TW202245758A

TW202245758A - 作為丙酮酸激酶活化劑之吡咯啶-吡唑

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Publication number: TW202245758A
Application number: TW111104385A
Authority: TW
Inventors: 琳那 Q 賽提; 沙忽爾尼拉爾; 喆李; 明余; 馬努維拉則卡內拉
Original assignee: 美商全球血液治療公司
Priority date: 2021-02-08
Filing date: 2022-02-07
Publication date: 2022-12-01
Also published as: US20220267337A1; US11566030B2; US20230151016A1; WO2022170200A1

Abstract

本文所描述之標的物係關於式I之丙酮酸激酶活化化合物及其醫藥鹽、製備該等化合物之方法、包含該等化合物之醫藥組合物及投與該等化合物用於治療與PKR及/或PKM2相關之疾病(諸如丙酮酸激酶缺乏症、鐮狀細胞疾病及β-地中海貧血症)的方法。

Description

作為丙酮酸激酶活化劑之吡咯啶-吡唑

本文所描述之標的物係針對丙酮酸激酶活化化合物、製備該等化合物之方法、醫藥組合物及其在治療與PKR及/或PKM2相關之疾病中之用途。

丙酮酸激酶(PK)為細胞代謝之基本組分，在糖酵解之最終步驟中將ADP及磷酸烯醇丙酮酸鹽(PEP)轉化為丙酮酸鹽。丙酮酸激酶具有四種獨特同功型，其濃度隨不同組織類型而變化(Dayton等人, EMBO Rep. 2016 17(12):1721-1730)；Israelsen及Vander Heiden, Semin . Cell Dev . Biol .2015年7月；43:43-51；Mazurek, Int . J . Biochem . Cell Biol . 2011年7月；43(7):969-80)。各異構體負責催化丙酮酸鹽及ATP之產生，同時以對應於各組織類型之方式調節。

肝(PKL)中之丙酮酸激酶及來自紅血球/紅細胞(PKR)之丙酮酸激酶係四聚酶，其視內源性活化劑而定，該內源性活化劑稱為果糖-1,6-二磷酸鹽(FBP)用於活化(Koler及Vanbellinghen, Adv . Enzyme Regul. 1968 6:127-42；Taylor及Bailey, Biochem J. 1967年2月；102(2):32C-33C)。PKM1同功型見於腦、心臟及骨骼肌中，其中其充當穩定及組成型活性四聚蛋白質。PKM1因此不需要FBP來活化。PKM2異構體表現於大部分組織類型中，包括癌症、發育中之胚胎及所有增生組織。與PKR及PKL類似，PKM2需要FBP經由以四聚及最具活性形式使酶穩定而進行異位活化(Cardenas及Dyson, J . Exp . Zool. 1978年6月；204(3):361-7；Imamura及Tanaka, J . Biochem. 1972年6月；71(6):1043-51；Strandholm等人, Arch . Biochem . Biophys. 1976年3月；173(1):125-31)。

成熟紅細胞(RBC)依賴於糖酵解以用於能量生產。所有腫瘤細胞僅僅表現PKM2同功型，表明PKM2將為癌症療法之良好標靶。PKM2亦表現於脂肪組織及活化T細胞中。因此，除了癌症之外，控制PKM2活性之調節可有效治療肥胖及糖尿病。

所有糖酵解酶中之基因突變導致溶血性貧血(Van Wijk及Van Solinge, Blood 2005 106 (13): 4034-4042.)。引起功能缺失之PKL及PKR突變已知會引起PK缺乏症(PKD)且此等突變之臨床表現似乎侷限於RBC。

存在超過200個已知的且報導的與全世界報導之PKD有關的突變(Zanella等人, J . Haematol. 2005年7月；130(1):11-25)。一些突變直接破壞PK酶之催化活性，而其他突變破壞使活性四聚酶穩定之單體之間的相互作用。精胺酸殘基510突變成麩醯胺酸為北美及歐洲患者(約40%患者)中發現之最常見突變中之一者，且已知會破壞PKR四聚體之穩定性(Kedar等人, Clin . Genet. 2009年2月；75(2):157-62；Wang等人, Blood2001年11月15日；98(10):3113-20)。

患有PKD之患者除了多種共生病症以外亦患有慢性溶血性貧血。輸血及脾切除術為常見治療且已表明，基因療法可用於治療不久的將來之PKD (Garcia-Gomez等人, Molecular Therapy2016年8月1日；24(7)；Grace等人, Am . J . Hematol. 2015年9月；90(9):825-30)。

全世界PKD患者之數目未知；然而，一般高加索人群體之發病率估計為約1:20,000人，其中北美洲有51例/百萬人(Beutler及Gelbart, Blood2000年6月1日；95(11):3585-8)。

不存在用於治療PKD之經批准藥物。臨床上，遺傳性PKR缺乏症病症表現為非球形細胞溶血性貧血。此病症之臨床嚴重程度在完全補償之溶血中不可觀測到的症狀至在早期發展時或在生理應激期間需要慢性輸注及/或脾切除術之潛在致命嚴重貧血範圍內。對於一些最嚴重的病例，儘管在20,000名患者中估計頻率為1之人群極其罕見，但除輸血以外不存在疾病改善治療。此等遺傳性非球形細胞溶血性貧血患者存在明顯未滿足之醫療需求。來自患有鐮狀細胞貧血或患有β-地中海貧血症患者之RBC遭受增加之ATP需求以維持總體RBC健康。鐮狀細胞疾病患者及β-地中海貧血症患者之PKR活化可引起細胞健康及存活改良。

因此，此項技術中未有效解決的需求為充當具有所需功效及治療潛力之丙酮酸激酶活化劑的化合物。此問題以及其他源於丙酮酸激酶缺乏症之問題由本文所描述之標的物解決。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係關於式I化合物(其包括式I-Ia、I-Ib、II、III、IA及IB)或其醫藥學上可接受之鹽。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係針對一種醫藥組合物，其包含式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係針對治療個體之與丙酮酸激酶(PKR)及/或PKM2調節相關之疾病或病症的方法，該方法包含向該個體投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係關於活化個體之PKR及/或PKM2之方法，其包含向該個體投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係關於治療罹患與PKR及/或PKM2活性降低相關之疾病之個體的方法，其包含向該個體投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。

亦描述其他實施例。

本文描述式I之丙酮酸激酶活化劑；製備該等化合物之方法；包含該等化合物之醫藥組合物；及其在治療與丙酮酸激酶活性降低相關之疾病中的用途。

PKR活化化合物可用於治療患有β-地中海貧血症及鐮狀細胞貧血之患者(Alli等人, Hematology2008年12月；13(6):369-72；Kung等人, Blood2017年9月14日；130(11):1347-135)。如β-地中海貧血症小鼠模型所示，臨床試驗中之PKR活化劑AG-348、增加之PK活性及ATP水準以及改良之RBC參數。類似結果獲自活體外治療人類β-地中海貧血症RBC (Kuo等人, Mitapivat ( AG - 348 ), an oral PK - R activator , in adults with non - transfusion - dependent thalassemia : A phase 2 , open - label , multicenter study in progress；61 ^stAm. Soc. Hematol. Annual Meeting, 2019年12月)。

本文所描述之式I化合物適用於治療與丙酮酸激酶功能相關之疾病或病症。如本文所描述之生物化學分析所證明，式I化合物活化PKR及/或PKM2。在某些實施例中，本文所描述之化合物在活化PKR及/或PKM2方面比AG-348更有效。式I化合物適用於治療疾病，包括(但不限於)丙酮酸激酶缺乏症及鐮狀細胞疾病，諸如鐮狀細胞貧血及β-地中海貧血症。此外，該等化合物為本文所描述之方法，適用於治療癌症。

需要丙酮酸激酶活化劑，其亦具有額外有益特性，諸如改良之溶解度、穩定性及/或效力。本文所描述之式I之丙酮酸激酶活化劑化合物之優勢在於其可藉由本文所揭示之合成途徑以足夠之產率製備。

現將在下文中更全面地描述本發明所揭示之標的物。然而，得益於在前述描述中所呈現之教示內容，熟習關於本發明所揭示之標的物的技術者將想到本文中所闡述之本發明所揭示之標的物之許多修改及其他實施例。因此，應理解，本發明所揭示之標的物不限於所揭示之具體實施例且修改及其他具體實施例意欲包括於所附申請專利範圍之範疇內。換言之，本文所描述之標的物覆蓋所有替代方案、修改及等效物。除非另外定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語均具有與一般熟習此項技術者中之一者通常理解相同之含義。本文所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻均以全文引用之方式併入本文中。在所併入之文獻、專利及類似材料中之一或多者(包括(但不限於)定義術語、術語用法、所描述之技術等)與本申請案不同或抵觸的情況下，以本申請案為準。 I. 定義

如本說明書中所使用，除了以下字語、片語及符號所使用之上下文另外指示的情況之外，該等字語、片語及符號通常意欲具有如下文所闡述之含義。

不在兩個字母或符號之間的短劃線(「-」)用於指示取代基之連接點。舉例而言，-C(O)NH ₂經由碳原子連接。在化學基團之前端或末端處之短劃線為出於方便之目的；可在具有或不具有一或多個短劃線之情況下描繪化學基團而不會丟失其普通含義。在結構中穿過或垂直於線的末端繪製之波浪線或虛線指示基團之指定連接點。除非化學或結構上需要，否則不由化學基團所書寫或提出的次序指示或暗示方向性或立體化學。

字首「C _u _-C _v」指示以下基團具有u至v個碳原子。舉例而言，「C ₁-C ₆烷基」指示烷基具有1至6個碳原子。

本文中對「約」一個值或參數之提及包括(及描述)針對該值或參數本身之實施例。在某些實施例中，術語「約」包括指示量±50%。在某些其他實施例中，術語「約」包括指示量±20%。在某些其他實施例中，術語「約」包括指示量±10%。在其他實施例中，術語「約」包括所指示之量±5%。在某些其他實施例中，術語「約」包括所指示量±1%。在某些其他實施例中，術語「約」包括指示量±0.5%，且在某些其他實施例中包括指示量±0.1%。此等變化適合於執行所揭示之方法或採用所揭示之組合物。此外，術語「約x」包括「x」之描述。此外，除非上下文另外明確指示，否則單數形式「一(a)」及「該(the)」包括複數個參考物。因此，例如對「化合物」之參考包括複數個此類化合物且對「分析法」之參考包括對一或多個分析法及熟習此項技術者已知的其等效物之參考。

「烷基」係指非分支鏈或分支鏈飽和烴鏈。如本文所用，烷基具有1至20個碳原子(亦即C ₁-C ₂₀烷基)、1至12個碳原子(亦即C ₁-C ₁₂烷基)、1至8個碳原子(亦即C ₁-C ₈烷基)、1至6個碳原子(亦即C ₁-C ₆烷基)、1至4個碳原子(亦即C ₁-C ₄烷基)或1至3個碳原子(亦即C ₁-C ₃烷基)。烷基之實例包括，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基及3-甲基戊基。當藉由化學名稱命名或藉由分子式標識具有特定碳數之烷基殘基時，可涵蓋具有該碳數之所有位置異構體；因此，舉例而言，「丁基」包括正丁基(亦即，-(CH ₂) ₃CH ₃、二級丁基(亦即，-CH(CH ₃)CH ₂CH ₃)、異丁基(亦即，-CH ₂CH(CH ₃) ₂)及三級丁基(亦即，-C(CH ₃) ₃)；且「丙基」包括正丙基(亦即，-(CH ₂) ₂CH ₃及異丙基(亦即，-CH(CH ₃) ₂)。

術語「伸烷基」本身或作為另一取代基之部分意謂衍生自烷烴之二價基團，諸如亞甲基-CH ₂-、伸乙基-CH ₂CH ₂-及其類似基團。作為實例，「羥基-亞甲基」係指HO-CH ₂-*，其中*為與分子之連接點。

除非明確指示，否者當本文中將基團之組合(例如芳基烷基或芳烷基)稱為一個部分時，最後提及之基團含有原子，該部分藉由該原子連接至分子之其他部分。

「烷氧基」係指基團「烷基-O-」。烷氧基之實例包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、三級丁氧基、二級丁氧基、正戊氧基、正己氧基及1,2-二甲基丁氧基。

「胺基」係指基團-NR ^yR ^z，其中R ^y及R ^z獨立地為氫、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；其中每一者可視情況經取代，如本文中所定義。

「芳基」係指具有單個環(例如單環)或多個環(例如雙環或三環)之包括稠合系統之芳族碳環基。如本文所用，芳基具有6至20個環碳原子(亦即C ₆ _-C ₂₀芳基)、6至12個碳環原子(亦即C ₆ _-C ₁₂芳基)或6至10個碳環原子(亦即C ₆ _-C ₁₀芳基)。芳基之實例包括例如苯基、萘基、茀基及蒽基。然而，芳基不以任何方式涵蓋下文所定義之雜芳基或與其重疊。若一或多個芳基與雜芳基稠合，則所得環系統為雜芳基。若一或多個芳基與雜環基稠合，則所得環系統為雜環基。

「環烷基」係指具有單個環或多個環之包括稠合、橋接及螺環系統的飽和或部分飽和環烷基。術語「環烷基」包括具有至少一個sp ³碳原子(亦即，至少一個非芳環)之環烯基(亦即，具有至少一個雙鍵之環基)及碳環稠環系統。如本文所用，環烷基具有3至20個環碳原子(亦即C ₃-C ₂₀環烷基)、3至12個環碳原子(亦即C ₃-C ₁₂環烷基)、3至10個環碳原子(亦即C ₃-C ₁₀環烷基)、3至8個環碳原子(亦即C ₃-C ₈環烷基)、3至7個環碳原子(亦即C ₃-C ₇環烷基)或3至6個環碳原子(亦即C ₃-C ₆環烷基)。單環基團包括例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及環辛基。多環基團包括例如雙環[2.2.1]庚烷基、雙環[2.2.2]辛烷基、金剛烷基、降[𦯉]基、十氫萘基、7,7-二甲基-雙環[2.2.1]庚烷基及其類似基團。此外，術語環烷基意欲涵蓋可稠合至芳環之任何非芳族環，與分子之其餘部分之連接無關。再者，當在同一碳原子上存在兩個取代位時，環烷基亦包括「螺環烷基」，例如螺[2.5]辛烷基、螺[4.5]癸烷基或螺[5.5]十一烷基。

「鹵素」或「鹵基」係指佔據週期表之VIIA族的原子，諸如氟基、氯基、溴基或碘基。

「鹵代烷基」係指如上文所定義之非分支鏈或分支鏈烷基，其中一或多個(例如1至6或1至3個)氫原子經鹵素置換。舉例而言，在殘基經一個以上鹵素取代之情況下，其可藉由使用對應於所連接之鹵素部分之數目之字首來提及。二鹵代烷基及三鹵代烷基係指經兩個(「二」)或三個(「三」)鹵基取代之烷基，該等鹵基可為(但並非必須為)相同鹵素。鹵代烷基之實例包括例如三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基及其類似基團。「C ₁-C ₃鹵代烷基」及「鹵基-C ₁-C ₃烷基」在本文中可互換使用且係指具有1至3個碳原子之烷基鏈，其中烷基鏈中之一或多個氫原子經鹵素置換。此外，C ₁-C ₃氟烷基(或氟-C ₁-C ₃烷基)係指具有1至3個碳原子之烷基鏈，其中烷基鏈中之一或多個氫原子經氟基置換。鹵代烷基之非限制性實例包括−CH ₂CH ₂CF ₃、−CHF ₂、−CF ₃、−CH ₂CHF ₂及−CH ₂CF ₃。

「鹵代烷氧基」係指如上文所定義之烷氧基，其中一或多個(例如1至6或1至3個)氫原子經鹵素置換。「C ₁-C ₃鹵代烷氧基」及「鹵基-C ₁-C ₃烷氧基」在本文中可互換使用且係指烷氧基之烷基單元中具有1至3個碳原子之烷氧基，其中烷基鏈中之一或多個氫原子經鹵素置換。鹵代烷氧基之非限制性實例包括−OCH ₂CHF ₂、−OCH ₂CF ₃及-OCF ₃。

「羥烷基」或「羥基伸烷基」及其類似基團係指如上文所定義之烷基或伸烷基，其中一或多個(例如1至6個或1至3個)氫原子經羥基置換。藉助於實例，術語「羥基-C ₁-C ₃烷基」、「C ₁-C ₃羥烷基」或「羥基-C ₁-C ₃伸烷基」係指一個至三個碳烷基鏈，其中任何碳上之一或多個氫經羥基置換，特定言之，鏈之一個碳上的一個氫經羥基置換。

「雜芳基」係指具有單個環、多個環或多個稠合環之芳族基團，其中一或多個環雜原子獨立地選自氮、氧及硫。如本文所用，雜芳基包括1至20個環碳原子(亦即C ₁-C ₂₀雜芳基)、3至12個環碳原子(亦即C ₃-C ₁₂雜芳基)或3至8個碳環原子(亦即C ₃-C ₈雜芳基)，以及1至5個環雜原子、1至4個環雜原子、1至3個環雜原子、1至2個環雜原子或1個環雜原子，該等環雜原子獨立地選自氮、氧及硫。在某些情況下，雜芳基包括9-10員環系統(9員至10員雜芳基)、6-10員環系統(6員至10員雜芳基)、5-10員環系統(5員至10員雜芳基)、5-7員環系統(5員至7員雜芳基)或5-6員環系統(5員至6員雜芳基)，各自獨立地具有1至4個環雜原子、1至3個環雜原子、1至2個環雜原子或1個環雜原子，該等環雜原子獨立地選自氮、氧及硫。雜芳基之實例包括例如吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并萘并呋喃基、苯并㗁唑基、苯并噻吩基(benzothienyl/benzothiophenyl)、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、㖕啉基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、異噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、異吲哚基、異喹啉基、異㗁唑基、㖠啶基、㗁二唑基、㗁唑基、1-氧離子基吡啶基、1-氧離子基嘧啶基、1-氧離子基吡𠯤基、1-氧離子基嗒𠯤基、啡𠯤基、呔𠯤基、喋啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡𠯤基、嘧啶基、嗒𠯤基、喹唑啉基、喹喏啉基、喹啉基、

啶基、異喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基及三𠯤基。稠合雜芳基環之實例包括但不限於苯并[d]噻唑基、喹啉基、異喹啉基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并[d]咪唑基、吡唑并[1,5-a]吡啶基及咪唑并[1,5-a]吡啶基，其中該雜芳基可經由稠合系統之任一環結合。具有單個或多個稠合環、含有至少一個雜原子之任何芳族環視為雜芳基，與分子之其餘部分之連接無關(亦即，經由稠合環中之任一者)。雜芳基並不涵蓋如上文所定義之芳基或與其重疊。

「雜環基」係指具有獨立地選自氮、氧及硫之一或多個環雜原子的飽和或部分不飽和環烷基。術語「雜環基」包括雜環烯基(亦即具有至少一個雙鍵之雜環基)、橋接雜環基、稠合雜環基及螺雜環基。雜環基可為其中多環可為稠環、橋聯環或螺環的單環或多環，且可包含一或多個(例如1至3個)側氧基(=O)部分或N-氧化物(-O ^-)部分。含有至少一個雜原子之任何非芳族環視為雜環基，與連接無關(亦即，可經由碳原子或雜原子結合)。此外，術語雜環基意欲涵蓋含有至少一個雜原子之任何非芳族環，該環可與芳基或雜芳基環稠合，與分子之其餘部分之連接無關。如本文所用，雜環基具有2至20個環碳原子(亦即C ₂-C ₂₀雜環基)、2至12個環碳原子(亦即C ₂-C ₁₂雜環基)、2至10個環碳原子(亦即C ₂-C ₁₀雜環基)、2至8個環碳原子(亦即C ₂-C ₈雜環基)、3至12個環碳原子(亦即C ₃-C ₁₂雜環基)、3至8個環碳原子(亦即C ₃-C ₈雜環基)或3至6個環碳原子(亦即C ₃-C ₆雜環基)；具有1至5個環雜原子、1至4個環雜原子、1至3個環雜原子、1至2個環雜原子或1個環雜原子，該等環雜原子獨立地選自氮、硫或氧。當雜環基環含有4至6個環原子時，其在本文中亦稱作4員至6員雜環基。當雜環基環含有5至7個環原子時，其在本文中亦稱為5員至7員雜環基。當雜環基環含有5至10個環原子時，其在本文中亦稱為5員至10員雜環基。雜環基之實例包括例如吖呾基、氮呯基、苯并間二氧雜環戊烯基、苯并[b][1,4]二氧呯基、1,4-苯并二㗁烷基、苯并哌喃基、苯并間二氧雜環己烯基、苯并哌喃酮基、苯并呋喃酮基、二氧戊環基、二氫哌喃基、氫哌喃基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氫異喹啉基、呋喃酮基、咪唑啉基、咪唑啶基、吲哚啉基、吲哚𠯤基、異吲哚啉基、異噻唑啶基、異㗁唑啶基、嗎啉基、八氫吲哚基、八氫異吲哚基、2-側氧基哌𠯤基、2-側氧基哌啶基、2-側氧基吡咯啶基、㗁唑烷基、環氧乙烷基、氧雜環丁烷基、啡噻𠯤基、啡㗁𠯤基、哌啶基、哌𠯤基、4-哌啶酮基、吡咯啶基、吡唑啶基、

啶基、噻唑啶基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、三噻烷基、四氫喹啉基、噻吩基(thiophenyl/thienyl)、四氫哌喃基、硫嗎啉基、噻𠰌啉基、1-側氧基-硫𠰌啉基及1,1-二側氧基-硫𠰌啉基。當同一碳原子上存在兩個取代位時，術語「雜環基」亦包括「螺雜環基」。螺雜環基環之實例包括例如雙環及三環系統，諸如2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷基、2-氧雜-6-氮雜螺[3.4]辛烷基及6-氧雜-1-氮雜螺[3.3]庚烷基。稠合雜環基環之實例包括(但不限於)1,2,3,4-四氫異喹啉基、4,5,6,7-四氫噻吩并[2,3-c]吡啶基、吲哚啉基及異吲哚啉基，其中雜環基可經由稠合系統之任一個環結合。

「(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基」係指烷基-烷氧基，其中烷氧基單元及烷基單元各自單獨地含有具有1至3個碳原子之烷基鏈。

「(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基」係指烷氧基-烷氧基，其中兩個烷氧基單元各自個別地含有具有1至3個碳原子之烷基鏈。

術語「視情況存在」或「視情況」意謂隨後所描述之事件或情形可發生或可不發生，且該描述包括該事件或情形發生之情況及該事件或情形不發生之情況。此外，術語「視情況經取代」係指指定原子或基團上之任一或多個(例如1至5、1至4或1至3個)氫原子可經或可不經除氫以外之部分置換。

本文所用之術語「經取代」意謂以上基團(亦即烷基、伸烷基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、環烷基、芳基、雜環基及/或雜芳基)中之任一者，其中至少一個(例如1至5、1至4或1至3個)氫原子經與非氫原子(諸如(但不限於)烷基、烷氧基、胺基、芳基、芳烷基、羧基、羧基酯、氰基、環烷基、鹵基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、羥烷基、雜芳基、雜環基、-NHNH ₂、羥基、側氧基、硝基、-S(O)OH、-S(O) ₂OH、N-氧化物或-Si(R ^y) ₃)鍵結之鍵置換，其中各R ^y獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、芳基、雜芳基或雜環基。

在某些實施例中，「經取代」包括以上烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基中之任一者中一或多個(例如1至5個、1至4個或1至3個)氫原子獨立地經氘、鹵基、氰基、硝基、側氧基、烷基、鹵代烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-NR ^gR ^h、-NR ^gC(=O)R ^h、-NR ^gC(=O)NR ^gR ^h、-NR ^gC(=O)OR ^h、-NR ^gS(=O) ₁ _- ₂R ^h、-C(=O)R ^g、-C(=O)OR ^g、-OC(=O)OR ^g、-OC(=O)R ^g、-C(=O)NR ^gR ^h、-OC(=O)NR ^gR ^h、-OR ^g、-SR ^g、-S(=O)R ^g、-S(=O) ₂R ^g、-OS(=O) ₁ _- ₂R ^g、-S(=O) ₁ _- ₂OR ^g、-NR ^gS(=O) ₁ _- ₂NR ^gR ^h、=NSO ₂R ^g、=NOR ^g、-S(=O) ₁ _- ₂NR ^gR ^h、-SF ₅、-SCF ₃或-OCF ₃置換。在某些實施例中，「經取代」亦意謂以上基團中之任一者，其中一或多個(例如1至5個、1至4個或1至3個)氫原子經-C(=O)R ^g、-C(=O)OR ^g、-C(=O)NR ^gR ^h、-CH ₂SO ₂R ^g或-CH ₂SO ₂NR ^gR ^h置換。在前述內容中，R ^g及R ^h相同或不同且獨立地為氫、烷基、烷氧基、芳基、環烷基、鹵代烷基、雜環基及/或雜芳基。在某些實施例中，「經取代」亦意謂以上基團中之任一者，其中一或多個(例如1至5個、1至4個或1至3個)氫原子經與胺基、氰基、羥基、硝基、側氧基、鹵基、烷基、烷氧基、烷胺基、芳基、環烷基、鹵代烷基、雜環基、N-雜環基、雜芳基鍵結之鍵置換，或R ^g及R ^h及R ⁱ中之兩者與其所連接之原子一起形成雜環基環，其視情況經側氧基、鹵基或烷基取代，視情況經側氧基、鹵基、胺基、羥基或烷氧基取代。

藉由用無限地附加之其他取代基(例如，具有經取代烷基之經取代芳基，該經取代烷基本身由經取代芳基取代，該經取代芳基進一步由經取代雜烷基取代等等)定義取代基所獲得之聚合物或類似的無限結構並不意欲包括在本文中。除非另外指出，否則本文所描述之化合物中之連續置換之最大數目為三。舉例而言，用兩個其他經取代之芳基連續取代經取代之芳基限於經(經(經取代之芳基)取代之芳基)取代之芳基。類似地，以上定義不意欲包括不允許之取代模式(例如，經5個氟取代之甲基或具有兩個相鄰氧環原子之雜芳基)。該等不許可之取代模式為熟習此項技術者所熟知。當用於修飾化學基團時，術語「經取代」可描述本文所定義之其他化學基團。

在某些實施例中，如本文所用，片語「一或多個」係指一至五個。在某些實施例中，如本文所用，片語「一或多個」係指一至四個。在某些實施例中，如本文所使用，片語「一或多個」係指一至三個。

本文中所給出之任何化合物或結構意欲表示該化合物的未經標記之形式以及經同位素標記之形式。此等化合物形式亦可稱作且包括「經同位素增濃類似物」。經同位素標記之化合物具有本文中描繪之結構，但一或多個原子經具有所選原子質量或質量數之原子置換除外。可併入所揭示之化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟、氯及碘之同位素，諸如分別為 ²H、 ³H、 ¹¹C、 ¹³C、 ¹⁴C、 ¹³N、 ¹⁵N、 ¹⁵O、 ¹⁷O、 ¹⁸O、 ³¹P、 ³²P、 ³⁵S、 ¹⁸F、 ³⁶Cl、 ¹²³I及 ¹²⁵I。經各種同位素標記之本發明化合物係例如其中併入諸如 ³H、 ¹³C及 ¹⁴C之放射性同位素的彼等化合物。此類經同位素標記之化合物可適用於代謝研究、反應動力學研究、偵測或成像技術(諸如正電子發射斷層攝影術(PET)或單光子發射電腦斷層攝影術(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析)或用於患者之放射性治療。

術語「經同位素增濃之類似物」包括本文所描述之化合物的「氘化類似物」，其中一或多個氫，諸如碳原子上的氫經氘置換。此類化合物展現增加之代謝抗性，且因此當向哺乳動物(尤其人類)投與時，適用於增加任何化合物之半衰期。參見例如Foster, 「Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism,」 Trends Pharmacol. Sci. 5(12):524-527 (1984)。此類化合物係藉由此項技術中熟知之手段合成，例如藉由採用其中一或多個氫已由氘置換之起始物質。

本發明之經氘標記或取代之治療性化合物可具有經改良之DMPK (藥物代謝及藥物動力學)特性，該等特性與分佈、代謝及排泄(ADME)相關。用較重同位素(諸如氘)取代可得到由更大代謝穩定性產生之某些治療優點，例如增加之活體內半衰期、降低之劑量需求及/或治療指數改良。經 ¹⁸F、 ³H、 ¹¹C標記之化合物可適用於PET或SPECT或其他成像研究。本發明之經同位素標記之化合物及其前藥通常可以藉由進行流程中或下文所描述之實例及製備中所揭示之程序，藉由用可容易獲得的經同位素標記之試劑取代非同位素標記之試劑來製備。應理解，在此情形下，氘視為本文所描述之化合物的取代基。

可藉由同位素增濃因素來定義此類較重同位素(特定言之氘)之濃度。在本發明之化合物中，未明確指定為特定同位素之任何原子意圖表示彼原子之任何穩定同位素。除非另有說明，否則當位置經明確指定為「H」或「氫」時，應理解該位置在其天然豐度同位素組成中具有氫。因此，在本發明之化合物中，任何明確表示為氘(D)之原子意圖表示氘。此外，在一些實施例中，提供對應氘化類似物。

在許多情況下，本發明之化合物能夠藉助於胺基及/或羧基或與其類似之基團的存在而形成酸鹽及/或鹼鹽。

亦提供本文所描述之化合物之醫藥學上可接受之鹽、經同位素增濃類似物、氘化類似物、異構體(諸如立體異構物)、異構體混合物(諸如立體異構物之混合物)、前藥及代謝物。

「醫藥學上可接受」或「生理學上可接受」係指適用於製備適用於獸醫學或人類醫藥用途之醫藥組合物的化合物、鹽、組合物、劑型及其他材料。

所給出之化合物的術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留所給出之化合物之生物學有效性及特性且在生物學上或其他方面並非不合需要的鹽。「醫藥學上可接受之鹽」或「生理學上可接受之鹽」包括例如與無機酸所成之鹽及與有機酸所成之鹽。另外，若本文中所描述之化合物以酸加成鹽形式獲得，則可藉由使酸鹽之溶液鹼化來獲得游離鹼。相反，若產物為游離鹼，則可根據由鹼化合物製備酸加成鹽之習知程序，藉由將游離鹼溶解於適合有機溶劑中且用酸處理溶液來產生加成鹽，特定言之醫藥學上可接受之加成鹽。熟習此項技術者將認識到可用於製備無毒性醫藥學上可接受之加成鹽之各種合成方法。醫藥學上可接受之酸加成鹽可自無機酸及有機酸製備。來源於無機酸之鹽包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物之鹽。來源於有機酸之鹽包括例如乙酸、丙酸、葡萄糖酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、丁二酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸及其類似物之鹽。類似地，醫藥學上可接受之鹼加成鹽可由無機鹼及有機鹼製備。僅作為實例，來源於無機鹼之鹽包括鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、鋁鹽、銨鹽、鈣鹽以及鎂鹽。衍生自有機鹼之鹽包括(但不限於)以下之鹽：一級胺、二級胺及三級胺，諸如烷基胺(亦即，NH ₂(烷基))、二烷基胺(亦即，HN(烷基) ₂)、三烷基胺(亦即，N(烷基) ₃)、經取代烷基胺(亦即，NH ₂(經取代烷基))、二(經取代烷基)胺(亦即，HN(經取代烷基) ₂)、三(經取代烷基)胺(亦即，N(經取代烷基) ₃)、烯基胺(亦即，NH ₂(烯基))、二烯基胺(亦即，HN(烯基) ₂)、三烯基胺(亦即，N(烯基) ₃)、經取代之烯基胺(亦即，NH ₂(經取代之烯基))、二(經取代之烯基)胺(亦即，HN(經取代之烯基) ₂)、三(經取代之烯基)胺(亦即，N(經取代之烯基) ₃)、單、二或三環烷基胺(亦即，NH ₂(環烷基)、HN(環烷基) ₂、N(環烷基) ₃)、單、二或三芳基胺(亦即，NH ₂(芳基)、HN(芳基) ₂、N(芳基) ₃)或混合胺等。僅舉例而言，適合之胺之特定實例包括異丙胺、三甲胺、二乙胺、三(異丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲胺基乙醇、哌𠯤、哌啶、𠰌啉、N-乙基哌啶及其類似者。

術語「水合物」係指由本文所描述之化合物及水形成之複合物。

術語「溶劑合物」係指一或多個溶劑分子與本發明化合物之締合物或複合物。形成溶劑合物之溶劑之實例包括但不限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、二甲亞碸、乙酸乙酯、乙酸及乙醇胺。

一些化合物以互變異構物之形式存在。互變異構物彼此處於平衡。舉例而言，含有醯胺之化合物可與亞胺酸互變異構物平衡存在。無論展示何種互變異構物且無論互變異構物之間的平衡性質如何，一般熟習此項技術者將化合物均理解為包含醯胺及亞胺酸互變異構物兩者。因此，含醯胺化合物應理解為包括其亞胺酸互變異構物。類似地，含亞胺酸之化合物應理解為包括其醯胺互變異構物。

本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽包括不對稱中心且因此可產生鏡像異構物、非鏡像異構物及其他立體異構形式，就絕對立體化學而言，其可定義為( R)-或( S)-，或就胺基酸而言，定義為(D)-或(L)-。本發明標的物意欲包括所有此類可能的異構體，以及其外消旋及光學純形式。具光學活性之(+)及(-)、( R)-及( S)-或(D)-及(L)-異構體可使用對掌性合成子或對掌性試劑來製備，或使用習知技術(例如層析及分步結晶)來解析。用於製備/分離個別鏡像異構物之習知技術包括自適合的光學純前驅體進行對掌性合成或使用例如對掌性高壓液相層析(HPLC)對外消旋體(或鹽或衍生物之外消旋體)進行解析。當本文所描述之化合物含有烯系雙鍵或其他幾何不對稱中心時且除非另外說明，否則意欲化合物包括E及Z幾何異構體。

「立體異構物」係指由藉由相同鍵鍵結之相同原子構成但具有不可互換之不同三維結構的化合物。本發明標的物涵蓋各種立體異構物及其混合物且包括「鏡像異構物」，該鏡像異構物係指其分子互為不可重疊鏡像的兩種立體異構物。

「非鏡像異構物」為具有至少兩個不對稱原子，但彼此不為鏡像之立體異構物。

本文所描繪之化合物的相對中心係使用「粗鍵」型式(粗體或平行線)以圖形方式指示，且絕對立體化學係使用楔形鍵(粗體或平行線)描繪。

「前藥」意謂在向哺乳動物個體投與此類前藥時，活體內釋放根據本文所描述之結構的活性母體藥物之任何化合物。藉由修飾本文所描述之化合物中存在之官能基，以此方式使得該等修飾可活體內裂解以釋放母體化合物來製備本文所描述之化合物的前藥。可藉由以使變異體可活體內分裂從而釋放母化合物之方式來修飾出現在化合物中的官能基，以製備前藥。前藥包括本文所描述之化合物，其中本文所描述之化合物的羥基、胺基、羧基或硫氫基可結合至可活體內裂解從而分別再生游離羥基、胺基或硫氫基的任何基團。前藥之實例包括但不限於本文所描述之化合物中的羥基官能基的酯(例如乙酸酯、甲酸酯及苯甲酸酯衍生物)、醯胺、胍、胺基甲酸酯(例如N,N-二甲胺基羰基)及其類似物。前藥之製備、選擇及使用論述於T. Higuchi及V. Stella, 「Pro-drugs as Novel Delivery Systems」, A.C.S研討會系列(A.C.S. Symposium Series)之第14卷；「Design of Prodrugs」, H. Bundgaard編, Elsevier, 1985；及「Bioreversible Carriers in Drug Design」, Edward B. Roche編, 美國藥學協會及帕加蒙出版社(American Pharmaceutical Association and Pergamon Press), 1987中，其各自以全文引用之方式併入本文中。

如本文所用之術語「代謝物」係指當本文所揭示之化合物代謝時形成之所得產物。如本文所用，術語「代謝」係指諸如本文所揭示之化合物的特定物質被生物體改變之過程(包括(但不限於)水解反應及由酶催化之反應)之總和。舉例而言，本發明標的物之化合物之醛部分(-C(O)H)可在活體內還原成-CH ₂OH部分。

如本文所用，除非另外規定，否則術語「活化劑」係指增加丙酮酸激酶R (PKR)或丙酮酸激酶M2 (PKM2)之活性的式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽。本文中「活化」意謂在化合物存在下將PKR之活性或PKM2活性提高至大於PKR或PKM2活性之基礎水準的水準。在一些實施例中，術語「活化」意謂PKR或PKM2活性提高至少約5%、至少約10%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約60%、至少約70%、至少約80%、至少約90%或至少約95%。在其他實施例中，活化意謂PKR或PKM2活性提高約5%至約25%、約25%至約50%、約50%至約75%或約75%至100%。在一些實施例中，活化意謂PKR或PKM2活性提高約95%至100%，例如活性提高95%、96%、97%、98%、99%或100%。此等提高可使用熟習此項技術者可識別的多種技術量測，包括活體外分析。

