本申請案主張2017年3月30日申請之美國臨時申請案第62/478,788號之優先權，該案以全文引用之方式併入本文中。 一般技術者在閱讀以下實施方式後可更容易地理解本發明之特徵及優勢。應瞭解，為清楚起見，在各別實施例之情形中在上下文中描述的本發明之某些特徵亦可組合形成單個實施例，且為簡潔起見，在單個實施例之情形中描述的本發明之各種特徵亦可組合以便形成其子組合。本文中鑑別為例示性或較佳之實施例打算為說明性的且不具限制性。 除非另外具體規定，否則以單數形式提及亦可包括複數形式。舉例而言，「一(a/an)」可指一個，或一或多個。 當本文列出值範圍時，希望該範圍內涵蓋各值及子範圍。舉例而言，「1-5 mg」打算涵蓋1 mg、2 mg、3 mg、4 mg、5 mg、1-2 mg、1-3 mg、1-4 mg、1-5 mg、2-3 mg、2-4 mg、2-5 mg、3-4 mg、3-5 mg以及4-5 mg。 當術語「約(about)」與數值範圍結合使用時，其藉由擴展邊界至彼等數值以上及以下來調整該範圍。一般而言，術語「約」在本文中用於修飾一數值以使其在所述值以上及以下20%、10%、5%或1%變化範圍內。在一些實施例中，術語「約」用於修飾一數值以使其在所述值以上及以下10%變化範圍內。在一些實施例中，術語「約」用於修飾一數值以使其在所述值以上及以下5%變化範圍內。在一些實施例中，術語「約」用於修飾一數值以使其在所述值以上及以下1%變化範圍內。 本發明之特定化合物可以特定幾何或立體異構形式存在。本發明涵蓋在本發明範疇內之所有此類化合物，包括順式及反式異構體、R-及S-對映異構體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體、其外消旋混合物及其其他混合物。其他不對稱碳原子可存在於諸如烷基之取代基中。所有此類異構體以及其混合物打算包括於本發明中。 經同位素標記之化合物亦屬於本發明之範疇內。如本文所用，「經同位素標記之化合物」係指包括各自如本文所述之醫藥鹽及前藥的本發明之化合物，其中一或多個原子置換成原子質量或質量數不同於自然界中存在之原子質量或質量數的原子。可併入本發明之化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如
2
H、
3
H、
13
C、
14
C、
15
N、
18
O、
17
O、
31
P、
32
P、
35
S及
36
Cl。 藉由對本發明之化合物進行同位素標記，該等化合物可適用於藥物及/或受質組織分佈分析。氚化(
3
H)及碳-14(
14
C)標記之化合物因其容易製備及可偵測性而尤其較佳。此外，用諸如氘(
2
H)之較重同位素取代由於更大的代謝穩定性而可提供特定治療優勢，例如增加活體內半衰期或降低劑量需求，且因此在一些情況下可為較佳。本發明之同位素標記之化合物，包括其醫藥鹽、酯及前藥可藉由此項技術中已知的任何方式製備。 此外，用諸如氘之較重同位素取代正常豐度之氫(
1
H)可獲得特定治療優勢，例如由改良之吸收、分佈、代謝及/或排泄(ADME)特性產生、形成具有改良之功效、安全性及/或耐受性的藥物。用
13
C置換正常豐度之
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C亦可獲得益處。 本文所揭示化合物之溶劑合物及鹽亦屬於本發明之範疇內。術語「溶劑合物」表示包含本發明化合物之一或多個分子與一或多個溶劑分子之聚集物。本發明化合物之溶劑合物包括例如水合物。 「醫藥學上可接受之鹽」的實例包括酸加成鹽及鹼加成鹽。酸加成鹽的實例包括無機酸鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽及其類似物，及有機酸鹽，諸如檸檬酸鹽、乙二酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、丁二酸鹽、蘋果酸鹽、乙酸鹽、甲酸鹽、丙酸鹽、苯甲酸鹽、三氟乙酸鹽、甲烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、樟腦磺酸鹽及其類似物。鹼加成鹽的實例包括無機鹼鹽，諸如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋇鹽、鋁鹽及其類似物，及有機鹼之鹽，諸如三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、2,6-二甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺[參(羥基甲基)甲胺]、第三丁胺、環己胺、二環己胺、N,N-二苯甲基乙胺及其類似物。其他實例包括胺基酸之鹽，包括鹼性或酸性胺基酸，諸如精胺酸、溶胞素、鳥胺酸、天冬胺酸、麩胺酸及其類似物。 本文所揭示化合物之前藥亦屬於本發明之範疇內。如本文所用，術語「前藥」係指母藥物分子或其衍生物之藥理學衍生物，其需要在生物體內自發或酶促生物轉化以釋放活性藥物。除非另外規定，否則本發明化合物之前藥亦涵蓋且屬於本發明之範疇內。舉例而言，前藥是本文揭示之化合物及其特定衍生物之變體或衍生物，其具有在特定代謝條件下可裂解之基團，當其裂解且視情況進一步轉化時，變成本發明之化合物。當此類前藥在生理學條件下進行溶劑分解或發生酶促降解時，其在活體內具有醫藥活性。視生物體內釋放活性藥物所需的生物轉化步驟的數目以及以前驅物型形式存在之官能基的數目而定，本文之前藥化合物可稱為單重、雙重、三重等。 前藥形式通常在哺乳動物生物體中提供溶解度、組織相容性或延時釋放之優勢。此項技術中通常已知的前藥包括熟知的酸衍生物，諸如藉由母體酸與適合醇反應製備之酯、藉由母體酸化合物與胺反應製備之醯胺、反應形成醯化鹼衍生物之鹼性基團等。當然，其他前藥衍生物可與本文揭示之其他特徵組合來改善生物可用性。因此，熟習此項技術者將瞭解，具有胺基、醯胺基、羥基或羧基之特定本發明化合物或其衍生物可轉化成前藥。前藥包括具有胺基酸殘基或藉由肽鍵共價連接至游離胺基或羥基或羧酸基的兩個或更多個(例如兩個、三個或四個)胺基酸殘基之多肽鏈的化合物或其衍生物。胺基酸殘基包括通常由三個字母符號命名的20種天然存在之胺基酸，且亦包括4-羥基脯胺酸、羥基離胺酸、鎖鏈離胺酸、異鎖鏈離胺酸、3-甲基組胺酸、正纈胺酸、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、瓜胺酸高半胱胺酸、高絲胺酸、鳥胺酸及甲硫胺酸碸。舉例而言，本發明化合物可經歷轉型產生酚系衍生物，其可轉化成多種前藥。當投與時，此等多種前藥可代謝成酚系衍生物，其可進一步轉化成本發明化合物。因此，由本文所揭示化合物及其衍生物製備之前藥屬於本發明及隨附申請專利範圍之範疇內。前藥亦包括具有共價鍵結至本文所揭示之上述取代基中之任一者的碳酸酯、胺基甲酸酯、醯胺或烷基酯部分之化合物。 本發明揭示之化合物、同位素標記之化合物、鹽、溶劑合物及前藥可以若干互變異構形式存在，包括烯醇及亞胺形式，以及酮及烯胺形式及其幾何異構體以及混合物。互變異構體以溶液中互變異構體集合之混合物形式存在。在固體形式中，通常以一種互變異構體占主導。即使可描述一種互變異構體，但全部互變異構體均在本發明之範疇內。 如本文所用，術語個體之「癌症」係指存在具有引起癌症之細胞的典型特徵(諸如不受控之增殖、不滅性、轉移可能、快速生長及增殖速率或/及某些形態特徵)的細胞。通常，癌細胞為腫瘤或腫塊形式，但此類細胞可單獨存在於個體內或可在血流中以獨立細胞形式循環，諸如白血病或淋巴瘤細胞。如本文所用之癌症的實例包括(但不限於)肺癌、胰臟癌、骨癌、皮膚癌、頭部或頸部癌、皮膚或眼內黑素瘤、乳癌、子宮癌、卵巢癌、結腸癌、直腸癌、肛門區癌、胃癌(stomach cancer)、胃癌(gastric cancer)、胃腸癌、子宮癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金氏病(Hodgkin's Disease)、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、膀胱癌、睪丸癌、尿管癌、腎盂癌、間皮瘤、肝細胞癌、膽道癌、腎癌、腎細胞癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、中樞神經系統(CNS)贅瘤、脊軸腫瘤、腦幹神經膠質瘤、多形性膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、神經鞘瘤、室管膜瘤、神經管胚細胞瘤、脊膜瘤、鱗狀細胞癌、垂體腺瘤，其包括上述癌症中之任一者之難治性型式或上述癌症中之一或多者之組合。一些例示性癌症包括於通用術語中，且例示性癌症及通用術語包括在術語「癌症」中。舉例而言，通用術語泌尿癌包括膀胱癌、前列腺癌、腎癌、睪丸癌及其類似癌症；且另一通用術語肝膽癌包括肝癌(自身為包括肝細胞癌或膽管癌之通用術語)、膽囊癌、膽道癌或胰臟癌。泌尿癌與肝膽癌均由本發明涵蓋且包括於術語「癌症」中。 「實體腫瘤(solid tumor)」亦包括於術語「癌症」內。如本文所用，術語「實體腫瘤」指形成異常腫瘤塊(諸如肉瘤、癌瘤及淋巴瘤)之彼等病狀(諸如癌症)。實體腫瘤之實例包括(但不限於)非小細胞肺癌(NSCLC)、神經內分泌腫瘤、胸腺瘤、纖維腫瘤、轉移性結腸直腸癌(mCRC)及其類似實體腫瘤。在一些實施例中，實體腫瘤疾病為腺癌、鱗狀細胞癌、大細胞癌及其類似疾病。 如本文所用，「癌症幹細胞」(「CSC」)或「癌症幹細胞」(「CSC」)係指具有自我更新能力且致瘤性的癌細胞群體。其亦稱為「癌症起始細胞」、「腫瘤起始細胞」、「癌症幹細胞樣細胞」、「幹細胞樣癌細胞」、「侵襲性癌細胞」以及「超級惡性癌細胞」等。分離此等細胞之方法包括(但不限於)藉由其流出Hoechst 33342之能力進行增濃、增濃表面標記物，諸如CD133、CD44等，且藉由其致瘤特性進行增濃。 如本文所用，術語「癌症幹性抑制劑」係指能夠抑制CSC之化合物。不受任何特定理論限制，癌症幹性抑制劑可靶向或/及抑制癌症幹細胞的幹細胞樣特徵中涉及之多個路徑。舉例而言，多個路徑可涉及STAT3、β-連環蛋白、NANOG、TCF4及其類似物。癌症幹性抑制劑可為小分子或生物製劑(包括糖、肽、蛋白質、核酸或其組合)。在一些實施例中，本發明之癌症幹性抑制劑是2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮。 如本文所用，術語「個體」係指人類及非人類動物，包括獸醫學個體。術語「非人類動物」包括所有脊椎動物，例如哺乳動物及非哺乳動物，諸如非人類靈長類動物、小鼠、家兔、綿羊、犬、貓、馬、牛、雞、兩棲動物以及爬行動物。在一些實施例中，個體是人類且可稱為患者。 如本文所用，術語「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」較佳係指獲得有益或所需臨床結果之動作，包括(但不限於)緩解或改善疾病或病況之一或多種病徵或症狀，減輕疾病程度，穩定疾病狀態(即不惡化)、改善或緩解疾病病狀、減緩進展速率或時間、無論可偵測或不可偵測之緩解(部分或全部)，或/及預防疾病或病況。「治療」亦可意謂與無治療存在下之預期生存期相比延長的生存期。治療無需是治癒性的，且可為將本發明化合物投與至尚未發生疾病之健康人類的動作，例如以延遲或避免疾病發作。有時，此亦稱為「預防(prevent)」、「預防(preventing)」或「預防(prevention)」。 如本文所用，術語活性劑之「有效量」係指足以引發所需生物反應之量。如一般技術者將瞭解，本發明化合物之有效量可視諸如期望之生物學終點、化合物之藥物動力學、所治療之疾病、投與模式或/及患者而變化。 就降低癌細胞生長而言，抗癌劑之「有效量」意指能夠在一定程度上降低一些癌症或腫瘤細胞之生長的量。術語包括能夠引起癌症或腫瘤細胞的生長抑制、細胞抑制及/或細胞毒性作用，及/或細胞凋亡的量。 關於癌症治療之「治療有效量」意謂能夠引起一種或多種以下作用之量：(1)在一定程度上抑制癌症或腫瘤生長，包括減緩生長或完全生長停滯；(2)減少癌症或腫瘤細胞之數目；(3)減小腫瘤尺寸；(4)抑制(即減少、減緩或完全停止)癌症或腫瘤細胞浸潤至周圍器官；(5)抑制(即減少、減緩或完全停止)轉移；(6)提高抗腫瘤免疫反應，其可但並非必須導致腫瘤消退或排斥，或/及(7)在一定程度上減輕與癌症或腫瘤相關的一或多種症狀。治療有效量可根據諸如個體之疾病病狀、年齡、性別及體重以及一或多種抗癌劑在個體體內誘發所需反應之能力的因素而變化。「治療有效量」亦為治療有益作用超過任何毒性或有害作用的量。 術語「治療癌症」、「癌症治療」或其等效物意謂降低、減少或抑制癌細胞之複製；降低、減少或抑制癌症之擴散(形成癌轉移)；減小腫瘤尺寸；減少腫瘤數目(即減輕腫瘤負荷)；減輕或減少體內癌細胞數目；預防手術摘除或其他抗癌療法後的癌症復發；或/及改善或減輕由癌症引起之疾病的症狀。 如本文所用，術語「組合(combination)」或「組合(combinatorial)」意謂投與至少兩種不同藥劑以治療病症、病況或症狀，例如癌症病況。此類組合療法可涉及在投與第二藥劑之前、期間及/或之後投與一種藥劑。本文所述之化合物、產物及/或醫藥組成物及第二藥劑可在相同醫藥組合物中投與個體，較佳人類個體。或者，本文所述之化合物、產物及/或醫藥組合物及第二藥劑可在各別醫藥組合物中同時、單獨或依序投與個體。本文所述之化合物、產物及/或醫藥組合物及第二藥劑可藉由相同或不同投與途徑投與個體。在一些實施例中，本發明之組合包含有效量之本文所述之化合物、產物及/或醫藥組合物及有效量的至少一種第二藥劑(例如預防劑或治療劑)。舉例而言，至少一種第二藥劑可具有與本文所述之化合物、產物及/或醫藥組合物不同的作用機制。在一些實施例中，本發明之組合藉由一起起作用以具有加成或協同作用來改良本文所述之化合物、產物及/或醫藥組合物及第二療法之預防或治療作用。在一些實施例中，本發明之組合降低與第二療法有關的副作用。藥劑(包括本發明之化合物或組合物或第二藥劑)的投與時間上可間隔高達數週，但更通常在48小時內，且最通常在24小時內。 術語「協同作用」及「協同」意謂一起使用之化合物實現的作用大於單獨使用該等化合物所產生之作用，即大於基於兩種單獨投與之活性成分所預測的作用的總和。協同作用可在化合物如下時實現：(1)共同調配且以組合調配物形式同時投與或傳遞；(2)以單獨調配物形式交替或同時傳遞；或(3)藉由一些其他方案。當以交替療法傳遞時，在依序投與或傳遞化合物時可獲得協同作用，例如以各別錠劑、丸劑或膠囊形式，或藉由各別注射器進行不同注射。通常，在交替治療期間，有效劑量之各活性成分依序投與，即連續投與，而在組合治療中，將有效劑量之兩種或更多種活性成分一起投與。協同抗癌作用表示大於組合中個別化合物之所預測的純累加作用的抗癌作用。 如本文所用，「代謝抑制劑」意謂抑制代謝酶的藥劑。「代謝抑制劑」的實例包括還原酶抑制劑、氧化酶抑制劑及結合酶抑制劑。「代謝抑制劑」的實例包括還原酶抑制劑及氧化酶抑制劑。「代謝抑制劑」的實例是還原酶抑制劑。不受任何特定理論限制，組合使用一或多種「代謝抑制劑」及2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮抑制2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之代謝且因此提高2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的抗腫瘤作用。 