[go: up one dir, main page]

TW201728586A - 化學化合物 - Google Patents

化學化合物 Download PDF

Info

Publication number
TW201728586A
TW201728586A TW105136236A TW105136236A TW201728586A TW 201728586 A TW201728586 A TW 201728586A TW 105136236 A TW105136236 A TW 105136236A TW 105136236 A TW105136236 A TW 105136236A TW 201728586 A TW201728586 A TW 201728586A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
methyl
compound
formula
pharmaceutically acceptable
group
Prior art date
Application number
TW105136236A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI730012B (zh
Inventor
克理佛德 大衛 瓊斯
里察 安德魯 華德
史蒂芬 史瓦洛
馬克 安卓 葛拉漢
安德魯 賀比 都伯森
詹姆士 麥卡貝
Original Assignee
阿斯特捷利康公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 阿斯特捷利康公司 filed Critical 阿斯特捷利康公司
Publication of TW201728586A publication Critical patent/TW201728586A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI730012B publication Critical patent/TWI730012B/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本揭露涉及具有式(I)之化合物□或其藥學上可接受的鹽，其中R1、R2和R3具有在上文說明書中所定義的任意含義；涉及其製備方法，包含它們的醫藥組成物以及它們在治療癌症中之用途。

Description

化學化合物
本揭露涉及選擇性地抑制ERK並且具有抗-癌活性的某些二氫咪唑并吡酮衍生物及其藥學上可接受的鹽。本揭露還涉及所述二氫咪唑并吡酮衍生物及其藥學上可接受的鹽在治療人體或動物體之方法，例如在預防或治療癌症中之用途。本揭露還涉及在製備所述二氫咪唑并吡酮衍生物中所涉及的方法和中間體化合物，並且涉及包含所述二氫咪唑并吡酮衍生物及其藥學上可接受的鹽的醫藥組成物。
蛋白激酶在幾乎細胞生物學的各個方面起著調節作用。哺乳動物的MAP激酶由參與從質膜到細胞核的細胞信號轉導的胞漿蛋白絲胺酸/蘇胺酸激酶組成。存在多種MAPK傳訊級聯，每種由3種組分組成：MAPK激酶(MAP3K)、MAPK激酶(MAP2K)以及MAPK。活化的MAP激酶磷酸化多種底物，該等底物包括其他蛋白激酶、蛋白磷酸酶、轉錄因子以及其他功能蛋白質。RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯參與調節細胞週期進程、細胞增殖、存活、代謝以及轉錄。
ERK1和ERK2係參與RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯的廣泛表現的MAPK激酶，除了提供另外的功能特異性的激酶結構域內的31胺基酸殘基插入之外，它們均包含提供傳訊特異性的獨特的N末端和C末端延伸。ERK1和ERK2在種類廣泛的細胞類型中 藉由銹導有絲分裂和其他的刺激物活化，從而引起RAS(HRAS、NRAS和KRAS)的多種同種型的活化。RAS的活化導致RAF同種型(ARAF、BRAF和CRAF)的募集和活化以及隨後導致MEK1和MEK2，介導ERK1和ERK2的酪胺酸和蘇胺酸的磷酸化作用的雙特異性蛋白激酶的活化。ERK1和ERK2具有大量識別的細胞質和細胞核的底物(參見Yoon S，塞格爾(Seger)R，胞外信號調節的激酶：多種底物調節不同的細胞功能(The extracellular signal-regulated kinase：multiple substrates regulate diverse cellular functions)；生長因數(Growth Factors)2006，24，21-44)。
RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯在多種疾病中脫調節(deregulate)，該等疾病包括顱腦損傷、癌症、心臟肥大、糖尿病以及炎症。確切地在癌症中，在胰腺癌中以大約58%，在結腸直腸癌中以33%，並且在膽管癌中以31%發生KRAS的突變，並且在黑素瘤中以18%發生NRAS突變。RAS中的致癌突變導致在多種腫瘤中ERK活性升高。此外，在黑素瘤中以大約40%-60%，在甲狀腺癌中以40%，在結腸直腸癌中以20%發生BRAF的突變(參見Vakiani E，Solit DB.KRAS和BRAF；藥物靶標和預測性生物標記(drug targets and predictive biomarkers)；病理學雜誌(Journal of Pathology)2011，223，219-29)。該等觀察表明RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯係對於在大範圍的人腫瘤抗癌症治療有吸引力的途徑。
我們已發現一系列化學化合物，該等化學化合物具有在相同傳訊級聯上對ERK超過其他激酶的抑制選擇性。
其中在此提及ERK抑制時，應理解為係指ERK1和/ 或ERK2抑制，特別係ERK2抑制。
根據一個方面，提供一種具有式(I)之化合物：
其中：R1係氫、C1-3烷基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被選自下組的取代基取代，該組由以下各項組成：C1-3烷基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：C1-3烷基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：鹵素、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、C1-3烷基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了一種如上文所定義的具有式(I)之化合物。
在一個實施方式中，提供了一種具有式(I)之化合物的藥學上可接受的鹽。
術語“視情況取代的”應當理解為意指“取代的或未取代的”。
