TW201815410A

TW201815410A - 藥物之經黏膜吸收促進劑

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Publication number: TW201815410A
Application number: TW106113061A
Authority: TW
Inventors: 武田真莉子; 龜井敬泰
Original assignee: 學校法人神戶學院
Priority date: 2016-04-19
Filing date: 2017-04-19
Publication date: 2018-05-01
Also published as: JPWO2017183559A1; WO2017183559A1

Abstract

本發明之課題在於提供一種藥物之經黏膜吸收促進劑，該課題是透過使用選自於由(a成分)鹼性胺基酸、(b成分)2~5個鹼性胺基酸構成之胜肽及(c成分)色胺酸所構成群組中之至少1種來解決。

Description

藥物之經黏膜吸收促進劑

本發明是有關於藥物之經黏膜吸收促進劑及含有其之醫藥組成物。

進入21世紀，伴隨著生物市場的急速發展，更是需要對製劑導入革新的Drug Delivery System(DDS)技術以使胜肽・蛋白質・核酸醫藥等高分子在生體中更有效率吸收。特別是，儘管期望開發出對患者而言便利性最高之口服製劑，然生物藥物之類的經黏膜吸收性・穩定性極低之物質的口服製劑化是最為困難，就現狀而言，99%的生物藥物是限於注射投予。因此，強烈需求開發出能促進生物藥物等之經黏膜吸收性的手段。

以往，有報告指出，例如使用某種界面活性劑來引起膜結構之不穩定化或細胞間緊密型連結(tight junction)之開放，藉此可促進生物藥物等的經黏膜吸收性(非專利文獻1~2)。然而，該等技術因其原理，對活體有不良影響的可能性。

又，近年來有報告指出，透過使用TAT胜肽、穿透素(penetratin)等各種細胞膜穿透胜肽(cell-penetrating peptides (CPPs))，可促進生物藥物導入細胞內(非專利文獻3)。但是，該等胜肽大多是與藥物交聯來使用，藉此來促進藥物之經黏膜吸收。例如，已知有在前列腺癌治療藥之柳菩林(leuprolide)的C末端側交聯細胞膜穿透胜肽之精胺酸六胜肽者(非專利文獻4)。因此，此技術之汎用性低，又，亦有因交聯使藥物活性減少的可能性。

本案發明人等的報告指出，精胺酸寡胜肽等細胞膜穿透胜肽可透過單純與藥物混合使用而可促進藥物之經黏膜吸收性(非專利文獻5)。若為此技術，由於不需要交聯，因此產生如上所述問題之可能性低。針對精胺酸寡胜肽，目前已報告有十胜肽、八胜肽、六胜肽等由6個以上精胺酸所構成之胜肽。其中，儘管八胜肽及十胜肽顯示出高度經黏膜吸收促進作用，然據稱較精胺酸殘基數更少之六胜肽的經黏膜吸收性還低(非專利文獻5)。

[習知技術文獻] [非專利文獻] 非專利文獻1：B. F. Choonara, E. Y. Choonara, P. Kumar, D. Bijukumar, L. C. du Toit, V. Pillay, A review of advanced oral drug delivery technologies facilitating the protection and absorption of protein and peptide molecules, Biotech. Adv. 32 (2014) 1269-1282. 非專利文獻2：S. Gupta, A. Jain, M. Chakraborty, J. K. Sahni, J. Ali, S. Dang, Oral delivery of therapeutic proteins and peptides: a review on recent developments, Drug Deliv. 20 (2013) 237-246. 非專利文獻3：Copolovici DM, Langel K, Eriste E, Langel U 2014. Cell-penetrating peptides: design, synthesis, and applications. ACS Nano. 8(3):1972-1994. 非專利文獻4：Kamei N, Morishita M, Ehara J, Takayama K. 2008. Permeation characteristics of oligoarginine through intestinal epithelium and its usefulness for intestinal peptide drug delivery. J Control Release 131:94-99. 非專利文獻5：Morishita M, Kamei N, Ehara J, Isowa K, Takayama K. A novel approach using functional peptides for efficient intestinal absorption of insulin, J Control Release. 2007 Apr 2;118(2):177-84. Epub 2006 Dec 29. 非專利文獻6：Margherita Di Pisa, Ge!rard Chassaing, and Jean-Marie Swiecicki. Translocation Mechanism(s) of Cell-Penetrating Peptides: Biophysical Studies Using Artificial Membrane Bilayers, Biochemistry 2015, 54, 194-207. 非專利文獻7：醫藥品醫療機器Regulatory Science, PMDRS, 46(12), 829-836, 2015.