如本文所用，「還原酶抑制劑」意謂抑制催化還原反應之酶的藥劑。「還原酶抑制劑」的實例包括「醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)」、「羰基還原酶抑制劑(CR抑制劑)」、「醛還原酶抑制劑(ALR抑制劑)」及「醛醣還原酶抑制劑(AR抑制劑)」。「還原酶抑制劑」的實例包括醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)、羰基還原酶抑制劑(CR抑制劑)及醛還原酶抑制劑(ALR抑制劑)。「還原酶抑制劑」的實例包括醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)及羰基還原酶抑制劑(CR抑制劑)。「還原酶抑制劑」的實例是醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)。 「醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)」的實例包括二氟尼柳、氟芬那酸、甲芬那酸、甲氯芬那酸、舒林酸、沙美特羅、氯倍他索、炔雌醇、氯倍他松、孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸甲烯雌醇、孕烯醇酮、乙酸氯地孕酮、哈西奈德、糠酸莫米松、替勃龍、雌馬性素、布地奈德、乙酸環丙孕酮、苯溴馬隆、達普松、醋磺環己脲、氯丙嗪、吡格列酮、格列本脲、洛沙坦、艾芬地爾、酮康唑或格列美脲。 「醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)」的特定實例包括二氟尼柳、苯溴馬隆、氟芬那酸、甲芬那酸及舒林酸。 「醛基-酮基還原酶抑制劑(AKR抑制劑)」的特定實例包括二氟尼柳、氟芬那酸、甲芬那酸及舒林酸。 「氧化酶抑制劑」意謂抑制催化氧化反應之代謝酶的藥劑。 「氧化酶抑制劑」的實例包括「含有黃素之單加氧酶抑制劑(FMO抑制劑)」、「醇脫氫酶抑制劑(ADH抑制劑)」、「醛脫氫酶抑制劑(ALDH抑制劑)」及「單胺氧化酶抑制劑(MAO抑制劑)」。「氧化酶抑制劑」的實例包括「醇脫氫酶抑制劑(ADH抑制劑)」及「醛脫氫酶抑制劑(ALDH抑制劑)」。「氧化酶抑制劑」的實例是醛脫氫酶抑制劑(ALDH抑制劑)。 「醛脫氫酶抑制劑(ALDH抑制劑)」的實例包括4-二乙基胺基苯甲醛、免賴得(benomyl)、檸檬醛、氰胺、二硫龍、草達滅、巴吉林及大豆異黃酮。 「結合酶抑制劑」意謂抑制結合相關之代謝酶的藥劑。「結合酶抑制劑」的實例包括「UGP-葡萄糖醛酸基轉移酶抑制劑(UGT抑制劑)」、「磺基轉移酶抑制劑(ST抑制劑)」、「胺基酸N-醯基轉移酶抑制劑」、「乙醯基轉移酶抑制劑(NAT抑制劑)」、「甲基轉移酶抑制劑」及「麩胱甘肽S-轉移酶抑制劑(GST抑制劑)」。「結合酶抑制劑」的實例包括「UGT抑制劑」、「ST抑制劑」及「GST抑制劑」。「結合酶抑制劑」的實例包括「UGT抑制劑」及「GST抑制劑」。「結合酶抑制劑」的實例是「GST抑制劑」。 「轉運體抑制劑」意謂抑制治療劑從細胞排泄出去的藥劑。「轉運體抑制劑」的實例包括ATP結合卡匣轉運體(ABC)A1抑制劑、ABCA2抑制劑、ABCA3抑制劑、ABCR抑制劑、ABCA5抑制劑、ABCA6抑制劑、ABCA7抑制劑、ABCA8抑制劑、ABCA9抑制劑、ABCA10抑制劑、ABCA12抑制劑、ABCA13抑制劑、多藥耐藥性(MDR)1抑制劑、與抗原處理有關的轉運體(TAP)1抑制劑、TAP2抑制劑、MDR3抑制劑、ABCB5抑制劑、ABCB6抑制劑、ABC7M-ABC1抑制劑、ABCB9抑制劑、ABCB10抑制劑、膽汁鹽輸出泵(BSEP)抑制劑、多藥耐藥性相關蛋白(MRP)1抑制劑、MRP2抑制劑、MRP3抑制劑、MRP4抑制劑、MRP5抑制劑、MRP6抑制劑、囊性纖維化跨膜傳導調節劑(CFTR)抑制劑、磺醯脲受體(SUR)1抑制劑、SUR2抑制劑、ABCC10抑制劑、ABCC11抑制劑、ABCC12抑制劑、ABCC13抑制劑、ATP-結合卡匣轉運體子家族D(ALD)抑制劑、ALD2抑制劑、過氧化物酶體膜蛋白(PXMP)1抑制劑、核糖核酸酶L(RNASEL)I抑制劑、ABC50抑制劑、ABCF2抑制劑、ABCF3抑制劑、ABCG1抑制劑、ABCG2抑制劑、ABCG4抑制劑、ABCG5抑制劑以及ABCG8抑制劑。「轉運體抑制劑」的特定實例包括環孢素、維拉帕米、依克立達、吉非替尼及紅黴素。 如本文所用，術語「非類固醇消炎藥(NSAID)」具有其通常公認的含義。其係指通常提供止痛及解熱作用之藥物類別。本文之NSAID可包括以下中之任一者：水楊酸鹽，包括阿司匹林(乙醯水楊酸)、二氟尼柳及雙水楊酸酯；丙酸衍生物，包括布洛芬、右布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮基布洛芬、右酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪及洛索洛芬；乙酸衍生物，包括吲哚美辛、托美丁、舒林酸、依託度酸、酮咯酸、雙氯芬酸及萘丁美酮；烯醇酸(昔康)衍生物，包括吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈噁昔康、氯諾昔康及伊索昔康；芬那酸衍生物(芬那酯)，包括因法來酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸及托芬那酸；選擇性COX-2抑制劑，包括塞內考昔、羅非考昔、伐地考昔、帕瑞考昔、盧米羅可、依他考昔及非羅考昔；磺醯胺，包括尼美舒利；及其他NSAID，包括利克飛龍(藉由抑制LOX (脂加氧酶)及COX起作用且因此稱為LOX/COX抑制劑)及離胺酸氯尼辛；以及天然NSAID，包括貫葉金絲桃素、玄參素及促鈣三醇(維生素D)。 在一個態樣中，本發明提供用於治療癌症的組合物，包括醫藥組合物。在一些實施例中，醫藥組合物包括本發明化合物。在一些實施例中，化合物是癌症幹性抑制劑。在一些實施例中，化合物係選自2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、其前藥、前述任一者之醫藥學上可接受之鹽或前述任一者之溶劑合物。在一些實施例中，化合物係選自具有式I之化合物：
其前藥、前述任一者之醫藥學上可接受之鹽及前述任一者之溶劑合物。在一些實施例中，具有式I之化合物亦稱為BBI608或那帕布新。在一些實施例中，化合物係選自例如藉由使用US專利第9,084,766號中之實例8-11製備的化合物，該專利之內容以全文引用的方式併入本文中。在一些實施例中，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、具有式I之化合物、藉由使用US專利第9,084,766號中之實例8-11製備的化合物、BBI608及那帕布新可互換使用。 在一些實施例中，術語「本發明化合物」或「化合物」係指選自以下的至少一種化合物：2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、具有式I之化合物、藉由使用US專利第9,084,766號中之實例8-11製備的化合物、BBI608或那帕布新、其前藥、前述任一者之醫藥學上可接受之鹽及前述任一者之溶劑合物。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中本發明化合物的量可在約5重量%至約25重量%範圍內。如本文所用，稱為「重量%」之量為組分相對於醫藥組合物之總重量的重量百分比。在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量可在約10重量%至約20重量%範圍內。在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量為約16重量%至約17重量%，諸如約16.7重量%。 在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量可在約20重量%至約80重量%範圍內。在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量可在約40重量%至約60重量%範圍內。在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量為約45重量%至約55重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的本發明化合物之量為約50重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物包括至少一種黏合劑。在一些實施例中，醫藥組合物包括至少一種崩解劑。在一些實施例中，醫藥組合物包括至少一種其他賦形劑。在一些實施例中，醫藥組合物包括選自潤滑劑及界面活性劑之至少一種組分。 在一些實施例中，至少一種黏合劑是羥丙基纖維素、褐藻酸、羧基甲基纖維素、甲基纖維素、共聚維酮/乙烯吡咯啶酮-乙酸乙烯酯共聚物、部分水解之聚乙烯醇或其組合。在一些實施例中，至少一種黏合劑是共聚維酮/乙烯吡咯啶酮-乙酸乙烯酯共聚物。在一些實施例中，共聚維酮/乙烯吡咯啶酮-乙酸乙烯酯共聚物是Kollidon VA 64 (由BASF製造)。在一些實施例中，至少一種黏合劑是部分水解之聚乙烯醇。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約0.5重量%至約5重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約1重量%至約4重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約1重量%至約3重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約1.5重量%至約2.5重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約2重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約2重量%至約4重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約2.5重量%至約3.5重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約3重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約5重量%至約25重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約10重量%至約20重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約15重量%至約18重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量是約16重量%至約17重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種黏合劑之量為約16.7重量%。 在一些實施例中，至少一種崩解劑是羥基乙酸澱粉鈉、交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮、羧基甲基澱粉鈉、低取代羥基丙基纖維素或其組合。在一些實施例中，至少一種崩解劑是交聯羧甲纖維素鈉。在一些實施例中，至少一種崩解劑是低取代羥基丙基纖維素。在一些實施例中，至少一種崩解劑是羧基甲基澱粉鈉。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約5重量%至約25重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約10重量%至約20重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約12重量%至約18重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約14重量%至約16重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量為約15重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約15重量%至約18重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約16重量%至約17重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量為約16.7重量%。 在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約10重量%至約30重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約15重量%至約25重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約18重量%至約22重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量為約19重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約15重量%至約55重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約25重量%至約40重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約30重量%至約35重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量是約32重量%至約34重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種崩解劑之量為約33.33重量%。 在一些實施例中，至少一種其他賦形劑是甘露糖醇、山梨糖醇、二水合磷酸氫鈣、無水磷酸氫二鈣、磷酸三鈣、微晶纖維素或其組合。在一些實施例中，至少一種其他賦形劑是甘露糖醇。在一些實施例中，至少一種其他賦形劑是微晶纖維素。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約5重量%至約25重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約10重量%至約20重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約15重量%至約18重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約16重量%至約17重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量為約16.7重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約15重量%至約45重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約17.5重量%至約37.5重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約20重量%至約35重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約25重量%至約30重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量為約27.5重量%。 