TW202200127A - 用於治療化學療法引起的腹瀉之方法及組合物 - Google Patents

Abstract

本文提供一種治療腹瀉的方法，其係向有此需要之患者投與足以治療腹瀉之量之氯離子轉運抑制劑。腹瀉之治療包括治療該腹瀉以及疼痛、腹部不適及與腹瀉相關之其他症狀。在一個實施例中，該氯離子轉運抑制劑為克羅非馬(crofelemer)。

Description

用於治療化學療法引起的腹瀉之方法及組合物

本發明係關於預防、改善及/或治療腹瀉之方法。更特定言之，本文中所提供之方法使用原花青素(諸如克羅非馬(crofelemer))與化學治療劑組合預防、改善或治療化學療法引起之腹瀉(CID)。

腹瀉在人類癌症患者中經常發生，其可由放射線療法、化學治療劑、體能下降、移植物抗宿主疾病及感染或其組合引起。特定而言，化學療法引起之腹瀉(CID)為常見的，尤其在患有晚期癌症之患者中，且必須評定致病源是否與化學治療療程相關[Gibson, R.及Stringer, A., Curr Opin Support Palliat Care 3: 31-35, 2009]。仔細分析可使得較好地控制腹瀉症狀以預防可能不可逆之嚴重併發症[Davila, M.及Bresalier, R., Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol 5: 682-696, 2008；Vincenzi, B.等人，Nat Clin Pract Oncol 5: 455-465, 2008]。後遺症可包括脫水、營養不良、心臟血管問題及甚至死亡。

視化學療法療程而定，CID極其普遍，估計患者中發病率在約50%至80%之間[Benson, A.等人，J Clin Oncol 22: 2918-2926, 2004；Gibson, R.及Stringer, A., Curr Opin Support Palliat Care 3: 31-35, 2009]，尤其彼等用5-氟尿嘧啶推注或伊立替康(irinotecan)及氟嘧啶之一些組合療法(IFL，XELIRI)治療的患者。無論酪胺酸激酶抑制劑及抗體之分子靶向方法如何，腹瀉為高達60%之患者的常見副作用，其中高達10%患有嚴重腹瀉。此外，潛在的病理生理學仍然在研究中。

通常引起腹瀉之治療劑包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他濱(capecitabine)及伊立替康(CPT-11) [Benson, A.等人，J Clin Oncol 22: 2918-2926, 2004；Keefe, D.等人，Semin Oncol Nurs 20: 38-47, 2004]。其通常為劑量相關之副作用且可與毒性之其他特徵相關。CID似乎為多因素過程，藉此對腸黏膜之急性損傷(包括腸上皮細胞之損失、表面壞死及腸壁發炎)造成小腸之吸收與分泌之間的不平衡[Keefe, D.等人，Gut 47: 632-637, 2000；Keefe, D. Support Care Cancer 15: 483-490, 2007；Gibson, R.及Stringer, A., Curr Opin Support Palliat Care 3: 31-35, 2009]。

未經治療、危及生命之胃腸綜合症由兩個國家癌症研究所(National Cancer Institute)所贊助之合作小組試驗識別為嚴重併發症。此等試驗審查伊立替康加高劑量氟尿嘧啶及甲醯四氫葉酸用於晚期結腸直腸癌時出現之早期毒性死亡，且強調對此嚴重併發症進行警惕性監測及積極治療之需要[Conti, J.等人，J Clin Oncol 14: 709-715, 1996；Arbuckle, R.等人，Oncologist 5: 250-259, 2000；Saltz L.等人，N Engl J Med 343: 905-914, 2000]。另外，腹瀉可藉由造成給藥延遲、減少或使用替代性藥劑來妨礙化學療法及其他癌症治療，其可能對存活率產生最終影響[Engelking, C.等人, Oncol Nurs Forum 25: 859-860 1998；Ippoliti, A., Am J Health Syst Pharm 55: 1573-1580, 1998]。

因此，正接受化學療法之人類個體中之藥物相關腹瀉表示需要更有效管理之重要且未滿足的臨床需求。目前開處之療法僅為部分有效的或受到不可接受的副作用之困擾，諸如便秘及潛在的成癮。開發用於治療化學療法相關之腹瀉之藥物將為正接受化學療法之個體提供重要的益處，該藥物具有較低的藥物-藥物交互作用之可能性、對藥物代謝之影響或濫用可能性。

本文中揭示預防、改善及/或治療正投與或已投與化學療法療程之人類個體中之腹瀉的方法。在一個實施例中，本文中所提供之方法預防、改善或治療化學療法引起之腹瀉(CID)。

在一個態樣中，本文中提供治療正接受化學療法(尤其進行癌症治療)之人類個體中之CID的方法，其包含向有此需要之個體投與包含有效量之來自龍血巴豆(C. lechleri )之原花青素聚合物組合物(較佳地克羅非馬)的組合物以治療、改善或預防CID。在某些實施例中，克羅非馬為受腸道保護之調配物。在某些實施例中，投與化學療法以治療、改善、控制或預防癌症。

根據某些實施例，克羅非馬可與其他化學治療劑組合投與。

在一個實施例中，在投與化學療法之同時投與克羅非馬以減少或延緩CID之發作。

在某些實施例中，根據國家癌症研究所(the National Cancer Institute)之通用毒性準則(Common Toxicity Criteria)，個體表現出1級、2級、3級或4級腹瀉。

在一個實施例中，在投與化學療法之前投與克羅非馬以減少或延緩CID之發作。

在一個實施例中，在投與化學療法之後投與克羅非馬以減少CID之發作或治療CID。

在某些實施例中，投與克羅非馬以降低CID之風險、發生率或嚴重程度，使得人類個體可耐受具有作為副作用之CID的特定化學治療劑或具有作為副作用之CID之更高劑量的化學治療劑。

在一個實施例中，化學治療劑係選自烷基化劑、蒽環黴素(anthracyclines)、細胞骨架瓦解劑(紫杉烷(taxane))、埃博黴素(epothilones)、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、拓樸異構酶I之抑制劑、拓樸異構酶II之抑制劑、激酶抑制劑、核苷酸類似物及前驅體類似物、肽抗生素、基於鉑之藥劑及類視黃素。

在一個實施例中，化學治療劑包含一或多種酪胺酸激酶抑制劑。酪胺酸激酶抑制劑(TKI)具有選自以下之目標：上皮生長因子受體(EGFR)、VEGFR (例如，VEGFR-1、VEGFR-2及/或VEGFR-3)；AXL、RET、TYRO3、MER、KIT、TRKB、FLT-3、CSF-1R、間變性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase；ALK)、ROS-1 (c-ros)；肝細胞生長因子受體(HGFR)、c-Met、RON、血小板衍生生長因子受體(PDGFR) α及β、纖維母細胞生長因子受體(FGFR1、2、3或4)、KIT、Lck、Fms、Itk、BRAF、突變體BRAF、c-CRAF、BRK、EPHR及TIE-2。在一個實施例中，化學治療劑包含一或多種EGFR TKI。在一個實施例中，化學治療劑包含一或多種泛ErbB受體TKI。在一個實施例中，化學治療劑包含EGFR TKI及泛ErbB受體TKI。

在一個實施例中，酪胺酸激酶抑制劑係選自拉帕替尼(lapatinib)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、阿西替尼(axitinib)、伊馬替尼(imatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、達沙替尼(dasatinib)、卡博替尼(cabozantinib)、蘆可替尼(ruxolitinib)、奈拉替尼(neratinib)、伯舒替尼(bosutinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、阿法替尼(afatninib)、侖伐替尼(lenvatinib)、圖卡替尼(tucatinib)、凡德他尼(vandetanib)、色瑞替尼(ceritinib)、克唑替尼(crizotinib)、達可替尼(dacomitinib)及伐拉替尼(valatinib)。

在一個實施例中，化學療法為磷酸肌醇3-激酶抑制劑，諸如阿培利司(alpelisib)。

在一個實施例中，化學療法為週期素依賴性激酶 (cyclin-dependent kinase；CDK) 4/6/抑制劑，視情況為阿貝西利(abemaciclib)。

在一個實施例中，化學療法包含一或多種人類表皮生長因子受體(hEGFR)抑制劑之HER。

在一個實施例中，HER抑制劑係選自RG7116、RG1273 (帕妥珠單抗(pertuzumab)，Perjeta®)、RG3502 (曲妥珠單抗(trastuzumab)依曼他星(emantasine)，T-DMI)、RG597 (曲妥珠單抗，HERCEPTIN)、RGA201 (RG7160)、埃羅替尼(Tarceva®)、達可替尼(PF-00299804)、PF-05280014 (輝瑞(Pfizer)之RG597之生物類似藥mAB)。

在各種實施例中，化學療法療程包含兩種或更多種HER抑制劑(諸如曲妥珠單抗及帕妥珠單抗)及一或多種化學治療劑，諸如紫杉烷，如多西他賽(docetaxel)或太平洋紫杉醇(paclitaxel)。在各種實施例中，化學療法療程進一步包含基於鉑之抗腫瘤藥，諸如卡鉑。

在各種實施例中，化學療法療程包含HER抑制劑，諸如曲妥珠單抗或帕妥珠單抗；酪胺酸激酶抑制劑，諸如奈拉替尼；及紫杉烷，諸如多西他賽或太平洋紫杉醇。在各種實施例中，化學療法療程進一步包含基於鉑之抗腫瘤藥，諸如卡鉑。

在各種實施例中，化學療法療程經每三週投與一次。

在各種實施例中，在個體開始表現出CID之症狀之後投與克羅非馬。

在某些實施例中，在採用化學療法治療期間投與克羅非馬。

在某些實施例中，個體正接受化學療法以治療一或多種形式之癌症，諸如乳癌。

在某些實施例中，投與克羅非馬直至CID之症狀改善，然後停止投與克羅非馬。

在各種實施例中，投藥包含：向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，尤其調配為經口投藥之錠劑的受腸道保護之克羅非馬。在其他實施例中，克羅非馬經調配用於經口投藥但未受腸道保護，例如不具有腸溶衣。在其他實施例中，原花青素聚合物組合物之劑量與每天約250 mg至約1000 mg；每天約250 mg；每天約500 mg；每天約1000 mg；每天兩次約125 mg；每天兩次約250 mg；或每天兩次約500 mg之受腸道保護之克羅非馬的口服劑型等效。

在一個態樣中，本文中提供治療正接受化學療法之個體之糞便硬度的方法，其包含：向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，尤其調配為用於經口投藥之錠劑之受腸道保護的克羅非馬(或為與受腸道保護之克羅非馬調配物之劑量生物等效的一定劑量之原花青素聚合物組合物)。

在一個態樣中，本文中提供改善正接受化學療法之個體之糞便硬度的方法，其包含：向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，尤其調配為用於經口投藥之錠劑之受腸道保護的克羅非馬(或為與受腸道保護之克羅非馬調配物之劑量生物等效的一定劑量之原花青素聚合物組合物)。

在一個態樣中，本文中提供緩解正接受化學療法之個體之水樣腹瀉的方法，其包含：向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，尤其調配為用於經口投藥之錠劑之受腸道保護的克羅非馬(或為與受腸道保護之克羅非馬調配物之劑量生物等效的一定劑量之原花青素聚合物組合物)。

在一個態樣中，本文中提供減少正接受化學療法之個體之每天排便次數的方法，其包含：向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，尤其調配為用於經口投藥之錠劑之受腸道保護的克羅非馬(或為與受腸道保護之克羅非馬調配物之劑量生物等效的一定劑量之原花青素聚合物組合物)。

劑量可為含有來自龍血巴豆之原花青素聚合物組合物之組合物的量，其與受腸道保護之克羅非馬調配物之劑量生物等效。

在一個實施例中，若個體顯示以下中之一或多者：每天排便次數減少、每天水樣排便次數減少、疼痛或不適之每天或每週腹部評分改善、每天糞便硬度之評分改善、糞便硬度評分減小(自水樣至成形)、個體經歷尿急之每週天數減少、個體經歷大便失禁之每週天數減少，則該人類個體視為已經治療。

在一個實施例中，若個體顯示每天糞便硬度之評分改善，則人類個體視為已經治療。

在一個實施例中，若個體顯示糞便硬度減小，則人類個體視為已經治療。

在一個實施例中，若個體顯示每天水樣排便次數減少，則人類個體視為已經治療。

在一個實施例中，若個體顯示每天排便次數減少，則人類個體視為已經治療。

在一個實施例中，自基線量測增加或減少之症狀。

在一個實施例中，在化學療法期間進行投藥。

在一個實施例中，在比化學療法週期長約1至約6週內進行投藥。

在一個實施例中，在約3至12週內進行投藥。

下文揭示其他實施例。

某些化學療法可在人類個體中造成化學療法引起之腹瀉(CID)，其可造成痛苦，不利地影響個體健康及幸福，使化學療法難以耐受，使得個體必須服用較低劑量之化學治療劑或停止服用化學治療劑或切換至不同的治療療程，但對於CID，該化學治療劑可能對癌症之治療更有效。龍血巴豆之原花青素聚合物組合物(尤其克羅非馬)，且更特定言之，經調配用於經口投藥之包覆腸溶包衣的克羅非馬以及SB300減少、改善、預防或消除正接受化學療法之個體之CID症狀。因此，投與克羅非馬或龍血巴豆之其他原花青素聚合物組合物可准許個體耐受某些化學治療療程，或耐受更高、更有效劑量之某些化學治療療程。

