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TW202304507A - 含有抗ｍｕｃ１６ｘ抗ｃｄ３雙特異性抗體之穩定調配物 - Google Patents

含有抗ｍｕｃ１６ｘ抗ｃｄ３雙特異性抗體之穩定調配物 Download PDF

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TW202304507A
TW202304507A TW111112453A TW111112453A TW202304507A TW 202304507 A TW202304507 A TW 202304507A TW 111112453 A TW111112453 A TW 111112453A TW 111112453 A TW111112453 A TW 111112453A TW 202304507 A TW202304507 A TW 202304507A
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TW
Taiwan
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seq
pharmaceutical formulation
amino acid
acid sequence
binding domain
Prior art date
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TW111112453A
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道格拉斯 卡曼
楊登傑
徐曉濱
海波 邱
肯尼士 格拉漢
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美商再生元醫藥公司
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Abstract

本發明提供穩定液體藥物調配物，其包含特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類雙特異性抗體。在某些實施例中，該等調配物除該雙特異性抗體之外亦含有緩衝液、界面活性劑及糖。本發明之藥物調配物在應力及儲存時展現出相當程度的抗體穩定性。

Description

含有抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之穩定調配物
參考序列表
本申請案藉由引用以電腦可讀形式提交之檔案名為10820WO01-Sequence.txt之序列表之方式併入，該檔案創建於2022年3月4且含有25,356位元組。
本發明係關於治療性抗體調配物之領域。更具體而言，本發明係關於包含特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類雙特異性抗體之藥物調配物的領域。
治療性大分子（例如抗體）必須以不僅使分子適於投予患者，且亦在儲存及後續使用期間維持其穩定性的方式調配。舉例而言，除非適當地調配溶液，否則液體溶液中之治療性抗體易於發生降解、聚集及/或非所需之化學改質。液體調配物中之抗體之穩定性不僅視調配物中所使用之賦形劑之種類而定，且亦視賦形劑相對於彼此之量及比例而定。此外，當製備液體抗體調配物時，除穩定性之外，亦必須考慮其他考慮因素。此類額外考慮因素之實例包括可藉由給定調配物調節之抗體之濃度及調配物之視覺品質或外觀。因此，當調配治療性抗體時，必須格外小心以獲得保持穩定、含有足夠濃度之抗體且具有使得調配物能夠方便地投予至患者之其他特性的調配物。
黏蛋白16（MUC16），亦稱為癌症抗原125、癌抗原125、碳水化合物抗原125或CA-125，為單一跨膜域高度糖基化整合膜醣蛋白，其在卵巢癌中高度表現。CD3係在與T細胞受體複合物（TCR）結合之T細胞上表現之同源二聚抗原或異源二聚抗原，且為T細胞活化所需。
針對人類MUC16及人類CD3之雙特異性抗體係需要適當調配之治療相關大分子的一個實例。此類抗體在臨床上適用於例如治療癌症（例如表現MUC16之癌症、卵巢癌、乳癌、胰臟癌及非小細胞肺癌）。
儘管抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為此項技術中已知（參見例如WO 2018/067331），但仍需要包含抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之藥物調配物，其足夠穩定且適用於向患者投予。
提供包含雙特異性抗MUC16×抗CD3抗體及一或多種賦形劑之穩定液體藥物調配物，以及包含此類調配物及其用途之套組、單位劑型及容器。
在一個態樣中，本發明提供一種穩定液體藥物調配物，其包含：（a）雙特異性抗體，其包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列；（b）包含醋酸鈉之緩衝液；（c）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及（d）包含糖之穩定劑；其中調配物之pH值為5.0 ± 0.5。
在一些情況下，抗體濃度為1 mg/ml ± 0.1 mg/ml至200 mg/ml±20 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為5 mg/ml ± 0.5 mg/ml至50 mg/ml ± 5 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為5 mg/ml ± 0.5 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為50 mg/ml ± 5 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為150 mg/ml ± 15 mg/ml。
在一些情況下，醋酸鹽緩衝液濃度為10 mM ± 1 mM至50 mM ± 5 mM。在一些情況下，醋酸鹽緩衝液濃度為25 mM ± 2.5 mM至35 mM ± 3.5 mM。在一些情況下，醋酸鹽緩衝液濃度為30 mM ± 3 mM。
在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.01% ± 0.005%至0.5% ± 0.05% w/v。在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.03% w/v。在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.2% ± 0.02% w/v。在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.05% ± 0.01% w/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。
在一些實施例中，糖為蔗糖。在一些情況下，蔗糖濃度為5% ± 1%至20% ± 4% w/v。在一些情況下，蔗糖濃度為7% ± 0.5%至12% ± 0.5% w/v。在一些情況下，蔗糖濃度為10% ± 1% w/v。在一些情況下，蔗糖濃度為7%  ± 0.7% w/v。在一些情況下，蔗糖濃縮為8% ± 0.8% w/v。
在一些實施例中，藥物調配物包含：（a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之抗體，（b）25 mM ± 2 mM至35 mM ± 2 mM之醋酸鹽緩衝液，（c）0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.05% w/v之聚山梨醇酯，及（d）5% ± 1%至15% ± 3% w/v之蔗糖，pH值為5.0 ± 0.5。
在一些實施例中，藥物調配物包含：（a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之抗體；（b）30 mM ± 1 mM之醋酸鹽緩衝液；（c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯；及（d）10% ± 1% w/v蔗糖，pH值為5.0 ± 0.3。
在一些實施例中，藥物調配物包含：（a）50 mg/ml ± 5 mg/ml之抗體，（b）25 mM ± 2 mM至35 mM ± 2 mM之醋酸鹽緩衝液，（c）0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.05% w/v之聚山梨醇酯，及（d）5% ± 1%至15% ± 3% w/v之蔗糖，pH值為5.0 ± 0.5。
在一些實施例中，藥物調配物包含：（a）50 mg/ml ± 0.5 mg/之ml抗體；（b）30 mM ± 1 mM之醋酸鹽緩衝液；（c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯；及（d）10% ± 1% w/v之蔗糖，pH值為5.0 ± 0.3。
在此等實施例中之任一者中，聚山梨醇酯可為聚山梨醇酯20。
在上文所論述之各種實施例中之任一者中，調配物在5℃下儲存12個月或24個月之後含有不超過2.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由尺寸排阻超高效液相層析法（SE-UPLC）所測定。在一些情況下，調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過3.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定。在一些情況下，調配物在-30℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，或在-30℃下儲存24個月之後含有不超過2.0%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定。在一些情況下，調配物在-80℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，或在-30℃下儲存24個月之後含有不超過2.0%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定。
在一個態樣中，本發明提供一種從凍乾物復水（reconstitute）的穩定液體藥物調配物，其包含：（a）濃度為1 mg/ml至30 mg/ml之雙特異性抗體，其中雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列；（b）包含組胺酸之緩衝液；（c）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及（d）包含糖之穩定劑；其中調配物之pH值為6.0 ± 0.5。
在一些情況下，抗體濃度係2 mg/ml ± 0.5 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為20 mg/ml ± 2 mg/ml。在一些情況下，組胺酸緩衝液濃度為5 mM ± 1 mM至15 mM ± 1 mM。在一些情況下，組胺酸緩衝液濃度為10 mM ± 1 mM。在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.01%至0.1% w/v。在一些情況下，聚山梨醇酯濃度為0.05% ± 0.01% w/v。在一些實施例中，聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。在一些實施例中，糖為蔗糖。在某些情況下，蔗糖濃度為8% ± 0.5%至12% ± 0.5% w/v。在一些情況下，蔗糖濃度為10% ± 1% w/v。
在本發明之此態樣之實施例中之任一者中：（a）至少95%之抗體在5℃下儲存12個月之後、18個月之後、24個月之後或36個月之後具有天然構形；（b）至少95%之抗體在25℃及60%相對濕度下儲存6個月後具有天然構形；（c）至少95%之抗體在37℃下儲存3個月之後具有天然構形；（d）調配物在5℃下儲存12個月之後、18個月之後、24個月之後或36個月之後含有不超過1%的高分子量（HMW）物種；（e）調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過1%的HMW物種；或（f）調配物在37℃下儲存3個月之後含有不超過1%的HMW物種；如藉由SE-UPLC所測定。
在一個態樣中，本發明提供一種穩定液體藥物調配物，其包含：（a）濃度為100 mg/ml至200 mg/ml之雙特異性抗體，其中雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列；（b）包含醋酸鹽之緩衝液；（c）包含糖之穩定劑；及（d）包含聚山梨醇酯之界面活性劑，其中調配物之pH值為5.0 ± 0.5。
在一些情況下，抗體濃度為125 mg/ml至175 mg/ml。在一些情況下，抗體濃度為150 mg/ml ± 10 mg/ml。在一些實施例中，糖為蔗糖。在一些情況下，蔗糖濃度為4%至12% w/v。在一些情況下，蔗糖濃度為8% w/v ± 1% w/v。在一些情況下，醋酸鹽緩衝液濃度為25 mM至35 mM。在一些情況下，醋酸鹽緩衝液濃度為30 mM ± 1 mM。在一些情況下，聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。在一些情況下，聚山梨醇酯20濃度為0.01% w/v至0.1% w/v。聚山梨醇酯20濃度為0.05% w/v ± 0.01% w/v。
在本發明之此態樣之實施例中之任一者中：（a）調配物在-30℃或-80℃下儲存12個月之後或24個月之後含有不超過2.5%的高分子量（HMW）物種；（b）調配物在5℃下儲存6個月之後含有不超過4%的HMW物種；或（c）調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過6%的HMW物種；如藉由SE-UPLC所測定。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，調配物含有不超過40%、不超過39%、不超過38%、亦不超過37%、亦不超過36%或不超過35%之糖化物種變異體，其中該糖化物種變異體包含在SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 4之殘基98處、或SEQ ID NO: 9之殘基2處的糖化。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少90%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少90一致性的LCVR，且第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少90%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少90一致性的LCVR。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少95%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少95%一致性的LCVR，且第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少95%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少95%一致性的LCVR。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少99%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少99%一致性的LCVR，且第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少99%一致性的LCVR。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR。
在一個態樣中，本發明提供一種穩定藥物調配物，其包含：（a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2；（c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（d）10% ± 1% w/v之蔗糖。
在一個態樣中，本發明提供一種穩定藥物調配物，其包含：（a）50 mg/ml ± 5 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2；（c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（d）10% ± 1% w/v之蔗糖。
在一個態樣中，本發明提供一種穩定藥物調配物，其包含：（a）150 mg/ml ± 15 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2；（c）0.05% ± 0.01% w/v之聚山梨醇酯20；及（d）8% ± 1% w/v之蔗糖。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，抗體包含分別附接至第一抗原結合域及第二抗原結合域中之每一者之HCVR的人類IgG重鏈恆定區。在一些情況下，重鏈恆定區係同型IgG1。在一些情況下，重鏈恆定區係同型IgG4。
在一些實施例中，附接至第一抗原結合域之HCVR之重鏈恆定區或附接至第二抗原結合域之HCVR之重鏈恆定區，但兩者並非同時，含有相對於未經修飾之相同同型之重鏈減少蛋白質A結合的胺基酸修飾。在一些情況下，所述修飾包含在同型IgG1或IgG4之重鏈中的H435R取代（EU編號）。在一些情況下，所述修飾包含在同型IgG1或IgG4之重鏈中的H435R取代及Y436F取代（EU編號）。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，抗體包含重鏈恆定區，該重鏈恆定區包含選自由SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及SEQ ID NO: 19組成之群組之胺基酸序列。在一些實施例中，抗體包含：包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之重鏈恆定區及包含SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之重鏈恆定區。在一些實施例中，抗體包含：包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之重鏈恆定區及包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列之重鏈恆定區。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，抗體包含含有第一抗原結合域之HCVR之第一重鏈及含有第二抗原結合域之HCVR之第二重鏈，其中第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列的殘基1至442，且第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列的殘基1至449。在一些實施例中，抗體包含含有第一及第二抗原結合域之LCVR的共同輕鏈，其中共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列。
在上文或本文中所論述之各種實施例中之任一者中，藥物調配物可藉由量測「糖化物種」之百分比變化而認定係穩定的，其中糖化物種之百分比變化係：（i）在5℃下儲存6個月之後不超過1.5%；（ii）在5℃下儲存12個月之後不超過3%；（iii）在-30℃下儲存12個月之後、18個月之後或24個月之後不超過1.5%；或在-80℃下儲存12個月之後、18個月之後或24個月之後不超過1%，如藉由陽離子交換超高效液相層析法（CEX-UPLC）及/或藉由液相層析-質譜法（LC-MS）所測定。
在一個態樣中，本發明提供一種藥物組成物，其中該組成物包含如上文或本文中所論述之藥物調配物，且該組成物容納於容器中。
在一些實施例中，容器為小瓶。在一些情況下，小瓶為2 ml、5 ml或10 ml之1型透明玻璃小瓶。在一些實施例中，容器為注射器。在一些情況下，注射器為低鎢玻璃。在一些實施例中，容器為預填充注射器。在一些實施例中，藥物組成物容納於自動注射器中。
在一個態樣中，本發明提供一種套組，其包含（i）裝有包含如上文或本文中所論述之藥物調配物之組成物的容器，以及使用該組成物的說明書。
在一些實施例中，容器為玻璃小瓶。在一些實施例中，容器為預填充注射器。在一些實施例中，容器為自動注射器。
在一些實施例中，說明書敍述組成物之皮下投予。在一些實施例中，說明書列舉組成物之靜脈內投予。
在一個態樣中，本發明提供一種包含如上文或本文中所論述之藥物調配物的單位劑型，其中抗體以0.1 mg至500 mg之量存在。在一些情況下，抗體以5 ± 1 mg至50 ± 5 mg之量存在。在一些情況下，抗體以10 ± 1 mg至200 ± 20 mg之量存在。在一些實施例中，抗體以4 mg、5 mg、10 mg、12.5 mg、40 mg、50 mg、150 mg或180 mg之量存在。
在一些實施例中，單位劑型為玻璃小瓶、預填充注射器或自動注射器。
在一個態樣中，本發明提供一種容器，其含有包含如上文或本文中所論述之藥物調配物的組成物。在各種實施例中，容器為玻璃小瓶、預填充注射器或自動注射器。
在各種實施例中，上文或本文中所論述之實施例之特徵或組分中之任一者可組合，且此類組合涵蓋在本發明之範疇內。上文或本文中所論述之任何具體值可與上文或本文中所論述之另一相關值組合以列舉範圍，其中該等值表示該範圍之上端及下端，且此類範圍及屬於此類範圍內之所有值均涵蓋於本發明之範疇內。上文或本文中所論述之值中之每一者可表示為具有1%、5%、10%或20%之變化。舉例而言，10 mM濃度可表示為10 mM ± 0.1 mM（1%變化）、10 mM ± 0.5 mM（5%變化）、10 mM ± 1 mM（10%變化）或10 mM ± 2 mM（20%變化）。
其他實施例將由隨後實施方式之綜述變得顯而易見。
在描述本發明之前，應理解本發明不限於所描述之特定方法及實驗條件，因而方法及條件可改變。亦應理解，本文所使用之術語是僅出於描述特定實施例的目的而並不意欲為限制性的，因為本發明之範疇將僅由隨附申請專利範圍限制。
除非另外定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語均具有與本發明所屬領域中之一般熟習此項技術者通常所理解之含義相同之含義。如本文所使用，當關於特定敍述數值或值範圍使用時，術語「約」意謂值自敍述值之變化可不超過1%。舉例而言，如本文所使用，表述「約100」包括99及101及其之間的所有值（例如99.1、99.2、99.3、99.4等）。
儘管類似或等效於本文所描述之方法及物質之任何方法及物質可以用於本發明之實踐或測試中，但現描述例示性方法及物質。本說明書中所提及之所有專利、申請案及非專利出版物均以全文引用之方式併入本文中。 藥物調配物
如本文所使用，表述「藥物調配物」意謂至少一種活性成分（例如雙特異性抗MUC16×抗CD3抗體，其能夠在人類或非人類動物中發揮生物作用）與至少一種非活性成分之組合，該非活性成分在與活性成分及/或一或多種額外非活性成分組合時適用於治療性投予至人類或非人類動物。除非另外具體指示，否則如本文所使用之術語「調配物」意謂「藥物調配物」。本發明提供包含至少一種治療性多肽之藥物調配物。根據本發明之某些實施例，治療性多肽係特異性結合於人類MUC16及人類CD3或其抗原結合片段的雙特異性抗體。更具體而言，本發明特別包括藥物調配物，其包含：（i）特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類雙特異性抗體；（ii）包含醋酸鹽之緩衝液；（iii）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及（iv）包含糖之穩定劑。若額外組分並不顯著地干擾調配物之穩定性，則額外組分可包括於本發明之調配物中。下文詳細描述本發明內所包括之具體例示性組分及調配物。
在某些實施例中，本發明之藥物調配物可為流體調配物。如本文所使用，表述「流體調配物」意謂在約2℃至約45℃下主要以流體狀態存在之至少兩種組分之混合物。流體調配物尤其包括液體調配物。流體調配物可視其特定成分而具有低黏度、中等黏度或高黏度。 特異性結合於人類 MUC16 及人類 CD3 之雙特異性抗體
本發明之藥物調配物可包含特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類雙特異性抗體或其抗原結合片段。
如本文所使用，術語「抗體」，其包括「雙特異性抗體」，通常意指包含藉由雙硫鍵互連之四個多肽鏈、兩個重（H）鏈及兩個輕（L）鏈之免疫球蛋白分子以及其多聚體（例如IgM）；然而，在術語「抗體」之定義內亦涵蓋僅由重鏈組成（亦即缺乏輕鏈）之免疫球蛋白分子。各重鏈包含重鏈可變區（在本文中縮寫為HCVR或VH）及重鏈恆定區。重鏈恆定區包含三個域，CH1、CH2及CH3。各輕鏈包含輕鏈可變區（在本文中縮寫為LCVR或VL）及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區包含一個域（CL1）。VH及VL區可以進一步細分成高度變異區，該高度變異區稱為互補決定區（CDR），穿插有稱為骨架區（FR）之更保守區。各VH及VL係由自胺基末端至羧基末端按以下順序排列之三個CDR及四個FR構成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
在本發明之某些實施例中，本發明之抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為人類抗體。如本文所使用，術語「人類抗體」意欲包括具有來源於人類生殖系免疫球蛋白序列之可變區及恆定區之抗體。本發明之人類抗體可包括例如CDR特別是CDR3中之不由人類生殖系免疫球蛋白序列編碼之胺基酸殘基（例如藉由活體外隨機或位點特異性突變誘發或藉由活體內體細胞突變引入之突變）。然而，如本文所使用，術語「人類抗體」不意指包括其中來源於諸如小鼠之另一哺乳動物物種之生殖系之CDR序列已移植至人類框架序列上的抗體。在各種實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為人類IgG抗體。在各種實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為同型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或混合同型之人類抗體。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為人類IgG1抗體（即，該抗體包含分別附接至第一抗原結合域及第二抗原結合域中之每一者之HCVR的人類IgG1重鏈恆定區）。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體為人類IgG4抗體（即，該抗體包含分別附接至第一抗原結合域及第二抗原結合域中之每一者之HCVR的人類IgG4重鏈恆定區）。在上文或本文中所論述之實施例中之任一者中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體可包含人類κ輕鏈。在上文或本文中所論述之實施例中之任一者中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體可包含人類λ輕鏈。
在任何實施例中，雙特異性抗體可在一條或兩條重鏈中包括修飾以促進自同源二聚體雜質中純化雙特異性抗體（即，異二聚體）。在一些實施例中，雙特異性抗體包括相同的第一及第二重鏈（即，抗MUC16結合臂之重鏈及抗CD3結合臂之重鏈）（例如，同型IgG1或IgG4兩者），不同之處在於一條或另一條重鏈之CH3域中存在與缺乏修飾之抗體相比，降低了雙特異性抗體與蛋白質A之結合的修飾。在一些情況下，第一重鏈之CH3域（例如，抗MUC16結合臂之CH3域）結合蛋白質A，且第二重鏈之CH3域（例如，抗CD3結合臂之CH3域）含有減少或消除蛋白質A結合之突變。在一些情況下，突變係H435R修飾（藉由EU編號；藉由IMGT外顯子編號之H95R）。在一些情況下，突變係H435R修飾（藉由EU編號；藉由IMGT外顯子編號之H95R）及Y436F修飾（藉由EU編號；藉由IMGT編號之Y96F）。可發現於第二CH3域內之其他修飾包括：在IgG1 CH3域之情況下，藉由EU（藉由IMGT之D16E、L18M、N44S、K52N、V57M及V82I）之D356E、L358M、N384S、K392N、V397M及V422I；及在IgG4 CH3域之情況下，藉由EU（藉由IMGT之Q15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79Q及V82I）之Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q及V422I。
在任何實施例中，雙特異性抗體可包括嵌合鉸鏈。術語「嵌合鉸鏈」意指包括嵌合蛋白，該嵌合蛋白包含衍生自一個Ig分子之鉸鏈區的第一胺基酸序列及衍生自Ig分子之不同類別或子類別之鉸鏈區的第二胺基酸序列。舉例而言，在實施例中，嵌合鉸鏈包含衍生自人類IgG1鉸鏈區或人類IgG4鉸鏈區的第一胺基酸序列或「上鉸鏈」序列及衍生自人類IgG2鉸鏈區的第二胺基酸序列或「下鉸鏈」序列。在某些實施例中，根據EU編號，第一或「上鉸鏈」序列包含來自216至227位之胺基酸殘基。在一些實施例中，根據EU編號，第二或「下鉸鏈」序列包含來自228至236位之胺基酸殘基。
在一些實施例中，本發明之抗體為重組人類抗體。如本文所使用，術語「重組人類抗體」意指包括藉由重組方式製備、表現、產生或分離之所有人類抗體，諸如使用轉染至宿主細胞中之重組表現載體表現之抗體、自重組組合性人類抗體庫分離之抗體、自具有人類免疫球蛋白基因之轉殖基因之動物（例如小鼠）分離之抗體（參見例如Taylor等人(1992)《核酸研究（Nucl.Acids Res. 20:6287-6295）》或藉由涉及將人類免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列之任何其他方式製備、表現、產生或分離之抗體。此類重組人類抗體具有衍生自人類生殖系免疫球蛋白序列之可變及恆定區。然而，在某些實施例中，此類重組人類抗體可經受活體外突變誘發（或當使用人類Ig序列之轉殖基因動物時，進行活體內體細胞突變誘發），且因此重組抗體之V H及V L區之胺基酸序列雖然衍生自人類生殖系V H及V L序列且與其相關，但可能並非天然存在於活體內之人類抗體生殖系抗體庫內之序列。
如本文所使用，術語抗體之「抗原結合部分」或「抗原結合片段」（或簡言之「抗體部分」或「抗體片段」）係指保持特異性結合於人類MUC16或人類CD3之能力之抗體的一或多個片段。
如本文所使用，「經分離之抗體」意指實質上不含具有不同抗原特異性之其他抗體的抗體（例如特異性結合人類MUC16及人類CD3之經分離之雙特異性抗體實質上不含特異性結合除人類MUC16及人類CD3之外之抗原的抗體）。
術語「特異性結合」或其類似術語意謂抗體或其抗原結合片段與在生理條件下相對穩定之抗原形成複合物。特異性結合之特徵可以在於解離常數為至少約1×10 -6M或更大。用於確定兩個分子是否特異性結合之方法為本技術中熟知的，且包括例如平衡透析、表面電漿子共振及其類似方法。然而，特異性結合人類MUC16及人類CD3之經分離之抗體可與諸如來自其他物種（異種同源物）之MUC16或CD3分子之其他抗原具有交叉反應。在本發明之情形下，結合於人類MUC16及人類CD3之多特異性（例如雙特異性）抗體以及一或多個額外抗原視為「特異性結合」人類MUC16及人類CD3。此外，經分離之抗體可實質上不含其他細胞物質及/或化學物質。
可包括於本發明之藥物調配物中之例示性抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體係描述於WO 2018/067331中，其揭示內容以全文引用之方式併入本文。
根據本發明之某些實施例，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體或其抗原結合片段包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含重鏈互補決定區（CDR）A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3，其分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，且第二抗原結合域包含重鏈CDR A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3，其分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列。根據本發明之某些實施例，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體或其抗原結合片段包含共同（對於第一及第二抗原結合域兩者而言）輕鏈互補決定區LCDR1、LCDR2、LCDR3，其分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列。
