TW202206106A - 一類載藥的大分子及其製備方法 - Google Patents

Abstract

本揭露涉及一類載藥的大分子及其製備方法。具體地，該大分子是負載藥物及藥物代謝動力學修飾劑的樹枝狀聚合物，尤其涉及藉由特定連接子將藥物連接於樹枝狀聚合物。該類大分子可以用於對藥物的釋放速率進行調節，具體是藉由連接子的選擇進行的。

Description

一類載藥的大分子及其製備方法

本揭露屬於醫藥領域，關於負載藥物及藥物代謝動力學修飾劑的樹枝狀聚合物，尤其是涉及藉由特定連接子將藥物連接於樹枝狀聚合物。

目前，雖然藥物的研究開發取得了長足進步，但還是有許多藥物在臨床試驗階段因其物理性質(譬如溶解性)使得其難以配製成合適的製劑進行給藥，或由於給藥後發生的高藥物濃度期間導致的毒性效應及差的治療指數而失敗。此外，還包括其它缺點如吸收差、生物利用度低、體內穩定性差、靶向性差導致的全身性副作用，以及在給藥後無法控制其在體內的生物分佈、代謝和腎或肝清除。隨著藥物研究的不斷進步，出現了一些新的研究領域和一些具有重大潛力的技術方法來推動藥物的開發，諸如在脂質體、膠束或聚合膠束製劑中配製藥物試劑，以及將藥物試劑共價附著至親水聚合物主鏈等。雖然這些策略可增溶藥物活性劑且在某些情況下改善生物利用度和靶向性，但藥物活性劑的釋放存在困難，在某些情況下，在藥物分子到達目標器官之前，載體就會快速降解釋放出藥物活性劑。很多情況下藥物活性劑從載體的釋放速率為可變的，因此使藥物在體內或在目標器官中達不到有效治療劑量。

近年來，已發現樹枝狀聚合物在生物技術和藥物應用領域取得明顯進步(Xiangyang Shi et al.Sci China Mater,2018,61(11),1387-1403.)。樹枝狀聚合物是具有密集分支結構的特定種類的聚合物，從核心分子出發不斷地向外重複支化生長而得到的結構類似於樹狀的大分子，即核心經過分支長到一定長度後以分成兩個分枝，如此重複進行，直到長得足夠稠密以致於長成像球形一樣的樹叢(V Gajbhiye et al.Journal of Pharmacy and Pharmacology,2009,61,989-1003.)，其特徵在於比普通聚合物更高濃度的官能團/單位分子體積。特別是樹枝狀聚合物的獨特性質，例如其高分支程度、多價、球形結構和良好確定的分子量，使得其給予用於藥物遞送的新支架的希望。在過去十年中，關於生物相容性樹枝狀聚合物的設計和合成及其對生物科學的許多領域包括藥物遞送的應用的研究也越來越受關注。

澳大利亞的Starpahrma公司利用其開發的樹枝狀聚賴胺酸進行抗癌藥物的負載和運輸，來增強藥物的藥理性質，確保了藥物在適當的時候被送到身體的適當部位，這種方法被稱為“藥物輸送”，這項技術以DEP®商標上市。其中DEP®-多西他賽、DEP®-卡巴他賽以及DEP®-伊立替康是該公司目前利用DEP®技術重點開發處於臨床研究階段的3款抗癌藥物，顯示了很好的開發前景。

CN103796684A揭露了藉由二酸連接子將藥物與樹枝狀聚合物連接起來的大分子，尤其是藉由包含被氧、氮或硫原子間斷的C₁-C₁₀的飽和支鏈或直鏈的二酸連接子連接。

本揭露提供了一種大分子，其包含：

i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

ii)第一端基，其為包含羥基、胺基、羧基或者巰基的藥學活性劑或其殘基A；

iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

其中所述第一端基藉由連接子-X₁-L-X₂-共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基，X₁為連接子與藥學活性劑的連接基，X₂為連接子與樹枝狀聚合物的連接基，其中：

a)X₁和X₂選自-C(O)-或不存在，L為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基；當X₁和X₂中至少一個不存在時，所述C_1-10直鏈或支鏈伸烷基任選被取代基取代；當X₁和X₂均為-C(O)-時，所述C_1-10直鏈或支鏈伸烷基進一步被取代基取代；所述的取代基選自氘、羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團；或者

b)X₁和X₂選自-C(O)-或不存在，L為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烯基或伸炔基，所述伸烯基和伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代，或者

c)X₁選自-C(O)-或不存在，X₂不存在，L與樹枝狀聚合物表面 胺基的氮原子連接後形成含氮雜環結構

，L₁為任選被一個或多個 氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基、伸烯基或伸炔基，所述伸烷基、伸烯基或伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、伸環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代，X₃選自CR₅或N，其中R₅選自氫、氘、羥基、烷基或烷氫基，m選自0、1或2；或者

d)X₁選自-C(O)-或不存在，X₂不存在，且L為

，L₂ 為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基、伸烯基或伸炔基，所述伸烷基、伸烯基或伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代，n選自1或2，其中含氮雜環端與樹枝狀聚合物連接，L₂端藉由-C(O)-或者直接與藥學活性劑連接；

其中，R₁、R₂各自獨立地選自氫、羥基、C_1-6烷基、環烷基、C_1-6烷氧基。

在一些實施方案中，X₁和X₂均為-C(O)-，L為被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-6直鏈或支鏈伸烷基，所述C_1-6直鏈或支鏈伸烷基被獨立地選自氘、羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、C_1-6鹵烷氧基和鹵素的一個或多個取代基所取代。

在一些實施方案中，X₁和X₂均為-C(O)-，L為被一至三個獨立地選自硫或氮的原子間斷的C_1-6直鏈或支鏈伸烷基，所述C_1-6直鏈或支鏈伸烷基被獨立地選自羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、C_1-6鹵烷氧基和鹵素的一個或多個取代基所取代。

在一些實施方案中，所述C_1-6直鏈或支鏈伸烷基被一個或多個C_3-7伸環烷基取代。

在一些實施方案中，連接子為-C(O)-X-C(O)-，

其中X為

；

R_a、R_b各自獨立地選自氫、C_1-6烷基，或R_a、R_b與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；R_c、R_d各自獨立地選自氫、C_1-6烷基，或R_c、R_d與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；條件是至少有一個R_a、R_b與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基或至少有一個R_c、R_d與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；

X’選自-CH₂-、-O-、-S-和-NR₃-；

R₃為氫或C_1-6烷基；

s和t各自獨立地選自1至4的整數；

R_a、R_b、R_c、R_d在每次出現時可選擇相同或不同的基團。

在一些實施方案中，X為

、

、

、

、

或

，其中s1和t1各自獨立地選自1至4 的整數。

在一些實施方案中，X’選自-O-、-S-、-NH-和-N(CH₃)-。

在一些實施方案中，連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵。

在一些實施方案中，藥學活性劑或其殘基A包含羥基，並與X1形成酯鍵。

在一些具體實施方案中，連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵，結構選自如下：

在一些實施方案中，連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵，結構如下：

在一些實施方案中，連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂不存在，L的一部分基團形成氮雜環，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成碳-氮鍵。

在一些具體實施方案中，連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂不存在，L的一部分基團形成氮雜環，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成碳-氮鍵，結構選自如下：

本揭露還提供一種大分子，其包含：

i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

ii)第一端基，其為包含羥基、胺基、羧基或者巰基的藥學活性劑或其殘基；

iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

其中所述第一端基藉由三酸連接子共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基，三酸連接子中的一個羰基與藥學活性劑或其殘基連接，另外兩個羰基與樹枝狀聚合物的同一表面胺基連接並因此與連接子部分形成含氮雜環。

在一些實施方案中，所述的三酸連接子與藥學活性劑或其殘基A以及樹枝狀聚合物D連接，形成如下的結構：

，其中X₄選自C、N，L₃為任選被氧、硫或氮原子間斷的C_1-10伸 烷基、伸烯基或者伸炔基，p為選自0-5的整數。

在一些實施方案中，所述的三酸連接子與藥學活性劑或其殘基A以及樹枝狀聚合物D連接，形成選自如下的結構：

其中，D為樹枝狀聚合物，A為藥學活性劑或其殘基。

在一些實施方案中，所述的藥學活性劑或其殘基含有羥基，並與三酸連接子的羰基形成酯鍵。

本揭露還提供一種大分子，其包含：

i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

ii)第一端基，其為艾日布林、曲貝替定或盧比替定(Lurbinectedin)；

iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

其中所述第一端基藉由二酸連接子共價連接於所述樹枝狀聚合物樹枝狀聚合物的表面胺基，所述二酸連接子包含任選被一個或多個硫或氮原子間斷的C_1-10烷基鏈。

在一些實施方案中，所述的二酸連接子包含的C_1-10烷基鏈未被氧、硫或氮原子間斷。

在特定的實施方案中，二酸連接子可選自

、

在一些實施方案中，所述的二酸連接子包含被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10烷基。

在特定的實施方案中，二酸連接子可選自

、

本揭露還提供一種大分子，其包含：

i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

ii)第一端基，其為包含羥基、胺基、羧基或者驗基的藥學活性劑或其殘基，並且不是多西他賽；

iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

其中所述第一端基藉由選自如下的連接子共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

在一些實施方案中，選擇本揭露的連接子可以提供所需的藥物釋放速率，例如，快速釋放或者緩慢釋放。

在一些實施方案中，大分子的藥學活性劑的釋放速率比不依賴於大分子遞送的快一些，可能至少快1倍。在一些實施方案中，大分子的藥學活性劑的釋放速率比不依賴於大分子遞送的釋放的更慢，可能慢兩倍、三倍、四倍、五倍、六倍、七倍、八倍、九倍、十倍或者十倍以上、十五倍以上、二十倍以上、三十倍以上。低釋放速率的大分子適合將大分子配製成長時間例如1周到3個月、1個月到6個月、6個月以上的時間內緩慢釋放的藥物。快速釋放較佳在0-8h內，尤其是0-4h內，特別是0-2h，更特別是5-60分鐘內釋放大於50%的藥學活性劑。中等釋放較佳在1-72小時內，尤其是2-48小時內釋放大於50%的藥學活性劑。藥學活性劑的釋放速率可以藉由選擇合適的連接子進行控制，釋放速率還依賴藥物活性劑的特性。在一些實施方案中，藥學活性劑藉由相同的連接子連接於樹枝狀聚合物。在另一些實施方案中，藥學活性劑藉由兩種或者多種連接子與樹枝狀聚合物進行連接，以使藥學活性劑可以以不同的釋放速率從大分子釋放。

在一些實施方案中，所述的第一端基與第二端基以1：2-2：1的比率存在，尤其是1：2、1：1、2：1。在一些實施方案中，所述大分子包含為封閉基團、藥物或者靶向基團的第三端基。封閉基團可以是醯基。在一些實施方案中，第一端基、第二端基和第三端基的比率為1：1：1-1：2：2，尤其是1：2：1。在一些實施方案中，其中至少50%的端基包含第一端基或者第二端基中的一者。在特定實施方案中，藥物活性劑結合至大於14%、25%、27%、30%、39%、44%或48%的表面胺基。在一些實施方案中，藥物代謝動力學修飾劑結合至大於15%、25%、30%、33%或46%的表面胺基的總數。