[發明欲解決之課題] 本發明課題在於提供一種藥物之經黏膜吸收促進劑。進一步言之，係以提供一種不需要與藥物交聯且對活體之不良影響更少的經黏膜吸收促進劑為課題。

[用以解決課題之手段] 本案發明人有鑑於前述課題而精心研究，結果發現，精胺酸等鹼性胺基酸或殘基數較以往報告還要少(亦即殘基數為5以下)之鹼性胺基酸寡胜肽，會對藥物發揮高度經黏膜吸收促進作用。以往，據說若鹼性胺基酸殘基數較少，則其經黏膜吸收促進作用亦會較低(非專利文獻5)，因此本發明此一發現令人驚訝。進一步還發現，色胺酸會對藥物發揮高度經黏膜吸收促進作用。基於該等發現並進一步進行研究，結果便完成本發明。

亦即，本發明包含下述態樣：項1.一種藥物之經黏膜吸收促進劑，含有選自於由下述成分所構成群組中之至少1種：(a成分)鹼性胺基酸、(b成分)2~5個鹼性胺基酸構成之胜肽及(c成分)色胺酸。項2.如項1之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為L-胺基酸。項3.如項1或2之經黏膜吸收促進劑，其含有前述a成分。項4.如項1~3中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為選自於由精胺酸、離胺酸及組胺酸所構成群組中之至少1種。項5.如項1~4中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為精胺酸。項6.如項1~5中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述b成分為由2~4個鹼性胺基酸構成之胜肽。項7.如項1~6中任一項之經黏膜吸收促進劑，其含有前述c成分。項8.如項1~7中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述黏膜為腸黏膜。項9.如項1~8中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述藥物之等電點為7以下。項10.如項1~9中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述藥物為胜肽或蛋白質。項11.一種醫藥組成物，含有如項1~10中任一項之經黏膜吸收促進劑及藥物。項12.如項11之醫藥組成物，其為固態劑。項13.如項11或12之醫藥組成物，其為口服投予製劑。

[發明效果] 根據本發明，可提供一種經黏膜吸收促進劑，其不需要與藥物交聯且對活體之不良影響更少。

大多數生物藥物等藥物由於經黏膜吸收性低的理由而做成注射劑來提供，然注射劑需要進行刺針的行為，對患者而言負擔感大。又，在注射器使用後之廢棄方面，有經濟負擔或環境負荷，進而在發展中國家等還有因注射器之重複使用而致感染症的可能性。透過本發明，藉由使藥物之經黏膜吸收性提升，可將藥物以更難產生前述問題之製劑形態(例如，口服劑等)來提供。

[用以實施發明之形態] 針對本說明書中「含有」及「包含」之表現，包含所謂「含有」、「包含」、「實質上由…構成」及「僅由…組成」之概念。

本發明有關於一種藥物之經黏膜吸收促進劑(本說明書中有時亦顯示為「本發明之經黏膜吸收促進劑」。)，以及含有本發明之經黏膜吸收促進劑及藥物的醫藥組成物(本說明書中有時亦顯示為「本發明之醫藥組成物」。)，前述藥物之經黏膜吸收促進劑含有選自於由(a成分)鹼性胺基酸、(b成分)2~5個鹼性胺基酸構成之胜肽及(c成分)色胺酸所構成群組中之至少1種。以下將就該等進行說明。

鹼性胺基酸若為在側鏈具有鹼性官能基，且等電點是在鹼性區域之胺基酸(宜為α-胺基酸)，則無特別限制。

鹼性官能基可舉例如胍基、胺基、咪唑基等，且宜為胍基、胺基等，以胍基為佳。

鹼性胺基酸之等電點可例如超過7，且宜在7.5以上、以在9以上為佳、以在10以上更佳。等電點之上限並無特別限定，可例如14。

鹼性胺基酸之具體例可舉例如天然胺基酸之精胺酸、離胺酸、組胺酸、鳥胺酸、瓜胺酸等。該等之中，從經黏膜吸收促進效果的觀點來看，可舉精胺酸、離胺酸等為宜、以精胺酸為佳。

鹼性胺基酸之立體配置並無特別限制，L體或D體任一皆可。從所謂經黏膜吸收促進效果更高的觀點，及/或所謂用量依存性的更提升經黏膜吸收促進效果的觀點來看，鹼性胺基酸宜為L-胺基酸。

