[go: up one dir, main page]

TW202237612A - Ｉｒａｋ４抑制劑 - Google Patents

Ｉｒａｋ４抑制劑 Download PDF

Info

Publication number
TW202237612A
TW202237612A TW110145977A TW110145977A TW202237612A TW 202237612 A TW202237612 A TW 202237612A TW 110145977 A TW110145977 A TW 110145977A TW 110145977 A TW110145977 A TW 110145977A TW 202237612 A TW202237612 A TW 202237612A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
indazole
isomer
carboxamide
methoxy
pyrazolo
Prior art date
Application number
TW110145977A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI902994B (zh
Inventor
埃娜 特瑞斯提奇
史蒂芬 席瑟爾
雅芬 蘇
蕙芳 張
安納 英格利 克里斯堤納 博格瑞
Original Assignee
瑞典商阿斯特捷利康公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 瑞典商阿斯特捷利康公司 filed Critical 瑞典商阿斯特捷利康公司
Publication of TW202237612A publication Critical patent/TW202237612A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI902994B publication Critical patent/TWI902994B/zh

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本申請關於抑制IRAK4並且因此在醫學中具有潛在用途的具有式 (I) 之化學化合物及其藥學上可接受的鹽。

Description

IRAK4抑制劑
本說明書關於抑制IRAK4並且因此在醫學中具有潛在用途的化學化合物及其藥學上可接受的鹽。本說明書還關於該等IRAK4抑制劑在治療呼吸疾病、癌症、炎性疾病和自體炎性/自體免疫疾病中之用途，該等呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），該等自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症（Sjögren’s syndrome）、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬。本說明書還關於在製備所述IRAK4抑制劑中所關於之方法和中間體化合物，並且關於含有該抑制劑的藥物組成物。
介白素-1受體（IL-1R）相關激酶4（IRAK4）係免疫傳訊的關鍵調節子。IRAK4由多種細胞類型表現並且介導來自Toll樣受體（TLR）和介白素-1（IL-1）家族的受體（包括IL-1R、IL-18R和IL-33受體ST2）的訊息傳導。TLR識別來源於微生物的配位基，諸如脂多糖（LPS）或微生物RNA或DNA並對其產生反應，同時IL-1家族的受體可以藉由由TLR活化細胞（IL-1β和IL-18）或藉由組織損傷（IL-1α和IL-33）產生的內源性配位基活化。在TLR或IL-1受體藉由其配位基活化時，銜接蛋白髓樣分化初級反應88（MyD88）被募集到受體並且與IRAK家族的蛋白質（IRAK1、IRAK2和IRAK4）一起形成被稱為「Myddosome」的多聚體蛋白複合物。Myddosome充當傳訊平臺以誘導核因子κB（NF-κB）和促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）訊息傳導途徑，以轉錄因子NF-κB、活化蛋白1（AP1）、c-AMP反應元件結合蛋白（CREB）和干擾素調節因子5（IRF5）的活化結束，從而驅動炎性細胞介素和趨化因子的轉錄。缺乏IRAK4的小鼠係可存活的，但是缺乏對於IL-1β、IL-18和LPS的炎性細胞介素反應。在IRAK4中呈現功能缺失突變的人表現出免疫受損表型，並且他們的免疫細胞示出對於TLR促效劑和IL-1受體配位基的消除的細胞介素反應。
IRAK4的特徵在於介導與MyD88的相互作用的N-末端死亡結構域和位於中心的激酶結構域。Myddosome形成促進IRAK4自磷酸化，其調控Myddosome的穩定性和下游傳訊。藉由TLR和IL-1R進行的細胞介素誘導需要IRAK4的激酶活性，如藉由表現激酶死亡的IRAK4的敲入小鼠中的研究以及使用小分子IRAK4激酶抑制劑的研究所示。
鑒於其在消除炎性反應中的關鍵作用，IRAK4構成發揮抗炎作用的藥物的靶。
氣喘和COPD（慢性阻塞性肺疾病）係構成世界範圍內未滿足的醫學需求的慢性肺疾病。氣喘和COPD的特徵在於慢性氣道炎症，關於細胞介素釋放異常、免疫細胞活化失調和氣道重塑。在氣喘中，對於氣道的刺激，諸如過敏性、病毒性和細菌性刺激經由病原體相關分子模式（PAMP）活化TLR受體，並且經由警報素（包括IL-33和IL-1α）的釋放以及藉由炎性小體活化時釋放的IL-1β來活化IL-1R和ST2受體。TLR和IL-1家族的受體存在於氣道中的多種細胞類型中，包括巨噬細胞、樹突細胞、肥大細胞、單核細胞和上皮細胞，並且藉由釋放炎性細胞介素（TNF-α、IL-6、IL-8、GM-CSF、IL-5）對其配位基產生反應，從而導致氣道炎症、炎性細胞（諸如嗜中性粒細胞和嗜酸性粒細胞）的募集、氣道高反應性和黏液產生。IRAK4抑制具有抑制氣道中的該等炎性途徑的潛力。來自氣喘和COPD患者的肺樣本的基因表現分析已經揭示了若干患者的子集中與IL-1R和TLR2/4炎性途徑相關聯的基因表現上調。據我們所知，雖然還未在治療呼吸疾病的臨床中探索IRAK4抑制劑，但是來自若干研究組的臨床前數據指示干擾IRAK4調節的途徑減弱氣喘和COPD兩者的動物模型中的氣道炎症。例如，缺乏MyD88（myddosome的中心組分）的小鼠被保護而免受由過敏原或IL-33誘導的氣道炎症，如用阻斷IRAK2與IRAK4之間的相互作用的小分子模擬物處理的小鼠。還已經發現用單株抗體阻斷IL-1β在氣喘的耐類固醇的小鼠模型中抑制由過敏原和細菌誘導的氣道炎症。此外，在過敏原攻擊時用IL-1R拮抗劑阿那白滯素處理小鼠在過敏性氣喘的小鼠模型中改善氣喘樣症狀。長期暴露於香煙煙霧係罹患COPD的主要因素。在暴露於香煙煙霧的小鼠中，IL-1傳訊在介導嗜中性粒細胞氣道炎症中是重要的，並且用針對IL-1α、IL-1β或IL-1R的抗體阻斷IL-1傳訊可以改善肺中的嗜中性粒細胞炎症並且減少暴露於香煙煙霧的小鼠中的細菌或病毒誘導的惡化。綜合考慮，IRAK4抑制具有藉由同時阻斷若干疾病相關的傳訊途徑而在炎性呼吸疾病中提供廣泛的抗炎作用的潛力。
作為Myddosome的重要調節子，IRAK4還是由IL-1R、TLR或ST2介導的機制驅動的其他炎性疾病中的有希望的治療靶。如先前揭露的，IRAK4在自體免疫障礙諸如類風濕性關節炎和全身性紅斑狼瘡（SLE）中發揮作用（參見例如WO 2017207386和WO 2015150995）。在SLE中，由自身抗體和自體抗原構成的免疫複合物可以驅動TLR依賴性病理性傳訊。在SLE病理中，據報告IRAK4抑制阻斷漿細胞樣樹突細胞中由TLR7和TLR9活化介導的I型干擾素和促炎細胞介素的釋放。表現IRAK4的激酶死亡突變體或用IRAK4激酶抑制劑化合物處理的小鼠耐受實驗誘導的關節炎和狼瘡（參見例如WO 2017207386）。阿那白滯素（一種IL-1受體拮抗劑）用於治療類風濕性關節炎的批准用途也支持致病性IL-1R傳訊在這種疾病中的作用。在休格倫氏症中，TLR在PBMC（外周血單核細胞）中上調，並且唾液腺和TLR活化可以刺激干擾素和其他炎性細胞介素的釋放，表明其牽涉到休格倫氏症的病理。MyD88敲除小鼠在休格倫氏症的實驗小鼠模型中還表現出減少的疾病表現。全身性硬化症係一種嚴重的自體免疫障礙，其中IL-1R、TLR4、TLR8和ST2傳訊可以驅動致病機制，包括微血管損傷和纖維化。抑制IRAK4作為全身性硬化症的治療因此將同時阻斷多個疾病相關途徑。在肌炎中，高水平的IL-1α和IL-1β可能促進肌肉細胞炎症。肌炎患者還被表徵為高I型干擾素基因簽名，其可以部分地由TLR7/9活化驅動，並且IL-1R傳訊的相關性由較小的機械臨床試驗中用阿那白滯素治療的肌炎患者的改善的臨床結果支持。作為IL-1R途徑的重要調節子，IRAK4還是治療痛風中的有希望的靶。特別地在痛風患者中形成的尿酸一鈉晶體可以觸發炎性小體的活化和IL-1β的釋放。使用卡那津單抗（一種抗IL-1β單株抗體）或阿那白滯素兩者已經在痛風發作的治療中證明了臨床功效。還已經在患有子宮內膜異位症的患者中發現了高水平的IL-1β和IL-33。在口服投與IRAK4抑制劑抑制病灶形成的小鼠模型中示出了IRAK4在子宮內膜異位症的疾病過程中的重要性。在相同的小鼠模型中MyD88敲除小鼠也被保護而免受罹患子宮內膜異位症。IL-33/ST2傳訊係異位性皮膚炎中的關鍵機制，其關於皮膚炎症、上皮屏障完整性和嗜酸性粒細胞募集的調節。IL-33可以MyD88依賴性方式在小鼠中觸發濕疹和皮炎。作為ST2傳訊的調節子和myddosome的重要組分，IRAK4具有在異位性皮膚炎中抑制致病性IL-33/ST2傳訊的潛力。TLR7和IL-1R介導的機制兩者均表明關於牛皮癬。咪喹莫特（TLR/8促效劑）可以MyD88依賴性方式在小鼠中誘導牛皮癬樣疾病。IL-1β在牛皮癬皮損中上調並且已經表明IL-1β/IL-1R軸促進皮膚炎症並且調節牛皮癬病理中IL-17（一種從TH17細胞釋放的關鍵細胞介素）的產生。已經進一步顯示IRAK4激酶活性係體內調節TH17分化和TH17介導的疾病所需的。
多種IRAK4激酶抑制劑係已知的，並且已經在原理上被開發用於腫瘤學或炎性疾病（參見例如WO 2015150995、WO 2017207386、WO 2017009806、WO 2016174183、WO 2018234342）。在已知的IRAK4激酶抑制劑中，PF-06650833最近已經完成了治療類風濕性關節炎的II期臨床試驗（參見clinicaltrials.gov的NCT02996500條目）。
綜合考慮，IRAK4抑制劑具有用於治療多種疾病和病症的潛力，雖然目前為止還沒有這種抑制劑被批准用於臨床使用。本說明書的目標係提供具有使得IRAK4抑制劑適用於臨床使用，例如用於治療與IRAK4介導的途徑的活化相關聯的炎性疾病諸如氣喘、COPD和慢性自體免疫/自體炎性疾病的物理化學和選擇性特徵（profile）的新的IRAK4抑制劑。
在第一方面，本說明書提供了一種具有式 (A) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，
Figure 02_image001
(A) 其中： R 1選自
Figure 02_image005
； R 2選自
Figure 02_image007
； R 3和R 4各自獨立地選自H、Me、Et、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； Y係N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6、CONMe 2或5員 N-雜環諸如1,2,3-三唑，並且Z係H、Me、Et和視需要取代的C 1-C 6烷基；或者 Y和Z組合形成視需要取代的4員、5員或6員環； X選自OR 7和NR 8R 9； R 5選自H、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 6選自視需要取代的C 1-C 6烷基、視需要取代的C 3-C 6環烷基和視需要取代的5員或6員飽和N-雜環； R 7係Me、Et、異丙基、正丙基、環丙基、環丁基、視需要取代的C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的雜原子的4員、5員或6員環； R 8和R 9獨立地選自H、Me和視需要取代的C 1-C 6烷基，或者一起形成視需要取代的C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的另外的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環； 其中當存在時，Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9的視需要取代基獨立地選自OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。
在第二方面，本說明書提供了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，
Figure 02_image001
(I) 其中： R 1選自
Figure 02_image010
； R 2選自
Figure 02_image012
； R 3和R 4各自獨立地選自H、Me、Et、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； Y係N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6、CONMe 2或5員 N-雜環諸如1,2,3-三唑，並且Z係H、Me、Et和視需要取代的C 1-C 6烷基；或者 Y和Z組合形成視需要取代的4員、5員或6員環； X選自OR 7和NR 8R 9； R 5選自H、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 6選自視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 7係Me、Et、異丙基、正丙基、環丙基、環丁基、視需要取代的C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的雜原子的4員、5員或6員環； R 8和R 9獨立地選自H、Me和視需要取代的C 1-C 6烷基，或者一起形成視需要取代的C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的另外的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環； 其中當存在時，Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9的視需要取代基獨立地選自OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。
以下本文對具有式 (I) 之化合物的提及應閱讀為包括對具有式 (A) 之化合物提及以及對具有式 (I) 之化合物的提及。
本說明書還描述了一種藥物組成物，其包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及至少一種藥學上可接受的賦形劑。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於作為藥物。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）中使用。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療炎性疾病中使用。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬中使用。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療癌症中使用，例如用於與BTK抑制劑組合使用。
本說明書還描述了一種具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療癌症中使用。在此類使用中，具有式 (I) 之化合物可以用作單一療法，或與另一種治療劑組合使用，例如用於治療血液惡性腫瘤。有待治療的血液惡性腫瘤可以選自華氏巨球蛋白血症（WM）、非何杰金氏淋巴瘤（NHL）、彌漫型大B細胞淋巴瘤（DLBCL）、原發性中樞神經系統淋巴瘤（PCNSL）、脾臟緣帶淋巴瘤（SMZL）、小淋巴球淋巴瘤（SLL）、白血病（慢性淋巴球性白血病（CLL））和意義不明單株免疫球蛋白增高症（MGUS-IgM+）。此外，該使用可以是用於治療具有MYD88突變、B細胞受體（BCR）突變或MYD88和BCR突變兩者的血液惡性腫瘤。當該化合物與另一種治療劑組合使用時，該第二劑可以選自下組，該組包括BCR抑制劑諸如BTK抑制劑（實例包括依魯替尼（ibrutinib）、阿卡替尼（acalabrutinib）、澤布替尼（zanubrutinib）或替拉魯替尼（tirabrutinib））、PI3Kδ抑制劑和SYK抑制劑或免疫療法。
本說明書還描述了具有式 (I) 之化合物用於製造藥物之用途，例如其中該藥物用於治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），或用於治療癌症或用於治療自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬，或用於治療炎性疾病。
本說明書還描述了治療方法，其包括向對其有需要的患者投與有效量的具有式 (I) 之化合物，其中該有需要的患者具有呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），癌症，自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬或炎性疾病。
本說明書還關於用於製造具有式 (I) 之化合物之方法。
藉由閱讀本說明書，本說明書的另外的方面對於熟悉該項技術者而言將是明顯的。
本說明書參考下圖。
如上所述，已經發現具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽係IRAK4激酶的有效抑制劑。此外，具有式 (I) 之較佳的化合物表現出對於其他激酶優異選擇性，從而提供了避免脫靶作用和毒性的特徵。IRAK4抑制性活性和缺乏有害脫靶作用的此希望組合指示本說明書的化合物用於醫學的適用性。
除非另外定義，否則本文使用的所有技術和科學術語具有如本揭露所屬領域的普通技術人員通常理解的相同含義。例如， Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology[簡明生物醫學和分子生物學詞典], Juo, Pei-Show, 第2版, 2002, CRC出版社； Dictionary of Cell and Molecular Biology[細胞和分子生物學詞典], 第3版, 1999, Academic Press [學術出版社]；以及 Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology[生物化學和分子生物學牛津詞典]，修訂版, 2000, 牛津大學出版社（Oxford University Press）為技術人員提供在本揭露中使用的許多術語的通用詞典注釋。
為了使本說明書可以更容易理解，在下面明確定義了某些術語。此外，定義在整個詳細說明中視情況而闡述。
單位、前綴和符號係以它們的國際單位系統（Système International de Unites）（SI）接受的形式表示。數值範圍包括限定該範圍的數字。
術語「藥物組成物」係指如下製劑，該製劑處於允許該活性成分的生物活性有效的形式，並且不含有另外的、對其將要投與的受試者具有不可接受的毒性的組分。此類組成物可以是無菌的。根據本說明書的藥物組成物將包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，和至少一種藥學上可接受的賦形劑。
術語如「治療（treating）」或「治療（treatment）」或「治療（to treat）」或「減輕（alleviating）」或「減輕（alleviate）」係指 (1) 使得診斷的病理性病症或障礙被治癒、減緩、減輕症狀、和/或停止進展的治療措施以及 (2) 防止和/或減緩所靶向的病理學病症或障礙的發展的預防性或防止性措施。因此，需要治療的那些包括已具有障礙的那些；傾向於具有或罹患障礙的那些；以及在他們中需要預防障礙的那些。在某些方面中，如果患者顯示例如，總的、部分的或暫態的此呼吸疾病的症狀的緩解，則根據本揭露之方法成功「治療」了該受試者的呼吸疾病。
術語「受試者」係指有待成為特定治療的接受者的任何動物（例如，哺乳動物），包括但不限於人類、非人類靈長動物、齧齒類等。典型地，術語「受試者」和「患者」在本文關於人類受試者可互換地使用。
如本文和以上所用，符號 «用於指示具有式 (I) 之化合物的組分與該化合物的其他組分的連接位點。為了藉由實例對此進行說明，當具有式 (I) 之化合物具有以下指定的R 1結構單元（moift）時，該化合物將是具有結構 A的化合物。類似地，當具有式 (I) 之化合物具有以下R 2結構單元時，該化合物將是具有結構 B的化合物。
Figure 02_image014
如本文所用，術語「烷基」係指具有指定碳原子數的直鏈和支鏈飽和烴基。如本文所用，術語氘烷基係指其中一個或多個，視需要所有氫被氘原子替代的烷基。術語環烷基係指飽和的環烴。
在本說明書中，如在術語中所使用的前綴C x-C y諸如C x-C y烷基和類似物（其中x和y係整數）指示在該基團中存在的碳原子的數值範圍。例如，C 1-C 4烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、二級丁基、異丁基和三級丁基，同時C 1-C 3烷基的實例包括甲基、乙基、正丙基和異丙基。C 1-C 4烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、二級丁氧基和三級丁氧基。C 1-C 3烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和異丙氧基。
除非明確說明，否則基團的鍵合原子可以是該基團的任何適合的原子；例如，丙基包括丙-1-基和丙-2-基。
如本文所用，術語環烷基係指具有指定碳原子數的飽和環烴基。因此，C 3-C 6環烷基係指環丙基、環丁基、環戊基和環己基。
如本文所用，術語烷氧基係指具有連接至烷基鏈上的氧原子的基團，其中如上定義，烷基鏈係具有指定碳原子數的直鏈和支鏈飽和烴基。因此，C 1-C 3烷氧基係指甲氧基、乙氧基、O n Pr和O i Pr基團。
如本文和以上所述，基團R 2可以被基團R 4取代。在此類情況下，基團R 4可以附接至任何可用的環碳上，雖然較佳的是R 4附接至與附接至如下所示的吲唑環上的碳原子相鄰的碳原子上。
Figure 02_image016
如本文和以上所述，術語乙醯基係指具有式-C(O)Me的基團。對於N-醯化基團的提及在本文中用於是指具有小烷基側鏈（即，視需要取代的C 1-C 6烷基側鏈或視需要取代的C 3-C 6環烷基）的醯胺，在每種情況下，視需要的取代基選自OH、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl，其中較佳的 N-醯化基團係 N-乙醯基，即基團-NRC(O)Me。
如本文和以上所述，具有式 (I) 之化合物包含基團R 2，其可以是被組合形成4員、5員或6員環的兩個基團Y和Z取代的環己基環。在此類情況下，該4員、5員或6員環係飽和烴環系統，視需要其中，一個或兩個環碳被選自O和N的雜原子替換。在其中兩個環碳被雜原子替換的情況下，雜原子不是直接結合的，即雜原子替換不相鄰的環碳，或者它們在環中不被CH 2基團間隔開，但是可以例如被羰基連接以提供例如碳酸酯或胺基甲酸酯結構單元。烴環可以併入羰基，如在Y和Z組合形成環醯胺的情況下。在較佳的實例中，4員、5員或6員環係環醯胺或胺基甲酸酯，諸如吡咯啶-2-酮、㗁唑啶-2-酮、哌啶-2-酮和1,3-㗁𠯤啶-2-酮。可替代地，基團Y和Z可以組合形成在氮處被醯基取代的氮雜環丁烷。此外，4員、5員或6員環可以被選自以下的基團取代：OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。該等視需要的取代基可以有利地用於調控分子的物理化學特性，諸如可溶性，或例如相對於其他激酶進一步優化與IRAK4激酶的相互作用，從而提供更有效和更具選擇性的IRAK4激酶抑制劑。
如本文所述，具有式 (A) 之化合物包含可以選自以下的基團Y：N(R 5)COMe、N(Me)COR 6和N(R 5)COR 6。在此類情況下，基團R 6可以是視需要取代的5員或6員飽和 N-雜環，例如經由雜環的氮原子連接至Y的羰基上以提供尿素部分的吡咯啶或哌啶。例如，Y可以是基團N(Me)COR 6，其中R 6係如下所示的3-羥基吡咯啶。
Figure 02_image018
如本文和以上所述，基團R 7可以是含有選自O和N的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環。為了避免疑問，「含有雜原子」意指環的原子中的一個係選自O或N的雜原子。在此類情況下，含有選自O和N的雜原子的飽和4員、5員或6員環係較佳的。含有選自O和N的雜原子的較佳的4員、5員或6員環的實例係氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、四氫呋喃、吡咯啶、四氫哌喃和哌啶。如本文和以上所述，取代基R 8和R 9可以組合以形成含有選自O和N的另一個雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環。在其中存在另一個雜原子的情況下，該雜原子不直接結合至N，即環中的雜原子係不相鄰的，或者它們不被CH 2基團間隔開。在此類情況下，較佳的是所得的環係飽和的，例如所得的環可以是𠰌啉或哌𠯤環。
如對於本領域的讀者明顯的，具有式 (I) 之化合物並且特別是基團R 2可以各種立體化學形式存在。應理解，申請專利範圍涵蓋具有式 (I) 之化合物的所有立體化學形式，雖然作為IRAK4的抑制劑的具有最高活性的化合物係較佳的。應認識到，具有式 (I) 之化合物可以在存在或不存在處於任何相關比例的具有式 (I) 之化合物的一種或多種其他可能的立體異構形式的條件下製備、分離和/或提供。立體富化的或立體純的化合物的製備可以藉由本領域中熟知的有機化學標準技術進行，例如藉由從立體富化的或立體純的起始材料合成，合成過程中使用適當的立體富化的或立體純的催化劑，和/或藉由拆分外消旋的或部分富化的立體異構物混合物（例如經由手性層析法）進行。
作為實例，在以下情況下，取代基R 2係1,3-取代的環己醇基團。在此系統中，環上醇和吲唑基團的相對（ rel）立體化學可以是順式或反式，並且順式或反式異構物中的每一種將進而以反映手性中心（即，附接至羥基和吲唑基團上的碳）的 (R)或 (S)組態的兩種鏡像異構物形式存在。在本文所述之某些情況下，化合物將被稱為具有相對（ rel）立體化學佈置的化合物的異構物1和2，因此在被稱為 rel-(1 S, 3 R)的化合物的情況下，應理解，兩種可能的異構物係具有相同的相對立體化學但彼此係鏡像異構物的(1 S,3 R)異構物和(1 R,3 S)異構物。因此對於以下具有順式相對立體化學的化合物的提及係指具有此相對立體化學的兩種可能的化合物。本文的已知相對立體化學和未確定的絕對立體化學的結構被描繪為具有限定詞的單一鏡像異構物「或鏡像異構物」。
Figure 02_image020
如本文和以上所述，具有式 (I) 之化合物的某些組分係視需要取代的。如本文所述，術語視需要取代的意指化合物的結構元件可以被或可以不被一個或多個指定的視需要取代基取代。在其中基團Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9中的一個或多個存在視需要取代基的情況下，通常較佳的是每個取代基團存在零個、一個或兩個取代基，例如存在零個或一個取代基。在其中存在兩個羥基取代基的情況下，應理解，兩個羥基不附接至同一碳原子上。在其中視需要取代基係F的情況下，較佳的是存在一個、兩個或三個F取代基，並且此外，在存在兩個或三個取代基的情況下，它們直接結合至同一碳原子。該等視需要的取代基可以用於調控分子的物理化學特性，諸如可溶性，調控代謝，或例如相對於其他激酶進一步優化與IRAK4激酶的相互作用，從而提供更有效和更具選擇性的IRAK4激酶抑制劑。
如上所述，在第一實施方式中，本說明書提供了一種具有式 (A) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，
Figure 02_image001
(A) 其中： R 1選自
Figure 02_image023
； R 2選自
Figure 02_image025
； R 3和R 4各自獨立地選自H、Me、Et、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； Y係N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6、CONMe 2或5員 N-雜環諸如1,2,3-三唑，並且Z係H、Me、Et和視需要取代的C 1-C 6烷基；或者 Y和Z組合形成視需要取代的4員、5員或6員環； X選自OR 7和NR 8R 9； R 5選自H、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 6選自視需要取代的C 1-C 6烷基、視需要取代的C 3-C 6環烷基和視需要取代的5員或6員飽和N-雜環； R 7係Me、Et、異丙基、正丙基、環丙基、環丁基、視需要取代的C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的雜原子的4員、5員或6員環； R 8和R 9獨立地選自H、Me和視需要取代的C 1-C 6烷基，或者一起形成視需要取代的C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的另外的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環； 其中當存在時，Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9的視需要取代基獨立地選自OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。
在實施方式中，具有式 (A) 之化合物係具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，
Figure 02_image001
(I) 其中： R 1選自
Figure 02_image027
； R 2選自
Figure 02_image029
； R 3和R 4各自獨立地選自H、Me、Et、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； Y係N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6、CONMe 2或5員 N-雜環諸如1,2,3-三唑，並且Z係H、Me、Et和視需要取代的C 1-C 6烷基；或者 Y和Z組合形成視需要取代的4員、5員或6員環； X選自OR 7和NR 8R 9； R 5選自H、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 6選自視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 7係Me、Et、異丙基、正丙基、環丙基、環丁基、視需要取代的C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的雜原子的4員、5員或6員環； R 8和R 9獨立地選自H、Me和視需要取代的C 1-C 6烷基，或者一起形成視需要取代的C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的另外的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環； 其中當存在時，Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9的視需要取代基獨立地選自OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (Ia) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image031
並且基團Y和Z組合形成4員、5員或6員環，其係視需要取代的3-羥基環丁基、 N-醯化氮雜環丁烷、吡咯啶-2-酮、1-烷基吡咯啶-2-酮、3-烷基㗁唑啶-2-酮、1-烷基哌啶-2-酮或3-烷基-1,3-㗁𠯤啶-2-酮環。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (Ib) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image031
並且基團Y和Z組合形成4員、5員或6員環，其選自3-羥基環丁基、 N-乙醯基氮雜環丁烷、1-甲基吡咯啶-2-酮、3-甲基㗁唑啶-2-酮、1-甲基基哌啶-2-酮和3-甲基-1,3-㗁𠯤啶-2-酮。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (Ic) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image031
並且基團Y和Z組合形成選自以下的4員、5員或6員環
Figure 02_image033
其中 «代表與環己基的附接位點，並且R 10係Me或視需要被OH、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、NH 2、NHMe、NMe 2、F或Cl取代的C 1-C 6烷基。
在實施方式中，具有式 (A) 之化合物係具有式 (Ac) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image031
並且基團Y和Z組合形成係
Figure 02_image035
的4員、5員或6員環，其中 «代表與環己基的附接位點，並且R 10係Me或視需要被OH、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、NH 2、NHMe、NMe 2、F或Cl取代的C 1-C 6烷基。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (Id) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image031
，Y選自N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6和CONMe 2並且Z係H。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (Ie) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image037
，視需要其中R 4係H。
在實施方式中，具有式 (I) 或式 (A) 之化合物係具有式 (If) 之化合物，其中基團R 2係
Figure 02_image039
，視需要其中R 3和R 4係甲基。
在實施方式中，具有式 (If) 之化合物係具有式 (Ig) 之化合物，其中基團R 2選自
Figure 02_image041
。
在實施方式中，具有式 (If) 之化合物係具有式 (Ih) 之化合物，其中基團R 2選自
Figure 02_image043
。
在實施方式中，具有式 (If) 之化合物係具有式 (Ah) 之化合物，其中基團R 2選自
Figure 02_image045
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig) 或 (Ih) 中的任一個的化合物係具有式 (Ii) 之化合物，其中R 1係
Figure 02_image047
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ac) 或 (Ah) 中的任一個的化合物係具有式 (Ai) 之化合物，其中R 1係
Figure 02_image047
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ac) 或 (Ah) 中的任一個的化合物係具有式 (Aj) 之化合物，其中R 1係
Figure 02_image049
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig) 或 (Ih) 中的任一個的化合物係具有式 (Ij) 之化合物，其中R 1係
Figure 02_image049
。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii) 或 (Ij) 之化合物係具有式 (Ik) 之化合物，其中X係OR 7，視需要其中R 7係OMe。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ac) 或 (Ah) 中的任一個的化合物係具有式 (Ak) 之化合物，其中X係OR 7，視需要其中R 7係OMe。在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii) 或 (Ij) 之化合物係具有式 (Il) 之化合物，其中X係NR 8R 9。
在實施方式中，具有式 (I) 之化合物，例如具有式 (Ac) 或 (Ah) 中的任一個的化合物係具有式 (A) 之化合物，其中X係NR 8R 9。
在實施方式中，具有式 (A) 之化合物選自： N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 s,4 s)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 R,3 S)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 s,4 s)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-(4-羥基-4-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((7 R,8 R)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺或 rel-2-((7 S,8 S)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1、2、3或4； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2,4-二甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2,4-二甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基環丙烷甲醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-((1 r,3 R)-3-羥基 -N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-((1 s,3 S)-3-羥基 -N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(2-羥基- N,2-二甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 r,3 r)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 s,3 s)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3-三唑-1-基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3-三唑-2-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 rel-2-((1 S,2 S,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 R,3 S)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 R,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基 -N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 R)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 S)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基 -N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基) -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((5 R,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2以及 rel-2-((5 S,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2 或其藥學上可接受的鹽。
本發明的IRAK4抑制劑可以由可易於獲得的起始材料（可從商業供應商，諸如默克公司（Merck KGaA）獲得或藉由包括在熟悉該項技術者的公知常識中之方法獲得）製備。以下反應方案描述了用於合成IRAK4抑制劑的各種方法。可以給出典型或較佳的反應條件用於合成，但是熟悉該項技術者將能夠提出該等條件的修改以獲得本文沒有描述的類似物。以下呈現的方案因此係用於合成本說明書的化合物的代表性方法，並且它們不應被解釋為以任何方式約束本說明書的範圍。此外，可以修改反應順序以改變總體合成，以便允許在不同的合成階段處在分子的不同位置處的變化。
有知識的讀者將認識到，以下方案中所述之化合物可能在一些情況下作為區域異構物和立體異構物的混合物獲得，該等異構物可以在合成的不同階段處使用熟悉該項技術者熟知的技術諸如矽膠/C18層析法、HPLC、SFC、結晶等分離。
骨架 / 構建單元的通用合成：
方案 1：用Hal = 鹵化物合成骨架I-6。
Figure 02_image052
如方案1所示的骨架I-6可以由可商購獲得的2,4-二氟苯甲醛 (I-1) 製備。I-1可以使用標準硝化條件，例如使用濃硫酸和濃硝酸的混合物或如例如WO2017/009798中所述使用濃硫酸和硝酸鉀的混合硝化，以得到硝基化合物I-2。在鹼（例如，DIPEA）和合適的溶劑（例如，DMF）的存在下在高溫下用環丙醇處理I-2形成異丙醚I-3。吲唑I-4可以由I-3藉由其在合適的溶劑中在高溫（例如，80°C）下與肼反應獲得。隨後，芳香族胺I-5可以藉由還原硝基化合物I-4，例如藉由在乙醇/水混合物中用Fe和氯化銨（可替代地，可以使用在H 2氣氛下在MeOH中的碳上的Pd（或碳上的Pd(OH) 2））處理獲得。胺I-5可以藉由例如在合適的溶劑（例如，乙腈）中用亞硝酸三級丁酯和溴化銅(I)處理來轉化為對應的溴化物I-6（Hal = Br）。在硝基還原之前用例如PMB保護基團對I-4的吲唑NH進行保護，接著在引入溴化物之後進行去保護增加該等轉換的產率。胺I-5可以藉由例如在水/乙酸中用亞硝酸鈉和碘化鉀處理來轉化為對應的碘化物I-6（Hal = I）。
方案 2：用如請求項中定義的R 1和R 7= −Me或−環丙基通用合成構建單元II-4。
Figure 02_image054
鹵化物II-1（Hal = Br或I）可以用作合成構建單元II-4的起始材料，如方案2中描繪。鹵化物II-1係可商購獲得的，或者可以使用以上方案1中所述之步驟獲得。在作為溶劑的醇的存在下在CO氣氛（視需要在COware ®和SilaCOgen ®的幫助下原位生成）下用Pd催化劑（例如，Pd(dppf)Cl 2）處理II-1產生酯II-2（當使用MeOH作為溶劑時，在此示為甲酯）。隨後在合適的溶劑（例如，水）中用例如氫氧化鋰或氫氧化鉀裂解酯產生羧酸II-3。用胺R 1−NH 2對此酸II-3進行的醯胺形成可以在作為溶劑的鹼（例如，DIPEA）和DMF和/或THF的存在下用各種醯胺偶合試劑（例如，HATU）進行以產生所需的構建單元II-4。
鹵化物II-1轉化為醯胺II-4還可以使用胺基羰基化反應以一步方式進行。在鹼（例如，TEA）和胺R 1−NH 2的存在下在CO氣氛（視需要原位生成）下在溶劑（例如，CH 3CN）中用Pd源（例如，Pd(OAc) 2）和合適的配位基（例如，1,3-雙(二苯膦基)丙烷）攪拌II-1（Hal = Br或I）在一步中得到醯胺II-4。
方案 3：用以下物質通用合成構建單元III-2：Hal = 鹵化物（Br，I）；R = R 2（如請求項中定義）或如下定義的R 2的保護先質；R 7= −Me或−環丙基等。
Figure 02_image056
方案3中所示的吲唑III-2可以藉由用在合適的溶劑（例如，DMF、THF、二㗁𠮿、二甲苯、MeCN）中的鹼（例如，K 2CO 3、Cs 2CO 3、NaHCO 3、NaOH、KOH、Na t OBu、K t OBu、KOEt、KHMDS、DIPEA、吡啶、TEA）和R 2的烷基化試劑R−Y（例如，甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或鹵化物）在高溫下處理來由化合物III-1（可商購獲得或藉由以上方案1中所示的合成獲得）獲得。可替代地，烷基化可以藉由化合物III-1與R 2的α,β-不飽和羰基先質的邁克爾反應來進行。在R 2含有需要藉由合適的保護基團保護以用於此合成步驟的官能基的情況下，應使用R 2的合適保護先質。此外，如方案3中所示的烷基化反應可以用R 2的合適先質進行，該先質可以稍後在朝向目標化合物的合成中轉化為R 2。例如，如果R 2含有胺或醯胺官能基，則胺可以在烷基化劑中用合適的保護基團（例如，Boc）保護，該保護基團在烷基化反應之後裂解。隨後，胺可以烷基化或轉化為醯胺。如果R 2含有醇官能基，則此官能基可以用合適的醇保護基團保護，該醇保護基團承受烷基化反應的反應條件並且在目標化合物的合成中在後續階段裂解。保護基團係本領域熟知的（參見例如，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis [有機合成中的保護基團], Ed P.G.M.Wuts, Wiley, NY 2014, 第5版）。可替代地，烷基化劑可以含有呈合適的保護羰基官能基形式的胺/醯胺/醇官能基的先質，其可以在藉由熟悉該項技術者已知的合成方法進行的合成中在後續階段中去保護並轉化為目標化合物的所需胺/醯胺/醇官能基。
根據以上所述之烷基化反應中使用的反應條件，可以獲得 N1和 N2-區域異構物的混合物。 N1異構物可以在以上所述之烷基化反應之後立即或在目標化合物的合成中在後續階段中藉由例如柱層析法與 N2異構物分離。
方案 4：用以下物質通用合成構建單元IV-2和IV-7：R = R 2（如請求項中定義或其如在方案3中所述之合適保護的先質；R 7= −Me、−環丙基等。
Figure 02_image058
方案4描述了 N-2吲唑異構物IV-2和IV-7的區域選擇性合成。在合適的溶劑（例如， iPrOH）中在高溫下用胺R−NH 2處理用於合成IV-2的可商購獲得的起始材料IV-1，接著添加三正丁基膦使得形成IV-2。用於合成IV-7的起始材料IV-3係可商購獲得的（IV-3，R 7= Me，CAS 586412-86-4），或者可以如方案1中概述的合成順序中所示獲得（針對R 7= 環丙基）。在合適的溶劑（例如，EtOH）中用胺R−NH 2處理苯甲醛IV-3以形成對應的亞胺，接著在合適的溶劑（例如，DMF）中與疊氮化鈉攪拌粗亞胺IV-4產生雙環中間體IV-5。還原IV-5的硝基（在H 2氣氛下用例如碳上的Pd(OH) 2）產生芳香族胺IV-6。隨後在乙酸中用例如亞硝酸鈉和碘化鉀處理IV-6產生對應的碘化合物IV-7。
具有式 (I) 之化合物的通用合成：
方案 5：具有式 (I) 之化合物的通用合成，方法1：
Figure 02_image060
具有式 (I) 之化合物可以由化合物II-4如方案5中所示製備（R 7= −Me、−環丙基等；R 1係如請求項中定義的）。方案2中示出了製備化合物II-4的反應順序。
吲唑II-4可以藉由在與鹼相容的溶劑中用鹼（例如，KOH、KHMDS、Cs 2CO 3）和合適的烷基化試劑R−Y（Y = 甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、鹵化物，R = R 2或如方案3中以上定義的R 2的合適保護先質）處理來烷基化。在烷基化反應中使用R−Y（其中R = R 2的合適先質）的情況下，方案3中所述之步驟可以在烷基化之後進行以將R轉化為目標化合物的R 2。
根據以上所述之烷基化反應中使用的反應條件，可以獲得 N1和 N2-區域異構物的混合物。 N1異構物可以藉由例如柱層析法與 N2異構物分離以獲得具有式 (I) 之化合物。
方案 6：具有式 (I) 之化合物的通用合成，方法2：
Figure 02_image062
方案6中示出了製備具有式 (I) 之化合物的另一種方法。用於此途徑的合適起始材料係吲唑III-2（Hal = 鹵化物（Br，I）；R = 如請求項中定義的R 2或其如方案3中所述之合適先質；R 7= −Me、−環丙基等）。鹵化物III-2可以如方案3和4中所述獲得，並且可以首先在作為溶劑的醇的存在下在CO氣氛下（在高壓下）用Pd催化劑（例如，Pd(dppf)Cl 2）處理以產生酯VI-1（如果使用MeOH作為溶劑，則形成Me-酯VI-1）。隨後在合適的溶劑（例如，水）中藉由例如氫氧化鋰或氫氧化鉀裂解酯產生羧酸VI-2。用胺R 1−NH 2（R 1係如請求項中定義的）進行的此酸VI-2的醯胺形成可以用各種醯胺偶合試劑（例如，HATU，T3P）進行以產生具有式 (I) 之所需化合物。
如果方案6中所示的反應順序以化合物III-2（R = R 2的保護先質）開始，則將R轉換為R 2（如方案3中所述）可以在方案6中所示的合成順序的不同階段處進行，這取決於轉換的性質和順序中間體中存在的官能基與反應條件的相容性（熟悉該項技術者將能夠決定步驟的順序）。
將鹵化物III-2（R = R 2）轉化為具有式 (I) 之化合物也可以在一鍋胺基羰基化方案中進行。在鹼（例如，TEA）和偶合胺R 1−NH 2的存在下在CO氣氛下（在高壓下）在溶劑（例如，CH 3CN）中與Pd源（例如，Pd(OAc) 2）和合適的配位基（例如，1,3-雙(二苯膦基)丙烷或二(金剛烷-1-基)丁基磷烷）攪拌III-2（R = R 2）在一步中產生具有式 (I) 之化合物。
如果胺基羰基化反應用化合物III-2（R = R 2的合適保護先質）進行，則將R轉化為R 2（如方案3中所述）可以在方案6中所示的胺基羰基化反應之後進行，以得到具有式 (I) 之化合物。
方案 7：具有式 (I) 之化合物的通用合成，方法3：
Figure 02_image064
方案7示出了稍後在合成中改變取代基R 7以獲得具有式 (I) 之化合物之方法。以化合物VII-1開始，可以在DCM中用例如BBr 3裂解甲氧基醚以產生苯酚VII-2。隨後在烷基化反應或光延偶合中VII-2與烷基化試劑R 7−Y（例如，甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或鹵化物）或醇R 7−OH反應產生具有式 (I) 之化合物。
在本說明書的實施方式中，提供了合成具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽之方法，在具有式 (I) 之化合物的合成中的中間體，例如本文和以上所述之方法和中間體。
在實施方式中，提供了一種藥物組成物，其包含具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的賦形劑。在此類實施方式中，具有式 (i) 之化合物較佳的是用作單一鏡像異構物形式。可以視需要存在少量雜質，例如按質量計最多1%的其他立體異構物形式。該等藥物組成物可以用於治療其中IRAK4激酶抑制劑可以是有益的病症，如本文和以上更詳細所述。
在實施方式中，提供了一種用於產生藥品的具有式 (I) 之化合物，視需要其中該藥品用於治療或預防其中IRAK4激酶抑制劑可以是有益的病症，如本文和以上更詳細所述。
具有式 (I) 之化合物及其藥學上可接受的鹽可以按無定形形式、結晶形式、或半結晶形式製備、使用或提供並且任何給定的具有式 (I) 之化合物及其藥學上可接受的鹽可以能夠形成為多於一種晶體和/或多晶形形式，包括水合的（例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其他化學計量水合物）和/或溶劑化形式。應當理解的是本說明書涵蓋了任何以及所有具有式 (I) 之化合物及其藥學上可接受的鹽的此類固體形式。
在本說明書的另外的實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物，該化合物藉由在以下‘實例’部分中所描述之方法可獲得。
本說明書旨在包括存在於本發明化合物中的原子的所有同位素。同位素應理解為包括具有相同原子數但具有不同質量數的那些原子。例如，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括 13C和 14C。具有式 (I) 之同位素標記的化合物通常可藉由熟悉該項技術者已知的常規技術或藉由與在附隨的實例中所描述的那些類似的過程使用適當的同位素標記的試劑替代以前採用的非標記的試劑來製備。
具有式 (I) 之化合物的合適的藥學上可接受的鹽可以是例如酸加成鹽。具有式 (I) 之化合物的合適的藥學上可接受的鹽可以是例如具有式 (I) 之化合物的酸加成鹽，例如與無機酸或有機酸的酸加成鹽。本說明書中的化合物可以作為游離鹼化合物（即處於非鹽化狀態）來提供。
具有式 (I) 之化合物的另一種合適的藥學上可接受的鹽可以是例如在向所述人體或動物體投與具有式 (I) 之化合物之後在所述人體或動物體內所形成的鹽。
具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽可以作為共晶固體形式製備。應當理解的是具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽的藥學上可接受的共晶體形成本說明書的一個方面。
用於在藥學背景下使用，可能較佳的是在不存在大量其他立體異構形式的情況下提供具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
具有式 (I) 之化合物、或其藥學上可接受的鹽將通常經由口服途徑投與，但是以包含活性成分或其藥學上可接受的鹽或其溶劑化物或這種鹽的溶劑化物的藥物製劑的形式、以藥學上可接受的劑型的腸胃外、靜脈內、肌肉內、皮下或其他可注射方式、含服、直腸、陰道、經皮和/或鼻途徑和/或經由吸入的投與也是可以的。取決於有待治療的障礙和患者以及投與途徑，可以按變化的劑量投與該等組成物，例如以從1 mg至1,000 mg或從100 mg至2,000 mg的口服劑量投與。
上面所述之具有式 (I) 之化合物的藥物配製物可以被製備例如用於腸胃外、皮下、肌肉內或靜脈內投與。
以上所述之具有式 (I) 之化合物的藥物配製物可以方便地以單位劑型投與，並且可以藉由製藥領域中熟知的任何方法，例如如Remington's Pharmaceutical Sciences [雷明頓藥物科學], 第17版, Mack Publishing Company, Easton, PA. [馬克出版公司, 伊斯頓, 賓夕法尼亞州], (1985) 中所述之製備。
適於口服投與的藥物配製物可以包含一種或多種生理上可相容的載體和/或賦形劑，並且可以是呈固體或液體的形式。片劑和膠囊可以用以下物質製備：黏合劑；填充劑；滑潤劑；和表面活性劑。液體組成物可以含有常規添加劑，諸如懸浮劑；乳化劑；和防腐劑。液體組成物可以包封在例如明膠中以提供單位劑型。固體口服劑型包括片劑、兩件式硬殼膠囊和軟彈性明膠（SEG）膠囊。根據本說明書的示例性口服組成物包含填充到兩件式硬殼膠囊或軟彈性明膠（SEG）膠囊中的具有式 (I) 之化合物和至少一種藥學上可接受的賦形劑。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中作為藥物使用。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑使用。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用之用途。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於在如人類的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑使用的藥物中之用途。
在其中具有式 (I) 之化合物用於治療特徵在於過度增殖性疾病或實體腫瘤疾病的病症和相關治療方法以及用於製造旨在治療此類疾病的藥物的實施方式中，應理解，在較佳的實施方式中，該疾病係黑色素瘤，並且此外，與布魯頓氏酪胺酸激酶抑制劑組合使用係較佳的。
在本說明書中，除非另外說明，否則短語「有效量」意指化合物或組成物的足以顯著和積極地改變待治療的症狀和/或病症（例如，提供積極的臨床反應）的量。用於藥物組成物中的活性成分的有效量將隨所治療的具體病症、病症的嚴重程度、治療的持續時間、同步治療的性質、所利用的一種或多種具體活性成分、所利用的一種或多種具體藥學上可接受的賦形劑/載體、以及處於主治醫生的知識和專業知識範圍內的類似因素而變化。有效量通常在0.1 mg至1,000 mg的範圍內。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對IRAK4激酶的抑制性作用。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於提供對IRAK4激酶的抑制性作用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，還提供了一種用於提供對IRAK4激酶的抑制性作用之方法，其包括向對其有需要的患者投與有效量的如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個實施方式，提供了一種如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對IRAK4激酶的選擇性抑制性作用。在此類情況下，選擇性抑制性作用指示實現體外IRAK4激酶活性的50%抑制所需的具有式 (I) 之化合物的濃度低於實現另一種激酶（例如，如果被抑制則產生毒性副作用的另一種激酶）的50%抑制所需的濃度的10倍、100倍或1000倍或更低。
根據另一個實施方式，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於提供對IRAK4激酶的選擇性抑制性作用的藥物中之用途。
根據另一個實施方式，還提供了一種用於提供對IRAK4激酶的選擇性抑制性作用之方法，其包括向對其有需要的患者投與有效量的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
本文描述了可以抑制IRAK4激酶的化合物。在生物化學和基於細胞的測定中，本說明書的化合物顯示出係有效的IRAK4激酶抑制劑並且因此可用於治療藉由IRAK4激酶活性介導的障礙，特別是用於治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），炎性疾病和自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬。
在實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物用於治療呼吸疾病之用途，視需要其中該呼吸疾病係氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）。
在實施方式中，提供了具有式 (I) 之化合物用於治療炎性疾病或自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬之用途。
在實施方式中，提供了一種治療方法，其包括向對有需要的患者投與有效量的具有式 (I) 之化合物，其中該患者具有呼吸疾病，視需要其中該呼吸疾病係氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD）。
在實施方式中，提供了一種治療方法，其包括向對有需要的患者投與有效量的具有式 (I) 之化合物，其中該患者具有治療炎性疾病或自體炎性/自體免疫疾病，諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬。
根據本說明書的另一個方面，提供了如上文所定義的具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽在製造用於治療藉由IRAK4激酶活性介導的障礙，特別是用於治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），炎性疾病和自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬的藥物中之用途。
應瞭解，提供了以下實例以使得可以完全理解本發明的性質。還應瞭解，以下實例不旨在以任何方式限制描述的範圍。
實例
使用了以下縮寫：
atm 標準氣壓單位
aq. 水性
BOC 三級丁氧羰基
CO 一氧化碳
Cs 2CO 3 碳酸銫
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯
DIPEA N, N-二異丙基乙胺
DMAP 4-(二甲胺基)吡啶
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲亞碸
dppf 1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵
dppp 1,3-雙(二苯膦基)丙烷
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
FA 甲酸
g 克
h 小時
HATU N-[(二甲基胺基)-1 H-1,2,3-三唑-[4,5- b]吡啶-1-基亞甲基]- N-甲基甲烷銨六氟磷酸鹽 N-氧化物
HCl 鹽酸
HPLC 高效液相層析法
K 2CO 3 碳酸鉀
KF 氟化鉀
KOH 氫氧化鉀
L 升
LiOH 氫氧化鋰
LiHMDS 雙(三甲基矽基)胺基鋰
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
min 分鐘
mL 毫升
MsCl 甲磺醯氯
MTBE 甲基三級丁基醚
NaBH 4 四氫硼酸鈉
NaH 氫化鈉
NaOH 氫氧化鈉
NH 3 氨
NH 4HCO 3 碳酸氫銨
NH 4Cl 氯化銨
NH 4OH 氫氧化銨
nm 奈米
N 2 氮氣
Pd(dppf)Cl 2 [1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)
Pd(dppf)Cl 2- CH 2Cl 2 [1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物
Pd(OAc) 2 乙酸鈀(II)
Pd(OH) 2 氫氧化鈀(II)
PE 石油醚
PMB 對甲氧苄基
prep. 製備型
i-PrOH 2-丙醇
rt 室溫
SFC 超臨界流體層析法
T3P 丙烷膦酸酐
TFA 三氟乙酸
TEA 三乙胺
TsCl 4-甲基苯磺醯氯
如果以上未定義，則用於分析數據的縮寫與本領域中的常見用法一致（參見J Med Chem Standard Abbreviations and Acronyms [醫藥化學雜誌縮寫和首字母縮寫] http: //pubsapp.acs.org/paragonplus/submission/jmcmar/jmcmar_abbreviations.pdf?）。
以下提供的化合物名稱使用PerkinElmer ChemDraw Professional, 20.0.2.51版生成。在其中關於絕對立體化學存在不確定性的情況下，盡可能地指定相對立體化學。
中間體的製備
中間體 Int I-1 ： 5- 溴 -4- 甲氧基 -2- 硝基苯甲醛的合成
5- 溴 -4- 氟 -2- 硝基苯甲醛
Figure 02_image066
在0ºC下將發煙硝酸（12.0 mL，0.3 mol）在濃硫酸（25 mL）中的溶液逐滴添加到在濃硫酸（75 mL）中的3-溴-4-氟苯甲醛（19.3 g，95.1 mmol）中。將所得的黃色溶液緩慢升溫至室溫並攪拌4 d。然後將反應混合物倒在碎冰上，並且將所得的沈澱物藉由過濾收集以得到作為黃色固體的5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛（22.6 g，96%）。m/z (ESI−), [M−H] −= 245/247。
5- 溴 -4- 甲氧基 -2- 硝基苯甲醛 (Int I-1)
Figure 02_image068
在室溫下將在MeOH（46 mL）中的甲醇鈉（10.9 g，60.6 mmol）添加到在MeOH（150 mL）中的5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛（10.0 g，40.3 mmol）中。在攪拌16 h之後，將反應物用水（300 mL）淬滅，將形成的固體過濾掉並用水（100 mL）洗滌以得到作為淡黃色固體的5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛（6.6 g，63%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ10.03 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 4.04 (s, 3H)。
中間體 Int I-2 ： 6- 環丙氧基 -5- 硝基 -1 H- 吲唑的合成
2,4- 二氟 -5- 硝基苯甲醛
Figure 02_image070
在0°C下在N 2氣氛下在1 h時間段內向2,4-二氟苯甲醛（50.0 g，351.9 mmol）在硫酸（180 mL）中的溶液中緩慢添加硝酸（15 M）（30.5 mL，457.4 mmol）和硫酸（900 mL）的混合物。將反應混合物在室溫下再攪拌3 h，之後將混合物倒在冰/水上並用EtOAc（400 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到作為黃色油狀物的2,4-二氟-5-硝基苯甲醛（50.0 g，76%）。
4- 環丙氧基 -2- 氟 -5- 硝基苯甲醛
Figure 02_image072
將在DMF（25 mL）中的2,4-二氟-5-硝基苯甲醛（20.0 g，106.9 mmol）、環丙醇（6.2 g，106.9 mmol）和DIPEA（37.3 mL，213.8 mmol）在100°C下攪拌2 h。使反應混合物冷卻至室溫，倒入冰/水（750 mL）中並用EtOAc（350 mL）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用PE/EtOAc（6 : 1）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的粗4-環丙氧基-2-氟-5-硝基苯甲醛（12.0 g）。MS ESI, m/z = 226 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -5- 硝基 -1 H- 吲唑 (Int I-2)
Figure 02_image074
將4-環丙氧基-2-氟-5-硝基苯甲醛（37.0 g，164.3 mmol）緩慢添加到在EtOH（100 mL）中的水合肼（80%在水中）（32.9 g，525.8 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌15 min，並且然後在80°C下攪拌2 h。使反應混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮，以得到作為紅色固體的6-環丙氧基-5-硝基-1 H-吲唑（34.0 g，94%）。MS ESI, m/z = 220 [M+H] +。
中間體 Int I-3 ： 6- 環丙氧基 -5- 碘 -1 H- 吲唑的合成
6- 環丙氧基 -1 H- 吲唑 -5- 胺
Figure 02_image076
向6-環丙氧基-5-硝基-1 H-吲唑 ( Int I-2) （35.0 g，159.7 mmol）和NH 4Cl（42.7 g，798.4 mmol）在EtOH（100 mL）/水（100 mL）中的溶液中添加鐵（44.6 g，798.4 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h，冷卻至室溫，過濾，並且將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用PE/EtOAc（2 : 1）洗脫）純化，以得到作為紅色固體的6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-胺（15.3 g，51%）。MS ESI, m/z = 190 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -5- 碘 -1 H- 吲唑 (Int I-3)
Figure 02_image078
在0°C下向6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-胺（5.0 g，26.4 mmol）在乙酸（100 mL）中的溶液中緩慢添加亞硝酸鈉（2.7 g，39.6 mmol）在水（10 mL）中的溶液。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。然後逐滴添加碘化鉀（8.8 g，52.9 mmol）在水（10 mL）中的溶液，並且將混合物在60°C下攪拌4 h。將反應混合物冷卻至室溫，倒入水（400 mL）中並用EtOAc（500 mL）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用PE/EtOAc（2 : 1）洗脫）純化，以得到作為紅色固體的6-環丙氧基-5-碘-1 H-吲唑（4.0 g，50%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 12.95 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 3.94 - 4.02 (m, 1H), 0.61 - 0.95 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 301 [M+H] +。
中間體 Int I-4 ： 5- 溴 -6- 環丙氧基 -1 H- 吲唑的合成
6- 環丙氧基 -1-(4- 甲氧苄基 )-5- 硝基 -1 H- 吲唑
Figure 02_image080