如在此使用的，術語“烷基”係指具有指定數目碳原子的直鏈和支鏈飽和烴基兩者。提及單獨的烷基基團如“丙基”係特定針對僅僅直鏈形式的並且提及單獨的支鏈烷基基團，例如“異丙基”係特定針對僅僅支鏈形式。
C1-3烷基的實例係甲基、乙基、丙基以及異丙基。
C1-4烷基的實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基以及三級丁基。
如在此使用的術語“鹵素”(halogen或halo)係指氯、溴、氟和碘。在某些實施方式中，術語“鹵素”可以指氟、氯、和溴。在某些實施方式中，術語“鹵素”可以指氟和氯。在某些實施方式中，術語“鹵素”可以指氟。在某些實施方式中，術語“鹵素”可以指氯。在某些實施方式中，術語“鹵素”可以指溴。
在一個方面中，R1係氫、甲基或-CH2OMe。
在一個方面中，R1係甲基或-CH2OMe。
在一個方面中，R1係氫。
在一個方面中，R1係甲基。
在一個方面中，R1係-CH2OMe。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲 基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、甲氧基和OCHF2。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被二氟甲基取代；或者 R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被甲基取代。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被二氟甲基取代。
在一個方面中，R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代。
在一個方面中，R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基或三氟甲基。
在一個方面中，R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被甲基取代。
在一個方面中，R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被二氟甲基取代。
在一個方面中，R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原 子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、甲氧基和-OCHF2。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯或甲氧基。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯和甲氧基。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯和甲氧基。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原 子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和甲氧基。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和甲氧基。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被氟取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被氯取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被二氟甲基取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被三氟甲基取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被甲氧基取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被-OCHF2取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被氟取代。
在一個方面中，R2係苯基，視情況在1個環碳原子上被氯取代。
在一個方面中，R2係6-甲基吡啶-2-基、4-(二氟甲基)吡啶-2-基、6-(二氟甲基)吡啶-2-基、4-(三氟甲基)吡啶-2-基、6-(三氟甲基)吡啶-2-基、2-(三氟甲基)吡啶-4-基、2-(三氟甲基)嘧啶-4-基、6-(三氟甲基)嘧啶-4-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基、3,5-二氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-(二氟甲氧基)苯基、3-(二氟甲基)苯基、3-甲氧基苯基或4-氟-3-甲氧基苯基。
在一個方面中，R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基或3,5-二氟苯基。
在一個方面中，R2係6-甲基吡啶-2-基。
在一個方面中，R2係4-(二氟甲基)吡啶-2-基。
在一個方面中，R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基。
在一個方面中，R2係4-(三氟甲基)吡啶-2-基。
在一個方面中，R2係6-(三氟甲基)吡啶-2-基。
在一個方面中，R2係2-(三氟甲基)吡啶-4-基。
在一個方面中，R2係2-(三氟甲基)嘧啶-4-基。
在一個方面中，R2係6-(三氟甲基)嘧啶-4-基。
在一個方面中，R2係3-氯苯基。
在一個方面中，R2係3,4-二氟苯基。
在一個方面中，R2係3,5-二氟苯基。
在一個方面中，R2係3-氯-4-氟苯基。
在一個方面中，R2係3-(二氟甲氧基)苯基。
在一個方面中，R2係3-(二氟甲基)苯基。
在一個方面中，R2係3-甲氧基苯基。
在一個方面中，R2係4-氟-3-甲氧基苯基。
在一個方面中，R3係氫、甲基或氯。
在一個方面中，R3係氫或甲基。
在一個方面中，R3係氫。
在一個方面中，R3係甲基。
在一個方面中，R3係氯。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、 甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯。
或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基； 或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥 學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被二氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯；以及R3係氫或甲基；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥 學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；以及R3係氫、甲基或氯。
