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TW202409070A - 芳族含硼化合物及相關胰島素類似物 - Google Patents

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陳雕
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靜欣 梁
米娜 伊克蘭 安瓦爾 夏克
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Abstract

本揭示案係關於包括一或多個芳族含硼基團之新穎化合物及製備所揭示之化合物的方法。本揭示案進一步係關於包含所揭示之化合物的醫藥組合物，及其在預防及治療疾病及病症中之用途。

Description

芳族含硼化合物及相關胰島素類似物
本揭示案係關於包括一或多個芳族含硼基團之新穎化合物。本揭示案係關於新穎化合物結合葡萄糖之用途。本揭示案進一步係關於該等化合物及/或包含所揭示之化合物的醫藥組合物用於治療由升高之葡萄糖含量表徵之病症的套組及用途，該等病症諸如高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量異常及1型糖尿病、以及肥胖症、代謝症候群、神經疾病、情緒障礙及精神障礙。 序列表
本申請案與電子格式之序列表一起申請。序列表以2023年4月7日創建之名稱為「02021_00153-00304_SL.xml」的檔案形式提供，且大小為6,324,718個位元組。電子格式之序列表中之資訊以全文引用之方式併入本文中。
硼酸通常被視為傾向於與羥基結合之路易斯酸（Lewis acid），因為作為路易斯酸，硼酸可與路易斯鹼（Lewis base），例如氫氧根陰離子形成錯合物。因此，含有包括硼酸在內之硼酸鹽的分子具有結合羥基的一般趨勢。此結合趨勢可用於藉由硼酸化標記試劑偵測含羥基之基團，其中硼酸酯基團與羥基結合，且根據溶劑及緩衝條件，硼酸酯可與含羥基分子之羥基（諸如存在於二醇（例如，葡萄糖）中之羥基）形成可水解的硼酸酯-酯鍵。儘管含硼化合物可與含二醇分子結合，但使用含硼化合物實現選擇性一直具有挑戰性，此係因為其能夠在不同程度上結合各種二醇，包括順式二醇。儘管可實現含硼化合物對所關注之特定鄰二醇的改良的結合親和力，但此可導致選擇性的損失。
葡萄糖為人體之主要燃料，且在健康個體中血糖值受到嚴格調控。舉例而言，在兩餐之間，血糖接近5 mmol/L（mM），且當餐後血糖濃度升高時，該值藉由胰島素之作用迅速調節回5 mM。胰島素激素由胰臟β細胞分泌，且當胰島素與全身細胞（例如肌肉及脂肪）上之胰島素受體結合時，刺激細胞以藉由葡萄糖轉運蛋白自儲存囊泡轉位至細胞表面來吸收葡萄糖（GLUT4）。（Huang, S.H.等人, (2007) 《細胞代謝（Cell Metabolism）》 5:237-252.）
糖尿病患者可能會由於針對β細胞之自體免疫而失去產生胰島素之能力（1型），或對胰島素之敏感性較低且胰島素分泌受損（2型）。舉例而言，患有1型糖尿病之患者可能依賴每日多次注射胰島素，均用於基礎覆蓋，通常一日一次，且藉由進餐（推注）來控制葡萄糖含量。（Polonsky, K.S.等人(1988) 《臨床調查期刊（The Journal of Clinical Investigation）》 81: 442-448.）因為葡萄糖值可能會不可預見地波動，所以日復一日完美的胰島素給藥係極其困難的。事實上，儘管在糖尿病治療中取得了許多技術進步，但研究人員目前看到，部分歸因於生活方式問題，長期葡萄糖控制及/或整體代謝健康狀況惡化。
葡萄糖感測器及葡萄糖感測胰島素類似物為此項技術中已知的。參見例如WO 2016/179568 A1及WO 2021/202802 A1。然而，此項技術中仍需要研發具有改良之特性的葡萄糖感測器及葡萄糖感測胰島素，諸如結合至胰島素受體及對不同葡萄糖濃度成比例地反映，以及對生理條件下之葡萄糖含量變化提供分級且可逆的反應。
因此，對於可控制血糖含量之新穎化合物，諸如結合葡萄糖且可用於葡萄糖反應性胰島素類似物/結合物中之化合物，存在未滿足之醫療需求。
在本文中，吾等揭示具有改良特性之葡萄糖感測器及葡萄糖感測胰島素類似物，諸如對於相對較低濃度之葡萄糖的親和力提高、對於胰島素受體之親和力提高以及胰島素受體之活性提高。
根據一些實施例，本揭示案提供包含芳族含硼官能基（例如，F2、F5及F10）之新穎Z1c化合物（例如，FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226）。在一些實施例中，本揭示案提供由式(X'') n1表示之間接連接子，其中X''如本文所定義且各n1為1、2、3、4或5（例如，如式FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75中所例示）。在一些實施例中，本揭示案提供包含芳族含硼官能基（例如，F2、F5及F10）之新穎Z1c-連接子（例如，式FFL-1至FFL-101）。
在一些實施例中，本揭示案提供包含原料藥（例如，X1）及至少一個具有芳族含硼官能基之Z1c的化合物。在一些實施例中，所揭示之化合物包含一或多個支架（例如，如式FFL-1至FFL-101中所例示之FF支架及Z1c-連接子支架）。在一些實施例中，化合物包含原料藥。在至少一些實施例中，原料藥為多肽或小分子。
在至少一些實施例中，所揭示之化合物具有至少兩個芳族含硼官能基。在一些實施例中，化合物為對特定醣類（諸如葡萄糖）具有選擇性，同時對其他醣類顯示出降低之親和力，且其中在化合物的芳族含硼部分中存在至少兩個芳族含硼官能基。在某些實施例中，芳族含硼部分可直接或間接共價結合至包含胺之原料藥、共價結合至含胺連接子之原料藥，或NH 2或OH（例如，其中X1為NH 2或OH）。在一些實施例中，原料藥與含胺連接子共價結合且胺基與芳族含硼部分（Z1c）結合。在某些實施例中，芳族含硼部分（Z1c）具有包含繫鏈基團（式FF）及芳族含硼基團之架構，其共同形成所揭示之化合物的芳族含硼部分。在一些實施例中，芳族含硼部分（Z1c）與間接連接子（例如式FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75）共價結合且具有包含繫鏈基團（式FF）及芳族含硼基團之架構，其共同地形成所揭示之化合物的芳族含硼部分。
在一些實施例中，一或多個Z1c可經由一或多個間接連接子（例如，式FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75及/或使用醯胺或肽鍵連接在一起的一或多個L-胺基酸或D-胺基酸）連接（例如，結合、連接）至原料藥（例如，X1）。在至少一些實施例中，經由繫鏈基團（例如，式FF）對硼官能基之旋轉約束增強化合物（例如，結合物）對特定二醇（諸如葡萄糖）及遠離體內其他二醇之結合親和力，且從而提供對特定二醇之選擇性。在一些實施例中，化合物可響應於體內內源性及/或外源性小分子（諸如葡萄糖）而展現出治療藥物動力學及/或藥效動力學。葡萄糖之生理濃度的變化經由葡萄糖與結合至藥物分子的含硼架構的相互作用可導致藥物分子之活化及/或釋放，或相反地，可導致藥物分子（例如肽激素）之失活及/或螯合，及/或藥物分子之活性的調變。
在一些實施例中，本揭示案提供一種化合物，其包含X1及一或多個Z1c；或其互變異構物、立體異構物或立體異構物之混合物；或醫藥學上可接受之鹽或水合物或同位素衍生物，其中： X1包含： i.       包含胺之原料藥； ii.     經組態以共價結合至原料藥之胺；或 iii.   NH 2或OH（例如X1為NH 2或OH）； 其中各Z1c係獨立地選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226；且其中各Z1c直接或間接地共價結合至X1中之胺或當X1為NH 2共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH。
在一些實施例中，本揭示案提供一種由式I表示之化合物或其立體異構物立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： ， （式 I ）其中： X1包含： i.       包含胺之原料藥； ii.     經組態以共價結合至原料藥之胺；或 iii.   NH 2或OH（例如X1為NH 2或OH）； 各Z1a獨立地包含使用醯胺或肽鍵連接在一起之1至50個胺基酸； 各Z1b獨立地為小分子連接子； 各Z1c係獨立地選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226；其中各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH； 各m'為0或1； 各n'為0； 各o'為1； 各p'為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且 各q'為1、2、3、4或5，其中當p'或q'為2或更大時，各對應Z1c經獨立地選擇且可相同或不同，且其中當q'為2或更大時，各對應Z1a經獨立地選擇且可相同或不同； 當m'=0且n'=0時，各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH，且對於m'=1，各Z1a經由醯胺或肽鍵共價結合至X1且各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或共價結合至X1； 及 其中式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226為： ， 其中X表示直接與X1之胺連接或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接或間接共價結合至X1之胺的共價連接點；且其中B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團；且其中式I化合物之一或多個位置可包含同位素（例如， 2H或 14C）。
在一些實施例中，X1為OH或NH 2。在一些實施例中，本文揭示之化合物（例如，式I、式II）直接地或經由視情況存在之連接子結合至原料藥。
在一些實施例中，式I化合物包含： 至少一個Z1c經由間接連接子共價結合至X1或Z1a，其中間接連接子由式(X'') n1表示， 各n1獨立地選自1、2、3、4及5，且 各X''獨立地選自： （i）      L-胺基酸或D-胺基酸，其中L-胺基酸或D-胺基酸之胺官能基直接地或間接地共價結合至Z1c，且L-胺基酸或D-胺基酸之酸官能基直接地或間接地結合至X1或Z1a；及 （ii）     包含取代基R''及Z''之式FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL68及FL71至FL75，及包含取代基R''、Z''、A'及A''之式FL69及FL70，及其立體異構物； 其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基；且 A''係選自以下中之一者：烷基（例如，C 1-C 6烷基）、經取代之醯基、以酸基封端之醯基、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
在一些實施例中，n1為1。
在式I化合物之一些實施例中，m'=0，n'=0，o'=0，且化合物由式IC表示： ；其中： （式 IC ）各p'為1、2、3或4；且 各q'為1、2、3、4或5。
在一些實施例中，各B 1及B 2為式F2。
在一些實施例中，各Z1c共價結合至間接連接子且Z1c及間接連接子組合之每一者係選自包含取代基X之式FFL-1至FFL-101；其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接或間接地共價結合至X1之胺或與Z1a之胺的共價連接點。
在一些實施例中，X1為包含具有A鏈及B鏈之胰島素受體促效劑的多肽。
在一些實施例中，至少一個Z1c包含α甲基或β甲基。
本文亦揭示治療方法。所揭示之方法可包含治療有需要之個體，其中該個體患有由升高之葡萄糖含量表徵之疾病。該等方法可包含向有需要之個體投與式I化合物、式I化合物之醫藥學上可接受之鹽、包含式I化合物之醫藥組合物或包含式I化合物之醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。
本文亦揭示一種治療或預防有需要之個體中內分泌及/或代謝疾病的方法，其包含向該個體投與式I化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。在一些實施例中，式（I）化合物包含原料藥，其中原料藥為多肽人類激素、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑制素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽或其類似物。
在一些實施例中，式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物與第二藥劑或療法同時投與。在一些實施例中，第二藥劑為原料藥，其中原料藥為多肽人類激素、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑制素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽，或其類似物。在一些實施例中，式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物與第二藥劑或療法並行地投與。在一些實施例中，式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物與第二藥劑或療法依序投與（例如，其中最初投與式（I）化合物且隨後投與第二藥劑或療法或其中最初投與第二藥劑或療法且隨後投與式（I）化合物）。在一些實施例中，式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物以與第二藥劑或療法相同的單位劑型投與。在一些實施例中，式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物以與第二藥劑或療法不同的單位劑型投與。
在至少一個實施例中，本揭示案之醫藥組合物可用於治療個體之由升高之葡萄糖表徵的疾病（或用於製造用於治療其之藥劑），該疾病諸如糖尿病。在至少一個實施例中，治療有效量之本揭示案之醫藥組合物可投與診斷患有糖尿病或代謝疾病之個體。在至少一個實施例中，本揭示案之醫藥組合物包含至少一種本文所揭示之化合物（例如，式I、Z1c、Z1c-連接子）及至少一種選自以下之額外組分：醫藥學上可接受之載劑、醫藥學上可接受之媒劑及醫藥學上可接受之賦形劑。
在一些實施例中，所揭示之化合物包含選自胰島素及胰島素類似物之胰島素受體促效劑（例如，其中X1為胰島素或胰島素類似物）。在一些實施例中，X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25、24051及24052之序列，且B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24061、24062、24063、24064及25000至25397之序列。
在一些實施例中，X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中： A鏈包含選自SEQ ID NO 24051及24052之序列， B鏈包含選自SEQ ID NO 25095、25229、25232、25236、25305、25308、25312及25380至25397之序列； 各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D，且直接地或經由間接連接子共價結合至X1中之一或多個離胺酸殘基； B 1及B 2各自為F2；且 間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL75及其立體異構物。
在一些實施例中，化合物係選自包含A鏈及B鏈之胰島素，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 24501及24502之序列；且其中B鏈包含選自SEQ ID NO 25229、25232、25305、25308、25312、25236、25095及25380至25397之序列。
在一些實施例中，本揭示案提供由式II表示之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： Z1c-連接子 （式II） 其中Z1c-連接子係選自式FFL-1至FFL-101； 其中X係選自脫離基（例如，鹵素、N-羥基丁二醯亞胺（NHS）基團、2,3,5,6-四氟苯酚（TFP）基團、五氟苯酚（Pfp）基團或磺酸酯）、NH 2、OH及H；且 其中B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團。
在式I化合物之一些實施例中，X1包含胰島素受體促效劑，其為具有A鏈及B鏈之胰島素或胰島素類似物。在一些實施例中，A鏈或B鏈之一或多個離胺酸殘基及/或N端如式I所描述共價結合。在一些實施例中，本文所描述之胰島素或胰島素類似物用作用於製造由式I描述之結合物的化合物（例如，中間化合物）。在一些實施例中，本文所描述之胰島素或胰島素類似物用於預防及/或治療內分泌及/或代謝疾病之方法中，例如包含向有需要之個體投與本文所描述之實施例之任何化合物（例如，經修飾之胰島素），藉此治療內分泌及/或代謝疾病。
相關申請案之交叉參考
本申請案主張2022年5月18日申請之美國臨時專利申請案第63/364,893號之優先權，其以全文引用之方式併入本文中。
儘管芳族含硼化合物（例如，基團）可結合至含二醇分子，但使用芳族含硼化合物（其可充當分子感測器）來達成選擇性具有挑戰性，此係由於其能夠以不同程度結合各種二醇，包括順式二醇。改良的芳族含硼化合物（其可充當分子感測器）對所關注之特定鄰二醇的結合親和力可能導致選擇性的損失。
將芳族含硼化合物之硼官能基（例如，感測器）定位在特定或特定幾何結構中之支架可增加對特定鄰二醇的選擇性，同時保持對所關注之二醇的親和力。根據一些實施例，本文所揭示之芳族含硼化合物在芳族硼基支架以及影響與含羥基分子結合之特定支架幾何結構上具有不同側基。
根據一些實施例，本揭示案之化合物包含在三維空間中定向硼官能基的芳族含硼化合物，使得含硼化合物在空間上定向以接合含有鄰二醇之己糖，使得硼基團可適當地接合鄰二醇分子中之羥基且提供選擇性的增強。在一些實施例中，芳族含硼化合物經芳環上之特定官能基修飾，該官能基可與適當或合適的支架一起提供更高選擇性及/或親和力以結合所關注之鄰二醇且遠離體內其他二醇。
在一些實施例中，芳族含硼化合物與原料藥（例如小分子、多肽）結合，其中芳族含硼化合物提供與原料藥及/或體內蛋白質（諸如血液及/或血漿中之循環蛋白，包括白蛋白及/或球蛋白）之分子內及/或分子間相互作用。在一些實施例中，芳族含硼化合物展現與體內之糖化蛋白（諸如糖化白蛋白）的可逆結合，且此結合受到血糖或血漿糖分子之含量的可逆影響。在一些實施例中，感測器與特定鄰二醇之選擇性結合改變彼等分子內及/或分子間結合的程度，且從而調節原料藥在體內之藥物動力學及整體活性；此作用可藉由存在之鄰二醇含量來控制。
在一些實施例中，原料藥為肽激素。在一些實施例中，肽激素為人類肽激素，諸如胰島素或胰島素類似物、升糖素或另一腸促胰島素激素。在一些實施例中，感測器對葡萄糖中之鄰二醇具有選擇性，且此選擇性增強同時保持對葡萄糖之親和力且同時降低對血液中之其他糖的親和力。在一些實施例中，支架以及（例如，與後者組合）含硼化合物之芳族核心上的側基能夠基於血液中之葡萄糖及/或其他鄰二醇之含量控制所結合原料藥之整體活性及/或藥物動力學。
在一些實施例中，芳族含硼化合物包含具有結合硼官能基（亦即，F2、F5及F10）之特定支架分子（例如，FF結構、FFL-1至FFL-101、DSL-1（二硼酸鹽支架連接子）至DSL-112），其中支架已被用於在三維幾何結構中定向硼官能基，以使得硼官能基彼此靠近且在一定距離內定向，此有助於參與所選己糖（諸如葡萄糖）之特定羥基定向。
不希望受理論所束縛，咸信本文所揭示之芳族含硼化合物（例如，分子）經由以下三種機制中之至少一或多者來提高選擇性：（1）FF支架促進匹配芳族含硼化合物中硼基團上之羥基及/或烷氧基以及提高選擇性之鄰二醇分子中之羥基的定向；（2）藉由識別連接至或接近例如含硼化合物之芳族核心的特定官能基來獲得進一步的選擇性增益，該等官能基會影響芳族含硼化合物之電子結構，且藉此有利於在生理pH下與鄰二醇的可逆結合；及（3）連接至芳族含硼化合物（例如，感測器支架）之官能基有助於提供空間位阻，以減少與非所需的己糖的結合，同時保持與所關注之糖（諸如葡萄糖）的結合。在一些實施例中，FF支架提供葡萄糖結合。在一些實施例中，FF支架與間接連接子之組合提供與血漿蛋白（諸如但不限於糖化蛋白質）之親和力，且FF支架與間接連接子之組合提供與血漿蛋白之可逆相互作用，該可逆相互作用經由糖分子與FF支架在生理條件下之結合來控制。在本揭示案中組合在一起之此等作用（例如，式I及式II之化合物）提供針對所關注之含鄰二醇分子結合且遠離體內其他二醇的所需或適合選擇性。
在一些實施例中，芳族含硼化合物與原料藥結合，其中芳族含硼化合物提供與體內蛋白質之分子內及/或分子間相互作用。此類蛋白質可包括血液及/或人類血漿中之循環蛋白質，諸如白蛋白、醣基化蛋白質及/或免疫球蛋白、包括糖化血漿蛋白（諸如糖化白蛋白）之糖化蛋白質。在一些實施例中，感測器與所關注分子中之特定鄰二醇之選擇性結合改變分子內與分子間結合的程度，且藉此調節體內原料藥之藥物動力學及整體活性。在一些實施例中，原料藥為肽激素，且在其某些實施例中，肽激素為腸促胰島素激素，諸如胰島素，且含有鄰二醇之分子為葡萄糖，但本揭示案不限於此。
定義 除非另外定義，否則本文所使用的所有術語（包括技術及科學術語）具有與本揭示案所屬領域之一般技術者通常理解的相同意義。應進一步理解，除非本文中明確地如此定義，否則術語（諸如常用詞典中所定義的彼等術語）應解釋為具有與其在相關技術及/或本說明書的上下文中的含義一致的含義，且不應以理想化或過分正式意義來進行解釋。
除非本文特定描述，否則本文所提及之官能基、官能部分及反應應理解為具有與有機化學中之標準描述及/或一般原理一致的含義，例如，《有機化學（Organic Chemistry）》, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999；Larock, 《綜合有機轉化（Comprehensive Organic Transformations）》, VCH Publishers, Inc., New York, 1989；Carruthers, 《一些現代有機合成方法（Some Modern Methods of Organic Synthesis）》, 第3版, Cambridge University Press, Cambridge, 1987；Smith及March, 《馬奇高等有機化學（March's Advanced Organic Chemistry）》, 第5版, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001中。通用官能基（諸如烷基、芳基、乙醯基等）涵蓋屬於如有機化學領域中一般定義之彼等官能基類別的特定實例或物質，且一般熟習此項技術者能夠識別官能基之特定實例實施例。
除非在本文中特定地描述，否則在整個說明書中使用之化學術語、官能基及一般術語係根據元素週期表(Periodic Table of the Elements), CAS版本, 《化學與物理學手冊（Handbook of Chemistry and Physics）》, 第75版, 內封面來識別。在某些實施例中，除非在上下文中另有說明，否則本文使用的術語「一（a/an）」及「該（the）」以及類似指代應解釋為涵蓋單數及複數。如本文所使用之術語「CAS#」亦稱為CASRN或CAS編號，為由化學文摘社（CAS）分配給公開科學文獻中描述之每種化學物質的唯一數字標識符。
如本文所用，包括有機化合物之化合物的命名法可使用常見名稱（IUPAC、IUBMB或CAS對命名法之建議）給出。若給予名稱，則熟習此項技術者可藉由使用命名約定系統性還原化合物結構或藉由市售軟體（諸如CHEMDRAW TM（Cambridgesoft Corporation, U.S.A.））而容易地確定化合物結構。
本文中所使用之術語係用於描述實施例之目的且並不意欲限制本揭示案。應進一步理解，當在本說明書中使用時，術語「包含（comprises/comprising）」及包括「（includes/including）」指定所陳述之特徵、整體、動作、操作、元件及/或組分，但不排除存在或添加一或多個其他特徵、整體、動作、操作、元件、組分及/或其群組。如本文所使用，術語「及/或」包括相關聯所列項目中的一或多者中的任何及所有組合。諸如「……中之至少一者（at least one of）」之表述在位於元件清單之前時修飾元件的整個清單，且並不修飾清單的個別元件。
如本文中所使用，術語「實質上」、「約」以及類似術語用作表示近似的術語且不用作表示程度的術語，且意欲考慮所屬技術領域中具有通常知識者將辨識到的量測值或計算值中的固有偏差。通篇所使用之術語「約」用於描述且解釋小變化。舉例而言，「約」可意謂數值可修改±5%、±4%、±3%、±2%、±1%、±0.5%、±0.4%、±0.3%、±0.2%、±0.1%或±0.05%。由術語「約」修飾之數值包括特定識別值。舉例而言，「約5.0」包括5.0。
此外，在描述本揭示案之實施例時使用「可」係指「本揭示案之一或多個實施例」。如本文所用，術語「使用（use）」、「使用（using）」及「使用（used）」可被視為分別與術語「利用（utilize）」、「利用（utilizing）」及「利用（utilized）」同義。此外，術語「例示性」意欲指代實例或說明。
此外，本文中所列舉之任何數值範圍均意欲包括所列舉範圍內所歸入的具有相同數值精確度的所有子範圍。舉例而言，「1至10」之範圍意欲包括所列舉的最小值1與所列舉的最大值10之間（且包括所列舉的最小值1與所列舉的最大值10）的所有子範圍，亦即，具有等於或大於1的最小值及等於或小於10的最大值，例如，2至7。本文中所列舉之任何最大數值限制意欲包括其中歸入的所有較低數值限制，且在本說明書中所列舉的任何最小數值限制意欲包括其中歸入的所有較高數值限制。因此，申請者保留修正本說明書（包括申請專利範圍）的權力，以明確地列舉本文中所明確列舉的範圍內所歸入的任何子範圍。
如本文所用，「芳族含硼基團」係指具有至少一個與芳族基團共價鍵結之硼原子的化合物及/或具有至少一個共價結合在芳族基團內的硼原子的化合物。如本文所用，術語「芳族」可包括「雜環」、「雜環基」或「雜環的」。如本文所用，術語「雜環」、「雜環基」或「雜環的」各自係指含有一個、兩個、三個或四個獨立地選自氮、氧、磷及硫之雜原子的不飽和3員至18員環。在一些實施例中，術語「芳族」可包括「芳基」。如本文所用，術語「芳基」係指具有5至14個環原子之單環、雙環或其他多碳環、芳環系統。芳基可視情況稠合至選自芳基、環烷基、雜芳基及雜環基之一或多個環。例示性芳基亦包括但不限於單環芳環系統，其中環包含6個碳原子。
如本文所用，術語「雜芳基」係指含有一或多個雜原子（例如1至3個雜原子，諸如氮、氧及硫）之單環、雙環或多環芳環系統。雜芳基可經一或多個取代基取代。雜芳基亦可稠合至非芳環。例示性雜芳基包括但不限於單環芳環，其中該環包含2至5個碳原子及1至3個雜原子。在一些實施例中，芳族含硼基團可包括但不限於芳基硼酸及雜芳基硼酸、芳基硼酸酯及雜芳基硼酸酯，及/或硼氧雜環（boroxole）。根據某些實施例適用之例示性芳族含硼基團包括例如本文中描述為以下之彼等者：FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B、FF226、F2、F5、F10及FFL-1至FFL-101，且進一步包括例如專利申請案PCT/US2021/025261（2021年3月31日申請）中所揭示為化合物F1至F9、F12至F43、F500至F520及PCT/US2021/059802（2021年11月18日申請）中揭示為化合物FF1至FF224及F1至F10之彼等者；其揭示內容以全文引用之方式明確地併入本文中。
如本文所用，術語「小分子連接子」係指包含朝向X1之第一連接點及朝向Z1b、Z1a或Z1c之第二連接點的化學基團（例如，支架、部分）。在一些實施例中，第一連接點朝向X1且第二連接點朝向Z1c。在一些實施例中，第一連接點朝向X1且第二連接點朝向Z1a。在一些實施例中，小分子連接子為選自專利申請案PCT/US2021/025261中所揭示之式IIa至IIai、式IIIa至IIIai及FL1至FL19之部分/化學基團，其相關揭示內容以引用之方式明確地併入本文中。
如本文所用，術語「間接連接子」係指包含朝向X1之第一連接點及朝向Z1b、Z1a或Z1c之第二連接點的化學基團（例如，支架、部分）。在一些實施例中，第一連接點朝向X1且第二連接點朝向Z1c。在一些實施例中，間接連接子為選自式（i）FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75之部分/化學基團、其立體異構物；及（ii）L-天然或非天然胺基酸或D-天然或非天然胺基酸。在一些實施例中，至少一個Z1c經由一或多個間接連接子共價結合至X1或Z1a，其中間接連接子由式(X'') n1表示，且各n1獨立地選自1、2、3、4及5。舉例而言，至少一個Z1c經由間接連接子共價結合至X1，其中間接連接子由式III表示：
r''-(X1'') n1-(X2'') n2-(X3'') n3-(X4'') n4-(X5'') n5-z'' （式III） 其中 z''表示與X1中之胺的連接點； r''表示與Z1c之連接點； n1、n2、n3、n4及n5中之各者獨立地為0或1； 各X1''、X2''、X3''、X4''、X5''獨立地選自L-胺基酸或D-胺基酸，其中胺基酸之胺官能基共價結合至式III中之r''，且胺基酸之酸官能基共價結合至式III、FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75中之z''。
如本文中所使用，術語「胺基酸」包括蛋白型(或天然)胺基酸(在彼等20種標準胺基酸中)以及非蛋白型(或非天然)胺基酸。蛋白型胺基酸為天然併入蛋白質中之彼等胺基酸。標準胺基酸為由遺傳密碼編碼之彼等胺基酸。非蛋白型胺基酸未發現於蛋白質中，或並非藉由標準細胞機構產生（例如其可經受轉譯後修飾）。一般而言，胺基酸殘基(肽/蛋白質序列)可藉由其全名、其單字母代碼及/或其三字母代碼來鑑別。此三種方式係完全等效的。在下文中，未陳述光學異構體之本揭示案之化合物之各胺基酸應理解為意謂 L-異構體（除非另外說明）。胺基酸為含有胺基及羧酸基團及視情況存在的一或多個通常稱為側鏈之額外基團的分子。
如本文中所使用，術語「胺基酸殘基」為形式上已自羧基移除羥基及/或形式上已自胺基移除氫原子的胺基酸。如自以下實例顯而易見，胺基酸殘基可藉由其全名、其單字母代碼及/或其三字母代碼來鑑別。此三種方式完全等效且可互換。
如本文所用，術語「烷基」係指飽和的直鏈或分支鏈烴，諸如具有1至30個碳原子之直鏈或分支鏈基團，在本文中稱為C 1-30烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 22烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 20烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 18烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 16烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 14烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 12烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 10烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 8烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 6烷基。在一些實施例中，烷基為C 1-C 4烷基。例示性烷基包括但不限於甲基、乙基、丙基、異丙基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-1-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-1-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、丁基、異丁基、三級丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基及辛基。在一些實施例中，「烷基」為直鏈烴。在一些實施例中，「烷基」為分支鏈烴。
如本文所用，術語「環烷基」係指由環烷衍生之具有3至16個碳或3至8個碳的飽和或不飽和環狀、雙環或橋接雙環烴基，在本文中稱為「(C 3-C 8)環烷基」。在一些實施例中，環烷基為(C 3-C 6)環烷基。例示性環烷基包括但不限於環己烷、環己烯、環戊烷及環戊烯。環烷基可經以下之基團取代：烷氧基、芳基氧基、烷基、烯基、炔基、醯胺、胺基、芳基、芳基烷基、胺基甲酸酯、羧基、氰基、環烷基、酯、醚、甲醯基、鹵素、鹵烷基、雜芳基、雜環基、羥基、酮、硝基、磷酸酯、硫化物、亞磺醯基、磺醯基、磺酸、磺醯胺及硫酮。環烷基可稠合至其他環烷基（飽和或部分不飽和）、芳基或雜環基，以形成雙環、四環等。術語「環烷基」亦包括可含有或可不含有雜原子之橋接及螺稠環結構。
如本文所用，術語「醯基」係指R-C(O)-基團，諸如但不限於(烷基)-C(O)-、(烯基)-C(O)-、(炔基)-C(O)-、(芳基)-C(O)-、(環烷基)-C(O)-、(雜芳基)-C(O)-及(雜環基)-C(O)-，其中基團經由羰基官能基連接到母體分子結構。在一些實施例中，其為C 1-10醯基基團，其係指例如烷基、烯基、炔基、芳基、環烷基或雜芳基部分的鏈或環原子外加醯基之羰基碳的總數。舉例而言，C 4-醯基具有三個其他環或鏈原子外加羰基。在一些實施例中，其為C 1-C 22醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 20醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 18醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 16醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 14醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 12醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 10醯基。在一些實施例中，其為C 1-C 8醯基。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指經一或多個鹵素取代之烷基。鹵烷基之實例包括但不限於三氟甲基、二氟甲基、五氟乙基、三氯甲基等。在一些實施例中，其為C 1-C 22鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 20鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 18鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 16鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 14鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 12鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 10鹵烷基。在一些實施例中，其為C 1-C 8鹵烷基。