將NaH（60 wt%）（2.6 g，63.9 mmol）緩慢添加到在DMF（20 mL）中的1-(氯甲基)-4-甲氧基苯（7.5 g，47.9 mmol）和6-環丙氧基-5-硝基-1 H-吲唑 ( Int I-2) （7.0 g，31.9 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物倒入水（750 mL）中，並且用EtOAc（1 × 400 mL）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以產生粗產物，將其藉由矽膠層析法（用PE/EtOAc 2/1洗脫）純化，以得到作為紅色固體的6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-5-硝基-1 H-吲唑（6.0 g，55%）。MS ESI, m/z = 340 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -1-(4- 甲氧苄基 )-1 H- 吲唑 -5- 胺
Figure 02_image082
將鐵（4.9 g，88.4 mmol）添加到在EtOH（20 mL）和水（20.00 mL）中的NH 4Cl（4.7 g，88.4 mmol）和6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-5-硝基-1 H-吲唑（6.0 g，17.7 mmol）中。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h，冷卻至室溫並且然後過濾並濃縮。將粗產物藉由矽膠層析法（用PE/EtOAc 2/1洗脫）純化，以得到作為紅色膠狀物的6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1 H-吲唑-5-胺（4.8 g，88%）。MS ESI, m/z = 310 [M+H] +。
5- 溴 -6- 環丙氧基 -1-(4- 甲氧苄基 )-1 H- 吲唑
Figure 02_image084
在16°C下在N 2氣氛下在20 min時間段內將溴化銅（464 mg，3.2 mmol）添加到在MeCN（5 mL）中的亞硝酸三級丁酯（333 mg，3.2 mmol）和6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1 H-吲唑-5-胺（500 mg，1.6 mmol）中。將所得的混合物在50°C下攪拌0.5 h。將混合物冷卻至室溫，然後倒入水（400 mL）中並用EtOAc（2 × 400 mL）萃取。將有機相經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將粗產物藉由矽膠層析法（用EtOAc/PE（1 : 3）洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的5-溴-6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1 H-吲唑（68 mg，11%）。MS ESI, m/z = 373/375 [M+H] +。
5- 溴 -6- 環丙氧基 -1 H- 吲唑 (Int I-4)
Figure 02_image086
將TFA（3.0 mL，39.0 mmol）添加到在DCE（1 mL）中的5-溴-6-環丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1 H-吲唑（400 mg，1.1 mmol）中。將所得的混合物在100°C下攪拌12 h，冷卻至室溫並且然後濃縮。將粗產物藉由快速C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（5% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為灰色固體的5-溴-6-環丙氧基-1 H-吲唑（156 mg，58%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.00 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.00 (tt, 1H), 0.83 - 0.92 (m, 2H), 0.70 - 0.80 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 253/255 [M+H] +。
中間體 Int I-5 ：吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 胺的合成
Figure 02_image088
將NH 3水溶液（25%）（34.9 mL，403.0 mmol）添加到吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺（20.0 g，80.6 mmol）的TFA鹽在EtOH（300 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h，之後將該混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的50% - 90% EtOAc洗脫）純化，以得到作為橙色固體的吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺（9.9 g，92%）。MS ESI, m/z = 135 [M+H] +。
中間體 Int II-1 ： N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
Figure 02_image090
將Pd(OAc) 2（89 mg，0.4 mmol）添加到在脫氣MeCN（30 mL）中的TEA（3.7 mL，26.4 mmol）、dppp（165 mg，0.4 mmol）、5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（2.0 g，8.8 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（1.3 g，9.7 mmol）中。將所得的混合物在100°C下在CO氣氛下在4巴下攪拌23 h。在將混合物冷卻至室溫之後，將形成的沈澱物藉由過濾收集，用MeCN（2 mL）洗滌並在真空下乾燥，以得到作為灰色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺（2.4 g，87%），其不經進一步純化即可使用。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ 12.86 (s, 1H), 10.79 (s, 1H), 8.50 - 8.65 (m, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.01 - 8.12 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.18 (dd, 1H), 4.18 (s, 3H)。m/z (ESI+) [M+H] += 309。
中間體 Int II-2 ： 6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
6- 甲氧基 -1 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image092
將Pd(dppf)Cl 2（9.7 g，13.2 mmol）、DIPEA（77 mL，440.4 mmol）和5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（20.0 g，88 mmol）在MeOH（500 mL）中的溶液在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌12 h。在將混合物冷卻至室溫之後，將反應混合物通過二氧化矽過濾，並且在減壓下除去溶劑。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的0%至30% EtOAc洗脫）純化，以得到作為棕色固體的6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲酸甲酯（8.0 g，44%）。m/z (ESI+), [M+H] += 207。
6- 甲氧基 -1 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image094
在室溫下在N 2氣氛下將在水（5 mL）中的LiOH（732 mg，30.5 mmol）添加到在MeOH（5 mL）中的6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲酸甲酯（2.1 g，10.2 mmol）中。將反應混合物在室溫下攪拌3 h並且然後用HCl水溶液（0.1 M）酸化。將形成的沈澱物藉由過濾收集，用MeOH洗滌並在真空下乾燥，以得到作為灰色固體的6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲酸（1.6 g，80%），其不經進一步純化即可使用。m/z (ESI+), [M+H] += 193。
6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int-II-2)
Figure 02_image096
在室溫下在N 2氣氛下將吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （7.3 g，54.0 mmol）添加到在THF（20 mL）中的HATU（20.6 g，54.0 mmol）、DIPEA（36 mL，208.0 mmol）和6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲酸（8.0 g，42.0 mmol）中。將所得的溶液攪拌2 h。將反應混合物倒入水（20 mL）中，並且將形成的固體經由過濾收集，用水（100 mL）洗滌並在真空下乾燥，以得到作為黃色固體的6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺（10.0 g），其不經進一步純化即可使用。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.13 (s, 1H), 10.32 (s, 1H), 9.01 - 9.12 (m, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.53 - 8.56 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.00 - 7.11 (m, 1H), 4.10 (s, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 309。
中間體 Int II-3 ： 6- 環丙氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
6- 環丙氧基 -1 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image098
將5-溴-6-環丙氧基-1 H-吲唑 ( Int I-4) （5.5 g，21.7 mmol）、DIPEA（2.1 g，16.6 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（15.9 g，21.7 mmol）在MeOH（30 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮並藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-甲酸甲酯（4.4 g，87%）。MS ESI, m/z = 233 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -1 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image100
在室溫下向6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-甲酸甲酯（4.4 g，19.0 mmol）在MeOH（5 mL）中的溶液中添加LiOH（1.4 g，56.8 mmol）在水（5 mL）中的溶液。將所得的溶液在30°C攪拌12 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水（25 mL）稀釋並用EtOAc（10 mL × 3）洗滌。將水層用0.1 N HCl酸化至pH 4 - 5，並且將形成的沈澱物藉由過濾收集以得到6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-甲酸（2.7 g，65%）。MS ESI, m/z = 219 [M+H] +。
6- 環丙氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-1 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int-II-3)
Figure 02_image102
在室溫下向6-環丙氧基-1 H-吲唑-5-甲酸（5.5 g，25.2 mmol）、HATU（14.4 g，37.8 mmol）和DIPEA（22.0 mL，126.0 mmol）在DMF（6 mL）和THF（54 mL）中的溶液中添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （5.1 g，37.8 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將反應混合物倒入水（1 L）中並且將形成的沈澱物藉由過濾收集。將固體懸浮在MeOH（150 mL）中，接著添加K 2CO 3（15 g），並且將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。隨後，將懸浮液倒入水（1 L）中並過濾，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺（6.9 g，81%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 13.14 (s, 1H), 10.26 (s, 1H), 8.97 - 9.17 (m, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.42 - 8.64 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 6.95 - 7.10 (m, 1H), 4.17 - 4.39 (m, 1H), 1.06 - 0.90 (m, 2H), 0.90 - 1.20 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 335 [M+H] +。
中間體 Int III-1 ： 1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 4- 甲苯磺酸酯的合成
8- 羥基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image104
在0°C下向在MeOH（100 mL）中的1-氮雜螺[4.5]癸烷-2,8-二酮（4.5 g，26.9 mmol）中一次性添加NaBH 4（2.0 g，53.8 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌。在14 h之後，將反應混合物用EtOAc（50 mL）淬滅，真空除去溶劑，並且將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色油狀物的8-羥基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（2.5 g，55%）。m/z (ESI+), [M+H] += 170。
2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image106
在室溫下在N 2氣氛下將TsCl（6.8 g，35.8 mmol）緩慢添加到在DCM（15 mL）中的8-羥基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（2.8 g，16.3 mmol）、DMAP（199 mg，1.6 mmol）和TEA（9.1 mL，65.0 mmol）溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物用水（100 mL）淬滅，用DCM（15 mL × 3）萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的30% - 60% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯（2.00 g，38%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.79 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 4.39 - 4.59 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.07 - 2.19 (m, 2H), 1.48 - 1.83 (m, 8H), 1.35 - 1.48 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 324。
1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 4- 甲苯磺酸酯 (Int III-1)
Figure 02_image108
在0°C下在N 2氣氛下向2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯（1.9 g, 5.9 mmol）在DMF（8 mL）中的溶液中添加NaH（60 wt.%）（352 mg，8.8 mmol）。將所得的懸浮液在0°C下攪拌30 min，接著添加碘甲烷（1.5 mL，23.5 mmol）。將反應混合物在室溫下再攪拌6 h並且然後用水（10 mL）淬滅。將混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.5% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為無色固體的1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯（1.8 g，91%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (3 : 1異構物混合物) δ 7.78 - 7.86 (m, 2H), 7.48 (d, 2H), 4.61 - 4.70/4.43 - 4.53 (m, 1H) (異構物), 2.59/2.55 (s, 3H) (異構物), 2.42 (s, 3H), 2.13 - 2.23 (m, 2H), 1.54 - 1.89 (m, 8H), 1.15 - 1.26/1.26 - 1.37 (m, 2H) (異構物)。m/z (ESI+), [M+H] += 338。
中間體 Int III-2 ： 7-(( 甲磺醯基 ) 氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯的合成
Figure 02_image110
在0°C下在N 2氣氛下向在DCM（15 mL）中的7-羥基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（2.0 g，8.3 mmol）和TEA（2.3 mL，16.6 mmol）中添加MsCl（839 μL，10.8 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌。在15 h之後，將反應混合物倒入水（150 mL）中並且用DCM（3 × 100 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且真空除去溶劑，以得到作為橙色固體的粗7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（2.70 g）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ4.57 - 4.70 (m, 1H), 3.53 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 3.16 (s, 3H), 1.71 - 1.90 (m, 4H), 1.51 - 1.66 (m, 4H), 1.38 (s, 9H)。m/z (ESI+), [M− tBu+H] += 264。
中間體 Int III-3 ： 2- 羥基 -2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 4- 甲苯磺酸酯的合成
2- 甲基 -8,11- 二氧雜二螺 [3.2.4 7.2 4] 十三烷 -2- 醇
Figure 02_image112
在−78°C下在N 2氣氛下將溴化甲基鎂在THF（3 N，10.0 mL，30.0 mmol）中的溶液緩慢添加到在THF（50 mL）中的8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-酮（2.0 g，10.2 mmol）中。將所得的混合物在−65°C下攪拌1 h，並且在−40°C下攪拌2 h。將反應混合物在−40°C下用飽和NH 4Cl水溶液（50 mL）淬滅，使其升溫至室溫並且用EtOAc（3 × 50 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑。將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用在PE中的30%至40% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色油狀物的2-甲基-8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-醇（2.1 g，97%）。
2- 羥基 -2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -7- 酮
Figure 02_image114
在室溫下在N 2氣氛下將HCl水溶液（2 N，20 mL，40 mmol）緩慢添加到在THF（20 mL）中的2-甲基-8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-醇（2.1 g，9.9 mmol）中，並且繼續攪拌2 h。將混合物用NaOH水溶液（2 m）中和至pH 7並且用EtOAc（3 × 100 mL）萃取。將合併的有機層用鹽水（1 × 50 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥並真空濃縮，以得到作為無色油狀物的粗2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-酮（1.7 g）。m/z (ESI+), [M+H] += 169。
2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -2,7- 二醇
Figure 02_image116
在室溫下在N 2氣氛下將NaBH 4（37.8 mg，1.0 mmol）緩慢添加到在MeOH（3 mL）中的粗2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-酮（84 mg）中，並且將所得的混合物攪拌30 min。然後真空除去溶劑，並且將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用在PE中的50%至70% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的2-甲基螺[3.5]壬烷-2,7-二醇（78 mg，92%）。
2- 羥基 -2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 4- 甲苯磺酸酯 (Int-III-3)
Figure 02_image118
在室溫下在N 2氣氛下將TsCl（4.0 g，21.0 mmol）緩慢添加到在DCM（50 mL）中的2-甲基螺[3.5]壬烷-2,7-二醇（1.2 g，7.1 mmol）、DMAP（172 mg，1.4 mmol）和TEA（4.9 mL，35.2 mmol）中，並且將所得的混合物在50°C下攪拌。在16 h之後，使反應混合物冷卻至室溫，用水（50 mL）淬滅並用DCM（2 × 50 mL）萃取。將合併的有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥並真空濃縮。將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用在PE中的10%至50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為淡黃色油狀物的2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯（1.7 g，74%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ7.77 (d, 2H), 7.46 (d, 2H), 4.38 - 4.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.21 - 1.81 (m, 12H), 1.18 (s, 3H)。
中間體 Int III-4 ： 6- 甲基 -7- 側氧基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯的合成
Figure 02_image120
在−78°C下將在THF（157.0 mL，157.0 mmol）中的1 M LiHMDS添加到THF（100 mL）中，接著在N 2氣氛下在30 min時間段內逐滴添加7-側氧基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（18.8 g，78.6 mmol）在THF（300 mL）中的溶液。將所得的混合物在−78°C下攪拌1 h。隨後，逐滴添加碘甲烷（22.3 g，157.1 mmol）。將反應混合物在−78°C下再攪拌30 min，接著在室溫下攪拌15 h。將混合物用冰水（150 mL）淬滅並且用EtOAc（500 mL × 3）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的16% - 20% EtOAc洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的6-甲基-7-側氧基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（9.5 g，48%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 3.83 (br. s, 2H), 3.53 (br. s, 2H), 2.40 - 2.49 (m, 2H), 2.06 - 2.22 (m, 3H), 1.72 - 1.83 (m, 1H), 1.47 - 1.57 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 0.88 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 239 [M− tBu+CH 3CN+2H] +。
中間體 Int III-5 和 Int III-6 ： 外消旋 - (6 R,7 S)-6- 甲基 -7-(( 甲磺醯基 ) 氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯和 外消旋 - (6 S,7 S)-6- 甲基 -7-(( 甲磺醯基 ) 氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
外消旋 - (6 R,7 S)-7- 羥基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2— 甲酸三級丁酯和 外消旋 - (6 S,7 S)-7- 羥基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2-- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image122
在0°C下在N 2氣氛下在40 min時間段內向6-甲基-7-側氧基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-4) （19.5 g，77.0 mmol）在MeOH（300 mL）中的溶液中分批添加NaBH 4（5.8 g，153.9 mmol）。將所得的混合物升溫至室溫，持續5 h。將反應物用鹽水（300 mL）淬滅並且用EtOAc（500 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下蒸發。將殘餘物藉由矽膠層析法（(1.)：用在PE中的25% - 30% EtOAc洗脫；(2.)：用在PE中的25% EtOAc洗脫）純化兩次，以得到作為無色固體的 外消旋-(6 R,7 S)-7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（13.6 g，69%）和 外消旋 -(6 S,7 S)-7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.8 g，9%）。 (6 R,7 S)- 異構物：MS ESI, m/z = 200 [M− tBu+2H] +； (6 S,7 S)- 異構物：MS ESI, m/z = 200 [M− tBu+2H] +。
外消旋 - (6 R,7 S)-6- 甲基 -7-(( 甲磺醯基 ) 氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯 (Int III-5)
Figure 02_image124
在室溫下在15 min內將MsCl（7.7 mL，98.7 mmol）逐滴添加到 外消旋-(6 R,7 S)-7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（4.2 g，16.5 mmol）和TEA（22.9 mL，165 mmol）在DCM（20 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將混合物用水（25 mL × 2）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的50%至100% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(6 R,7 S)-6-甲基-7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（3.5 g，64%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 4.64 - 4.68 (m, 1H), 3.41 - 3.61 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 1.94 - 2.02 (m, 1H), 1.52 - 1.82 (m, 5H), 1.38 (s, 10H), 0.88 - 0.97 (m, 3H)。
外消旋 - (6 S,7 S)-6- 甲基 -7-(( 甲磺醯基 ) 氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯 (Int III-6)
Figure 02_image126
在0°C下在N 2氣氛下將MsCl（0.55 mL，7.1 mmol）逐滴添加到 外消旋 -(6 S,7 S)-7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.8 g，7.1 mmol）和TEA（983 µL，7.1 mmol）在DCM（8 mL）中的溶液中。將所得的溶液在室溫下攪拌3 h。將反應混合物用水（10 mL）淬滅並且用DCM（15 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 60% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-(6 S,7 S)-6-甲基-7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.4 g，60%）。MS ESI, m/z = 667 [2M+H] +。
中間體 Int III-7 ：外消旋 -(1 R,3 R)-3- 羥基環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image128
在0°C下將TsCl（8.2 g，42.0 mmol）添加到在DCM（300 mL）中的TEA（12.0 mL，86.1 mmol）、DMAP（526 mg，4.3 mmol）和外消旋-(1 R,3 R)-環己烷-1,3-二醇（5 mg，43.0 mmol）中，並且將所得的混合物在室溫下攪拌。在2 h之後，將反應混合物用水（200 mL）淬滅並且用DCM（2 × 300 mL）萃取。將合併的有機層用鹽水（1 × 200 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥並真空濃縮。將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用在DCM中的0%至40% EtOAc洗脫）純化，以得到作為淡黃色油狀物的 外消旋-(1 R,3 R)-3-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（5.0 g，43%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ7.77 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 4.68 - 4.80 (m, 1H), 4.59 (br. s, 1H), 3.70 - 3.81 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.20 - 1.73 (m, 8H)。
中間體 Int III-8 ： (1 s,4 s)-4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯的合成
Figure 02_image130
在室溫下在N 2氣氛下在5 min時間段內將TsCl（33.2 g，174.2 mmol）添加到((1 s,4 s)-4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（15.0 g，69.7 mmol）、DMAP（851 mg，7.0 mmol）和TEA（29.1 mL，209.0 mmol）在DCM（300 mL）中的溶液中。將所得的混合物在50°C下攪拌20 h。使反應混合物冷卻至室溫，用DCM（500 mL）稀釋，用鹽水（150 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的10% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的(1 s,4 s)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（15.5 g，60%）。
1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.70 - 7.85 (m, 2H), 7.41 - 7.54 (m, 2H), 6.80 (d, 1H), 4.58 (s, 1H), 3.14 - 3.34 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.61 - 1.79 (m, 2H), 1.32 - 1.60 (m, 15H)。
中間體 Int III-9 ： 4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯的合成
Figure 02_image132
在室溫下在N 2氣氛下在5 min時間段內將TsCl（21.3 g，111.5 mmol）逐滴添加到(4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（順式/反式比率1 : 5）（20.0 g，92.9 mmol）和TEA（25.9 mL，185.8 mmol）在DCM（400 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫攪拌20 h。將反應混合物用DCM（400 mL）稀釋，用水（150 mL × 2）洗滌並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的10% - 25% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式比率1 : 5）（26.0 g，76%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 5順式/反式異構物混合物) δ 7.75 - 7.85 (m, 2H), 7.47 (d, 2H), 6.81/6.71 (d, 1H) (異構物), 4.54 - 4.62/4.27 - 4.42 (m, 1H) (異構物), 3.10 - 3.28 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.62 - 1.83 (m, 4H), 1.39 - 1.58 (m, 2H), 1.30 - 1.38 (m, 9H) (異構物), 1.09 - 1.27 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 270 [M−Boc+2H] +。
中間體 Int III-10 ： 4-(( 三級丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯的合成
Figure 02_image134
在室溫下將碘甲烷（3.8 g，27.1 mmol）逐滴添加到NaH（60 wt.%）（812 mg，20.3 mmol）和4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式1 : 5） ( Int III-9) （5.0 g，13.5 mmol）在DMF（50 mL）中的懸浮液中。將所得的混合物在60°C下攪拌4 h。使混合物冷卻至室溫，將反應物用水（100 mL）淬滅並且用EtOAc（100 mL × 2）萃取。將合併的有機層用鹽水（100 mL × 4）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮以得到淡黃色固體。將固體藉由矽膠層析法（用在PE中的10% - 25% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式1 : 5）（2.5 g，48%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.80 (d, 2H), 7.48 (d, 2H), 4.32 - 4.45 (m, 1H), 3.57 - 3.89 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.43 (s, 3H), 1.67 - 1.91 (m, 2H), 1.42 - 1.67 (m, 6H), 1.38 (s, 9H)。MS ESI, m/z = 284 [M−Boc+2H] +。
中間體 Int III-11 和 Int III-12 ： 外消旋 -(7 R,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 醇和 外消旋 -(7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 醇
Figure 02_image136
在0°C下在N 2氣氛下在20 min時間段內向7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-酮（50.0 g，293.8 mmol）在MeOH（500 mL）中的溶液中分批添加NaBH 4（22.3 g，587.5 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的16% EtOAc洗脫）直接純化，以得到 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇（3.18 g，6%）和 外消旋-(7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇（19.00 g，38%）。 外消旋 -(7 R,8 S)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 4.27 (d, 1H), 3.75 - 3.9 (m, 4H), 3.51 - 3.6 (m, 1H), 1.44 - 1.78 (m, 5H), 1.25 - 1.44 (m, 2H), 0.86 (d, 3H)。 外消旋 -(7 S,8 S)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 4.45 (d, 1H), 3.75 - 3.89 (m, 4H), 2.89 - 3.05 (m, 1H), 1.27 - 1.77 (m, 6H), 1.19 (t, 1H), 0.90 (d, 3H)。
中間體 Int III-13 ： 外消旋 -(7 R,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基甲烷磺酸酯的合成
Figure 02_image138
在0°C下在N 2氣氛下在30 min時間段內將MsCl（1.4 mL，17.4 mmol）逐滴添加到 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇 ( Int III-11) （2.5 g，14.5 mmol）和TEA（6.1 mL，43.6 mmol）在DCM（50 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物用鹽水（100 mL）淬滅並且用DCM（100 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 20% EtOAc洗脫）純化，以得到作為棕色油狀物的 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯（2.1 g，58%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 4.71 (br. s, 1H), 3.80 - 3.92 (m, 4H), 3.17 (s, 3H), 2.02 - 2.13 (m, 1H), 1.85 - 2.02 (m, 1H), 1.32 - 1.83 (m, 5H), 0.94 (d, 3H)。
中間體 Int IV-1 ： (1 s,4 s)-4-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 醇
(1 r,4 r)-4- 羥基環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image140
向TsCl（8.2 g，43.0 mmol）、TEA（8.7 g，86.1 mmol）和DMAP（591 mg，4.8 mmol）在DCM（100 mL）中的溶液中添加(1 r,4 r)-環己烷-1,4-二醇（5.0 g，43.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌14 h。將反應混合物在減壓下濃縮，並且將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的20% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的(1R,4R)-4-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（2.1 g，18%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.78 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 4.40 - 4.53 (m, 1H), 3.39 - 3.54 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.60 - 1.83 (m, 4H), 1.32 - 1.60 (m, 2H), 1.13 - 1.32 (m, 2H)。
(1 s,4 s)-4-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 醇 (Int IV-1)
Figure 02_image142
在室溫下向6-環丙氧基-5-碘-1 H-吲唑 ( Int I-3) （300 mg，1.0 mmol）和KOH（224 mg，4.0 mmol）在DMF（30 mL）中的溶液中添加(1 r,4 r)-4-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（946 mg，3.5 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌14 h。將混合物冷卻至室溫，用EtOAc（50 mL）稀釋並用水（50 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的(1 s,4 s)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇（115 mg，25%）。MS ESI, m/z = 399 [M+H] +。
中間體 Int IV-2 ： (1 r,4 r)-4-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 醇的合成
(1 s,4 s)-4- 羥基環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image144
在0°C下向(1 s,4 s)-環己烷-1,4-二醇（3.0 g，25.8 mmol）、TEA（5.2 g，51.7 mmol）和DMAP（316 mg，2.6 mmol）在DCM（50 mL）中的溶液中添加TsCl（5.2 g，27.1 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，並且依次用0.1 N HCl（50 mL）和水（50 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 60% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的(1 s,4 s)-4-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（2.2 g，32%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 7.78 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 4.47 - 4.55 (m, 1H), 3.43 - 3.53 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.60 - 1.78 (m, 2H), 1.35 - 1.60 (m, 6H)。
(1 r,4 r)-4-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 醇 (Int IV-2)
Figure 02_image146
向(1 s,4 s)-4-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（1.3 g，4.7 mmol）和6-環丙氧基-5-碘-1 H-吲唑 ( Int I-3) （350 mg，1.2 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液中添加KOH（196 mg，3.5 mmol）。將所得的混合物在70°C下攪拌13 h。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc（50 mL）稀釋並用水（50 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的(1 r,4 r)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇（110 mg，24%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.23 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 4.66 (br. s, 1H), 4.32 - 4.47 (m, 1H), 3.87 - 3.99 (m, 1H), 3.43 - 3.59 (m, 1H), 1.82 - 2.12 (m, 6H), 1.35 - 1.47 (m, 2H), 0.82 - 0.91 (m, 2H), 0.66 - 0.75 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 399 [M+H] +。
中間體 Int IV-3 ： 外消旋 -5- 溴 -6- 甲氧基 -2-((7 R,8 R)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑的合成
Figure 02_image148
在室溫下向5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（1.5 g，6.6 mmol）和KOH（1.5 g，26.4 mmol）在DMF（40 mL）中的溶液中添加 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯 ( Int III-13) （2.0 g，8.0 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌過夜。將反應混合物用EtOAc（300 mL）稀釋並且用鹽水（150 mL × 4）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為棕色固體的 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（600 mg，22%）。MS ESI, m/z = 381/383 [M+H] +。
中間體 Int IV-4 和 Int IV-5 ： 5- 溴 -6- 甲氧基 -2-((7 R,8 R)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑和 5- 溴 -6- 甲氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑的合成
Figure 02_image150
藉由以下分離 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑 ( Int IV-3) （7.3 g，19.2 mmol）：製備型SFC（Chiralpak ®IG，5 µm 50 × 250 mm；與在CO 2（35 oC，100巴）中的50% MeOH（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；200 mL/min），以得到均作為灰色固體的5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（3.1 g，43%，100% ee）和5-溴-6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（3.0 g，41%，100% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.13 (td, 1H), 3.87 - 3.99 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 2.26 - 2.43 (m, 1H), 2.19 (td, 1H), 1.75 - 1.99 (m, 3H), 1.68 (td, 1H), 1.46 (t, 1H), 0.52 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 381/383 [M+H] +。
中間體 Int IV-6 和 Int IV-7 ： (5 s,8 s)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮和 (5 r,8 r)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮的合成
2- 甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基甲烷磺酸酯
Figure 02_image152
在0°C下將MsCl（2.0 g，17.6 mmol）逐滴添加到在DCM（25 mL）中的8-羥基-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮（1.9 g，10.4 mmol）和DIPEA（4.7 g，36.3 mmol）溶液中。將所得的混合物升溫至室溫並攪拌48 h。將反應混合物用冰冷的半飽和NaHCO 3水溶液（30 mL）淬滅，並且用DCM（50 mL × 2）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用DCM洗脫）純化，以得到作為橙色油狀物的2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯（3.1 g，96%）。
(5 s,8 s)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮 (Int IV-6) 和 (5 r,8 r)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮 (Int IV-7)
Figure 02_image154
在75°C下向5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（775 mg，3.4 mmol）和KOH（434 mg，7.0 mmol）在THF（15 mL）中的溶液中添加2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯（1.3 g，5.0 mmol）。將所得的混合物在75°C下攪拌過夜。將反應物冷卻至室溫，用水淬滅，用DCM（40 mL × 4）萃取，乾燥並在減壓下濃縮。將殘餘物載入到10 g Isolute ®SCX2交換筒上。將筒用DCM/MeOH（1 : 1）（150 mL）洗滌以除去不想要的1 H-吲唑異構物，並且然後在蒸發溶劑之後用100 mL 2 N NH 3-MeOH溶液/DCM（1 : 1）洗脫以得到粗產物。將棕色殘餘物藉由矽膠層析法（用EtOAc洗脫，並且然後用在DCM中的0% - 2% 2 N NH 3-MeOH溶液洗脫）進一步純化，以得到8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮。藉由以下進一步分離此材料：手性製備型SFC（Lux ®纖維素-3，5 μm 30 mm × 250 mm；與在CO 2（40 °C，130巴）中的20% EtOH（20 mM二乙胺）等度；120 mL/min），以得到作為第一洗脫異構物的(5 s,8 s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮（153 mg，3%，100%ee）和作為第二洗脫異構物的(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮（153 mg，3%，99.2% ee）。 (5 s,8 s)- 異構物： 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 7.83 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.26 - 4.36 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.34 (s, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.28 (s, 2H), 2.12 - 2.20 (m, 2H), 2.01 - 2.12 (m, 2H), 1.87 - 1.96 (m, 2H), 1.57 - 1.68 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 392/394 [M+H] +。 (5 r,8 r)- 異構物： 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 7.85 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.29 - 4.41 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.18 (s, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.41 (s, 2H), 2.18 - 2.26 (m, 2H), 1.96 - 2.09 (m, 2H), 1.85 - 1.95 (m, 2H), 1.57 - 1.69 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 392/394 [M+H] +。
中間體 Int IV-8 ： ((1 r,4 r)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image156
在室溫下在N 2氣氛下向((1 r,4 r)-4-胺基環己基)胺基甲酸三級丁酯（10.5 g，49.0 mmol）在 i-PrOH（200 mL）中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （12.7 g，49.0 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌1 h，接著添加三正丁基膦（29.7 g，147.0 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌13 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的9% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)胺基甲酸三級丁酯（14.2 g，68%）。MS ESI, m/z = 424/426 [M+H] +。
中間體 Int V-1 和 Int V-2 ： N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺和 N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
外消旋 -(3 R,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-3- 甲基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image158
在室溫下在N 2氣氛下將 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑 ( Int IV-3) （400 mg，1.1 mmol）添加到在THF（5 mL）/水（5 mL）中的1.2 N HCl溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.05% TFA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己烷-1-酮（330 mg，93%）。MS ESI, m/z = 337/339 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int V-1) 和 N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int V-2)
Figure 02_image160
將 外消旋-(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己烷-1-酮（330 mg，1.0 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（201 mg，1.5 mmol）、Pd(OAc) 2（22 mg，0.1 mmol）、dppp（81 mg，0.2 mmol）和TEA（409 µL，2.9 mmol）在MeCN（15 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在90°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮並藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：製備型手性SFC（Chiralpak ®AS-H，5 μm 20 mm × 250 mm；與在CO 2（40°C，70巴）中的45% i-PrOH（2 mM NH 3-MeOH）等度；40 mL/min），以得到均作為黃色固體的作為第一洗脫異構物的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（220 mg，34%，71.2% ee）和作為第二洗脫異構物的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，31%，83.3% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.65 (dd, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 4.61 - 4.76 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.64 - 2.79 (m, 1H), 2.52 - 2.60 (m, 1H), 2.23 - 2.49 (m, 5H), 0.65 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 419 [M+H] +。
中間體 Int V-3 ： N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( 甲基胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
((1 r,4 r)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image162
在0°C下向((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)胺基甲酸三級丁酯 ( Int IV-8) （990 mg，2.3 mmol）在DMF（10 mL）中的溶液中添加NaH（60 wt.%）（1.1 g，28.0 mmol）。將所得的混合物在0°C下攪拌30 min，接著添加碘甲烷（662 mg，4.7 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌15 h，然後用水（10 mL）淬滅並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為黑色固體的((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（600 mg，59%），其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 438/440 [M+H] +。
((1 r,4 r)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image164
將((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（380 mg，0.9 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（134 mg，1.0 mmol）、Pd(OAc) 2（44 mg，0.2 mmol）、dppp（165 mg，0.4 mmol）和TEA（604 µL，4.3 mmol）在MeCN（20 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。然後，將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.05% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為紅色固體的((1 r,4 r)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（430 mg，95%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.14 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 4.34 - 4.61 (m, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.79 - 4.04 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.12 - 2.33 (m, 2H), 1.92 - 2.12 (m, 2H), 1.62 - 1.92 (m, 4H), 1.42 (s, 9H)。MS ESI, m/z = 520 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( 甲基胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int V-3)
Figure 02_image166
在室溫下在N 2氣氛下將((1r,4r)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（430 mg，0.8 mmol）添加到在二㗁𠮿（12 mL，24.0 mmol）中的2 N HCl中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h並且然後在減壓下濃縮，以得到 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗HCl鹽（300 mg），其不經進一步純化即可直接使用。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.26 (s, 1H), 8.97 (dd, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.43 (dd, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.67 (dd, 1H), 7.28 (s, 1H), 4.48 - 4.64 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.01 - 3.22 (m, 1H), 2.54 - 2.59 (m, 3H), 2.12 - 2.29 (m, 4H), 1.85 - 2.12 (m, 2H), 1.47 - 1.73 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 420 [M+H] +。
中間體 Int V-4 ： 6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( 甲基胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
((1 r,4 r)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image168
在0°C下在N 2氣氛下向((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)胺基甲酸三級丁酯 ( Int IV-8) （4.2 g，9.9 mmol）在DMF（50 mL）中的溶液中添加NaH（60 wt.%）（792 mg，19.8 mmol）。將所得的懸浮液在室溫下攪拌30 min，接著添加碘甲烷（1.2 mL，19.8 mmol）。在攪拌13 h之後，將反應物用水（150 mL）淬滅。將沈澱物過濾，用水（150 mL）洗滌並真空乾燥，以得到作為無色固體的((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4.4 g，100%）。MS ESI, m/z = 438/440 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4-(( 三級丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image170