如本文所用，術語「丙酮酸激酶活化劑」及其類似物係指活化、提高或調節丙酮酸激酶之生物活性中之一或多者的化合物。與適當對照相比，活性可提高例如丙酮酸激酶活性之至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、95%或100%。提高可為統計學上顯著之提高。

「治療」為用於獲得有益或所需結果(包括臨床結果)之途徑。有利或期望臨床結果可包括以下各者中之一或多者：a)抑制該疾病或病況(例如，減少由該疾病或病況產生之一或多種症狀及/或減輕該疾病或病況之程度)；b)減緩或停止與該疾病或病況相關之一或多種臨床症狀的發展(例如，使該疾病或病況穩定、預防或延遲該疾病或病況之惡化或進展及/或預防或延遲該疾病或病況之擴散(例如轉移))；及/或c)減輕該疾病，亦即使臨床症狀消退(例如，改善疾病病況、提供該疾病或病況之部分或總體緩解、增強另一藥物療法之作用、延遲該疾病之進展、提高生命品質及/或延長存活期)。

「預防(Prevention/preventing)」意謂使疾病或病況之臨床症狀不發展的對該疾病或病況之任何治療。在一些實施例中，化合物可向具有該疾病或病況之風險或具有該疾病或病況之家族史之個體(包括人類)投與。

「個體」係指已成為或將成為治療、觀察或實驗之對象的動物，諸如哺乳動物(包括人類)。本文中所描述之方法可適用於人類治療及/或獸醫學應用。在一些實施例中，個體為哺乳動物。在一個實施例中，個體為人類。

本文中所描述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、互變異構物、立體異構物、立體異構物之混合物、前藥或氘化類似物的術語「治療有效量」或「有效量」意謂當向個體投與時足以實現治療以提供治療效益(諸如改善症狀或減緩疾病進展)的量。舉例而言，治療有效量可為足以減輕丙酮酸激酶缺乏症(PKD)之症狀的量。治療有效量可視正在進行治療之個體及疾病或病況、個體之體重及年齡、該疾病或病況之嚴重程度及投與方式而改變，其可以容易地由一者或一般技術者判定。

下文亦可按需要提供額外定義。 II. 化合物

在某些實施例中，本文所描述之標的物係針對式I化合物及其醫藥學上可接受之鹽：

其中， R ^a1為羥基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷基； R ^a2為氫或C ₁-C ₃烷基；或R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成4員至5員雜環基； R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一個或兩個在各情況下獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷基及(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基；及 R ^b為噻唑-2(3H)-酮或5員雜芳基環，各自視情況經在各情況下獨立地選自由以下組成之群的一個、兩個或三個取代基取代：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基、C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、3員至6員環烷基、4員至6員雜環基、苯基及5員或6員雜芳基；或其醫藥學上可接受之鹽。

適用化合物包括具有如上文所描述之變數的所有彼等化合物。

在某些實施例中，適用的式I化合物包括其中R ^a1為C ₁-C ₃羥烷基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a1為−OH、−CH ₂OH、−CH(OH)CH ₃、−OCH ₃或−OCH ₂CH ₂OH之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a1為−OH、−CH ₂OH或−CH(OH)CH ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a1為−CH ₂OH之彼等化合物。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a2為氫或−CH ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a2為氫之彼等化合物。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成氧雜環丁烷基環之彼等化合物。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為各自視情況經一或兩個鹵基取代之苯基或吡啶基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為各自視情況經一個鹵基取代之苯基或吡啶基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為各自視情況經氟基或氯基取代之苯基或吡啶基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為各自視情況經氟基取代之苯基或吡啶基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為苯基、2-氟苯基、2-氯苯基或吡啶-2-基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為苯基、2-氟苯基或吡啶-2-基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為2-氟苯基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為

之彼等化合物，其中，X為CH或N；且R ^c1為氫、氟基或氯基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為

之彼等化合物，其中X為CH或N；且R ^c1為氫、氟基或氯基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為苯基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c經(即

) C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷氧基正取代之苯基之彼等化合物，其中

中之R ^c1為C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷氧基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為經−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、甲氧基-C ₁-C ₃烷氧基、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂CH ₂OH正取代之苯基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^c為經−CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂OCH ₃正取代之苯基之彼等化合物。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環之彼等化合物，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、苯基及4員至6員雜環基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環之彼等化合物，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−CH(CH ₃) ₂、氟基-C ₁-C ₃烷基、氟基-C ₁-C ₃烷氧基、苯基、5員雜環基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、−OCH ₂CH ₃及−OCH ₃。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環之彼等化合物，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CF ₃、−CH ₂CHF ₂、−CH ₂CH ₂CF ₃、−CHF ₂、−OCH ₂CHF ₂、苯基、−OCH ₂CF ₃、−CH ₂CF ₃、−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CH ₂OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、−OCH ₃及四氫呋喃基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為經一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代且視情況進一步經一個C ₁-C ₃烷基取代之5員雜芳基環之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為經一個選自由C ₁-C ₃烷基及C ₁-C ₃鹵代烷基組成之群的取代基取代之5員雜芳基環之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為經一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代之5員雜芳基環之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為經兩個取代基取代之5員雜芳基環之彼等化合物，該等取代基各自獨立地選自由C ₁-C ₃烷基及C ₁-C ₃鹵代烷基組成之群。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為經一個C ₁-C ₃烷基及一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代之5員雜芳基環之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b之5員雜芳基環含有一個、兩個或三個氮環原子之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b之5員雜芳基環為吡唑基、咪唑基、吡咯基、㗁唑基、三唑基或噻唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b之5員雜芳基環為吡唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

或

之化合物，其中，R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷基、氫或四氫呋喃基；且R ^b2為氫、鹵基-C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

或

之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

或

之彼等化合物；其中R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氫或C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b2為氫之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b2為C ₁-C ₃烷基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b2為-CH ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為氟基-C ₁-C ₃烷基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CHF ₂、−CH ₂CH ₂CF ₃、−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CHF ₂或−CH ₂CF ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CHF ₂或−CH ₂CF ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CH ₂F之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CHF ₂之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CF ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氟基-C ₁-C ₃烷基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CH ₃；且R ^b2為−CF ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b2為氫且R ^b1為−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CHF ₂或−CH ₂CF ₃。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b2為-CH ₃且R ^b1為-CH ₂CHF ₂。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b2為氫且R ^b1為-CH ₂CHF ₂。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b1為−CH ₂CH ₂OCH ₃或四氫呋喃基；且R ^b2為氫之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b之5員雜芳基環為噻唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中，R ^b3為鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷氧基；且R ^b4為氫或C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

或

且R ^b3為-CH ₃、-CH ₂CH ₂CF ₃、-OCH ₂CHF ₂、-OCH ₂CHF ₃、-OCH ₃或-OCH ₂CH ₃；且R ^b4為-CH ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b中之噻唑-2(3H)-酮為

之彼等化合物，其中R ^b6係選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b7係選自由氫及C ₁-C ₃烷基組成之群。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b中之噻唑-2(3H)-酮為

之彼等化合物，其中R ^b6係選自由甲基、乙基及-CH ₂CHF ₂組成之群；且R ^b7為甲基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為5員雜芳基環，其中R ^b之5員雜芳基環為噻吩基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b5為鹵基、C ₁-C ₃烷基、苯基或鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b5為苯基、-CH ₂CH ₃、-CF ₃、溴基或-CH ₂CH ₂CF ₃之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為咪唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b8及R ^b9各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b8為鹵基-C ₁-C ₃烷基且R ^b9為氫。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b8為-CH ₂CF ₂H之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為吡咯基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b10及R ^b11各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b10為氫且R ^b11為鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b11為-CF3之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為三唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，R ^b12及R ^b13各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b13為氫且R ^b12為鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b12為-CH ₂CHF ₂之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為異㗁唑基之彼等化合物。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b14及R ^b15各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b為

之彼等化合物，其中R ^b14及R ^b15各自為C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中R ^b14及R ^b15各自為甲基之彼等化合物。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式I-Ia之彼等化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1、R ^a2、R ^c及R ^b如上文所描述。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式I-Ib之彼等化合物

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式II之彼等化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1、R ^c及R ^b如上文所描述。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式III之彼等化合物

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式IA之彼等化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中X、R ^C1及R ^b如上文所描述。

在某些實施例中，適用之式I化合物包括其中化合物具有式IB之彼等化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中X、R ^C1及R ^b如上文所描述。

在某些實施例中，適用之化合物包括具有式IA之彼等化合物

或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為CH；R ^c1為氟基或氫；R ^b為

；其中R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氫或C ₁-C ₃烷基。在某些實施例中，適用之化合物包括具有式IA之彼等化合物，其中R ^b1為-CH ₂CH ₂F、-CH ₂CHF ₂或-CH ₂CF ₃；且R ^b2為氫或甲基。在某些其他實施例中，適用之化合物包括具有式IA之彼等化合物，其中R ^b1為-CH ₂CH ₂F、-CH ₂CHF ₂或-CH ₂CF ₃；且R ^b2為氫。本文所描述之主題包括以下表1中之化合物或其醫藥學上可接受之鹽：

表1

化合物編號	結構	IUPAC 名稱	質量實驗值 ( M + 1 )
1		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	452
2		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	470
3		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-{[1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基｝2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮	488
4		(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-羥基-2-苯基乙-1-酮	438
5		(2S)-1-(2-{[1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基｝-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	452
6		(2S,3S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丁-1-酮	466
7		(2S,3R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丁-1-酮	466
8		3-氯基-2-[3-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基)氧雜環丁烷-3-基]吡啶	499
9		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮	486
10*		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮或 (2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮	467
11		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	466
12		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	470.1
13		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮	486
14		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	484
15		(2S)-1-{2-[(2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	433.04
16		(2S)-1-{2-[(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	417.03
17		(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(3,3,3-三氟丙基)噻吩-2-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮	499.89
18		(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[(5-苯基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	479.92
19		(2S)-1-{2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	481.83 / 483.74
20		(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(3,3,3-三氟丙基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮	515.04
21		(2S)-1-{2-[(5-乙基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	432.04
22		(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮	516.95
23		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	466.96
24		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	452.05
25		(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或 5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-3,4-二甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮	449.11
26		(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-乙氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或 3-乙基-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮	462.92
27		(2S)-1-(2-{[2-(2,2-二氟乙氧基)-4-甲基-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮或 3-(2,2-二氟乙基)-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮	498.96
28*		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮或 (S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮	457
29*		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮或 (S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮	457
30		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	470
31*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮	471
32*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮	471
33		(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	488
34		(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-羥基-2-苯基乙醇	438
35		(2R)-1-[2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	452
36		(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮	456
37		(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮	456
38*		(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮或 (2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮	457
39*		(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮或 (2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮	457
40*		(2R)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮或 (2S)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮	474
41*		(2R)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮或 (2S)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮	474
42*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮	471
43*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮	471
44		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	464.2
45		(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	464.2
46		(R)-2-(2-氯苯基)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基丙-1-酮	486
47		(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	504
48		(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	504
49		(2S,3R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮	484
50		(2S,3S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮	484
51		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮	456
52		(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮	517
53		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	488
54		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	488
55		(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	504
56		(2R)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	504
57		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-(1-異丙基吡唑-4-基磺醯基)-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	448
58		(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮	502
59		(R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮	502
60		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	464
61		(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	464
62		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	488
63		(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮	504
64		3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶	499
65		(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮	517
66		(2S)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮	483
67		(2R)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮	483
68		(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	502
69		(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	502
70		(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	518
71		(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	518
72		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	452
73		(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	506
74		(2R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	506
75		(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮	531
76		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	466
77		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	466
78		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	484
79		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	484
80		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮	500
81		(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	500
82		3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶	513
83		(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	470
84		(2R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮	470
85*		(2R)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮或 (2S)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮	518
86*		(2R)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮或 (2S)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮	518
87		(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	480
88		(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	480
89		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	466
90		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	468
91		(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	468.1
92*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮	526
93*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮	526
94		(2S)-1-{2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	484
95		(2R)-1-{2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	484
96		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	466
97		(2R)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	466
98		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	482
99		(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	482
100		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6 二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	484
101		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	500
102		(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	500
103		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮	496
104		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮	496
105		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙-1-酮	480
106		(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙-1-酮	480
107		(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	487
108		(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮	487
109*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮	512
110*		(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮或 (R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮	512
111		(2S)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	484
112		(2R)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	484
113		(2S)-3-羥基-1-(2-{[1-(氧雜環戊-3-基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮	458.45
114		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮	470.2
115		1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-甲氧基乙-1-酮	471
116		(2S)-1-(2-{[1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	438.04
117		(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)苯硫-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮	471.95
118		(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)-1H-吡咯-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮	455.12
119		(2S)-1-{2-[(2-乙氧基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮	449.12
120		(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮	482
121		(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮	482
122		(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-甲氧基-2-苯基丙-1-酮	452.12
123*		(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮或 (2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮	467

*絕對立體化學未確定 III. 醫藥組合物及投與模式

本文中所提供之化合物通常以醫藥組合物形式投與。因此，本文亦提供醫藥組合物，其包含本文所描述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、立體異構物或立體異構物之混合物中之一或多者及一或多種醫藥學上可接受之媒劑，該等媒劑選自載劑、佐劑及賦形劑。適合的醫藥學上可接受之媒劑可包括例如惰性固體稀釋劑及填充劑、稀釋劑(包括無菌水性溶液及各種有機溶劑)、滲透增強劑、增溶劑及佐劑。此類組合物係以醫藥技術中熟知之方式製備。參見例如 Remington ' s Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co., Philadelphia, Pa.第17版(1985)；及Modern Pharmaceutics, Marcel Dekker, Inc.第3版(G.S. Banker及C.T. Rhodes編)。

醫藥組合物可以單次或多次劑量形式投與。醫藥組合物可藉由各種方法投與，包括例如經直腸、經頰、鼻內及經皮途徑。在某些實施例中，醫藥組合物可藉由動脈內注射、靜脈內、腹膜內、非經腸、肌內、皮下、經口、局部或以吸入劑形式投與。

一種投與模式為非經腸，例如藉由注射。本文所描述之醫藥組合物可併入以供藉由注射投與之形式包括例如水性或油性懸浮液或乳液，其含芝麻油、玉米油、棉籽油或花生油以及酏劑、甘露醇、右旋糖或無菌水溶液及類似醫藥媒劑。

經口投與可為用於投與本文所描述之化合物之另一途徑。可經由例如膠囊或包覆腸溶包衣錠劑投與。在製造包括至少一種本文中所描述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、立體異構物或立體異構物之混合物的醫藥組合物中，活性成份通常由賦形劑稀釋及/或密封於可呈膠囊、藥囊、紙張或其他容器形式之此類載劑內。當賦形劑充當稀釋劑時，其可呈固體、半固體或液體材料形式，其充當活性成分之媒劑、載劑或介質。因此，組合物可呈以下形式：錠劑、丸劑、散劑、口含錠、藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳液、溶液、糖漿、氣霧劑(呈固體形式或於液體介質中)、含有例如高達10重量%之活性化合物的軟膏、軟及硬明膠膠囊、無菌可注射溶液及無菌封裝粉末。

適合的賦形劑之一些實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、海藻酸鹽、黃蓍、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、纖維素、水、糖漿及甲基纖維素。調配物可另外包括：潤滑劑，諸如滑石、硬脂酸鎂及礦物油；潤濕劑；乳化劑及懸浮劑；防腐劑，諸如羥基苯甲酸甲酯及羥基苯甲酸丙酯；甜味劑；以及調味劑。

可藉由採用此項技術中已知之程序來調配包括至少一種本文所描述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、立體異構物或立體異構物之混合物的組合物以便在向個體投與之後提供活性成份之快速、持續或延遲釋放。用於經口投與之控制釋放藥物遞送系統包括含有經聚合物塗佈之儲集囊或藥物-聚合物基質調配物的滲透泵系統及溶解系統。控制釋放系統之實例在美國專利第3,845,770號、第4,326,525號、第4,902,514號及第5,616,345號中給出。另一種用於本文中所揭示之方法中的調配物使用經皮遞送裝置(「貼片」)。此類經皮貼片可用於提供本文中所描述之化合物以控制量連續或非連續輸注。用於遞送醫藥試劑之經皮貼片之構造及使用為此項技術中所熟知。參見例如美國專利第5,023,252號、第4,992,445號及第5,001,139號。此類貼片可經構造以用於連續、脈衝式或按需求傳遞醫藥試劑。

對於製備固體組合物，諸如錠劑而言，主要活性成分可與醫藥賦形劑混合以形成含有本文所描述之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、立體異構物或立體異構物之混合物之均質混合物的固體預調配組合物。當提及此等預調配組合物為均勻組合物時，活性成分可均勻分散在整個組合物中，以便組合物可容易地再分成同等有效的單位劑型，諸如錠劑、丸劑及膠囊。

本文中所描述之化合物之錠劑或丸劑可經包衣或以其他方式混配以得到提供長作用時間或免受胃之酸性條件之優勢的劑型。舉例而言，錠劑或丸劑可包括內部劑量及外部劑量組分，後者呈前者上之包膜形式。兩種組分可由腸溶層隔開，該腸溶層用以防止在胃中崩解且允許內部組分完整進入十二指腸或釋放延遲。多種材料可用於此類腸溶層或腸溶衣，此類材料包括多種聚合酸及聚合酸與諸如蟲膠、鯨蠟醇及乙酸纖維素之材料之混合物。

用於吸入或吹入之組合物可包括在醫藥學上可接受之水性或有機溶劑或其混合物中之溶液及懸浮液以及散劑。液體或固體組合物可含有如本文中所描述之適合的醫藥學上可接受之賦形劑。在一些實施例中，藉由經口或經鼻呼吸道途徑投與組合物以用於局部或全身性作用。在其他實施例中，於醫藥學上可接受之溶劑中之組合物可藉由使用惰性氣體進行霧化。霧化溶液可直接自霧化裝置吸入或霧化裝置可連接至面罩或間歇性正壓呼吸機。可以適合的方式自遞送調配物之裝置投與(較佳經口或經鼻)溶液、懸浮液或粉末組合物。

本申請案之化合物用於任何特定個體的具體劑量水準將視多種因素而定，包括經受治療之個體所採用特定化合物之活性、年齡、體重、總體健康狀況、性別、膳食、投與時間、投與途徑及排泄速率、藥物組合及特定疾病之嚴重程度。舉例而言，劑量可表示為每公斤個體體重的本文所描述之化合物之毫克數(mg/kg)。介於約0.1與150 mg/kg之間的劑量可為適當的。在一些實施例中，約0.1及100 mg/kg可為適合的。在其他實施例中，介於0.5 mg/kg與60 mg/kg之間的劑量可為適當的。當在尺寸廣泛不同之個體之間調節劑量時，諸如當在兒童及成年人類中使用藥物時或當將諸如犬之非人類個體中之有效劑量轉換成適合於人類個體之劑量時所發生的，根據個體之體重進行標準化為尤其適用的。視藥物動力學及藥力學性質(包括特定化合物之吸收、分佈、代謝及分泌)而定，劑量可一天一次(QID)、每天兩次(BID)或更頻繁地投與。此外，毒性因素可影響劑量及投與方案。在經口投與時，丸劑、膠囊或錠劑可每天攝取或以較低頻率攝取指定時段。方案可重複多個治療循環。 IV. 治療方法

本文所描述之方法可應用於活體內或離體細胞群體。「活體內」意謂在活的個體內，如在動物或人類內。在此情形下，可在個體中在治療學上使用本文中所描述之方法。「離體」意謂在活的個體外部。離體細胞群體之實例包括活體外細胞培養物及生物樣品，包括自個體獲得之體液或組織樣品。此等樣品可藉由此項技術中熟知之方法獲得。例示性生物體液樣品包括血液、腦脊髓液、尿液及唾液。在此情形下，本文中所描述之化合物及組合物可用於多種目的，包括治療性及實驗性目的。舉例而言，可離體使用本文中所描述之化合物及組合物以測定就既定適應症、細胞類型、個體及其他參數而言之本發明之化合物之最佳投與時程及/或劑量。自此類用法搜集之資訊可用於實驗目的或臨床中以設定活體內治療方案。本文所描述之化合物及組合物可能適合之其他離體使用描述於下文中或對熟習此項技術者將變得顯而易見。所選化合物可進一步經表徵以檢查在人類或非人類個體中之安全性或耐受劑量。此類特性可使用熟習此項技術者通常已知之方法檢查。

在某些實施例中，本文所揭示之主題係關於活化PKR及/或PKRM2之方法，包括藉由投與治療有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物來治療個體之疾病或病症的方法。在某些實施例中，疾病或病症係選自由以下組成之群：PKD (丙酮酸激酶缺乏症)、SCD (例如鐮狀細胞貧血)及地中海貧血症(例如β-地中海貧血症)。

在某些實施例中，本文所揭示之標的物係關於治療罹患與PKR及/或PKM2活性降低相關之疾病之個體的方法，其包含向該個體投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。在某些實施例中，與PKR活性降低相關之疾病係選自由以下組成之群：遺傳性非球形細胞溶血性貧血、溶血性貧血(例如由磷酸甘油酸激酶缺乏症引起之慢性溶血性貧血)、遺傳性球狀紅血球增多症、遺傳性橢圓形紅血球增多症、β-脂蛋白缺乏症(或巴-科症候群(Bassen-Kornzweig syndrome))、陣發性夜間血紅素尿症、後天性溶血性貧血(例如先天性貧血(例如酶病(enzymopathies)))及慢性疾病之貧血。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係針對治療個體之與PKR及/或PKM2調節相關之疾病或病症的方法，該方法包含向該個體投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。

在某些實施例中，本文所描述之標的物係針對一種治療有需要之個體之癌症的方法，其包含投與有效量之式I化合物、其醫藥學上可接受之鹽或包含式I化合物之醫藥組合物。在某些實施例中，癌症係選自由以下組成之群：膀胱癌、乳癌(例如導管癌)、子宮頸癌(例如鱗狀細胞癌)、大腸直腸癌(例如腺癌)、食道癌(例如鱗狀細胞癌)、胃癌(例如腺癌、神經管胚細胞瘤、大腸癌、絨毛膜癌、鱗狀細胞癌)、頭頸癌、血液癌(例如急性淋巴球性貧血、急性骨髓白血病、急性淋巴母細胞B細胞白血病、多形性大細胞淋巴瘤、B細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、慢性淋巴球性白血病、慢性嗜酸性球性白血病/嗜酸性白血球增多症候群、慢性骨髓白血病、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、套細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、T細胞急性淋巴母細胞白血病)、肺癌(例如細支氣管肺泡腺癌、間皮瘤、黏液表皮樣癌瘤、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、腺癌、鱗狀細胞癌)、肝癌(例如肝細胞癌)、淋巴瘤、神經癌(例如神經膠母細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠質瘤)、卵巢(例如腺癌)、胰臟癌(例如導管癌)、前列腺癌(例如腺癌)、腎癌(例如腎細胞癌、透明細胞腎癌)、肉瘤(例如軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewings sarcoma)、纖維肉瘤、多電位肉瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、滑膜肉瘤)、皮膚癌(例如黑素瘤、表皮樣癌瘤、鱗狀細胞癌)、甲狀腺癌(例如髓性癌)及子宮癌。在較佳實施例中，癌症為肺癌。

在某些實施例中，本文所描述之投與及治療方法進一步包含共同投與一或多種額外醫藥學活性化合物。

在組合療法中，醫藥學活性化合物可在同一調配物中同時投與或在不同時間投與。此等組合療法包含共同投與式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種額外醫藥學活性化合物。固定劑量組合療法中之組合療法包含在固定劑量調配物中共同投與式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種額外醫藥學活性化合物。自由劑量組合療法中之組合療法包含藉由同時投與個別化合物或藉由在一段時間內依序使用個別化合物而以各別化合物之自由劑量共同投與式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽與至少一種額外醫藥學活性化合物。 V. 製備式I化合物及其醫藥學上可接受之鹽之方法

在製備本文所描述之化合物中使用之起始物質及試劑可購自商業供應商，諸如Sigma-Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wis.)、Bachem (Torrance, Calif.)，或藉由熟習此項技術者已知之方法遵循在參考文獻中闡述之程序製備，該等參考文獻諸如Fieser及Fieser's Reagents for Organic Synthesis, 第1-17卷(John Wiley and Sons, 1991)； Rodd ' s Chemistry of Carbon Compounds, 第1-5卷及增刊(Elsevier Science Publishers, 1989)； Organic Reactions, 第1-40卷(John Wiley and Sons, 1991), March ' s Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 第4版)及 Larock ' s Comprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc., 1989)。此等方案僅說明可藉其合成本發明化合物之一些方法，且可作出對此等流程之各種修改且熟習此項技術者將閱讀本發明而提出各種修改。可視需要使用習知技術，包括(但不限於)過濾、蒸餾、結晶、層析及其類似技術來分離及純化反應之起始物質及中間物及最終產物。可使用習知方式(包括物理常數及光譜資料)來表徵此類材料。

適用於合成化合物及所需試劑以及中間物的合成化學轉化及保護基法(添加保護基及去除保護基)為此項技術中已知，且包括例如以下文獻中所描述的方法：R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)；T. W. Greene及P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 第3版, John Wiley and Sons (1999)；及L. Paquette編, Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)及其後續版本。

化合物可單獨製備或以包含至少2種，例如5至1,000種化合物或10至100種化合物的化合物庫形式製備。式I化合物之庫可藉由組合之『分離及混合』方法或藉由多個平行合成使用溶液相或固相化學法，藉由熟習此項技術者已知之程序來製備。因此，根據另一態樣，提供一種化合物庫，其包含至少2種化合物或其醫藥學上可接受之鹽。

除非相反地說明，否則本文所描述之反應在大氣壓下在約-78℃至約150℃，諸如約0℃至約125℃之溫度範圍內進行且進一步諸如在約室溫(或環境溫度)，例如約20℃下進行。本文中所展示且描述之途徑僅為說明性且不預期亦不理解為以任何方式限制申請專利範圍之範疇。熟習此項技術者將能夠基於本文揭示內容而認識到所揭示之合成之修改且設計替代途徑；所有此類修改及替代途徑均屬於申請專利範圍之範疇內。

本文中所描述之標的物包括(但不限於)以下實施例： 1a. 一種式I化合物：

，

I

其中， R ^a1為羥基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷基； R ^a2為氫或C ₁-C ₃烷基；或R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成4員至5員雜環基； R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一個或兩個在各情況下獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷基及(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基；及 R ^b為噻唑-2(3H)-酮或5員雜芳基環，各自視情況經在各情況下獨立地選自由以下組成之群的一個、兩個或三個取代基取代：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基、C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、3員至6員環烷基、4員至6員雜環基、苯基及5員或6員雜芳基；或其醫藥學上可接受之鹽。 1b. 一種式I化合物：

其中， R ^a1為羥基或C ₁-C ₃羥基烷基； R ^a2為氫或C ₁-C ₃烷基；或R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成4員至5員雜環基； R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一或兩個各自獨立地選自由鹵基組成之群的取代基取代；及 R ^b為5員雜芳基環，其視情況經一或兩個各自獨立地選自由C ₁-C ₃烷基及C ₁-C ₃鹵代烷基組成之群的取代基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。 2b. 如實施例1b或1a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為C ₁-C ₃羥基烷基。 3a. 如實施例1a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為-OH、-CH ₂OH、-CH(OH)CH ₃、-OCH ₃或-OCH ₂CH ₂OH。 3b. 如實施例1b或3a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為-OH、-CH ₂OH或-CH(OH)CH ₃。 4b. 如實施例1b至3b、1a或3a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為-CH ₂OH。 5b. 如實施例1b至4b、1a或3a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a2為氫或-CH ₃。 6b. 如實施例5b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a2為氫。 7b. 如實施例1b或1a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成氧雜環丁烷基環。 8a. 如實施例1b至7b、1a或3a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一或兩個鹵基取代。 8b. 如實施例1b至7b、1a、3a或8a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一個鹵基取代。 9b. 如實施例8b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經氟基或氯基取代。 10b. 如實施例8b、8a或9b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經氟基取代。 11b. 如實施例8b、8a或9b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基、2-氟苯基、2-氯苯基或吡啶基-2-基。 12b. 如實施例11b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基、2-氟苯基或吡啶基-2-基。 13b. 如實施例12b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為2-氟苯基。 12a. 如實施例1b至13b、1a、3a或8a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為

，其中，X為CH或N；且R ^c1為氫、氟基或氯基。 14b. 如實施例1b至9b、1a、3a、8a或12a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為

，其中X為CH或N；且R ^c1為氫、氟基或氯基。 14a. 如實施例1b至9b、1a、3a、8a或12a中任一項之化合物，其中R ^c為苯基。 15a. 如實施例1b至7b、1a、3a、8a或12a中任一例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷氧基正取代之苯基。 16a. 如實施例15a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、甲氧基-C ₁-C ₃烷氧基、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂CH ₂OH正取代之苯基。 17a. 如實施例16a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經−CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂OCH ₃正取代之苯基。 18a. 如實施例2b至14b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a或17a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、苯基及4員至6員雜環基。 19a. 如實施例18a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−CH(CH ₃) ₂、氟基-C ₁-C ₃烷基、氟基-C ₁-C ₃烷氧基、苯基、5員雜環基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、−OCH ₂CH ₃及−OCH ₃。 20a. 如實施例19a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CF ₃、−CH ₂CHF ₂、−CH ₂CH ₂CF ₃、−CHF ₂、−OCH ₂CHF ₂、苯基、−OCH ₂CF ₃、−CH ₂CF ₃、−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CH ₂OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、−OCH ₃及四氫呋喃基。 15b. 如實施例1b至14b、1a、3a、12a或18a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代且視情況進一步經一個C ₁-C ₃烷基取代之5員雜芳基環。 16b. 如實施例1b至14b、1a、3a、12a或18a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個選自由C ₁-C ₃烷基及C ₁-C ₃鹵代烷基組成之群的取代基取代之5員雜芳基環。 17b. 如實施例16b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代之5員雜芳基環。 18b. 如實施例1b至14b、1a、3a、12a或18a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由C ₁-C ₃烷基及C ₁-C ₃鹵代烷基組成之群。 19b. 如實施例18b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個C ₁-C ₃烷基及一個C ₁-C ₃鹵代烷基取代之5員雜芳基環。 20b. 如實施例1b至19b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a或20a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b之5員雜芳基環含有一個、兩個或三個氮環原子。 27a. 如實施例20b之化合物，其中該R ^b之5員雜芳基環為吡唑基、咪唑基、吡咯基、㗁唑基、三唑基或噻唑基。 21b. 如實施例1b至20b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為吡唑基。 29a. 如實施例1b至21b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷基、氫或四氫呋喃基；及 R ^b2為氫、鹵基-C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷基。 30a. 如實施例1b至21b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a、20a、27a或29a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

。 22b. 如實施例1b至21b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a、20a、27a、29a或30a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

；其中R ^b1為C ₁-C ₃鹵代烷基；且R ^b2為氫或C ₁-C ₃烷基。 23b. 如實施例22b、29a或30a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為氫。 24b. 如實施例22b、29a或30a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為C ₁-C ₃烷基。 25b. 如實施例24b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為-CH ₃。 26b. 如實施例22b至25b、29a或30a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為C ₁-C ₃氟烷基。 36a. 如實施例26b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CHF ₂、-CH ₂CH ₂CF ₃、-CH ₂CH ₂F、-CH ₂CHF ₂或-CH ₂CF ₃。 27b. 如實施例26b或36a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CH ₂F、-CH ₂CHF ₂或-CH ₂CF ₃。 28b. 如實施例26b、36a或27b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為−CH ₂CH ₂F。 29b. 如實施例26b、36a或27b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CHF ₂。 30b. 如實施例26b、36a或27b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為−CH ₂CF ₃。 37a. 如實施例29a或30a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氟基-C ₁-C ₃烷基。 38a. 如實施例37a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CH ₃；且R ^b2為−CF ₃。 39a. 如實施例29a或30a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CH ₂OCH ₃或四氫呋喃基；且R ^b2為氫。 40a. 如實施例27a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為噻唑基。 41a. 如實施例40a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b3為鹵基C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷氧基；及 R ^b4為氫或C ₁-C ₃烷基。 42a. 如實施例41a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

。 43a. 如實施例41a或42a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b3為-CH ₃、-CH ₂CH ₂CF ₃、-OCH ₂CHF ₂、-OCH ₂CHF ₃、-OCH ₃或-OCH ₂CH ₃；且R ^b4為-CH ₃。 44a. 如實施例1b至30b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a或20a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為5員雜芳基環，其中該R ^b之5員雜芳基環為噻吩基。 45a. 如實施例44a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b5為鹵基、C ₁-C ₃烷基、苯基或鹵基-C ₁-C ₃烷基。 46a. 如實施例45a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

。 47a. 如實施例45a或46a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b5為苯基、-CH ₂CH ₃、−CF ₃、溴基或-CH ₂CH ₂CF ₃。 48a. 如實施例1a、2b至14b、14a-19a或20a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮。 49a. 如實施例48a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b6係選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b7係選自由氫及C ₁-C ₃烷基組成之群。 50a. 如實施例48a或49a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b6係選自由甲基、乙基及-CH ₂CHF ₂組成之群；且R ^b7為甲基。 51a. 如實施例1a、2b至14b、14a至19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為咪唑基。 52a. 如實施例51a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b8及R ^b9各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。 53a. 如實施例51a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b8為鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b9為氫。 54a. 如實施例52a或53a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b8為-CH ₂CF ₂H。 55a. 如實施例1a、2b至14b、14a至19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為吡咯基。 56a. 如實施例55a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b10及R ^b11各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。 57a. 如實施例56a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b10為氫且R ^b11為鹵基-C ₁-C ₃烷基。 58a. 如實施例56a或57a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b11為-CF ₃。 59a. 如實施例1a、2b至14b、14a至19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為三唑基。 60a. 如實施例59a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b12及R ^b13各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。 61a. 如實施例60a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b13為氫且R ^b12為鹵基-C ₁-C ₃烷基。 62a. 如實施例60a或61a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b12為-CH ₂CHF ₂。 63a. 如實施例1a、2b至14b、14a至19a、20a或27a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為㗁唑基。 64a. 如實施例63a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b14及R ^b15各自獨立地選自由以下組成之群：氫、C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基。 65a. 如實施例64a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為

，其中R ^b14及R ^b15各自為C ₁-C ₃烷基。 66a. 如實施例64a或65a之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b14及R ^b15各自為甲基。 67a. 如實施例1b至30b、1a、3a、8a、12a、14a、15a、16a、17a、18a、19a、20a、27a、29a、30a、36a或37a至66a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物具有式I-Ia

；或式I-Ib

；或式II

；或式III

。 31b. 如實施例1b至14b、1a、3a、8a、12a、18a至20a、15b至20b、27a、21b、29a至30a、22b至26b、36a、27b、28b至30b或37a至67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物具有式IA

。 68a. 如實施例1b至14b、1a、3a、8a、12a、18a至20a、15b至20b、27a、21b、29a至30a、22b至26b、36a、27b、28b至30b或37a至67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物具有式IB

。 32b. 如實施例1a或1b之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，該化合物選自表1。 33b. 一種醫藥組合物，其包含如實施例1b至32b、1a、3a、8a、12a、14a至20a、27a、29a至30a、36a或37a-67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑。 34b. 一種治療個體之與丙酮酸激酶(PKR)及/或PKM2調節相關之疾病或病症的方法，其包含向該個體投與有效量之如實施例1b至32b、1a、3a、8a、12a、14a-20a、27a、29a-30a、36a或37a-67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如實施例33b之醫藥組合物。 35b. 一種活化個體之PKR及/或PKM2的方法，其包含向該個體投與有效量之如實施例1b至32b、1a、3a、8a、12a、14a至20a、27a、29a至30a、36a或37a至67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如實施例33b之醫藥組合物。 36b. 一種治療罹患與PKR及/或PKM2活性降低相關之疾病之個體的方法，其包含向該個體投與有效量之如實施例1b至32b、1a、3a、8a、12a、14a至20a、27a、29a至30a、36a或37a至67a中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如實施例33b之醫藥組合物。 37b. 如實施例34b或36b之方法，其中該疾病係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、地中海貧血症、遺傳性非球形溶血性貧血、溶血性貧血、遺傳性球狀紅血球增多症、遺傳性橢圓形紅血球增多症、β-脂蛋白缺乏症、陣發性夜間血紅素尿症、後天性溶血性貧血及慢性疾病之貧血。 38c. 如實施例34b、36b或37b之方法，其中該疾病係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、地中海貧血症、遺傳性非球形溶血性貧血、溶血性貧血、遺傳性球狀紅血球增多症、遺傳性橢圓形紅血球增多症、β-脂蛋白缺乏症、陣發性夜間血紅素尿症、後天性溶血性貧血、癌症及慢性疾病之貧血。 39c. 如實施例37b或38c之方法，其中該疾病係選自由鐮狀細胞疾病及地中海貧血症組成之群。 40c. 如實施例39c之方法，其中該地中海貧血症為β-地中海貧血症。以下實例係以說明且非限制之方式提供。實例 I.合成實例實例1.1