本揭露所述藥學活性劑可選自：麻醉劑、抗酸劑、抗體、抗感染藥、生物製品、心血管藥物、造影劑、利尿劑、補血藥、免疫抑制劑、激素和類似物、營養製品、眼科藥物、疼痛治療劑、呼吸藥物、佐劑、同化劑、抗關節炎藥、抗痙攣藥、抗組織胺藥、消炎藥、抗潰瘍藥、行為矯正藥物、腫瘤藥物、中樞神經系統藥物、避孕藥、糖尿病治療藥物、生育藥物、生長促進劑、止血藥、免疫刺激劑、肌肉鬆弛藥、肥胖治療劑、骨質疏鬆症藥物、肽、鎮靜劑和安定劑、尿道酸化劑或維生素。

在一些實施方案中，藥物活性劑為腫瘤藥物、類固醇、鴉片類鎮痛藥、呼吸系統藥物、中樞神經系統(CNS)藥物、高膽固醇血症藥物、抗高血壓藥物、抗生素、免疫抑制藥物、抗菌劑、促黃體激素釋放激素(LHRH)激動劑、LHRH拮抗劑、抗病毒藥、抗逆轉錄病毒藥物、雌激素受體調節劑、生長抑制素類似物、抗發炎藥物、維生素D2類似物、合成甲狀腺素、抗組織胺劑、抗真菌劑或非類固醇類抗發炎藥物(NSAID)。

在一些實施方案中，所述的腫瘤藥物包括紫杉烷(如紫杉醇、卡巴他賽和多西他賽)、喜樹鹼及其類似物(如伊立替康和托泊替康)、其它抗微管劑(如長春氟寧)、核苷類(如吉西他濱、克拉屈濱、氟達拉濱、卡培他濱、地西他濱、阿紮胞苷、氯法拉濱和奈拉濱)、激酶抑制劑(如達沙替尼(sprycel)、坦羅莫斯(temisirolimus)、達沙替尼、AZD6244、AZD1152、PI-103、R-roscovitine、奧羅莫星和purvalanol A)和埃博黴素B類似物(如伊沙匹隆)、蒽環類藥物(anthrocyclines)(如氨柔比星、多柔比星、表柔比星和戊柔比星)、海鞘素衍生物(如曲貝替定(trabectecin)、盧比替定(lurbinectedin))、蛋白酶體抑制劑(如硼替佐米)和其它拓撲異構酶抑制劑、嵌入劑和烷化劑、微管抑制劑如艾日布林等，或這些藥物分子的結構改造物。

在一些實施方案中，所述的藥學活性劑選自紫杉烷類藥物、喜樹鹼衍生物、核苷類藥物、蒽環類藥物、海鞘素衍生物、蛋白酶體抑制劑、微管抑制劑、BCL-2抑制劑、BCL-X_L抑制劑、選擇性核輸出抑制劑、抗代謝藥物、酪胺酸激酶抑制劑、PLK1抑制劑、CDK4/6抑制劑、BTK抑制劑、非類固醇激素受體拮抗劑和類固醇，較佳為紫杉烷類藥物、BCL-2抑制劑和BCL-X_L抑制劑。

在一些實施方案中，所述的類固醇包括合成類固醇(如睪固酮、雙氫睪固酮和乙炔雌二醇)和皮質類固醇(如可的松、潑尼松龍(prednisilone)、布地奈德、曲安西龍、氟替卡松、莫米松、安西奈德、氟輕鬆(flucinolone)、醋酸氟輕鬆(fluocinanide)、地奈德、氯氟舒松、潑尼卡酯、氟可龍、地塞米松、倍他米松和氟潑尼定(fluprednidine))。

在一些實施方案中，所述的鴉片類鎮痛藥包括嗎啡、羥嗎啡酮、納洛酮、可待因、羥考酮、甲基納曲酮、氫嗎啡酮、丁丙諾啡和埃托啡。

在一些實施方案中，所述的呼吸系統藥物包括支氣管擴張劑、吸入類固醇和減充血劑特別是沙丁胺醇、異丙托溴銨、孟魯司特和福莫特羅。

在一些實施方案中，所述的CNS藥物包括抗精神病藥(如喹硫平)和抗抑鬱藥(如文拉法辛)。

在一些實施方案中，所述的高膽固醇血症藥物包括依澤替米貝和他汀類如辛伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀和瑞舒伐他汀。

在一些實施方案中，所述的抗高血壓藥物包括氯沙坦、奧美沙坦、坦酯(medoxomil)、美托洛爾(metrolol)、曲伏前列素和波生坦。

在一些實施方案中，所述的免疫抑制藥物包括糖皮質激素、細胞抑制劑、抗體片段、抗嗜免疫劑、干擾素、TNF結合蛋白特別是鈣調磷酸酶 抑制劑(cacineurin inhibitors)如他克莫司、黴酚酸及其衍生物，如嗎替麥考酚酯和環孢菌素。

在一些實施方案中，所述的抗菌劑包括抗生素，如阿莫西林、美羅培南和克拉維酸。

在一些實施方案中，所述的LHRH激動劑包括醋酸戈舍瑞林、地洛瑞林和亮丙瑞林。在一些實施方案中，所述的LHRH拮抗劑包括西曲瑞克、加尼瑞克、阿巴瑞克和地加瑞克(degarelix)。

在一些實施方案中，所述的抗病毒藥包括核苷類似物如拉米夫定、齊多夫定、阿巴卡韋和恩替卡韋，以及抗逆轉錄病毒藥物包括蛋白酶抑制劑如阿紮那韋、lapinavir和利托那韋(ritonavir)。

在一些實施方案中，所述的雌激素受體調節劑包括雷洛昔芬和氟維司群。

在一些實施方案中，所述的生長抑制素類似物包括奧曲肽。

在一些實施方案中，所述的抗發炎藥物包括美沙拉秦以及合適的NSAID包括撲熱息痛(對乙醯胺基酚)。

在一些實施方案中，所述的維生素D2類似物包括帕立骨化醇。

在一些實施方案中，所述的合成甲狀腺素包括左甲狀腺素。

在一些實施方案中，所述的抗組織胺劑包括非索非那定。

在一些實施方案中，所述的抗真菌劑包括唑類諸如伏立康唑(viriconazole)。

在一些實施方案中，所述的藥學活性劑是艾日布林。在一些實施方案中，所述的藥學活性劑是多西他賽。在一些實施方案中，所述的藥學活性劑是曲貝替定。在一些實施方案中，所述的藥學活性劑是盧比替定(lurbinectedin)。

在一些實施方案中，所述的藥學活性劑選自多西他賽、伊立替康、吉西他濱、卡培他濱、地西他濱、阿紮胞苷、多柔比星、表柔比星、曲貝替定、盧比替定、硼替佐米、艾日布林、塞利尼索、維奈托克、特西他賽、培美曲塞、卡巴他賽、卡博替尼、昂凡色替(Onvansertib)、下式化合物2，或這些藥物分子的結構改造物，

在一些實施方案中，所述的藥學活性劑在水溶液中是微溶或者不溶的。

第二端基為藥物代謝動力學修飾劑，可以修飾或調解藥學活性劑或大分子的藥物代謝動力學特徵，包括吸收、分佈、代謝和/或排泄。在特定的實施方案中，藥物代謝動力學修飾劑延長藥學活性劑的血漿半衰期，使得連接於大分子的藥學活性劑的半衰期比單純的藥學活性劑或在非樹枝狀聚合物載體上的藥學活性劑的半衰期更長。較佳地，大分子或組成物的半衰期比單純的藥學活性劑或在非樹枝狀聚合物載體上的藥學活性劑的半衰期長至少2倍，且更佳地至少10倍。

所述的藥物代謝動力學修飾劑可選自聚乙二醇、聚乙基噁唑啉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙二醇、葉酸鹽或者關於細胞表面受體的配體的葉 酸鹽衍生物。在一些實施方案中，所述的藥物代謝動力學修飾劑是聚乙二醇。在一些實施方案中，所述的聚乙二醇具有220至5500Da範圍內的分子量，例如可以是220-2500Da、570-2500Da、220-1100Da、570-1100Da、1000-5500Da、1000-2500Da、1000-2300Da的分子量。在一些實施方案中，所述的藥物代謝動力學修飾劑與所述樹枝狀聚合物表面胺基形成醯胺鍵。

靶向基團為結合至具有一些選擇性的生物目標細胞、器官或組織的試劑，從而有助於將大分子導向體內特定的靶標並使其在該目標細胞、器官或組織中積聚。另外，靶向基團可以為藉由受體介導的胞吞作用積極進入細胞或組織的大分子提供機制。特定的實例包括凝集素和抗體以及其它針對細胞表面受體的配體(包括小分子)。該相互作用可藉由任何類型的鍵或締合(包括共價鍵、離子鍵和氫鍵、凡得瓦力)進行。合適的靶向基團包括結合於細胞表面受體的那些，例如，葉酸受體、腎上腺素能受體、生長激素、促黃體激素受體、雌激素受體、表皮生長因數受體、成纖維細胞生長因數受體(如FGFR2)、IL-2受體、CFTR和血管上皮生長因數(VEGF)受體。

在一些實施方案中，靶向基團為促黃體激素釋放激素(LHRH)或其結合於促黃體激素釋放激素受體的衍生物。在一些實施方案中，靶向基團為LYP-1，其為靶向腫瘤的淋巴系統而非正常組織的淋巴系統的肽。在一些實施方案中，靶向基團可為RGD肽。RGD肽為含有序列-Arg-Gly-Asp-的肽，該序列為細胞外基質蛋白質中主要的整聯蛋白識別位點。在一些實施方案中，靶向基團可為葉酸。雌激素也可用於表達雌激素受體的目標細胞。

在一些實施方案中，靶向基團可直接地或較佳地藉由連接基團結合至樹枝狀聚合物核心。連接基團可為能夠結合至核心的官能團和靶向基團上的官能團的任何二價基團。

本揭露的大分子包含樹枝狀聚合物，其中結構單元的最外代具有表面胺基。大分子的樹枝狀聚合物的特性並不特別地重要，條件是它具有表面胺基。例如，樹枝狀聚合物可以為聚賴胺酸、聚賴胺酸類似物、聚醯胺基胺(PAMAM)、聚乙烯亞胺(PEI)或聚醚羥胺(PEHAM)樹枝狀聚合物。在一些實施方案中，樹枝狀聚合物是聚賴胺酸或聚賴胺酸類似物。聚賴胺酸或聚賴胺酸類似物包含核心和2-7代賴胺酸或賴胺酸類似物，例如包含2代、3代、4代、5代、6代或者7代賴胺酸或賴胺酸類似物。

在一些實施方案中，所述的賴胺酸具有如1所示結構：

在一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如2所示結構：

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如3所示結構：

，其中a為1或者2的整數；b和c相同或不同且為1至4的 整數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如4所示結構：

，其中a為0至2的整數；b和c相同或不同且為2至6的整 數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如5所示結構：

，其中a為0至5的整數；b和c相同或不同且為1至5 的整數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如6所示結構：

，其中a為0至5的整數；b和c相同或不同且為0至5的 整數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如7所示結構：

，其中a為0至5的整數；b和c相同或不同且為1至5 的整數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如8所示結構：

，其中a為0至5的整數；b、c和d相同或不同且為1 至5的整數。

在另一些實施方案中，所述賴胺酸類似物具有如9所示結構：

，其中a為0至5的整數；b和c相同或不同且為1至5 的整數。

本揭露所述的樹枝狀聚合物，尤其是聚賴胺酸或聚賴胺酸類似物的核心可選自二苯甲基胺(BHA)、賴胺酸的二苯甲基胺(BHALys)或賴胺酸類似物或者如下10-26所示的結構：