在某些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體或其抗原結合片段包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，其中第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的重鏈可變區（HCVR），且第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR。在某些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體或其抗原結合片段包含有包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的共同輕鏈可變區（LCVR）。在某些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體或其抗原結合片段包含：第一抗原結合域，其包含有包含SEQ ID NO: 4/6之胺基酸序列的HCVR/LCVR胺基酸序列對；及第二抗原結合域，其包含有包含SEQ ID NO: 5/6之胺基酸序列的HCVR/LCVR胺基酸序列對。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體包含上述HCVR/LCVR序列對及人類IgG1重鏈恆定區。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體包含上述HCVR/LCVR序列對及人類IgG4重鏈恆定區。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體包含上述HCVR/LCVR序列對及人類IgG重鏈恆定區。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體包含上述HCVR/LCVR序列對及人類IgG1或IgG4重鏈恆定區。在一些實施例中，抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體包含：第一重鏈，其包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列；第二重鏈，其包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列；及共同輕鏈，其包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列。一種具有第一抗原結合域及第二抗原結合域之抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體在本文中稱為mAb1，該第一抗原結合域特異性結合人類MUC16且包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域特異性結合人類CD3且包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR。該抗體具有包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列的第一重鏈（包括特異性結合人類MUC16的HCVR）、包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列的第二重鏈（包括特異性結合人類CD3的HCVR）及包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列的共同輕鏈。在一些情況下，抗體的成熟形式可能不包括SEQ ID NO: 1及2的C端離胺酸殘基。因此，在一些情況下，mAb1之抗MUC16結合臂包含有包含SEQ ID NO: 1之殘基1至442的重鏈，且mAb1之抗CD3結合臂包含有包含SEQ ID NO: 2之殘基1至449的重鏈。
本發明之藥物調配物內所含之抗體或其抗原結合片段之量可視調配物所期望之特定特性以及意欲使用調配物之特定情況及目的而變化。在某些實施例中，藥物調配物可含有約0.1 mg/mL至約500 mg/mL之抗體；約0.5 mg/mL至約400 mg/mL之抗體；約1 mg/mL至約200 mg/mL之抗體；約2 mg/mL至約100 mg/mL；約1 mg/mL至約5 mg/mL之抗體；約10 mg/mL至約30 mg/mL之抗體；約75 mg/mL至約125 mg/mL；約5 mg/mL至約50 mg/mL；約4 mg/ml至約60 mg/ml；或約2 mg/mL至約55 mg/mL之抗體。舉例而言，本發明之調配物可為液體調配物，其包含約0.5 mg/mL；約1 mg/mL；約2 mg/mL；約3 mg/mL；約4 mg/mL；約5 mg/mL；約6 mg/mL；約7 mg/mL；約8 mg/mL；約9 mg/mL；約10 mg/mL；約11 mg/mL；約12 mg/mL；約13 mg/mL；約14 mg/mL；約15 mg/mL；約16 mg/mL；約17 mg/mL；約18 mg/mL；約19 mg/mL；約20 mg/mL；約21 mg/mL；約22 mg/mL；約23 mg/mL；約24 mg/mL；約25 mg/mL；約26 mg/mL；約27 mg/mL；約28 mg/mL；約29 mg/mL；約30 mg/mL；約35 mg/mL；約40 mg/mL；約45 mg/mL；約50 mg/mL；約55 mg/mL；約60 mg/mL；約65 mg/mL；約70 mg/mL；約75 mg/mL；約80 mg/mL；約85 mg/mL；約90 mg/mL；約95 mg/mL；約96 mg/mL；約97 mg/mL；約98 mg/mL；約99 mg/mL；約100 mg/mL；約101 mg/mL；約102 mg/mL；約103 mg/mL；約104 mg/mL；約105 mg/mL；約110 mg/mL；約115 mg/mL；約120 mg/mL；約125 mg/mL；約130 mg/mL；約135 mg/mL；約140 mg/mL；約145 mg/mL；約150 mg/mL；約155 mg/mL；約160 mg/mL；約165 mg/mL；約170 mg/mL；約175 mg/mL；約180 mg/mL；約185 mg/mL；約190 mg/mL；約195 mg/mL；或約200 mg/mL之特異性結合於人類MUC16及人類CD3之抗體或其抗原結合片段。在某些實施例中，藥物調配物為液體調配物，其可含有1 ± 0.1 mg/mL至200 ± 20 mg/mL之抗體；2 ± 0.2 mg/mL至10 ± 1 mg/mL之抗體；1 ± 0.5 mg/mL至30 ± 5 mg/mL之抗體；40 ± 4 mg/mL至60 ± 6 mg/mL之抗體；1 ± 0.1 mg/mL至3 ± 0.3 mg/mL之抗體；3 ± 0.5 mg/mL至7 ± 0.5 mg/mL之抗體；45 ± 1 mg/mL至55 ± 1 mg/mL之抗體；140 ± 5 mg/ml至160 ± 5 mg/ml之抗體；或175 ± 5 mg/mL至185 ± 5 mg/mL之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有5 ± 0.5 mg/mL之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有50 ± 5 mg/mL之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有150 ± 15 mg/ml之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有2 ± 0.2 mg/ml之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有20 ± 2 mg/ml之抗體。在一些實施例中，藥物調配物含有180 ± 10 mg/ml之抗體。 生物等效物
本發明涵蓋具有與本文所揭示之例示性分子之胺基酸序列不同的胺基酸序列但保留結合人類MUC16及人類CD3之能力的抗體。當相比於親本序列時，此類變異體分子可包含胺基酸之一或多個添加、缺失或取代，但展現與本文所論述之抗體之生物活性基本上等效之生物活性。
本發明包括與本文所闡述之例示性抗體中之任一者生物等效之抗原結合分子。舉例而言，若兩種抗體為在類似實驗條件下以相同莫耳劑量（單次劑量或多次劑量）投予時，吸收速率及程度不顯示顯著差異之藥物等效物或藥物替代物時，則該兩種抗體被認定為生物等效的。若一些抗體在其吸收程度方面等效但在其吸收速率方面不等效，則將其視為等效物或藥物替代物，且又可將其視為生物等效的，此係因為吸收速率中之此類差異為既定的且反映在標籤中，對於在例如長期使用方面達到有效主體藥物濃度並非必需的，且對於所研究之特定藥品而言視為醫療上無關緊要的。
在一個實施例中，若兩種抗體在其安全性、純度及效力方面不存在臨床上有意義之差異，則其為生物等效的。
在一個實施例中，若患者可以在參考產品與生物學產品之間轉換一或多次且相比於不具有該轉換之持續療法，不具有預期副作用風險增加，該副作用包括臨床上顯著之免疫原性變化或經減弱之有效性，則兩種抗體為生物等效的。
生物等效性可藉由活體內及活體外方法證實。生物等效性量測包括例如（a）人類或其他哺乳動物中之活體內測試，其中量測血液、血漿、血清或其他生物流體中隨時間而變之抗體或其代謝物的濃度；（b）與人類活體內生物可用性資料相關且合理地預測人類活體內生物可用性資料的活體外測試；（c）人類或其他哺乳動物中之活體內測試，其中量測隨時間而變之抗體（或其目標）之適當急性藥理學作用；及（d）建立抗原結合蛋白之安全性、功效或生物可用性或生物等效性的良好受控之臨床試驗。 調配物賦形劑及 pH 值
本發明之藥物調配物包含一或多種賦形劑。如本文所使用，術語「賦形劑」意謂添加至調配物中以提供期望稠度、黏度或穩定作用之任何非治療劑。
在某些實施例中，本發明之藥物調配物包含一或多種碳水化合物，例如一或多種糖。糖可以為還原糖或非還原糖。「還原糖」包括例如具有酮基或醛基且含有允許糖充當還原劑之反應性半縮醛基之糖。還原糖之具體實例包括果糖、葡萄糖、甘油醛、乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、核糖、鼠李糖、半乳糖及麥芽糖。非還原糖可包含變旋異構碳，該變旋異構碳為縮醛且實質上不與胺基酸或多肽發生起始梅納反應（Maillard reaction）之反應。非還原糖之具體實例包括蔗糖、海藻糖、山梨糖、蔗糖素、松三糖及棉子糖。糖酸包括例如葡萄糖二酸、葡萄糖酸鹽及其他多羥基糖及其鹽。在一些實施例中，糖為蔗糖。在一些情況下，糖（例如蔗糖）充當抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之熱穩定劑。
本發明之藥物調配物內所含之糖（例如蔗糖）之量視使用調配物之具體情況及預期目的而變化。在某些實施例中，調配物可含有約0.1%至約20%糖、約0.5%至約20%糖、約1%至約20%糖、約2%至約15%糖、約5%至約15%糖、約7.5%至約12.5%糖、或約9%至約11%糖。舉例而言，本發明之藥物調配物可包含約0.5%、約1.0%、約1.5%、約2.0%、約2.5%、約3.0%、約3.5%、約4.0%、約4.5%、約5.0%、約5.5%、約6.0%、約6.5%、約7.0%、約7.5%、約8.0%、約8.5%、約9.0%、約9.5%、約10.0%、約10.5%、約11.0%、約11.5%、約12.0%、約12.5%、約13.0%、約13.5%、約14.0%、約14.5%、約15%或約20%糖（例如蔗糖）。在一些實施例中，調配物含有約10%糖（例如蔗糖）。在一些實施例中，調配物含有約5%糖（例如蔗糖）。上述百分比中之各者對應於重量/體積百分比（w/v）。在一些情況下，調配物含有5% ± 1%至20% ± 4% w/v蔗糖。在一些情況下，調配物含有5%至10% w/v蔗糖。在一些情況下，調配物含有8%±  0.5%至12% ± 0.5% w/v蔗糖。在一些情況下，調配物含有10% ± 1% w/v蔗糖。
本發明之藥物調配物亦可包含一或多種有機共溶劑（或界面穩定劑），其類型及量應在諸如回轉式振盪之粗糙處置或攪動條件下使抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體穩定。在一些實施例中，有機共溶劑為界面活性劑。如本文所使用，術語「界面活性劑」意謂降低物質所溶解之流體之表面張力及/或降低油與水之間之界面張力的物質。界面活性劑可以為離子或非離子的。可包括於本發明之調配物中之例示性非離子界面活性劑包括例如烷基聚(環氧乙烷)、烷基多葡糖苷（例如辛基葡糖苷及癸基麥芽糖苷）、諸如鯨蠟醇及油醇之脂肪醇、椰油醯胺MEA、椰油醯胺DEA及椰油醯胺TEA。可包括於本發明之調配物中之特定非離子界面活性劑包括例如聚山梨醇酯，諸如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯28、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯65、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯81及聚山梨醇酯85；泊洛沙姆（poloxamer），諸如泊洛沙姆188（亦稱為Pluronic F68）、泊洛沙姆407；聚乙烯-聚丙二醇；或聚乙二醇（PEG）。聚山梨醇酯20亦稱為TWEEN 20、脫水山梨糖醇單月桂酸酯及聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯。在一些實施例中，界面活性劑為聚山梨醇酯20。
本發明之藥物調配物內所含之界面活性劑之量可視調配物所期望之具體特性以及意欲使用調配物之特定情況及目的而變化。在某些實施例中，調配物可含有約0.01%至約1%之界面活性劑、約0.01%至約0.5%之界面活性劑、約0.1%至約0.3%、約0.15%至約0.25%之界面活性劑、或約0.19%至約0.21%之界面活性劑。舉例而言，本發明之調配物可包含約0.01%、約0.02%、約0.03%、約0.04%、約0.05%、約0.06%、約0.07%、約0.08%、約0.09%、約0.10%、約0.11%、約0.12%、約0.13%、約0.14%、約0.15%、約0.16%、約0.17%、約0.18%、約0.19%、約0.20%、約0.21%、約0.22%、約0.23%、約0.24%、約0.25%、約0.26%、約0.27%、約0.28%、約0.29%、或約0.30%之界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）。在一些實施例中，調配物含有約0.2%之界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）。在一些實施例中，調配物含有約0.05%之界面活性劑（例如聚山梨醇酯20）。上述百分比中之各者對應於重量/體積百分比（w/v）。在一些情況下，調配物含有0.01% ± 0.005%至0.5% ± 0.25% w/v之聚山梨醇酯20。在一些情況下，調配物含有0.2% ± 0.05% w/v之聚山梨醇酯20。在一些情況下，調配物含有0.2% ± 0.01% w/v之聚山梨醇酯20。
本發明之藥物調配物還可包含緩衝液或緩衝液系統，其用以維持穩定的pH值且有助於穩定抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體。在一些實施例中，緩衝液或緩衝液系統包含緩衝範圍完全或部分與pH 4.5至5.5之範圍重疊之至少一種緩衝液。在某些實施例中，緩衝液包含醋酸鹽緩衝液（例如醋酸鈉）。在某些實施例中，緩衝液（例如醋酸鹽）係以約1 mM至約50 mM、約20 mM至約40 mM、約25 mM至約35 mM、約28 mM至約32 mM、或約29 mM至約31 mM之濃度存在。在一些實施例中，緩衝液（例如，醋酸鹽）係以約20 mM、約21 mM、約22 mM、約23 mM、約24 mM、約25 mM、約26 mM、約27 mM、約28 mM、約29 mM、約30 mM、約31 mM、約32 mM、約33 mM、約34 mM、約35 mM、約36 mM、約37 mM、約38 mM、約39 mM、或約40 mM之濃度存在。在一些實施例中，緩衝液為以約1 mM、約2 mM、約3 mM、約4 mM、約5 mM、約6 mM、約7 mM、約8 mM、約9 mM、約10 mM、約11 mM、約12 mM、約13 mM、約14 mM、約15 mM、約16 mM、約17 mM、約18 mM、約19 mM、或約20 mM之濃度存在的組胺酸緩衝液。在一些情況下，調配物含有濃度為5 mM ± 1 mM至15 mM ± 3 mM之組胺酸緩衝液。在一些情況下，調配物含有濃度為10 mM ± 1 mM之組胺酸緩衝液。在一些實施例中，調配物含有醋酸鹽緩衝液（例如，處於上文或本文中所論述之任何濃度）。在一些實施例中，調配物含有磷酸鹽緩衝液（例如，處於上文或本文中所論述之任何濃度）。
在一些實施例中，本發明之藥物調配物亦可包含精胺酸。在一些情況下，精胺酸以1至100 mM之濃度存在。在一些實施例中，精胺酸以25至75 mM之濃度存在。在一些情況下，精胺酸以50 mM ± 5 mM之濃度存在。在一個實施例中，藥物調配物包含pH值為5.0 ± 0.1之30 mM ± 3 mM醋酸鹽、7% ± 0.7% w/v之蔗糖、0.05% ± 0.01% w/v之聚山梨醇酯（例如聚山梨醇酯20）及50 mM ± 5 mM之精胺酸。在一些情況下，抗體以1 mg/ml至200 mg/ml或150 mg/ml ± 10 mg/ml之濃度存在。
在抗體純化過程期間，可能期望或有必要將一種緩衝液交換為另一種，以達成合適的賦形劑濃度、抗體濃度、pH值等。可以例如藉由使用例如半透切向流過濾膜的超過濾/透濾作用（UF/DF）來完成緩衝液交換。然而，使用此類技術有可能引起吉布斯-唐南效應（Gibbs-Donnan effect）（Bolton等人, 2011, 《生物技術進展（Biotechnol. Prog）》27（1）：140-152）。在蛋白質濃縮過程期間，膜的產品側上正電荷之積累藉由正離子偏向膜的另一側移動而在電學上得到平衡。此現象之潛在後果係，由於在UF/DF步驟期間帶正電荷的透濾作用緩衝液賦形劑對帶正電荷的抗體蛋白的靜電排斥，因此某些組分（例如醋酸鹽）之最終濃度可能低於此等組分的預期目標濃度。因此，本發明包括調配物，其中由於吉布斯-唐南效應，例如醋酸鹽之濃度自本文所列舉之量或範圍而變化。
體積排阻描述了高濃度樣品的行為，其中溶液的總體積中有很大一部分被溶質佔據，尤其係大分子，例如蛋白質，從該空間中排除了溶劑。隨後，此減少了可用於溶解其他溶質之溶劑的總體積，這可能會導致超過濾膜分配不均。因此，本發明包括調配物，其中由於體積排阻效應，例如醋酸鹽之濃度可不同於本文所敍述之量或範圍。
在製造本發明之調配物期間，調配物的組成可能發生變化。這些變化可包括活性成分之濃度、賦形劑之濃度及/或調配物之pH值。本發明包括包含抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之調配物，該抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體係穩定的且在賦形劑濃度變化高達至少10%的情況下保留效力。舉例而言，本文包括抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體調配物，其中該調配物之穩定性及效力不受抗體、蔗糖、醋酸鹽緩衝液及/或聚山梨醇酯之濃度的 ± 10%或 ± 20%變化影響。 藥物調配物之穩定性
本發明之藥物調配物展現高水準之穩定性。如本文所使用之關於藥物調配物之術語「穩定」意謂藥物調配物內之抗體在儲存限定時間量之後保留可接受程度之結構及/或功能及/或生物活性。即使調配物中所含之抗體在儲存限定時間量之後不能維持其結構及/或功能及/或生物活性之100%，該調配物亦可為穩定的。在某些情況下，約90%、約95%、約96%、約97%、約98%或約99%之抗體在儲存限定時間量之後之結構及/或功能及/或生物活性的維持可視為「穩定的」。
穩定性可特別藉由測定在給定溫度下儲存限定時間量之後調配物中剩餘之天然抗體的百分比來量測。天然抗體之百分比可尤其藉由尺寸排阻層析法（例如尺寸排阻高效液相層析法[SE-HPLC]）來測定。當本文使用「可接受之穩定度」時，此片語意謂可在給定溫度下儲存限定時間量之後在調配物中偵測到至少90%天然形式之抗體。在某些實施例中，可在給定溫度下儲存限定時間量之後在調配物中偵測到至少約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%天然形式之抗體。量測穩定性之前之限定時間量可為至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月、至少18個月、至少24個月、至少30個月、至少36個月或更長時間。當評定穩定性時藥物調配物可儲存之溫度可為約-80℃至約45℃之任何溫度，例如儲存在約-80℃、約-30℃、約-20℃、約0℃、約4℃至8℃、約5℃、約25℃、約35℃、約37℃或約45℃下。舉例而言，若在5℃下儲存3個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%或97%之天然抗體，則藥物調配物可視為穩定的。若在5℃下儲存6個月後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%或97%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在5℃下儲存9個月後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在5℃下儲存12個月後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在5℃下儲存24個月後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在5℃下儲存36個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在25℃（及視情況60%相對濕度）下儲存3個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在25℃（及視情況60%相對濕度）下儲存6個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在25℃（及視情況60%相對濕度）下儲存9個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%或99.5%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在37℃下儲存3個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、95%、96%或97%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在45℃（及視情況75%相對濕度）下儲存1個月之後，藉由SE-HPLC偵測到大於約90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%或98%之天然抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。
可使用其他方法以評定本發明之調配物之穩定性，諸如用以測定熱穩定性之差示掃描量熱法（DSC）、用以測定機械穩定性之受控攪動及用以測定溶液混濁度之在約350 nm或約405 nm處之吸光度。舉例而言，若在約5℃至約25℃下儲存6個月或更多個月後，本發明之調配物之OD 405相對於t = 0時調配物之OD 405的變化小於約0.05（例如0.04、0.03、0.02、0.01或更小），則調配物可視為穩定的。
量測抗體與其目標之結合親和力亦可用於評定穩定性。舉例而言，若在例如-80℃、-30℃、-20℃、5℃、25℃、37℃、45℃等下儲存限定時間量（例如14天至9個月）後，本發明之調配物內所含之抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體以抗體在該儲存之前之結合親和力的至少80%、85%、90%、95%或更多親和力結合於人類MUC16及人類CD3，則調配物可視為穩定的。結合親和力可藉由諸如ELISA或電漿子共振之任何方法來測定。生物活性可藉由MUC16或CD3活性分析來測定，例如藉由使表現MUC16或CD3之細胞與包含抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之調配物接觸。抗體與此類細胞之結合可諸如經由FACS分析來直接量測。
穩定性可特別藉由測定在限定溫度下儲存限定時間量之後在調配物內形成聚集物之抗體的百分比來量測，其中穩定性與所形成之聚集物（高分子量（HMW）物種）百分比成反比。經聚集之抗體之百分比可尤其藉由尺寸排阻層析法（例如尺寸排阻高效液相層析法[SE-HPLC]或尺寸排阻超高效液相層析法[SE-UPLC]）來測定。如本文所使用之片語「可接受之穩定度」意謂至多6%之抗體呈在給定溫度（最高25℃）下儲存限定時間量之後在調配物中偵測到之聚集形式。在某些實施例中，可接受之穩定度意謂可在給定溫度下儲存限定時間量之後在調配物中之聚集物中偵測到至多約6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%或0.1%之抗體。量測穩定性之前之限定時間量可為至少2週、至少28天、至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月、至少18個月、至少24個月、至少30個月、至少36個月或更長時間。當評定穩定性時藥物調配物可儲存之溫度可為約-80℃至約45℃之任何溫度，例如儲存在約-80℃、約-30℃、約-20℃、約0℃、約4℃至8℃、約5℃、約25℃、約35℃、約37℃或約45℃下。舉例而言，若在5℃下儲存九個月之後，偵測到小於約3%、2.75%、2.5%、2.25%、2%、1.75%、1.5%、1.25%、1%、0.75%、0.5%、0.25%或0.1%呈聚集形式之抗體，則藥物調配物可視為穩定的。在一些情況下，若在5℃下儲存六個月之後，偵測到小於約5%、4.75%、4.5%、4.25%、4%、3.75、3.5%、3.25%、2%或1%呈聚集形式之抗體，則藥物調配物可視為穩定的。若在25℃及60%相對濕度下儲存六個月之後，偵測到小於約6%、5.75%、5.5%、5.25%、5%、4.5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%、1.75%、1.5%、1.25%、1%、0.75%、0.5%、0.25%或0.1%呈聚集形式之抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在37℃下儲存三個月之後，偵測到小於約6%、5.75%、5.5%、5.25%、5%、4.5%、4%、3.5%、3%、2.5%、2%、1.75%、1.5%、1.25%、1%、0.75%、0.5%、0.25%或0.1%呈聚集形式之抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。若在-30℃或-80℃下儲存十二個月之後，偵測到小於約3%、2.75%、2.5%、2.25%、2%、1.9%、1.8%、1.7%、1.6%、1.5%、1%、0.5%或0.1%呈聚集形式之抗體，則藥物調配物亦可視為穩定的。
穩定性特別可藉由測定以糖化物種形式保留的抗體之百分比來量測。抗體之「糖化物種」之百分比可藉由離子交換層析法（例如陽離子交換高效液相層析法[CEX-HPLC]或陽離子交換超高效液相層析法[CEX-UPLC]）及/或藉由LC-MS來測定。如本文所使用之片語「可接受之穩定度」意謂呈「糖化物種」形式之抗體的百分比變化在限定溫度下儲存限定時間量之後不超指定量。在某些實施例中，在給定溫度下儲存限定時間量之後，可接受之穩定度意謂「糖化物種」之百分比變化不超過25%、不超過20%、不超過15%、不超過10%、不超過9%、不超過8%、不超過7%、不超過6%、不超過5%、不超過4%、不超過3%、不超過2.5%、不超過2%、不超過1.5%或不超過1%。量測穩定性之前之限定時間量可為至少2週、至少28天、至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月、至少6個月、至少7個月、至少8個月、至少9個月、至少10個月、至少11個月、至少12個月、至少18個月、至少24個月、至少30個月、至少36個月或更長時間。當評定穩定性時藥物調配物可儲存之溫度可為約-80℃至約45℃之任何溫度，例如儲存在約-80℃、約-30℃、約-20℃、約0℃、約4℃至8℃、約5℃、約25℃或約45℃下。舉例而言，若在-80℃或-30℃下儲存十二個月之後，「糖化物種」之百分比變化不超過5%、不超過4%、不超過3%、不超過2%或不超過1.5%，則藥物調配物可視為穩定的。在另一實例中，若在5℃下儲存六個月之後，「糖化物種」之百分比變化不超過5%、不超過4%、不超過3%、不超過2%或不超過1.5%，則藥物調配物可視為穩定的。在另一實例中，若在5℃下儲存十二個月之後，「糖化物種」之百分比變化不超過5%、不超過4%或不超過3%，則藥物調配物可視為穩定的。在各情況下，可藉由使用陽離子交換超高效液相層析法（CEX-UPLC）及/或藉由LC-MS進行量測。
對「在指定時段之後」藥物調配物之穩定性之參考意謂在特定時段結束時或特定時段大約結束時進行穩定性參數（例如天然形式%、HMW物種%、或酸形式%）量測，但不意謂對於其後所量測之參數，藥物調配物維持相同穩定度。舉例而言，對12個月之後之特定穩定性之參考意謂在研究開始之後12個月時或約12個月時進行穩定性量測。用於評定調配物中之抗體之穩定性的額外方法展示於下文所呈現的實例中。
如下文實例中所說明，本發明部分係基於以下發現：所主張之賦形劑與雙特異性抗MUC16×抗CD3抗體之組合產生穩定之調配物。 例示性調配物