將((1 r,4 r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（4.3 g，9.8 mmol）、Pd(dppf)Cl 2（714 mg，1.0 mmol）和TEA（13.6 mL，97.6 mmol）在MeOH（125 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的30% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（3.8 g，93%）。MS ESI, m/z = 418 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4-(( 三級丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image172
在室溫下向2-((1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（2.9 g，6.9 mmol）在MeOH（50 mL）/水（25 mL）中的溶液中添加NaOH (556 mg，13.9 mmol)。將所得的溶液在30°C攪拌12 h。將反應混合物冷卻至室溫並用4 N HCl酸化至pH約6。將沈澱物過濾，用水（200 mL）洗滌並真空乾燥，以得到作為淡黃色固體的2-((1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（2.7 g，95%）。MS ESI, m/z = 404 [M+H] +。
((1 r,4 r)-4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image174
在室溫下在N 2氣氛下向2-((1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（2.6 g，6.4 mmol）和DIPEA（3.4 mL，19.3 mmol）在DMF（50 mL）中的溶液中添加HATU（2.9 g，7.7 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌15 min，接著添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺的HCl鹽（1.4 g，8.4 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌13 h。將混合物用水（100 mL）稀釋並過濾以獲得粗固體。將固體用水（100 mL）洗滌，並且然後藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% -5% MeOH洗脫）純化，以得到作為黃色固體的((1 r,4 r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（3.3 g，99%）。MS ESI, m/z = 520 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( 甲基胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 (Int V-4)
Figure 02_image176
在室溫下在N 2氣氛下向((1 r,4 r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（3.3 g，6.4 mmol）在DCM（40 mL）中的溶液中添加在二㗁𠮿（15.9 mL，63.5 mmol）中的4 N HCl，並且將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將混合物在減壓下濃縮，以得到作為淡黃色固體的6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的HCl鹽（2.9 g），其不經進一步純化即可直接使用。MS ESI, m/z = 420 [M+H] +。
中間體 Int V-5 ： 2-(2- 乙醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-6- 羥基 -N- ( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的合成
Figure 02_image178
在0°C下在N 2氣氛下在5 min時間段內將BBr 3（8.0 mL，8.3 mmol）逐滴添加到在DCM（15 mL）中的2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（ 實例 21，參見以下）（380 mg，0.8 mmol）中，並且將所得的混合物在40°C下攪拌。在6 h之後，使反應混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO 3水溶液（10 mL）淬滅並用鹽水（50 mL）稀釋。將混合物用EtOAc（2 × 50mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的0%至25% MeCN洗脫）純化，接著藉由矽膠層析法（用在DCM中的9%至10% MeOH洗脫）純化，以得到作為淺棕色固體的2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羥基 -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（170 mg，46%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1 旋轉異構物混合物) δ11.69 (s, 1H), 11.62 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.33 - 4.53 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.52 (s, 1H), 1.83 - 2.12 (m, 6H), 1.76/1.78 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.61 - 1.74 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 460。
實例
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((5 r,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 1 ）
8- 胺基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image180
將1-氮雜螺[4.5]癸烷-2,8-二酮（1.0 g，6.0 mmol）與在MeOH（46.0 mL，0.18 mol）中的4 N NH 3混合並且在室溫下攪拌。在1 h之後，在−50°C下將所得的溶液添加到在THF（20 mL）中的NaBH 4（256 mg，6.8 mmol）中並使其升溫至室溫。將反應物用水（10 mL）淬滅，並且真空除去有機溶劑。然後，添加4 M NaOH水溶液（40 mL）和氯化鈉（10 g）。將所得的懸浮液用DCM（4 × 70 mL）萃取，將合併有機相經MgSO 4乾燥，並且真空除去溶劑以得到粗8-胺基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（0.9 g），其不經進一步純化即可使用。
(5 r,8 r)- 8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image182
向在 i-PrOH（25 mL）中的粗8-胺基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（600 mg）中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （1.1 g，2.2 mmol），並且將所得的混合物在80°C下攪拌。在4 h之後，添加三正丁基膦（1.6 mL，6.5 mmol），並且將混合物在80°C下攪拌過夜。然後使反應混合物冷卻至室溫並過濾。將收集的固體用庚烷（3 × 10 mL）洗滌並使用離子交換層析法純化，用250 mL DCM/MeOH（1 : 1）洗滌並用DCM/4 N NH 3-MeOH溶液（1/1）洗脫。然後將分離的固體使用 i-PrOH重結晶以除去不想要的(5 s,8 s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮。將濾液藉由矽膠層析法（用在庚烷中的50%-100% EtOAc，然後EtOAc，接著在DCM中的0%-3% NH 3-MeOH洗脫）進一步純化，以得到(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（320 mg，39%）。m/z (ESI+), [M+H] += 378/380。
(5 r,8 r)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image184
在0°C下向(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（310 mg，0.7 mmol）在DMF（5 mL）/THF（5 mL）中的攪拌溶液添加NaH（60 wt.%）（93 mg，2.1 mmol）。在20 min之後，在0°C下緩慢添加碘甲烷（130 µL，2.1 mmol）。將所得的混合物升溫至室溫並攪拌過夜。然後將反應混合物用冰水（250 mL）淬滅並且用DCM（4 × 25 mL）萃取。將合併的有機相真空濃縮，並且將所得的殘餘物使用矽膠層析法（用DCM（300 mL），EtOAc（2 L），然後用在DCM（150 mL）中的2% NH 3-MeOH洗脫）純化，以得到作為米色固體的(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（225 mg，78%）。m/z (ESI+), [M+H] += 392/394。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((5 r,8 r)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 1 ）
Figure 02_image186
將甲基二苯基矽烷羧酸（193 mg，0.8 mmol）和KF（46 mg，0.8 mmol）添加到乾燥且N 2沖洗的COware氣體反應器的室A中。將在脫氣的無水MeCN（2 mL）中的(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（116 mg，0.3 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（121 mg，0.9 mmol）、dppp（41 mg，0.1 mmol）、Pd(OAc) 2（27 mg，0.1 mmol）和TEA（223 µL，1.6 mmol）添加到室B中。然後，將DMSO（350 µL）添加到室A中並且將室B在85°C下攪拌過夜。使反應混合物冷卻至室溫。將室B中的反應物用飽和NaHCO 3淬滅，真空除去溶劑，並且將所得的殘餘物使用離子交換層析法純化，用DCM/MeOH（1/1；200 mL）洗滌並且用在MeOH（200 mL）中的4 N NH 3洗脫。將所得的深棕色固體使用矽膠層析法（用EtOAc（2 L）並且然後用在DCM中的0%-3% NH 3-MeOH洗脫）進一步純化，以得到橙色-黃色固體。將橙色-黃色固體用EtOAc（20 mL）研磨，以得到亮黃色固體，將其在 i-PrOH（3 mL）漿化過夜。將漿液溶液過濾，並且將收集的沈澱物用 i-PrOH（4 × 500 µL）和戊烷（3 × 1 mL）洗滌，以得到作為淺黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（93 mg，74%）。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.65 (dd, 1H), 8.64 (d, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 4.49 - 4.61 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.28 (t, 2H), 2.07 - 2.18 (m, 4H), 1.94 - 2.03 (m, 4H), 1.53 - 1.59 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 474。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((5 s,8 s)-1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 2 ）
Figure 02_image188
向1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-1) （1.4 g，4.2 mmol）中添加DMF（15 mL）、 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （1.3 g，4.2 mmol）和KOH（466 mg，8.3 mmol）。將所得的溶液在100°C下攪拌。在12 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且使用C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.05% FA）洗脫）直接純化，接著藉由手性HPLC（CHIRAL ART纖維素-SB，2×25 mm，5 μm；流動相A：MTBE（在MeOH中的2 mm NH 3）；流動相B： i-PrOH；梯度：等度50% B，持續21.5 min；流速：20 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（28.0 mg，1%）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) δ8.75 (d, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.59 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.04 (dd, 1H), 7.21 - 7.28 (m, 2H), 4.71 - 4.79 (m, 1H), 4.23 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.59 - 2.69 (m, 2H), 2.44 (t, 2H), 2.07 - 2.33 (m, 6H), 1.45 - 1.55 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 474。
2-((1 s,4 s)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 3 ）
(1 r,4 r)-4- 羥基 - N, N- 二甲基環己烷 -1- 甲醯胺
Figure 02_image190
在室溫下在N 2氣氛下在3 h時間段內將HATU（9.5 g，25.0 mmol）添加到在DCM（30 mL）中的(1 r,4 r)-4-羥基環己烷-1-甲酸（3.0 g，20.8 mmol）、二甲胺鹽酸鹽（5.1 g，62.5 mmol）和DIPEA（14.5 mL，83.0 mmol）中。在將所得的混合物攪拌3 h之後，將反應混合物倒入水（20 mL）中並用DCM（3 × 20 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑。將粗產物經受矽膠層析法（用在PE中的0%至50% EtOAc洗脫），以得到粗(1 r,4 r)-4-羥基- N, N-二甲基環己烷-1-甲醯胺（2.1 g），其不經進一步純化即可使用。m/z (ESI+), [M+H] += 172。
(1 r,4 r)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image192
在0°C下在N 2氣氛下將TsCl（8.4 g，44.1 mmol）逐滴添加到在DCM（20 mL）中的TEA（7.3 mL，52.4 mmol）、DMAP（214 mg，1.8 mmol）和粗(1 r,4 r)-4-羥基- N, N-二甲基環己烷-1-甲醯胺（2 g）中，並且將所得的溶液在室溫下攪拌。在11 h之後，將反應混合物倒入水（20 mL）中，用DCM（3 × 10 mL）萃取，將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑。將所得的殘餘物經受矽膠層析法（用在PE中的10%至20% EtOAc洗脫），以得到粗(1 r,4 r)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基4-甲苯磺酸酯（2.1 g），其不經進一步純化即可使用。m/z (ESI+), [M+H] += 326。
2-((1 s,4 s)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 3 ）
Figure 02_image194
在室溫下在N 2氣氛下將KOH（218 mg，3.9 mmol）添加到在DMF（6 mL）中的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （300 mg，1.0 mmol）和粗(1 r,4 r)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基4-甲苯磺酸酯（950 mg）中，並且將所得的溶液在100°C下攪拌。在12 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的10%至60% MeCN（0.5% FA）洗脫），接著進行製備型HPLC（XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5 µm，19 mm×150 mm；流動相A：水（0.1% FA）；流動相B：MeCN；梯度：在7 min內15%至27% B，然後27% B持續2 min，流速：60 mL/min），以得到作為黃色固體的2-((1 s,4 s)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（40 mg，9%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (t, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.56 - 4.65 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.03 (s, 3H), 2.85 - 2.97 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 1.94 - 2.04 (m, 3H), 1.59 - 1.81(m, 6H)。m/z (ESI+), [M+H] += 462。
2-((1 r,4 r)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 4 ）
(1 s,4 s)-4- 羥基 - N, N- 二甲基環己烷甲醯胺
Figure 02_image196
在室溫下在N 2氣氛下將HATU（9.5 g，24.9 mmol）添加到DIPEA（14.5 mL，83.2 mmol）、二甲胺 × HCl（5.1 g，62.4 mmol）和(1 s,4 s)-4-羥基環己烷羧酸（3.0 g，20.8 mmol）在DCM（30 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物倒入水（20 mL）中並且用DCM（2 × 20 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的0至80% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的粗(1 s,4 s)-4-羥基- N, N-二甲基環己烷甲醯胺（3.5 g）。
(1 s,4 s)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image198
在室溫下在N 2氣氛下在3 h時間段內將TEA（7.3 mL，52.6 mmol）添加到在DCM（30 mL）中的DMAP（214 mg，1.8 mmol）、(1 s,4 s)-4-羥基- N, N-二甲基環己烷甲醯胺（3.0 g，17.0 mmol）和TsCl（6.7 g，35 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物倒入水（20 mL）中並且用DCM（3 × 25 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的0%至20% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的(1 s,4 s)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基4-甲苯磺酸酯（2.1 g，37%）。m/z (ESI+) [M+H] += 326。
2-((1 r,4 r)-4-( 二甲基胺基甲醯基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 4 ）
Figure 02_image200
在室溫下在N 2氣氛下將KOH（80 mg，1.4 mmol）添加到(1 s,4 s)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基4-甲苯磺酸酯（348 mg，1.1 mmol）和 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （110 mg，0.4 mmol）在DMF（10 mL）中的溶液中。將所得的溶液在100°C下攪拌12 h並冷卻至室溫，之後將混合物倒入水（10 mL）中。將水相用EtOAc（3 × 20 mL）萃取，將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以得到黃色油狀物。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的0%至30% EtOAc洗脫）純化，接著藉由製備型HPLC（Xselect CSH氟苯基OBD柱，5 µm二氧化矽，30×150 mm，流動相A：水（0.1% FA），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內20% B至30% B）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 r,4 r)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（10 mg，17%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.61 - 8.67 (m, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.14 - 8.18 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.18 - 7.27 (m, 2H), 4.48 - 4.54 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.07 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 2.70 - 2.80 (m, 1H), 2.16 - 2.20 (m, 2H), 1.99 - 2.05 (m, 2H), 1.84 - 1.88 (m, 2H), 1.58 - 1.65 (m, 2H)。m/z (ESI+) [M+H] += 462。
2-(2- 羥基 -2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 5 ）和異構物 2 （實例 6 ）
Figure 02_image202
將Cs 2CO 3（793 mg，2.4 mmol）添加到在DMF（15 mL）中的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （300 mg，1.0 mmol）和2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-3) （631 mg，2.0 mmol）中，並且將所得的混合物在85°C下在N 2氣氛下攪拌。在5 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.5% FA）洗脫），接著進行兩步製備型HPLC純化（（第1製備型HPLC：XBridge Prep OBD C18，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在7分鐘內28% B至48% B；流速：60 mL/min.）（第2製備型HPLC：Chiralpak ID-2，2×25 cm，5 µm；流動相A：MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）；流動相B：MeOH；梯度：在14 min內等度50% B；流速：16 mL/min.）），以得到均作為黃色固體的2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（25 mg，6%，100% ee）和2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（23 mg，5%，99.5% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.04 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.33 - 4.52 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 1.71 - 2.05 (m, 10H), 1.43 - 1.61 (m, 2H), 1.26 (s, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 461。
2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 7 ）和 2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 8 ）
(1 s,4 s)-4- 羥基環己基甲烷磺酸酯
Figure 02_image204
在0°C下將MsCl（1.9 mL，23.7 mmol）添加到(1 s,4 s)-環己烷-1,4-二醇（2.5 g，21.5 mmol）和TEA（6.0 mL，43.0 mmol）在DCM（200 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將混合物倒入水（20 mL）中，將水層用DCM（1 × 20 mL）萃取，並且將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將粗產物藉由矽膠層析法（用PE : EtOAc 50%至100%）純化，以得到作為無色固體的粗(1 s,4 s)-4-羥基環己基甲烷磺酸酯（2.9 g）。
2-((1s,4 s)-4- 羥基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 7 ）和 2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2 -b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 8 ）
Figure 02_image206
將Cs 2CO 3（1.8 g，5.7 mmol）添加到 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （350 mg，1.1 mmol）和粗(1 s, 4s)-4-羥基環己基甲烷磺酸酯（1.3 g）在DMF（20 mL）中的溶液中。將所得的混合物在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮並藉由C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的2-(4-羥基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的反式和順式異構物的混合物。藉由以下分離此材料：製備型SFC（CHIRALPAK IH，2.0×25 cm，5 µm；流動相A：CO2，流動相B：EtOH（8 mmol/L NH 3-MeOH）；流速：40 mL/min；梯度：40% B），以得到均作為淺黃色固體的第一洗脫物2-((1s,4 s)-4-羥基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（4 mg，1%）和第二洗脫物2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（12 mg，3%）。 (1 s,4 s)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.06 (s, 1H), 8.49 - 8.70 (m, 3H), 8.13 - 8.20 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.17 - 7.31 (m, 2H), 4.39 - 4.62 (m, 2H), 4.13 (s, 3H), 3.85 - 3.92 (m, 1H), 2.21 - 2.38 (m, 2H), 1.56 - 1.98 (m, 6H)。m/z (ESI+) [M+H] += 407。 (1 r,4 r)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.61 - 8.67 (m, 1H), 8.55 - 8.60 (m, 2H), 8.12 - 8.19 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.18 - 7.29 (m, 2H), 4.70 - 4.78 (m, 1H), 4.41 - 4.53 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.72 - 3.47 (m, 1H), 1.88 - 2.18 (m, 6H), 1.39-1.49 (m, 2H)。m/z (ESI+) [M+H] += 407。
rel -2-((1 S,3 R)-3- 羥基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 9 ）和異構物 2 （實例 10 ）
Figure 02_image208
在N 2氣氛下向在DMF（10 mL）中的 外消旋-(1 R,3 R)-3-羥基環己基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-7) （351 mg，1.3 mmol）和Cs 2CO 3（423 mg，1.3 mmol）添加 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （400 mg，1.3 mmol），並且將所得的混合物在90°C下攪拌。在5 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.05% FA）洗脫），接著進行製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在7 min內16% B至36% B；流速：60 mL/min）和手性製備型HPLC（CHIRAL ART纖維素-SB，4.6×100 mm，3 μm；流動相A：（MTBE + 在MeOH中的0.5% 2 N NH 3），流動相B： i-PrOH；梯度：在25 min內等度30% B；流速：18 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（16 mg，3%，99% ee）和 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（17 mg，3%，98.7% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.04 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.46 - 4.57 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.56 - 3.67 (m, 1H), 2.27 - 2.37 (m, 1H), 2.01 - 2.09 (m, 1H), 1.67 - 1.95 (m, 4H), 1.39 - 1.48 (m, 1H), 1.12 - 1.26 (m, 1H)。m/z (ESI+), [M+H] += 407。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.04 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.46 - 4.57 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.55 - 3.67 (m, 1H), 2.25 - 2.37 (m, 1H), 2.02 - 2.12 (m, 1H), 1.65 - 1.95 (m, 4H), 1.32 - 1.53 (m, 1H), 1.12 - 1.26 (m, 1H)。m/z (ESI+), [M+H] += 407。
6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 11 ）和異構物 2 （實例 12 ）
Figure 02_image210
在室溫下在N 2氣氛下向6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-2) （450 mg，1.5 mmol）和1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-1) （985 mg，2.9 mmol）在DMF（8 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（1.4 g，4.4 mmol）。將反應混合物在90°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 40% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®Shield RP18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在9 min內在水中22% − 32% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：手性製備型HPLC（YMC手性ART纖維素-SB 5 µm 20 mm × 250 mm；在9 min內與MeOH中的50%己烷/DCM（75/25，0.5% 2 M NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（55 mg，8%，100% ee）和6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（32 mg，5%，99.8% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (3 : 7旋轉異構物混合物) δ 10.32 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (br. s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.46/8.45 (s, 1H) (旋轉異構物), 8.16 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.70 - 4.80 (m, 1H), 4.15 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.29 (t, 2H), 1.92 - 2.21 (m, 8H), 1.51 - 1.61 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 474。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 7旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.49/8.48 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.25 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.48 - 4.60 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.28 (t, 2H), 2.08 - 2.18 (m, 4H), 1.93 - 2.04 (m, 4H), 1.52 - 1.60 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 474。
rel -2-((1 S,3 R)-3- 羥基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 13 ）和異構物 2 （實例 14 ）
Figure 02_image212
在室溫下在N 2氣氛下將6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-2) （400 mg，1.3 mmol）添加到Cs 2CO 3（1.3 g，3.9 mmol）和 外消旋-(1 R,3 R)-3-羥基環己基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-7) （702 mg，2.6 mmol）在DMF（15 mL）中的漿液中。將所得的混合物在90°C下攪拌12 h。使反應混合物冷卻至室溫，濃縮並且首先藉由C18快速層析法（用在水中的0至100% MeCN（0.05% NH4OH）洗脫），然後藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18，30×150 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內21% B至30% B）直接純化，以得到作為黃色固體的所需區域異構物 外消旋-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：手性製備型HPLC（CHIRAL ART纖維素-SB柱，2×25 cm，5 µm；流動相A：MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH），流動相B： i-PrOH；流速：20 mL/min；在14 min內等度50% B），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（26 mg，5%，99% ee）和 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（26 mg，5%，99% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.05 - 9.12 (m, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.51 - 8.57 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.00 - 7.10 (m, 1H), 4.82 - 4.86 (m, 1H), 4.45 - 4.55 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.55 - 3.67 (m, 1H), 2.25 - 2.34 (m, 1H), 2.00 - 2.11 (m, 1H), 1.68 - 1.95 (m, 4H), 1.40 - 1.51 (m, 1H), 1.13 - 1.26 (m, 1H)。m/z (ES+), [M+H] += 407。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.05 - 9.10 (m, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.51 - 8.56 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.01 - 7.10 (m, 1H), 4.45 - 4.55 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.56 - 3.67 (m, 1H), 2.28 - 2.32 (m, 1H), 2.00 - 2.10 (m, 1H), 1.87 - 1.92 (m, 1H), 1.67 - 1.87 (m, 3H), 1.36 - 1.50 (m, 1H), 1.12 - 1.26 (m, 1H)。m/z (ES+), [M+H] += 407。
6- 環丙氧基 -2-(2- 羥基 -2- 甲基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 15 ）和異構物 2 （實例 16 ）
Figure 02_image214
在室溫下向6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （330 mg，1.0 mmol）和2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯 ( Int III-3) （480 mg，1.5 mmol）在DMF（15 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（643 mg，2.0 mmol）。將所得的反應混合物在85°C下在N 2氣氛下攪拌5 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH C18 OBD，5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中35% − 55% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IE 5 μm 20 mm × 250 mm；與MeOH中的50%己烷/DCM（75/25，10 mM NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的6-環丙氧基-2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（37 mg，9%，100% ee）和6-環丙氧基-2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（38 mg，9%，95.8% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.46 - 8.63 (m, 3H), 7.53 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.34 - 4.49 (m, 1H), 4.15 - 4.26 (m, 1H), 1.67 - 2.08 (m, 10H), 1.37 - 1.67 (m, 2H), 1.27 (s, 3H), 1.03 - 1.12 (m, 2H)。0.92 - 1.03 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 487 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 R,3 S)-3- 羥基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 17 ）和 6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 18 ）
rel -6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 19 ）和異構物 2 （實例 20 ）
3- 羥基環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image216
在0°C下在N 2氣氛下在5 min時間段內將TsCl（17.2 g，90.4 mmol）緩慢添加到環己烷-1,3-二醇（10.0 g，86.1 mmol）、DMAP（1.1 g，8.6 mmol）和TEA（36.0 mL，258.3 mmol）在DCM（100 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌15 h。將反應混合物用鹽水（100 mL）淬滅，用DCM（100 mL × 2）萃取，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的25% - 30% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的3-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（8.0 g，34%）。MS ESI, m/z = 271 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺和 外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image218
在室溫下向6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （500 mg，1.5 mmol）和3-羥基環己基4-甲苯磺酸酯（1.2 g，4.5 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（1.5 g，4.5 mmol）。將反應混合物在100°C下攪拌5 h。將反應混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，接著藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH OBD C18，5 µm 30 mm × 150 mm；洗脫梯度為在水中24% − 34% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到均作為黃色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（31 mg，5%）和 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（110 mg，17%）。
6- 環丙氧基 -2-((1 R,3 S)-3- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 17 ）和 6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 18 ）
Figure 02_image220
藉由以下分離 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（31 mg，0.1 mmol）：製備型手性HPLC（Chiralpak ®ID，5 µm 30 × 250 mm；在30 min內與EtOH中的80%己烷/DCM（75/25，10 mM NH 3-MeOH）等度；45 mL/min），以得到均作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 R,3 S)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（6 mg，20%，99.9% ee）和6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（10 mg，33%，99.5% ee）。 (1 R,3 S)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.55 (dd, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.85 (d, 1H), 4.45 - 4.62 (m, 1H), 4.18 - 4.28 (m, 1H), 3.53 - 3.69 (m, 1H), 2.24 - 2.29 (m, 1H), 1.98 - 2.12 (m, 1H), 1.69 - 1.96 (m, 4H), 1.31 - 1.53 (m, 1H), 1.10 - 1.31 (m, 1H), 0.93 - 1.10 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。 (1 S,3 R)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.49 - 8.58 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.85 (d, 1H), 4.43 - 4.60 (m, 1H), 4.16 - 4.28 (m, 1H), 3.54 - 3.68 (m, 1H), 2.24 - 2.38 (m, 1H), 1.98 - 2.14 (m, 1H), 1.64 - 1.98 (m, 4H), 1.30 - 1.54 (m, 1H), 1.12 - 1.30 (m, 1H), 0.89 - 1.12 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 19 ）和異構物 2 （實例 20 ）
Figure 02_image222
藉由以下分離 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（110 mg，0.3 mmol）：製備型手性HPLC（YMC手性ART纖維素-SB 5 µm 20 mm × 250 mm；在17 min內與EtOH中的90%己烷/DCM（75/25，10 mM NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（37 mg，34%，100% ee）和 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（22 mg，20%，98% ee） - 異構物2。 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.55 (dd, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.74 - 4.88 (m, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.17 - 4.27 (m, 1H), 4.10 - 4.17 (m, 1H), 2.00 - 2.16 (m, 3H), 1.75 - 2.00 (m, 2H), 1.53 - 1.75 (m, 2H), 1.42 - 1.53 (m, 1H), 0.94 - 1.12 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.55 (dd, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.70 - 4.88 (m, 1H), 4.16 - 4.26 (m, 1H), 4.08 - 4.16 (m, 1H), 1.99 - 2.17 (m, 3H), 1.76 - 1.99 (m, 2H), 1.56 - 1.76 (m, 2H), 1.38 - 1.56 (m, 1H), 0.93 - 1.12 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。
2-(2- 乙醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 21 ）
7-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image224
在室溫下在2 min時間段內向在DMF（20 mL）中的粗7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-2) （1.5 g，4.5 mmol）和 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （700 mg，2.3 mmol）中添加KOH（255 mg，4.5 mmol），並且將所得的混合物在100°C下攪拌過夜。然後，使反應混合物冷卻至室溫，倒入水（150 mL）中並用EtOAc（3 × 100 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑以得到黃色固體。將殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的0%至80% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以產生粗7-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（280 mg），其不經進一步純化即可使用。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-(2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image226
向在DCM（4 mL）中的粗7-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（280 mg）中添加TFA（1.0 mL，13.0 mmol），並且將所得的混合物在室溫下攪拌。在2 h之後，真空除去溶劑，並且將所得的殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的0%至80% MeCN（5% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（60 mg，26%）。m/z (ESI+), [M+H] += 432。
2-(2- 乙醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 21 ）
Figure 02_image228
在室溫下在N 2氣氛下向在DCM（1 mL）中的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（350 mg，0.8 mmol）和TEA（452 μL，3.2 mmol）中添加乙酸酐（0.2 mL，1.6 mmol）。將所得的溶液攪拌1 h，之後真空除去溶劑以得到黃色固體。將殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的60%至70% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（400 mg，99%）。 1H NMR (300 MHz, CD 3OD) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ8.69 (s, 1H), 8.55 - 8.58 (m, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.22 (dd, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.52 - 4.55 (m, 1H), 4.21 (s, 3H), 4.06 (s, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 1.95 - 2.28 (m, 6H), 1.89/1.91 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.74 - 1.87 (m, 2H). m/z (ESI+), [M+H] += 474。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 22 ）
(1 r,4 r)-4-(( 三級丁氧基羰基 ) 胺基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image230
在室溫下在N 2氣氛下在5 min時間段內將TsCl（5.3 g，27.8 mmol）添加到在DCM（30 mL）中的((1 r,4 r)-4-羥基環己基)胺基甲酸三級丁酯（5.0 g，23.2 mmol）和TEA（6.5 mL，46.6 mmol）中。在2 h之後，將反應混合物倒入水（50 mL）中並且用DCM（2 × 75 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑。將所得的紅色油狀物溶解在DCM（50 mL）中並通過矽膠墊過濾。將矽膠墊用DCM（500 mL）洗滌，並且真空除去溶劑，以得到粗(1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（4.5 g），其不經進一步純化即可使用。
(1 r,4 r)-4-(( 三級丁氧基羰基 )( 甲基 ) 胺基 ) 環己基 4- 甲苯磺酸酯
Figure 02_image232
在室溫下向在DMF（10 mL）中的粗(1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（4.5 g）和NaH（60 wt.%）（731 mg，18.3 mmol）中逐滴添加碘甲烷（6.9 g，48.6 mmol），將所得的混合物在60°C下攪拌。在2 h之後，使反應混合物冷卻至室溫，用水（20 mL）淬滅並用EtOAc（3 × 25mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且真空除去溶劑。將所得的殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的30%至60% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到粗(1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（2.4 g），其不經進一步純化即可使用。
((1 s,4 s)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image234
向在DMF（10 mL）中的粗(1 r,4 r)-4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（2.4 g）和KOH（182 mg，3.2 mmol）中添加 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-1) （500 mg，1.6 mmol），並且將所得的溶液在100°C下攪拌。在12 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且使用C18快速層析法（用在水中的20%至100% MeCN（0.05% FA）洗脫）直接純化，以得到粗((1 s,4 s)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（0.6 g）。m/z (ESI+), [M+H] += 520。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( 甲基胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image236
向在1,4-二㗁𠮿（6 mL）中的粗((1 s,4 s)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（0.6 g）中添加HCl水溶液（12 N，1 mL，12.0 mmol），並且將所得的混合物在室溫下攪拌。在2 h之後，真空除去溶劑以得到 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗HCl鹽（0.5 g），其不經進一步純化即可使用。m/z (ESI+), [M+H] += 420。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 22 ）
Figure 02_image238
在室溫下向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗HCl鹽（0.5 g）中添加在DCM（1 mL）中的乙酸酐（0.2 mL，1.7 mmol）和TEA（0.6 mL，4.4 mmol），並且將所得的混合物在室溫下攪拌。在5 min之後，添加另外的乙酸酐（0.2 mL，1.7 mmol）並且繼續攪拌1 h。然後，將反應混合物用水（5 mL）淬滅並且真空除去溶劑。將所得的殘餘物使用製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18，30×250，5 µm；流動相A：水（0.05% NH 4OH）；流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至47% B）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（21.5 mg，4%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 2旋轉異構物混合物) δ11.06 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.40 - 4.49 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.75 - 3.86 (m, 1H), 2.68 (s, 2H), 2.55 (s, 1H), 1.99 - 2.15 (m, 3H), 2.07 (s, 1H), 1.96 (s, 2H), 1.63 - 1.88 (m, 3H), 1.52 - 1.63 (m, 1H), 1.38 - 1.47 (m, 1H)。m/z (ESI+), [M+H] += 462。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 23 ）
Figure 02_image240
在室溫下將 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-3) 之粗HCl鹽（390 mg）添加到在DCM（5 mL）中的TEA（477 µL，3.4 mmol）中。在將所得的混合物攪拌5 min之後，添加乙酸酐（121 µL，1.3 mmol）。繼續攪拌1 h，之後將反應物用水（5 mL）淬滅並濃縮以得到作為黃色油狀物的粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18，30×250，5 µm；流動相A：水（0.05% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內27% B至47% B）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（62 mg，16%）。1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4) (2 : 3旋轉異構物混合物) δ 8.69 - 8.73 (m, 1H), 8.55 - 8.61 (m, 1H), 8.45 - 8.49 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 7.99 - 8.06 (m,1H), 7.21 - 7.26 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 4.45 - 4.62/3.87 - 3.97 (m, 2H) (旋轉異構物), 4.22/4.21 (s, 3H) (旋轉異構物), 2.99/2.88 (s,3H) (旋轉異構物), 2.30 - 2.40 (m, 2H), 2.06 - 2.25 (m, 5H), 1.81 - 2.01 (m, 4H)。
6- 甲氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 24 ）和 6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 25 ）
4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image242
在N 2氣氛下將Cs 2CO 3（3.2 g，9.7 mmol）添加到4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式比率1 : 5） ( Int III-10) （2.5 g，6.5 mmol）和6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-2) （1.0 g，3.2 mmol）在DMF（40 mL）中的溶液中。將所得的混合物在90°C下攪拌4 h，使其冷卻至室溫並且首先藉由快速C18快速層析法（用在水中的0%至70% MeCN洗脫）直接純化，接著藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內40% B至60% B）純化，以得到作為黃色固體的4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基(甲基)胺基甲酸三級丁酯（270 mg，16%，順式/反式比率5 : 1）。m/z (ES+), [M+H] += 520。
6- 甲氧基 -2-(4-( 甲基胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image244
將TFA（2 mL，3.0 mmol）添加到在DCM（4 mL）中的(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基(甲基)胺基甲酸三級丁酯（150 mg，0.3 mmol；順式/反式比率5 : 1）中。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。在減壓下除去溶劑，將殘餘物溶解在EtOAc中並用飽和NaHCO 3水溶液鹼化。將有機層用鹽水（3 × 50 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且將溶劑在減壓下蒸發，以得到6-甲氧基-2-(4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的TFA鹽（120 mg，99%；順式/反式比率5 : 1）。m/z (ES+), [M+H] += 420。
6- 甲氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 24 ）和 6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 25 ）
Figure 02_image246
將乙酸酐（58 mg，0.6 mmol）添加到TEA（120 µL，1.1 mmol）和6-甲氧基-2-(4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的TFA鹽（120 mg，0.3 mmol）（順式/反式比率5 : 1）在DCM（3 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。在減壓下除去溶劑，並且將殘餘物首先藉由C18快速層析法（用在水中的0%至70% MeCN洗脫）純化，然後藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mmol/L NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內16% B至36% B）純化，以得到作為橙色固體的6-甲氧基-2-(4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（順式/反式比率5 : 1）。藉由以下分離兩種異構物：手性製備型HPLC（CHIRAL ART纖維素-SB柱，2×25 cm，5 µm；洗脫梯度在EtOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）；流速：20 mL/min；在13 min內），以得到均作為黃色固體的作為第一洗脫異構物的6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（90 mg，68%，100% ee）和作為第二洗脫異構物的6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（20 mg，15%，100% ee） 。 (1 s,4 s)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.37 (s, 1H), 9.05 - 9.12 (m, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.53 - 8.57 (m, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.00 - 7.11 (m, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.39 - 4.54/3.74 - 3.88 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.08 (s, 3H), 2.54 - 2.72 (m, 5H), 1.92 - 2.20 (m, 5H), 1.52 - 1.90 (m, 3H), 1.38 - 1.50 (m, 1H)。m/z (ES+), [M+H] += 462。 (1 r,4 r)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.01 - 9.11 (m, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.52 - 8.63 (m, 2H), 8.46 - 8.49 (m, 1H), 7.19 - 7.24 (m, 1H), 6.99 - 7.09 (m, 1H), 4.36 - 4.59/3.70 - 3.90 (m, 3H) (旋轉異構物), 4.07 (s, 3H), 2.90 (s, 2H), 2.70 (s, 1H), 2.31 - 1.93 (m, 7H), 1.59 - 1.92 (m, 4H)。m/z (ES+), [M+H] += 462。