所謂由鹼性胺基酸構成之胜肽是指複數個鹼性胺基酸彼此(宜為鹼性胺基酸主鏈上之胺基及羧基)以肽鍵鍵結而成之胜肽，除此之外並無特別限制。

構成該胜肽之鹼性胺基酸的數量為2~5個，且宜為2~4個。

該胜肽可由僅1種鹼性胺基酸所構成，亦可由2種以上鹼性胺基酸所構成。

色胺酸之立體配置並無特別限制，L體或D體任一皆可。從所謂經黏膜吸收促進效果更高的觀點，及/或所謂用量依存性的更提升經黏膜吸收促進效果的觀點來看，色胺酸宜為L體。

鹼性胺基酸、由鹼性胺基酸構成之胜肽、及色胺酸只要在具有經黏膜吸收促進效果之下，亦可經化學修飾。再者，經黏膜吸收促進效果之有無可依照或根據眾所皆知的方法來判定，例如可依照或根據後述試驗例1所記載之方法來判定。

鹼性胺基酸、由鹼性胺基酸構成之胜肽、及色胺酸在主鏈末端之羧基可為羧酸基(-COO-)、醯胺(-CONH₂ )或酯(-COOR)之任一。

在此，酯中的R可使用例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基等C_1-6 烷基；例如環戊基、環己基等C_3-8 環烷基；例如苯基、α-萘基等C_6-12 芳基；例如苯甲基、苯乙基等苯基-C_1-2 烷基；α-萘基甲基等α-萘基-C_1-2 烷基等的C_7-14 芳烷基；新戊醯氧基甲基(Pivaloyloxymethyl)等。

進一步，鹼性胺基酸、由鹼性胺基酸構成之胜肽、及色胺酸亦包含主鏈末端之胺基被保護基(例如甲醯基、乙醯基等C_1-6 烷醯基(alkanoyl)等的C_1-6 醯基等)保護者、側鏈上之取代基(例如胺基、咪唑基、胍基等)被適當之保護基(例如甲醯基、乙醯基等C_1-6 烷醯基等的C_1-6 醯基等)保護者等。

鹼性胺基酸、由鹼性胺基酸構成之胜肽、及色胺酸亦可為與酸或鹼之在藥學上容許之鹽的形態。鹽若為藥學上容許之鹽則無特別限定，可採用酸性鹽、鹼性鹽之任一。例如酸性鹽之例可舉鹽酸鹽、溴化氫酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等無機酸鹽；醋酸鹽、丙酸鹽、酒石酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等有機酸鹽；天冬胺酸鹽、谷胺酸鹽等胺基酸鹽等。又，鹼性鹽之例可舉鈉鹽、鉀鹽等鹼金屬鹽；鈣鹽、鎂鹽等鹼土類金屬鹽等。

鹼性胺基酸、由鹼性胺基酸構成之胜肽、及色胺酸亦可為溶劑合物之形態。溶劑若為藥學上容許者則無特別限定，可舉例如水、乙醇、甘油、醋酸等。

鹼性胺基酸(a成分)可1種單獨使用，亦可組合任意之2種以上來使用。

由鹼性胺基酸構成之胜肽(b成分)可1種單獨使用，亦可組合任意之2種以上來使用。

色胺酸(c成分)可1種單獨使用，亦可組合任意之2種以上來使用。

本發明之經黏膜吸收促進劑在有效成分方面只要是含有選自於由a成分、b成分及c成分所構成群組中之至少1種，則無特別限定。從所謂經黏膜吸收促進效果更高的觀點，及/或活體已進行日常性的接種且安全性更高的觀點來看，本發明之經黏膜吸收促進劑在有效成分方面宜含有選自於由a成分及c成分所構成群組中之至少1種，且以在有效成分方面僅含有選自於由a成分及c成分所構成群組中之至少1種為佳，以在有效成分方面僅含有c成分更佳。

a成分、b成分及c成分可直接使用市售者，亦可依照或根據眾所皆知的合成方法來製造。

雖不欲限定解釋，然在採用a成分及b成分時，本發明之機制可認為是如下。精胺酸八胜肽等含有許多鹼性胺基酸之眾所皆知的細胞膜穿透性胜肽，可認為是因其正電荷與藥物形成複合體並穿透細胞膜，藉此可使藥物之經黏膜吸收性提升(非專利文獻6及7)。因此，本發明有效成分之a成分及b成分亦具有正電荷，而可認為是基於相同的機制來發揮其效果。