或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被甲基取代；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被二氟甲基取代；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥 學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥 學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基和甲氧基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯和甲氧基；以及 R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯和甲氧基；以及R3係氫、甲基或氯。
或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取 代基取代，該組由以下各項組成：氟和甲氧基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和氯；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係苯基，視情況在2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟和甲氧基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe； R2係6-甲基吡啶-2-基、4-(二氟甲基)吡啶-2-基、6-(二氟甲基)吡啶-2-基、4-(三氟甲基)吡啶-2-基、6-(三氟甲基)吡啶-2-基、2-(三氟甲基)吡啶-4-基、2-(三氟甲基)嘧啶-4-基、6-(三氟甲基)嘧啶-4-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基、3,5-二氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-(二氟甲氧基)苯基、3-(二氟甲基)苯基、3-甲氧基苯基或4-氟-3-甲氧基苯基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基或3,5-二氟苯基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係甲基或-CH2OMe；R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基或3,5-二氟苯基；以及R3係氫或甲基； 或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係3-氯苯基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係3,4-二氟苯基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係3,5-二氟苯基；以及R3係氫、甲基或氯；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係甲基或-CH2OMe；R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基；以及R3係氫或甲基；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係甲基或-CH2OMe；R2係3-氯苯基；以及R3係氫或甲基；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中： R1係甲基或-CH2OMe；R2係3,4-二氟苯基；以及R3係氫或甲基；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中：R1係甲基或-CH2OMe；R2係3,5-二氟苯基；以及R3係氫或甲基；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了任何一個或多個具體的實例或其藥學上可接受的鹽。在另一個方面，提供了在此描述的具體實例或其藥學上可接受的鹽，其中任何一個或多個實例被排除。在另一個方面，提供了選自以下各項的化合物：2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮； (S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮； 7-(3-氯苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-(二氟甲基)苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5- 基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮； (S)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3,4-二氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；以及(R)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了選自以下各項之化合物：(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮己二酸加合物。
在另一個方面，提供了選自以下各項之化合物：(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮； (S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；以及(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個方面，提供了具有實例18的化合物或其藥學上可接受的加合物。
一些具有式(I)之化合物具有手性中心並且認識到此類具有式(I)之化合物可以在或不在另外以任何相關比例的一 種或多種具有式(I)之其他2種可能的鏡像異構物的條件下製備、分離和/或提供。富含鏡像物的/鏡像物純的化合物的製備可以藉由本領域中熟知的有機化學標準技術進行，例如藉由從富含鏡像物的/鏡像物純的起始材料合成，合成過程中使用適當的富含鏡像物的或鏡像物純的催化劑，和/或藉由拆分外消旋的或部分富含的立體異構物混合物(例如藉由手性層析法)進行。