在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約22重量%至約37重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約25重量%至約35重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約30重量%至約32重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量為約31重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約20重量%至約60重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約35重量%至約45重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約38重量%至約43重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量是約41重量%至約43重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種其他賦形劑之量為約41.7重量%。 在一些實施例中，至少一種組分是界面活性劑。在一些實施例中，界面活性劑是聚氧乙烯脫水山梨糖醇烷基化物、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、維生素E TPGS或月桂基硫酸鈉。在一些實施例中，聚氧乙烯脫水山梨糖醇烷基化物是聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯或聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。在一些實施例中，聚氧乙烯脫水山梨糖醇烷基化物是聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。在一些實施例中，脂質是磷脂，包括磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯甘油、鞘磷脂、卵磷脂或氫化磷脂；固醇；或膽固醇。在一些實施例中，脂質是磷脂，包括磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯甘油、鞘磷脂、卵磷脂、氫化磷脂；或膽固醇。 在一些實施例中，至少一種界面活性劑是聚山梨醇酯、月桂基硫酸鈉、環糊精、卵磷脂、維生素E TPGS (D-α-生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯)或其組合。在一些實施例中，界面活性劑是維生素E TPGS (D-α-生育酚聚乙二醇1000丁二酸酯)。在一些實施例中，界面活性劑是月桂基硫酸鈉。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約0.05重量%至約2重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約0.1重量%至約2重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約0.1重量%至約1重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量為約0.5重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約1重量%至約20重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約5重量%至約12重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約7重量%至約10重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約8重量%至約9重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量為約8.33重量%。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約5重量%至約25重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約10重量%至約20重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約15重量%至約18重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量是約16重量%至約17重量%。舉例而言，醫藥組合物中的至少一種界面活性劑之量為約16.7重量%。 在一些實施例中，至少一種組分是潤滑劑。在一些實施例中，潤滑劑是硬脂酸鎂、滑石、鏈烷烴、油酸鈉、月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸鎂或其組合。在一些實施例中，潤滑劑為硬脂酸鎂。 在一些實施例中，本發明之醫藥組合物中的潤滑劑之量是約0.1重量%至約10重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的潤滑劑之量是約0.1重量%至約5重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的潤滑劑之量是約0.5重量%至約2重量%。在一些實施例中，醫藥組合物中的潤滑劑之量是約0.5重量%至約1.5重量%。舉例而言，醫藥組合物中的潤滑劑之量為約1重量%。 在一些實施例中，醫藥組合物另外包括一或多種添加劑，其各自獨立地為流化劑、塗佈劑、增溶劑、溶液緩凝劑、吸收促進劑、增稠劑、分散劑、穩定劑、甜味劑、調味劑、pH調節劑、等滲劑、著色劑、乳化劑、保濕劑、脫模劑、消毒劑、防腐劑或抗氧化劑。 在一些實施例中，添加劑是乳糖、山梨糖醇、甘露糖醇、結晶纖維素、碳酸鈣、矽酸鈣、無水磷酸氫鈉、甲基纖維素、羥丙甲纖維素、羥丙基纖維素、聚維酮、聚乙烯醇、羧基甲基纖維素鈉、乙基纖維素、乙酸纖維素、阿拉伯膠、黃原膠、粉末狀黃芪膠、明膠、褐藻酸、海藻酸鹽、低取代羥丙基纖維素、羧基甲基纖維素、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、木薯澱粉、部分預膠凝化澱粉、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲纖維素鈉、交聯聚維酮、羥基乙酸澱粉鈉、瓊脂、輕無水矽酸、二氧化矽、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂醯反丁烯二酸鈉、氧化鈦、紅色三氧化二鐵、黃色三氧化二鐵、黑色氧化鐵、食品顏色、植物油，諸如可可油脂、花生油、棉子油、玉米油、胚芽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、大豆油及其類似物；丙三醇、聚乙二醇、丙二醇、油酸乙酯、月桂酸乙酯、丙三醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、聚氧伸乙基脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧甘油酯、脂肪酸、水、生理食鹽水、乙醇、異丙醇、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、鯨蠟醇、異硬脂醇、環糊精、羥丙基-β-環糊精、矽酮、液體石蠟、磷脂，諸如磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯乙醇胺、磷脂醯甘油、鞘磷脂、卵磷脂、氫化磷脂及其類似物；固醇、膽固醇、硫酸膽固醇、神經醯胺、人類血清白蛋白、高嶺土、膨潤土、矽酸鎂鋁、氧化鋅、阿斯巴甜糖、糖精、糖精鈉、蔗糖、乙醯磺胺酸K、蔗糖素、紐甜、聚氧乙烯脫水山梨糖醇烷基化物、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油、維生素E TPGS、月桂基硫酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、甘胺酸、檸檬酸、檸檬酸鈉、氯化鈉、葡萄糖、對羥基苯甲酸酯、苯紮氯銨、苄索氯銨、苯甲酸、苯甲酸鈉、維生素E、沒食子酸丙酯、抗壞血酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、乙二胺四乙酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉或半胱胺酸。在一些實施例中，添加劑是聚氧甘油酯、界面活性劑、脂質、植物油、丙三醇-脂肪酸酯、丙二醇-脂肪酸酯、脂肪酸、丙二醇、聚乙二醇、纖維素或纖維素衍生物、pH調節劑、等滲劑或抗氧化劑。在一些實施例中，添加劑是聚氧甘油酯、界面活性劑、脂質、植物油、丙三醇-脂肪酸酯、丙二醇-脂肪酸酯、脂肪酸、丙二醇、聚乙二醇或抗氧化劑。在一些實施例中，添加劑是聚氧甘油酯、界面活性劑、脂質、丙三醇-脂肪酸酯、丙二醇-脂肪酸酯、脂肪酸或抗氧化劑。添加劑之特定實例可為聚氧甘油酯、界面活性劑、脂質或抗氧化劑。 在一些實施例中，聚氧甘油酯是辛醯基己醯基聚氧甘油酯、十二醯基聚氧甘油酯、亞油醯基聚氧甘油酯、油醯基聚氧甘油酯或硬脂醯基聚氧甘油酯。在一些實施例中，聚氧甘油酯是辛醯基己醯基聚乙二醇-8甘油酯、十二醯基聚乙二醇-32甘油酯、十二醯基聚乙二醇-6甘油酯、亞油醯基聚乙二醇-6甘油酯、油醯基聚乙二醇-6甘油酯或硬脂醯基聚乙二醇-32甘油酯。在一些實施例中，聚氧甘油酯是十二醯基聚乙二醇-32甘油酯或亞油醯基聚乙二醇-6甘油酯。在一些實施例中，聚氧甘油酯是十二醯基聚乙二醇-32甘油酯。 在一些實施例中，抗氧化劑是維生素E、維生素E TPGS、沒食子酸丙酯、抗壞血酸、亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、乙二胺四乙酸鈉、異抗壞血酸、抗壞血酸鈉或半胱胺酸。在一些實施例中，抗氧化劑是維生素E或維生素E TPGS。在一些實施例中，抗氧化劑是維生素E TPGS。 在一些實施例中，醫藥組合物包括約5重量%至約25重量%範圍內之量的本發明化合物；約5重量%至約25重量%範圍內之量的Kollidon VA 64；約5重量%至約25重量%範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約20重量%至約60重量%範圍內之量的甘露糖醇；以及約1重量%至約20重量%範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物包括約10重量%至約20重量%範圍內之量的本發明化合物；約10重量%至約20重量%範圍內之量的Kollidon VA 64；約10重量%至約20重量%範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約35重量%至約45重量%範圍內之量的甘露糖醇；以及約5重量%至約12重量%範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物包括約16.7重量%之量的本發明化合物；約16.7重量%之量的Kollidon VA 64；約16.7重量%之量的交聯羧甲纖維素鈉；約41.67重量%之量的甘露糖醇；以及約8.33重量%之量的維生素E TPGS。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約30 mg至約130 mg範圍內之量的本發明化合物；約30 mg至約130 mg範圍內之量的Kollidon VA 64；約30 mg至約130 mg範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約100 mg至約300 mg範圍內之量的甘露糖醇；以及約5 mg至約75 mg範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物可包括約60 mg至約100 mg範圍內之量的本發明化合物；約60 mg至約100 mg範圍內之量的Kollidon VA 64；約60 mg至約100 mg範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約150 mg至約250 mg範圍內之量的甘露糖醇；以及約20 mg至約60 mg範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物可包括約80 mg之量的本發明化合物；約80 mg之量的Kollidon VA 64；約80 mg之量的交聯羧甲纖維素鈉；約200 mg之量的甘露糖醇；以及約40 mg之量的維生素E TPGS。 在一些實施例中，醫藥組合物包括約5重量%至約25重量%範圍內之量的本發明化合物；約5重量%至約25重量%範圍內之量的Kollidon VA 64；約15重量%至約55重量%範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約5重量%至約25重量%範圍內之量的甘露糖醇；以及約5重量%至約25重量%範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物包括約10重量%至約20重量%範圍內之量的本發明化合物；約10重量%至約20重量%範圍內之量的Kollidon VA 64；約25重量%至約40重量%範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約10重量%至約20重量%範圍內之量的甘露糖醇；以及約10重量%至約20重量%範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物包括約16.7重量%之量的本發明化合物；約16.7重量%之量的Kollidon VA 64；約33.3重量%之量的交聯羧甲纖維素鈉；約16.7重量%之量的甘露糖醇；以及約16.7重量%之量的維生素E TPGS。