因此，本發明之經黏膜吸收促進劑之作為對象的藥物，特別是採用a成分及b成分時，只要是具有生物活性，且可與a成分及/或b成分藉由電性的相互作用來形成複合體之藥物，則無特別限定，可舉例如等電點(pI)從中性區域至酸性區域之藥物，且宜為pI:7以下(或小於7) 之藥物、以pI:7~0.01之藥物為佳、以pI:6~0.1之藥物更佳、以pI:6~1之藥物特別為佳。

藥物之分子量並無特別限制。可舉例如分子量100~1000000之藥物、且宜為300~200000之藥物、以800~100000之藥物為佳、以1500~50000之藥物更佳、以2000~10000之藥物特別為佳。

藥物之具體例可舉例如胜肽、蛋白質、糖、多糖類、核酸、低分子化合物等。更具體可舉例如胰島素、胃泌素、Exendin-4、GLP1、亮丙瑞林(leuprolide)、降鈣素、干擾素β、聚乙二醇化蛋白質(PEGylated protein)、類糊精(dextran)、奈米粒子等。

本發明經黏膜吸收促進劑之作為對象的黏膜並無特別限制。黏膜可舉例如腸黏膜、胃黏膜、鼻黏膜、口腔黏膜、肺黏膜等，且宜為腸黏膜。

本發明之醫藥組成物只要含有上述之本發明經黏膜吸收促進劑與藥物，則無特別限制，亦可視需要含有其他成分。其他成分若為藥學上容許之成分則無特別限定，可舉例如基劑、載劑、溶劑、分散劑、乳化劑、緩衝劑、穩定劑、賦形劑、結合劑、崩解劑、潤滑劑、增黏劑、保溼劑、著色料、香料、螯合劑等。

本發明醫藥組成物之劑形只要是以自黏膜吸收為目的製得的劑形，則無特別限定，可舉例如錠劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、細粒劑、糖漿劑、腸溶劑、緩釋性膠囊劑、咀嚼錠、滴劑、丸劑、內用液劑、零食錠劑、緩釋劑、緩釋性顆粒劑等口服劑；點鼻劑、吸入劑、肛門栓劑、插入劑、浣腸劑、凝膠劑等外用劑等。又，本發明之醫藥組成物可為固態劑、半固態劑、液劑之任一，然宜為固態劑、半固態劑，且以固態劑為佳。

本發明醫藥組成物中之藥物含量會依藥物種類、投予對象、投予路徑、劑形、患者狀態、及醫師判斷等來變動而無限定，可設為例如0.0001~95重量%，且宜設為0.001~50重量%。

本發明醫藥組成物中之a成分及b成分的合計含量會依藥物種類、投予對象、投予路徑、劑形、患者狀態、及醫師判斷等來變動而無限定，可設為例如0.0001~95重量%，且宜設為0.001~50重量%。

a成分及b成分即使較少亦能發揮其效果。從如此觀點來看，本發明醫藥組成物，例如，對投予對象體重1kg，每1次a成分及b成分的合計投予量宜使用成1μg~200mg，且以10μg~150mg為佳、以100μg~100mg更佳、以500μg~50mg特別為佳。

[實施例] 以下將基於實施例來詳細說明本發明，然本發明並未被該等實施例所限定。

試驗例1：評價精胺酸或精胺酸胜肽之經黏膜吸收促進作用＜試驗例1-1：調製投予液＞將各種量的重組人類胰島素(27.5 IU/mg)(和光純藥工業公司製)在聚丙烯管中溶解於50μL之0.1N鹽酸水溶液中之後，將其利用1.4 mL之以0.001%濃度含有甲基纖維素的PBS溶液(pH 6.0)來稀釋，再以50μL之0.1N氫氧化鈉水溶液來標準化，獲得胰島素溶液。另一方面，在被驗物質方面，在量取各種量之鹼性胺基酸(L-精胺酸)(和光純藥工業公司製)或各種量之鹼性胺基酸寡胜肽(2 mer、4 mer、或8 mer)至聚丙烯管中之後，將其溶解於以0.001%濃度含有甲基纖維素的PBS溶液(pH 6.0)中，獲得被驗物質溶液。將依上述獲得之胰島素溶液直接、或者將依上述獲得之胰島素溶液與被驗物質溶液各以等量來混合者，做成投予液並用於以下之投予試驗。