本文中所揭示之方法涉及向患有例如化學療法引起之腹瀉(CID)或處於罹患CID之風險下的正接受化學療法之個體投與有效量的原花青素聚合物，例如克羅非馬。 I.   定義

當術語以單數形式提供時，本發明人亦考慮由術語之複數描述之本發明之態樣。如在本說明書及所附申請專利範圍中所使用，除非上下文明確規定，否則單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數參考物，例如，「化合物」包括複數種化合物。因此，舉例而言，對「方法」之參考包括一或多種方法及/或本文中所描述之類型之步驟，且/或在閱讀本發明時，其對於彼等熟習此項技術者將變得顯而易見。

「改善(Ameliorate/amelioration)」、「改善(improvement)」或類似者係指例如在個體或至少少數個體中發生之可偵測的改善或與改善一致之可偵測的變化，例如在至少約2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、100%或在此等值中之任意兩者之間的範圍內。與未用克羅非馬治療之個體相比，此類改善或變化可在經治療個體中觀測到，其中未經治療之個體患有相同或類似疾病、病況、症狀或其類似者，或為罹患相同或類似疾病、病況、症狀或其類似者之個體。疾病、病況、症狀或分析參數之改善可主觀或客觀地測定，例如由個體自我評定、藉由臨床醫師之評定或藉由進行適當的分析或量測。改善可為短暫的、長期的或永久的或其可在向個體投與克羅非馬期間或之後的相關時間為可變的，或用於分析或本文中所描述之其他方法或所引用之參考物中，例如在下文所描述之時間範圍內，或在投藥後約1小時或使用克羅非馬直至個體已接受此類治療之後的約7天、2週、28天或1、3、6、9個月或更多個月內。

對例如分子之症狀、含量或生物活性或其類似者之「調節」係指例如症狀或活性或其類似者可偵測地增加或減少。與未用克羅非馬治療之個體相比，此類增加或減少可在經治療之個體中觀測到，其中未經治療之個體具有相同或類似疾病、病況、症狀或其類似者，或為罹患相同或類似疾病、病況、症狀或其類似者之個體。此類增加或減少可為至少約2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、100%、150%、200%、250%、300%、400%、500%、1000%或更多或在此等值中之任兩者之間的任何範圍內。調節可主觀或客觀地測定。調節可為短暫的、長期的或永久的或其可在向個體投與克羅非馬期間或之後的相關時間為可變的，或用於分析或本文中所描述之其他方法或所引用之參考物中，例如在下文所描述之時間內，或投藥後約1小時或使用克羅非馬直至個體已接受克羅非馬之後的約2週、28天、3、6、9個月或更多個月內。

如本文中所使用，「個體」包括動物，包括正接受化學療法且患有CID或處於CID之風險下，或可獲益於投與如本文中所描述之克羅非馬的人類，諸如人類個體。

化合物之術語「治療有效量」係指在對個體進行單一劑量或多劑量投藥後，在治療、控制或改善化學療法引起之腹瀉之症狀方面有效的克羅非馬之量。

化合物之術語「預防有效量」係指在對個體進行單一劑量或多劑量投藥後，在預防CID方面有效的克羅非馬之量。

術語「投藥」或「投與」包括向個體引入克羅非馬以執行其預期功能之途徑。可使用之投藥途徑之實例包括注射、經口、吸入、經陰道、經直腸及經皮。醫藥製劑可以適用於各投藥途徑之形式給予。舉例而言，此等製劑以錠劑或膠囊形式，藉由注射、吸入、軟膏或栓劑投與。投藥亦可藉由注射、輸注或吸入進行；藉由洗劑或軟膏來局部進行；及藉由栓劑經直腸進行。較佳為經口投藥。視投藥途徑而定，克羅非馬可塗佈有所選擇之材料或安置於所選擇之材料中以保護其免受可能不利地影響其執行其預期功能之能力的天然條件。克羅非馬可單獨投與，或與另一藥劑或如上文所描述之藥劑或與醫藥學上可接受之載劑或兩者結合投與。克羅非馬之例示性包覆腸溶包衣形式描述於例如美國專利7,556,831中。

與一或多種其他治療劑「組合」投藥包括按任何次序同時(simultaneous/concurrent)及連續投藥。

片語「醫藥學上可接受」係指如本文中所描述之克羅非馬、含有克羅非馬之組合物及/或劑型，其在合理的醫學判斷之範疇內，適用於與人類及動物之組織接觸使用而無過多毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理的益處/風險比相稱。

片語「醫藥學上可接受之載劑」包括醫藥學上可接受之材料、組合物或媒劑，諸如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或密封材料，其涉及將主體化學物質自人體之一個器官或部分運載或輸送至人體之另一器官或部分。

如本文中所使用，術語「治療(treat/treatment)」意欲包括減輕或改善由化學療法所引起或由投與一或多種療法引起之病況或一或多種症狀的進展、嚴重程度及/或持續時間。

舉例而言，治療CID可包括改善以下CID之症狀，包括例如，每天排便次數(頻率)減少、每天水樣排便次數減少、症狀頻率(尿急、大便失禁)減少、症狀嚴重程度(腹痛或不適)降低、每天糞便硬度評分(水樣至成形)減小或由水樣糞便產生成形糞便之糞便硬度降低。化學療法引起之腹瀉的嚴重程度可根據國家癌症研究所改編之腹瀉通用毒性準則(Common Toxicity Criteria for diarrhea)來表徵(參見例如，Stein等人,Ther. Adv. Med. Oncol. 2:51-43 (2010))。在此準則中，1級為比基線每天增加超過4次大便(或與基線相比造口術輸出輕度增加)；2級為比基線每天增加4至6次大便(與基線相比造口術輸出中度增加)；3級為比基線每天增加超過7次大便，指示失禁及住院之發生率(與基線相比造口術輸出嚴重增加)；且4級為危及生命之後果，指示需要緊急干預。因此，治療可包括降低準則之一、二或三個等級。

如在「獲得克羅非馬」中之術語「獲得」意欲包括購買、合成、分離、萃取或以其他方式獲取克羅非馬。

如在耐受特定化學治療劑中之術語「耐受(tolerate/tolerance)」意謂個體不會遭受如此嚴重之副作用以至於損害個體之健康及幸福，在一定程度上損害超過化學療法之益處，或個體由於副作用而不與化學治療療程相容。 II. 活性化合物  A.  原花青素

原花青素為一組濃縮鞣質(tannin)。已展示在動物測試中具有止瀉品質的來自藥用植物(例如，非洲肉豆蔻(Pycanthus angolenis)及巴非豆(Baphia nitida))的粗萃取物(Onwukaeme及Anuforo, 1993, Discovery and Innovation, 5:317；Onwukaeme及Lot, 1991, Phytotherapy Res., 5:254)。含有鞣質之粗萃取物，尤其來自角豆莢(carob pods)及甜栗木之萃取物，已提議作為治療劑或預防劑(美國專利第5,043,160號；歐洲專利第481,396號)。

原花青素係由至少兩個或更多個可具有相同或不同單體結構之單體單元組成。單體單元(通常稱為「無色花青素(leucoanthocyanidin)」)通常為單體類黃酮，其包括兒茶素、表兒茶素、沒食子兒茶素(gallocatechins)、沒食子表兒茶素(galloepicatechins)、黃烷醇、黃酮醇及黃烷-3,4-二醇、無色花青素及花青素。因此，聚合物鏈係基於不同的結構單元，其產生多種多樣聚合原花青素及大量可能的異構體(Hemingway等人, 1982, J. C. S. Perkin, 1:1217)。類黃酮3-醇單元之較大聚合物在大部分植物中佔主導性，且發現平均分子量高於2,000道爾頓，含有6個或更多個單元(Newman等人, 1987, Mag. Res. Chem., 25:118)。

原花青素聚合物存在於廣泛多種的植物中，尤其彼等具有木本生長習性之植物(例如，巴豆屬及海棠屬)。在南美洲發現之多種不同的巴豆樹種，包括仙人掌巴豆(Croton sakutaris)、八卦葉巴豆(Croton gossypifolius)、帕拉諾花柱巴豆(Croton palanostima)、龍血巴豆(Croton lechleri)、樹皮紅唇巴豆(Croton erythrochilus)及擬龍血巴豆(Croton draconoides)，產生紅色黏稠的乳膠汁液，稱為龍血樹(Sangre de Drago)或「龍血竭(dragon's blood)」。美國專利第5,211,944號首先描述自巴豆屬植物分離水溶性原花青素聚合物組合物及使用該組合物作為抗病毒劑(亦參見Ubillas等人, 1994, Phytomedicine, 1:77)。原花青素聚合物組合物展示對各種病毒具有抗病毒活性，包括呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒及疱疹病毒。美國專利第5,211,944號亦揭示自海棠果(Calophyllum inophylum)分離水溶性原花青素聚合物組合物及使用此組合物作為抗病毒劑。

適用於本文中所展示之方法的例示性原花青素聚合物組合物較佳藉由此項技術中已知之任何方法自巴豆屬植物或海棠屬植物分離。舉例而言，原花青素聚合物組合物可藉由美國專利第5,211,944號中或Ubillas等人, 1994, Phytomedicine 1: 77-106中所揭示之方法自巴豆屬或海棠屬植物分離。

在一個特定實施例中，適用於本文中所展示之方法中的原花青素聚合物組合物為克羅非馬。

克羅非馬為自大戟科(Euphorbiace family)之植物龍血巴豆之紅色黏稠乳膠萃取且純化之寡聚原花青素。植物廣泛分佈於整個熱帶中美洲及南美洲且由於其藥用特性(包括治療腹瀉)被民族植物學家及當地治療師廣泛認可(McRae 1988)。咸信克羅非馬經由內腔阻滯囊性纖維化跨膜傳導調節蛋白(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator；CFTR)氯(Cl-)通道來發揮其止瀉作用。克羅非馬已證明對霍亂毒素、毛喉素(forskolin)、大腸桿菌LT及STa毒素介導之Cl-分泌具有活體外活性，且經由其對CFTR通道之影響使CT-處理之小鼠中的電解質及積液正常化(Gabriel 1999, Fischer 2004, Adam 2005)。克羅非馬亦顯著改善由於腸毒性大腸桿菌引起之人體內的分泌性腹瀉(DiCesare 2002)，亦認為其經由活化CFTR引起分泌性腹瀉(Kunzelmann 2002)。可預期CFTR通道之阻滯對男性產生負面結果，甚至模擬囊腫纖維化。然而，克羅非馬在人體中幾乎沒有全身生物可用性。在研究時，結果指示很少或沒有腸胃道吸收克羅非馬，且正常男性個體對克羅非馬之耐受性良好。因此，克羅非馬之作用位點在胃腸道中為局部的。

克羅非馬(CAS 148465-45-6)為不同鏈長之寡聚原花青素，其來源自大戟科之血竭龍血巴豆。克羅非馬之平均分子量在約1500道爾頓與約2900道爾頓之間。包含克羅非馬之單體包含兒茶素、表兒茶素、沒食子兒茶素及表沒食子兒茶素。克羅非馬之鏈長介於約3至約30個單位之範圍內，平均鏈長為約8個單位。克羅非馬之結構顯示如下。

其中平均值n=6。

分離克羅非馬之其他方法可見於美國專利公開案第2005/0019389號中，其內容明確地併入本文中。

另外，原花青素聚合物組合物可為SB 300，例如由Fischer, H.等人, (2004,J. Ethnopharmacol. , 93(2-3):351-357)所描述。SB300為天然產物萃取物，其尤其適用於非包覆腸溶衣或受保護之調配物及組合物。在一實施例中，包含來自龍血巴豆之原花青素聚合物且用於本發明之治療方法中的醫藥學上可接受之組合物可獲自龍血巴豆，例如，如Shaman Pharmaceuticals, Inc.之WO 00/47062中所描述，其內容併入本文中，且調配為食物或膳食補充劑或營養調配物，尤其非包覆腸溶衣之調配物。

在其他實施例中，獲自巴豆屬種類及海棠屬種類之原始乳膠或獲自巴豆屬種類及海棠屬種類之萃取物適用於本文中所展示之方法。例示性萃取物描述於Persinos等人, 1979, J. Pharma. Sci. 68:124及Sethi, 1977, Canadian J. Pharm. Sci. 12:7中。 B.  與化學治療劑之組合

本文中所描述之原花青素可與用於本文中所描述之方法中的癌症藥物/化學治療劑組合以治療CID。癌症藥物及癌症化學治療劑為通用術語，其含義包括術語癌症藥物、癌症化學治療藥物、癌症藥劑、癌症化學療法、化學治療藥物、化學治療劑、化學療法、化學療法藥物、癌症化合物、癌症化合物療法、化學療法化合物及癌症藥物療法。此類化學療法應亦意謂以下化學物質：可抑制癌症細胞路徑；可用於活體外殺滅癌細胞；可用於活體內殺滅癌細胞，如在癌症腫瘤中；且在一些情況下可用於治療罹患癌症之個體以保護癌症患者之正常細胞的生存力或攻擊癌症患者之癌細胞的生存力。

藉助於僅作為實例而不意欲限制本發明之範疇，且更特定地指出，本發明之實踐為化學治療劑的以下實例及組合使用。亦列出可由化學治療劑靶向之多個細胞路徑。大體而言，癌症化學治療藥物以醫藥組合物之形式使用，用於醫藥用途，或用於患者之治療方法中。