根據本發明之一個態樣，藥物調配物包含：（i）特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體；（ii）包含醋酸鹽（醋酸鈉）之緩衝液；（iii）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及（iv）包含糖之穩定劑。根據另一態樣，藥物調配物包含：（i）特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體；（ii）包含醋酸鹽之緩衝液；（iii）包含糖之穩定劑。根據另一態樣，藥物調配物包含：（i）特異性結合於人類MUC16及人類CD3之人類抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體；（ii）包含組胺酸之緩衝液；（iii）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及（iv）包含糖之穩定劑。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約25 mM至約35 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.1% w/v至約0.3% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約5% w/v至約15% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG1之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約25 mM至約35 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.1% w/v至約0.3% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約5% w/v至約15% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約25 mM至約35 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.1% w/v至約0.3% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約5% w/v至約15% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含第一重鏈、第二重鏈及共同輕鏈，該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，且該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列；（ii）濃度為約25 mM至約35 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.1% w/v至約0.3% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約5% w/v至約15% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG1之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含第一重鏈、第二重鏈及共同輕鏈，該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，且該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.1。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG1之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.1。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.1。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含第一重鏈、第二重鏈及共同輕鏈，該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，且該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列；（ii）濃度為10 mM之組胺酸；（ii）濃度為約30 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.1。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約3 mg/ml ± 1 mg/ml至7 mg/ml ± 1 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約40 mg/ml ± 2 mg/ml至60 mg/ml ± 2 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約50 mg/ml ± 5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約50 mg/ml ± 5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區（視情況其中兩條重鏈中之一者具有相對於相同同型之未經修飾之重鏈減少蛋白質A結合的修飾，且視情況其中兩條重鏈中之一者或兩者具有嵌合鉸鏈）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區，且其中兩條重鏈中之一者具有相對於未經修飾之IgG4 CH3域減少蛋白質A結合的CH3域中之修飾（例如藉由EU編號之H435R及Y436F）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約50 mg/ml ± 0.5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，其中抗體具有同型IgG4之重鏈恆定區，且其中兩條重鏈中之一者具有相對於未經修飾之IgG4 CH3域減少蛋白質A結合的CH3域中之修飾（例如藉由EU編號之H435R及Y436F）；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含第一重鏈、第二重鏈及共同輕鏈，該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，且該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約50 mg/ml ± 5 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含第一重鏈、第二重鏈及共同輕鏈，該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列，該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列，且該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；（iii）濃度為約0.2% w/v ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約1 mg/ml至約3 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約10 mM ± 1 mM之組胺酸；（iii）濃度為約0.05% w/v ± 0.01% w/v之聚山梨醇酯20；及（iv）濃度為約10% w/v ± 1% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為6.0 ± 0.3。
在一些情況下，穩定液體藥物調配物包含（i）濃度為約150 mg/ml至約200 mg/ml之人類雙特異性抗體，其特異性結合於人類MUC16及人類CD3且包含特異性結合人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合人類CD3之第二抗原結合域，該第一抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含有包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR；（ii）濃度為約30 mM ± 1 mM之醋酸鹽；及（iii）濃度為約5% w/v ± 0.5% w/v之蔗糖，其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.3。
在此等例示性調配物中之任一者中，「穩定」可定義為：（a）調配物在5℃下儲存12個月之後含有不超過2.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（b）調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過3.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（c）調配物在-30℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（d）調配物在-80℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（e）至少95%之抗體在5℃下儲存12個月之後具有天然構形，如藉由SE-UPLC所測定；（f）至少95%之抗體在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後具有天然構形，如藉由SE-UPLC所測定；（g）至少95%之抗體在37℃下儲存3個月之後具有天然構形，如藉由SE-UPLC所測定；（h）調配物在5℃下儲存12個月之後含有不超過1%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（i）調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過1%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（j）調配物在37℃下儲存3個月之後含有不超過1%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定；（k）調配物在-30℃或-80℃下儲存12個月之後含有不超過2%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定；（l）調配物在5℃下儲存6個月之後含有不超過4%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定；或（m）調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過6%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定。
在此等例示性調配物中之任一者中，雙特異性抗體可包括在一條或兩條重鏈中之修飾以促進自同源二聚體雜質中純化雙特異性抗體（即，異二聚體）。在一些實施例中，雙特異性抗體包括相同的第一及第二重鏈（即，抗MUC16結合臂之重鏈及抗CD3結合臂之重鏈）（例如，同型IgG1或IgG4兩者），不同之處在於一條或另一條重鏈之CH3域中存在與缺乏修飾之抗體相比，降低了雙特異性抗體與蛋白質A之結合的修飾。在一些情況下，第一重鏈之CH3域（例如，抗MUC16結合臂之CH3域）結合蛋白質A，且第二重鏈之CH3域（例如，抗CD3結合臂之CH3域）含有減少或消除蛋白質A結合之突變。在一些情況下，突變係H435R修飾（藉由EU編號；藉由IMGT外顯子編號之H95R）。在一些情況下，突變係H435R修飾（藉由EU編號；藉由IMGT外顯子編號之H95R）及Y436F修飾（藉由EU編號；藉由IMGT編號之Y96F）。可發現於第二CH3域內之其他修飾包括：在IgG1 CH3域之情況下，藉由EU（藉由IMGT之D16E、L18M、N44S、K52N、V57M及V82I ）之D356E、L358M、N384S、K392N、V397M及V422I）；及在IgG4 CH3域之情況下，藉由EU（藉由IMGT之Q15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79Q及V82I）之Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q及V422I。
本發明所涵蓋之藥物調配物之額外非限制性實例係在本文其他地方闡述，包括下文所呈現之工作實例。 容器及投予方法
本發明之藥物調配物可被容納於適用於儲存藥劑及其他治療性組成物之任何容器內。舉例而言，藥物調配物可含於諸如小瓶、安瓿、注射器、卡匣、瓶或IV袋之具有限定體積之經密封且經滅菌之塑膠或玻璃容器內。可使用包括例如澄清且不透明（例如琥珀色）玻璃或塑膠小瓶之不同類型之小瓶以含有本發明之調配物。同樣的，可使用任何類型之注射器以容納及/或投予本發明之藥物調配物。在一些實施例中，藥物調配物被容納於預填充注射器中。在一些實施例中，藥物調配物被容納於預填充立樁針注射器中。
本發明之藥物調配物可容納於「正常鎢」注射器或「低鎢」注射器內。如一般熟習此項技術者將瞭解，製造玻璃注射器之方法一般涉及使用熱鎢棒用以刺穿玻璃，由此在玻璃上產生可自其中抽吸液體且自注射器排出之洞。此過程導致痕量鎢沈積於注射器之內表面上。後續洗滌及其他處理步驟可用於減少注射器中之鎢之量。如本文所使用，術語「正常鎢」意謂注射器含有大於500十億分之一（ppb）之鎢。術語「低鎢」意謂注射器含有小於500 ppb之鎢。舉例而言，根據本發明，低鎢注射器可含有少於約490、480、470、460、450、440、430、420、410、390、350、300、250、200、150、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10 ppb或更少之鎢。
用於注射器中之橡膠柱塞及用於封閉小瓶開口之橡膠塞可經塗佈以防止注射器或小瓶之藥用內容物污染及/或保留其穩定性。因此，根據某些實施例，本發明之藥物調配物可被容納於包含經塗佈之柱塞之注射器內，或被容納於用經塗佈之橡膠塞密封之小瓶內。舉例而言，柱塞或橡膠塞可塗佈有氟碳化合物薄膜。適用於與含有本發明之藥物調配物之小瓶及注射器一起使用之經塗佈之橡膠塞及/或柱塞之實例在例如以下中提及：美國專利第4,997,423號、第5,908,686號、第6,286,699號、第6,645,635號、及第7,226,554號，該等專利之內容以全文引用之方式併入本文中。可在本發明之情形下使用之特定例示性經塗佈之橡膠塞及柱塞可以以商品名「FluroTec®」商購自賓夕法尼亞州萊昂維爾之西氏醫藥服務公司（West Pharmaceutical Services, Inc.，Lionville, PA）。FluroTec®係氟碳塗層之一個實例，用於最小化或防止藥物產品黏附至橡膠表面。根據本發明之某些實施例，藥物調配物可被容納於包含經氟碳化合物塗佈之柱塞之低鎢注射器內。在一些實施例中，容器為諸如Ompi EZ-Fill TM注射器或BD Neopak TM注射器之注射器。在一些情況下，注射器為具有1 mL iWest活塞、27G薄壁針及FM30針套或BD260針套之1 mL長玻璃注射器。在一些情況下，注射器為具有West NovaPure TM1-3 mL活塞、27G薄壁針及FM30針套或BD260針套之2.25 mL玻璃注射器。在各種實施例中，注射器為0.5 mL、0.6 mL、0.7 mL、0.8 mL、0.9 mL、1.0 mL、1.1 mL、1.2 mL、1.3 mL、1.4 mL、1.5 mL、1.6 mL、1.7 mL、1.8 mL、1.9 mL、2.0 mL、2.1 mL、2.2 mL、2.3 mL、2.4 mL、2.5 mL、2.6 mL、2.7 mL、2.8 mL、2.9 mL、3.0 mL、3.5 mL、4.0 mL、4.5 mL、5.0 mL、5.5 mL、6.0 mL、6.5 mL、7.0 mL、7.5 mL、8.0 mL、8.5 mL、9.0 mL、9.5 mL或10 mL注射器（例如玻璃注射器）。
藥物調配物可藉由諸如注射（例如皮下、靜脈內、肌內、腹膜內等）或經皮、經黏膜、經鼻、經肺及/或經口投予之非經腸途徑投予至患者。大量可再用筆式及/或自動注射器式遞送裝置可以用於皮下遞送本發明之藥物調配物。僅舉幾例，實例包括但不限於AUTOPEN™（英國伍德斯托克之歐文芒福德公司（Owen Mumford, Inc., Woodstock, UK））、DISETRONIC™筆（瑞士布格多夫（Bergdorf, Switzerland）之Disetronic Medical Systems）、HUMALOG MIX 75/25™筆、HUMALOG™筆、HUMALIN 70/30™筆（印第安納州印第安納波利斯之禮來公司（Eli Lilly and Co., Indianapolis, IN））、NOVOPEN™ I、NOVOPEN™ II及NOVOPEN™ III（丹麥哥本哈根之諾和諾德（Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark））、NOVOPEN JUNIOR™（丹麥哥本哈根之諾和諾德）、BD™筆（新澤西州富蘭克林湖之BD公司（Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ））、OPTIPEN™、OPTIPEN PRO™、OPTIPEN STARLET™及OPTICLIK™（德國法蘭克福之賽諾菲-安萬特（sanofi-aventis, Frankfurt, Germany））。僅舉幾例，應用於本發明之藥物組成物之皮下遞送中之拋棄式筆式及/或自動注射器式遞送裝置之實例包括但不限於SOLOSTAR™筆（賽諾菲-安萬特）、FLEXPEN™（諾和諾德）及KWIKPEN™（禮來）、SURECLICK TM自動注射器（加利福尼亞州紹曾德奧克斯之安進（Amgen, Thousand Oaks, CA））、PENLET TM（Haselmeier, Stuttgart，德國）、EPIPEN（Dey, L.P.）及HUMIRA TM筆（伊利諾伊州亞培園區之亞培（Abbott Labs, Abbott Park, IL））。在一些情況下，藥物調配物被容納於特別適於與自動注射器一起使用之注射器中。皮下注射可使用20至30號針或25至30號針來投予。在一些情況下，皮下注射可使用25號針來投予。在一些情況下，皮下注射可使用27號針來投予。在一些情況下，皮下注射可使用29號針來投予。
另一類型之遞送裝置可包括安全系統。此類裝置可為相對便宜的，且一旦注射完成，則操作以手動或自動地將安全套筒延伸至針上。安全系統之實例可包括西氏醫藥之ERIS裝置或碧迪公司（Becton Dickinson）之UltraSafe裝置。另外，本文亦考慮使用大容量裝置（「LVD」）或快速注射器（bolus injector）來遞送本發明之藥物調配物。在一些情況下，LVD或快速注射器可經配置以將藥劑注射至患者中。舉例而言，LVD或快速注射器可經配置以遞送「大」容量藥劑（通常約2 ml至約10 ml）。
在某些實施例中，藥物調配物經由IV滴注投予，使得調配物在包含生理學可接受溶液的IV袋中稀釋。在一個實施例中，藥物組成物係處於靜脈輸液袋中的複合無菌製劑，使得單劑量之藥品稀釋至100 mL、250 mL（或其他適合於靜脈內滴注遞送之類似量）的生理緩衝液（例如0.9%鹽水）。
本發明之藥物調配物亦可含於單位劑型中。如本文所使用，術語「單位劑型」係指適用作待治療之患者之單位劑量之物理離散單位，各單位含有經計算以與所需醫藥載劑、稀釋劑或賦形劑結合產生所期望治療效果之預定量之活性化合物。在各種實施例中，單位劑型被容納於如本文所論述之容器內。本發明之調配物中之活性成分（例如抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體）之實際劑量水準可變化以便獲得可有效達成特定患者、組成物及投予模式所期望之治療反應且對患者不具有副作用之量的活性成分。所選劑量水準將視各種藥物動力學因素而定，該等因素包括所採用之本發明之特定組成物的活性、投予途徑、投予時間、所採用之特定化合物之排泄速率、治療持續時間、與所採用之特定組成物組合使用的其他藥物、化合物及/或物質、所治療患者之年齡、性別、體重、病況、一般健康狀況及先前病史；及醫學技術中熟知之類似因素。如本文所使用之術語「稀釋劑」係指適合於更改或達成如本文所描述之例示性或適當濃度或濃度之溶液。
在各種實施例中，單位劑型含有意欲單次使用之量之活性成分（例如抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體）。在各種實施例中，單位劑型中之活性成分之量為約0.1 mg至約5000 mg、約100 mg至約1000 mg，及約100 mg至約500 mg、約100 mg至約400 mg、約100 mg至約200 mg、約40 mg至約60 mg、約125 mg至約175 mg、約160 mg至約200、約1 mg至約250 mg、約1 mg至約100 mg、約1 mg至約50 mg、約1 mg至約25 mg、約1 mg至約20 mg、約5 mg至約15 mg或其範圍或間隔。例如約2 mg至約100 mg或2 mg至20 mg之上文所敍述量之中間範圍亦成為本發明之一部分。舉例而言，本文包括使用上文所敍述值（或含於上文所敍述範圍內之值）中之任一個之組合作為上限值及/或下限值之值的範圍。在一些實施例中，單位劑型包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200 mg之抗體。在一些實施例中，單位劑型包含5 mg之抗體。在一些實施例中，單位劑型包含12.5 mg之抗體。在特定實施例中，調配物常常以呈單位劑型之液體形式供應。在一些實施例中，單位劑型包含3至7 mg或8至12 mg、10至15 mg、35至45 mg、45至55 mg、140至160 mg或170至190 mg。在一些實施例中，根據本發明之單位劑型適合於皮下投予至患者（例如，含有濃度為約100 mg/ml或約200 mg/ml，或150 mg/ml ± 5 mg/ml之抗體的單位劑型）。
本發明亦包括製備單位劑型之方法。在例示性實施例中，用於製備藥物單位劑型之方法包括在適合容器（例如本文所論述之彼等容器）中組合前述實施例中之任一個之調配物。 藥物調配物之治療性用途
本發明之藥物調配物特別適用於治療、預防及/或緩解與表現人類MUC16之細胞相關之任何疾病或病症。可藉由投予本發明之藥物調配物治療的例示性、非限制性疾病及病症包括卵巢癌、乳癌、胰臟癌及非小細胞肺癌。
本發明之治療方法包含向個體投予包含如本文所揭示之抗MUC16×抗CD3雙特異性抗體之任何調配物。投予藥物調配物之個體可為例如需要此類治療之任何人類或非人類動物。舉例而言，個體可為診斷患有前述疾病或病症中之任一者或視為處於罹患前述疾病或病症中之任一者之風險下的個體。本發明進一步包括本文所揭示之藥物調配物中之任一者在製造用於治療與表現人類MUC16之細胞相關之任何疾病或病症之藥劑中的用途，該等任何疾病或病症包括上文所提及之例示性疾病、病症及病況中之任一者。
在一些實施例中，本發明提供包含如本文所論述之藥物調配物（例如具有調配物或單位劑型之容器）及封裝或標籤（例如藥品說明書）以及藥物調配物使用說明書之套組以治療如上文所論述之疾病或病症。在一些情況下，說明書提供如本文所論述之單位劑型用於治療疾病或病症之用途。
本文中所提及之序列及相應SEQ ID NO之概述展示於下文表1中。 表 1 ：序列之概述
SEQ ID NO: 描述
1 抗MUC16重鏈
2 抗CD3重鏈
3 共同抗MUC16及抗CD3輕鏈
4 抗MUC16 HCVR
5 抗CD3 HCVR
6 共同抗MUC16及抗CD3 LCVR
7 抗MUC16 HCDR1
8 抗MUC16 HCDR2
9 抗MUC16 HCDR3
10 抗CD3 HCDR1
11 抗CD3 HCDR2
12 抗CD3 HCDR3
13 共同抗MUC16及抗CD3 LCDR1
14 共同抗MUC16及抗CD3 LCDR2
15 共同抗MUC16及抗CD3 LCDR3
16 IgG4重鏈恆定區
17 具有H435R/Y436F之IgG4重鏈恆定區
18 IgG1重鏈恆定區
19 具有H435R/Y436F之IgG1重鏈恆定區
實例
以下實例用以便於向本領域普通技術人員提供如何製造及使用本發明之方法及組成物之完整揭示內容及描述，而非用於限制本發明人視作其發明之物之範疇。已努力確保關於所用數字（例如量、溫度等）之準確性，但應考慮一些實驗誤差及偏差。除非另有指示，否則份數為重量份，分子量為平均分子量，溫度係以攝氏度計，且壓力為大氣壓或接近大氣壓。 實例 1 ：研發穩定液體及凍乾抗 MUC16× 抗 CD3 雙特異性抗體調配物
調配物之物理穩定性係指顏色、外觀、pH值、濁度、微粒及蛋白質濃度等特性。化學穩定性係指蛋白質的高分子量（HMW）物種、低分子量（LMW）物種、電荷變異體及其他化學修飾的形成。mAb1藥品之物理及化學穩定性使用以下分析進行評定：藉由目視檢查之顏色及外觀；pH值；藉由在405 nm處增加光密度（OD）量測濁度；藉由Micro-Flow Imaging ™(MFI)進行亞可見顆粒分析；藉由反相超高效液相層析法（RP-UPLC）濃縮蛋白質；使用尺寸排阻超高效液相層析法（SE-UPLC）以及還原及非還原微晶片毛細管電泳-十二烷基硫酸鈉（MCESDS）評定各藥品之純度；電荷變異體分析使用陽離子交換UPLC（CEX-UPLC）（糖化mAb1藉由CEX-UPLC偵測）及成像毛細管等電聚焦（iCIEF）來確定；生物分析效力（每一樣品之相對效力藉由生物分析測定，且定義為：（IC 50參考樣品/IC 50樣品）×100%；儲存穩定性樣品之所量測效力必須在參考標準的測量效力的50至150%範圍內）。
mAb1之凍乾調配物經開發用於靜脈內（IV）或皮下（SC）投予。凍乾的mAb1藥品可用無菌注射用水（WFI）復水至2 mg/mL mAb1或20 mg/ml mAb1的濃度，用於IV輸注或SC注射。調配物研發活動涉及評估緩衝液、pH值、有機共溶劑、界面活性劑及蔗糖（作為熱穩定劑）以鑑別增強蛋白質穩定性之賦形劑。由此等研究產生之結果用於開發適合於復水成液體形式之穩定凍乾調配物。 緩衝液及pH值選擇
藉由將2 mg/mL mAb1在45℃下在於變化pH值範圍內之一系列緩衝液系統中培育28天，以在液體調配物中檢驗緩衝液及pH值對mAb1之熱穩定性之影響。研究以下pH值及緩衝液系統：醋酸鹽（pH 4.5至5.5）、組胺酸（pH 5.5至6.5）及磷酸鹽（pH 6.5至7.5）。此等分析揭露主要降解路徑為HMW物種及電荷變異體之形成。如表2中所示，基於SE-UPLC之結果，當在組胺酸緩衝液中在pH 5.5與pH 6.5之間或在醋酸鹽中在pH 4.5與5.5之間調配mAb1時，觀測到HMW物種形成之最低速率及單體損失之最低速率。如表2中所示，CEX-UPLC分析亦指出，當在醋酸鹽緩衝液中在pH 5.5與6.5之間或在醋酸鹽中在pH 4.5與5.5之間調配mAb1時，電荷變異體概況係最穩定的。相對於起始物質，mAb1於45℃下培育28天之後，藉由CEX-UPLC分析觀測到總酸性物種之相對量降低及主要電荷變異體峰之同時增加。
分離由CEX-UPLC層析圖中所觀測到之構成約50%之總酸性電荷變異體的單峰。進一步分析將此峰中之主要組分鑑別為含有雙特異性抗體之MUC16結合臂之CDR3內之重鏈（HC）Lys98糖化的mAb1蛋白（糖化詳細論述於以下段落中）。在與mAb1調配物之開發相關的最初活動期間，全部監測主要電荷變異體、總酸性物種、總鹼性物種及分子之糖化形式的穩定性。選擇pH 6.0之組胺酸緩衝液用於臨床上賦能之調配物，此係因為HMW物種形成速率、單體損失速率及電荷變異體形成速率在此緩衝液及pH值中最小。
藉由CEX-UPLC分析觀測到包含大致50%之總mAb1衍生之酸性電荷變異體的特異性mAb1衍生之酸性峰。在45℃下培育28天之後，藉由CEX-UPLC偵測到此峰面積減少。此峰值鑑別為在雙特異性抗體之MUC16結合臂之CDR3內的HC Lys98處含有糖化的mAb1變異體。隨著mAb1之糖化形式之水準降低，觀測到藉由生物分析之效力增加（參見圖1）。儘管Lys98去糖化反應容易在溶液中發生，但當調配物在5℃下儲存至少12個月時，呈凍乾狀態之糖化水準保持不變。此外，當凍乾調配物在5℃下儲存長達12個月時，效力保持不變。因此，選擇凍乾調配物作為mAb1之調配物。 界面活性劑/有機共溶劑選擇
在液體調配物中檢測界面活性劑、聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80對5 mg/mL mAb1的攪拌應力穩定性及熱穩定性的影響（含有界面活性劑之調配物中存在10%之蔗糖）。測試濃度為0至0.1%（w/v）之聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80穩定mAb1之能力（參見下表3及4）。如表3中所示，聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80均能夠使mAb1以0.01%或更高之水準存在時穩定至攪拌應力。當調配物中不包括界面活性劑時，觀測到HMW物種增加高達1.9%。當≥0.01%聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80包括於調配物中時，未觀測到HMW物種增加。
選擇0.05%聚山梨醇酯20及0.05%聚山梨醇酯80之濃度來檢驗熱應力對mAb1穩定性之影響。如表4中所示，在45℃下培育28天之後，與含有0.05%聚山梨醇酯80之調配物相比，含有0.05%聚山梨醇酯20之調配物被觀測到大致少了0.5% HMW物種及多了1.6%mAb1單體。此外，mAb1在0.05%聚山梨醇酯20存在下展現改良之穩定性概況，如藉由CEX-UPLC分析在45℃下培育28天之後所測定。相對於在0.05%聚山梨醇酯80存在下調配之mAb1（參見表4），在0.05%聚山梨醇酯20存在下之mAb1展現（1）酸性物種形成減少大致5%，（2）主要電荷變異體形式損失降低大致6%，及（3）糖化物種水準變化大致相等。選擇0.05%聚山梨醇酯20作為mAb1藥品調配物之界面活性劑，因為其對於攪拌應力能足夠穩定蛋白質。 熱穩定劑/冷凍保護劑
穩定劑，諸如蔗糖，有時可添加至液體及凍乾抗體調配物中，以增加蛋白質對於冷凍/解凍應力之熱穩定性及穩定性來。mAb1調配物中需要包括蔗糖，以使mAb1對於冷凍/解凍應力穩定。在不存在蔗糖之情況下，HMW物種之水準在mAb1經歷四個冷凍及解凍循環之後增加0.4%（參見表5）。添加10%蔗糖至調配物穩定之mAb1原料藥以進行四次冷凍/解凍循環（參見表5）。
蔗糖亦為在凍乾過程期間使mAb1穩定之冷凍保護劑所必需的。如表6所示，在凍乾mAb1調配物復水之後，HMW物種之相對量在無蔗糖存在下增加0.2%，但在調配物含有10%蔗糖時不展現明顯變化。 當凍乾mAb1在無蔗糖存在下，在50℃下培育28天時，HMW物種之水準增加5.9%且單體水準降低7.1%，如由SE-UPLC所測定（參見表7）。此外，在不存在蔗糖之情況下，在50℃下培育mAb1之後，酸性物種之水準降低13.8%，鹼性物種之水準增加14.3%，且糖化物種之水準降低14.7%，如藉由CEX-UPLC所測定（參見表7）。然而，如表7中所示，在10%蔗糖存在下，未觀測到分子量變異體或電荷變異體之位準發生顯著變化。
百分之十蔗糖在凍乾過程期間對mAb1之冷凍/解凍穩定性、熱穩定性及穩定性具有積極影響。百分之十蔗糖亦用作凍乾期間之增積劑。因此，選擇10%蔗糖作為用於產生凍乾mAb1調配物之穩定劑。 所選調配物組分之概述
當在10 mM組胺酸、0.050%聚山梨醇酯20及10%蔗糖存在下在pH 6.0下調配時，mAb1展現最大穩定性。在mAb1液體調配物開發期間鑑別之主要降解路徑為HMW物種及電荷變異體之形成。所觀測到之特別受關注之電荷變異體為HC-CDR3-Lys98之糖化。凍乾mAb1在應力條件及即時儲存條件下培育之後，糖化mAb1之水準已展示不變。在液體調配物開發及凍乾可行性研究期間獲得之資訊形成用於開發適用於臨床應用之凍乾藥品之調配物的基礎。為使得能夠將凍乾藥品復水至2 mg/mL mAb1之濃度用於IV投予，研發含有2 mg/mL mAB1、10 mM組胺酸、pH 6.0、10%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）聚山梨醇酯20之調配原料藥。 表 2 ： 緩衝液及 pH 值對在 45 ℃下培育 28 天之 2 mg/mL mAb1 之穩定性的影響
配方 2 mg/mL mAb1及10 mM緩衝液
填充體積 0.4 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
pH/緩衝液 外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化a 根據CEX-UPLC之電荷變異體變化 a
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
pH 4.5，醋酸鹽 合格 0.00 4.6 104 0.8 -1.6 0.8 -14.5 8.5 6.0 -19.6
pH 5.0，醋酸鹽 合格 0.00 5.1 101 1.0 -1.4 0.3 -11.0 9.6 1.5 -21.6
pH 5.5，醋酸鹽 合格 0.00 5.7 100 1.4 -1.6 0.3 -7.8 9.4 -1.6 -22.0
pH 5.5，組胺酸 合格 0.00 5.6 99 1.0 -1.4 0.4 -13.3 4.1 9.2 -22.1
pH 6.0，組胺酸 合格 0.00 6.1 102 0.7 -0.9 0.2 -9.2 5.8 3.4 -23.2
pH 6.5，組胺酸 合格 0.00 6.6 102 0.9 -1.1 0.3 -4.8 3.7 1.1 -22.5
pH 6.5，磷酸鹽 合格 0.00 6.4 100 3.8 -4.3 0.5 1.8 -10.1 8.3 -18.2
pH 7.0，磷酸鹽 合格 0.01 6.9 95 3.7 -4.5 0.8 10.5 -14.5 4.0 -19.1
pH 7.5，磷酸鹽 不合格b 0.08 7.4 91 5.3 -7.2 1.8 -19.5 12.9 6.6 NDc
a報導為相對於起始物質而言之純度變化。在所有調配物中起始物質（無培育）含有根據SE-UPLC之≥97.8%天然峰及根據CEX-UPLC之≥42.6%主峰。 b樣品渾濁，無可見顆粒。 c由於廣泛降解而未測定 CEX陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；LMW，低分子量；ND，未測定；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 3 ： 攪拌後界面活性劑濃度對 5 mg/mL mAb1 穩定性之影響（渦旋 120 分鐘）
配方 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0
填充體積 0.4 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
有機共溶劑/界面活性劑/蔗糖 顏色及外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化 a 根據CEX-UPLC之電荷變異體變化 a
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
無共溶劑/蔗糖 合格 0.02 6.0 99 1.3 -1.3 0.0 -0.1 0.1 0 -0.8
10%（w/v）蔗糖 合格 0.02 6.0 100 1.9 -1.9 0.0 1.1 -0.8 -0.2 -0.4
0.01%（w/v）聚山梨醇酯20及10%（w/v）蔗糖 合格 0.01 6.0 102 0.0 0.0 0.0 0.1 1.3 -1.5 0.0
0.05%（w/v）聚山梨醇酯20及10%（w/v）蔗糖 合格 0.01 6.0 103 0.0 0.0 0.0 -0.4 0.5 -0.1 0.7
0.1%（w/v）聚山梨醇酯20及10%（w/v）蔗糖 合格 0.01 6.0 103 0.0 0.0 0.0 -0.2 -1.2 1.3 -0.1
0.01%（w/v）聚山梨醇酯80及10%（w/v）蔗糖 合格 0.00 6.0 105 0.0 0.0 0.0 -1.1 0.4 0.7 1.0