如本文所用，術語「芳基」係指具有5至14個環原子的單環、雙環或其他多碳環、芳族環系統。芳基可視情況稠合至選自芳基、環烷基、雜芳基及雜環基之一或多個環。本揭示案之芳基可經選自以下之基團取代：烷氧基、芳基氧基、烷基、烯基、炔基、醯胺、胺基、芳基、芳基烷基、胺基甲酸酯、羧基、氰基、環烷基、酯、醚、甲醯基、鹵素、鹵烷基、雜芳基、雜環基、羥基、酮、硝基、磷酸酯、硫化物、亞磺醯基、磺醯基、磺酸、磺醯胺及硫酮。例示性芳基包括但不限於苯基、甲苯基、蒽基、茀基、茚基、薁基及萘基，以及苯并稠合之碳環部分，諸如5,6,7,8-四氫萘基。例示性芳基亦包括但不限於單環芳環系統，其中環包含6個碳原子。
如本文所使用，術語「脫離基」為可與鍵結之電子一起置換為穩定物質之原子（或原子基團）。舉例而言，脫離基可為陰離子（例如，Cl -）或中性分子（例如，H 2O）。在一些實施例中，脫離基為鹵素、N-羥基丁二醯亞胺（NHS）基團、2,3,5,6-四氟苯酚（TFP）基團、五氟苯酚（Pfp）基團或磺酸酯。
「異構體」意謂滿足以下條件之化合物：其具有相同數目及類型之原子且因此具有相同分子量，但在空間中原子之排列或組態方面不同。
「立體異構物」或「光學異構體」意謂穩定的異構體，其具有至少一個對掌性原子或受限旋光性，從而產生垂直的不對稱平面（例如某些聯苯、丙二烯及螺環化合物）且可旋轉平面偏振光。因為本揭示案之化合物中存在可產生立體異構性之不對稱中心及其他化學結構，所以本揭示案涵蓋立體異構物及其混合物。本揭示案之化合物及其鹽包括不對稱碳原子且因此可以單一立體異構物、外消旋體以及對映異構體及非對映異構體之混合物形式存在。在一些實施例中，此類化合物將以外消旋混合物形式製備。在一些實施例中，此類化合物可以純立體異構物（亦即個別對映異構體或非對映異構體）或立體異構物富集混合物形式製備。如下文更詳細地論述，可藉由以下方法製備化合物之個別立體異構物：自含有所需對掌性中心之光活性起始物質合成，或製備對映異構產物之混合物，接著進行分離或解析，諸如轉化成非對映異構體之混合物，接著進行分離或再結晶，使用層析技術，使用對掌性解析劑，或在對掌性層析管柱上直接分離對映異構體。特定立體化學之起始化合物可商購，或藉由下文所描述之方法製備且藉由此項技術中熟知的技術解析。
如本文中所使用，「脂肪酸」為具有脂族鏈之羧酸。飽和脂肪酸具有飽和脂族鏈，而不飽和脂肪酸具有不飽和脂族鏈。在一些實施例中，脂肪酸為C 3-C 26脂肪酸。在一些實施例中，脂肪酸為C 4-C 20脂肪酸。在一些實施例中，脂肪酸為選自以下之飽和脂肪酸：CH 3CH 2COOH、CH 3(CH 2) 2COOH、CH 3(CH 2) 3COOH、CH 3(CH 2) 4COOH、CH 3(CH 2) 5COOH、CH 3(CH 2) 6COOH、CH 3(CH 2) 7COOH、CH 3(CH 2) 8COOH、CH 3(CH 2) 9COOH、CH 3(CH 2) 10COOH、CH 3(CH 2) 11COOH及CH 3(CH 2) 12COOH、CH 3(CH 2) 13COOH、CH 3(CH 2) 14COOH、CH 3(CH 2) 15COOH、CH 3(CH 2) 16COOH、CH 3(CH 2) 17COOH及CH 3(CH 2) 18COOH。在一些實施例中，脂肪酸為選自以下之不飽和脂肪酸：α-亞麻油酸、十八碳四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、亞麻油酸、反亞油酸、γ-次亞麻油酸、油酸、反油酸及巨頭鯨魷酸(gondoic acid)。
術語「醫藥學上可接受之鹽」係指可存在於本發明組合物中所用之化合物中之酸性或鹼性基團的鹽。
如本文所用，「原料藥」係指小分子化合物及/或含多肽之化合物。根據一些實施例，適用於本文所描述之化合物及方法的原料藥為治療上、預防上及/或診斷上活性之原料藥。
應理解，儘管諸如「第一」、「第二」、「第三」等的術語可在本文中用於描述各種元件（諸如分子、組分、基團及/或部分等），但彼等元件不應受限於此等術語。此等術語僅用於將一個元件與另一元件區分開來。因此，下文所描述之第一元件可被稱為第二元件而不脫離本揭示案之精神及範疇。將理解，當稱元件或基團「連接至」、「結合至」、「鍵聯至」或「耦接至」另一元件或基團時，該等兩個元件可直接連接，或可存在一或多個介入元件。應理解，除非上下文明確排除或排除，否則本文所描述之結合及連接可選擇為直接結合或直接連接。
如本文所用，術語「直接」或「直接共價結合（directly covalently conjugated）」或「直接共價結合（covalently conjugated directly）」可互換使用以指示第一基團「直接」或「直接共價結合（directly covalently conjugated）」或「直接共價結合（covalently conjugated directly）」至第二基團，此意謂第一及第二基團在無額外介入基團的情況下共價鍵合在一起。
如本文所用，術語「間接」或「間接共價結合（indirectly covalently conjugated）」或「間接共價結合（covalently conjugated indirectly）」可互換使用以指示第一基團「間接」或「間接共價結合（indirectly covalently conjugated）」或「間接共價結合（covalently conjugated indirectly）」至第二基團，此意謂第一及第二基團與至少一個額外介入基團（例如，小分子、連接子、間隔子、線形胺基酸序列及/或非線性胺基酸序列）共價鍵合在一起。
術語「胰島素受體促效劑」、「具有促效劑效能之化合物」在具有針對胰島素受體之效能的上下文中及「促效劑效能」在具有針對胰島素受體之促效劑效能的化合物的上下文中係指結合及/或活化胰島素受體之化合物（例如，如例如US 2016/0324932中所描述之式（I）化合物、蛋白質、融合蛋白）。
術語「短效胰島素受體促效劑（short-acting insulin receptor agonist）」及「短效胰島素（short-acting insulin）」係指具有與魚精蛋白胰島素人類及人類胰島素（以商品名Humulin®出售）相等或更快的起始活性之胰島素受體。舉例而言，短效胰島素可具有在注射10分鐘內奏效。作為另一實例，短效胰島素可具有在注射20分鐘內奏效。在一些實施例中，短效胰島素可在注射後1至4小時內具有最大有效性（峰值）。在一些實施例中，短效胰島素可在用餐之前或期間及/或之後不久投與。
術語「長效胰島素受體促效劑（long-acting insulin receptor agonist）」及「長效胰島素（long-acting insulin）」係指具有比Humulin®更慢之奏效的胰島素受體促效劑。舉例而言，長效胰島素可在1至2小時之間或更長時間內奏效。在某些實施例中，長效胰島素可在6至20小時內具有最大有效性（峰值）及或具有長效。在一些實施例中，長效胰島素可以每天一次或例如每週一次之頻率投與。
當在本文中結合胰島素受體促效劑使用時，術語「適用於用餐給藥」係指適用於在用餐期間及/或用餐之後不久控制血糖含量之短效胰島素受體促效劑。
當在本文中結合胰島素受體促效劑使用時，術語「適用於每週一次給藥」係指具有以下藥物動力學及藥效學特徵之胰島素受體促效劑：當以不超過每週一次頻率投與時經充分延長以控制整天之血糖含量。此類分子之實例包括如US2016/0324932中所描述之融合蛋白，包括BIF。BIF亦稱為依胰島素-α（insulin efsitora alfa），包含與人類IgG Fc區融合之胰島素受體促效劑的二聚體，其中該胰島素受體促效劑包含經由使用第一肽連接子與胰島素A鏈類似物融合之胰島素B鏈類似物，且其中該胰島素A鏈類似物之C端殘基直接與第二肽連接子之N端殘基融合，且該第二肽連接子之C端殘基直接與人類IgG Fc區之N端殘基融合。BIF鑑別為CAS登記號2131038-11-2，其提供以下化學名稱：（1）胰島素[16-麩胺酸，25-組胺酸，27-甘胺酸，28-甘胺酸，29-甘胺酸，30-甘胺酸]（人類B鏈）融合蛋白及肽（合成7-胺基酸連接子）融合蛋白及胰島素[47-蘇胺酸，51-天冬胺酸，58-甘胺酸]（人類A鏈）融合蛋白及肽（合成20-胺基酸連接子）融合蛋白及免疫球蛋白G2（人類Fc片段），二聚體；及（2）智人(Homo sapiens)胰島素B鏈[Y16＞Y(16)，F25＞H(25)，TPKT27-30＞GGGG(27-30)] (1-30)融合蛋白及二(甘胺醯基)絲胺醯基四(甘胺醯基) (31-37)胰島素A鏈[I10＞T(47)，Y14＞D(51)，N21＞G(58)] (38-58)融合蛋白及參(四甘胺醯基谷胺醯胺醯基)五甘胺醯基(59-78)智人免疫球蛋白重鏈恆定γ 2 {del-CH1，鉸鏈-(7-12)，CH2，CH3[K 107＞del(300)]} (79-299)，二聚體(80-80':83-83')-雙二硫化物，表現於CHO細胞中，經α糖基化。
如本文中所使用，「葡萄糖感測胰島素（glucose sensing insulin）」係指具有視血糖含量而定之起始活性及/或活性水平的胰島素受體促效劑。此類分子之實例包括本文所揭示之式（I）化合物，諸如實例2、5、13、22、28、32、35、50、56、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、126、128、132、134、135、150及154。
術語「基於腸促胰島素之療法」包括任何治療，其包含投與稱為腸促胰島素之代謝激素群組，或促進、實現、增強及/或模擬其作用，該群組包括但不限於GLP-1、胃抑肽（GIP）及升糖素。當前可用的基於腸促胰島素之療法包括GLP-1R促效劑。
「DPP-4抑制劑」為阻斷負責降解腸促胰島素之DPP-4酶的化合物。當前可用之DPP-4抑制劑包括西他列汀（sitagliptin）（Januvia®）及利拉利汀（linagliptin）（Tradjenta®）。
「GLP-1R促效劑」及「升糖素受體促效劑」定義為包含天然人類GLP-1（SEQ ID NO:25）或人類升糖素之胺基酸序列的化合物，以及在GLP-1受體（GLP-1類似物、GLP-1衍生物或GLP-1融合蛋白）處保持完全或部分活性的化合物。GLP-1R活性可藉由此項技術中已知之方法量測，包括使用量測GLP-1受體結合活性或受體活化之活體內實驗及活體外分析，例如採用胰島細胞或胰島素瘤細胞之分析，如EP 619,322及美國專利第5,120,712號中分別描述。GLP-1類似物為具有修飾之分子，該修飾包括相較於天然人類GLP-1（SEQ ID NO:25）之胺基酸序列時的一或多個胺基酸取代、缺失、倒位或添加。GLP-1衍生物為具有天然人類GLP-1（SEQ ID NO:25）或GLP-1類似物之胺基酸序列，但另外具有其胺基酸側基、α-碳原子、末端胺基或末端羧酸基中之一或多者的至少一個化學修飾的分子。GLP-1融合蛋白為包含GLP-1、GLP-1類似物或GLP-1衍生物部分及第二多肽之異源蛋白質。當前可用的GLP-1R促效劑包括艾塞那肽（exenatide）（Byetta®及Bydureon®）、利拉魯肽（liraglutide）（Victoza®）、阿必魯肽（albiglutide）（Tanzeum®）及度拉糖肽（dulaglutide）（Trulicity®），其結構為此項技術中已知的。參見例如美國專利第5,424,286號（艾塞那肽）；美國專利第6,268,343號（利拉魯肽）；US 20140447 I 7（阿必魯肽）；及美國專利第7,452,966號（度拉糖肽）。
術語「賦形劑」意謂添加至組合物中之除融合蛋白或任何其他額外活性成分外的任何物質。可用於本發明之組合物中的此類賦形劑之實例包括緩衝劑、界面活性劑、等張劑及防腐劑。「醫藥學上可接受之賦形劑」係指與組合物中之其他成分相容且適用於與其可遇到之任何組織、器官或身體部分接觸的賦形劑，意謂其必須不攜帶毒性、刺激、過敏性反應、免疫原性或過度超過其治療益處之任何其他併發症的風險。在一些實施例中，賦形劑可用於在溶液中穩定促效劑或用於增加起始最大有效性。此類賦形劑可包括甘露醇、山梨醇、間甲酚、EDTA及檸檬酸鹽。
「緩衝劑」為藉由其酸鹼結合物組分之作用抵抗pH變化之物質。在某些實施例中，本發明之組合物的pH為約5.5至約9.0，較佳地在約7.0與約8.0之間，更佳地在約7.2與7.8之間。適用於將本發明之組合物之pH控制在所需範圍內的緩衝劑包括但不限於諸如以下之試劑：磷酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽或其酸、精胺酸、TRIS、HEPES及組胺酸緩衝液以及其組合。「TRIS」係指2-胺基-2-羥基甲基-1,3-丙二醇及其任何藥理學上可接受之鹽。游離鹼及鹽酸鹽形式（亦即，TRIS-HCl）為TRIS之兩種常見形式。TRIS在此項技術中亦稱為三羥甲基胺基甲烷、緩血酸胺及參(羥基甲基)胺基甲烷。本發明之組合物中之較佳緩衝劑為檸檬酸鹽或檸檬酸、磷酸鹽及TRIS。
本文所揭示之化合物可包含一或多種蛋白質組分（例如，其中X1包含一或多種蛋白質組分）。在一些實施例中，本文所揭示之化合物包含兩種或更多種融合蛋白組分或兩種或更多種結合蛋白組分。如本文中所使用之術語「融合蛋白」係指兩種或更多種不同蛋白質之組合，該等蛋白質直接經由一種蛋白質之C端與另一種蛋白質之N端之間的肽鍵或間接地經由連接子（亦即，經由化學連接子，諸如生物官能化PEG連接子）或經由連接一種蛋白質之C端或N端或側鏈及另一種蛋白質之C端或N端或側鏈的連續胺基酸鏈連接在一起。如本文中所使用之術語「結合物蛋白質」係指兩種或更多種不同蛋白質之組合，該等蛋白質直接經由化學鍵或間接經由化學連接子化學地連接在一起。在一些情況下，兩種或更多種蛋白質可對相同或類似受體（亦即，兩中胰島素促效劑肽之融合物）起作用或可對單獨且不同的受體（亦即，一種蛋白質為胰島素受體促效劑，且另一種蛋白質為升糖素受體促效劑）起作用。在一些情況下，融合蛋白可含有僅一種促效劑蛋白質，而其他蛋白質為人類IgG Fc區或單域抗體（奈米抗體）或可變重鏈序列（V HH）。
片語「包含融合蛋白之組合物」涵蓋包含融合蛋白之單體、均二聚體、雜二聚體或多聚體的組合物。在某些實施例中，本揭示案之醫藥組合物為包含濃度為以下之融合蛋白的組合物：至少1 mg/mL、至少2 mg/mL、至少5 mg/mL、至少10 mg/mL、至少20 mg/mL、至少25 mg/mL、至少30 mg/mL、至少35 mg/mL、至少50 mg/mL、至少55 mg/mL、至少50 mg/mL、至少65 mg/mL、至少75 mg/mL、至少100 mg/mL或更大。在一些實施例中，融合蛋白以10至100 mg/mL之濃度存在。在一些實施例中，融合蛋白以15至75 mg/mL之濃度存在，且在一些實施例中，融合蛋白以20至65 mg/mL之濃度存在。
本揭示案之醫藥組合物亦可含有「界面活性劑」，意謂降低液體之表面張力的物質。用於醫藥組合物及可用於本揭示案之某些組合物中的界面活性劑之實例包括聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、聚乙二醇（例如，PEG 400、PEG 3000、TRITON X-100）、聚乙二醇烷基醚（例如，BRIJ）、聚丙二醇、嵌段共聚物（例如，泊洛沙姆（poloxamer）、PLURONIC F68；泊洛沙姆407、PLURONIC F127；TETRONICS）、脫水山梨醇烷基酯（例如，SPAN）、聚乙氧基化蓖麻油（例如，KOLLIPHOR、十六醇聚氧乙烯醚）及海藻糖。
本發明之醫藥組合物亦可含有防腐劑。術語「防腐劑」係指添加至醫藥調配物中以充當抗微生物劑之化合物。在此項技術中已知在非經腸調配物中有效及可接受的防腐劑包括苯紮氯銨（benzalkonium chloride）、苯乙銨（benzethonium）、氯己定（chlorohexidine）、苯酚、間甲酚、苯甲醇、對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯、氯丁醇、鄰甲酚、對甲酚、氯甲酚、硝酸苯汞、硫柳汞、苯甲酸及其各種混合物。酚類防腐劑包括化合物苯酚、間甲酚、鄰甲酚、對甲酚、氯甲酚、對羥基苯甲酸甲酯、苯甲醇及其混合物。若需要防腐劑，用於本發明之組合物中的防腐劑較佳為酚類防腐劑，較佳為間甲酚、苯酚及/或苯甲醇。已知某些酚類防腐劑，諸如苯酚及間甲酚結合至胰島素及胰島素六聚體，且藉此使增加物理或化學穩定性或兩者之構形變化穩定。然而，在包含其他蛋白質之組合物中，此類防腐劑可有助於形成蛋白質聚集體，或高分子量聚合物（HMWP）。參見例如Maa Y F及Hsu C C, 《國際藥劑學雜誌（Int J Pharm）》 140: 155-168 (1996)；Fransson J等人, 《藥物研究（Pharm. Res.）》, 14: 606-612 (1997)；Lam X M等人，《藥物研究》, 14: 725-729 (1997)；Remmele R L Jr等人, 《藥物研究》 15: 200-208.(1998)；Thirumangalathu R等人，《藥物科學雜誌（J Pharm Sci）》 95：1480-1497 (2006)。在一些情況下，治療性調配物中之蛋白質聚集體可能由於其誘導免疫反應之趨勢而不合需要。
如本文所使用，「組合療法」或與一或多種其他治療劑「組合」投與涉及投與兩種或更多種意欲治療預定適應症及/或與其相關之病狀的活性劑（例如，兩種或更多種藥理劑）。投與可為同時（並行）或按任何次序連續（依序）。「組合療法」之兩種或更多種藥劑可調配為單獨的組合物（例如，調配物）或可調配為單一組合物（調配物）。「組合療法」涵蓋投與具有不同作用機制或靶向不同適應症及/或病狀之藥劑以及具有類似作用機制或靶向類似適應症及/或病狀之藥劑。舉例而言，因為1型糖尿病患者產生極少或不產生胰島素，所以針對1型糖尿病之有效胰島素療法可涉及使用兩種類型之外源投與之胰島素：由彈丸注射提供之速效餐時胰島素；及長效基礎胰島素，每天投與一次或兩次以控制兩餐之間的血糖含量。2型糖尿病患者之治療通常開始於規定的體重減輕、運動及糖尿病飲食；但當此等量測不能控制升高之血糖時，則可能需要經口藥劑及基於腸促胰島素之療法，諸如投與能夠增加腸促胰島素含量之類升糖素肽-1（GLP-1）受體促效劑及/或二肽基肽酶4 （DPP-4）抑制劑。當此等藥劑仍不足時，可考慮用胰島素進行治療。疾病進展至需要胰島素療法之時刻的2型糖尿病患者亦可開始每天一次注射長效基礎胰島素，但在一些情況下，視需要可包括進餐時注射速效胰島素。在一些實施例中，本揭示案提供一種組合療法，其包含投與速效胰島素及基礎胰島素，及/或包含例如本文所揭示之一或多種二硼酸鹽感測器之融合蛋白。
術語「投與（administer）」、「投與（administering）」或「投與（administration）」包括將藥理劑（例如，藥劑）遞送至預定個體（例如，患者）的任何方法或操作。藥理劑可為任何適合治療劑，諸如生物劑，諸如抗體或其抗原結合片段（例如，包含此抗體或抗原結合片段之醫藥組合物）、肽藥劑（例如，激素或其經修飾之類似物或低分子量藥劑（例如，結構上定義之小分子或化學實體）。藥理劑之投與可為全身性的或藉由局部投與。在一些實施例中，投與可涉及一或多種可並行地、同時或依序投與之藥理劑。
術語「同時」及「並行地」可互換地使用且在本文中用以指投與兩種或更多種治療劑，其中投與之至少一部分在時間上重疊或其中投與第二治療劑係在投與第一治療劑之後的短時段內進行，不長於開始後續投與所需之時間。舉例而言，並行投與將包括在第一藥劑之後投與第二藥劑而不增加延遲超出完成第一投與及開始第二投與所需之時間。
術語「依序」及「連續地」可互換地使用且在本文中用以指投與兩種或更多種治療劑，其中在投與一種治療劑與投與另一藥劑之間存在延遲時段。舉例而言，依序投與將包括投與兩種或更多種治療劑，其中時間間隔大於約15分鐘，諸如約20、30、40、50或60分鐘、1天、2天、3天、1週、2週、3週或1個月或更長時間中之任一者。
如本文所使用，術語「基礎胰島素（basal insulin/insulins）」可指若干類型之基礎胰島素（例如，長效胰島素）。舉例而言，以商品名LANTUS®出售之甘精胰島素包含經修飾之胰島素結構，其中胰島素A鏈中之位置21處的天冬醯胺經甘胺酸置換，且將兩個精胺酸添加至B鏈之C端中。另一實例以商品名Rezvoglar TM出售之甘精胰島素-algr類似地包含經修飾之胰島素結構，其中胰島素A鏈中之位置21處的天冬醯胺經甘胺酸置換，且將兩個精胺酸添加至B鏈之C端中。作為又一實例，以商品名LEVEMIR®出售之地特胰島素（insulin detemir）包含經修飾之胰島素結構，其中B鏈之位置30處的蘇胺酸已缺失且B鏈之位置29處的離胺酸已經由14-碳肉豆蔻醯基脂肪酸與B29處之離胺酸之E-胺基團的共價鍵聯而衍生化。在歐洲及日本以商品名TRESIBA®購得之德谷胰島素（Insulin degludec）包含經修飾之胰島素結構，其中B鏈之位置30處的蘇胺酸已缺失，且B鏈之位置29處的離胺酸之ε-胺基經由γ-L-麩胺酸連接子與十六烷二酸共價衍生化。所有此等胰島素經指示用於每日一次投與。在一些實施例中，本揭示案提供一或多種化合物（例如，式I、融合蛋白）用於製造用於治療疾病（例如，糖尿病、肥胖症、血脂異常或代謝症候群）之藥劑的用途，其中藥劑與另一活性成分同時、分開或依序組合投與。藉由向有需要之患者投與治療有效量的本發明之化合物及/或組合物，本文所揭示之化合物及組合（例如，式I化合物、融合蛋白）有效於治療有需要之個體之疾病及/或病狀。
如本文中所使用，片語「治療有效量」及「預防有效量」係指在疾病或疾病之明顯症狀之治療、預防或控制中提供治療益處的量。治療有效量可出於治癒、癒合、緩解、減輕、改變、補救、改善、改良或影響疾病、疾病之症狀或疾病傾向性之目的來治療疾病或病狀、疾病之症狀或疾病傾向性。治療有效之設定或特定量可容易地由一般醫療從業者確定，且可視此項技術中已知之因素而變化，諸如疾病類型、患者之病史及年齡、疾病階段及其他治療劑之投與。在一些實施例中，片語「治療有效量」係指足以調節患者之血糖而不產生不可接受之副作用的本文所揭示之化合物及/或醫藥組合物及/或活性劑組合的量。向個體投與的本文所揭示之化合物及/或醫藥組合物及/或活性劑組合的治療有效量將視疾病類型及嚴重程度以及個體之特徵，諸如一般健康狀況、年齡、性別、體重及對藥物之耐受性而定。熟習此項技術者將能夠根據此等及其他因素確定適當之劑量。舉例而言，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約0.01 nmol/kg至約100 nmol/kg。在一些實施例中，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約1 nmol/kg至約50 nmol/kg。在一些實施例中，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約16 nmol/kg至約25 nmol/kg。在一些實施例中，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約1 mg至約200 mg。在一些實施例中，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約25 mg至約175 mg。在一些實施例中，當每週一次投與時，本揭示案之融合蛋白的治療有效量介於約100 mg至約160 mg。
術語「個體（subject）」及「患者（patient）」在本文中可互換地使用且係指接受療法或治療之當事人。在一些實施例中，「個體」及「患者」為人類。
術語「血糖含量（blood sugar level）」及「血糖（glycemia）」在本文可互換地使用且係指血液中存在之糖的濃度。血糖計或血糖儀可用於量測血液樣本中糖之量。血糖含量通常測量為mg糖/dL血液（mg/dL）。血糖含量可指本文所揭示之糖中之任一者的含量。舉例而言，血糖含量將包括血液中葡萄糖之濃度，另外稱為血糖含量（blood glucose level）/濃度。
如本文所使用，術語「穩態」係指所關注變數無增加或減小或具有極小（亦即，小於10%或更低）變化的恆定/固定條件。藉助於上下文，在一些實施例中，胰島素受體促效劑以固定劑量彈丸靜脈內（IV）輸注，且血糖含量藉由以可變速率（mg /kg/min）連續輸液葡萄糖而維持在一些預定「穩態」水平（例如，對於血糖正常狀態為100 mg/dL；對於高血糖為200 mg/dL或400 mg/dL）。為維持「穩態」血糖含量而輸注之葡萄糖的量等於全身葡萄糖的攝取及利用。
術語「高血糖症」在本文中用以指生理學上地高血糖含量。高血糖係指生理學上高血糖含量的狀態。視為高血糖之血糖含量將基於個體之物種而變化。舉例而言，在大鼠中，高血糖症係指血糖含量≥200 mg/dL。在人類中，高血糖症係指血糖含量＞180 mg/dL。
術語「血糖正常」在本文中用以指生理學上地正常血糖含量。血糖正常係指正常血糖含量的狀態。視為血糖正常之血糖含量將基於個體之物種而變化。舉例而言，在大鼠中，血糖正常係指血糖含量＜ 200 mg/dL。在人類中，血糖正常係指血糖含量在70至180 mg/dL之間。
片語「葡萄糖輸注速率」在本文中用以指葡萄糖輸注至個體中之速率。單位為mg/kg/min之葡萄糖輸注速率（GIR）計算如下：(輸注速率(mL/hr) × 葡萄糖濃度(g/dL) × 1000 (mg/g))/體重(kg) × 60 (min/hr) × 100 (mL/dL)，其中「輸注速率」係指葡萄糖輸注至個體中之速率，「葡萄糖濃度」係指待輸注之葡萄糖之濃度，且「體重」係指個體之體重。在一些實施例中，GIR對應於維持指定血糖含量所需要的葡萄糖輸注速率。
如本文中所使用之片語「相對葡萄糖輸注速率差」係指兩種不同條件、實驗或量測之間所輸注之葡萄糖量的差異。在一些實施例中，其可藉由獲得(a)一個用於維持指定血糖濃度之記錄GIR之曲線下面積（AUC）與(b)另一個用於維持不同血糖濃度之記錄GIR之AUC之間的差異來量測。一般而言，自用於維持較高血糖濃度之GIR的AUC減去用於維持較低血糖濃度之GIR的AUC。舉例而言，在第一GIR（提供100 mg/dL之血糖濃度）之AUC為600 mg/kg/min.min且第二GIR（提供200 mg/dL之血糖濃度）之AUC為800 mg/kg/min.min的情況下，自第二GIR之AUC減去第一GIR之AUC得到200 mg/kg/min.min之相對葡萄糖輸注速率差。
如本文中所使用，片語「相對葡萄糖輸注速率比」係指兩種不同條件、實驗或量測之間所輸注之葡萄糖量的比率。在一些實施例中，其可藉由獲得(a)一個用於維持血糖濃度之記錄GIR之曲線下面積（AUC）與(b)另一個用於維持不同葡萄糖糖濃度之記錄GIR之AUC之間的比率來量測。一般而言，將用於維持較高血糖濃度之GIR的AUC除以用於維持較低血糖濃度之GIR的AUC。舉例而言，在第一GIR（提供100 mg/dL之血糖濃度）之AUC為600 mg/kg/min.min且第二GIR（提供200 mg/dL之血糖濃度）之AUC為800 mg/kg/min.min的情況下，第二GIR之AUC除以第一GIR之AUC得到1.33之相對葡萄糖輸注速率比。
如本文中所使用，片語「曲線下面積」係指無論繪製或數學上表示，藉由曲線、軸及兩個邊界點定界之面積。在一些實施例中，用於計算曲線下面積（AUC）之曲線為GIR隨時間變化之量度，其中X軸將對應於時間且Y軸將對應於GIR，原點處於Y軸上之0處（亦即，X軸及Y軸交叉於Y軸上之0處）。舉例而言，曲線可為在一段時間內記錄之GIR，且邊界點為實驗中輸注開始及結束時之GIR。隨後將計算繪製曲線與X軸之間、起始與結束邊界點之間的區域的AUC。在數學上，AUC可根據熟習此項技術者已知之方法計算，例如，如Tai M.M. (1994) 《糖尿病護理（Diabetes Care）》，17(2)：152-154中，其內容以全文引用之方式併入本文中。在一些實施例中，使用梯形規則及應用之基線校正來計算曲線下面積（AUC）。在一些實施例中，使用GraphPad Prism v9計算AUC。對於基線校正，可自時間0（x = 0）至時間最後量測時間點（x =300）之各GIR值減去在注射之前30分鐘（x = -30 min）至注射時（x=0）的平均GIR值。梯形計算如下： 其中a為第一時間點（例如，0分鐘)且b為最後時間點（例如，300分鐘）。如下根據小梯形之細分計算面積： 使得Δx為各時間點（5分鐘間隔）之間的差。
如本文中所使用，術語「EC50」係指在劑量反應分析中化合物之半最大效應濃度。EC50為由於暴露於化合物而產生最大可能效應之一半所需要的化合物之濃度的量度。可使用此項技術中已知之方法計算EC50。在一些實施例中，EC50可使用以下等式使用四參數邏輯回歸曲線來計算：Y=底部值 + (X^希爾斜率)*(頂部值-底部值)/(X^希爾斜率 + EC50^希爾斜率)，其中希爾斜率（hillslope）係指劑量-反應曲線之頂部及底部平穩段之間的S形曲線之斜率。在一些實施例中，EC50可使用GraphPad Prism v7、8或9來計算。當化合物具有其在糖（例如，葡萄糖）之兩個或更多個濃度下量測的EC50時，（a）術語「第一糖濃度」係指糖之第一較低濃度，例如其中濃度為約3 mM或約5 mM，且（b）「第二糖濃度」係指糖之第二較高濃度，例如其中濃度為約10 mM、約20 mM或約30 mM。在一些實施例中，舉例而言，比較劑量反應曲線之EC50以評估例示性式I化合物自低葡萄糖濃度（例如，約3 mM或約4 mM）至高葡萄糖濃度（例如，約10 mM、約20 mM或約30 mM）之胰島素受體磷酸化（IR磷酸化）活性的倍數變化。此倍數活性變化藉由化合物（例如，式I化合物）在「低」葡萄糖濃度（例如，約3 mM）下載EC50除以該化合物在「高」葡萄糖濃度（例如，約20 mM）下之EC50來測定，其中所有其他條件保持恆定。參見標題為「式I化合物之活性的活體外論證」之實例。
如本文中所使用，術語「Kd」係指解離常數，且反映配位體（例如，如本文所描述之二硼酸鹽感測器）與其目標（例如糖，例如葡萄糖）之間的結合親和力。舉例而言，「葡萄糖Kd」及「平均葡萄糖Kd」在本文所描述之二硼酸鹽感測器之上下文中係指二硼酸鹽感測器針對葡萄糖之親和力，其中Kd係在二硼酸鹽感測器結合至胰島素分子以產生本文所描述之化合物之前量測的。本文所描述之二硼酸鹽感測器與葡萄糖之結合可經由茜素紅S（ARS）置換分析量測且在二硼酸鹽感測器結合（例如，共價結合）至胰島素分子（例如，式I化合物）之前記錄。ARS置換分析為此項技術中已知的，例如Springsteen及Wang (2001）《化學通訊（Chem. Comm.）》，1608-1609，其內容以全文引用之方式併入本文中。在ARS置換分析中，將如本文所揭示之二硼酸鹽感測器與ARS一起培育且記錄螢光發射。如本文所描述之二硼酸鹽感測器及ARS之組合物隨後相對於糖（例如，葡萄糖）之連續稀釋滴定，且隨後在培育之後量測螢光發射以確定當二硼酸鹽感測器結合至糖時置換ARS。強度變化（具有及不具有糖之螢光發射）可相對於糖之濃度繪製以產生糖結合之締合常數。當二硼酸鹽感測器對糖具有較高締合常數時，Kd增加。另外，如本文所描述之二硼酸鹽感測器包括對糖具有選擇性親和力/結合的彼等者。舉例而言，如本文所描述之二硼酸鹽感測器可包括對葡萄糖具有增加之親和力（結合），但對諸如乳酸鹽及/或果糖之其他糖不具有親和力的感測器。 參見標題為「使用ARS置換分析測定葡萄糖、果糖及乳酸鹽結合（Kd）之程序」的實例。
如本文中所使用，術語「鉗夾（clamp）」、「鉗夾分析（clamp assay）」及「鉗夾（clamped）」係指高血糖/血糖正常鉗夾（葡萄糖鉗夾），其公認為用於在實驗動物中及在人類中經由葡萄糖利用偵測胰島素活性之「黃金標準」方法。在高血糖/血糖正常鉗夾中，血漿（血液）胰島素濃度急劇升高且在某些實施例中，藉由連續輸液胰島素維持，同時藉由可變的葡萄糖輸注速率（GIR）使血漿葡萄糖濃度在預定高血糖或血糖正常含量下保持恆定。當達成穩態血糖含量時，葡萄糖輸注速率等於胰島素受體刺激之體內所有組織的葡萄糖攝取，且因此為特定血糖含量下之胰島素活性的量度。舉例而言，在一些實施例中，在研究過程中將葡萄糖連續輸注至個體且調節葡萄糖輸注速率以回應於投與化合物（例如，式I化合物）維持恆定的血糖含量。回應於以特定劑量水平或濃度投與化合物的糖輸注速率變化經記錄且用於測定糖輸注速率。在一些實施例中，糖為葡萄糖。參見例如Lautt W.W.等人(1998) 《加拿大生理學及藥理學雜誌（Canadian Journal of Physiology and Pharmacology）》76(12):1080-1086，其內容以全文引用之方式併入本文中。本文提及且使用之鉗夾技術/分析為此項技術中已知且揭示之技術之修改版本。參見標題為「式I化合物之活性的活體內論證」之實例。
在至少一些實施例中，一或多個基團（例如，X1a、Z1a、Z1c）彼此直接地或間接地（例如，經由一或多個間接連接子）共價結合。舉例而言，根據某些實施例，Z1c直接地或間接地（例如，經由一或多個間接連接子）共價結合至X1中之胺。作為另一實例，根據某些實施例，一或多種原料藥（X1）共價結合至一或多個含胺連接子。在一些實施例中，X表示直接與X1中之胺，或與直接或間接（例如，經由間接連接子）共價結合至X1之胺的共價連接點。在某些實施例中，各Z1c獨立地直接或間接（例如，經由式(X'') n1之間接連接子）與Z1a之胺或與X1之胺共價結合。在一些實施例中，至少一個Z1c經由間接連接子（例如，式(X'') n1）共價結合至X1或至Z1a。
如本文中所使用，諸如「朝向[基團]之連接點」、「連接至（attachment to）」及「朝向[基團]之共價鍵聯」之術語表示指定之原子、連接或鍵聯比結構式內之其他連接點或共價鍵聯變數更接近於所指定之基團。在一些實施例中，連接點或共價鍵聯可直接鄰接指定基團，且在一些實施例中，其他原子或基團可存在於其間。
如本文所用，術語「同源性百分比」係指在最佳比對之後兩個序列之間的序列一致性百分比。相同序列具有100%之同源性百分比。最佳比對可藉由相似性搜尋方法描述之同源性比對演算法來執行，如Pearson及Lipman, 《美國國家科學院院刊（ Proc. Natl. Acad. Sci.）》 USA 85:2444 (1988)，及可藉由相似性搜尋描述之一般方法來執行，如Neddleman及Wunsch, 《分子生物學雜誌（ J. Mol. Biol.）》 48:443 (1970)，包括此等演算法的實施或視覺比較。如本文所用，「胰島素A鏈」為與野生型人類胰島素之A鏈具有最高同源性百分比的胰島素鏈。如本文所用，「胰島素B鏈」為與野生型人類胰島素之B鏈具有最高同源性百分比的胰島素鏈。
在一些實施例中，術語「共價連接（covalently connected）」、「共價結合（covalently conjugated）」「經由共價結合（through a covalent conjugation）」可互換地用於表示兩個或更多個原子、基團或化學部分經由化學鍵鍵合或連接。在一些實施例中，化學鍵（在一些實施例中，其可被稱為共價鍵）可為（例如由以下組成）兩個原子、基團或化學部分之間的一或多個共用電子對（例如，呈單鍵、雙鍵或參鍵）。在一些實施例中，化學（共價）鍵可進一步包括一或多個原子或官能基，且可使用此項技術中之彼官能基之對應名稱來提及。舉例而言，包括-SS-基團之共價鍵可稱為二硫鍵；包括-(C=O)-基團之共價鍵可稱為羰基鍵；包括-(CF 2)-基團之共價鍵可稱為二氟亞甲基鍵等。除非明確說明，否則共價鍵內之鍵或官能基的類型不受限制，例如當其描述為包括或選自某些基團時。適合共價鍵之類型或種類將自說明書及/或上下文理解。