此處列出癌症藥物可能具有作用之細胞目標之實例，但不為限制性的。癌症化學治療劑之細胞目標包括以下經識別的目標：mTORC、RAF激酶、MEK激酶、磷酸肌醇激酶3、纖維母細胞生長因子受體、多酪胺酸激酶、人類表皮生長因子受體、血管內皮生長因子、其他血管生成因子、熱休克蛋白、平滑(Smo)受體、FMS樣酪胺酸激酶3受體、細胞凋亡蛋白抑制劑、週期素依賴性激酶、去乙醯酶、ALK酪胺酸激酶受體、絲胺酸/蘇胺酸-蛋白激酶Pim-1、豪豬醯基轉移酶、刺蝟路徑、蛋白激酶C、mDM2、Glypciin 3、ChK1、肝細胞生長因子MET受體、類表皮生長因子結構域7、Notch路徑、Src-家族激酶、DNA甲基轉移酶、DNA嵌入劑、胸苷合成酶、微管功能瓦解劑、DNA交聯劑、DNA鏈裂解劑、DNA烷基化劑、JNK依賴性p53 Ser15磷酸化誘導劑、DNA拓樸異構酶抑制劑、Bcl-2及自由基產生劑。

在各種實施例中，化學治療劑係選自烷基化劑、蒽環黴素、細胞骨架瓦解劑(紫杉烷)、埃博黴素、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、拓樸異構酶I之抑制劑、拓樸異構酶II之抑制劑、激酶抑制劑、核苷酸類似物及前驅體類似物、肽抗生素、基於鉑之藥劑及類視黃素。

在特定實施例中，化學治療劑為癌症生長抑制劑。癌症生長抑制劑為一種類型之生物療法且包括酪胺酸激酶抑制劑及HER2抑制劑、蛋白酶體抑制劑、mTOR抑制劑、PI3K抑制劑、組蛋白去乙醯基酶抑制劑及刺蝟路徑阻斷劑。

在一特定實施例中，化學治療劑為一或多種酪胺酸激酶抑制劑(TKI)。

酪胺酸激酶為負責藉由信號轉導級聯來活化諸多蛋白質之酶。蛋白質藉由將磷酸基團添加至蛋白質中(磷酸化)來活化。酪胺酸激酶抑制劑(TKI)通常用作抗癌藥物。TKI藉由四種不同機制起作用：其可與三磷酸腺苷(ATP)、磷酸化實體、受質或兩者競爭或可以立體異位方式起作用，亦即與活性位點之外的位點結合，藉由構形變化影響其活性。TKI為酪胺酸磷酸化之小分子量抑制劑，其不會抑制使絲胺酸或蘇胺酸殘基磷酸化之蛋白激酶，且可在EGFR之激酶結構域與胰島素受體之激酶結構域之間進行區分。其進一步展示，儘管酪胺酸-激酶結構域守恆，但吾人可設計且合成在甚至緊密相關之蛋白酪胺酸激酶(諸如EGFR)與其緊密近親HER2之間進行區分的TKI。

酪胺酸激酶抑制劑之特定實例包括拉帕替尼、舒尼替尼、索拉非尼、埃羅替尼、吉非替尼、阿西替尼、伊馬替尼、尼羅替尼、達沙替尼、卡博替尼、蘆可替尼、奈拉替尼、伯舒替尼及伐拉替尼。

在一特定實施例中，化學治療劑為一或多種人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑。

由HER2活化之信號傳導路徑包括：有絲分裂原活化之蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase；MAPK)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K/Akt)、磷脂酶C γ、蛋白激酶C (PKC)及信號轉導子及轉錄活化因子(STAT)。經由ErbB受體家族之信號傳導促進細胞增殖且對抗細胞凋亡，且因此必須嚴格調控以防止不受控的細胞生長發生。ERBB2基因之擴增或過度表現與疾病復發增加及預後不佳密切相關。亦已知在乳癌、卵巢癌、胃癌及侵襲性子宮癌(諸如子宮漿液性子宮內膜癌)中出現過度表現。HER2與基因GRB7共定位且大多數情況下與基因GRB7共擴增，該基因GRB7為與乳腺、睪丸生殖細胞、胃及食管腫瘤相關之原癌基因。HER2蛋白已展示在細胞膜上形成簇，其可在腫瘤形成中起作用。人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑之特定實例包括RG7116、RG1273 (帕妥珠單抗，Perjeta®)、RG3502 (曲妥珠單抗依曼他星，T-DMI)、RG597 (曲妥珠單抗，HERCEPTIN)、RGA201 (RG7160)、埃羅替尼(Tarceva®)、達可替尼(PF-00299804)、PF-05280014 (輝瑞之RG597之生物類似藥mAB)。

通常用於癌症患者中之癌症化學治療藥物之通用名稱包括：多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、5-氟尿嘧啶、太平洋紫杉醇、多西他賽、順鉑(cisplatin)、博萊黴素(bleomycin)、美法侖(melphalan)、白花丹素(plumbagin)、伊立替康、絲裂黴素-C及米托蒽醌(mitoxantrone)。藉助於實例，可使用且可處於臨床試驗階段之一些其他癌症化學治療藥物包括：瑞諾司他(resminostat)、他喹莫德(tasquinimod)、瑞法替尼(refametinib)、拉帕替尼、泰維伯(Tyverb)、阿倫格爾(Arenegyr)、帕瑞肽(pasireotide)、絲尼芬(Signifor)、替西單抗(ticilimumab)、曲美木單抗(tremelimumab)、蘭索那唑(PrevOnco)、ABT-869、利尼法尼(linifanib)、替伐替尼(tivantinib)、特羅凱(Tarceva)、埃羅替尼、拜萬戈(Stivarga)、瑞戈非尼(regorafenib)、氟代索拉非尼、布立尼布(brivanib)、脂質多柔比星、侖伐替尼、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、維甲酸(peretinoin)、如克奧(Ruchiko)、母帕司汀(muparfostat)、替吉奧(Teysuno)、喃氟啶(tegafur)、吉美拉西(gimeracil)、奧替拉西(oteracil)及奧侖替尼(orantinib)。

可用於本發明中之經FDA批准之癌症藥物(通用名稱)的實例包括：索拉非尼、瑞戈非尼、伊馬替尼、艾瑞布林(eribulin)、吉西他濱(gemcitabine)、卡培他濱、帕唑帕尼、拉帕替尼、達拉非尼(dabrafenib)、蘋果酸舒尼替尼、克唑替尼、依維莫司(everolimus)、托瑞西羅莫司(torisirolimus)、西羅莫司(sirolimus)、阿西替尼、吉非替尼、阿那曲唑(anastrozole)、比卡魯胺(bicalutamide)、氟維司群(fulvestrant)、雷替曲塞(ralitrexed)、培美曲塞(pemetrexed)、乙酸高瑟林(goserilin acetate)、埃羅替尼、維莫非尼(vemurafenib)、維索得吉(visiodegib)、檸檬酸他莫昔芬、太平洋紫杉醇、多西他賽、卡巴他賽(cabazitaxel)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、阿柏西普(ziv-aflibercept)、貝伐珠單抗(bevacizumab)、曲妥珠單抗、帕妥珠單抗、帕帝單抗(pantiumumab)、紫杉烷、博萊黴素、美法侖、白花丹素、開普拓(camptosar)、絲裂黴素-C、多柔比星、聚乙二醇化多柔比星、5-氟-尿嘧啶、替莫唑胺(temozolomide)、帕瑞肽、喃氟啶、吉美拉西、歐塔拉昔(oteraci)、硼替佐米(bortezomib)、來那度胺(lenalidomide)及羅米地新(romidepsin)。

可用於本發明中之一些癌症藥物的製造商品牌名稱包括：NEXAVAR (索拉非尼(sorafenb))、STIVARGA (瑞戈非尼)、AFINITOR (依維莫司)、GLEEVEC (伊馬替尼)、HALAVEN (艾瑞布林)、ALIMTA (培美曲塞)、GEMZAR (吉西他濱)、VOTRIENT (帕唑帕尼)、TYKERB (拉帕替尼)、TAFINIAR (達拉非尼)、SUTENT (蘋果酸舒尼替尼)、XALKORI (克唑替尼)、TORISEL (托瑞西羅莫司)、INLYTA (阿西替尼)、IRESSA (吉非替尼)、ARIMIDEX (阿那曲唑(anastrole))、CASODEX (比卡魯胺)、FASLODEX (氟維司群)、TOMUDEX (雷替曲塞)、ZOLADEX (乙酸高瑟林)、TARCEVA (埃羅替尼)、XELODA (卡培他濱)、ZELBROF (維莫非尼)、ERIVEDGE (維索得吉)、PERJETA (帕妥珠單抗)、HERCEPTIN (曲妥珠單抗)、TAXOTERE (多西他賽)、JEVTANA (卡巴他賽)、ELOXATIN (奧沙利鉑)、ZALTRAP (阿柏西普)、AVASTIN (貝伐珠單抗)諾瓦得士(Nolvadex)、伊圖巴爾(Istubal)及VALODEX (檸檬酸他莫昔芬)、TEMODAR (替莫唑胺)、SIGNIFOR (帕瑞肽)、VECTIBIX (帕帝單抗)、ADRIAMYCIN (多柔比星)、DOXIL (聚乙二醇化多柔比星)、ABRAXANE (太平洋紫杉醇)、TEYSUNO (喃氟啶、吉美拉西、奧替拉西)、BORTEZOMIB (萬珂(Velcade))及來那度胺、ISTODAX (羅米地辛)。

預期用於本發明之癌症藥物療法包括艾瑞莎(Iressa) (吉非替尼)、瑞寧得(Arimidex) (阿那曲唑)、康士得(Casodex) (比卡魯胺)、芙仕得(Faslodex) (氟維司群)、托穆戴克斯(Tomudex) (雷替曲塞)、諾雷德(Zoladex) (乙酸高瑟林)、諾瓦得士、伊圖巴爾及瓦洛地克斯(Valodex) (檸檬酸他莫昔芬)、愛必妥(Erbitux) (西妥昔單抗(cetuximab))、施達塞(Sprycel) (達沙替尼)、易莎平(Ixempra) (伊沙匹隆(ixabepilone))、紫杉醇 (太平洋紫杉醇)、鉑爾定(Paraplatin) (卡鉑)及易沃伊(Yervoy) (易普單抗(ipilumumab))、維必施(Vectibix) (帕帝單抗)、利妥木單抗(rilotumumab)、特伯納尼(trebananib)、利那木單抗(blinatumumab)、哈拉溫(Halaven) (艾瑞布林)、愛甯達(Alimta) (培美曲塞)及健擇(Gemzar) (吉西他濱)、維曲特(Votrient) (帕唑帕尼)、泰康達(Tykerb) (拉帕替尼)及達非尼(Tafiniar) (達拉非尼)、多希(Doxil) (多柔比星、阿德力黴素(adriamycin))、諾華(Temodar) (替莫唑胺)、阿飛尼妥(Afinitor) (依維莫司)、格列維克(Gleevec) (伊馬替尼)及絲尼芬(Signifor) (帕瑞肽)、多韋替尼(dovitinib)、米哚妥林(midostaurin)、帕比司他(panobinostat)、替吉奧(喃氟啶、吉美拉西、奧替拉西)、納維托克(navitoclax)、維利帕尼(velipariban)、利尼法尼、凝血栓蛋白、伊洛司他(ilorasertib)、艾伯維(elagolix)、阿曲生坦(atrasentan)、舒癌特(Sutent) (蘋果酸舒尼替尼)、夏克瑞(Xalkori) (克唑替尼)、托瑞斯(Torisel) (托瑞西羅莫司)、因塔(Inlyta) (阿西替尼)、達可替尼、伯舒替尼、特羅凱 (埃羅替尼)、截瘤達(Xeloda) (卡培他濱)、澤波拉夫(Zelbrof) (維羅非尼(vemurafenib))、艾麗維吉(Erivedge) (維索得吉)、帕傑它(Perjeta) (帕妥珠單抗)、賀癌平(Herceptin) (曲妥珠單抗)、癌思停(Avastin) (貝伐珠單抗)、克癌易(Taxotere) (多西他賽)、傑維坦(Jevtana) (卡巴他賽)、艾洛汀(Eloxatin) (奧沙利鉑)、紮爾拉普(Zaltrap) (阿柏西普)、依尼帕瑞(iniparib)、奈拉替尼(HKI-272)及奧瑞布林(ombrabulin)。 I.         III. 治療方法

本文中提供治療、預防或緩解由化學療法所引起之腹瀉或胃腸症狀之方法，其包含向有此需要之個體單獨或與化學治療劑組合投與有效量之克羅非馬。可使用本文中所展示之方法治療或預防之例示性腹瀉包括CID。個體較佳地為人類。

在一個實施例中，治療CID包括改善以下CID之症狀，包括例如，每天排便次數(頻率)減少、每天水樣排便次數減少、症狀頻率(尿急、大便失禁)減少、症狀嚴重程度(腹痛或不適)降低、每天糞便硬度評分(水樣至成形)減小或由水樣糞便產生成形糞便之糞便硬度降低。在某些實施例中，治療使得腹瀉通用毒性準則之等級降低，例如自4級降低至3級、2級或1級；或自3級降低至2級或1級；或自2級降低至1級。在某些實施例中，治療引起改善，使得個體不符合通用毒性準則等級中之任一者，亦即不再罹患腹瀉。

在其他特定實施例中，治療亦可包括例如以下中之一或多者：每天排便次數減少、每天水樣排便次數減少、每天疼痛或不適之腹部評分改善、每天糞便硬度之評分改善、個體經歷尿急之每週或每月天數減少或個體經歷大便失禁之每週或每月天數減少。