，其中a為1至9，較佳為1至5的整數；

，其中a、b和c相同或不同 且為1-5的整數，d為0-100，較佳為1-30的整數；

，其中a和b相同或不同，且為0至5的整 數；

，其中a和c相同或不同且為 1-6的整數，b為0-6的整數；

，其中a和d相同或不同且 為1-6的整數，b和c相同或不同且為0-6的整數；

，其中a和b相同或不同且為1-5，特別是1-3，尤其是1的整數；

，其中a、b和c相同或不同，且為選自1-6的整數；

，其中a、b和c相同或不同，且為選自0-6的 整數；

、

或

，其中a、b和c相同或不 同，且為選自0-6的整數；

，其中a、b和c相同或不同，且為0-6的整數，d、e和f相同或不同，且為1-6的整數；

，其中a、b和c相同或不同，為1- 6的整數；

，

，其中a、b、c和d可以相 同或不同，且為0-6的整數；

，其中a、b、c和d可以相同或不同， 且為1-6的整數；或者

，其中a、b、c和d可以相同或 不同，且為0-6的整數，e、f、g和h可以相同或不同，且為1-6的整數。

本揭露還涉及一種藥物組成物，包含本揭露的大分子和藥學上可接受的載體。在一些實施方案中，所述的藥物組成物中不含增溶賦形劑，例如聚乙氧基蓖麻油、聚山梨醇酯。在一些實施方案中，所述的藥物組成物藉由透皮、口服、注射等方式給藥。

本揭露的大分子可以被配製成的組成物，其包括適於經口、直腸、局部、鼻內、吸入、氣霧劑、眼部、或腸胃外(包括腹膜內、靜脈內、皮下或肌內注射)施用的那些。組成物可方便地以單位劑型呈現並且可藉由製藥領域眾所周知的任何方法製備。所述方法包括使大分子與構成一種或多種輔助成分的載體締合的步驟。通常，組成物藉由使大分子與液體載體締合形成溶液或懸浮液製備，或可選地使大分子與適於形成固體，任選地顆粒產物的製劑組分締合，然後，如果必要，將產物成形為所需的遞送形式。本發明的固體製劑，當為顆粒時，通常將包含約1奈米至約500微米的顆粒尺寸範圍。通常，針對預期用於靜脈內施用的固體製劑，顆粒直徑範圍通常將為約1nm至約10微米。組成物可含有本發明的大分子，所述大分子為具有小於1000nm，例如5至1000nm，特別是5至500nm，尤其是5至400nm(如5至50nm且特別是5至20nm)的顆粒直徑的奈米顆粒。在特定實施方案中，組成物含有具有5至20nm的平均尺寸的大分子。在一些實施方案中，大分子在組成物中為多分散的，PDI為1.01至1.8之間，特別是1.01至1.5之間，且尤其是1.01至1.2之間。在特定實施方案中，大分子在組成物中為單分散的。特別佳為無菌的、凍乾的組成物，所述組成物在注射前於水性媒介物中重構。

在一些實施方案中，組成物含有具有5至20nm的平均尺寸的大分子。在一些實施方案中，所述大分子的顆粒尺寸D₉₀或者D₅₀小於1000nm，例如5至1000nm，特別是5至500nm，尤其是5至400nm(如5至50nm，特別是5至20nm)。在特定實施方案中，組成物含有具有D₅₀為5至20nm的大分子。

本揭露的大分子也可用於提供藥物活性劑的控釋和/或緩釋製劑形式。在緩釋製劑中，選擇製劑成分以在延長的時期裡(如數天、數周或數月)從製劑中釋放大分子。這類製劑包括經皮貼劑或在可皮下沉積的可植入裝置中 或藉由靜脈注射、皮下注射、肌內注射、硬膜內注射或顱內注射。在控釋製劑中，選擇二酸連接子以在給定的時間視窗中釋放其大部分的藥物活性劑。例如，當已知大部分的大分子在目標器官、組織或腫瘤中積聚所花費的時間時，在積聚時間已過去之後可以選擇連接子以釋放其大部分的藥物活性劑。這可允許在給定時間點在需要其作用的位元點遞送高載藥量。可選地，選擇連接子以在延長的時期裡於治療水準釋放藥物活性劑。在一些實施方案中，製劑可具有多種控釋特性。例如，製劑包含其中藥物藉由不同的連接子連接的大分子，這允許快釋藥物的突釋然後在延長的時期裡以較低但恆定的治療水準較慢釋放。在一些實施方案中，製劑可具有緩釋和控釋特性。例如，可以選擇製劑成分以在延長的時期裡釋放大分子且選擇連接子以遞送恆定的低治療水準的藥物活性劑。在一些實施方案中，藥物活性劑藉由不同的連接子連接於相同的分子。在一些實施方案中，每個藥物-連接子組合連接於相同製劑中的不同的大分子。

在一些實施方案中，所述的藥物組成物中，大分子被配製為在5分鐘至60分鐘之間釋放大於50%的藥學活性劑。在一些實施方案中，所述的藥物組成物中，大分子被配製為在2小時至48小時之間釋放大於50%的藥學活性劑。在一些實施方案中，所述的藥物組成物中，大分子被配製為在5天至30天之間釋放大於50%的藥學活性劑。

本揭露另一方面提供治療或抑制腫瘤生長的方法，其包括施用有效量的本發明的大分子或含有其的藥物組成物，其中作為第一端基的藥物活性劑為腫瘤藥物。本揭露中所述的腫瘤選自黑色素瘤、腦瘤、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結腸直腸癌、肺癌、腎癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、皮膚癌、神經母細胞瘤、肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細胞瘤、睪丸腫瘤、子宮癌、頭頸腫瘤、多發性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、真性紅細胞增多症、白血病、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌和 兒科腫瘤(尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睪丸癌、成神經細胞瘤、視網膜母細胞瘤、肝胚細胞瘤、腎母細胞瘤等)。

在本揭露另一方面，提供用腫瘤藥物治療後降低過敏症的方法，其包括施用本揭露的大分子或含有其的藥物組成物，其中所述組成物基本上不含增溶賦形劑如Cremophor EL和聚山梨醇酯80。

在本揭露的另一方面，提供降低腫瘤藥物或腫瘤藥物的製劑的毒性的方法，其包括施用本揭露的大分子或含有其的藥物組成物，其中所述腫瘤藥物為大分子的第一端基。在一些實施方案中，降低的毒性為血液毒性、神經毒性、胃腸毒性、心臟毒性、肝毒性、腎毒性、耳毒性或腦病毒性。

在本揭露的另一方面，提供降低與腫瘤藥物或腫瘤藥物的製劑相關的副作用的方法，其包括施用本揭露的大分子或含有其的藥物組成物，其中所述腫瘤藥物為大分子的第一端基。在一些實施方案中，減少的副作用選自嗜中性白血球減少、白細胞減少、血小板減少、骨髓中毒性、骨髓抑制、神經病、疲勞、非特異性神經認知問題、眩暈、腦病、貧血、味覺障礙、呼吸困難、便秘、厭食、甲病症、液體瀦留、虛弱、疼痛、噁心、嘔吐、黏膜炎、禿髮、皮膚反應、肌痛、過敏症和過敏性。

在一些實施方案中，本揭露的大分子或包含大分子的藥物組成物可以減少或消除具有試劑如皮質類固醇和抗組織胺劑的術前用藥的需要。

製備樹枝狀聚合物的方法在本領域為已知的。例如，大分子的樹枝狀聚合物可藉由發散方法或收斂方法或其混合製備。

在發散方法中，將結構單元的每代依序加入至核心或前一代。保護具有一個或兩個表面胺基的表面代。如果胺基中的一者得到保護，那麼游離的胺基與連接子、連接子-藥物活性劑或藥物代謝動力學修飾劑中的一者反應。如果兩個胺基均得到保護，它們以不同的保護基團得到保護，那麼可以去 除一個保護基團而不去除另一個保護基團。去除胺基保護基團中的一者並與連接子、連接子-藥物活性劑或藥物代謝動力學修飾劑中的一者反應。一旦初始端基已連接於樹枝狀聚合物，那麼去除另一胺基保護基團且加入另一第一和第二端基。這些基團藉由本領域已知的醯胺形成連接於表面胺基。

在收斂方法中，結構單元的每一代在前一代上建立以形成樹枝化基元。在樹枝化基元連接於核心之前或之後，第一和第二端基可如以上所述連接於表面胺基。

在混合方法中，將結構單元的每一代加入至核心或結構單元的前一代。然而，在最後一代加入至樹枝狀聚合物之前，將表面胺基與端基(例如，第一和第二端基，第一和第三端基或第二和第三端基)官能化。然後將官能化的末代加入至結構單元的亞表面層並將樹枝化基元連接至核心。

藥物活性劑藉由本領域已知的酯化反應與連接子的羧酸中的一者反應。例如，形成活化的羧酸如使用醯氯或酸酐，且與藥物活性劑的羥基反應。如果藥物活性劑具有一個以上的羥基，那麼其它的羥基可以得到保護。

在靶向試劑連接於核心的情況下，核心上的官能團可在樹枝狀聚合物樹枝狀聚合物形成期間得到保護然後去保護並與靶向試劑、連接基團或靶向試劑-連接基團反應。可選地，在形成樹枝狀聚合物樹枝狀聚合物之前，核心可與連接基團或靶向試劑-連接基團反應。

合適的保護基團、其引入和去除的方法描述於Greene& Wuts,Protecting Groupsin Organic Synthesis，第三版，1999。

本揭露還包括大分子或其藥學上可接受的鹽的各種氘代形式，大分子中的每個可用的氫原子可獨立地被氘原子置換。所屬技術領域具有通常知識者將知曉如何合成本揭露的大分子或其藥學上可接受的鹽的氘代形式。

本揭露還包括同位素標記的大分子，大分子中的一個或多個原子被具有不同於自然界中最常見的原子品質或質量數的原子替換。可用於本揭露的大分子的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、氟、碘和氯的同位素，例如³H、¹¹C、¹⁴C、¹⁸F、¹²³I或¹²⁵I。

本揭露的大分子可以呈藥學上可接受的鹽的形式。但是，應理解非藥學上可接受的鹽也落入本揭露的範圍內，因為這些可以在藥學上可接受的鹽的製備中用作中間體或在儲存或運輸過程中可能為有用的。合適的藥學上可接受的鹽包括但不限於藥學上可接受的無機酸(如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、胺基磺酸和氫溴酸)的鹽，或藥學上可接受的有機酸(如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、馬來酸、檸檬酸、乳酸、黏酸、葡萄糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲烷磺酸、甲苯磺酸(toluenesulphonic)、苯磺酸、水楊酸、磺胺酸(sulphanilic)、天冬胺酸、谷胺酸、乙二胺四乙酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗壞血酸和戊酸)的鹽。鹼式鹽包括但不限於與藥學上可接受的陽離子(如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、銨和烷基銨)形成的那些。

除非有相反陳述，否則下列用在說明書和申請專利範圍中的術語具有下述含義。

本揭露所述的“被(一個或多個)氧、硫或氮原子間斷”，例如“被(一個或多個)氧、硫或氮原子間斷的C_1-10伸烷基”，指氧、硫或氮原 子可以位於烷基鏈內部、也可以在烷基鏈的末端。例如，

，表 示連接子-X₁-L-X₂-中，X₁不存在，並且X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵，該處的伸烷基被氧和硫間斷，硫位於烷基鏈的內部，氧在烷基鏈的末端。另外，本揭露為了方便對連接子以及連接子與樹枝狀聚合 物、藥學活性劑的連接關係進行描述引入了“D”和“A”，連接子本身並不包含“D”、“A”、或者“D”、“A”上的基團。