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約30 mg至約130 mg範圍內之量的本發明化合物；約30 mg至約130 mg範圍內之量的Kollidon VA 64；約50 mg至約250 mg範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約30 mg至約130 mg範圍內之量的甘露糖醇；以及約30 mg至約130 mg範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物可包括約60 mg至約100 mg範圍內之量的本發明化合物；約60 mg至約100 mg範圍內之量的Kollidon VA 64；約120 mg至約200 mg範圍內之量的交聯羧甲纖維素鈉；約60 mg至約100 mg範圍內之量的甘露糖醇；以及約60 mg至約100 mg範圍內之量的維生素E TPGS。在一些實施例中，醫藥組合物可包括約80 mg之量的本發明化合物；約80 mg之量的Kollidon VA 64；約160 mg之量的交聯羧甲纖維素鈉；約80 mg之量的甘露糖醇；以及約80 mg之量的維生素E TPGS。 在一些實施例中，醫藥組合物包括約25重量%至約75重量%範圍內之量的本發明化合物；約0.5重量%至約5重量%範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約5重量%至約25重量%範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約15重量%至約45重量%範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.1重量%至約2重量%範圍內之量的硬脂酸鎂。在一些實施例中，醫藥組合物包括約40重量%至約60重量%範圍內之量的本發明化合物；約1重量%至約4重量%範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約10重量%至約20重量%範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約22重量%至約37重量%範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.5重量%至約1重量%範圍內之量的硬脂酸鎂。在一些實施例中，醫藥組合物包括約50重量%之量的本發明化合物；約3重量%之量的部分水解之聚乙烯醇；約15重量%之量的低取代羥基丙基纖維素；約31重量%之量的微晶纖維素；以及約1重量%之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約30 mg至約130 mg範圍內之量的本發明化合物；約3 mg至約6 mg範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約16 mg至約32 mg範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約35 mg至約65 mg範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.5 mg至約2.5 mg範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約50 mg至約100 mg範圍內之量的本發明化合物；約4 mg至約5 mg範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約20 mg至約28 mg範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約45 mg至約55 mg範圍內之量的微晶纖維素；以及約1 mg至約2 mg範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約80 mg之量的本發明化合物；約4.8 mg之量的部分水解之聚乙烯醇；約24 mg之量的低取代羥基丙基纖維素；約49.6 mg之量的微晶纖維素；以及約1.6 mg之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約20重量%至約80重量%範圍內之量的本發明化合物；約0.1重量%至約2重量%範圍內之量的月桂基硫酸鈉；約0.5重量%至約3重量%範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約5重量%至約25重量%範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約1重量%至約7重量%範圍內之量的羧基甲基澱粉鈉；約15重量%至約40重量%範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.1重量%至約2重量%範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約40重量%至約60重量%範圍內之量的本發明化合物；約0.35重量%至約0.65重量%範圍內之量的月桂基硫酸鈉；約1重量%至約2重量%範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約10重量%至約20重量%範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約3重量%至約5重量%範圍內之量的羧基甲基澱粉鈉；約22重量%至約32重量%範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.5重量%至約1重量%範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約50重量%之量的本發明化合物；約0.5重量%之量的月桂基硫酸鈉；約2重量%之量的部分水解之聚乙烯醇；約15重量%之量的的低取代羥基丙基纖維素；約4重量%之量的羧基甲基澱粉鈉；約27.5重量%之量的微晶纖維素；以及約1重量%之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約30 mg至約130 mg範圍內之量的本發明化合物；約0.1 mg至約2 mg範圍內之量的月桂基硫酸鈉；約1 mg至約5 mg範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約10 mg至約40 mg範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約4 mg至約9 mg範圍內之量的羧基甲基澱粉鈉；約30 mg至約60 mg範圍內之量的微晶纖維素；以及約0.5 mg至約2 mg範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約50 mg至約100 mg範圍內之量的本發明化合物；約0.5 mg至約1 mg範圍內之量的月桂基硫酸鈉；約2 mg至約4 mg範圍內之量的部分水解之聚乙烯醇；約20 mg至約30 mg範圍內之量的低取代羥基丙基纖維素；約5 mg至約7 mg範圍內之量的羧基甲基澱粉鈉；約40 mg至約50 mg範圍內之量的微晶纖維素；以及約1 mg至約2 mg範圍內之量的硬脂酸鎂。 在一些實施例中，醫藥組合物可包括約80 mg之量的本發明化合物；約0.8 mg之量的月桂基硫酸鈉；約3.2 mg之量的部分水解之聚乙烯醇；約24 mg之量的低取代羥基丙基纖維素；約6.4 mg之量的羧基甲基澱粉鈉；約44 mg之量的微晶纖維素；以及約1.6 mg之量的硬脂酸鎂。 當投與本發明之醫藥組合物時，所用本發明化合物之量視所治療之哺乳動物(包括症狀、年齡及其類似者)及特定投與尤其而變化。在一些實施例中，化合物之量通常將為足以產生所需治療作用之量。在一些實施例中，化合物之總日劑量在約10 mg至約2000 mg範圍內。在一些實施例中，化合物之總日劑量為約50 mg、約80 mg、約100 mg、約150 mg、約160 mg、約200 mg、約240 mg、約250 mg、約300 mg、約320 mg、約350 mg、約400 mg、約450 mg、約480 mg、約500 mg、約550 mg、約560 mg、約600 mg、約640 mg、約650 mg、約700 mg、約720 mg、約750 mg、約800 mg、約850 mg、約880 mg、約900 mg、約960 mg或約1000 mg。在一些實施例中，化合物的總日劑量為約50 mg、約100 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、約400 mg、約450 mg、約500 mg、約550 mg、約600 mg、約650 mg、約700 mg、約750 mg、約800 mg、約850 mg、約900 mg、約950 mg或約1000 mg。在一些實施例中，化合物的總日劑量為約80 mg、約160 mg、約240 mg、約320 mg、約480 mg、約560 mg、約640 mg、約720 mg、約880 mg或約960 mg。舉例而言，化合物的總日劑量可為約80 mg、160 mg、320 mg、480 mg或960 mg。在一些實施例中，化合物之總日劑量為480 mg。在一些實施例中，化合物之總日劑量為960 mg。在一些實施例中，化合物之總日劑量為1000 mg。 當本發明之醫藥組合物每天分兩次或更多次分別投與時，所用化合物之量視症狀、年齡、投與方法及其類似者而變化。舉例而言，本發明化合物之總日劑量以兩個劑量分別投與，其中各劑量是約20 mg至約500 mg。在一些實施例中，化合物之總日劑量分兩個劑量分別投與，其中各劑量為約80 mg、約160 mg、約240 mg、約320 mg、約400 mg、約480 mg或約500 mg。在一些實施例中，化合物之總日劑量分兩個劑量分別投與，其中各劑量為約240 mg、約480 mg或約500 mg。 本發明之醫藥組合物可調配成適合劑型，用於且經選自由以下組成之群的投與途徑投與：經口、經鼻、局部、直腸、經陰道或非經腸投與，或靜脈內(IV)、皮下或肌肉內注射。劑型之實例包括(但不限於)錠劑、膠囊、粉末、顆粒、溶液、懸浮液、注射液、貼片、膏藥及其類似物。該調配物藉由已知方法用醫藥學上可接受之添加劑製造。 在一個態樣中，本發明提供一種組合。在一些實施例中，該組合用於治療癌症。不受任何特定理論限制，本發明之組合可提高本發明化合物或/及至少一種第二藥劑的抗癌活性或/及減少化合物或至少一種第二藥劑的副作用。另外，與本發明組合可觀測到協同作用。在一些實施例中，該組合包括本發明化合物及至少一種第二藥劑。在一些實施例中，該組合包括本文所揭示之組合物及至少一種第二藥劑。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑為代謝抑制劑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是還原酶抑制劑、氧化酶抑制劑、結合酶抑制劑或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是AKR抑制劑、CR抑制劑、ALR抑制劑、AR抑制劑或其組合。 在一些實施例中，還原酶抑制劑是二氟尼柳、氟芬那酸、甲芬那酸、甲氯芬那酸、舒林酸、沙美特羅、氯倍他索、炔雌醇、氯倍他松、孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸甲烯雌醇、孕烯醇酮、乙酸氯地孕酮、哈西奈德、糠酸莫米松、替勃龍、雌馬性素、布地奈德、乙酸環丙孕酮、苯溴馬隆、達普松、醋磺環己脲、氯丙嗪、吡格列酮、格列本脲、洛沙坦、艾芬地爾、酮康唑、格列美脲或其組合。在一些實施例中，還原酶抑制劑是二氟尼柳、氟芬那酸、甲芬那酸、氯倍他索、甲氯芬那酸、苯溴馬隆、炔雌醇、氯倍他松、達普松、舒林酸、醋磺環己脲、氯丙嗪、吡格列酮、格列本脲、洛沙坦、艾芬地爾、酮康唑、沙美特羅、格列美脲或其組合。在一些實施例中，還原酶抑制劑是二氟尼柳、苯溴馬隆、氟芬那酸、甲芬那酸、甲氯芬那酸、酮康唑、舒林酸或其組合。在一些實施例中，還原酶抑制劑是二氟尼柳、苯溴馬隆、氟芬那酸、甲芬那酸、舒林酸或其組合。在一些實施例中，還原酶抑制劑是二氟尼柳。在一些實施例中，還原酶抑制劑是氟芬那酸。在一些實施例中，還原酶抑制劑是甲芬那酸。在一些實施例中，還原酶抑制劑是舒林酸。 在一些實施例中，氧化酶抑制劑是4-二乙基胺基苯甲醛、免賴得、檸檬醛、氰胺、二硫龍、草達滅、巴吉林、大豆異黃酮或其組合。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是轉運體抑制劑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是環孢素、維拉帕米、依克立達、吉非替尼、紅黴素或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是環孢素、維拉帕米、吉非替尼或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是吉非替尼。不受任何特定理論限制，轉運體抑制劑及本發明化合物組合使用可抑制化合物自癌細胞排泄出去，且因此提高化合物之抗腫瘤作用。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是NSAID。在一些實施例中，NSAID是水楊酸酯、丙酸衍生物、乙酸衍生物、烯醇酸(昔康)衍生物、芬那酸衍生物(芬那酯)、選擇性COX-2抑制劑、磺醯胺、利克飛龍、離胺酸氯尼辛、天然NSAID或其組合。在一些實施例中，NSAID是阿司匹林(乙醯水楊酸)、二氟尼柳、雙水楊酸酯、布洛芬、右布洛芬、萘普生、非諾洛芬、酮基布洛芬、右酮洛芬、氟比洛芬、奧沙普嗪、洛索洛芬、吲哚美辛、托美丁、舒林酸、依託度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、萘丁美酮、吡羅昔康、美洛昔康、替諾昔康、屈噁昔康、氯諾昔康、伊索昔康、因法來酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞內考昔、羅非考昔、伐地考昔、帕瑞考昔、盧米羅可、依他考昔、非羅考昔、尼美舒利、利克飛龍、離胺酸氯尼辛、貫葉金絲桃素、玄參素、促鈣三醇(維生素D)或其組合。在一些實施例中，NSAID是阿司匹林(乙醯水楊酸)、二氟尼柳、雙水楊酸酯、吲哚美辛、托美丁、舒林酸、依託度酸、酮咯酸、雙氯芬酸、萘丁美酮、塞內考昔、羅非考昔、伐地考昔、帕瑞考昔、盧米羅可、依他考昔、非羅考昔、利克飛龍或其組合。在一些實施例中，NSAID是阿司匹林、舒林酸、塞內考昔、羅非考昔、伐地考昔、帕瑞考昔、盧米羅可、依他考昔、非羅考昔或其組合。在一些實施例中，NSAID是阿司匹林。在一些實施例中，NSAID是舒林酸。在一些實施例中，NSAID是塞內考昔。在一些實施例中，NSAID是羅非考昔。在一些實施例中，NSAID是非羅考昔。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑激素治療劑、化學治療劑、免疫治療劑或細胞生長因子抑制劑。