＜試驗例1-2:投予試驗＞使用雄SD(Sprague Dawley)大鼠(體重180~220 g)(SLC公司製)來進行投予試驗。將固定在板上且麻醉好之大鼠在正中切開腹部，使迴腸露出。在迴盲部近端插入導管，且為了防止液體損失，在好好結紮後返回腹腔內原本的位置。使用輸液幫浦，使PBS(37℃)通過導管並循環(5.0 mL/min、4分鐘)。去除導管的管子並封閉其部分。為了使因手術所致血糖值上升返回原樣，直接將大鼠放置30分鐘。之後，將以前述試驗例1-1獲得之投予液0.5 mL直接投予到迴腸袢內。將胰島素投予量，以及投予液中被驗物質之種類及濃度顯示於表1。實施例1~3及比較例2之被驗物質濃度是調整成換算成精胺酸單體時濃度會相同(8 mM)。

[表1]

＜試驗例1-3：評價經黏膜吸收促進作用＞在試驗例1-2中，在投予前、以及投予後經過5、10、15、30、60、120及180分後採血。將獲得之血液離心(13,400 g、1分鐘)獲得血漿。將血漿中人類胰島素(亦即，投予後經由腸黏膜被吸收的胰島素)之濃度使用人類胰島素ELISA套組(Mercodia公司製)來測定。測定結果顯示於圖1。如圖1所示，透過將精胺酸或精胺酸寡胜肽與胰島素一起投予，可促進胰島素吸收。又，吸收促進作用之強度順序為精胺酸(實施例1：L-R)＞精胺酸二胜肽(實施例2：L-R2)＞精胺酸四胜肽(實施例3：L-R4)＞精胺酸八胜肽(比較例2：L-R8)。

試驗例2：評價精胺酸之用量依存性的經黏膜吸收促進作用除了令投予液中被驗物質之種類及濃度如表2所示之外，其餘與試驗例1相同來進行試驗。結果顯示於圖2。如圖2所示，精胺酸會用量依存性的促進胰島素吸收。

[表2]

試驗例3：評價鹼性胺基酸之經黏膜吸收促進作用除了令投予液中被驗物質之種類及濃度如表3所示之外，其餘與試驗例1相同來進行試驗。結果顯示於圖3。如圖3所示，即便為精胺酸以外的鹼性胺基酸，亦促進了胰島素吸收。又，吸收促進作用之強度順序為精胺酸(實施例1：L-R)＞離胺酸(實施例6：L-K)＞組胺酸(實施例7：L-H)。

[表3]

試驗例4：評價1，對腸上皮組織之完整性(integrity)的影響　在試驗例1之後，將迴腸以20 mL的PBS(37℃)處理，之後，通入空氣。將0.5 mL之溶液直接投予到迴腸袢內。供於投予之溶液為以下4種：溶液1：PBS 溶液2：含有胰島素之PBS(胰島素量：50 IU/體重(kg)) 溶液3：以40 mM濃度含有L-精胺酸之PBS 溶液4：以5%(w/v)濃度含有牛磺去氧膽酸鈉之PBS。

自投予經過3小時後，將迴腸袢以5.0 mL之PBS洗淨，並回收腸液。將腸液中的LDH(lactate dehydrogenase)濃度使用LDH套組來測定。測定結果顯示於圖4。如圖4所示，在投予陽性控制組(positive control)之牛磺去氧膽酸鈉的情況下，與投予PBS之情況相比，腸液中LDH濃度是極高的。此現象顯示出，因為牛磺去氧膽酸鈉使腸上皮的完整性崩壞，因此本來存在血中的LDH通過腸上皮而滲漏。相對於此，在投予精胺酸的情況下，腸液中LDH濃度，從投予PBS之情況來看，是幾乎沒有變化，因此顯示出，精胺酸對腸上皮組織之完整性的影響極少，而為安全性高的成分。

試驗例5：評價1，對上皮組織之緊密型連結構造的影響基於使精胺酸等被驗物質作用後之培養細胞層的電阻(TEER:transepithelial electrical resistance(跨上皮電阻))，來評價對被驗物質之緊密型連結構造的影響。具體是如下進行。