在一個態樣中，本文中提供治療正接受化學療法之個體之CID的方法，其包含向有此需要之個體投與包含有效量之克羅非馬之組合物以治療CID。在特定實施例中，克羅非馬為包覆腸溶衣之口服劑型。在其他實施例中，克羅非馬為未受腸溶衣保護之口服劑型。

在一個實施例中，在進行化學療法的同時投與克羅非馬以減少或延緩CID之發作。在一個實施例中，在化學療法之前投與克羅非馬以減少或延緩CID之發作。在一個實施例中，在化學療法之後投與克羅非馬以減少CID之發作或治療CID。

CID可為化學療法之不良副作用，尤其在治療癌症之化學療法中。在一些實施例中，CID可能嚴重至足以干擾個體之化學療法療程，因為CID會導致對化學療法療程缺乏耐受性或耐受性降低。因此，在某些實施例中，提供增加個體對某種化學治療劑或療程之耐受性的方法，使得個體可耐受且可接受投與推薦劑量之化學治療劑或可接受投與化學治療劑。

在一些實施例中，個體正接受化學療法以治療一或多種形式之癌症。一或多種形式之癌症可選自乳癌、卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、腎癌、甲狀腺癌、口腔癌或口咽癌、星形細胞瘤、肉瘤、間皮瘤、脊膜瘤、淋巴瘤、骨髓瘤、頭頸癌、肺癌、癌瘤(例如，鱗狀細胞癌)、惡性黑色素瘤、腹膜癌、胃癌、肝癌、結腸直腸癌、膽囊癌、骨癌、胰臟癌、舌癌、食道癌、腦瘤、腦幹神經膠質瘤、其轉移瘤及白血病。

在一個實施例中，化學療法包含一或多種酪胺酸激酶抑制劑。

在一個實施例中，酪胺酸激酶抑制劑係選自拉帕替尼、舒尼替尼、索拉非尼、埃羅替尼、吉非替尼、阿西替尼、伊馬替尼、尼羅替尼、達沙替尼、卡博替尼、蘆可替尼、奈拉替尼、伯舒替尼、妥賽蘭尼(toceranib)及伐拉替尼。

在一個實施例中，化學療法包含一或多種人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑。

在一個實施例中，人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑係選自RG7116、RG1273 (帕妥珠單抗，Perjeta®)、RG3502 (曲妥珠單抗依曼他星，T-DMI)、RG597 (曲妥珠單抗，HERCEPTIN)、RGA201 (RG7160)、埃羅替尼(Tarceva®)、達可替尼(PF-00299804)、PF-05280014 (輝瑞之RG597之生物類似藥mAB)。

在各種實施例中，在個體開始表現出CID之症狀之後投與克羅非馬。在各種實施例中，在開始化學療法或一輪化學療法之前投與克羅非馬以預防或降低與化學療法相關之CID的嚴重程度。在實施例中，在化學療法或一輪化學療法之前一天、三天或一週投與克羅非馬以預防或降低化學療法之治療後發生CID之風險或發生率。

在某些實施例中，在採用化學療法治療期間投與克羅非馬。治療之持續時間可包含兩輪化學療法之間的時間。舉例而言，在某些實施例中，每三週或四週投與一次化學療法，或每15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35天投與一次化學療法。

在某些實施例中，投與克羅非馬直至CID之症狀改善，然後停止投與克羅非馬。

如熟習此項技術者顯而易見，待投與之適用活體內劑量及特定投藥模式可視年齡、體重及所治療哺乳動物物種、所採用之特定化合物及/或採用此等化合物所出於之特定用途而變化。有效劑量(亦即，達成所需結果所必需之劑量)之測定可由熟習此項技術者使用常規藥理學方法且參考本文中所提供之資料來實現。

在一個態樣中，本文中提供治療正接受化學療法之個體之糞便硬度的方法，其中若每天糞便硬度評分得到改善及/或在一天或幾天或數週內量測之糞便硬度評分降低，則個體視為已經治療，該等方法包含向有此需要之個體投與包含有效量之克羅非馬的組合物以治療糞便硬度。此減少可自基線量測。基線可在用克羅非馬進行治療前的數天至數週內測定。治療包含向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與1000 mg；每天兩次投與約125 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，較佳地包覆腸溶包衣之口服劑型或一定劑量之原花青素聚合物組合物(包括未受腸道保護之口服劑型的克羅非馬)，其與每天250 mg至約1000 mg；每天約250 mg；每天1000 mg；每天兩次約125 mg；或每天兩次約500 mg之受腸道保護之口服劑型的克羅非馬生物等效。

在一個態樣中，本文中提供緩解正接受化學療法之個體之水樣腹瀉之方法，其中若個體經歷在投與克羅非馬的每天及/或數天、一週或數週內水樣排便次數減少，則個體視為已經治療，該等方法包含向有此需要之個體投與包含有效量之克羅非馬的組合物以減輕水樣腹瀉。

此減少可自基線量測。基線可在用克羅非馬進行治療前的數天至數週內測定。治療包含向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與1000 mg；每天兩次投與約125 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，較佳地包覆腸溶包衣之口服劑型的克羅非馬，或替代地，一定劑量之原花青素聚合物組合物(包括未受腸道保護之口服劑型的克羅非馬)，其與每天250 mg至約1000 mg；每天約250 mg；每天1000 mg；每天兩次約125 mg；或每天兩次約500 mg之受腸道保護之口服劑型的克羅非馬生物等效。

在一個態樣中，本文中提供減少每天排便次數之方法，其中若自基線量測之每天排便次數減少，則個體視為已經治療，該等方法包含向有此需要之個體投與包含有效量之克羅非馬的組合物以減少每天排便次數。

基線可在用克羅非馬進行治療前的數天至數週內測定。治療包含向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與1000 mg；每天兩次投與約125 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬，較佳地包覆腸溶包衣之口服劑型的克羅非馬，或替代地，一定劑量之原花青素聚合物組合物(包括未受腸道保護之口服劑型的克羅非馬)，其與每天250 mg至約1000 mg；每天約250 mg；每天1000 mg；每天兩次約125 mg；或每天兩次約500 mg之受腸道保護之口服劑型的克羅非馬生物等效。

在某些實施例中，所提供之方法導致腹瀉通用毒性準則等級之等級降低。另外，所提供之方法導致耐受化學治療療程之能力提高，使得個體保持且遵從開處的化學治療療程。

視需要，可例如一天一次、一天兩次、一天三次或每天四次或更多次投與克羅非馬。克羅非馬可以例如約25 mg BID至約3000 mg TID之劑量投與，較佳地克羅非馬每天以約125 mg至約1000 mg投與。在另一實施例中，視症狀而定，以125 mg BID至約500 mg BID投與克羅非馬。在另一實施例中，以125 mg BID投與克羅非馬。在另一實施例中，以500 mg BID投與克羅非馬。克羅非馬可例如以錠劑形式、粉末形式、液體形式或以膠囊形式經口投與。在較佳實施例中，將克羅非馬調配為包覆腸溶包衣之口服劑型。在其他實施例中，克羅非馬為未經包覆腸溶包衣之口服劑型。

在例示性實施例中，向個體經口投與250、500或1000 mg/天之受腸道保護的克羅非馬或投與一定劑量之包括克羅非馬之原花青素聚合物組合物，其與以250、500或1000 mg/天投與之包覆腸溶包衣之克羅非馬的口服劑型生物等效。

在特定實施例中，向個體投與125、250或500 mg p.o. b.i.d (每天兩次經口投與)包覆腸溶包衣之克羅非馬或一定劑量之與125, 250 or 500 mg p.o. b.i.d包覆腸溶包衣之克羅非馬生物等效的原花青素聚合物組合物。其他適當之方法劑量可由健康護理專業人士或個體測定。可基於個體之體重、年齡、健康狀況、性別或醫學病況增加或減少每天投與之克羅非馬的量。熟習此項技術者將能夠基於本發明及遵循實例中所展示之資料確定個體的適當劑量。

在其他實施例中，個體用克羅非馬治療2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24週或更多週或26週或更多週。治療時長可視疾病類型及時長而變化且適當的治療時長可由受益於本發明之熟習此項技術者容易地測定。

有此需要之個體包括易受CID影響或患有CID之個體。

在某些實施例中，向個體投與克羅非馬以與一或多種止瀉藥(諸如(但不限於)洛哌丁胺(loperamide)、奧曲肽(octreotide)、益生菌及適用於治療化學療法相關之腹瀉的任何其他藥劑)組合治療CID。 IV. 醫藥製劑

本文中亦提供醫藥組合物，其包含有效量之本文中所描述的克羅非馬及醫藥學上可接受之載劑。在另一實施例中，有效量對治療CID有效。

製備及使用克羅非馬之實例已描述於美國專利7,556,831、美國專利公開案20070254050及美國專利公開案20080031984中，其皆以全文引用之方式併入本文中。

一個實施例包括包含克羅非馬及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物。在較佳實施例中，醫藥組合物為受腸道保護之口服劑型，諸如錠劑或膠囊。替代地，醫藥組合物為未受腸道保護之口服劑型。

本文中所描述之醫藥組合物可進一步包含賦形劑，例如以下中之一或多者：稀釋劑、結合劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑、調味劑或甜味劑。組合物可調配用於呈密封封裝之所選擇之包衣或未包衣之錠劑、硬及軟明膠膠囊、經糖塗覆之丸劑、口含錠、粉片、丸劑及散劑。舉例而言，組合物可調配用於局部使用，例如軟膏、髮膏、乳膏、凝膠及洗劑。

在某些實施例中，此等醫藥組合物適用於向個體局部或經口投藥。在其他實施例中，如下文詳細描述，醫藥組合物可經特別調配以用於以固體或液體形式投與，包括適用於以下之彼等：(1)經口投藥，例如灌藥(水性或非水性溶液或懸浮液)、錠劑、大丸劑、散劑、顆粒、糊劑；(2)非經腸投藥，例如藉由皮下、肌肉內或靜脈內注射，如例如無菌溶液或懸浮液；(3)局部施用，例如以施用至皮膚之乳膏、軟膏或噴霧形式；或(4)陰道內或直腸內，例如以子宮托、乳膏或發泡體形式；或(5)氣霧劑，例如以含有化合物之水性氣霧劑、脂質製劑或固體粒子形式。

醫藥載劑在與調配物之其他成分相容且對患者無害的意義上必須為「可接受的」。可作為醫藥學上可接受之載劑之材料的一些實例包括：(1)糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)粉末狀黃蓍；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；(9)油，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10)二元醇，諸如丙二醇；(11)多元醇，諸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇及聚乙二醇；(12)酯，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)不含熱原質水；(17)等張性鹽水；(18)林格氏溶液(Ringer's solution)；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩衝溶液；及(21)醫藥調配物中所採用之其他無毒相容物質。

潤濕劑、乳化劑及潤滑劑(諸如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂)以及著色劑、脫模劑、包衣劑、甜味劑、調味劑及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑亦可存在於組合物中。

醫藥學上可接受之抗氧化劑之實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、鹽酸半胱胺酸、硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉及其類似物；(2)油溶性抗氧化劑，諸如棕櫚酸抗壞血酸酯、丁基化羥基甲氧苯(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚及其類似物；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸及其類似物。

含有克羅非馬之組合物包括適用於經口、經鼻、局部(包括經頰及舌下)、經直腸、經陰道、氣霧劑及/或非經腸投藥之彼等組合物。組合物適宜以單位劑型呈現且可藉由藥劑學技術中已知之任何方法來製備。可與載劑材料組合以產生單一劑型之活性成分用量將視所治療之宿主、特定投藥模式而定。可與載劑材料組合以產生單一劑型之活性成分用量將通常為產生治療效果之化合物用量。一般而言，在100%中，此用量將在約0.01%至約99%之活性成分之範圍內，例如約5%至約70%或約10%至約30%。

用於經口或經直腸投與克羅非馬之液體劑型可包括例如醫藥學上可接受之乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。除活性成分以外，液體劑型可含有常用於此項技術中之惰性稀釋劑，諸如(例如)水或其他溶劑；助溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(尤其為棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇及脫水山梨糖醇之脂肪酸酯；及其混合物。

除克羅非馬之外，懸浮液可含有懸浮劑，例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧化乙烯山梨糖醇及脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂-瓊脂及黃蓍及其混合物。用於局部或經皮投與克羅非馬之劑型可包括例如散劑、噴霧劑、軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、溶液、貼劑及吸入劑。除克羅非馬之外，軟膏、糊劑、乳膏及凝膠可含有賦形劑，諸如動物及植物脂肪、油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚矽氧、膨潤土、矽酸、滑石及氧化鋅或其混合物。除克羅非馬之外，散劑及噴霧劑可含有賦形劑，諸如乳糖、滑石、矽酸、氫氧化鋁、矽酸鈣及聚醯胺粉末或此等物質之混合物。噴霧劑可另外含有習用推進劑，諸如氯氟烴及揮發性未經取代之烴，諸如丁烷及丙烷。

可用於醫藥組合物中之適合之水性及非水性載劑的實例可包括例如水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇及其類似物)及其適合之混合物、植物油(諸如橄欖油)及可注射之有機酯(諸如油酸乙酯)。適當流動性可例如藉由使用包衣材料(諸如卵磷脂)、在分散液之情況下藉由維持所需粒度及藉由使用界面活性劑來維持。