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是激素治療劑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是磷雌酚、己烯雌酚、氯三芳乙烯、乙酸甲羥助孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸氯地孕酮、乙酸環丙孕酮、達那唑、地諾孕素、索普瑞尼、烯丙雌醇、孕三烯酮、諾美孕酮、太得恩、美帕曲星、雷諾昔酚、奧美昔芬、左美洛昔芬、抗雌激素(例如檸檬酸他莫昔芬、檸檬酸托瑞米芬及其類似物)、丸劑調配物、美雄烷、睾內脂(testololactone)、胺格魯米特、LH-RH衍生物(LH-RH促效劑(例如乙酸戈舍瑞林、布舍瑞林、亮丙瑞林及其類似物)、LH-RH拮抗劑)、曲洛昔芬、環硫雄醇、乙炔基雌二醇磺酸酯、芳香酶抑制劑(例如鹽酸法屈唑、阿那曲唑、來曲唑、依西美坦、伏羅唑、福美司坦及其類似物)、抗雄激素(例如氟他胺、比卡魯胺、尼魯胺及其類似物)、基於腎上腺皮質激素之藥劑(例如地塞米松、潑尼龍、倍他米松、曲安西龍及其類似物)、雄激素合成抑制劑(例如阿比特龍及其類似物)、類視黃素及延遲類視黃素代謝之藥劑(例如利阿唑及其類似物)，或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是地塞米松。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是化學治療劑。化學治療劑可包括烷基化劑、抗代謝物、抗癌抗生素、源自植物之抗癌劑、另一化學治療劑或其組合。 因此，在一些實施例中，至少一種第二藥劑是烷基化劑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是氮芥、氮芥N-氧化物鹽酸鹽、苯丁酸氮芥、環磷醯胺、異環磷醯胺、噻替派、卡波醌、英丙舒凡、白消安、尼莫司汀鹽酸鹽、二溴甘露醇、美法侖、達卡巴嗪、雷莫司汀、雌氮芥磷酸鈉、三伸乙基三聚氰胺、卡莫司汀、洛莫司汀、鏈脲菌素、哌泊溴烷、依託格魯、卡鉑、順鉑、米鉑、奈達鉑、奧沙利鉑、六甲蜜胺、胺莫司汀、二溴螺銨鹽酸鹽、福莫司汀、潑尼氮芥、嘌嘧替派、利鉑莫司汀、替莫唑胺、曲奧舒凡、曲磷胺、淨司他丁司他美、阿多來新、半胱胺亞硝脲、比折來新或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是卡鉑、順鉑、奧沙利鉑或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是卡鉑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是奧沙利鉑。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是抗代謝物。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是巰基嘌呤、6-巰基嘌呤核糖苷、硫肌苷、甲胺喋呤、培美曲塞、依諾他濱、阿糖胞苷、阿糖胞苷焦磷酸鹽(cytarabine ocfosphate)、安西他濱鹽酸鹽、基於5-FU之藥劑(例如氟尿嘧啶、替加氟、UFT、脫氧氟尿苷、卡莫氟、加洛他濱、乙嘧替氟、卡培他濱及其類似物)、胺基喋呤、奈拉濱、亞葉酸鈣、塔布羅迪(Tabloid)、布托新(butocin)、亞葉酸鈣、左亞葉酸鈣、克拉屈濱、乙嘧替氟、氟達拉濱、吉西他濱、羥基脲、噴司他丁、吡曲克辛、碘苷、米托胍腙、噻唑呋林、胺莫司汀、苯達莫司汀或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是基於5-FU之藥劑(例如氟尿嘧啶、替加氟、UFT、脫氧氟尿苷、卡莫氟、加洛他濱、乙嘧替氟、卡培他濱及其類似物)、甲醯四氫葉酸、吉西他濱或其組合。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是基於5-FU之藥劑(例如氟尿嘧啶、替加氟、UFT、脫氧氟尿苷、卡莫氟、加洛他濱、乙嘧替氟或卡培他濱)。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是甲醯四氫葉酸。在一些實施例中，至少一種第二藥劑為吉西他濱。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是抗癌抗生素。在一些實施例中，抗癌抗生素包括放線菌素D、放射菌素C、絲裂黴素C、色黴素A3、鹽酸博萊黴素、硫酸博萊黴素、硫酸培洛黴素、鹽酸道諾黴素、鹽酸小紅莓、鹽酸阿柔比星、鹽酸吡柔比星、鹽酸表柔比星、新制癌菌素、光神黴素、抗癌黴素、嗜癌菌素、米托坦、鹽酸左柔比星、鹽酸米托蒽醌、鹽酸伊達比星或其組合。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是源自植物之抗癌劑。在一些實施例中，源自植物之抗癌劑是依託泊苷、磷酸依託泊苷、硫酸長春花鹼、長春新鹼硫酸鹽、硫酸長春地辛、替尼泊甙、太平洋紫杉醇、多西他賽、DJ-927、長春瑞賓、伊立替康、拓朴替康或其組合。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是其他化學治療劑。在一些實施例中，其他化學治療劑是索布佐生。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是免疫治療劑。免疫治療劑可為細胞，例如免疫細胞。舉例而言，免疫細胞，特定言之對腫瘤特異之細胞，可活化、培養及向患者投與。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是自然殺手細胞、淋巴激素活化之殺手細胞、細胞毒性T細胞或樹突狀細胞。免疫治療劑可為西普亮塞-T (普羅旺)。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是抗體。舉例而言，抗體可結合於癌症抗原、誘發抗體依賴性細胞介導之細胞毒性、激活補體系統、預防受體與其配位體相互作用或傳遞化學治療劑。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是靶向細胞毒性T淋巴細胞相關抗原(CTLA，例如CTLA4)之藥劑、漸進式細胞死亡蛋白(PD，例如PD-1)、T細胞膜蛋白(TIM，例如TIM3)、腺苷A2a受體(A2aR)、淋巴細胞活化基因(LAG，例如LAG3)、殺手免疫球蛋白受體(KIR)或其類似物。舉例而言，其可為CTLA4抑制劑、PD1抑制劑、PDL1、LAG3抑制劑、KIR抑制劑、B7-H3配位體、B7-H4配位體或TIM3抑制劑。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是AMP-224、阿侖單抗、巴維昔單抗、貝伐單抗、BMS-936559、BMS-986016、貝倫妥單抗維多汀、西妥昔單抗、吉妥單抗奧唑米星、替伊莫單抗、IMP321、伊派利單抗、拉立珠單抗(MK3475)、利瑞路單抗(BMS-986015)、MDX-1105、MGA271、MPDL3280A、尼沃單抗、奧伐木單抗、帕尼單抗、帕博利珠單抗、皮立珠單抗(CT-011)、利妥昔單抗、托西莫單抗、曲妥珠單抗、曲美單抗(MEDI4736)、優瑞路單抗或其組合。免疫治療劑亦可為細胞因子。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是伊派利單抗、尼沃單抗、帕博利珠單抗或其組合。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是干擾素(IFN)、介白素或其類似物。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是干擾素(IFNα或IFNβ)、2型(IFNγ)或III型(IFNλ)。在一些實施例中，至少一種第二藥劑是介白素-1 (IL-1)、介白素-1α (IL-1α)、介白素-1β (IL-1β)、介白素-2 (IL-2)、介白素-3 (IL-3)、介白素-4 (IL-4)、介白素-6 (IL-6)、介白素-8 (IL-8)、介白素-10 (IL-10)、介白素-11 (IL-11)、介白素-12 (IL-12)、介白素-13 (IL-13)或介白素-18 (IL-18)，或其組合。在一些實施例中，免疫治療劑是畢西巴尼、雲芝多醣、裂殖菌多糖、香菇多醣、烏苯美司、干擾素、介白素、巨噬細胞群落刺激因子、粒細胞群落刺激因子、紅血球生成素、淋巴毒素、BCG疫苗、小棒狀桿菌、左旋咪唑、多醣K、丙考達唑、抗CTLA4抗體、PD-1抗體或Toll樣受體促效劑(例如TLR7促效劑、TLR8促效劑、TLR9促效劑及其類似物)。 在一些實施例中，至少一種第二藥劑是細胞生長因子之抑制劑。通常，細胞生長因子包括一種因子，該因子是分子量為20,000或更低之肽，且藉由與受體結合而在低濃度下展示作用。特定言之，EGF (表皮生長因子)或具有實質上與其相同活性之物質(例如TGF-α及其類似物)、胰島素或具有實質上與其相同活性之物質(例如胰島素、IGF (胰島素樣生長因子)-1、IGF-2及其類似物)、FGF (纖維母細胞生長因子)或具有實質上與其相同活性之物質(例如酸性FGF、鹼性FGF、KGK (角質細胞生長因子)、FGF-10及其類似物)，及其他細胞生長因子(例如CSF (群落刺激因子)、EPO (紅血球生成素)、IL-2 (介白素-2)、NGF (神經生長因子)、PDGF (源自血小板之生長因子)、TGF-β (轉型生長因子β)、HGF (肝細胞生長因子)、VEGF (血管內皮生長因子)、海瑞古林、血管生成素及其類似物)。 在一個態樣中，本發明提供治療有需要之個體的方法。在另一態樣中，本發明提供本發明之化合物、組合物或/及組合之用途，其用於治療有需要之個體。 在一些實施例中，個體患有癌症。在一些實施例中，癌症是急性白血病、慢性淋巴球性白血病、慢性骨髓性白血病、真性紅血球增多症、惡性淋巴瘤、腦腫瘤、頭頸癌、食道癌、甲狀腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、胃癌、膽囊/膽管癌、肝癌、胰臟癌、結腸癌、直腸癌、絨毛膜上皮瘤、絨毛膜胚瘤、絨膜癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、尿道上皮癌、腎細胞癌、睾丸瘤、威爾姆斯瘤、皮膚癌、惡性黑色素瘤、神經母細胞瘤、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、軟組織肉瘤或其組合。 在一些實施例中，方法或用途包括投與治療有效量之本發明的組合。在一些實施例中，本發明之方法或用途包括投與治療有效量之本發明化合物。在一些實施例中，方法或用途包括投與治療有效量之本發明的醫藥組合物。在一些實施例中，方法或用途包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其各自在本文中詳細論述。在一些實施例中，方法或用途包括手術、放射療法、基因療法、溫熱療法、超低溫療法、雷射燒傷療法或其組合。 本發明化合物及至少一種第二藥劑的投與不限於任何特定時間、間隔或工序。其可同時或以任何時間間隔投與個體。另外，可形成本發明醫藥組合物與至少一種第二藥劑的混合物。至少一種第二藥劑的劑量可基於打算臨床使用之劑量適當選擇。此外，本發明組合物與至少一種第二藥劑之混合比可視打算投與之個體、投與途徑、目標疾病、症狀、組合及其類似因素而適當選擇。舉例而言，當打算投與之個體是人類時，每重量份本發明組合物可使用0.01至100重量份至少一種第二藥劑。另外，為了抑制其副作用，其可與諸如止吐劑、睡眠誘導劑、抗驚厥劑及其類似物之藥劑(例如至少一種第二藥劑)組合使用。 在另一態樣中，本文揭示抑制、減少及/或降低癌症幹細胞存活率及/或自我更新之方法，其包含投與治療有效量之至少一種醫藥組合物，其包含本發明化合物；至少一種崩解劑；至少一種其他賦形劑；以及至少一種選自潤滑劑及界面活性劑之組分。在一些實施例中，該方法包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其在本文中詳細論述。 在另一態樣中，本文亦揭示治療個體體內至少一種習知化學療法及/或靶向療法難治癒之癌症的方法，其包含投與治療有效量之至少一種醫藥組合物，其包含本發明化合物；至少一種崩解劑；至少一種其他賦形劑；以及至少一種選自潤滑劑及界面活性劑之組分。在一些實施例中，該方法包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其在本文中詳細論述。 在另一態樣中，本文揭示治療手術、化學療法或放射療法失敗之個體體內復發性癌症之方法，其包含投與治療有效量之至少一種醫藥組合物，其包含本發明化合物；至少一種崩解劑；至少一種其他賦形劑；以及至少一種選自潤滑劑及界面活性劑之組分。在一些實施例中，該方法包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其在本文中詳細論述。 在另一態樣中，本文亦揭示治療或預防個體體內癌症轉移之方法，其包含投與治療有效量之至少一種醫藥組合物，其包含本發明化合物；至少一種崩解劑；至少一種其他賦形劑；以及至少一種選自潤滑劑及界面活性劑之組分。在一些實施例中，該方法包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其在本文中詳細論述。 在一些實施例中，本發明提供一種治療個體體內之癌症的方法，其包含投與治療有效量之至少一種醫藥組合物，其包含本發明化合物；至少一種崩解劑；至少一種其他賦形劑；以及至少一種選自潤滑劑及界面活性劑之組分。在一些實施例中，該方法包括投與治療有效量之至少一種第二藥劑，其在本文中詳細論述。在一些實施例中，癌症可選自胃及胃食道腺癌、結腸直腸腺癌、乳癌、卵巢癌、頭頸癌、黑素瘤以及胰臟癌。在一些實施例中，癌症為轉移性胰臟癌。 在一些實施例中，癌症可為難治性癌症。在一些實施例中，癌症可為復發性癌症。在一些實施例中，癌症可為轉移性癌症。在一些實施例中，癌症可與活化STAT3之表現相關。在一些實施例中，癌症可與核β-連環蛋白過度表現相關。 提供實例、表格及圖以便於一般技術者理解本發明及瞭解隨附申請專利範圍。由此，其不用於限制本發明及隨附申請專利範圍的範疇。應注意，以下參考實例及實例中展示之化合物名稱並不始終遵循IUPAC命名法。應注意，儘管有時使用縮寫來簡化描述，但此等縮寫與上文描述定義相同。 實例 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、BBI608、那帕布新或具有式I之化合物可例如根據US專利第9,084,766號中之實例8-11合成。 人類SW480 (結腸癌)、MIA PaCa-2 (胰臟癌)及MKN45 (胃腺癌)人類細胞株購自美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection)(ATCC；www.atcc.org/en.aspx；Manassas, VA 20110；電話703-365-2700)。
實例 1 . 製備 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP2A
藉由在玻璃小瓶中稱量100 mg BBI608，向BBI608添加8 mL Labrafil M 2125 CS，且藉由渦旋混合混合物，隨後向同一混合物添加2 mL Gelucire 44/14且藉由渦旋混合獲得10 mg/mL的均勻懸浮液，製備小規模DP2A。此DP2A用於針對100 mg/kg之給藥方案給藥。 藉由使用表2中之組分製備大規模DP2A調配物。 表2.
