；最終二甲基亞砜(DMSO)濃度為0.25%)在37℃預先孵育，然後加入NADPH(最終濃度為1mM)、UDPGA(最終濃度為1mM)和阿拉甘肽(最終濃度為25μg/mg)來啟動反應。對於測試的每個化合物，均包括無輔因子對照孵育，其中添加0.1M磷酸鹽緩衝液pH 7.4，而不是輔因子(去除NADPH和UDPGA)。每個測試化合物均進行雙重孵育，分別進行對照孵育。正對照物與測試化合物一起孵育以評估代謝活性。這是基於預期代謝物的出現。

每個化合物的孵育時間為0、10、20、40、60和120分鐘。對照組(無輔因子)僅孵育120分鐘。在適當的時間點，將孵育物轉移至乙腈中(比例為1：3)停止反應。終止板以3,000rpm的速度在4℃下離心20分鐘，以沉澱蛋白質。

蛋白沉澱後，加入內標準，並使用確定的LC．MS/MS條件對樣品進行分析。使用匹配基質標準曲線定量Com pound A(母體)和tofacitinib(代謝物)。

從峰面積比(化合物峰面積/內標準峰面積)隨時間的圖形中，確定線的梯度。檢測後的峰面積比對換算得到濃度。結果如下

從上述結果可以看出，Compound A在皮膚中可以轉化為JAK激酶抑制劑託法替尼。

實施例54：本發明的化合物化學穩定性研究

將化合物密封後，放置在60度恆溫箱中放置30天，取樣後以高效液相層析檢驗化合物總雜質佔比(面積歸一法計算)。

Claims

式(I)的化合物，其結構式為：
如請求項1所述的式(I)的化合物，其包括該式(I)的化合物的晶型、可藥用鹽、生物活性代謝物、溶劑化物、水合物、外消旋體、對映體或立體異構體。
式(I)的化合物的晶型A，

在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型A在8.2±0.2°和11.3±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。
如請求項3所述的式(I)的化合物的晶型A，其還在6.8±0.2°、15.7±0.2°、17.0±0.2°、17.6±0.2°、19.6±0.2°、20.6±0.2°、21.2±0.2°、23.9±0.2°和24.7±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。
式(I)的化合物的晶型A，

其在120.7±1℃處具有吸熱峰。
式(I)的化合物的晶型B，

在使用Cu-Kα輻射得到的以衍射角2θ角度表示的X-射線粉末衍射圖譜中，該晶型B在7.0±0.2°、7.8±0.2°和21.1±0.2°的2θ角處顯示特徵峰。
如請求項6所述的式(I)的化合物的晶型B，其還在14.0±0.2°、11.2±0.2°、19.6±0.2°、17.5±0.2°、28.2±0.2°、20.5±0.2°、26.2±0.2°、20.9±0.2°和19.8±0.2°的2θ角中的至少一處顯示特徵峰。
式(I)的化合物的晶型B，

其在95.1±1℃和113.4±1℃處具有吸熱峰。
醫藥組成物，其包括請求項1或2所述的式(I)的化合物，請求項3至5中任一項所述的式(I)的化合物的晶型A，或請求項6至8中任一項所述的式(I)的化合物的晶型B，以及視需要地藥學上可接受的載體。
請求項1或2所述的式(I)的化合物，請求項3至5中任一項所述的式(I)的化合物的晶型A，請求項6至8中任一項所述的式(I)的化合物的晶型B或請求項9所述的醫藥組成物作為JAK抑制劑前藥的應用。
如請求項10所述的應用，該JAK抑制劑為託法替尼。
請求項1或2所述的式(I)的化合物，請求項3至5中任一項所述的式(I)的化合物的晶型A，請求項6至8中任一項所述的式(I)的化合物的晶型B或請求項9所述的醫藥組成物在製備藥物中的用途，該藥物用於預防和/或治療疾病和/或病症。
如請求項12所述的用途，其中該疾病和/或病症包括受試者中與施用抗腫瘤劑相關的疾病或病症。
如請求項13所述的用途，其中該與施用抗腫瘤劑相關的疾病或病症包括與施用抗腫瘤劑相關的皮疹。
如請求項12所述的用途，其中該疾病或病症包括皮膚疾病或病症和/或皮下組織疾病或病症。
如請求項15所述的用途，其中該皮膚疾病或病症包括免疫性皮膚疾病或病症。
如請求項15至16中任一項所述的用途，其中該皮膚疾病或病症包括異位性皮膚炎、斑禿或銀屑病。
如請求項12至17中任一項所述的用途，其中該藥物的給藥形式包含乳膏、洗液、凝膠、軟膏、油膏、噴劑、脂質體製劑、擦劑和/或氣霧劑。
如請求項12至18中任一項所述的用途，其中該藥物中還包括一種或多種其他活性成分。
一種預防和/或治療疾病和/或病症的方法，其包括向有需要的受試者施用請求項1或2所述的式(I)的化合物，請求項3至5中任一項所述的式(I)的化合物的晶型A，請求項6至8中任一項所述的式(I)的化合物的晶型B或請求項9所述的醫藥組成物。
如請求項20所述的方法，其中該疾病和/或病症包括受試者中與施用抗腫瘤劑相關的疾病或病症。
如請求項21所述的方法，其中該與施用抗腫瘤劑相關的疾病或病症包括與施用抗腫瘤劑相關的皮疹。
如請求項20所述的方法，其中該疾病和/或病症包括皮膚疾病或病症和/或皮下組織疾病或病症。
如請求項23所述的方法，其中該皮膚疾病或病症包括免疫性皮膚疾病或病症。
如請求項23至24中任一項所述的方法，其中該皮膚疾病或病症包括異位性皮膚炎、斑禿或銀屑病。
藥物組合或試劑盒，其包括：1)抗腫瘤劑；以及2)請求項1或2所述的式(I)的化合物，請求項3至5中任一項所述的式(I)的化合物的晶型A，請求項6至8中任一項所述的式(I)的化合物的晶型B或請求項9所述的醫藥組成物。
如請求項26所述的藥物組合或試劑盒，其還包括緩衝液。
如請求項26至27中任一項所述的藥物組合或試劑盒，其還包含賦形劑。
如請求項26至28中任一項所述的藥物組合或試劑盒，其中該組分1)與該組分2)彼此不混合。