在一個實施例中，克羅非馬經包覆腸溶包衣從而保護其免受胃之酸性條件的降解及/或與存在於胃中之蛋白質(諸如胃蛋白酶)的交互作用，例如受腸道保護之調配物。在一特定實施例中，克羅非馬呈錠劑形式。在又另一實施例中，錠劑經包覆腸溶包衣，例如Eudragit®。在一個實施例中，克羅非馬經調配為包覆腸溶包衣之膠囊殼中之包覆腸溶包衣的珠粒或顆粒。在另一實施例中，克羅非馬經調配為延遲釋放組合物。

在某些實施例中，組合物用中和胃酸之一或多種化合物調配。替代地，在投與中和胃酸之醫藥組合物的同時或之後(subsequent to/after)投與含有組合物之醫藥組合物。適用於中和胃酸之化合物(諸如抗酸劑)包括(但不限於)碳酸鋁、氫氧化鋁、次硝酸鉍、次水楊酸鉍、碳酸鈣、碳酸二羥基鋁鈉、氫氧化鎂鋁(magaldrate)、碳酸鎂、氫氧化鎂、氧化鎂及其混合物。能夠減少胃酸分泌且/或能夠降低胃液酸性之化合物為此項技術中所熟知且包括(但不限於)抗酸劑(氫氧化鋁、碳酸鋁、甘胺酸鋁、氧化鎂、氫氧化鎂、碳酸鎂、碳酸鈣、碳酸氫鈉)、胃酸阻斷劑及前述化合物中之任一者之組合。一般而言，根據本文中所提供之方法，已由相關政府機構批准出售且能夠減少胃酸產生且/或降低胃液酸性之任何藥物可與抑制劑分子(諸如克羅非馬)組合投與。

在克羅非馬未經包覆腸溶包衣之一特定實施例中，克羅非馬用一或多種能夠減少胃酸分泌且/或能夠降低胃液酸性之化合物調配。在一例示性實施例中，克羅非馬經調配為控制釋放(延遲釋放)組合物，諸如Merck GEM、Alza OROS、蠟基質(釋放主要延遲直至調配物離開胃且進入腸道中之後)。

本文中亦提供克羅非馬之醫藥調配物，其包含組合物以及醫藥學上可接受之載劑，其劑量在治療CID時為治療上有效的。在一個實施例中，視情況用潤滑劑(諸如(但不限於)硬脂酸鎂)壓縮為錠劑之可直接壓縮之克羅非馬(例如，可無需賦形劑直接壓縮為具有醫藥學上可接受之硬度及脆度的錠劑)經包覆腸溶包衣。此等調配物可藉由此項技術中已知之方法製備，參見，例如描述於Remington's Pharmaceutical Sciences, 第18版, Alfonso R.Gennaro編, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1990中之方法。

在一特定實施例中，原花青素聚合物組合物包含克羅非馬(CAS 148465-45-6)。

在再另一實施例中，組合物經包覆腸溶包衣。腸溶衣為在胃中保持完整之彼等包衣，但一旦其達至小腸，將溶解且釋放劑型之內容物。用具有酸基之成分製備大量腸溶衣，使得在存在於胃中之極低pH下，亦即pH 1.5至2.5，酸基不會經離子化且包衣保持未解離的不溶形式。在更高pH水準下，諸如在腸道環境中，將腸溶衣轉化為離子化形式，其可溶解以釋放抑制劑分子。其他腸溶衣保持完整直至其在小腸中由酶降解，且其他在限定的水分暴露之後分解，使得包衣保持完整直至進入小腸之後。

適用於製備腸溶衣之聚合物包括(但不限於)蟲膠、澱粉及直鏈澱粉乙酸酯鄰苯二甲酸酯、苯乙烯-順丁烯二酸共聚物、丁二酸乙酸纖維素、鄰苯二甲酸乙酸纖維素(CAP)、聚乙酸乙烯酯鄰苯二甲酸酯(PVAP)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HP-50及HP-55級)、乙基纖維素、脂肪、硬脂酸丁酯及具有酸性可離子化基團之甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物。在一個實施例中，醫藥組合物含有聚合原花青素組合物及腸溶衣聚合物Eudragit^® L 30D，一種平均分子量為250,000道爾頓的甲基丙烯酸及丙烯酸甲酯之陰離子共聚物。在另一實施例中，腸溶衣聚合物為Eudragit^® L 30D-55。將腸溶衣塗覆至克羅非馬組合物可藉由此項技術中已知之用於塗覆腸溶衣的任何方法實現。舉例而言，但不藉助於限制，腸溶聚合物可使用基於有機溶劑之溶液來應用，該等溶液含有用於噴塗應用之5至10% w/w聚合物及用於泛包衣之高達30% w/w聚合物。通常使用之溶劑包括(但不限於)丙酮、丙酮/乙酸乙酯混合物、氯化甲烷/甲醇混合物及含有此等溶劑之三元混合物。可使用作為分散劑之水應用一些腸溶聚合物，諸如甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物。必須調整溶劑系統之揮發性以防止由黏性所致之黏著且防止在溶劑蒸發時因過早噴霧乾燥或聚合物沈澱而導致之塗層的高孔隙率。

在另一實施例中，包含克羅非馬之醫藥組合物調配為包覆腸溶包衣顆粒或粉末(直徑為300-5001之微球體)，其以硬殼明膠膠囊形式提供且懸浮於用於兒科投藥之口服溶液中。包覆腸溶包衣粉末或顆粒亦可與食物混合，尤其用於兒科投藥。

顆粒及粉末可使用此項技術中已知之任何方法製備，諸如(但不限於)結晶、噴霧乾燥或任何粉碎方法，例如使用高速混合器/製粒機。例示性調配物可在例如以下美國專利及申請案中發現：美國專利案第7,341,744號；USSN 11/510,152；及USSN 12/175,131。

無論所選擇之投藥途徑如何，藉由熟習此項技術者已知之方法將克羅非馬調配為醫藥學上可接受之劑型。

在組合療法治療中，藉由此項技術中已知之方法向哺乳動物(例如，人類、男性或女性)投與化合物及其他藥物藥劑。藥劑可以單一劑型或單獨劑型投與。其他治療劑之有效量為熟習此項技術者所熟知。然而，測定其他治療劑之最佳有效量範圍亦在熟習技術人員的能力範圍內。在向動物投與另一治療劑之一個實施例中，化合物之有效量小於其在不投與其他治療劑之情況下的有效量。在另一實施例中，藥劑之有效量小於其在不投與化合物之情況下的有效量。以此方式，與高劑量之任一藥劑相關的不合需要之副作用可經最小化。其他潛在優勢(包括(但不限於)改善的給藥療程及/或降低的藥物成本)將對熟習此項技術者來說為顯而易見的。

在各種實施例中，相隔小於5分鐘、相隔小於30分鐘、相隔1小時、相隔約1小時、相隔約1至約2小時、相隔約2小時至約3小時、相隔約3小時至約4小時、相隔約4小時至約5小時、相隔約5小時至約6小時至、相隔約6小時至約7小時、相隔約7小時至約8小時、相隔約8小時至約9小時、相隔約9小時至約10小時、相隔約10小時至約11小時、相隔約11小時至約12小時、相隔約12小時至18小時、相隔18小時至24小時、相隔24小時至36小時、相隔36小時至48小時、相隔48小時至52小時、相隔52小時至60小時、相隔60小時至72小時、相隔72小時至84小時、相隔84小時至96小時或相隔96小時至120小時投與療法(例如，預防劑或治療劑)。在一或多個實施例中，在同一次患者問診內投與兩種或更多種療法。 V.  套組

本文亦提供套組，例如用於治療正接受化學療法之個體之腹瀉(例如CID)之套組。套組可含有例如克羅非馬或包含克羅非馬之醫藥組合物及使用說明書。使用說明書可含有處方資訊、劑量資訊、儲存資訊及其類似物。

標記說明書包括例如服用克羅非馬至少3天以治療CID之說明。亦可閱讀說明書，例如服用125mg BID至500mg BID之間的克羅非馬直至症狀消退或持續治療CID之化學療法治療時長。亦可閱讀說明書，例如服用125mg BID之克羅非馬直至症狀消退或持續治療CID之化學療法治療時長。亦可閱讀說明書，例如服用500mg BID之克羅非馬直至CID症狀消退。 實例

應瞭解，本發明不應視為受限於現在所描述之實例；相反，本發明應視為包括本文中所提供之任何及所有應用及普通技術人員之技能範圍內的所有等效變體。 實例1：克羅非馬用於治療犬中之化學療法引起之腹瀉之安全性及有效性的研究

磷酸妥賽蘭尼(Toceranib phosphate) (Palladia®)為靶向數種受體酪胺酸激酶(RTK)之多激酶抑制劑，且指示用於治療犬中Patnaik II級或III級復發性皮膚肥大細胞腫瘤，伴有或不伴有局部淋巴結受累。除肥大細胞腫瘤以外，磷酸妥賽蘭尼目前更常用於標籤外治療贅瘤。

磷酸妥賽蘭尼指示初始劑量為3.25 mg/kg (1.48 mg/lb)體重，每隔一天口服。若需要，可利用0.5 mg/kg之劑量減少間隔[至每隔一天2.2 mg/kg (1.0 mg/lb)之最小劑量]及劑量中斷(停止使用磷酸妥賽蘭尼至多兩週)以控制不良反應。此批准係基於隨機、安慰劑對照、雙盲、多中心臨床實地研究，其展示在第六週遮蔽期結束時，磷酸妥賽蘭尼在目標反應之主要有效性終點方面比安慰劑具有統計學上顯著之優勢(37%與8%，p＜0.001) (London CA等人, Clin. Cancer Res, 15(11), 2009)。有時以比經標記劑量較低之劑量(2.5-3毫克/公斤/給藥)開處磷酸妥賽蘭尼；然而，儘管通常頻率較低，但仍然觀測到腹瀉之副作用。

預期與單獨使用磷酸妥賽蘭尼相比，克羅非馬及磷酸妥賽蘭尼之組合將不會引起不良反應的任何增加，此係由於克羅非馬吸收極少且已在人類研究中證實與其他藥物之藥理學暴露之交互作用最小。

磷酸妥賽蘭尼已與需要及時治療之重度腹瀉或GI出血相關。在倫敦研究之遮蔽期間，在磷酸妥賽蘭尼中觀測到46%全級及7%的3-4級腹瀉，而在安慰劑中觀測到27%全級及3%的3-4級腹瀉。在研究之遮蔽加開放標記期間，在磷酸妥賽蘭尼中觀測到59%全級及8%的3-4級腹瀉。視臨床症狀之嚴重程度而定，劑量中斷及劑量減少經認為係必需的。

克羅非馬(SP-303)為自龍血巴豆純化之原花青素分子，其具有強烈的抗分泌特性及經由調節及正常化經cAMP刺激之CFTR通道及經鈣活化之氯通道(CaCC)兩者之高活性的獨特作用模式。克羅非馬治療腹瀉而不影響包括犬及人類之數種物種的腸動力。克羅非馬在治療劑量下不經全身性吸收，但實際上在胃腸道之內腔內局部起作用。

克羅非馬經FDA (CDER)批准用於治療正用抗反轉錄病毒治療之患有HIV之人類的非感染性腹瀉。批准支持長期投與克羅非馬。

正研究克羅非馬用於治療犬之急性腹瀉。在概念驗證研究(CANA-001)中，向表現出急性腹瀉之犬投與克羅非馬(2-4 mg/kg，每天兩次持續三天；n = 29)或安慰劑(每天兩次持續三天；n = 32)。在三個24小時治療期及一個24小時觀察期之後，用克羅非馬治療之犬比經安慰劑治療之犬較好地緩解腹瀉。一項進行中的隨機、安慰劑對照研究(CANA-003)設計成為犬之急性腹瀉提供克羅非馬之實質性有效證據。

對進行化學療法之八隻犬進行以2-4 mg/kg BID給藥三天之克羅非馬的安全性及耐受性研究(CANA-002)。此為一項在(藉由先前開處之治療腹瀉的藥物或由其醫療圖表中所標註之症狀)篩選前90天內在患有當前(活動性)腹瀉或具有CID病史之用戶所有犬中對克羅非馬包覆腸溶包衣之錠劑的兩個現場的開放標記安全性研究。在研究期間無嚴重不良事件(SAE)報導，且無個體由於任何原因(包括AE或個體安全性問題)退出研究。在研究期間未觀測到臨床上顯著的安全性發現。在最後一次報導的觀測時，所有八隻犬具有成形的糞便。研究設計

此研究為一項前瞻性雙盲多現場概念驗證研究(表1)。 表1.C-102實驗設計之概述

組	N	治療劑	劑量(mg/kg/劑)	途徑	頻率	給藥次數
IVP	≥25	克羅非馬	2-54.3	PO	BID	6次給藥
CP	≥12	安慰劑	0	PO	BID	6次給藥

研究概述

此研究將在門診基礎上進行，自轉診及理論的獸醫中心採購犬。所有研究現場將遵循單一療程。僅接受最少三劑由Zoetis製造之Palladia®品牌錠劑的犬才有資格參加此研究。由於混配磷酸妥賽蘭尼可能導致更多的腹瀉誘發之變異且導致更嚴重腹瀉之可能性，服用經混配之磷酸妥賽蘭尼的犬不符合此研究。Palladia®品牌錠劑可自研究者同意且可包括醫院或現場藥房、當地藥房或在線藥房之任何來源獲得。