對於在藥學背景下，較佳的是在不存在大量其他立體異構物形式的情況下提供具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽， 因此，在一個實施方式中提供了一種組成物，該組成物包含具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，視情況和具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式一起，其中該具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(ee%)90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係99%。
在另一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含具有式(I)之化合物、或其藥學上可接受的鹽， 3藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
在一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合；視情況進一步包含具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式，其中該具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(ee%)90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係99%。
具有式(I)之化合物及其藥學上可接受的鹽可以由非晶質形式、結晶形式、或半結晶形式製備、使用或提供並且任何給定的具有式(I)之化合物及其藥學上可接受的鹽可由多於一種晶體/多晶形形式形成，包括水合的(例如半-水合物、一-水合物、二-水合物、三-水合物或其他化學計量水合物)和/或溶劑化形式。應當理解的是本揭露涵蓋了任何以及所有具有式(I)之化合物及其藥學上可接受的鹽的此類固體形式。
在另外的實施方式中，提供了具有式(I)之化合物，該化合物藉由在以下‘實例’部分所描述的方案可獲得。
本揭露打算包括存在於本揭露化合物中的原子的所有同位素。同位素應理解為包括具有相同原子數但具有不同質量數的那些原子。舉例來說，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括13C和14C。
具有式(I)之化合物的適合的藥學上可接受的鹽例如係酸加成鹽。
具有式(I)之化合物的另一種適合藥學上可接受的鹽係例如在給予人體或動物體具有式(I)之化合物之後所述人體或動物體內所形成的鹽。
具有式(I)之化合物的適合藥學上可接受的鹽還可以是例如具有式(I)之化合物的酸加成鹽，例如與無機或有機酸(如鹽酸、氫溴酸、硫酸或三氟乙酸)的酸加成鹽。具有式(I)之化合物的適合藥學上可接受的鹽還可以是例如與以下酸的酸加成鹽，該等酸為：乙酸、己二酸、苯磺酸、苯甲酸、肉桂酸、檸檬酸、D,L-乳酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富馬酸、L-酒石酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、甲烷磺酸、1,5-萘二磺酸(napadisylic acid)、磷酸、糖精、琥珀酸、甲苯磺酸(例如對-甲苯磺酸)。應當理解的是具有式(I)之化合物的藥學上可接受的鹽形成本揭露的一個方面。
具有式(I)之化合物可以作為共晶固體體形式製備。為避免疑義，共晶體係指以下固體，該等固體係由具有式(I)之化合物和至少一種其他的分子和/或離子化合物總體上以化學計量比組成的晶體單相材料(在此稱為共形成體)，其既不是溶劑化 物也不是簡單的鹽。總體而言，如果具有式(I)之化合物及其共形成體具有△pKa(pKa(鹼)-pKa(酸))>1，將會存在導致離子化的實質質子轉移以及不同於共晶體的鹽的潛在生成。另一方面，如果具有式(I)之化合物及其共形成體具有△pKa(pKa(鹼)-pKa(酸))<1，將會存在較少的實質質子轉移。如果滿足該標準，該化合物共形成體應當被分類為共晶體。在共晶體中，該API化合物和共形成體分子藉由氫鍵以及可能其他非共價作用來相互作用。應注意，一種共晶體可以本身形成溶劑化物，包括水合物。
具有式(I)之化合物的藥學上可接受的共晶體可能係，例如，己二酸或富馬酸共晶體。應當理解的是具有式(I)之化合物的藥學上可接受的共晶體形成本揭露的另一個方面。
應當理解的是，在此描述的術語“加合物”覆蓋具有式(I)之化合物的藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的共晶體兩者。熟習該項技術者能夠基於以上描述的化合物及其共形成體的pKa的不同確定係形成鹽還是共晶體。在一個方面中，加合物係鹽。在一個方面中，加合物係共晶體。
一般地，在任何實施方式和方面中，在此提及“具有式(I)的化合物的藥學上可接受的鹽”(或多個實例中的一個)應理解為包括具有式(I)之化合物(或相應實例中的任何一個或多個)表現為藥學上可接受的共晶體或更一般地描述為(藥學上可接受的)加合物，除非上下文另外要求。
術語“具有式(I)之化合物的藥學上可接受的共晶體”應當理解成係指在具有式(I)之化合物和藥學上可接受的相 對離子(共形成物)之間形成的共晶體。類似地，術語“具有式(I)之化合物的藥學上可接受的加合物”應當理解成係指在具有式(I)之化合物和藥學上可接受的相對離子(共形成體)之間形成的加合物(鹽或共晶體)。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物，在此稱作形式1，特徵在於提供使用CuKa輻射測量的以下2θ值中的至少一者：23.3和16.7。(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物，形式1，特徵在於提供基本上如圖1所示的X射線粉末繞射圖。十個X射線粉末繞射峰示於表1中：