在一些實施例中，胰島素受體促效劑可在結合至胰島素受體之前與人類血清白蛋白（HSA）結合或締合。舉例而言，含有DSL-1至DSL-112中任一者之胰島素受體促效劑可經由氫鍵、離子締合或可水解硼酯鍵與HSA締合或結合。此等相互作用可沿HSA之表面存在，諸如與離胺酸殘基之鹽橋、與絲胺酸、蘇胺酸及/或酪胺酸羥基形成可裂解硼酯鍵，及/或HSA上之特定位置，諸如位點I或位點II小分子藥物結合位點或七個脂肪酸結合位點中之一或多者（Yamasaki, K.等人 (2013) 《生物化學與生物物理學學報（Biochimica et Biophysica Acta）》 12:5435-5443）。
在一些實施例中，胺基酸側鏈可經由任何數目之化學鍵（例如，結合部分）共價連接（例如，鍵聯或交聯），如《生物結合物技術（Bioconjugate Techniques）》（第三版），由Greg T. Hermanson編輯, Academic Press, Boston, 2013中一般描述。舉例而言，側鏈可經由醯胺、酯、醚、硫醚、異脲、亞胺、三唑或此項技術中可獲得的用於將一種肽、蛋白質或合成聚合物共價連接至第二肽、蛋白質或合成聚合物之任何合適的共價結合化學反應來共價連接。術語聚合物包括多肽。術語「共價結合化學反應」可指結合部分及/或用於形成結合部分之化學反應中包括的一或多個官能基。
術語「鄰二醇」係指一組分子，其中兩個羥基佔據鄰位，即其與相鄰原子連接。此類分子可包括但不限於醣類，諸如己糖、葡萄糖、甘露糖及果糖。
在一些實施例中，術語「白蛋白」意謂人類血清白蛋白或與人類血清白蛋白具有至少60%同源性百分比的蛋白質。應理解，在一些實施例中，白蛋白可出於結合之目的經進一步化學修飾。在一些實施例中，修飾可包括一或多個共價連接之連接子。在一些實施例中，術語「白蛋白」意謂人類血清白蛋白或與人類血清白蛋白具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同源性百分比的蛋白質。在一些實施例中，術語「白蛋白」意謂人類血清白蛋白或與人類血清白蛋白具有至少90%同源性百分比的蛋白質。在一些實施例中，術語「白蛋白」意謂人類血清白蛋白或與人類血清白蛋白具有至少95%同源性百分比的蛋白質。在一些實施例中，術語「白蛋白」意謂人類血清白蛋白或與人類血清白蛋白具有至少99%同源性百分比的蛋白質。在一些實施例中，白蛋白係未修飾之人血清白蛋白。
術語「治療」意欲包括預防及最小化所提及之疾病、病症或病狀（亦即，「治療」係指預防性及治療性投與本發明之化合物或包含本發明之化合物的組合物，除非另有說明或明確與上下文相矛盾）。投與途徑可為將本揭示案之化合物有效地傳輸至身體中之所需或適當位置的任何途徑，諸如非經腸（例如皮下、肌肉內、經口或靜脈內）。對於非經腸投與，與已知胰島素之調配類似地調配本揭示案之化合物。此外，對於非經腸投與，與已知胰島素之投與類似地投與本揭示案之化合物，且醫師熟悉此程序。待投與的本揭示案之化合物之量、確定多久投與本揭示案之化合物及選擇投與本揭示案之何種化合物（視情況與另一抗糖尿病化合物一起）與熟悉待治療之病狀（例如，糖尿病）的治療的醫師協商決定。
在一些實施例中，如本文中所使用之「治療性組合物」及「醫藥組合物」意謂意欲具有諸如醫藥組合物、遺傳物質、生物製劑及其他物質之治療效果的組合物。醫藥組合物可經組態以在體內發揮治療作用；可改變濃度以減少補充頻率等。在一些實施例中，「治療有效量」及「預防有效量」係指在疾病或疾病之明顯症狀之治療、預防或控制中提供治療益處的量。治療有效量可出於治癒、癒合、緩解、減輕、改變、補救、改善、改良或影響疾病、疾病之症狀或疾病傾向性之目的來治療疾病或病狀、疾病之症狀或疾病傾向性。治療有效之設定或特定量可容易地由一般醫療從業者確定，且可視此項技術中已知之因素而變化，諸如疾病類型、患者之病史及年齡、疾病階段及其他治療劑之投與。在一些實施例中，本文所描述之經修飾之胰島素藉由注射或吸入或藉由其他途徑遞送至體內，且可以非儲存形式可逆地結合至可溶性葡萄糖。在一些實施例中，本文所描述之經修飾之胰島素經延長時段自體內局部儲存物釋放或自結合形式釋放至血清中之蛋白質，諸如白蛋白。在一些實施例中，經修飾之胰島素的釋放在葡萄糖含量升高情況下加速，且在一些實施例中，此類釋放速率可視血糖含量或血液中之其他小分子（包括含二醇之分子）之含量而定。在一些實施例中，本文所描述之經修飾之胰島素之釋放、生物可用性及/或溶解度隨血液或血清葡萄糖濃度或體內其他小分子之濃度變化而控制。
另外，除非另外陳述，否則本文中所描繪之結構亦意謂包括不同之處僅在於存在一或多個同位素富集原子之化合物。舉例而言，除了氫經氘（ 2H）或氚（ 3H）置換或碳經 13C-碳原子或 14C-碳原子置換以外的具有本揭示案結構之化合物均在本揭示案之範疇內。此類化合物可用作例如分析工具、生物測定中之探針或治療劑。
在一些實施例中，官能基可經由任何適合之共價結合化學反應（連接子）共價結合或鍵聯，其可用於使一個官能基或胺基酸側鏈與另一官能基共價結合，非限制性實例包括醯胺、酯、醚、硫醚、異脲、亞胺及三唑連接子。在一些實施例中，官能基經由如此項技術中所定義之點擊化學反應共價結合。此等包括例如環加成反應，包括但不限於3+2環加成反應、應變促進之炔-硝酮環加成反應、應變烯烴、烯烴及四 逆需求狄爾斯-阿爾德反應（Diels-Alder）、銅（I）催化之疊氮化物-炔環加成反應（CuAAC）、硫醇-順丁烯二醯亞胺加成反應、應變促進之疊氮化物-炔環加成、施陶丁格接合（Staudinger ligation）、親核開環反應及與碳-碳多重鍵之加成反應。此等反應中之一些描述於例如H. C. Kolb, M. G. Finn及K. B. Sharpless (2001)；點擊化學：來自一些良好反應之各種化學功能（Click Chemistry: Diverse Chemical Function from a Few Good Reactions），《德國應用化學國際版（ Angewandte Chemie International Edition）》40 (11): 2004-2021；Kolb及Sharpless, 《今日藥物發現（ Drug Discovery Today）》8:1128-1137, 2003；Huisgen, R. 《德國應用化學英語國際版（ Angew. Chem. Int. Ed. Engl.）》1963, 2, 565；Agard, N. J.; Baskin, J. M.; Prescher, J. A.; Lo, A.; Bertozzi, C. R. 《ACS化學生物學（ ACS Chem. Biol.）》2006, 1, 644。熟習此項技術者將能夠選擇用於此類點選反應之適合緩衝液、pH及反應條件。在一些實施例中，共價結合係如此項技術中所定義之「生物正交反應」的結果。此類反應例如以下中所描述：Sletten, Ellen M.；Bertozzi, Carolyn R. (2009).生物正交化學：在功能的海洋中尋找選擇性（Bioorthogonal Chemistry: Fishing for Selectivity in a Sea of Functionality），《德國應用化學國際版》48 (38): 6974-98.；Prescher, Jennifer A; Bertozzi, Carolyn R (2005).生命系統化學（Chemistry in living systems），《自然化學生物學（ Nature Chemical Biology）》1 (1): 13-21。
在一些實施例中，可以使用天然化學接合來鍵聯官能基，例如以下中所描述：Dawson, P. E.；Muir, T. W.；Clark-Lewis, I.；Kent, S. B. (1994) 藉由天然化學接合合成蛋白質（Synthesis of proteins by native chemical ligation），《科學（ Science）》266 (5186): 776-778.如本文所用，諸如「鍵聯」、「共價結合」等術語可指上文在一些實施例中所描述之任何化學反應。當用於描述共價鍵或連接的一部分時，術語「胺（amine）」、「胺基（amino group）」及/或「胺基團（amine group）」可互換地用於指示所描述之元件共價連接的胺基或胺基團。在一些實施例中，胺基或胺基團可為一級胺、二級胺或片段（諸如NH---⊕），對其進行結合且對其進行描述。
在一些實施例中，胺基或胺基團可為肽或肽鏈之N端的NH 2基，或離胺酸側鏈之NH 2基，但本揭示案之實施例不限於此。在一些實施例中，第一基團與第二基團之連接係參照源自第二基團之胺或胺基描述，該胺或胺基為該第一基團與該第二基團之間的共價鍵的一部分。舉例而言，X1上之離胺酸側鏈之胺可稱為胺，且此外可描述為經由醯胺鍵結合以指定構成共價鍵之官能基的結構及連接性。若共價連接經由胺鍵或胺鍵聯進行，則其稱為胺鍵聯。應理解，與胺連接之羰基（例如，(C=O)-NH部分）構成醯胺鍵，且因此根據定義，胺鍵不直接連接至羰基。換言之，當用於描述共價鍵或連接時，術語「醯胺鍵」及/或「醯胺鍵聯」可互換地用於表示連接至胺的羰基（例如，(C=O)-NH部分）。
在一些實施例中，其他修飾包括連接化學實體（例如，部分或官能基），諸如碳水化合物基團、一或多個含順式二醇之基團、一或多個磷酸酯基團、一或多個兒茶酚基、法呢基（farnesyl group）、異法呢基、脂肪酸基團或用於結合、官能化或意欲影響胰島素之藥物動力學、藥效動力學及/或生物物理學溶液特徵之其他修飾的連接子。
在一些實施例中，化合物包括人類肽激素（例如，X1)。在一些實施例中，肽激素為人類胰臟之多肽激素。在一些實施例中，化合物，諸如式I化合物，包括人類胰島素或人類胰島素類似物。在一些實施例中，胰島素中之兩個不同胺基如由式I所描述共價結合。
應理解，人類肽激素、人類胰臟之多肽激素、胰島素、人類胰島素、經修飾之胰島素及人類胰島素類似物可在所描述之實施例中之一些中互換使用；亦即例如在某些實施例中，「人類胰島素類似物」可替代地用於使用人類胰島素描述之實施例中。在一些實施例中，化合物，諸如式I化合物，包括人類胰島素或人類胰島素類似物。在一些實施例中，式I化合物包括如式I對於p'=1所描述的人類胰島素或人類胰島素類似物，其中胰島素中之單個胺基如式I所描述結合。在一些實施例中，胺基為胰島素B鏈之N端或離胺酸側鏈之胺基。在一些實施例中，胰島素中之兩個或更多個不同胺基各自獨立地如式I所描述共價結合。在一些實施例中，至少一個胺基為胰島素B鏈之N端。在一些實施例中，胺基包含胰島素中之離胺酸殘基之側鏈的胺基。
一般熟習此項技術者已知的肽激素（例如人類多肽激素，例如胰島素）之各種適合修飾包括於本揭示案之範疇內。在一些實施例中，Z1a之多肽或在胰島素之B鏈的N端或A鏈之C端的視情況延伸之多肽含有與人類多肽序列具有高達70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同源性的序列。在一些實施例中，Z1a之多肽或在胰島素之B鏈的N端或A鏈之C端的視情況延伸之多肽含有一或多個視情況與脯胺酸殘基相鄰的離胺酸殘基，使得脯胺酸為離胺酸之C端。在一些實施例中，離胺酸殘基之胺基各自獨立地如式I所描述結合。
在一些實施例中，胰島素經由與含糖或二醇之分子結合而經進一步修飾。在一些實施例中，人類多肽激素為雙重或三重雜交肽，其包含兩種或更多種人類肽激素之序列且可經由多種受體起作用；例如葡萄糖依賴性促胰島素多肽（GIP）及GLP-1受體促效劑或GLP-1/GIP/升糖素三重促效劑。在一些實施例中，人類多肽激素為腸激素。在一些實施例中，人類多肽激素係選自c-肽，促腎上腺皮質激素（ACTH）、胰澱素、血管緊張素、心鈉素（ANP）、降鈣素、膽囊收縮素（CCK）、胃泌素、胃饑餓素、升糖素、生長激素、促卵泡激素（FSH）、胰島素、瘦素、黑色素細胞刺激素（MSH）、催產素、甲狀旁腺激素（PTH）、催乳素、腎素、生長抑素、促甲狀腺激素（TSH）、促甲狀腺激素釋放激素（TRH）、加壓素、血管活性腸肽、神經肽、影響心血管健康或食慾之肽激素、一或多種此等肽之混合物以及此等肽之類似物。在一些實施例中，化合物包含例如經由與聚合物、XTEN蛋白序列或脂族鏈共價結合進一步修飾之人類多肽激素。在一些實施例中，聚合物修飾之化合物在血液中具有更長的循環時間。在一些實施例中，聚合物修飾之化合物在血液中具有使得其適用於注射（一天一次注射、每週一次注射或每月一次注射）之循環時間。在一些實施例中，人類多肽激素或其類似物包括一或多種L-天然或非天然胺基酸或D-天然或非天然胺基酸，其各自獨立地為二十種典型胺基酸或非典型胺基酸中之一者。
在一些實施例中，胰島素受體促效劑為包含A鏈及B鏈之胰島素類似物，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25、24051及24052之序列，且B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24061、24062、24063、24064及25000至25397之序列。在一些實施例中，胰島素類似物包含：包含序列24051之A鏈及包含選自以下之序列的B鏈：25000、25001、25006至25009、25076、25077、25082至25085、25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。在一些實施例中，胰島素類似物包含：包含序列24051之A鏈及包含選自以下之序列的B鏈：25011、25012、25017至25020、25087、25088、25093至25096、25229、25239、25232、25240、25245至25248、25305、25308、25315、25316及25321至25324。在一些實施例中，胰島素類似物包含：包含序列24051之A鏈及包含選自以下之序列的B鏈：25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。在一些實施例中，胰島素類似物包含：包含序列24051之A鏈及包含選自以下之序列的B鏈：25011、25012、25017至25020、25087、25088、25093至25096、25229、25232、25305及25308。在一些實施例中，胰島素類似物包含具有A鏈及B鏈之人類胰島素，其中A鏈及/或B鏈中之每一者中已突變、缺失或另外插入至多六個殘基。在其一些實施例中，胰島素類似物包括含有A鏈及B鏈之胰島素，其具有將B鏈之C端與A鏈之N端連接的連接肽，且該連接肽包括天然胰島素原C-肽以及如此項技術中已知之C-肽之較短版本，其中C-肽之較短版本允許單鏈胰島素保持生物活性及/或效能。
字詞類似物（analog）及類似物（analogue）為相同字詞之替代性拼寫，在本文可互換地使用且具有相同的意義。在人類激素、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽的上下文中，類似物意謂由包括胺基酸之至多8個突變、缺失或插入及/或其他化學修飾的親本序列產生之任何相關序列。在一些實施例中，如此項技術中已知，此類似物可增強生物活性、藥物動力學、藥效學、效能、穩定性及或化學及物理特性。
在一些實施例中，人類激素類似物包括一或多個殘基，其為2-胺基異丁酸及/或其他人工（亦即，非天然）胺基酸。
在一些實施例中，在胰島素類似物中，胰島素之B鏈之C端與A鏈之N端共價結合。在一些實施例中，胰島素之B鏈之C端與A鏈之N端共價結合且連接肽為C-肽。在一些實施例中，胰島素之B鏈之C端與A鏈之N端共價結合且連接肽為C-肽且進一步包括包含式I結合物之任何中間化合物。
在一些實施例中，胰島素類似物包括賴脯胰島素（insulin lispro）或甘精胰島素型修飾或影響胰島素在體內之藥物動力學或半衰期的對人類胰島素之任何適合修飾。在一些實施例中，用於製備本發明之聚乙二醇化賴脯胰島素化合物的賴脯胰島素可藉由多種公認肽合成技術中之任一者製備，包括溶液相方法、固相方法、半合成方法及重組DNA方法。舉例而言，美國專利第5,700,662號（Chance等人）及歐洲專利第214 826號（Brange等人）揭示多種胰島素類似物之製備。賴脯胰島素之A鏈及B鏈亦可經由胰島素原樣前驅物分子使用重組DNA技術製備。在一些實施例中，胰島素原樣前驅物用於製備賴脯胰島素，該賴脯胰島素用於製備本發明之聚乙二醇化賴脯胰島素。
在一些實施例中，本發明化合物之胰島素部分可經由使用重組DNA技術產生前驅蛋白分子來製備。DNA，包括cDNA及合成DNA，可為雙股或單股的。編碼本文所描述之前驅蛋白分子的編碼序列可能因遺傳密碼之冗餘或簡併而變化。可將DNA引入宿主細胞中以便產生本發明之前驅蛋白。適當宿主細胞用表現系統短暫或穩定轉染或轉型以產生前驅蛋白。該等宿主細胞可為細菌細胞，諸如大腸桿菌之K12或B菌株；真菌細胞，諸如酵母細胞；或哺乳動物細胞，諸如中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞。表現載體在宿主生物體中通常可以游離基因體或宿主染色體DNA之整體部分形式複製。通常，表現載體將含有選擇標記物，例如四環素(tetracycline)、新黴素(neomycin)及二氫葉酸還原酶，以允許選擇經所需DNA序列轉型之細胞。
在一些實施例中，多肽激素為升糖素。在一些實施例中，升糖素具有已知影響升糖素之溶解性及溶液穩定性的其他突變及修飾。在一些實施例中，化合物（諸如式I化合物）包含Z1a經由肽鍵與胰島素之B鏈之N端的結合及至少一種由式I所描述與胰島素之額外結合。在一些實施例中，額外結合為與胰島素中之離胺酸殘基結合。在一些實施例中，至少一個此類離胺酸為胰島素B鏈之位置15與C端之間的殘基。在一些實施例中，離胺酸殘基視情況緊鄰脯胺酸、甘胺酸、精胺酸、蘇胺酸或絲胺酸。在一些實施例中，式I中之一或多個胺基酸為D-胺基酸。在一些實施例中，化合物（諸如由式I表示之化合物）中之任何二級或一級胺各自獨立地視情況經乙醯化。在一些實施例中，式I化合物具有多肽激素X1，其進一步與藥物分子、顯影劑、螯合劑、造影劑、放射性同位素或接合免疫細胞之分子結合。
在一些實施例中，X1為多肽激素，其包含結合胞外蛋白受體的肽配位體。在一些實施例中，X1包含與天然人類多肽激素具有至少50%同源性之人類多肽激素的多肽類似物。在一些實施例中，X1包含與天然人類多肽激素具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同源性之人類多肽激素的多肽類似物。在一些實施例中，X1包含與天然人類多肽激素具有至少90%同源性之人類多肽激素的多肽類似物。在一些實施例中，X1包含與天然人類多肽激素具有至少95%同源性之人類多肽激素的多肽類似物。在一些實施例中，X1包含與天然人類多肽激素具有至少99%同源性之人類多肽激素的多肽類似物。在一些實施例中，X1為人類胰島素類似物，其中至多10個額外殘基經添加至胰島素之A鏈或B鏈。
在一些實施例中，術語「葡萄糖反應性」係指在葡萄糖存在及不存在下或在葡萄糖低含量與高含量（例如，3 mM葡萄糖與20 mM葡萄糖）差異中的活性變化。在一些實施例中，藉由在基於細胞之分析中誘導半峰最大反應（EC50）所需之胰島素濃度（以胰島素的奈莫耳單位（nM）為單位）評估結合之胰島素的活性。較低EC50濃度之結合胰島素的活性比具有較高EC50濃度之胰島素更高（例如EC50為3 nM之胰島素比EC50為50 nM之胰島素更具活性）。當胰島素在葡萄糖不存在及存在下或在葡萄糖較低含量及較高含量時分別自活性較低的EC50（較高nM）變為活性較高的EC50（較低nM）時，觀測到「葡萄糖反應」。
在一些實施例中，式I化合物包含一或多個L-人工胺基酸或D-人工胺基酸，其不為二十種天然存在之胺基酸中之一者。在一些實施例中，此類人工胺基酸之側鏈可經由多種反應共價結合，該等反應包括生物正交反應，諸如由以下所描述：Rostovtsev, V.V., Green, L.G., Fokin, V.V. & Sharpless, K.B. 逐步胡伊斯根環加成過程：銅(I)催化之疊氮化合物及末端炔烴的區域選擇性「接合」（A stepwise huisgen cycloaddition process: copper(I)-catalyzed regioselective "ligation" of azides and terminal alkynes.）《德國應用化學國際版》41, 2596-2599 (2002)，或Liang, Y., Mackey, J.L., Lopez, S.A., Liu, F. & Houk, K.N. 生物正交環加成中相互正交性之控制與設計（Control and design of mutual orthogonality in bioorthogonal cycloadditions.）《美國化學會志（ J. Am. Chem. Soc.）》134, 17904-17907 (2012)。在一些實施例中，Z1a含有一或多個L-人工胺基酸或D-人工胺基酸，其不為二十種天然存在之胺基酸中之一者。在一些實施例中，Z1a中之兩個胺基酸之側鏈經由三唑鍵共價結合在一起。
胰島素激素為血糖（糖）含量之重要調節因子。在正常個體中，存在胰島素，且當藉由胰臟釋放時，其例如藉由與胰島素受體結合且活化胰島素受體，觸發肝臟、脂肪及骨胳肌肉細胞吸收葡萄糖而降低血糖含量。糖尿病（Diabetes mellitus；DM）（通常稱為糖尿病）為一組以長時間保持高血糖含量為特徵之代謝疾病。
如本文所用，「胰島素」涵蓋野生型及改變形式之胰島素，其能夠結合且活化胰島素受體，或在活體內投與時能夠引起血糖的可量測降低；且涵蓋野生型及改變形式之人類胰島素，其能夠結合且活化人類胰島素受體，或當對人活體內投與時能夠引起血糖的可量測降低。
在一些實施例中，胰島素包括來自任何物種之呈純化、合成或重組形式的胰島素且包括人類胰島素、豬胰島素、牛胰島素、綿羊胰島素及兔胰島素。在一些實施例中，胰島素具有兩條鏈：B鏈及A鏈。在一些實施例中，該等鏈經由肽，諸如如此項技術中已知之c-肽或c-肽之縮短形式連接在一起，且在其他實施例中，胰島素可作為可進一步加工成成熟胰島素之胰島素原（胰島素前驅物）提供。多種改變形式之胰島素為此項技術中已知的且可諸如藉由添加化學部分（諸如PEG基團或脂肪醯基鏈）進行化學改變。改變之胰島素可經突變，包括胺基酸之添加、缺失或取代。在一些實施例中，術語「desB30」係指缺乏B30胺基酸殘基之胰島素。
如本文中所使用，術語「胰島素類似物」意謂具有胰島素受體促效劑活性的經修飾之人類胰島素，其中相對於人類胰島素，該胰島素之一至10個胺基酸殘基已經修飾（例如，取代、缺失、添加（亦即，延長）、插入及其任何組合）。在此情形下，一或多個胺基酸之插入或添加視為單一修飾。舉例而言，胰島素類似物可具有一至9個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至8個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至7個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至6個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至5個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至4個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至3個經修飾之胺基酸殘基。作為又一實例，胰島素類似物可具有一至2個經修飾之胺基酸殘基。在一些實施例中，胰島素類似物可具有2、3、4、5、6、7、8或9個經修飾之胺基酸殘基。
胰島素分子中之修飾指示取代天然胺基酸殘基之胺基酸殘基的鏈（A或B）、位置及單或三字母代碼。在本文中，如「A1」、「A2」及「A3」等之術語分別表示胰島素A鏈中之位置1、2及3等處的胺基酸(自N端計數)。類似地，如B1、B2及B3等之術語分別表示胰島素B鏈中之位置1、2及3等處的胺基酸(自N端計數)。使用胺基酸之單字母代碼，如A21A、A21G及A21Q之術語表示A21位置之胺基酸分別為A、G及Q。使用胺基酸之三字母代碼，相應表述分別為A21Ala、A21Gly及A21Gln。
因此，舉例而言，具有4個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN （SEQ ID NO: 25737）；且其中B鏈包含序列GKGSHKFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25738），其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有GKGSHK（SEQ ID NO: 25726）（亦即，6個胺基酸已添加/附接至N端），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，且B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，Thr）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25737及25738））。
作為又一實例，具有7個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCGK（SEQ ID NO: 25739）；且其中B鏈包含序列KGSHKFVDQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25740），其中A鏈中之位置21之胺基酸（亦即，N）經G取代，且A鏈在C端延長有K（亦即，1個胺基酸已添加/附接至C端），且B鏈在N端已延長有KGSHK（SEQ ID NO: 25727）（亦即，5個胺基酸已添加/附接至N端），且其中B鏈中之位置3之胺基酸（亦即，N）經D取代，且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，且B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，T）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25739及25740））。
作為又一實例，具有2個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 25731）；且其中B鏈包含序列KFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPKT（SEQ ID NO: 25741），其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有K（亦即，1個胺基酸已添加/附接至N端），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25731及25741））。 。
作為又一實例，具有6個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCGK（SEQ ID NO: 25732）；且其中B鏈包含序列KGSHKFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25742），其中A鏈中之位置21之胺基酸（亦即，N）經G取代，且A鏈在C端延長有K（亦即，1個胺基酸已添加/附接至C端），且B鏈在N端已延長有KGSHK（SEQ ID NO: 25727）（亦即，5個胺基酸已添加/附接至N端），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，且B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，T）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25732及25742））。
作為又一實例，具有4個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 25733）；且其中B鏈包含序列KGSHFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25743），其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有KGSH（SEQ ID NO: 25728）（亦即，4個胺基酸添加/附接至N端），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，且B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，Thr）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25733及25743））。
作為又一實例，具有5個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 25734）；且其中B鏈包含序列KGSHQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25744）；其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有KGSH（SEQ ID NO: 25728）（亦即，4個胺基酸已添加/附接至N端）且缺失前3個殘基（FVN），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，且B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，Thr）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25734及25744））。
作為又一實例，具有5個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 25735）；且其中B鏈包含序列KGSHKQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR（SEQ ID NO: 25745）；其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有KGSHK（SEQ ID NO: 25727）（亦即，5個胺基酸已添加/附接至N端）且缺失前3個殘基（FVN），且其中B鏈中之位置21之胺基酸（亦即，E）經K取代，B鏈中之位置29之胺基酸（亦即，K）經R取代，且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，Thr）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25735及25745））。
作為又一實例，具有2個修飾之胰島素類似物包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含序列GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 25736）；且其中B鏈包含序列GKGGGGSGGGGSGGGGSFVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPK（SEQ ID NO: 25746），其中A鏈具有人類胰島素之A鏈之野生型序列（例如，無突變、缺失、添加）且B鏈在N端已延長有GKGGGGSGGGGSGGGGS（SEQ ID NO: 25729）（亦即，17個胺基酸已添加/附接至N端），且B鏈中之位置30之胺基酸（亦即，Thr）缺失（如下文所示（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25736及25746））。
在一些實施例中，胰島素類似物包括與野生型人類胰島素相比在化學上改變之胰島素，諸如但不限於藉由添加化學部分，諸如PEG基團或脂肪醯基鏈。在一些實施例中，在本文可互換使用的經改變之胰島素/胰島素類似物可經突變，包括胺基酸之添加、缺失或取代。胰島素之不同原聚體可由此等變化產生且併入一些實施例中。在一些實施例中，活性形式之胰島素具有少於11個此類修飾（例如，1-4、1-3、1-9、1-8、1-7、1-6、2-6、2-5、2-4、1-5、1-2、2-9、2-8、2-7、2-3、3-9、3-8、3-7、3-6、3-5、3-4、4-9、4-8、4-7、4-6、4-5、5-9、5-8、5-7、5-6、6-9、6-8、6-7、7-9、7-8、8-9、9、8、7、6、5、4、3、2或1）。如本文中所使用，人類胰島素之野生型序列（A鏈及B鏈）具有胺基酸序列為GIVEQCCTSICSLYQLENYCN（SEQ ID NO: 1）的A鏈，及胺基酸序列為FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT（SEQ ID NO:2）的B鏈。在一些實施例中，胰島素類似物與野生型人類胰島素具有至少70%序列同源性。在一些實施例中，胰島素類似物與野生型人類胰島素具有至少80%序列同源性。在一些實施例中，胰島素類似物與野生型人類胰島素具有至少90%序列同源性。在一些實施例中，胰島素類似物與野生型人類胰島素具有至少95%、96%、97%或95%序列同源性。在一些實施例中，胰島素類似物與野生型人類胰島素具有至少99%序列同源性。
人類胰島素與兔、豬、牛及綿羊胰島素在胺基酸A8、A9、A10及B30中不同，其順序如下：人類之Thr、Ser、Ile、Thr；兔之Thr、Ser、Ile、Ser；豬之Thr、Ser、Ile、Ala；綿羊之Ala、Gly、Val、Ala；及牛之Ala、Ser、Val、Ala。在一些實施例中，經修飾之胰島素可在B鏈之位置B1、B2、B28或B29或位置B28及B29處突變。在一些實施例中，經修飾之胰島素可在A鏈之A1、A2、A21或其他位置處突變。舉例而言，賴脯胰島素為一種速效修飾胰島素，其中B鏈之C端的離胺酸及脯胺酸殘基已經逆轉。門冬胰島素為一種速效修飾胰島素，其中脯胺酸在位置B28處經天冬胺酸取代。在本揭示案之一些實施例中預期在B28及B29處突變之胰島素可進一步包括額外突變。舉例而言，谷賴胰島素為一種速效修飾胰島素，其中天冬胺酸在位置B3處經離胺酸殘基取代，且離胺酸在位置B29處經麩胺酸殘基取代。在一些實施例中，更長效及更高穩定性的胰島素類似物如式I所描述經共價修飾，且可含有突變，諸如在A14處酪胺酸經麩胺酸置換，在B16處酪胺酸經組胺酸置換，及在B25處苯丙胺酸經組胺酸置換。