2-((1 r,4 r)-4-( 環丙烷甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 26 ）和 2-((1 s,4 s)-4-( 環丙烷甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 27 ）
(4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image248
在室溫下在N 2氣氛下在2 min時間段內向6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-2) （500 mg，1.6 mmol）和4-((三級丁氧基羰基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式比率1 : 5） ( Int III-9) （1.5 g，4.1 mmol）在DMF（15 mL）中的懸浮液中添加Cs 2CO 3（1.6 g，4.9 mmol）。將反應混合物在90°C下攪拌3 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（1% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)胺基甲酸三級丁酯（順式/反式比率7 : 1）（280 mg，34%）。MS ESI, m/z = 506 [M+H] +。
2-(4- 胺基環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image250
在室溫下在N 2氣氛下在2 min時間段內向(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)胺基甲酸三級丁酯（順式/反式比率7 : 1）（280 mg，0.6 mmol）在DCM（20 mL）中的溶液中逐滴添加在二㗁𠮿中的4 N HCl（1.4 mL，5.6 mmol）。將反應混合物攪拌2 h，之後將其在減壓下濃縮以得到2-(4-胺基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（順式/反式比率7 : 1）（270 mg，約90 wt.%）的粗HCl鹽，其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 406 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4- ( 環丙烷甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 26 ）和 2-((1 s,4 s )-4-( 環丙烷甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 27 ）
Figure 02_image252
在室溫下在N 2氣氛下在2 min時間段內向2-(4-胺基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（順式/反式比率7 : 1）（90 wt.%）（270 mg）的粗HCl鹽和TEA（250 µL，1.8 mmol）在DCM（4 mL）中的溶液中緩慢添加4-溴丁醯氯（227 mg，1.2 mmol），並且將所得的混合物攪拌2 h。將混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 90% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®Shield RP18 OBD，5 µm 30×150 mm；洗脫梯度為在8 min內在水中26% − 34% MeCN（0.05% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到2-((1 r,4 r)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（8 mg，3%），在此之後再次藉由以下分離此材料：製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中35% − 50% MeCN（10 mM NH 4HCO 3和0.1% NH 4OH）；60 mL/min），以得到2-((1 s,4 s)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（52 mg，20%），兩者均為黃色固體。 (1 r,4 r)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.51 - 8.59 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.42 - 4.56 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.60 - 3.74 (m, 1H), 2.10 - 2.23 (m, 2H), 1.89 - 2.06 (m, 4H), 1.33 - 1.61 (m, 3H), 0.58 - 0.74 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。 (1 s,4 s)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.46 - 4.60 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.87 - 4.00 (m, 1H), 2.25 - 2.39 (m, 2H), 1.89 - 2.10 (m, 2H), 1.58 - 1.87 (m, 5H), 0.56 - 0.76 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。
rel- 2-((6 R,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-6- 環丙氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 28 ）和異構物 2 （實例 29 ）
rel- 2-((6 S,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-6- 環丙氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 30 ）和異構物 2 （實例 31 ）
外消旋 -(6 R,7 R)-7-(6- 環丙氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image254
在室溫下向6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （500 mg，1.5 mmol）和 外消旋-(6 R,7 S)-6-甲基-7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-5) （748 mg，2.2 mmol）在DMF（10 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（1.5 g，4.5 mmol）。將反應混合物在100°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的80% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到粗 外消旋-(6 R,7 R)-7-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（400 mg）。MS ESI, m/z = 572 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((6 R,7 R)-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )- 2H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image256
向粗 外消旋-(6 R,7 R)-7-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（400 mg）在DCM（8 mL）中的溶液中逐滴添加TFA（2.0 mL，26.0 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌4 h。將混合物在減壓下濃縮，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-6-環丙氧基-2-((6 R,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（350 mg），其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 472 [M+H] +。
rel- 2-((6 R,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-6- 環丙氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 28 ）和異構物 2 （實例 29 ）
Figure 02_image258
在0°C下在N 2氣氛下向 外消旋-6-環丙氧基-2-((6 R,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（350 mg）和TEA（250 µL，1.8 mmol）在DCM（5 mL）中的溶液中添加乙醯氯（110 mg，1.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（Waters SunFire ®C18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中35% − 45% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）純化，並且然後藉由製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA 5 μm 20 mm × 250 mm；在27 min內與EtOH中的25% MTBE（2 mM NH 3-MeOH）等度；15 mL/min）純化，以得到均作為黃色固體的 rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（15 mg，5%，100% ee）和 rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（15 mg，5%，99.7% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.30 (s, 1H), 9.07 (d, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.55 (d, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.54/7.52 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.16 - 4.24 (m, 1H), 4.05 - 4.16 (m, 1H), 3.97/3.80 (s, 2H) (旋轉異構物), 3.68/3.53 (s, 2H) (旋轉異構物), 2.06 - 2.17 (m, 1H), 1.88 - 2.06 (m, 4H), 1.80/1.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.60 - 1.72 (m, 1H), 1.42 (t, 1H), 1.03 - 1.11 (m, 2H), 0.93 - 1.03 (m, 2H), 0.59 (br. d, 3H)。MS ESI, m/z = 514 [M+H] +。
外消旋 -(6 S,7 R)-7-(6- 環丙氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image260
在室溫下在N 2氣氛下向6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （600 mg，1.8 mmol）和 外消旋-(6 S,7 S)-6-甲基-7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-6) （1.1 g，3.2 mmol）在DMF（6 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（1.8 g，5.4 mmol）。將反應混合物在95°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeOH（0.05% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的粗 外消旋-(6 S,7 R)-7-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（900 mg），其含有大約30% N1-異構物。MS ESI, m/z = 572 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((6 S,7 R)-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )- 2H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image262
在N 2氣氛下向粗 外消旋-(6 S,7 R)-7-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（900 mg）（含有30% N1-異構物）在DCM（5 mL）中的溶液中逐滴添加TFA（243 mL，31.5 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將混合物在減壓下濃縮，以得到作為黃色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((6 S,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（710 mg），其含有某一 N1-異構物。MS ESI, m/z = 472 [M+H] +。
rel- 2-((6 S,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-6- 環丙氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 30 ）和異構物 2 （實例 31 ）
Figure 02_image264
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-6-環丙氧基-2-((6 S,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（700 mg）和TEA（833 µL，6.0 mmol）在DCM（5 mL）中的溶液中添加乙醯氯（188 mg，2.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% TFA）洗脫）純化，以得到 外消旋-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基-N -(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲醯胺（100 mg），將其藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中30% − 50% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，並且然後藉由製備型手性HPLC（YMC手性ART纖維素-SB 5 μm 20 mm × 250 mm；與EtOH中的50%己烷/DCM（75/25，10 mM NH 3-MeOH）等度；20 mL/min）分離，以得到作為黃色固體的 rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（30 mg，4%，99.5% ee）和 rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（30 mg，4%，100% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.50 - 8.59 (m, 3H), 7.53 (d, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.68 (br. s, 1H), 4.24 (br. s, 1H), 3.82 - 3.93 (m, 2H), 3.56 - 3.67 (m, 2H), 2.30 - 2.42 (m, 1H), 1.90 - 2.30 (m, 4H), 1.69 - 1.83 (m, 5H), 1.03 - 1.12 (m, 2H), 0.92 - 1.03 (m, 2H), 0.52 - 0.67 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 514 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 32 ）和 6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 33 ）
(4-(6- 環丙氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸三級丁酯
Figure 02_image266
向4-((三級丁氧基羰基)(甲基)胺基)環己基4-甲苯磺酸酯（順式/反式比率1 : 5） ( Int III-10) （2.3 g，6.0 mmol）和6-環並氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （1.0 g，3.0 mmol）在DMF（30 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（2.9 g，9.0 mmol）。將反應混合物在90°C下攪拌4 h。將混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH OBD C18 5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中47% − 67% MeCN（10 mM NH 4HCO 3和0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為橙色固體的(4-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（順式/反式比率5 : 1）（180 mg，11%）。MS ESI, m/z = 546 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-(4-( 甲基胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image268
向(4-(6-環丙氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸三級丁酯（順式/反式比率5 : 1）（150 mg，0.3 mmol）在DCM（6 mL）中的溶液中逐滴添加TFA（3.0 mL，38.9 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌1 h。將混合物在減壓下濃縮，以得到6-環丙氧基-2-(4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（順式/反式比率5 : 1）（130 mg，94 wt.%）的粗TFA鹽。粗產物不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 446 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 32 ）和 6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 33 ）
Figure 02_image270
在室溫下向6-環丙氧基-2-(4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（順式/反式比率5 : 1）（120 mg，94 wt.%）的粗TFA鹽和TEA（150 µL，1.1 mmol）在DCM（5 mL）中的溶液中添加乙酸酐（55 mg，0.5 mmol）。將所得的混合物攪拌1 h。將反應混合物在減壓下濃縮，並且將粗產物藉由C18快速層析法（在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為橙色固體的6-環丙氧基-2-(4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：製備型手性HPLC（Chiralpak ®ID-2，5 µm 20 × 250 mm；與MeOH中的70%己烷/DCM（3/1，0.5% 2 N NH 3-MeOH溶液）等度；流速：20 mL/min），以得到6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（90 mg，63%，99.9% ee）和6-環丙氧基-2-((1r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（20 mg，14%，99.0% ee）。 (1 s,4 s)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.34 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.50 - 8.65 (m, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.63 - 4.78 (m, 1H), 4.38 - 4.54 / 3.72 - 3.90 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.17 - 4.30 (m, 1H), 2.54 - 2.77 (m, 2H), 2.55 / 2.69 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.91 - 2.22 (m, 2H), 1.97 / 2.08 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.38 - 1.89 (m, 4H), 1.04 - 1.13 (m, 2H), 0.94 - 1.04 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。 (1 r,4 r)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.34 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8。49 - 8.67 (m, 3H), 7.44 - 7.57 (m, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.46 - 4.61 (m, 1H), 4.36 - 4.46 / 3.71 - 3.87 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.17 - 4.30 (m, 1H), 2.74 / 2.87 (s, 3H) (旋轉異構物), 2.16 - 2.33 (m, 2H), 2.01 / 2.10 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.93 - 2.16 (m, 2H), 1.65 - 1.93 (m, 4H), 1.02 - 1.13 (m, 2H), 0.92 - 1.02 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 34 ）和異構物 2 （實例 35 ）
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 36 ）和異構物 2 （實例 37 ）
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4-( 甲基胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image272
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-1) （100 mg，0.2 mmol）和1 M甲胺-MeOH溶液（1.2 mL，1.2 mmol）在DCM（5 mL）中的溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉（101 mg，0.5 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 40% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（90 mg，87%）。MS ESI, m/z = 434 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 34 ）和異構物 2 （實例 35 ）
Figure 02_image274
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（80 mg，0.2 mmol）和TEA（103 µL，0.7 mmol）在DCM（2 mL）中的溶液中添加乙酸酐（38 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物在減壓下濃縮並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XSelect CSH C18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在10 min內在水中50% − 65% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（45 mg）。藉由以下分離固體：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IF，5 µm 20 × 250 mm；在28 min內與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH溶液）等度；流速：15 mL/min），以得到均作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（11 mg，12%，99.9% ee）和 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（20 mg，22%，99.9% ee）。 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1.2 : 1旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.42 - 4.59/3.78 - 3.96 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.06 - 4.22 (m, 4H), 2.86/2.73 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.92 - 2.39 (m, 6H), 1.41 - 1.90 (m, 4H), 0.52 - 0.66 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (3 : 2旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.51 - 4.76/3.90 - 4.08 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.31 - 4.48 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.59 - 2.99 (m, 4H), 2.24 - 2.40 (m, 1H), 1.74 - 2.24 (m, 6H), 1.26 - 1.74 (m, 2H), 0.92 - 1.20 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4-( 甲基胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image276
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-2) （120 mg，0.3 mmol）和2 M甲胺-MeOH溶液（717 µL，1.4 mmol）在DCM（2 mL）中的溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉（122 mg，0.6 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 20% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（100 mg，80%）。MS ESI, m/z = 434 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 36 ）和異構物 2 （實例 37 ）
Figure 02_image278
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（90 mg，0.2 mmol）和TEA（116 µL，0.8 mmol）在DCM（2 mL）中的溶液中添加乙酸酐（42 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物在減壓下濃縮並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 50% MeCN洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH C18 OBD，5 µm 19 × 250 mm；洗脫梯度為在10 min內在水中50% − 60% MeCN（10 mM NH 4HCO 3和0.1% NH 4OH）；25 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（62 mg）。藉由以下分離固體：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IF，5 µm 20 × 250 mm；在18 min內與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH溶液）等度；流速：15 mL/min），以得到均作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（25 mg，25%，100% ee）和 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（20 mg，20%，99.8% ee）。 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1.6 : 1旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.51 - 4.74/3.89 - 4.08 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.31 - 4.48 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.60 - 2.94 (m, 4H), 1.76 - 2.42 (m, 7H), 1.25 - 1.73 (m, 2H), 0.91 - 1.20 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1.2 : 1旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.53 - 8.73 (m, 3H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.16 - 7.35 (m, 2H), 4.44 - 4.57/3.81 - 3.95 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.03 - 4.27 (m, 4H), 2.86/2.72 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.93 - 2.40 (m, 6H), 1.42 - 1.93 (m, 4H), 0.41 - 0.73 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。
rel -2-((1 S,2 S,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 38 ）和異構物 2 （實例 39 ）
rel -2-((1 S,2 S,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 40 ）和異構物 2 （實例 41 ）
外消旋 -6- 甲氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image280
在N 2氣氛下向6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-2)（1.1 g，3.6 mmol）和 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯 ( Int III-13) （1.8 g，7.1 mmol）在DMF（10 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（3.5 g，10.7 mmol）。將反應混合物在90°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫，倒入水（50 mL）中並用EtOAc（25 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®Shield RP18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在9 min內在水中30% − 40% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）純化，以得到 外消旋-6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2-吲唑-5-甲醯胺（700 mg，42%）。m/z (ESI+), [M+H] += 463。
外消旋 -6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image282
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（300 mg，0.7 mmol）在1,4-二㗁𠮿（2 mL）中的溶液中添加3 N HCl水溶液（2.7 mL，8.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物用濃NH 4OH水溶液酸化，並且藉由C18快速層析法（用在水中的20% - 50% MeCN（1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，74%）。m/z (ESI+), [M+H] += 419。
rel -2-((1 S,2 S,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 38 ）和異構物 2 （實例 39 ）
Figure 02_image284
rel -2-((1 S,2 S,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 40 ）和異構物 2 （實例 41 ）
Figure 02_image286
在N 2氣氛下向 外消旋-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，0.5 mmol）在MeOH（5 mL）中的溶液中添加NaBH 4（36 mg，1.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物用水（10 mL）淬滅，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 50% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-2-((1 S,2 S)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。將此混合物藉由製備型手性HPLC（Chiralpak ®ID-2, 5 µm 20 × 250 mm；與MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）/MeOH，60/40等度；流速：16 mL/min）分離，以得到作為第一洗脫異構物的 rel-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（7 mg，4%，100% ee）和作為第二洗脫異構物的 rel-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（56 mg，28%，99.9% ee）。將作為第三和第四異構物洗脫但具有更低純度的以下兩種化合物在第二手性製備型HPLC（Chiralpak ®IE，5 µm 20 × 250 mm；與MTBE（2 mM NH 3-MeOH溶液）/MeOH，50/50等度；流速：20 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的 rel-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（36 mg，18%，99.9% ee）和 rel-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（6 mg，3%，99.6% ee）。
rel -(1 S,2 S,4 R)- 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.01 - 4.12 (m, 4H), 3.96 (br. s, 1H), 2.52 - 2.59 (m, 1H), 2.31 - 2.47 (m, 1H), 1.78 - 1.89 (m, 2H), 1.67 - 1.77 (m, 1H), 1.55 - 1.65 (m, 1H), 1.28 - 1.40 (m, 1H), 0.54 (d, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 421。
rel -(1 S,2 S,4 S)- 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.01 - 4.11 (m, 4H), 3.55 - 3.67 (m, 1H), 2.11 - 2.24 (m, 1H), 1.88 - 2.10 (m, 4H), 1.29 - 1.45 (m, 1H), 1.16 (q, 1H), 0.57 (d, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 421。
rel -(1 S,2 S,4 S)- 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.00 - 4.14 (m, 4H), 3.56 - 3.67 (m, 1H), 2.11 - 2.26 (m, 1H), 1.89 - 2.11 (m, 4H), 1.30 - 1.45 (m, 1H), 1.16 (q, 1H), 0.57 (d, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 421。
rel -(1 S,2 S,4 R)- 異構物2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.03 - 4.12 (m, 4H), 3.92 - 3.99 (m, 1H), 2.52 - 2.59 (m, 1H), 2.34 - 2.47 (m, 1H), 1.78 - 1.89 (m, 2H), 1.68 - 1.77 (m, 1H), 1.55 - 1.67 (m, 1H), 1.25 - 1.40 (m, 1H), 0.54 (d, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 421。
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,2 S,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 42 ）和異構物 2 （實例 43 ）
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,2 S,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 44 ）和異構物 2 （實例 45 ）
外消旋 - 6- 環丙氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image288
向6-環丙氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （1.4 g，4.2 mmol）和 外消旋 -(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯 ( Int III-13) （1.1 g，8.4 mmol）在DMF（30 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（2.9 g，9.0 mmol）。將反應混合物在95°C下攪拌3 h，並且在冷卻至室溫之後用EtOAc（500 mL）稀釋，並且用鹽水（100 mL × 3）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型SFC（DAICEL DCpak® P4VP，5 µm 30 mm × 250 mm；與在CO 2（35 oC，70巴）中的30% DCM/MeOH（50/50，0.1% 2M NH 3-MEOH）等度；60 mL/min）純化，以得到作為橙色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（440 mg，22%）。MS ESI, m/z = 489 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image290
向 外消旋-6-環丙氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（400 mg，0.8 mmol）在THF（5 mL）和水（5 mL）中的溶液中添加濃HCl水溶液（2.0 mL，24.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型SFC（YMC手性ART直鏈澱粉-C Neo 5 µm 30 mm × 250 mm；與在CO 2（35°C，78巴）中的60% MeOH/MeCN（50/50，0.1% 2 M NH 3-MeOH）等度；60 mL/min）進一步純化，以得到作為橙色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（196 mg，54%）。MS ESI, m/z = 445 [M+H] +。
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,2 S,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 42 ）和異構物 2 （實例 43 ）
Figure 02_image292
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,2 S,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 44 ）和異構物 2 （實例 45 ）
Figure 02_image294
在N 2氣氛下向 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S) -2-甲基-4-側氧基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（180 mg，0.4 mmol）在MeOH（5 mL）中的溶液中添加NaBH 4（31 mg，0.8 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物用水（1 mL）淬滅並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 50% MeCN洗脫）純化，以得到作為橙色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA 5 μm 20 mm × 250 mm；與MeOH中的80% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；17 mL/min），以得到全部作為黃色固體的作為第一洗脫異構物的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（8 mg，4%，98.9% ee）、作為第二洗脫異構物的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（7 mg，4%，98.4% ee）、作為第三洗脫異構物的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（40 mg，22%，99.6% ee）和作為第四洗脫異構物的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（30 mg，17%，99.5% ee）。
rel -(1 S,2 S,4 R)- 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.48 - 8.61 (m, 3H), 7.53 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.16 - 4.27 (m, 1H), 4.10 (td, 1H), 3.96 (br. s, 1H), 2.24 - 2.47 (m, 2H), 1.77 - 1.90 (m, 2H), 1.50 - 1.77 (m, 2H), 1.28 - 1.42 (m, 1H), 0.93 - 1.15 (m, 4H), 0.55 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 447 [M+H] +。
rel-(1S,2S,4R)- 異構物 2： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (d, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.48 - 8.64 (m, 3H), 7.53 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.22 (br. s, 1H), 4.01 - 4.15 (m, 1H), 3.96 (br. s, 1H), 2.22 - 2.46 (m, 2H), 1.77 - 1.92 (m, 2H), 1.50 - 1.77 (m, 2H), 1.27 - 1.45 (m, 1H), 0.92 - 1.15 (m, 4H), 0.55 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 447 [M+H] +。
rel -(1 S,2 S,4 S)- 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.30 (s, 1H), 9.06 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.48 - 8.65 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.04 (dd, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.15 - 4.25 (m, 1H), 4.02 - 4.15 (m, 1H), 3.54 - 3.69 (m, 1H), ), 1.87 - 2.30 (m, 5H), 1.29 - 1.50 (m, 1H), 1.11 - 1.29 (m, 1H), 0.92 - 1.11 (m, 4H), 0.58 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 447 [M+H] +。
rel -(1 S,2 S,4 S)- 異構物 2： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.30 (s, 1H), 9.02 - 9.11 (m, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.48 - 8.65 (m, 3H), 7.51 (s, 1H), 7.10 - 7.00 (m, 1H), 4.71 (d, 1H), 4.15 - 4.25 (m, 1H), 4.02 - 4.15 (m, 1H), 3.54 - 3.69 (m, 1H), 1.87 - 2.30 (m, 5H), 1.27 - 1.50 (m, 1H), 1.11 - 1.27 (m, 1H), 0.92 - 1.11 (m, 4H), 0.58 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 447 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-(2- 羥基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 46 ）和異構物 2 （實例 47 ）
8,11- 二氧雜二螺 [3.2.4 7.2 4] 十三烷 -2- 醇
Figure 02_image296
在0°C下在N 2氣氛下向8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-酮（3.0 g，15.3 mmol）在MeOH（50 mL）中的溶液中添加NaBH 4（867 mg，22.9 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應溶液藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-醇（3.0 g，99%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 4.80 - 4.90 (m, 1H), 3.98 - 4.11 (m, 1H), 3.83 (s, 4H), 2.02 - 2.15 (m, 2H), 1.40 - 1.55 (m, 10H)。
8,11- 二氧雜二螺 [3.2.4 7.2 4] 十三烷 -2- 基 4- 硝基苯甲酸酯
Figure 02_image298
在0°C下將4-硝基苯甲醯氯（3.7 g，19.7 mmol）添加到TEA（5.3 mL，37.8 mmol）和8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-醇（3.0 g，15.1 mmol）在DCM（50 mL）中的溶液中。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h。將反應混合物在減壓下濃縮，並且藉由矽膠層析法（用在PE中的20% - 50% EtOAc洗脫），以得到粗8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（6.0 g，75 wt.%）。MS ESI, m/z = 348 [M+H] +。
7- 側氧基螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 4- 硝基苯甲酸酯
Figure 02_image300
向粗8,11-二氧雜二螺[3.2.4 7.2 4]十三烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（75 wt.%）（6.0 g）在THF（40 mL）中的溶液中添加2 N HCl（40.0 mL，80.0 mmol），並且將反應混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物用EtOAc（200 mL）稀釋，用水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且然後在減壓下濃縮以得到7-側氧基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（3.5 g，50%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.36 (d, 2H), 8.22 (d, 2H), 5.15 - 5.36 (m, 1H), 2.52 - 2.61 (m, 2H), 2.17 - 2.43 (m, 4H), 2.04 - 2.17 (m, 2H), 1.82 - 2.00 (m, 4H)。
7- 羥基螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 4- 硝基苯甲酸酯
Figure 02_image302
在室溫下在N 2氣氛下向7-側氧基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（3.4 g，11.2 mmol）在MeOH（60 mL）中的溶液中添加NaBH 4（848 mg，22.4 mmol）。將所得的溶液攪拌2 h。將反應混合物用EtOAc（250 mL）稀釋，並且用水（75 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到作為無色固體的7-羥基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（2.0 g，58%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.34 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 5.18 (p, 1H), 4.42 (d, 1H), 3.34 - 3.50 (m, 2H), 2.19 - 2.46 (m, 2H), 1.89 (td, 2H), 1.50 - 1.78 (m, 4H), 1.06 - 1.50 (m, 4H)。
7-( 甲苯磺醯基氧基 ) 螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 4- 硝基苯甲酸酯
Figure 02_image304
將TsCl（2.8 g，14.7 mmol）緩慢添加到7-羥基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（1.8 g，5.9 mmol）、DMAP（72 mg，0.6 mmol）和TEA（2.5 mL，17.7 mmol）在DCM（50 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h，然後用DCM（100 mL）稀釋，並且用0.1 N HCl（75 mL）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 30% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的7-(甲苯磺醯基氧基)螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（1.20 g，44%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 8.34 (d, 2H), 8.14 (d, 2H), 7.80 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 5.16 (p, 1H), 4.41 - 4.59 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.24 - 2.42 (m, 2H), 1.83 - 1.95 (m, 2H), 1.60 - 1.71 (m, 4H), 1.38 - 1.60 (m, 4H)。
6- 環丙氧基 -2-(2- 羥基螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 46 ）、異構物 2 （實例 47 ）
Figure 02_image306
在室溫下向7-(甲苯磺醯基氧基)螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯（1.2 g，2.6 mmol）和6-環並氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-1 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int II-3) （350 mg，1.1 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液中添加Cs 2CO 3（1.0 g，3.1 mmol）。將反應混合物在90°C下攪拌12 h。在此之後，將反應混合物冷卻至室溫，接著添加Cs 2CO 3（314 mg，1.0 mmol）和MeOH（20 mL）。將所得的混合物再攪拌3 h。將反應混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺，其含有某一 N1-區域異構物。將6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（70 mg）藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH OBD C18 5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中30% − 40% MeCN（10 mM NH 4HCO 3和0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，並且然後藉由手性製備型HPLC（Chiralpak ®IF，20 × 250 mm，5 µm；與MTBE/MeOH（0.1% 2 N NH 3-MeOH），80/20等度；流速：14 mL/min），以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（12 mg，9%，100%ee）和6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（9 mg，7%，99% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.50 - 8.60 (m, 3H), 7.53 (s, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.92 (d, 1H), 4.33 - 4.52 (m, 1H), 4.18 - 4.27 (m, 1H), 4.06 - 4.18 (m, 1H), 2.24 - 2.39 (m, 1H), 1.82 - 2.15 (m, 5H), 1.42 - 1.82 (m, 6H), 1.02 - 1.10 (m, 2H), 0.93 - 1.02 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 473 [M+H] +。
2-(4- 羥基 -4- 甲基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 48 ）和異構物 2 （實例 49 ）
5- 溴 -6- 甲氧基 -2-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑
Figure 02_image308
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （3.3 g，12.7 mmol）在 i-PrOH（30 mL）中的溶液中添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-胺（2.0 g，12.7 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌1 h，然後冷卻至室溫並且接著添加三正丁基膦（12.9 g，63.6 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌13 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的10% - 100% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色固體的粗5-溴-6-甲氧基-2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（8.2 g，41 wt.%），其不經進一步純化即可在下一步驟中使用。MS ESI, m/z = 367/369 [M+H] +。
4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image310
在室溫下向粗5-溴-6-甲氧基-2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（41 wt.%）（8.2 g）在THF（50 mL）中的溶液中添加在水中的4 N HCl（22.9 mL，91.6 mmol），並且將所得的溶液在室溫下在N 2氣氛下攪拌12 h。將混合物用2 N NaOH中和，並且用EtOAc（150 mL×3）萃取。將合併的有機層在減壓下濃縮。將殘餘物從PE/EtOAc（3/1，100 mL）中結晶，以得到作為淡黃色固體的4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（3.0 g，100%）。MS ESI, m/z = 323/325 [M+H] +。
4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image312
在−20°C下在N 2氣氛下向4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（700 mg，2.2 mmol）在THF（120 mL）中的溶液中緩慢添加在THF中的3 N溴化甲基鎂（4.3 mL，13.0 mmol）。將所得的混合物在−20°C下攪拌2 h。將反應物用飽和NH 4Cl水溶液（5 mL）淬滅並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為棕色固體的4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（730 mg，99%）。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
2-(4- 羥基 -4- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image314
將4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（730 mg，2.2 mmol）、Pd(dppf)Cl 2（157 mg，0.2 mmol）和DIPEA（2.3 ml，12.9 mmol）在MeOH（25 mL）中的混合物在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌24 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為棕色油狀物的2-(4-羥基-4-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（635 mg，93%）。MS ESI, m/z = 319 [M+H] +。
2-(4- 羥基 -4- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image316
在N 2氣氛下向2-(4-羥基-4-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（635 mg，2.0 mmol）在MeOH（20 mL）中的溶液中添加LiOH（155 mg，6.5 mmol）在水（20 mL）中的溶液。將所得的混合物在室溫下攪拌17 h。將反應混合物用1 N HCl中和，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% FA）洗脫）直接純化，以得到作為棕色膠狀物的2-(4-羥基-4-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（600 mg，99%）。MS ESI, m/z = 305 [M+H] +。
2-(4- 羥基 -4- 甲基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 48 ）和異構物 2 （實例 49 ）
Figure 02_image318
在室溫下在N 2氣氛下向2-(4-羥基-4-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（100 mg，0.3 mmol）和HATU（150 mg，0.4 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液中添加DIPEA（230 µL，1.3 mmol），接著添加咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（53 mg，0.4 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌19 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）直接純化，並且藉由手性製備型HPLC（Chiralpak ®ID，5 μm 20 mm × 250 mm；在12 min內與DCM/MeOH（1 : 1）中的20% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min）純化，以得到均作為黃色固體的2-(4-羥基-4-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（11 mg，8%，100% ee）和2-(4-羥基-4-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（7 mg，5%，99.9% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.61 - 8.67 (m, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.14 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 4.34 - 4.48 (m, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.12 (s, 3H), 2.18 - 2.35 (m, 2H), 1.82 - 1.94 (m, 2H), 1.62 - 1.76 (m, 2H), 1.44 - 1.6 (m, 2H), 1.17 (s, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.60 - 8.68 (m, 2H), 8.57 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.21 (ddd, 1H), 4.44 - 4.56 (m, 2H), 4.11 (s, 3H), 1.98 - 2.12 (m, 4H), 1.53 - 1.73 (m, 4H), 1.23 (s, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 50 ）和異構物 2 （實例 51 ）