0.05%（w/v）聚山梨醇酯80及10%（w/v）蔗糖 合格 0.00 6.0 104 0.0 0.0 0.0 0.5 -1.7 1.2 0.2
0.1%（w/v）聚山梨醇酯80及10%（w/v）蔗糖 合格 0.00 6.0 105 0.0 0.0 0.0 0.9 -0.6 -0.3 0.2
a報導相對於起始物質之純度變化；在所有調配物中起始物質（未培育）含有根據SE-UPLC之≥97.7%天然峰及根據CEX-UPLC之≥46.8%主峰。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 4 ：評估聚山梨醇酯 20 及聚山梨醇酯 80 濃度： 界面活性劑濃度對在 45 ℃下培育 28 天時 5 mg/mL mAb1 穩定性之影響
配方 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0
填充體積 0.4 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
有機共溶劑/界面活性劑/蔗糖 顏色及外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化a 根據CEX-UPLC之電荷變異體變化 a
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
0.05%（w/v）聚山梨醇酯20及10%（w/v）蔗糖 合格 0.02 6.0 101 9.3 -10.1 0.7 1.1 -0.2 -0.9 -17.6
0.05%（w/v）聚山梨醇酯80及10%（w/v）蔗糖 合格 0.01 6.0 100 9.8 -11.7 1.9 6.0 -6.5 0.5 -16.1
a報導相對於起始物質之純度變化；在所有調配物中起始物質（未培育）含有根據SE-UPLC之≥97.6%天然峰及根據CEX-UPLC之≥46.0%主峰。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 5 ： 四次冷凍及解凍循環後 10% 蔗糖對 5 mg/mL mAb1 穩定性之影響
配方 5 mg/mL mAb1，10 mM組胺酸，pH 5.5a
填充體積 0.4 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
有機共溶劑/界面活性劑/蔗糖 顏色及外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH a 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化b 根據CEX-UPLC之帶電變異體變化 b
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
無蔗糖 合格 0.01 5.5 99 0.4 -0.4 0.1 3.3 -2.9 -0.3 -1.4
10%（w/v）蔗糖 合格 0.00 5.5 101 0.0 0.0 0.0 -0.4 0.3 0.1 0.4
a對於初始配方開發，使用5.5的pH值。直至選擇初始界面活性劑之後才進行pH值的最佳化。 b報導相對於起始物質之純度變化；在所有調配物中起始物質（未培育）含有根據SE-UPLC之≥97.4%天然峰及根據CEX-UPLC之≥42.8%主峰。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 6 ： 藉由包括 10% 蔗糖使 mAb1 在凍乾期間 穩定化
凍乾前調配物 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0，0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
復水調配物 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0，0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 0.5 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
熱穩定劑 顏色及外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化c 根據CEX-UPLC之電荷變異體變化 c
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
無蔗糖 合格 0.01 6.1 105 0.2 -0.1 -0.1 -0.4 0.2 0.1 0.2
10%（w/v）蔗糖 合格 0.02 6.1 104 0.0 0.1 -0.1 -0.6 0.5 0.1 0.2
（凍乾完成後立即復水及分析mAb1） c報導相對於起始物質之純度變化；在所有調配物中起始物質（未培育）含有根據SE-UPLC之≥98.7%天然峰及根據CEX-UPLC之≥45.1%主峰。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 7 ： 10% 蔗糖的存在對在 50 ℃下培育 28 天的凍乾 mAb1 DP 穩定性之影響
凍乾前調配物 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0，0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
復水調配物 5 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0，0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 0.5 mL
容器/封閉件 2 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有經FluorTec®塗佈之4432/50丁基橡膠塞
熱穩定劑 顏色及外觀 混濁度（在405 nm處之OD增加） pH 藉由RP-UPLC回收之總mAb1% 根據SE-UPLC之純度變化a 根據CEX-UPLC之電荷變異體變化 a
HMW% 天然% LMW% 酸性% 主要% 鹼性% 糖化%
無蔗糖 合格 0.00 6.1 94 5.9 -7.1 1.1 -13.8 -0.5 14.3 -14.7
10%（w/v）蔗糖 合格 0.01 6.1 98 0.0 -0.3 0.3 -1.1 0.8 0.4 -0.9
a報導相對於起始物質之純度變化；在所有調配物中起始物質（未培育）含有根據SE-UPLC之≥98.7%天然峰及根據CEX-UPLC之≥45.1%主峰。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；RP，反相；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 實例 2 ：調配物之儲存及應力穩定性
進行研究以評估mAb1藥品的液體、凍乾及復水調配物之儲存、加速穩定性及應力穩定性（攪拌）。 mAb1凍乾藥品的分析結果表明，當mAb1藥品在5℃下儲存至少36個月時具有物理及化學穩定性（參見表8、10及12）。在所監測之屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之顯著變化。在加速條件下培育後mAb1凍乾藥品之分析結果提供於表9、11及13。在37℃下培育3個月之後，在所監測之屬性中之任一者中未偵測到mAb1之物理或化學穩定性中之顯著變化。類似地，在25℃/60%相對濕度（RH）下培育6個月之後，在所監測屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之顯著變化。在50℃下培育3個月之後，觀測到HMW物種（0.3%）及鹼性物種（藉由CEX-UPLC觀測為7.6%，藉由icIEF觀測為4.0%）略有增加。在加速條件下培育後由生物測定分析測定出mAb1維持其效力。 表 8 ： 研究在 5 ℃下儲存之 mAb1 凍乾藥品 之穩定性
凍乾前調配物 2 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0、10%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
容器/封閉件 5 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有West V10-F597W 4432/50 B2-TR塞子
在5℃下之儲存時長（月）
分析a 0 1 3b 6 9 12 18 24 36
凍乾藥品分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
水分% 0.68 NR 0.81 0.81 NR 0.75 NR 0.76 1.15
復水時間（秒） 62 55 55 54 55 54 56 55 33
復水藥品分析c
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 6.0 6.0 6.0 6.1 6.0 6.1 6.1 6.0 6.1
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 200 NR 84 424 NR 232 NR 759 429
≥10 μm 10 NR 7 10 NR 17 NR 30 21
≥25 μm 5 NR 2 2 NR 1 NR 5 5
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 99 104 101 100 100 103 101 96
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 NR 100 100 NR 100 NR 100 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 NR 100 100 NR 100 NR 100 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.6 0.5 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.5
天然% 99.0 99.1 99.1 99.0 99.0 99.0 99.0 98.8 99.1
LMW% 0.4 0.4 0.4 0.5 0.4 0.5 0.4 0.6 0.4
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 50.2 51.9 50.5 51.8 51.3 52.1 51.6 51.7 51.3
主要% 47.3 45.5 46.9 44.5 45.5 44.8 44.9 45.0 46.1
鹼性% 2.5 2.7 2.6 3.7 3.2 3.1 3.5 3.4 2.6
糖化% 28.4 27.9 28.5 27.6 27.4 27.6 27.5 27.1 26.4
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 47.0 NR 48.9 48.1 NR 48.9 NR 48.6 48.2
主要% 44.6 NR 43.2 43.7 NR 43.0 NR 43.8 43.6
鹼性% 8.5 NR 8.0 8.2 NR 8.1 NR 7.6 8.3
相對效力%（生物分析） 125 NR 73 NR NR 89 NR 67 106
a    CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 b   此等樣品之實際儲存時長為4個月 c    樣品用無菌WFI復水至2 mg/mL mAb1 表 9 ： 研究在加速條件下儲存之 mAb1 凍乾藥品 之穩定性
凍乾前調配物 2 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0、10%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
容器/封閉件 5 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有West V10-F597W 4432/50 B2-TR塞子
無儲存 25 ℃ /60% RH 儲存 （月） 37 ℃儲存 （月）
分析 t=0 3 6 1 3
凍乾藥品 分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格 合格
水分% 0.68 1.01a 0.97 NR 0.89
復水時間（秒） 62 54 52 54 55
復水藥品分析 b
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 200 68a 332 NR 800
≥ 10 µm 10 8a 5 NR 52
≥ 25 µm 5 3a 2 NR 25
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 104 102 99 104
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 100 100 NR 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 100 100 NR 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
天然% 99.0 99.0 99.0 99.1 98.9
LMW% 0.4 0.4 0.5 0.4 0.5
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 50.2 50.3 51.8 51.4 50.0
主要% 47.3 47.0 44.3 46.0 47.1
鹼性% 2.5 2.7 3.9 2.7 2.9
糖化% 28.4 28.4 27.2 28.0 28.2
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 47.0 48.1 48.4 NR 46.8
主要% 44.6 43.2 42.7 NR 44.3
鹼性% 8.5 8.7 9.0 NR 9.0
相對效力%（生物分析） 125 102 NR NR 93
a    實際儲存時長為4個月 b   樣品用無菌WFI復水至2 mg/mL mAb1 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 10 ： 研究在 5 ℃下儲存之 mAb1 凍乾藥品 的穩定性
凍乾前調配物 2 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0、10%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
容器/封閉件 5 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有West V10-F597W 4432/50 B2-TR塞子
在5℃下之儲存時長（月）
分析a 0 1 3 6 9 12 18 24 36
凍乾藥品分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
水分% 0.44 NR 0.28 0.40 NR 0.52 NR 0.26 0.74
復水時間（秒） 49 49 48 46 48 45 53 49 44
復水藥品分析b
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.01 0.00 0.00 0.01
pH值 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 176 NR 129 207 NR 163 NR 193 710
≥10 μm 7 NR 3 5 NR 3 NR 8 11
≥25 μm 3 NR 0 0 NR 2 NR 0 2
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 105 107 107 107 106 109 104 109
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 NR 100 100 NR 100 NR 100 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 NR 100 100 NR 100 NR 100 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.7 0.7 0.7 0.7 0.6 0.7 0.7 0.7 0.7
天然% 99.0 99.0 98.9 98.9 98.9 98.9 98.8 98.7 98.8
LMW% 0.4 0.4 0.5 0.4 0.4 0.4 0.5 0.6 0.6
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 48.8 48.4 49.1 49.3 48.3 49.4 49.3 49.7 49.6
主要% 47.7 47.9 46.7 46.6 47.7 47.0 47.8 46.2 47.0
鹼性% 3.5 3.7 4.3 4.1 4.0 3.6 2.9 4.0 3.5
糖化% 27.1 27.1 27.1 26.9 26.9 26.5 26.3 24.9 25.7
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 47.5 NR 47.8 47.6 NR 45.6 NR 46.9 46.0
主要% 43.5 NR 43.1 43.0 NR 45.0 NR 43.8 44.9
鹼性% 9.0 NR 9.1 9.3 NR 9.4 NR 9.4 9.1
相對效力%（生物分析） 70 NR 139 110 NR 109 NR 88 84
a    CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 b   樣品用無菌WFI復水至2 mg/mL mAb1 表 11 ： 研究在加速條件下儲存之 mAb1 凍乾藥品 的穩定性
凍乾前調配物 2 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0、10%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
容器/封閉件 5 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有West V10-F597W 4432/50 B2-TR塞子
無儲存 25 ℃ /60% RH 儲存 （月） 37 ℃儲存 （月）
分析 t=0 3 6 1 3
凍乾藥品 分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格 合格
水分% 0.44 0.60 0.80 NR 0.71
復水時間（秒） 49 48 50 43 51
復 水藥品分析a
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 176 277 133 NR 281
≥ 10 µm 7 0 8 NR 0
≥ 25 µm 3 0 3 NR 0
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 106 108 105 105
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 100 100 100 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 100 100 100 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7
天然% 99.0 98.9 98.9 98.9 98.8
LMW% 0.4 0.5 0.5 0.5 0.5
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 48.8 49.0 49.1 48.1 48.5
主要% 47.7 46.7 46.3 48.0 46.6
鹼性% 3.5 4.4 4.6 3.9 4.9
糖化% 27.1 27.0 26.7 27.0 26.5
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 47.5 46.5 47.4 47.7 46.1
主要% 43.5 44.6 43.1 42.8 44.5
鹼性% 9.0 9.0 9.4 9.5 9.3
相對效力%（生物分析） 70 121 95 NR 111
a    樣品用無菌WFI復水至2 mg/mL mAb1 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 12 ： 研究在 5 ℃下儲存之 mAb1 50 mg 凍乾藥品 的穩定性
凍乾前 調配物 20 mg/mL mAb1 、 10 mM 組胺酸， pH 6.0 、 10% （ w/v ）蔗糖、 0.05% （ w/v ）聚山梨醇酯 20
填充體積 2.5 mL
容器 / 封閉件 5 mL 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有 West V10-F597W 4432/50 B2-TR 塞子
在 5 ℃下之儲存時長（月）
分析a 0 1 3 6 9 12 18 24 36b
凍乾藥品 分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
水分% 0.74 NR NR 0.99 NR 1.16 NR 1.56 1.18
復水時間（秒） 49 44 60 66 55 53 48 47 29
復水藥品分析c
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 5.9 5.9 5.9 5.9 5.9 5.9 5.9 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 259 NR NR 1274 NR 2707 NR 2343 NA
≥10 μm 30 NR NR 28 NR 48 NR 21 NA
≥25 μm 5 NR NR 3 NR 4 NR 1 NA
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 100 103 101 100 99 99 91 108
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 NR NR 100 NR 100 NR 100 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 NR NR 100 NR 100 NR 100 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.8 0.8 0.9 0.8 0.9 0.9 0.9 0.8 0.9
天然% 98.8 98.9 98.6 98.8 98.7 98.7 98.7 98.8 98.6
LMW% 0.4 0.4 0.5 0.4 0.5 0.4 0.5 0.4 0.5
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 47.7 48.0 48.8 48.3 49.5 48.3 48.1 49.7 47.7
主要% 47.1 47.3 45.9 46.8 42.5 45.3 46.2 43.8 46.7
鹼性% 5.1 4.7 5.3 4.8 8.0 6.4 5.7 6.5 5.5
糖化% 24.4 24.0 24.5 24.2 21.3 22.1 23.2 22.2 23.0
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 45.1 NR NR 44.8 NR 47.8 NR 47.7 47.2
主要% 46.0 NR NR 46.5 NR 45.5 NR 45.1 45.3
鹼性% 8.8 NR NR 8.7 NR 6.7 NR 7.2 7.4
相對效力%（生物分析） 98 NR NR 104 NR 104 NR 91 118
a    CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NA，不可用；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 b   36個月的MFI資料因儀器故障及備用樣品不足而無法獲得。 c    樣品用無菌WFI復水至20 mg/mL mAb1 表 13 ： 研究在加速條件下儲存之 mAb1 50 mg 凍乾藥品 的穩定性
凍乾前 調配物 20 mg/mL mAb1 、 10 mM 組胺酸， pH 6.0 、 10% （ w/v ）蔗糖、 0.05% （ w/v ）聚山梨醇酯 20
填充體積 2.5 mL
容器 / 封閉件 5 mL 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有 West V10-F597W 4432/50 B2-TR 塞子
無儲存 25 ℃ /60% RH 儲存 （月） 50 ℃儲存 （月）
分析a t=0 6 1 3
凍乾藥品 分析
餅狀物外觀 合格 合格 合格 合格
水分% 0.74 1.00 NR 1.00
復水時間（秒） 49 48 55 62
復水藥品分析b
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 5.9 5.9 5.9 5.9
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/容器） 2-10 μm 259 1227 NR 11225
≥ 10 µm 30 36 NR 429
≥ 25 µm 5 9 NR 64
藉由RP-UPLC回收之蛋白質% 100 99 100 99
根據MCE-SDS之純度 非還原；主峰% 100 100 NR 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 100 NR 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.8 1.1 0.9 1.1
天然% 98.8 98.4 98.7 98.3
LMW% 0.4 0.5 0.4 0.5
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 47.7 47.4 44.5 43.9
主要% 47.1 46.9 47.2 43.4
鹼性% 5.1 5.7 8.4 12.7
糖化% 24.4 23.7 22.3 20.5
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 45.1 48.4 NR 48.4
主要% 46.0 45.3 NR 38.8
鹼性% 8.8 6.3 NR 12.8
相對效力%（生物分析） 98 118 NR NR
a    CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像；NR，非必需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 b   樣品用無菌WFI復水至20 mg/mL mAb1
復水的mAb1藥品亦進行其他穩定性研究以評估復水的藥品在25℃下培育長達24小時以及在應力（攪動）條件下的穩定性。用2.3 mL WFI（至2.5 mL最終體積）將凍乾藥品（在5 mL 1型玻璃小瓶中調配的2.5 mL原料藥）復水為2 mg/mL mAb1或20 mg/mL mAb1。此等穩定性研究的結果顯示於下表14及15中。在25℃下培育24小時時，發現2 mg/mL mAb1及20 mg/ml mAb1之復水mAb1藥品溶液在物理及化學上係穩定的。在所監測之屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之顯著變化。此等資料表明復水的藥品在室溫下係穩定。亦發現當攪動（在環境溫度下渦旋）60分鐘時，2 mg/mL mAb1及20 mg/ml mAb1之復水的mAb1藥品溶液在物理及化學上係穩定的。在所監測之屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之顯著變化。 表 14 ： 研究用於 IV 投予之 mAb1 復水藥品的穩定性
配方 2 mg/mL mAb1、10 mM組胺酸，pH 6.0、10%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
容器/封閉件 5 mL 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有West V10-F597W 4432/50 B2-TR塞子
分析 無應力 攪動（分鐘） 25 ℃儲存（小時）
t=0 30 60 8 24
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/mL） 2-10 μm 1066 NR 3183 NR 407
≥ 10 µm 68 NR 60 NR 13
≥ 25 µm 6 NR 9 NR 5
藉由RP-UPLC回收之總蛋白質% 100 100 100 100 101
根據MCE-SDS之純度 a 非還原；主峰% 100 NR 100 NR 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 NR 100 NR 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6
天然% 99.0 98.9 98.9 98.9 99.0
LMW% 0.4 0.5 0.5 0.5 0.4
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 50.0 50.0 50.1 50.1 47.9
主要% 45.1 45.1 45.1 45.2 46.2
鹼性% 4.9 4.9 4.8 4.7 5.9
糖化% 23.8 23.6 23.6 23.5 24.4
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 48.4 NR 48.4 NR 48.3
主要% 43.6 NR 43.6 NR 43.6
鹼性% 8.0 NR 8.0 NR 8.1
藉由生物分析進行之相對效力% 88 NR 92 NR 94
CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 15 ： 研究用於 IV 投予之 mAb1 復水 20 mg/mL 藥品的穩定性
配方 20 mg/mL mAb1 、 10 mM 組胺酸， pH 6.0 、 10% （ w/v ）蔗糖、 0.05% （ w/v ）聚山梨醇酯 20
填充體積 2.5 mL
容器 / 封閉件 5 mL 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶，其具有 West V10-F597W 4432/50 B2-TR 塞子
分析 無應力 攪動（分鐘） 25 ℃儲存（小時）
t=0 30 60 8 24
顏色及外觀 合格 合格 合格 合格 合格
混濁度（在405 nm處之OD增加） 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
pH值 6.0 6.0 6.0 6.0 6.0
藉由MFI進行之微粒分析（顆粒/mL） 2-10 μm 8437 NR 4282 NR 2799
≥ 10 µm 1387 NR 134 NR 345
≥ 25 µm 249 NR 15 NR 74
藉由RP-UPLC回收之總蛋白質% 100 101 100 101 102
根據MCE-SDS之純度 a 非還原；主峰% 100 NR 100 NR 100
還原；重鏈+輕鏈% 100 NR 100 NR 100
根據SE-UPLC之純度 HMW% 0.8 0.8 0.8 0.8 0.8
天然% 98.7 98.7 98.7 98.7 98.7
LMW% 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
藉由CEX-UPLC進行之帶電變異體分析 酸性% 47.7 47.7 47.4 47.6 47.4
主要% 46.9 47.0 47.2 46.5 46.6
鹼性% 5.4 5.4 5.5 5.9 6.0
糖化% 24.1 24.7 24.4 24.1 24.5
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 酸性% 47.3 NR 47.2 NR 47.5
主要% 45.2 NR 45.0 NR 44.4
鹼性% 7.6 NR 7.8 NR 8.1
藉由生物分析進行之相對效力% 75 NR 64 NR 88
CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MFI，微流成像™；NR，非所需；OD，光密度；RP，反相；SDS，十二烷基硫酸鈉；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法
mAb1藥品儲存及應力穩定性研究的結果表明mAb1係穩定的。mAb1調配物可在不損害物理或化學穩定性之情況下承受短暫的暴露於室溫。當經復水至2 mg/mL或20 mg/ml之濃度時，mAb1調配物亦為穩定的。使經復水之mAb1藥品暴露於25℃持續長達24小時將不損害蛋白質之完整性，亦不損害經復水之藥品之攪動。
mAb1藥品的復水體積顯示於下表16及17中。 表 16 ： 為 IV 投予而 重組之 5 mg/ml mAb1 藥品的復水體積、溢出體積及可抽取體積
配方組分 為IV投予而復水
FDS中之mAb1濃度（預凍乾） 2 mg/mL
每小瓶蛋白質之量 5 mg
復水DP中之mAb1濃度 2 mg/mL
填充體積 2.5 mL
用於復水之WFI體積 2.3 mL
最終復水體積 2.5 mL
溢出體積 0.5 mL
可供抽取之體積 2.0 mL
DP，藥品；FDS，調配原料藥；IV，靜脈內；WFI，注射用水 表 17 ： 為 IV 投予而 復水之 50 mg/ml mAb1 DP 的復水體積、溢出體積及可抽取體積
配方組分 為IV投予而重組
FDS中之mAb1濃度（預凍乾） 20 mg/mL
每小瓶蛋白質之量 50 mg
復水DP中之mAb1濃度 20 mg/mL
目標填充體積 2.5 mL
用於復水之WFI體積 2.3 mL
最終復水體積 2.5 mL
溢出體積 0.5 mL
可供抽取之體積 2.0 mL
DP，藥品；FDS，調配原料藥；IV，靜脈內；WFI，注射用水
進行研究穩定性研究以確定mAb1原料藥（≥180 mg/ml mAb1、30 mM醋酸鹽、5% w/v蔗糖，pH 5.0）及調配原料藥（50 mg/ml mAb1、30 mM醋酸鹽、10% w/v蔗糖、0.2% w/v聚山梨醇酯20，pH 5.0）之長期儲存、加速穩定性（高於儲存條件的溫度）及應力穩定性（40℃/75% RH，攪動、冷凍及解凍），如下文更充分地論述。
在-80℃及-30℃下儲存長達24個月時，未偵測到mAb1原料藥的物理或化學穩定性發生顯著變化（參見表18及19）。此等結果表明當mAb1原料藥在儲存條件下冷凍儲存時穩定至少24個月。研究加速穩定性研究之結果呈現於表20至表22中。在-20℃下培育長達6個月之後，任何所監測屬性均未觀測到顯著變化。很可能歸因於樣品蒸發，在5℃及25℃/60% RH下培育長達6個月之後，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在5℃及25℃/60% RH下培育長達6個月之後，藉由SE-UPLC及非還原MCE觀測到HMW物種增加。由於MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在5℃及25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1（酸性物種）減少，同時伴隨區域2（主峰）增加。很可能歸因於脫醯胺作用，在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由iCIEF觀測到區域1（酸性物種）增加，同時伴隨區域2（主峰）減少。此等結果表明mAb1原料藥可耐受在-20℃下培育至少6個月而不損害蛋白質之物理或化學穩定性。研究應力穩定性研究之結果呈現於表23及表24及表17中。當攪動（渦旋）10分鐘或暴露於4次冷凍/解凍循環時，mAb1原料藥在物理及化學上係穩定的。很可能歸因於樣品蒸發，在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在40℃/75% RH下培育3個月之後觀測到顏色強度增加。在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由SE-UPLC及MCE觀測HMW及LMW物種增加。由於在MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在40℃/75% RH下培育之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1減少，同時伴隨區域2增加。在40℃/75% RH下培育3個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域3增加，同時伴隨區域2減少。區域3增加係由於CEX-UPLC所需之高鹽溶離步驟期間鹼性峰溶離增加。加速及加壓條件之結果指出mAb1原料藥之主要降解路徑為HMW、LMW及電荷變異體。 表 18 ： mAb1 原料藥在 -80 ℃下之穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-80℃下之儲存時長（月）
0 1 3 6 9 12 18 24 36
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY2 Not ＞ BY2 Not ＞ BY3  
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 4.9 4.9 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 181.9 185.6 189.5 189.2 181.4 183.3 186.1  
效力（%） 126 NR NR 106 NR 87 NR 80  
還原MCE（%） 純度 97.0 97.5 97.2 97.2 97.3 97.1 97.8 96.9  
LMW 0.4 0.4 0.4 0.5 0.2 0.5 0.2 0.8  
非還原MCE（%） 純度 97.7 97.8 97.7 97.6 96.1 97.0 97.1 97.4
LMW 1.8 1.8 1.7 1.7 2.8 2.4 1.7 1.6  
SE-UPLC（%） 純度 98.3 98.2 98.3 98.2 98.2 98.3 98.3 98.3
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.7 1.9 1.8 1.8 1.8 1.7 1.7 1.7
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 51.7 51.4 51.1 51.7 52.0 52.2 51.8
糖化 35.8 34.9 34.5 35.1 35.0 34.9 35.0 34.6
區域2 44.6 44.2 44.7 44.9 43.6 43.4 43.5 43.6
區域3 4.0 4.0 3.9 4.0 4.7 4.7 4.3 4.6  
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY2，顏色不比參考溶液BY2更深；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 19 ： mAb1 原料藥在 -30 ℃下之穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-30℃下之儲存時長（月）
0 1 3 6 9 12 18 24 36
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY2 Not ＞ BY2 Not ＞ BY3  
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 4.9 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 187.2 182.7 187.1 181.1 185.8 182.6 188.3  
效力（%） 126 NR NR 106 NR 92 NR 105  
還原MCE（%） 純度 97.0 97.7 97.5 96.9 97.1 97.1 97.4 96.6  
LMW 0.4 0.3 0.3 0.5 0.3 0.5 0.2 0.8  
非還原MCE（%） 純度 97.7 97.8 97.7 98.1 97.0 97.5 95.7 97.6
LMW 1.8 1.7 1.7 1.5 2.3 2.0 1.8 1.5  
SE-UPLC（%） 純度 98.3 98.2 98.2 98.2 98.2 98.2 98.2 98.1
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.7 1.8 1.8 1.8 1.8 1.8 1.8 1.9
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 51.8 51.4 51.2 51.5 51.8 52.2 51.7
糖化 35.8 34.9 34.7 35.1 34.9 34.6 35.1 34.5
區域2 44.6 44.3 44.7 45.0 43.7 43.3 43.6 43.9
區域3 4.0 3.9 3.9 3.9 4.7 4.9 4.3 4.5  
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY2，顏色不比參考溶液BY2更深；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 20 ： 在 -20 ℃下儲存之 mAb1 原料藥的穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-20℃下儲存之時長（月）
0 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 185.2 187.1 189.4
還原MCE（%） 純度 97.0 97.4 97.2 97.1
LMW 0.4 0.6 0.5 0.5
非還原MCE（%） 純度 97.7 97.4 97.5 97.4
LMW 1.8 2.4 1.8 1.7
SE-UPLC（%） 純度 98.3 98.2 98.2 98.2
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.7 1.8 1.8 1.8
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 51.7 51.3 51.2
糖化 35.8 34.9 34.1 35.2
區域2 44.6 44.3 44.7 44.8
區域3 4.0 4.0 4.0 4.0
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 21 ：在 5 ℃下儲存之 mAb1 原料藥的穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在5℃下之儲存時長（月）
0 0.5 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 183.3 188.4 187.9 197.5
還原MCE（%） 純度 97.0 97.4 97.3 97.2 97.0
LMW 0.4 0.4 0.3 0.4 0.6
非還原MCE（%） 純度 97.7 97.1 96.9 96.5 95.7
LMW 1.8 2.3 2.3 1.8 2.1
SE-UPLC（%） 純度 98.3 97.9 97.6 97.0 96.5
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.7 2.1 2.4 3.0 3.5
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 50.0 50.8 49.3 47.9
糖化 35.8 34.9 34.6 34.0 33.9
區域2 44.6 46.0 45.1 46.4 48.0
區域3 4.0 4.0 4.1 4.3 4.1
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 22 ：在 25 ℃ /60% RH 下儲存之 mAb1 原料藥的穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在25℃/60% RH下之儲存時長（月）
0 0.5 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY2
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 184.0 180.1 203.1 207.9
還原MCE（%） 純度 97.0 96.7 97.2 96.8 96.3
LMW 0.4 0.5 0.4 0.6 0.7
非還原MCE（%） 純度 97.7 96.5 96.1 94.9 93.7
LMW 1.8 2.2 2.3 2.2 2.4
SE-UPLC（%） 純度 98.3 96.8 96.2 95.2 94.2
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1
HMW 1.7 3.2 3.8 4.8 5.7
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 45.1 42.4 31.7 23.6
糖化 35.8 31.9 29.0 19.4 13.5
區域2 44.6 50.7 53.5 63.7 71.2
區域3 4.0 4.2 4.2 4.6 5.2
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY2，顏色不比參考溶液BY2更深；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 23 ：在 40 ℃ /75% RH 下儲存之 mAb1 原料藥的穩定性
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 40℃/75% RH下儲存之時長（月）
0 0.25 0.5 1 3
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY2 Not ＞ BY2 Not ＞ BY2 Not ＞ BY1
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 187.7 187.7 191.9 207.1
還原MCE（%） 純度 97.0 97.1 96.8 96.0 93.9
LMW 0.4 0.4 0.5 0.7 1.4
非還原MCE（%） 純度 97.7 95.8 95.3 93.2 86.2
LMW 1.8 1.9 2.2 3.7 5.6
SE-UPLC（%） 純度 98.3 95.0 92.6 88.4 78.1
LMW 0.0 0.0 0.0 0.2 0.6
HMW 1.7 5.0 7.4 11.4 21.3
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 32.1 22.7 17.6 18.4
糖化 35.8 21.4 13.5 7.4 9.3
區域2 44.6 62.5 70.3 71.7 55.7
區域3 4.0 5.5 7.0 10.6 25.9
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY1，顏色不比參考溶液BY1更深；Not＞BY2，顏色不比參考溶液BY2更深；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 24 ： mAb1 原料藥之穩定性－攪動及冷凍 / 解凍之影響
配方 182.0 mg/mL mAb1、30 mM醋酸、5%（w/v）蔗糖，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 t=0 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）
5 10 2 4
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY3 Not ＞ BY2 Not ＞ BY2
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 181.1 183.9 183.5 183.7 187.2
還原MCE（%） 純度 97.0 NR 96.7 NR 97.1
LMW 0.4 NR 0.5 NR 0.5
非還原MCE（%） 純度 97.7 NR 97.9 NR 97.5
LMW 1.8 NR 1.6 NR 1.9
SE-UPLC（%） 純度 98.3 98.3 98.3 98.3 98.2
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.7 1.7 1.7 1.7 1.8
CEX-UPLC（%） 區域1 51.5 51.5 51.4 49.9 50.6
糖化 35.8 35.1 35.0 34.7 34.9
區域2 44.6 44.7 44.6 46.0 45.3
區域3 4.0 3.8 3.9 4.0 4.0
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY2，顏色不比參考溶液BY2更深；Not＞BY3，顏色不比參考溶液BY3更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法
當在-80℃及-30℃下儲存長達24個月時，未偵測到mAb1調配之原料藥之物理或化學穩定性的顯著變化（參見表25及26）。此等結果表明當mAb1原料藥在儲存條件下冷凍儲存時能穩定至少24個月。研究加速穩定性研究之結果呈現於表27至29中。在-20℃或5℃下培育mAb1調配之原料藥長達6個月之後，未觀測到所監測屬性之顯著變化。可能歸因於樣品蒸發，在25℃/60% RH下培育長達6個月之後，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在5℃及25℃/60% RH下培育長達6個月之後，藉由SE-UPLC及非還原MCE觀測到HMW物種增加。由於MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1（酸性物種）減少，同時伴隨區域2（主峰）增加。很可能歸因於脫醯胺作用，在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由iCIEF觀測到區域1（酸性物種）增加，同時伴隨區域2（主峰）減少。此等結果表明mAb1原料藥可耐受在-20℃下培育至少6個月及在5℃下培育3個月而不損害蛋白質之物理或化學穩定性。mAb1調配之原料藥亦可耐受短時間暴露的溫度至25℃/60% RH。研究應力穩定性研究之結果呈現於表30及表31中。mAb1調配之原料藥在攪動（渦旋）長達120分鐘或經歷至多四個冷凍及解凍循環時在物理及化學上係穩定的（在經受4次冷凍/解凍循環之後藉由MFI觀測到顆粒之較少增加）。很可能歸因於樣品蒸發，在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由SE-UPLC及MCE觀測HMW及LMW物種增加。由於在MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在40℃/75% RH下培育之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1減少，同時伴隨區域2增加。在40℃/75% RH下培育2個月之後，存在區域1之減少且伴隨區域2之增加。然而，在三個月時間點之後趨勢顛倒，而觀測到區域1及區域3之明顯增加，並伴隨區域2之減少。區域1之增加可能歸因於天冬醯胺酸或麩醯胺酸上之競爭脫醯胺作用，而區域3之增加係歸因於在高鹽洗提步驟處，洗提出之鹼性峰增加。加速及加壓條件之結果指出mAb1調配之原料藥之主要降解路徑為HMW、LMW及電荷變異體。4次冷凍及解凍循環之後，藉由MFI觀測到2至10 µm顆粒的小量增加。 表 25 ： 在 -80 ℃下 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-80℃下之儲存時長（月）
0 1 3 6 9 12 18 24
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY5
pH值 5.0 4.9 5.0 5.0 5.0 4.9 4.9 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 52.4 50.1 51.9 51.0 49.7 51.2 52.2
效力（%） 92 NR NR 105 NR 91 NR 90
還原MCE（%） 純度 96.9 96.8 97.1 97.5 97.4 96.7 96.8 96.8
LMW 0.4 0.5 0.4 0.5 0.5 0.5 0.9 0.9
非還原MCE（%） 純度 97.6 98.0 97.4 97.8 97.5 97.6 97.8 97.9
LMW 2.0 1.8 1.9 1.8 2.2 2.0 1.8 1.6
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.6 98.6 98.6 98.6 98.6 98.6 98.4
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.4 1.4 1.4 1.4 1.4 1.5 1.4 1.6
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 51.9 51.5 51.4 51.9 52.1 52.4 50.7
糖化 35.3 35.2 34.7 35.3 35.1 35.0 35.1 34.3
區域2 44.5 44.1 44.7 44.9 43.7 43.2 43.5 44.8
區域3 3.7 4.0 3.8 3.8 4.4 4.7 4.0 4.5
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞BY5，顏色不比參考溶液BY5更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 26 ： 在 -30 ℃下 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-30℃下之儲存時長（月）
0 1 3 6 9 12 18 24
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY5
pH值 5.0 4.9 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 50.1 50.9 52.5 51.8 51.5 50.7 49.7
效力（%） 92 NR NR 105 NR 85 NR 94
還原MCE（%） 純度 96.9 96.6 96.5 97.2 97.4 97.3 96.8 96.8
LMW 0.4 0.5 0.5 0.5 0.2 0.5 0.8 0.9
非還原MCE（%） 純度 97.6 98.0 97.6 97.4 97.2 97.6 97.9 97.8
LMW 2.0 1.7 1.9 2.3 2.2 1.9 1.6 1.6
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.6 98.6 98.6 98.5 98.5 98.5 98.4
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1 0.0 0.0
HMW 1.4 1.4 1.4 1.4 1.5 1.5 1.5 1.6
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 51.9 51.6 51.4 51.8 52.0 52.4 50.8
糖化 35.3 35.1 34.7 35.1 34.9 34.9 35.2 34.3
區域2 44.5 44.1 44.7 44.8 43.7 43.2 43.6 44.8
區域3 3.7 4.0 3.8 3.8 4.5 4.7 4.1 4.4
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞BY5，顏色不比參考溶液BY5更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 27 ： 在 -20 ℃下儲存之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在-20℃下儲存之時長（月）
0 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.0 4.9 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 51.8 52.0 52.0
還原MCE（%） 純度 96.9 97.3 97.4 97.0
LMW 0.4 0.4 0.4 0.5
非還原MCE（%） 純度 97.6 97.9 97.5 97.6
LMW 2.0 1.6 1.9 1.9
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.6 98.6 98.6
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.4 1.5 1.4 1.5
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 51.9 51.5 51.3
糖化 35.3 35.2 34.6 35.1
區域2 44.5 44.2 44.7 45.0
區域3 3.7 3.9 3.8 3.8
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 28 ：在 5 ℃下儲存之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在5℃下之儲存時長（月）
0 0.5 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 51.7 53.2 51.9 54.3
還原MCE（%） 純度 96.9 97.6 96.4 97.4 97.2
LMW 0.4 0.4 0.5 0.4 0.7
非還原MCE（%） 純度 97.6 97.6 97.9 97.4 97.0
LMW 2.0 2.1 1.7 1.8 2.0
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.6 98.4 98.2 97.9
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.4 1.4 1.6 1.8 2.1
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 50.3 51.3 50.0 48.7
糖化 35.3 35.1 34.5 34.7 33.8
區域2 44.5 45.9 44.9 46.1 47.7
區域3 3.7 3.8 3.8 3.9 3.7
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 29 ：在 25 ℃ /60% RH 下儲存之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 在25℃/60% RH下之儲存時長（月）
0 0.5 1 3 6
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 50.8 52.2 54.8 60.0
還原MCE（%） 純度 96.9 96.3 96.1 97.0 96.6
LMW 0.4 0.5 0.5 0.7 0.8
非還原MCE（%） 純度 97.6 97.0 96.9 96.1 95.7
LMW 2.0 2.4 2.3 2.3 2.4
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.3 97.9 97.3 96.7
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1
HMW 1.4 1.8 2.2 2.7 3.2
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 45.5 42.6 31.4 24.0
糖化 35.3 32.1 28.1 19.5 13.8
區域2 44.5 50.7 53.7 65.2 72.3
區域3 3.7 3.8 3.7 3.4 3.7
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 30 ：在 40 ℃ /75% RH 下儲存之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 40℃/75% RH下儲存之時長（月）
0 0.25 0.5 1 3
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ II
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 52.9 52.3 53.2 56.2
還原MCE（%） 純度 96.9 97.1 96.8 96.1 94.7
LMW 0.4 0.5 0.5 1.0 1.3
非還原MCE（%） 純度 97.6 96.4 96.2 95.2 90.4
LMW 2.0 2.7 2.8 3.4 5.9
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.1 97.1 95.5 88.1
LMW 0.0 0.0 0.0 0.2 0.5
HMW 1.4 1.9 2.9 4.4 11.4
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 32.4 23.0 20.6 26.4
糖化 35.3 20.6 13.5 9.7 13.1
區域2 44.5 63.9 72.8 73.7 62.8
區域3 3.7 3.7 4.2 5.7 10.8
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；Not＞II，不比參考懸浮液II更渾濁；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法 表 31 ： mAb1 調配之原料藥的穩定性 攪動及冷凍 / 解凍之作用
配方 50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖、0.2%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0
容器/封閉件 5 mL具有HDPE閉合之γ輻射聚碳酸酯小瓶
分析 t=0 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）
60 120 2 4
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I Not ＞ I
顏色 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.6 51.7 52.9 50.3 51.7
還原MCE（%） 純度 96.9 NR 97.7 NR 96.9
LMW 0.4 NR 0.4 NR 0.5
非還原MCE（%） 純度 97.6 NR 97.4 NR 97.9
LMW 2.0 NR 2.1 NR 1.8
SE-UPLC（%） 純度 98.6 98.6 98.6 98.6 98.6
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.4 1.4 1.4 1.4 1.4
CEX-UPLC（%） 區域1 51.8 51.7 51.7 50.2 50.7
糖化 35.3 35.0 35.1 34.9 35.1
區域2 44.5 44.7 44.5 46.1 45.4
區域3 3.7 3.7 3.8 3.7 3.9
CEX，陽離子交換；HDPE，高密度聚乙烯；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更渾濁；NR，非所需；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法