合成1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7)

步驟1

將含4-吲哚吡唑(20.00 g，103.11 mmol，1.00當量)之DMF (250.00 mL)置放於500-mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在0℃下添加NaH (4.95 g，206.21 mmol，2.00當量)。在室溫下攪拌所得混合物0.5 h，隨後在攪拌下在0℃下逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(29.69 g，154.66 mmol，1.50當量)。將所得溶液在室溫下攪拌隔夜，隨後藉由添加水/冰使其淬滅。用3×200 mL乙酸乙酯萃取所得溶液，且合併有機層，且經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (8%)溶離。此產生21 g (78.94%)呈無色油狀之1-(2,2-二氟乙基)-4-吲哚吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 259。

步驟2

將1-(2, 2-二氟乙基)至4-吲哚吡唑(21.00 g，81.39 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(30.33 g，244.17 mmol，3.00當量)、二㗁烷(250.00 kg)、DIEA (31.56 g，244.19 mmol，3.00當量)、XantPhos (9.42 g, 16.28 mmol, 0.20當量)及Pd ₂(dba) ₃(7.45 g，8.14 mmol，0.10當量)置放於在室溫下在氮氣氛圍中吹掃且維持之500 mL圓底燒瓶中。所得混合物在100℃下攪拌隔夜，隨後將其冷卻至室溫且濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (5%)溶離。此產生14.4 g (69.57%)呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)吡唑。LCMS (ES) [M-1] ⁺m/z: 255。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)吡唑(14.40 g，56.63 mmol，1.00當量)、HOAc (180.00 mL)及H ₂O (20.00 mL)置放於250 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加NCS (22.68 g，169.85 mmol，3.00當量)，且將所得溶液在室溫下攪拌1 h，隨後將其濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (10%)溶離。此產生11 g (84.24%)呈黃色油狀物之1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 211。

步驟4

將含2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(11.00 g，52.57 mmol，1.00當量)之THF (180.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在0℃下添加NaH (1.64 g，68.34 mmol，1.30當量)。隨後在0℃下在攪拌下向其中逐滴添加1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-磺醯氯(13.34 g，57.85 mmol，1.10當量)且在0℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加5 mL HOAc淬滅反應物，且用3×200 mL二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。殘餘物用200 mL MTBE稀釋且藉由過濾收集固體。此產生15.3 g (72.15%)呈白色固體狀之2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 404。

步驟5

將2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(15.30 g，37.93 mmol，1.00當量)、DCM (200.00 mL)及二甲基吡啶(16.26 g，151.71 mmol，4.00當量)置放於250 mL圓底燒瓶中，隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加TMSOTf (25.29 g，113.78 mmol，3.00當量)。在0℃下攪拌所得溶液1 h，隨後藉由添加水/冰使其淬滅。濃縮所得混合物且藉由Prep-HPLC在以下條件下純化粗產物(30 g)：管柱、XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 μm；移動相，水(0.1%FA)及CAN (在11 min內5%相B至多20%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之標題化合物( 中間物 7) (10 g，86.9%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 304。實例1.2

合成(2R,3S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丁酸、(2S,3R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丁酸、(2R,3R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丁酸及(2S,3S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丁酸( 中間物 II - 9)

將含(2-氯苯基)乙酸(5.00 g，29.31 mmol，1.0當量)之THF (50 mL)置放於室溫下在氮氣氛圍中吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。將反應物冷卻至-78℃，且逐滴添加LDA溶液(4.3 mL，32.24 mmol，1.1當量)，且在-78℃下攪拌反應物2 h。隨後逐滴添加乙醛溶液(2.58 g，58.62 mmol，2.0當量)且攪拌所得溶液2 h，使其升溫至-78℃至0℃。反應混合物隨後用飽和NH ₄Cl (20 mL)淬滅，用EtOAc (50 mL×3)萃取，乾燥且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析預純化，接著藉由Pre CHIRAL_HPLC在以下條件下分離：管柱:勒克司直鏈澱粉-1，50*250mm，10 μm；移動相：A=正己烷，B=乙醇；流動速率：90 mL/min；梯度：50 min內50% B；220 nm。此產生以下四種產物：

滯留時間之第1部分在ANAL_SFC: (500 mg, 7.95%)中=1.894 min；LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 213。此物質指定為 中間物 II - 9a。

滯留時間之第2部分在ANAL_SFC: (500 mg, 7.95%)中=1.944 min；LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 213。此物質指定為 中間物 II - 9c。

滯留時間之第3部分在ANAL_SFC: (500 mg, 7.95%)中=2.082 min；LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 213。此物質指定為 中間物 II - 9b。

滯留時間之第4部分在ANAL_SFC: (500 mg, 7.95%)中=2.440 min；LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 213。此物質指定為 中間物 II - 9d。實例1.3

合成(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 10)

步驟1

將含(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(10.00 g，56.43 mmol，1.0當量)之THF (100 mL)置放於在室溫下在氮氣氛圍中吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。將混合物冷卻至-78℃，且逐滴添加含正BuLi之己烷之溶液(25.0 mL，263.27 mmol，4.6當量)。在反應物在-78℃下攪拌1 h之後，添加(2-氟苯基)乙醯氯(10.71 g，62.07 mmol，1.1當量)於THF (20 mL)中之另一溶液。將所得溶液攪拌2 h且使其升溫至-78℃至0℃。隨後藉由添加50 mL飽和NH ₄Cl來淬滅反應物。將所得溶液用3×80 mL乙酸乙酯萃取，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:50至1:5)溶離。此產生12.5 g (70.69%)呈灰白色固體狀之(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 314。

步驟2

將(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2酮(2.50 g，7.98 mmol，1.0當量)及DCM (30 mL)置放於在氮氣氛圍中在室溫下吹掃且維持之100 mL 3頸圓底燒瓶中。在反應物冷卻至0℃之後，逐滴添加TiCl ₄(1.66 g，8.78 mmol，1.1當量)於DCM (5 mL)中之溶液。攪拌反應物5 min，添加DIEA (1.13 g，8.78 mmol，1.1當量)，且在0℃下攪拌混合物1 h。隨後添加1,3,5-三㗁烷(0.86 g，9.57 mmol，1.2當量)及TiCl ₄(1.66 g，8.78 mmol，1.1當量)。在0℃下再攪拌所得溶液2 h，隨後將其用飽和NH ₄Cl (10 mL)淬滅。用DCM (50 mL×3)萃取混合物且合併之有機層經乾燥且濃縮。藉由矽膠管柱層析(PE/EA=100:1至1:1)純化殘餘物，得到呈黃色膠狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(2 g，73.00%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 344。

步驟3

將(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(2.00 g，5.83 mmol，1.0當量)及THF (8 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。在反應物冷卻至0℃之後，逐滴添加LiOH.H ₂O (0.49 g，11.65 mmol，2.0當量)於H ₂O (2 mL)及H ₂O ₂(30%) (0.99 g，29.12 mmol，5.0當量)中之溶液。反應物在0℃下攪拌2 h，隨後其用飽和Na ₂SO ₃(10 mL)淬滅且用DCM (50 mL×5)萃取。水性混合物用HCl (5 N)調節至pH=3，用5×30 mL DCM萃取，經無水硫酸鈉乾燥，且濃縮。殘餘物藉由prep. HPLC (具有相A之C18矽膠管柱：水/0.05% TFA，移動相B：ACN；流動速率：1.5 mL/min；梯度：5% B至100% B，在1.2 min內，保持0.6 min)純化。此產生呈黃色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(0.4 g，37.29%)。

CHIRAL_HPLC：滯留時間0.716 min。1H-NMR: (300 MHz, DMSO-d ₆, ppm): δ 12.5 (br, 1H), 7.42-7.28 (m, 2H), 7.21-7.15 (m, 2H), 4.95 (br, 1H), 3.98-3.90 (m, 2H), 3.69-3.61 (m, 1H)；LCMS (ES) [M-1] ^-m/z：183.0；滯留時間0.716 min。實例1.4

合成(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 11)

步驟1

將含(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(1.00 g，5.64 mmol，1.00當量)之THF (15.00 mL)置放於在室溫下在氮氣氛圍下吹掃及維持之100 mL 3頸圓底燒瓶中且將混合物冷卻至-78℃。此後在攪拌下在-78℃下逐滴添加含正丁基鋰之己烷(2.48 mL，6.20 mmol，1.10當量)。在1 h之後，在攪拌下在-78℃下逐滴添加(2-氯苯基)乙醯氯(1.60 g，8.46 mmol，1.50當量)。在1 h之後，藉由添加冷卻至室溫，用3×20 mL乙酸乙酯萃取且將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮的3 mL飽和NH ₄Cl來淬滅。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (10.6%)溶離。此產生呈黃色油狀物之1 g (53.73%) (4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氯苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 330。

步驟2

將(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氯苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(1.00 g，3.03 mmol，1.00當量)及DCM (20.00 mL)置放於100 mL 3頸圓底燒瓶中。接著在0℃下在攪拌下逐滴添加TiCl ₄(0.63 g，3.34 mmol，1.10當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液。5 min之後，在攪拌下在0℃下逐滴添加DIEA (0.45 g，3.48 mmol，1.15當量)且在0℃下攪拌所得溶液30 min。隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加三㗁烷(0.30 g，3.34 mmol，1.10當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液。5 min之後，在0℃下在攪拌下逐滴添加TiCl ₄(0.63 g，3.34 mmol，1.10當量)於DCM (2.00 mL)中之溶液且在0℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加5 mL飽和NH ₄Cl淬滅反應，用3×20 mL二氯甲烷萃取。合併之有機層經合併，用20 ml飽和NaHCO ₃洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。此產生0.8 g (73.32%)呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 360。

步驟3

將含(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(0.80 g，2.22 mmol，1.00當量)之THF (9.00 mL)及H ₂O (2.00 mL)置放於100 mL 3頸圓底燒瓶中。此後接著在0℃下在攪拌下逐滴添加H ₂O ₂(0.38 g，11.12 mmol，5.00當量)於水(1 mL)中之溶液，接著在0℃下在攪拌下逐滴添加LiOH ^.H ₂O (0.19 g，4.45 mmol，2.00當量)於水(1 mL)中之溶液。在0℃下攪拌所得溶液2 h，隨後藉由添加3 mL飽和NaSO ₃來使其淬滅。用2×10 mL二氯甲烷萃取所得溶液且合併水層。用HCl (1 mol/L)將溶液之pH值調節至3且用3×20 mL DCM/MeOH=10/1萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。粗產物(0.5 g)藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 um；移動相，水(FA)及CAN (在11 min內自5%相B達至30%)；偵測器，254。由此產生170 mg (38.11%)呈灰白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸酸。LCMS (ES) [M-1] ⁺m/z: 199。實例1.5

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物1)

將(S)-托品酸(3.50 g，21.06 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7 ，6.39 g，21.06 mmol，1.00當量)、DMF (50.00 mL)及NMM (4.26 g，42.12 mmol，2.00當量)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。隨後在0℃下逐份添加HATU (9.61 g，25.27 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液2 h。藉由Prep-HPLC在以下條件下純化粗產物(10 g)：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱、50*250 mm 5 μm 10 nm；移動相、水(0.1%FA)及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，254。此產生5.7 g (59.95%)呈白色固體狀之(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.70 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.41 - 7.18 (m, 5H), 6.41 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 4.96-4.65 (m, 4H), 4.56 - 4.26 (m, 3H), 4.07 - 3.93 (m, 2H), 3.59-3.47 (m, 1H)。LCMS13-PH-MY-PK-440-0: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 452。實例1.6

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物2)

將(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 10；100 mg，0.54 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，182 mg，0.65 mmol，1.20當量)及NMM (0.18 mL，0.65 mmol，3.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下添加HATU (251 mg，0.65 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由Prep-HPLC (Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm，10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：15 min中自5% B達至35% B，偵測器，220 nm)直接純化反應溶液，得到呈白色固體狀之標題化合物(137.0 mg，54%)。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.71 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.43-7.28 (m, 2H), 7.24-7.14 (m, 2H), 6.61 (tt, J = 54.3 Hz, 3.6 Hz, 1H), 4.96 (dd, J = 22.5, 14.4 Hz, 1H), 4.77 (td, J = 15.0, 3.6 Hz, 2H), 4.54-4.24 (m, 4H), 4.02 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.64-3.57 (m, 1H); LCMS: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 470。實例1.7

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-{[1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮(化合物3)

步驟1

將4-吲哚吡唑(5.00 g，25.78 mmol，1.00當量)、DMF (100 mL)、2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(7.48 g，32.23 mmol，1.25當量)及Cs ₂CO ₃(16.80 g，51.55 mmol，2當量)置放於500 mL圓底燒瓶中。在25℃下攪拌所得溶液2 h。反應物隨後藉由添加100 mL水進行淬滅，用3×200 mL乙酸乙酯萃取，且合併有機層，用3×200 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/石油醚(1:20)溶離。此產生6.50 g (91.36%)呈淡黃色油狀物之4-碘-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 277。

步驟2

將4-碘-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(6.50 g，23.55 mmol，1.00當量)、甲苯(100 mL)、DIEA (6.09 g，47.10 mmol，2.00當量)、Pd ₂(dba) ₃(2.16 g，2.35 mmol，0.10當量)、XantPhos (2.73 g，4.72 mmol，0.20當量)及苯甲基硫醇(8.77 g，70.65 mmol，3.00當量)置放於在惰性氮氣氛圍下吹掃及維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中，及將所得溶液在100℃下攪拌隔夜。真空濃縮所得混合物且將殘餘物施加至具有乙酸乙酯/石油醚(1:10)之矽膠管柱上。此產生5.00 g (77.97%)呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 273。

步驟3

向250 mL圓底燒瓶中置放將4-(苯甲基硫基)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(5.00 g，18.36 mmol，1.00當量)、HOAc (45 mL)、H ₂O (5 mL)及NCS (9.81 g，73.46 mmol，4.00當量)，且在25℃下攪拌所得溶液4 h。真空濃縮所得混合物且將殘餘物施加至具有乙酸乙酯/石油醚(1:5)之矽膠管柱上。此產生4.00 g (87.62%)呈黃色油狀物之1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-磺醯氯。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.37 g，16.09 mmol，1.00當量)及THF (50 mL)置放於100 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下添加NaH (0.77 g，19.31 mmol，1.20當量，60%)。在0℃下攪拌所得溶液30 min，隨後在0℃下添加1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-磺醯氯(4 g，16.09 mmol，1.00當量)，且在0℃下攪拌所得溶液1 h。反應物隨後藉由添加50 mL水淬滅，用3×100 mL乙酸乙酯萃取，且合併有機層，用3×100 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:3)溶離。產物藉由Prep-SFC在以下條件下純化：管柱：掌性RT纖維素-SC，3*25 cm；移動相A：CO ₂，移動相B：MeOH-----製備型；流動速率：75 mL/min；梯度：等度15% B；管柱溫度：35；背壓(巴)：100；波長：220 nm；RT1(min)：3.6；RT2 (min)：4.4；樣品溶劑：MeOH:DCM=1:1；注入體積: 1 mL；此產生2.20 g (32.45%)呈白色固體狀之2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 422。

步驟5

將2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.20 g，5.22 mmol，1.00當量)、DCM (10 mL)及二甲基吡啶(2.24 g，20.90 mmol，4.00當量)置放於100 mL圓底燒瓶中，隨後在0℃下添加三氟甲磺酸三甲基矽烷酯(3.48 g，15.66 mmol，3.00當量)且在0℃下攪拌所得溶液2 h。隨後藉由添加1 mL MeOH淬滅反應物且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(20:1)溶離。此產生呈灰白色固體狀之標題化合物( 中間物 I - 10，1.65 g，98.4%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 322。

步驟6

將(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 10；75 mg，0.41 mmol，1.00當量)、DMF (5 mL)、4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑(144 mg，0.45 mmol，1.10當量)及NMM (82 mg，0.81 mmol，2.00當量)置放於50 mL圓底燒瓶中，接著在0℃下添加HATU (186 mg，0.49 mmol，1.20當量)。在25℃下攪拌所得溶液1 h。粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件(Prep-HPLC-001)下純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv。254 nm。此產生呈白色固體狀之標題化合物(135.1 mg，68.1%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.79 (s, 1H), 8.21-8.14 (m, 2H), 7.39 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.35-7.27 (m, 1H), 7.23-7.13 (m, 2H), 5.22 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.96-4.82 (m, 2H), 4.56-4.35 (m, 2H), 4.35-4.22 (m, 2H), 3.99 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 3.67-3.57 (m, 1H)；LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 488。掌性HPLC：滯留時間5.566 min。實例1.8

合成(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-羥基-2-苯基乙-1-酮(化合物4)

將(R)-杏仁酸(70.00 mg，0.46 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間產物 I - 7，139.54 mg，0.46 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (93.07 mg，0.92 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下逐份添加HATU (209.92 mg，0.55 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。粗產物(300 mg)藉由Prep-HPLC (管柱，Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250mm 5um 10nm；移動相，水(0.1% FA)及ACN (在15 min內15%相B達至50%)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(106.5 mg，52.9%)。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.71 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.20-8.14 (m, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.47-7.23 (m, 5H), 6.42 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.83-4.72 (m, 1H), 4.69 (ddd, J = 15.4, 3.6, 1.6 Hz, 2H), 4.60-4.24 (m, 3H); LCMS (ES, m/z): [M+H] ⁺: 438。實例1.9

合成(2S)-1-(2-{[1-(2-氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物5)

步驟1

將4-溴吡唑(1.50 g，10.206 mmol，1.00當量)、乙烷、1-氟基-2-碘-(2.66 g，15.291 mmol，1.50當量)、Cs ₂CO ₃(6.65 g，20.412 mmol，2當量)及DMF (30.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在室溫下攪拌所得溶液8 h。反應混合物隨後用3×50 mL二氯甲烷萃取且將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (1:4)溶離。此產生1.5 g (76.15%)呈灰白色固體狀之4-溴-1-(2-氟乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 193。

步驟2

將4-溴-1-(2-氟乙基)吡唑(1.50 g，7.771 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(1.93 g，15.539 mmol，2.00當量)、XantPhos (0.45 g，0.777 mmol，0.1當量)、Pd ₂(dba) ₃(1.42 g，1.554 mmol，0.2當量)、DIEA (2.01 g，15.543 mmol，2當量)及二㗁烷(30.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在100℃下攪拌所得溶液24 h。隨後冷卻反應混合物至室溫。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF:PE (1:3)溶離。此產生1.3 g (70.79%)呈淡黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(2-氟乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 237。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-(2-氟乙基)吡唑(1.30 g，5.501 mmol，1.00當量)、NCS (2.20 g，16.503 mmol，3.00當量)、HOAc (27.00 mL)及H ₂O (3.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在室溫下攪拌所得溶液6 h。混合物隨後用3×30 mL二氯甲烷萃取且將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:3)溶離。此產生630 mg (53.86%)呈淡黃色油狀物之1-(2-氟乙基)吡唑-4-磺醯氯。

步驟4

將1-(2-氟乙基)吡唑-4-磺醯氯(630.00 mg，2.963 mmol，1.00當量)、2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(682.01 mg，3.259 mmol，1.1當量)、NaH (106.66 mg，4.445 mmol，1.50當量)及THF (20.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在室溫下攪拌所得混合物4 h。反應物隨後藉由添加水來淬滅，用3×30 mL二氯甲烷萃取且將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:3)溶離。此產生750 mg (65.68%)呈灰白色固體狀之2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 386。

步驟5

將2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(750.00 mg，1.946 mmol，1.00當量)、TMSOTf (1.30 g，5.849 mmol，3.01當量)及2,6-二甲基吡啶(834.07 mg，7.784 mmol，4.00當量)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在室溫下攪拌所得混合物4 h。隨後藉由添加30 mL水淬滅反應物且在真空下濃縮。用5×30 mL H ₂O洗滌所得混合物且藉由過濾收集固體。此產生呈白色固體狀之1-(2-氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑(290 mg，52.23)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 286。

步驟6

將1-(2-氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-2-(2-[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑(130.00 mg，0.456 mmol，1.00當量)、(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 10；100.70 mg，0.547 mmol，1.20當量)、HATU (259.88 mg，0.683 mmol，1.5當量)、DIEA (117.78 mg，0.911 mmol，2當量)及DMF (20.00 mL)置放於50 mL圓底燒瓶中，且在室溫下攪拌所得溶液4 h。混合物隨後用3×30 mL二氯甲烷萃取且將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。粗產物藉由Prep-HPLC (管柱：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：90 mL/min；梯度：在12 min內自15% B至50% B；波長：220 nm，得到呈白色固體狀之標題化合物(130.9 mg，63.63%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.71 (s, 1H), 8.17 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.45-7.35 (m, 1H), 7.30 (dd, J= 7.9, 6.1 Hz, 1H), 7.25-7.11 (m, 2H), 4.99-4.81 (m, 2H), 4.70 (t, J= 4.7 Hz, 1H), 4.55 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 4.51-4.41 (m, 2H), 4.37 (d, J= 16.6 Hz, 1H), 4.33-4.21 (m, 2H), 4.02-3.96 (m, 1H), 3.60 (dt, J= 11.0, 5.8 Hz, 1H). LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 452。實例1.10

合成(2S,3S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丁-1-酮(化合物6)

在0℃下在氮氣氛圍下向(2S,3S)-3-羥基-2-苯丁酸溶液(如步驟2中使用乙醛而非1,3,5-三㗁烷針對 中間物 II - 10所描述合成；60.00 mg，0.333 mmol，1.00當量)、NMM (67.36 mg，0.666 mmol，2.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑( 中間物 I - 7；100.98 mg，0.333 mmol，1.00當量)於DMF (2.00 mL，12.922 mmol，38.81當量)中之溶液中逐份添加HATU (139.26 mg，0.366 mmol，1.10當量)。在室溫下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件(Prep-HPLC-001)下純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱、50*250 mm、5 μm 10 nm；移動相、水(0.1%FA)及ACN (在20 min內自18%相B達至60%)；偵測器，uv。254 nm，得到呈白色固體狀之(2S,3S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丁-1-酮(103 mg，66.46%)。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6)δ 8.70 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.46 -7.36 (m, 2H), 7.35-7.19 (m, 3H), 6.41 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.91 (t, J = 13.5 Hz, 1H), 4.72 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.57-4.17 (m, 4H), 3.70 (dd, J = 9.1, 1.9 Hz, 1H), 0.86 (d, J = 6.2 Hz, 3H); LCMS (ES) [M+1] + m/z: 466。實例1.11

合成(2S,3R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丁-1-酮(化合物7)

在0℃下在氮氣氛圍下向(2S,3R)-3-羥基-2-苯丁酸(如步驟2中使用乙醛而非1,3,5-三㗁烷針對 中間物 II - 10所描述合成；60.00 mg，0.333 mmol，1.00當量)、NMM (67.36 mg，0.666 mmol，2.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑( 中間物 I - 7；100.98 mg，0.333 mmol，1.00當量)於DMF (1.00 mL，12.922 mmol，38.81當量)中之溶液中逐份添加HATU (139.26 mg，0.366 mmol，1.10當量)。在室溫下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件(Prep-HPLC-001)下純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水(0.1% FA)及ACN (在20 min內自15%相B達至60%)；偵測器，uv。254 nm，得到呈白色固體狀之(2S,3R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丁-1-酮(91 mg，58.72%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ8.70 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.46-7.35 (m, 2H), 7.34-.18 (m, 3H), 6.41 (tt, J = 54.5, 3.5 Hz, 1H), 4.91 (dd, J= 24.0, 14.3 Hz, 1H), 4.71 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.54 -4.24 (m, 3H), 4.22-4.06 (m, 1H), 3.69 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 1.15 (d, J= 6.0 Hz, 3H); LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.12

合成3-氯基-2-(3-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基]氧雜環丁烷-3-基)吡啶(化合物8)

步驟1

將含3-氯基-2-氟吡啶(1.20 g，9.12 mmol，1.00當量)、氧雜環丁烷-3-腈(839 mg，10.10 mmol，1.10當量)之甲苯(20.00 mL)置放於50 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下添加KHMDS (1M於THF) (11.00 mL，10.94 mmol，1.2當量)。添加後，在室溫下攪拌所得溶液30 min。隨後藉由添加NH ₄Cl (水溶液) (30.00 mL)淬滅反應物，且用乙酸乙酯(50.00 mL×2)萃取。經合併之有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。殘餘物藉由用乙酸乙酯/石油醚(1/3)溶離之矽膠管柱純化，得到呈黃色固體狀之3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲腈(1.38 g，78%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 195。

步驟2

將3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲腈(1.38 g，7.09 mmol，1.00當量)、H ₂O (10.00 mL)、EtOH (20.00 mL)及NaOH (1.14 g，28.50 mmol，4.00當量)置放於100 mL圓底燒瓶中，且在80℃下攪拌混合物12 h。隨後使反應物冷卻至室溫且藉由Flash-Prep-HPLC在以下條件下直接純化：C18-120 g管柱，CH ₃CN/H ₂O，在12 min內自5%至40%，流動速率，70 mL/min，偵測器，254 nm。將目標溶離份凍結乾燥，此產生1.0 g (60%)呈白色固體狀之3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸鈉。LCMS (ES) [M-Na+H+1] ⁺m/z: 214。

步驟3

將3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸鈉(110 mg，0.46 mmol，1.00當量)、DMF (3.0 mL)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，142 mg，0.46 mmol，1.00當量)及NMM (94.45 mg，0.93 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下分三批添加HATU (213 mg，0.56 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。反應溶液藉由Flash-Prep-HPLC在以下條件下純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：15 min內自15% B至50% B，波長：220 nm。冷凍乾燥目標溶離份，此產生呈白色固體狀之3-氯基-2-(3-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基]氧雜環丁烷-3-基)吡啶(109.3 mg，47%)。1H-NMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.71-8.69 (m, 2H), 8.15 (d, J= 18.0 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.62-7.46 (m, 1H), 6.41 (t, J= 54.3 Hz, 1H), 5.23 (dd, J= 6.0, 3.3 Hz, 2H), 5.13 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.77-4.65 (m, 2H), 4.51 (d, J= 9.3 Hz, 2H), 3.70 (d, J= 7.8 Hz, 2H). LCMS: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 499。實例1.13

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基丙-1-酮(化合物9)

將1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，150.00 mg，0.49 mmol，1.00當量)、(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 11；99.22 mg，0.49 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (100.05 mg，0.99 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下逐份添加HATU (225.66 mg，0.59 mmol，1.20當量)，且在室溫下攪拌所得溶液2 h。粗產物(300 mg)藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm 5um 10nm；移動相、水(0.1%NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在15 min內自15%相B達至70%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之標題化合物(136.3 mg，56.72%)。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO- d 6, ppm): δ 8.72 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.12 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.53-7.39 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 2H), 6.42 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 5.02-4.93 (m, 1H), 4.98-4.82 (m, 1H), 4.72 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.58-4.33 (m, 3H), 4.31 (dd, J = 13.8, 10.1 Hz, 1H), 4.04-3.89 (m, 1H), 3.57 (dq, J = 10.1, 5.0 Hz, 1H). LCMS13-PH-MY-PK-448-0: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 486。實例1.14

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮及(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮(化合物10及123)

步驟1

將2-(吡啶-2-基)乙酸乙酯(10.00 g，60.536 mmol，1.00當量)、四氫呋喃(30 mL)、HMPA (10.85 g，60.536 mmol，1.00當量)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在-78℃下逐滴添加LDA (30.00 mL，60.500 mmol，1.00當量，2M)。在-78℃下攪拌所得溶液0.5 h，隨後在-78℃下逐滴添加硫酸二甲酯(7.64 g，60.536 mmol，1.00當量)，且在-78℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加100 mL水將反應物淬滅且用2×200 mL乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:10)溶離。此產生9.5 g (87.56%)呈淡黃色油狀物之2-(吡啶-2-基)丙酸乙酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z:180。

步驟2

將2-(吡啶-2-基)丙酸乙酯(6.00 g，33.479 mmol，1.00當量)及四氫呋喃(60 mL)置放於250 mL圓底燒瓶中。隨後在-78℃下逐滴添加LDA (33.50 mL，66.9 mmol，1.00當量，2M)且在-78℃下攪拌所得溶液1 h。隨後添加(氯甲氧基)三異丙基矽烷(14.92 g，66.957 mmol，2.00當量)且在25℃下攪拌所得溶液16 h。隨後藉由添加100 mL水將反應物淬滅且用2×200 mL乙酸乙酯萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用乙酸乙酯/石油醚(1:10)溶離。此產生9.8 g (80.07%)呈淡黃色固體狀之2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-[(三異丙基矽烷基)氧基]丙酸乙酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z:366。

步驟3

將2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-[(三異丙基矽烷基)氧基]丙酸乙酯(8.90 g，24.344 mmol，1.00當量)、四氫呋喃(20 mL)、甲醇(20 mL)、水(20 mL)及NaOH (3.89 g，97.377 mmol，4.00當量)置放於250 mL圓底燒瓶中，且在80℃下攪拌所得溶液16 h。過濾粗反應混合物且對其進行逆相製備型HPLC (Prep-C18，20-45M，120 g，天津博納艾傑爾科技(Tianjin Bonna-Agela Technologies)；經10 min時段將50% MeCN/水梯度溶離至60% MeCN/水，得到呈黃色固體狀之2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-((三異丙基矽烷基)氧基)丙酸鈉(5.4 g, 61.70%)。LCMS (ES) [M-Na+H+1] ⁺m/z: 338。

步驟4

將1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，350.00 mg，1.15 mmol，1.00當量)、外消旋2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-[(三異丙基矽烷基)氧基]丙酸鈉(414.89 mg，1.15 mmol，1.00當量)、DMF (10.00 mL)及NMM (233.45 mg，2.31 mmol，2.00當量)置放於40 mL小瓶中，隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加HATU (526.55 mg，1.38 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液2 h。粗產物(1 g)藉由Prep-HPLC (管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm 5 μm 10 nm；移動相、水(0.1%NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在15 min內自25%相B達至80%)；偵測器，254)純化，得到呈灰白色固體狀之1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-[(三異丙基矽烷基)氧基]丙-1-酮(450 mg，62.61%)，LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 623。

步驟5

將1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-甲基-2-(吡啶-2-基)-3-[(三異丙基矽烷基)氧基]丙-1-酮(450.00 mg，0.72 mmol，1.00當量)、THF (20.00 mL)、H ₂O (2.00 mL)及TFA (2.00 mL)置放於40 mL小瓶中，且在40℃下攪拌所得溶液隔夜。粗產物(500 mg)藉由Prep-HPLC (管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250mm 5um 10nm；移動相、水(0.1%FA)及ACN (在15 min內自15%相B至40%)；偵測器，254)純化，得到呈白色固體狀之外消旋1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮(240 mg，71.21%)。

步驟6

將外消旋1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮藉由Prep-SFC (XA-Prep SFC150-1：管柱、CHIRALPAK IE，3*25 cm，5 um；移動相、CO ₂(60%)及MEOH (0.1% 2M NH ₃-MEOH)(40%)；偵測器，254)進行分離。

在RT=2.33 min時收集立體異構物1 (101.2 mg，46.00%)之溶離份。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.71 - 8.65 (m, 1H), 8.53 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.13 - 7.99 (m, 2H), 7.79 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 6.41 (t, J = 54.4 Hz, 1H), 4.82 - 4.63 (m, 3H), 4.46 (d, J = 14.2 Hz, 2H), 3.97 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 3.80 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.48 (dd, J = 30.1, 14.1 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H); LCMS13-PH-MY-PK-451-0A: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 467。

步驟2

將1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-甲基-2-(吡啶-2-基)丙-1-酮(220 mg)藉由Prep-SFC使用以下條件(XA-Prep SFC150-1)純化：管柱，CHIRALPAK IE，3*25 cm，5 um；移動相、CO ₂(60%)及MEOH (0.1% 2M NH ₃-MEOH)( 40%)；偵測器，254。

在RT=2.094 min時收集呈白色固體狀之立體異構物2 (100.8 mg，45.82%)之溶離份。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.13 - 7.99 (m, 2H), 7.79 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.5, 5.0 Hz, 1H), 6.41 (t, J = 54.5 Hz, 1H), 4.77 - 4.63 (m, 3H), 4.46 (d, J = 14.5 Hz, 2H), 3.97 (dd, J = 11.0, 4.6 Hz, 1H), 3.88 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 10.9, 5.5 Hz, 1H), 3.48 (dd, J = 30.0, 14.0 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H). LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 467。實例1.15

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物11)

步驟1

將3-溴基-1H-吡唑(10.0 g，62.50 mmol，1.00當量)及DMF (100.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中) (3.0 g，75.00 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液0.5 h，隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(17.91 g，93.75 mmol，1.50當量)。將所得溶液在室溫下攪拌12 h，隨後將其藉由添加水/冰(100 mL)來淬滅且用3×200 mL乙酸乙酯萃取。將有機層合併，用鹽水(3×100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由用THF/PE (5%)溶離之矽膠管柱純化，得到7.9 g作為區位異構物之混合物之目標。藉由SFC在以下條件下進一步純化混合物： CHIRALPAK IG，3*25 cm，5 μm，移動相A：CO ₂(l)，移動相B：MeOH，流動速率：70 mL/min，梯度：等度25% B；波長：220 nm。RT1 (min)：2.17，RT2 (min)：2.75。將RT=2.75 min下的目標溶離份真空濃縮，產生2.3 g (16%)呈無色油狀物之4-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 225。H-NMR-PH-GBT-ZL-PK-91-1: (300 MHz, CDCl ₃, ppm): δ 7.46 (s, 1H), 6.25 (t, 1H), 4.40 (td, J=13.2, 4.5 Hz, 2H)。

步驟2

將4-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1-吡唑(2.30 g，10.27 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(3.82 g，30.81 mmol，3.00當量)、甲苯(30.00 mL)、DIEA (3.97 g，30.81 mmol，3.00當量)、XantPhos (1.19 g，2.05 mmol，0.20當量)及Pd ₂(dba) ₃(0.94 g，1.02 mmol，0.10當量)置放於在惰性氮氣氛圍下吹掃且維持之100 mL圓底燒瓶中，且在100℃下攪拌混合物48 h。隨後將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由用HF/PE (5%)溶離之矽膠管柱純化。此產生1.00 g (36%)呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 269。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑(1.00 g，3.73 mmol，1.00當量)、HOAc (9.00 mL)及H ₂O (1.00 mL)置放於50 mL圓底燒瓶中，接著在20℃以下之溫度一次性添加NCS (1.50 g，11.19 mmol，3.00當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h，隨後將其濃縮。殘餘物藉由用THF/PE (20%)溶離之矽膠管柱純化，產生800 mg (88%)呈白色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 225。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(685 mg，3.28 mmol，1.00當量)及THF (15.00 mL)置放於50 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中；170 mg，4.26 mmol，1.30當量)。為此，在相同溫度下在攪拌下逐滴添加1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-磺醯氯(800 mg，3.28 mmol，1.00當量)且在0℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加0.5 mL HOAc淬滅反應物，且用3×200 mL二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。用5 mL MTBE稀釋殘餘物且藉由過濾收集由此形成之固體。此產生600 mg (45%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 418。使用DMF代替THF作為溶劑在LCMS中產生低於1%區位異構物。

步驟5

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯(600 mg，1.44 mmol，1.00當量)、DCM (10.00 mL)及二甲基吡啶(616 mg，5.76 mmol，4.00當量)置放於50 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下在攪拌下逐滴添加TMSOTf (959 mg，4.32 mmol，3.00當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液1 h，隨後藉由添加水/冰(10 mL)淬滅所得溶液，且藉由Prep-HPLC在以下條件下純化水相中之粗產物：XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 um，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在11 min內自5%相B達至20%)，偵測器，UV 254 nm。此產生240 mg (53%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 318。

步驟6

將(S)-3-羥基-2-苯丙酸(43 mg，0.26 mmol，1.00當量)、2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(120 mg，0.26 mmol，1.00當量)、DMF (3.00 mL)及NMM (53 mg，0.52 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下逐份添加HATU (198 mg，0.52 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在12 min內自15%達至50%)，偵測器，UV 254 nm。冷凍乾燥目標之溶離份。此產生85.3 mg (48%)呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.20(s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.40-7.25 (m, 5H), 6.37 (tt, J = 54.3, 3.4 Hz, 1H), 4.96-4.76 (m, 2H), 4.65 (td, J = 15.3, 3.3 Hz, 2H), 4.54-4.26 (m, 3H), 4.06-3.92 (m, 2H), 3.59-3.46 (m, 1H). LCMS: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 466。實例1.16

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮(實例13)