在一些實施例中，本文中胰島素之等電點可使用任何適合方法，例如藉由添加或取代適合胺基酸，來相對於野生型人類胰島素偏移。在一些實施例中，經修飾之胰島素之等電點可藉由葡萄糖（例如藉由與葡萄糖之相互作用）調節。舉例而言，甘精胰島素為一種基礎胰島素，其中已將兩個精胺酸殘基添加至B-肽之C端，且A21已經甘胺酸置換。在一些實施例中，胰島素可不具有殘基B1、B2、B3、B26、B27、B28、B29及B30中之一或多者（例如，胰島素可為所列殘基中之一或多者處的缺失突變體）。在一些實施例中，胰島素分子在A鏈或B鏈之N端或C端上含有多達五個額外胺基酸殘基。在一些實施例中，一或多個胺基酸殘基位於位置A1、A21、B1、B29、B30及/或B31處或缺失。在一些實施例中，本揭示案之胰島素分子經突變以使得一或多個胺基酸經其酸性形式置換（取代）。在一些實施例中，天冬醯胺經天冬胺酸或麩胺酸置換。在一些實施例中，麩醯胺酸經天冬胺酸或麩胺酸置換。在一些實施例中，A21可為天冬胺酸，B3可為天冬胺酸，或兩個位置均可含有天冬胺酸。熟習此項技術者應認識到，可對保持生物活性之胰島素進行任何先前報導或廣泛接受之突變或修飾，且此類胰島素類似物可用於本揭示案之實施例中。在一些實施例中，胰島素可在任何位置連接至脂肪酸，或在任何胺基處經脂肪酸醯化，包括離胺酸側鏈之彼等及胰島素N端上之α-胺基，且脂肪酸可包括C8、C9、C10、C11、C12、C14、C15、C16、C17或C18鏈。在一些實施例中，脂肪酸鏈長度為8至20個碳。在一些實施例中，胰島素為地特胰島素，其中肉豆蔻酸在B29處與離胺酸共價結合，且B30缺失或不存在。在一些實施例中，胰島素分子之位置B28為離胺酸且此離胺酸之ε(ε)-胺基與脂肪酸結合。
在一些實施例中，經修飾之胰島素之A或B鏈的N端或C端使用肽接合酶接合。在一些實施例中，使用蛋白質接合酶將多肽添加至胰島素A鏈及/或B鏈之C端或胰島素A鏈及/或B鏈之N端，且在其一些實施例中，接合酶係選自分選酶（sortase）、蝶豆黏酶（butelase）、Trypsiligase、枯草桿菌蛋白酶（Subtilisin）、枯草桿菌蛋白酶突變體（Peptiligase）或與此等接合酶具有至少75%同源性之酶。在一些實施例中，接合經由表現蛋白接合達成，如在以下中所描述：Muir TW, Sondhi D, Cole PA.「表現之蛋白質接合：蛋白質工程改造之通用方法（Expressed protein ligation: a general method for protein engineering.）」 《美國國家科學院院刊（ Proc Natl Acad Sci U S A.）》1998; 95(12):6705-6710。在一些實施例中，使用施陶丁格接合、利用施陶丁格反應將多肽連接至經修飾之胰島素，且例如在以下中所描述：Nilsson, B. L.；Kiessling, L. L.；Raines, R. T. (2000).「施陶丁格接合：來自硫酯及疊氮化物之肽（Staudinger ligation: A peptide from a thioester and azide.）」《有機化學通訊（ Org. Lett.）》2 (13): 1939-1941。在一些實施例中，使用Ser/Thr接合將多肽結合至經修飾之胰島素，例如在以下中所描述：Zhang Y, Xu C, Kam HY, Lee CL, Li X. 2013, 「絲胺酸/蘇胺酸接合之蛋白質化學合成（Protein chemical synthesis by serine/threonine ligation.）」《美國國家科學院院刊》17:6657-6662。在一些實施例中，B鏈自身具有小於32個胺基酸或34個胺基酸，且在一些實施例中，胰島素具有4個二硫鍵而非3個二硫鍵。胰島素之A及B鏈中存在二硫鍵。舉例而言，二硫鍵存在於SEQ ID NO: 1之位置6處之半胱胺酸與SEQ ID NO: 1之位置11處之半胱胺酸之間，二硫鍵存在於SEQ ID NO: 1之位置7處之半胱胺酸與SEQ ID NO: 2之位置7處之半胱胺酸之間，且二硫鍵存在於SEQ ID NO: 1之位置20處之半胱胺酸與SEQ ID NO: 2之位置19處之半胱胺酸之間。
在一些實施例中，本揭示案之經修飾之胰島素包含一或多個突變及/或化學修飾，包括但不限於以下胰島素分子之一：N εB29-辛醯基-Arg B0Gly A21Asp B3Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Arg A0Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Gly A21Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Gly A21Gln B3Lys B28Pro B30Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Arg A0Gly A21Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Arg A0Gly A21Gln B3Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Arg A0Gly A21Asp B3Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Arg A0Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Gly A21Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Gly A21Gln B3Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Arg A0Gly A21Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB29-軟脂醯基-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-HI、N εB28-軟脂醯基-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-肉豆蔻醯基-Lys B28Pro B29-HI、N εB29-軟脂醯基-去(B30)-HI、N εB30-肉豆蔻醯基-Thr B29Lys B30-HI、N εB30-軟脂醯基-Thr B29Lys B30-HI、N εB29-(N-軟脂醯基-γ-麩胺醯基)-去(B30)-HI、N εB29-(N-石膽醯基-γ-麩胺醯基)-des(B30)-HI、N εB29-(ω-羧基十七醯基)-去(B30)-HI、N εB29-(ω-羧基十七醯基)-HI、N εB29-辛醯基-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Gly A21Arg B31Arg B31-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Gly A21Gln B3Arg B31Arg B32-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Arg A0Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-Arg A0Gly A21Gln B3Arg B31Arg B32-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Arg A0Gly A21Asp B3Arg B31Arg B32-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Arg B31Arg B32-HI、N εB29-肉豆蔻醯基-Arg A0Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Gly A21Gln B3Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Arg A0Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-Arg A0Gly A21Gln B3Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Arg A0Gly A21Gln B3Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Arg A0Gly A21Asp B3Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI、N εB28-辛醯基-Arg A0Lys B28Pro B29Arg B31Arg B32-HI。N εB29-戊醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N αB1-己醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N αA1-庚醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-辛醯基-N αB1-辛醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-丙醯基-N αA1-丙醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N αA1-乙醯基-N αB1-乙醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-甲醯基-N αA1-甲醯基-N αB1-甲醯基-Gly A21Arg B31Arg B32-HI、N εB29-甲醯基-去(B26)-HI、N αB1-乙醯基-Asp B28-HI、N εB29-丙醯基-N αA1-丙醯基-N αB1-丙醯基-Asp B1Asp B3Asp B21-HI、N εB29-戊醯基-Gly A21-HI、N αB1-己醯基-Gly A21-HI、N αA1-庚醯基-Gly A21-HI、N εB29-辛醯基-N αB1-辛醯基-Gly A21-HI、N εB29-丙醯基-N αA1-丙醯基-Gly A21-HI、N αA1-乙醯基-N αB1-乙醯基-Gly A21-HI、N εB29-甲醯基-N αA1-甲醯基-N αB1-甲醯基-Gly A21-HI、N εB29-丁醯基-去(B30)-HI、N αB31-丁醯基-去(B30)-HI、N αA1-丁醯基-去(B30)-HI、N εB29-丁醯基-N αB31-丁醯基-去(B30)-HI、N εB29-丁醯基-N αA1-丁醯基-去(B30)-HI、N αA1-丁醯基-N αB31-丁醯基-去(B30)-HI、N εB29-丁醯基-N αA1-丁醯基-N αB31-丁醯基-去(B30)-HI、Lys B28Pro B29-HI（賴脯胰島素）、Asp B28-HI（門冬胰島素）、Lys B3Glu B29-HI（賴麩胰島素）、Arg B31Arg B32-HI（甘精胰島素）、N εB29-肉豆蔻醯基-去(B30)-HI（地特胰島素）、Ala B26-HI、Asp B1-HI、Arg A0-HI、Asp B1Glu B13-HI、Gly A21-HI、Gly A21Arg B31Arg B32-HI、Arg A0Arg B31Arg B32-HI、Arg A0Gly A21Arg B31Arg B32-HI、去(B30)-HI、去(B27)-HI、去(B28-B30)-HI、去(B1)-HI、去(B1-B3)-HIN εB29-十三醯基-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-去(B30)-HI、N εB29-十三醯基-Gly A21-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-Gly A21-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-Gly A21-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-Gly A21-去(B30)-HI、N εB29-十三醯基-Gly A21Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-Gly A21Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-Gly A21-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-Gly A21-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十三醯基-Ala A21-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-Ala A21-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-Ala A21-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-Ala A21-去(B30)-HI、N εB29-十三醯基-Ala A21-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-Ala A21Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-Ala A21Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-Ala A21Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十三醯基-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十四醯基-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-癸醯基-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-十二醯基-Gln B3-去(B30)-HI、N εB29-Z1-Gly A21-HI、N εB29-Z2-Gly A21-HI、N εB29-Z4-Gly A21-HI、N εB29-Z3-Gly A21-HI、N εB29-Z1-Ala A21-HI、N εB29-Z2-Ala A21-HI、N εB29-Z4-Ala A21-HI、N εB29-Z3-Ala A21-HI,N εB29-Z1-Gly A21Gln B3-HI、N εB29-Z2-Gly A21Gln B3-HI、N εB29-Z4-Gly A21Gln B3-HI、N εB29-Z3-Gly A21Gln B3-HI、N εB29-Z1-Ala A21Gln B3-HI、N εB29-Z2-Ala A21Gln B3-HI、N εB29-Z4-Ala A21Gln B3-HI、N εB29-Z3-Ala A21Gln B3-HI、N εB29-Z1-Gln B3-HI、N εB29-Z2-Gln B3-HI、N εB29-Z4-Gln B3-HI、N εB29-Z3-Gln B3-HI、N εB29-Z1-Glu B30-HI、N εB29-Z2-Glu B30-HI、N εB29-Z4-Glu B30-HI、N εB29-Z3-Glu B30-HI、N εB29-Z1-Gly A21Glu B30-HI、N εB29-Z2-Gly A21Glu B30-HI、N εB29-Z4-Gly A21Glu B30-HI、N εB29-Z3-Gly A21Glu B30-HI、N εB29-Z1-Gly A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z2-Gly A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z4-Gly A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z3-Gly A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z1-Ala A21Glu B30-HI、N εB29-Z2-Ala A21Glu B30-HI、N εB29-Z4-Ala A21Gln B30-HI、N εB29-Z3-Ala A21Glu B30-HI、N εB29-Z1-Ala A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z2-Ala A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z4-Ala A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z3-Ala A21Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z1-Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z2-Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z4-Gln B3Glu B30-HI、N εB29-Z3-Gln B3Glu B30-HI，且其中Z1為十三醯基，Z2為十四醯基，Z3為十二醯基，Z4為癸醯基且HI為人類胰島素。
在一些實施例中，胰島素包括一或多種以下突變及/或化學修飾：N εB28-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N αB1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N αA1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-XXXXX-N αB1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-XXXXX-N αA1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N αA1-XXXXX-N αB1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-XXXXX-N αA1-XXXXX-N αB1-XXXXX-Lys B28Pro B29-HI、N εB29-XXXXX-HI、N αB1-XXXXX-HI、N αA1-XXXXX-HI、N εB29-XXXXX-N αB1-XXXXX-HI、N εB29-XXXXX-N αA1-XXXXX-HI、N αA1-XXXXX-N αB1-XXXXX-HI、N εB29-XXXXX-N αA1-XXXXX-N αB1-XXXXX-HI、N εB29-YYYYY-HI、N αB1-YYYYY-HI、N αA1-YYYYY-HI、N εB29-YYYYY-N αB1-YYYYY-HI、N εB29-YYYYY-N αA1-YYYYY-HI、N αA1-YYYYY-N αB1-YYYYY-HI、N εB29-YYYYY-N αA1-YYYYY-N αB1-YYYYY-HI、N εB28-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N εB21-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N αA1-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-YYYYY-N αB1-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-YYYYY-N αA1-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N αA1-YYYYY-N αB1-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI、N εB28-YYYYY-N αA1-YYYYY-N αB1-YYYYY-Lys B28Pro B29-HI，且其中YYYYY為乙醯基或甲醯基中之一者，且其中XXXXX為以下中之一者：丙醯基、丁醯基、戊醯基、己醯基、庚醯基、辛醯基、壬醯基或癸醯基且HI為人類胰島素。
在一些實施例中，胰島素可經由天然存在於胰島素結構內或在結合之前添加之反應性部分結合，包括例如羧基或反應性酯、胺、羥基、醛、硫氫基、順丁烯二醯亞胺基、炔基、疊氮基等部分。胰島素天然地包括可與NHS-酯、異氰酸酯或異硫氰酸酯共價結合之反應性α端胺及ε-胺離胺酸基團。在一些實施例中，可採用經修飾之胰島素，其中適合胺基酸（例如離胺酸或非天然胺基酸）已添加或取代至胺基酸序列中以提供除本文所描述之實施例之經修飾之胺基酸之外的替代結合點。在一些實施例中，結合方法可藉由在結合之前選擇性地封閉某些反應性部分來控制。在一些實施例中，胰島素可包括修飾之任何組合，且本揭示案亦涵蓋包含前述修飾中之任一者的非人類胰島素（例如，豬胰島素、牛胰島素、兔胰島素、綿羊胰島素等）之經修飾形式。應理解，一些實施例包括此等及其他先前所描述之經修飾胰島素，諸如以下美國專利號中描述的彼等：5,474,978；5,461,031；4,421,685；7,387,996；6,869,930；6,174,856；6,011,007；5,866,538；5,750,4976；906,028；6,551,992；6,465,426；6,444,641；6,335,316；6,268,335；6,051,551；6,034,054；5,952,297；5,922,675；5,747,642；5,693,609；5,650,486；5,547,929；5,504,188；US 2015/0353619，包括本文所描述或引用之非天然胺基酸，且包括對本文所描述之非人類胰島素的此類修飾。亦應理解，在一些實施例中，胰島素可與聚乙二醇聚合物（諸如不超過60,000 Mn之聚乙二醇聚合物）共價結合，或經由永久或可逆鍵與白蛋白共價結合。
在一些實施例中，本揭示案之化合物（諸如式I）結合至螯合劑，且在一些實施例中，螯合劑可用於捕獲放射性有效負載，諸如鎵68、銅64、鎦177或錒225。在一些實施例中，螯合劑係基於DOTA、NOTA、TETA或4臂DOTA，且在一些實施例中，螯合劑可使用PEG連接子經由與螯合劑及肽之醯胺鍵連接至肽。
在一些實施例中，經修飾之胰島素的活性、生物可用性、溶解度、等電點、電荷及/或疏水性可經由化學修飾及/或由於諸如糖之小分子與化合物（諸如本文所揭示之化合物）的相互作用來控制，本文所描述之化合物與胰島素共價連接或混合。
在一些實施例中，一或多種元素、官能基或原子可自所描繪之結構特定地省略或排除（例如，末端官能基可經氫原子置換，或連接基團可經鍵置換），例如在式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226中，且應理解，此省略或排除之要素使得此等基團（結構）不同且不等效。例如，若式結構之替代型式（變化形式）在B1或B2之R1中不具有硝基，則該變化與包括硝基之結構不等效（例如，在結構上及化學上不等效），至少因為硝基改變在生理條件下B1及B2之pKa且因此改變Z1c對葡萄糖之整體親和力。
旋轉受限之繫鏈硼結合物。 在一些實施例中，芳族含硼化合物及/或芳族含硼基團為旋轉受限之繫鏈硼結合物。在一些實施例中，本揭示案中存在之旋轉受限之繫鏈硼結合物含有藉由不利的立體相互作用（例如取代基之間扭式與反式相互作用）、由於鍵雜交引起之阻礙旋轉（例如，順式-醯胺旋轉與反式-醯胺旋轉），或經由剛性共價鍵（例如，烯烴部分之( E)與( Z)構形）而阻礙旋轉的支架。舉例而言，式FF116含有與胺基成對（例如，連接至同一原子）的烷基官能團，該等胺基與硼酸官能化部分共價結合。烷基官能基可能會限制可接近的二面角及圍繞C-C或C-X鍵的旋轉自由度（通常在胺基酸中稱為χ（chi）二面角）。舉例而言，絲胺酸殘基上之羥基側鏈可接近60º、180º或240º(-60º)的二面角，且幾乎均勻分佈，而蘇胺酸之羥基側鏈只能採用180º或240º (-60º）的二面角。與蘇胺酸上之羥基成對的甲基之存在可提供空間體積，當其他大型取代基相對於甲基呈間扭式構形時會產生不利的相互作用。式FF116含有成對的烷基取代基，該等成對的烷基取代基可限制硼結合胺採用的可接近二面角，影響採用的二面角且使硼酸官能化基團更緊密地結合在一起，且允許結合物與目標分子（諸如蛋白質或糖）之結合增加。
在一些實施例中，胰島素促效劑之活性（葡萄糖反應性）受感測器之三維結構控制。舉例而言，FF116A、FF115A、FF225A為組成型異構體（含有相同的分子式但不同的原子間鍵）。在一些實施例中，當與實例23、實例82及實例27中之相同連接子（FL3）及相同胰島素主鏈（亦即，相同A鏈（亦即，序列:1）及相同B鏈（亦即，序列:24060））一起使用時，此等化合物對葡萄糖差異展現不同反應性，其中相比於實例82及實例27，實例23展示葡萄糖之最大倍數變化（反應性）。在一些實施例中，FF支架（例如，FF116A、FF225A）上存在甲基具有比非甲基FF支架（例如，FF115A）更大的效能（例如，降低EC 50）。實例23回應於3 mM至20 mM葡萄糖之葡萄糖變化具有約7至8倍之倍數變化，而在相同的葡萄糖變化範圍內，實例27具有約6之倍數變化且實例82具有約4之倍數變化。因此，支架FF116A（具有β甲基）及FF225A（具有α甲基）上存在甲基提供相比於FF115A（FF支架上無甲基）改良之葡萄糖反應性，且此外由支架FF116A提供之葡萄糖反應性比FF225A更佳。作為另一對比，如實例156中所示，具有胰島素主鏈（亦即，A鏈序列：24051及B鏈序列：24061）及支架FF116A及連接子FL3的化合物具有二硼酸鹽支架3-(( 2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸，其提供回應於3 mM至20 mM之葡萄糖變化的4.0之倍數變化。而若在相同的實例156中，二硼酸鹽感測器變為( S)-3-(2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸，則回應於3 mM至20 mM之葡萄糖變化所觀測到的倍數變化為3.6。此表明，二硼酸鹽感測器3-(( 2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸（FF支架上具有甲基）對含有感測器( S)-3-(2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丙醯胺基)丙酸（FF支架上無甲基）之胰島素提供優良的葡萄糖對胰島素之反應性。
在一些實施例中，異構結構之立體化學（例如，化合物之立體化學（例如在Z1c部分內））可選擇性地增加結合物（例如Z1c部分）對特定目標二醇（諸如葡萄糖）之親和力。舉例而言，在一些實施例中，可選擇Z1c之一或多種立體異構物（例如，順式或反式、( R)或( S)及( E)或( Z)）來增加或降低Z1c（及分子架構或結合物整體）對葡萄糖之親和力。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之順式形式（例如，Z1c包括具有順式立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之反式形式，例如當此等式包括兩個由鍵連接之立構中心時（例如，Z1c包括具有反式立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF114A、FF115、FF115A、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之 R形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括至少一個立構中心時（例如，Z1c包括具有 R立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之 S形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括至少一個立構中心時（例如，Z1c包括具有 S立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226之 S,S形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括兩個由鍵連接之立構中心時（例如，Z1c包括具有 S,S立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之 S,R形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括兩個由鍵連接之立構中心時（例如，Z1c包括具有 S,R立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之 R,R形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括兩個由鍵連接之立構中心時（例如，Z1c包括具有 R,R立體化學之結構）。在一些實施例中，適當時使用式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226之 R,S形式，例如當式FF12、FF114、FF115、FF116、FF117、FF193A、FF203、FF225及FF226包括兩個由鍵連接之立構中心時（例如，Z1c包括具有 R,S立體化學之結構）。在一些實施例中，化合物包括本文揭示之化合物之一或多種互變異構物。在一些實施例中，化合物包括本文揭示之化合物之一或多種立體異構物或立體異構物之混合物。
在一些實施例中，化合物共價結合至升糖素、GLP-1、GLP-2或此等中任一者之變化形式（例如，具有一或多個胺基酸之缺失、插入及/或置換的任何變化形式）。在一些實施例中，可對升糖素進行本文所論述的對胰島素進行之任何適合的化學修飾。在一些實施例中，結合物與第二或原料藥或一或多種選自以下之化合物混合：胺基乙基葡萄糖、胺基乙基雙甘露糖、胺基乙基三甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿洛糖、D-甘露糖、D-古洛糖、D-艾杜糖、D-塔羅糖、N-疊氮甘露糖胺（ManNAz）或N-疊氮半乳糖胺（GalNAz）或N-疊氮葡萄糖胺（GlcNAz）、2'-氟核糖、2'-脫氧核糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、甘露糖、此等之衍生物（例如，葡萄糖胺、甘露糖胺、甲基葡萄糖、甲基甘露糖、乙基葡萄糖、乙基甘露糖等）、山梨糖醇、肌醇、半乳糖醇、甜醇、木糖醇、阿拉伯糖醇及/或此等之更高級組合（諸如直鏈及/或分支鏈雙甘露糖、直鏈及/或分支鏈三甘露糖）、含有順式二醇、兒茶酚、tris之分子及DOPA分子，諸如L-DOPA或L-3,4-二羥基苯丙胺酸。
此外，熟習此項技術者應認識到，在一些實施例中，可在Z1a中使用（包括）適合之蛋白型人工胺基酸中之一或多者。舉例而言，在一些實施例中，以下人工胺基酸中之一或多者可基於以下各者中所述且經由以下各者提及之方法使用，且胺基酸之清單提供於：Liu, C. C.；Schultz, P. G. (2010).「在遺傳密碼中添加新化學物質（Adding new chemistries to the genetic code.）」《生物化學年鑒（ Annual Review of Biochemistry）》79: 413-44。熟習此項技術者應認識到，在一些實施例中，人工胺基酸可藉由肽合成併入Z1a中，其隨後與藥物或胰島素共價結合，且此等胺基酸包括本文中提及之胺基酸以及先前報導之非蛋白型胺基酸。在一些實施例中，人工胺基酸存在（例如，可包括）於胰島素中，且在其一些實施例中，可使用合適的方法及途徑經由重組蛋白表現來併入蛋白型人工胺基酸，包括描述於美國專利及專利申請案專利中之彼等，包括：US 2008/0044854、US 8518666、US 8980581、US 2008/0044854、US 20140045261、US 2004/0053390、US 7229634、US 8236344、US 2005/0196427、US 2010/0247433、US 7198915、US 7723070、US 2002/0042097、US 2004/0058415、US 2008/0026422、US 2008/0160609、US 2010/0184193、US 2012/0077228、US 2014/025599、US 7198915、US 7632492、US 7723070，且其他蛋白型人工胺基酸可使用以下描述之方法及途徑以重組方式引入：US 7736872、US 7816320、US 7829310、US 7829659、US 7883866、US 8097702、US 8946148。
在一些實施例中，環狀胺基酸諸如3-羥基脯胺酸、4-羥基脯胺酸、氮丙啶-2-羧酸、氮雜環丁烷-2-羧酸、哌啶-2-羧酸、3-羧基- 啉、3-羧基-硫 啉、4-氧雜脯胺酸、焦麩胺酸、l,3- 唑啶-4-羧酸、l,3-噻唑啶-4-甲酸、3-硫脯胺酸、4-硫脯胺酸、3-硒脯胺酸、4-硒脯胺酸、4-酮脯胺酸、3,4-脫氫脯胺酸、4-胺基脯胺酸、4-氟脯胺酸、4,4-二氟脯胺酸、4-氯脯胺酸、4,4-二氯脯胺酸、4-溴脯胺酸、4,4-二溴脯胺酸、4-甲基脯胺酸、4-乙基脯胺酸、4-環己基-脯胺酸、3-苯基脯胺酸、4-苯基脯胺酸、3,4-苯基脯胺酸、4-疊氮脯胺酸、4-羧基脯胺酸、a-甲基脯胺酸、a-乙基脯胺酸、a-丙基脯胺酸、a-烯丙基脯胺酸、a-苯甲基脯胺酸、a-(4-氟苯甲基)-脯胺酸、a-(2-氯苯甲基)-脯胺酸、a-(3-氯苯甲基)-脯胺酸、a-(2-溴苯甲基)-脯胺酸、a-(4-溴苯甲基)-脯胺酸、a-(4-甲基苯甲基)-脯胺酸、a-(二苯基甲基)-脯胺酸、a-(萘基甲基)-脯胺酸、D-脯胺酸、或S-高脯胺酸、(2S,4S)-4-氟-L-脯胺酸、(2S,4R)-4-氟-L-脯胺酸、(2S)-3,4-脫氫-L-脯胺酸、(2S,4S)-4-羥基-L-脯胺酸、(2S,4R)-4-羥基-L-脯胺酸、(2S,4S)-4-疊氮基-L-脯胺酸、(2S)-4,4-二氟-L-脯胺酸、(2S)-氮雜環丁烷-2-羧酸、(2S)-哌啶-2-羧酸或(4R)-1,3-噻唑啶-4-羧酸可用於與胰島素結合之分子架構中。
應理解，在一些實施例中，使用以下方法達成胺基酸之特定定向，例如Albericio, F. (2000).《固相合成：實用指南（第1版）（ Solid-Phase Synthesis: A Practical Guide (1 ed.)）》.博卡拉頓市：CRC出版社，第848頁。在一些實施例中，本揭示案之化合物（諸如式I或式II之化合物）可結合至二醇、兒茶酚、己糖、葡萄糖、木糖、岩藻糖、半乳糖胺、葡糖胺、甘露糖胺、半乳糖、甘露糖、果糖、半乳醣醛酸、葡醣醛酸、艾杜醣醛酸、甘露醣醛酸、乙醯半乳糖胺、乙醯葡糖胺、乙醯甘露糖胺、乙醯胞壁酸、2-酮-3-脫氧-甘油-半乳糖-壬酸、乙醯神經胺酸、羥乙醯神經胺酸、神經傳遞素、多巴胺或二糖或醣類或二醇之聚合物。
在一些實施例中，修飾或中間體可包括使用N-甲基亞胺基二乙酸（MIDA）基團來製備MIDA結合之硼酸酯或MIDA硼酸酯；在製備硼酸酯之過程中可使用此類修飾以達到最終使用結構（例如，在用於製備本文所描述之結合物的方法的實施例中）。在一些實施例中，硼酸頻哪醇酯用於最終結構，其中頻哪醇基團可由本領域中熟悉此項技術者使用標準技術容易地移除。MIDA保護之硼酸酯易於處理，在空氣中穩定，與層析法兼容，且在標準無水交叉偶合條件下不反應，且在室溫下在溫和的鹼性水溶液（諸如1 M NaOH或甚至NaHCO 3）下容易去保護，或如以下所描述：Lee, S. J.等人, (2008). 《美國化學會雜誌》130:466.