表現出普瑞納糞便評分(Purina Fecal Score；PFS)為6或7之腹瀉的犬將由其所有者展示以參加研究。所有者可在其犬開始Palladia®時或在開始Palladia®之約1-12週內告知此臨床試驗，但僅20-40%用Palladia®治療之犬將罹患臨床上顯著的腹瀉，其視劑量而定。若其犬在服用Palladia®時的確罹患臨床上顯著的腹瀉症狀，則所有者將受指示用其行動電話攝影機拍攝腹瀉相片且接著帶其犬進行身體檢查。若研究者評定犬符合研究之選入準則，則將進行選入。

基線資訊將包括具備資格之PFS (及所有者具有的任何相片)、首次標記腹瀉之時間、自腹瀉開始的腹瀉發作次數(若已知)、入選前72小時內對合併用藥的審查、醫療及用藥史、身體檢查及採集用於臨床病理學測試之樣本(CBC、CHEM、U/A、卵及寄生蟲之糞便樣本)。符合所有納入準則且無排除準則之犬將隨機分組以接受研究性獸醫產品(Investigational Veterinary Product；IVP)或對照產品(CP)，每天兩次(間隔12 ± 2小時)，總共6劑。在緊接著完成所有篩選活動後(亦即同一天)，應由醫院工作人員在醫院經口投與第一劑量。

研究期(T0 - T96hr)劃分為三個24小時治療期(T0 - T24hr；T＞24hr - T48hr；T＞48hr - T72hr)，隨後為24小時觀察期(T＞72hr - T96hr)，其在最後一次治療(在T60h投與)後12小時開始且持續24小時。因此，各犬將由所有者進行評定總共96小時。大約在T0、T12hr、T24hr、T36hr、T48hr及T60hr對各犬進行給藥。在研究期間，犬住在家中，且犬之安全性及健康狀況將由其所有者與研究者或經訓練的指定人員之間的日常電話通話進行監測。此等日常通話評定犬之健康狀況且確保將犬帶至研究者處以評定任何可能的不良事件。

糞便評定由所有者每天完成。所有者要求完成一份日記，其記錄每次排便時間、色彩及一張相片(15分鐘時間範圍內之所有消除將視為單次排便)。此允許單盲個體為每次排便選擇適當的普瑞納糞便評分。異常觀測結果將由所有者報導，其將每天由研究者或經訓練指定人員進行評定以測定不良事件。伴隨藥物將由所有者報導且在96小時研究期間由研究人員記錄。

在研究期結束或停止時，研究者將在完成研究之前對犬進行最終評估，其將包括再一次身體檢查及額外的臨床病理學測試(CBC，CHEM)。僅當基線結果異常時，才進行重複的UA。

資料經擷取在電子資料擷取表格上，紙質表格用作備份。研究程序 知情同意書

由所有者之犬的治療獸醫/研究者聯繫所有者參與此研究。與Palladia®療法相關之腹瀉通常發生在開始療法的前幾週內。因此，在其犬開始惡性腫瘤之Palladia®治療時，或在開始Palladia®治療的90天內，可能會聯繫所有者進行此研究。可與犬主論述此研究，預測犬可能罹患腹瀉，應理解此等犬中之許多將不會罹患腹瀉之病徵且最終將不會選入研究。替代地，所有者可在其犬已經具有腹瀉病徵之首次呈現時間提出此項研究。指示所有者用其蜂巢式電話或數位相機拍攝腹瀉之相片。在當時已向所有者提供關於研究之書面及口頭資訊。若所有者同意其犬參與研究，則在其犬根據研究需求罹患腹瀉時，所有者將在篩選活動之前簽署知情同意書(ICF)且註明日期。篩選

若所有者注意到其(his/her)犬在最少三劑Palladia®品牌錠劑之後患有腹瀉，則所有者將犬帶至研究現場且所有者及研究者將論述PFS記錄且審查所有者可具有之任何腹瀉相片。若篩選PFS為6或7，則必須獲得知情同意書，且接著研究者將判定犬是否符合研究納入及排除準則。亦將在篩選時獲取VCOG-CTCAE v1.1腹瀉等級(參見附件4)。在驗證犬符合納入準則且不符合研究之排除準則時，將獲得醫療史、對先前及當前藥物之評定、身體檢查及採集用於臨床化學、血液學、尿液分析及糞便分析之樣本以確定治療前(基線)值。上文基線實驗室評定之結果將不會妨礙犬選入，除非犬不符合療程之納入及排除準則。實際上，治療前值將視為基線結果且記錄於適當的CRF上。時間 0

在犬通過篩選之後，其視為符合選入條件且選入研究。當犬仍然在研究現場時，將由研究人員向犬經口投與研究治療之第一劑量。將記錄此第一劑量投藥之時間點且標註為時間0 (T0)。由於意欲約每12小時進行給藥，若在中午12點之前投與第一劑量，則將在同一天由所有者在家投與第二劑量，或若在下午投與第一劑量，則在第二天上午投與第二劑量。所有後續劑量將遵循每天兩次，間隔12 ± 2小時的給藥時程。治療期

研究治療將在治療期間(T0hr - T72hr)經口投與，每天兩次(間隔12 ± 2小時)，持續三個24小時治療期。然而，若在下午在研究現場投與第一劑量，則可在第一劑量之後最多18小時投與第二劑量。諸如Greenies Pill Pocket(TM)之媒劑可用於給藥但並非必需的。研究犬必須保持服用Palladia®品牌錠劑且在研究過程中不改為混配的磷酸妥賽蘭尼。

對於經標註之每次排便，犬主或其(his/her)指定人員將拍照且在第一劑量之後的96小時內將其上傳至伺服器。若所有者/指定人員發現研究犬未經注意地排便，則將在觀測到排便時拍攝相片，且作為未注意的排便鍵入至EDC中。若在15分鐘時間段內注意到多次排便，則其可視為一次排便且硬度將基於所觀測到及所描述之最高PFS評分來測定。

研究人員將嘗試每天給所有者/指定人員進行電話呼叫以確認由所有者鍵入至EDC中之資料為正確的。現場工作人員將盡一切努力在每一24小時間隔內與所有者/指定人員交談至少一次。若現場未成功，則現場將在EDC中註明此點；然而，此無法進行電話聯繫之情況將不會視為療程偏差。

在與所有者/指定人員交談時，由所有者/指定人員標註之任何觀測將由研究者評定為可能的不良事件。另外，由所有者給予犬之任何新的藥物將鍵入至先前及伴隨藥物頁面中。觀測期

在觀測期間(T＞72hr - T96hr)，所有者將繼續拍攝其犬之排便但不會進行進一步的測試品給藥。研究人員將嘗試每天給所有者/指定人員進行電話呼叫以確認由所有者鍵入至EDC中之資料為正確的。由所有者/指定人員標註之任何觀測將由研究者評定為可能的不良事件。另外，由所有者給予犬之任何新的藥物將鍵入至先前及伴隨藥物頁面中。觀測期將用於評估在IVP停藥後腹瀉症狀之持續效果或復發情況。最終評估 ( 研究程序結束 )

在成功完成此次訪診及其程序時，將認為犬已完成研究。最終身體檢查將在觀測期結束時，或在觀測期結束之3個工作日內或在停止時進行(若犬停止給藥，則現場工作人員將試圖讓所有者帶犬來完成此次訪視。若此為不可能的，則犬將視為失去訪診)。將收集樣本用於臨床化學、血液學及尿液分析(僅當初始樣本具有臨床上顯著異常時，才會重複尿液分析)。亦將同時評定最終VCOG-CTCAE v1.1腹瀉等級。研究者或共研究者將與犬主會面以審查且確認日記中之資料的準確性，且詢問腹瀉症狀之再發作情況，重點為完成IP給藥後任何排便之色彩及頻率。

贊助者可在任何時間決定終止研究(亦即，未完成)。終止原因將記錄於研究記錄中。研究中止

犬主或研究者可出於任何原因且在任何時間中止犬之研究。

在犬中止研究之情況下，應進行與最終評估相同的程序。若中止原因係由於AE，則此將記錄於AE表上。不良事件

犬之症狀、行為及糞便屬性相對於基線(用IP治療前)之任何臨床上地顯著變化將由犬之所有者報導。在適當時，犬之身體檢查或實驗室值相對於基線之任何臨床上地顯著變化將由研究者標註於不良事件(AE)表上。亦將經由犬主與研究者或經訓練指定人員之間的每天電話通話來確定不良事件之評定。不良事件將根據ABON系統定級。動物數目

選入目標為在所有現場關於IVP之至少25個用於療效之初步評估的可評估病例。將選入至少12個關於CP之額外可評估病例以比較IVP與CP之間的療效結果。經IVP治療之犬與經CP治療之犬的比率將為約2:1。研究將使用在相鄰美國中至少三個地理學上不同的現場。任何給定現場之最大選入數為研究中之可評估病例總數目的40%。

由於此為一項試點研究，樣本大小估算不係基於統計考慮。至少25個IVP可評估病例及12個CP可評估病例之可評估樣本大小視為足夠用於此研究之目的。阻礙因素

在此研究中將不使用阻礙因素。隨機分組程序

將由研究統計學家創建各研究現場之單獨的隨機分組清單。統計學家將以約2:1 IVP:CP之比率隨機分配研究治療。盲化程序

此為一項隨機的雙盲研究，因此贊助者、所有者、研究者及所有現場研究人員將對治療盲化。所有者將另外對線上資料擷取系統中之其犬之排便的前述記錄盲化以免影響其隨後的排便記錄。 研究性產品(IP) 研究性獸醫產品(IVP)專有名稱 ： 克羅非馬 (CAS 編號： 148465-45-6)

IVP調配物將根據GMP之原理製造。各調配物之分析憑證將包括於最終研究報導中。將記錄製造現場名稱及地址、組合物百分比、批號(lot/batch number)及有效期/複驗日期。

除克羅非馬之活性醫藥成分(API)之外，非活性成分包括微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、膠態二氧化矽及硬脂酸鎂。腸溶包衣成分包括丙烯酸乙酯及丙烯酸甲酯共聚物分散液、滑石、檸檬酸三乙酯、三仙膠、氧化鈦、對羥基苯甲酸丙酯及對羥基苯甲酸甲酯。劑型

IVP將以含有125 mg之克羅非馬之未評分包覆腸溶包衣的白色錠劑形式提供。對照產品 (CP)

CP將根據GMP之原理製造。分析憑證將包括於最終研究報導中。將記錄製造現場名稱及地址、組合物百分比、批號及有效期/複驗日期。

CP之調配物將與IVP之調配物相配，但將不會含有活性醫藥成分(API)。劑型

CP將以含有0 mg克羅非馬之IVP相同大小的未評分包覆腸溶包衣的白色錠劑形式提供。劑量調整

此研究之劑量係基於自試點研究獲得之資料，其評定克羅非馬(SP-303)在緩解與犬之分泌性腹瀉相關之臨床症狀方面的臨床有效性(CANA-001)及30天(WIL-288006)及9個月(WIL-288022)毒性研究所確定之廣泛的安全界限。在為期9個月之研究中研究克羅非馬在犬中之長期安全性，在此期間，向三組米格魯犬(beagle dog)以膠囊形式每日一次、每週7天投與錠劑，持續273或274天。劑量為50、175及600毫克/公斤/天，加並行對照組。基於此研究之結果，對於向犬經口(膠囊)投與包覆腸溶包衣的克羅非馬錠劑連續273或274天，未觀測到的不良作用水準(NOAEL)為50毫克/公斤/天。在此劑量下，結果受限於罕見的胃腸症狀。較高劑量(175及600毫克/公斤/天)下之結果表明，主要副作用為胃腸刺激，其反過來導致各種次級作用(體重及食物消耗量減少、腹瀉、嘔吐、血液學及血清化學參數變化、甲狀腺/甲狀旁腺重量減少及/或嗜鹼性體存在時之巨噬細胞浸潤及淋巴結、胃腸道及肝臟中之色素攝取)。因此，無作用水準估計在50與175毫克/公斤/天之間。研究人員之安全注意事項

將在研究期間遵循研究人員之標準安全注意事項。意識到何時投與IP之犬所有者無特定注意事項。每次裝運IP時將向現場提供安全資料表(SDS)。 研究性產品投與

將為各參與研究現場召開研究啟動會議(面對面或藉由網路研討會)以確保研究者及相關研究人員徹底理解程序且可向犬主闡明關於投與IP及採集資料的此等程序。

在對各犬進行研究登記時，將對犬進行稱重且研究者將自下表確定劑量： 表2：基於體重之劑量

體重	劑量
5至137 lb. (2.3至62 kg)	1錠劑BID

當犬仍然在研究現場時，將由研究人員向犬經口投與研究治療之第一劑量。在研究之剩餘時間中，接著將由其所有者或指定人員在家每天兩次(間隔12 ± 2小時)向犬經口給藥。犬主將在研究期間記錄給藥時間。可使用諸如Greenies Pill Pocket™之媒劑或小食物球，但不為必需的。在已投與劑量之後，將對犬進行短暫觀測以確保錠劑已經吞服而非吐出。

若犬在給藥後一小時內嘔吐，則此觀測結果將由所有者記錄且犬應再給藥相同數目之新錠劑。若犬在給藥後超過一小時嘔吐，則此觀測結果應由所有者記錄，但不應在此時向犬再給藥且應視為在彼時間點給藥。若犬在給藥後嘔吐超過一次，則犬應中止研究。研究者或指定人員將在不良事件CRF上記錄各嘔吐事件。 表3：測試動物及病例鑑別