穩定性研究已進行以評估液體mAb1藥品之儲存及加速穩定性。用於儲存及加速穩定性研究之液體藥品係藉由在6R ISO 1型玻璃小瓶中填充2.5 mL調配之原料藥來製造。液體藥品在儲存、加速及應力條件下培育。當在5℃下儲存長達12或24個月時未偵測到mAb1液體藥品之物理或化學穩定性之顯著變化（參見表32及33）。此等結果表明mAb1液體藥品在儲存條件下能保持穩定至少12或24個月。研究加速穩定性研究之結果呈現於表34及表35中。由於在MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處的去糖化，當在25 oC/60% RH下儲存長達6個月時，藉由CEX-UPLC觀測到區域1之減少，同時伴隨區域2之增加。在25℃/60% RH下培育長達6個月之後，藉由iCIEF觀測到區域1之增加，同時伴隨區域2之減少。在其他監測之屬性中未觀測到顯著變化。研究加壓穩定性研究之結果呈現於表34至表37中。mAb1液體藥品在攪動（渦旋）120分鐘時在物理及化學上係穩定的。在40℃/75% RH下培育3個月之後，藉由SE-UPLC觀測到HMW及LMW物種增加。在40℃/75% RH下培育3個月之後，藉由還原及非還原之MCE觀測到LMW物種增加。由於各分析之敏感性不同，藉由CEX-UPLC及iCIEF觀測到電荷變異體之不同趨勢。在40 oC/75% RH下培育長達3個月之後，很可能歸因於天冬醯胺酸或麩醯胺酸之脫醯胺作用，觀測到區域1之增加，同時伴隨區域2之減少。在40 oC/75% RH下培育長達2個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到存在區域1之減少，同時伴隨區域2之增加。很可能歸因於競爭脫醯胺反應，此後為在3個月時間點藉由CEX-UPLC觀測到區域1之明顯增加，同時伴隨區域2之減少。當在40 oC/75% RH下培育時，藉由iCIEF在3個月時間點觀測到區域3之減少。在4次冷凍及解凍循環之後，藉由MFI觀測到2至10 um顆粒之增加。加速及加壓條件之結果指出mAb1液體藥品之主要降解路徑為HMW、LMW及電荷變異體。 表 32 ： 在 5 ℃下儲存之 5.0 mg/ml mAb1 液體藥品的穩定性
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH為5.0的水性緩衝溶液中之無菌5.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur.1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec ®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off ®密封
儲存條件 5℃
分析 儲存時長（月）
0 3 6 9 12 18 24 30 36
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP    
透明度 Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I    
顏色 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7    
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0    
總蛋白（mg/mL） 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2    
效力（%） 135 NR 106 NR 107 NR 101    
聚山梨醇酯20（%） 0.21 NR 0.20 NR 0.21 NR 0.21    
還原MCE（%） 純度 97.5 97.3 96.9 97.2 96.9 97.4 96.8    
LMW 0.2 0.3 0.5 0.1 0.6 0.1 0.3    
非還原MCE（%） 純度 97.4 97.5 97.3 97.0 96.8 97.3 97.0    
LMW 2.2 2.0 2.1 2.5 2.7 2.1 2.2    
SE-UPLC（%） MP純度 98.5 98.6 98.5 98.5 98.5 98.4 98.4    
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0    
HMW 1.5 1.5 1.5 1.5 1.6 1.6 1.6    
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 41.0 39.6 38.8 37.7 37.0 35.9 34.3    
糖化 28.6 27.0 27.2 26.6 25.9 25.1 23.7    
區域2 53.9 55.5 56.6 57.5 57.6 59.7 61.8    
區域3 5.2 4.9 4.7 4.8 5.5 4.4 3.8    
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 37 135 229 NR 1074 NR 1460    
≥25 μm 0 0 0 NR 8 NR 0    
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY7，顏色不比參考溶液BY7更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；SE、尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 33 ：在 5 ℃下儲存之 50.0 mg/ml mAb1 液體藥品的穩定性
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH值為5.0的水性緩衝溶液中之無菌50.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur.1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off®密封
儲存條件 5℃
分析 儲存時長（月）
0 3 6 9 12 18 24 30 36
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP        
透明度 Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III        
顏色 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5        
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0        
總蛋白（mg/mL） 51.0 49.3 49.5 49.8 49.4        
效力（%） 81 NR 104 NR 130        
聚山梨醇酯20（%） 0.19 NR 0.20 NR 0.20        
還原MCE（%） 純度 97.1 97.2 97.3 96.5 96.7        
LMW 0.3 0.4 0.1 0.7 0.8        
非還原MCE（%） 純度 96.9 97.2 97.0 97.0 96.8        
LMW 2.3 2.0 2.1 2.1 2.3        
SE-UPLC（%） MP純度 97.9 97.9 97.8 97.7 97.6        
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0        
HMW 2.1 2.1 2.2 2.3 2.4        
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 39.9 38.9 38.1 37.4 36.9        
糖化 28.0 27.0 26.8 26.4 26.1        
區域2 54.3 55.8 56.6 57.8 58.1        
區域3 5.8 5.3 5.3 4.9 5.1        
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 25 18 62 NR 49        
≥25 μm 2 0 0 NR 0        
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY5，顏色不比參考溶液BY5更深；Not＞III，不比參考懸浮液III更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 34 ： 在 25 ℃ /60% RH 及 40 ℃ /75% RH 下儲存之 5.0 mg/ml mAb1 液體藥品的穩定性
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH值為5.0的水性緩衝溶液中之無菌5.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur.1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off ®密封
分析 t = 0 25℃/60% RH儲存（月） 40℃/75% RH儲存（月）
1 3 6 0.5 1 3
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞I Not ＞II Not ＞I Not ＞II Not ＞II Not ＞II Not ＞II
顏色 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2 5.4
聚山梨醇酯20（%） 0.21 NR NR 0.21 NR NR 0.20
還原MCE（%） 純度 97.5 97.1 96.9 96.6 96.7 96.6 94.5
LMW 0.2 0.4 0.5 0.6 0.5 0.4 1.5
非還原MCE（%） 純度 97.4 97.0 97.1 96.9 97.0 96.1 92.9
LMW 2.2 2.6 2.4 2.6 2.6 3.5 5.8
SE-UPLC（%） MP純度 98.5 98.7 98.4 98.3 98.6 97.5 95.4
LMW 0.0 0.0 0.2 0.0 0.0 0.8 0.7
HMW 1.5 1.3 1.5 1.7 1.4 1.7 3.9
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 41.0 31.5 24.6 19.7 17.8 14.2 26.2
糖化 28.6 22.6 14.7 10.1 9.4 6.2 13.2
區域2 53.9 64.4 71.9 76.9 78.4 81.5 67.7
區域3 5.2 4.1 3.5 3.4 3.7 4.3 6.1
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 37 NR 451 580 NR NR 484
≥25 μm 0 NR 8 10 NR NR 5
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY7，顏色不比參考溶液BY7更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更混濁；Not＞II，不比參考懸浮液II更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 35 ：在 25 ℃ /60% RH 及 40 ℃ /75% RH 下儲存之 50.0 mg/ml mAb1 液體藥品的穩定性
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH值為5.0的水性緩衝溶液中之無菌50.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur. 1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off ®密封
分析 t = 0 25℃/60% RH儲存（月） 40℃/75% RH儲存（月）
1 3 6 0.5 1 3
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞III
顏色 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY4
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.0 48.6 50.3 51.0 49.5 49.3 51.1
聚山梨醇酯20（%） 0.19 NR NR 0.20 NR NR 0.19
還原MCE（%） 純度 97.1 97.4 96.7 96.5 96.7 95.9 93.5
LMW 0.3 0.2 0.6 0.3 0.4 1.0 2.6
非還原MCE（%） 純度 96.9 96.2 96.4 93.2 95.9 94.7 91.6
LMW 2.3 2.9 2.5 3.0 2.9 3.8 6.0
SE-UPLC（%） MP純度 97.9 97.8 97.5 97.4 97.0 96.1 90.4
LMW 0.0 0.0 0.1 0.0 0.4 0.5 0.4
HMW 2.1 2.2 2.5 2.6 2.6 3.5 9.2
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 39.9 33.3 25.4 20.9 18.5 17.4 28.6
糖化 28.0 23.2 15.6 11.4 11.1 8.8 13.1
區域2 54.3 62.0 69.6 74.7 77.2 77.1 59.4
區域3 5.8 4.7 5.1 4.4 4.3 5.5 12.0
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 25 NR 55 75 NR NR 20
≥25 μm 2 NR 1 1 NR NR 1
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY4，顏色不比參考溶液BY4更深；Not＞BY5，顏色不比參考溶液BY5更深；Not＞III，不比參考懸浮液III更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；RH，相對濕度；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 36 ： 5.0 mg/nl mAb1 液體藥品的穩定性 攪動及冷凍 / 解凍之作用
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH值為5.0的水性緩衝溶液中之無菌5.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器/封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur.1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off ®密封
分析 T = 0 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）
60 120 2 4
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I Not ＞I
顏色 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7 Not ＞BY7
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 5.2 5.2 5.2 5.2 5.2
聚山梨醇酯20（%） 0.21 NR 0.20 NR 0.21
還原MCE（%） 純度 97.5 NR 97.2 NR 97.3
LMW 0.2 NR 0.2 NR 0.2
非還原MCE（%） 純度 97.4 NR 97.2 NR 97.8
LMW 2.2 NR 2.4 NR 1.9
SE-UPLC（%） MP純度 98.5 98.3 98.3 98.4 98.5
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 1.5 1.7 1.7 1.7 1.6
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 41.0 40.9 40.8 39.2 39.5
糖化 28.6 28.5 28.5 28.1 28.1
區域2 53.9 53.9 54.2 55.7 55.3
區域3 5.2 5.2 5.1 5.1 5.2
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 37 NR 125 NR 294
≥25 μm 0 NR 0 NR 15
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY7，顏色不比參考溶液BY7更深；Not＞I，不比參考懸浮液I更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；SE、尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 37 ： 50.0 mg/nl mAb1 液體藥品的穩定性 攪動及冷凍 / 解凍之作用
配方 mAb1藥品；含有30 mM醋酸鹽、10%（w/v）蔗糖及0.2%（w/v）聚山梨醇酯20之pH值為5.0的水性緩衝溶液中之無菌50.0 mg/mL小瓶裝mAb1重組蛋白
容器/封閉件 6R（5 mL）USP/Ph. Eur.1型硼矽酸鹽玻璃小瓶；20 mm經FluroTec®塗佈之氯丁基塞子；20 mm Flip-Off ®密封
分析 T = 0 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）
60 120 2 4
物理形態/條件 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 Not ＞III Not ＞III Not ＞III Not ＞II Not ＞III
顏色 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5 Not ＞BY5
pH值 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 51.0 49.4 49.1 49.4 48.1
聚山梨醇酯20（%） 0.19 NR 0.19 NR 0.19
還原MCE（%） 純度 97.1 NR 97.1 NR 97.3
LMW 0.3 NR 0.2 NR 0.1
非還原MCE（%） 純度 96.9 NR 96.6 NR 96.8
LMW 2.3 NR 2.8 NR 2.4
SE-UPLC（%） MP純度 97.9 97.8 97.9 97.8 97.8
LMW 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
HMW 2.1 2.2 2.2 2.2 2.2
藉由CEX-UPLC之電荷變異體分析（%） 區域1 39.9 40.0 40.1 39.0 39.0
糖化 28.0 27.9 28.1 28.0 28.1
區域2 54.3 54.2 54.1 55.6 55.6
區域3 5.8 5.8 5.8 5.5 5.4
藉由不透光度（#/容器）之顆粒物質 ≥10 μm 25 NR 12 NR 34
≥25 μm 2 NR 0 NR 1
CEX，陽離子交換；HMW，高分子量；LEFVP，基本上不含可見微粒的液體；LMW，低分子量；MCE，微晶片毛細管電泳；MP，主峰；Not＞BY5，顏色不比參考溶液BY5更深；Not＞II，不比參考懸浮液II更混濁；Not＞III，不比參考懸浮液III更混濁；NR，非所需；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 實例 3 ：凍乾循環開發
開發用於臨床生產之凍乾過程由以下組成：冷凍、初次乾燥及二次乾燥。凍乾過程使用基於-31.2℃之部分餅狀物崩潰溫度的FTS LyoStar ™III凍乾器進行，使用冷凍乾燥顯微鏡測定經冷凍調配之原料藥。在初次乾燥期間，產品溫度不超過部分餅狀物崩潰溫度，藉此在凍乾循環期間維持餅狀物狀完整性。開發二次乾燥過程以確保藥品具有較低殘餘水分含量。
該凍乾循環花費大致63小時在含有2.5 mL 2 mg/mL mAb1調配之原料藥的5 mL 1型玻璃小瓶中產生冷凍乾燥之mAb1藥品。凍乾循環含有下表38中所示之步驟。 表 38 ： 凍乾循環
凍乾步驟 儲存溫度勻變速率 （勻變持續時間） 儲存溫度（℃） 保持時間（小時） 腔室壓力
加載量 NA 5-25 NA 環境壓力
保持 0.5℃/分鐘 5 1 環境壓力
冷凍 0.5℃/分鐘（100分鐘） -45 2 環境壓力
初次乾燥 0.5℃/分鐘（50分鐘） -20 40 100毫托
二次乾燥 0.2℃/分鐘（300分鐘） 40 10 100毫托
加塞之溫度斜線變化 0.5℃/分鐘（30分鐘） 25 1 100毫托
用氣體氮氣充填 NA 25 NA 80%大氣壓力（608,000毫托）
加塞 NA 25 NA 80%大氣壓力（608,000毫托）
NA，不適用 實例 4 ：開發用於靜脈內投予之穩定液體抗 MUC16× 抗 CD3 雙特異性抗體調配物及調配物穩定性
進行靜脈內（IV）調配物（包括包含5 mg/ml mAb1及50 mg/ml mAb1之調配物)之開發以鑑別使MUC16結合臂中HCDR3-Lys98處之糖化變化降至最低的pH值、適當緩衝液及維持pH值且克服製造期間所觀測到之唐南效應（Donnan effect）的濃度、維持所需黏度及張力之濃度的適合熱穩定劑及在IV投予期間維持足以稀釋之濃度的適合界面活性劑，同時維持穩定液體調配物。
如上文所論述，MUC16結合臂之HC-CDR3-Lys98處之糖化對效力具有直接影響。去糖化導致如藉由生物分析所量測之效力增加。影響mAb1中之去糖化速率的主要調配物因子係pH值。在液體調配物中藉由在三個不同pH值：5.0、5.5及6.0下的10 mM組胺酸、10%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）聚山梨醇酯20中在5℃下培育2 mg/mL mAb1 36個月或在25℃下培育2個月來研究pH值對糖化及高分子量（HMW）物種之水準的影響（圖2A至2D）。在此等條件下觀測到之主要降解路徑為HMW物種之形成及如藉由CEX-UPLC偵測到之HC-CDR3-Lys98處的去糖化。隨著mAb1調配物之pH值降低，所形成之HMW物種之水準及去糖化速率降低。
此係因為組胺酸在pH 5.0下並非良好緩衝液，所以選擇醋酸鈉作為mAb1液體調配物之緩衝液。藉由用5%（w/v）蔗糖及五種不同pH值：4.8、5.0、5.2、5.5及5.7在熱應力下培育含50 mg/mL mAb1之10 mM醋酸鹽中研究pH值之影響。在40℃下培育28天之後，主要降解路徑為HMW物種之形成及HC-CDR3-Lys98處之去糖化。與組胺酸緩衝液中之觀測結果一致，所形成HMW物種之水準及在較低pH值下去糖化速率降低（圖3A至3B）。選擇pH 5.0作為目標以產生保持穩定mAb1所需之範圍內的正常製造變化的穩健調配物。
在液體調配物中檢測在pH 5.0下醋酸鹽濃度對150 mg/mL mAb1調配物之穩定性的作用。含有21至40 mM範圍內之醋酸鹽緩衝液的調配物在45℃下培育14天。較高溫度允許快速偵測蛋白質降解。此等分析揭露主要降解路徑為HMW物種及電荷變異體之形成。基於該資料選擇導致增加HMW物種及30 mM之醋酸鹽濃度增加。濃度為30 mM之醋酸鹽能夠處理在製造過程期間所觀測到之唐南效應。作為唐南效應之結果，需要30 mM醋酸鹽以將調配物pH值維持在5.0。與具有較高濃度之醋酸鹽的調配物相比，此醋酸鹽濃度在此應力條件下提供相對於HMW物種之形成的經改良之穩定（表39）。因此，選擇30 mM作為用於IV投予之mAb1液體調配物之醋酸鹽濃度。 表 39 ： 在 45 ℃下培育 14 天之含 150 mg/mL mAb1 之 pH 值為 5.0 之醋酸鹽緩衝液中的穩定性
配方 含 150 mg/mL mAb1 之醋酸鹽緩衝液， pH 值為 5.0
填充體積 0.5 mL
容器 / 封閉件 2R USP/Ph. Eur. 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶； 13 mm 經 FluroTec ® 塗佈之丁基彈性塞； 13 mm Flip-Off ® 密封
儲存條件 在 45 ℃下培育 14 天
緩衝液 t=0a 21 mM 醋酸鹽 30 mM 醋酸鹽 40 mM 醋酸鹽
顏色及外觀b 合格 合格 合格 合格
濁度（OD在405 nm下之增加）c 0.00 0.02 0.03 0.06
pH值 5.0 5.0 5.1 5.1
藉由RP-UPLC之總蛋白（mg/mL） 155 152 166 161
SE-UPLC（%） HMW 1.3 18.1 20.0 21.9
純度 98.4 80.1 78.7 76.8
LMW 0.3 1.8 1.4 1.3
CEX-UPLC （%） 區域1 47.1 22.3 23.7 24.0
糖化 28.9 5.0 5.5 5.5
區域2 48.4 73.3 72.0 71.6
區域3 4.5 4.4 4.4 4.4
at=0結果報導表示此研究中所有樣品之起始值的平均值 b   樣品通過顏色及目視外觀評估，若其為透明至淺乳白色，基本上不含可見微粒，且無色至淡黃色。 c與各調配物之t=0相比 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典
在液體調配物（150 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽，pH值為5.0，具有0至13%[w/v]蔗糖）中在冷凍/解凍及熱應力下檢驗蔗糖對mAb1之穩定性的影響。較高溫度允許在此等應力下快速偵測蛋白質降解。在冷凍/解凍應力下，主要降解路徑為HMW物種之形成（表40）。在45℃熱應力下，主要降解路徑為HMW及LMW物種之形成及電荷變異體之變化。具有較高濃度蔗糖之調配物（≥10%）藉由降低HMW及LMW物種之水準及HC-CDR3-Lys98處之去糖化速率而提供經改良之穩定（表41）。為維持mAb1之所需黏度及張力，選擇10%（w/v）蔗糖作為用於IV投予之液體調配物之熱穩定劑。 表 40 ： 在冷凍 / 解凍應力條件下，含有 150 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液的穩定性，其中該醋酸鹽緩衝液具有不同濃度之蔗糖（ pH 值為 5.0 ）
配方 含 150 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液， pH 值為 5.0
填充體積 0.5 mL
容器 / 封閉件 2R USP/Ph. Eur. 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶； 13 mm 經 FluroTec ® 塗佈之丁基橡膠塞子； 13 mm Flip-Off ® 密封
應力條件 8 次冷凍 / 解凍循環
熱穩定劑 t=0a 0% （ w/v ）蔗糖 2% （ w/v ）蔗糖 5% （ w/v ）蔗糖 10% （ w/v ）蔗糖 13% （ w/v ）蔗糖
顏色及外觀b 合格 合格 合格 合格 合格 合格
濁度（OD在405 nm下之增加）c 0.00 0.02 0.00 0.00 0.00 0.01
pH值 5.0 5.1 5.1 5.1 5.1 5.0
總蛋白（mg/mL） 155 148 150 162 149 157
SE-UPLC（%） HMW 1.3 2.4 1.5 1.4 1.4 1.4
純度 98.4 97.1 98.2 98.3 98.3 98.4
LMW 0.3 0.5 0.3 0.3 0.3 0.3
CEX-UPLC （%） 區域1 47.1 46.3 46.8 46.8 47.0 46.9
糖化 28.9 28.7 28.3 28.4 27.9 28.5
區域2 48.4 48.5 48.4 48.4 48.3 48.4
區域3 4.5 5.2 4.8 4.8 4.8 4.7
at=0結果報導表示此研究中所有樣品之起始值的平均值 b   樣品通過顏色及目視外觀評估，若其為透明至淺乳白色，基本上不含可見微粒，且無色至淡黃色。 c與各調配物之t=0相比 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 41 ： 在 45 ℃下培育 14 天之含有 150 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液的穩定性，其中該醋酸鹽緩衝液具有不同濃度之蔗糖（ pH 值為 5.0 ）
配方 含 150 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液， pH 值為 5.0
填充體積 0.5 mL
容器 / 封閉件 2R USP/Ph. Eur. 1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶； 13 mm 經 FluroTec ® 塗佈之丁基橡膠塞子； 13 mm Flip-Off ® 密封
儲存條件 在 45 ℃下培育 14 天
熱穩定劑   t=0a 0% （ w/v ）蔗糖 2% （ w/v ）蔗糖 5% （ w/v ）蔗糖 10% （ w/v ）蔗糖 13% （ w/v ）蔗糖
顏色及外觀b 合格 合格 合格 合格 合格 合格
濁度（OD在405 nm下之增加）c 0.00 0.03 0.03 0.03 0.01 0.02
pH值 5.0 5.1 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（mg/mL） 155 166 156 157 161 165
SE-UPLC（%） HMW 1.3 20.0 26.0 23.4 17.3 14.5
純度 98.4 78.7 72.8 75.6 81.8 84.7
LMW 0.3 1.4 1.2 1.1 0.9 0.8
CEX-UPLC （%） 區域1 47.1 23.7 24.7 25.1 27.1 28.3
糖化 28.9 5.5 6.1 5.1 6.7 8.1
區域2 48.4 72.0 70.8 70.4 68.3 67.1
區域3 4.5 4.4 4.5 4.5 4.6 4.5
at=0結果報導表示此研究中所有樣品之起始值的平均值 b   樣品通過顏色及目視外觀評估，若其為透明至淺乳白色，基本上不含可見微粒，且無色至淡黃色。 c與各調配物之t=0相比 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典
在mAb1調配物初始開發期間表明對界面活性劑之需求。當不存在界面活性劑時，當藉由渦旋攪動調配物時，觀測到mAb1 HMW物種增加。添加界面活性劑使mAb1穩定至攪動應力。在初始開發中，由於與聚山梨醇酯80相比改良之熱穩定性，選擇聚山梨醇酯20作為界面活性劑。當在0.9%氯化鈉中稀釋以用於IV投予時，意欲用於IV投予之mAb1調配物亦需要調配物中之聚山梨醇酯20使mAb1穩定。
在液體調配物（50 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、10%[w/v]蔗糖，pH值為5.0，具有0至0.25%[w/v]聚山梨醇酯20）中在攪拌及熱應力下檢驗聚山梨醇酯20對mAb1之穩定性的影響。
在攪動應力下，mAb1在所測試之所有液體調配物中係穩定的（表42）。在45℃熱應力下，HMW物種及電荷變異體之形成為主要降解路徑（表43）。增加聚山梨醇酯20濃度對電荷變異體之形成具有無意義影響，然而，在增加聚山梨醇酯20濃度之情況下觀測到所形成HMW物種之水準的一些增加。此係因為此等mAb1調配物藉由在0.9%氯化鈉中稀釋而進行IV遞送，所以調配物將含有0.2%（w/v）聚山梨醇酯20。0.2%聚山梨醇酯20使mAb1穩定且在稀釋用於IV投予時提供mAb1之足夠穩定化。 表 42 ： 含 50 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液、 10% （ w/v ）蔗糖， pH 值為 5.0 與聚山梨醇酯 20 藉由渦旋攪動之穩定性
配方 含 50 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液、 10% （ w/v ）蔗糖， pH 值為 5.0
填充體積 0.5 mL
容器 / 封閉件 2R USP/Ph. Eur.1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶； 13 mm 經 FluroTec ® 塗佈之丁基橡膠塞子； 13 mm Flip-Off ® 密封
應力條件 以 1,000 rpm 渦 旋 60 min
界面活性劑 t=0a 0% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.05% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.10% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.20% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.25% （ w/v ）聚山梨醇酯 20
顏色及外觀b 合格 合格 合格 合格 合格 合格
濁度（OD在405 nm下之增加）c 0.00 0.00 0.01 0.01 0.00 0.00
pH值 5.1 5.0 5.0 5.1 5.0 5.1
總蛋白（mg/mL） 51 48 49 49 49 49