野生型胰島素與胰島素受體結合之生物學機制先前報導於Menting, J.G. 等人, (2013)《 自然（ Nature）》493, 241-245；及Menting, J.G. 等人, (2014).「胰島素中之保護性鉸鏈打開以實現其受體接合（Protective hinge in insulin opens to enable its receptor engagement.）」《美國國家科學院院刊》111, E3395-3404中。此類胰島素之活性可使用任何適合之技術，例如藉由使用與TyrA14- 125I人類胰島素之活體外胰島素受體作為示蹤劑且利用抗體結合珠粒與胰島素受體單株抗體來量測。在一些實施例中，動物模型可用於使用熟習此項技術者已知的方法活體內評定葡萄糖刺激期間的胰島素活性。在一些實施例中，本文所揭示之化合物與所關注之重組蛋白（諸如胰島素）一起部分地或完全地表現。用於在大腸桿菌中表現胰島素之方法為已知的且可容易由熟習此項技術者藉由使用在以下中所概述之程序進行，例如：Jonasson (1996).《歐洲生物化學雜誌（ Eur. J. Biochem.）》236:656-661；Cowley (1997).《歐洲生化學會聯合會快報（ FEBS Lett.）》402:124- 130；Cho (2001).《生物技術與生物處理工程（ Biotechnol. Bioprocess Eng.）》6: 144- 149；Tikhonov (2001).《蛋白質表現及純化（ Protein Exp. Pur.）》21: 176-182；Malik (2007).《蛋白質表現及純化》55: 100-111；及Min (2011).《生物技術雜誌（ J. Biotech.）》151:350-356。在最常見方法中，蛋白質表現為具有分裂蛋白質或親和標籤之單鏈胰島素原構築體。當Z1a存在時，包括Z1a之化合物（諸如式I化合物）可表示為胰島素原之一部分，則經化學修飾以經由醯胺鍵與所關注之結構結合。此方法藉由減少處理步驟之數目提供良好的產率且降低實驗複雜性，且允許在天然樣胰島素中進行再摺疊，參見例如Jonasson, 《 歐洲生物化學雜誌》236:656-661 (1996)；Cho, 《 生物技術與生物處理工程》6: 144- 149 (2001)；Tikhonov, 《 蛋白質表現及純化》21 : 176-182 (2001)；Min, 《 生物技術雜誌》151 :350-356 (201 1))。當在大腸桿菌中表現時，胰島素原通常存在於包涵體中且容易由熟習此項技術者純化。
在一些實施例中，胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG（異丙硫基-β-半乳糖苷）誘導來表現。作為一實例，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。所需胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5457066號、第5700662號、第5514646號、第9050371號及第10400021號。
在一些實施例中，本揭示案之化合物（例如，式I、式II）可調配用於注射。舉例而言，其可調配用於注射至個體（諸如人類）中。在一些實施例中，組合物可為醫藥組合物，諸如無菌可注射醫藥組合物。在一些實施例中，組合物可經調配用於皮下注射。在一些實施例中，組合物經調配以用於經皮、皮內、經黏膜、經鼻、可吸入或肌肉內投與。在一些實施例中，組合物可以口服劑型或肺部劑型調配。適用於注射之醫藥組合物可包括無菌水溶液，其含有例如糖、多元醇（諸如甘露糖醇及山梨糖醇）、苯酚、間甲酚及氯化鈉，且分散液可在甘油、液體聚乙二醇及其混合物中製備，且在油及載劑中可為例如含有例如水、醣類、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇及其類似物）及其混合物之溶劑或分散介質。熟習此項技術者認識到，可研發特定調配物以最好地適合本發明之分子架構之應用及使用方法。醫藥組合物之調配及製造中之通用考慮因素、投與途徑且包括適合的醫藥學上可接受之載劑，可見於例如《雷明頓氏醫藥科學（ Remington's Pharmaceutical Science）》第19版，Mack Publishing Co., Easton, Pa.，1995。在一些實施例中，若化合物（例如，式I化合物）包含胰島素，則醫藥組合物可包括鋅，例如Zn 2+以及胰島素。舉例而言，此類鋅調配物描述於美國專利第9,034,818號中。舉例而言，醫藥組合物可包含與經修飾之胰島素的莫耳比為約M:N之鋅，其中M為1-11且N為6-1。在一些實施例中，此類經修飾之胰島素可儲存於泵中，且該泵在身體外部或內部釋放經修飾之胰島素。在一些實施例中，泵可用於釋放恆定量的經修飾之胰島素，其中胰島素對葡萄糖有反應，且可基於血液中之葡萄糖含量及/或自注射部位之釋放速率自動調節活性。在一些實施例中，組合物可以單位劑型調配以便於投與及劑量均一性。在一些實施例中，除藉由分子架構得到之作用以外，醫藥組合物可進一步包括第二胰島素類型以提供速效或基本胰島素。在一些實施例中，本揭示案之化合物（例如，式I化合物）與胰島素分開注射但藉由結合至胰島素調節胰島素之活性，且在一些實施例中，此活性變化視葡萄糖而定。
在一些實施例中，醫藥組合物包含本文所揭示之化合物中之一或多者及至少一種選自醫藥學上可接受之載劑、醫藥學上可接受之媒劑及醫藥學上可接受之賦形劑的額外組分。在一些實施例中，醫藥組合物包含式I化合物及至少一種選自醫藥學上可接受之載劑、醫藥學上可接受之媒劑及醫藥學上可接受之賦形劑的額外組分。
在一些實施例中，本揭示案包括可為套組之一部分的化合物，其中該套組包括包含經修飾之胰島素的式I化合物以及醫藥學上可接受之載劑，且可包括用於注射之注射器或筆。在一些實施例中，套組可包括預填充有包括式I化合物及液體載劑之醫藥組合物的注射器或筆。替代地，套組可包括單獨的容器（諸如具有醫藥組合物之小瓶），該醫藥組合物包括式I化合物及無水載劑，以及空的注射器或筆。在一些實施例中，此套組可包括具有液體載劑之單獨容器，該液體載劑可用於復原給定組合物，該給定組合物可隨後吸收至注射器或筆中。在一些實施例中，套組可包括說明書。在一些實施例中，該套組可包括血糖量測裝置，其本地或遠程計算將在給定時間點或以規則間隔注射的經修飾之胰島素的合適劑量。此類給藥方案為患者所特有的，且可作為例如由人或電腦對泵進行程式化的指令來提供。套組可包括將血糖量測值局部地傳輸至第二電腦或其他處（例如，雲端）之電子裝置，其接著計算患者在某一時間需要使用的包含例如經修飾之胰島素的式I化合物的正確量。
在一些實施例中，本發明係關於一種治療個體之疾病或病狀的方法，其包含向個體投與包括本文所描述之化合物的組合物。在一些實施例中，疾病或病狀可為高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量異常、1型糖尿病、肥胖症、代謝症候群X或血脂異常、妊娠期糖尿病、前期糖尿病、阿茲海默氏症、MODY 1、MODY 2或MODY 3糖尿病、情緒障礙及精神障礙。應瞭解，此組合方法亦可與接收胰島素敏化劑或用於糖尿病之二級藥物（諸如二胍，諸如二甲雙胍、格列酮）或/及胰島素促泌素（諸如磺醯脲、GLP-1、茚啶-4等）或澱粉素之胰島素抗性患者一起使用。
在一些實施例中，可向接受至少一種額外療法或服用至少一種額外藥物或治療蛋白之患者投與本揭示案之化合物（諸如式I化合物）。在一些實施例中，至少一種額外療法旨在治療與所投與之化合物（例如，式I化合物）相同的疾病或病症。在一些實施例中，至少一種額外療法旨在治療化合物（例如式I化合物）之副作用或作為輔助療法。兩種療法之時間範圍可不同或相同；只要患者在一段時間內自兩種療法獲益，其可按相同或不同時程進行投與。兩種或更多種療法可在相同或不同調配物內投與，只要患者自兩種療法中受益一段時間。此等方法中之任一者可用於向個體投與多於一種抗糖尿病藥物。
在一些實施例中，將使用治療有效量之化合物（例如式I化合物），其為足以在合理的益處與風險比下治療疾病或病狀（意謂例如改善疾病或病狀之症狀、延遲其進展、預防其復發或延遲其發作）的量。在一些實施例中，此可涉及功效平衡及對毒性之額外安全性。額外安全性意謂例如化合物（例如式I化合物）可對血糖含量或其他分子含量之變化起反應，即使在患者不主動地監測該分子之含量時，諸如在給定時間範圍（例如在睡眠期間）之血糖含量。在一些實施例中，治療功效及毒性可藉由細胞培養物中或實驗動物之活體內標準藥理學程序測定，且例如量測藥物治療指數之ED 50及LD 50。在一些實施例中，具有分子架構之胰島素的平均日劑量在5至400 U範圍內（例如30至150 U，其中1個胰島素單位為約0.04 mg）。在一些實施例中，每天或每兩天或每三天或每4天投與一定量之具有此等胰島素劑量之化合物（例如式I化合物）。在一些實施例中，基準係藉由演算法確定，該演算法可由電腦計算。在一些實施例中，每週或以規律間隔投與5至10倍此等劑量之化合物（諸如式I化合物）量。在一些實施例中，每兩週或以規律間隔投與10至20倍此等劑量之結合物量。在一些實施例中，每月或以規律間隔投與20至40倍此等劑量之化合物（例如式I化合物）之量。在一些實施例中，胰島素之A鏈之C端可進一步用包括1至20個胺基酸殘基之肽（胺基酸序列）延長。在一些實施例中，胰島素類似物為desB30胰島素。
在一些實施例中，Z1a為胺基酸或肽。在至少一些實施例中，Z1a包括（由以下構成）1至50個胺基酸殘基，例如1個殘基、50個殘基或任何中間數目個殘基（諸如10、15、25、30、42個殘基等）。在一些實施例中，Z1a包括1至15個胺基酸。在至少一些實施例中，肽Z1a包括1至8個胺基酸。在一些實施例中，Z1a包括5至6個胺基酸。在一些實施例中，Z1a包含至少一個獨立地選自以下之胺基酸：丙胺酸（A）、天冬醯胺（N）、麩醯胺酸（Q）、蘇胺酸（T）、甲硫胺酸（M）、組胺酸（H）、半胱胺酸（C）、纈胺酸（V）、異白胺酸（I）、離胺酸（K）及白胺酸（L），且其餘胺基酸各自獨立地選自二十種天然存在之胺基酸中之任一者。在一些實施例中，Z1a可包括二胺基丙酸、二胺基丁酸或鳥胺酸。
在一些實施例中，Z1a包括1至5個離胺酸（K）。在一些實施例中，Z1a包括1至3個K胺基酸。在一些實施例中，Z1a包括5至6個胺基酸且至少一或多個胺基酸為K。在一些實施例中，Z1a包括5至6個胺基酸且1至3個胺基酸為K。
在一些實施例中，Z1a附接至N端及/或C端，及/或插入至胰島素之A鏈或B鏈之序列中。
化合物在一些實施例中，本文提供式I化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： ， （式 I ）其中： X1包含： i.       包含胺之原料藥； ii.     經組態以共價結合至原料藥之胺；或 iii.   NH 2或OH（例如X1為NH 2或OH）； 各Z1a獨立地包含使用醯胺或肽鍵連接在一起之1至50個胺基酸； 各Z1b獨立地為小分子連接子； 各Z1c係獨立地選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、{FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226；其中各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或X1之胺或NH 2（當X1為NH 2時）或OH（當X1為OH時）； 各m'為0或1； 各n'為0； 各o'為1； 各p'為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且 各q'為1、2、3、4或5，其中當p'或q'為2或更大時，各對應Z1c經獨立地選擇且可相同或不同，且其中當q'為2或更大時，各對應Z1a經獨立地選擇且可相同或不同；且 當m'=0，各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至X1之胺或共價結合至NH 2（當X1為NH 2時）或共價結合至OH（當X1為OH時），且對於m'=1，各Z1a經由醯胺或肽鍵共價結合至X1且各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或共價結合至X1。
在一些實施例中，化合物係選自由式I表示之化合物、其立體異構物、其立體異構物之混合物及其醫藥學上可接受之鹽，限制條件為化合物不為PCT/US2021/059802中揭示之實例1至880中之任一者。
在一些實施例中，X1為包含具有A鏈及B鏈之胰島素受體促效劑的多肽。
在一些實施例中，本揭示案係關於具有下式之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： 其中： X1包含多肽，該多肽包含具有A鏈及B鏈之胰島素受體促效劑； 各Z1a獨立地包含使用醯胺或肽鍵連接在一起之1至50個胺基酸； 各Z1c獨立地選自式FF12A、FF12B、FF114A、FF115A、FF116A及FF225A，其中各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或X1之胺或當X1為OH時共價結合至OH； 各m'為0或1； 各p'為1、2、3、4或5；且 各q'為1、2、3、4或5，其中當p'或q'為2或更大時，各對應Z1c經獨立地選擇且可相同或不同，且其中當q'為2或更大時，各對應Z1a經獨立地選擇且可相同或不同； 當m'=0時，各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為OH時共價結合至OH，當m'=1時，各Z1a經由醯胺或肽鍵共價結合至X1且各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺；且 其中化合物之一或多個位置可包含同位素。
在一些實施例中，至少一個Z1c包含α甲基或β甲基。在一些實施例中，Z1c包含α甲基。在一些實施例中，Z1c包含β甲基。
在一些實施例中，化合物包含： 至少一個Z1c經由間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH或共價結合至Z1a之胺， 間接連接子由式(X'') n1表示，其中 各n1獨立地選自1、2、3、4及5，且 各X''獨立地選自： i.       L-胺基酸或D-胺基酸，其中L-胺基酸或D-胺基酸之胺官能基直接地或間接地共價結合至Z1c，且L-胺基酸或D-胺基酸之酸官能基直接地或間接地結合至X1或Z1a；及 ii.     式FL(IA)、FL(IB)、FL69及FL70； 其中式FL(IA)及FL(IB)為： 、 ，及其立體異構物； 其中： G係選自3至6員環烷基、3至10員雜環基、雜芳基及芳基，其中各基團視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代：羥基、胺基、鹵素、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、烷氧基及烷基（例如，C 1-C 6烷基）； E不存在或為視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代之伸烷基：鹵素、羥基及胺基； Q不存在或係選自氫、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、鹵基、氰基、烷氧基、羧酸、胺基、羥基、醯胺、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、雜環、雜芳基及芳基，其中烷基、烷氧基、環烷基、雜環、雜芳基及芳基各自視情況經1至5個獨立地選自以下之基團取代：烷基（例如，C 1-C 6烷基）、胺基、醯胺、鹵基、羥基、氰基、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）及烷氧基； Q'係選自氫、烷基（例如，C 1-C 6烷基）及醯基； Q及Q'與其所連接之碳及氮原子一起視情況形成4員雜環基、5員雜環基、6元雜環基、9員雙環雜環基或10員雙環雜環基，其中4員雜環基、5員雜環基、6員雜環基、9員雙環雜環基及10員雙環雜環基各自視情況經1至5獨立地選自以下之基團取代：烷基（例如，C 1-C 6烷基）、胺基、鹵基、羥基、氰基、醯胺、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）及烷氧基； p為0、1、2、3、4或5； q為0、1、2、3、4或5； R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵；且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化； 其中式FL69及FL70為： 、 ，及其立體異構物；其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基；且 A''係選自烷基（例如，C 1-C 6烷基）、經取代之醯基、以酸封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
在一些實施例中，化合物包含： 至少一個Z1c經由間接連接子共價結合至X1或Z1a，其中間接連接子由式(X'') n1表示， 各n1獨立地選自1、2、3、4或5，且 各X''獨立地選自： L-胺基酸或D-胺基酸，其中L-胺基酸或D-胺基酸之胺官能基直接地或間接地共價結合至Z1c，且L-胺基酸或D-胺基酸之酸官能基直接地或間接地結合至X1或Z1a；及 式FL(IA)、FL(IB)、FL69及FL70，其中式FL(IA)及FL(IB)係選自式FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL68及FL71至FL75： ，及其立體異構物； 其中： p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
其中式FL69及FL70為： 、 及其立體異構物；其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、飽和或不飽和脂肪酸、環烷基（例如，C 3-C 6環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基；且 A''係選自烷基（例如，C 1-C 6烷基）、經取代之醯基、以酸基封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
在一些實施例中，FL70之立體化學在立體生成碳處可為 S或 R 。在一些實施例中，FL70之立體化學在立體生成碳處為 S 。在一些實施例中，FL70之立體化學在立體生成碳處為 R 。
在一些實施例中，n1為1。
在一些實施例中，化合物由式IC表示： ， IC 。各p'為1、2、3或4；且 各q'為1、2、3、4或5。
在一些實施例中，各B 1及B 2獨立地選自式F2、F5及F10， 其中式F2、F5及F10為： ； 其中： 一個R 1表示(C=O)---*或(CH 2)m(C=O)---*，其中---*表示與Z1c之其餘部分的連接點，且m為1、2、3、4、5、6或7；且 各剩餘R 1獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、CH 2-NH 2、NH 2、(C=O)-NH 2、CH=O、SO 2CH 3、SO 2CF 3、CF 3、CHF 2、NO 2、CH 3、OCH 3、O(CH 2) m''CH 3、(SO 2)NH-CH 3、(SO 2)NH(CH 2) m''CH 3及OCF 3，其中m''為1、2、3、4、5、6或7； Y8為O、N或NR，其中R為烷基（例如，C 1-C 6烷基）或H； Y9為H、CH 3或烷基（例如，C 1-C 6烷基），其限制條件為當Y8為O時，Y9為CH 3或烷基（例如，C 1-C 6烷基）；且 i為1、2或3。
在一些實施例中，B 1及B 2係選自式F2，且各剩餘R 1獨立地選自H、CF 3及F；且各剩餘R 1為H，或各剩餘R 1中之一者或兩者為F或CF 3。
在一些實施例中，至少一個Z1c係選自FF12、FF12A-D、FF116及FF116A-D。在一些實施例中，B1及B2皆係選自F2，其中所有剩餘R1為H；且間接連接子係選自相對疏水性間接連接子。在一些實施例中，相對疏水性間接連接子可選自FL3、FL20-22、FL25、FL27-28、FL30-33、FL35、FL37、FL41、FL43-70及具有疏水性側鏈之胺基酸。在一些實施例中，B1及B2皆係選自F2，其中剩餘R1中之一者為CF 3且剩餘R1為H；且間接連接子係選自相對親水性間接連接子。在一些實施例中，相對親水性間接連接子可選自FL5、FL5A、FL5B、FL23-24、FL26、FL29、FL34、FL36、FL38-40、FL42及具有親水性側鏈之胺基酸。
在一些實施例中，各Z1c共價結合至間接連接子且Z1c及間接連接子組合中之每一者（亦即，Z1c-連接子）係選自式FFL-1至FFL-101： 及 ，及其立體異構物； 其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺或與Z1a之胺的共價連接點。
在一些實施例中，B 1及B 2係選自式F2，其中各剩餘R 1獨立地選自H、CF 3及F；其中各Z1c共價結合間接連接子且Z1c及間接連接子組合中之各者係選自式FFL-1-4、6-7、9、13-16、20-23、28-29、31-33、39、42-45、48、53、57-58、60-62、65及67： 、及其立體異構物； 其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺或與Z1a之胺的共價連接點。
在一些實施例中，X1為包含一或多個各自獨立地直接或經由間接連接子結合至Z1c之離胺酸胺基酸的多肽原料藥。
在一些實施例中，X1包含多肽人類激素、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽或其任何類似物。
在一些實施例中，X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25、24051及24052之序列，且B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24061、24062、24063、24064及25000至25397之序列。
在一些實施例中，X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中： A鏈包含選自SEQ ID NO 24051及24052之序列， B鏈包含選自SEQ ID NO 25095、25229、25232、25236、25305、25308、25312及25380至25397之序列； 各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF12D、FF116A、FF116B、FF116C及FF116D，且直接地或經由間接連接子共價結合至X1中之一或多個離胺酸殘基； B 1及B 2各自選自F2；且 間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL75及其立體異構物。
在一些實施例中，X1為包含具有A鏈及B鏈之胰島素受體促效劑的多肽，其中： A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25及24051之序列， B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24063、25228、25313、25393、25396及25397之序列； 各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF114A、FF115A、FF116A及FF225A，且直接地或經由間接連接子共價結合至X1中之一或多個離胺酸殘基； B 1及B 2各自選自F2；且 間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL21及其立體異構物。 在一些實施例中，化合物係選自： 實例1（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25398及25399）： ， 實例2（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25400及25401）： ， 實例3（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25402及25403）： ， 實例4（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25404及25405）： ， 實例5（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25406及25407）： ， 實例6（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25408及25409）： ， 實例7（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25410及25411）： ， 實例8（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25412及25413）： ， 實例9（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25414及25415）： ， 實例10（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25416及25417）： ， 實例11（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25418及25419）： ， 實例12（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25420及25421）： ， 實例13（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25422及25423）： ， 實例14（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25424及25425）： ， 實例15（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25426及25427）： ， 實例16（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25428及25429）： ， 實例17（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25430及25431）： ， 實例18（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25432及25433）： ， 實例19（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25434及25435）： ， 實例20（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25436及25437）： ， 實例21（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25438及25439）： ， 實例22（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25422及25423）： ， 實例23（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25440及25441）： ， 實例24（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25442及25443）： ， 實例25（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25444及25445）： ， 實例26（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25446及25447）： ， 實例27（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25448及25449）： ， 實例28（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25450及25451）： ， 實例29（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25452及25453）： ， 實例30（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25454及25455）： ， 實例31（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25456及25457）： ， 實例32（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25458及25459）： ， 實例33（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25460及25461）： ， 實例34（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25462及25463）： ， 實例35（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25464及25465）： , 實例36（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25466及25467）： ， 實例37（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25468及25469）： ， 實例38（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25470及25471）： ， 實例39（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25472及25473）： ， 實例40（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25474及25475）： ， 實例41（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25476及25477）： ， 實例42（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25478及25479）： ， 實例43（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25480及25481）： ， 實例44（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25482及25483）： ， 實例45（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25484及25485）： ， 實例46（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25486及25487）： ， 實例47（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25488及25489）： ， 實例48（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25490及25491）： ， 實例49（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25492及25493）： ， 實例50（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25494及25495）： ， 實例51（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25496及25497）： ， 實例52（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25498及25499）： ， 實例53（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25500及25501）： ， 實例54（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25502及25503）： ， 實例55（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25504及25505）： ， 實例56（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25506及25507）： ， 實例57（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25508及25509）： ， 實例58（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25510及25511）： ， 實例59（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25512及25513）： ， 實例60（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25514及25515）： ， 實例61（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25480及25481）： ， 實例62（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25516及25517）： ， 實例63（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25518及25519）： ， 實例64（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25520及25521）： ， 實例65（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25522及25523）： ， 實例66（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25524及25525）： ， 實例67（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25526及25527）： ， 實例68（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25528及25529）： ， 實例69（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25530及25531）： ， 實例70（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25532及25533）： ， 實例71（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25534及25535）： ， 實例72（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25536及25537）： ， 實例73（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25538及25539）： ， 實例74（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25540及25541）： ， 實例75（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25542及25543）： ， 實例76（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25544及25545）： ， 實例77（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25546及25547）： ， 實例78（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25548及25549）： ， 實例79（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25550及25551）： ， 實例80（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25552及25553）： ， 實例81（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25554及25555）： ， 實例82（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25556及25557）： ， 實例83（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25558及25559）： ， 實例84（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25560及25561）： ， 實例85（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25562及25563）： ， 實例86（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25564及25565）： ， 實例87（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25566及25567）： ， 實例88（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25568及25569）： ， 實例89（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25570及25571）： ， 實例90（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25572及25573）： ， 實例91（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25574及25575）： ， 實例92（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25576及25577）： ， 實例93（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25578及25579）： ， 實例94（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25580及25581）： ， 實例95（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25582及25583）： ， 實例96（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25584及25585）： ， 實例97（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25586及25587）： ， 實例98（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25588及25589）： ， 實例99（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25590及25591）： ， 實例100（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25592及25593）： ， 實例101（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25594及25595）： ， 實例102（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25596及25597）： ， 實例103（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25598及25599）： ， 實例104（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25600及25601）： ， 實例105（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25602及25603）： ， 實例106（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25604及25605）： ， 實例107（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25606及25607）： ， 實例108（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25608及25609）： ， 實例109（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25610及25611）： ， 實例110（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25612及25613）： ， 實例111（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25614及25615）： ， 實例112（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25616及25617）： ， 實例113（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25618及25619）： ， 實例114（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25620及25621）： ， 實例115（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25622及25623）： ， 實例116（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25624及25625）： ， 實例117（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25626及25627）： ， 實例118（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25628及25629）： ， 實例119（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25630及25631）： ， 實例120（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25632及25633）： ， 實例121（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25634及25635）： ， 實例122（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25636及25637）： ， 實例123（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25638及25639）： ， 實例124（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25640及25641）： ， 實例125（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25642及25643）： ， 實例126（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25644及25645）： ， 實例127（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25646及25647）： ， 實例128（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25648及25649）： ， 實例129（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25650及25651）： ， 實例130（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25652及25653）： ， 實例131（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25654及25655）： ， 實例132（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25656及25657）： ， 實例133（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25658及25659）： ， 實例134（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25660及25661）： ， 實例135（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25662及25663）： ， 實例136（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25664及25665）： ， 實例137（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25666及25667）： ， 實例138（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25668及25669）： ， 實例139（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25670及25671）： ， 實例140（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25672及25673）： ， 實例141（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25674及25675）： ， 實例142（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25676及25677）： ， 實例143（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25678及25679）： ， 實例144（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25680及25681）： ， 實例145（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25682及25683）： ， 實例146（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25684及25685）： ， 實例147（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25686及25687）： ， 實例148（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25688及25689）： ， 實例149（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25690及25691）： ， 實例150（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25692及25693）： ， 實例151（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25694及25695）： ， 實例152（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25696及25697）： ， 實例153（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25698及25699）： ， 實例154（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25700及25701）： ， 實例155（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25702及25703）： ， 實例156（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25704及25705）： ， 其立體異構物、其醫藥學上可接受之鹽、其同位素及其組合。
在一些實施例中，本文提供選自由以下組成之群的化合物：包含A鏈及B鏈之胰島素，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 24501及24502之序列；且其中B鏈包含選自SEQ ID NO 25229、25232、25305、25308、25312、25236、25095及25380至25397之序列。
在一些實施例中，各間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL32、FL41、FL62、FL63及其立體異構物。
在一些實施例中，B 1及B 2係選自式F2，且各剩餘R 1獨立地選自H、F、CL、I、Br及CF 3。
在一些實施例中，B 1及B 2係選自式F2，且各剩餘R 1為H。
在一些實施例中，X1包含至少一個離胺酸及N端；各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D，其中各B 1及B 2為F2；各Z1c直接地或經由間接連接子結合至X1中之離胺酸之胺側鏈或X1中之N端；且各間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75及其立體異構物，其中FL3及FL5中之各p獨立地為1、2或3。
在一些實施例中，至少一個Z1c經由間接連接子結合至B鏈中之離胺酸之胺側鏈或B鏈N端。
在一些實施例中，X1包含兩個或更多個離胺酸胺基酸。
在一些實施例中，B鏈包含至少兩個各自獨立地直接或經由間接連接子結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
在一些實施例中，B鏈包含至少三個各自獨立地經由間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
在一些實施例中，A鏈包含一或多個各自獨立地直接或經由間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
在一些實施例中，X1包含具有至少一個經由間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸的A鏈。
在一些實施例中，式I化合物係選自： ； 。
在一些實施例中，至少一個Z1c經由間接連接子共價結合X1，且其中間接連接子獨立地選自： 式FL3， 其中p為2或3； 式FL5、FL5A及FL5B， 其中p為1或2；及 ，及其立體異構物； 其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基；且 A''係選自烷基（例如，C 1-C 6烷基）、經取代之醯基、以酸基封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
在一些實施例中，間接連接子係選自： 。
在一些實施例中，X1為胰島素，其進一步包含1至5個經置換、插入、附加或突變成具有直接地或間接地結合至Z1c之游離胺之胺基酸的殘基。
在一些實施例中，至少一個Z1c結合至已在胰島素上經置換、插入或突變之胺基酸的游離胺側鏈。
在一些實施例中，化合物直接或經由連接子共價結合至可結合至存在於人類血漿中之至少一種蛋白質的分子。
在一些實施例中，在式F2、F5及F10中之各者中，一個R 1為(C=O)---*。
在一些實施例中，化合物由式II表示，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： Z1c-連接子 （式II） 其中Z1c-連接子係選自： ；其中X係選自脫離基、NH 2、OH及H；且 B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團。
在一些實施例中，由式(II)表示之化合物包含至少一個獨立地選自式F2、F5及F10之B 1或B 2， 其中式F2、F5及F10為： ； 其中： 一個R 1表示(C=O)---*或(CH 2)m(C=O)---*，其中---*表示與Z1c之其餘部分的連接點，且m為1、2、3、4、5、6或7；且 各剩餘R 1獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、CH 2-NH 2、NH 2、(C=O)-NH 2、CH=O、SO 2CH 3、SO 2CF 3、CF 3、CHF 2、NO 2、CH 3、OCH 3、O(CH 2) m''CH 3、(SO 2)NH-CH 3、(SO 2)NH(CH 2) m''CH 3及OCF 3，其中m''為1、2、3、4、5、6或7； Y8為O、N及NR，其中R為烷基（例如，C 1-C 6烷基）或H； Y9為H、CH 3或烷基（例如，C 1-C 6烷基），其限制條件為當Y8為O時，Y9為CH 3或烷基（例如，C 1-C 6烷基）；且 i為1、2或3。
在一些實施例中，Z1c-連接子（亦即，式II）係選自： ，且 其中X為脫離基或表示直接與式I之X1的共價連接點。
在一些實施例中，當X為脫離基時，X係選自N-氧基丁二醯亞胺、2,3,5,6-四氟苯氧基（TFP）、五氟苯氧基（Pfp）、OH、鹵素、順丁烯二醯亞胺烷胺基、順丁烯二醯亞胺醯胺基聚乙二醇胺基、及順丁烯二醯亞胺聚乙二醇胺基。在一些實施例中，X係選自N-氧基丁二醯亞胺及OH。在一些實施例中，X為OH。在一些實施例中，X為N-氧基丁二醯亞胺。在一些實施例中，順丁烯二醯亞胺聚乙二醇胺基係選自Mal-PEG2-胺、Mal-PEG4-胺及Mal-PEG5-胺或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，順丁烯二醯亞胺烷胺基係選自Mal-C6-胺及N-(2-胺基乙基)順丁烯二醯亞胺或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，順丁烯二醯亞胺醯胺基聚乙二醇胺基係選自Mal-醯胺基-PEG9-胺、Mal-醯胺基-PEG11-胺、Mal-醯胺基-PEG23-胺、4-Mal-甲基-環己烷甲醯胺-甲基-[1,2,3]三唑-PEG8-胺或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例中，Z1c-連接子係選自： 、其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合。在一些實施例中，Z1c-連接子係選自： 、其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合。
在一些實施例中，可向個體投與治療有效量的本揭示案之醫藥組合物。在一些實施例中，醫藥組合物包含至少一種本文所揭示之化合物（例如，式I）及醫藥學上可接受之載劑。
在一些實施例中，本文所揭示之化合物用作藥劑。
在一些實施例中，本揭示案提供一種治療或預防糖尿病、葡萄糖耐量異常、高血糖症或代謝症候群之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的本文所揭示之化合物或本文所揭示之醫藥組合物。
在一些實施例中，醫藥組合物包含一或多種多元醇。
在一些實施例中，多元醇係選自甘露醇、山梨醇、赤藻糖醇、異麥芽酮糖醇（isomalt）、乳糖醇、葡萄糖及麥芽糖醇。
在一些實施例中，醫藥組合物包含至少一種本文所揭示之化合物，其用作用於治療糖尿病或肥胖症、用於控制血糖含量或用於控制藥物釋放的藥劑。
在一些實施例中，本揭示案提供一種之向個體投與本文所揭示之化合物或本文所揭示之醫藥組合物作為治療劑或預防劑的方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種製備如本文所揭示之包含至少一個烷基化及/或醯胺化步驟之化合物的方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種藉由投與包含如本文所揭示之化合物，諸如實例1至156之裝置或調配物來治療個體之方法。舉例而言，裝置可為固定劑量注射器、微劑量注射器、內部或外部貼片。
在一些實施例中，本揭示案之化合物可用作製造原料藥或治療性或防治性化合物的中間物。