步驟1

將3-溴基-1H-吡唑(15.0 g，102.04 mmol，1.00當量)及DMF (150.00 mL)置放於500 mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中) (4.9 g，122.45 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液0.5 h，隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(29.4 g，153.06 mmol，1.50當量)。添加後，在室溫下攪拌所得溶液12 h。反應物隨後藉由添加水/冰(150 mL)來淬滅且用3×200 mL乙酸乙酯萃取。合併有機層，用鹽水(3×150 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。藉由用THF/PE (8%)溶離之矽膠管柱純化殘餘物。此產生8.5 g (40%)呈無色油狀物之3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 211。 ¹H-NMR: (300 MHz, CDCl ₃) δ 7.36 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.33 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.07 (t, J= 55.2 Hz, 1H), 4.42 (td, J= 13.5, 4.5 Hz, 2H)。

步驟2

將3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑(8.00 g，37.9 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(14.12 g，113.7 mmol，3.00當量)、二㗁烷(100.00 mL)、DIEA (14.67 g，113.7 mmol，3.00當量)、XantPhos (4.39 g，7.58 mmol，0.20當量)及Pd ₂(dba) ₃(4.38 g，3.79 mmol，0.10當量)置放於在惰性氮氣氛圍中吹掃且維持之500 mL圓底燒瓶中。在100℃下攪拌混合物24 h。隨後將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。藉由用THF/PE (5%)溶離之矽膠管柱純化殘餘物。此產生5 g (52%)呈黃色油狀物之3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 255。

步驟3

將3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑(5.00 g，19.69 mmol，1.00當量)、HOAc (54.00 mL)及H ₂O (6.00 mL)置放於250 mL圓底燒瓶中，隨後在低於20℃下逐份添加NCS (7.91 g，50.07 mmol，3.00當量)。將所得溶液在室溫下攪拌1 h，且隨後濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上且用THF/PE (10%)溶離。此產生3.8 g (69%)呈黃色油狀物之1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 211。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯( 2.9 g，13.88 mmol，1.00當量)及THF (50.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中；0.83 g，20.82 mmol，1.50當量)。在0℃下在攪拌下向此1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-磺醯氯(3.8 g，16.52 mmol，1.20當量)逐滴添加。將所得溶液在0℃下攪拌1 h，隨後將其藉由添加5 mL H ₂O淬滅且用3×100 mL乙酸乙酯萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。用30 mL MTBE稀釋殘餘物，且藉由過濾收集固體。此產生3.5 g (62%)呈淡黃色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 404。

步驟5

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯(2.5 g，6.20 mmol，1.00當量)、DCM (50.00 mL)及二甲基吡啶(2.66 g，24.80 mmol，4.00當量)置放於250 mL圓底燒瓶中，接著在0℃下在攪拌下逐滴添加TMSOTf (4.13 g，18.60 mmol，3.00當量)。在0℃下攪拌所得溶液1 h，隨後藉由添加水/冰20 mL使其淬滅。H ₂O中之粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 um，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (11 min內自5%相B達至20%)，偵測器，UV 254 nm。此產生1.6 (85%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 304。

步驟6

將(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(80.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(120.94 mg，0.39 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (80.67 mg，0.79 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中，接著在0℃下逐份添加HATU (181.95 mg，0.49 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。粗產物(300 mg)藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm 5um 10nm；移動相、水(0.1%NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在15 min內自15%相B達至70%)；偵測器，254。此產生104.4 mg (53.88%)呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基丙-1-酮。 ¹H-NMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.23 (s, 1H), 8.07 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.50- 7.42 (m, 2H), 7.37-7.23 (m, 2H), 6.99 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.40 (tt, J = 54.3, 3.5 Hz, 1H), 4.99 (dd, J = 5.5, 3.3 Hz, 1H), 4.99-4.83 (m, 1H), 4.78 (td, J = 15.3, 3.5 Hz, 2H), 4.58-4.25 (m, 4H), 3.97 (tdd, J = 8.7, 5.9, 2.9 Hz, 1H), 3.58 (dq, J = 10.1, 5.0 Hz, 1H)。LCMS: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 486。實例1.17

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物12)

步驟1

將3-溴基-1H-吡唑(15.0 g，102.04 mmol，1.00當量)、DMF (150.00 mL)置放於500 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中；4.9 g，122.45 mmol，1.20當量)，且在相同溫度下攪拌所得溶液0.5 h。隨後逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(29.4 g，153.06 mmol，1.50當量)且在室溫下攪拌所得溶液12 h。反應物隨後藉由添加水/冰(150 mL)來淬滅且用3×200 mL乙酸乙酯萃取。合併有機層且用鹽水(150 mL×3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮；殘餘物藉由矽膠管柱用THF/PE (8%)純化，得到8.5 g (40%)呈無色油狀物之3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑。 ¹H-NMR (300 MHz, CDCl ₃) δ 7.36 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.33 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.07 (t, J= 55.2 Hz, 1H), 4.42 (td, J= 13.5, 4.5 Hz, 2H); LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 211。

步驟2

將3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑(8.00 g，37.9 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(14.12 g，113.7 mmol，3.00當量)、二㗁烷(100.00 mL)、DIEA (14.67 g，113.7 mmol，3.00當量)、XantPhos (4.39 g，7.58 mmol，0.20當量)及Pd ₂(dba) ₃(4.38 g，3.79 mmol，0.10當量)置放於在惰性氮氣氛圍中吹掃且維持之500 mL圓底燒瓶中。在100℃下攪拌混合物24 h。隨後將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱用THF/PE (5%)純化，得到5 g (52%)呈黃色油狀物之3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 255。

步驟3

將3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑(5.00 g，19.69 mmol，1.00當量)、HOAc (54.00 mL)及H ₂O (6.00 mL)置放於250 mL圓底燒瓶中，接著在低於20℃下逐份添加NCS (7.91 g，50.07 mmol，3.00當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h，且隨後濃縮。將殘餘物施加至用THF/PE (10%)之矽膠管柱上。此產生3.8 g (69%)呈黃色油狀物之1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 211。

步驟4

將含2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.9 g，13.88 mmol，1.00當量)之THF (50.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中；0.83 g，20.82 mmol，1.50當量)。隨後逐滴添加1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-磺醯氯(3.8 g，16.52 mmol，1.20當量)且在0℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加5 mL H ₂O淬滅反應物，且用3×100 mL二氯甲烷萃取。合併有機層且經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。用30 mL MTBE稀釋殘餘物，且藉由過濾收集固體。此產生3.5 g (62%)呈淡黃色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 404。

步驟5

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯(2.5 g，6.20 mmol，1.00當量)、DCM (50.00 mL)及二甲基吡啶(2.66 g，24.80 mmol，4.00當量)置放於250 mL圓底燒瓶中，接著逐滴添加TMSOTf (4.13 g，18.60 mmol，3.00當量)。在0℃下攪拌所得溶液1 h，隨後藉由添加水/冰20 mL淬滅。 H ₂O中之粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 um，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (11 min內自5%相B達至20%)，偵測器，UV 254 nm。由此產生1.6 g (85%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 304。

步驟6

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(197 mg，0.65 mmol，1.20當量)、DMF (4.0 mL)、(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(中間物II-10；100 mg，0.54 mmol，1.00當量)及NMM (165 mg，1.63 mmol，3.00當量)置放於8 mL小瓶中，接著在0℃下在攪拌下添加HATU (247 mg，0.65 mmol，1.20當量)。在添加後，在相同溫度下攪拌所得溶液1 h。反應混合物隨後藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：12 min內自15% B至50% B，偵測器：220 nm。此產生97 mg呈白色固體狀之(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H-NMR-PH-GBT- MY-PK-464-0: (400 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.22 (dd, J= 2.8, 1.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.43-7.38 (m, 1H), 7.35-7.29 (m, 1H), 7.23-7.15 (m, 2H), 6.99 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.54 (tt, J= 54.0, 3.6 Hz, 1H), 4.95-4.86 (m, 2H), 4.82 (td, J= 10.8, 3.6 Hz, 2H), 4.52-4.25 (m, 4H), 4.02 (t, J= 9.6 Hz, 1H), 3.64-3.58 (m, 1H). LCMS: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 470。實例1.18

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物14)

步驟1

將含3-溴基-1H-吡唑(10.0 g，62.50 mmol，1.00當量)之DMF (100.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，隨後在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中) (3.0 g，75.00 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液0.5 h。隨後在0℃下在攪拌下逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(17.91 g，93.75 mmol，1.50當量)。在室溫下攪拌所得溶液12 h，隨後藉由添加水/冰(100 mL)來淬滅反應物且用3×200 mL乙酸乙酯萃取。合併有機層，用鹽水(100 mL×3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱用THF/PE (5%)純化，產生7.9 g目標與區位異構物之混合物。藉由SFC在以下條件下進一步純化混合物： CHIRALPAK IG，3*25 cm，5 μm，移動相A：CO ₂(l)，移動相B：MeOH，流動速率：70 mL/min，梯度：等度25% B；波長：220 nm。RT1 (min)：2.17，RT2 (min)：2.75。將2.75 min下的目標溶離份真空濃縮，產生2.3 g (16%)呈無色油狀物之4-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑。 ¹H-NMR: (300 MHz, CDCl ₃, ppm): δ 7.46 (s, 1H), 6.25 (t, 1H), 4.40 (td, J=13.2, 4.5 Hz, 2H). LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 225。

步驟2

將4-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1-吡唑(2.30 g，10.27 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(3.82 g，30.81 mmol，3.00當量)、甲苯(30.00 mL)、DIEA (3.97 g，30.81 mmol，3.00當量)、XantPhos (1.19 g，2.05 mmol，0.20當量)及Pd ₂(dba) ₃(0.94 g，1.02 mmol，0.10當量)置放於在惰性氮氣氛圍下吹掃且維持之100 mL圓底燒瓶中，且在100℃下攪拌混合物48 h。隨後將反應混合物冷卻至室溫且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱用THF/PE (5%)純化，得到1.00 g (36%)呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 269。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑(1.00 g，3.73 mmol，1.00當量)、HOAc (9.00 mL)及H ₂O (1.00 mL)置放於50 mL圓底燒瓶中，接著在20℃以下之溫度一次性添加NCS (1.50 g，11.19 mmol，3.00當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h，隨後將其濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱用THF/PE (20%)純化，得到800 mg (88%)呈白色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 225。

步驟4

將含2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(685 mg，3.28 mmol，1.00當量)之THF(15.00 mL)置放於50 mL 3頸圓底燒瓶中，接著在0℃下逐份添加NaH (60%於礦物油中；170 mg，4.26 mmol，1.30當量)。隨後逐滴添加1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-磺醯氯(800 mg，3.28 mmol，1.00當量)且在0℃下攪拌所得溶液1 h。隨後藉由添加0.5 mL HOAc淬滅反應物，且用3×200 mL二氯甲烷萃取。合併有機層，經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。用5 mL MTBE稀釋殘餘物且藉由過濾收集固體。此產生600 mg (45%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 418。

步驟5

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯(600 mg，1.44 mmol，1.00當量)、DCM (10.00 mL)及二甲基吡啶(616 mg，5.76 mmol，4.00當量)置放於50 mL 3頸圓底燒瓶中，接著逐滴添加TMSOTf (959 mg，4.32 mmol，3.00當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液1 h。反應物隨後藉由添加水/冰(10 mL)來淬滅且呈水相之粗產物藉由Prep-HPLC在以下條件下直接純化：XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 um，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在11 min內自5%相B達至20%)，偵測器，UV 254 nm。此產生240 mg (53%)呈白色固體狀之2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 318。

步驟6

將(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(中間物II-10；100 mg，0.54 mmol，1.00當量)、DMF (4.00 mL)、2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(225 mg，0.71 mmol，1.30當量)及NMM (0.18 mL，1.63 mmol，3.00當量)置放於8 mL中，接著添加HATU (247 mg，0.65 mmol，1.20當量)。在相同溫度下攪拌所得溶液1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：XSelect CSH Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 μm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：20 mL/min，梯度：在8 min內自29% B至45% B，偵測器，220 nm。此產生呈白色固體狀之96 mg (S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H-NMR-PH-GBT- ZL-PK-97-0: (300 MHz, DMSO- d ₆ , ppm): δ 8.21 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.42-7.28 (m, 2H), 7.24-7.14 (m, 2H), 6.60 (tt, J= 54.3, 3.3 Hz, 1H), 4.96-4.84 (m, 2H), 4.74 (td, J= 15.3, 3.6 Hz, 2H), 4.53- 4.40 (m, 2H), 4.35-4.24 (m 2H), 4.03 - 3.95 (m, 1H), 3.65-3.56 (m, 1H), 2.52 (s, 3H). LCMS-PH-GBT-ZL-PK-97-0: (ES, m/z): [M+H] ⁺: 484。實例1.19

合成(2S)-1-{2-[(2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物15)

步驟1

在5 min內在N ₂下於冰浴中向氫化鈉(124.24 mg；3.11 mmol；1.30當量)於THF (15 mL)中之懸浮液中添加2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(500.00 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液。在冰浴中攪拌混合物30 min。隨後緩慢添加2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯(505.84 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (2 mL)中之溶液。使混合物在冰浴中攪拌45 min，同時升溫至環境溫度。隨後淬滅反應混合物且用NH ₄Cl (亦添加0.5 mL AcOH)稀釋且用IPA:CHCl ₃之1:3混合物萃取兩次。合併之有機物用水及鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到深色油狀物。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-40% EtOAc/庚烷溶離，得到呈淡黃色固體狀之所需產物(638 mg；74%)。

步驟2

向2-[(二甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(295.00 mg；0.77 mmol；1.00當量)於1,2-二氯乙烷(5.90 mL)中之混合物中添加ZnBr ₂(518.35 mg；2.30 mmol；3.00當量)。使此混合物在55℃下攪拌。添加數份額外ZnBr ₂以驅動反應完成。

在60 h之後，使混合物冷卻至環境溫度，用水稀釋，用2.5 mL氫氧化銨水溶液淬滅，且用CHCl ₃:IPA之3:1混合物萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到黃褐色蠟。 ¹H NMR展示部分轉化為所需產物，其中存在約25% SM。此物質不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟3

將(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(113.95 mg；0.69 mmol；1.30當量)、2,4-二甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,3-噻唑(150.00 mg；0.53 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.18 mL；1.06 mmol；2.00當量)於DMF (5.28 mL)中之混合物中添加HATU (260.74 mg；0.69 mmol；1.30當量)，且將所得混合物在環境溫度下攪拌。2.5 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮。粗物質在用0-30% EtOAc/庚烷溶離之矽膠管柱上純化以分離未反應之SM，且隨後在80% EtOAc/庚烷下純化以分離與所需產物一致之呈無色固體狀之所需產物(51.8 mg，23%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.23 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.35 - 7.17 (m, 5H), 4.92 - 4.80 (m, 1H), 4.78 (dd, J = 5.1, 2.1 Hz, 1H, OH), 4.50 - 4.24 (m, 3H), 4.01 - 3.90 (m, 2H), 3.54 - 3.44 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.52 (d, J = 2.6 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 433.04。實例1.20

合成(2S)-1-{2-[(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物16)

標題化合物根據針對化合物15所描述之3步步驟，使用3,5-二甲基-4-異㗁唑磺醯氯代替步驟1中2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯合成。將分離呈無色固體狀之(2S)-1-{2-[(3,5-二甲基-1,2-㗁唑-4-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(85 mg，54%)。 ¹H NMR ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.26 (dd, J = 2.7, 1.3 Hz, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 4H), 7.21 (ddq, J = 7.0, 4.5, 2.3 Hz, 1H), 4.93 - 4.80 (m, 1H), 4.80 - 4.75 (m, 1H, OH), 4.51 - 4.24 (m, 3H), 4.01 3.91 (m, 2H), 3.49 (td, J = 4.4, 1.9 Hz, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.29 (d, J = 3.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 417.03。實例1.21

合成(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(3,3,3-三氟丙基)噻吩-2-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮(化合物17)

步驟1

在5 min內在N ₂下於冰浴中向氫化鈉(124.24 mg；3.11 mmol；1.30當量)於THF (15 mL)中之懸浮液中添加2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(500.00 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液。在冰浴中攪拌混合物30 min。隨後緩慢添加5-溴基-2-噻吩磺醯氯(624.97 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (2 mL)中之溶液且攪拌所得混合物，同時升溫至環境溫度。90 min之後，淬滅反應混合物且用NH ₄Cl (亦添加0.5 mL AcOH)稀釋且用IPA:CHCl ₃之1:3混合物萃取兩次。合併之有機物用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到黃褐色固體。按原樣收集部分(850 mg)。其餘粗物質吸收至矽膠塞上，且在用0-40% EtOAc/庚烷溶離之矽膠管柱上純化，得到與所需產物(135 mg；94%)一致之灰白色固體。

步驟2

將密封小瓶中之(3,3,3-三氟丙基)三氟硼酸鉀(46.96 mg；0.23 mmol；1.00當量)、2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(100.00 mg；0.23 mmol；1.00當量)、碳酸銫(225.05 mg；0.69 mmol；3.00當量)、乙酸鈀(2.58 mg；0.01 mmol；0.05當量)及RuPhos (10.74 mg；0.02 mmol；0.10當量)於甲苯(1.15 mL)及水(0.38 mL)中之混合物加熱至95℃。4 h後，使混合物冷卻至環境溫度，淬滅且用飽和NH ₄Cl稀釋且用DCM萃取。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到深黃色油狀物。殘餘物在矽膠管柱上純化，用0-30% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之所需產物(63 mg；60%)。

步驟3

向2-{[5-(3,3,3-三氟丙基)噻吩-2-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(63.00 mg；0.14 mmol；1.00當量)於1,2-二氯乙烷(1.26 mL)中之混合物中添加ZnBr ₂(94.27 mg；0.42 mmol；3.00當量)。使此混合物在55℃下攪拌。在隔夜之後，使混合物冷卻至環境溫度，用水稀釋，用0.5 mL氫氧化銨水溶液淬滅，且用CHCl ₃:IPA之3:1混合物萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到淡黃色半固體。此物質不經進一步純化即用於下一步驟，假定產率為100% (49 mg)。

步驟4

向(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(30.13 mg；0.18 mmol；1.30當量)、2-{[5-(3,3,3-三氟丙基)噻吩-2-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑(49.00 mg；0.14 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.05 mL；0.28 mmol；2.00當量)於DMF(1.39 mL)中之混合物中添加HATU (68.93 mg；0.18 mmol；1.30當量)，且在環境溫度下攪拌所得混合物。2 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-100% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(3,3,3-三氟丙基)噻吩-2-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮(20.4 mg；29%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.18 - 8.15 (m, 1H), 7.77 (dd, J = 3.9, 0.7 Hz, 1H), 7.37 - 7.17 (m, 5H), 7.11 (ddq, J = 4.0, 1.8, 0.9 Hz, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 4.77 (dd, J = 5.2, 3.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.35 (m, 2H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 3.99 - 3.91 (m, 2H), 3.53 - 3.45 (m, 1H), 3.08 (dd, J = 9.6, 6.5 Hz, 2H), 2.72 - 2.60 (m, 2H). LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 499.89。實例1.22

合成(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[(5-苯基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物18)

根據針對化合物17所描述之4步步驟，在步驟2中使用苯基硼酸代替(3,3,3-三氟丙基)三氟硼酸鉀來合成標題化合物。將分離呈無色固體狀之(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[(5-苯基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(4.2 mg；32%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.21 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.91 (dd, J = 4.1, 1.1 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.61 (dd, J = 4.1, 1.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 3H), 7.34 - 7.23 (m, 4H), 7.23 - 7.16 (m, 1H), 4.85 (dd, J = 30.2, 14.4 Hz, 1H), 4.78 - 4.72 (m, 1H), 4.50 - 4.36 (m, 2H), 4.30 (dd, J = 19.4, 12.6 Hz, 1H), 3.99 - 3.89 (m, 2H), 3.49 (dd, J = 8.7, 4.0 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 479.92。實例1.23

合成(2S)-1-{2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物19)

步驟1

向2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(步驟1，合成化合物17)，135.00 mg；0.31 mmol；1.00當量)於1,2-二氯乙烷(2.70 mL)中之混合物中添加溴化鋅(209.98 mg；0.93 mmol；3.00當量)。使此混合物在55℃下攪拌隔夜。將反應混合物冷卻至環境溫度，用水稀釋，用1.5 mL氫氧化銨水溶液淬滅，且用CHCl ₃:IPA之3:1混合物萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到黃褐色固體。此物質不經進一步純化即用於下一步驟，假定產率100% (100 mg)。

步驟2

向(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(64.64 mg；0.39 mmol；1.30當量)、2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑(100.00 mg；0.30 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.10 mL；0.60 mmol；2.00當量)於DMF (2.99 mL)中之混合物中添加HATU (147.90 mg；0.39 mmol；1.30當量)，且在環境溫度下攪拌所得混合物。2.5 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-80% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之(2S)-1-{2-[(5-溴噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(44.2 mg，31%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.18 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.75 (dt, J = 4.2, 1.1 Hz, 1H), 7.40 (dt, J = 4.1, 1.4 Hz, 1H), 7.34 - 7.18 (m, 5H), 4.93 - 4.80 (m, 1H), 4.79 - 4.76 (m, 1H), 4.49 - 4.25 (m, 3H), 4.00 - 3.90 (m, 2H), 3.53 - 3.45 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 481.83 / 483.74。實例1.24

合成(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(3,3,3-三氟丙基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮(化合物20)

根據針對化合物17所描述之4步步驟，使用2-氯基-4-甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯代替步驟1中之5-溴基-2-噻吩磺醯氯來合成標題化合物。將分離呈無色固體狀之(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(3,3,3-三氟丙基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮(6.3 mg；28%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.26 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.35 - 7.25 (m, 4H), 7.24 - 7.17 (m, 1H), 4.85 (dd, J = 28.9, 14.4 Hz, 1H), 4.77 (dq, J = 5.0, 2.9 Hz, 1H), 4.50 - 4.34 (m, 2H), 4.34 - 4.25 (m, 1H), 3.96 (dd, J = 8.4, 2.5 Hz, 2H), 3.49 (td, J = 5.4, 4.7, 3.0 Hz, 1H), 3.27 - 3.20 (m, 2H), 2.79 - 2.66 (m, 2H), 2.54 (d, J = 2.5 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 515.04。實例1.25

合成(2S)-1-{2-[(5-乙基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物21)

根據針對化合物17所描述之4步步驟，在步驟2中使用乙基三氟硼酸鉀代替(3,3,3-三氟丙基)三氟硼酸鉀來合成標題化合物。分離呈無色固體狀之(2S)-1-{2-[(5-乙基噻吩-2-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(10.0 mg；36%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.16 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.74 (dt, J = 4.0, 1.2 Hz, 1H), 7.30 (dtdd, J = 9.4, 7.8, 6.1, 1.5 Hz, 4H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 6.99 (dp, J = 3.8, 1.1 Hz, 1H), 4.90 - 4.78 (m, 1H), 4.48 - 4.36 (m, 2H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.00 - 3.90 (m, 2H), 3.53 - 3.45 (m, 1H), 2.87 - 2.79 (m, 2H), 1.18 (td, J = 7.5, 1.1 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 432.04。實例1.26

合成(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮(化合物22)

步驟1

在5 min內在N ₂下於冰浴中向氫化鈉(141.64 mg；3.54 mmol；1.30當量)於THF (15 mL)中之懸浮液中添加2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(570.00 mg；2.72 mmol；1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液。在冰浴中攪拌混合物30 min。隨後緩慢添加2-氯基-4-甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯(632.28 mg；2.72 mmol；1.00當量)於THF (2 mL)中之溶液。在冰浴中攪拌混合物45 min，同時升溫至環境溫度。在2 h後，反應混合物經淬滅且用飽和NH ₄Cl溶液(亦添加2 mL AcOH)稀釋且用IPA:CHCl ₃之1:3混合物萃取兩次。合併之有機物用水及鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到紅色油狀物。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-50% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之2-[(2-氯基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(542 mg；49%)。

步驟2

將2-[(2-氯基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(40.00 mg；0.10 mmol；1.00當量)、2,2,2-三氟乙醇(0.01 mL；0.20 mmol；2.00當量)及碳酸銫(96.56 mg；0.30 mmol；3.00 mmol)於乙腈(2.00 mL)中之混合物在環境溫度下攪拌隔夜。混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到無色油狀物。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-20% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之2-{[4-甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(30 mg；65%)。

步驟3

向2-{[4-甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(30.0mg；0.06 mmol；1.00當量)於冷卻至0℃之二氯甲烷(0.18 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(0.36 mL；12.00 V)，且在0℃下攪拌混合物。在1 h後，在真空中濃縮混合物且在高真空下乾燥1 h。粗物質不經進一步純化即用於下一步驟，假定100%產率(23 mg游離鹼；31 mg TFA鹽)。

步驟4

向(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(13.88 mg；0.08 mmol；1.30當量)、4-甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑；三氟乙酸(31.00 mg；0.06 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.02 mL；0.13 mmol；2.00當量)於DMF (0.64 mL)中之混合物中添加HATU (31.77 mg；0.08 mmol；1.30當量)，且在環境溫度下攪拌所得混合物。1 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。隨後濃縮有機相。粗產物在矽膠管柱上純化，用0-80% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之(2S)-3-羥基-1-(2-{[4-甲基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮(17.8 mg，53 %)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.35 (dd, J = 2.6, 1.3 Hz, 1H), 7.39 - 7.26 (m, 4H), 7.22 (td, J = 7.2, 1.4 Hz, 1H), 5.00 (qd, J = 8.4, 1.3 Hz, 2H), 4.97 - 4.85 (m, 1H), 4.80 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.59 - 4.42 (m, 2H), 4.42 - 4.31 (m, 1H), 4.03 - 3.93 (m, 2H), 3.56 - 3.45 (m, 1H), 2.54 (d, J = 1.4 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 516.95。實例1.27

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物23)

根據針對化合物22所描述之4步步驟，在步驟2中使用甲醇代替2,2,2-三氟乙醇且使用步驟4中之(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸( 中間物 II - 10)代替(2S)-3-羥基-2-苯丙酸來合成標題化合物。將分離呈無色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(6.0 mg；32 %)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.25 - 8.17 (m, 1H), 7.36 (td, J = 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.31 - 7.23 (m, 1H), 7.20 - 7.09 (m, 2H), 4.96 - 4.79 (m, 2H), 4.52 - 4.34 (m, 2H), 4.33 - 4.18 (m, 2H), 4.04 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 4.00 - 3.91 (m, 1H), 3.56 (dq, J = 10.9, 5.8 Hz, 1H), 2.45 (dd, J = 2.2, 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466.96。實例1.28

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物24)

步驟1

在環境溫度下，向4-溴基-1H-咪唑(500.00 mg；3.40 mmol；1.00當量)及碳酸銫(1 163.85 mg；3.57 mmol；1.05當量)於二甲亞碸(6.80 mL)中之混合物中添加2,2-二氟甲烷磺酸乙酯(1 092.60 mg；5.10 mmol；1.50當量)且在環境溫度下攪拌混合物。3.5 h後，混合物用水稀釋，用EtOAc萃取，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到黃色油狀物。粗物質在矽膠上純化，用0-50% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色油狀物之所需產物(292 mg；40%)。

步驟2

向4-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑(100.00 mg；0.47 mmol；1.00當量)、Xantphos (27.42 mg；0.05 mmol；0.10當量)、Pd ₂(dba) ₃(86.79 mg；0.09 mmol；0.20當量)、休尼格氏鹼(0.17 mL；0.95 mmol；2.00當量)及苯甲基硫氫化物(0.11 mL；0.95 mmol；2.00當量)於1,4-二㗁烷(2.37 mL)中之混合物進行用Ar抽空/回填3次循環，且隨後在Ar下在100℃下攪拌。22 h後，使混合物冷卻至環境溫度且濃縮。殘餘物在矽膠管柱上純化，用0-40% EtOAc/庚烷溶離，得到與所需產物一致之黃色油狀物，儘管經少量未反應之SM污染。產物(70 mg)未經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟3

在環境溫度下攪拌4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑(20.00 mg；0.08 mmol；1.00當量)及1-氯基-2,5-吡咯啶二酮(31.51 mg；0.24 mmol；3.00當量)於乙酸(0.39 mL)及水(0.04 mL)中之混合物；3 h後(未觀測到反應)，二氯-二甲基-乙內醯脲(3當量)。1 h後，混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮。殘餘物在矽膠管柱上純化，用0-80% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之所需產物(16.5 mg；93%)。

步驟4

在N ₂下於冰浴中向氫化鈉(3.73 mg；0.09 mmol；1.30當量)於THF (1 mL)中之懸浮液中逐滴添加2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(15.00 mg；0.07 mmol；1.00當量)於THF (0.5 mL)中之溶液。使混合物在冰浴中攪拌20 min。隨後緩慢添加1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑-4-磺醯氯(16.53 mg；0.07 mmol；1.00當量)於THF (0.5 mL)中之溶液。使混合物攪拌，同時升溫至環境溫度。1 h後，淬滅反應混合物且用NH ₄Cl稀釋(亦添加幾滴AcOH)。此混合物用IPA:CHCl ₃之1:3混合物萃取兩次。合併之有機物用水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到無色油狀物。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-40% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之所需產物(20 mg；72%)。

步驟5

向2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(20.00 mg；0.05 mmol；1.00當量)於冷卻至0℃之二氯甲烷(0.12 mL)中之溶液中添加TFA (0.24 mL；12.00 V)且在0℃下攪拌混合物。1 h後，在真空中濃縮混合物且在高真空下乾燥1 h。粗物質不經進一步純化即用於下一步驟，假定100%產率(15 mg游離鹼；20 mg TFA鹽)。

步驟6

向(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(10.35 mg；0.06 mmol；1.30當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-咪唑；TFA(20.00 mg；0.05 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.02 mL；0.10 mmol；2.00當量)於DMF (0.48 mL)中之混合物中添加HATU (23.69 mg；0.06 mmol；1.30當量)，且在環境溫度下攪拌所得混合物。1 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。隨後濃縮有機相。粗材料在矽膠管柱上純化，用0-100% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-咪唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(6.4 mg；29%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.24 - 8.18 (m, 1H), 8.13 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.90 (dd, J = 2.0, 1.0 Hz, 1H), 7.35 - 7.24 (m, 4H), 7.24 - 7.17 (m, 1H), 6.50 - 6.17 (m, 1H), 4.93 - 4.79 (m, 1H), 4.80 - 4.70 (m, 3H), 4.50 - 4.33 (m, 2H), 4.29 (dd, J = 17.9, 13.2 Hz, 1H), 3.96 (dd, J = 8.1, 2.2 Hz, 2H), 3.49 (dd, J = 5.9, 3.5 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 452.05。實例1.29

合成(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-3,4-二甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(化合物25)

步驟1

在5 min內在氮氣下於冰浴中向氫化鈉(124.24 mg；3.11 mmol；1.30當量)於THF (15 mL)中之懸浮液中添加2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(500.00 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (3 mL)中之溶液。在冰浴中攪拌混合物30 min。隨後緩慢添加2-氯基-4-甲基-1,3-噻唑-5-氯醯氯(554.63 mg；2.39 mmol；1.00當量)於THF (2 mL)中之懸浮液。在冰浴中攪拌混合物45 min，同時升溫至環境溫度。在2 h後，反應混合物經淬滅且用飽和NH ₄Cl (亦添加2 mL AcOH)稀釋且用IPA:CHCl ₃之1:3混合物萃取兩次。合併之有機物用水及鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到黃色油狀物。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-50% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色固體狀之2-[(2-羥基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(234 mg；25%)。 ¹HNMR為不確定的，但LCMS與羥基副產物一致。此物質未經進一步純化即繼續使用。

步驟2

在環境溫度下向2-[(2-羥基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(60.00 mg；0.16 mmol；1.00當量)及碳酸鉀(64.28 mg；0.47 mmol；3.00當量)於丙酮(1.55 mL)中之混合物中添加碘甲烷(0.02 mL；0.31 mmol；2.00當量)，且在環境溫度下攪拌混合物隔夜。將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗滌且經MgSO ₄乾燥。在濃縮之後得到黃色油狀物。粗物質藉由矽膠管柱純化，用0-40% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色油狀物之2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯或2-[(3,4-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(13 mg；21 %)。

步驟3

向2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯或2-[(3,4-二甲基-2-側氧基-2,3-二氫-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(13.00 mg；0.03 mmol；1.00當量)於1,2-二氯乙烷(0.26 mL)中之混合物中添加溴化鋅(21.93 mg；0.10 mmol；3.00當量)，且使其在55℃下攪拌所得混合物隔夜。將混合物冷卻至環境溫度，用水稀釋，用0.5 mL氫氧化銨水溶液淬滅，且用CHCl ₃:IPA之3:1混合物萃取。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到呈灰色固體狀之2-甲氧基-4-甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,3-噻唑或3,4-二甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮。此物質不經進一步純化即用於下一步驟，假定產率為100% (約9.5 mg)。

步驟4

向(2S)-3-羥基-2-苯丙酸(6.83 mg；0.04 mmol；1.30當量)、2-甲氧基-4-甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,3-噻唑或3,4-二甲基-5-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(9.50 mg；0.03 mmol；1.00當量)及休尼格氏鹼(0.01 mL；0.06 mmol；2.00當量)於DMF (0.32 mL)中之混合物中添加HATU (15.63 mg；0.04 mmol；1.30當量)，且在環境溫度下攪拌所得混合物。2.5 h後，用1:1 PhMe/EtOAc稀釋混合物且用等量水洗滌。有機相經MgSO ₄乾燥，過濾且濃縮。粗物質在矽膠管柱上純化，用0-100% EtOAc/庚烷溶離，得到呈無色、與所需產物一致之極蓬鬆固體(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-甲氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-3,4-二甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(3.0 mg，21 %)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.17 (dq, J = 2.0, 1.0 Hz, 1H), 7.35 - 7.20 (m, 5H), 4.86 (dd, J = 31.8, 14.4 Hz, 1H), 4.78 (q, J = 5.2 Hz, 1H), 4.52 - 4.26 (m, 3H), 4.01 - 3.91 (m, 2H), 3.50 (q, J = 3.6 Hz, 1H), 3.18 (dd, J = 1.8, 0.9 Hz, 3H), 2.46 (d, J = 0.9 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 449.11。實例1.30

合成(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-乙氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或3-乙基-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(化合物26)

針對化合物25所描述之4步步驟，在步驟2中使用碘乙烷替代碘甲烷來合成標題化合物。將分離呈無色固體狀之(2S)-3-羥基-1-{2-[(2-乙氧基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮或3-乙基-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(2.0 mg；22%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.21 - 8.12 (m, 1H), 7.36 - 7.18 (m, 5H), 4.87 (dd, J = 33.2, 14.3 Hz, 1H), 4.78 (t, J = 4.8 Hz, 1H; OH), 4.39 (ddt, J = 45.1, 20.1, 15.1 Hz, 3H), 4.01 - 3.92 (m, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 2H), 3.50 (dt, J = 7.8, 2.6 Hz, 1H), 2.50 (t, J = 0.6 Hz, 3H), 1.13 - 1.07 (m, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 462.92。實例1.31

合成(2S)-1-(2-{[2-(2,2-二氟乙氧基)-4-甲基-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮或3-(2,2-二氟乙基)-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(化合物27)

根據針對化合物25所描述之4步程步驟，在步驟2中使用2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯代替碘甲烷合成標題化合物。將分離呈無色固體狀之(2S)-1-(2-{[2-(2,2-二氟乙氧基)-4-甲基-1,3-噻唑-5-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮或3-(2,2-二氟乙基)-5-({5-[(2S)-3-羥基-2-苯基丙醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-基}磺醯基)-4-甲基-2,3-二氫-1,3-噻唑-2-酮(5.4 mg；45%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 7.81 (dd, J = 8.7, 1.3 Hz, 1H), 7.38 - 7.16 (m, 5H), 6.43 - 6.10 (m, 1H), 5.13 - 4.75 (m, 2H；含有OH信號), 4.64 (dd, J = 17.5, 14.2 Hz, 1H), 4.58 - 4.30 (m, 2H), 4.28 - 4.16 (m, 2H), 4.03 - 3.88 (m, 2H), 3.51 (tdd, J = 8.7, 6.2, 2.5 Hz, 1H), 2.52 (d, J = 1.3 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 498.96。實例1.32

合成(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮及(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮(化合物28及29)

向20 mL小瓶中添加1-(2,2-二氟乙基)-3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(步驟5，實例 1 . 16，300 mg，1.00 mmol，1.00當量)、(3-氟吡啶-2-基)(羥基)鹽酸乙酸(249 mg，1.20 mmol，1.20當量)、DMF (5.00 mL)、DIEA (387 mg，3.00 mmol，3.0當量)。此後在0℃下添加HATU (456 mg，1.20 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得混合物2 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用此等條件純化：C18-120 g管柱，CH ₃CN/H ₂O (0.05% FA)，在12 min內自10%至80%，流動速率，70 mL/min，偵測器，254 nm。將目標溶離份凍結乾燥，得到230 mg呈白色固體狀之1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮。