將源自人類結腸癌之細胞(Caco-2細胞)播種到12孔之跨孔盤(transwell plate)(1.0×10⁵ cells/cm² )，並在DMEM培養基中培養21天(直到到達一定的TEER(＞500Ωcm² )(顯示在單層中形成緊密型連結。))。在跨孔的上(apical)側加入500μL的傳輸緩衝液1(transport buffer 1)(以10 mM之MES緩衝化的HBSS)、在底(basal)側加入1.5 mL的傳輸緩衝液2(以10 mM之HEPES(pH7.4)緩衝化的HBSS)，並進行30分鐘的前培養(pre incubation)。前培養後，使用電壓電阻計(Millicell ERS-2、Millipore公司製)測定TEER，並設獲得之値為試驗開始時的TEER(T₀ )。將上側之傳輸緩衝液1之中的100μL置換成100μL之含有被驗物質的試驗溶液，並培養2小時。置換試驗溶液後，在上側腔室內，被驗物質之種類及濃度如下：試驗溶液1：胰島素15μM 試驗溶液2：胰島素15μM、L-精胺酸480μM 試驗溶液3：胰島素15μM、L-精胺酸960μM 試驗溶液4：胰島素15μM、D-精胺酸480μM 試驗溶液5：胰島素15μM、D-精胺酸960μM 試驗溶液6：胰島素15μM、D-精胺酸八胜肽60μM。

培養後，使用電壓電阻計(Millicell ERS-2、Millipore公司製)來測定TEER，並設獲得之値為試驗後的TEER(T₁₂₀ )。將試驗後的TEER(T₁₂₀ )除以試驗開始時的TEER(T₀ )再乘以100的値顯示於圖5。如圖5所示，即便使精胺酸以非常高濃度來作用，TEER是幾乎沒有變化。如此現象顯示出，精胺酸對腸上皮組織之緊密型連結構造的影響極少，而為安全性高的成分。

試驗例6：透過併用鹼性胺基酸與色胺酸之經黏膜吸收促進作用的評價　除了投予液中被驗物質之種類及濃度做成如表4所示者之外，其餘與試驗例1相同來進行試驗。結果顯示於圖6。如圖6所示，透過併用鹼性胺基酸與色胺酸，可更促進胰島素吸收。

[表4]

試驗例7：L-色胺酸單獨之經黏膜吸收促進作用的評價除了將投予液中被驗物質之種類及濃度做成如表5所示者之外，其餘與試驗例1相同來進行試驗。結果顯示於圖7。如圖7所示，透過L-色胺酸，可更促進胰島素吸收。

[表5]

試驗例8：D-色胺酸單獨之經黏膜吸收促進作用的評價除了將投予液中被驗物質之種類及濃度做成如表6所示者之外，其餘與試驗例1相同來進行試驗。結果顯示於圖8。如圖8所示，透過D-色胺酸，可更促進胰島素吸收。

[表6]

試驗例9：評價2，對腸上皮組織之完整性的影響除了在投予液方面是使用以下7種溶液之外，其餘與試驗例4相同來進行試驗：溶液A：以0.001%之濃度含有甲基纖維素的PBS 溶液B：含有胰島素之PBS(胰島素量：50 IU/體重(kg)) 溶液C：以40 mM濃度含有L-精胺酸之PBS 溶液D：以16 mM濃度含有L-色胺酸之PBS 溶液E：以32 mM濃度含有L-色胺酸之PBS 溶液F：含有40 mM濃度之L-精胺酸及50 mM濃度之L-色胺酸的PBS 溶液G：以5%(w/v)濃度含有牛磺去氧膽酸鈉之PBS。

測定結果顯示於圖9。如圖9所示，在投予陽性控制組之牛磺去氧膽酸鈉的情況下，與投予PBS之情況相比，腸液中LDH濃度極高。此現象顯示出，因為牛磺去氧膽酸鈉使腸上皮的完整性崩壞，因此本來存在細胞內的LDH通過腸上皮而滲漏。相對於此，在投予色胺酸的情況下，從投予PBS之情況來看，腸液中LDH濃度是幾乎沒有變化，因此顯示出，色胺酸對腸上皮組織之完整性的影響極少，而為安全性高的成分。

試驗例10：體內(in vivo)口服投予試驗對絕食24 小時後的小鼠，使用口服探條(sonde)(i..d. 0.9 × length 50 mm) (Natsume Seisakusho Co., Ltd., Tokyo, Japan)，口服投予胰島素 (50 IU/kg)、L-精胺酸 (200 mM)、或者胰島素與L-精胺酸(40或200 mM) (100μL) 混合溶液。在投予前、以及投予後15、30、60、120、180、240、300、及360分後，從尾靜脈採血(一滴)，並使用One Touch Ultra View( Johnson & Johnson K.K., Tokyo, Japan)測定經時性血糖値。