術語“烷基”是指具有1至10個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基。在適當的情況下，烷基可具有指定的碳原子數，例如，C_1-4烷基，所述烷基包括在直鏈或支鏈排列中具有1、2、3或4個碳原子的烷基。合適的烷基的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、4-甲基丁基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、5-甲基戊基、2-乙基丁基、3-乙基丁基、庚基、辛基、壬基和癸基。

術語“伸烷基”是指具有1至10個碳原子的直鏈或支鏈二價烷基。

術語“烯基”是指包括具有2至12個碳原子的支鏈和直鏈烯烴或含有脂族烴基團的烯烴。例如“C_2-6烯基”表示具有2、3、4、5或6個碳原子的烯基。烯基的實例包括但不限於，乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基丁-2-烯基、3-甲基丁-1-烯基、1-戊烯基、3-戊烯基及4-己烯基。

術語“炔基”是指包括具有2至12個碳原子的支鏈和直鏈炔基或含有脂族烴基的烯烴，或若規定指定碳原子數，則意指該特定數目。例如乙炔基、丙炔基(例如1-丙炔基、2-丙炔基)、3-丁炔基、戊炔基、己炔基及1-甲基戊-2-炔基。

“伸烯基”、“伸炔基”是指衍生自烯基或炔基的部分不飽和的支鏈或直鏈二價烴基。在某些實施例中，此類伸烯基任選地被取代。伸烯基的非限制性實例包括伸乙烯基、伸丙烯基、伸丁烯基、伸戊烯基、伸己烯基、 伸庚烯基、伸辛烯基、伸壬烯基、伸癸烯基及類似基團；伸炔基的非限制性實例包括伸乙炔基、伸丙炔基、伸丁炔基、伸戊炔基、伸己炔基及類似基團。

“環烷基”是指飽和或部分不飽和的環烴。環烷基環可包括指定的碳原子數。例如，3至8元環烷基包括3、4、5、6、7或8個碳原子。合適的環烷基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、1,4-環己二烯基、環庚基和環辛基。

術語“伸環烷基”是指衍生自環烷基的二價環烴基。例如

，

，

，

等。

術語“烷氧基”是指-O-(烷基)和-O-(非取代的環烷基)，其中烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是任選取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自H原子、D原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。

術語“芳基”是指在各個環中至多7個原子的任何穩定的、單環或雙環碳環，其中至少一個環為芳族的。此類芳基的實例包括但不限於苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、聯苯基或聯萘基。

術語“雜環烷基”或“雜環基”是指環烴，其中一至四個碳原子已被獨立地選自N、N(R)，S，S(O)、S(O)₂和O的雜原子替換。雜環可為飽和的或不飽和的。合適的雜環基的實例包括四氫呋喃基、四氫噻吩基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡唑啉基、吡喃基、呱啶基、吡唑啉基、二硫雜環戊二烯基、氧雜硫雜環戊二烯基、二氧雜環己基、二氧雜環己烯基、嗎啉代和噁嗪基。

術語“雜芳基”表示在各個環中至多7個原子的穩定的單環或雙環，其中至少一個環為芳族且至少一個環含有選自O、N和S的1至4個雜原子。在本定義範圍內的雜芳基包括但不限於吖啶基、哢唑基、噌啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、吡唑基、吲哚基、苯並三唑基、呋喃基、噻吩基、苯硫基、3,4-伸丙基二氧苯硫基(3,4-propylenedioxythiophenyl)、苯並噻吩基、苯並呋喃基、苯並二噁烷、苯並二氧雜環己烯、喹啉基、異喹啉基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉、噻唑基、異噻唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,3,5-三嗪基、1,2,4三嗪基、1,2,4,5四嗪基和四唑基。

術語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。

術語“鹵”是指被一個或多個選自氟、氯、溴、碘的原子取代。

“樹枝狀聚合物”是指含有核心和至少一個連接於所述核心的樹枝化基元的分子。每個樹枝化基元由至少一層或一代分支的結構單元構成，產生具有每代結構單元的分支的越來越多的分支結構。連接於核心的樹枝化基元的最大數目受限於核心上官能團的數目。

“結構單元”是指具有至少三個官能團的分支的分子，一個官能團用於連接於核心或結構單元的上一代且至少兩個官能團用於連接於結構單元的下一代或形成樹枝狀聚合物聚合物的表面。

“代”是指構成樹枝化基元或樹枝狀聚合物的結構單元的層數。例如，一代樹枝狀聚合物將具有一層連接於所述核心的分支的結構單元，例如，核心-[[結構單元]]_u，其中u為連接於核心的樹枝化基元的數目。兩代樹枝狀聚合物在連接於核心的每個樹枝化基元中具有兩層結構單元，當所述結構單元具有一個分支點時，所述樹枝狀聚合物可為：核心[[結構單元][結構單 元]₂]_u。三代樹枝狀聚合物在連接於核心的每個樹枝化基元中具有三層結構單元，例如核心-[[結構單元][結構單元]₂[結構單元]₄]u。六代樹枝狀聚合物具有六層連接於核心的結構單元，例如核心-[[結構單元][結構單元]₂[結構單元]₄[結構單元]₈[結構單元]₁₆[結構單元]₃₂]_u等。結構單元的最後一代(最外代)提供樹枝狀聚合物的表面官能化和可用於結合端基的官能化基團的數目。例如，在具有兩個樹枝化基元連接於核心的樹枝狀聚合物中(u=2)，如果每個結構單元具有一個分支點並且存在6代時，那麼最外代具有64個結構單元和128個可用於結合端基的官能團。

“微溶的”是指在水中具有1mg/mL至10mg/mL的溶解度的藥物或藥物活性劑。在水中溶解度小於1mg/mL的藥物被認為是不溶的。

“增溶賦形劑”是指用於將不溶的或微溶的藥學活性劑溶解於水性製劑的製劑添加劑。實例包括表面活性劑如聚乙氧基蓖麻油包括Cremophor EL、CremophorRH40和Cremophor RH60，D-α生育酚-聚乙二醇1000琥珀酸鹽、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、solutol HS15、山梨醇單油酸酯(sorbitan monoleate)、泊洛沙姆407、Labrasol等。

“任選的”或“任選”是指意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。例如，“L為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈伸烷基”意味著C_1-10直鏈伸烷基可以被氧、硫或氮原子間斷但不必須被間斷，該說明包括C_1-10直鏈伸烷基被氧、硫或氮原子間斷的情形和C_1-10直鏈伸烷基不被氧、硫或氮原子間斷的情形。

“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代 基僅處在它們的可能的化學位置，所屬技術領域具有通常知識者能夠在不付出過多努力的情況下(藉由實驗或理論)確定可能或不可能的取代。

本揭露所述化合物的化學結構中，鍵“/”並未指定構型，即鍵“/”可以為“

”或“

”，或者同時包含“

”和“

”兩種構型。本揭露所述化合物的化學結構中，鍵“

”並未指定構型，即可以為Z構型或E構型，或者同時包含兩種構型。

本揭露所述化合物或其可藥用鹽、或其異構體的任何同位素標記的衍生物都被本揭露所覆蓋。能夠被同位素標記的原子包括但不限於氫、碳、氮、氧、磷、氟、氯、碘等。它們可分別被同位素²H(D)、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl和¹²⁵I等代替。除另有說明，當一個位置被特別地指定為氘(D)時，該位置應理解為具有大於氘的天然豐度(其為0.015%)至少3000倍的豐度的氘(即，至少45%的氘摻入)。

本揭露中藥學活性劑或其殘基、藥學活性劑、藥學活性劑或其殘基A可互換使用，均是指具有藥學活性的分子或者基團。

圖1為測試例1中本揭露化合物的人血漿轉化濃度曲線。

圖2為測試例2中的米格魯犬血漿PK曲線。

以下結合實施例進一步描述解釋本發明，但這些實施例並非意味著限制本發明的範圍。

本發明實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或商品製造廠商所建議的條件。未註明具體來源的試劑，為市場購買的常規試劑。

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或質譜(MS)來確定的。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)，化學位移是以10^-6(ppm)作為單位給出。

MS的測定用FINNIGAN LCQAd(ESI)質譜儀(生產商：Thermo，型號：Finnigan LCQ advantage MAX)。

高效液相色譜法(HPLC)的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(Sunfire C18 150×4.6mm色譜管柱)和Waters 2695-2996高壓液相色譜儀(Gimini C18 150×4.6mm色譜管柱)。

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm矽膠板。

管柱層析一般使用煙臺黃海200~300目矽膠為載體。

本發明的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organnics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中如無特殊說明，反應均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，反覆操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中如無特殊說明，反應中的溶液是指水溶液。

實施例中如無特殊說明，反應的溫度為室溫。

室溫為最適宜的反應溫度，溫度範圍是20℃~30℃。

實施例中pH=6.5的PBS緩衝液的配製：取KH₂PO₄ 8.5g，K₂HPO₄.3H₂O 8.56g，NaCl 5.85g，EDTA 1.5g置於瓶中，定容至2L，超音波震盪使其全部溶解，搖勻即得。

純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑的體系包括：A：二氯甲烷和異丙醇體系，B：二氯甲烷和甲醇體系，C：石油醚和乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和酸性或鹼性試劑等進行調節。

本披露部分化合物是藉由Q-TOF LC/MS來表徵的。Q-TOF LC/MS使用安捷倫6530精確質量數四級杆-飛行時間質譜儀和安捷倫1290-Infinity超高效液相色譜儀(安捷倫Poroshell 300SB-C8 5μm,2.1×75mm色譜管柱)。

參考專利CN 110312531A的合成方法，合成得到了如下一類樹枝狀聚合物，其第一胺基端基用於與藥物活性劑的連接，第二端基用於與藥物代謝動力學修飾劑PEG相連：

在下文實施例中表示的樹枝狀聚合物包括參考樹枝狀聚合物的核心和樹枝狀聚合物最外代中的結構單元。未描繪第1代至亞表面代。樹枝狀聚合物BHALys[Lys]₃₂表示5代樹枝狀聚合物，其具有下式BHALys[Lys]₂[Lys]₄[Lys]₈[Lys]₁₆[Lys]₃₂，64個表面胺基可用於結合於端基。

樹枝狀聚合物支架BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₅₇₀]₃₂、BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₁₁₀₀]₃₂、BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-t-PEG₂₃₀₀]₃₂、BHALys[Lys]₃₂[α-4-HSBA]₃₂[ε-PEG₁₁₀₀]₃₂、BHALys[Lys]₃₂[α-GILGVP-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₁₁₀₀]₃₂和BHALys[Lys]₃₂[α-GILGVP-NH₂.TFA]₃₂[ε-t-PEG₂₃₀₀]₃₂的製備可見於Kaminskas等人，J Control.Release(2011)(doi：10.1016/j.jconrel.2011.02.005)。樹枝狀聚合物支架4-疊氮苯甲醯胺-PEG₁₂-NEOEOEN[Su(NPN)₂][Lys]₁₆[NH₂.TFA]₃₂的製備可見於WO08/017122。

1-A00、1-B00和1-C00是根據專利WO2012167309A合成，其連接的藥學活性劑為多西他賽；2-A00是根據專利WO2018154004A合成，其連接的藥學活性劑為化合物2。樹枝狀聚合物支架BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₁₁₀₀]₃₂在實施例中記為Dendrimer 1，BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₂₁₀₀]₃₂在實施例中記為Dendrimer 1-PEG2K，根據WO2018154004A的方法合成：