1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙-1-酮(230 mg)藉由掌性Prep-HPLC使用此等條件分離：掌性ART纖維素-SJ管柱，3*25 cm，5 μm，移動相A：CO ₂(l)，移動相B：MeOH (0.1% 2 M NH3-MeOH)，流動速率：85 mL/min，梯度：等度35% B，保持10 min，波長：220 nm。分離兩種化合物。在4.4 min時之溶離份在真空中濃縮，產生呈白色固體狀之立體異構物3 (83 mg，21%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.40-8.36 (m, 1H), 8.21 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 8.08-8.06 (m, 1H), 7.80-7.71 (m, 1H), 7.52-7.44 (m, 1H), 7.00 (dd, J = 2.4, 1.2 Hz, 1H), 6.41 (t, J = 54.3 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 6.9, 9.0 Hz, 1H), 5.64-5.59 (m, 1H), 4.91-4.73(m, 3H), 4.61-4.29(m, 2H), 4.16 (dd, J = 9.0, 6.9 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 457。在5.5 min時之溶離份在真空中濃縮，產生立體異構物4。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.40-8.36 (m, 1H), 8.21 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 8.08-8.06 (m, 1H), 7.80-7.71 (m, 1H), 7.52-7.44 (m, 1H), 7.00 (dd, J = 2.4, 1.2 Hz, 1H), 6.41 (t, J = 54.3 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 6.9, 9.0 Hz, 1H), 5.64-5.59 (m, 1H), 4.91-4.73(m, 3H), 4.61-4.29(m, 2H), 4.16 (dd, J = 9.0, 6.9 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 457。實例1.33

合成(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物30)

根據實例 1 . 6中所描述之步驟自(R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(100.00 mg，0.54 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，181.80 mg，0.65 mmol，1.20當量)合成標題化合物。獲得呈白色固體狀之(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.71 (s, 1H), 8.18 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.59 - 6.98 (m, 4H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 5.12 - 4.50 (m, 3H), 4.70 - 4.13 (m, 4H), 3.99 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.60 (dt, J = 10.6, 5.7 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 470。實例1.34

合成(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮及(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮(化合物31及32)

根據針對化合物28及29所描述之步驟合成標題化合物。粗產物藉由Prep-HPLC使用此等條件純化：SunFire Prep C18 OBD管柱，19×150 mm，5 um，移動相A，H ₂O (0.1 % FA)；相B，CH ₃CN/MeOH (1/1) (在15 min內自5%達至40% CH3CN/MeOH)，接著藉由Prep-SFC使用以下條件：管柱，掌性ART纖維素-SJ，3*25 cm，5 µm，移動相A，CO ₂，移動相B，MeOH (0.1% 2M NH ₃-MeOH)，梯度，等度25% B，偵測器，220 nm。此產生兩種立體異構物：呈白色固體狀之立體異構物5，RT1：5.58 min，(106.4 mg，6.98%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.39-8.36 (m, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73-765 (m, 1H), 7.42-7.36 (m, 1H), 7.00 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.40 (tt, J = 57.0 Hz， 3.0 Hz, 1H), 4.93 - 4.73 (m, 4H), 4.53 - 4.34 (m, 3H), 4.26 (t, J = 15.0 Hz, 1H), 4.10 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.97-3.90 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471。呈白色固體狀之立體異構物6，RT2：6.68 min (101.4 mg，6.65%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.39-8.36 (m, 1H), 8.22 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73-7.65 (m, 1H), 7.42-7.35 (m, 1H), 6.99 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.40 (tt, J = 54.3 Hz, 3.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.73 (m, 4H), 4.53-4.34 (m, 3H), 4.26 (t, J = 15.3 Hz, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 1H), 3.98-3.89 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471。實例1.35

合成(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物33)

遵循步驟6、實例 1 . 7中所描述之步驟自(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(75 mg，0.41 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，144 mg，0.45 mmol，1.10當量)合成標題化合物。將分離呈白色粉末狀之(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(114.2 mg，57.53%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.78 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.21-8.15 (m, 2H), 7.39 (td, J = 7.6, 3.8 Hz, 1H), 7.35-7.26 (m, 1H), 7.24- 7.12 (m, 2H), 5.24 (q, J = 8.9 Hz, 2H), 4.97-4.82 (m, 2H), 4.52-4.24 (m, 4H), 4.04-3.94 (m, 1H), 3.64 - 3.54 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 488。實例1.36

合成(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-羥基-2-苯基乙醇(化合物34)

如實例 1 . 8中所描述自(S)-杏仁酸(70.00 mg，0.46 mmol，1.00當量)及 中間物 I - 7(139.54 mg，0.46 mmol，1.00當量)合成標題化合物。獲得呈白色固體狀之(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-羥基-2-苯基乙醇(108 mg，53.67%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.71 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.47-7.24 (m, 5H), 6.42 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.83-4.72 (m, 1H), 4.69 (dq, J = 15.2, 1.5 Hz, 2H), 4.60-4.24 (m, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 438。實例1.37

合成(2R)-1-[2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物35)

遵循步驟6、實例 1 . 9中所描述之步驟自2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(61.97 mg，0.336 mmol，1.20當量)及1-(2-氟乙基)-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(80.00 mg，0.280 mmol，1.00當量) (步驟5，實例1.9)合成標題化合物。獲得57.8 mg (45.66%)呈白色固體狀之(2R)-1-[2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.71 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.30 (dd, J = 7.9, 6.1 Hz, 1H), 7.25-7.11 (m, 2H), 4.99-4.81 (m, 2H), 4.70 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 4.55 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.51-4.41 (m, 2H), 4.37 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 4.33-4.21 (m, 2H), 3.99 (td, J = 9.4, 7.9, 3.3 Hz, 1H), 3.60 (dt, J = 11.0, 5.8 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 452。實例1.38

合成(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(化合物36)及(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(化合物37)

將1-(2,2-二氟乙基)-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑( 中間物 I - 7，300.00 mg，0.99 mmol，1.00當量)、(2-氟苯基)(羥基)乙酸(168.29 mg，0.99 mmol，1.00當量)、DMF (10.00 mL)及NMM (200.10 mg，1.98 mmol，2.00當量)置放於20 mL小瓶中。接著在0℃下逐份添加HATU (451.33 mg，1.187 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液2 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm、10 nm；移動相、水(0.5% NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在15 min內自15%相達至60%)；偵測器，254。此產生250 mg (55.50%)呈白色固體狀之1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 456。

1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮藉由Prep-SFC使用以下條件純化：管柱，(R,R)-WHELK-O1-Kromasil，2.11*25 cm，5 µm，移動相，CO ₂(70%)及MeOH (30%)；偵測器，254。將分離呈白色固體狀之(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(116 mg，46.40%)。分析型SFC：2.395 min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.73 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.38 (dq, J = 3.7, 1.7 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.76 (dddd, J = 10.0, 8.3, 3.7, 1.3 Hz, 1H), 7.48 (dtd, J = 8.6, 4.4, 2.6 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.5 Hz, 1H), 5.61 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.85 (dd, J = 19.6, 14.3 Hz, 1H), 4.73 (tdd, J = 15.1, 3.7, 1.4 Hz, 2H), 4.63 - 4.39 (m, 2H), 4.13 (dd, J = 25.1, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 456。

將分離呈白色固體狀之(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(115 mg, 46.00%)。分析型SFC：1.708 min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.19 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.47 (tdd, J = 7.5, 5.4, 1.9 Hz, 1H), 7.37 (dtt, J = 7.8, 4.6, 2.5 Hz, 1H), 7.27 - 7.12 (m, 2H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.5 Hz, 1H), 5.91 (dd, J = 15.0, 6.8 Hz, 1H), 5.55 (dd, J = 6.8, 2.9 Hz, 1H), 4.85 (dd, J = 20.7, 14.2 Hz, 1H), 4.72 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.60 - 4.38 (m, 2H), 4.29 (dd, J = 25.9, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 456。實例1.39

合成(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮及(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮(化合物38及39)

遵循針對合成化合物36及37所描述之步驟自(3-氟吡啶-2-基)(羥基)鹽酸乙酸(328.54 mg，1.58 mmol，1.20當量)及 中間物 - 7(400.00 mg，1.32 mmol，1.00當量)合成標題化合物。獲得呈白色固體狀之1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮(260 mg，43.19%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 457。

1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-羥基乙酮(250.00 mg，0.55 mmol，1.00當量)藉由Prep-SFC使用以下條件來純化：管柱，掌性ART 纖維素-SJ，3*25 cm，5 µm；移動相，CO ₂(65%)及EtOH (0.1% 2M NH ₃-MEOH) (35%)；偵測器，254。分離兩種立體異構物；立體異構物7：呈白色固體狀(93.6 mg，37.44%)。分析型SFC：2.395 min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.38 (dd, J = 4.8, 2.1 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.82 - 7.69 (m, 1H), 7.54 - 7.41 (m, 1H), 6.42 (t, J = 54.3 Hz, 1H), 5.80 (s, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.92 - 4.81 (m, 1H), 4.81 - 4.65 (m, 2H), 4.63 - 4.39 (m, 2H), 4.13 (dd, J = 25.1, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 457。

亦將分離呈白色固體狀之立體異構物8 (105.9 mg，42.36%)。分析型SFC：2.395 min。1.708 min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.73 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.38 (dq, J = 3.7, 1.7 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.76 (dddd, J = 10.0, 8.3, 3.7, 1.3 Hz, 1H), 7.48 (dtd, J = 8.6, 4.4, 2.6 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.5 Hz, 1H), 5.61 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.85 (dd, J = 19.6, 14.3 Hz, 1H), 4.73 (tdd, J = 15.1, 3.7, 1.4 Hz, 2H), 4.63 - 4.39 (m, 2H), 4.13 (dd, J = 25.1, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 457。實例1.40

合成(2R)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮及(2S)-2-(2-氟苯基)-2-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}乙酮(化合物40及41)

遵循實例6、實例 1 . 7所描述之步驟自(2-氟苯基)(羥基)乙酸(150 mg，0.88 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，283 mg，0.88 mmol，1.00當量)合成標題化合物。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱，UNK UNK製備型C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm；移動相、水及ACN (在15 min內自23% ACN達至60%)。在真空下濃縮所得混合物。粗產物藉由掌性Prep-HPLC使用以下條件(XA-Prep SFC150-1)純化：管柱：掌性ART直鏈澱粉-C NEO，3*25 cm，5 μm；移動相A：CO ₂，移動相B：MeOH (0.1% 2M NH ₃-MeOH)；流動速率：90 mL/min；梯度：等度20% B；管柱溫度(℃)：35；背壓(巴)：100；波長：220 nm。分離兩種立體異構物。掌性HPLC：滯留時間：1.195 min。對於其他異構體，掌性HPLC：滯留時間：1.617 min。

呈白色固體狀之立體異構物9：RT1：9.13 min (113 mg，54.15%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.81 (s, 1H), 8.21-8.18 (m, 2H), 7.46 (q, J= 7.5 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.19 (dt, J= 15.3, 7.3 Hz, 2H), 5.89 (dd, J= 19.6, 6.8 Hz, 1H), 5.55 (dd, J= 6.7, 4.0 Hz, 1H), 5.25 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.85 (dd, J= 27.2, 14.2 Hz, 1H), 4.58 - 4.38 (m, 2H), 4.29 (dd, J= 33.8, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 474。

呈白色固體狀之立體異構物10，RT2：10.47 min (104.9 mg，50.27%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.81 (s, 1H), 8.21-8.18 (m, 2H), 7.46 (q, J= 7.5 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.19 (dt, J= 15.3, 7.3 Hz, 2H), 5.89 (dd, J= 19.6, 6.8 Hz, 1H), 5.55 (dd, J= 6.7, 4.0 Hz, 1H), 5.25 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.85 (dd, J= 27.2, 14.2 Hz, 1H), 4.58 - 4.38 (m, 2H), 4.29 (dd, J= 33.8, 14.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 474。實例1.41

合成(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮及(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮(化合物42及43)

步驟1

將2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥丙酸(400 mg，2.160 mmol，1當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑( 中間物 I - 7，589.70 mg，1.944 mmol，0.9當量)、DMF (8 mL)、DIEA (335.05 mg，2.592 mmol，1.2當量)、T ₃P (618.65 mg，1.944 mmol，0.9當量)添加於20 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm，10 nm，移動相，水(0.1% FA)及CH ₃CN (在15 min內自10%達至45%)，偵測器，UV 254 nm。此產生呈白色固體狀之1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮(250 mg，24.60%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471。

步驟2

將1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-3-羥基丙-1-酮(250 mg)藉由掌性Prep-SFC使用以下條件分離：管柱：掌性ART 纖維素-SJ，3*25 cm，5 μm；移動相A：CO ₂，移動相B：MeOH (0.1% 2M NH ₃-MEOH)；流動速率：80 mL/min；梯度：等度20% B；管柱溫度(℃)：35；背壓(巴)：100；波長：220 nm；RT1 (8.58 min)：RT2 (9.63 min)；樣品溶劑：MeOH。分離兩種化合物。8.58 min時之溶離份在真空中濃縮，得到呈白色固體狀之立體異構物11、110 mg。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.72 (s, 1H), 8.38 (dq, J = 3.6, 1.7 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.69 (dddd, J = 10.0, 8.4, 3.5, 1.3 Hz, 1H), 7.39 (dtd, J = 8.5, 4.4, 2.2 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.88 (dd, J = 25.3, 13.9 Hz, 1H), 4.72 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.49 (dd, J = 16.0, 11.6 Hz, 1H), 4.46 - 4.32 (m, 2H), 4.25 (dd, J = 21.2, 13.9 Hz, 1H), 4.10 (t, J = 9.1 Hz, 1H), 3.94 (q, J = 8.4 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471。

9.63 min時之溶離份在真空中濃縮，得到呈白色固體狀之立體異構物12，110 mg。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.72 (s, 1H), 8.38 (dq, J = 3.5, 1.6 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.69 (dddd, J = 9.9, 8.3, 3.4, 1.4 Hz, 1H), 7.39 (dtd, J = 8.6, 4.4, 2.2 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.88 (dd, J = 25.2, 13.9 Hz, 1H), 4.72 (td, J = 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.49 (dd, J = 15.9, 11.6 Hz, 1H), 4.46 - 4.32 (m, 2H), 4.25 (dd, J = 21.2, 13.9 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 10.5, 7.4 Hz, 1H), 3.94 (dt, J = 10.0, 7.3 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471。實例1.42

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物44)

步驟1

將3-溴基-1H-吡唑(5.00 g，34.01 mmol，1.0當量)、MeCN (75 mL)、2-溴乙基甲基醚(7.09 g，51.02 mmol，1.5當量)、KI (1.13 g，6.80 mmol，0.2當量)、Cs ₂CO ₃(22.17 g，68.039 mmol，2.0當量)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在25℃下攪拌所得溶液5小時。濾出固體。在真空下濃縮所得混合物。在矽膠管柱上用PE:THF (100:1至10:1)純化殘餘物。此產生5.0 g (71.68%)呈淡黃色油狀物之3-溴基-1-(2-甲氧基乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 205/207。

步驟2

將3-溴基-1-(2-甲氧基乙基)吡唑(5.00 g，24.38 mmol，1.0當量)、甲苯(75 mL)、DIEA (0.63 g，4.87 mmol，0.2當量)、Pd ₂(dba) ₃.CHCl ₃(2.52 g，2.43 mmol，0.1當量)、XantPhos (35.27 g，60.96 mmol，2.5當量)、苯甲基硫醇(6.06 g，48.76 mmol，2.0當量)置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。在110℃下攪拌所得溶液48小時。濃縮所得混合物。將殘餘物施加至用EtOAc/PE (1:100至1:10)之矽膠管柱上。此產生4.5 g (74.31%)呈淡黃色油狀物之3-(苯甲基硫基)-1-(2-甲氧基乙基)吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 249。

步驟3

將3-(苯甲基硫基)-1-(2-甲氧基乙基)吡唑(3.00 g，12.08 mmol，1.0當量)、AcOH (24mL)、H ₂O (8 mL)置放於100 mL 3頸圓底燒瓶中。在反應物冷卻至0℃之後，逐份添加NCS (6.45 g，48.32 mmol，4.0當量)。在0-25℃下攪拌所得溶液5小時。隨後藉由添加20 mL水來使反應淬滅。將所得溶液用EtOAc (3×50 mL)萃取，在減壓下在烘箱中乾燥且濃縮。殘餘物在矽膠管柱上用PE/THF (100:1至5:1)純化，產生1.6 g (58.95%)呈淡黃色油狀物之1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-磺醯氯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 225。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(1.00 g，4.77 mmol，1.0當量)及THF (15 mL)置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之100 mL 3頸圓底燒瓶中。在反應物冷卻至0℃後，逐份添加NaH (0.13 g，5.25 mmol，1.1當量)。在0℃下攪拌反應物30 min之後，逐份添加1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-磺醯氯(1.07 g，4.779 mmol，1.0當量)。隨後在0℃下再攪拌所得混合物2小時至室溫。所得混合物用含AcOH (2 mL)之20 mL水淬滅，用DCM (4×50 mL)萃取，經Na ₂SO ₄乾燥且濃縮。用EtOAc/PE=1:1 (10 mL)濕磨殘餘物30 min。藉由濾液收集產物，乾燥濾餅，得到呈灰白色固體狀之2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸丁酯(1.2 g，63.18%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 398.1。

步驟5

將2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(500 mg，1.25 mmol，1.0當量)、DCM (10 mL)及2,6-二甲基吡啶(539 mg，5.03 mmol，4.0當量)置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之100 mL 3頸圓底燒瓶中。在反應物冷卻至0℃之後，逐滴添加TMSOTf (838 mg，3.77 mmol，3.0當量)。在0℃下攪拌反應物3 h之後，所得混合物用5 mL水淬滅且濃縮。藉由濾液收集沈澱固體，乾燥濾餅，得到呈灰白色固體狀之1-(2-甲氧基乙基)-3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(300 mg，80.20%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 298.1。

步驟6

向1-(2-甲氧基乙基)-3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(120 mg，0.40 mmol，1.0當量)及(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(81 mg，0.44 mmol，1.1當量)於DMF (5 mL) NMM (102 mg，1.01 mmol，2.5當量)中之攪拌溶液中添加，隨後在0℃下數份添加HATU (184 mg，0.48 mmol，1.2當量)。在0℃下攪拌所得混合物1 h。所得混合物經濃縮且藉由prep HPLC (管柱，C18；移動相，移動相：MeCN=5/1B：水流動速率：20 mL/min管柱：DAICEL CHIRALPAK IC，250*20 mm, 220 nm梯度：在20 min內50% B；220 nm)，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(140 mg，74.84%)。CHIRAL_HPLC：滯留時間9.904 min。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.20 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 7.98 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.40 (dd, J= 8.7, 6.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 1H), 7.19 (dq, J= 15.0, 7.4, 6.6 Hz, 2H), 6.90 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.94-4.85 (m, 2H), 4.57-4.37 (m, 2H), 4.37-4.10 (m, 4H), 4.00 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 3.77-3.51 (m, 3H), 3.16 (d, J= 3.9 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 464.2。實例1.43

合成(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物45)

根據針對化合物44所描述之步驟，使用(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸合成及純化標題化合物。將分離呈灰白色固體狀之(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮。CHIRAL_HPLC：滯留時間8.588 min。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.19 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 8.03-7.93 (m, 1H), 7.40 (tt, J= 6.3, 3.1 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 1H), 7.19 (dd, J= 12.1, 6.4 Hz, 2H), 6.95-6.85 (m, 1H), 4.94-4.85 (m, 2H), 4.58-4.37 (m, 2H), 4.36-4.15 (m, 4H), 3.98 (d, J= 9.8 Hz, 1H), 3.73-3.52 (m, 3H), 3.17 (d, J= 3.9 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 464.2。實例1.44

合成(R)-2-(2-氯苯基)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基丙-1-酮(化合物46)

遵循實例 1 . 13中所描述之步驟自(R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(100 mg，0.50 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑( 中間物 I - 7，167 mg，0.55 mmol，1.10當量)合成標題化合物。將分離呈白色固體狀之(R)-2-(2-氯苯基)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基丙-1-酮(113 mg)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.12 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.35-7.26 (m, 2H), 6.60 (tt, J = 54.6, 3.6 Hz, 1H), 4.99 - 4.85 (m, 2H), 4.78 (td, J = 15.0, 3.6 Hz, 2H), 4.55-4.27 (m, 4H), 4.02-3.93 (m, 1H), 3.62-3.54 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 486。實例1.46

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物47)

遵循步驟6、實例1.7中所描述之步驟由(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，211.45 mg，0.45 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色粉末狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(120.1 mg，53.13%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.81 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.18 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.23 (m, 2H), 5.32 - 5.17 (m, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.95 - 4.82 (m, 1H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 4.44 - 4.34 (m, 2H), 4.33 - 4.26 (m, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.57 (dd, J = 10.1, 5.0 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 504。實例1.47

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物48)

遵循步驟6、實例 1 . 7所描述之步驟自(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)及 中間物 I - 10(211.45 mg，0.45 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色粉末狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(121.3 mg，53.66%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.81 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.18 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.23 (m, 2H), 5.32 - 5.17 (m, 2H), 5.02 - 4.82 (m, 2H), 4.56 - 4.45 (m, 1H), 4.43 - 4.33 (m, 2H), 4.34 - 4.26 (m, 1H), 3.97 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.57 (dq, J = 10.0, 4.9 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 504。實例1.48

合成(2S,3R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮(化合物49)

遵循步驟6、實例 1 . 7中所描述之步驟自(2S,3R)-3-羥基-2-苯丁酸(50 mg，0.28 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，89 mg，0.28 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色粉末狀之(2S,3R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮(76.7 mg, 57%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.79 (s, 1H), 8.18 (d, J = 3.8 Hz, 2H), 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.22 (m, 3H), 5.24 (q, J = 8.9 Hz, 2H), 4.91 (dd, J = 24.0, 14.3 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 3H), 4.18 - 4.12 (m, 1H), 3.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 1.15 (d, J = 6.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.49

合成(2S,3S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮(化合物50)

遵循步驟6、實例 1 . 7中所描述之步驟自(2S,3R)-3-羥基-2-苯丁酸(50 mg，0.28 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，89 mg，0.28 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色粉末狀之(2S,3R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丁-1-酮(75.8 mg, 56%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.79 (t, J= 1.0 Hz, 1H), 8.24 - 8.14 (m, 2H), 7.45 - 7.36 (m, 2H), 7.34 - 7.21 (m, 3H), 5.24 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.91 (t, J= 13.5 Hz, 1H), 4.82 (dd, J= 5.4, 3.8 Hz, 1H), 4.58 - 4.33 (m, 3H), 4.32 - 4.19 (m, 1H), 3.70 (dd, J= 9.1, 2.2 Hz, 1H), 0.86 (d, J= 6.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.50

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(化合物51)

遵循步驟6、實例 1 . 16中所描述之步驟自(R)-(2-氟苯基)(羥基)乙酸(50 mg，0.29 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(89 mg，0.29 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-2-羥基乙酮(86.8 mg，65%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.22 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.47 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 7.01 - 6.96 (m, 1H), 6.40 (tt, J = 54.4, 3.9 Hz, 1H), 5.90 (dd, J = 20.8, 6.6 Hz, 1H), 5.56 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.66 (m, 3H), 4.57 - 4.40 (m, 2H), 4.36 - 4.20 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 456。實例1.51

合成(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮(化合物52)

遵循步驟3、實例 1 . 7中所描述之步驟自3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸鈉(化合物8，實例1.12，126 mg，0.54 mmol，1.00當量)及1-(2,2,2-三氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 10，172 mg，0.54 mmol，1.00當量)合成標題化合物。將分離呈白色固體狀之(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮(102.1 mg，37%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.78 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.70 (dd, J = 4.7, 1.5 Hz, 1H), 8.19 - 8.06 (m, 2H), 7.99 (ddd, J = 8.0, 3.9, 1.5 Hz, 1H), 7.49 (ddd, J = 7.8, 4.7, 2.6 Hz, 1H), 5.24 (dt, J = 9.3, 2.6 Hz, 4H), 5.13 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.51 (d, J = 9.7 Hz, 2H), 3.70 (d, J = 8.4 Hz, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 517。實例1.52

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物53)

步驟1

將(2,3-二氟苯基)氯化乙醯基(10.0 g，52.474 mmol，1當量)、THF (250 mL)之混合物置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。在-78℃下逐滴添加n-BuLi (4.37 g，68.216 mmol，1.3當量) 1小時，在-78℃下逐滴添加(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(7.44 g，41.979 mmol，0.8當量)且在-78℃下攪拌所得溶液2小時至室溫。反應隨後藉由添加200 mL水淬滅。用3×150 mL EtOAc萃取所得溶液且用1×200 ml鹽水洗滌所得混合物。使混合物經無水硫酸鈉乾燥且濃縮。將殘餘物施加至用EtOAc/PE (13/87)之矽膠管柱上。此產生6.4 g (36.81%)呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2,3-二氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 332。

步驟2

將(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2,3-二氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(6.4 g，19.317 mmol，1當量)於DCM中之攪拌冷卻(0℃)溶液置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，逐滴添加TiCl ₄(4.03 g，21.249 mmol，1.1當量)。攪拌所得黃色溶液約5 min (0℃)，其後逐滴添加DIEA (2.87 g，22.215 mmol，1.15當量)。在0℃下攪拌所得深紅-紫色混合物1 h，隨後添加(HCHO) ₃(1.91 g，21.249 mmol，1.1當量)及額外TiCl ₄(4.03 g，21.249 mmol，1.1當量)。所得混合物在0℃下再攪拌2小時且隨後藉由添加NH ₄Cl飽和水溶液(100 ml) (大致相等體積)淬滅且用額外DCM (3×100 ml)萃取。用飽和NaHCO ₃(200 ml)洗滌有機層，經無水Na ₂SO ₄乾燥且濃縮。此產生7.3g呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮) (粗物質)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 362。

步驟3

在0℃下將(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(7.3 g，20.202 mmol，1當量)、THF (64 mL)、H ₂O (16 mL)、H ₂O ₂(30%) (3.44 g，101.010 mmol，5.0當量)及LiOH.H ₂O (1.70 g，40.40 mmol，2.0當量)之混合物置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下攪拌所得溶液2小時。隨後藉由添加飽和Na ₂SO ₃(15 ml)及水(35 ml)淬滅反應物。用2M HCl將溶液之pH值調節至1。所得溶液用3×100 mL DCM/MeOH (10/1)萃取，經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/THF (1:4)溶離，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸(2.6 g，63.66%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 201。

步驟4

將(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸(100 mg，0.495 mmol，1當量)、DMF (2.00 mL)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑( 中間物 I - 7，225.04 mg，0.742 mmol，1.5當量)、DIEA (191.80 mg，1.485 mmol，3.0當量)、HATU (244.51 mg，0.643 mmol，1.3當量)之混合物置放於8 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得溶液2小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm；移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：ACN；流動速率：90 mL/min；梯度：在12 min內自20% B至55% B，55% B；波長：220 nm；RT1 (min)：12。此產生99.4 mg (41.23%)呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ): δ 8.71 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.35-7.31 (m, 1H), 7.21-7.16 (m, 2H), 6.37 (tt, J = 54.3, 3.5 Hz, 1H), 4.95-4.85 (m, 2H), 4.75-4.67 (m, 2H), 4.49-4.27 (m, 4H), 3.98 (m, 1H), 3.64-3.63 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 488。實例1.53

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物54)

步驟1

將(2,3-二氟苯基)氯化乙醯基(10.0 g，52.474 mmol，1當量)、THF (200 mL)之混合物置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。在-78℃下逐滴添加n-BuLi (27.29 mL，68.216 mmol，1.3當量) 1小時。在-78℃下逐滴添加(4S)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(7.44 g，41.979 mmol，0.8當量)。在-78℃至室溫下攪拌所得溶液2小時。反應隨後藉由添加200 mL水淬滅。用3×150 mL EtOAc萃取所得溶液。用鹽水(200 ml)洗滌所得混合物。混合物經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。在矽膠管柱上用EtOAc/PE (3/7)純化殘餘物。此產生10.3 g (59.24%)呈黃色油狀物之(S)-4-苯甲基-3-(2-(2,3-二氟苯基)乙醯基)㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 332。

步驟2

將(S)-4-苯甲基-3-(2-(2,3-二氟苯基)乙醯基)㗁唑啶-2-酮(5.0 g，15.091 mmol，1當量)於DCM中之攪拌冷卻(0℃)溶液置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中，逐滴添加TiCl ₄(3.15 g，16.6 mmol，1.1當量)。攪拌所得黃色溶液約5 min (0℃)，其後逐滴添加DIEA (2.24 g，17.3 mmol，1.15當量)。在0℃下攪拌所得深紅-紫色混合物1 h，隨後添加1,3,5-三㗁烷(1.50 g，16.6 mmol，1.1當量)及額外TiCl ₄(3.15 g，16.6 mmol，1.1當量)。所得混合物在0℃下再攪拌4小時且隨後藉由添加NH ₄Cl飽和水溶液(100 ml) (大致相等體積)淬滅且用額外DCM (3×100 ml)萃取。用飽和NaHCO ₃(200 ml)洗滌有機層，經無水Na ₂SO ₄乾燥且濃縮。此產生6.1 g (粗物質)呈黃色油狀物之(S)-4-苯甲基-3-((S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙醯基)㗁唑啶-2-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 362。

步驟3

在0℃下將(S)-4-苯甲基-3-((R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙醯基)㗁唑啶-2-酮(6.1 g，16.8 mmol，1當量)、THF (60 mL)、H ₂O (15 mL)、H ₂O ₂(9.57 mL，84.405 mmol，5當量)及LiOH (0.81 g，33.762 mmol，2.0當量)之混合物置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下攪拌所得溶液2小時。隨後藉由添加飽和Na ₂SO ₃(15 ml)及水(35 ml)淬滅反應物。用2M HCl將溶液之pH值調節至1。所得溶液用DCM/MeOH (10/1) (3×100 mL)萃取，經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/THF (1:4)溶離，得到呈灰白色固體狀之(R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸(2.3 g，67.40%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 201。

步驟4

將(2R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸(100 mg，0.495 mmol，1當量)、DMF (2.00 mL)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(150.03 mg，0.495 mmol，1.0當量)、DIEA (191.80 mg，1.485 mmol，3.0當量)、HATU (244.51 mg，0.643 mmol，1.3當量)之混合物置放於8 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得溶液2小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱，Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水(0.1% TFA)及ACN (在12 min內自20%相B達至55%)；偵測器，uv。獲得產物。此產生145.2 mg (60.22%)呈白色固體狀之(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.42-7.24 (m, 1H), 7.22-7.15 (m, 2H), 6.37 (tt, J = 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.25-4.83 (m, 2H), 4.79-4.65 (m, 2H), 4.54-4.23 (m, 4H), 4.05-3.94 (m, 1H), 3.71-3.59 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 488。實例1.54

合成(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物55)

步驟1

將(2-氯基-3-氟苯基)乙酸(30.00 g，159.09 mmol，1.00當量)、DMF (2.00 mL)及DCM (300.00 mL)添加至500 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將乙二醯氯(30.29 g，238.63 mmol，1.50當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物3 h。在減壓下濃縮所得混合物。此產生呈黃色油狀物之(2-氯基-3-氟苯基)乙醯氯(31.00 g，粗物質)。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ⁺m/z: 187。

步驟2

將(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(10.70 g，60.38 mmol，1.00當量)及THF (150.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在-78℃下將n-BuLi (2.5 M) (31.40 mL，78.50 mmol，1.30當量)逐滴添加至以上混合物中。在氮氣氛圍下於-78℃攪拌所得混合物1 h。在-78℃下將含(2-氯基-3-氟苯基)乙醯氯(15.00 g，72.46 mmol，1.20當量)之THF(20.00 mL)逐滴添加於以上混合物中。在-78℃下再攪拌所得混合物1 h。用飽和NH ₄Cl (水溶液)淬滅反應物。用EtOAc (3×150 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (9%)溶離，得到呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氯基-3-氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(8.00 g，38.10%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 348。

步驟3

將(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-氯基-3-氟苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(8.00 g，23.00 mmol，1.00當量)及DCM (80.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下逐滴添加TiCl ₄(2.77 mL，25.30 mmol，1.10當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液。在氮氣氛圍下在0℃下攪拌所得混合物5 min。在0℃下將DIEA (3.42 g，26.46 mmol，1.15當量)逐滴添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。在0℃下逐滴添加三㗁烷(2.28 g，25.30 mmol，1.10當量)於DCM (5.00 mL)中之溶液且在0℃下處理10 min。隨後在0℃下逐滴添加TiCl ₄(2.77 mL，25.30 mmol，1.10當量)於DCM (1.00 mL)中之混合物。在0℃下攪拌所得混合物2 h。藉由添加飽和NH ₄Cl (水溶液) (80.00 mL)來淬滅反應物。用DCM (3×150 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用飽和NaHCO ₃(100.00 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(8.20 g，粗產物)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 378。

步驟4

將(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(8.20 g，21.71 mmol，1.00當量)及THF (60.00 mL)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將含H ₂O ₂(30%) (3.70 mL，108.74 mmol，5.01當量)及LiOH (1.04 g，43.41 mmol，2.00當量)之H ₂O(15.00 mL)逐滴添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。用飽和Na ₂SO ₃(水溶液)淬滅反應物。用DCM (3×100 mL)萃取水層。收集水層且用2 M HCl酸化至pH 2。用DCM/MeOH (10:1) (10×150 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 μm；移動相、水(0.1% FA)及CAN (在11 min內自5%相B達至30%)；偵測器，254。此產生呈黃色油狀物之(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-3-羥丙酸(3.30 g，69.55%)。LCMS (ES) [M-1] ⁺m/z: 217。

步驟5

將(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-3-羥丙酸(100.00 mg，0.46 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(110.99 mg，0.37 mmol，0.80當量)、DMF (3.00 mL)及NMM (138.80 mg，1.37 mmol，3.00當量)添加於8 mL小瓶中。在0℃下將HATU (208.72 mg，0.55 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，Atlantis Prep T3 OBD管柱，19*150 mm 5 μm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：MeOH-HPLC；流動速率：20 mL/min；梯度：在7 min內自35% B至70% B；波長：220 nm。此產生呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(70.80 mg，30.72%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.12 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.44-7.24 (m, 3H), 6.42 (tt, J= 54.4, 3.6 Hz, 1H), 5.06-4.95 (m, 1H), 4.94-4.84 (m, 1H), 4.72 (td, J= 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.54-4.29 (m, 4H), 4.05-3.91 (m, 1H), 3.60 (dt, J= 10.0, 5.1 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 504。實例1.55

合成(2R)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物56)

根據步驟2-5中所描述之用於合成化合物55之步驟，藉由在步驟2中使(2-氯基-3-氟苯基)乙醯氯(步驟1)與(4S)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(10.70 g，60.38 mmol，1.00當量)反應來合成標題化合物。呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氯基-3-氟苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.12 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.44-7.23 (m, 3H), 6.65-6.18 (m, 1H), 5.00 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 4.92 (dd, J= 22.0, 13.9 Hz, 1H), 4.72 (td, J= 15.1, 3.6 Hz, 2H), 4.54-4.2 7 (m, 4H), 3.98 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 3.61 (dd, J= 10.1, 5.2 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M-1] ⁺m/z: 504。實例1.56

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-(1-異丙基吡唑-4-基磺醯基)-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物57)

步驟1

將4-吲哚吡唑(5.0 g，25.77 mmol，1.00當量)及DMF (50 mL)添加於100 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NaH (60%於礦物油中) (1.13 g，28.35 mmol，1.10當量)逐份添加至以上混合物中。在相同溫度下再攪拌所得混合物0.5 h，接著在0℃下逐滴添加2-碘丙烷(5.70 g，33.51 mmol，1.30當量)。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。反應物用水(50 mL)淬滅，用EtOAc (3×50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (1:3)溶離，得到呈淡黃色油狀物之4-碘-1-異丙基吡唑(6.0 g，98%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 237。