類別	描述
物種	家犬(Canis familiaris/domestic dog)
來源	用戶所有之動物
品種	任一種
體重	5至137 lb. (2.3至62 kg)
年齡	≥1歲
性別	雄性或雌性
生殖狀態	完整的、切除或閹割過的。未懷孕之哺乳期雌性

將為參與研究之各犬分配唯一的病例號，但不會為其所有者簽署ICF但其犬並未正式篩選且登記的犬分配病例號。在各個現場，病例號將由一個兩位數之現場標識號以及一個三位數的犬標識號組成。IP將基於各登記犬之順序編號來分配至所有者。 有效性變量 主要終點腹瀉消退

治療成功(腹瀉消退)將定義為在治療期間(T0hr - T72hr)至少24小時內出現成形糞便(PFS為1、2、3、4或5)且保持成形糞便(亦即，無PFS為6或7)或沒有糞便的任何犬。因此，腹瀉必須在T48hr內消退。

治療失敗將定義為在治療期間(T0hr - T72hr)至少24小時內未實現成形糞便(PFS為1、2、3、4或5)及/或經歷以下中之任一者的任何犬：

1.由於察覺缺乏療效而撤回所有者同意書

2.妨礙其繼續參與研究之不良事件 次要終點在整個治療期內之腹瀉消退

治療成功(腹瀉消退)將定義為在治療期間(T0hr - T72hr)出現成形糞便(PFS為1、2、3、4或5)且保持成形糞便(亦即，無PFS為6或7)或沒有糞便的任何犬。

治療失敗將定義為在治療期間(T0hr - T72hr)未實現成形糞便(PFS為1、2、3、4或5)及/或經歷以下中之任一者的任何犬：

1.由於察覺缺乏療效而撤回所有者同意書

2.妨礙其繼續參與研究之不良事件12.2.2 在篩選及最終評估時比較腹瀉 VCOG CTCAE v1.1 等 級

在對各犬進行篩選時採用之腹瀉VCOG-CTCAE v1.1等級將與T72h、T96h及最終評估時之腹瀉VCOG-CTCAE v1.1等級進行比較。篩選與T72h、T96h及最終評估之間的等級變化將在接受IVP之犬與接受CP之犬之間進行比較。最後一次未成形糞便之時間

最後一次未成形糞便之時間(TLUS)將由僅在72小時治療期(T0hr - T72hr)間的第一劑量(T0hr)與最後一次未成形糞便(PFS為6或7)之間的經過時間測定。鬆散或水樣腹瀉之頻率

鬆散或水樣腹瀉(PFS為6或7)之頻率將由在研究期間T0hr - T96hr發生之未成形糞便事件(PFS為6或7)的總數目測定。(將在24小時週期內分析)。安全性

安全性評定將基於由所有者報導之症狀以及由研究者進行之身體檢查結果及整個研究中實驗室工作中的任何異常而進行。 糞便評定普瑞納糞便評分 (PFS)

使用普瑞納糞便評分(PFS)圖表，在篩選時將經由與犬主溝通且理想地藉由一或多張犬排便之相片獲得PFS。將由犬主描述每天對PFS之各評估且藉由犬主與研究者或經訓練指定人員之間的通話進行審查。

各糞便評定將僅考慮自前述糞便評定所產生之新的排便。若犬在15分鐘期間已經歷兩次或更多次排便，則此等排便將一起標註且分配單一PFS，最高PFS數值評分適合於記錄在CRF上之排便。排便次數

在研究期間的每天當中，犬主/指定人員將記錄各排便事件，將相片上傳至eCRF上。若犬在15分鐘時間段期間已經歷兩次或更多次排便，則此等排便將一起標註為一個事件。在各排便事件及記錄時間及相片之後，下一次排便事件將視為單獨事件。 統計分析

所有統計測試將為雙側的。有效性將以5%顯著水準進行評估。所有測試將使用SAS 9.3版或更高版本進行。 統計分析群體

由於此為概念驗證研究，有效性分析將包括所有隨機分組且接受至少一種劑量之研究藥物的犬(安全性群體/意向治療(ITT)群體)。 有效性主要有效性變量：腹瀉消退

主要有效性變量『腹瀉消退』將對分(成功與失敗)且將比較治療期間(T0hr-72hr)之治療組之間的成功比例。治療組之間的可能差異將藉由廣義線性混合模型進行評定(使用SAS® Proc GLIMMIX假設二項分佈及羅吉特聯繫(logit link))。該模型將包括治療(IVP或CP)之固定效應、位點與位點治療交互作用作為隨機效應，基線PFS作為協變量。

若兩個治療組之間的成功率存在顯著差異且與CP組相比，IVP組之成功百分比更高，則將得出治療有效性。 次要有效性變量在整個治療期內之腹瀉消退

有效性變量『在整個治療期內之腹瀉消退』將對分(成功與失敗)且將比較治療期間(T0hr-72hr)之治療組之間的成功比例。治療組之間的可能差異將藉由廣義線性混合模型進行評定(使用SAS® Proc GLIMMIX假設二項分佈及羅吉特聯繫)。該模型將包括治療(IVP或CP)之固定效應、位點與位點治療交互作用作為隨機效應，基線PFS作為協變量。

若兩個治療組之間的成功率存在顯著差異且與CP組相比，IVP組之成功百分比更高，則將得出治療有效性。在篩選及最終評估時的腹瀉 VCOG CTCAE v1.1 等 級之比較

篩選與最終評估之間的等級變化將在接受IVP之犬與接受CP之犬之間進行比較，使用協方差分析(ANCOVA)模型，其中治療作為固定效應，且位點與位點治療交互作用作為隨機效應，基線PFS作為協變量。 最後一次未成形糞便之時間

最後一次未成形糞便之時間(TLUS)將使用卡本-麥爾(Kaplan-Meier)方法呈現且使用對數等級測試進行比較。沒有成形糞便之犬(評分為6或7)將在最後一次未成形糞便時經審查。對於僅具有成形糞便(評分為1、2、3、4或5)或沒有糞便之犬，TLUS的出現時間將設定為零。 腹瀉頻率

治療作為固定效應，位點與位點治療交互作用作為隨機效應，基線PFS作為協變量之ANCOVA模型將用以比較IVP與CP之間的腹瀉頻率。實例 2 ： HER2 陽性乳癌患者 ( 人類個體 ) 中 用克羅非馬預防及防治腹瀉之研究

研究設計 ： 在高達40-80%之接受針對HER2陽性局部晚期或轉移性乳癌之此種治療的患者中發現化學療法引起之腹瀉。此腹瀉可顯著影響患者之生活品質及耐受化學/抗HER2療法之能力。此研究將觀察藥物克羅非馬在預防乳癌患者之腹瀉方面的療效，該等乳癌患者接受曲妥珠單抗、帕妥珠單抗及多西他賽或太平洋紫杉醇，使用或不使用卡鉑(化學治療療程稱為THP及TCHP)。

療程 ：

約46名患者將隨機分配至治療組或對照組。在使用THP或TCHP之化學療法的第1週期至第2週期期間，治療組之患者將一天兩次服用一錠劑克羅非馬(各錠劑為125mg)，整體吞服而無需咀嚼或壓碎。將在化學療法之第3週期期間對患者監測克羅非馬。對照組之患者將在THP或TCHP之第1週期至第3週期進行研究。對照組之患者在此研究之任何時間不會接受克羅非馬。週期可包含輸注開處之THP或TCHP，隨後持續21天。參見Baselga J, Cortés J, Kim SB等人，Pertuzumab plus Trastuzumab plus Docetaxel for Metastatic Breast Cancer. N Engl J Med. 2012;366:109-119。

合格準則：

符合研究條件之患者大多如下：願意且能夠提供書面知情同意書；≥18歲之男性或女性；在病理學上證實之任何階段之HER2陽性乳癌的診斷(允許先前治療而無先前療法之限制)；安排接受至少3個連續週期之THP或TCHP；根據ECOG標度，機能狀態為0-2；在知情同意時對具有生育潛力之女性進行陰性妊娠測試；如由ECHO或MUGA測定，在基線處之左心室射血分數(LVEF)大於或等於50%；及能夠讀取、理解、遵循研究程序且完成克羅非馬、急救藥物及排便日記。患有腦轉移瘤之患者(包括同時進行類固醇治療之患者)允許進行此研究。不符合研究條件之患者包括正母乳哺育之女性；患有持續大腸急躁症(IBS)或結腸炎之彼等患者(包括但不限於潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病(Crohn's disease)、顯微性結腸炎等)；在簽署同意書之3週內使用研究性藥物或在研究期間預計使用，在過去3週內使用化學療法、曲妥珠單抗或帕妥珠單抗，在過去7天內使用輕瀉劑，在過去7天內使用慢性輕瀉劑(≥連續30天)或抗腹瀉劑(包括但不限於洛哌丁胺、奧曲肽、鉍、鴉片酊、阿托品(atropine)、除食物以外之任何形式的益生菌)，在過去7天內使用抗生素的彼等患者。若患者具有以下中之任一者，則亦將其排除：任何類型之造口術；全結腸切除術；大便失禁；在研究期間，持續輻射引起之腹瀉或便秘，或計劃對腹部或骨盆進行放射療法；需要持續干預之活動性全身性感染，包括(但不限於)口服及靜脈內抗生素、抗真菌藥、抗寄生蟲藥、抗病毒藥；在過去6個月內進行重大腹部或骨盆手術；開始THP或TCHP時器官功能不當，其可包括在簽署同意書前之28天內的以下實驗室結果：總膽紅素＞正常值上限(ULN) (除非患者記錄吉爾伯特氏綜合症(Gilbert's syndrome))；血清肌酐＞2.0 mg/dL或177 μmol/L；或AST (SGOT)及ALT (SPGT) ＞ 2.5 ULN。

有效性變量：

主要結果量測所有等級之腹瀉[時間範圍：29個月]：在化學療法之第1週期及第2週期期間持續2天或連續更多天之所有等級腹瀉的發生率

次要結果量測如下：

任何等級之腹瀉[時間範圍：29個月]任何等級之腹瀉的發生率，如根據CTCAE v4.0、根據週期及根據分層所量測

3至4級腹瀉[時間範圍：29個月] 3至4級腹瀉之發生率，如根據CTCAE v4.0、根據週期及根據分層所量測

腹瀉發作[時間範圍：29個月]任何等級、整體及根據分層之首次腹瀉事件的發作時間

腹瀉持續時間[時間範圍：29個月]任何等級腹瀉之持續時間(天)，自第1天至第21天根據事件開始之週期及根據分層定義

3至4級腹瀉之持續時間[時間範圍：29個月] 3至4級腹瀉之持續時間(天)，自第1天至第21天根據事件開始之週期及根據分層定義

止瀉藥[時間範圍：29個月]根據週期及等級使用止瀉藥(除研究藥物以外)

FACIT-D總評分[時間範圍：29個月]定量FACIT-D總分，根據週期及根據分層在各週期之第1天及研究完成時收集

FACIT-D腹瀉評分[時間範圍：29個月]根據週期及根據分層定量FACIT-D腹瀉子集(DS)評分

大便頻率及硬度[時間範圍：29個月]糞便硬度之頻率表，如根據布里斯托糞便分類法(Bristol Stool scale)、根據治療組之間的週期分層所量測

本文中引用之所有公開案、專利及專利申請案特此以全文引用之方式併入本文中。 實例3：克羅非馬用於治療米格魯犬之奈拉替尼引起之腹瀉之安全性及有效性的研究

奈拉替尼(Nerlynx®)為經口獲得的HER-2受體酪胺酸激酶(亦結合EGFR及HER4)之6,7-經二取代-4-苯胺基喹啉-3-甲腈不可逆抑制劑，其具有潛在的抗腫瘤活性，且指示用於患有早期HER2陽性(過度表現/擴增)乳癌之成人患者的延長輔助治療以遵循基於佐劑曲妥珠單抗之療法以及轉移性HER2陽性乳癌。

奈拉替尼之建議劑量為240 mg，每天一次經口服用。若需要，則可利用40 mg之劑量減少間隔[至每天一次120 mg之最小劑量]及劑量中斷(停止服用奈拉替尼長達三週)以控制不良反應。止瀉預防開始使用洛哌丁胺及第一劑量之奈拉替尼且在治療之前2個週期(56天)期間繼續。此批准係基於多中心、隨機、雙盲、安慰劑對照研究(ExteNET)。

預期與單獨使用奈拉替尼相比，克羅非馬及奈拉替尼之組合將不會引起不良反應的任何增加，此係由於克羅非馬吸收極少且已在人類研究中證實與其他藥物之藥理學暴露之交互作用最小。

已在用奈拉替尼治療期間報導嚴重腹瀉及後遺症，諸如脫水、低血壓及腎衰竭。在ExteNET中之95%經奈拉替尼治療的患者中報導腹瀉。3級腹瀉發生在40%之患者中且4級腹瀉發生在0.1%之患者中。大部分患者(93%)在治療之第一個月患有腹瀉，且首次發作等級≥ 3之腹瀉的中值時間為8天(範圍，1-350)，且等級≥ 3之腹瀉的中值累積持續時間為5天(範圍，1-139)。目標