實例 2 . 製備 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP3 _ 19
藉由在容器中稱量BBI608 (2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮)、交聯羧甲纖維素鈉、Kollidon VA 64及甘露糖醇來製備小規模DP3_19調配物。混合物使用研缽及研杵手動碾磨。將所需量之維生素E TPGS添加至混合物中且使用研缽及研杵手動碾磨所得混合物獲得精細調配混合物。 藉由使用表3中之組分製備大規模DP3_19調配物。 表3.
實例 3 . 製備 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP3 _ 19v1
小規模DP3_19v1調配物類似於實例2中之DP3_19製備。 藉由使用表4中之組分製備大規模DP3_19v1調配物。 表4.
實例 4 . 製備 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 的醫藥錠劑 T - 45 及 T - 46
小規模T-45及T46調配物類似於實例2中所述之DP3_19製備。
實例 5 . 投與 DP3 _ 19 及 DP3 _ 19v1 產生的 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之血漿濃度的比較 .
對於各調配物，稱量適量混合物以實現10或20 mg BBI608。針對指定劑量方案分別添加1 mL水製備100 mg/kg或200 mg/kg的懸浮液。 根據實驗設計自測試個體收集血漿樣品。向50 μL空白血漿添加BBI608之5 μL ACN或標準溶液(5、10、20以及50 μg/mL BBI608)且混合物藉由渦旋簡單混合製備標準樣品。使用玻璃小瓶進行萃取且在冰上製備樣品。 向測試樣品添加5 μL ACN且混合物藉由渦旋簡單混合。向上述標準及測試樣品添加5 μL內標溶液(IS，10 μg/mL)且混合物藉由渦旋簡單混合。向混合物添加150 μL含有1%甲酸之ACN以在血漿樣品中沈澱蛋白質及自蛋白質解離BBI608。 樣品在室溫下在13,000 rpm下離心5 min且收集40 μL清液層且注射至HPLC (HPLC管柱：Phenomenex Luna C18(2), 5 μm, 250 × 4.6 mm；移動相：10 mM磷酸鉀(pH 6.8):乙腈(50:50)；流動速率：1.0 mL/min；注射體積：40 μL；管柱溫度：室溫；偵測器波長：254 nm)中。 如圖3中所示，DP3_19及DP3_19v1在給藥之後0.5至6小時具有實質血漿濃度。
實例 6 . 投與具有或不具有 月桂基硫酸鈉 ( SLS ) 之 DP3 _ 19v1 產生的 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 血漿濃度的比較 .
類似於實例5中進行實驗。如圖4中所示，具有或不具有月桂基硫酸鈉之DP3_19在給藥之後0.5至6小時具有實質血漿濃度。
實例 7 . 投與 DP2A 及 DP3 _ 19v1 產生的 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之血漿濃度的比較
類似於實例5進行實驗。如圖5中所示，給予DP3_19v1在測試週期(給藥之後2至24小時)顯示比給予DP2A高的血漿濃度。
實例 8 . 經口投與 DP2A 、 DP3 _ 19v1 、 T - 45 及 T - 46 產生的 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之血漿濃度的比較 .
類似於實例5進行實驗。如圖6中所示，給予DP3_19v1在測試週期(給藥之後0.5至6小時)顯示比給予DP2A、T-45及T-46高的血漿濃度；給予T-45顯示與給予DP3_19v1類似的初始血漿濃度；給予T-46及DP2A顯示類似初始血漿濃度；以及在給予全部測試調配物之後6小時，給予T-46顯示最低血漿濃度。
實例 9 . 小鼠 SW480 結腸癌異種移植模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP2A 及 DP3 _ 19v1 的功效比較 .
在本文中稱為「DP2A」的包含BBI608之組合物揭示於WO 2014/169078中。DP2A組合物呈膠囊形式，在約295 mg(80 mg BBI608)至約460 mg(125毫克BBI608)範圍內。 DP2A及DP3_19v1中之BBI608各自使用標準方案內部製備(如上文所述)。將藥物/賦形劑混合物碾磨成細粉，且在給藥之前用蒸餾水復原。使用T-45及T-46。DP3 (CRO)調配物自合約研究機構獲得。使用研缽及研杵將錠劑碾磨成細粉，且在給藥之前用蒸餾水復原。 在研究開始之前，使4週齡雌性無胸腺裸鼠(nu/nu；Taconic Biosciences)適應動物圈養設施至少7天。小鼠皮下接種人類SW480細胞(全部8 × 10
6
/隻動物)。一旦腫瘤形成(腫瘤體積約170-200 mm
3
)，動物隨機分成每組具有五隻動物的處理組且用指定BBI608調配物每日經口給藥連續10天。對照組動物不接收BBI608給藥。在接種之後第一天開始，隔日評估腫瘤體積及體重量測。使用數位測徑規量測腫瘤尺寸，且根據[長度 × (寬度
2
)]/2計算腫瘤體積。 所有方案均耐受良好，未觀測到體重顯著變化。 表5.
如圖7A中所示，DP3比DP2A更有效抑制小鼠中的腫瘤生長。2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之量增加進一步降低腫瘤生長。如圖7B中所示，測試動物以最小體重損失維持其體重。 如圖7A中所示，在100 mg/kg下，BBI-DP3比DP2A更有效抑制人類結腸癌細胞系SW480異種移植物在裸鼠中之生長。DP3在100 mg/kg及200 mg/kg下亦顯示劑量依賴性腫瘤生長抑制。
實例 10 . 小鼠 SW480 結腸癌異種移植模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP2A 、 DP3 _ 19v1 、 T - 45 及 T - 46 的功效比較 .
此實驗以類似於實例9之方式進行，但研究進行14天且在第1天、第5天、第8天、第11天及第14天評估腫瘤體積。未量測體重改變。 表6.
如圖8中所示，不同型式之DP3的給予在抑制腫瘤生長方面表現出比DP2A的給予更佳之功效。在100 mg/kg下，DP3_19v1比DP2A更有效抑制裸鼠中人類結腸癌細胞系SW480異種移植物的生長。T-45相較於T-46展現展現略微改良之抗腫瘤活性且抑制腫瘤生長的程度與DP2A類似。
實例 11 . 小鼠 MIA PaCa - 2 胰臟癌異種移植模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP2A 及 DP3 的功效比較 .
此實驗以與實例9類似之方式進行，但小鼠用人類MIA PaCa-2細胞接種，且在第1天、第3天、第6天、第8天及第10天評估腫瘤體積。 如圖9A及圖9B所示，與先前發現一致，在以相當水準給藥時，DP3_19v1顯示優於DP2A之功效。全部劑量水準之DP3及DP2A均顯著抑制腫瘤生長。在100 mg/kg及200 mg/kg劑量水準下，DP3_19v1相較於DP2A顯示優良功效。將DP3_19v1及DP2A各自之劑量提高至200 mg/kg導致活體內抗腫瘤活性提高，然而DP2A在此劑量水準下之腫瘤生長抑制程度與100 mg/kg DP3_19v1實現之程度相當。 在此實驗中研究的任何動物均未觀測到體重顯著改變，表明所有組合物在所檢查劑量下均具有良好耐受性。 表7.
實例 12 . 小鼠 MKN45 胃腺癌異種移植模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮 ( BBI608 ) 之 DP2A 、 DP3 _ 19v1 、 DP3 ( 來自 CRO ) 及 T - 45 之 功效比較 .
此實驗以類似於實例9之方式進行，但小鼠用人類MKN45細胞接種，且在第1天、第4天、第7天、第9天及第11天評估腫瘤體積。 攜帶確定MKN45異種移植物之小鼠(n=5/組)每天經口給予100 mg/kg DP2A、DP3_19v1、BBI-DP3 (CRO)或T-45持續連續11天。量測平均腫瘤體積且繪製於圖10中。 如圖10中所示，暴露於DP3_19v1及DP3 (CRO)中之每一者引發類似程度的腫瘤抑制。DP3_19v1及DP3 (CRO)顯示優於DP2A及T-45之功效。 表8.