SE-UPLC（%） HMW 1.7 1.7 1.7 1.7 1.7 1.7
純度 98.0 98.0 98.0 98.0 98.0 98.0
LMW 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
CEX-UPLC （%） 區域1 43.4 43.3 43.3 43.5 43.3 43.6
糖化 30.9 31.0 31.0 30.9 30.9 31.3
區域2 51.8 51.9 51.9 51.6 51.9 51.8
區域3 4.8 4.8 4.8 4.9 4.8 4.6
at=0結果報導表示此研究中所有樣品之起始值的平均值 樣品通過顏色及目視外觀評估，若其為透明至淺乳白色，基本上不含可見微粒，且無色至淡黃色。 c與各調配物之t=0相比 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典 表 43 ： 在 45 ℃下培育 14 天之含 50 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液、 10% （ w/v ）蔗糖、 pH 值為 5.0 與聚山梨醇酯 20 的穩定性
配方 含 50 mg/mL mAb1 之 30 mM 醋酸鹽緩衝液、 10% （ w/v ）蔗糖， pH 值為 5.0
填充體積 0.5 mL
容器 / 封閉件 2R USP/Ph. Eur.1 型硼矽酸鹽玻璃小瓶； 13 mm 經 FluroTec ® 塗佈之丁基橡膠塞子； 13 mm Flip-Off ® 密封
儲存條件 在 45 ℃下培育 14 天
界面活性劑 t=0a 0% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.05% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.10% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.20% （ w/v ）聚山梨醇酯 20 0.25% （ w/v ）聚山梨醇酯 20
顏色及外觀b 合格 合格 合格 合格 合格 合格
濁度（OD在405 nm下之增加）c 0.00 0.01 0.01 0.02 0.01 0.01
pH值 5.1 5.1 5.1 5.1 5.1 5.1
總蛋白（mg/mL） 51 50 50 51 51 50
SE-UPLC（%） HMW 1.7 4.2 5.1 5.1 5.8 6.0
純度 98.0 95.0 94.0 94.0 93.3 93.1
LMW 0.3 0.9 0.9 0.9 0.9 0.9
CEX-UPLC （%） 區域1 43.4 17.7 17.4 17.4 16.6 16.8
糖化 30.9 8.0 7.8 7.9 7.3 7.4
區域2 51.8 75.1 74.5 74.7 74.8 74.5
區域3 4.8 7.2 8.1 7.9 8.6 8.7
at=0結果報導表示此研究中所有樣品之起始值的平均值 b   樣品通過顏色及目視外觀評估，若其為透明至淺乳白色，基本上不含可見微粒，且無色至淡黃色。 c與各調配物之t=0相比 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；HMW，高分子量；LMW，低分子量；OD，光密度；Ph. Eur，歐洲藥典；SE，尺寸排阻；UPLC，超高效液相層析法；USP，美國藥典
進行長期、加速及壓力穩定性研究以驗證液體調配物之穩定性。結果指示此等調配物提供足夠的穩定性。 實例 5 ：開發用於皮下投予之穩定液體抗 MUC16× 抗 CD3 雙特異性抗體調配物及調配物穩定性
開發包括包含150 mg/ml mAb1之調配物的皮下（SC）調配物以鑑別用於SC投予及穩定性而最大化的賦形劑及濃度。
鑑別緩衝液、pH值及界面活性劑參數用於IV調配物（實例4）且此等參數應用於皮下調配物。界面活性劑（聚山梨醇酯20）濃度亦在IV調配物開發期間表徵且資料用於選擇適合於皮下調配物之界面活性劑濃度。在mAb1之皮下調配物開發期間，緩衝液、pH值及界面活性劑類型及濃度保持恆定至以下水準： ●  pH：5.0。為使去糖化速率及HMW物種形成降至最低 ●  緩衝液：30 mM醋酸鈉。為維持pH 5.0，即使在處理期間觀測到唐南效應 ●  界面活性劑：0.05%（w/v）聚山梨醇酯20。為了平衡對攪拌應力之穩定性同時最小化對熱穩定性之影響
評估mAb1 SC調配物之其他因素係： ●  mAb1濃度：在50至150 mg/mL範圍內評定 ○      mAb1濃度，其在2至8℃下儲存時達成所需臨床劑量，同時維持穩定性至少24個月，且在20℃下維持黏度小於20 cP，其中目標重量滲透濃度為290至400 mOsm/kg。 ●  蔗糖濃度：在2至10%範圍內評定 ○      蔗糖濃度以提供足夠熱穩定性，同時最小化對重量滲透濃度及黏度之影響 ○      需要至少2%（w/v）蔗糖以使mAb1穩定至冷凍/解凍應力 ●  精胺酸濃度：在0至100 mM範圍內評定 ○      評定精胺酸降低黏度及評定對穩定性及重量滲透濃度之影響的能力
用於SC投予所評估之調配物展示於下表44中。 表 44 ：針對 mAb1 之 SC 投予測試 之調配物
配方編號 [蛋白質]（mg/mL） [蔗糖]（%，w/v） [精胺酸]（mM） 醋酸鹽（mM） 聚山梨醇酯20（%）
1 100 2 37.5 30 0.05
2 100 10 0 30 0.05
3 50 2 100 30 0.05
4 150 10 100 30 0.05
5 50 2 0 30 0.05
6 50 10 100 30 0.05
7 150 10 50 30 0.05
8 50 6 50 30 0.05
9 100 6 100 30 0.05
10 150 4.44 0 30 0.05
11 100 6 50 30 0.05
12 150 2 100 30 0.05
黏度分析-圖4顯示mAb1黏度作為mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度之函數的依賴性。自此研究得到以下觀測結果：（i）促成黏度之主要因素為mAb1濃度。在50至150 mg/mL範圍內，黏度自約2 cP至約11 cP(在20℃下)以指數方式增加；(ii)黏度對蔗糖存在較小依賴性。在150 mg/mL mAb1濃度下，當蔗糖在2至10%（w/v）變化時，黏度在約11 cP至13 cP（在20℃下）範圍內增加；且（iii）精胺酸濃度對黏度之影響在量值方面與蔗糖類似，但精胺酸增加黏度自約11 cP降至9 cP（在20℃下）。
黏度分析-圖5顯示mAb1重量滲透濃度作為mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度之函數的依賴性。自此研究得到以下觀測結果：（i）mAb1濃度對50至150 mg/mL範圍內之重量滲透濃度產生可忽略的貢獻；（ii）促成重量滲透濃度之主要因素為蔗糖。在150 mg/mL mAb1濃度下，當蔗糖在2至10%（w/v）變化時，重量滲透濃度自約90 mOsm/kg增加至約410 mOsm/kg；及（iii）增加精胺酸濃度亦使得重量滲透濃度增加。在150 mg/mL mAb1下，精胺酸自0增加至100 mM使重量滲透濃度自約90 mOsm/kg增加至約300 mOsm/kg。
穩定性分析-圖6展示mAb1隨mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度變化的穩定性。在此研究中，評定在25℃/60% RH及40℃/75% RH下HMW物種形成。另外，在相同條件下評定酸性物種之損失及糖化物種之損失。進行以下觀測：（i）增加蔗糖濃度引起在25℃/60% RH及40℃/75% RH下HMW形成速率降低；（ii）增加精胺酸濃度引起在25℃/60% RH下HMW形成速率降低但HMW形成速率在40℃/75% RH下增加；（iii）增加蔗糖濃度引起酸性物種及糖化物種形成速率在25℃/60% RH下降低。（酸性及糖化物種隨時間推移減少，因此較小的負速率意謂隨時間推移之較少降解）；及（iv）增加精胺酸濃度使得在25℃/60% RH下形成糖化物種之速率降低。
基於先前開發研究（例如實例1及2）及此研究，選擇兩種主導調配物用於進一步穩定性、黏度及重量滲透濃度評定。兩種主導調配物及相應黏度及重量滲透濃度顯示於下表45中。兩種調配物均滿足在150 mg/mL mAb1濃度下之黏度及重量滲透濃度目標。兩種調配物在40℃/75% RH下培育3個月、在25℃/60% RH下培育6個月或在2至8℃下培育6個月時顯示類似的穩定性（圖7A及7B）。兩種調配物均顯示HMW物種及糖化物種之類似變化。 表 45 ：例示性 mAb1 SC 調配物
配方 20C （ CP ）下之黏度 重量滲透濃度（ MMOL/KG ）
150 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、 8% （ w/v ）蔗糖、0.05%（w/v）PS20，pH 5.0 12.6 333
150 mg/mL mAb1、30 mM醋酸鹽、 7% （ w/v ）蔗糖、 50 mM 精胺酸、0.05%（w/v）PS20，pH 5.0 11.6 389
基於此等資料，兩種調配物均為可比較的。不選擇精胺酸作為皮下調配物中之賦形劑，因為其提供對穩定性或黏度之極小改良但引起重量滲透濃度增加。因此，較佳例示性皮下調配物為：150 mg/mL mAb1；30 mM醋酸鹽，pH 5.0；8% w/v蔗糖；及0.05% w/v聚山梨醇酯20。
亦開始進行穩定性研究以評估mAb1調配物之儲存、應力及加速穩定性。穩定性研究包括在肖特(Schott) 6R硼矽酸鹽玻璃小瓶中儲存之皮下（SC）調配物（含150 mg/mL mAb1之30 mM醋酸鈉、8%（w/v）蔗糖、0.05%（w/v）聚山梨醇酯20，pH 5.0）。液體調配物在儲存、應力及加速條件下培育。應力及加速條件經選擇以模擬藥品在製造及處理期間將經受之條件，及闡明mAb1之降解路徑。亦評估額外應力（包括攪動及冷凍/解凍）下之穩定性。
當在5℃下儲存至少6個月時，評估調配物中之抗體（mAb1）在物理及化學上係穩定的（表46）。在6R小瓶中，在5℃下在經監測屬性中之任一者中未偵測到穩定性之顯著變化。在加速及應力條件下培育之後mAb1調配物之分析的結果提供於表47中。在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由SE-UPLC觀測到1.7% HMW物種增加。由於各分析之敏感性不同，藉由CEX-UPLC及iCIEF觀測到電荷變異體之不同趨勢。藉由iCIEF觀測到區域1之增加，同時伴隨區域2之減少。由於MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化（去糖化亦出現在熱應力條件下），當在25℃/60% RH下儲存至多6個月時，藉由CEX-UPLC觀測到區域1之減少，同時伴隨區域2之增加。加速條件之結果指示液體調配物在6R小瓶中在熱應力下係穩定的。
在40℃/75% RH下培育3個月之後，藉由SE-UPLC分別觀測到HMW及LMW物種中之15.9及1.1%增加。由於各分析之敏感性不同，藉由CEX-UPLC及iCIEF觀測到電荷變異體之不同趨勢。在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由iCIEF觀測到區域1之增加，同時伴隨區域2及3之減少，可能歸因於天冬醯胺酸或麩醯胺酸上之脫醯胺作用。在40℃/75% RH下培育長達2個月之後，由於MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化而藉由CEX-UPLC觀測到區域1之降低，同時伴隨區域2之增加（去糖化亦在加速應力條件下發生）。此後為在3個月時間點藉由CEX-UPLC觀測到區域1之明顯增加，同時伴隨區域2之減少，很可能歸因於競爭脫醯胺反應。在40 oC/75% RH下3個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域3中亦存在16.3%增加。此增加經測定以包含mAb1之寡聚物種，主要包括四聚體、五聚物、六聚體及七聚體物種。在40℃/75% RH下培育mAb1調配物之結果指出mAb1藥品之主要降解路徑為HMW及LMW物種之形成及電荷變異體之分佈變化。
當渦旋60或120分鐘時，mAb1調配物在物理及化學上係穩定的（表48）。在所監測之屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之可觀變化。當經歷4次冷凍及解凍循環時，mAb1調配物亦在物理及化學上係穩定的（表48）。在所監測之屬性中之任一者中未偵測到物理或化學穩定性中之可觀變化。 表 46 ： 在 5 ℃下儲存之 mAb1 藥品的穩定性
配方 150.0 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽、8%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）聚山梨醇酯20。
儲存容器 USP/EP 1型硼矽酸鹽6R ISO玻璃小瓶；20 mm West S10-F451 4432/50 B2-40液體塞子；具有旋轉關閉按鈕之West 20 mm鋁密封
儲存條件 5℃，直立式
分析 品質接受準則a 儲存時長（月）
T=0 1 3 6  
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP  
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II  
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4  
pH值 4.7至5.3 5.0 5.0 5.0 5.0  
總蛋白（SoloVPE） 135至165 mg/mL 144.8 145.3 150.7 146.2  
藉由生物分析之效力 50至150% 103 NR NR 146  
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.7 97.5 97.4  
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0  
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.3 2.5 2.6  
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.9 NR NR 40.2  
區域2報導% 41.9 NR NR 42.7  
區域3報導% 18.2 NR NR 17.1  
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.7 45.5 44.3 43.5  
b.糖化物種%（報導%） 32.4 32.6 31.6 31.2  
c. ≥35%區域2 48.3 48.8 49.9 50.9  
d. ≤25%區域3 6.0 5.8 5.8 5.6  
微粒物質（不透光度） ≥ 10 µm： ≤ 6000（顆粒/容器） 13 NR NR 22  
≥ 25 µm： ≤ 600（顆粒/容器） 0 NR NR 4  
微粒物質（MFI ™） 報導顆粒/mL： 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 3641 NR NR 1829  
≥ 10 µm（顆粒/mL） 240 NR NR 86  
≥ 25 µm（顆粒/mL） 34 NR NR 23  
聚山梨醇酯20含量 0.05± 0.025% PS20 0.05 NR NR 0.06  
a.運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。NR指出未在設定時間點處進行之測試。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法；NR，非所需；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體。 表 47 ： 在 25 ℃ /60% RH 及 40 ℃下培育之 mAb1 藥品的穩定性
配方 150.0 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽、8%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）聚山梨醇酯20。
儲存容器 USP/EP 1型硼矽酸鹽6R ISO玻璃小瓶；20 mm West S10-F451 4432/50 B2-40液體塞子；具有旋轉關閉按鈕之West 20 mm鋁密封
儲存條件 無儲存 25℃/60% RH儲存 （月） 40℃儲存 （月）
分析 T = 0 0.5 1 3 6 0.25 0.5 1 3
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ II Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ III
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY3
pH值 4.7至5.3 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白（SoloVPE） 135至165 mg/mL 144.8 149.0 145.3 153.9 148.4 145.2 148.9 144.8 147.9
藉由生物分析之效力 50至150% 103 NR NR NR 148 NR NR NR 132
根據SE-UPLC之純度   a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.4 97.2 96.6 96.0 95.7 94.8 92.2 80.9
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1 0.3 0.0 0.1 1.1
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.6 2.8 3.3 3.9 4.0 5.2 7.7 18.1
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.9 NR NR NR 49.0 NR NR NR 72.0
區域2報導% 41.9 NR NR NR 33.5 NR NR NR 18.0
區域3報導% 18.2 NR NR NR 17.5 NR NR NR 10.0
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15-60%區域1 45.7 41.3 38.8 29.2 23.1 30.8 23.4 18.3 25.1
b.糖化物種%（報導%） 32.4 29.5 27.5 18.6 13.2 20.3 13.5 7.5 12.2
c. ≥ 35%區域2 48.3 53.0 56.2 65.6 71.3 63.7 69.5 72.4 55.6
d. ≤25%區域3 6.0 5.6 5.0 5.2 5.6 5.5 7.1 9.3 19.3
微粒物質（不透光度）   ≥ 10 µm： ≤ 6000個顆粒/容器 13 NR NR NR 25 NR NR NR 48
≥ 25 µm： ≤ 600個顆粒/容器 0 NR NR NR 2 NR NR NR 5
微粒物質（MFI ™） 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 3641 NR NR NR 1238 NR NR NR 653
≥ 10 µm（顆粒/mL） 240 NR NR NR 29 NR NR NR 33
≥ 25 µm（顆粒/mL） 34 NR NR NR 2 NR NR NR 2
聚山梨醇酯20含量 報導PS20% 0.05 NR NR NR 0.06 NR NR NR 0.05
NR指出未在設定時間點處進行之測試。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法；NR，非所需 表 48 ： mAb1 藥品的穩定性 - 攪動及冷凍 / 解凍之作用
配方 150.0 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽、8%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）聚山梨醇酯20。
儲存容器 USP/EP 1型硼矽酸鹽6R ISO玻璃小瓶；20 mm West S10-F451 4432/50 B2-40液體塞子；具有旋轉關閉按鈕之West 20 mm鋁密封
儲存條件 無應力 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）  
分析 T = 0 60 120 2 4  
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP  
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II  
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4  
pH值 4.7至5.3 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0  
總蛋白（SoloVPE） 135至165 mg/mL 144.8 144.4 144.4 145.7 147.9  
藉由生物分析之效力 50至150% 103 NR 138 NR 97  
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.8 97.8 97.8 97.8  
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1  
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.2 2.2 2.2 2.1  
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.9 NR 40.3 NR 39.5  
區域2報導% 41.9 NR 42.3 NR 42.5  
區域3報導% 18.2 NR 17.5 NR 18.0  
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.7 45.7 45.8 45.2 45.5  
b.糖化物種%（報導%） 32.4 32.4 32.5 32.0 32.3  
c. ≥35%區域2 48.3 48.3 48.3 48.8 48.4  
d. ≤25%區域3 6.0 6.0 6.0 6.1 6.0  
微粒物質（不透光度） ≥ 10 µm： ≤6000個顆粒/容器 13 NR 4 NR 40  
≥ 25 µm： ≤ 600個顆粒/容器 0 NR 0 NR 3  
微粒物質（MFI ™） 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 3641 NR 1470 NR 271  
≥ 10 µm（顆粒/mL） 240 NR 73 NR 13  
≥ 25 µm（顆粒/mL） 34 NR 0 NR 2  
聚山梨醇酯20含量 報導PS20% 0.05 NR 0.05 NR 0.05  
NR指出未在設定時間點處進行之測試。 DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；LMW，低分子量；MFI、微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法；NR，非所需
開始進行額外穩定性研究，以確定在150 mg/ml抗體下之mAb1調配物的長期儲存、加速穩定性（儲存條件以上之溫度）及應力穩定性（40℃/75% RH，攪動、冷凍及解凍）。將具有150 mg/mL抗體之mAb1調配物裝入用於攪動、冷凍/解凍、冷凍儲存及加速及應力儲存條件的5 mL聚碳酸酯小瓶中。聚碳酸酯小瓶代表用於在GMP設施中製造之mAb1調配物（經調配之原料藥）之儲存容器。測試調配物含有150 mg/mL經純化之mAb1於含有30 mM醋酸鈉（pH 5.0）、8%（w/v）蔗糖及0.05%（w/v）PS20的緩衝水溶液中。
當在-80℃及-30℃下儲存長達6個月時，未偵測到mAb1調配物之物理或化學穩定性的顯著變化（表49及表50）。此等結果指出mAb1（150 mg/mL）當在儲存條件下冷凍儲存時穩定至少6個月。
研究加速穩定性研究之結果呈現於表51A及51B中。在mAb1調配物（150 mg/mL抗體）在-20℃下培育長達6個月之後，未觀測到所監測屬性之顯著變化。在25℃/60% RH下培育6個月之後，很可能歸因於樣品蒸發，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在5℃及25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由SE-UPLC觀測到HMW物種增加。由於MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1（酸性物種）減少，同時伴隨區域2（主峰）增加。很可能歸因於脫醯胺作用，在25℃/60% RH下培育6個月之後，藉由iCIEF觀測到區域1（酸性物種）增加，同時伴隨區域2（主峰）減少。此等結果表明mAb1（150 mg/mL）調配物可耐受在-20℃下培育至少6個月及在5℃下培育3個月而不損害蛋白質之物理或化學穩定性。mAb1調配物亦可耐受至25℃/60% RH之溫度的短時間暴露。
研究應力穩定性研究之結果呈現於表51A及51B，及表52中。當攪動（渦旋）長達120分鐘或經歷至多四個循環之冷凍及解凍時，mAb1（150 mg/mL）調配物在物理及化學上係穩定的。在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，很可能歸因於樣品蒸發，藉由SoloVPE觀測到蛋白質濃度增加。在40℃/75% RH下培育長達3個月之後，藉由SE-UPLC觀測HMW及LMW物種增加。由於在MUC16臂之HC-CDR3-Lys98處之去糖化，在40℃/75% RH下培育之後，藉由CEX-UPLC觀測到區域1減少，同時伴隨區域2增加。在40℃/75% RH下培育2個月之後，存在區域1之減少且伴隨區域2之增加。然而，在三個月時間點之後，趨勢顛倒且存在區域1及區域3之明顯增加，且伴隨區域2之減少。區域1之增加很可能歸因於天冬醯胺酸或麩醯胺酸上之競爭脫醯胺作用，而區域3之增加經確定為包含mAb1之寡聚物種，主要包括四聚體、五聚體、六聚體及七聚體物種。加速及加壓條件之結果指出mAb1（150 mg/mL）之主要降解路徑為HMW、LMW及電荷變異體。 表 49 ： mAb1 調配之原料藥在 -80 ℃下之穩定性
配方 150 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽，pH 5.0、8%（w/v）蔗糖、0.05%聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
儲存容器 5 mL具有HDPE內襯封閉件Cellon聚碳酸酯小瓶
儲存條件 -80℃，直立式小瓶定向
分析 品質接受準則a 儲存時長（月）  
T=0 1 3 6  
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP  
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II  
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4  
pH值 4.8至5.2 5.0 5.0 5.0 5.0  
總蛋白 45至55 mg/mL 146.3 148.9 153.2 148.7  
根據SE-UPLC之純度   a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.9 97.8 97.9  
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0  
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.1 2.2 2.1  
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.4     41.7  
區域2報導% 42.5     41.6  
區域3報導% 18.1     16.7  
藉由CEX進行之帶電變異體分析   a.15至60%區域1 45.8 45.9 45.1 45.5  
b.糖化物種%（報導%） 32.5 32.6 32.0 32.2  
c. ≥35%區域2 48.2 48.5 48.6 48.6  
d. ≤25%區域3 6.0 5.6 6.3 5.9  
微粒物質（MFI ™） 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 9537     250  
≥ 10 µm（顆粒/mL） 622     4  
≥ 25 µm（顆粒/mL） 76     0  
聚山梨醇酯20含量 PS20報導% 0.05        
a.運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。僅針對資訊，來自無品質目標報導百分比之分析的結果。灰色框表示測試並非在設定時間點處進行。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法。 表 50 ：在 -30 ℃下 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 150 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽，pH 5.0、8%（w/v）蔗糖、0.05%聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
儲存容器 5 mL具有HDPE內襯封閉件Cellon聚碳酸酯小瓶
儲存條件 -30℃，直立式小瓶定向
分析 品質接受準則a 儲存時長（月）  
T=0 1 3 6  
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP  
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II  
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4  
pH值 4.8至5.2 5.0 5.0 5.0 5.0  
總蛋白 45至55 mg/mL 146.3 146.1 148.3 149.2  
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.9 97.8 97.9  
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0  
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.1 2.2 2.1  
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.4     41.6  
區域2報導% 42.5     42.4  
區域3報導% 18.1     16.1  
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.8 46.0 45.3 45.7  
b.糖化物種%（報導%） 32.5 32.3 32.2 32.5  
c. ≥35%區域2 48.2 48.3 48.5 48.5  
d. ≤25%區域3 6.0 5.7 6.2 5.8  
微粒物質（MFI ™） 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 9537     469  
≥ 10 µm（顆粒/mL） 622     13  
≥ 25 µm（顆粒/mL） 76     4  
聚山梨醇酯20含量 PS20報導% 0.05        
藉由生物分析之效力 50%至150%參考標準 94     149  
a.運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。僅針對資訊，來自無品質目標報導百分比之分析的結果。灰色框表示測試並非在設定時間點處進行。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法。 表 51A ： 在 -20 ℃、 5 ℃下培育之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 150 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽，pH 5.0、8%（w/v）蔗糖、0.05%聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