在另一態樣中，本發明提供人類胰島素類似物，其包含A鏈及B鏈，其中A鏈包含選自SEQ ID 24051及24052之序列；且其中B鏈包含選自SEQ ID NO 25000至25397之序列。
在一些實施例中，A鏈包含序列24051且B鏈包含選自以下之序列：25000、25001、25006至25009、25076、25077、25082至25085、25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。
在一些實施例中，A鏈包含序列24051，且B鏈包含選自以下之序列：25011、25012、25017至25020、25087、25088、25093至25096、25229、25239、25232、25240、25245至25248、25305、25308、25315、25316及25321至25324。
在一些實施例中，A鏈包含序列24051且B鏈包含選自以下之序列：25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。
在一些實施例中，A鏈包含序列24051且B鏈包含選自以下之序列：25011、25012、25017至25020、25087、25088、25093至25096、25229、25232、25305及25308。
在一些實施例中，本文所揭示之化合物之促效劑效能係藉由量測化合物活化受體（例如，胰島素受體）之效能來測定。在一些實施例中，本揭示案提供包含至少一個芳族含硼基團之對胰島素受體具有促效劑效能的化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為10 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1.2至約14、約1.2至約10、約2至約9、約2至約8、約3至約7或約3至約6。
在一些實施例中，本揭示案係針對包含至少一個連接至包含甲基之FF支架（例如，FF116A、FF225A）的芳族含硼基團的化合物，該化合物針對胰島素受體具有促效劑效能，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為10 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約2.5至約3.7、約2.5至約3.5、約2.5至約3，或約3至約3.5。在一些實施例中，甲基為β甲基，例如FF116A。在一些實施例中，甲基為α甲基，例如FF225A。
在一些實施例中，本揭示案提供對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為10 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1至約15、約1至約10、約2至約9、約2至約8、約3至約7，或約3至約6。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為10 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15。
在一些實施例中，本揭示案提供對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為20 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約2至約25、約2至約20、約2至約15、約2至約10、約2至約10、約2至約9，或約2至約8。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為20 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25。
在一些實施例中，本揭示案係針對包含至少一個包含甲基（例如，α甲基二硼酸鹽感測器或β甲基二硼酸鹽感測器，諸如DSL-9、DSL-14、DSL-18、DSL-66、DSL-69、DSL-72、DSL-75、DSL-109、DSL-110，其中X表示直接與式I之X1中之胺的共價連接點）之芳族含硼基團且對胰島素受體具有促效劑效能之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為20 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1.5至約21、約1.6至約21、約1.7至約20、及約3至約20、約4至約15或約10至約15。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為20 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15。
在一些實施例中，本揭示案提供對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為3 mM且第二葡萄糖濃度為20 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1至約25、約2至約24、約2至約24、約4至約20、約5至約18或約10至約15。
在一些實施例中，本揭示案提供對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1.2至約5、約1.3至約5、約1.4至約5、約1.5至約5、約2至約4或約3至約4。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約1.2、1.3、1.4、1.5、2、3、4或5。
在一些實施例中，本揭示案係針對對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個包含甲基（例如，α甲基二硼酸鹽感測器或β甲基二硼酸鹽感測器，諸如DSL-9、DSL-14、DSL-18、DSL-66、DSL-69、DSL-72、DSL-75、DSL-109、DSL-110）之芳族含硼基團的化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1.5至約3.5、約1.5至約3、約2至約3或約2.5至約3。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約1.2、1.3、1.4、1.5、2或3。
在一些實施例中，本揭示案提供對胰島素受體具有促效劑效能的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化胰島素受體之第二EC50效能，其中當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，該化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為約1至約6、約2至約6、約3至約5或約3至約4。在一些實施例中，當第一葡萄糖濃度為5.6 mM且第二葡萄糖濃度為11.1 mM時，化合物的第一EC50與第二EC50之胰島素受體促效劑效能比為至少或至多約1、2、3、4、5或6。
在一些實施例中，本揭示案提供具有對葡萄糖之結合親和力的包含至少一個二硼酸鹽感測器之化合物，其中化合物的葡萄糖Kd在0.01 mM至3 mM、0.01 mM至2.5 mM、0.01 mM至2 mM、0.01 mM至1.5 mM、0.01 mM至1 mM或0.01 mM至0.5 mM範圍內。在一些實施例中，化合物的葡萄糖Kd小於約3、2.5、2、1.5、1、0.5或0.01 mM。在一些實施例中，化合物的葡萄糖Kd小於約3、2.5、2、1.5、1、0.5或0.01 mM且化合物具有針對胰島素受體之促效劑活性。
在一些實施例中，本揭示案提供針對葡萄糖具有結合親和力的包含至少一個芳族含硼基團之化合物，其中當以30 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下在第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物提供50至2500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min）及/或0.2至5之相對葡萄糖輸注速率比。在一些實施例中，化合物提供至少約50、100、200、300、400、500、1000、1500、2000或2500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min）及/或至少約1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案係針對包含至少一個包含甲基（例如，α甲基二硼酸鹽感測器或β甲基二硼酸鹽感測器，諸如DSL-9、DSL-14、DSL-18、DSL-66、DSL-69、DSL-72、DSL-75、DSL-109、DSL-110）之芳族含硼基團且針對胰島素受體具有促效劑效能的化合物，其中當以30 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物具有約700至約2500、約750至約2500、約800至約2500、約850至約2500、約900至約2500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及約2至約4、約2至約3、或約3至約4之相對葡萄糖輸注速率比率。
在一些實施例中，本揭示案提供針對葡萄糖具有促效劑效能的化合物，其包含至少一個對葡萄糖具有結合親和力的芳族含硼基團，其中當以30 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物提供約1至約2500、約1至約2000、約1至約1500、約100至約1500、及約1000至約1500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及約0.1至約5、約0.2至約4.5、約0.5至約4、約0.5至約3.5或約1至約3之相對葡萄糖輸注速率比。在一些實施例中，化合物提供至少約50、100、200、300、400、500、1000、1500、2000或2500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min）及/或至少或至多約2、2.5、3、3.5、4、4.5或5之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案提供包含至少一個芳族含硼基團之化合物，其針對葡萄糖具有結合親和力，其中當以20 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物提供150至1000之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min）及約1至約3之相對葡萄糖輸注速率比。在一些實施例中，化合物提供至少約150、200、250、300、450、500、600、700、800、900或1000之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及/或至少或至多約1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案係針對對葡萄糖具有結合親和力的化合物，其包含至少一個包含甲基（例如，α甲基二硼酸鹽感測器或β甲基二硼酸鹽感測器，諸如DSL-9、DSL-14、DSL-18、DSL-66、DSL-69、DSL-72、DSL-75、DSL-109、DSL-110）之芳族含硼基團。在一些實施例中，化合物以20 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度，化合物具有約10至約1000、約10至約900、約20至約800、約50至約700、約100至約600及約200至約500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及約1至約2、約1至約1.5或約2至約2.5之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案提供對葡萄糖具有促效劑效能的化合物，其包含至少一個芳族含硼基團，其中當以20 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物提供約100至約2500、約100至約1000、約100至約900、約200至約800、約300至約700、約400至約600及約400至約500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及約1至約2.5、約1至約2、約1至約1.5、約0.5至約1.5或約1至約1.5之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案提供對葡萄糖具有結合親和力的化合物，其包含至少一個對葡萄糖具有結合親和力的芳族含硼基團，其中當以10 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，化合物提供60至2400之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min）及0.5至約4之相對葡萄糖輸注速率比。
在一些實施例中，本揭示案提供對葡萄糖具有結合親和力之化合物，其包含對葡萄糖具有親和力之至少一個芳族含硼基團，包含至少一個二硼酸鹽感測器。
在一些實施例中，本揭示案係關於對胰島素受體具有促效劑效能之化合物，其包含至少一個芳族含硼基團（例如，二硼酸鹽感測器，諸如DSL-1至DSL-112），其中一或多個芳族含硼基團包含甲基（例如，β甲基、α甲基）。在一些實施例中，化合物係選自實例1、實例3、實例4、實例5、實例6、實例8、實例9、實例10、實例11、實例12、實例15、實例16、實例18、實例19、實例23、實例24、實例25、實例27、實例30、實例33、實例34、實例35、實例37、實例40、實例41、實例44、實例46、實例48、實例49、實例52、實例54、實例55、實例56、實例57、實例59、實例64、實例65、實例67、實例69、實例70、實例75、實例76、實例80、實例82、實例83、實例84、實例85、實例92、實例94、實例95、實例96、實例97、實例100、實例101、實例102、實例104、實例107、實例109、實例112、實例113、實例114、實例118、實例119、實例122、實例123、實例127、實例129、實例130、實例131、實例132、實例133、實例140、實例152及實例154。在一些實施例中，至少一個芳族含硼基團（例如，二硼酸鹽感測器）對葡萄糖具有結合親和力。在一些實施例中，包含兩個或更多個二硼酸鹽感測器之化合物對葡萄糖具有較高親和力。在一些實施例中，包含三個或更多個二硼酸鹽感測器之化合物對葡萄糖具有較高親和力。
在一些實施例中，可測試及計算DSL化合物，諸如DSL-1A至DSL-112A與葡萄糖、果糖及/或乳酸鹽之結合常數。在一些實施例中，本文所揭示之DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.01 mM至約3 mM範圍內。本文所揭示之一些例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.01 mM至約2.5 mM範圍內。本文所揭示之一些例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.5 mM至約1.5 mM範圍內。在一些實施例中，例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值小於約3、2.5、2、1.5、1、0.5或0.01 mM。
本揭示案亦可根據以下編號實施例中任一項所定義： 1.     一種具有下式之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： 其中： X1包含多肽，該多肽包含具有A鏈及B鏈之胰島素受體促效劑，其中A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25及24051之序列，且B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24061、24063、25228、25313、25393、25396及25397之序列； 各Z1a獨立地包含使用醯胺或肽鍵連接在一起之1至50個胺基酸； 各Z1c獨立地選自式FF12A、FF12B、FF114A、FF115A、FF116A及FF225A，其中各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或X1之胺或當X1為OH時共價結合至OH； 各m'為0或1； 各p'為1、2、3、4或5；且 各q'為1、2、3、4或5，其中當p'或q'為2或更大時，各對應Z1c經獨立地選擇且可相同或不同，且其中當q'為2或更大時，各對應Z1a經獨立地選擇且可相同或不同； 當m'=0時，各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為OH時共價結合至OH，當m'=1時，各Z1a經由醯胺或肽鍵共價結合至X1且各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺； 且 其中式FF12A、FF12B、FF114A、FF115A、FF116A及FF225A為： ， 其中X表示直接與X1之胺或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺的共價連接點；且其中B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團；且 其中化合物之一或多個位置可包含同位素。 2.     如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中至少一個Z1c包含包含β甲基。 3.     如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中至少一個Z1c包含包含α甲基。 4.     如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中B 1及B 2各自獨立地為式F2， 其中式F2為： ； 其中： 第一R 1表示(C=O)---*或(CH 2)m(C=O)---*，其中---*表示與Z1c之其餘部分的連接點，且m為1、2、3、4、5、6或7；且 各剩餘R 1獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、CH 2-NH 2、NH 2、(C=O)-NH 2、CH=O、SO 2CH 3、SO 2CF 3、CF 3、CHF 2、NO 2、CH 3、OCH 3、O(CH 2) m ''CH 3、(SO 2)NH-CH 3、(SO 2)NH(CH 2) m ''CH 3及OCF 3，其中m''為1、2、3、4、5、6或7。 5.     如實施例2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中第一R 1為(C=O)---*。 6.     如實施例2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中（a）各剩餘R 1獨立地選自（i）H、CF 3及F；或（b）兩個剩餘R 1為H且一個剩餘R 1為CF 3或F。 7.     如實施例6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中各剩餘R 1為H。 8.     如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中 一或多個Z1c經由間接連接子共價結合至X1或Z1a，該間接連接子由式(X'') n1表示， 各n1獨立地選自1、2、3、4及5，且 各X''獨立地選自式FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL21、FL25、FL33、FL41、FL59、FL60、FL64、FL65、FL68、FL69及FL74： ，及其立體異構物； 其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、烷基（例如，C 1-C 6烷基）、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、C 1-C 6鹵烷基、芳基及雜芳基；且 A''係選自烷基（例如，C 1-C 6烷基）、經取代之醯基、以酸基封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、環烷基（例如，(C 3-C 6)環烷基）、鹵烷基（例如，C 1-C 6鹵烷基）、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。 9.     如實施例8之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中各該間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL33、FL64、FL65、FL69及其立體異構物。 10.  如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中一或多個Z1c經由間接連接子共價結合至X1，且其中間接連接子獨立地選自 式FL3， 其中p為2或3；及 式FL5、FL5A及FL5B， 其中p為1或2。 11.  如實施例10之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中間接連接子係選自： ，及其立體異構物； 12.  如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽， 其中Z1c中之各者共價結合至間接連接子以形成Z1c-連接子，其獨立地選自： 其中X表示直接與X1中之胺或當X1為OH時與OH之共價連接點。 13.  如實施例1之化合物，其中化合物係選自實例3、實例19、實例22、實例23、實例27、實例41、實例42、實例44、實例45、實例48、實例50、實例55、實例56、實例69、實例71、實例76、實例87、實例93、實例105、實例131、實例136、實例140、實例141、實例142、實例143、實例144、實例145、實例146、實例147、實例148、實例149、實例151、實例152、實例153、實例154及實例155；其醫藥學上可接受之鹽、其同位素及其組合。 14.  如實施例1之化合物，其中化合物係選自實例3、實例19、實例23、實例27、實例41、實例44、實例48、實例55、實例56、實例69、實例76、實例131、實例140、實例152、實例154及實例156；其醫藥學上可接受之鹽、其同位素及其組合。 15.  一種醫藥組合物，其包含如實施例1之至少一種化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物、或醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑。 16.  一種醫藥組合物，其包含至少一種如實施例13之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑。 17.  一種醫藥組合物，其包含至少一種如實施例14之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑。 18.  一種治療糖尿病、葡萄糖耐量異常、高血糖症或代謝症候群之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的如實施例1之化合物或其立體異構物或立體異構物之混合物、或醫藥學上可接受之鹽。 19.  一種治療糖尿病、葡萄糖耐量異常、高血糖症或代謝症候群之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量如實施例15之醫藥組合物。 20.  一種治療1型糖尿病或2型糖尿病之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的如實施例15至17中任一項之醫藥組合物。 21.  一種治療2型糖尿病之方法，其包含向有需要之個體投與治療有效量的如實施例16或17之醫藥組合物。 22.  一種由式II表示之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： Z1c-連接子 （式II） 其中Z1c-連接子係選自DSL-2、DSL-8、DSL-14、DSL-18、DSL-19、DSL-21、DSL-32、DSL-37、DSL-47、DSL-48、DSL-58、DSL-65、DSL-66、DSL-67、DSL-68、DSL-69、DSL-73、DSL-75、DSL-77、DSL-83、DSL-104、DSL-105、DSL-106、DSL-107、DSL-108、DSL-109、DSL-110、DSL-111；且其中X為脫離基，且 其中式II化合物之一或多個位置可包含同位素。 23.  如實施例22之化合物，其中X係選自N-羥基丁二醯亞胺（NHS）、2,3,5,6-四氟苯酚（TFP）、五氟苯酚（Pfp）、OH及鹵素。 24.  如實施例22之化合物，其中化合物係選自DSL-2A、DSL-9A、DSL-14A、DSL-18A、DSL-19A、DSL-21A、DSL-32A、DSL-37A、DSL-47A、DSL-48A、DSL-58A、DSL-65A、DSL-66A、DSL-67A、DSL-68A、DSL-69A、DSL-73A、DSL-75A、DSL-77A、DSL-83A、DSL-104A、DSL-105A、DSL-106A、DSL-107A、DSL-108A、DSL-109A、DSL-110A、DSL-111A、其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合。 25.  如實施例22之化合物，其中化合物係選自DSL-2B、DSL-9B、DSL-14B、DSL-18B、DSL-19B、DSL-21B、DSL-32B、DSL-37B、DSL-47B、DSL-48B、DSL-49B、DSL-58B、DSL-65B、DSL66B、DSL-67B、DSL-68B、DSL-69B、DSL-73B、DSL-75B、DSL-77B、DSL-83B、DSL-104B、DSL-105B、DSL-106B、DSL-107B、DSL-108B、DSL-109B、DSL-110B、DSL-111B、其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合。 b.     製備方法
在一些實施例中，本揭示案提供一種製備包含芳族含硼化合物及/或芳族含硼基團（例如，Z1c、Z1c-連接子（式II）、式I）之化合物或包含本揭示案之一或多種化合物的醫藥製劑的方法。
在一些實施例中，本揭示案提供一種用於製備旋轉受限之繫鏈硼結合物的方法，該結合物含有藉由不利的立體相互作用（例如取代基之間扭式與反式相互作用）、由於鍵雜交引起之阻礙旋轉（例如，順式-醯胺旋轉與反式-醯胺旋轉），或經由剛性共價鍵（例如，烯烴部分之( E)與( Z)構形）而阻礙旋轉的支架（Z1c、Z1c-連接子）。舉例而言，式FF116、FF116A、FF116B、FF116C及FF116D含有與胺基成對（例如，連接至同一原子）的烷基官能團，該等胺基與硼酸官能化部分共價結合。作為另一實例，式FF116、FF116A、FF116B、FF116C及FF116D中之一或多者含有成對的烷基取代基，該等成對的烷基取代基可限制硼結合胺採用的可接近二面角，影響採用的二面角且使硼酸官能化基團更緊密地結合在一起，且允許結合物與目標分子（諸如蛋白質或糖）之結合增加。
在一些實施例中，如本文所揭示之化合物經由與第二藥劑或治療劑連接（例如，結合、融合等）來進一步修飾以形成融合蛋白。在一些實施例中，第二藥劑或治療劑為如本文所描述之蛋白質或肽。在一些實施例中，第二藥劑為原料藥，其中原料藥為多肽人類激素、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素或升糖素類似物、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑制素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽，或其類似物。在一些實施例中，融合蛋白包含如本文所描述之一或多個二硼酸鹽感測器。在一些實施例中，兩種或更多種藥劑經連接（例如，結合、融合等）以產生包含一或多個二硼酸鹽感測器之融合蛋白。在一些實施例中，兩種或更多種藥劑為如本文所描述之蛋白質或肽。本文所描述之化合物及組合物或治療方法的生物活性（例如，促效劑效能、生物可用性等）可根據熟習此項技術者已知之方法來評估。在一些實施例中，化合物之生物活性係藉由評估化合物之EC50來測定。在一些實施例中，化合物之生物活性係使用本文所揭示之胰島素受體磷酸化（IR磷酸化）分析來測定。在一些實施例中，化合物之生物活性係藉由評估化合物對其目標之結合親和力（Kd）來測定。在一些實施例中，化合物之生物活性係藉由評估相對葡萄糖速率差來測定。在一些實施例中，化合物之生物活性係藉由評估相對葡萄糖速率比來測定。
治療方法在一些實施例中，本揭示案提供一種治療罹患或易患疾病之個體的方法，該疾病有利地藉由本文所揭示之化合物或包含本文所揭示之化合物中之一或多者的醫藥製劑來治療。在一些實施例中，該方法包含向有需要之個體投與有效量的本揭示案之醫藥製劑/組合物的步驟。在至少一個實施例中，本揭示案之化合物及/或醫藥製劑可用於（或用於藥劑製造）治療或預防病症，該病症包括高血糖症、2型糖尿病、葡萄糖耐量受損、1型糖尿病、肥胖症、代謝症候群X或血脂異常、妊娠期糖尿病、前期糖尿病、阿茲海默氏症（Alzheimer's disease）、MODY 1、MODY 2或MODY 3糖尿病、神經疾病、情緒障礙及精神障礙。在至少一個實施例中，向罹患糖尿病之個體投與治療有效量的本揭示案之化合物及/或醫藥製劑。在一些實施例中，糖尿病為1型糖尿病或2型糖尿病。在一些實施例中，糖尿病為1型糖尿病。
在一些實施例中，當第一活性藥劑與第二（另一）活性藥劑一起投與時，可調節劑量以使得兩種組合治療之活性足以調節患者之血糖含量。因此，可以此組合投與以調節血糖含量的第一活性藥劑或第二活性劑之量可低於第一活性藥劑或第二活性劑以單藥療法形式投與時所需的量。
以下實例及實驗資料僅出於說明之目的提供，且不限制本揭示案之實施例之範疇。
以下縮寫具有以下闡述之定義：
縮寫 全名
Acm s-乙醯胺基甲基
ACN 乙腈
ARS 茜素紅S
Boc 三級丁氧基羰基
DCM 二氯甲烷
Dde 1-(4,4-二甲基-2,6-二側氧基環己-1-亞基)乙基
DIPEA，DIEA N,N-二異丙基乙胺
DMF 二甲基甲醯胺
DMSO 二甲基亞碸
DTDP 2,2,-二硫吡啶
EDC 3-(乙基亞胺基亞甲基胺基)-N,N-二甲基丙-1-胺
Fmoc 芴基甲氧羰基氯
GLP-1 升糖素樣肽1
HATU 六氟磷酸氮雜苯并三唑四甲基金尿
HCl 鹽酸
IGF1 胰島素樣生長因子1
IPTG 異丙硫基-β-半乳糖苷
IBs 包涵體
LC-MS 液相層析質譜法
MeOH 甲醇
MIDA N-甲基亞胺基二乙酸
MODY 年輕人之成年型糖尿病
NHS N-羥基丁二醯亞胺
Oxyma 氰基羥基亞胺基乙酸乙酯
RAM Rink Amide基質
PEG 聚乙二醇
SDS 十二烷基硫酸鈉
tBu 三級丁基
TFA 三氟乙酸
TFP 2,3,5,6-四氟苯酚
TMB 3,3',5,5'-四甲基聯苯胺
Pfp 五氟苯酚
CaCl 2 氯化鈣
HFIP 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇
SnCl 2 氯化錫
實例 A. 芳族含硼化合物之製備。所揭示之化合物可根據以下流程製備。以下流程表示用於製備此等化合物之一般方法。然而，此等化合物之合成不限於此等代表性方法，因為其亦可藉由熟習合成化學技術者經由各種其他方法製備。
DSL 合成方法 1 ： 關於二硼化傳感器的樹脂合成：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-(((( 9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（0.93 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3 。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用20%哌啶及DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將2,3-雙(((( 9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丁酸、 4（0.224 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃下加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 5 。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 7 。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 7用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 8（ DSL-66A）。
二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 8溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。將純溶離份分離、合併、冷凍且凍乾，得到3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 11（ DSL-66B），約33%產率（20 mg）。計算質量(M+H) += 607.2，觀測質量(M+H) += 606.9。
DSL-66B之MS資料列於表I中。下表I中列出之其他實例在類似條件下合成。 表I
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-9B 647.24 647
DSL-14B 643.19 643.07
DSL-66B 607.20 607.08
DSL-73B 607.20   
DSL-112B 743.18 742.90
DSL 合成方法 2 ： 關於二硼化感測器之樹脂合成：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（0.93 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3。樹脂用DCM（3×5 mL）隨後用DMF（3×5 mL）洗滌。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2S,3S)-(Fmoc-胺基)-3-疊氮基丁酸 4（0.146 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 mL，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 5 。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及THF（3 × 5 mL）洗滌且用0.2 M SnCl 2（189 mg）、0.8 M硫酚（440 ul）及1 M DIEA（870 ul）於THF中之5 mL溶液處理且將其在振盪器上輕緩地混合1小時。在1小時之後，用THF（3 × 5 mL）及DMF（3 × 5 mL）洗滌樹脂。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 6a。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 ml，2 mmol）之溶液添加至樹脂（6a）中且在50℃加熱30分鐘，得到 7 。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 7用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 8（ DSL-66A）。 DSL-14A、 DSL-15A、 DSL-68A之合成遵循類似程序。
二硼化感測器之 NHS- 活化：將二硼化感測器酸 8溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且隨後輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下乾燥，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘，藉由LCMS分析得到所需產物。將純溶離份分離、合併、冷凍且凍乾，得到3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 11（ DSL-66B），29%產率（17.4 mg）。計算質量(M+H) += 607.2，觀測質量(M+H) += 606.9
DSL-14B、 DSL-15B及 DSL-68B之合成遵循類似程序。 DSL 合成方法 3 ： 關於二硼化感測器之樹脂合成：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加(S)-3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-4-(三級丁氧基)丁酸 40（119 mg，0.3 mmol）與DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 41。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2 S,4 R)-1-((( 9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-4-(((( 9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸、 14（0.229 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DMF（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 42 。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 43。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 43用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-1A-OtBu。
二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-1A-OtBu溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發。三級丁基保護基用含TFA之DCM（50%）移除，使其混合1小時，在真空下還原，隨後溶解於DMSO（100 uL）中且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到呈白色粉末狀之 DSL-1B（25 mg）。
DSL-1B之MS資料列於表II中。下表II中列出之其他實例在類似條件下合成。 表II
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-1B 648.20   
DSL-2B 663.19 718.93（具有tBu基團）
DSL-70B 677.21 733.19（具有tBu基團）
DSL 合成方法 4 ： 關於二硼化感測器之樹脂合成：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加(S)-3-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-4-(三級丁氧基)丁酸 40（119 mg，0.3 mmol）與DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 44。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2 S,4 R)-1-(((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-4-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸、 14（0.229 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DMF（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 45。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 43。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 45用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-15A-OtBu。
二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-15A-OtBu溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發。三級丁基保護基用含TFA之DCM（50%）移除，使其混合1小時，在真空下還原，隨後溶解於DMSO（100 uL）中且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到呈白色粉末狀之 DSL-15B（21 mg）。
DSL-15B之MS資料列於表III中。下表III中列出之其他實例在類似條件下合成。 表III
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-15B 636.20   
DSL-51B 801.18 856.45（具有tBu基團）
DSL-75B 665.21 734.75（具有tBu基團）
DSL 合成方法 5 ： 關於二硼化感測器之樹脂合成：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加( R)-3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-甲基己酸 12（110 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 13。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2 S,4 R)-1-(((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-4-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸、 14（0.229 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DMF（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 15。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 16。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 16用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-67A。
5b ：二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-67A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-5-甲基己酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 DSL-67B，約28%產率（18.7 mg）。計算質量(M+H) += 675.2，觀測質量(M+H) += 675.0。
DSL-67B之MS資料列於表IV中。下表IV中列出之其他實例在類似條件下合成。 表IV
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-19B 619.20   
DSL-37B 673.25 672.99
DSL-47B 727.24 727.88
DSL-48B 661.25 661.12
DSL-58B 739.26 738.95
DSL-65B 799.20 798.83
DSL-67B 675.27 675.07
DSL-105B 709.25 709.03
DSL-107B 723.27 722.93
DSL-111B 695.24 695.09
DSL 合成方法 6： 將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加2-(1-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)環戊基)乙酸 17（109 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 18。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2 S,4 S)-1-(((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-4-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸、 19（0.229 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DMF（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 20。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 21。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 21用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸（ DSL-60A）。
將粗製二硼化感測器酸 DSL-60A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍及凍乾純餾分，得到2-(1-((2 S,4 S)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環戊基)乙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 DSL-60B，約22%產率（14.7 mg）。計算質量(M+H) += 673.2，觀測質量(M+H) += 673.0
DSL-61B至 DSL-77B及 DSL-108B之合成遵循類似程序。
DSL-60B之MS資料列於表V中。下表V中列出之其他實例在類似條件下合成。 表V
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-60B 672.24   
DSL-77B 619.20 619.11
DSL-108B 655.19   
DSL 合成方法 7： 將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（94 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將 N 2-(((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)- N 6-((烯丙氧基)羰基)- L- 離胺酸 22（0.181 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 23 ，接著用含20%哌啶之DMF處理5分鐘(3 × 5 mL)且用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2 S,4 R)-1-(((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-4-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)吡咯啶-2-甲酸、 14（0.229 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 24。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 25。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM (3 × 5 mL）洗滌且用肆(三苯基膦)鈀（20 mol%，46 mg）處理，且將含苯基矽烷（493 ul，4 mmol）之6 mL DCM在室溫下攪拌1小時且用DCM（3 × 5 mL）及DMF（3 × 5 mL）洗滌。將辛酸 26（63 ul，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 27 。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 27用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-68A。
7b ：二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-68A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到3-(( S)-2-((2 R,4 S)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-6-辛醯胺基己醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 DSL-68B，約30%產率（26.1 mg）。計算質量(M+H) += 873.4，觀測質量(M+H) += 873.2
DSL 合成方法 8 ： ( R)-3,4- 雙 ((((9 H- 茀 -9- 基 ) 甲氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 丁酸之合成在100 mL圓底燒瓶中，(3R)-3-{[(三級丁氧基)羰基]胺基}-4-{[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]胺基}丁酸（1 g，2.27 mmol）用1:1 TFA:DCM（15 mL）處理且在室溫下攪拌1小時。反應完成後，在減壓下移除溶劑且進一步與DCM（15 mL × 3）一起共蒸發。將油性產物溶解於5:1 10%碳酸鈉及THF（50 mL）中，接著添加含Fmoc-OSu（0.76 g，2.27 mmol）之THF（10 mL）且攪拌15小時。反應混合物用乙酸乙酯（35 mL）稀釋，且用1 N HCl酸化至pH約3。分離有機層且水層用乙酸乙酯（2 × 15 mL）萃取，用鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下蒸發，得到( R)-3,4-雙((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丁酸（1.2 g，95%）。
( R)-3-(3,4- 雙 (1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [ c][1,2] 氧雜硼戊環 -6- 甲醯胺基 ) 丁醯胺基 ) 丙酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯之合成將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（94 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將( R)-3,4-雙((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丁酸 30（0.224 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 31 。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 32。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 32用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-104A。
8b ：二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-104A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到 DSL-104B( R)-3-(3,4-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯，約22%產率（13 mg）。計算質量(M+H) += 607.2，觀測質量(M+H) += 607.1
DSL 合成方法 9 ： ( R)-3-(4,5- 雙 (1- 羥基 -1,3- 二氫苯并 [ c][1,2] 氧雜硼戊環 -6- 甲醯胺基 ) 戊醯胺基 ) 丙酸 2,5- 二側氧基吡咯啶 -1- 基酯之合成將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（94 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIPEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3。樹脂用DCM（3 × 5 mL），接著DMF（3 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將( R)-4,5-雙((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)戊酸 33（0.224 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 ml，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）於DCM（5 mL）中之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，用DMF（4 × 5 mL）洗滌，得到 34 。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4×5 mL）洗滌。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 mL，2 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 35。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 35用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-106A。
9b ：二硼化感測器之 NHS- 活化：將粗製二硼化感測器酸 DSL-106A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下蒸發，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘且藉由LCMS分析。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到 DSL-106B( R)-3-(4,5-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)戊醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯，約30%產率（18.6 mg）。計算質量(M+H) += 621.2，觀測質量(M+H) += 621.1
DSL 合成方法 10 ：將2-氯三苯甲基樹脂 1（300 mg，0.3 mmol）在無水DCM（5 mL）中溶脹30分鐘。溶劑用氮移除且立即添加3-((((9 H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)丙酸 2（0.93 mg，0.3 mmol）於DCM及DIPEA（0.3 mL，1.7 mmol）中之溶液且輕緩地混合隔夜。混合物用DCM洗滌且未反應位點用20% MeOH於DCM及DIEA（1 M）之溶液中的溶液封端且混合1小時，得到 3。樹脂用DCM（3×5 mL）隨後用DMF（3×5 mL）洗滌。樹脂用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL）且用DMF（4 × 5 mL）洗滌。將(2S,3S)-(Fmoc-胺基)-3-疊氮基丁酸 4（0.146 g，0.4 mmol）、DIPEA（0.14 mL，0.8 mmol）及HATU（0.152 g，0.4 mmol）之溶液添加至樹脂中且在50℃加熱30分鐘，得到 5。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及THF（3 × 5 mL）洗滌且用0.2 M SnCl 2（189 mg）、0.8 M硫酚（440 ul）及1 M DIEA（870 ul）於THF中之5 mL溶液處理且將其在振盪器上輕緩地混合1小時。在1小時之後，用THF（3 × 5 mL）及DMF（3 × 5 mL）洗滌樹脂，得到 36。將1-羥基-3H-2,1-苯并氧雜硼戊環-6-羧酸 6（0.178 g，1 mmol）、HATU（0.380 g，1 mmol）及DIPEA（0.35 ml，2 mmol）之溶液添加至樹脂（6a）中且在50℃加熱30分鐘，得到 37。 樹脂用DMF（5 × 5 mL）洗滌，且用含20%哌啶之DMF處理5分鐘（3 × 5 mL），且用DMF（4 × 5 mL）洗滌，接著與 38偶合得到 39。樹脂用DMF（4 × 5 mL）及DCM（3 × 5 mL）洗滌。