測定結果顯示於圖10。如圖10所示，單獨口服投予胰島素或L-精胺酸，仍無法自制血糖値，然透過將胰島素與L-精胺酸一起口服投予，則可抑制血糖値。

圖1顯示試驗例1之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝3-5)。「胰島素」表示比較例1、「L-R」表示實施例1、「L-R2」表示實施例2、「L-R4」表示實施例3、「L-R8」表示比較例2(參照表1)。圖2顯示試驗例2之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝4)。「0 mM」表示比較例1、「8 mM」表示實施例1、「16 mM」表示實施例4、「40 mM」表示實施例5(參照表2)。圖3顯示試驗例3之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝3-4)。「胰島素」表示比較例1、「L-R」表示實施例1、「L-K」表示實施例6、「L-H」表示實施例7(參照表3)。圖4顯示試驗例4之結果。橫軸顯示腸液中之LDH(lactate dehydrogenase，乳酸脫氫酶)濃度、各數據是顯示平均值±SEM(n＝4)。「PBS」表示溶液1、「胰島素」表示溶液2、「L-R」表示溶液3、「牛磺去氧膽酸鈉(Sodium taurodeoxycholate)」表示溶液4。圖5顯示試驗例5之結果。橫軸顯示將試驗後之TEER(T₁₂₀ )除以試驗開始時之TEER(T₀ )再乘以100的值、各數據是顯示平均值±SEM(n＝4)。從上依序顯示使用試驗溶液1、試驗溶液2、試驗溶液3、試驗溶液4、試驗溶液5、試驗溶液6之情況。圖6顯示試驗例6之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝2-4)。「胰島素」表示比較例1、「L-R1」表示實施例5、「L-R1＋L-W1」表示實施例8(參照表4)。圖7顯示試驗例7之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝2-6)。「胰島素」表示比較例1、「16 mM」表示實施例9、「32 mM」表示實施例10(參照表5)。圖8顯示試驗例8之結果。縱軸顯示血漿中的人類胰島素濃度、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝2-6)。「胰島素」表示比較例1、「16 mM」表示實施例11、「32 mM」表示實施例12(參照表6)。圖9顯示試驗例9之結果。縱軸顯示腸液中之LDH(lactate dehydrogenase)濃度、各數據是顯示平均值±SEM(n＝3)。「PBS」表示溶液A、「胰島素」表示溶液B、「＋L-R1 (40 mM)」表示溶液C、「＋L-W1 (16 mM)」表示溶液D、「＋L-W1 (32 mM)」表示溶液E、「＋L-R1 (40 mM) ＋L-W1 (50 mM)」表示溶液F、「牛磺去氧膽酸鈉」表示溶液G。圖10顯示試驗例10之結果。縱軸顯示血糖值之相對值(令投予前的數值為100%時)、橫軸顯示投予後的經過時間、各數據是顯示平均值±SEM(n＝4-6)。「L-R1」表示L-精胺酸。

Claims

一種藥物之經黏膜吸收促進劑，含有選自於由下述成分所構成群組中之至少1種： (a成分)鹼性胺基酸、 (b成分)2~5個鹼性胺基酸構成之胜肽、及 (c成分)色胺酸。
如請求項1之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為L-胺基酸。
如請求項1或2之經黏膜吸收促進劑，其含有前述a成分。
如請求項1至3中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為選自於由精胺酸、離胺酸及組胺酸所構成群組中之至少1種。
如請求項1至4中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述鹼性胺基酸為精胺酸。
如請求項1至5中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述b成分為由2~4個鹼性胺基酸構成之胜肽。
如請求項1至6中任一項之經黏膜吸收促進劑，其含有前述c成分。
如請求項1至7中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述黏膜為腸黏膜。
如請求項1至8中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述藥物之等電點為7以下。
如請求項1至9中任一項之經黏膜吸收促進劑，其中前述藥物為胜肽或蛋白質。
一種醫藥組成物，含有如請求項1至10中任一項之經黏膜吸收促進劑及藥物。
如請求項11之醫藥組成物，其為固態劑。
如請求項11或12之醫藥組成物，其為口服劑。