外消旋 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 52 ）和異構物 2 （實例 53 ）
3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image320
在室溫下向5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（5.0 g，22.0 mmol）和環己-2-烯-1-酮（16.9 g，176.2 mmol）在1,4-二㗁𠮿（1 L）中的溶液中添加K 2CO 3（9.13 g，66.06 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫，用水（1 L）淬滅並且用EtOAc（500 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮為黃色油狀物。將油狀物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 60% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（1.6 g，22%）。m/z (ESI+), [M+H] += 323/324。
3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image322
在−40°C下在N 2氣氛下在10 min時間段內向3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（2.0 g，6.2 mmol）在THF（30 mL）中的溶液中逐滴添加在THF中的1 M溴化甲基鎂（24.8 mL，24.8 mmol）。將所得的混合物在−40°C下攪拌12 h。將反應物用水（10 mL）淬滅並且用EtOAc（20 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.5% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（2.0 g，95%）。m/z (ESI+), [M+H] += 339/341。
外消旋 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯和 外消旋 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image324
將3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（2.0 g，5.9 mmol）、DIPEA（5.1 mL，29.5 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（648 mg，0.9 mmol）在MeOH（30 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌12 h。使反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的30% - 60% EtOAc洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XSelect CSH C18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在10 min內在水中20% − 45% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）純化，以得到均作為黃色固體的 外消旋-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（550 mg，29%）和 外消旋-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（800 mg，43%）。m/z (ESI+), [M+H] += 319。
外消旋 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image326
在室溫下向 外消旋-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（500 mg，1.6 mmol）在MeOH（2 mL）中的溶液中添加LiOH（113 mg，4.7 mmol）在水（2 mL）中的溶液。將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用0.1 N HCl酸化至pH 4 - 5，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的40% - 60% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為無色固體的 外消旋-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（400 mg，84%）。m/z (ESI+), [M+H] += 305。
rel -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 50 ）和異構物 2 （實例 51 ）
Figure 02_image328
向 外消旋-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（200 mg，0.7 mmol）、HATU（300 mg，0.8 mmol）和DIPEA（574 µL，3.3 mmol）在DMF（3 mL）中的溶液中添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （141 mg，1.1 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌6 h。將反應混合物用水（5 mL）淬滅，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的10%至60% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，接著藉由製備型手性HPLC（Chiralpak IA，2×25 cm，5 µm；流動相A：Hex/DCM（2 : 1，0.5% 2 N NH 3-MeOH），流動相B：MeOH；流速：20 mL/min；梯度：在12 min內50% B），以得到 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺異構物1（44 mg，16%，100% ee）和 rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺異構物2（42 mg，15%，98.4% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.52 - 8.58 (m, 2H), 8.47 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.68 (s, 1H), 4.51 - 4.61 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 1.93 - 2.12 (m, 3H), 1.72 - 1.87 (m, 2H), 1.58 - 1.67 (m, 1H), 1.38 - 1.55 (m, 2H), 1.24 (s, 3H)。m/z (ESI+), [M+H] += 421。
外消旋 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image330
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（800 mg，2.5 mmol）在MeOH（6 mL）中的溶液中添加LiOH（181 mg，7.5 mmol）在水（6 mL）中的溶液。將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用0.1 N HCl酸化至pH 4 - 5，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的30% - 60% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為無色固體的 外消旋-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（600 mg，78%）。MS ESI, m/z = 305 [M+H] +。
外消旋 -2-((1 S,3 S)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 52 ）和異構物 2 （實例 53 ）
Figure 02_image332
將 外消旋-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲酸（200 mg，0.7 mmol）、HATU（300 mg，0.8 mmol）和DIPEA（574 µL，3.3 mmol）在THF（15 mL）中的溶液在N 2氣氛下攪拌1 h，接著添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （132 mg，1.0 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌4 h。將反應物用水（5 mL）淬滅，並且將形成的沈澱物藉由過濾收集，以得到作為黃色固體的 外消旋-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：製備型手性HPLC（Chiralpak ®ID-2，5 μm 20 mm × 250 mm；在25 min內與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH溶液）等度；17 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（40 mg，19%，99.8% ee）和 rel-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（48 mg，23%，99.8% ee）。 異構物 1： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.51 - 8.59 (m, 2H), 8.46 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.64 - 4.83 (m, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.05 (s, 3H), 1.87 - 2.13 (m, 3H), 1.71 - 1.87 (m, 2H), 1.55 - 1.71 (m, 2H), 1.27 - 1.43 (m, 1H), 1.20 (s, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.52 - 8.57 (m, 2H), 8.46 (d, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.68 - 4.79 (m, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.04 - 2.12 (m, 1H), 1.98 - 2.04 (m, 1H), 1.92 (t, 1H), 1.70 - 1.87 (m, 2H), 1.55 - 1.69 (m, 2H), 1.29 - 1.40 (m, 1H), 1.20 (s, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 54 ）和異構物 2 （實例 55 ）
3-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 酮
Figure 02_image334
在室溫下向6-環丙氧基-5-碘-1 H-吲唑 ( Int I-3) （3.0 g，10.0 mmol）和環己-2-烯-1-酮（7.7 g，80.0 mmol）在1,4-二㗁𠮿（500 mL）中的溶液中添加K 2CO 3（4.1 g，30.0 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫，用水（100 mL）淬滅並用EtOAc（300 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為無色固體的3-(5-碘-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（980 mg，25%）。MS ESI, m/z = 397 [M+H] +。
3-(6- 環丙氧基 -5- 碘 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image336
在室溫下在N 2氣氛下向3-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-酮（800 mg，2.0 mmol）在THF（10 mL）中的溶液中逐滴添加在THF中的1 M溴化甲基鎂（8.1 mL，8.1 mmol）。將所得的混合物在−40°C下攪拌5 h。將反應物用水（20 mL）淬滅並且用EtOAc（50 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的30% - 60% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為無色固體的粗3-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（720 mg），其不經進一步純化即可直接使用。MS ESI, m/z = 413 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image338
將粗3-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基環己烷-1-醇（720 mg）、DIPEA（1.5 mL，8.7 mmol）和Pd(dppf)Cl 2（128 mg，0.2 mmol）在MeOH（100 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫並過濾。將濾液藉由C18快速層析法（用在PE中的0% - 60% MeCN洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®Shield RP18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中30% − 40% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）進一步純化，以得到 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（240 mg，40%）。MS ESI, m/z = 345 [M+H] +。
外消旋 -6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image340
向 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（180 mg，0.5 mmol）在MeOH（2 mL）中的溶液中添加LiOH（38 mg，1.6 mmol）在水（2 mL）中的溶液。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將混合物用0.1 N HCl酸化至pH 4 - 5。將混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.5% FA）洗脫）直接純化，以得到作為無色固體的 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（160 mg，93%）。MS ESI, m/z = 331 [M+H] +。
rel- 6- 環丙氧基 -2-((1 S,3 R)-3- 羥基 -3- 甲基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 54 ）和異構物 2 （實例 55 ）
Figure 02_image342
在N 2氣氛下向 外消旋-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（100 mg，0.3 mmol）、HATU（115 mg，0.3 mmol）和DIPEA（53 µL，0.3 mmol）在THF（10 mL）中的溶液中添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （41 mg，0.3 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h。將反應物用水（1 mL）淬滅。將混合物藉由製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA，5 μm 20 mm × 250 mm；與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）等度；50 mL/min）直接純化，以得到均作為黃色固體的 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（42 mg，42%，100% ee）和 rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（46 mg，46%，100% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.31 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.55 (dd, 1H), 5.53 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.50 - 4.64 (m, 1H), 4.19 - 4.25 (m, 1H), 1.94 - 2.11 (m, 3H), 1.72 - 1.86 (m, 2H), 1.63 (br. d, 1H), 1.37 - 1.56 (m, 2H), 1.25 (s, 3H), 1.01 - 1.11 (m, 2H), 0.93 - 1.03 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 447 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 56 ）
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image344
將(1 s,4 s)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇 ( Int IV-1) （110 mg，0.3 mmol）、TEA（115 µL，0.8 mmol）和Pd(dppf)Cl 2- CH 2Cl 2（226 mg，0.3 mmol）在MeOH（20 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌14 h。將混合物冷卻至室溫，濃縮並藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeOH（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（67 mg，73%）。MS ESI, m/z = 331 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image346
向NaOH（35 mg，0.9 mmol）在MeOH（1 mL）和水（0.5 mL）中的溶液中添加6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（57 mg，0.2 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌4 h。將反應混合物用0.1 N HCl酸化至pH約6並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為無色固體的粗6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（64 mg，86 wt.%）。MS ESI, m/z = 317 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 56 ）
Figure 02_image348
向粗6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（86 wt.%）（54 mg）、DIPEA（119 µL，0.7 mmol）、HOBt（5 mg，0.03 mmol）和HATU（97 mg，0.3 mmol）在DMF（5 mL）中的溶液中添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （46 mg，0.34 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌4 h。將反應混合物用EtOAc（50 mL）稀釋，並且用水（25 mL）洗滌。將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH C18 OBD 5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中27% − 34% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（20 mg，27%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.49 - 8.58 (m, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.52 (d, 1H), 4.42 - 4.51 (m, 1H), 4.18 - 4.27 (m, 1H), 3.85 - 3.94 (m, 1H), 2.24 - 2.39 (m, 2H), 1.82 - 1.92 (m, 2H), 1.72 - 1.82 (m, 2H), 1.58 - 1.72 (m, 2H), 1.03 - 1.13 (m, 2H), 0.94 - 1.03 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 57 ）
6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image350
將(1 r,4 r)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇 ( Int IV-2) （110 mg，0.3 mmol）、TEA（115 µL，0.8 mmol）和Pd(dppf)Cl 2- CH 2Cl 2（45 mg，0.1 mmol）在MeOH（10 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌13 h。將反應混合物冷卻至室溫並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeOH（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（80 mg，88%）。MS ESI, m/z = 331 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image352
向6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（70 mg，0.2 mmol）在MeOH（1 mL）中的溶液中添加NaOH（34 mg，0.9 mmol）在水（1 mL）中的溶液。將所得的溶液在室溫下攪拌14 h。將反應混合物用2 N HCl調節至pH 5 - 6並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（45 mg，67%）。MS ESI, m/z = 317 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 57 ）
Figure 02_image354
向6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（40 mg，0.1 mmol）、吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺的TFA鹽（62 mg，0.3 mmol）、HOBt（4 mg，0.03 mmol）和HATU（72 mg，0.2 mmol）在DMF（5 mL）中的溶液中添加DIPEA（66 µL，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將反應混合物用EtOAc（50 mL）稀釋，並且用水（50 mL）洗滌。將有機層在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH C18 OBD 5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中24% − 32% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（12 mg，22%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 10.30 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.04 (dd, 1H), 4.72 (d, 1H), 4.41 - 4.55 (m, 1H), 4.15 - 4.25 (m, 1H), 3.48 - 3.63 (m, 1H), 2.04 - 2.16 (m, 2H), 1.89 - 2.04 (m, 4H), 1.30 - 1.51 (m, 2H), 0.93 - 1.10 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 433 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 58 ）
( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙烷 -2- 基乙酸酯
Figure 02_image356
在室溫下在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（300 mg，0.7 mmol）和TEA（200 mg，2.0 mmol）在DCM（10 mL）中的溶液中添加( R)-1-氯-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（149 mg，1.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物用MeOH（2 mL）淬滅並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（320 mg，91%）。MS ESI, m/z = 534 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 58 ）
Figure 02_image358
在室溫下在N 2氣氛下向( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（300 mg，0.6 mmol）在MeOH（10 mL）/水（5 mL）中的溶液中添加NaOH（68 mg，1.7 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在8 min內在水中12% − 42% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）直接純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（265 mg，96%，100% ee）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (5 : 6旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.53 - 8.59 (m, 2H), 8.48/8.47 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.22/7.20 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.93/4.74 (d, 1H) (旋轉異構物), 4.34 - 4.58/3.93 - 4.02 (m, 3H) (旋轉異構物), 4.06 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.62 - 2.27 (m, 8H), 1.22/1.18 (d, 3H) (旋轉異構物)。MS ESI, m/z = 492 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 59 ）
( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙烷 -2- 基乙酸酯
Figure 02_image360
在室溫下在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（130 mg，0.3 mmol）和TEA（87 mg，0.9 mmol）在DCM（8 mL）中的溶液中添加( S)-1-氯-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（64 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應混合物用MeOH（2 mL）淬滅，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（152 mg，100%）。MS ESI, m/z = 534 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 59 ）
Figure 02_image362
在室溫下在N 2氣氛下向( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（145 mg，0.3 mmol）在MeOH（5 mL）/水（2.5 mL）中的溶液中添加NaOH（22 mg，0.5 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用水（10 mL）稀釋，並且將形成的沈澱物藉由過濾收集。將固體依次用乙腈（2 mL）和水（5 mL）洗滌，並且然後真空乾燥以得到作為黃色固體的2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（118 mg，88%，100% ee）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.52 - 8.59 (m, 2H), 8.48/8.47 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.22/7.20 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.93/4.75 (d, 1H) (旋轉異構物), 4.45 - 4.57/3.93 - 4.03 (m, 2H) (旋轉異構物), 4.34 - 4.45 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.62 - 2.28 (m, 8H), 1.22/1.18 (d, 3H) (旋轉異構物)。MS ESI, m/z = 492 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 60 ）和異構物 2 （實例 61 ）
6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 62 ）和異構物 2 （實例 63 ）
6- 甲氧基 -2-((7 R,8 R)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image364
將5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑 ( Int IV-4) （380 mg，1.0 mmol）、Pd(dppf)Cl 2- CH 2Cl 2（163 mg，0.2 mmol）和TEA（695 µL，5.0 mmol）在MeOH（10 mL）中的混合物在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌20 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為無色固體的6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（350 mg，97%）。MS ESI, m/z = 361 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image366
向6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（340 mg，0.9 mmol）在THF（5 mL）/水（5 mL）中的溶液中添加HCl水溶液（12 N）（2.0 mL，24.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物用飽和NaHCO 3水溶液中和，用EtOAc（200 mL）稀釋並用水（100 mL × 2）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為無色固體的6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（290 mg，97%）。MS ESI, m/z = 317 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image368
向6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（285 mg，0.9 mmol）在MeOH（5 mL）/水（2.5 mL）中的懸浮液中添加NaOH（144 mg，3.6 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物用2 N HCl酸化至pH 5，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為無色膠狀物的6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（270 mg，99%）。MS ESI, m/z = 303 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image370
在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸（265 mg，0.9 mmol）和HATU（367 mg，1.0 mmol）在DMF（5 mL）中的溶液中添加DIPEA（612 µL，3.5 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌15 min，接著添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （176 mg，1.3 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2 h，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（230 mg，63%）。MS ESI, m/z = 419 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R)-2- 甲基 -4-( 甲基胺基 ) 環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image372
向6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（105 mg，0.3 mmol）和甲胺（在MeOH中31 wt.%）（126 mg，1.3 mmol）在DCE（5 mL）中的溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉（106 mg，0.5 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物在減壓下濃縮，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（100 mg，92%）。MS ESI, m/z = 434 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 R,2 R,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 60 ）和異構物 2 （實例 61 ）
Figure 02_image374
向6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（95 mg，0.2 mmol）和TEA（122 µL，0.9 mmol）在DCM（2 mL）中的溶液中添加乙酸酐（45 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將混合物在減壓下濃縮，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IH，5 μm 20 mm × 250 mm；在7.5 min內與MeOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min），以得到均作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺異構物1（20 mg，19%，99.9% ee）和6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺異構物2（68 mg，65%，100% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (2 : 3旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.56/8.53 (s, 1H)(旋轉異構物), 8.54 (dd, 1H), 8.47/8.46 (s, 1H)(旋轉異構物), 7.24/7.21 (s, 1H)(旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.45 - 4.59/3.8 - 3.93 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.08 - 4.18 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.86/2.73 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.97 - 2.38 (m, 6H), 1.43 - 1.89 (m, 4H), 0.53 - 0.65 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.63/4.02 (br. s, 1H) (旋轉異構物), 4.38 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.65 - 2.93 (m, 3H), 1.26 - 2.39 (m, 10H), 0.94 - 1.21 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image376
將5-溴-6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑 ( Int IV-5) （1.0 g，2.6 mmol）、Pd(dppf)Cl 2（384 mg，0.5 mmol）和DIPEA（2.3 mL，13.1 mmol）在MeOH（60 mL）中的混合物在CO氣氛下在15 atm下並在110°C下攪拌15 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（860 mg，91%）。MS ESI, m/z = 361 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image378
在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（850 mg，2.4 mmol）在MeOH（6 mL）中的溶液中添加LiOH（169 mg，7.1 mmol）在水（6 mL）中的溶液。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應混合物用0.1 N HCl酸化至pH 6，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的含有32%的6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲酸的粗6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸（720 mg）。MS ESI, m/z = 347 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((7 S,8 S)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image380
在室溫下在N 2氣氛下向粗6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲酸（710 mg）和DIPEA（1.4 mL，8.2 mmol）在DMF（10 mL）中的溶液中添加HATU（935 mg，2.5 mmol），接著添加吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺（412 mg，3.1 mmol）。將反應物在室溫下攪拌2 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（640 mg，68%）。MS ESI, m/z = 463 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4- 側氧基環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image382
向6-甲氧基-2-((7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（630 mg，1.4 mmol）在THF（8 mL）中的懸浮液中添加2.4 N HCl（10.0 mL，24.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用飽和NaHCO 3水溶液中和，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為無色固體的6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（570 mg，100%）。MS ESI, m/z = 419 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S)-2- 甲基 -4-( 甲基胺基 ) 環己基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image384
向6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，0.5 mmol）和甲胺（在MeOH中30 wt.%）（495 mg，4.8 mmol）在DCE（6 mL）中的溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉（203 mg，1.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物在減壓下濃縮，並且然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（170 mg，82%）。MS ESI, m/z = 434 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 S,2 S,4 R*)-2- 甲基 -4-( N- 甲基乙醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 62 ）和異構物 2 （實例 63 ）
Figure 02_image386
向6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（160 mg，0.4 mmol）和TEA（257 µL，1.9 mmol）在DCM（5 mL）中的溶液中添加乙酸酐（94 mg，0.9 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將混合物在減壓下濃縮，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IH，5 μm 20 mm × 250 mm；在14 min內與MeOH中的80% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min），以得到均作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（17 mg，10%，99.4% ee）和6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（59 mg，34%，99.9% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (3 : 4旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.56/8.53 (s, 1H) (旋轉異構物), 8.54 (dd, 1H), 8.47/8.46 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.24/7.21 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.45 - 4.56/3.82 - 3.93 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.08 - 4.18 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.86/2.73 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.94 - 2.39 (m, 6H), 1.44 - 1.87 (m, 4H), 0.54 - 0.65 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (2 : 3旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.63/4.02 (br. s, 1H) (旋轉異構物), 4.38 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.61 - 2.93 (m, 3H), 1.25 - 2.43 (m, 10H), 0.95 - 1.17 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。
rel -2-((6 S,7 R)- 2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 64 ）和異構物 2 （實例 65 ）
7- 羥基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image388
在0°C下在N 2氣氛下在5 min時間段內將NaBH 4（388 mg，10.3 mmol）分批添加到6-甲基-7-側氧基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-4) （1.3 g，5.1 mmol）在MeOH（20 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h。將反應物用水（5 mL）淬滅並直接濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的30%至40% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.2 g，92%）（順式/反式1 : 2）。
6- 甲基 -7-( 甲基磺醯氧基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image390
在0°C下在N 2氣氛下，在5 min的時間段內，將MsCl（1.6 g，14.1 mmol）逐滴添加到TEA（2.6 mL，18.8 mmol）和7-羥基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.2 g，4.7 mmol）（順式/反式1 : 2）在DCM（25 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用水（50 mL）淬滅並且用DCM（100 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且蒸發溶劑，以得到作為黃色油狀物的粗6-甲基-7-(甲基磺醯氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.5 g）（主要是反式異構物）。產物不經進一步純化即可用於下一步驟。
外消旋 -(6 S,7 R)-7-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image392
在室溫下將KOH（1.2 g，22.0 mmol）緩慢添加到粗6-甲基-7-(甲基磺醯氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（1.5 g）（主要是反式異構物）和5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（1.0 g，4.4 mmol）在DMF（20 mL）中的溶液中。將反應混合物在100°C下攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫，用水（5 mL）淬滅並且將水層用EtOAc（100 mL × 3）萃取。將合併的有機層用鹽水（100 mL × 2）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並且蒸發溶劑。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的20%至30% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色固體的粗 外消旋-(6 S,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（400 mg）。m/z (ESI+) [M− tBu] += 408/410。
外消旋 -5- 溴 -6- 甲氧基 -2-((6 S,7 R)-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-2 H- 吲唑
Figure 02_image394
在0°C下在N 2氣氛下將TFA（4 mL）逐滴添加到粗 外消旋-(6 S,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（400 mg）在DCM（20 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。在減壓下除去溶劑，以得到 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((6 S,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑的粗TFA鹽（500 mg），其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 364/366 [M+H] +。
外消旋 -1-((6 S,7 R)-7-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 乙酮
Figure 02_image396
在0°C下在N 2氣氛下將乙醯氯（223 µL，3.1 mmol）逐滴添加到 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((6 S,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑的粗TFA鹽（500 mg）和TEA（1.5 mL，10.5 mmol）在DCM（10 mL）中的溶液中。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應物用水（5 mL）淬滅並且將水層用DCM（50 mL × 3）萃取。將合併的有機層用鹽水（50 mL × 2）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的50% - 100% MeCN（0.05% HCOOH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-1-((6 S,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙酮（190 mg，45%）。m/z (ESI+) [M+H] += 406, 408。
rel -2-((6 S,7 R)- 2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 64 ）和異構物 2 （實例 65 ）
Figure 02_image398
將Pd(OAc) 2（9 mg，0.04 mmol）添加到dppp（41 mg，0.1 mmol）、TEA（123 µL，0.9 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（174 mg，1.3 mmol）和 外消旋-1-((6 S,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙-1-酮（180 mg，0.4 mmol)在MeCN（10 mL）中的溶液中。將所得的混合物在90°C下在CO氣氛下在15 atm下攪拌過夜。將粗產物冷卻至室溫，並且藉由C18快速層析法（用在水中的50%至55% MeCN（0.1% HCOOH）洗脫）直接純化。然後將獲得的材料藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內20% B至47% B）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：手性製備型SFC（CelluCoat柱，250 × 30 mm，5 µm，流動相為在120巴和40 C下的在CO 2中的30% MeOH，並且流速為100 mL/min），以得到 rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（37 mg，21%，100% ee）和 rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（34 mg，19%，100% ee）。兩種異構物作為膠狀物收集。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) (3 : 4旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.55 - 8.61 (m, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.30/7.29 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.22 (dd, 1H), 4.65 - 4.74 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.83 - 3.93 (m, 2H), 3.55 - 3.65 (m, 2H), 1.93 - 2.41 (m, 5H), 1.77 (br. s, 3H), 1.67 - 1.76 (m, 2H), 0.57/0.56 (d, 3H) (旋轉異構物)。m/z (ESI+) [M+H] += 488。
rel -2-((6 R,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 66 ）和異構物 2 （實例 67 ）
外消旋 -(6 R,7 R)-7-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image400
在0°C下在N 2氣氛下將KOH（1.4 g，25.0 mmol）添加到 外消旋-(6 R,7 S)-6-甲基-7-((甲磺醯基)氧基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯 ( Int III-5) （3.0 g，9.0 mmol）和5-溴-6-甲氧基-1 H-吲唑（1.9 g，8.2 mmol）在THF（50 mL）中的溶液中。將所得的混合物在80°C下攪拌12 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水（100 mL）稀釋並用EtOAc（2 × 75 mL）洗滌。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並濃縮以得到黃色油狀物。將油狀物藉由C18快速層析法（用在水中的50%至90% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-(6 R,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（0.5 g，13%）。m/z (ESI+) [M+H] += 464/466。
外消旋 -(6 R,7 R)-7-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image402
將咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（255 mg，1.9 mmol）、dppp（82 mg，0.2 mmol）、Pd(OAc) 2（44 mg，0.2 mmol）、TEA（588 mg，5.8 mmol）和 外消旋-(6 R,7 R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（450 mg，1.0 mmol）在MeCN（8 mL）中的溶液在CO氣氛下在15 atm下並在90°C下攪拌12 h，並且然後使其冷卻至室溫。在減壓下除去溶劑，並且將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的40%至90% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的粗 外消旋-(6 R,7 R)-7-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（450 mg）。m/z (ESI+) [M+H] += 546。
外消旋 - N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((6 R,7 R)-6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image404
向粗 外消旋-(6 R,7 R)-7-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸三級丁酯（450 mg）中添加在DCM（4 mL）中的TFA（2 mL，26.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。在減壓下除去溶劑，以得到作為黃色油狀物的 外消旋- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((6 R,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（350 mg）。產物不經進一步純化即可使用。m/z (ESI+) [M+H] += 446。
rel -2-((6 R,7 R)-2- 乙醯基 -6- 甲基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 66 ）和異構物 2 （實例 67 ）
Figure 02_image406
在室溫下將 外消旋- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((6 R,7 R)-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的粗TFA鹽（350 mg）添加到在DCM（8 mL）中的TEA（195 mg，1.9 mmol）中。將混合物在室溫下攪拌5 min，並且添加乙酸酐（99 mg，1.0 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌1 h。將混合物用水（5 mL）淬滅並且藉由C18快速層析法（用在水中的20%至100% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離異構物：手性製備型HPLC（CHIRALPAK IF，2×25 cm，5 µm；流動相A：MTBE（2 mM NH 3-MeOH），流動相B：MeOH；流速：17 mL/min；在18 min內等度50% B），以得到 rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（95 mg，30%，100% ee）和異構物2，其在藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，30×150 mm，5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），流動相B：MeCN；流速：60 mL/min；梯度：在7 min內20% B至40% B）進行第二次純化之後產生 rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（66 mg，21%，99% ee）。兩種異構物作為黃色固體收集。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.580/8.577 (s, 1H) (旋轉異構物), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.06 - 4.17 (m, 1H), 3.93 - 4.01/3.65 - 3.73 (m, 2H) (旋轉異構物), 3.80/3.53 (s, 2H) (旋轉異構物), 2.06 - 2.19 (m, 1H), 1.90 - 2.05 (m, 4H), 1.80/1.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.60 - 1.73 (m, 1H), 1.38 - 1.49 (m, 1H), 0.60/0.58 (d, 3H) (旋轉異構物)。m/z (ESI+) [M+H] += 488。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.63 (d, 1H), 8.55 - 8.61 (m, 2H), 8.15 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.05 - 4.17 (m, 1H), 3.92 - 4.00/3.65 - 3.72 (m, 2H) (旋轉異構物), 3.79/3.52 (s, 2H) (旋轉異構物), 2.05 - 2.20 (m, 1H), 1.89 - 2.05 (m, 4H), 1.79/1.76 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.61 - 1.72 (m, 1H), 1.42 (t, 1H), 0.59/0.57 (s, 3H) (旋轉異構物)。m/z (ESI+) [M+H] += 488。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((5 s,8 s)-2- 甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 68 ）
Figure 02_image408
將甲基二苯基矽烷羧酸（95 mg，0.4 mmol）和KF（23 mg，0.4 mmol）添加到乾燥且N 2沖洗的COware氣體反應器的室A中。將在脫氣的無水MeCN（1 mL）中的(5 s,8 s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮 ( Int IV-6) （35 mg，0.3 mmol）、dppp（14 mg，0.03 mmol）、Pd(OAc) 2（7 mg，0.03 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（80 mg，0.6 mmol）和DIPEA（138 µL，0.8 mmol）添加到室B中。然後，將DMSO（350 µL）添加到室A中並且將室B在85°C下攪拌過夜。使反應混合物冷卻至室溫。將室B中的反應物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，在減壓下濃縮，溶解在DCM（30 mL）中並載入在5 g Isolute ®SCX2交換筒上。將筒用DCM/MeOH（1 : 1；100 mL）洗滌，然後用DCM / 4 N NH 3-MeOH溶液（1 : 1；100 mL）洗脫，並且然後用2 N NH 3-MeOH溶液（100 mL）洗脫，以得到深黃色固體。將固體藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 2.5% 2 N NH 3-MeOH溶液洗脫）純化以得到黃色固體。將固體在室溫下懸浮在MeCN（2 mL）中並攪拌48 h。然後將懸浮液過濾並用冰冷的MeCN（500 µL × 2）洗滌，以得到作為淡黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（36 mg，58%）。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 11.25 (s, 1H), 8.83 (d, 1H), 8.35 - 8.44 (m, 2H), 8.10 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.02 (dd, 1H), 4.36 - 4.46 (m, 1H), 4.19 (s, 3H), 3.38 (s, 2H), 2.89 (s, 3H), 2.33 (s, 2H), 2.20 - 2.28 (m, 2H), 2.06 - 2.17 (m, 2H), 1.97 (d, 2H), 1.68 (td, 2H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-((5 r,8 r)-2- 甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 69 ）
Figure 02_image410
將甲基二苯基矽烷羧酸（88 mg，0.4 mmol）和KF（21 mg，0.4 mmol）添加到乾燥且N 2沖洗的COware氣體反應器的室A中。將在脫氣的無水MeCN（1 mL）中的(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮 ( Int IV-7) （49 mg，0.1 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（27 mg，0.2 mmol）、dppp（13 mg，0.03 mmol）、Pd(OAc) 2（7 mg，0.03 mmol）和DIPEA（127 µL，0.7 mmol）添加到室B中。然後，將DMSO（200 µL）添加到室A中並且將室B在85°C下攪拌過夜。使反應混合物冷卻至室溫。將室B中的反應物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，在減壓下濃縮，溶解在DCM（30 mL）中並載入在5 g Isolute ®SCX2交換筒上。將載入的SCX2筒用DCM/MeOH（1 : 1；100 mL）洗滌，然後用DCM / 4 N NH 3-MeOH溶液（1 : 1；100 mL）洗脫，並且然後用2 N NH 3-MeOH溶液（100 mL）洗脫，以得到深黃色固體。將固體藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 2.5% 2 N NH 3-MeOH溶液洗脫）純化以得到黃色固體，將其在室溫下懸浮在MeCN（3 mL）中並攪拌48 h。將懸浮液過濾並用冰冷的MeCN（500 µL × 2）洗滌以得到固體。將固體溶解在15 mL煮沸的MeCN中，並且在減壓下在45°C下緩慢濃縮至5 mL以得到懸浮液，將其保持在室溫下過夜。將懸浮液過濾並且將殘餘物用冰冷的MeCN（500 µL × 2）洗滌，以得到作為淡黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(( 5r ,8r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（46 mg，90%）。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 11.28 (s, 1H), 8.8 - 8.84 (m, 1H), 8.47 (dd, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.40 (tt, 1H), 4.19 (s, 3H), 3.20 (s, 2H), 2.87 (t, 3H), 2.44 (s, 2H), 2.22 - 2.30 (m, 2H), 2.04 - 2.15 (m, 2H), 1.91 - 1.98 (m, 2H), 1.65 (td, 2H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。