自樹脂裂解二硼化感測器樹脂上之化合物 39用含20% 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇（HFIP）之DCM（7 mL）處理且輕緩地混合1小時。過濾樹脂，且在減壓下蒸發濾液。殘餘物進一步用DCM（2 × 5 mL）懸浮且蒸發，得到不經純化即用於下一步驟中的二硼化感測器酸 DSL-109A。
10b ：二硼化感測器之 NHS- 活化：將二硼化感測器酸 DSL-109A溶解於DMF（2 mL）中且用3-(3-二甲胺基丙基)-1-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽 9（EDC）（0.096 g，0.5 mmol）、N-羥基丁二醯亞胺 10（NHS）（0.115 g，1 mmol）處理，且隨後輕緩地混合隔夜。藉由LCMS監測反應進程。反應完成後，反應混合物用乙酸乙酯（20 mL）稀釋且用100 mmol HCl（10 mL）洗滌。有機層經無水Na 2SO 4乾燥且在真空下乾燥，溶解於DMSO（100 uL）中，且在C18管柱上藉由逆相（RP）急驟層析法用20% ACN/水（具有0.1% TFA）至60% ACN/水（具有0.1% TFA）之梯度分餾10分鐘，藉由LCMS分析得到所需產物。分離、合併、冷凍且凍乾純餾分，得到3-((2 S,3 S)-2-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-3-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯 DSL-109B，約20%%產率（12.5 mg）。計算質量(M+H) += 625.1，觀測質量(M+H) += 625.1
DSL-109B之MS資料列於表VI中。下表VI中列出之實例在類似條件下合成。 表VI
DSL-B實例 計算質量[M+H] +1 觀測質量[M+H] +1
DSL-109B 624.18   
DSL-110B 675.19 675.07
DSL-1A至 DSL-112A之化學結構及IUPAC名稱概述於下表1中。 表 1
化合物 # FF FL F 結構 /IUPAC 名稱
DSL-1A FF12A FL38 F2 ( S)-4-羥基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丁酸
DSL-2A FF12A FL5B F2 ((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)- L-天冬胺酸
DSL-3A FF12A FL22 F2 2-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環戊烷-1-甲酸
DSL-4A FF12A FL20 F2 2-(1-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環戊基)乙酸
DSL-5A FF12A FL24 F2 2-(4-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)四氫-2 H-吡喃-4-基)乙酸
DSL-6A FF12A FL3 F2 3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-7A FF12A FL39 F2 (3 S,4 R)-4-羥基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)戊酸
DSL-8A FF12A FL23 F2 ( S)-7-胺基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)庚酸
DSL-9A FF116A FL21 F2 (1S,2S)-2-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)環戊烷-1-甲酸
DSL-10A FF116A FL24 F2 2-(4-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)四氫-2 H-吡喃-4-基)乙酸
DSL-11A FF116A FL23 F2 ( S)-7-胺基-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)庚酸
DSL-12A FF116A FL36 F2 ( S)-6-胺基-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-6-側氧基己酸
DSL-13A FF116A FL20 F2 2-(1-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)環戊基)乙酸
DSL-14A FF116A FL3 F2 3-((2 S,3 S)-2,3-雙(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-15A FF116A FL38 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4-羥基丁酸
DSL-16A FF116A FL5B F2 ((2 S,3 S)-2-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-3-(1-羥基-4-(三氟甲基)-2,3-二氫-1 H-苯并[ b]硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)- L-天冬胺酸
DSL-17A FF116A FL39 F2 (3 S,4 R)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4-羥基戊酸
DSL-18A FF116A FL5B F2 ((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)- L-天冬胺酸
DSL-19A FF12A FL3 F2 3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-20A FF116A FL35 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(4-甲氧基苯基)丙酸
DSL-21A FF12A FL5B F2 ((2 S,4 R)-1-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)- L-麩胺酸
DSL-22A FF12A FL3 F2 3-((2 S,4 R)-1-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-23A FF116A FL28 F2 2-(( S)-1-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)吡咯啶-2-基)乙酸
DSL-24A FF116A FL41 F2 ( R)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4-(全氟苯基)丁酸
DSL-25A FF116A FL42 F2 2-((2 S)-1-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)-4-羥基吡咯啶-2-基)乙酸
DSL-26A FF12A FL42 F2 2-((2 S)-4-羥基-1-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)吡咯啶-2-基)乙酸
DSL-27A FF116A FL34 F2 2-(4-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)哌啶-4-基)乙酸
DSL-28A FF12A FL34 F2 2-(4-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)哌啶-4-基)乙酸
DSL-29A FF116A FL27 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4,4,4-三氟丁酸
DSL-30A FF12A FL27 F2 ( S)-4,4,4-三氟-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丁酸
DSL-31A FF116A FL32 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-32A FF12A FL5B F2 ((2 S,4 R)-1-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)- L-天冬胺酸
DSL-33A FF12A FL32 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-34A FF12A FL29 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)己二酸
DSL-35A FF116A FL29 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)己二酸
DSL-36A FF116A FL37 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4-(4-羥基苯基)丁酸
DSL-37A FF12A FL25 F2 (1 S,2 S)-2-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環己烷-1-甲酸
DSL-38A FF116A FL25 F2 (1 S,2 S)-2-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)環己烷-1-甲酸
DSL-39A FF12A FL26 F2 ( S)-4-胺基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丁酸
DSL-40A FF12A FL31 F2 ( R)-4-(4-氰基苯基)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丁酸
DSL-41A FF116A FL40 F2 ( S)-5-胺基-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-5-側氧基戊酸
DSL-42A FF12A FL37 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(4-羥基苯基)丁酸
DSL-43A FF12A FL40 F2 ( S)-5-胺基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-5-側氧基戊酸
DSL-44A FF12A FL62 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(3-(三氟甲基)苯基)丁酸
DSL-45A FF12A FL63 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(4-碘苯基)丁酸
DSL-46A FF12A FL56 F2 ( S)-3-(4-氟苯基)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-47A FF12A FL60 F2 ( S)-4-(4-氟苯基)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丁酸
DSL-48A FF12A FL64 F2 ( R)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-甲基戊酸
DSL-49A FF12A FL32 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-50A FF12A FL67 F2 (3 R)-3 (3 R,4 S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-甲基己酸
DSL-51A FF116A FL5B F2 ((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)- L-麩胺酸
DSL-52A FF116A FL26 F2 ( R)-4-胺基-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丁酸
DSL-53A FF12A FL35 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(4-甲氧基苯基)丙酸
DSL-54A FF116A FL40 F2 ( R)-5-胺基-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-5-側氧基戊酸
DSL-55A FF12A FL30 F2 2-(( S)-1-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)哌啶-2-基)乙酸
DSL-56A FF12A FL5B F2 ((2 S,4 S)-1-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)- L-麩胺酸
DSL-57A FF116A FL33 F2 ( S)-3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-4-(4-甲氧基苯基)丁酸
DSL-58A FF12A FL33 F2 ( S)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(4-甲氧基苯基)丁酸
DSL-59A FF12A FL36 F2 ( S)-6-胺基-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-6-側氧基己酸
DSL-60A FF12B FL20 F2 2-(1-((2 S,4 S)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環戊基)乙酸
DSL-61A FF12B FL32 F2 ( S)-3-((2 S,4 S)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-62A FF12B FL5B F2 ((2S,4S)-1-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)-L-天冬胺酸
DSL-63A FF116A FL30 F2 2-(( S)-1-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)哌啶-2-基)乙酸
DSL-64A FF12A FL28 F2 2-(( S)-1-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)吡咯啶-2-基)乙酸
DSL-65A FF12A FL41 F2 ( R)-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(全氟苯基)丁酸
DSL-66A FF116A FL3 F2 3-((2 S,3 S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-67A FF12A FL68 F2 ( S-3-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-5-甲基己酸
DSL-68A FF12A FL3, FL69 F2 3-(( S)-2-((2 S,4 R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-6-辛醯胺基己醯胺基)丙酸
DSL-69A FF116A FL3 F2 3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-70A FF12A FL5B F2 ((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)-L-麩胺酸
DSL-71A FF116A FL3 F2 4-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丁酸
DSL-72A FF225B FL3 F2 (R)-3-(2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-2-甲基丙醯胺基)丙酸
DSL-73A FF225A FL3 F2 (S)-3-(2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-2-甲基丙醯胺基)丙酸
DSL-74A FF203 FL3 F2 3-((2S,3R)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-4-(羥胺基)-4-側氧基丁醯胺基)丙酸
DSL-75A FF116A FL5B F2 ((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)-L-麩胺酸
DSL-76A FF193A FL3 F2 3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-4-(甲胺基)-4-側氧基丁醯胺基)丙酸
DSL-77A FF12B FL3 F2 3-((2S,4S)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-78A FF116A FL75 F2 3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-N-甲基丁醯胺基)丙酸
DSL-79A FF12A FL71 F2 (S)-4-胺基-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-側氧基丁酸   
DSL-80A FF12A FL43 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(噻吩-2-基)丁酸
DSL-81A FF12A FL5B F2 ((2S,4R)-1-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)-L-天冬胺酸
DSL-82A FF116A FL5B F2 ((2S,3S)-2,3-雙(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)-L-麩胺酸
DSL-83A FF12A FL5B F2 ((2S,4R)-1-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)-L-麩胺酸
DSL-84A FF116A FL44 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酸
DSL-85A FF116A FL72 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(噻吩-2-基)丙酸
DSL-86A FF116A FL53 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(對甲苯基)丙酸
DSL-87A FF116A FL73 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(呋喃-2-基)丙酸
DSL-88A FF116A FL48 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(3,5-二甲氧基苯基)丙酸
DSL-89A FL12A FL53 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(對甲苯基)丙酸
DSL-90A FF116A FL68 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-5-甲基己酸
DSL-91A FF12A FL45 F2 2-((R)-2-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-羰基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)乙酸
DSL-92A FF12A FL48 F2 (S)-3-(3,5-二甲氧基苯基)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-93A FF116A FL56 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(4-氟苯基)丙酸
DSL-94A FF116A FL45 F2 2-((R)-2-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)乙酸
DSL-95A FF12A FL50 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(2-甲氧基苯基)丙酸
DSL-96A FF116A FL46 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-97A FF116A FL50 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(2-甲氧基苯基)丙酸
DSL-98A FF12A FL46 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)丙酸
DSL-99A FF12A FL73 F2 (S)-3-(呋喃-2-基)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-100A FF116A FL55 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(間甲苯基)丙酸
DSL-101A FF116A FL57 F2 (S)-3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-3-(3-氟苯基)丙酸
DSL-102A FF12A FL55 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(間甲苯基)丙酸
DSL-103A FF12A FL57 F2 (S)-3-(3-氟苯基)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-104A FF115A FL3 F2 (R)-3-(3,4-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-105A FF12A FL74 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-苯基丁酸
DSL-106A FF114A FL3 F2 (R)-3-(4,5-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)戊醯胺基)丙酸
DSL-107A FF12A FL65 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-5-苯基戊酸
DSL-108A FF12B FL3 F2 3-((2S,4S)-1-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)丙酸
DSL-109A FF116A FL3 F2 3-((2S,3S)-2-(4-氟-1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-3-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-110A FF116A FL3 F2 3-((2S,3S)-3-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-2-(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸
DSL-111A FF12A FL59 F2 (R)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-苯基丙酸
DSL-112A FF12A FL44 F2 (S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酸
式 I 化合物之合成 式 I 化合物之合成提供可用於合成所描述實例的說明性合成方案。
連接半胱胺酸殘基之線為二硫鍵。為清楚起見，胰島素之A鏈及B鏈之N端處的H-不為組胺酸，其為N端之氫。A鏈及B鏈之C端處所示之-OH為各別鏈之C端。
胰島素表現及結合方法 1 1a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
1b. 二硼酸鹽感測器 11 與胰島素原之結合。向單鏈胰島素原 12（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含3-(( 2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[ c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ 11 ， DSL-66B ，4.4 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 13 。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將粗製溶液在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素結合物用TFA（約200 uL）沈澱、離心、傾析。隨後將粗沈澱物用水（2 ×500 uL）洗滌，隨後溶解於DMSO (100至200 uL）中，用20% ACN/水（5至10 mL）稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到白色粉末（5至10 mg） 14（實例19）。 流程1.二硼酸鹽感測器（11）與胰島素原（12）（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25706至25707及25434至25435）之結合。
實例19（化合物14）之MS資料列於表A中。下表A中列出之其他實例在類似條件下合成。 表A
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例19： 7797.47 1549.695 1549.4580 1291.581 1291.4125
實例41： 8001.44 1590.489 1590.4195 1325.576 1325.4336
實例42： 7833.47 1556.895 1556.5677 1297.581 1297.3340
實例43： 7833.47 1556.895    1297.581   
實例44： 7917.57 1573.715 1573.7895 1311.598 1311.6387
實例45： 7995.61 1589.323 1589.1750 1324.604 1324.5053
實例46： 7884.55 1567.111    1306.094   
實例47： 8046.58 1599.517    1333.099   
實例49： 8013.54 1592.909    1327.593   
實例50： 7965.44 1583.289 1583.2360 1319.576 1319.5296
實例51： 7953.57 1580.915    1317.598   
實例52： 8115.60 1613.321    1344.603   
實例53： 7920.55 1574.311    1312.094   
實例54： 8010.58 1592.317    1327.099   
實例55： 8205.40 1631.281 1631.4997 1359.569 1359.5781
實例56： 7929.44 1576.089    1313.576   
實例57： 7839.52 1558.105    1298.589   
實例58： 8151.60 1620.521    1350.603   
實例59： 8379.41 1666.083    1388.571   
實例60： 7962.49 1582.699    1319.084   
實例61： 7833.47 1556.895    1297.581   
實例62： 8151.60 1620.521    1350.603   
實例63： 7923.51 1574.903    1312.588   
實例64： 8337.47 1657.695    1381.581   
實例65： 7965.55 1583.311    1319.594   
實例66： 8178.60 1625.921    1355.103   
實例67： 8004.65 1591.131    1326.111   
實例68： 7995.61 1589.323    1324.604   
實例70： 7929.55 1576.111    1313.594   
實例71： 8373.47 1664.895 1664.8339 1387.581 1387.5842
實例72： 8001.55 1590.511    1325.594   
實例73： 7995.61 1589.323    1324.604   
實例74： 8040.65 1598.331    1332.111   
實例76： 7905.42 1571.285 1571.3102 1309.573 1309.5893
實例77： 7965.55 1583.311    1319.594   
實例78： 8037.44 1597.689    1331.576   
實例79： 8121.48 1614.497    1345.583   
實例83： 7959.61 1582.123    1318.604   
實例84： 7959.61 1582.123    1318.604   
實例85： 7917.57 1573.715    1311.598   
實例86： 8049.54 1600.109    1333.593   
實例87： 8596.07 1709.415 1709.4965 1424.681 1424.7392
實例145： 7797.47 1549.695 1549.6064 1291.581 1291.4941
實例146： 8103.61 1610.923 1611.0307 1342.604 1342.5192
實例147： 7839.52 1558.105 1558.0749 1298.589 1298.5543
實例148： 8145.66 1619.333 1619.5586 1349.613 1349.6242
實例149 7941.42 1578.485 1578.3760 1315.573 1315.5098
實例152： 7851.45 1560.491 1560.3640 1300.578 1300.4802
實例154： 7971.49 1584.499 1584.6594 1320.584 1320.56091
實例155： 8061.57 1602.515 1602.4331 1335.598 1335.4232
胰島素表現及結合方法 2 2a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如5,457,066、5,700,662、5,514,646、9,050,371及10,400,021。
2b. 二硼酸鹽感測器 DSL-51 與胰島素原之結合。向單鏈胰島素原 15（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含(S)-2-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-6-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)-5-側氧基己酸（ DSL-51B ，6.2 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 15i 。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）及羧肽酶（CBP，1:1000羧肽酶比胰島素質量）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到實例11之白色粉末（6 mg）。
替代地，胰島素原 15用(S)-2-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)-6-(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)-5-側氧基己酸三級丁酯（ DSL-51-OtBu）在如上文所描述之類似條件下處理。在消化及沈澱之後，將粗結合物溶解於TFA:H2O（95:5）中，將其攪拌1小時，在減壓下濃縮，溶解於DMSO（100至200 uL）中，於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到實例11。 流程2. DSL-51B與胰島素原 15（按出現順序分別為(SEQ ID NOS 25708至25709及25418至25419）之結合。
實例2之MS資料列於表B中。下表B中列出之其他實例在類似條件下合成。 表B
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例2： 8170.38 1627.88 1627.8299 1356.73 1356.6901
實例6： 8034.41 1597.083    1331.071   
實例11： 8286.39 1647.479 1647.4054 1373.068 1373.0243
實例13： 8310.39 1652.279    1377.068   
實例18： 8170.38 1624.277    1353.733   
實例20： 8310.39 1652.279    1377.068   
實例22： 8282.36 1646.673    1372.396   
胰島素表現及結合方法 3 3a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
3b. 二硼酸鹽感測器 DSL-58B 與胰島素原之結合。向單鏈胰島素原 16（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含(S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(4-甲氧基苯基)丁酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-58B ，5.3 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 16i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例141（8.2 mg）。 流程3. DSL-58B與胰島素原 16（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25710至25711及25674至25675）之結合。
實例141之MS資料列於表C中。下表C中列出之其他實例在類似條件下合成。 表C
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例140： 8446.62 1679.525 1679.0139 1399.773 1399.1890
實例141： 8830.92 1756.385 1756.3025 1463.823 1463.6154
實例142： 8350.69 1660.339 1660.1569 1383.784 1383.6989
實例143： 8566.88 1703.577 1703.8767 1419.816 1419.0679
實例144： 8302.69 1650.739 1650.3696 1375.784 1375.6896
胰島素表現及結合方法 4 4a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
4b. 二硼酸鹽感測器 DSL-66 與胰島素原 18 之結合。向單鏈胰島素原 18（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-66B，6.2 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 18i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例69（7 mg）。 流程4. DSL-66B與胰島素原 18（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25712至25713及25530至25531）之結合。
實例69之MS資料列於表D中。下表D中列出之其他實例在類似條件下合成。 表D
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例69： 7323.25 1454.85 1454.8797 1212.54 1212.5711
胰島素表現及結合方法 5 5a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
5b. 二硼酸鹽感測器 DSL-58B 與胰島素原 17 之結合。向單鏈胰島素原 17（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含(S)-3-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)-4-(4-甲氧基苯基)丁酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-58B，5.8 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 17i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例153（11 mg）。 流程5. DSL-58B與胰島素原 17（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25714至25715及25698至25699）之結合。
實例153之MS資料列於表E中。下表E中列出之其他實例在類似條件下合成。 表E
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例8： 7683.43 1526.887    1272.574   
實例17： 8151.49 1620.499    1350.584   
實例105： 7887.62 1567.725 1567.7978 1306.60 1306.4987
實例136： 8043.54 1598.909 1598.9497 1332.593 1332.4593
實例138： 7986.52 1587.505    1323.089   
實例151： 7845.57 1559.315 1559.3305 1299.598 1299.4420
實例153： 8079.6 1606.121 1606.1023 1338.603 1338.6067
胰島素表現及結合方法 6 6a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
6b. 二硼酸鹽感測器 DSL-69B 與胰島素原 19 之結合。向單鏈胰島素原 19（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-4-(三氟甲基)-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-69B，5 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 19i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且隨後添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）及羧肽酶（CBP，1:1000羧肽酶比胰島素質量）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例131（8 mg）。 流程6. DSL-51B與胰島素原 19（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25716至25717及25654至25655）之結合。
實例131之MS資料列於表F中。下表F中列出之其他實例在類似條件下合成。 表F
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-2H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-2H 2O] 6+
實例130： 8089.31 1608.06    1343.22   
實例131： 8088.35 1608.063 1607.8112 1323.888 1342.8357
實例132： 8032.29 1596.659    1333.719   
實例133： 7916.28 1573.457    1314.384   
實例134： 8056.29 1601.459    1337.719   
實例135： 8028.26 1595.853    1333.048   
胰島素表現及結合方法 7 7a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
7b. 二硼酸鹽感測器 DSL-37B 與胰島素原 20 之結合。向單鏈胰島素原 20（20 mg）於DMSO（200 Ul）中之溶液中添加含(1S,2S)-2-((2S,4R)-1-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-羰基)-4-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)吡咯啶-2-甲醯胺基)環己烷-1-甲酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-37B，7.5 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 20i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例7（10 mg）。 流程7. DSL-37B與胰島素原 20（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25718至25719及25410至25411）之結合。
實例7之MS資料列於表G中。下表G中列出之其他實例在類似條件下合成。 表G
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例3 8303.68 1650.937 1650.9410 1375.949 1375.7885
實例7： 8567.86 1703.773 1703.6046 1422.98 1422.5018
實例14： 8583.70 1706.941    1422.619   
實例21： 8627.91 1715.783    1429.988   
實例88： 8351.68 1660.537    1383.949   
實例89： 8495.60 1689.321    1407.936   
實例90： 8527.64 1695.729    1413.276   
實例91： 8673.56 1724.913    1437.596   
實例92： 8535.70 1697.341    1414.619   
實例93： 8727.62 1735.725    1446.606   
胰島素表現及結合方法 8 8a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
8b. 二硼酸鹽感測器 DSL-66B 與胰島素原 21 之結合。向單鏈胰島素原 21（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-66B，6.4 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 21i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）及羧肽酶（CBP，1:1000羧肽酶比胰島素質量）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例48（9 mg）。 流程8. DSL-66B與胰島素原 21（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25720至25721及25490至25491）之結合。
實例48之MS資料列於表H中。 表H
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例48： 7898.52 1569.905 1569.8236 1308.423 1308.1837
胰島素表現及結合方法 9 9a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
9b. 二硼酸鹽感測器 DSL-73B 與胰島素原 22 之結合。向單鏈胰島素原 22（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含(S)-3-(2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)-2-甲基丙胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-73B，5.5 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 22i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）及羧肽酶（CBP，1:1000羧肽酶比胰島素質量）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例27（10 mg）。 流程9. DSL-73B與胰島素原 22（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25722至25723及25448至25449）之結合。
實例27之MS資料列於表I中。 表I
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例23： 7404.29 1471.059 1470.9639 1226.05 1225.9504
實例24： 7603.49 1510.899    1259.251   
實例26： 7530.32 1496.265    1247.056   
實例27： 7404.29 1471.059 1471.2545 1226.05 1226.2500
實例28： 7572.26 1504.653    1254.046   
實例29： 7440.29 1478.259    1232.051   
實例30： 7512.23 1492.647    1244.041   
實例32： 7614.30 1513.061    1261.053   
實例33： 7536.37 1497.475    1248.064   
實例34： 7812.21 1552.643    1294.038   
胰島素表現及結合方法 10 10a. 胰島素原之表現胰島素原可使用在諸如B21菌株之大腸桿菌菌株中對IPTG誘導型表現構築體及載體進行標準IPTG誘導來表現。簡言之，表現構築體由B鏈、C-肽、A鏈組成。舉例而言，EAEDLQVGQVELGGGPGAGSLQPLALEGSLQR（SEQ ID NO: 25730）之c-肽序列可用於表現胰島素原。胰島素原表現於包涵體（IB）中，在感測器結合之前例如經由現有his標籤將IB捕獲、洗滌且進一步純化。
所需單鏈胰島素原之表現可經由此項技術中已知之程序進行。參見例如美國專利第5,457,066號、第5,700,662號、第5,514,646號、第9,050,371號及第10,400,021號。
10b. 二硼酸鹽感測器 DSL-66B 與胰島素原 22 之結合。向單鏈胰島素原 22（20 mg）於DMSO（200 uL）中之溶液中添加含3-((2S,3S)-2,3-雙(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]氧雜硼戊環-6-甲醯胺基)丁醯胺基)丙酸2,5-二側氧基吡咯啶-1-基酯（ DSL-66B，4.5 mg）之DMSO（50 uL）及二異丙基乙胺（DIPEA，20 uL）。將反應物在室溫下攪拌1小時。將三氟乙酸（TFA，40 uL）添加至反應混合物中以沈澱胰島素原結合物中間物 22i。將反應混合物離心（11000 RPM，5分鐘），傾析，且將上清液再懸浮於50 mM乙酸（pH 4.5）、100 mM NaCl及30% ACN之100 uL溶液中。溶液用500 uL水稀釋，隨後添加30 uL之1 M Tris pH 9（50 mM最終濃度）、6 uL之500 mM CaCl 2（5 mM最終濃度）。pH用0.5 M NaOH（5至10 uL）調節至約9至9.5且添加胰蛋白酶（1:500至1:2000胰蛋白酶質量比胰島素質量，約10 uL之0.2 ug/mL儲備溶液）。將胰島素混合物在室溫下攪拌16小時。粗結合之胰島素用TFA（約200 uL）沈澱且將溶液離心、傾析，且將沈澱物溶解於DMSO（100至200 uL）中，隨後於20% ACN/水（5至10 mL）中稀釋，且藉由逆相HPLC來純化。收集、冷凍且凍乾餾分，得到呈白色粉末狀之實例156（6 mg）。 流程10. DSL-66B與胰島素原 22（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25724至25725及25704至25705）之結合。
實例 156之MS資料列於表J中。 表J
實例 預期質量（整體質量） 計算質量[M+5H-3H 2O] 5+ 觀測質量[M+5H-3H 2O] 5+ 計算質量[M+6H-3H 2O] 6+ 觀測質量[M+6H-3H 2O] 6+
實例156： 7064.17 1403.03 1403.0438 1169.36 1169.3714
B. 在生物分析中測試化合物活性使用茜素紅S（ARS）置換分析測試本揭示案之例示性化合物（例如，二硼化感測器）。
B.1使用ARS置換分析測定葡萄糖、果糖及乳酸鹽結合（Kd）之程序。 使用此項技術中之標準方法測定茜素紅S（ARS）與所測試之例示性化合物之間的結合事件的締合常數。針對實例化合物之連續稀釋，在96孔培養盤中進行10 -5M ARS於0.1 M磷酸鹽緩衝液（pH 7.4）中之三次滴定，在25℃下濃度範圍為0至0.1 M。將實例化合物-ARS溶液在25℃下培育5至45分鐘，且使用激發波長468 nm及發射波長585 nm來量測螢光強度。相對於實例化合物之濃度標繪強度變化，且擬合強度資料以產生ARS結合之締合常數。
經由結合至實例化合物之ARS之置換測定目標糖化合物（例如，葡萄糖）與所測試之芳族含硼基團（DSL化合物）之間的結合之締合常數。針對目標糖化合物之連續稀釋，在96孔培養盤中進行10 -5M ARS及0.1 M實例化合物於0.1 M磷酸鹽緩衝液（pH 7.4）中之三次滴定，在25℃下濃度範圍為0至2.0 M。將硼-ARS-碳水化合物溶液在25℃下培育30至60分鐘，且在盤讀取器中以激發波長468 nm及發射波長585 nm來量測各孔之強度。
相對於目標糖化合物之濃度標繪強度變化，且將資料擬合至單點競爭方程（one-site competition equation）： 得到硼化合物-目標糖化合物結合事件之締合常數。
可測試及計算DSL化合物，諸如DSL-1A至DSL-112A與葡萄糖、果糖及/或乳酸鹽之結合常數。本文所揭示之例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.01 mM至約3 mM範圍內。本文所揭示之一些例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.01 mM至約2.5 mM範圍內。本文所揭示之一些例示性DSL化合物對葡萄糖具有結合親和力，Kd值在約0.5 mM至約1.5 mM範圍內。
B.2 式 I 化合物之活性的活體外論證將組成性表現人類胰島素受體同功型ß之中國倉鼠卵巢（CHO）細胞以35,000個細胞/孔接種於96孔組織培養微量盤中且在補充有麩醯胺酸及10%胎牛血清之洛斯維帕克紀念研究所（Roswell Park Memorial Institute；RPMI）1640培養基（生長培養基）中生長隔夜。次日早晨，用新製生長培養基替換生長培養基。
藉由在達爾伯克氏改良伊格爾培養基（Dulbecco's Modified Eagle Medium；DMEM）培養基（不含葡萄糖、不含酚紅，含有4% w/v血清白蛋白）中逐步連續稀釋式I化合物來製備單獨的摻入培養基微量盤。以適當「高」（例如，20 mM）及「低」（例如，3 mM）濃度之葡萄糖一式三份地製備連續稀釋之式I化合物的孔，以測定式I化合物在不同可能的血糖含量下之效能變化。野生型胰島素充當陽性對照且不含任何化合物之培養基充當陰性對照。
隨後用DMEM培養基（不含葡萄糖、不含酚紅）替換96孔組織培養微量盤中之細胞上的生長培養基，且使培養盤在37℃靜置5分鐘。抽吸培養基且在37℃用單獨製備之培養盤（摻入培養基）的內容物替換10分鐘。10分鐘之後，抽吸摻入培養基且將細胞在室溫下用10%中性緩衝福馬林固定10分鐘。隨後抽吸中性緩衝福馬林，且用PBS（pH 7.4）嚴格地洗滌微量盤。隨後用補充有10% v/v胎牛血清及0.1% Triton X-100之PBS（pH 7.4）滲透且阻斷微量盤，持續30分鐘。隨後將培養盤在4℃下用含5% FBS之PBS+1:680比率（v:v）之兔（Rb）α-二氧磷基-Y1150/Y1151 IR抗體（ Cell Signaling Technologies #3024）染色隔夜。在隔夜培育接著用PBS（pH 7.4）嚴格洗滌之後，將微量盤在37℃在含5% FBS之PBS + 1:1000比率（v/v）之HRP α-兔抗體（ Cell Signaling Technologies ， #7074）中培育100分鐘。用PBS（pH 7.4）嚴格洗滌培養盤，且使用TMB受質在37℃下顯色讀數15分鐘。藉由添加0.1 M鹽酸來停止顯色且在450 nm下量測吸光度。在GraphPad Prism中標繪一式三份的吸光度值且使用四參數邏輯回歸分析以產生劑量反應曲線。比較劑量反應曲線之EC50以評估例示性式I化合物自低葡萄糖濃度至高葡萄糖濃度之活化倍數。將高葡萄糖濃度及低葡萄糖濃度下之GSI之EC50值比率用於計算胰島素活性之倍數變化。使用以下等式計算EC50： Y=底部值 + (X^希爾斜率)*(頂部值-底部值)/(X^希爾斜率 + EC50^希爾斜率)。
實例1至156具有在≥1.2至45範圍內之胰島素受體磷酸化（IR磷酸化）（倍數變化）。本文所揭示之一些實例具有在≥1.2至10範圍內之胰島素受體磷酸化（IR磷酸化）（倍數變化）。