一般程式

一般程式A

連接子與藥物的安裝

在0℃，向磁力攪拌的羧酸連接子(0.2-0.5mmol)在溶劑DMF或乙腈(1-5mL)的溶液中加入EDC或DCC(1.2當量)的偶聯劑。將混合物放置攪拌5分鐘，然後滴加含有藥物(0.4-1當量)和DMAP(0.4-1當量)的混合物的溶液(1mL)。將混合物在0℃保持1小時，然後使其升溫至環境溫度。然後真空去 除揮發物並將殘餘物藉由製備型HPLC(BEH300Waters XBridge C18，5μM，30x150mm，40-80%ACN/水(5-40min)，不含緩衝液)純化以獲得所需產物。

一般程式B

連接子與藥物的安裝

向磁力攪拌的藥物(0.3-1.0mmol)和酸酐(2當量)在DMF(3-5mL)的溶液中加入DIPEA(3當量)。將混合物在環境溫度攪拌過夜。然後真空去除揮發物並將殘餘物藉由製備型HPLC(BEH300Waters XBridge C18，5μM，30x150mm，40-70%ACN/水(5-40min)，不含緩衝液，RT=34min)純化。將適當的級分真空濃縮以得到所需靶物。

一般程式C

具有藥物-連接子負載的樹枝狀聚合物。

在室溫，向磁力攪拌的BHALys[Lys]₃₂[α-NH₂.TFA]₃₂[ε-PEG₁₁₀₀]₃₂(0.5-1.0μmol)和DIPEA(1.2當量/胺)在DMF的混合物中加入連接子-藥物(1.2當量/胺基)和PyBOP(1.2當量/胺基)。在室溫攪拌1.5小時之後，去除揮發物並將殘餘物藉由SEC(sephadex，LH20，MeOH)純化。將適當的級分(如藉由HPLC判斷)合併，並濃縮以得到所需物質。

一般程式D

點擊反應

向磁力攪拌的以1：1 H₂O/t-BuOH(大約0.5mL)的樹枝狀聚合物溶液(0.5-1.0mmol)中，加入炔烴試劑(2當量)、抗壞血酸鈉溶液(2當量)和CuSO₄溶液(20mol%)。將溶液加熱至80℃並用HPLC監測。根據需要加入額外量的抗壞血酸鈉和CuSO₄以驅動反應完成。在判斷反應完成之後，真空濃縮反應物，然後純化。

本揭露中大分子可按照選自以下路線進行合成，PG為羧酸保護基：

實施例1：本揭露化合物1-F00的製備

第一步

氮氣氛下，將1-F01-2(44g，0.23mol，按照專利US2005020645A合成)和溴乙酸第三丁酯(53.6g，0.28mol)溶於二甲基亞碸(640mL)中，冷卻至0℃，加入KOH(25.8g，0.46mol)，於0℃下攪拌1 小時。加入1N鹽酸中和，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，濃縮後經矽膠管柱層析純化得44g產物1-F01-3，收率69%。

第二步

將化合物1-F01-3(3.1g，10.13mmol)溶於二氯甲烷(16mL)中，加入三氟乙酸(8mL)，室溫攪拌3小時。濃縮後加入甲基第三丁基醚(MTBE)(20mL)溶解，用飽和碳酸氫鈉溶液中和，水相用MTBE(10mL)洗滌，用1N鹽酸調pH至2，用乙酸乙酯萃取，濃縮後得2.1g產物1-F01-4，收率71%。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ12.64(br,1H),7.33-7.41(m,5H),5.15(s,2H),4.16(s,2H),1.18-1.30(m,4H)。

第三步

將化合物多西他賽(DTX)(360mg，0.45mmol)、1-F01-4(145mg，0.58mmol)和二甲胺基吡啶(DMAP)(55mg，0.45mmol)溶於二氯甲烷(5mL)中，冷卻至0℃，滴加二環己基碳二亞胺(DCC)(120mg，0.58mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液，室溫攪拌過夜。濃縮後藉由高效液相色譜法製備得332mg產物1-F01-Bn，收率71%。

MS-ESI：m/z 1040.4[M+H]⁺。

第四步

將化合物1-F01-Bn(300mg，0.29mmol)溶於四氫呋喃(5mL)中，加入Pd/C(50mg，10wt.%)，在氫氣氛下，於室溫攪拌過夜。過濾，濾液減壓濃縮，得270mg產物1-F01，收率99%。MS-ESI：m/z 950.3[M+H]⁺。

第五步

氮氣氛下，將化合物1-F01(57mg，60.4μmol)與六氟磷酸苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)(60mg，115.5μmol)溶於無水N,N-二甲基甲醯胺(DMF)(2mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(68mg，1.5μmol)與二異丙基乙基胺(DIPEA)(15mg，115.5μmol)的無水DMF(2mL)混合溶液，反應1.5小時。將反應液直接藉由管柱層析色譜法純化，得到72mg油狀化合物。用純化水(20mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到70mg產物1-F00，收率79%。

¹H NMR指示19 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為59.1kDa(25.9%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.02-8.25(m,59H),7.12-7.94(m,261H),6.00-6.31(m,19H),5.54-5.72(m,22H),5.20-5.51(m,86H),4.96-5.08(m,45H),4.10-4.68(m,138H),3.40-4.04(m,3100H),3.33-3.36(s,91H),3.02-3.23(m,131H),2.22-2.65(m,174H),1.00-2.10(m,1362H)。

實施例2：本揭露化合物1-L00的製備

第一步

將化合物1-L01-6A(246.7mg，1.56mmol，根據文獻Organic Letters,2006,8,5685-5688合成)、多西他賽(840mg，1.04mmol)和DCC(385.6mg，1.87mmol)溶於DMF(15mL)中，加入DMAP(190.6mg，1.56mmol)，室溫攪拌16小時。HPLC製備純化，得到370mg產物1-L01，收率37.5%。

MS-ESI：m/z 948.4[M+H]⁺。

第二步

氮氣氛下，將化合物1-L01(30.3mg，31.9μmol)和PyBOP(31.9mg，61.5μmol)溶於無水DMF(1.0mL)中，滴加Dendrimer 1(36mg，0.799μmol)與DIPEA(7.9mg，61.5μmol)的無水DMF(1.0mL)混合溶液，反應1.5小時。將反應液直接藉由管柱層析色譜法純化，得到37mg油狀化合物。用純化水(10mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到35mg產物1-L00，收率72%。

¹H NMR指示21 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為60.9kDa(27.8%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.02-8.25(m,58H),7.12-7.94(m,263H),6.00-6.30(m,21H),5.53-5.76(m,25H),5.11-5.46(m,113H),4.96-5.10(m,70H),4.05-4.52(m,77H),3.40-3.96(m,3100H),3.33-3.36(S,103H),2.97-3.23(m,130H),2.25-2.74(m,216H),1.00-2.10(m,1373H)。

實施例3：本揭露化合物1-M00的製備

第一步

將化合物1-1(711mg，5mmol)溶於四氫呋喃(10mL)中，冷卻至-70℃，滴加二異丙基胺基鋰(LDA)(3.5mL，7mmol)。攪拌30分鐘後，加入化合物1-2(551mg，5.5mmol)，繼續攪拌2小時。加水淬火，用2N鹽酸調pH為6~7，用乙酸乙酯萃取，濃縮後得到700mg粗品1-M01-a，直接用於下一步反應。

第二步

將化合物1-M01-a(700mg，2.89mmol)溶解於甲醇(100mL)中，加入KOH(162mg，2.89mmol)，於室溫攪拌16小時。加水稀 釋，用2N鹽酸調pH為3~5，用乙酸乙酯萃取，濃縮後得到650mg粗品1-M01-b，直接用於下一步反應。

第三步

將化合物1-M01-b(650mg，3.03mmol)、溴化苄(519mg，3.03mmol)和碳酸鉀(836mg，6.06mmol)加入到DMF(10mL)中，於室溫攪拌3小時。加水稀釋後，用乙酸乙酯萃取，濃縮後得800mg粗品1-M01-c，直接用於下一步反應。

第四步

將化合物1-M01-c(800mg，2.63mmol)溶於二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(10mL)，於室溫攪拌2小時。濃縮後HPLC製備純化得60mg產品1-M01-d，四步收率6%。

MS-ESI：m/z 249.2[M+H]⁺。

第五步

將化合物1-M01-d(37mg，0.1485mmol)、多西他賽(60mg，0.0743mmol)和DCC(27.6mg，0.1337mmol)溶於DMF(15mL)中，加入DMAP(13.6mg，0.1114mmol)，於室溫攪拌16小時。HPLC製備純化，得到15mg 1-M01-Bn，收率19.5%。

MS-ESI：m/z 1038.4[M+H]⁺。

第六步

將化合物1-M01-Bn(14mg，0.0135mmol)溶於四氫呋喃(3mL)中，加入Pd/C(3mg，10wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌24小時。HPLC製備純化得10mg產品1-M01，收率78%。

MS-ESI：m/z 948.4[M+H]⁺。

第七步

氮氣氛下，將化合物1-M01(50.4mg，53.2μmol)和PyBOP(53.2mg，102.3μmol)溶於無水DMF(2mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(60mg，1.33μmol)與DIPEA(13.2mg，102.3μmol)的無水DMF(1mL)混合溶液，反應1.5小時。將反應液直接藉由管柱層析色譜法純化，得到63mg油狀化合物。用純化水(15mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到60mg產物1-M00，收率73%。

¹H NMR指示22 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為61.8kDa(28.7%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.02-8.27(m,48H),7.13-7.94(m,204H),6.00-6.30(m,22H),5.53-5.72(m,24H),5.08-5.45(m,108H),4.10-4.68(m,141H),3.40-4.04(m,3100H),3.33-3.37(s,98H),3.06-3.23(m,109H),2.23-2.66(m,176H),1.00-2.10(m,1128H)。

實施例4：本揭露化合物1-Q00的製備

第一步

將化合物1-F01-3(4g，13.07mmol)溶於乙酸乙酯(80mL)中，加入Pd(OH)₂/C(0.8g，20wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌過夜。過濾，濾液減壓濃縮，得2.6g產物1-F01a，收率92%。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ 4.13(s,2H),1.49(s,9H),1.43-1.47(m,2H),1.30-1.33(m,2H)。

第二步

將化合物1-F01a(2.6g，12.03mmol)溶於DMF(60mL)中，加入烯丙基溴(4.37g，36.09mmol)和NaHCO₃(2.32g，27.67mmol)，室溫攪拌過夜。加熱到50℃，繼續反應2小時。加入1N鹽酸(100mL)淬火，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，濃縮後經管柱層析色譜法純化得2.1g產物1-Q01-1，收率68%。

第三步

將化合物1-Q01-1(2.1g，8.20mmol)溶於二氯甲烷(10mL)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(22mL)，升至室溫攪拌過夜。濃縮後得1.93g粗品產物1-Q01-2，直接用於下一步反應。

第四步

氮氣氛下，將化合物1-Q01-2(1.93g，9.65mmol)、苯甲醇(1.25g，11.57mmol)和DMAP(235mg，1.93mmol)溶於二氯甲烷(20mL)中，分批加入DCC(2.39g，11.57mmol)，室溫攪拌過夜。濃縮後經管柱層析色譜法純化得2g產物1-Q01-3，收率71%。