rel -2-((5 R,7 R,8 R)-2,7- 二甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺或 rel -2-((5 R,7 S,8 S)-2,7- 二甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 70 ）、異構物 2 （實例 71 ）、異構物 3 （實例 72 ）和異構物 4 （實例 73 ）
7- 甲基 -8- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯
Figure 02_image412
在−78°C下在N 2氣氛下在20 min時間段內向8-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯（15.0 g，59.2 mmol）在THF（150 mL）中的溶液中逐滴添加在THF中的1 M LiHMDS（118.5 mL，118.5 mmol）。將所得的混合物在−78°C下攪拌2 h。隨後，緩慢添加碘甲烷（7.4 mL，118.5 mmol）。使反應混合物升溫至室溫並攪拌15 h。將反應物用飽和NH 4Cl水溶液（300 mL）淬滅並用EtOAc（250 mL × 3）萃取。將合併的有機層用鹽水（30 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的5% - 20% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色半固體的7-甲基-8-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯（6.6 g，42%）。MS ESI, m/z = 212 [M− tBu] +。
外消旋 - (5 R,7 R,8 S)-7,8- 二羥基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯和 外消旋 - (5 R,7 S,8 R)-7,8- 二羥基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯的混合物
Figure 02_image414
在0°C下在N 2氣氛下在1 min時間段內向7-甲基-8-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯（5.0 g，18.7 mmol）在THF（70 mL）中的溶液中添加在THF中的2 M三二級丁基硼氫化鋰（18.7 mL，37.4 mmol）。將所得的混合物在0°C下攪拌3 h。將反應混合物用丙酮（20 mL）淬滅並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的25% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為淡黃色油狀物的 外消旋 -(5 R,7 R,8 S)-7,8-二羥基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 R)-7,8-二羥基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（4.8 g，95%）。MS ESI, m/z = 214 [M− tBu] +。
外消旋 - (5 R,7 R,8 R)-8-(1,3- 二側氧基異吲哚啉 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯和 外消旋 - (5 R,7 S,8 S)-8-(1,3- 二側氧基異吲哚啉 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯的混合物
Figure 02_image416
在0°C下在N 2氣氛下向 外消旋 -(5 R,7 R,8 S)-7,8-二羥基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 R)-7,8-二羥基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（3.4 g，12.6 mmol）、三苯基膦（6.6 g，25.2 mmol）和異吲哚啉-1,3-二酮（2.8 g，18.9 mmol）在THF（60 mL）中的溶液中添加DIAD（4.9 mL，25.2 mmol）。將所得的混合物在45°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫，倒入鹽水（200 mL）中並用EtOAc（250 mL）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用DCM洗脫）純化，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）進一步純化，以得到作為淡黃色固體的 外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（1.9 g，37%）。MS ESI, m/z = 384 [M− tBu+CH 3CN] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8- 胺基 -7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8- 胺基 -7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯的混合物
Figure 02_image418
向 外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（1.9 g，4.6 mmol）在EtOH（30 mL）中的溶液中添加水合肼（80%在水中）（2.9 g，46.4 mmol）。將所得的混合物在50°C下攪拌3 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用DCM洗脫）純化，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）進一步純化以得到標題化合物的甲酸鹽。將甲酸鹽溶解在水（50 mL）中，用飽和NaHCO 3水溶液鹼化至pH 9並且然後用EtOAc（100 mL×2）和氯仿（100 mL）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮，以得到作為淡黃色油狀物的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-胺基-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-胺基-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（380 mg，31%）。MS ESI, m/z = 269 [M+H] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 甲酸三級丁酯的混合物
Figure 02_image420
向 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-胺基-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-胺基-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（360 mg，1.3 mmol）在 i-PrOH（15 mL）中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （384 mg，1.5 mmol）。將所得的混合物在50°C下攪拌2 h，然後冷卻至30°C，接著添加三正丁基膦（814 mg，4.0 mmol）。將反應混合物在80°C下在N 2氣氛下攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（440 mg，69%）。MS ESI, m/z = 478/480 [M+H] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-7- 甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷的混合物
Figure 02_image422
向 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-2-甲酸三級丁酯的混合物（410 mg，0.9 mmol）在二㗁𠮿（4 mL）中的溶液中添加在二㗁𠮿中的4 N HCl（2.0 mL，8.0 mmol），並且將所得的溶液在室溫下攪拌20 h。將反應混合物在減壓下濃縮，以得到 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷的HCl鹽的粗混合物（354 mg），其不經進一步純化即可直接使用。MS ESI, m/z = 378/380 [M+H] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2,7- 二甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2,7- 二甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷的混合物
Figure 02_image424
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷的HCl鹽（354 mg，0.9 mmol）、乙酸（51 mg，0.9 mmol）和甲醛水溶液（40 wt.%）（674 mg，8.3 mmol）在MeOH（10 mL）中的粗混合物中添加三乙醯氧基硼氫化鈉（362 mg，1.7 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeOH（2% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為淡黃色固體的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷的混合物（335 mg，100%）。MS ESI, m/z = 392/394 [M+H] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2,7- 二甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮和 外消旋 -(5 R,7 S,8 S)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2,7- 二甲基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -3- 酮的混合物
Figure 02_image426
向 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷的混合物（310 mg，0.8 mmol）在THF（25 mL）中的溶液中添加碘溶液（1.5 g，5.9 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h，接著添加在水（10 mL）中的碳酸氫鈉（664 mg，7.9 mmol）。然後，將反應混合物在室溫下再攪拌2 h。將反應物用飽和Na 2SO 3水溶液淬滅，直至顏色變為淺黃色，並且然後用DCM（200 mL）萃取。將有機層用鹽水（100 mL）洗滌，經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（Waters XSelect CSH氟-苯基OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在12 min內在水中32% − 42% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）純化，以得到作為淡黃色固體的含有40%的8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-1-酮的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮）的混合物（120 mg），其不經進一步分離即可使用。
rel -2-((5 R,7 R,8 R)-2,7- 二甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺或 rel -2-((5 R,7 S,8 S)-2,7- 二甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 70 ）、異構物 2 （實例 71 ）、異構物 3 （實例 72 ）和異構物 4 （實例 73 ）
Figure 02_image428
將含有40%的8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-1-酮的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮和 外消旋-(5 R,7 S,8 S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2,7-二甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮）的混合物（115 mg）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（80 mg，0.6 mmol）、Pd(OAc) 2（14 mg，0.06 mmol）、dppp（41 mg，0.1 mmol）和DIPEA（183 mg，1.4 mmol）在MeCN（15 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.05% FA）洗脫）純化，以得到含有40%的2-(2,7-二甲基-1-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的 rel-2-((5 R,7 R,8 R)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺和 rel-2-((5 R,7 S,8 S)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1 - 4的混合物。將所需的產物與副產物分離並且藉由三個連續手性製備型HPLC運行（第一運行：Chiralpak ®IA，5 μm 20 mm × 250 mm；與EtOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min；第二和第三運行：Chiralpak ®ID，5 μm 20 mm × 250 mm；在16 min內與MeOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min）分離，以得到作為淡黃色固體的以下四種異構物：異構物1（7 mg，5%）、異構物2（7 mg，5%）、異構物3（5 mg，3%）和異構物4（5 mg，3%）。異構物1和2彼此係鏡像異構物，針對兩種異構物獲得的LCMS/ 1H NMR係相同的；異構物3和和異構物4彼此係鏡像異構物，並且針對兩種異構物獲得的LCMS/ 1H NMR係相同的。 異構物 1/ 異構物 2 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.06 - 4.17 (m, 4H), 3.14 (s, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.34 (s, 2H), 2.04 - 2.27 (m, 2H), 1.87 - 1.98 (m, 1H), 1.72 - 1.83 (m, 2H), 1.54 - 1.66 (m, 1H), 1.34 (t, 1H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。 異構物 3/ 異構物 4 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.07 - 4.17 (m, 4H), 3.38 (s, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.06 - 2.28 (m, 4H), 1.86 - 1.96 (m, 1H), 1.76 - 1.86 (m, 2H), 1.51 - 1.63 (m, 1H), 1.33 (t, 1H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -3- 氧雜 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 74 ）和異構物 2 （實例 75 ）
(4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ) 甲醇
Figure 02_image430
在室溫下在N 2氣氛下向(4-胺基環己基)甲醇（2.0 g，15.5 mmol）在 i-PrOH（20 mL）中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （4.0 g，15.5 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌1 h，然後冷卻至室溫，接著添加三正丁基膦（15.7 g，77.4 mmol）。將混合物在80°C下攪拌15 h。將反應混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的20% - 50% EtOAc洗脫）純化以產生黃色油狀物。將油狀物隨後從EtOAc（2 mL）/PE（12 ml）中結晶，以得到作為無色固體的(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲醇（900 mg，17%）。將來自結晶的濾液在減壓下濃縮，以得到作為固體的(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲醇（5.0 g，47 wt.%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
(4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ) 甲基胺基甲酸酯
Figure 02_image432
在0°C下向粗(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲醇（47 wt.%）（4.9 g）在DCM（20 mL）中的溶液中添加2,2,2-三氯乙醯基異氰酸酯（1.5 g，8.2 mmol）。將所得的溶液升溫至室溫並攪拌2 h。隨後，添加MeOH和K 2CO 3（94 mg，0.7 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌15 h。將反應物用水（20 mL）淬滅並且用DCM（20 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物從EtOAc/戊烷（3/1）（20 mL）中結晶，以得到作為無色固體的(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲基胺基甲酸酯（2.5 g，96%）。MS ESI, m/z = 382/384 [M+H] +。
8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-3- 氧雜 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image434
在室溫下在N 2氣氛下在3 min時間段內向氧化鎂（728 mg，18.1 mmol）、[乙醯氧基(苯基)-λ 3-碘苯]乙酸酯（3.5 g，11.0 mmol）和(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲基胺基甲酸酯（1.5 g，3.9 mmol）在DCM（150 mL）中的溶液中添加乙酸銠(II)（347 mg，0.8 mmol）。將所得的溶液在40°C攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫，倒入水（100 mL）中並用DCM（200 mL × 2）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XSelect CSH C18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在8 min內在水中34% − 35% MeCN（0.05% TFA）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為淡黃色固體的8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（340 mg，23%）。MS ESI, m/z = 380/382 [M+H] +。
8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基 -3- 氧雜 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image436
在室溫下在N 2氣氛下將碘甲烷（134 mg，1.0 mmol）逐滴添加到NaH（60 wt.%）（19 mg，0.5 mmol）和8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（120 mg，0.3 mmol）在DMF（6 mL）中的懸浮液中。將所得的混合物在室溫下攪拌15 h。將反應物用飽和NH 4Cl水溶液（5 mL）淬滅，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為紅色固體的8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（70 mg，56%）。MS ESI, m/z = 380/382 [M+H] +。
N -( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -3- 氧雜 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 74 ）和異構物 2 （實例 75 ）
Figure 02_image438
將8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（124 mg，0.3 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（121 mg，0.9 mmol）、Pd(OAc) 2（14 mg，0.06 mmol）、dppp（41 mg，0.1 mmol）和TEA（438 µL，3.2 mmol）在MeCN（10 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 90% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在8 min內在水中30% − 60% MeOH（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離固體：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IF，5 μm 20 mm × 250 mm；在26 min內與EtOH中的50% MTBE（0.5% 2 M NH 3-MeOH）等度；13.0 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-1-甲基-2-側氧基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（7 mg，4%，100% ee）和 rel- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-1-甲基-2-側氧基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（1 mg，1%，98.9% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.65 - 4.73 (m, 1H), 4.23 (s, 2H), 4.13 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.51 - 2.58 (m, 2H), 1.93 - 2.15 (m, 4H), 1.53 (d, 2H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.62 - 8.66 (m, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.25 - 7.29 (m, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.48 - 4.61 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.12 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.18 (s, 2H), 1.95 - 2.09 (m, 4H), 1.66 - 1.76 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 476 [M+H] +。
rel -2-((1 R,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 76 ），異構物 2 （實例 77 ）
rel -2-((1 S,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 78 ）和異構物 2 （實例 79 ）
外消旋 -(3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image440
將HCl水溶液（12 N）（10.0 mL，120.0 mmol）添加到THF（10 mL）和水（10 mL）中，接著添加 外消旋-(7 R,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇 ( Int III-11) （3.1 g，18.0 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將反應混合物的pH用30 wt.% NH 4OH水溶液調節至pH 5 - 6，然後將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己烷-1-酮（2.1 g，91%）。MS ESI, m/z = 170 [M+CH 3CN+H] +。
外消旋 -(1 S,2 R,4 R)-4-( 苄基胺基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇和 外消旋 -(1 S,2 R,4 S)-4-( 苄基胺基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇的混合物
Figure 02_image442
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-(3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己烷-1-酮（2.0 g，15.6 mmol）在DCE（40 mL）中的溶液中添加苯甲胺（2.0 g，18.7 mmol）。將所得的溶液攪拌1 h，接著添加三乙醯氧基硼氫化鈉（9.9 g，46.8 mmol）。將混合物在室溫下再攪拌3 h。將反應物用水（15 mL）淬滅並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為棕色固體的 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇的混合物（2.10 g，61%）。
外消旋 -(1 S,2 R,4 R)-4- 胺基 -2- 甲基環己烷 -1- 醇和 外消旋 -(1 S,2 R,4 S)-4- 胺基 -2- 甲基環己烷 -1- 醇的混合物
Figure 02_image444
在N 2氣氛下向 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇的混合物（2.0 g，9.1 mmol）在MeOH（30 mL）中的溶液中添加在碳上的Pd(OH) 2（20 wt.%）（640 mg，0.9 mmol）。將所得的懸浮液在室溫下在氫氣下在2 atm下攪拌12 h。將反應混合物通過矽膠過濾，並且將矽膠餅用MeOH（30 mL）洗滌。將合併的MeOH溶液在減壓下濃縮，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇的粗混合物（1.20 g，90 wt.%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。
外消旋 -(1 S,2 R,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇和 外消旋 -(1 S,2 R,4 S)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇的混合物
Figure 02_image446
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （2.2 g，8.4 mmol）在 i-PrOH（20 mL）中的溶液中添加 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇的粗混合物（90 wt.%）（1.0 g）。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h，然後冷卻至室溫，接著添加三正丁基膦（5.6 g，27.9 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 50% MeOH（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇的粗混合物（5.0 g，45 wt.%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
外消旋 -2-((1 R,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺和 外消旋 -2-((1 S,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺的混合物
Figure 02_image448
將 外消旋-(1 S,2 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 S,2 R,4 S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇的粗混合物（45 wt.%）（5.0 g）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（978 mg，7.3 mmol）、Pd(OAc) 2（291 mg，1.3 mmol）、dppp（1.1 g，2.7 mmol）和TEA（2.8 mL，19.9 mmol）在MeCN（80 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在10 atm下並在100°C下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 100% EtOAc洗脫）純化，並且藉由製備型SFC（DAICEL DCpak ®P4VP，5 μm 20 mm × 250 mm；與在CO 2（35 oC，100巴）中的35% MeOH（2 mM NH 3-MeOH）等度）進一步純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺和 外消旋-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的混合物（600 mg，22%）。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
外消旋 -2-((1 R,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺和 外消旋 -2-((1 S,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺
Figure 02_image450
將 外消旋 -2-((1R,3R,4S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺和 外消旋-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的混合物（600 mg，1.4 mmol）藉由手性製備型SFC（Chiralpak ®IH，5 µm 30 × 250 mm；與在CO 2（35 oC，100巴）中的32% MeOH（2 mM NH 3-MeOH）等度；70 mL/min）分離，以得到均作為黃色固體的 外消旋 -2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，33%）和 外消旋-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（220 mg，37%）。
rel -2-((1 R,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 76 ）和異構物 2 （實例 77 ）
Figure 02_image452
將 外消旋-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，0.5 mmol）進一步分離並且藉由手性製備型HPLC（Chiralpak ®IA，5 μm 20 mm × 250 mm；在23 min內與EtOH中的50%己烷/DCM（75/25，0.5% 2 M NH 3-MeOH）等度；18.0 mL/min）和手性製備型HPLC（對於異構物1：Waters XSelect CSH C18 OBD，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中22% − 26% MeCN（0.1% FA）；60 mL/min）純化，以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（40 mg，20%，100% ee）和 rel-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（40 mg，20%，100% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.58 (br. s, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.36 - 4.62 (m, 2H), 4.12 (s, 3H), 3.66 (s, 1H), 2.11 - 2.27 (m, 1H), 2.00 (q, 1H), 1.80 - 1.93 (m, 2H), 1.56 - 1.80 (m, 3H), 0.96 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel -2-((1 S,3 R,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 78 ）和異構物 2 （實例 79 ）
Figure 02_image454
將 外消旋-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（200 mg，0.5 mmol）藉由手性製備型HPLC（Chiralpak ®ID-2，5 μm 20 mm × 250 mm；在19 min內與MeOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min）進一步分離，以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（80 mg，40%，98.2% ee）和 rel-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（80 mg，40%，97.9% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 4.68 (tt, 1H), 4.60 (br. s, 1H), 4.11 (s, 3H), 3.71 (dt, 1H), 1.92 - 2.20 (m, 5H), 1.57 - 1.76 (m, 2H), 1.00 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.61 (br. s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.63 - 4.73 (m, 1H), 4.60 (d, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.67 - 3.76 (m, 1H), 1.92 - 2.21 (m, 5H), 1.58 - 1.75 (m, 2H), 1.00 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel -2-((1 S,3 S,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 80 ）和異構物 2 （實例 81 ）
rel -2-((1 R,3 S,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 82 ）和異構物 2 （實例 83 ）
外消旋 -(3 S,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image456
將HCl水溶液（12 N）（8.0 mL，96.0 mmol）添加到THF（8 mL）和水（8 mL）中，接著添加 外消旋-(7 S,8 S)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇 ( Int III-12) （2.0 g，11.6 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌12 h。將混合物的pH用30 wt.% NH 4OH水溶液調節至pH 5 - 6，然後將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己烷-1-酮（1.3 g，89%）。MS ESI, m/z = 211 [M+2CH 3CN+H] +。
外消旋 -(1 S,2 S,4 S)-4-( 苄基胺基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇和 外消旋 -(1 S,2 S,4 R)-4-( 苄基胺基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image458
在室溫下在N 2氣氛下向 外消旋-(3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己烷-1-酮（1.3 g，10.1 mmol）在DCE（50 mL）中的溶液中添加苯甲胺（1.3 g，12.2 mmol）。將所得的溶液攪拌1 h，接著添加三乙醯氧基硼氫化鈉（6.6 g，30.4 mmol）。將反應混合物在室溫下再攪拌3 h。將反應物用水（10 mL）淬滅並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的30% - 60% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到均作為黃色固體的 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇（200 mg，9%）和 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇（700 mg，32%）。MS ESI, m/z = 220 [M+H] +。
外消旋 -(1 S,2 S,4 S)-4- 胺基 -2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image460
在N 2氣氛下向 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇（180 mg，0.8 mmol）在MeOH（20 mL）中的溶液中添加在碳上的Pd(OH) 2（20 wt.%）（175 mg，0.2 mmol）。將所得的懸浮液在室溫下在氫氣下在1~2 atm下攪拌12 h。將反應混合物通過矽膠過濾，並且將矽膠餅用MeOH（100 mL）洗滌。將合併的MeOH溶液在減壓下濃縮，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇（100 mg，94%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。MS ESI, m/z = 130 [M+H] +。
外消旋 -(1 S,2 S,4 S)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image462
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （242 mg，0.9 mmol）在 i-PrOH（20 mL）中的溶液中添加 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇（100 mg，0.8 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌1 h，然後冷卻至室溫，接著添加三正丁基膦（626 mg，3.1 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80%乙腈（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（200 mg，76%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
rel -2-((1 S,3 S,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 80 ）和異構物 2 （實例 81 ）
Figure 02_image464
將 外消旋-(1 S,2 S,4 S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（200 mg，0.3 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（40 mg，0.3 mmol）、Pd(OAc) 2（14 mg，0.06 mmol）、dppp（41 mg，0.1 mmol）和TEA（164 µL，1.2 mmol）在MeCN（50 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在10 atm下並在100°C下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80%乙腈（0.05% FA）洗脫）純化，以得到 外消旋-2-((1 S,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下進一步分離此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IA，5 μm 20 mm × 250 mm；在11 min內與DCM/MeOH（1 : 1）中的10% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min），以得到 rel-2-((1 S,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（16 mg，13%，100% ee）和 rel-2-((1 S,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（16 mg，13%，100% ee）；兩者均為黃色固體。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.54 - 8.59 (m, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.66 (d, 1H), 4.46 - 4.59 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.02 - 3.14 (m, 1H), 2.02 - 2.16 (m, 2H), 1.96 (td, 2H), 1.70 (q, 1H), 1.37 - 1.58 (m, 2H), 1.01 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
外消旋 -(1 S,2 S,4 R)-4- 胺基 -2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image466
在N 2氣氛下向 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-(苄基胺基)-2-甲基環己烷-1-醇（600 mg，2.7 mmol）在MeOH（20 mL）中的溶液中添加在碳上的Pd(OH) 2（20 wt.%）（582 mg，0.6 mmol）。將所得的懸浮液在室溫下在氫氣下在1~2 atm下攪拌12 h。將反應混合物通過矽膠過濾，並且將矽膠餅用MeOH（100 mL）洗滌。將合併的MeOH溶液在減壓下濃縮，以得到作為黃色油狀物的粗 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇（400 mg），其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 130 [M+H] +。
外消旋 -(1 S,2 S,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image468
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （740 mg，2.9 mmol）在 i-PrOH（30 mL）中的溶液中添加 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-胺基-2-甲基環己烷-1-醇（380 mg，2.6 mmol）。將所得的混合物在80°C下攪拌1 h，然後冷卻至室溫，接著添加三正丁基膦（1.6 g，7.8 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80%乙腈（0.05% FA）洗脫）純化，以得到作為棕色油狀物的 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（600 mg，68%），其不經進一步純化即可用於下一步驟。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
rel -2-((1 R,3 S,4 S)-4- 羥基 -3- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺異構物 1 （實例 82 ）和異構物 2 （實例 83 ）
Figure 02_image470
將 外消旋-(1 S,2 S,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（580 mg，1.7 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（257 mg，1.9 mmol）、Pd(OAc) 2（67 mg，0.3 mmol）、dppp（288 mg，0.7 mmol）和TEA（994 µL，7.1 mmol）在MeCN（55 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在10 atm下並在100°C下攪拌12 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80%乙腈（0.05% FA）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 19 × 250 mm；洗脫梯度為在11 min內在水中22% − 32% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；25 mL/min）進一步純化，以得到 外消旋-2-((1 R,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下進一步純化此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IE，5 μm 20 mm × 250 mm；在27 min內與DCM/MeOH（1 : 1）中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20.0 mL/min）和手性製備型HPLC（對於異構物1：Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中18% − 48% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 R,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（13 mg，1%，98.5% ee）和 rel-2-((1 R,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（19 mg，3%，99.6% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.61 - 4.70 (m, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.13 (s, 3H), 2.44 - 2.49 (m, 1H), 2.35 - 2.48 (m, 1H), 1.84 - 1.94 (m, 1H), 1.72 - 1.82 (m, 2H), 1.63 - 1.70 (m, 1H), 1.47 - 1.56 (m, 1H), 1.01 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.59 - 4.70 (m, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.13 (s, 3H), 3.30 - 3.37 (m, 1H), 2.45 - 2.50 (m, 1H), 2.35 - 2.48 (m, 1H), 1.83 - 1.95 (m, 1H), 1.71 - 1.83 (m, 2H), 1.61 - 1.71 (m, 1H), 1.47 - 1.56 (m, 1H), 1.01 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
6- 環丙氧基 -2-((1 r,4 r)-4- 羥基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 84 ）
Figure 02_image472
將(1 r,4 r)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇 ( Int IV-2) （80 mg，0.2 mmol）和Pd(OAc) 2（5 mg，0.02 mmol）添加到在MeCN（10 mL）中的TEA（61 mg，0.6 mmol）、dppp（17 mg，0.04 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（54 mg，0.4 mmol），並且將所得的混合物在15 atm下在CO氣氛下在90°C下攪拌。在12 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% FA）洗脫），接著進行製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在10 min內25% B至30% B；流速：60 mL/min），以得到作為黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（17 mg，20%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ10.91 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.13 (dd, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.19 (dd, 1H), 4.75 (d, 1H), 4.38 - 4.55 (m, 1H), 4.16 - 4.28 (m, 1H), 3.48 - 3.62 (m, 1H), 1.84 - 2.23 (m, 6H), 1.30 - 1.53 (m, 2H), 0.94 - 1.18 (m, 4H)。m/z (ESI+), [M+H] += 433。
6- 環丙氧基 -2-((1 s,4 s)-4- 羥基環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 85 ）
Figure 02_image474
向在MeCN（5 mL）中的粗(1 s,4 s)-4-(6-環丙氧基-5-碘-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-醇 ( Int IV-1) （70 mg，0.2 mmol）、dppp（7 mg，0.02 mmol）、TEA（98 μL，0.7 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（54 mg，0.4 mmol）中添加Pd(OAc) 2（5 mg，0.02 mmol）中，並且將所得的混合物在15 atm下在CO氣氛下在90°C下攪拌。在12 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且真空除去溶劑。將所得的殘餘物使用C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（7 mg，9%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ10.94 (s, 1H), 8.65 (dd, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.43 - 4.59 (m, 2H), 4.20 - 4.29 (m, 1H), 3.86 - 3.93 (m, 1H), 2.22 - 2.39 (m, 2H), 1.72 - 1.95 (m, 4H), 1.57 - 1.72 (m, 2H), 1.07 - 1.15 (m, 2H), 0.97 - 1.07 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 433。
6- 甲氧基 -2-((5 r,8 r)-2- 甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 86 ）
Figure 02_image476
將甲基二苯基矽烷羧酸（84 mg，0.4 mmol）和KF（20 mg，0.4 mmol）添加到乾燥且N 2沖洗的COware氣體反應器的室A中。將在脫氣的無水MeCN（1.5 mL）中的(5 r,8 r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮 ( Int IV-7) （47 mg，0.1 mmol）、吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （35 mg，0.2 mmol ）、dppp（12 mg，0.03 mmol）、Pd(OAc) 2（7 mg，0.03 mmol）和DIPEA（122 µL，0.7 mmol）添加到室B中。然後，將DMSO（200 µL）添加到室A中並且將室B在85°C下攪拌過夜。使反應混合物冷卻至室溫。將室B中的反應物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，在減壓下濃縮，溶解在DCM（30 mL）中並載入在5 g Isolute ®SCX2交換筒上。將筒用DCM/MeOH（1 : 1；100 mL）洗滌，然後用4 N NH 3-MeOH溶液（100 mL）洗脫，以得到深棕色固體。將棕色固體藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 2.5% 2 N NH 3-MeOH溶液洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH C18 OBD，5 μm 19 mm × 150 mm；用在水/MeCN中的10% − 31% MeCN（95/5；0.2% 26 wt.% NH 4OH）洗脫，在20 min內；流速：19 mL/min）進一步純化以得到黃色固體。將此固體溶解在DCM中並載入在5 g Isolute ®SCX2交換筒上，並且將載入筒用水（20 mL）和MeOH（50 mL）洗滌以除去副產物，並且然後用在MeOH/DCM（1 : 1；100 mL）中的20 mL 2 N NH 3溶液洗脫，以得到6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（14 mg，25%）。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 10.46 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.40 (dd, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.79 (dd, 1H), 4.39 (tt, 1H), 4.16 (s, 3H), 3.20 (s, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.44 (s, 2H), 2.22 - 2.32 (m, 2H), 2.04 - 2.15 (m, 2H), 1.89 - 1.98 (m, 2H), 1.61 - 1.69 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((5 s,8 s)-2- 甲基 -3- 側氧基 -2- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 87 ）
Figure 02_image478
將甲基二苯基矽烷羧酸（95 mg，0.4 mmol）和KF（23 mg，0.4 mmol）添加到乾燥且N 2沖洗的COware氣體反應器的室A中。將在脫氣的無水MeCN（1 mL）中的(5 s,8 s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-3-酮 ( Int IV-6) （52 mg，0.13 mmol）、吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺 ( Int I-5) （39 mg，0.3 mmol）、dppp（14 mg，0.03 mmol）、Pd(OAc) 2（7 mg，0.03 mmol）和DIPEA（138 µL，0.8 mmol）添加到室B中。然後，將DMSO（350 µL）添加到室A中並且將室B在85°C下攪拌過夜。使反應混合物冷卻至室溫。將室B中的反應物用飽和NaHCO 3水溶液淬滅，在減壓下濃縮，溶解在DCM（30 mL）中並載入在5 g Isolute ®SCX2交換筒上。將筒用DCM/MeOH（1 : 1；100 mL）洗滌，然後用4 N NH 3-MeOH溶液（100 mL）洗脫，以得到深棕色固體。將固體藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 2.5% 2 N NH 3-MeOH溶液洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（Waters XBridge BEH C18 OBD，5 μm 19 mm × 150 mm；用在水/MeCN中的5% − 35% MeCN（95/5；0.2% 26 wt.% NH 4OH水溶液）洗脫，pH 10，在20 min內；流速：19 mL/min）進一步純化，以得到6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（3 mg，5%）。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 10.45 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.80 (d, 1H), 8.61 (dd, 1H), 8.41 (dd, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.80 (dd, 1H), 4.41 (tt, 1H), 4.17 (s, 3H), 3.39 (s, 2H), 2.88 (d, 3H), 2.3 - 2.35 (m, 2H), 2.2 - 2.27 (m, 2H), 2.14 (qd, 2H), 1.94 - 1.99 (m, 2H), 1.67 (td, 2H)。MS ESI, m/z = 474 [M+H] +。
2-((1 R,2 R,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 88 ）和 2-((1 R,2 R,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 89 ）
Figure 02_image480
在室溫下在N 2氣氛下向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-2) （180 mg，0.4 mmol）在MeOH（10 mL）中的溶液中添加NaBH 4（33 mg，0.9 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應溶液藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 60% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為棕色固體的2-((1 R,2 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：製備型手性HPLC（Chiralpak ®ID 5 μm 20 mm × 250 mm；在19 min內與MeOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；40 mL/min），以得到均作為黃色固體的第一洗脫異構物2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（15 mg，8%）和第二洗脫異構物2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（105 mg，50%）。 (1 R,2 R,4 S)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.07 (s, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.23 (dd, 1H), 4.58 (d, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.03 - 4.15 (m, 1H), 3.93 - 4.01 (m, 1H), 2.25 - 2.46 (m, 2H), 1.55 - 1.90 (m, 4H), 1.29 - 1.42 (m, 1H), 0.54 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 (1 R,2 R,4 R)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.16 (dd, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.74 (d, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.02 - 4.11 (m, 1H), 3.54 - 3.71 (m, 1H), 2.10 - 2.26 (m, 1H), 1.86 - 2.10 (m, 4H), 1.28 - 1.48 (m, 1H), 1.09 - 1.26 (m, 1H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
2-((1 S,2 S,4 R)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 90 ）和 2-((1 S,2 S,4 S)-4- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 91 ）
Figure 02_image482
在室溫下在N 2氣氛下向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S)-2-甲基-4-側氧基環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-1) （180 mg，0.4 mmol）在MeOH（10 mL）中的溶液中添加NaBH 4（33 mg，0.9 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h。將反應溶液藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 70% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為棕色固體的2-((1 S,2 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA 5 μm 20 mm × 250 mm；與MeOH中的50% MTBE（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的第一洗脫異構物2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（23 mg，13%）和第二洗脫異構物2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（120 mg，67%）。 (1 S,2 S,4 R)- 異構物： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.06 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.57 (d, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.02 - 4.12 (m, 1H), 3.96 (s, 1H), 2.30 - 2.58 (m, 2H), 1.77 - 1.89 (m, 2H), 1.68 - 1.77 (m, 1H), 1.55 - 1.68 (m, 1H), 1.30 - 1.40 (m, 1H), 0.54 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 (1 S,2 S,4 S)- 異構物： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.03 - 4.11 (m, 1H), 3.54 - 3.68 (m, 1H), 2.20 - 2.30 (m, 1H), 1.85 - 2.10 (m, 4H), 1.29 - 1.46 (m, 1H), 1.08 - 1.25 (m, 1H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