B.3 式 I 化合物 之活性之活體內論證雄性史泊格-多利大鼠進行頸動脈及頸靜脈之手術插管以用於血液採樣及輸注，且使其恢復一週。經插管之大鼠用鏈佐黴素（STZ，55 mg/kg，7天）處理以誘導糖尿病狀態（血糖濃度＞300 mg/dL）。將糖尿病大鼠禁食整夜，隨後置放於單獨的實驗室中且連接至採樣/輸注管線。在注射胰島素實例之前，輸注葡萄糖以升高血糖含量（BG）或使用根皮苷（phloridzin）以降低各大鼠之BG以獲得高血糖狀態（200或400 mg/dL，N=6至8）或血糖正常狀態（100 mg/dL，N=6至8）的大鼠群組。每5分鐘量測血糖及維持鉗夾BG所需之葡萄糖輸注速率（GIR），且調節GIR以維持所需BG含量。在整個研究期間以投與根皮苷或葡萄糖開始連續輸注生長抑素（5 ug/kg/min）。在時間0分鐘處，在10秒時段內輸注式I化合物之彈丸劑量（1 nmol/kg至60 nmol/kg），且以可變速率連續輸注葡萄糖以維持高血糖症（200或400 mg/dL）或血糖正常穩態（100 mg/dL）300分鐘。針對高血糖（200或400 mg/dL）及血糖正常（100 mg/dL）含量計算化合物注射後之總葡萄糖輸注直至GIR返回至其化合物注射前值或達至300分鐘的總曲線下面積（AUC）值。使用梯形規則及應用之基線校正來計算曲線下面積（AUC）。自時間0至時間600分鐘之各GIR值減去注射前30分鐘至注射之平均GIR值以用於基線校正。梯形計算如下： 其中a為第一時間點（例如，0分鐘）且b為最後時間點（例如，300分鐘）。如下根據小梯形之細分計算面積： 因此，Δx為各時間點之間的差。
相比於血糖正常BG，式I化合物需要更大的GIR及總葡萄糖輸注AUC以維持鉗夾高血糖BG，從而表明BG增加時，化合物降低葡萄糖作用的葡萄糖反應性增加。化合物在高血糖條件下展現在250至5000範圍內之AUC值，且在血糖正常含量下展現200至4500之AUC值。高血糖AUC比血糖正常AUC之比率在400 mg/dL至100 mg/dL下介於0.01至5且在200 mg/dL至100 mg/dL下介於0.2至4.5。
在含有式FF116、FF116A-D、FF225、FF225A、FF225B及FF226之化合物的基於細胞之實驗中亦觀測到，在與硼氧雜環或硼酸鹽結合之氮相同的碳上具有成對烷基取代基的感測器與不具有成對烷基取代基的變異體相比，在3至20 mM葡萄糖範圍內提供了高5%至56%的葡萄糖反應性。舉例而言，當由式FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D、FF225、FF225A、FF225B及FF226中之一者表示之Z1C結合至胰島素中之離胺酸殘基時，其中式FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D、FF225、FF225A、FF225B及FF226中之硼酸鹽（B1、B2）由F2表示，觀測到相比於代替式FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D、FF225、FF225A、FF225B及FF226中之一者，一種情況使用2,3-二胺基丙酸，所得胰島素對3至20 mM葡萄糖之間的葡萄糖含量變化的反應性高11%至56%。該資料表明，在與硼氧雜環或硼酸鹽結合之氮相同的碳上存在成對烷基取代基提高了所得胰島素結合物的葡萄糖反應性，且呈3至20 mM葡萄糖範圍內之測試變化形式。
在不希望受理論束縛的情況下，咸信此一般原理延伸至其他式FF12、FF12A-D、FF114、FF115、FF116、FF116A-D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226，從而提供使葡萄糖反應性在3至20 mM或2至50 mM葡萄糖範圍內增強至少5%、至少10%、至少20%或至少40%的構架。
在不希望受理論束縛的情況下，基於對葡萄糖反應性趨勢之觀測，咸信存在與FF式（其與芳族含硼基團結合）中胺基相鄰的羰基或離胺基少於兩個碳中心遠的羰基經由影響經由血漿蛋白相互作用（諸如與白蛋白）斷開原料藥活性的能力來增強葡萄糖反應性，且此與葡萄糖親和力無關，因此葡萄糖親和力不受該羰基之位置的影響。
在不希望受理論束縛的情況下，咸信分子之藥物動力學及潛在白蛋白或血液蛋白結合受該羰基之位置的影響，且藉此增強整體葡萄糖反應性，同時使絕對葡萄糖親和力保持或幾乎相同。因此，在本發明之某些實施例中，羰基（作為FF式中與X之酸、醯胺或鍵之部分）位於離含硼化合物所結合之兩個胺中之一者少於三個或少於兩個碳中心內。在某些實施例中，胺在彼此之兩個碳中心內的位置使得能夠對芳族含硼基團進行空間及幾何約束以增強葡萄糖結合及選擇性，且此外，離兩個胺（其與芳族含硼基團連接）中之一者少於兩個碳中心內之羰基（例如作為醯胺鍵之部分）之存在確保不同的白蛋白結合，其方式使得化合物在血液中及體內展現出葡萄糖反應性。在一些實施例中，與芳族含硼基團結合之兩個胺的幾何約束的組合，以及離一個胺的一至兩個碳中心內之羰基的存在提供了對生理血液及血漿葡萄糖含量中之葡萄糖反應性的必要要求。
在不希望受理論束縛的情況下，基於葡萄糖反應性傾向之觀測，咸信間接連接子與Z1c之相互作用有助於進一步增強葡萄糖反應性。舉例而言，可在一些實施例中產生增強之葡萄糖反應性，其中Z1c係選自FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D，B1及B2由F2表示，其中剩餘R1中之各者為H，且其中間接連接子係選自相對疏水性胺基酸或含有選自FL3、FL20-22、FL25、FL27-28、FL30-33、FL35、FL37、FL41、FL43、FL45-70之相對疏水性分子（例如，連接子）。舉例而言，可在一些實施例中產生增強之葡萄糖反應性，其中Z1c係選自FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D，B1及B2由F2表示，其中剩餘R1中之一者為CF 3且剩餘R1為H，且其中間接連接子係選自親水性胺基酸或含有選自FL5、FL5A、FL5B、FL23-24、FL26、FL29、FL34、FL36、FL38-40及FL42之親水性分子（例如，連接子）。
在不希望受理論束縛的情況下，在一些實施例中，在3至10 mM、4至10 mM、3至20 mM或4至20 mM葡萄糖之生理範圍內的葡萄糖反應性藉由以下進一步增強：（i）相對疏水性間接連接子（例如，FL3、FL20-22、FL25、FL27-28、FL30-33、FL35、FL37、FL41、FL43-70）及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中所有剩餘R1為H）之組合，或（ii）相對親水性間接連接子（例如，FL5、FL5A、FL5B、FL23-24、FL26、FL29、FL34、FL36、FL38-40、FL42）及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中剩餘R1中之一者為CF3）之組合。
在不希望受理論束縛的情況下，在一些實施例中，在3至10 mM、4至10 mM、3至20 mM或4至20 mM葡萄糖之生理範圍內的葡萄糖反應性藉由以下進一步增強：（i）相對疏水性間接連接子及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中所有剩餘R1為H，其中胰島素中之至少三個或至少四個離胺酸殘基結合至Z1c）之組合，或（ii）相對親水性間接連接子及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中剩餘R1中之一者為CF3，且其中胰島素中之至少兩個或至少三個離胺酸殘基結合至Z1c）之組合。
在不希望受理論束縛的情況下，在一些實施例中，經由選擇選自以下的間接連接子與Z1c之組合增強葡萄糖反應性：（i）相對疏水性間接連接子及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中所有剩餘R1為H）之組合，或（ii）相對親水性間接連接子及Z1c（其中B1及B2皆係選自F2，其中剩餘R1中之一者為CF3且剩餘R1為H）之組合。
在不希望受理論束縛的情況下，在一些實施例中，經由選擇選自以下的間接連接子與Z1c之組合增強葡萄糖反應性：（i）相對疏水性間接連接子及Z1C（其選自FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D，其中B1及B2皆係選自F2，其中所有剩餘R1為H）之組合，或（ii）相對親水性間接連接子及Z1c（其選自FF12、FF12A-D、FF116、FF116A-D，其中B1及B2皆係選自F2，其中剩餘R 1中之一者為CF 3且剩餘R1為H）之組合。
關於具有與式FF12、FF12A-D、FF114、FF115、FF116、FF116A-D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226中之一者結合之離胺酸殘基之胰島素的基於細胞之分析實驗表明，當一或多個離胺酸殘基如式I描述使用式FF12、FF12A-D、FF114、FF115、FF116、FF116A-D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226中之一者修飾，且其中離胺酸殘基存在於胰島素（以插入或突變形式）中或附接至胰島素之B鏈之N端或C端或胰島素之A鏈之C端的多肽中，且其中胰島素序列內存在經類似修飾之額外離胺酸殘基時，胰島素之增強葡萄糖反應性增加。藉由在STZ糖尿病小鼠模型中測試式I化合物進一步證實該等結果，其中經由彈丸注射式I化合物，隨後進行葡萄糖刺激及血糖量測，或經由葡萄糖鉗夾分析來量測胰島素之活性，其中胰島素的活性量測為血糖含量的函數。結果進一步表明，本文所揭示之例示性式I化合物在體內起作用且對血糖之生理變化起反應且回應於血糖含量之變化而在體內提供動態胰島素作用。在某些實施例中，附接至胰島素之B鏈之N端的多肽之N端附近的一或多個離胺酸殘基，以及胰島素之B鏈中之至少一個額外離胺酸如式IC所描述結合。
在某些實施例中，將序列附接至N端及/或C端，及/或插入至胰島素A鏈之序列中，其中胰島素之A鏈包含以下序列中之一者，視情況具有至多四個額外缺失及/或突變： GIVEQCCTSICSLYQLENYCN (SEQ ID NO: 1)； GIVEQCCTSICSLYQLENYCGK (SEQ ID NO: 25)； GIVEQCCTSICSLYQLENYCG (SEQ ID NO: 24051)； GIVEQCCTSICSLEQLENYCG (SEQ ID NO: 24052)； 及/或將序列附接至N端及/或C端，及/或插入至胰島素之B鏈之序列中，其中胰島素之B鏈包含以下序列中之一者，且視情況具有至多四個額外缺失及/或突變： KFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPKT (SEQ ID NO: 24060)； KGSHFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR (SEQ ID NO: 24061)； KGSHQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR (SEQ ID NO: 24062)； KGSHKQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR (SEQ ID NO: 24063)； GKPGGGGSGGGGSGGGGSFVNQHLCGSHLVEALYLVCGDRGFFYTPK (SEQ ID NO: 24064)； KFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRPT  (SEQ ID NO: 25000)； KFVGQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRPT  (SEQ ID NO: 25001)； KHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRPT  (SEQ ID NO: 25002)； KFVNQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRP  (SEQ ID NO: 25003)； KFVGQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRP  (SEQ ID NO: 25004)； KHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTRP  (SEQ ID NO: 25005)； KFVSQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR  (SEQ ID NO: 25006)； KFVTQHLCGSHLVEALYLVCGKRGFFYTPR  (SEQ ID NO: 25007)； 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無
無
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Claims (60)

  1. 一種由式I表示之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： ， （式 I ）其中： X1包含 i.    包含胺之原料藥； ii.   經組態以共價結合至原料藥之胺；或 iii.  NH 2或OH； 各Z1a獨立地包含使用醯胺或肽鍵連接在一起之1至50個胺基酸； 各Z1b獨立地為小分子連接子； 各Z1c獨立地選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226；其中各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH； 各m'為0或1； 各n'為0； 各o'為1； 各p'為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；且 各q'為1、2、3、4或5，其中當p'或q'為2或更大時，各對應Z1c經獨立地選擇且可相同或不同，且其中當q'為2或更大時，各對應Z1a經獨立地選擇且可相同或不同； 當m'=0且n'=0時，各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH，且對於m'=1，各Z1a經由醯胺或肽鍵共價結合至X1且各Z1c直接地或經由間接連接子共價結合至Z1a之胺或共價結合至X1； 且 其中式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226為： ， 其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺的共價連接點；且其中B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團；且 其中該式I化合物之一或多個位置可包含同位素。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中 至少一個Z1c經由該間接連接子共價結合至X1之胺或當X1為NH 2時共價結合至NH 2或當X1為OH時共價結合至OH或共價結合至Z1a之胺， 該間接連接子由式(X'') n1表示，其中 各n1獨立地選自1、2、3、4及5，且 各X''獨立地選自： i.    L-胺基酸或D-胺基酸，其中該L-胺基酸或該D-胺基酸之胺官能基直接地或間接地共價結合至Z1c，且該L-胺基酸或該D-胺基酸之酸官能基直接地或間接地結合至X1或Z1a；及 ii.   式FL(IA)、FL(IB)、FL69及FL70； 其中式FL(IA)及FL(IB)為： ，及其立體異構物； 其中： G係選自3至6員環烷基、3至10員雜環基、雜芳基及芳基，其中各基團視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代：羥基、胺基、鹵素、(C 3-C 6)環烷基、烷氧基及C 1-C 6烷基； E不存在或為視情況經1至3個獨立地選自以下之基團取代的伸烷基：鹵素、羥基及胺基； Q不存在或係選自氫、C 1-C 6烷基、鹵基、氰基、烷氧基、羧酸、胺基、羥基、醯胺、C 1-C 6鹵烷基、(C 3-C 6)環烷基、雜環、雜芳基及芳基，其中該烷基、該烷氧基、該環烷基、該雜環、該雜芳基及該芳基各自視情況經1至5個獨立地選自以下之基團取代：C 1-C 6烷基、胺基、醯胺、鹵基、羥基、氰基、C 1-C 6鹵烷基及烷氧基； Q'係選自氫、C 1-C 6烷基及醯基； Q及Q'與其所連接之碳及氮原子一起視情況形成4員雜環基、5員雜環基、6元雜環基、9員雙環雜環基或10員雙環雜環基，其中該4員雜環基、該5員雜環基、該6員雜環基、該9員雙環雜環基及該10員雙環雜環基各自視情況經1至5獨立地選自以下之基團取代：C 1-C 6烷基、胺基、鹵基、羥基、氰基、醯胺、C 1-C 6鹵烷基及烷氧基； p為0、1、2、3、4或5； q為0、1、2、3、4或5； R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵；且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化； 其中式FL69及FL70為： ，及其立體異構物；其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、C 1-C 6烷基、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、(C 3-C 6)環烷基、鹵烷基、芳基及雜芳基；且 A''係選自C 1-C 6烷基、經取代之醯基、以酸封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、(C 3-C 6)環烷基、鹵烷基、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
  3. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中式FL(IA)及FL(IB)係選自式FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL68及FL71至FL75： 、及其立體異構物； 其中： p為1、2、3、4或5， q為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
  4. 如請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中n1為1。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係由式IC表示： ， （式 IC ）各p'為1、2、3或4；且 各q'為1、2、3、4或5。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各B 1及B 2獨立地選自式F2、F5及F10， 其中式F2、F5及F10為： ； 其中： 一個R 1表示(C=O)---*或(CH 2)m(C=O)---*，其中---*表示與Z1c之其餘部分的連接點，且m為1、2、3、4、5、6或7；且 各剩餘R 1獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、CH 2-NH 2、NH 2、(C=O)-NH 2、CH=O、SO 2CH 3、SO 2CF 3、CF 3、CHF 2、NO 2、CH 3、OCH 3、O(CH 2) m''CH 3、(SO 2)NH-CH 3、(SO 2)NH(CH 2) m''CH 3及OCF 3，其中m''為1、2、3、4、5、6或7； Y8為O、N或NR，其中R為C 1-C 6烷基或H； Y9為H、CH 3或C 1-C 6烷基，其限制條件為當Y8為O時，該Y9為CH 3或C 1-C 6烷基；且 i為1、2或3。
  7. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中（a）各剩餘R 1獨立地選自（i）H、CF 3及F；或（b）兩個剩餘R 1為H且一個剩餘R 1為CF 3或F。
  8. 如請求項1至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各Z1c共價結合至間接連接子且Z1c及該間接連接子組合中之各者為FFL-1至FFL-101： ，及其立體異構物； 其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺或與Z1a之胺的共價連接點。
  9. 如請求項6或7之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中B 1及B 2各自獨立地為式F2，其中各剩餘R 1獨立地選自H、CF 3及F；其中各Z1c共價結合至間接連接子且Z1c及該間接連接子組合中之各者係選自式FFL-1-4、6-7、9、13-16、20-23、28-29、31-33、39、42-45、48、53、57-58、60-62、65及67： 、及其立體異構物； 其中X表示直接與X1之胺或當X1為NH 2時與NH 2或當X1為OH時與OH或與直接地或間接地共價結合至X1之胺或與Z1a之胺的共價連接點。
  10. 如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X1為包含一或多個各自獨立地直接或經由間接連接子結合至Z1c之離胺酸胺基酸的多肽原料藥。
  11. 如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X1包含多肽人類激素、胰島素受體促效劑、內分泌激素、胰島素、人類胰島素、升糖素、澱粉素、鬆弛素、GLP-1、調酸素、生長抑素、抑胃多肽、葡萄糖依賴性促胰島素多肽、包含來自兩種或更多種人類多肽激素之序列的雜合肽，或其任何類似物。
  12. 如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中該A鏈包含選自SEQ ID NO 1、25、24051及24052之序列，且該B鏈包含選自SEQ ID NO 24060、24061、24062、24063、24064及25000至25397之序列。
  13. 如請求項12之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X1包含具有A鏈及B鏈之胰島素，其中該A鏈包含選自SEQ ID NO 24051及24052之序列，且 其中該B鏈包含選自SEQ ID NO 25095、25229、25232、25236、25305、25308、25312及25380至25397之序列； 各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF116A、FF116B、FF116C及FF116D，且直接地或經由該間接連接子共價結合至X1中之一或多個離胺酸殘基； B 1及B 2各自獨立地為式F2；且 該間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL20至FL75及其立體異構物。
  14. 如請求項11之化合物，其中該化合物係選自： 實例1（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25398及25399）： ， 實例2（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25400及25401）： ， 實例3（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25402及25403）： ， 實例4（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25404及25405）： ， 實例5（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25406及25407）： ， 實例6（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25408及25409）： ， 實例7（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25410及25411）： ， 實例8（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25412及25413）： ， 實例9（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25414及25415）： ， 實例11（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25418及25419）： ， 實例12（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25420及25421）： ， 實例13（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25422及25423）： ， 實例14（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25424及25425）： ， 實例15（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25426及25427）： ， 實例16（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25428及25429）： ， 實例17（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25430及25431）： ， 實例18（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25432及25433）： ， 實例19（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25434及25435）： ， 實例20（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25436及25437）： ， 實例21（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25438及25439）： ， 實例22（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25422及25423）： ， 實例23（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25440及25441）： ， 實例24（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25442及25443）： ， 實例26（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25446及25447）： ， 實例27（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25448及25449）： ， 實例28（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25450及25451）： ， 實例29（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25452及25453）： ， 實例30（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25454及25455）： ， 實例31（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25456及25457）： ， 實例32（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25458及25459）： ， 實例33（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25460及25461）： ， 實例34（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25462及25463）： ， 實例35（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25464及25465）： , 實例36（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25466及25467）： ， 實例37（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25468及25469）： ， 實例38（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25470及25471）： ， 實例39（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25472及25473）： ， 實例40（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25474及25475）： ， 實例41（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25476及25477）： ， 實例42（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25478及25479）： ， 實例43（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25480及25481）： ， 實例44（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25482及25483）： ， 實例45（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25484及25485）： ， 實例46（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25486及25487）： ， 實例47（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25488及25489）： ， 實例48（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25490及25491）： ， 實例49（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25492及25493）： ， 實例50（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25494及25495）： ， 實例51（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25496及25497）： ， 實例52（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25498及25499）： ， 實例53（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25500及25501）： ， 實例54（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25502及25503）： ， 實例55（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25504及25505）： ， 實例56（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25506及25507）： ， 實例57（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25508及25509）： ， 實例58（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25510及25511）： ， 實例59（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25512及25513）： ， 實例60（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25514及25515）： ， 實例61（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25480及25481）： ， 實例62（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25516及25517）： ， 實例63（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25518及25519）： ， 實例64（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25520及25521）： ， 實例65（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25522及25523）： ， 實例66（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25524及25525）： ， 實例67（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25526及25527）： ， 實例68（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25528及25529）： ， 實例69（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25530及25531）： ， 實例70（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25532及25533）： ， 實例71（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25534及25535）： ， 實例72（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25536及25537）： ， 實例73（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25538及25539）： ， 實例74（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25540及25541）： ， 實例75（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25542及25543）： ， 實例76（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25544及25545）： ， 實例77（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25546及25547）： ， 實例78（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25548及25549）： ， 實例79（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25550及25551）： ， 實例80（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25552及25553）： ， 實例81（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25554及25555）： ， 實例82（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25556及25557）： ， 實例83（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25558及25559）： ， 實例84（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25560及25561）： ， 實例85（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25562及25563）： ， 實例86（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25564及25565）： ， 實例87（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25566及25567）： ， 實例88（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25568及25569）： ， 實例89（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25570及25571）： ， 實例90（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25572及25573）： ， 實例91（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25574及25575）： ， 實例92（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25576及25577）： ， 實例93（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25578及25579）： ， 實例94（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25580及25581）： ， 實例95（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25582及25583）： ， 實例96（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25584及25585）： ， 實例97（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25586及25587）： ， 實例98（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25588及25589）： ， 實例99（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25590及25591）： ， 實例100（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25592及25593）： ， 實例101（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25594及25595）： ， 實例102（按出現順序分別為SEQ 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25644及25645）： ， 實例127（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25646及25647）： ， 實例128（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25648及25649）： ， 實例129（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25650及25651）： ， 實例130（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25652及25653）： ， 實例131（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25654及25655）： ， 實例132（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25656及25657）： ， 實例133（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25658及25659）： ， 實例134（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25660及25661）： ， 實例135（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25662及25663）： ， 實例136（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25664及25665）： ， 實例137（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25666及25667）： ， 實例138（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25668及25669）： ， 實例139（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25670及25671）： ， 實例140（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25672及25673）： ， 實例141（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25674及25675）： ， 實例142（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25676及25677）： ， 實例143（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25678及25679）： ， 實例144（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25680及25681）： ， 實例145（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25682及25683）： ， 實例146（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25684及25685）： ， 實例147（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25686及25687）： ， 實例148（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25688及25689）： ， 實例149（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25690及25691）： ， 實例150（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25692及25693）： ， 實例151（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25694及25695）： ， 實例152（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25696及25697）： ， 實例153（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25698及25699）： ， 實例154（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25700及25701）： ， 實例155（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25702及25703）： ，及 實例156（按出現順序分別為SEQ ID NOS 25704及25705）： ；或 其醫藥學上可接受之鹽、其同位素及其組合。
  15. 一種化合物，其選自由包含A鏈及B鏈之胰島素組成之群，其中該A鏈包含選自24501及24502之序列；且其中該B鏈包含選自SEQ ID NO 25229、25232、25305、25308、25312、25236、25095及25380至25397之序列。
  16. 一種醫藥組合物，其包含至少一種如請求項1至15中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
  17. 如請求項1至15中任一項之化合物，其用作藥劑。
  18. 一種治療或預防糖尿病、葡萄糖耐量異常、高血糖症或代謝症候群之方法，其中該方法包含向有需要之個體投與如請求項1至15中任一項之化合物或如請求項16之醫藥組合物。
  19. 如請求項4之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各該間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B、FL32、FL41、FL62、FL63及其立體異構物。
  20. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該B 1及該B 2各自獨立地為式F2，且各剩餘R 1獨立地選自H、F、CL、I、Br及CF 3。
  21. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該B 1及該B 2各自獨立地為式F2，且各剩餘R 1為H。
  22. 如請求項2至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中： X1包含至少一個離胺酸及N端； 各Z1c獨立地選自FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF116、FF116A、FF116B、FF116C及FF116D，其中各B 1及B 2為F2； 各Z1c直接地或經由該間接連接子結合至X1中之離胺酸中之胺側鏈或X1中之N端；且 各間接連接子獨立地選自FL3、FL5、FL5A、FL5B及FL20至FL75，及其立體異構物，其中在FL3及FL5中，各p獨立地為1、2或3。
  23. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中至少一個Z1c經由該間接連接子結合至該B鏈中之離胺酸之胺側鏈或該B鏈N端。
  24. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X1包含兩個或更多個離胺酸胺基酸。
  25. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該B鏈包含至少兩個各自獨立地直接或經由間接連接子結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
  26. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該B鏈包含至少三個各自獨立地經由該間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
  27. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該A鏈包含一或多個各自獨立地直接或經由間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸胺基酸。
  28. 如請求項13之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X1包含具有至少一個經由該間接連接子共價結合至Z1c之離胺酸的A鏈。
  29. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自： ； ； ； ；及 。
  30. 如請求項4或5之化合物，其中至少一個Z1c經由該間接連接子共價結合至X1，且其中各間接連接子獨立地選自 式FL3， 其中p為2或3； 式FL5、FL5A及FL5B， 其中p為1或2；且 ，及其立體異構物； 其中： R''表示與Z1c之直接或間接共價鍵； Z''表示與X1或Z1a之直接或間接共價鍵； A'係選自H、C 1-C 6烷基、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、(C 3-C 6)環烷基、C 1-C 6鹵烷基、芳基及雜芳基；且 A''係選自C 1-C 6烷基、經取代之醯基、以酸基封端之醯基、飽和或不飽和脂肪酸、(C 3-C 6)環烷基、C 1-C 6鹵烷基、芳基及雜芳基； p為1、2、3、4或5，且 任何一級胺視情況經乙醯化或烷基化。
  31. 如請求項30之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各間接連接子係選自： 。
  32. 如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X1為胰島素，其進一步包含1至5個經置換、插入、附加或突變成具有直接地或間接地結合至Z1c之游離胺之胺基酸的殘基。
  33. 如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中至少一個Z1c結合至已在胰島素上經置換、插入或突變之胺基酸的游離胺側鏈。
  34. 如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物直接或經由連接子共價結合至可結合至存在於人類血漿中之至少一種蛋白質的分子。
  35. 如請求項16之醫藥組合物，其中該醫藥組合物包含一或多種多元醇。
  36. 如請求項35之醫藥組合物，其中該等多元醇係選自甘露醇、山梨醇、赤藻糖醇、異麥芽酮糖醇（isomalt）、乳糖醇、葡萄糖及麥芽糖醇。
  37. 一種組合物，其包含至少一種如請求項1至15及19至34中任一項之化合物，其用作用於治療糖尿病或肥胖症、用於控制血糖含量或用於控制藥物之釋放的藥劑。
  38. 一種向個體投與如請求項1至15中任一項之化合物或如請求項16或35至36之醫藥組合物的方法，其中該方法包含向該個體投與該化合物或該組合物作為治療劑或預防劑。
  39. 一種製備如請求項1至15中任一項之化合物的方法，其中該方法包含至少一個烷基化及/或醯胺化步驟。
  40. 一種治療個體之方法，其藉由投與包含如請求項1至15中任一項之化合物的裝置或調配物來進行。
  41. 如請求項1至15中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物用作製造原料藥或治療性或防治性化合物的中間物。
  42. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中在各式F2、F5及F10中，一個R 1為(C=O)---*。
  43. 一種由式II表示之化合物，或其立體異構物或立體異構物之混合物，或醫藥學上可接受之鹽： Z1c-連接子 （式II） 其中該Z1c-連接子係選自： ；其中X係選自脫離基、NH 2及H；且 B 1及B 2可相同或不同，各自獨立地表示芳族含硼基團。
  44. 如請求項43之化合物，其包含至少一個獨立地選自式F2、F5及F10之B 1或B 2， 其中式F2、F5及F10為： ； 其中： 一個R 1表示(C=O)---*或(CH 2)m(C=O)---*，其中---*表示與Z1c之其餘部分的連接點，且m為1、2、3、4、5、6或7；且 各剩餘R 1獨立地選自H、F、Cl、Br、I、OH、CH 2-NH 2、NH 2、(C=O)-NH 2、CH=O、SO 2CH 3、SO 2CF 3、CF 3、CHF 2、NO 2、CH 3、OCH 3、O(CH 2) m''CH 3、(SO 2)NH-CH 3、(SO 2)NH(CH 2) m''CH 3及OCF 3，其中m''為1、2、3、4、5、6或7； Y8為O、N及NR，其中R為C 1-C 6烷基或H； Y9為H、CH 3或C 1-C 6烷基，其限制條件為當Y8為O時，Y9為CH 3或C 1-C 6烷基；且 i為1、2或3。
  45. 如請求項44之化合物，其中該Z1c-連接子係選自： ，或其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合； 其中X為脫離基。
  46. 如請求項45之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X係選自N-氧基丁二醯亞胺（NHS）、2,3,5,6-四氟苯氧基（TFP）、五氟苯氧基（Pfp）、OH、鹵素、順丁烯二醯亞胺烷胺基、順丁烯二醯亞胺醯胺基聚乙二醇胺基及順丁烯二醯亞胺聚乙二醇胺基。
  47. 如請求項46之化合物，其中該化合物係選自： ，或其立體異構物或立體異構物之混合物、醫藥學上可接受之鹽及其組合。
  48. 一種胰島素類似物，其包含A鏈及B鏈，其中該A鏈包含選自24051及24052之序列；且其中該B鏈包含選自25000至25397之序列。
  49. 如請求項48之胰島素類似物，其中該A鏈包含序列24051；且 其中該B鏈包含選自以下之序列：25000、25001、25006至25009、25076、25077、25082至25085、25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。
  50. 如請求項48之胰島素類似物，其中該A鏈包含序列24051；且 其中該B鏈包含選自以下之序列：25011、25012、25017至25020、25087、25088、25093至25096、25229、25239、25232、25240、25245至25248、25305、25308、25315、25316及25321至25324。
  51. 如請求項48之胰島素類似物，其中該A鏈包含序列24051；且 其中該B鏈包含選自以下之序列：25228、25229、25232、25234至25237、25304、25305、25308及25310至25313。
  52. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中在該至少一個Z1c中，B1及B2皆各自獨立地為式F2，其中所有剩餘R1為H；且該間接連接子係選自FL3、FL20-22、FL25、FL27-28、FL30-33、FL35、FL37、FL41、FL43-70，及具有疏水性側鏈之胺基酸。
  53. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中在該至少一個Z1c中，B1及B2皆各自獨立地為式F2，其中剩餘R1中之一者為CF 3且剩餘R1為H；且該間接連接子係選自FL5、FL23-24、FL26、FL29、FL34、FL36、FL38-40、FL42，及具有親水性側鏈之胺基酸。
  54. 如請求項52或53之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該至少一個Z1c係選自FF12、FF12A-D、FF116及FF116A-D。
  55. 一種對胰島素受體具有促效劑效能之化合物，其包含至少一個對胰島素受體具有促效劑效能之芳族含硼基團， 該化合物具有在第一葡萄糖濃度下活化該胰島素受體之第一EC50效能及在第二葡萄糖濃度下活化該胰島素受體之第二EC50效能，其中當該第一葡萄糖濃度為3 mM且該第二葡萄糖濃度為20 mM時，該化合物的該第一EC50與該第二EC50之胰島素受體促效劑效能比率為約2至約25、約2至約20、約2至約15、約2至約10、約2至約10、約2至約9或約2至約8，且 其中該至少一個芳族含硼基團連接至FF支架，且其中該FF支架係選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226。
  56. 一種對葡萄糖具有促效劑效能之化合物，其包含至少一個對葡萄糖具有結合親和力之芳族含硼基團，其中當以30 nmol/kg之劑量向第一葡萄糖輸注速率下之第一組大鼠投與以提供100 mg/dL之血糖濃度且向第二葡萄糖輸注速率下之第二組大鼠投與以提供200 mg/dL之血糖濃度時，該化合物提供約1至約2500、約1至約2000、約1至約1500、約100至約1500及約1000至約1500之相對葡萄糖輸注速率差（mg/kg/min.min），及約0.1至約5、約0.2至約4.5、約0.5至約4、約0.5至約3.5或約1至約3之相對葡萄糖輸注速率比，且 其中該至少一個芳族含硼基團連接至FF支架，且其中該FF支架係選自式FF12、FF12A、FF12B、FF12C、FF12D、FF114、FF114A、FF114B、FF115、FF115A、FF115B、FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF117、FF193A、FF203、FF225、FF225A、FF225B及FF226。
  57. 如請求項55或56之化合物，其中該FF支架係選自 式FF116、FF116A、FF116B、FF116C、FF116D、FF225、FF225A及FF225B。
  58. 一種向個體投與如請求項55至57中任一項之化合物或如請求項16或35至36之醫藥組合物的方法，其中該方法包含向該個體投與該化合物或該組合物作為治療劑或預防劑。
  59. 一種製備如請求項55至57中任一項之化合物的方法，其中該方法包含至少一個烷基化及/或醯胺化步驟。
  60. 一種治療個體之方法，其藉由投與包含如請求項55至57中任一項之化合物的裝置或調配物來進行。
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