實例 13 . 人類肝臟胞溶質溶離份中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮之代謝量測
製備將人類肝臟胞溶質(0.1 mg/mL)及NADPH (1 mmol/L)溶解於磷酸鹽緩衝溶液中獲得之反應溶液。向反應溶液中添加[
14
C]-標記之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮使得二酮濃度是0.5 μmol/L，且藉此起始反應。在37℃下培育既定時間之後，添加含有0.1%甲酸之乙腈終止反應，且將混合物離心。在氮氣流下將清液層蒸發至乾燥之後，使用重新溶解溶劑[10 mmol/L乙酸銨:乙腈，9:1 (v/v)]將其重新溶解，接著使用放射性-HPLC量測放射性。 此實驗顯示產生[
14
C]標記之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮，其在肝臟胞溶質中時間依賴性代謝以主要產生還原型代謝物2-(1-羥乙基)萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(M1)(圖11)。
實例 14 . 鑑別 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮之代謝酶
向藉由將人類肝臟胞溶質(0.1 mg/mL)及NADPH (1 mmol/L)溶解於磷酸鹽緩衝溶液中獲得之反應溶液添加CR抑制劑槲皮苷(10 μmol/L或100 μmol/L)及AKR抑制劑酚酞或甲羥孕酮17-乙酸鹽(1.0 μmol/L或10 μmol/L)。另外，向反應溶液添加[
14
C]標記之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮使得二酮濃度是0.5 μmol/L。在37℃下培育5分鐘之後，使用放射性-HPLC量測放射性。 此實驗顯示在進行100 μmol/L處理時，在僅槲皮苷的情況下，對2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的代謝微弱抑制，而在酚酞或甲羥孕酮17-乙酸鹽情況下，比槲皮苷更高程度的抑制2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的代謝(圖12)。可得出AKR及CR涉及於2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮代謝中的結論。
實例 15 . 篩選代謝酶之抑制劑
向藉由將人類肝臟胞溶質(0.1 mg/mL)及NADPH (1 mmol/L)溶解於磷酸鹽緩衝溶液中獲得之反應溶液添加測試藥物(10 μmol/L)。接著，添加2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮直至0.5 μmol/L且藉此起始反應。在37℃下培育5分鐘之後，添加溶解於含有0.1%甲酸之乙腈中的50 nmol/L苯妥英溶液，且終止反應。離心之後，所得清液層使用LC-MS/MS量測，以定量殘餘量之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮，且藉由與對照組比較來評估測試藥物之抑制強度。 此實驗顯示2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的代謝被以下各項抑制：氟芬那酸、甲芬那酸、氯倍他索、甲氯芬那酸、苯溴馬隆、炔雌醇、氯倍他松、達普松、舒林酸、醋磺環己脲、氯丙嗪、吡格列酮、格列本脲、洛沙坦、艾芬地爾、酮康唑、沙美特羅及格列美脲(圖13)。
實例 16 . AKR 高表現細胞系之鑑別
分別由人類癌細胞系(A549、H460、HCT116及HT29)製備之全部RNA用於進行DNA晶片分析。DNA晶片分析使用基因晶片人類基因組HG133A及B (由Affymetrix, Inc.製造)進行。特定言之，根據以下程序進行分析：(1)自總RNA製備cDNA；(2)自cDNA製備經標記之cRNA；(3)使經標記之cRNA片段化；(4)使分段cRNA與探針陣列雜交；(5)染色探針陣列；(6)掃描探針陣列；以及(7)基因表現分析。 (1)自總RNA製備cDNA 將含有100 pmol T7-(dT)24引子(Amersham製造)及10 μg自對應癌細胞系製備的各總RNA的11 μL混合物溶液在70℃下加熱10分鐘，接著在冰上冷卻。冷卻後，添加4 μL包括於用於Cdna合成之Superscript Choice System中之5×第一股cDNA緩衝液 (Gibco-BRL製造)、2 μL包括於套組中的0.1M DTT及1 μL包括於套組中的10 mM dNTP混合物，且混合物溶液在42℃下加熱2分鐘。另外，添加2 μL (400U)包括於套組中之Super ScriptII RT，接著在42℃下加熱混合物溶液1小時且在冰上冷卻。冷卻後，添加91 μL DEPC處理之水(由Nacalai Tesque, Inc.製造)、30 μL包括於套組中之5 ×第二股反應緩衝液、3 μL 10 mM dNTP混合物、1 μL (10U)包括於套組中之大腸桿菌DNA接合酶、4 μL (40U)包括於套組中之大腸桿菌DNA聚合酶I以及1 μL (2U)包括於套組中之大腸桿菌RNaseH以使混合物溶液在16℃下反應5分鐘。接著，添加2 μL (10U)包括於套組中之T4 DNA聚合酶。在16℃下反應5分鐘之後，添加10 μL 0.5M EDTA。接著，添加162 μL苯酚/氯仿/異戊醇溶液(由Nippon Gene Co., Ltd.製造)且混合。將混合物溶液轉移至Phase Lock Gel Light (由Eppendorf AG.製造)中，其先前已在室溫下在14,000 rpm下離心30秒。在室溫下在14,000 rpm下離心2分鐘之後，將145 μL水層轉移至艾本德管(Eppendorf tube)。向所得溶液添加72.5 μL 7.5 M乙酸銨溶液及362.5 μL乙醇且混合。溶液接著在4℃下在14,000 rpm下離心20分鐘。離心之後，棄去清液層以獲得包括所製備cDNA之DNA離心塊。 接著，向離心塊添加0.5 mL 80%乙醇。在4℃下在14,000 rpm下離心5分鐘之後，棄去清液層。再次進行同一操作，將離心塊乾燥且溶解於12 μL DEPC處理之水中。 藉由上述操作，自分別由人類癌細胞品系製備之總RNA獲得cDNA。 (2)自cDNA製備經標記之cRNA 將5 μL各cDNA溶液與17 μL DEPC處理之水、4 μL 10 × HY BioArray高產量RNA轉錄物標記套組中包括的反應緩衝液(由ENZO製造)、4 μL包括於套組中之10×生物素標記之核糖核苷酸、4 μL包括於套組中之10×DTT、4 μL包括於套組中之10×RNase抑制劑混合物以及2 μL包括於套組中之20×T7 RNA聚合酶混合以使混合物在37℃下反應5小時。反應之後，向反應溶液添加60 μL DEPC處理之水，接著所製備及標記之cRNA使用RNeasy Mini套組根據隨附方案純化。 (3)經標記之cRNA的片段化 藉由向含有20 μg各經標記之cRNA之溶液添加8 μL 5 ×片段化緩衝液(200 mM tris-乙酸pH 8.1 (由Sigma製造)、500 mM乙酸鉀(由Sigma製造)及150 mM乙酸鎂(由Sigma製造))而獲得之40 μL反應溶液在94℃下加熱35分鐘，接著將其置於冰上。由此使經標記之RNA片段化。 (4)片段化cRNA與探針陣列之雜交 將40 μL各片段化cRNA與4 μL 5 nM對照組Oligo B2 (由Amersham製造)、4 μL 100 ×對照組cRNA混合物、40 μg鯡魚精子DNA (由Promega KK.製造)、200 μg乙醯化BSA (由Gibco-BRL製造)、200 μL 2 × MES雜交緩衝液(200 mM MES、2M [Na+]、40 mM EDTA、0.02% Tween 20 (由Pierce製造)，pH 6.5-6.7)以及144 μL DEPC處理之水混合獲得400 μL雜交混合物。所得雜交混合物各自在99℃下加熱5分鐘，且在45℃下進一步加熱5分鐘。加熱之後，將其在室溫下在14,000 rpm下離心5分鐘以獲得雜交混合物清液層。 同時，用1×MES雜交緩衝液填充之人類基因組HG133A及B探針陣列(由Affymetrix, Inc.製造)在雜交烘箱中在45℃下在60 rpm下旋轉10分鐘，接著移除1×MES雜交緩衝液製備探針陣列。將上文中獲得之200 μL雜交混合物清液層分別添加至探針陣列，且將其在雜交烘箱中在45℃下在60 rpm下旋轉16小時，獲得與片段化cRNA雜交之探針陣列。 (5)染色探針陣列 將來自上文中獲得之各雜交探針陣列的雜交混合物回收及移除，接著用非嚴格洗滌緩衝劑(6 × SSPE (20 × SSPE稀釋液(由Nacalai Tesque, Inc.製造))、0.01% Tween 20及0.005% Antifoam0-30 (由Sigma製造))填充。接著，將與片段化cRNA雜交之探針陣列安裝至基因晶片流體站400 (由Affymetrix, Inc.製造)的預定位置，該流體站中放置有非嚴格洗滌緩衝液及嚴格洗滌緩衝液(100 mM MES、0.1M NaCl及0.01% Tween 20)。接著，根據染色方案EuKGE-WS2，使用一級溶液(10 μg/mL抗生蛋白鏈菌素藻紅素(SAPE) (由Molecular Probe製造)、2 mg/mL乙醯化BSA、100 mM MES、1M NaCl (由Ambion製造)、0.05% Tween 20以及0.005% Antifoam 0-30)以及二級染色溶液(100 μg/mL山羊IgG (由Sigma製造)、3 μg/mL生物素化抗抗生蛋白鏈菌素抗體(由Vector Laboratories製造)、2 mg/mL乙醯化BSA、100 mM MES、1M NaCl、0.05% Tween 20以及0.005% Antifoam 0-30)進行染色。 (6)掃描探針陣列及(7)基因表現分析 經染色之探針陣列中之每一者經歷HP基因陣列掃描儀(由Affymetrix, Inc.製造)來讀取染色圖案。基於經染色之圖案，探針陣列上的基因表現藉由基因晶片工作站系統(由Affymetrix, Inc.製造)分析。接著，根據分析方案進行基因表現的標準化及比較分析。 此實驗顯示AKR1B1、1B10、1C1、1C2及1C3在A549及H460中高度表現(圖14)。
實例 17 . 藉由代謝抑制劑提高 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮於培養細胞中之胞內濃度
將A549細胞或H460細胞以2 × 10
4
/孔接種至96孔培養盤(由Corning Inc.製造)，接著在培育箱中在37℃下在5%二氧化碳氛圍下培養48小時。其後，將其用2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮以最終濃度1.0 μmol/L且在有或無30 μmol/L或100 μmol/L甲芬那酸或氟芬那酸存在下培養2小時，接著用PBS洗滌。此後，向各孔添加80%甲醇獲得細胞溶解產物。細胞溶解產物使用LC-MS/MS分析測定2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之胞內濃度。 此實驗顯示在甲芬那酸或氟芬那酸存在下2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的胞內濃度增加(圖15)。
實例 18 . 藉由代謝抑制劑改良 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮於培養細胞中之細胞毒性作用
將A549細胞或H460細胞以2 × 10
4
/孔接種至96孔培養盤(Corning)，接著在培育箱中在37℃下在5%二氧化碳氛圍下培養48小時。將2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮添加至各孔中，使得最終濃度是1.0 μmol/L。此後，將其在有或無測試化合物(最終濃度30 μmol/L氟芬那酸、100 μmol/L氟芬那酸或100 μmol/L甲芬那酸)存在下培養6小時，添加Prest Blue (Life Technologies)，接著培育1至2小時。培育之後，量測570 nm下的吸光度來評估細胞毒性。將未添加細胞之孔的吸光度(A空白)定義為背景，使用下式計算細胞存活率，將各孔之吸光度(A樣品)減去背景吸光度獲得之值乘以100所獲得之值，除以將細胞未經2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮處理或含有代謝抑制劑之孔的值(A對照)減去A空白獲得之值。 細胞存活率(%) = (A樣品 - A空白) × 100 / (A對照 - A空白) 根據評估結果，在A549細胞及H460細胞之兩種細胞中，在使用1.3 μmol/L 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之單一藥劑處理中，細胞存活率為100%或更高，而添加100 μmol/L氟芬那酸或甲芬那酸顯著降低細胞存活率。發現與氟芬那酸或甲芬那酸組合提高2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之細胞毒性活性作用(圖16)。
實例 19 . 荷瘤小鼠中藉由與代謝抑制劑組合引起 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮的血漿濃度改變
在投與之後，在單個時間向7週齡小鼠(BALB/cAnNCrlCrlj，雌性，Charles River Laboratories Japan, Inc.)經口投與溶液(1)、(2)或(3)。 (1) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 (2) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及100 mg/kg甲芬那酸 (3) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及300 mg/kg甲芬那酸 投與2、6及16小時之後收集血液，且離心血液獲得血漿。向血漿添加甲醇，使得甲醇最終濃度是80%，接著將其離心。另外，藉由經過濾器過濾進行蛋白質移除療法，接著偵測2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮且使用LC-MS/MS (API4000，AB SCIEX)定量。同時，在收集血液的同時收集腫瘤塊，偵測及定量腫瘤中的2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮。 根據評估結果，發現相較於2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的單一藥劑投與組，與甲芬那酸組合的組中，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮之血漿濃度較高(圖17)。此外，在腫瘤中之濃度中，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮與300 mg/kg甲芬那酸之組合組中的2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮濃度比2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的單一藥劑組高(圖17)。
實例 20 . 攜帶癌症之小鼠中藉由與代謝抑制劑組合引起 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮的血漿濃度改變
在投與之後，在單個時間向8週齡小鼠(BALB/cAnNCrlCrlj，雌性，Charles River Laboratories Japan, Inc.)經口投與溶液(1)或(2)。 (1)100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 (2) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 投與兩小時之後，收集血液，接著離心獲得血漿。向血漿添加甲醇，使得甲醇最終濃度是80%，接著將其離心。另外，藉由經過濾器過濾進行蛋白質移除療法，接著偵測2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮且使用LC-MS/MS (API4000，AB SCIEX)定量。 此實驗顯示與單一藥劑投與2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮組之比較，與舒林酸之組合的組中的血漿中2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的濃度較高(圖18)。