2-((1 R,2 R,4 S)-4- 羥基 -2,4- 二甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 92 ）和 2-((1 R,2 R,4 R)-4- 羥基 -2,4- 二甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 93 ）
外消旋 -(7 R,8 R)- N- 苄基 -7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 胺
Figure 02_image484
在N 2氣氛下向7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-酮（3.0 g，17.6 mmol）和苯甲胺（2.8 g，26.4 mmol）在甲苯（50 mL）中的溶液中添加4-甲基苯磺酸一水合物（335 mg，1.8 mmol）。將所得的溶液在120°C下攪拌15 h。隨後，使混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮，以得到粗亞胺中間體。在−60°C下在N 2氣氛下在5 min時間段內向亞胺在MeOH（60 mL）中的溶液中分批添加NaBH 4（0.6 g，15.8 mmol）。將所得的混合物在−60°C下攪拌1 h，然後緩慢升溫至室溫並攪拌3 h。如上所述平行製備五個批次的粗產物溶液併合並，之後進行純化。將反應混合物在減壓下濃縮，溶解在EtOAc（500 mL）中並且用鹽水（300 mL × 3）洗滌。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4HCO 3）洗脫）純化，以得到作為橙色油狀物的 外消旋-(7 R,8 R)- N-苄基-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-胺（8.1 g，35%）。MS ESI, m/z = 262 [M+H] +。
外消旋 -(7 R,8 R)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 胺
Figure 02_image486
在N 2氣氛下向 外消旋-(7 R,8 R)- N-苄基-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-胺（8.1 g，31.0 mmol）在MeOH（100 mL）中的溶液中添加在碳上的Pd(OH) 2（20 wt.%）（872 mg，1.2 mmol）。將所得的懸浮液在室溫下在氫氣下在2 atm下攪拌15 h。將反應混合物經矽藻土過濾，並且將矽藻土餅用MeOH（150 mL）洗滌。將合併的MeOH溶液在減壓下濃縮，以得到作為棕色油狀物的粗 外消旋-(7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-胺（5.0 g），其不經進一步純化即可使用。
5- 溴 -6- 甲氧基 -2-((7 R,8 R)-7- 甲基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )-2 H- 吲唑
Figure 02_image488
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛 ( Int I-1) （10.6 g，40.9 mmol）在 i-PrOH（200 mL）中的溶液中添加粗 外消旋-(7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-胺（7.0 g）。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h，然後冷卻至室溫並且接著添加三正丁基膦（41.4 g，204.4 mmol）。將反應混合物在80°C下攪拌24 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 10% MeOH的洗脫）純化，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）進一步純化，以得到作為黃色固體的 外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑。藉由以下純化此材料：手性製備型SFC（Chiralpak ®IG，5 µm 50 × 250 mm；與在CO 2（35 oC，100巴）中的50% MeOH（0.1% 2 N NH 3-MeOH）等度），以得到作為灰色固體的5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（3.0 g，19%，100% ee）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.25 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.13 (td, 1H), 3.87 - 3.99 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 2.26 - 2.43 (m, 1H), 2.19 (td, 1H), 1.75 - 1.96 (m, 3H), 1.68 (td, 1H), 1.46 (t, 1H), 0.52 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 381/383 [M+H] +。
(3 R,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-3- 甲基環己烷 -1- 酮
Figure 02_image490
在室溫下在N 2氣氛下向5-溴-6-甲氧基-2-((7 R,8 R)-7-甲基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑（185 mg，0.5 mmol）在THF（5 mL）中的溶液中添加4 N HCl水溶液（5 mL，20.0 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌12 h。將反應混合物用NH 4OH水溶液中和至pH約7並且然後在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 50% EtOAc洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己烷-1-酮（160 mg，98%）。MS ESI, m/z = 337/339 [M+H] +。
(3 R,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1,3- 二甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image492
在0°C下在N 2氣氛下在2分鐘的時間段內向(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己烷-1-酮（120 mg，0.4 mmol）在THF（3 mL）中的溶液中添加在THF中的3 N溴化甲基鎂（178 µL，0.5 mmol）。將所得的混合物在0°C下攪拌5 h。將反應物用水（1 mL）淬滅並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN洗脫）純化，以得到作為黃色油狀物的(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,3-二甲基環己烷-1-醇（80 mg，64%）。MS ESI, m/z = 353/355 [M+H] +。
2-((1 R,2 R,4 S)-4- 羥基 -2,4- 二甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 92 ）和 2-((1 R,2 R,4 R)-4- 羥基 -2,4- 二甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 93 ）
Figure 02_image494
將(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,3-二甲基環己烷-1-醇（80 mg，0.2 mmol）、咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（92 mg，0.7 mmol）、Pd(OAc) 2（10 mg，0.05 mmol）、dppp（37 mg，0.09 mmol）和TEA（158 µL，1.1 mmol）在MeCN（5 mL）中的懸浮液在CO氣氛下在15 atm下並在90°C下攪拌10 h。使混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN洗脫）純化，以得到作為無色液體的2-((1 R,2 R)-4-羥基-2,4-二甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下分離此材料：製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH C18 OBD，5 μm 30 mm × 150 mm；用在7 min內在水中的23% − 43% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）洗脫；流速：60 mL/min），以得到均作為淡黃色固體的2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2,4-二甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（7 mg，7%）和2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2,4-二甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（20 mg，20%）。 (1 R,2 R,4 S)- 異構物： 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 11.04 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.02 - 4.10 (m, 1H), 2.12 - 2.25 (m, 1H), 1.99 - 2.12 (m, 1H), 1.85 - 1.97 (m, 1H), 1.53 - 1.77 (m, 3H), 1.32 - 1.43 (m, 1H), 1.30 (s, 3H), 0.55 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 435 [M+H] +。 (1 R,2 R,4 R)- 異構物： 1H NMR (500 MHz, CDCl 3) δ 11.22 (s, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.35 - 8.4 (m, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.96 (dd, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.19 (s, 3H), 3.94 (td, 1H), 2.53 - 2.63 (m, 1H), 2.48 (qd, 1H), 2.00 (m, 1H), 1.81 - 1.94 (m, 2H), 1.63 (m, 1H), 1.35 - 1.38 (m, 1H), 1.34 (s, 3H), 0.70 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 435 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 94 ）
( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙烷 -2- 基乙酸酯
Figure 02_image496
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( IntV-3) 之HCl鹽（140 mg，0.3 mmol）和TEA（171 µL，1.2 mmol）在DCM（7 mL）中的溶液中添加( S)-1-氯-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（69 mg，0.5 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h，然後用水（10 mL）淬滅並且用DCM（20 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% TFA）洗脫）直接純化，以得到作為無色固體的( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（52 mg，32%）。MS ESI, m/z = 534 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 94 ）
Figure 02_image498
向( S)-1-(((1 r,4 S)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（41 mg，0.1 mmol）在THF（1.5 mL）/水（1.5 mL）中的溶液中添加LiOH（13 mg，0.5 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h，然後用水（10 mL）淬滅並且用EtOAc（20 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（Waters XSelect CSH氟-苯基OBD，5 µm 19 × 250 mm；洗脫梯度為在10 min內在水中30% − 45% MeCN（0.1% FA）；25 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺和2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的混合物（85 : 15）（6 mg，15%）。此步驟中的消旋化作用的原因係未知的。MS ESI, m/z = 492 [M+H] +。所需產物的進一步分離和純化在以下實例95中描述。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2- 羥基 -N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 95 ）
( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基 )-1- 側氧基丙烷 -2- 基乙酸酯
Figure 02_image500
向 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-3) 之粗HCl鹽（130 mg，0.3 mmol）和TEA（159 µL，1.1 mmol）在DCM（7 mL）中的溶液中添加( R)-1-氯-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（64 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌2 h，然後用水（10 mL）淬滅並且用DCM（20 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（92 mg，61%）。MS ESI, m/z = 534 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2- 羥基 - N- 甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 95 ）
Figure 02_image502
向( R)-1-(((1 r,4 R)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（75 mg，0.1 mmol）在THF（2.5 mL）/水（2.5 mL）中的溶液中添加LiOH（24 mg，1.0 mmol）。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h，然後用水（15 mL）淬滅並且用EtOAc（25 mL × 3）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS 5µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中11% − 44% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基- N-甲基丙烷醯胺基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺和2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基- N-甲基丙烷醯胺基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺的混合物（85 : 15）（27 mg，39%）。此步驟中的消旋化作用的原因係未知的。將此混合物與實例94中獲得的產物混合物合併並且藉由製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA，5 μm 20 mm × 250 mm；在20 min內與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH3-MeOH）等度；20.0 mL/min）分離，以得到均作為黃色固體的2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基- N-甲基丙烷醯胺基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（4 mg，100% ee）和2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基- N-甲基丙烷醯胺基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（13 mg，99.8% ee）。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（ 實例 94 ）： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (4 : 5旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.56 - 8.67 (m, 3H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.18 - 7.30 (m, 2H), 4.94/4.76 (d, 1H) (旋轉異構物), 4.33 - 4.59/3.92 - 4.03 (m, 3H) (旋轉異構物), 4.12 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.60 - 2.27 (m, 8H), 1.22/1.18 (d, 3H) (旋轉異構物)。MS ESI, m/z = 492 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（ 實例 95 ）： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (4 : 5旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.52 - 8.68 (m, 3H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.17 - 7.31 (m, 2H), 4.81 (br. s, 1H), 4.34 - 4.59/3.91 - 4.05 (m, 3H) (旋轉異構物), 4.12 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.60 - 2.28 (m, 8H), 1.22/1.18 (d, 3H) (旋轉異構物)。MS ESI, m/z = 492 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-((1 r,4 r)-4-( N- 甲基環丙烷甲醯胺基 ) 環己基 )- N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 96 ）
Figure 02_image504
在室溫下在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（50 mg，0.1 mmol）和TEA（50 µL，0.4 mmol）在DCM（2 mL）中的溶液中添加環丙烷甲醯氯（25 mg，0.2 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h，然後用MeOH（0.5 mL）淬滅並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基環丙烷甲醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（29 mg，54%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (2 : 3旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.52 - 8.59 (m, 2H), 8.48/8.47 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.23/7.20 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 4.46 - 4.58 (m, 1H), 4.36 - 4.46/4.19 - 4.30 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.06 (s, 3H), 3.04/2.77 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.72 - 2.28 (m, 8H), 1.58 - 1.71 (m, 1H), 0.60 - 0.84 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-((1 r,3 R)-3- 羥基 -N- 甲基環丁烷 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 97 ）
Figure 02_image506
在室溫下在N 2氣氛下向(1 r,3 r)-3-羥基環丁烷-1-甲酸（78 mg，0.7 mmol）和DIPEA（253 µL，1.5 mmol）在DMF（6 mL）中的溶液中添加HATU（220 mg，0.6 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌10 min，接著添加6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（220 mg，0.48 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌2 h，然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS 5µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中10% − 41% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-((1 r,3 R)-3-羥基 -N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（182 mg，73%，100% ee）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (4 : 5旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.52 - 8.59 (m, 2H), 8.48/8.47 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.23/7.21 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 5.08/5.06 (d, 1H) (旋轉異構物), 4.44 - 4.54 (m, 1H), 4.36 - 4.44/3.54 - 3.64 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.08 - 4.18 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.23 - 3.30/3.10 - 3.21 (m, 1H) (旋轉異構物), 2.75/2.74 (s, 3H) (旋轉異構物), 2.29 - 2.42 (m, 2H), 2.15 - 2.25 (m, 2H), 1.96 - 2.14 (m, 4H), 1.6 - 1.94 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 518 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-((1 s,3 S)-3- 羥基 -N- 甲基環丁烷 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 98 ）
Figure 02_image508
在室溫下在N 2氣氛下向(1 s,3 s)-3-羥基環丁烷-1-甲酸（78 mg，0.7 mmol）和DIPEA（253 µL，1.5 mmol）在DMF（6 mL）中的溶液中添加HATU（220 mg，0.6 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌10 min，接著添加6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（220 mg，0.5 mmol）。將反應混合物在rt下攪拌2 h，然後藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 80% MeCN（0.1% FA）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS 5µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中10% − 41% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-((1 s,3 S)-3-羥基- N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（178 mg，71%，100% ee）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.51 - 8.60 (m, 2H), 8.48/8.47 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.22/7.20 (s, 1H) (旋轉異構物), 7.05 (dd, 1H), 5.02 - 5.09 (m, 1H), 4.43 - 4.55 (m, 1H), 4.34 - 4.43/3.67 - 3.79 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.06 (s, 3H), 3.92 - 4.04 (m, 1H), 2.76 - 2.88 (m, 2H), 2.65 - 2.76/2.30 - 2.43 (m, 4H) (旋轉異構物), 2.15 - 2.26 (m, 2H), 1.59 - 2.14 (m, 8H)。MS ESI, m/z = 518 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4-(2- 羥基 - N,2- 二甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 99 ）
1-(((1 r,4 r)-4-(6- 甲氧基 -5-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基胺基甲醯基 )-2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基 )-2- 甲基 -1- 側氧基丙烷 -2- 基乙酸酯
Figure 02_image510
在室溫下在N 2氣氛下向6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-4) 之HCl鹽（230 mg，0.5 mmol）和TEA（153 mg，1.5 mmol）在DCM（10 mL）中的溶液中添加1-氯-2-甲基-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（125 mg，0.8 mmol）。將所得的混合物在室溫下攪拌1 h，然後用MeOH（2 mL）淬滅並且在減壓下濃縮以獲得固體。將固體用水（25 mL）洗滌並且然後用PE/EtOAc（10 : 1）（44 mL）洗滌，以得到作為黃色固體的1-(((1 r,4 r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（265 mg，96%），其不經進一步純化即可使用。MS ESI, m/z = 548 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4-(2- 羥基 - N,2- 二甲基丙烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 99 ）
Figure 02_image512
在室溫下在N 2氣氛下向1-(((1 r,4 r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基胺基甲醯基)-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基)-2-甲基-1-側氧基丙烷-2-基乙酸酯（250 mg，0.5 mmol）在MeOH（10 mL）/水（5 mL）中的懸浮液中添加NaOH（55 mg，1.4 mmol），接著添加DCM（1 mL）以溶解不可溶的固體。將所得的溶液在室溫下攪拌2 h，然後在減壓下濃縮，再溶解在MeOH/DMF（2 mL/3 mL）中並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中30% − 45% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 r,4 r)-4-(2-羥基- N,2-二甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（215 mg，93%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (2 : 3旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 5.43/5.32 (s, 1H) (旋轉異構物), 4.69 - 4.93/4.28 - 4.43 (m, 1H) (旋轉異構物), 4.43 - 4.58 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.16/2.71 (s, 3H) (旋轉異構物), 2.14 - 2.27 (m, 2H), 1.96 - 2.11 (m, 2H), 1.59 - 1.95 (m, 4H), 1.35 (s, 6H)。MS ESI, m/z = 506 [M+H] +。
2-(2- 乙醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6-((1 r,3 r)-3- 甲氧基環丁氧基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 100 ）
Figure 02_image514
將2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羥基 -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-5) （20 mg，0.04 mmol）、(1 s,3 s)-3-甲氧基環丁烷-1-醇（45 mg，0.4 mmol）、三苯基膦（23 mg，0.1 mmol）和DIAD（42 µL，0.2 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3 mL）中的混合物在微波中在140°C下攪拌。在2 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的0%至50% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫），接著進行製備型HPLC（XBridge Prep C18 OBD，30×150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在7 min內22% B至42% B；流速：60 mL/min），以得到作為黃色固體的2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 r,3 r)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（8 mg，34%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ11.13 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.62 (dd, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.21 (dd, 1H), 6.97/6.99 (s, 1H) (旋轉異構物), 5.14 - 5.27 (m, 1H), 4.42 - 4.56 (m, 1H), 4.20 - 4.35 (m, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.23 (s, 3H), 2.71 - 2.83 (m, 2H), 2.57 - 2.68 (m, 2H), 1.86 - 2.10 (m, 6H), 1.76/1.78 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.59 - 1.74 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 544。
2-(2- 乙醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6-((1 s,3 s)-3- 甲氧基環丁氧基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 101 ）
Figure 02_image516
將2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羥基- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 ( Int V-5) （20 mg，0.04 mmol）、(1 r,3 r)-3-甲氧基環丁烷-1-醇（18 mg，0.2 mmol）、三苯基膦（46 mg，0.2 mmol）和DIAD（34 µL，0.2 mmol）在1,4-二㗁𠮿（3 mL）中的混合物在微波中在140°C下攪拌。在1 h之後，使反應混合物冷卻至室溫並且直接經受C18快速層析法（用在水中的0%至40% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫），接著進行製備型HPLC（XBridge Shield RP18 OBD，30×150 mm，5 µm；流動相A：水（0.05% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在8 min內28% B至36% B；流速：60 mL/min）和製備型手性HPLC（CHIRAL ART纖維素-SB S-5 µm，2×25 cm，5 μm；流動相A：MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）；流動相B：EtOH；梯度：等度30% B，持續27 min；流速：18 mL/min），以得到作為黃色固體的2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 s,3 s)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（10 mg，42%，100% ee）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (1 : 1旋轉異構物混合物) δ11.18 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.57 (dd, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 7.08/7.09 (s, 1H) (旋轉異構物), 4.74 - 4.84 (m, 1H), 4.40 - 4.58 (m, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.80 (s, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.02 - 3.17 (m, 2H), 2.34 - 2.45 (m, 2H), 1.85 - 2.15 (m, 6H), 1.76/1.78 (s, 3H) (旋轉異構物), 1.62 - 1.74 (m, 2H)。m/z (ESI+), [M+H] += 544。
2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 102 ）
2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3- 三唑 -2- 基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 103 ）
(1 s,4 s)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基甲烷磺酸酯
Figure 02_image518
在0°C下在N 2下在2 min時間段內將MsCl（288 µL，3.7 mmol）逐滴添加到2-((1s,4 s)-4-羥基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（ 實例 7）（300 mg，0.7 mmol）和TEA（617 µL，4.4 mmol）在二氯甲烷（50 mL）中的溶液中。將所得的溶液在30°C下攪拌5 h。將反應混合物用水（20 mL）淬滅並且用DCM（25 mL × 2）萃取。將合併的有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法（用在DCM中的0% - 10% MeOH洗脫）純化，以得到作為黃色固體的(1 s,4 s)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基甲烷磺酸酯（260 mg，73%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.61 - 8.70 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.95 - 5.04 (m, 1H), 4.55 - 4.69 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.24 (s, 3H), 1.98 - 2.34 (m, 6H), 1.80 - 1.98 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 485 [M+H] +。
2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 102 ）
Figure 02_image520
2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3- 三唑 -2- 基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 103 ）
Figure 02_image522
向1 H-1,2,3-三唑（285 mg，4.1 mmol）和Cs 2CO 3（403 mg，1.2 mmol）在DMF（10 mL）中的懸浮液中添加(1 s,4 s)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基甲烷磺酸酯（200 mg，0.4 mmol）。將所得的混合物在90°C下攪拌2 h。將反應混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1%甲酸）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度為在7 min內在水中27% − 47% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH），接著47% − 95%，再持續3分鐘；60 mL/min）進一步純化，以得到均作為黃色固體的2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3-三唑-1-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（11 mg，6%）和2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3-三唑-2-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（26 mg，14%）。2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3-三唑-1-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.62 - 8.67 (m, 2H), 8.61 (s, 1H), 8.24 (d, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.62 - 4.79 (m, 2H), 4.13 (s, 3H), 2.26 - 2.38 (m, 4H), 2.05 - 2.26 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 458 [M+H] +。2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3-三唑-2-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.81 (s, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.63 - 4.78 (m, 2H), 4.13 (s, 3H), 2.26 - 2.37 (m, 4H), 2.02 - 2.26 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 458 [M+H] +。
rel -2-((1 S,2 S,3 R)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 104 ）和異構物 2 （實例 105 ）
外消旋 -(1 R,2 S,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇
Figure 02_image524
在25°C下在N 2下將5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛（75 mg，0.29 mmol）添加到在 i-PrOH（5 mL）中的 外消旋-(1 R,2 S,3 S)-3-胺基-2-甲基環己烷-1-醇鹽酸鹽（45 mg，0.27 mmol）（根據Cao, Hai Thuong等人 Synthesis[合成] 2011, 20, 3297-3300之方法製備）和TEA（121 µL，0.87 mmol）中。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h。使反應物冷卻至室溫，然後將三正丁基膦（213 µL，0.87 mmol）添加到反應物中，並且將所得的溶液在80°C下攪拌12 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（具有0.1% FA）洗脫）純化，接著藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中33% − 53% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為無色油狀物的 外消旋-(1 R,2 S,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（130 mg，100%，73% wt.純度）。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ7.86 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.56 (q, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.87 (dt, 1H), 3.49 (d, 1H), 2.32 (s, 1H), 2.23 - 2.08 (m, 1H), 2.04 - 1.95 (m, 3H), 1.60 - 1.49 (m, 2H), 0.80 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
rel -2-((1 S,2 S,3 R)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 104 ）和異構物 2 （實例 105 ）
Figure 02_image526
將Pd(OAc) 2（9.2 mg，0.04 mmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（33.8 mg，0.08 mmol）、TEA（286 µL，2.05 mmol）、 外消旋-(1 R,2 S,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（120 mg，0.21 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（83 mg，0.62 mmol）在MeCN（8 mL）中的溶液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.1% FA）洗脫）純化，並且然後藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®BEH OBD C18，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中16% − 46% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到 外消旋-2-((1 S,2 S,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下進一步純化此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IA，2 × 25 cm，5 µm；用MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）（1 : 1）等度洗脫；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,2 S,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（10 mg，11%，98.7% ee）和 rel-2-((1 S,2 S,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（11 mg，13%，95.7% ee）。針對兩個產物獲得的 1H NMR和MS係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.04 (s, 1H), 8.69 - 8.52 (m, 3H), 8.15 (d, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.99 - 4.73 (m, 1H), 4.63 (dd, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.91 - 3.73 (m, 1H), 2.65 - 2.56 (m, 1H), 2.23 - 2.01 (m, 1H), 1.99 - 1.80 (m, 2H), 1.55 (d, 1H), 1.45 (q, 2H), 0.52 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel -2-((1 S,2 R,3 S)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 106 ）和異構物 2 （實例 107 ）
rel - 2-((1 S,2 R,3 R)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 108 ）和異構物 2 （實例 109 ）
外消旋 -(1 S,2 R,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇和 rel -(1 R,2 R,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇 - 異構物 1 和異構物 2
Figure 02_image528
在25°C下在N 2下將5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛（180 mg，0.69 mmol）添加到在 i-PrOH（5 mL）中的 外消旋(1 R,2 R,3 S)-3-胺基-2-甲基環己烷-1-醇鹽酸鹽和 外消旋-(1 S,2 R,3 S)-3-胺基-2-甲基環己烷-1-醇鹽酸鹽的混合物（89 mg，0.69 mmol）（根據Cao, Hai Thuong等人 Synthesis[合成] 2011, 20, 3297 --3300之方法製備）和TEA（289 µL，2.08 mmol）中。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h。使反應物冷卻至室溫，然後添加三正丁基膦（512 µL，0.87 mmol），並且將所得的溶液在80°C下攪拌12 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（具有0.1% FA）洗脫）純化，並且然後藉由製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18柱，5 µm 30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中43% − 73% MeOH（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到 外消旋-(1 S,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇和 外消旋-(1 R,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇的混合物。藉由以下進一步純化此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IC 2 × 25 cm，5 µm；與己烷中的MeOH 15%（0.5% 2 N NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到全部作為淡黃色固體的 外消旋-(1 S,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（35 mg，15%）、 rel-(1 R,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇 - 異構物1（27 mg，11%，98% ee）和 rel-(1 R,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇 - 異構物2（20 mg，9%，99% ee）。 外消旋 -(1 S,2 R,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.82 (dt, 2H), 7.07 (d, 1H), 4.33 (td, 1H), 4.09 (s, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 3H), 2.45 - 2.22 (m, 1H), 2.18 - 2.03 (m, 2H), 2.01 - 1.81 (m, 3H), 1.79 - 1.64 (m, 1H), 0.70 (dt, 3H)。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。 rel -(1 R,2 R,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇 - 異構物 1 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.87 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.10 - 3.80 (m, 4H), 3.47 - 3.31 (m, 1H), 2.15 - 2.05 (m, 3H), 1.96 (q, 1H), 1.70 (s, 1H), 1.59 - 1.45 (m, 2H), 0.82 (dd, 3H)。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。 rel -(1 R,2 R,3 S)-3-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-2- 甲基環己烷 -1- 醇 - 異構物 2 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.87 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.10 - 3.80 (m, 4H), 3.40 (s, 1H), 2.10 (tt, 3H), 1.96 (t, 1H), 1.80 (s, 1H), 1.50 (d, 2H), 0.81 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H] +。
rel -2-((1 S,2 R,3 S)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 106 ）和異構物 2 （實例 107 ）
Figure 02_image530
將Pd(OAc) 2（2.6 mg，11 µmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（9.0 mg，0.02 mmol）、TEA（76 µL，2.05 mmol）、 外消旋-(1 S,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇（32 mg，0.05 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（22 mg，0.16 mmol）在MeCN（6 mL）中的溶液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.1% FA）洗脫）純化，以得到 外消旋-2-((1 S,2 R,3 S)-3-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺。藉由以下進一步純化此材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IA 2 x 25 cm，5 µm；用EtOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）（1 : 1）等度洗脫；18 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 S,2 R,3 S)-3-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（3 mg，14%，99.7% ee）和 rel-2-((1 S,2 R,3 S)-3-羥基-2-甲基環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（3.9 mg，18%，100% ee）。 異構物 1： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.61 (d, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.69 (d, 1H), 4.50 - 4.35 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.87 (s, 1H), 2.21 - 2.09 (m, 1H), 2.04 - 1.93 (m, 2H), 1.89 - 1.72 (m, 2H), 1.66 - 1.47 (m, 2H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。 異構物 2： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.69 (d, 1H), 4.42 (td, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.87 (s, 1H), 2.15 (t, 1H), 1.96 (dd, 2H), 1.82 (dd, 2H), 1.56 (q, 2H), 0.57 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel - 2-((1 S,2 R,3 R)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 108 ）
Figure 02_image532
將Pd(OAc) 2（1.9 mg，8.55 µmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（7.1 mg，0.02 mmol）、TEA（60 µL，0.43 mmol）、 rel-(1 R,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇 - 異構物1（25 mg，0.04 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（17.2 mg，0.13 mmol）在MeCN（8 mL）中的溶液在一氧化碳氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，並且藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS，30 mm x 150 mm，5 µm；洗脫梯度：在水中12% − 45% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為淡黃色固體的 rel-2-((1 S,2 R,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（2.9 mg，16%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.80 (d, 1H), 4.22 - 4.08 (m, 4H), 3.28 - 3.14 (m, 1H), 2.08 - 1.86 (m, 4H), 1.83 - 1.74 (m, 1H), 1.52 - 1.27 (m, 2H), 0.63 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
rel - 2-((1 S,2 R,3 R)-3- 羥基 -2- 甲基環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 2 （實例 109 ）
Figure 02_image534
將Pd(OAc) 2（1.3 mg，5.81 µmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（4.8 mg，0.01 mmol）、TEA（41 µL，0.29 mmol）、 rel-(1 R,2 R,3 S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-2-甲基環己烷-1-醇 - 異構物2（17 mg，0.03 mmol）和咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-胺（11.7 mg，0.09 mmol）在MeCN（6 mL）中的溶液在CO氣氛下在15 atm下並在100°C下攪拌15 h。將混合物冷卻至室溫並在減壓下濃縮。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，並且然後藉由製備型HPLC（Waters Xbridge ®OBD C18，5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中15% − 45% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的 rel-2-((1 S,2 R,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（5.3 mg，43%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.79 (d, 1H), 4.20 - 4.08 (m, 4H), 3.25 - 3.07 (m, 1H), 2.06 - 1.86 (m, 4H), 1.80 (d, 1H), 1.56 - 1.29 (m, 2H), 0.63 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 421 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3- 羥基 -N- 甲基丁烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 110 ）
Figure 02_image536
將HATU（89 mg，0.23 mmol）添加到在DMF（6 mL）中的DIPEA（103 µL，0.59 mmol）、( S)-3-羥基丁酸（20.4 mg，0.20 mmol）和6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺鹽酸鹽 ( Int V-4) （70 mg，0.13 mmol）中。將所得的混合物在25°C下攪拌15 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4.OH）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS 5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中9% − 42% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（37 mg，55.7%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.34 (s, 1H), 9.09 - 9.01 (m, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.58 - 8.49 (m, 2H), 8.46 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.62 (d, 1H), 4.56 - 4.37 (m, 1.5H), 4.04 (s, 4H),3.92 - 3.81 (m, 0.5H) 2.79 (d, 3H), 2.46 - 2.25 (m, 2H), 2.24 - 1.95 (m, 4H), 1.92 - 1.56 (m, 4H), 1.18 - 1.02 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 506 [M+H] +
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3- 羥基 -N- 甲基丁烷醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 -N- ( 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 111 ）
Figure 02_image538
將HATU（96 mg，0.25 mmol）添加到在DMF（6 mL）中的DIPEA（110 µL，0.63 mmol）、( R)-3-羥基丁酸（21.8 mg，0.21 mmol）和6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺鹽酸鹽 ( Int V-4) （70 mg，0.14 mmol）中。將所得的混合物在25°C下攪拌15 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4.OH）洗脫）直接純化，並且藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS，5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度：在水中9% − 42% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）進一步純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基- N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺（53 mg，74.5%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.58 - 8.52 (m, 2H), 8.48 (d, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.67 - 4.59 (m, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 1.5H), 4.10 - 3.97 (m, 4H), 3.96 - 3.86 (m, 0.5H), 2.81 (d, 3H), 2.48 - 2.29 (m, 2H), 2.25 - 1.96 (m, 4H), 1.93 - 1.60 (m, 4H), 1.16 - 1.07 (m, 3H)。MS ESI, m/z = 506 [M+H] +
rel -2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 R)-3- 羥基 - N- 甲基環戊烷 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 112 ）和異構物 2 （實例 113 ）
Figure 02_image540