第五步

氮氣氛下，將化合物1-Q01-3(2g，6.89mmol)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(73mg，0.1mmol)溶於二氯甲烷(60mL)和水(6mL)中，加入Bu₃SnH(2.95g，10.13mmol)，室溫攪拌0.5小時。加水(5mL)稀釋後，用二氯甲烷(10mL×2)萃取，濃縮後藉由HPLC製備純化得510mg產物1-Q01-P。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆ )δ13.07(br,1H),7.31-7.38(m,5H),5.14(s,2H),4.31(s,2H),1.15-1.17(m,4H)。

第六步

氮氣氛下，將化合物多西他賽(240mg，0.30mmol)，1-Q01-P(89mg，0.36mmol)和DMAP(37mg，0.30mmol)溶於二氯甲烷(4mL)中，冷卻至0℃，滴加DCC(74mg，0.36mmol)的二氯甲烷溶液(0.5mL)，室溫攪拌過夜。HPLC製備純化，得111mg產物1-Q01-Bn，收率36%。

MS-ESI：m/z 1040.4[M+H]⁺。

第七步

將化合物1-Q01-Bn(110mg，0.11mmol)溶於四氫呋喃(5mL)中，加入Pd/C(30mg，10wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌過夜。過濾，濾液減壓濃縮得98mg產物1-Q01，收率98%。

MS-ESI：m/z 950.3[M+H]⁺。

第八步

氮氣氛下，將化合物1-Q01(60.6mg，63.9μmol)與PyBOP(63.6mg，122.3μmol)溶於無水DMF(1.5mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(72mg，1.59μmol)與DIPEA(15.8mg，102.3μmol)的無水DMF(1.5mL)混合溶液，反應1.5小時。將反應液直接藉由管柱層析色譜法純化，得到80mg油狀化合物。用純化水(20mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到78mg產物1-Q00，收率76%。

¹H NMR指示25DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為64.7kDa(31.2%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.02-8.23(m,59H),7.11-7.90(m,256H),6.00-6.30(m,25H),5.54-5.70(m,25H),5.08-5.42(m,108H),4.10-4.64(m,150H),3.40-3.96(m,3100H),3.33-3.36(s,108H),2.98-3.24(m,129H),2.28-2.62(m,176H),1.00-2.10(m,1346H).

實施例5：本揭露化合物1-S00的製備

第一步

將化合物1-T01-1(200.0g，1.66mol)溶於二氯甲烷(2.5L)中，加入碳酸氫鈉(168.0g，2.0mol)，分批加入化合物1-T01-2B(4,4'-雙甲 氧基三苯甲基氯，563.2g，1.66mol)，室溫攪拌19小時。加水(1000mL)淬火，用二氯甲烷萃取，濃縮得油狀物，加入乙酸乙酯(400mL)溶解，滴加石油醚(2000mL)，室溫繼續攪拌半小時，過濾，乾燥，得到587.2g產物1-T01-3A，收率83.4%。

MS-ESI：m/z 423.2[M+H]⁺。

第二步

將化合物1-01-3A(400.0g，0.947mol)溶於四氫呋喃(3L)中，冷卻至-60℃，滴加LDA(1.042L，2.084mol，2M在THF/己烷中)。於-60℃反應1.5小時，加入1,3,2-二氧雜噻吩烷-2,2-二氧化物(129.2g，1.042mol)，繼續攪拌20分鐘，加入二甲基丙烯基脲(DMPU)(133.4g，1.042mol)，攪拌1小時。升至室溫攪拌19小時。加入1升10%氯化銨水溶液淬火，用乙酸乙酯萃取，濃縮後得436.5g粗品產物1-T01-4A，收率102.8%。

MS-ESI：m/z 449.2[M+H]⁺。

第三步

將化合物1-T01-4A(436.5g，947mmol)溶於二氯甲烷(2.5L)中，加入三乙基矽烷(131.9g，1137mmol)，冷卻至5℃，滴加三氟乙酸/二氯甲烷(74.5g的三氟乙酸溶於100mL的二氯甲烷)混合溶液，室溫攪拌23小時。含1-T01-5B的反應液直接用於下一步反應。

第四步

將NaOH(227.3g,5.68mol)的水溶液(1L)滴入上一步的含1-T01-5B的反應液中，隨後加入四氫呋喃(600mL)，加熱至55℃，攪拌3小時。冷卻至室溫，減壓除去有機溶劑，水相用乙酸乙酯洗滌，然後用1N稀鹽酸調節pH至6得1-T01-6B水溶液，直接用於下一步反應。

第五步

向上一步得到的1-T01-6B水溶液(111.8g，947mmol)中加入四氫呋喃(300mL)，冷卻至0℃，滴加溴乙酸第三丁酯(92.4g，663mmol)，然後升至室溫攪拌20小時。減壓除去四氫呋喃，用2N鹽酸調pH至3~4，用乙酸乙酯萃取，濃縮後藉由管柱層析色譜法純化，得到49.3g粗品。加入250毫升石油醚，室溫攪拌2小時，過濾乾燥得到25.0g產物1-T01-tBu，四步總收率11.1%。

MS-ESI：m/z 255.1[M+Na]⁺。

第六步

將化合物1-T01-tBu(6.0g，25.8mmol)溶於DMF(30mL)中，依次加入溴化苄(5.3g，31.0mmol)和碳酸鉀(7.1g，51.7mmol)，加熱至70℃，攪拌1.5小時。冷卻後加水(150mL)稀釋，用乙酸乙酯(100mL)萃取，濃縮得9.9g粗品1-S01-4A。收率122.4%。

MS-ESI：m/z 345.2[M+Na]⁺。

第七步

將化合物1-S01-4A(10.2g，25.8mmol)溶於二氯甲烷(51mL)中，滴加三氟乙酸(51mL)，室溫攪拌1小時。濃縮後經管柱層析色譜法純化得到6.2g產物1-S01-P，收率73.5%。

MS-ESI：m/z 267.2[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCI₃)δ7.38-7.26(m,5H),5.14(s,2H),3.47(s,2H),1.71-1.68(m,2H),1.35-1.32(m,2H)。

第八步

將化合物多西他賽(3.0g，3.71mmol)、1-S01-P(1.087g，4.08mmol)和DMAP(0.498g，4.08mmol)溶於DMF(30mL)中，冷卻至0℃，加入(1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亞胺)(EDCI)(0.783g，4.08 mmol)。然後升至室溫，攪拌16小時。加水(300mL)淬火，用乙酸乙酯萃取，濃縮後經管柱層析色譜法純化，得到3.11g產物1-S01-Bn，收率77%。

MS-ESI：m/z 1078.3[M+Na]⁺。

第九步

將化合物1-S01-Bn(3.1g，2.93mmol)溶於四氫呋喃(62mL)中，加入Pd/C(0.62g，10wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌22小時。過濾濃縮得2.7g產物1-S01，收率95.1%。

MS-ESI：m/z 988.2[M+Na]⁺。

第十步

氮氣氛下，將化合物1-S01(492mg，509.6μmol)與PyBOP(510mg，981μmol)溶於無水DMF(8.4mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(600mg，12.74μmol)與DIPEA(127mg，981μmol)的無水DMF(8.4mL)混合溶液，反應2小時。將反應液用乙腈(16.8mL)稀釋後，藉由超濾(10KD，Hydrosart^®)裝置，用乙腈超濾純化，得到0.88g粗品。用純化水(100mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到0.85g產物1-S00，收率103%。

¹H NMR指示22DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為64.3kDa(27.6%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.99-8.25(m,55H),7.05-7.86(m,253H),6.00-6.31(m,22H),5.57-5.74(m,22H),5.11-5.48(m,76H),4.96-5.08(m,40H),4.10-4.68(m,125H),3.40-4.08(m,3200H),3.33-3.37(s,104H),3.07-3.24(m,116H),2.14-2.69(m,205H),1.00-2.10(m,1258H)。

實施例6：本揭露化合物1-T00的製備

第一步

將化合物1-T01-3B(42.83g，108.57mmol，根據文獻European Journal of Organic Chemistry,2009,22,p.3795-3800合成)和DMAP(1.33g，10.86mmol)溶於二氯甲烷(200mL)中，冷卻至0-5℃，分批加入DCC(24.64g，119.43mmol)，升至室溫攪拌21小時。減壓濃縮後經管柱層析色譜法純化得34.7g產品1-T01-4，收率71%。

MS-ESI：m/z 451.2[M+H]⁺。

第二步

將LDA(42mL，2M在THF/己烷中)用四氫呋喃(300mL)稀釋，冷卻至-70℃，滴加化合物1-T01-4(17.35g，38.50mmol)的四氫呋喃(40mL)溶液，保持-70℃攪拌1小時。滴加1,3,2-二氧雜噻吩烷-2,2-二氧化物(7.17g，57.76mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液，隨後滴加DMPU(5.43g，57.76mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液。滴畢，緩慢升至室溫，攪拌16小時。加入冰水(400mL)淬火，用二氯甲烷萃取，減壓濃縮後經管柱層析色譜法純化，得4.4g產品1-T01-5，收率37.4%。

MS-ESI：m/z 477.2[M+H]⁺。

第三步

將化合物1-T01-5(8.76g，18.38mmol)溶於二氯甲烷(180mL)中，加入三乙基矽烷(2.56g,22mmol)，冷卻至0-5℃，加入三氟乙酸(0.9mL)的二氯甲烷(2mL)溶液，升至室溫攪拌19小時。濃縮後藉由管柱層析色譜法純化，得1.68g產品1-T01-6，收率52%。

第四步

將化合物1-T01-6(480mg，2.75mmol)和K₂CO₃(760mg，5.51mmol)加入到DMF(5mL)中，滴加溴乙酸苄酯(758mg，3.31mmol)。室溫攪拌16 小時。加冰水淬火，用二氯甲烷萃取，濃縮後經管柱層析色譜法純化，得620mg產品1-T01-7，收率69.8%。

MS-ESI：m/z 345.2[M+Na]⁺。

第五步

將化合物1-T01-7(620mg，1.92mmol)溶於二氯甲烷(5.0mL)中，冷卻至0-5℃，滴加三氟乙酸(2.5mL)。升至室溫攪拌16小時。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得396mg產品1-T01-P，收率77.3%。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.33-7.36(m,5H),5.16(s,2H),3.51(s,2H),1.41-1.48(m,2H),1.12-1.16(m,2H)。

第六步

氮氣氛下，將化合物多西他賽(80mg，0.1mmol)和1-T01-P(53mg，0.2mmol)溶於二氯甲烷(3mL)中，加入DMAP(14mg，0.12mmol)和DCC(25mg，0.12mmol)，室溫攪拌過夜。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得70mg產品1-T01-Bn，收率67%。

MS-ESI：m/z 1057.2[M+H]⁺。

第七步

將化合物1-T01-Bn(70mg，0.067mol)溶於四氫呋喃(10mL)中，加入Pd/C(30mg，10wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌22小時。過濾後濃縮得60mg產物1-T01，收率：94%。

MS-ESI：m/z 988.2[M+Na]⁺。

第八步

氮氣氛下，將化合物1-T01(59.8mg，62.0μmol)與PyBOP(62.5mg，120.0μmol)溶於無水DMF(2mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(70mg，1.55μmol)與DIPEA(15.5mg，120.0μmol)的無水DMF(2mL) 混合溶液，反應1.5小時。將反應液直接藉由管柱層析色譜法純化，得到74mg粗品。用純化水(20mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到71mg產物1-T00，收率73%。

¹H NMR指示23 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為63.2kDa(29.4%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.02-8.25(m,54H),7.14-7.88(m,223H),6.00-6.31(m,23H),5.54-5.72(m,26H),5.14-5.51(m,94H),4.96-5.08(m,46H),4.06-4.53(m,106H),3.40-4.04(m,3100H),3.33-3.36(s,87H),3.03-3.24(m,114H),2.24-2.62(m,167H),1.00-2.10(m,1191H)。