實例 21 . 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮與甲芬那酸組合在荷瘤小鼠中之抗腫瘤作用
向每個5週齡小鼠(BALB/cAnNCrlCrlj，雄性，Charles River Laboratories Japan, Inc.)個體的右腹部移植5 × 10
6
個A549細胞。一週之後，在單個時間經口投與以下投與溶液(1)、(2)、(3)、(4)或(5)。 (1) 100 mg/kg甲芬那酸 (2) 30 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 (3) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 (4) 30 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及100 mg/kg甲芬那酸 (5) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及100 mg/kg甲芬那酸 根據投與溶液或不具有藥劑之投與溶液連續投與五天，接著藥物療法停止兩天且再次連續投與五天的時程，將其一天一次經口投與。腫瘤塊的長軸及短軸藉由維尼爾測徑規(vernier caliper)以2至5天間隔量測，且藉由將其代入下式中來計算腫瘤體積：(短軸)
2
× (長軸)/2。 儘管甲芬那酸為不具有抗腫瘤活性之單一藥劑，但組合使用2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及甲芬那酸相較於2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮作為單一藥劑顯著提高抗腫瘤活性(圖19)。
實例 22 . 荷瘤小鼠中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮與舒林酸組合之抗腫瘤作用
向每個雌性無胸腺裸鼠個體皮下移植8 × 10
6
個SW480細胞，且使腫瘤生長直至其可觸知。自腫瘤達到約200 mm
3
之時間點開始，一天一次經口投與以下投與溶液(1)、(2)、(3)或(4)。在投與週期期間規律量測腫瘤體積。 (1) 媒劑 (2) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮 (3) 25 mg/kg舒林酸 (4) 100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 每日連續投與投與溶液或不具有藥劑之投與溶液。腫瘤塊的長軸及短軸藉由維尼爾測徑規(vernier caliper)以2至3天間隔量測，藉由將其代入下式中來計算腫瘤體積：(短軸)
2
× (長軸)/2。 儘管舒林酸為不具有抗腫瘤活性之單一藥劑，但組合使用2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸相較於2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮作為單一藥劑顯著提高抗腫瘤活性(圖20)。
實例 23 . SW480 小鼠模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮與舒林酸之組合的抗腫瘤作用
在研究開始之前，使4週齡雌性無胸腺裸鼠(nu/nu；Taconic Biosciences)適應動物圈養設施至少7天。小鼠皮下接種人類SW480細胞(全部8 × 10
6
/隻動物)。一旦腫瘤形成(腫瘤體積為約200 mm
3
)，將動物隨機分成每組具有五隻動物的處理組，且一日一次經口投與以下投與溶液(1)、(2)、(3)或(4)。在投與週期期間規律量測腫瘤體積。 (1) 媒劑(作為對照組) (2) 羧甲基纖維素鈉(CMC)/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(BBI608) (3) CMC/Tween中25 mg/kg舒林酸 (4) CMC/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 儘管舒林酸為不具有抗腫瘤活性之單一藥劑，但組合使用2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸相較於作為單一藥劑的2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮或舒林酸或對照組顯著提高抗腫瘤活性(圖21)。
實例 24 . CT26 同系小鼠模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮與舒林酸之組合的抗腫瘤作用
在研究開始之前，使7週齡雌性Balb/C小鼠(Taconic Biosciences)適應動物圈養設施至少7天。小鼠皮下接種人類CT26細胞(3 × 10
5
個細胞/動物)。一旦腫瘤形成(腫瘤體積約80-100 mm
3
)，動物隨機分成每組具有五隻動物的處理組且一日一次經口投與以下投與溶液(1)、(2)、(3)或(4)持續9天。在投與週期期間規律量測腫瘤體積。 (1) 媒劑(作為對照組) (2) 羧甲基纖維素鈉(CMC)/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(BBI608) (3) CMC/Tween中25 mg/kg舒林酸 (4) CMC/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 儘管舒林酸為不具有抗腫瘤活性之單一藥劑，組合使用2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸相較於作為單一藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮或舒林酸或對照組顯著提高抗腫瘤活性(圖22A)且測試個體不顯示顯著體重減輕(圖22B)。
實例 25 ：自實例 24 獲得之腫瘤組織的免疫螢光染色
固定樣品：將實例24中自小鼠採集之部分腫瘤組織在4℃下在3.7%中性緩衝甲醛中固定隔夜，接著石蠟包埋，切成約5微米，且固定在帶正電荷之載玻片上。將具有腫瘤或對照組織之載玻片烘烤、去石蠟且在10 mM檸檬酸鈉(PH6.0)中培育10分鐘。抗原修復之後，載玻片分別用初級抗體P-STAT3 (家兔，細胞信號傳導，1:100)、β-連環蛋白(小鼠，santa cruz，1:400)或CD3 (家兔，abcam，1:100)在4℃下探測隔夜，接著Alexa Fluor螢光染料結合之二級抗體(1:500，Invitrogen)探測。用具有DAPI之ProLong封固劑(Invitrogen)封固後，在具有20×物鏡之Zeiss螢光顯微鏡下檢驗載玻片，且用Zen軟體分析。 冷凍樣品：將實例24中自小鼠採集之部分腫瘤組織在液氮中快速冷凍，包埋在OCT(Leica)中，切成約6微米，且固定在帶正電荷之載玻片上。組織在-20℃下固定於丙酮中1分鐘。在PBS中復水之後，載玻片分別用初級抗體CD8 (大鼠，santa cruz，1:100)及CD3 (家兔，abcam，1:100)在4℃下探測隔夜，接著Alexa Fluor螢光染料結合之二級抗體(1:500，Invitrogen)探測。用具有DAPI之ProLong封固劑(Invitrogen)封固後，在具有20×物鏡之Zeiss螢光顯微鏡下檢驗載玻片，且用Zen軟體分析。 如圖23中所示，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸之組合提高腫瘤組織中p-STAT3及β-連環蛋白表現之抑制。另外，如圖26-28中所示，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸之組合出乎意料地提高腫瘤組織中的T細胞(CD3+及CD8+)浸潤。
實例 26 ： 自實例 24 獲得的腫瘤組織中浸潤 T 細胞之 FACS 分析
在含有DMEM培養基之膠原蛋白酶I (100U/mL)中在37℃下將實例24中自小鼠採集之部分腫瘤組織經30分鐘消化成單細胞。根據製造商建議用Lympholyte-M自腫瘤組織混合物移除碎片及紅細胞。將死細胞用Zombie NIR染料(Invitrogen，100 μl細胞添加1 μL)及Fc阻斷(參看下表)培育之後，將細胞與T細胞表面標記抗體(CD3、CD8a及CD4，如下表所示)一起培育。藉由BD FACS分析器分析染色細胞。進一步分析Zombie NIR染料陰性之活細胞的T細胞標記物染色。T細胞-----CD3
+
；細胞毒性T細胞------CD3
+
及CD8
+
。使用Microsoft Excel藉由不成對之史都登氏t-測試(Student's t-test)確定各組之間差異的統計學顯著性。P值＜0.05視為顯著。
如圖24A-24H中所示，對照組中之CT26腫瘤中存在高水準之腫瘤浸潤T細胞(包括細胞毒性T細胞)(例如圖24A及24E)；乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸之組合增加腫瘤浸潤CD8
+
T細胞及CD4
+
T細胞之總數(例如圖24H)；以及T細胞CD3
+
/CD4
+
比率不受乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸之組合的影響。 另外，如圖25A中所示，當CD3
+
細胞標準化成總活細胞時，發現用乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸處理之個體中浸潤T細胞(CD3
+
)顯著多於對照組中。如圖25B中所示，當CD3
+
CD8
+
細胞標準化成總活細胞時，發現用乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸處理之個體中浸潤細胞毒性T細胞顯著多於對照組中。
實例 27 ： Apcmin +/- 小鼠模型中 2 - 乙醯基萘并 [ 2 , 3 - b ] 呋喃 - 4 , 9 - 二酮與舒林酸之組合的抗腫瘤作用
ApcMin+/− C57BL/6小鼠。C57BL/6J背景之ApcMin/+小鼠最初獲自Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME)且與野生型(wt) C57BL/6J小鼠內部育種產生ApcMin/+。 對於圖29中所示之結果，8-9週齡ApcMin/+小鼠如下文所示一日一次用以下投與溶液(1)、(2)、(3)或(4)經口處理持續19天。在整個處理時程中監測體重及臨床跡象。在處理第19天，處死動物。縱向切開小腸且用亞甲基藍染色。使用10×放大倍數之立體顯微鏡記錄腫瘤的數目及尺寸。 (1) 媒劑(作為對照組) (2) 羧甲基纖維素鈉(CMC)/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(BBI608) (3) CMC/Tween中25 mg/kg舒林酸 (4) CMC/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 對於圖30中所示之結果，16-17週齡ApcMin/+小鼠如下文所示一日一次用以下投與溶液(1)、(2)、(3)或(4)經口處理持續12天。在整個處理時程中監測體重及臨床跡象。在處理第12天，處死動物。縱向切開小腸且用亞甲基藍染色。使用10×放大倍數之立體顯微鏡記錄腫瘤的數目及尺寸。 (1)媒劑(作為對照組) (2) 羧甲基纖維素鈉(CMC)/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(BBI608) (3) CMC/Tween中25 mg/kg舒林酸 (4) CMC/Tween中100 mg/kg 2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及25 mg/kg舒林酸 統計分析. 使用Prism軟體(GraphPad)分析腫瘤數目且藉由施加不成對史都登氏t-測試(unpaired Student's t-test)測定各組之間的統計顯著性差異。P值＜0.05視為顯著。 如圖29中所示，當小鼠接受處理時其為8-9週齡，投與作為單個藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸減少大腫瘤(＞0.5 mm)的數目，2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸的組合進一步減少每隻小鼠的大腫瘤(＞0.5 mm)的數目；以及，另外，儘管投與作為單一藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸看起來不減少小腫瘤(＜0.5 mm)的數目，但組合顯著減少小腫瘤的出現。 如圖30中所示，當小鼠接受處理時其為16-17週齡，投與作為單一藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸減少每隻小鼠的腫瘤數，且2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸的組合進一步減少每隻小鼠的腫瘤數。
實例 28 ：自實例 27 獲得之組織的免疫螢光染色
冷凍樣品：將實例27中自小鼠採集之結腸息肉在液氮中快速冷凍，包埋於OCT (Leica)中，切成約6微米，且固定在帶正電荷之載玻片上。將組織在-20℃下在丙酮中固定1分鐘進行CD3及CD8染色，在4℃下在3.7%中性緩衝甲醛中固定15分鐘，且在-20℃下針對P-STAT3及β-連環蛋白染色用甲醇透化。在PBS中復水之後，載玻片在4℃下分別用初級抗體：P-STAT3 (家兔，細胞信號傳導，1:100)及β-連環蛋白(小鼠，santa cruz，1:400)或CD8 (大鼠，santa cruz，1:100)及CD3 (家兔，abcam，1:100)探測隔夜，接著Alexa Fluor螢光染料結合之二級抗體(1:500，Invitrogen)探測。用具有DAPI之ProLong封固劑(Invitrogen)封固後，在具有20×物鏡之Zeiss螢光顯微鏡下檢驗載玻片，且用Zen軟體分析。 如圖31中所示，投與作為單一藥劑及與舒林酸組合之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮顯著降低p-STAT3表現；且投與作為單一藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸以及兩者之組合降低β-連環蛋白表現。 如圖32中所示，發現來自APCmin
+/-
小鼠之腫瘤具有浸潤T細胞(CD3
+
)，但其中僅小部分為CD8
+
T細胞(細胞毒性T細胞)；作為單一藥劑之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸略微增加浸潤CD8
+
T細胞；且2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮及舒林酸之組合實質上進一步增加浸潤CD8
+
T細胞。 不受任何特定理論限制，本發明之組合看似改良2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮的藥物動力學及藥效學，且增強其抗腫瘤作用，且因此，可能需要較低劑量或較少投與之2-乙醯基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮來預防及/或治療癌症。 本發明之多種特徵及優點由詳細說明書顯而易見，因此隨附申請專利範圍打算涵蓋本發明之所有屬於本發明之真實精神及範疇內的此類特徵及優點。此外，由於熟習此項技術者容易想到諸多修正及變化形式，因此不希望將本發明限於所說明及描述之精確構造及操作；因此，可使用屬於本發明範疇內之所有適合修正及等效形式。 此外，一般技術者將瞭解，本發明所基於之概念容易用作設計用於實現本發明之多個目的的其他醫藥組合物以及醫藥錠劑的基礎。因此，申請專利範圍不打算受前述描述限制。