儲存容器 5 mL具有HDPE內襯封閉件Cellon聚碳酸酯小瓶
儲存條件 無儲存 -20℃儲存 （月） 5℃儲存 （月）
分析 品質接受準則a T = 0 1 3 6 0.5 1 3 6
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 4.8至5.2 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白 45至55 mg/mL 146.3 146.4 150.4 154.2 146.8 151.1 150.9 161.3
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.8 97.8 97.9 97.7 97.7 97.5 97.4
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.2 2.2 2.1 2.3 2.3 2.5 2.6
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.4     41.3       43.6
區域2報導% 42.5     42.1       40.2
區域3報導% 18.1     16.6       16.3
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.8 45.9 45.4 45.4 45.3 45.5 44.1 43.5
b.糖化物種%（報導%） 32.5 32.6 32.3 32.1 32.3 32.3 31.7 31.2
c. ≥35%區域2 48.2 48.4 48.3 48.6 48.9 48.8 49.9 50.7
d. ≤25%區域3 6.0 5.7 6.3 6.0 5.8 5.7 6.1 5.8
微粒物質（MFI ™） 報導顆粒/mL： 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 9537     284       298
≥ 10 µm（顆粒/mL） 622     35       29
≥ 25 µm（顆粒/mL） 76     17       2
a    運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。僅針對資訊，來自無品質目標報導百分比之分析的結果。灰色框表示測試並非在設定時間點處進行。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法。 表 51B ：在 25 ℃ /60% RH 及 40 ℃ /75% RH 下培育之 mAb1 調配之原料藥的穩定性
配方 150 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽，pH 5.0、8%（w/v）蔗糖、0.05%聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
儲存容器 5 mL具有HDPE內襯封閉件Cellon聚碳酸酯小瓶
儲存條件 無儲存 25℃/60% RH儲存 （月） 40℃/75% RH儲存 （月）
分析 品質接受準則a T = 0 0.5 1 3 6 0.25 0.5 1 3
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ II Not ＞ III Not ＞ III Not ＞ III
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY3
pH值 4.8至5.2 5.0 5.0 5.0 5.1 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白 45至55 mg/mL 146.3 149.2 149.5 160.6 162.6 142.5 146.8 151.9 164.0
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.4 97.1 96.5 95.7 95.7 94.7 92.1 80.9
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.1 0.0 0.1 0.3 0.0 0.1 1.2
c. ≤7% HMW物種 2.2 2.6 2.8 3.5 4.2 4.0 5.3 7.8 17.9
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 區域1報導% 39.4       50.5       70.1
區域2報導% 42.5       32.3       19.5
區域3報導% 18.1       17.2       10.3
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.8 41.4 38.7 29.2 23.4 30.9 23.5 18.4 25.2
b.糖化物種%（報導%） 32.5 29.5 27.2 18.6 13.1 20.4 13.4 7.6 12.0
c. ≥35%區域2 48.2 52.8 56.0 65.5 70.5 63.4 69.2 72.0 55.0
d. ≤25%區域3 6.0 5.8 5.3 5.3 6.1 5.7 7.3 9.6 19.8
微粒物質（MFI ™） 報導顆粒/mL： 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 9537       58       113
≥ 10 µm（顆粒/mL） 622       4       19
≥ 25 µm（顆粒/mL） 76       4       0
a    運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。僅針對資訊，來自無品質目標報導百分比之分析的結果。灰色框表示測試並非在設定時間點處進行。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體；LMW，低分子量；MFI，微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法。 表 52 ： mAb1 調配之原料藥的穩定性 - 攪動及冷凍 / 解凍之作用
配方 150 mg/mL REGN4018、30 mM醋酸鹽，pH 5.0、8%（w/v）蔗糖、0.05%聚山梨醇酯20
填充體積 2.5 mL
儲存容器 5 mL具有HDPE內襯封閉件Cellon聚碳酸酯小瓶
儲存條件 無應力 攪動（分鐘） 冷凍/解凍（循環）
分析 品質接受準則a T = 0 60 120 2 4
物理形態/條件 基本上不含可見微粒的液體 LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP LEFVP
透明度 不比參考懸浮液IV更渾濁 Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II Not ＞ II
顏色 顏色不比參考溶液BY2更深 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4 Not ＞ BY4
pH值 5.8至6.2 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
總蛋白 22.5至27.5 mg/mL 146.3 145.4 144.9 147.6 146.9
根據SE-UPLC之純度 a.純度≥90%總峰面積 97.8 97.8 97.8 97.8 97.8
b.≤5% LMW物種 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
c.≤7% HMW物種 2.2 2.2 2.2 2.2 2.2
藉由iCIEF進行之帶電變異體分析 a.≤75%區域1 39.4   39.3   39.3
b.≥25%區域2 42.5   43.0   43.2
C.≤ 25%區域3 18.1   17.7   17.6
藉由CEX進行之帶電變異體分析 a.15至60%區域1 45.8 45.6 45.8 45.3 45.5
b.糖化物種%（報導%） 32.5 32.4 32.4 32.3 32.5
c. ≥35%區域2 48.2 48.3 48.3 48.5 48.3
d. ≤25%區域3 6.0 6.0 5.9 6.2 6.2
微粒物質（MFI ™） 2 µm ≤ x ＜ 10 µm（顆粒/mL） 9537   1353   242
≥ 10 µm（顆粒/mL） 622   90   19
≥ 25 µm（顆粒/mL） 76   15   13
a    運用程式特定調整自FBP-015-FD FDG平台品質目標採用之準則。僅針對資訊，來自無品質目標報導百分比之分析的結果。灰色框表示測試並非在設定時間點處進行。 CEX，陽離子交換；DS，原料藥；FDG，配方開發群；HMW，高分子量；iCIEF，成像毛細管等電聚焦；LEFVP，基本上不含可見顆粒的液體；LMW，低分子量；微流成像™；MP，主峰；SE-UPLC，尺寸排阻超高效液相層析法。
本發明之範疇不受本文所描述之具體實施例限制。實際上，根據前述描述，除本文所描述之修改之外，本發明之各種修改對熟習此項技術者而言亦會變得顯而易見。此等修改意欲屬於隨附申請專利範圍之範疇內。
圖1說明mAb1之相對效力與HCDR3-Lys98之糖化含量之間的關係。藉由用製備型陽離子交換層析純化糖化及非糖化mAb1及以不同比率混合兩種物種來產生糖化水準。效力資料指出效力取決於糖化水準。
圖2A、2B、2C及2D說明pH值對組胺酸緩衝液中調配之mAb1的糖化水準及高分子量（HMW）物種的影響。調配物包括含2 mg/ml mAb1之10 mM組胺酸、10% w/v蔗糖及具有不同pH值之0.05% w/v聚山梨醇酯20，且在5℃下培育長達36個月或在25℃下持續長達2個月。在5℃（圖2A）或25℃（圖2B）下藉由陽離子交換層析（CEX-UPLC）監測糖化水準，且在5℃（圖2C）或25℃（圖2D）下藉由尺寸排阻層析（CEX-UPLC）監測HMW水準。
圖3A及3B說明pH值對在醋酸緩衝液中調配之mAb1的糖化及HMW物種之水準的影響。調配物包括含50 mg/ml mAb1之10 mM醋酸鹽及具有不同pH值之5% w/v蔗糖，且在40℃下培育28天。藉由CEX-UPLC監測糖化水準（圖3A），且藉由SEU-PLC監測HMW水準（圖3B）。
圖4說明mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度對mAb1調配物之黏度的影響。該等曲線表示實驗資料之統計模型。
圖5說明mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度對mAb1調配物之重量滲透濃度的影響。該等曲線表示實驗資料之統計模型。
圖6說明mAb1濃度、蔗糖濃度及精胺酸濃度對mAb1調配物之穩定性的影響。該等曲線表示實驗資料之統計模型。
圖7A及7B說明兩種mAb1調配物用於皮下投予之穩定性。兩種調配物在測試條件下培育時展示類似穩定性：在40℃/75%相對濕度（RH）下培育3個月；在25℃/60% RH下培育6個月；及在2至8℃下培育6個月。如圖中所示，F1含有150 mg/ml mAb1、pH值為5.0之30 mM醋酸、8% w/v蔗糖及0.05% w/v聚山梨醇酯80，且F2含有150 mg/ml mAb1、pH值為5.0之30 mM醋酸、7% w/v蔗糖、50 mM精胺酸及0.05% w/v聚山梨醇酯80。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
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Claims (91)

  1. 一種穩定液體藥物調配物，其包含： （a）雙特異性抗體，其包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且該第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列； （b）包含醋酸鈉之緩衝液； （c）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及 （d）包含糖之穩定劑； 其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.5。
  2. 如請求項1所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為1 mg/ml ± 0.1 mg/ml至200 mg/ml ± 20 mg/mL。
  3. 如請求項2所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為5 mg/ml ± 0.5 mg/ml至50 mg/ml ± 5 mg/ml。
  4. 如請求項3所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為5 mg/ml ± 0.5 mg/ml。
  5. 如請求項3之藥物調配物，其中該抗體濃度為50 mg/ml ± 5 mg/ml。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之藥物調配物，其中該醋酸鹽緩衝液濃度為10 mM ± 1 mM至50 mM ± 5 mM。
  7. 如請求項6所述之藥物調配物，其中該醋酸鹽緩衝液濃度為25 mM ± 2.5 mM至35 mM ± 3.5 mM。
  8. 如請求項7所述之藥物調配物，其中該醋酸鹽緩衝液濃度為30 mM ± 3 mM。
  9. 如請求項1至8中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯濃度為0.01% ± 0.005%至0.5% ± 0.05% w/v。
  10. 如請求項9所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯濃度為0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.03% w/v。
  11. 如請求項9所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯濃度為0.2% ± 0.02% w/v。
  12. 如請求項1至11中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。
  13. 如請求項1至12中任一項所述之藥物調配物，其中該糖為蔗糖。
  14. 如請求項13所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為5% ± 1%至20% ± 4% w/v。
  15. 如請求項14所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為7% ± 0.5%至12% ± 0.5% w/v。
  16. 如請求項15所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為10% ± 1% w/v。
  17. 如請求項1所述之藥物調配物，其包含： （a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之抗體， （b）25 mM ± 2 mM至35 mM ± 2 mM之醋酸鹽緩衝液， （c）0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.05% w/v之聚山梨醇酯，及 （d）5% ± 1%至15% ± 3% w/v之蔗糖， pH值為5.0 ± 0.5。
  18. 如請求項17所述之藥物調配物，其包含： （a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之抗體， （b）30 mM ± 1 mM之醋酸鹽緩衝液， （c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯，及 （d）10% ± 1% w/v蔗糖， pH值為5.0 ± 0.3。
  19. 如請求項1所述之藥物調配物，其包含： （a）50 mg/ml ± 5 mg/ml之抗體， （b）25 mM ± 2 mM至35 mM ± 2 mM之醋酸鹽緩衝液， （c）0.1% ± 0.05%至0.3% ± 0.05% w/v之聚山梨醇酯，及 （d）5% ± 1%至15% ± 3% w/v之蔗糖， pH值為5.0 ± 0.5。
  20. 如請求項19所述之藥物調配物，其包含： （a）50 mg/ml ± 0.5 mg/ml之抗體， （b）30 mM ± 1 mM之醋酸鹽緩衝液， （c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯，及 （d）10% ± 1% w/v之蔗糖， pH值為5.0 ± 0.3。
  21. 如請求項17至20中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。
  22. 如請求項1至21中任一項所述之藥物調配物，其中該調配物在5℃下儲存12個月或24個月之後含有不超過2.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定。
  23. 如請求項1至21中任一項所述之藥物調配物，其中該調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過3.5%的高分子量（HMW）物種，如藉由SE-UPLC所測定。
  24. 如請求項1至21中任一項所述之藥物調配物，其中該調配物在-30℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，或在-30℃下儲存24個月之後含有不超過2.0%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定。
  25. 如請求項1至21中任一項所述之藥物調配物，其中該調配物在-80℃下儲存12個月之後含有不超過1.5%的高分子量（HMW）物種，或在-30℃下儲存24個月之後含有不超過2.0%的HMW物種，如藉由SE-UPLC所測定。
  26. 一種由凍乾物復水（reconstitute）之穩定液體藥物調配物，其包含： （a）濃度為1 mg/ml至30 mg/ml之雙特異性抗體，其中該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且該第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列； （b）包含組胺酸之緩衝液； （c）包含聚山梨醇酯之有機共溶劑；及 （d）包含糖之穩定劑； 其中該調配物之pH值為6.0 ± 0.5。
  27. 如請求項26所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為2 mg/ml ± 0.5 mg/ml或20 mg/ml ± 2 mg/ml。
  28. 如請求項27所述之藥物調配物，其中該組胺酸緩衝液濃度為5 mM ± 1 mM至15 mM ± 1 mM。
  29. 如請求項28所述之藥物調配物，其中該組胺酸緩衝液濃度為10 mM ± 1 mM。
  30. 如請求項26至29中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯濃度為0.01%至0.1% w/v。
  31. 如請求項30所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯濃度為0.05% ± 0.01% w/v。
  32. 如請求項26至31中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。
  33. 如請求項26至32中任一項所述之藥物調配物，其中該糖為蔗糖。
  34. 如請求項33所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為8% ± 0.5%至12% ± 0.5% w/v。
  35. 如請求項34所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為10% ± 1% w/v。
  36. 如請求項26至35中任一項所述之藥物調配物：其中：（a）至少95%之該抗體在5℃下儲存12個月之後、18個月之後、24個月之後或36個月之後具有天然構形；（b）至少95%之該抗體在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後具有天然構形；（c）至少95%之該抗體在37℃下儲存3個月之後具有天然構形；（d）該調配物在5℃下儲存12個月之後、18個月之後、24個月之後或36個月之後含有不超過1%的高分子量（HMW）物種；（e）該調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過1%的HMW物種；或（f）該調配物在37℃下儲存3個月之後含有不超過1%的HMW物種； 如藉由SE-UPLC所測定。
  37. 一種穩定液體藥物調配物，其包含： （a）濃度為100 mg/ml至200 mg/ml之雙特異性抗體，其中該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈互補決定區（CDR）（A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），且該第二抗原結合域包含重鏈可變區（HCVR）中所含之三個重鏈CDR（A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3）及輕鏈可變區（LCVR）中所含之三個輕鏈CDR（LCDR1、LCDR2及LCDR3），其中A1-HCDR1、A1-HCDR2及A1-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 7、8及9之胺基酸序列，A2-HCDR1、A2-HCDR2及A2-HCDR3分別包含SEQ ID NO: 10、11及12之胺基酸序列，且LCDR1、LCDR2及LCDR3分別包含SEQ ID NO: 13、14及15之胺基酸序列； （b）包含醋酸鹽之緩衝液； （c）包含糖之穩定劑；及 （d）包含聚山梨醇酯之界面活性劑； 其中該調配物之pH值為5.0 ± 0.5。
  38. 如請求項37所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為125 mg/ml至175 mg/ml。
  39. 如請求項38所述之藥物調配物，其中該抗體濃度為150 mg/ml ± 10 mg/ml。
  40. 如請求項37至39中任一項所述之藥物調配物，其中該糖為蔗糖。
  41. 如請求項40所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為4%至12% w/v。
  42. 如請求項41所述之藥物調配物，其中該蔗糖濃度為8% w/v ± 1% w/v。
  43. 如請求項37至42中任一項所述之藥物調配物，其中該醋酸鹽緩衝液濃度為25 mM至35 mM。
  44. 如請求項43所述之藥物調配物，其中該醋酸鹽緩衝液濃度為30 mM ± 1 mM。
  45. 如請求項37至44中任一項所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯為聚山梨醇酯20。
  46. 如請求項45所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯20濃度為0.01% w/v至0.1% w/v。
  47. 如請求項46所述之藥物調配物，其中該聚山梨醇酯20濃度為0.05% w/v ± 0.01% w/v。
  48. 如請求項37至47中任一項所述之藥物調配物，其中：（a）該調配物在-30℃或-80℃下儲存12個月之後或24個月之後含有不超過2.5%的高分子量（HMW）物種；（b）該調配物在5℃下儲存6個月之後含有不超過4%的HMW物種；或（c）該調配物在25℃及60%相對濕度下儲存6個月之後含有不超過6%的HMW物種； 如藉由SE-UPLC所測定。
  49. 如請求項1至48中任一項所述之藥物調配物，其中該調配物含有不超過40%的糖化物種變異體，其中該糖化物種變異體包含在SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 4之殘基98處或SEQ ID NO: 9之殘基2處的糖化。
  50. 如請求項1至49中任一項所述之藥物調配物，其中該第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少90%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少90%一致性的LCVR，且該第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少90%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少90%一致性的LCVR。
  51. 如請求項50所述之藥物調配物，其中該第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少95%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少95%一致性的LCVR，且該第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少95%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少95%一致性的LCVR。
  52. 如請求項51所述之藥物調配物，其中該第一抗原結合域包含與SEQ ID NO: 4之胺基酸序列具有至少99%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少99%一致性的LCVR，且該第二抗原結合域包含與SEQ ID NO: 5之胺基酸序列具有至少99%一致性的HCVR及與SEQ ID NO: 6之胺基酸序列具有至少99%一致性的LCVR。
  53. 如請求項1至52中任一項所述之藥物調配物，其中該第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR。
  54. 一種穩定藥物調配物，其包含： （a）5 mg/ml ± 0.5 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR； （b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2， （c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20，及 （d）10%±1% w/v之蔗糖。
  55. 一種穩定藥物調配物，其包含： （a）50 mg/ml ± 5 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR； （b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2， （c）0.2% ± 0.02% w/v之聚山梨醇酯20，及 （d）10% ± 1% w/v之蔗糖。
  56. 一種穩定藥物調配物，其包含： （a）150 mg/ml ± 15 mg/ml之雙特異性抗體，該雙特異性抗體包含特異性結合於人類MUC16之第一抗原結合域及特異性結合於人類CD3之第二抗原結合域，其中該第一抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 4之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR，且該第二抗原結合域包含：包含SEQ ID NO: 5之胺基酸序列的HCVR及包含SEQ ID NO: 6之胺基酸序列的LCVR； （b）30 mM ± 1 mM之醋酸鈉緩衝液，pH值為5.0 ± 0.2， （c）0.05% ± 0.01% w/v聚山梨醇酯20，及 （d）8% ± 1% w/v蔗糖。
  57. 如請求項50至56中任一項所述之藥物調配物，其中該抗體包含分別附接至該第一抗原結合域及該第二抗原結合域中之每一者的該HCVR之人類IgG重鏈恆定區。
  58. 如請求項57所述之藥物調配物，其中該重鏈恆定區係同型IgG1。
  59. 如請求項57所述之藥物調配物，其中該重鏈恆定區係同型IgG4。
  60. 如請求項57至59中任一項所述之藥物調配物，其中附接至該第一抗原結合域之該HCVR之該重鏈恆定區或附接至該第二抗原結合域之該HCVR之該重鏈恆定區，但兩者並非同時，含有相對於未經修飾之相同同型重鏈減少蛋白質A結合的胺基酸修飾。
  61. 如請求項60所述之藥物調配物，其中該修飾包含在同型IgG1或IgG4之重鏈中的H435R取代（EU編號）。
  62. 如請求項60所述之藥物調配物，其中該修飾包含在同型IgG1或IgG4之重鏈中的H435R取代及Y436F取代（EU編號）。
  63. 如請求項57至59中任一項所述之藥物調配物，其中該抗體包含重鏈恆定區，該重鏈恆定區包含選自由以下組成之群組之胺基酸序列：SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18及SEQ ID NO: 19。
  64. 如請求項63所述之藥物調配物，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO: 16之胺基酸序列之重鏈恆定區及包含SEQ ID NO: 17之胺基酸序列之重鏈恆定區。
  65. 如請求項63所述之藥物調配物，其中該抗體包含：包含SEQ ID NO: 18之胺基酸序列之重鏈恆定區及包含SEQ ID NO: 19之胺基酸序列之重鏈恆定區。
  66. 如請求項50至56中任一項所述之藥物調配物，其中該抗體包含含有該第一抗原結合域之該HCVR之第一重鏈及含有該第二抗原結合域之該HCVR之第二重鏈，其中該第一重鏈包含SEQ ID NO: 1之胺基酸序列的殘基1至442，且該第二重鏈包含SEQ ID NO: 2之胺基酸序列的殘基1至449。
  67. 如請求項66所述之藥物調配物，其中該抗體包含含有該第一抗原結合域及該第二抗原結合域之該LCVR的共同輕鏈，其中該共同輕鏈包含SEQ ID NO: 3之胺基酸序列。
  68. 如請求項1至67中任一項所述之藥物調配物，其中糖化物種之變化百分比係：（i）在5℃下儲存6個月之後不超過1.5%；（ii）在5℃下儲存12個月之後不超過3%；（iii）在-30℃下儲存12個月之後、18個月之後或24個月之後不超過1.5%；或在-80℃下儲存12個月之後、18個月之後或24個月之後不超過1%，如藉由陽離子交換超高效液相層析法（CEX-UPLC）及/或藉由液相層析-質譜法（LC-MS）所測定。
  69. 一種藥物組成物，其中該組成物包含如請求項1至68中任一項所述之藥物調配物，且該組成物容納於容器中。
  70. 如請求項69所述之藥物組成物，其中該容器為小瓶。
  71. 如請求項70所述之藥物組成物，其中該小瓶為2 ml、5 ml或10 ml的1型透明玻璃小瓶。
  72. 如請求項69所述之藥物組成物，其中該容器為注射器。
  73. 如請求項72所述之藥物組成物，其中該注射器為低鎢玻璃。
  74. 如請求項69所述之藥物組成物，其中該容器為預填充注射器。
  75. 如請求項69所述之藥物組成物，其容納於自動注射器中。
  76. 一種套組，其包含（i）容納包含如請求項1至68中任一項所述之藥物調配物之組成物的容器，及使用該組成物之說明書。
  77. 如請求項76所述之套組，其中該容器為玻璃小瓶。
  78. 如請求項76所述之套組，其中該容器為預填充注射器。
  79. 如請求項76所述之套組，其中該容器為自動注射器。
  80. 如請求項76所述之套組，其中該等說明書敍述該組成物之皮下投予。
  81. 如請求項76所述之套組，其中該等說明書敍述該組成物之靜脈內投予。
  82. 一種包含如請求項1至68中任一項所述之藥物調配物的單位劑型，其中該抗體以0.1 mg至500 mg之量存在。
  83. 如請求項82所述之單位劑型，其中該抗體以1至20 mg之量存在。
  84. 如請求項82所述之單位劑型，其中該抗體以100至200 mg之量存在。
  85. 如請求項82所述之單位劑型，其為玻璃小瓶。
  86. 如請求項82所述之單位劑型，其為預填充注射器。
  87. 如請求項82所述之單位劑型，其為自動注射器。
  88. 一種容器，其容納包含如請求項1至68中任一項所述之藥物調配物的組成物。
  89. 如請求項88所述之容器，其為玻璃小瓶。
  90. 如請求項88所述之容器，其為預填充注射器。
  91. 如請求項88所述之容器，其為自動注射器。
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