實施例7：本揭露化合物1-Z00-A的製備

第一步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-A-6(220mg，1.3mmol，根據文獻Molecules,2020,25,2153合成)溶於四氫呋喃(5mL)中，冷卻至0℃，分批加入NaH(104mg，2.2mmol，60%在油中)，控制內溫<20℃，攪拌15分鐘。滴加化合物S2(360mg，1.6mmol)的四氫呋喃溶液，室溫攪拌過夜。將反應液冷至0℃，用飽和NaHCO₃水溶液(10mL)淬火，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，濃縮後經管柱層析色譜法純化得180mg產品1-Z01-A-7，收率43%。

MS-ESI：m/z 342.2[M+Na]⁺。

第二步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-A-7(180mg，0.56mmol)溶於二氯甲烷(2mL)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(2mL)。升至室溫攪拌過夜。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得50mg產品1-Z01-A-P，收率32%。

MS-ESI：m/z 264.2[M+H]⁺。

第三步

氮氣氛下，將化合物多西他賽(120mg，0.15mmol)和1-Z01-A-P(48mg，0.18mmol)溶於DMF(1mL)中，加入DMAP(19mg，0.15mmol)和DCC(38mg，0.18mmol)，室溫攪拌過夜。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得50mg產品1-Z01-A-Bn，收率32%。

MS-ESI：m/z 1053.3[M+H]⁺。

第四步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-A-Bn(50mg，0.047mmol)溶於甲醇(3mL)中，加入Pd/C(10mg，10wt.%)，氫氣氛下，室溫攪拌過夜。過濾，濃縮後得35mg產品1-Z01-A，收率77%。

MS-ESI：m/z 963.3[M+H]⁺。

第五步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-A(34mg，35.5μmol)與PyBOP(36mg，68.5μmol)溶於無水DMF(1.0mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(40mg，0.89μmol)與DIPEA(8.8mg，68.5μmol)的無水DMF(1.0mL)混合溶液，反應2小時。將反應液直接經管柱層析色譜法純化，得到42mg粗品，用純化水(10mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到39mg產物1-Z00-A，收率69%。

¹H NMR指示23 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為63.1kDa(29.4%重量%DTX)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.00-8.20(m,53H),7.13-7.85(m,218H),5.94-6.20(m,23H),5.53-5.71(m,25H),5.15-5.40(m,91H),4.95-5.07(m,42H),4.10-4.60(m,148H),3.40-4.04(m,3100H),3.33-3.37(s,102H),3.03-3.24(m,127H),2.20-2.67(m,240H),1.00-2.10(m,1350H)。

實施例8：本揭露化合物1-Z00-B的製備

第一步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-B-4(10.3g，47.9mmol，根據專利WO2016205633A合成)溶於DMF(150mL)中，加入碳酸鉀(33.1g，239.5mmol)和苄化溴(10.6g，62.3mmol)，加熱至60℃，反應16小時。冷卻後加水(300mL)淬火，用乙酸乙酯萃取，濃縮經管柱層析色譜法純化得到13g化合物1-Z01-B-5，收率89%。

MS-ESI：m/z 328.2[M+Na]⁺。

第二步

將化合物1-Z01-B-5(9.8g，32.1mmol)溶於二氯甲烷(50mL)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(30.07g，269mmol)，升至室溫反應6小時。濃縮後得到15.0g粗品1-Z01-B-6，收率>100%。

MS-ESI：m/z 206.1[M+H]⁺。

第三步

將化合物1-Z01-B-6(7.0g，15.0mmol)溶於乙腈(70mL)中，加入碳酸鉀(10.3g，75.0mmol)和溴乙酸第三丁酯(3.8g，19.5mmol)，室溫反應16小時。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得到3.0g產物1-Z01-B-7，收率62%。

MS-ESI：m/z 342.2[M+Na]⁺。

第四步

將化合物1-Z01-B-7(2.8g，8.8mmol)溶於二氯甲烷(10mL)中，冷卻至0℃，加入三氟乙酸(15g，135mmol)，升至室溫反應16小時。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得2.2g產品1-Z01-B-P，收率95%。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.29-7.40(m,5H),5.15(s,2H),3.82(s,2H),2.79(s,3H),1.46-1.53(m,2H),1.32-1.40(m,2H)。

MS-ESI：m/z 264.2[M+H]⁺。

第五步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-B-P(1.1g，4.16mmol)，多西他賽(2.8g，3.47mmol)和DMAP(0.508g，4.16mmol)溶於無水DME(30mL)中，冷卻至0℃，加入EDCI(0.798g，4.16mmol)，升至室溫反應16小時。加水(50mL)淬火，過濾得粗品，經管柱層析色譜法純化得2.7g產品1-Z01-B-Bn，收率74%。

MS-ESI：m/z 1053.3[M+H]⁺。

第六步

將化合物1-Z01-B-Bn(2.7g，2.56mmol)溶於無水四氫呋喃(30mL)中，加入Pd/C(270mg，10wt.%)，氫氣氛下，於室溫反應16小時。過濾，濃縮後得2.3g產品1-Z01-B，收率93%。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.13-8.10(m,2H),7.63-7.59(m,1H),7.53-7.48(m,2H),7.42-7.37(m,3H),7.30-7.26(m,3H),6.24-6.23(bs,1H),5.70-5.67(m,1H),5.49-5.43(m,2H),5.22-5.17(m,2H),4.33-4.11(m,4H)，3.93-3.91(m,1H)，3.68-3.53(m,2H),2.60-2.10(m,5H),1.94-1.68(m,10H),1.40-1.24(m,16H),1.18-1.05(m,6H)。

MS-ESI：m/z 963.3[M+H]⁺。

第七步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-B(573mg，594.8μmol)與PyBOP(596mg，1145μmol)溶於無水DME(9.8mL)中，滴加化合物Dendrimer 1(700mg，14.87μmol)與DIPEA(148mg，1145μmol)的無水DMF(9.8mL)混合溶液，反應2小時。將反應液用乙腈(19.6mL)稀釋後，藉由超濾(10KD，Hydrosart^®)裝置，用乙腈超濾純化，得到1.01g粗品，用純化水 (100mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到0.99g產物1-Z00-B，收率100%。

¹H NMR指示22 DTX/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為64.2kDa(27.6%重量%DTX)。

¹HNMR(400MHz,CD₃OD)δ8.01-8.23(m,57H),7.10-7.89(m,264H),6.00-6.31(m,22H),5.54-5.73(m,24H),5.20-5.51(m,82H),4.96-5.08(m,29H),4.10-4.68(m,132H),3.40-4.04(m,3200H),3.33-3.37(s,100H),3.07-3.24(m,97H),2.14-2.66(m,259H),0.94-2.08(m,1208H)。

實施例9：本揭露化合物2-B00的製備

第一步

氮氣氛下，將化合物1-Z01-B4-4(6.7g，36.0mmol，根據文獻Molecules,2020,25,2153合成)和無水碳酸鉀(10.0g，72.4mmol)加入到無水乙腈(67mL)中，加入溴乙酸苄酯(9.9g，43.2mmol)，室溫反應16小時。過濾後濃縮，粗品經管柱層析色譜法純化得10.1g 1-Z01-B4-5-Bn，收率88%。

MS-ESI：m/z 320.2[M+H]⁺。

第二步

將化合物1-Z01-B4-5(10.1g，31.6mmol)溶於四氫呋喃(100mL)中，加入Pd/C(1.0g，10wt.%)，氫氣氛下，室溫反應16小時。過濾後濃縮，粗品經管柱層析色譜法純化得5.5g 1-Z01-B4，收率76%。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ 3.58(s,2H),2.57(s,3H),1.45(s,9H),1.32-1.40(m,2H),0.98-1.03(m,2H)。

MS-ESI：m/z 230.1[M+H]⁺。

第三步

氮氣氛下，將化合物2(4.25g,4.5mmol，根據專利WO2012017251合成)溶於二氯甲烷(70mL)中，加入DMAP(165mg，1.35mmol)和化合物1-Z01-B4(1.85g，8.1mmol)，冷卻至0℃，滴加DCC(1.67g，8.1mmol)的DCM(10mL)溶液，升至室溫攪拌過夜。過濾後減壓濃縮，粗品經管柱層析色譜法分離，得4.2g產物2-B00-1，收率80%。

MS-ESI：m/z 1156.3[M+H]⁺。

第四步

氮氣氛下，將化合物2-B00-1(3.0g，2.6mmol)溶於乙腈(21mL)中，加入2,6-二甲基吡啶(4.18g，39mmol)，冷卻至5℃，緩慢加入三氟甲磺酸三甲基矽酯(TMSOTf)(8.67g，39mmol)，升至室溫攪拌2小時。濃縮後加乙酸乙酯(60mL)和水(40mL)，分離有機相。加入1.0M的四丁基氟化銨(TBAF)的四氫呋喃溶液(26mL，26mmol)，室溫攪拌2小時。濃縮後經管柱層析色譜法純化，得2.6g產物2-B00-2，收率92%。

MS-ESI：m/z 1100.2[M+H]⁺。

第五步

氮氣氛下，將化合物2-B00-2(1.38g，1.25mmol)與PyBOP(0.79g，1.51mmol)溶於無水DMF(21mL)中，滴加化合物Dendrimer 1-PEG2K(2.00g，0.025mmol)與N-甲基嗎啉(NMM)(0.51g，5.03mmol)的無水DMF(21mL)混合溶液，室溫反應2小時。將反應液用乙腈(42mL)稀釋後，藉由超濾(10 KD，Hydrosart^®)裝置，用乙腈超濾純化，得到 2.25g粗品，用純化水(150mL)溶解，經濾膜(0.22μm)過濾，凍乾後得到2.20g產物2-B00，收率89%。

¹H NMR指示21個藥物分子/樹枝狀聚合物。實際的分子量大約為98.5kDa(20.1%重量%藥物分子)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ 6.40-8.52(m,420H),4.13-4.70(m,62H),3.40-4.10(m,6000H),3.33-3.36(s,127H),2.79-3.25(m,279H),2.22-2.74(m,225H),0.61-1.94(m,606H).