步驟2

將4-碘-1-異丙基吡唑(6.0 g，25.41 mmol，1.00當量)及甲苯(60 mL)、DIEA (9.86 g，76.25 mmol，3.00當量)、Pd ₂(dba) ₃(2.92 g，5.08 mmol，0.20當量)、XantPhos (1.47 g，2.54 mmol，0.10當量)、苯甲基硫醇(6.31 g，50.83 mmol，2.00當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在氮氣氛圍下於100℃攪拌所得混合物12 h。將所得混合物冷卻至室溫且在真空下濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，得到呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-異丙基吡唑(5.2 g，88%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 233。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-異丙基吡唑(5.2 g，22.38 mmol，1.00當量)、HOAc (90 mL)、H ₂O (10 mL)及NCS(8.97 g，67.14 mmol，3.00當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。在真空下濃縮反應混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，得到呈淡黃色油狀物之1-異丙基吡唑-4-磺醯氯(3.2 g，69%)。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 189。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.21 g，15.33 mmol，1.00當量)及THF (30 mL)添加至100 mL 3頸圓底燒瓶中。將反應物冷卻至0℃，將NaH (60%於礦物油中) (0.66 g，16.87 mmol，1.10當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物0.5 h。將1-異丙基吡唑-4-磺醯氯(3.2 g，15.34 mmol，1.00當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。反應物用水(20 mL)淬滅，用EtOAc (3×50 mL)萃取，經無水Na ₂SO ₃乾燥。過濾且濃縮濾液，殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，獲得粗產物。粗產物自EtOAc/己烷(1:10)再結晶，得到呈白色固體狀之2-(1-異丙基吡唑-4-基磺醯基)-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(400 mg，7%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 382。

步驟5

將2-(1-異丙基吡唑-4-基磺醯基)-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(400 mg，1.04 mmol，1.00當量)及DCM (10 mL)、2,6-二甲基吡啶(450 mg，4.19 mmol，4.00當量)添加至50 mL 3頸圓底燒瓶中。將反應混合物冷卻至0℃，在0℃下將TMSOTf (700 mg，3.14 mmol，3.00當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。用水(20 mL)淬滅反應物，過濾，在紅外燈下乾燥濾餅4 h，得到呈白色固體狀之1-異丙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(270 mg，92%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 282。

步驟6

將1-異丙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(270 mg，0.96 mmol，1.00當量)及DMF (3 mL)、NMM (291.22 mg，2.88 mmol，3當量)、(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(176.75 mg，0.96 mmol，1當量)添加至20 mL小瓶中。將反應物冷卻至0℃。將HATU (438 mg，1.15 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm，10 nm，移動相，水(0.1% FA)及CH ₃CN (在7 min內自33% CH ₃CN達至70%)，偵測器，UV 254 nm，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-[2-(1-異丙基吡唑-4-基磺醯基)-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(105.6 mg, 25%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.70 (s, 1H), 8.15 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.01 (d, J= 1.0 Hz, 1H), 7.40 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.30 (dd, J= 7.8, 5.9 Hz, 1H), 7.26-7.11 (m, 2H), 4.99-4.81 (m, 2H), 4.57 (dd, J= 13.5, 6.8 Hz, 1H), 4.54-4.15 (m, 4H), 4.07-3.92 (m, 1H), 3.61 (dt, J= 10.3, 5.4 Hz, 1H), 1.40 (d, J= 6.6 Hz, 6H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 448。實例1.57

合成(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮(化合物58)及(R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮(化合物59)

步驟1

將4-碘-1H-吡唑(2.0 g，10.31 mmol，1.00當量)、1,1,1-三氟-3-碘丙烷(3.46 g，15.46 mmol，1.50當量)、K ₂CO ₃(2.84 g，20.62 mmol，2當量)、DMF (30.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液5小時。將所得溶液用EtOAc (3×50 mL)萃取且合併有機層且經無水Na ₂SO ₃乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至矽膠管柱上用THF/PE (1:4)溶離。此產生1.4 g (46.82%)呈灰白色固體狀之4-碘-1-(3,3,3-三氟丙基)-1-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 291。

步驟2

將4-碘-1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑(2.25 g，7.77 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(1.93 g，15.53 mmol，2.00當量)、XantPhos (0.45 g，0.77 mmol，0.1當量)、Pd ₂(dba) ₃(1.42 g，1.55 mmol，0.2當量)、DIEA (2.01 g，15.54 mmol，2當量)、二㗁烷(30.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。在100℃下攪拌所得溶液18小時。冷卻反應混合物至室溫。將殘餘物用THF/PE (1:3)施加至矽膠管柱上。此產生1.5 g (67.87%)呈淡黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 287。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑(1.50 g，5.24 mmol，1.00當量)、NCS (2.09 g，15.72 mmol，3.00當量)、HOAc (27.00 mL)、H ₂O (3.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液6小時。將所得溶液用DCM (3×30 mL)萃取且合併有機層且經無水Na ₂SO ₃乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至用EtOAc/PE (1:3)之矽膠管柱上。此產生800 mg (58.39%)呈淡黃色油狀物之1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-磺醯氯。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(500.00 mg，2.39 mmol，1.0當量)、NaH (143.54 mg，1.50當量)、THF (20.00 mL)、1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-磺醯氯(626.79 mg,2.39 mmol，1.0當量)逐份置放於100 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液4小時。反應隨後藉由添加水來淬滅。將所得溶液用DCM (3×30 mL)萃取且合併有機層且經無水Na ₂SO ₃乾燥且在真空下濃縮。將殘餘物施加至用EtOAc/PE (1:3)之矽膠管柱上。此產生750 mg (65.68%)呈灰白色固體狀之2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 436。

步驟5

將2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-甲酸三級丁酯(843 mg，1.94 mmol，1.00當量)、TMSOTf (1.30 g，5.849 mmol，3.01當量)、2,6-二甲基吡啶(834.07 mg，7.784 mmol，4.00當量)置放於100 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液4小時。隨後藉由添加水(30 mL)來淬滅反應物。在真空下濃縮所得混合物。用H ₂O (5×30 mL)洗滌所得混合物。藉由過濾來收集固體。此產生330 mg (50.84%)呈白色固體狀之2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 336。

步驟6

將2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(150.00 mg，0.44 mmol，1.00當量)、(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(98.86 mg，0.54 mmol，1.20當量)、HATU (255.22 mg，0.67 mmol，1.5當量)、DIEA (115.52 mg，0.895 mmol，2當量)、DMF (10.00 mL)置放於50 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液4小時。用3×30 mL DCM萃取所得溶液，且合併有機層，且經無水Na ₂SO ₄乾燥，且在真空下濃縮。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：90 mL/min；梯度：在12 min內自15% B至50% B，50% B；波長：220 nm；RT1 (12 min)：此產生140 mg (62.50%)呈白色固體狀之(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.75 (s, 1H), 8.15 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.06 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.25 - 7.11 (m, 2H), 4.95 - 4.82 (m, 2H), 4.52-4.23 (m, 6H), 4.04-3.95 (m, 1H), 3.65-3.57 (m, 1H), 2.98-2.84(m, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 502。

步驟7

將2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(150.00 mg，0.44 mmol，1.00當量)、(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(98.86 mg，0.54 mmol，1.20當量)、HATU (255.22 mg，0.67 mmol，1.5當量)、DIEA (115.52 mg，0.895 mmol，2當量)、DMF (10.00 mL)置放於50 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液4小時。用DCM (3×30 mL) 萃取所得溶液，且合併有機層，且經無水硫酸鈉乾燥，且在真空下濃縮。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10nm；移動相A：水(0.1%FA)，移動相B：ACN；流動速率：90 mL/min；梯度：在15 min內自15% B至50% B，50% B；波長：220 nm；RT1 (15 min)：此產生120 mg (53.57%)呈白色固體狀之(R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-(2-((1-(3,3,3-三氟丙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.74 (s, 1H), 8.14 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 8.05 (d, J= 3.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.25 - 7.11 (m, 2H), 4.95 - 4.82 (m, 2H), 4.52-4.23 (m, 6H), 4.04-3.95 (m, 1H), 3.65-3.57 (m, 1H), 2.98-2.84(m, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 502。實例1.58

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物60)及(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物61)

根據合成化合物58及59 步驟 1 - 7中所描述之步驟，在步驟1中使用2-溴乙基甲基醚代替1,1,1-三氟-3-碘丙烷來合成標題化合物。獲得呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.61 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.39 (dd, J= 7.9 Hz, 7.9 Hz 1H), 7.34-7.26 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.0, 7.6 Hz, 2H), 4.97-4.80 (m, 2H), 4.50-4.37 (m, 2H), 4.36-4.23 (m, 4H), 3.99 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.68 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.65-3.51 (m, 1H), 3.18 (d, J= 1.7 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 464。

類似地，獲得呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2-甲氧基乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.61 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.39 (dd, J= 7.9 Hz, 7.9 Hz 1H), 7.34-7.26 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 9.0, 7.6 Hz, 2H), 4.97-4.80 (m, 2H), 4.50-4.37 (m, 2H), 4.36-4.23 (m, 4H), 3.99 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.68 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 3.65-3.51 (m, 1H), 3.18 (d, J= 1.7 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 464。實例1.59

合成(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物62)

在室溫下於氮氣氛圍中將TCFH (140 mg，0.50 mmol，2.00當量)逐份添加至(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(55 mg，0.30 mmol，1.20當量)、NMI (61 mg，0.75 mmol，3.00當量)及3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(步驟5，實例 1 . 78)，80 mg，0.25 mmol，1.00當量)於CH ₃CN (2 mL)中之攪拌溶液中。在室溫下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物2 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm，10 nm，移動相，CH ₃CN/H ₂O (FA: 0.1%)，在12 min內自5%至48%，流動速率，80 mL/min，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份冷凍乾燥以得到呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(93 mg，76.6%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.23 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.40 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 1H), 7.25 - 7.12 (m, 2H), 7.02 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 5.45 - 5.26 (m, 2H), 5.01 - 4.80 (m, 2H), 4.61 - 4.39 (m, 2H), 4.39 - 4.19 (m, 2H), 4.11 - 3.89 (m, 1H), 3.80 - 3.47 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 488。實例1.60

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮(化合物63)

將(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(80.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)、3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(步驟5，實例 1 . 78)，128.11 mg，0.39 mmol，1.00當量)、NMM (80.67 mg，0.79 mmol，2.00當量)、DMF (5.00 mL)置放於20 mL小瓶中。接著在0℃下逐份添加HATU (181.95 mg，0.49 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。粗產物(300 mg)藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm 5 μm 10 nm；移動相，水(0.1%NH ₃.H ₂O)及ACN (在15 min內自15%相B達至70%)；偵測器，254。此產生112 mg (55.74%)呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.24 (s, 1H), 8.15 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.53 - 7.40 (m, 2H), 7.32 (q, J = 5.6, 4.7 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.33 (q, J = 9.0 Hz, 2H), 4.98 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.98 - 4.83 (m, 1H), 4.41 (dtt, J = 28.4, 13.4, 8.0 Hz, 4H), 3.97 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.58 (dq, J = 10.0, 5.0 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 504。實例1.61

合成3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶(化合物64)

將2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(170 mg，0.56 mmol，1.00當量)及DMF (3 mL)、3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸(120 mg，0.56 mmol，1.00當量)、NMM (170 mg，1.68 mmol，3.00當量)添加於20 mL小瓶中。將反應物冷卻至0℃，將HATU (256 mg，0.67 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC在以下條件下純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：15 min內自15% B至50% B，波長：UV 220 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶(104.1 mg，37%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.70 (dq, J= 4.7, 1.7 Hz, 1H), 8.28-7.95 (m, 1H), 8.22-7.80 (m, 2H), 7.49 (dtd, J= 6.6, 4.8, 1.8 Hz, 1H), 6.96 (t, J= 2.2 Hz, 1H), 6.73-6.03 (m, 1H), 5.18 (ddd, J= 28.4, 6.2, 2.8 Hz, 4H), 4.77 (tt, J= 15.3, 2.5 Hz, 2H), 4.74-4.34 (m, 2H), 3.71 (d, J= 4.5 Hz, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 499。實例1.62

合成(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮(實例65)

將2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(161 mg，0.50 mmol，1.20當量)、DMF (4.00 mL)、3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸(100 mg，0.42 mmol，1.00當量)、NMI (107 mg，1.25 mmol，3.00當量)置放於8 mL小瓶中。接著在0℃下在攪拌下添加TCFH (238 mg，0.83 mmol，2.00當量)。另外，在0℃下攪拌所得溶液1 h且藉由Prep-HPLC使用此等條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm，10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：在12 min內自20% B至55% B，偵測器，UV 220 nm。此產生118 mg呈白色固體狀之(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.71-8.68 (m, 1H), 8.20-8.12 (m, 2H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.52 (dt, J= 8.1, 5.1 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 5.37 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 5.24 (dd, J= 6.0, 3.9 Hz, 2H), 5.14 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.50 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.72 (d, J= 4.8 Hz, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 517。實例1.63

合成(2S)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮(化合物66)及(2R)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮(化合物67)

步驟1

在室溫下將甲吡唑(20 g，243.59 mmol，1.00當量)；DMF(200 mL)及NIS (57.54 g，255.77 mmol，1.05當量)添加至500 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物4 h。在室溫下用水淬滅反應物。用EtOAc (3×200 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，得到呈黃色油狀物之3-碘-4-甲基-1-吡唑(20 g，39.47%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 209。

步驟2

在室溫下將3-碘-4-甲基-1H-吡唑(10 g，48.08 mmol，1.00當量)；DMF (150 mL)；2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(13.95 g，60.10 mmol，1.25當量)及Cs ₂CO ₃(31.33 g，96.15 mmol，2當量)添加至500 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物3 h。在室溫下用水淬滅反應物。用EtOAc (3×200 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (8:1)溶離，得到呈黃色油狀物之3-碘-4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(12 g，86.06%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 291。

步驟3

在室溫下將3-碘-4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(11 g，37.927 mmol，1.00當量)；DIEA (14.71 g，113.781 mmol，3當量)；XantPhos (4.39 g，7.585 mmol，0.2當量)及Pd ₂(dba) ₃CHCl ₃(3.93 g，3.79 mmol，0.1當量)添加至500 mL 3頸圓底燒瓶中。在氮氣氛圍下在室溫下，向經攪拌之混合物中逐滴添加苯甲基硫醇(14.13 g，113.78 mmol，3當量)。在氮氣氛圍下於100℃攪拌所得混合物16 h。在減壓下濃縮所得混合物。在矽膠管柱上純化殘餘物，用PE/EA (10:1)溶離，得到呈橙色油狀物之3-(苯甲基硫基)-4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(9 g，82.88%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 287。

步驟4

在0℃下將3-(苯甲基硫基)-4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(8.5 g，29.69 mmol，1.00當量)；HOAc (77 mL)；H ₂O (8.5 mL)及NCS (15.86 g，118.75 mmol，4當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (8:1)溶離，得到呈黃色油狀物之4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-磺醯氯(7 g，89.78%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 263。

步驟5

在室溫下將4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-磺醯氯(8.53 g，32.50 mmol，1.0當量)及THF (100 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NaH (0.94 g，39.00 mmol，1.2當量)添加至以上混合物中。所得混合物在0℃下再攪拌30 min。在0℃下將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(6.8 g，32.50 mmol，1.00當量)添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物2 h。在室溫下用水淬滅反應物。用EtOAc (3×150 ml)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×150 ml)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物自己烷/EtOAc (5:1，100 ml)再結晶，得到呈淡黃色固體狀之2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(9 g，63.60%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 436。

步驟6

在室溫下將2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(9 g，20.67 mmol，1.00當量)；DCM (100 mL)及2,6-二甲基吡啶(8.86 g，82.68 mmol，4當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在0℃下將TMSOTf (13.78 g，62.01 mmol，3當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物3 h。在室溫下用MeOH淬滅反應物。在減壓下濃縮所得混合物。粗產物自己烷/EtOAc (1:1，100 ml)再結晶，得到呈白色固體狀之4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑；三氟甲磺酸(9 g，89.71%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 336。

步驟7

將(S)-托品酸(68 mg，0.41 mmol，1當量)；DMF (5 mL)；4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑；三氟甲磺酸(200 mg，0.41 mmol，1.00當量)及NMM (83 mg，0.82 mmol，2當量)添加至40 mL小瓶中。在0℃下將HATU (188 mg，0.49 mmol，1.2當量)添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-003)純化：管柱，SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 μm；移動相、水(0.1% FA)及ACN (在7 min內自30% ACN達至74%)。此產生呈白色固體狀之(2S)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮(131 mg，65.76%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.22 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.94 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.40 - 7.20 (m, 5H), 5.26 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.96 - 4.76 (m, 2H), 4.56 - 4.26 (m, 3H), 4.07 - 3.92 (m, 2H), 3.61 - 3.45 (m, 1H), 2.20 (t, J= 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 483。

步驟8

將(R)-托品酸(68 mg，0.412 mmol，1.0當量)、DMF (5 ml)及NMM (83 mg，0.82 mmol，2當量)添加至40 ml小瓶中。在0℃下將HATU (188 mg，0.49 mmol，1.2當量)添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-003)純化：管柱，SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 μm；移動相，水(0.1% FA)及ACN (在7 min內自30% ACN達至74%)；此產生呈白色固體狀之(2R)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-苯基丙-1-酮(122.6 mg，61.54%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.22 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.40 - 7.19 (m, 5H), 5.26 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.96 - 4.76 (m, 2H), 4.56 - 4.26 (m, 3H), 4.07 - 3.92 (m, 2H), 3.59 - 3.49 (m, 1H), 2.20 (t, J= 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 483。實例1.64

(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物68)及(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物69)

根據步驟7，實例 1 . 63中所描述之步驟，藉由使步驟6，實例 1 . 63中之4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑與(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸或(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸反應，得到呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(58.37%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.23 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.46 - 7.35 (m, 1H), 7.35 - 7.26 (m, 1H), 7.26 - 7.11 (m, 2H), 5.27 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.99 - 4.82 (m, 2H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 4.37 - 4.21 (m, 2H), 4.06 - 3.92 (m, 1H), 3.60 (dq, J= 10.3, 5.3 Hz, 1H), 2.20 (d, J= 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 502。

亦分離呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(61.08%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.23 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.46 - 7.34 (m, 1H), 7.38 - 7.25 (m, 1H), 7.31 - 7.11 (m, 2H), 5.27 (q, J= 9.0 Hz, 2H), 4.99 - 4.82 (m, 2H), 4.57 - 4.37 (m, 2H), 4.37 - 4.21 (m, 2H), 4.07 - 3.92 (m, 1H), 3.60 (dq, J= 10.5, 5.3 Hz, 1H), 2.20 (d, J= 1.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 502。實例1.65

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物70)及(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物71)

根據步驟7，實例 1 . 63中所描述之步驟，藉由使步驟6，實例 1 . 63中之4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑與(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸或(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸反應，得到呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(52.24%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.23 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 2H), 7.37 - 7.23 (m, 2H), 5.27 (q, J = 9.0 Hz, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.94 - 4.84 (m, 1H), 4.58 - 4.24 (m, 4H), 4.02 - 3.93 (m, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 1H), 2.20 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 518。亦分離呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥基-1-{2-[4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-yl}丙-1-酮(56.65%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.23 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 2H), 7.31 (ddt, J = 6.3, 4.3, 2.1 Hz, 2H), 5.27 (q, J = 9.0 Hz, 2H), 5.03 - 4.83 (m, 2H), 4.58 - 4.24 (m, 4H), 3.97 (q, J = 7.8, 6.5 Hz, 1H), 3.57 (dq, J = 10.1, 4.9 Hz, 1H), 2.20 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 518。實例1.66

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物72)

遵循步驟5，實例1.16中所描述之步驟自(S)-(2-氟苯基)(羥基)乙酸(66 mg，0.40 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 16，120 mg，0.40 mmol，1.00當量)合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(87.3 mg，48.87%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (s, 1H), 8.06 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.18 (m, 5H), 6.97 (t, J= 2.0 Hz, 1H), 6.39 (tt, J = 54.6, 3.4 Hz, 1H), 5.02 - 4.65 (m, 4H), 4.54 - 4.28 (m, 3H), 4.03 - 3.96 (m, 2H), 3.58 - 3.50 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 452。實例1.67

合成(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物73)及(2R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物74)

在室溫下將T3P (297.11 mg，0.934 mmol，1.5當量)及DIEA (160.91 mg，1.246 mmol，2當量)逐滴添加至4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(200 mg，0.623 mmol，1.00當量)及(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸(151.01 mg，0.748 mmol，1.2當量)於DMF中之攪拌混合物中。用CH ₂Cl ₂(3×20 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(藉由掌性Prep-HPLC，使用以下條件(Prep-HPLC-003)純化：管柱，SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5µm 10nm；移動相，水(0.1%FA)及ACN (在7 min內自35% ACN達至80%)純化，得到呈白色固體狀之(2S)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(58 mg，18.43%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.81 (s, 1H), 8.22 - 8.16 (m, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.24 - 7.16 (m, 2H), 5.25 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 4.91 (dd, J= 27.3, 14.0 Hz, 2H), 4.55 - 4.23 (m, 4H), 3.99 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 3.63 (dd, J= 10.5, 5.7 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 506。

使用上文所描述之相同條件自(2R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥丙酸合成呈白色固體狀之(2R)-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(94.2 mg，29.94%)且分離。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.81 (s, 1H), 8.23 - 8.16 (m, 2H), 7.33 (ddq, J= 8.9, 6.6, 4.5, 3.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.13 (m, 2H), 5.25 (q, J= 8.9 Hz, 2H), 5.00 - 4.83 (m, 2H), 4.55 - 4.25 (m, 4H), 3.99 (dt, J= 10.3, 6.6 Hz, 1H), 3.64 (dq, J= 11.0, 5.6 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 506。實例1.68

合成(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮(化合物75)

將2-((4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(285 mg，0.85 mmol，2.00當量)、DMF (4.00 mL)、3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸鈉(化合物8，實例1.12，100 mg，0.43 mmol，1.00當量)、NMI (232 mg，1.28 mmol，3.00當量)置放於8 mL小瓶中。接著在0℃下在攪拌下添加TCFH (238 mg，0.85 mmol，2.00當量)。添加之後，在0℃下攪拌所得溶液1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用此等條件純化：SunFire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm，移動相A：水(0.1% FA)，移動相B：CH ₃CN，流動速率：90 mL/min，梯度：在12 min內自25% B至60% B，偵測器，UV 220 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，此產生80 mg呈白色固體狀之(3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-基)(2-((4-甲基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)甲酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.71-8.69 (m, 1H), 8.19 (d, J= 28.4 Hz, 1H), 8.01-7.97 (m, 1H), 7.93 (t, J= 1.2 Hz, 1H), 7.51-7.47 (m, 1H), 5.29 - 5.22 (m, 4H), 5.14 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 4.53 (d, J= 10.8 Hz, 2H), 3.73 (d, J= 13.6 Hz, 2H), 2.18 (d, J= 3.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 531。實例1.69

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物76)

步驟1

將甲吡唑(25.00 g，304.49 mmol，1.00當量)及DMF (370.00 mL)添加至500 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NIS (71.93 g，319.71 mmol，1.05當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物2 h。用水/冰(300 mL)稀釋所得混合物。用EA (3×250 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×300 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (11%)溶離，得到呈白色固體狀之3-碘-4-甲基-1H-吡唑(18.00 g，28.42%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 209。

步驟2

將3-碘-4-甲基-1H-吡唑(11.70 g，56.25 mmol，1.00當量)及DMF (120.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NaH (2.02 g，84.37 mmol，1.50當量)逐份添加至以上混合物中。在氮氣氛圍下在0℃下攪拌所得混合物30 min。在0℃下將1,1-二氟-2-碘乙烷(16.20 g，84.37 mmol，1.50當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得溶液隔夜。用水/冰淬滅反應物。用EA (3×150 ml)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×200 ml)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (4%)溶離。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，掌性ART纖維素-SB，5*25 cm，5 µm；移動相A：CO ₂，移動相B：IPA；流動速率：160 mL/min；梯度：等度15% B；管柱溫度(℃)：35；背壓(巴)：100；波長：220 nm；RT1 (min)：3.53；RT ₂(min)：4.38；樣品溶劑：IPA:ACN=1:1；注射體積：2.5 mL。此產生呈無色液體狀之1-(2,2-二氟乙基)-3-碘-4-甲基吡唑(9.50 g，62.08%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 273。

步驟3

將1-(2,2-二氟乙基)-3-碘-4-甲基吡唑(9.50 g，34.922 mmol，1.00當量)、DIEA (13.54 g，104.77 mmol，3.00當量)、XantPhos (4.04 g，6.98 mmol，0.20當量)、Pd ₂(dba) ₃(3.20 g，3.49 mmol，0.10當量)、甲苯(100.00 mL)及苯甲基硫醇(8.67 g，69.84 mmol，2.00當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在100℃下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物隔夜。使混合物冷卻至室溫。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (2%)溶離，得到呈黃色液體狀之3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑(8.20 g，87.51%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 269。

步驟4

將3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑(8.10 g，30.19 mmol，1.00當量)、NCS (12.09 g，90.56 mmol，3.00當量)、HOAc (90.00 mL)及H ₂O (10.00 mL)添加至250 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (13%)溶離，得到呈淡黃色液體狀之1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-磺醯氯(6.10 g，82.60%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 245。

步驟5

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(4.67 g，22.32 mmol，1.00當量)及THF (70.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下在氮氣氛圍下向攪拌溶液中逐份添加NaH (0.80 g，33.48 mmol，1.50當量)。在0℃下將含1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-磺醯氯(6.01 g，24.55 mmol，1.10當量)之THF (20.00 mL)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物2 h。在0℃下藉由添加HOAc (2 mL)來淬滅反應物。用飽和NH ₄Cl (水溶液) (50 mL)稀釋所得混合物。用CH ₂Cl ₂(3×100 mL)萃取水層，且合併有機層，且經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (25%)溶離。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，掌性ART直鏈澱粉-C NEO，3*25 cm，5 µm；移動相A：CO ₂，移動相B：MeOH製備型；流動速率：75 mL/min；梯度：等度15% B；管柱溫度：35℃；背壓(巴)：100；波長：220 nm；RT ₁(min)：3.3；RT ₂(min)：4；樣品溶劑：MeOH-HPLC；注射體積：2 mL。此產生呈灰白色固體狀之2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.60 g，38.64%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 418。

步驟6

將2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.50 g，8.39 mmol，1.00當量)、2,6-二甲基吡啶(3.59 g，33.54 mmol，4.00當量)及DCM (30.00 mL)添加至100 mL圓底燒瓶中。在0℃下將TMSOTf (5.59 g，25.16 mmol，3.00當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。在減壓下濃縮所得混合物。過濾所得混合物，用DCM (2×10 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾餅。此產生呈灰白色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(2.20 g，82.69%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 318。

步驟7

將(S)-托品酸(64.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(134.43 mg，0.42 mmol，1.10當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (77.91 mg，0.77 mmol，2.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (175.73 mg，0.46 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250mm 5 μm 10nm；移動相、水(0.05% NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在12 min內自15%相B達至50%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(134.80 mg，75.19%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.20 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.45-7.20 (m, 5H), 6.37 (tt, J= 54.3, 3.5 Hz, 1H), 4.97-4.60 (m, 4H), 4.55-4.27 (m, 3H), 4.06-3.93 (m, 2H), 3.61-3.47 (m, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.70

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物77)

根據步驟7中針對使用(R)-托品酸(64.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(134.43 mg，0.42 mmol，1.10當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(162.60 mg，90.70%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.20 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.43-7.18 (m, 5H), 6.37 (tt, J= 54.3, 3.5 Hz, 1H), 4.97-4.62 (m, 4H), 4.55-4.27 (m, 3H), 4.07-3.91 (m, 2H), 3.64-3.44 (m, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.71

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物78)

根據步驟7中針對使用(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(72.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(136.46 mg，0.43 mmol，1.10當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(134.30 mg，71.05%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.40 (ddd, J= 9.4, 6.7, 1.8 Hz, 1H), 7.31 (ddd, J= 7.7, 5.2, 2.1 Hz, 1H), 7.25-7.11 (m, 2H), 6.37 (tt, J= 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.02-4.83 (m, 2H), 4.71 (td, J= 15.4, 3.5 Hz, 2H), 4.57-4.21 (m, 4H), 4.07-3.91 (m, 1H), 3.60 (dq, J= 10.5, 5.3 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.72

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物79)

根據步驟7中針對使用(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(72.00 mg，0.39 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(136.46 mg，0.43 mmol，1.10當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(134.90 mg，71.37%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.40 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.30 (dd, J= 7.9, 5.7 Hz, 1H), 7.26-7.14 (m, 2H), 6.62-6.15 (m, 1H), 4.98-4.81 (m, 2H), 4.71 (td, J= 15.4, 3.5 Hz, 2H), 4.56-4.38 (m, 2H), 4.36-4.21 (m, 2H), 4.08-3.93 (m, 1H), 3.68-3.54 (m, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.73

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮(化合物80)

根據步驟7中針對使用(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(157 mg，0.50 mmol，1.10當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈灰白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-1H-吡唑-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基丙-1-酮(161 mg，71.79%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.22 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 2H), 7.30 (dtd, J = 7.5, 6.0, 5.1, 3.7 Hz, 2H), 6.37 (tt, J = 54.4, 3.5 Hz, 1H), 4.98 (t, J = 4.6 Hz, 1H), 4.99 - 4.83 (m, 1H), 4.71 (td, J = 15.4, 3.5 Hz, 2H), 4.58 - 4.39 (m, 2H), 4.39 (s, 1H), 4.31 (dd, J = 13.9, 9.8 Hz, 1H), 4.02 - 3.92 (m, 1H), 3.57 (dq, J = 10.0, 5.0 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 500。實例1.74

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物81)

根據步驟7中針對使用(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(142.35 mg，0.45 mmol，1.00當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈灰白色固體狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(122.6 mg，54.67%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.46 (dddd, J = 10.3, 9.1, 4.6, 2.8 Hz, 2H), 7.31 (ddt, J = 6.2, 4.1, 2.1 Hz, 2H), 6.37 (tt, J = 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.03 - 4.83 (m, 2H), 4.71 (td, J = 15.4, 3.5 Hz, 2H), 4.58 - 4.24 (m, 4H), 4.02 - 3.91 (m, 1H), 3.57 (dq, J = 9.8, 4.9 Hz, 1H), 2.19 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 500。實例1.75

合成3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶(化合物82)

根據步驟7中針對使用1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(130.00 mg，0.41 mmol，1.00當量)及3-(3-氯吡啶-2-基)氧雜環丁烷-3-甲酸鈉(96.52 mg，0.41 mmol，1.00當量)合成化合物76所描述之步驟，得到呈灰白色固體狀之3-氯基-2-(3-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-4-甲基吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-羰基}氧雜環丁烷-3-基)吡啶(94.6 mg, 45.02%)來合成標題化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.70 (dt, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 21.2 Hz, 1H), 7.99 (ddd, J = 8.1, 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.49 (dt, J = 8.0, 4.7 Hz, 1H), 6.37 (tt, J = 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.23 (dd, J = 6.0, 2.8 Hz, 2H), 5.13 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.70 (td, J = 15.4, 3.5 Hz, 2H), 4.51 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.71 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 2.17 (d, J = 2.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 513。實例1.76

合成(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物83)

將(S)-托品酸(70 mg，0.42 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)、4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑( 中間物 I - 10，135 mg，0.42 mmol，1當量)、NMM (85 mg，0.84 mmol，2當量)置放於50 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加HATU (192 mg，0.51 mmol，1.2當量)。在25℃下攪拌所得溶液1小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv。254 nm。此產生呈白色固體狀之(2S)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(117 mg，59.17%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.78 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 4H), 7.24 (dt, J = 8.6, 4.3 Hz, 1H), 5.23 (q, J = 9.0 Hz, 2H), 5.01 - 4.71 (m, 2H), 4.53 - 4.27 (m, 3H), 4.02 - 3.88 (m, 2H), 3.57 - 3.50 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 470。實例1.77

合成(2R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(化合物84)

將(R)-托品酸(60 mg，0.36 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)、4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑( 中間物 I - 10，116 mg，0.36 mmol，1當量)、NMM (73 mg，0.72 mmol，2當量)置放於50 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加HATU (165 mg，0.43 mmol，1.2當量)。在25℃下攪拌所得溶液1小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv。254 nm。此產生呈白色固體狀之(2R)-3-羥基-2-苯基-1-{2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}丙-1-酮(106.4 mg，62.77%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.78 (d, J= 2.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J= 6.2 Hz, 2H), 7.45 - 7.28 (m, 4H), 7.27-7.20(m, 1H), 5.23 (qd, J= 8.9, 2.2 Hz, 2H), 4.96 - 4.71 (m, 2H), 4.53 - 4.27 (m, 3H), 4.05 - 3.93 (m, 2H), 3.58 - 3.46 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 470。實例1.78

合成(2R)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮及(2S)-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙烯酮(化合物85及86)

步驟1

在0℃下在氮氣氛圍下將2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(15.2 g，65.32 mmol，1.20當量)逐滴添加至3-溴基-1H-吡唑(8.0 g，54.43 mmol，1.00當量)及K ₂CO ₃(15.0 g，108.86 mmol，2.00當量)於DMF (160.00 mL)中之攪拌溶液中。在室溫下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物6 h。在室溫下用水(200 mL)淬滅反應物，用EtOAc (3×200 mL)萃取。合併之有機層用水(200 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/THF (10:1)溶離，得到呈黃色油狀物之3-溴基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(8.1 g，65%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 229。

步驟2

將Xantphos (2.02 g，3.49 mmol，0.20當量)、Pd ₂(dba) ₃(1.60 g，1.75 mmol，0.10當量)及苯甲基硫醇(4.34 g，34.93 mmol，2.00當量)添加至3-溴基-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(4.00 g，17.47 mmol，1.00當量)及DIEA (6.77 g，52.40 mmol，3.00當量)於甲苯(80.00 mL)中之溶液中。在110℃下在氮氣氛圍下攪拌混合物2天。將所得混合物冷卻至室溫，在減壓下濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EtOAc (4:1)溶離，得到呈黃色油狀物之3-(苯甲基硫基)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(2.8 g，59%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 273。

步驟3

在0℃下在空氣氛圍下，將NCS (7.36 g，55.12 mmol，3.00當量)逐份添加至3-(苯甲基硫基)-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(5.00 g，18.36 mmol，1.00當量)於HOAc (45.00 mL)及H ₂O (5.00 mL)中之攪拌溶液中。在室溫下在空氣氛圍下攪拌所得混合物1 h。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EtOAc (4:1)溶離，得到呈黃色油狀物之1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-磺醯氯(4.1 g, 90%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 249。

步驟4

在0℃下將氫化鈉(60%於礦物油中，0.77 g，32.18 mmol，2.00當量)添加至2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.70 g，17.70 mmol，1.10當量)於THF (80.00 mL)中之溶液中。將混合物攪拌30 min。添加含1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-磺醯氯(4.00 g，16.09 mmol，1.00當量)之THF (20.00 mL)，且將混合物升溫至室溫且攪拌2 h。反應混合物藉由水(100 mL)淬滅，用EtOAc (3×100 mL)萃取。合併之有機層用水(100 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。使殘餘物在混合溶劑PE/EA (10:1)中再結晶，得到呈白色固體狀之2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(5 g，73.7%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 422。

步驟5

在0℃下在氮氣氛圍下將TMSOTf (7.12 g，32.04 mmol，3.00當量)逐滴添加至2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(4.50 g，10.68 mmol，1.00當量) 及二甲基吡啶(4.58 g，42.72 mmol，4.00當量)於DCM (45 mL)中之攪拌溶液中。在0℃下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物1 h。在室溫下用水淬滅反應物。藉由過濾收集沈澱固體且在紅外光下乾燥，得到呈白色固體狀之3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(2.2 g，64%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 322。

步驟6

在0℃下在氮氣氛圍下將NMI (307 mg，3.735 mmol，3.00當量)及TCFH (699 mg，2.50 mmol，2.00當量)逐份添加至3-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]-1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑(400 mg，1.25 mmol，1.00當量)及(2-氟苯基)[2-(㗁烷-2-基氧基)乙氧基]乙酸(446 mg，1.50 mmol，1.20當量)於MeCN (8.00 mL)中之攪拌溶液中。在室溫下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物2 h。反應物用水淬滅且用EtOAc (3×20 mL)萃取。合併之有機層用水(1×20 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EtOAc (4:1)溶離，得到2-2-(2-氟苯基)-2-[2-(㗁烷-2-基)乙氧基]-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮(520 mg，71%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 586。

步驟7

在室溫下在空氣氛圍下攪拌2-2-(2-氟苯基)-2-[2-(噁烷-2-基)乙氧基]-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮(500 mg，0.85 mmol，1.00當量)及濃HCl (0.10 mL)於MeOH (5.00 mL)中之溶液2 h。粗產物藉由Flash-Prep-HPLC使用此等條件純化：C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm，10 nm，移動相，CH ₃CN/H ₂O (FA:0.1%)，在12 min內自5%至52%，流動速率，80 mL/min，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之2-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮(310 mg，70%)。

步驟8

外消旋2-2-(2-氟苯基)-2-(2-羥基乙氧基)-1-[2-[1-(2,2,2-三氟乙基)吡唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]乙酮(310 mg)藉由SFC使用以下條件分離：掌性PAK IG，3*25 cm，5 µm，移動相A：CO ₂(l)，移動相B：MeOH製備型，流動速率：80 mL/min，梯度：等度25% B。此產生兩種化合物。立體異構物13：呈白色固體狀之(91.2 mg，20.6%，(滯留時間6.5 min)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ 8.26 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.52-7.34 (m, 2H), 7.32 - 7.16 (m, 2H), 7.04 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 5.50 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 5.43 - 5.24 (m, 2H), 4.94 (dd, J= 20.5, 14.5 Hz, 1H), 4.79 - 4.66 (m, 1H), 4.68 - 4.40 (m, 3H), 3.63 - 3.52 (m, 4H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 518。