此研究之目標為評估克羅非馬在健康雌性犬中每天經口給藥奈拉替尼28天後降低腹瀉之發生率及嚴重程度的作用，而無需同時使用洛哌丁胺。方法

將二十四隻平均重量為7.2 kg (範圍6.4-8.5 kg)之健康成年雌性米格魯犬隨機分為三組，每組8隻犬。所有的犬在前5天內接受40毫克/天口服奈拉替尼每天一次；在28天時間段之剩餘時間內自第6天遞增至80毫克/天以誘導腹瀉，如藉由鬆散/水樣糞便所證明。

第1組犬代表對照組，在28天時間段內，其接受每天口服奈拉替尼錠劑及一天四次(QID)經口投與的安慰劑克羅非馬膠囊。在28天時間段內，第2組接受每天口服奈拉替尼錠劑及每天克羅非馬125 mg延遲釋放錠劑(Mytesi®)及QID經口投與之克羅非馬膠囊。在28天時間段內，第3組犬接受每天口服奈拉替尼錠劑及每天克羅非馬125 mg延遲釋放錠劑(Mytesi®)及QID經口投與之克羅非馬膠囊。表 4. 實驗設計之概述

組	N	治療劑	劑量(mg/劑量)	途徑	頻率	持續時間(天)
1	8	安慰劑	0	PO	QID	28
2	8	克羅非馬	125	PO	QID	28
3	8	克羅非馬	125	PO	BID	28

每天兩次對犬之糞便硬度及排便次數進行評估，其根據類似於人類布里斯托糞便形態評分(human Bristol Stool Form Score)之7分普瑞納糞便標度進行評分。輕度或中度脫水之犬經給予皮下液體及/或減少一天奈拉替尼劑量或一天藥物假期以改善其腹瀉嚴重程度。在28天治療期間，任何治療組中沒有犬在任何時間接受抗運動藥物(如洛哌丁胺)以降低腹瀉發生率或嚴重程度。

藉由以下評定克羅非馬在經口給藥奈拉替尼後對降低腹瀉嚴重程度的藥理學作用：a)測定「有反應者」犬之比例，該犬定義為在4週治療期之至少2週內水樣糞便≤ 7次之犬；b)評估各治療組中每週水樣糞便的平均次數；c)比較藉由所有治療組與安慰劑組中每週平均糞便評分測定的糞便硬度；d)比較所有治療組及安慰劑組中每劑量之奈拉替尼之每週水樣糞便的平均次數；e)比較每週平均糞便評分，所有治療組及安慰劑組中每劑量之奈拉替尼；及f)評估所有治療組與安慰劑組中體重、臨床化學及血液學參數的變化。

在各週計算概括統計量且經由t測試計算成對的p值以判定經克羅非馬治療之組與對照組的差異。使用作為協變量之基線糞便評分進行協方差分析(ANCOVA)。最小二乘法(Least Squares LSM)結果根據基線分數進行調整。結果

在此研究之28天治療期間之任何時間，治療組中之任一者的體重、臨床化學及血液學參數不存在明顯差異。

八分之三(3/8，37.5%)對照犬在4週時間段之至少2週內每週有≤ 7次水樣糞便。相比之下，8分之7 (87.5%)經克羅非馬QID治療之犬及8分之6 (75%)經克羅非馬BID治療之犬在4週治療期之2週內每週有≤ 7次水樣糞便。邏輯回歸分析顯示，對照組顯著不同於克羅非馬QID (優勢比= 17.8，p值=0.02)及/或克羅非馬BID (優勢比= 26.8，p值= 0.03)。接受克羅非馬QID之犬比對照組中所登記之犬成為「有反應者」更可能26.8倍。表 5. 有反應者及無反應者犬之實例 無反應者：總水樣糞便 42 次

第1 週	第2 週
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28	觀測 2 次/ 天
2		7	4	6	6	7	4	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	7	3	7	7	7	7	糞便評分
每週10次水樣大便	每週13次水樣大便

第3 週	第4 週
15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28
29	30	31	32	33	34	35	36	37	38	39	40	41	42	43	44	45	46	47	48	49	50	51	52	53	54	55	56	Observe 2 次/ 天
7	7	7	7	7	7	7	7	7		5	7	7	7	7	4	7	2	2	2	7	7	7	3	6	1	7	5	糞便評分
每週12次水樣大便	每週7次水樣大便

有反應者：總水樣糞便 29 次

第1 週	第2 週
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28	觀測 2 次/ 天
2		2	5	6	5	6	7	4	3	6		6	7	7	7	7	6	7	6	7	7	7	7	5	7	7	2	糞便評分
每週6次水樣大便	每週12次水樣大便

第3 週	第4 週
15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	25	26	27	28
29	30	31	32	33	34	35	36	37	38	39	40	41	42	43	44	45	46	47	48	49	50	51	52	53	54	55	56	觀測 2 次/ 天
6	5	7	5	3	6	4	2	3	7	7	7	6	2	4	2	5	7	1		2	6	7		6	2	2	2	糞便評分
每週7次水樣大便	每週4次水樣大便

在第1週及整個4週治療期之治療結束時，經安慰劑及克羅非馬治療BID及QID組之每週水樣糞便的平均次數顯示於表6中。當與對照犬(p＜0.05)相比時，在整個28天時間段內之總水樣糞便的平均次數顯著低於克羅非馬BID及QID組。表 6. 治療組之每週水樣糞便 (WS) 的次數

治療組	WS/wk之次數- 第1週	p值	WS/週之次數-整體	p值
對照組	7.54	-	8.71
QID	4.35	0.048	5.74	0.021
BID	4.36	0.043	5.96	0.028

WS，水樣糞便；wk，週。

如由每週平均糞便評分所量測之糞便硬度證實，克羅非馬QID及BID組具有更多成形糞便，而對照組犬具有更多鬆散/水樣糞便。治療組之結果顯示於表 7 中。當與對照組(p＜0.1)相比時，克羅非馬BID組存在較少的奈拉替尼劑量減少的趨勢。治療組之每週奈拉替尼劑量減少的平均數目顯示於表 8 中。表 7. 治療組之每週平均糞便評分 (FS)

治療組	每週平均糞便評分-整體	p值
對照組	5.09
BID	3.85	0.10
QID	4.12	0.033

表 8. 治療組之每週奈拉替尼劑量減少之數目

治療組	奈拉替尼之每週劑量減少之平均數目-整體	p值
對照組	4.87
BID	4.31	0.12
QID	4.26	0.009

與對照組相比，在第1週期間以及在整個28天治療期內，克羅非馬BID犬每週每奈拉替尼劑量之水樣糞便的平均次數顯著減少。第1週之結果及整體結果顯示於表 9 中。表 .9 治療組之每週每奈拉替尼劑量之水樣糞便 (WS) 的平均次數

治療組	每週每奈拉替尼之平均WS–第1週	p值	WS/週之次數–整體	p值
對照組	6.20	-	7.22	-
QID	3.44	0.034	4.72	0.052
BID	3.38	0.026	4.68	0.043

與對照組相比，由每週每奈拉替尼劑量之平均糞便評分所量測之糞便硬度顯示在整個28天治療期內克羅非馬QID及BID組顯著更多的成形糞便。結果顯示於表 10 中。表 10. 治療組之每週每奈拉替尼劑量之平均糞便評分

治療組	每週每奈拉替尼劑量之平均糞便評分–整體	p值
對照組	5.09
BID	3.85	0.010
QID	4.12	0.033

結論

此研究表明，在基於曲妥珠單抗之療法後，一級抗分泌性止瀉藥物克羅非馬顯著降低與每天經口投與奈拉替尼(一種指示用於輔助治療患有早期Her-2陽性乳癌之成人患者的激酶抑制劑)相關之腹瀉的發生率及嚴重程度。此項非臨床研究在雌性犬中進行，而無需同時投與洛哌丁胺(鴉片劑)且證實克羅非馬之氯離子通道調節的生理作用機制導致在給藥奈拉替尼後之腹瀉發生率及嚴重程度的顯著降低。

克羅非馬亦證實，在4週治療期之至少2週內「有反應者」之數目顯著提高，如由每週≤ 7次水樣糞便之臨限值所定義。

Claims (25)

1. 一種為正接受化學療法之人類個體治療化學療法引起之腹瀉(CID)的方法，其包含向有此需要之個體投與包含有效量之克羅非馬(crofelemer)之組合物以治療CID。
2. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬可與其他化學治療劑組合投與。
3. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬與化學療法同時投與，以減少或延緩CID之發作。
4. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬在化學療法之前投與，以預防、減少或延緩CID之發作。
5. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬在化學療法之後投與，以減少CID之發作或治療CID。
6. 如前述請求項中任一項之方法，其中該化學療法係選自烷基化劑、蒽環黴素(anthracyclines)、細胞骨架瓦解劑(紫杉烷(taxane))、埃博黴素(epothilones)、組蛋白去乙醯基酶抑制劑、拓樸異構酶I之抑制劑、拓樸異構酶II之抑制劑、激酶抑制劑、核苷酸類似物及前驅體類似物、肽抗生素、基於鉑之藥劑及類視黃素。
7. 如請求項6之方法，其中該化學療法包含一或多種酪胺酸激酶抑制劑。
8. 如請求項7之方法，其中該酪胺酸激酶抑制劑係選自拉帕替尼(lapatinib)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、埃羅替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、阿西替尼(axitinib)、伊馬替尼(imatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、達沙替尼(dasatinib)、卡博替尼(cabozantinib)、蘆可替尼(ruxolitinib)、奈拉替尼(neratinib)、伯舒替尼(bosutinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、阿法替尼(afatninib)、侖伐替尼(lenvatinib)、圖卡替尼(tucatinib)、凡德他尼(vandetanib)、色瑞替尼(ceritinib)、克唑替尼(crizotinib)、達可替尼(dacomitinib)及伐拉替尼(valatinib)。
9. 如請求項7之方法，其中該酪胺酸激酶抑制劑(TKI)係選自間變性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase；ALK) TKI (例如，克唑替尼、色瑞替尼及阿來替尼(alectinib))。
10. 如請求項6之方法，其中該化學療法為磷酸肌醇3-激酶抑制劑。
11. 如請求項10之方法，其中該磷酸肌醇3-激酶抑制劑為阿培利司(alpelisib)。
12. 如請求項6之方法，其中該化學療法為週期素依賴性激酶(cyclin-dependent kinase；CDK) 4/6/抑制劑，視情況為阿貝西利(abemaciclib)。
13. 如請求項1至6中任一項之方法，其中該化學療法包含一或多種人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑。
14. 如請求項9之方法，其中該人類表皮生長因子受體(HER)抑制劑係選自RG7116、RG1273 (帕妥珠單抗(pertuzumab)，Perjeta®)、RG3502 (曲妥珠單抗(trastuzumab)依曼他星(emantasine)，T-DMI)、RG597 (曲妥珠單抗，HERCEPTIN)、RGA201 (RG7160)、埃羅替尼(Tarceva®)、達可替尼(PF-00299804)、PF-05280014 (輝瑞(Pfizer)之RG597之生物類似藥mAB)。
15. 如請求項1之方法，其中在個體開始出現CID之症狀之後投與該克羅非馬。
16. 如請求項1之方法，其中在採用化學療法治療期間投與該克羅非馬。
17. 如請求項1之方法，其中投與該克羅非馬直至CID之症狀改善，然後停止投與克羅非馬。
18. 如請求項1之方法，其中該投與包含向有此需要之個體每天投與約250 mg至約1000 mg；每天投與約250 mg；每天投與約500 mg；每天投與約1000 mg；每天兩次投與約125 mg；每天兩次投與約250 mg；或每天兩次投與約500 mg之克羅非馬。
19. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬以包覆腸溶包衣之口服劑型投與。
20. 如請求項1之方法，其中該克羅非馬以未包覆腸溶包衣之口服劑型投與。
21. 如請求項1之方法，其中該個體可耐受該個體在不投與克羅非馬之情況下不能耐受之化學治療劑，或可耐受比該個體在不投與克羅非馬之情況下可耐受之更高劑量的化學治療劑。
22. 如請求項1之方法，其中若個體顯示以下中之一或多者：每天排便次數減少、每天水樣排便次數減少、疼痛或不適之每天腹部評分改善、每天糞便硬度之評分改善、糞便硬度減小、個體經歷尿急之每週天數減少、個體經歷大便失禁之每週天數減少或由於腹瀉嚴重惡化而進行的不定期訪診減少，則該個體視為已經治療。
23. 如請求項1之方法，其中該投藥導致根據通用毒性準則(Common Toxicity Criteria)之腹瀉等級降低1級、2級或3級。
24. 如請求項1之方法，其中該個體正接受化學療法以治療選自以下之癌症：乳癌、卵巢癌、前列腺癌、膀胱癌、宮頸癌、子宮癌、睪丸癌、腎癌、甲狀腺癌、口腔癌或口咽癌、星形細胞瘤、肉瘤、間皮瘤、脊膜瘤、淋巴瘤、骨髓瘤、頭頸癌、肺癌、癌瘤(例如，鱗狀細胞癌)、惡性黑色素瘤、腹膜癌、胃癌、肝癌、結腸直腸癌、膽囊癌、骨癌、胰臟癌、舌癌、食道癌、腦瘤、腦幹神經膠質瘤、其轉移瘤及白血病。
25. 一種治療正接受針對HER陽性乳癌之化學療法之人類個體中之CID的方法，該方法包含以125 mg之劑量每天兩次向該人類個體投與包含克羅非馬之組合物，其中該化學療法為曲妥珠單抗、帕妥珠單抗、多西他賽(docetaxel)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、或奈拉替尼或其組合，使用或不使用卡鉑(carboplatin)。