將HATU（163 mg，0.43 mmol）添加到在DMF（6 mL）中的DIEA（188 µL，1.08 mmol）、 外消旋-(1 R,3 R)-3-羥基環戊烷-1-甲酸（46.5 mg，0.36 mmol）和6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺鹽酸鹽 ( Int V-4) （150 mg，0.33 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌3 h。將粗產物藉由快速C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN洗脫）純化。藉由以下進一步純化材料：手性製備型HPLC（Chiralpak ®IF，2 x 25 cm，5 µm；在22 min內用在MeOH 60%中的MTBE 40%（0.5% 2 N NH 3-MeOH）等度洗脫；18 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 R)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（45 mg，26%）和 rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 R)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（44 mg，25%）。 異構物 1 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.60 - 8.52 (m, 2H), 8.47 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.06 (dd,1H), 4.48 (dd, 1.5H), 4.19 (dq, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.92 (q, 0.5H), 3.30 (m, 0.5H), 3.22 (m, 0.5.H), 2.82 (d, 3H), 2.16 (d, 3H), 2.08 - 1.87 (m, 3H), 1.87 - 1.6 (m, 7H).1.51 (m,1H)。MS ESI, m/z = 532 [M+H] +。 異構物 2 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.35 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.60 - 8.52 (m, 2H), 8.52 - 8.43 (m, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.55 (m, 1.5H), 4.22 - 4.15 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.95 (d, 0.5H) 3.31 (d, 0.5H) 3.21 (d, 0.5H), 2.82 (d, 3H), 2.16 (d. 3H), 2.11 - 1.88 (m, 3H), 1.89 - 1.61 (m, 7H), 1.5 (m, 1H)。MS ESI, m/z = 532 [M+H] +。
rel -2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 S)-3- 羥基 - N- 甲基環戊烷 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 )-6- 甲氧基 - N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 114 ）和異構物 2 （實例 115 ）
Figure 02_image542
將HATU（163 mg，0.43 mmol）添加到在DMF（10 mL）中的DIPEA（188 µL，1.08 mmol）、 外消旋-(1 R,3 S)-3-羥基環戊烷-1-甲酸（46.5 mg，0.36 mmol）和6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺鹽酸鹽 ( Int V-4) （150 mg，0.33 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌15 h。將粗產物藉由C18快速層析法（用在水中的0%至100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化。藉由以下進一步純化材料：手性製備型HPLC（Chiral Art纖維素SB，2 x 25 cm，5 µm；用MTBE 70%（0.5% 2 N NH 3-MeOH）/30%（DCM-MeOH，1 : 1）等度洗脫；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 S)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（22 mg，12%）和 rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 S)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（18 mg，10%）。 異構物 1 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.74 (d, 1H), 8.59 - 8.54 (m, 2H), 8.49 - 8.45 (m, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.06 (dd, 1H), 4.55 (m, 1.5H), 4.06 (s, 4H), 3.97 (m, 0.5H), 3.21 - 3.01 (m, 1H), 2.82 (d, 3H), 2.31 - 2.10 (m, 3H), 2.06 - 1.89 (m, 3H), 1.88 (m, 4H), 1.64 (m.4H)。MS ESI, m/z = 532 [M+H] +。 異構物 2 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 10.36 (s, 1H), 9.08 (dd, 1H), 8.74 (d, 1H), 8.59 - 8.54 (m, 2H), 8.48 (dd, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.06(dd, 1H), 4.52 (m, 1.5H), 4.06 (s, 4H), 3.91 (m. 0.5H), 3.00 (t, 1H), 2.82 (d, 3H), 2.18 (q, 3H), 2.09 - 1.88 (m, 3H), 1.87 (m, 4H), 1.61 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 532 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3- 羥基 - N- 甲基吡咯啶 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 116 ）和 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3- 羥基 -N- 甲基吡咯啶 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 117 ）
4-((1 r,4 r)-4-(5-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基胺基甲醯基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 )( 甲基 ) 胺基甲酸硝基苯酯
Figure 02_image544
在0°C下在N 2下將4-氯甲酸硝基苯酯（177 mg，0.88 mmol）添加到在DCM（1 mL）中的 N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-(甲基胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺鹽酸鹽 ( Int V-3) （200 mg，0.44 mmol）、TEA（245 µL，1.75 mmol）中。將所得的混合物在室溫下攪拌15 h。在減壓下除去溶劑，然後添加水（30 mL）和MeOH（5 mL）並且將所得的混合物攪拌30 min。將所得的沈澱物藉由過濾收集，用水（25 mL）洗滌並在真空下乾燥，以得到作為黃色固體的4-((1 r,4 r)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸硝基苯酯（260 mg，100%）。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) (旋轉異構物混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.67 - 8.60 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.29 - 7.18 ( m, 2H), 4.61 - 4.45 (m, 1H), 4.25 - 3.99 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.01和2.91 (s, 3H), 2.32 - 2.20 (m, 2H), 2.16 - 2.03 (m, 2H), 2.01 - 1.82 (m, 4H)。MS ESI, m/z = 585 [M+H] +。
2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3- 羥基 -N- 甲基吡咯啶 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 116 ）
Figure 02_image546
在25°C下在氮氣下將( S)-吡咯啶-3-醇（26.6 mg，0.30 mmol）添加到在DMF（3 mL）中的4-((1 r,4 r)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸硝基苯酯（110 mg，0.15 mmol）、TEA（106 µL，0.76 mmol）中。將所得的混合物在70°C下攪拌15 h。使反應混合物冷卻至室溫，然後藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS，5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度為在水中10% − 43% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（35 mg，43%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (d, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.57 - 4.41 (m, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.77 - 3.62 (m, 1H), 3.51 - 3.39 (m, 2H), 3.29 - 3.19 (m, 1H), 3.10 - 3.00 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.27 -2.15 (m, 2H), 2.10 - 1.94 (m, 2H), 1.89 - 1.77 (m, 4H), 1.77-1.66 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 533 [M+H] +。
2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3- 羥基 -N- 甲基吡咯啶 -1- 甲醯胺基 ) 環己基 ) -N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺（實例 117 ）
Figure 02_image548
在25°C下在N 2下將( R)-吡咯啶-3-醇（9.66 mg，0.11 mmol）添加到在DMF（3 mL）中的4-((1 r,4 r)-4-(5-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基胺基甲醯基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)(甲基)胺基甲酸硝基苯酯（40 mg，0.06 mmol）、TEA（39 µL，0.28 mmol）中。將所得的混合物在70°C下攪拌15 h。使反應混合物冷卻至室溫，然後藉由製備型HPLC（YMC-Actus Triart C18 ExRS，5 µm，30 × 150 mm；洗脫梯度為在水中10% − 43% MeCN（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；60 mL/min）純化，以得到作為黃色固體的2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基- N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺（20 mg，68%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.59 (d, 2H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.55 - 4.39 (m, 1H), 4.27 - 4.16 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.77 - 3.61 (m, 1H), 3.52 - 3.40 (m, 2H), 3.29 - 3.18 (m, 1H), 3.12 - 2.97 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.25 - 2.14 (m, 2H), 2.13 - 1.94 (m, 2H), 1.90 - 1.77 (m, 4H), 1.77-1.62 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 533 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5-a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 118 ）和異構物 2 （實例 119 ）
1- 胺基 -4-( 苄基胺基 ) 環己烷 -1- 甲酸甲酯
Figure 02_image550
在0°C下在N 2下在3 mmin內向1-胺基-4-側氧基環己烷-1-甲酸甲酯（1.5 g，8.8 mmol）和苯甲胺（1.1 g，10.5 mmol）在MeOH（28 mL）中的溶液中添加氰基硼氫化鈉（826 mg，13.1 mmol）。將所得的混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（2% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為無色固體的1-胺基-4-(苄基胺基)環己烷-1-甲酸甲酯（1.4 g，61%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) (1 : 2異構物混合物) δ 7.35 - 7.24 (m, 4H), 7.24 - 7.15 (m, 1H), 3.70/3.67 (s, 2H) (異構物), 3.61/3.59 (s, 3H) (異構物), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.09 - 1.98 (m, 1H), 1.84 - 1.73 (m, 1H), 1.67 - 1.41 (m, 5H), 1.28 - 0.99 (m, 1H)。MS ESI, m/z = 263 [M+H] +。
1,4- 二胺基環己烷 -1- 甲酸甲酯
Figure 02_image552
在N 2下向1-胺基-4-(苄基胺基)環己烷-1-甲酸甲酯（300 mg，1.1 mmol）在MeOH（16 mL）中的溶液中添加在碳上的Pd(OH) 2（20 wt.%）（60 mg，0.4 mmol）。將所得的懸浮液在25°C下在氫氣下在1 atm下攪拌2 h。將反應混合物經矽藻土過濾，並且將矽藻土餅用MeOH（100 mL）洗滌。將合併的MeOH溶液在減壓下濃縮，以得到作為無色油狀物的1,4-二胺基環己烷-1-甲酸甲酯（120 mg，61%），其不經進一步純化即可直接使用。MS ESI, m/z = 173 [M+H] +。
1- 胺基 -4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己烷 -1- 甲酸甲酯
Figure 02_image554
在25°C下在N 2下將5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛（1.3 g，4.9 mmol）添加到在 i-PrOH（32 mL）中的1,4-二胺基環己烷-1-甲酸甲酯（890 mg，5.2 mmol）和TEA（2 mL，14.8 mmol）溶液中。將所得的混合物在80°C下攪拌2 h，冷卻至室溫，接著添加三正丁基膦（3.6 mL，14.8 mmol）。將混合物在80°C下攪拌12 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的1-胺基-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-甲酸甲酯（650 mg，35%）。MS ESI, m/z = 382/384 (1:1) [M+H] +。
(1- 胺基 -4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 ) 環己基 ) 甲醇
Figure 02_image556
在0°C下在N 2下向1-胺基-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己烷-1-甲酸甲酯（630 mg，1.7 mmol）在THF（30 mL）中的溶液中添加氫化鋁鋰（94 mg，2.5 mmol）。將所得的混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物倒入Na 2SO 4·10H 2O在THF（50 mL）中的懸浮液中，並且然後通過矽藻土過濾。將矽藻土餅用THF（500 mL）洗滌。將合併的濾液在減壓下濃縮，以得到作為淡黃色固體的(1-胺基-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲醇（440 mg，75%），其不經進一步純化即可直接使用。MS ESI, m/z = 354/356 (1:1) [M+H] +。
N -(4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1-( 羥基甲基 ) 環己基 )-2- 氯乙醯胺
Figure 02_image558
在0°C下在N 2下在2 min內將2-氯乙醯氯（140 mg，1.3 mmol）逐滴添加到(1-胺基-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)環己基)甲醇（400 mg，1.1 mmol）在DCM（4.5 mL）和NaOH水溶液（2 N）（4.5 mL，2.3 mmol）中的混合物中。將所得的混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物倒入水（10 mL）中並且用DCM（20 mL × 3）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為淡黃色固體的 N-(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-(羥基甲基)環己基)-2-氯乙醯胺（120 mg，25%）。MS ESI, m/z = 430/432 (1:1) [M+H] +。
9-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -2- 酮
Figure 02_image560
在0°C下在N 2下在2 min內將三級丁醇鉀（177 mg，1.6 mmol）分批添加到 N-(4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-(羥基甲基)環己基)-2-氯乙醯胺（170 mg，0.4 mmol）在THF（10 mL）中的溶液中。將所得的混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物倒入飽和NH 4Cl水溶液（10 mL）中並用EtOAc（50 mL × 3）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為無色固體的9-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮（105 mg，68%）。MS ESI, m/z = 394/396 (1:1) [M+H] +。
9-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1- 甲基 -4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -2- 酮
Figure 02_image562
在0°C下在N 2下在2 min內將氫化鈉（60 wt.%）（14 mg，0.4 mmol）分批添加到9-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮（95 mg，0.2 mmol）在DMF（6 mL）中的溶液中。將所得的混合物在0°C下攪拌15 min，接著添加碘甲烷（103 mg，0.7 mmol）。將混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物用飽和NH 4Cl水溶液（10 mL）淬滅並用EtOAc（50 mL × 3）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% FA）洗脫）純化，以得到作為無色固體的9-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮（85 mg，86 %）。MS ESI, m/z = 408/410 (1:1) [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸甲酯
Figure 02_image564
將9-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1-甲基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮（85 mg，0.2 mmol）、Pd(dppf)Cl 2- CH 2Cl 2（17 mg，0.02 mmol）和TEA（290 µL，2.1 mmol）在MeOH（10 mL）中的混合物在CO氣氛下在15 atm下在100°C下在密封容器中加熱15 h。將反應混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為紅色固體的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（75 mg，93%）。MS ESI, m/z = 388 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲酸
Figure 02_image566
將氫氧化鋰（20 mg，0.8 mmol）添加到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)-2 H-吲唑-5-甲酸甲酯（65 mg，0.2 mmol）在THF（3 mL）/水（3 mL）中的的溶液中。將所得的溶液在25°C下攪拌2 h。將反應混合物用2 N HCl調節至pH 6。將混合物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）直接純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)-2 H-吲唑-5-甲酸（50 mg，80%）。MS ESI, m/z = 374 [M+H] +。
6- 甲氧基 -2-(1- 甲基 -2- 側氧基 -4- 氧雜 -1- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) -N-( 吡唑并 [1,5- a] 嘧啶 -3- 基 )-2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 118 ）和異構物 2 （實例 119 ）
Figure 02_image568
將吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-胺（23 mg，0.1 mmol）的HCl鹽添加到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)-2 H-吲唑-5-甲酸（45 mg，0.1 mmol）、HATU（55 mg，0.1 mmol）和DIPEA（63 µL，0.4 mmol）在DMF（3 mL）中的溶液中。將所得的混合物在25°C下攪拌2 h。將反應混合物在減壓下濃縮，並且藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，以得到作為黃色固體的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺的異構物的混合物。藉由以下分離此混合物：製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA 5 μm 20 mm × 250 mm；與MeOH中的50% MTBE（0.5% 2 N NH 3-MeOH）等度；在24 min內，20 mL/min），以得到均作為無色固體的作為第一洗脫異構物的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺- -異構物1（19 mg，32%，100% ee）和作為第二洗脫異構物的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（3 mg，5 %，99.5% ee）。 異構物 1 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.35 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.49 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.07 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.41 - 2.34 (m, 2H), 2.22 - 2.04 (m, 4H), 1.63 - 1.55 (m, 2H)。MS ESI, m/z = 490 [M+H] +。 異構物 2 ： 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6δ 10.34 (s, 1H), 9.07 (dd, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.54 (dd, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.05 (dd, 1H), 4.68 - 4.56 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.98 (s, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.20 - 1.94 (m, 6H), 1.81 (br. d, 2H)。MS ESI, m/z = 490 [M+H] +。
rel -2-((5 R,7 R,8 R)-1,7- 二甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 120 ）和異構物 2 （實例 121 ）
rel -2-((5 S,7 R,8 R)-1,7- 二甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 122 ）和異構物 2 （實例 123 ）
外消旋 -3- 溴 - N-((3 R,4 R)-4-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-3- 甲基環己 -1- 烯 -1- 基 )- N- 甲基丙醯胺
Figure 02_image570
在−78°C下在5 min內將在THF中的甲胺（2 M）（34.1 mL，68.2 mmol）添加到在密封容器中的 外消旋-(3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己烷-1-酮（如 Int V-1的合成中所述合成）（2.3g，6.8 mmol）在甲苯（100 mL）中的溶液中。將所得的溶液升溫至室溫並在110°C下攪拌2.5 h。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在THF（100 mL）中並冷卻至0°C。將碳酸氫鈉（859 mg，10.2 mmol）和3-溴丙醯氯（1.2 g，6.8 mmol）添加到反應混合物中，將其在25°C下攪拌30 min。將反應混合物用飽和NH 4Cl水溶液（25 mL）淬滅並用EtOAc（150 mL × 2）萃取。將有機層經Na 2SO 4乾燥，過濾並在減壓下濃縮以產生無色油狀物。將粗產物藉由矽膠層析法（用在PE中的0% - 60% EtOAc洗脫）純化，以得到作為紅色固體的 外消旋-3-溴- N-((3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己-1-烯-1-基)- N-甲基丙醯胺（850 mg，26%）。MS ESI, m/z = 484/486/485 (1:2:1) [M+H] +。
外消旋 -(5 R,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1,7- 二甲基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮和 外消旋 -(5 S,7 R,8 R)-8-(5- 溴 -6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -2- 基 )-1,7- 二甲基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -2- 酮
Figure 02_image572
在20 min內向 外消旋-3-溴- N-((3 R,4 R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-3-甲基環己-1-烯-1-基)- N-甲基丙醯胺（450 mg，0.9 mmol）在甲苯（60 mL）中的溶液中逐滴添加三丁基錫烷（810 mg，2.8 mmol）和AIBN（76 mg，0.5 mmol）在MeCN（1 mL）和甲苯（15 mL）中的溶液中。將所得的溶液在80°C下攪拌6 h。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100% MeCN（0.05% FA）洗脫）純化，接著進行製備型HPLC（XBridge Prep OBD C18，30 × 150 mm 5 µm；流動相A：水（10 mM NH 4HCO 3+ 0.1% NH 4OH）；流動相B：MeCN；梯度：在10 min內34% B至44% B，然後在44% B下等度，持續10 min；流速：60 mL/min），以得到均作為淡黃色固體的作為第一洗脫混合物的 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（26 mg，7%）和作為第二洗脫混合物的 外消旋-(5 S,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（26 mg，7%）。 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮： 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.84 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.79 (td, 1H), 2.77 (s, 3H), 2.48 - 2.23 (m, 4H), 2.15 - 2.03 (m, 3H), 1.88 (td, 1H), 1.70 - 1.57 (m, 3H), 0.67 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 406/408 [M+H] +。 外消旋-(5 S,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3) δ7.85 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.00 - 3.84 (m, 5H), 3.21 (s, 3H), 2.80 - 2.64 (m, 1H), 2.63 - 2.47 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 2.26 - 2.04 (m, 3H), 1.96 - 1.71 (m, 3H), 1.49 (dd, 1H), 0.71 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 406/408 [M+H] +。
rel -2-((5 R,7 R,8 R)-1,7- 二甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 120 ）和異構物 2 （實例 121 ）
Figure 02_image574
rel -2-((5 S,7 R,8 R)-1,7- 二甲基 -2- 側氧基 -1- 氮雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 )- N-( 咪唑并 [1,2- b] 嗒 𠯤 -3- 基 )-6- 甲氧基 -2 H- 吲唑 -5- 甲醯胺 - 異構物 1 （實例 122 ）和異構物 2 （實例 123 ）
Figure 02_image576
將 外消旋-(5 R,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（26 mg，0.1 mmol）、Pd(OAc) 2（29 mg，0.1 mmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（26 mg，0.1 mmol）和TEA（89 µL，0.6 mmol）在MeCN（10 mL）中的懸浮液在密封容器中在CO氣氛下在15 atm下在100°C下加熱15 h。在冷卻至室溫之後，將額外的Pd(OAc) 2（29 mg，0.1 mmol）、1,3-雙(二苯膦基)丙烷（26 mg，0.1 mmol）和TEA（89 µL，0.6 mmol）添加到以上反應混合物中。將所得的懸浮液再次在密封容器中在CO氣氛下在15 atm下在100°C下再加熱15 h。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，接著進行製備型手性HPLC（Chiralpak ®IA 5 μm 20 mm × 250 mm；在10 min內與MeOH/DCM（1/1）中的50% MTBE（0.5% 2 M NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((5 R,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（5 mg，16%；97.2% ee）和 rel-2-((5 R,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（4 mg，13%；99.5 % ee）。異構物1和2彼此係鏡像異構物，針對兩種異構物獲得的LCMS/ 1H NMR係相同的。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.64 (dd, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.21 - 4.13 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.41 - 2.26 (m, 3H), 2.26 - 2.14 (m, 1H), 2.09 - 1.89 (m, 4H), 1.71 (t, 1H), 1.61 - 1.50 (m, 2H), 0.59 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。
將 外消旋-(5 S,7 R,8 R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2 H-吲唑-2-基)-1,7-二甲基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-2-酮（26 mg，0.1 mmol）經受以上所述之反應條件。將混合物在減壓下濃縮。將殘餘物藉由C18快速層析法（用在水中的0% - 100%乙腈（0.1% NH 4OH）洗脫）純化，接著進行製備型手性HPLC（YMC Chiral ART纖維素-SB 5 µm 20 mm × 250 mm；在18 min內與乙醇中的50% MTBE（0.5% 2 M NH 3-MeOH）等度；20 mL/min），以得到均作為黃色固體的 rel-2-((5 S,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1（4 mg，13%，99.9% ee）和 rel-2-((5 S,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物2（4 mg，13%，98.6% ee）。異構物1和2彼此係鏡像異構物，針對兩種異構物獲得的LCMS/ 1H NMR係相同的。 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ11.05 (s, 1H), 8.67 - 8.61 (m, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.22 (dd, 1H), 4.26 (dt, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.08 (s, 3H), 2.75 - 2.54 (m, 1H), 2.53 - 2.36 (m, 1H), 2.27 (t, 2H), 2.16 - 1.92 (m, 3H), 1.89 - 1.70 (m, 3H), 1.53 (t, 1H), 0.62 (d, 3H)。MS ESI, m/z = 488 [M+H] +。
IRAK4 抑制劑化合物在 IRAK4 酶測定中的功效
使用質譜讀出在酶測定中確定化合物針對IRAK4的抑制性活性。使用Echo 655（Labcyte Inc），從溶解在DMSO中並添加到384孔測定板（Greiner #781280）中的10 mM化合物原液產生具有1 µM或10 µM最高濃度的10點半對數化合物濃度反應曲線。向測定板中添加在測定緩衝液（50 mM Tris-HCl pH 7.4，10 mM MgCl，5 mM麩胱甘肽 ，0.01% BSA，3 mM ATP）中稀釋至0.2 nM的最終濃度的10 µL人重組IRAK4蛋白（Life Technologies #PV4002）。將酶在室溫下用化合物溫育15分鐘，之後使用Echo 655（Labcyte Inc）將肽底物（KKARFSRFAGSSPSQSSMVAR，Innovagen custom synthesis，在DMSO中10 mM）添加到每個孔中，至10 µM的濃度。在室溫下兩小時之後，用90 µL的0.4%甲酸（Merck #33015）停止反應。在Waters TQ-S質譜儀上藉由LC-MS/MS測量未磷酸化和磷酸化的肽。使用TargetLynx軟體對峰進行積分，並且計算磷酸化與未磷酸化的肽之間的比率。對曲線進行擬合，並且在Genedata Screener 15（Genedata AG）中確定化合物功效。所呈現的數據係至少n=2的幾何平均數，或者從單一實驗獲得，如由*所表示。
IRAK4 磷酸化細胞測定
藉由TLR或IL-1R配位基進行的IRAK4活化導致IRAK4自磷酸化，這可以藉由IRAK4激酶抑制劑防止。在IL-1β刺激的Karpas-299細胞中評定IRAK4抑制劑化合物對於IRAK4自磷酸化的作用，作為細胞功效的量值。將Karpas-299細胞在含有10% FBS（Gibco #10270）的RPMI 1640（Gibco 61870-010）中培養。將細胞以2×10 4個細胞/孔鋪板在聚D-離胺酸塗覆的384孔板（Corning #356663）中，使用Echo 655（Labcyte Inc）將各種濃度（10點半對數劑量反應，最終最高濃度為30 µM）的化合物添加到該等板中。將細胞離心（250 g，4 min），在37°C下溫育1 h，然後在37°C下用22.7 ng/mL重組IL-1β（R&D Systems，#201-LB-025）刺激10 mnin，接著在4%多聚甲醛中固定10 min，並且在冰冷的70% MeOH中透化30 min。將細胞在BlueWasher（BlueCatBio）上用磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）洗滌兩次，然後用含有10% FBS的PBS封閉20 min。用BlueWasher除去封閉溶液，並且將細胞在含有0.05% Tween-20的封閉溶液中用抗pIRAK4（Thr345/Ser346）（CST，#11927，1 : 400）染色，持續1 h，然後在BlueWasher上用含有0.05% Tween-20的PBS洗滌兩次，接著在含有0.05% Tween-20的封閉緩衝液中用Alexa 647軛合的第二抗兔IgG抗體（CST，#4414，1 : 2,000）和Hoechst 33342（Sigma，1 : 2,000）染色，持續30 min。最後，將細胞用含有0.05% Tween-20的PBS洗滌兩次，並且使用適當的濾光器用10X空氣物鏡在ImageXpress Micro（分子裝置）上成像。在Columbus（PerkinElmer）中分析圖像，並且對螢光強度/來自第二抗體的細胞進行定量。在Genedata Screener 15（Genedata AG）中分析定量數據。在此測定中獲得的結果在 表 1中呈現，並且證明了本說明書的化合物抑制細胞中的IRAK4的能力。IC 50值係至少2個實驗的幾何平均數。
[ 表 1] 化合物在 IRAK4 酶抑制測定和 IRAK4 磷酸化細胞測定中的活性
實例 IRAK4 酶IC 50（nM） IRAK4 細胞IC 50（nM） 實例 IRAK4 酶IC 50（nM） IRAK4 細胞IC 50（nM）
1 0.1 5 64 ＜0.5 38
2 3.4 124 65 1.1 44
3 8.5 272 66 ＜0.5 23
4 ＜0.3* 17 67 4.3 144
5 0.5 31 68 1.6 53
6 0.7 44 69 0.5 22
7 6.0 111 70 0.4 9
8 2.8 58 71 1.9 30
9 1.6 57 72 0.4 7
10 1.2 19 73 3.2 57
11 ＞1010 ＞30000 74 2.7 79
12 1.0 33 75 0.3 12
13 6.5 816 76 2.3 -
14 17.7 171 77 0.7 14
15 0.5 91 78 2.5 52
16 0.6 77 79 1.0 21
17 1.0 50 80 1.5 28
18 ＜0.6 19 81 5.1 82
19 1.0 47 82 2.4 27
20 0.7 35 83 2.1 34
21 0.7 36 84 0.4* 40
22 5.1 268 85 0.8 50
23 0.2 5 86 1.9 36
24 83.1 668 87 0.2 26
25 1.4 19 88 1.3 44
26 1.6 26 89 1.1 36
27 4.4 67 90 5.2 101
28 3.0 161 91 2.3 88
29 0.5 31 92 1.6 30
30 ＜0.3 46 93 0.4 8
31 0.8 71 94 0.3 10
32 10.6 257 95 0.2 7
33 1.0 45 96 0.5 15
34 2.0 31 97 0.7 15
35 7.2 115 98 0.6 20
36 3.8 56 99 1.2 35
37 0.3 6 100 ＜0.03 6
38 4.6 186 101 ＜0.4 31
39 10.0 160 102 0.7 19
40 6.3 158 103 0.6 17
41 14.3 331 104 1.1 25
42 1.4 89 105 6.5 96
43 1.8 101 106 0.6 15
44 0.8 42 107 0.9 24
45 1.2 70 108 0.4 16
46 0.6 56 109 0.6 15
47 0.5 64 110 0.9 16
48 0.7 17 111 0.9 27
49 6.1 46 112 0.7 21
50 3.4 84 113 0.7 23
51 2.8 46 114 0.7 16
52 5.5 96 115 0.8 20
53 3.5 49 116 0.3 13
54 0.6 25 117 0.3 22
55 0.7 51 118 13.9 199
56 1.2 79 119 0.5 16
57 0.8 60 120 0.3 13
58 0.9 16 121 3.4 68
59 1.3 40 122 0.7 18
60 0.8 21 123 3.0 76
61 24.2 238      
62 16.0 185      
63 46.8 338      
IRAK4 抑制劑對於人 THP-1 單核細胞系中的 IL-1β 誘導的細胞介素釋放的作用
將THP-1細胞在含有10% FBS（Gibco 10270-106）、1 mM丙酮酸鈉（Gibco 11360-070）和100 U/mL青黴素-鏈黴素（Gibco 15140-122）的RPMI 1640（Gibco 72400-021）中培養。將細胞以5×10 4個細胞/孔鋪板在384孔Echo合格板（Labcyte PPT-0200）中，使用Echo 655（Labcyte Inc）將各種濃度（10點半對數劑量反應，最終最高濃度為10 µM）的化合物添加到該等板中。將板在37°C下溫育1 h，然後添加重組IL-1β（R&D Systems 201-LB-025/CF）至1.8 ng/mL的最終濃度。將板在37°C下溫育18 h。將板在250x g下離心四分鐘，然後使用Echo 655上的聲分配將1.6 µL的細胞上清液轉移到白色低體積384孔板（Greiner #784075）中。接下來，使用聲分配（珠和抗體來自PerkinElmer I8 AlphaLISA檢測套組（kit），AL224C）添加200 nL的受體珠（5 mg/mL）和生物素化的抗IL-8抗體（500 nM）。將板密封，短暫離心，然後在室溫下溫育1 h。之後，添加200 nL的供體珠溶液（5 mg/mL），將板密封並短暫離心，然後溫育1 h，之後在Envision板上讀數以允許確定實現THP1細胞中IL-1β刺激後釋放的IL-8的量減少50%所需的IRAK4抑制劑的濃度（ 表 2）。在Genedata Screener 15（Genedata AG）中分析定量數據。所呈現的數據係至少n=2的幾何平均數，或者從單一實驗獲得，如由*所表示。
IRAK4 抑制劑對於人 PBMC 中 LPS 和 IL-1β 誘導的細胞介素釋放的體外作用
為了評估IRAK4抑制劑對於人原代免疫細胞中阻斷疾病相關途徑的作用和功效，我們用LPS（TLR4促效劑）或IL-1β（IL-1R配位基）刺激人PBMC（外周血單核細胞）並且測量促炎細胞介素IL-6和TNF-α的釋放。簡而言之，使用LymphoPrep密度梯度將PBMC從由健康個體捐贈的人血中分離，並且以200 000個細胞/孔（用於LPS測定）或300 000個細胞/孔（用於IL-1β測定）的細胞密度鋪板在96孔培養板中。將細胞用系列稀釋度的IRAK4抑制劑或媒介物（DMSO）溫育1 h，之後用0.11 ng/mL LPS（來源於大腸桿菌）或1 ng/mL重組人IL-1β刺激細胞。在LPS刺激4 h或IL-1β刺激20 h之後，收集上清液並且藉由Mesoscale Discovery（MSD）多重測定測量促炎細胞介素TNF-α、IL-8和IL-6的水平。對劑量-反應曲線進行作圖，並且使用GraphPad Prism 8用4參數曲線擬合計算IC 50值（參見 表 3）。證明了根據本說明書的IRAK4抑制劑在抑制促炎細胞介素釋放和TNF-α中是高度活性的。
LPS 誘導的氣道炎症的小鼠模型中 IRAK4 抑制的體內作用
TLR充當氣道中的微生物和過敏原的第一感應物，並且可以介導快速炎性反應。吸入的LPS刺激的小鼠模型用於研究IRAK4抑制對於急性TLR4驅動的氣道炎症的過程的作用。簡而言之，藉由口服投與用5、15和50 mg/kg的測試化合物（實例89）或單獨的媒介物（在水中的5% DMSO，95% SBE-B-CD（30% w/v））對9週大的C57Bl/6NCrl雌性小鼠進行給藥。在0.5 h之後，藉由以6 L/min壓縮空氣流全身暴露於在鹽水中的1 mg/mL LPS（大腸桿菌0111：B4，來自Sigma L2630）的氣溶膠或僅鹽水，持續0.5 h來對動物進行刺激。在暴露之後，對盒子進行通氣並且將動物返回其飼養籠中。在4 h之後，用單一腹膜內注射0.3 mL戊巴比妥（100 mg/mL）對動物進行安樂死，並且使用1 mL的PBS對整個肺進行手動支氣管肺泡灌洗（BAL）。將收集的BAL液體（BALF）在300 x g下在4°C下離心10 min，並且收集上清液並儲存在-80°C下。使用MSD多重測定在BALF上清液中測量促炎細胞介素的水平，使用8隻小鼠/治療組，不同的是LPS/媒介物組，其中使用20隻小鼠。不同治療組中BALF上清液中的IL-6和TNF-α的水平在 圖 1中表示。實例89以劑量依賴性方式降低吸入的LPS刺激之後IL-6和TNF-α的水平。
[ 表 2] ：本說明書的化合物針對hTHP1細胞中的IL-1β刺激的IL-8釋放的IC 50值
實例 hTHP1 ， IL1β 刺激， IL8 釋放減少 IC 50 （ nM ） 實例 hTHP1 ， IL1β 刺激， IL8 釋放減少 IC 50 （ nM ）
5 16 33 30*
7 48 34 22*
8 50 37 3*
10 14* 38 31*
12 29 45 46
13 59 57 35
14 38 64 18
17 24 65 52
18 21 66 18
19 35* 67 91
20 31 68 84
21 17 69 15
23 7* 80 70*
25 23* 86 31
26 25* 89 31
29 20 91 49
30 14 92 28*
31 32 93 30*
* n = 1
[ 表 3]. 用 LPS 和 IL-1β 刺激的人 PBMC 中 IRAK4 抑制劑化合物的 IC 50 值（ nM ）
刺激 細胞介素讀出 實例89（IC 50，nM）
IL-1β IL-6 22
IL-8 30
LPS IL-6 32
TNF-α 39
無
[ 圖 1]. LPS 誘導的肺炎症的急性小鼠模型中實例 89 的體內劑量反應。在吸入LPS刺激（challenge）（1 mg/mL）之前1 h向小鼠口服給藥實例89化合物。在刺激之後4 h，將動物處死，並且測量支氣管肺泡灌洗液中釋放的IL-6和TNF-α的水平。實例89以劑量依賴性方式降低IL-6和TNF-α的水平。單個數據點表示單個動物，並且柱表示每個組的平均值。藉由將治療組與媒介物組進行比較的單向ANOVA檢驗計算各組之間的統計學差值。**p＜0.01, ***p＜0.001。因此建立了根據本說明書的IRAK4抑制劑減少體內炎性細胞介素和TNF-α的能力。
無
Figure 110145977-A0101-11-0002-3

Claims (16)

  1. 一種具有式 (A) 之化合物或其藥學上可接受的鹽，
    Figure 03_image001
    (A) 其中： R 1選自
    Figure 03_image579
    ； R 2選自
    Figure 03_image581
    ； R 3和R 4各自獨立地選自H、Me、Et、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； Y係N(Me)COMe、N(R 5)COMe、N(Me)COR 6、N(R 5)COR 6、CONMe 2或5員 N-雜環諸如1,2,3-三唑，並且Z係H、Me、Et和視需要取代的C 1-C 6烷基；或者 Y和Z組合形成視需要取代的4員、5員或6員環； X選自OR 7和NR 8R 9； R 5選自H、視需要取代的C 1-C 6烷基和視需要取代的C 3-C 6環烷基； R 6選自視需要取代的C 1-C 6烷基、視需要取代的C 3-C 6環烷基和視需要取代的5員或6員飽和 N-雜環； R 7係Me、Et、異丙基、正丙基、環丙基、環丁基、視需要取代的C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的雜原子的4員、5員或6員環； R 8和R 9獨立地選自H、Me和視需要取代的C 1-C 6烷基，或者一起形成視需要取代的C 3-C 6環烷基或含有選自O和N的另外的雜原子的視需要取代的4員、5員或6員環； 其中當存在時，Z、R 3、R 4、R 5、R 6、R 7、R 8和R 9的視需要取代基獨立地選自OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl。
  2. 如請求項1所述之化合物，其中，Y和Z組合形成4員、5員或6員環，其選自視需要取代的3-羥基環丁基、 N-醯化氮雜環丁烷、吡咯啶-2-酮、1-烷基吡咯啶-2-酮、3-烷基㗁唑啶-2-酮、1-烷基哌啶-2-酮或3-烷基-1,3-㗁𠯤啶-2-酮。
  3. 如請求項1所述之化合物，其中，Y和Z組合形成4員、5員或6員環，其選自視需要取代的3-羥基環丁基、 N-醯基氮雜環丁烷、1-甲基吡咯啶-2-酮、3-甲基㗁唑啶-2-酮、1-甲基哌啶-2-酮和3-甲基-1,3-㗁𠯤啶-2-酮。
  4. 如任一前述請求項所述之化合物，其中，在Y和Z組合形成4員、5員或6員環的情況下，該環選自
    Figure 03_image583
    其中 «代表與環己基環的附接位點，並且R 10係Me或視需要被OH、C 1-C 3烷基、C 1-C 3烷氧基、C(O)Me、胺基、NHMe、NMe 2、F或Cl取代的C 1-C 6烷基。
  5. 如請求項1所述之化合物，其中，R 2係
    Figure 03_image585
    ， 視需要其中R 3和R 4係甲基。
  6. 如請求項1所述之化合物，其中，R 2係
    Figure 03_image031
    ， 視需要其中Y係N(Me)COMe並且Z係H。
  7. 如任一前述請求項所述之化合物，其中，R 1係
    Figure 03_image588
    。
  8. 如任一前述請求項所述之化合物，其中，X係OR 7。
  9. 如請求項1所述之具有式 (A) 之化合物，其選自： N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 s,4 s)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(二甲基胺基甲醯基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-(2-羥基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 R,3 S)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 S)-3-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 s,4 s)-4-(環丙烷甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)-6-環丙氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)- 2H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-(2-羥基螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-(4-羥基-4-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 S)-3-羥基-3-甲基環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-6-環丙氧基-2-((1 S,3 R)-3-羥基-3-甲基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 R,2 R,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-甲氧基-2-((1 S,2 S,4 R*)-2-甲基-4-( N-甲基乙醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 S,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((6 R,7 R)-2-乙醯基-6-甲基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((7 R,8 R)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺或 rel-2-((7 S,8 S)-2,7-二甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1、2、3或4； N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-3-氧雜-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 R,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,3 S,4 S)-4-羥基-3-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 6-環丙氧基-2-((1 r,4 r)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-環丙氧基-2-((1 s,4 s)-4-羥基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((5 r,8 r)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((5 s,8 s)-2-甲基-3-側氧基-2-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,2 S,4 R)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,2 S,4 S)-4-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 S)-4-羥基-2,4-二甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,2 R,4 R)-4-羥基-2,4-二甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-2-羥基 -N-甲基丙烷醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-((1 r,4 r)-4-( N-甲基環丙烷甲醯胺基)環己基)- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-((1 r,3 R)-3-羥基 -N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-((1 s,3 S)-3-羥基 -N-甲基環丁烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(2-羥基- N,2-二甲基丙烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 r,3 r)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-(2-乙醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-((1 s,3 s)-3-甲氧基環丁氧基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(1 H-1,2,3-三唑-1-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 r,4 r)-4-(2 H-1,2,3-三唑-2-基)環己基)- N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((1 S,2 S,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 R,3 S)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 S,2 R,3 R)-3-羥基-2-甲基環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基 -N-甲基丁烷醯胺基)環己基)-6-甲氧基 -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺； rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 R)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((1 R,4 r)-4-((1 R,3 S)-3-羥基- N-甲基環戊烷-1-甲醯胺基)環己基)-6-甲氧基- N-(吡唑并[1,5- a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 2-((1 S,4 r)-4-(( S)-3-羥基 -N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 2-((1 R,4 r)-4-(( R)-3-羥基 -N-甲基吡咯啶-1-甲醯胺基)環己基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺； 6-甲氧基-2-(1-甲基-2-側氧基-4-氧雜-1-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基) -N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； rel-2-((5 R,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2；以及 rel-2-((5 S,7 R,8 R)-1,7-二甲基-2-側氧基-1-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基) -N-(咪唑并[1,2- b]嗒𠯤-3-基)-6-甲氧基-2 H-吲唑-5-甲醯胺 - 異構物1或異構物2； 或其藥學上可接受的鹽。
  10. 一種藥物組成物，其包含如任一前述請求項所述之具有式 (A) 之化合物和至少一種藥學上可接受的賦形劑。
  11. 如任一前述請求項所述之具有式 (A) 之化合物，用於用作藥物。
  12. 如請求項11所述之用於使用的化合物，其用於治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），癌症，炎性疾病和自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬。
  13. 如請求項1至9中任一項所述之具有式 (A) 之化合物，用於在藥物的製造中使用，視需要其中該藥物用於治療呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），癌症，炎性疾病和自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬。
  14. 一種治療其中IRAK4的抑制係有益的疾病或病症之方法，其包括向對其有需要的患者投與有效量的如請求項1至9中任一項所述之具有式 (I) 之化合物或其藥學上可接受的鹽。
  15. 如請求項14所述之治療方法，其中，該有需要的患者係患有呼吸疾病諸如氣喘和慢性阻塞性肺疾病（COPD），癌症，炎性疾病或自體炎性/自體免疫疾病諸如全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、肌炎、休格倫氏症、全身性硬化症、痛風、子宮內膜異位症、異位性皮膚炎和牛皮癬的患者。
  16. 如請求項11或請求項13所述之用於使用的化合物或如請求項14所述之治療方法，其中，該使用、藥物或治療係針對血液惡性腫瘤，其選自華氏巨球蛋白血症（WM）、非何杰金氏淋巴瘤（NHL）、彌漫型大B細胞淋巴瘤（DLBCL）、原發性中樞神經系統淋巴瘤（PCNSL）、脾臟緣帶淋巴瘤（SMZL）、小淋巴球淋巴瘤（SLL）、白血病（慢性淋巴球性白血病（CLL））和意義不明單株免疫球蛋白增高症（MGUS-IgM+）。
TW110145977A 2020-12-10 2021-12-09 Ｉｒａｋ４抑制劑、藥物組成物及其用途 TWI902994B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063199160P 2020-12-10 2020-12-10
US63/199,160 2020-12-10

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW202237612A true TW202237612A (zh) 2022-10-01
TWI902994B TWI902994B (zh) 2025-11-01

Family

ID=

Also Published As

Publication number Publication date
AU2021395816B2 (en) 2024-04-04
SMT202400417T1 (it) 2024-11-15
RS66095B1 (sr) 2024-11-29
MA62535B1 (fr) 2024-11-29
CL2023001662A1 (es) 2024-01-12
UY39561A (es) 2022-06-30
PE20240684A1 (es) 2024-04-10
HUE068584T2 (hu) 2025-01-28
FI4259632T3 (fi) 2024-10-24
ES2989489T3 (es) 2024-11-26
PL4259632T3 (pl) 2024-12-16
MX2023006816A (es) 2023-06-21
JP2023552838A (ja) 2023-12-19
KR20230118153A (ko) 2023-08-10
EP4259632A1 (en) 2023-10-18
US12448385B2 (en) 2025-10-21
AR124303A1 (es) 2023-03-15
IL303356A (en) 2023-08-01
DOP2023000119A (es) 2023-07-09
CO2023007624A2 (es) 2023-06-30
AU2021395816A9 (en) 2025-03-13
AU2021395816A1 (en) 2023-07-13
US20220185817A1 (en) 2022-06-16
WO2022122876A1 (en) 2022-06-16
LT4259632T (lt) 2024-10-10
CR20230264A (es) 2023-07-26
ECSP23050553A (es) 2023-08-31
HRP20241312T1 (hr) 2024-12-20
SI4259632T1 (sl) 2024-12-31
CN116583285A (zh) 2023-08-11
CA3203569A1 (en) 2022-06-16
US20240182479A1 (en) 2024-06-06
DK4259632T3 (da) 2024-10-21
ZA202306848B (en) 2024-04-24
US11866405B2 (en) 2024-01-09
JP7749015B2 (ja) 2025-10-03
EP4259632B1 (en) 2024-07-24
PT4259632T (pt) 2024-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11161855B2 (en) Tricyclic fused thiophene derivatives as JAK inhibitors
JP7177825B2 (ja) スピロ環化合物並びにその作製及び使用方法
JP7257387B2 (ja) スピロ環化合物並びにその作製及び使用方法
KR20160099705A (ko) Gpr6의 테트라하이드로피리도피라진 조절제
US12448385B2 (en) Substituted indazoles as IRAK4 inhibitors
JP2025020096A (ja) Ｉｒａｋ４阻害剤
TW202417435A (zh) 用於治療之parp14之靶向蛋白質降解
EA048052B1 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ N-(ИМИДАЗО[1,2-b]ПИРИДАЗИН-3-ИЛ)-1-ЦИКЛОГЕКСИЛ-2H-ИНДАЗОЛ-5-КАРБОКСАМИДА И N-(ПИРАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-3-ИЛ)-1-ЦИКЛОГЕКСИЛ-2H-ИНДАЗОЛ-5-КАРБОКСАМИДА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ IRAK4 ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АСТМЫ
HK40102588B (zh) N-(咪唑并[1,2-b]]哒嗪-3-基)-1-环己基-2h-吲唑-5-甲酰胺和 n-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-环己基-2h-吲唑-5-甲酰胺衍生物作为 irak4抑制剂用於治疗哮喘
HK40102588A (zh) N-(咪唑并[1,2-b]]哒嗪-3-基)-1-环己基-2h-吲唑-5-甲酰胺和 n-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-环己基-2h-吲唑-5-甲酰胺衍生物作为 irak4抑制剂用於治疗哮喘
TWI902994B (zh) Ｉｒａｋ４抑制劑、藥物組成物及其用途
RU2781639C2 (ru) Спироциклические соединения и способы их получения и применения