立體異構物14：呈白色固體狀之98.3 mg，22.3%，(滯留時間8.4 min)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ 8.26 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.52-7.34 (m, 2H), 7.32 - 7.16 (m, 2H), 7.04 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 5.50 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 5.43 - 5.24 (m, 2H), 4.94 (dd, J= 20.5, 14.5 Hz, 1H), 4.79 - 4.66 (m, 1H), 4.68 - 4.40 (m, 3H), 3.63 - 3.52 (m, 4H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 518。實例1.79

合成(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物87)

步驟1

將3-氯戊烷-2,4-二酮(15.00 g，111.47 mmol，1.00當量)、苯甲基硫醇(13.85 g，111.47 mmol，1.00當量)、NaHCO ₃(18.73 g，222.95 mmol，2.00當量)、(CH ₂OMe) ₂(200.00 mL)置放於500 mL圓底燒瓶中。於油浴中在90℃下攪拌所得溶液3 h。濃縮所得混合物。在矽膠管柱上純化殘餘物。此產生13.80 g (55.7%)呈黃色固體狀之3-(苯甲基硫基)戊烷-2,4-二酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 223。

步驟2

將3-(苯甲基硫基)戊烷-2,4-二酮(14.70 g，66.13 mmol，1.00當量)、水合肼(98%) (6.62 g，132.24 mmol，2.00當量)、PTSA (1.14 g，6.61 mmol，0.10當量)、EtOH (150.00 mL)置放於250 mL圓底燒瓶中。於油浴中在80℃下攪拌所得溶液隔夜。濃縮所得混合物。將殘餘物施加至用THF/PE (45%)之矽膠管柱上。此產生13.30 g (92.13%)呈淡黃色固體狀之4-(苯甲基硫基)-3,5-二甲基-1H-吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 219。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-3,5-二甲基-1H-吡唑(6.00 g，27.48 mmol，1.00當量)、DMF (80.00 mL)置放於100 mL 3頸圓底燒瓶中。此後在0℃下逐份添加NaH (0.99 g，41.22 mmol，1.50當量)。在室溫下攪拌所得溶液0.5 h。在0℃下在攪拌下向其中逐滴添加1,1-二氟-2-碘乙烷(7.91 g，41.21 mmol，1.50當量)。在室溫下攪拌所得溶液2 h。反應隨後藉由添加水/冰來淬滅。用EtOAc (3×100 mL)萃取所得溶液且合併有機層。用鹽水(3×50 mL)洗滌所得溶液，且合併有機層且經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。將殘餘物施加至用THF/PE (10%)之矽膠管柱上。此產生6.00 g (77.32%)呈黃色液體狀之4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 283。

步驟4

將4-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑(5.50 g，19.48 mmol，1.00當量)、HOAc (63.00 mL)、H ₂O (7.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下逐份添加NCS (7.80 g，58.44 mmol，3.00當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。濃縮所得混合物。將殘餘物施加至用THF/PE (5%)之矽膠管柱上。此產生5.00 g (99.23%)呈黃色液體狀之1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-磺醯氯。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ⁺m/z: 239。

步驟5

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.57 g，12.28 mmol，1.00當量)、THF (60.00 mL)置放於用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之100 mL 3頸圓底燒瓶中。此後在0℃下逐份添加NaH (0.44 g，18.42 mmol，1.50當量)。在0℃下攪拌所得溶液0.5 h。在0℃下在攪拌下向其中逐滴添加1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-磺醯氯(3.50 g，13.53 mmol，1.10當量)於THF (10.00 mL)中之溶液。在0℃下攪拌所得溶液2 h。隨後藉由添加4.00 mL CH ₃COOH淬滅反應物。用300 mL飽和NH ₄Cl (水溶液)稀釋所得溶液。將所得溶液用DCM (3×200 mL)萃取且合併有機層且經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。粗產物藉由Flash-Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱，C18矽膠；移動相，CH ₃CN/H ₂O (NH ₃ ^.H ₂O 0.1%)=40%在20 min內增加至CH ₃CN/H ₂O (NH ₃ ^.H ₂O 0.1%)=70%；偵測器，220 nm。粗產物藉由Prep-SFC使用以下條件(XA-Prep SFC150-1)純化：管柱：掌性ART直鏈澱粉-C NEO，3*25 cm，5 µm；移動相A：CO ₂，移動相B：MeOH製備型；流動速率：80 mL/min；梯度：等度15% B；管柱溫度(25℃)：35；背壓(巴)：100；波長：220 nm；RT ₁(min)：2.62；RT ₂(min)：3.20；樣品溶劑：MeOH製備型；注射體積：2 mL。此產生2.50 g (47.18%)呈白色固體狀之2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 432。

步驟6

將2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.50 g，5.80 mmol，1.00當量)、二甲基吡啶(2.48 g、23.18 mmol、4.00當量)、DCM (30.00 mL)置放於100 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下在攪拌下逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽烷酯(3.86 g，17.38 mmol，3.00當量)。在0℃下攪拌所得溶液2 h。隨後藉由添加MeOH淬滅反應物。濃縮所得混合物。將殘餘物施加至用THF/PE (83%)之矽膠管柱上。此產生1.80 g (93.76%)呈黃色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 332。

步驟7

將1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(280.24 mg，0.85 mmol，1.50當量)、(S)-托品酸(93.70 mg，0.56 mmol，1.00當量)、DMF (2.00 mL)、NMM (114.07 mg，1.13 mmol，2.00當量)置放於8 mL小瓶中。接著在0℃下逐份添加HATU (257.28 mg，0.68 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。粗產物(0.28 g)藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm；移動相、水(0.1% FA)及ACN (在12 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv。此產生120.90 mg (41.90%)呈白色固體狀之(2S)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.22 (s, 1H), 7.37-7.23 (m, 5H), 6.37 (tt, J= 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.94-4.77 (m, 2H), 4.61 (td, J= 15.0, 3.5 Hz, 2H), 4.49-4.29 (m, 3H), 4.16-3.79 (m, 2H), 3.72-3.32 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.30 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 480。實例1.80

合成(2R)-1-[2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基]-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物88)

將(R)-托品酸(93.70 mg，0.56 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-4-[4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基]吡唑(步驟6，合成化合物88)，280.24 mg，0.85 mmol，1.50當量)、NMM (114.07 mg，1.13 mmol，2.00當量)、DMF (2.00 mL)置放於8 mL小瓶中。接著在0℃下逐份添加HATU (257.28 mg，0.68 mmol，1.20當量)。在室溫下攪拌所得溶液1 h。粗產物(0.28 g)藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm；移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在12 min內自15%相B達至50%)；偵測器，220。此產生135.30 mg (50.04%)呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.22 (s, 1H), 7.37-7.23 (m, 5H), 6.59-6.17 (m, 1H), 4.94-4.77 (m, 2H), 4.61 (td, J= 15.0, 3.5 Hz, 2H), 4.49-4.29 (m, 3H), 4.16-3.79 (m, 2H), 3.72 -3.32 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.30 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 480。實例1.81

合成(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物89)

將1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，120 mg，0.38 mmol，1.00當量)及DMF (3 mL)、NMM (115 mg，1.13 mmol，3.00當量)、(R)-托品酸(63 mg，0.38 mmol，1.00當量)添加至20 mL小瓶中。將反應混合物冷卻至0℃，一次性添加HATU (173 mg，0.45 mmol，1.20當量)。在相同溫度下再攪拌所得混合物1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在12 min內自15% CH ₃CN達至50%)，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份凍結乾燥，得到呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(93.3 mg，53%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ 8.20 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.41-7.25 (m, 5H), 6.38 (tt, J = 54.3, 3.4 Hz, 1H), 4.87 (dd, J = 18.8, 14.1 Hz, 1H), 4.68 (td, J = 15.1, 3.3 Hz, 2H), 4.55-4.36 (m, 2H), 4.36-4.26 (m, 1H), 3.99 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.59-3.46 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.82

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物90)

在室溫下將(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)、1-(2-氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟6，實例 1 . 9，127.99 mg，0.45 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (136.13 mg，1.35 mmol，3.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (204.69 mg，0.54 mmol，1.20當量)逐份添加至攪拌溶液中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Shield RP18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm；移動相、水(10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1%NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在11 min內自27% ACN達至60%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(123.2 mg，58.69%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.08 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 2H), 7.38 - 7.23 (m, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.93 - 4.84 (m, 2H), 4.71 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 4.55 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 4.47 (q, J = 4.8 Hz, 2H), 4.43 - 4.35 (m, 2H), 4.33 - 4.25 (m, 1H), 3.97 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.59 - 3.56 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 468。實例1.83

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物91)

在室溫下將(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)、1-(2-氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟6，實例 1 . 9，127.99 mg，0.45 mmol，1當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (136.13 mg，1.35 mmol，3.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (204.69 mg，0.54 mmol，1.20當量)逐份添加至攪拌溶液中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Shield RP18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm；移動相、水(10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1%NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在11 min內自27% ACN達至60%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(142.7 mg，67.98%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.21 - 8.12 (m, 1H), 8.08 (dd, J = 1.8, 0.7 Hz, 1H), 7.53 - 7.39 (m, 2H), 7.38 - 7.23 (m, 2H), 5.00 - 4.82 (m, 3H), 4.71 (dd, J = 5.2, 4.1 Hz, 1H), 4.66 - 4.24 (m, 6H), 3.98 - 3.96 (m, 1H), 3.59 - 3.56 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 468.1。實例1.84

合成(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮及(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮(化合物92及93)

步驟1

在室溫下將2-(2-羥苯基)乙酸酯(5.0 g，30.09 mmol，1.00當量)、丙酮(50 mL)、Cs ₂CO ₃(12.7 g，38.98 mmol，1.30當量)、2-溴乙基甲基醚(4.60 g，33.10 mmol，1.10當量)及NaI (0.45 g，3.01 mmol，0.10當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在50℃攪拌所得混合物12 h。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/THF (4:1)溶離，得到呈黃色油狀物之2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸酯(1.55 g，23%)。GCMS m/z: 224。

步驟2

在室溫下將2-[2-(2-甲氧基乙氧基)苯基]乙酸甲酯(1.55 g，6.91 mmol，1.00當量)及DMF (30 mL)添加至100 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將CH ₃ONa (40 mg，0.74 mmol，0.11當量)、(HCHO) _n(0.21 g，6.91 mmol，1.0當量)添加至以上混合物中。在0℃下攪拌所得混合物1 h。用水(30 mL)淬滅反應物且用EtOAc (2×60 mL)萃取。合併之有機相用鹽水(3×30 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₃乾燥。過濾且在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (30%)溶離，得到呈黃色油狀物之3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙酸甲酯(681 mg，39%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 255。

步驟3

在室溫下將3-羥基-2-[2-(2-甲氧基乙氧基)苯基]丙酸甲酯(681 mg，2.68 mmol，1.00當量)、THF (5 mL)、H ₂O (5 mL)及LiOH (128 mg，5.35 mmol，2.00當量)添加至20 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。反應溶液藉由逆相急驟層析使用以下條件純化：C18-120 g，移動相，MeCN/水，在10 min內自5%至50%梯度，流動速率，70 mL/min，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，此產生呈白色固體狀之3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙酸鋰酯(440 mg，67%)。LCMS (ES) [M-Li+H+1] ⁺m/z: 241。

步驟4

在室溫下將3-羥基-2-[2-(2-甲氧基乙氧基)苯基]丙酸鋰酯(202 mg，0.82 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(324 mg，1.07 mmol，1.30當量)、DMF (4 mL)、DIEA (318 mg，2.46 mmol，3.00當量)及T ₃P (50%於EA) (630 mg，0.99 mmol，1.20當量)添加至20 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在15 min內自15% CH ₃CN達至50%)，偵測器，UV 254 nm。此產生呈白色固體狀之1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮(270 mg，63%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 526。

步驟5

1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)丙-1-酮(270 mg，0.514 mmol，1.00當量)藉由掌性Prep-HPLC使用以下條件分離：管柱，(R,R)-WHELK-O1-Kromasil，2.11*25 cm，5 μm，移動相A：HEX:DCM=3:1，移動相B：EtOH-HPLC；流動速率：25 mL/min，梯度：在22 min內30% B，波長：220/254 nm。第一溶離份在真空中濃縮，此產生呈白色固體狀之立體異構物15 (110.4 mg，41%)。掌性HPLC，Rt：1.628 Min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (s, 1H), 8.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 (ddd, J = 8.9, 6.9, 1.5 Hz, 2H), 7.02 - 6.93 (m, 1H), 6.90 (dd, J = 8.0, 6.9 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.5, 3.5 Hz, 1H), 4.91 - 4.54 (m, 4H), 4.54 - 4.29 (m, 3H), 4.11 (q, J = 4.8 Hz, 2H), 4.00 (td, J = 9.6, 4.9 Hz, 1H), 3.75 - 3.51 (m, 3H), 3.17 (d, J = 20.1 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 526。

在真空中濃縮第二溶離份，得到呈白色固體狀之立體異構物16 (103.3 mg，38%)。掌性HPLC，Rt：2.006 Min。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.72 (t, J = 0.9 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.14 - 8.09 (m, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 7.02 - 6.94 (m, 1H), 6.90 (td, J = 7.5, 1.1 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.91 - 4.54 (m, 5H), 4.54 - 4.29 (m, 3H), 4.19 - 3.99 (m, 2H), 3.98 (dd, J = 9.6, 4.9 Hz, 1H), 3.73 - 3.52 (m, 3H), 3.17 (d, J = 20.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 526。實例1.85

合成(2S)-1-{2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物94)

步驟1

將4-碘-3-(三氟甲基)-1H-吡唑(10.0 g，38.17 mmol，1.00當量)及DMF (100 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。將混合物冷卻至0℃，接著在0℃逐份添加NaH (60%於礦物油中) (1.83 g，45.80 mmol，1.20當量)。在相同溫度下再攪拌所得混合物0.5 h。將碘乙烷(7.74 g，49.62 mmol，1.30當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。反應物用水(100 mL)淬滅，用EtOAc (3×200 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (10:1)溶離，得到呈淡黃色油狀物之1-乙基-4-碘-3-(三氟甲基)吡唑(8.7 g，79%)。 ¹HNMR: (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.20 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 4.23 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 1.38 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 291。

步驟2

將1-乙基-4-碘-3-(三氟甲基)吡唑(8.7 g，29.99 mmol，1.00當量)及甲苯(90 mL)、DIEA (11.63 g，89.99 mmol，3.0當量)、Pd ₂(dba) ₃(2.75 g，3.00 mmol，0.10當量)、XantPhos (3.47 g，5.99 mmol，0.20當量)、苯基甲硫醇(7.45 g，59.99 mmol，2.00當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在氮氣氛圍下在100℃下攪拌所得混合物12 h。將反應混合物冷卻至室溫，且在真空下濃縮。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，得到呈黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑(6.5 g，76%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 287。

步驟3

將4-(苯甲基硫基)-1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑(6.5 g，22.70 mmol，1.00當量)及HOAc (90 mL)、H ₂O (10 mL)添加至250 mL圓底燒瓶中。將反應物冷卻至0℃。將NCS (9.09 g，68.10 mmol，3.00當量)逐份添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。在真空下濃縮所得混合物，殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5:1)溶離，得到呈黃色油狀物之1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-磺醯氯(1.6 g，27%)。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 243。

步驟4

將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(981 mg，4.68 mmol，1.00當量)及DMF (20 mL)添加至100 mL 3頸圓底燒瓶中。將反應物冷卻至0℃，將NaH (60%於礦物油中) (206 mg，5.15 mmol，1.10當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物0.5 h。將1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-磺醯氯(1.60 g，6.09 mmol，1.30當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。用水(30 mL)淬滅反應物，用EtOAc (3×100 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(3×100 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (2:1)溶離，得到呈白色固體狀之2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(450 mg，22%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 436。

步驟5

將2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(450 mg，1.03 mmol，1.00當量)及DCM (10 mL)、2,6-二甲基吡啶(443 mg，4.13 mmol，4.00當量)添加至50 mL 3頸圓底燒瓶中。將反應物冷卻至0℃。將TMSOTf (690 mg，3.09 mmol，3.00當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。反應物用水(20 mL)淬滅，用二氯甲烷(30 mL)萃取。在減壓下濃縮有機相。殘餘物藉由逆相急驟層析，使用以下條件純化：C18-12 g，移動相、CH ₃CN及水，在10 min內自10%至100%梯度，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之1-乙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-3-(三氟甲基)吡唑(340 mg，98%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 336。

步驟6

將1-乙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-3-(三氟甲基)吡唑(151 mg，0.45 mmol，1.5當量)及DMF (3 mL)、NMM (61 mg、0.60 mmol、2.00當量)、(S)-托品酸(50 mg、0.30 mmol、1.00當量)添加至20 mL小瓶中。將反應物冷卻至0℃，將HATU (137 mg，0.36 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。反應溶液藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在12 min內自15%達至50%)，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(107.4 mg，74%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.96 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.42 -7.21 (m, 5H), 4.98-4.79 (m, 2H), 4.57-4.26 (m, 5H), 4.02-3.96 (m, 2H), 3.54 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 1.40 (t, J= 7.3 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.86

合成(2R)-1-{2-[1-研究-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物95)

根據步驟6中所描述，使用(R)-托品酸合成化合物94之步驟來合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-乙基-3-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.96 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.42 -7.21 (m, 5H), 4.96-4.79 (m, 2H), 4.57-4.26 (m, 5H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.54 (d, J= 5.3 Hz, 1H), 1.40 (t, J= 7.3 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.87

合成(2S)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物96)

將(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(80 mg，0.43 mmol，1當量)、DMF (5.00 mL)、1-(2-氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，130 mg，0.43 mmol，1.00當量)、NMM (88 mg，0.87 mmol，2當量)置放於50 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加HATU (198 mg，0.52 mmol，1.2當量)。在室溫下攪拌所得溶液1小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv 254 nm。此產生呈灰白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(149.5 mg，73.95%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.19 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.40 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 7.25-7.13 (m, 2H), 4.96-4.77 (m, 3H), 4.69 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 4.54-4.34 (m, 4H), 4.34-4.22 (m, 2H), 4.05-3.94 (m, 1H), 3.60 (dq, J= 11.0, 5.8 Hz, 1H), 2.49 (d, J= 2.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.88

合成(2R)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物97)

將(2R)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(80 mg，0.43 mmol，1當量)、DMF (5.00 mL)、1-(2-氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，130 mg，0.43 mmol，1.00當量)、NMM (88 mg，0.87 mmol，2當量)置放於50 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加HATU (198 mg，0.52 mmol，1.2當量)。在室溫下攪拌所得溶液1小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 μm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv。254 nm。此產生呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(121.6 mg，60.15%)。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.19 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.40 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 7.30 (t, J= 7.0 Hz, 1H), 7.25-7.13 (m, 2H), 4.96-4.77 (m, 3H), 4.69 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 4.54-4.34 (m, 4H), 4.34-4.22 (m, 2H), 4.05-3.94 (m, 1H), 3.60 (dq, J= 11.0, 5.8 Hz, 1H), 2.49 (d, J= 2.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 466。實例1.89

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物98)

將(2S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(87 mg，0.43 mmol，1當量)、DMF (5.00 mL)、1-(2-氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，130 mg，0.43 mmol，1.00當量)、NMM (88 mg，0.87 mmol，2當量)置放於50 mL圓底燒瓶中。此後在0℃下添加HATU (198 mg，0.52 mmol，1.2當量)。在25℃下攪拌所得溶液1小時。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，5 µm 10 nm；移動相、水及ACN (在15 min內自15%相B達至50%)；偵測器，uv 254 nm。此產生呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(137.8 mg，65.84%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.20 (s, 1H), 8.01 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.36-7.25 (m, 2H), 4.99-4.78 (m, 3H), 4.69 (t, J= 4.7 Hz, 1H), 4.55-4.35 (m, 5H), 4.30 (t, J= 13.5 Hz, 1H), 4.02-3.91 (m, 1H), 3.57 (dq, J= 10.5, 5.4 Hz, 1H), 2.49 (d, J= 2.1 Hz, 3H). LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 482。實例1.90

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物99)

類似地，在相同反應條件下，自(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸獲得(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2-氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.20 (s, 1H), 8.01 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.36-7.24 (m, 2H), 5.00-4.84 (m, 2H), 4.81 (t, J= 4.7 Hz, 1H), 4.69 (t, J= 4.7 Hz, 1H), 4.55-4.35 (m, 5H), 4.30 (t, J= 13.4 Hz, 1H), 3.97 (qd, J= 8.9, 2.9 Hz, 1H), 3.57 (dq, J= 10.6, 5.4 Hz, 1H), 2.49 (d, J= 2.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 482。實例1.91

合成(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物100)

遵循步驟6，實例 1 . 18中所描述之步驟，標題化合物由(S)-2-(2-氟苯基)-3-羥丙酸(50 mg，0.27 mmol，1.00當量)及2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,4,5,6-四氫吡咯并[3,4-c]吡唑(步驟5，實例 1 . 18，112 mg，0.35 mmol，1.30當量)製得。分離呈白色固體狀之所需(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(37 mg)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.21 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.42-7.28 (m, 2H), 7.24-7.14 (m, 2H), 6.60 (tt, J= 54.3, 3.3 Hz, 1H), 4.96-4.84 (m, 2H), 4.74 (td, J= 15.3, 3.6 Hz, 2H), 4.53- 4.40 (m, 2H), 4.35-4.24 (m 2H), 4.03 - 3.95 (m, 1H), 3.65-3.56 (m, 1H), 2.52 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.92

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物101)

將(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(100 mg，0.49 mmol，1.00當量)及DMF (3 mL)、NMM (101 mg，0.99 mmol，2.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，174 mg，0.54 mmol，1.10當量)添加至20 mL小瓶中。將反應物冷卻至0℃。將HATU (228 mg，0.59 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。反應混合物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm，10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在7 min內自35%達至70%)，偵測器，254 nm UV)，得到呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(83.4 mg，33%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (s, 1H), 8.05 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.66-7.10 (m, 4H), 6.40 (tt, J= 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.03-4.81 (m, 2H), 4.68 (td, J= 15.3, 3.5 Hz, 2H), 4.58-4.25 (m, 4H), 3.97 (s, 1H), 3.58 (s, 1H), 2.50 (d, J= 1.8 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 500。實例1.93

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物102)

向20 mL小瓶中，將(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(60 mg，0.29 mmol，1.00當量)及DMF (3 mL)、NMM (61 mg，0.59 mmol，2.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(步驟5，實例 1 . 18，105 mg，0.32 mmol，1.10當量)添加至20 mL小瓶中。將反應物冷卻至0℃。將HATU (137 mg，0.35 mmol，1.20當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。反應混合物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：SunFire Prep C18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm，10 nm，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在7 min內自30%達至70%)，偵測器，UV 254 nm。將目標溶離份凍結乾燥，得到呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(38.8 mg，26%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.21 (s, 1H), 8.05 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.66-7.10 (m, 4H), 6.40 (tt, J= 54.3, 3.5 Hz, 1H), 5.03-4.81 (m, 2H), 4.68 (td, J= 15.3, 3.5 Hz, 2H), 4.58-4.25 (m, 4H), 3.97 (s, 1H), 3.58 (s, 1H), 2.50 (d, J= 1.8 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 500。實例1.94

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(化合物103)

步驟1

將2-(2-甲氧基苯基)乙酸(30.00 g，180.53 mmol，1.00當量)、DMF (2.00 mL)及DCM (300.00 mL)添加至500 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將乙二醯氯(34.37 g，270.80 mmol，1.50當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物3 h。在減壓下濃縮所得混合物。此產生呈黃色油狀物之(2-甲氧基苯基)乙醯氯(30.00 g，粗產物)。

步驟2

將(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(12.00 g，67.72 mmol，1.00當量)及THF (150.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在氮氣氛圍下在-78℃下將n-BuLi (35.21 mL，88.04 mmol，1.30當量)逐滴添加至以上混合物中。在-78℃下再攪拌所得混合物1 h。在-78℃下將含(2-甲氧基苯基)乙醯氯(15.00 g，81.263 mmol，1.20當量)之THF逐滴添加至攪拌溶液中。在-78℃至室溫下再攪拌所得混合物1 h。藉由添加飽和NH ₄Cl (水溶液) (100 mL)來淬滅反應物。用EA (3×150 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (15%)溶離，得到呈白色固體狀之(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-甲氧基苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(15.00 g，68.08%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 326。

步驟3

將(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-甲氧基苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(6.00 g，18.44 mmol，1.00當量)及DCM (60.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下逐滴添加TiCl ₄(2.82 mL，20.29 mmol，1.10當量)於DCM (1.00 mL)中之溶液。在氮氣氛圍下在0℃下攪拌所得混合物20 min。在0℃下將DIEA (2.74 g，21.21 mmol，1.15當量)逐滴添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。在0℃下逐滴添加三㗁烷(1.83 g，20.29 mmol，1.10當量)於DCM中之溶液且在0℃下處理20 min。在0℃下逐滴添加TiCl ₄(2.82 mL，20.29 mmol，1.10當量)於DCM (1.00 mL)中之混合物。在0℃下攪拌所得混合物2 h。藉由添加飽和NH ₄Cl (水溶液) (50 mL)來淬滅反應物。所得混合物用DCM (3×100 mL)萃取。合併之有機層用飽和NaHCO ₃(100 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(6.00 g，粗產物)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 356。

步驟4

將(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(6.00 g，16.88 mmol，1.00當量)及THF (60.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將含H ₂O ₂(30%) (1.97 mL，84.42 mmol，5.00當量)及LiOH (0.81 g，33.77 mmol，2.00當量)之H ₂O (15.00 mL)逐滴添加至攪拌混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。用Na ₂SO ₃淬滅反應物。所得混合物用DCM (3×100 mL)萃取。合併之水層用2 M HCl酸化至pH 3。用DCM/MeOH (10:1) (10×100 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 μm；移動相、水(0.1% FA)及CAN (在20 min內自10%相B達至30%)；偵測器，254。此產生呈黃色油狀物之(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸(1.20 g，36.23%)。LCMS (ES) [M-1] ⁺m/z: 195。

步驟5

將(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸(75.00 mg，0.38 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(133.42 mg，0.42 mmol，1.10當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (77.33 mg，0.76 mmol，2.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (174.42 mg，0.46 mmol，1.20當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250mm 5um 10nm；移動相、水(0.1% NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在15 min內自10%相B達至55%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(90.90 mg，47.99%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.20 (d, J= 5.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 7.29-7.19 (m, 2H), 7.01 (dd, J= 8.2, 4.0 Hz, 1H), 6.89 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.40 (tt, J = 54.3, 3.4 Hz, 1H), 4.90-4.75 (m, 2H), 4.68 (td, J = 15.3, 3.4 Hz, 2H), 4.55-4.25 (m, 4H), 3.95 (td, J = 9.5, 4.8 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.48 (dtd, J= 10.0, 4.9, 2.8 Hz, 1H), 2.51 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 496。實例1.95

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(化合物104)

根據在步驟1中使用(4S)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮合成化合物103中所描述之5步步驟合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-5-甲基吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.20 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 7.30-7.16 (m, 2H), 7.01 (dd, J= 8.1, 4.0 Hz, 1H), 6.89 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.40 (tt, J= 54.4, 3.4 Hz, 1H), 4.89-4.75 (m, 2H), 4.68 (td, J= 15.3, 3.4 Hz, 2H), 4.53-4.26 (m, 4H), 3.95 (tt, J= 9.6, 6.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.52-3.44 (m, 1H), 2.50 (s, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 496。實例1.96

合成(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物105)

步驟1

在室溫下將2-(2-溴苯基)乙酸酯(20.0 g，87.308 mmol，1.0當量)、二㗁烷(400 mL)、H ₂O (60 mL)、乙烯基三氟硼酸鉀(17.42 g，130.962 mmol，1.5當量)、Cs ₂CO ₃(71.12 g，218.270 mmol，2.5當量)及Pd(dppf)Cl ₂(6.39 g，8.731 mmol，0.1當量)添加至用惰性氮氣氛圍吹掃且維持之1000 mL圓底燒瓶中。在100℃下攪拌所得混合物16隔夜。用H ₂O (400 mL)稀釋所得混合物。所得混合物用DCM (3×500 ml)萃取，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (97/3)溶離，得到呈黃色油狀物之2-(2-乙烯基苯基)乙酸甲酯(11.13 g，72.34%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 177。

步驟2

在室溫下在1.5 atm氫氣下，將2-(2-乙烯基苯基)乙酸甲酯(11.0 g，62.424 mmol，1.0當量)、MeOH (110 mL)、Pd/C (1.1 g)包含至250 mL圓底燒瓶中，攪拌16隔夜。過濾所得混合物，且用MeOH (3×50 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。此產生呈透明油狀物之2-(2-乙基苯基)乙酸甲酯(10.0 g，89.88%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 179。

步驟3

在室溫下將2-(2-乙基苯基)乙酸甲酯(11.0 g，61.718 mmol，1.0當量)、MeOH (100 mL)、H ₂O (20 mL)及LiOH (2.96 g，123.436 mmol，2.0當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物3 h。用2M HCl將混合物酸化至pH 4。所得混合物用DCM (3×100 mL)萃取，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈白色固體狀之(2-乙基苯基)乙酸鋰(8.1 g，79.93%)。LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 163。

步驟4

在室溫下將(2-乙基苯基)乙酸(8.1 g，49.329 mmol，1.0當量)、DCM (100 mL)、氯(羥基)乙醯氯(19.08 g，147.987 mmol，3.0當量)添加至用惰性氮氣氛圍維持之250 mL圓底燒瓶中。在50℃攪拌所得混合物5隔夜。在減壓下濃縮所得混合物。此產生呈無色油狀物之(2-乙基苯基)乙醯氯(9.0 g，99.89%)。

步驟5

在-78℃下將(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮(3.93 g，22.173 mmol，0.9當量)及THF (135 mL)置放於在惰性氮氣氛圍下吹掃且維持之250 mL 3頸圓底燒瓶中。在-78℃下逐滴添加n-BuLi (2.05 g，32.028 mmol，1.3當量)。在-78℃下攪拌所得溶液1小時。在-78℃至室溫下逐滴添加(2-乙基苯基)乙醯氯(4.5 g，24.637 mmol，1當量)於THF (10 mL)中之溶液且攪拌2 h。反應隨後藉由添加100 mL水來淬滅。用EtOAc (3×100 mL)萃取所得溶液。用1×150 ml鹽水洗滌所得混合物。混合物經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。將殘餘物施加至用EtOAc/PE (2/1)之矽膠管柱上。此產生呈黃色油狀物之(4R)-4-苯甲基-3-[2-(2-乙基苯基)乙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(4.7 g，58.99%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 324。

步驟6

在0℃下將(4R)-4-苯甲基-3-[(2S)-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙醯基]-1,3-㗁唑啶-2-酮(4.6 g，13.016 mmol，1當量)及THF (60 mL，780.960 mmol)置放於250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將H ₂O ₂(30%) (2.21 g，65.080 mmol，5.0當量)、LiOH.H ₂O (0.62 g，26.032 mmol，2.0當量)添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物2 h。隨後藉由添加飽和Na ₂SO ₃、H ₂O (50 ml)淬滅反應物且用DCM (3×100 mL)萃取。用2M HCl將pH值調節至1。所得溶液用DCM/MeOH (10/1) (10×100 mL)萃取，經無水Na ₂SO ₃乾燥且濃縮。藉由用DCM/己烷(1/10)濕磨純化殘餘物。過濾所得混合物；在減壓下濃縮濾餅。此產生呈白色固體狀之(2S)-2-(2-乙基苯基)-3-羥丙酸(800 mg，31.64%)。LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 193。

步驟7

將(2S)-2-(2-乙基苯基)-3-羥丙酸(100 mg，0.515 mmol，1當量)及DMF (2 mL)添加至8 mL小瓶中。將1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(234.22 mg，0.772 mmol，1.5當量)、DIEA (199.63 mg，1.545 mmol，3.0當量)及HATU (254.49 mg，0.670 mmol，1.3當量)添加至以上混合物中。在室溫下再攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(SunFire Prep C18 OBD管柱，50×250 mm，5 um；移動相、相A：H ₂O (0.1 % FA)；相B：CH ₃CN (在12 min內自10% B達至50% B)純化，得到呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙-1-酮(150 mg，60.76。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d6) δ 8.70 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.29 - 7.14 (m, 3H), 7.12 (td, J = 7.3, 1.8 Hz, 1H), 6.41 (tt, J = 55.5, 4.0 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 25.3, 13.9 Hz, 1H), 4.79 - 4.62 (m, 2H), 4.58 - 4.34 (m, 2H), 4.22 - 4.08 (m, 1H), 4.09 - 3.89 (m, 2H), 3.44 (dd, J = 10.3, 4.5 Hz, 1H), 2.79 (p, J = 7.4 Hz, 2H), 1.24 (td, J = 7.5, 3.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 480。RT1 (min): 4.278。實例1.97

合成(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-2-(2-乙基苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物106)

遵循在步驟5中使用(4S)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮代替(4R)-4-苯甲基-1,3-㗁唑啶-2-酮合成化合物105中所報導之步驟合成標題化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 8.70 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.29 - 7.14 (m, 3H), 7.12 (td, J = 7.3, 1.8 Hz, 1H), 6.41 (ddt, J = 55.0, 52.2, 3.0 Hz, 1H), 4.90 (dd, J = 25.3, 13.9 Hz, 1H), 4.71 (tt, J = 15.0, 3.3 Hz, 2H), 4.58 - 4.34 (m, 2H), 4.22 - 4.08 (m, 1H), 4.09 - 3.89 (m, 2H), 3.44 (dd, J = 10.3, 4.5 Hz, 1H), 2.89-2.71 (m, 2H), 1.24 (td, J = 7.5, 3.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 480。RT1 (min): 3.049。實例1.98

合成(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物107)

步驟1

在室溫下將3-溴基-1H-1,2,4-三唑(15.00 g，101.38 mmol，1.00當量)、CH ₃CN (200.00 mL)、Cs ₂CO ₃(66.06 g，202.75 mmol，2.00當量)及2,2-二氟乙基三氟甲烷磺酸酯(26.05 g，121.65 mmol，1.20當量)添加至500 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。過濾所得混合物，用乙腈(3×100 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (10:100)溶離，得到呈黃色油狀物之3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑(10 g，46.53%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 212。

步驟2

將3-溴基-1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑(10.00 g，47.17 mmol，1.00當量)、甲苯(150.00 mL)、苯甲基硫醇(17.58 g，141.51 mmol，3.00當量)、BINAP (5.87 g，9.43 mmol，0.20當量)、DIEA (18.29 g，141.51 mmol，3.00當量)及Pd ₂(dba) ₃CHCl ₃(4.88 g，4.72 mmol，0.10當量)添加至500 mL圓底燒瓶中。在100℃下在氮氣氛圍下攪拌所得混合物隔夜。使混合物冷卻至室溫。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (10:100)溶離，得到呈黃色油狀物之3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑(8 g，66.43%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 256。

步驟3

在室溫下將3-(苯甲基硫基)-1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑(5.00 g，19.59 mmol，1.00當量)、HOAc (54.00 mL)、H ₂O (6.00 mL)及NCS (7.85 g，58.76 mmol，3.00當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用THF/PE (16:100)溶離，得到呈白色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-磺醯氯(3.5 g, 77.16%)。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ^-m/z: 212。

步驟4

在室溫下將2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.50 g，11.95 mmol，1.00當量)及THF (40.00 mL)添加至250 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NaH (0.43 g，17.92 mmol，1.50當量)逐份添加至攪拌溶液中。在0℃下攪拌所得混合物0.5 h。在0℃下將1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-磺醯氯(3.04 g，13.14 mmol，1.10當量)添加至攪拌溶液中。在0℃下攪拌所得混合物1 h。藉由在0℃下添加水/冰(50 mL)淬滅反應物。用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取所得混合物。合併之有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。藉由過濾收集所沈澱之固體且用乙醚(3×30 mL)洗滌。此產生呈白色固體狀之2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2 g，41.40%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 405。

步驟5

在室溫下將2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(2.00 g，4.95 mmol，1.00當量)、DCM (20.00 mL)及二甲基吡啶(2.12 g，19.78 mmol，4.00當量)添加至100 mL圓底燒瓶中。在0℃下將TMSOTf (3.30 g，14.84 mmol，3.00當量)逐滴添加至攪拌溶液中。在0℃下攪拌所得混合物1 h。在0℃用MeOH淬滅反應物。在減壓下濃縮所得混合物。粗產物(4 g)藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Prep C18 OBD管柱，19 cm，150 mm，5 μm；移動相、水(0.05% FA)及CAN (在10 min內自5%相B達至20%)；偵測器，254。此產生呈黃色固體狀之1-(2,2-二氟乙基)-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,2,4-三唑(1.2 g，79.74%)。LCMS (ES) [M-46+1] ⁺m/z: 305。