生物學評價

測試例1：本揭露化合物在人和小鼠血漿中的穩定性研究

1、供試品

實施例中所得的化合物1-A00、1-B00、1-C00、1-F00、1-L00、1-M00、1-S00以及多西他賽。

2、試驗用血漿

3、試驗方法

1)溶液配製

在PBS中製備10mg/mL的測試化合物和多西他賽溶液。在乙腈中製備了1mM的丙烷茶鹼工作溶液，在該試驗中將丙烷茶鹼用作人和小鼠血漿的陽性對照。

2)血漿穩定性的測試

a.在37℃水浴中快速解凍冷凍的血漿。在室溫以3220g離心血漿10分鐘，以去除凝塊，並將上清液收集到新的試管中。檢查並記錄血漿的pH值。

b.將每個細胞的490μL血漿添加到培養盤中，將培養盤在37℃預熱15分鐘。

c.預培養後，將10μL的10mg/mL測試化合物添加到490μL血漿中，以達到0.2mg/mL的最終濃度；將2μL的1mM對照化合物添加到398μL血漿中，以達到最終濃度為5μM。該測定將一式兩份進行。

d.將反應樣品在37℃培養。

e.在0、0.5、2、6和24小時從反應樣品中取出50μL的等分試樣。加入350μL含內標的冷乙腈終止反應。

f.將所有樣品渦旋10分鐘，然後在3220g離心30分鐘以沉澱蛋白質。將100μ0上清液轉移至新板中。上清液將根據LC-MS信號回應和峰形用超純水稀釋。

3)樣品分析

樣品藉由LC-MS/MS進行分析

4)資料分析

所有計算均使用Microsoft Excel進行。從提取的離子色譜圖中確定峰面積比。藉由以下公式計算每個時間點的轉化濃度：

轉化濃度_t小時(μg/mL)=峰面積比_t小時/峰面積比_STD×200(μg/mL)

其中峰面積比_t小時是t時測試化合物的峰面積比；

峰面積比_STD是200μg/mL多西他賽的峰面積比。

4、試驗結果

本揭露化合物在人和小鼠血漿中的轉化資料如下表1和表2以及圖1所示。

表1人血漿中的轉化資料

表2小鼠血漿中的轉化資料

註：△c指的是最近兩個時間點的血漿轉化濃度差值

從表1和表2及圖1可以看出，本揭露化合物具有平穩釋放藥物的效果。其中化合物1-S00的突釋更低，藥物釋放更好，且在達到治療濃度的基礎上，24小時內釋放更加平穩(從表中的△c值可對比得出)，藉由藥物緩釋修飾體內藥物代謝動力學特徵，可以降低副作用，提高治療範圍。

測試例2：單次靜脈注射給予米格魯犬不同化合物的藥物代謝動力學研究

1、供試品

實施例中所得的化合物2-B00以及2-A00(根據專利WO2018154004合成，連接Dendrimer 1-PEG2K)。

樣品製備方法：120mg/瓶的受試物，加入終體積5% DMSO、95%生理鹽水，渦旋溶解得到1.5mg/ml的供試樣品。

2、試驗動物

米格魯犬，Non-naïve級別，來源為美迪西普亞儲備動物庫：999M-004。

3、試驗方法

將收集的血液樣本置於EDTA-K2抗凝型採血管中，血液樣本均需加酯酶抑制劑進行特殊處理。在EDTA-K2抗凝的採血管中加入1/40採血體積的200mM DDVP(如採血量為0.04mL，則加入1μL 200mM DDVP)。將收集到的全血放在冰上，1小時內離心分離血漿(離心力2200g，離心10min，2-8℃)。測定血藥濃度。

表3給藥方案

4、試驗結果

各組的臨床觀察情況及藥物代謝動力學資料表4及圖2所示。

表4藥物代謝動力學數據

從試驗結果可以看出，本揭露化合物的早期藥物釋放更慢，在達到治療濃度的基礎上，釋放行為更加平穩。其中2-B00相比於2-A00，在AUC近似的情況下，擁有更低的C_max，可以降低副作用，提高治療範圍。

Claims (23)

1. 一種大分子，其包含：

   i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

   ii)第一端基，其為包含羥基、胺基、羧基或者驗基的藥學活性劑或其殘基A；

   iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

   其中所述第一端基藉由連接子-X₁-L-X₂-共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基，X₁為連接子與藥學活性劑的連接基，X₂為連接子與樹枝狀聚合物的連接基，其中：

   a)X₁和X₂選自-C(O)-或不存在，L為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基；當X₁和X₂中至少一個不存在時，所述C_1-10直鏈或支鏈伸烷基任選被取代基取代；當X₁和X₂均為-C(O)-時，所述C_1-10直鏈或支鏈伸烷基進一步被取代基取代；所述的取代基選自氘、羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基一個或多個基團；或者

   b)X₁和X₂選自-C(O)-或不存在，L為任選被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烯基或伸炔基，所述伸烯基和伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代；或者

   c)X₁選自-C(O)-或不存在，X₂不存在，L與樹枝狀聚合物表面胺基的氮 原子連接後形成含氮雜環結構

   

   ，L₁為任選被一個或多個氧、硫或 氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基、伸烯基或伸炔基，所述伸烷基、伸烯基或伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、伸環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代，X₃選自CR₅或N，其中R₅選自氫、氘、羥基、烷基或烷氧基，m選自0、1或2；或者

   d)X₁選自-C(O)-或不存在，X₂不存在，且L為

   

   ，L₂為任選被 一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-10直鏈或支鏈伸烷基、伸烯基或伸炔基，所述伸烷基、伸烯基或伸炔基任選被選自氘、羥基、烷基、環烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、鹵素、硝基、氰基、醯基、硫醚基、亞磺醯基、磺醯基、-NR₁R₂、芳基、雜芳基和雜環基的一個或多個基團所取代，n選自1或2，其中含氮雜環端與樹枝狀聚合物連接，L₂端藉由-C(O)-或者直接與藥學活性劑連接；

   其中，R₁、R₂各自獨立地選自氫、羥基、C_1-6烷基、環烷基、C_1-6烷氧基。
2. 根據請求項1所述的大分子，其中X₁和X₂均為-C(O)-，L為被一個或多個氧、硫或氮原子間斷的C_1-6直鏈或支鏈伸烷基，所述C_1-6直鏈或支鏈伸烷基被獨立地選自氘、羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、C_1-6鹵烷氧基和鹵素的一個或多個取代基所取代。
3. 根據請求項2所述的大分子，其中X₁和X₂均為-C(O)-，L為被一至三個獨立地選自硫或氮的原子間斷的C_1-6直鏈或支鏈伸烷基，所述C_1-6直 鏈或支鏈伸烷基被獨立地選自羥基、C_3-7環烷基、C_3-7伸環烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6鹵烷基、C_1-6鹵烷氧基和鹵素的一個或多個取代基所取代。
4. 根據請求項3所述的大分子，其中所述C_1-6直鏈或支鏈伸烷基被一個或多個C_3-7伸環烷基取代。
5. 根據請求項1所述的大分子，其中連接子為-C(O)-X-C(O)-， 其中X為

   

   ；

   R_a、R_b各自獨立地選自氫、C_1-6烷基，或R_a、R_b與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；R_c、R_d各自獨立地選自氫、C_1-6烷基，或R_c、R_d與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；條件是至少有一個R_a、R_b與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基或至少有一個R_c、R_d與其相連的碳原子一起形成C_3-7環烷基；

   X’選自-CH₂-、-O-、-S-和-NR₃-；

   R₃為氫或C_1-6烷基；

   s和t各自獨立地選自1至4的整數。
6. 根據請求項5所述的大分子，其中X為

   

   、

   

   、

   

   、

   

   、

   

   或

   

   ，其中s1和t1各自獨 立地選自1至4的整數。
7. 根據請求項5或6所述的大分子，其中X’選自-O-、-S-、-NH-和-N(CH₃)-。
8. 根據請求項1所述的大分子，其中連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵，結構如下：

   
9. 根據請求項1所述的大分子，其中連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂為-C(O)-，與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成醯胺鍵，結構如下：

   
10. 根據請求項1所述的大分子，其中連接子-X₁-L-X₂-中，X₁為-C(O)-，與藥學活性劑或其殘基A連接；X₂不存在，L的結構如下，其中含氮雜環端與樹枝狀聚合物D的表面胺基連接形成碳-氮鍵：

    
11. 一種大分子，其包含：

    i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

    ii)第一端基，其為包含羥基、胺基、羧基或者驗基的藥學活性劑或其殘基A；

    iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

    其中所述第一端基藉由三酸連接子共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基，三酸連接子中的一個羰基與藥學活性劑或其殘基連接，另外兩個羰基與樹枝狀聚合物的同一表面胺基連接並因此與連接子部分形成含氮雜環。
12. 根據請求項11所述的大分子，其中所述的三酸連接子與藥學活性劑或其殘基A以及樹枝狀聚合物D連接，形成如下的結構：

    

    ，其中X₄選自C、N，L₃為任選被氧、硫或氮原子間斷的C_{1- 10}伸烷基、伸烯基或者伸炔基，p為選自0-5的整數。
13. 根據請求項11所述的大分子，其中所述的三酸連接子與藥學活性劑或其殘基A以及樹枝狀聚合物D連接，形成選自如下的結構：

    
14. 一種大分子，其包含：

    i)具有表面胺基的樹枝狀聚合物D，其中至少兩個不同的端基共價連接於所述樹枝狀聚合物的表面胺基：

    ii)第一端基，其為艾日布林、曲貝替定或盧比替定；

    iii)第二端基，其為藥物代謝動力學修飾劑；

    其中所述第一端基藉由二酸連接子共價連接於所述樹枝狀聚合物樹枝狀聚合物的表面胺基，所述二酸連接子包含任選被一個或多個硫或氮原子間斷的C_1-10烷基鏈。
15. 根據請求項1至13中任一項所述的大分子，其中藥學活性劑選自麻醉劑、抗酸劑、抗體、抗感染藥、生物製品、心血管藥物、造影劑、利尿劑、補血藥、免疫抑制劑、激素和類似物、營養製品、眼科藥物、疼痛治療劑、呼吸藥物、佐劑、同化劑、抗關節炎藥、抗痙攣藥、抗組織胺藥、消炎藥、抗潰瘍藥、行為矯正藥物、腫瘤藥物、中樞神經系統藥物、避孕藥、糖尿病治療藥物、生育藥物、生長促進劑、止血藥、免疫刺激劑、肌肉鬆弛藥、肥胖治療劑、骨質疏鬆症藥物、肽、鎖靜劑和安定劑、尿道酸化劑或維生素。
16. 根據請求項1-13任一項所述的大分子，其中所述的藥學活性劑選自紫杉烷類藥物、喜樹鹼衍生物、核苷類藥物、蒽環類藥物、海鞘素衍生物、蛋白酶體抑制劑、微管抑制劑、BCL-2抑制劑、BCL-X_L抑制劑、選擇性核輸出抑制劑、抗代謝藥物、酪胺酸激酶抑制劑、PLK1抑制劑、CDK4/6抑制劑、BTK抑制劑、非類固醇激素受體拮抗劑和類固醇，較佳為紫杉烷類藥物、BCL-2抑制劑和BCL-X_L抑制劑。
17. 根據請求項1至13中任一項所述的大分子，其中藥學活性劑選自多西他賽、伊立替康、吉西他濱、卡培他濱、地西他濱、阿紮胞苷、多柔比星、表柔比星、曲貝替定、盧比替定、硼替佐米、艾日布林、塞利尼索、維奈托克、特西他賽、培美曲塞、卡巴他賽、卡博替尼、昂凡色替，或這些藥物分子的結構改造物。
18. 根據請求項1至13中任一項所述的大分子，其中藥學活性劑為多西他賽或下式化合物2，或它們的結構改造物，

    
19. 根據請求項1至18中任一項所述的大分子，其中所述的藥物代謝動力學修飾劑選自聚乙二醇、聚乙基噁唑啉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙二醇、葉酸鹽或者關於細胞表面受體的配體的葉酸鹽衍生物，較佳為聚乙二醇。
20. 根據請求項1至18中任一項所述的大分子，其中所述樹枝狀聚合物選自聚賴胺酸、聚賴胺酸類似物、聚醯胺基胺(PAMAM)、聚乙烯亞胺(PEI)或聚醚羥胺(PEHAM)樹枝狀聚合物，較佳為聚賴胺酸或者聚賴胺酸類似物。
21. 根據請求項20所述的大分子，其中所述聚賴胺酸或聚賴胺酸類似物包含核心和2-7代賴胺酸或賴胺酸類似物。
22. 一種藥物組成物，包含根據請求項1至21中任一項所述的大分子和藥學上可接受的載體。
23. 根據請求項14、16-18中任一項所述的大分子在製備治療腫瘤的藥物中的用途。

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