步驟6

在室溫下將(2S)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,2,4-三唑(136.50 mg，0.45 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (136.13 mg，1.35 mmol，3.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (204.69 mg，0.54 mmol，1.20當量)逐份添加至攪拌溶液中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Shield RP18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm；移動相、水(10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1% NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在9 min內自15% ACN達至70%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2S)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(130.3 mg，59.66%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.92 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.55 - 7.39 (m, 2H), 7.31 (tdd, J = 8.1, 6.1, 3.2 Hz, 2H), 6.80 - 6.12 (m, 1H), 5.04 - 4.88 (m, 3H), 4.94 - 4.83 (m, 1H), 4.59 - 4.28 (m, 4H), 3.98 (dddd, J = 10.9, 8.7, 5.9, 2.7 Hz, 1H), 3.59 (ddd, J = 10.6, 5.4, 4.1 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 487。實例1.99

合成(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(化合物108)

在室溫下將(2R)-2-(2-氯苯基)-3-羥丙酸(90.00 mg，0.45 mmol，1.00當量)、1-(2,2-二氟乙基)-3-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,2,4-三唑(136.50 mg，0.45 mmol，1.00當量)、DMF (5.00 mL)及NMM (136.13 mg，1.35 mmol，3.00當量)添加至20 mL小瓶中。在0℃下將HATU (204.69 mg，0.54 mmol，1.20當量)逐份添加至攪拌溶液中。在室溫下攪拌所得混合物1 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：管柱、XBridge Shield RP18 OBD管柱，19*150 mm，5 µm；移動相、水(10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1% NH ₃ ^.H ₂O)及ACN (在9 min內自15% ACN達至70%)；偵測器，254。此產生呈白色固體狀之(2R)-2-(2-氯苯基)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)-1,2,4-三唑-3-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基丙-1-酮(124.4 mg，56.95%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.91 (s, 1H), 8.31 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.55 - 7.40 (m, 2H), 7.39 - 7.23 (m, 2H), 6.69 - 6.29 (m, 1H), 5.04 - 4.83 (m, 4H), 4.59 - 4.46 (m, 1H), 4.51 - 4.36 (m, 2H), 4.34 (dd, J = 14.3, 6.6 Hz, 1H), 3.97 (ddq, J = 10.5, 5.9, 2.7 Hz, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 487。實例1.100

合成(S)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮及(R)-1-(2-((1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基)磺醯基)-2,6-二氫吡咯并[3,4-c]吡唑-5(4H)-基)-3-羥基-2-(2-(2-羥基乙氧基)苯基)丙-1-酮(化合物109及110)

步驟1

將2-(2-羥苯基)乙酸甲酯(10 g，60.177 mmol，1當量)、DMF (100 mL)、K ₂CO ₃(12.48 g，90.266 mmol，1.5當量)、(2-溴乙氧基)(三級丁基)二甲基矽烷(21.59 g，90.266 mmol，1.5當量)及KI (5.0 g，30.120 mmol，0.50當量)添加至250 mL圓底燒瓶中。在70℃下攪拌所得混合物16小時隔夜。在減壓下濃縮所得混合物。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (5/1)溶離，得到呈黃色油狀物之2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)乙酸甲酯(3.5 g，17.92%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 325。

步驟2

在室溫下將2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)乙酸甲酯(1.5 g，4.623 mmol，1當量)及DMF (60 mL)添加至100 mL 3頸圓底燒瓶中。在0℃下將NaOMe (0.02 g，0.462 mmol，0.1當量)、(HCHO)n (0.14 g，4.623 mmol，1.0當量)添加至以上混合物中。在0℃下再攪拌所得混合物1 h。用水淬滅反應物。所得混合物用EtOAc萃取且在減壓下濃縮有機層。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用EA/PE (1/4)溶離，得到呈黃色油狀物之2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)-3-羥基丙酸甲酯(720 mg，43.93%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 355。

步驟3

在室溫下將2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)-3-羥基丙酸甲酯(720 mg，2.031 mmol，1.0當量)、THF (10 mL)、H ₂O (2.5 mL)及LiOH-H ₂O (170.44 mg，4.062 mmol，2.0當量)添加至40 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物3 h。用2 M HCl將混合物酸化至pH 4。所得混合物用DCM (3×15 ml)萃取，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。此產生呈白色固體狀之2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)-3-羥基丙酸鋰(445 mg，64.35%)。LCMS (ES) [M-1] ^-m/z: 339。

步驟4

在室溫下將2-(2-{2-[(三級丁基二甲基矽烷基)氧基]乙氧基}苯基)-3-羥丙酸(400 mg，1.175 mmol，1當量)、DCM (10 mL)、TEA-3HF (1.893 g，11.750 mmol，10.0當量)及LiOH (128 mg，5.345 mmol，2.00當量)添加至20 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物4 h。在減壓下濃縮所得混合物。此產生呈黃色油狀物之3-羥基-2-[2-(2-羥基乙氧基)苯基]丙酸鋰(320 mg粗物質)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 227。

步驟5

在室溫下將3-羥基-2-[2-(2-羥基乙氧基)苯基]丙酸(300 mg，1.326 mmol，1.0當量)、DMF (5 mL)、1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑(603.29 mg，1.989 mmol，1.5當量)、DIEA (514.18 mg，3.978 mmol，3.0當量)及HATU (655.50 mg，1.724 mmol，1.3當量)添加至20 mL小瓶中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件(Prep-HPLC-001)純化：管柱、Sunfire Prep C18 OBD管柱，50*250 mm，10 µm 10 nm；移動相、水(0.1% FA)及ACN (在12 min內自20% ACN達至55%)。此產生呈白色固體狀之1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-[2-(2-羥基乙氧基)苯基]丙-1-酮(250 mg，36.86%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 512。

步驟6

1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-[2-(2-羥基乙氧基)苯基]丙-1-酮(200 mg，0.391 mmol，1當量)。管柱：(R,R)-WHELK-O1-Kromasil，2.11*25 cm，5 μm；移動相A：己烷:DCM=3:1 (0.5% 2M NH3-MeOH)--HPLC，移動相B：EtOH--HPLC；流動速率：25 mL/min；梯度：在25 min內自20% B至20% B；波長：220/254 nm；RT1(min)：15；RT2(min)：17；樣品溶劑：EtOH-HPLC；注射體積：0.5 mL；運行數：24。此產生兩種異構體之分離：呈灰白色固體狀之立體異構物17 (100 mg，50.00%)，RT1 (min)：6.050。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.12 (t, J = 0.9 Hz, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 6.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.63 (m, 5H), 4.58 - 4.29 (m, 4H), 4.00 (ddd, J = 19.1, 9.3, 5.5 Hz, 3H), 3.79 - 3.70 (m, 2H), 3.65 - 3.43 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 512。

呈灰白色固體狀之立體異構物18 (100 mg，50.00%)，RT1 (min)：6.889。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.12 (t, J = 0.9 Hz, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 6.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.5, 3.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.63 (m, 5H), 4.58 - 4.29 (m, 4H), 4.00 (ddd, J = 19.1, 9.3, 5.5 Hz, 3H), 3.79 - 3.70 (m, 2H), 3.65 - 3.43 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 512。實例1.101

合成(2S)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物111)

步驟1

在60℃下在氮氣氛圍下攪拌乙肼草酸鹽(23.22 g，154.65 mmol，1.30當量)於H ₂O (105 mL)中之溶液10 min。添加(3E)-4-乙氧基-1,1,1-三氟丁-3-烯-2-酮(20 g，118.96 mmol，1.00當量)於MeOH (150 mL)中之溶液。在60℃下攪拌所得混合物4 h。將反應混合物冷卻至室溫，用H ₂O (500 mL)稀釋，用EtOEt (4×200 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(500 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑(15 g) (含有區位異構物)未經進一步純化即直接用於下一步驟。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 165。

步驟2

在室溫下，將NIS (24.67 g，109.66 mmol，1.2當量)於TFA (80 mL)中之溶液逐滴添加至1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑(15 g，91.39 mmol，1.0當量)於AcOH (80 mL)中之攪拌溶液中。在80℃下攪拌所得混合物3 h。將混合物冷卻至室溫且用NaHSO ₃(10%，100 mL)淬滅。用2 M NaOH使混合物鹼化至pH 7，用EtOEt (3×100 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(300 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (10:1)溶離，得到呈淡黃色油狀物之1-乙基-4-碘-5-(三氟甲基)吡唑(9.0 g，33.9%) (區位異構物經避免)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 7.79 (s, 1H), 4.33 (q, J= 7.5 Hz, 2H), 1.36 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 291。

步驟3

將Pd ₂(dba) ₃(2.8 g，3.06 mmol，0.1當量)、XantPhos (3.5 g，6.12 mmol，0.2當量)及DIEA (11.8 g，91.81 mmol，3.0當量)添加至1-乙基-4-碘-5-(三氟甲基)吡唑啶(9.0 g，30.60 mmol，1.0當量)及苯甲基硫醇(7.6 g，61.21 mmol，2.0當量)於甲苯(150 mL)中之攪拌混合物中。在氮氣氛圍下在80℃下攪拌所得混合物5 h。將混合物冷卻至室溫且濃縮以移除溶劑。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (50:1)溶離，得到呈淡黃色油狀物之4-(苯甲基硫基)-1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑(6.8 g，77.6%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 287。

步驟4

在室溫下將NCS (9.5 g，71.25 mmol，3.0當量)逐份添加至4-(苯甲基硫基)-1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑(6.8 g，23.75 mmol，1.0當量)於AcOH (90 mL)及H ₂O (10 mL)中之攪拌溶液中。在室溫下攪拌所得混合物2 h。濃縮所得混合物，用DCM (100 mL)稀釋殘餘物。過濾所得混合物，用DCM (50 mL)洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/THF (50:1)溶離，得到呈無色油狀物之1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-磺醯氯(6.0 g，91.5%)。LCMS (ES) [M-Cl+OH-1] ⁺m/z: 243。

步驟5

在0℃下在氮氣氛圍下，將NaH (60%於礦物油中) (1.0 g，25.70 mmol，1.5當量)添加至2H,4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.6 g，17.13 mmol，1.0當量)於DMF (60 mL)中之攪拌溶液中。在0℃下攪拌所得混合物30 min。在0℃下將1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-磺醯氯(4.5 g，17.13 mmol，1.0當量)於DMF (10 mL)中之溶液逐滴添加至以上混合物中。在相同溫度下攪拌所得混合物2 h。反應物用飽和NH ₄Cl (水溶液)淬滅，用EtOAc (3×50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(60 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由矽膠管柱層析純化，用PE/EA (3:1)溶離，得到粗產物。粗產物藉由用混合溶劑PE/EA (3:1) (100 mL)濕磨進一步純化。此產生呈淡黃色固體狀之2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.2 g，42.8%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 436。

步驟6

將2,6-二甲基吡啶(3.1 g，29.39 mmol，4.0當量)添加至2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酸三級丁酯(3.2 g, 7.34 mmol, 1.0 eq.)於DCM (50 mL)中之攪拌溶液中。在0℃下將TMSOTf (4.9 g，22.07 mmol，3.0當量)逐滴添加至以上混合物中。在室溫下攪拌所得混合物2 h，用H ₂O (50 mL)稀釋。用飽和Na ₂CO ₃(水溶液)將混合物鹼化至pH 7。用CH ₂Cl ₂(3×30 mL)萃取所得混合物。合併之有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。殘餘物藉由逆相急驟層析，使用以下條件純化：管柱、C18-120 g，移動相，CH ₃CN於水中，在10 min內自10%至50%梯度，偵測器，UV 254 nm。此產生呈白色固體狀之1-乙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-5-(三氟甲基)吡唑(2.0 g，81.1%)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 336。

步驟7

將NMM (199 mg，1.96 mmol，3.0當量)添加至1-乙基-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-5-(三氟甲基)吡唑(220 mg，0.65 mmol，1.00當量)及(S)-托品酸(109 mg，0.65 mmol，1.0當量)於DMF(5 mL)中之攪拌溶液中。在0℃下將HATU (299 mg，0.78 mmol，1.2當量)逐份添加至以上混合物中。在0℃下攪拌所得混合物1 h。所得混合物用H ₂O (50 mL)稀釋，用EtOAc (3×20 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。過濾之後，在減壓下濃縮濾液。粗產物藉由Prep-HPLC使用以下條件純化：XBridge Prep C ¹⁸OBD管柱，19*150mm，5 um，移動相、水(0.1% FA)及CH ₃CN (在7 min內自30%相B達至40%)，偵測器，UV 254 nm。此產生呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(117.1 mg，36.9%)。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.24 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.42-7.20 (m, 5H), 4.90 (t, J= 15.1 Hz, 1H), 4.57-4.29 (m, 5H), 4.07-3.93 (m, 2H), 3.61-3.46 (m, 1H), 1.39 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.102

合成(2R)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物112)

根據步驟7中所描述之步驟在使用(R)-托品酸合成化合物112中合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-乙基-5-(三氟甲基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.24 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.42-7.17 (m, 5H), 4.90 (t, J= 15.1 Hz, 1H), 4.57-4.29 (m, 5H), 4.07-3.93 (m, 2H), 3.60-3.46 (m, 1H), 1.39 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 484。實例1.103

合成(2S)-3-羥基-1-(2-{[1-(氧雜環戊-3-基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮(化合物113)

在步驟1中，根據針對化合物15使用1-(氧雜環戊-3-基)-1H-吡唑-4-磺醯氯代替2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯所描述之3步步驟合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2S)-3-羥基-1-(2-{[1-(氧雜環戊-3-基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (dd, J = 1.9, 0.7 Hz, 1H), 8.11 (q, J = 1.1 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 4H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 5.10 - 5.00 (m, 1H), 4.91 - 4.69 (m, 2H), 4.50 - 4.22 (m, 3H), 4.03 - 3.80 (m, 5H), 3.74 (td, J = 8.3, 5.4 Hz, 1H), 3.56 - 3.41 (m, 1H), 2.39 - 2.27 (m, 1H), 2.22 (dddd, J = 13.2, 8.3, 5.4, 3.6 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 458.45。實例1.104

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-2-(2,3-二氟苯基)-3-羥基丙-1-酮(化合物114)

遵循與合成化合物5，實例1.9之步驟6類似的步驟由6-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,3-苯并噻唑( 中間物 I - 7，100.00 mg；0.33 mmol；1.00當量)及2-(2-氟苯基)-2-甲氧基乙酸(60.72 mg；0.33 mmol；1.00當量)製得標題化合物。將粗產物溶解於DMSO中且經逆相矽膠用梯度溶離0-80% MeCN/水純化。合併含有產物之溶離份且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(2-氟苯基)-2-甲氧基乙-1-酮(66 mg，43%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d6) δ 8.80 - 8.62 (m, 1H), 8.21 - 8.11 (m, 1H), 7.45 - 7.32 (m, 2H), 7.28 - 7.12 (m, 2H), 6.56 - 6.21 (m, 1H), 5.34 - 5.27 (m, 1H), 4.91 - 4.59 (m, 4H), 4.50 - 4.22 (m, 2H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 470.2。實例1.105

合成1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-甲氧基乙-1-酮(化合物115)

遵循與合成化合物1，實例1.5之步驟6類似的步驟由6-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1,3-苯并噻唑( 中間物 I - 7，60.00 mg；0.20 mmol；1.00當量)及2-(3-氟吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酸鋰酯(37.80 mg；0.20 mmol；1.00當量)製得標題化合物。將粗產物溶解於DMSO中且經逆相矽膠用梯度溶離0-80% MeCN/水純化。合併含有產物之溶離份且冷凍乾燥，得到呈白色固體狀之1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)-2-甲氧基乙-1-酮(13 mg，43%)。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (dd, J = 2.2, 0.7 Hz, 1H), 8.36 (ddt, J = 4.5, 3.0, 1.5 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 18.0, 1.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 7.74 (dddd, J = 10.1, 8.4, 4.7, 1.3 Hz, 1H), 7.47 (dtd, J = 8.5, 4.4, 3.2 Hz, 1H), 6.39 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.84 (dd, J = 19.4, 14.4 Hz, 1H), 4.69 (td, J = 15.1, 3.5 Hz, 2H), 4.57 - 4.37 (m, 2H), 4.27 (dd, J = 38.4, 14.4 Hz, 1H), 3.35 (d, J = 3.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 471。實例1.106

合成(2S)-1-(2-{[1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物116)

在步驟1中，根據步驟1-3中針對化合物15使用1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-磺醯氯代替2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯所描述之步驟合成標題化合物。分離呈白色固體狀之(2S)-1-(2-{[1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.17 (dd, J = 1.6, 0.7 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.16 (q, J = 1.3 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.36 - 7.25 (m, 4H), 7.24 - 7.17 (m, 1H), 4.94 - 4.72 (m, 2H), 4.51 - 4.22 (m, 3H), 4.00 - 3.91 (m, 2H), 3.54 - 3.43 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z 438.04。實例1.107

合成(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)噻吩-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮(化合物117)

在步驟1中，根據針對化合物15使用5-(三氟甲基)噻吩-3-磺醯氯代替2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯所描述之3步步驟合成標題化合物。呈白色固體狀之(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)噻吩-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.89 (dd, J = 1.7, 0.9 Hz, 1H), 8.23 (p, J = 1.6 Hz, 1H), 8.13 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.37 - 7.24 (m, 4H), 7.24 - 7.17 (m, 1H), 4.96 - 4.74 (m, 2H), 4.54 - 4.21 (m, 3H), 4.04 - 3.88 (m, 2H), 3.56 - 3.42 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 471.95。實例1.108

合成(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)-1H-吡咯-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮(化合物118)

在步驟1中，根據針對化合物15使用5-(三氟甲基)-1H-吡咯并-3-磺醯氯所描述之3步步驟合成標題化合物。呈白色固體狀之(2S)-3-羥基-2-苯基-1-(2-{[5-(三氟甲基)-1H-吡咯-3-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)丙-1-酮。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 455.12。實例1.109

合成(2S)-1-{2-[(2-乙氧基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物119)

在步驟1中，根據針對化合物15使用2-乙氧基-1,3-噻唑-5-磺醯氯代替2,4-二甲基-1,3-噻唑-5-磺醯氯所描述之3步步驟合成標題化合物。呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[(2-乙氧基-1,3-噻唑-5-基)磺醯基]-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.16 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.36 - 7.25 (m, 4H), 7.23 - 7.18 (m, 1H), 4.94 - 4.81 (m, 1H), 4.81 - 4.71 (m, 1H), 4.53 - 4.23 (m, 5H), 3.95 (s, 2H), 1.32 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 449.12。實例1.110

合成(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(化合物120)

遵循針對合成化合物4，實例1.8所描述之步驟由(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸(90.00 mg，0.46 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑( 中間物 - 7，139.12 mg，0.46 moml，1.00當量)合成標題化合物。得到呈白色固體狀之(2S)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(125.8 mg，56.96%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (t, J = 1.0 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.14 - 8.08 (m, 1H), 7.29 - 7.16 (m, 2H), 7.06 - 6.97 (m, 1H), 6.89 (td, J = 7.5, 1.1 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.91 - 4.64 (m, 4H), 4.53 - 4.24 (m, 4H), 3.95 (ddd, J = 15.3, 9.8, 5.7 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.48 (ddd, J = 10.1, 5.0, 3.4 Hz, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 482。實例1.111

合成(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(化合物121)

遵循針對合成化合物4，實例1.8所描述之步驟由(2S)-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸(80.00 mg，0.41 mmol，1.00當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-{4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}吡唑( 中間物 - 7，123.66 mg，0.41 moml，1.00當量)合成標題化合物。呈白色固體狀之(2R)-1-{2-[1-(2,2-二氟乙基)吡唑-4-基磺醯基]-4H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基}-3-羥基-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮(109.7 mg，55.88%)。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 - 8.68 (m, 1H), 8.18 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.30 - 7.16 (m, 2H), 7.06 - 6.96 (m, 1H), 6.89 (td, J = 7.5, 1.1 Hz, 1H), 6.42 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.91 - 4.63 (m, 4H), 4.55 - 4.25 (m, 4H), 3.95 (tt, J = 9.8, 5.7 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.54 - 3.42 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 482。實例1.112

合成(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮(化合物122)

根據實例 1 . 6中所描述之步驟由(2R)-3-羥基-2-苯丙酸(175.94 mg；1.06 mmol；1.20當量)及1-(2,2-二氟乙基)-4-{2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-2-磺醯基}-1H-吡唑( 中間物 I - 7，(400.00 mg；0.88 mmol；1.00當量)合成標題化合物。得到呈白色固體狀之(2R)-1-(2-{[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]磺醯基}-2H,4H,5H,6H-吡咯并[3,4-c]吡唑-5-基)-3-羥基-2-苯基丙-1-酮。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.66 (dd, J = 2.5, 0.7 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.13 (m, 5H), 6.37 (tt, J = 54.4, 3.6 Hz, 1H), 4.93 - 4.74 (m, 2H), 4.67 (tdd, J = 15.2, 3.6, 1.5 Hz, 2H), 4.49 - 4.23 (m, 3H), 4.00 - 3.91 (m, 2H), 3.54 - 3.43 (m, 1H)。LCMS (ES) [M+1] ⁺m/z: 452.12。生物學實例實例2.1 丙酮酸激酶活化方法

蛋白質生產及純化

將人類丙酮酸激酶R (PKR)、殘基14-574及人類丙酮酸激酶M2、殘基1-531選殖至表現質體中且獲自ATUM Bio (Newark，CA)。蛋白質以融合物形式轉譯，其中6×His、8×Arg及SUMO位於N端。截短人類PKR之第三構築體，殘基50-574，且類似地選殖用於結晶學實驗。選殖所有蛋白質，在大腸桿菌(E. coli)中表現，且使用類似方案純化。細胞在30℃下在補充有0.4%葡萄糖之魯利亞-貝爾塔尼(Luria-Bertani)培養液中生長至OD600=0.8且在16℃下用0.4 mM IPTG誘導18小時。藉由離心收集細胞，再懸浮於50 mM磷酸鉀pH 8.0、500 mM NaCl、25 mM咪唑pH 8.0及3 mM β-巰基乙醇中。使用LM20微流化床自微流體(Westwood，MA)裂解細胞。粗裂解物立即補充有0.2 mM苯甲基磺醯氟(PMSF)且以20,000 g離心20分鐘。隨後在4℃下，將可溶溶離份與2 mL Ni-NTA (GE Healthcare)/1,000 OD一起培育1小時。與Ni-NTA樹脂一起培育之後，藉由以2,500 g粒化樹脂3分鐘來移除裂解物，且用9倍床體積之50 mM磷酸鉀pH 8.0、500 mM NaCl、25 mM咪唑及3 mM β-巰基乙醇洗滌3次。在批料洗滌之後，將Ni-NTA樹脂負載於重力管柱上，且用6倍床體積之10 mM Tris/HCl pH 8.0、200 mM NaCl、500 mM咪唑及3 mM β-巰基乙醇溶離經HIS標記之蛋白質。針對10 mM Tris/HCl pH 8.0、200 mM NaCl及1 mM DTT使經溶離蛋白質透析隔夜，且使用20:1莫耳比之蛋白質:3C蛋白酶使6×His-8×Arg-SUMO標籤裂解。蛋白質藉由針對HiTrapQ或MonoQ 10/100 GL管柱(GE Healthcare)之陰離子交換層析經由線性NaCl梯度純化且藉由尺寸排阻層析使用Superdex S200 26/60管柱(GE Healthcare)純化兩次，該陰離子交換層析在10 mM Tris/HCl pH 8.0、200 mM NaCl、10 mM MgCl ₂、1 mM DTT中運行。將蛋白質濃縮至約12 mg/mL以用於結晶且急驟冷凍以儲存。實例2.2

丙酮酸激酶R活化之生物化學分析

丙酮酸激酶R (PKR)及丙酮酸激酶M2 (PKM2)之活化係使用基於發光之量測ATP產生及激酶Glo發光激酶試劑套組來量測。將0.1 nM PKR或PKM2與分析緩衝液混合物(500 mM Tris/HCl pH 7.5、500 mM NaCl、50 mM MgCl ₂、BSA及2 mM DTT，以30 uL總反應體積)中之0.3 mM ADP、1% DMSO、化合物或2mM FBP一起培育1小時。在一小時之後，將PEP以0.1 mM之最終濃度添加至反應物中且在室溫下再培育一小時。添加30 uL 激酶Glo試劑且培育反應物15分鐘。終點發光資料使用EnVision盤讀取器(PerkinElmer)量測。分析結果提供於表2中。

表2

來自表 1 之化合物編號	PKR AC ₅₀(nM)	PKR 活化 % ^a
1	5.4	97
2	4.7	110
3	7.1	108
4	22	62
5	2.7	88
6	11	86
7	17	102
8	5.7	103
9	3	126
10	116	112
11	5.7	92
12	6.9	121
13	7	133
14	7.1	129
15	44	15
16	1000	55
17	53	23
18	72	70
19	19	67
20	720	7
21	16	65
22	1000	0
23	8.6	30
24	64	93
25	22	73
26	11	51
27	570	0
28	3400	85
29	420	86
30	46	119
31	3600	45
32	40	114
33	450	89
34	930	102
35	130	125
36	23	85
37	960	126
38	1800	121
39	120	90
40	81	53
41	3400	40
42	2100	102
43	29	108
44	110	53
45	1300	53
46	150	191
47	10	108
48	580	111
49	71	113
50	82	89
51	140	112
52	24	93
53	5.2	100
54	260	108
55	5.1	98
56	170	122
57	6.7	50
58	30	59
59	1600	55
60	28	74
61	3000	49
62	70	60
63	50	85
64	12	100
65	110	42
66	120	0
67	100000	0
68	2100	9
69	15	4
70	82	36
71	3900	30
72	9.6	98
73	17	66
74	440	72
75	0.51	3
76	3800	3
77	0.51	16
78	7.1	32
79	550	33
80	8.9	73
81	500	62
82	8.3	19
83	15	69
84	2500	73
85	＞10000	103
86	1.1	0
87	10000	59
88	680	0
89	1200	105
90	5.7	131
91	91	164
92	10000	0
93	120	180
94	34	18
95	2900	15
96	6.4	93
97	550	102
98	9.1	117
99	410	100
100	380	126
101	8.5	123
102	690	126
103	26	101
104	560	121
105	74	67
106	210	189
107	53	89
108	3300	62
109	26	63
110	37	146
111	1600	42
112	3100	174
113	24	47
114	320	134
115	2100	96
116	34	53
117	22	35
118	160	13
119	54	58
120	16	102
121	98	166
122	240	120
123	＞10000	123

^a 各化合物實現之最大活化水準相對於藉由10 μM之文獻化合物AG-348實現之活化水準。實例2.3

用於活化肺癌細胞株中之丙酮酸激酶M2的基於細胞之分析

將H1299細胞以2,000個細胞/孔(100 μL)接種於96孔盤中。經處理之培養盤在37℃及5% CO ₂下培育隔夜。化合物在完全培養基中稀釋且在1% DMSO存在下添加至細胞中。細胞在37℃及5% CO ₂下與化合物一起培育90分鐘，隨後用PBS洗滌三次以移除殘餘化合物，且隨後溶解於溶解緩衝液(細胞信號傳導)中。使用下文所描述之NADH偶合分析用180 uM NADH、2 mM ADP、0.5單位LDH及0.5 mM PEP之反應混合物分析細胞裂解物。PKM2活性使用基於NADH消耗之偶合酶活化系統在穩態下量測。PKM2產生丙酮酸鹽，且偶合系統使用乳酸脫氫酶(LDH)將丙酮酸鹽還原成乳酸鹽，同時將NADH氧化成NAD ⁺。使用SPECTROstar奈米板讀取器(BMG Labtech)在340 nm之波長下監測NADH至NAD ⁺之轉化及在750 nm下量測之背景吸光度減法。監測PEP添加之後NADH吸收率之變化，且藉由減去750 nm下之基線，繼之以擬合簡單線性回歸模型之最小平方獲得斜率。產生10點曲線以藉由針對提高化合物濃度擬合NADH消耗速率來計算AC ₅₀值。

已努力確保關於所用數字(例如量、溫度等)之準確性，但應考慮一些實驗誤差及偏差。

熟習此項技術者將認識到與本文所描述之方法及材料類似或等效的許多方法及材料，其可用於實踐本文所描述之標的物。本發明決不僅限於所描述之方法及材料。

除非另外定義，否則本文所用之技術及科學術語具有與一般熟習此主題所屬技術者通常所理解相同之含義，且與以下一致：Singleton等人(1994) Dictionary of Microbiology and Molecular Biology, 第2版, J. Wiley & Sons, New York, NY；及Janeway, C.、Travers, P.、Walport, M.，Shlomchik (2001) Immunobiology,第5版, Garland Publishing, New York。

在整個本說明書及申請專利範圍中，詞語「包含(comprise/comprises/comprising)」係以非排他性意義使用，上下文另外需要的情況除外。應理解，本文中所描述之實施例包括「由實施例組成」及/或「基本上由實施例組成」。

當提供值的範圍時，應理解除非上下文另外明確指示，否則涵蓋在該範圍之上限與下限之間的各個中間值(至下限之單位的十分之一)及在該指定範圍內之任何其他指定值或中間值。亦涵蓋可獨立地包括於較小範圍中之此等小範圍之上限及下限，在指定範圍內受到任何特定排他性限制。在指定範圍包括限制中之一或兩者時，亦包括排除彼等所包括之限制之任一者或兩者的範圍。

得益於在前述描述及相關圖式中所呈現的教示內容，熟習關於此主題的技術者將想到本文中所闡述之許多修改及其他實施例。因此，應理解，主題不限於所揭示之具體實施例，且修改及其他實施例意欲包括於所附申請專利範圍之範疇內。雖然本文採用特定術語，但其僅以通用及描述意義且不出於限制之目的使用。

Claims

一種式I化合物：
或其醫藥學上可接受之鹽，其中， R ^a1為羥基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷基； R ^a2為氫或C ₁-C ₃烷基；或R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成4員至5員雜環基； R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一個或兩個在各情況下獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：鹵基、C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、羥基-C ₁-C ₃烷基及(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基；及 R ^b為噻唑-2(3H)-酮或5員雜芳基環，各自視情況經在各情況下獨立地選自由以下組成之群的一個、兩個或三個取代基取代：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基、C ₁-C ₃烷氧基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、3員至6員環烷基、4員至6員雜環基、苯基及5員或6員雜芳基。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為羥基-C ₁-C ₃烷基。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為-OH、-CH ₂OH、-CH(OH)CH ₃、-OCH ₃或-OCH ₂CH ₂OH。
如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1為-CH ₂OH。
如請求項1至4中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a2為氫或-CH ₃。
如請求項5之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a2為氫。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^a1及R ^a2與其各自所連接之碳原子一起形成氧雜環丁烷基環。
如請求項1至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一或兩個鹵基取代。
如請求項8之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經一個鹵基取代。
如請求項9之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基或吡啶基，其各自視情況經氟基或氯基取代。
如請求項8至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為苯基、2-氟苯基、2-氯苯基或吡啶-2-基。
如請求項1至11中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為
，其中，X為CH或N；且 R ^c1為氫、氟基或氯基。
如請求項12之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為
。
如請求項1至13中任一項之化合物，其中R ^c為苯基。
如請求項1至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷氧基或羥基-C ₁-C ₃烷氧基鄰位取代之苯基。
如請求項15之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、甲氧基-C ₁-C ₃烷氧基、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂CH ₂OH鄰位取代之苯基。
如請求項16之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^c為經−CH ₂CH ₃、−OCH ₃、−OCH ₂CH ₂OH或−OCH ₂CH ₂OCH ₃鄰位取代之苯基。
如請求項1至17中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、鹵基-C ₁-C ₃烷基、(C ₁-C ₃烷氧基)-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷氧基、苯基及4員至6員雜環基。
如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CH ₂CH ₂CH ₃、−CH(CH ₃) ₂、氟基-C ₁-C ₃烷基、氟基-C ₁-C ₃烷氧基、苯基、5員雜環基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、−OCH ₂CH ₃及−OCH ₃。
如請求項19之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為噻唑-2(3H)-酮或經一或兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由以下組成之群：−CH ₃、−CH ₂CH ₃、−CF ₃、−CH ₂CHF ₂、−CH ₂CH ₂CF ₃、−CHF ₂、−OCH ₂CHF ₂、苯基、−OCH ₂CF ₃、−CH ₂CF ₃、−CH ₂CH ₂F、−CH ₂CH ₂OCH ₃、−OCH ₂CH ₃、−OCH ₃及四氫呋喃基。
如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個鹵基-C ₁-C ₃烷基取代且視情況進一步經一個C ₁-C ₃烷基取代之5員雜芳基環。
如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個選自由C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基組成之群的取代基取代之5員雜芳基環。
如請求項22之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個鹵基-C ₁-C ₃烷基取代之5員雜芳基環。
如請求項18之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經兩個取代基取代之5員雜芳基環，該等取代基各自獨立地選自由C ₁-C ₃烷基及鹵基-C ₁-C ₃烷基組成之群。
如請求項24之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為經一個C ₁-C ₃烷基及一個鹵基-C ₁-C ₃烷基取代之5員雜芳基環。
如請求項1至25中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為包含一個、兩個或三個氮環原子之5員雜芳基環。
如請求項26之化合物，其中該R ^b之5員雜芳基環為吡唑基、咪唑基、吡咯基、㗁唑基、三唑基或噻唑基。
如請求項27之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為吡唑基。
如請求項1至28中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
，其中R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基、甲氧基-C ₁-C ₃烷基、C ₁-C ₃烷基、氫或四氫呋喃基；及 R ^b2為氫、鹵基-C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷基。
如請求項1至29中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
。
如請求項29或30之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為鹵基-C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氫或C ₁-C ₃烷基。
如請求項29至31中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為氫。
如請求項29至31中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為C ₁-C ₃烷基。
如請求項33之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b2為-CH ₃。
如請求項29至34中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為氟基-C ₁-C ₃烷基。
如請求項35之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CHF ₂、-CH ₂CH ₂CF ₃、-CH ₂CH ₂F、-CH ₂CHF ₂或-CH ₂CF ₃。
如請求項29或30之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為C ₁-C ₃烷基；且R ^b2為氟基-C ₁-C ₃烷基。
如請求項37之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CH ₃；且R ^b2為-CF ₃。
如請求項29或30之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b1為-CH ₂CH ₂OCH ₃或四氫呋喃基；且R ^b2為氫。
如請求項27之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該R ^b之5員雜芳基環為噻唑基。
如請求項40之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
，其中R ^b3為鹵基-C ₁-C ₃烷氧基、C ₁-C ₃烷基、鹵基-C ₁-C ₃烷基或C ₁-C ₃烷氧基；且 R ^b4為氫或C ₁-C ₃烷基。
如請求項41之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
。
如請求項41或42之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b3為-CH ₃、-CH ₂CH ₂CF ₃、-OCH ₂CHF ₂、-OCH ₂CHF ₃、-OCH ₃或-OCH ₂CH ₃；且R ^b4為-CH ₃。
如請求項1至25中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為5員雜芳基環，其中該R ^b之5員雜芳基環為噻吩基。
如請求項44之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
，其中R ^b5為鹵基、C ₁-C ₃烷基、苯基或鹵基-C ₁-C ₃烷基。
如請求項45之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b為
。
如請求項45或46之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R ^b5為苯基、-CH ₂CH ₃、-CF ₃、溴基或-CH ₂CH ₂CF ₃。
如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，該化合物選自表1。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至48中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之賦形劑。
一種治療個體中與丙酮酸激酶(pyruvate kinase；PKR)及/或PKM2調節相關之疾病或病症的方法，其包含向該個體投與有效量之如請求項1至48中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項49之醫藥組合物。
一種活化個體中PKR及/或PKM2之方法，其包含向該個體投與有效量之如請求項1至48中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，或如請求項49之醫藥組合物。
一種治療罹患與PKR及/或PKM2活性降低相關之疾病之個體的方法，其包含向該個體投與有效量之如請求項1至48中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或如請求項49之醫藥組合物。
如請求項52之方法，其中該疾病係選自由以下組成之群：鐮狀細胞疾病、鐮狀細胞貧血、地中海貧血症、遺傳性非球形溶血性貧血、溶血性貧血、遺傳性球狀紅血球增多症、遺傳性橢圓形紅血球增多症、β-脂蛋白缺乏症、陣發性夜間血紅素尿症、後天性溶血性貧血、癌症及慢性疾病之貧血。
如請求項53之方法，其中該疾病係選自由鐮狀細胞疾病及地中海貧血症組成之群。
如請求項54之方法，其中該地中海貧血症為β-地中海貧血症。