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=23.3°處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=16.7°處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=23.3°和16.7°處具有至少兩個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2θ=23.3°、16.7°、21.6°、13.6°、 7.3°、19.6°、25.8°、28.1°、14.5°、11.0°處具有特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，其具有與圖1中示出的X-射線粉末繞射圖基本相同的X-射線粉末繞射圖。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=23.3°±0.2° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=16.7°±0.2° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=23.3°和16.7°處具有至少兩個特異峰，其中所述值可以是±0.2° 2-θ。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟 苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2θ=23.3°、16.7°、21.6°、13.6°、7.3°、19.6°、25.8°、28.1°、14.5°、11.0°處具有特異峰，其中所述值可以是±0.2° 2-θ。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，它的DSC分析顯示以203.8℃開始的熔融吸熱和在204.6℃處的峰(圖2)。
因此，DSC分析顯示(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，為在約203.8℃下開始熔融且具有在約204.6℃處的峰的高熔點固體。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，在此稱作形式1，特徵在於提供使用CuKα輻射測量的以下2θ值中的至少一者：8.6和9.8。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，特徵在於提供一個基本上如圖3所示的X射線粉末繞射圖。十個X射線粉末繞射峰示於表2中：
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=8.6°處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧 啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=9.8°處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=8.6°和9.8°處具有至少兩個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2θ=8.6°、9.8°、17.8°、6.3°、10.3°、25.8°、19.1°、22.8°、25.1°、13.2°處具有特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，其具有與圖3中示出的X-射線粉末繞射圖基本相同的X-射線粉末繞射圖。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=8.6°±0.2° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=9.8°±0.2° 2-θ處具有至少一個特異峰。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在2-θ=8.6°和9.8°處具有至少兩個特異峰，其中所述值可以是±0.2° 2-θ。
根據本揭露，提供了一種晶體形式，(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，它的X射線粉末繞射圖在約2-θ=8.6°、9.8°、17.8°、6.3°、10.3°、25.8°、19.1°、22.8°、25.1°、13.2°處具有特異峰，其中所述值可以是±0.2° 2-θ。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1的DSC分析顯示以185.4℃開始的熔融吸熱和在186.2℃處的峰(圖4)。
因此，DSC分析顯示(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1為在185.4℃ 下開始熔融且具有在186.2℃處的峰的高熔點固體。
當陳述本揭露涉及晶體形式(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，和/或晶體形式(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1時，結晶度合宜地大於約60%，更合宜地大於約80%，較佳的是大於約90%並且更較佳的是大於約95%。最較佳的是，結晶度大於約98%。
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1，提供了與圖1中示出的X-射線粉末繞射圖基本相同的X-射線粉末繞射圖並且具有表1中所示的十個(角2-θ值)。(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1，提供了與圖3中示出的X-射線粉末繞射圖基本相同的X-射線粉末繞射圖並且具有表2中所示的十個(角2-θ值)。將理解的是X射線粉末繞射圖的2-θ值從一台機器到另一台機器或從一個樣品到另一個樣品可以輕微變化，因此該等引證的值並不被解釋為係絕對的。
已知可以獲得取決於測量條件(如，所用設備或機器)而具有一個或多個測量誤差的X射線粉末繞射圖。具體來說，總體上已知X射線粉末繞射圖的強度可以波動，取決於測量條件。 因此應理解，本揭露的形式1(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物不限於所提供的X射線粉末繞射圖與圖1中所示的X射線粉末繞射圖一致的晶體並且所提供的X射線粉末繞射圖與圖1中所示的那些X射線粉末繞射圖實質上相同的任何晶體均落入本揭露的範圍內。另外應理解，本揭露的形式1(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物不限於所提供的X射線粉末繞射圖與圖3中所示的X射線粉末繞射圖一致的晶體並且所提供的X射線粉末繞射圖與圖3中所示的那些X射線粉末繞射圖實質上相同的任何晶體均落入本揭露的範圍內。X射線粉末繞射領域的普通技術人員能夠判斷X射線粉末繞射圖的實質一致性。
X射線粉末繞射領域的技術人員將意識到峰值的相對強度可以被例如大小超過30微米並且非統一長寬比的顆粒影響，這可能影響樣品的分析。熟習該項技術者也應當理解，反射位置可以受樣品在衍射計中所處的確切高度和衍射計的零點校正影響。樣品的表面平面性也可能具有細微影響。因此，所呈現的衍射圖數據不應視為絕對值。(詹金斯R(Jenkins,R)和辛德爾R.L.(Snyder,R.L.)X射線粉末繞射測定法的介紹(‘Introduction to X-Ray Powder Diffractometry’)，約翰．威利父子公司(John Wiley & Sons)1996；邦C.W.(Bunn,C.W.)(1948)，化學晶體學(Chemical Crystallography)，倫敦克拉倫登出版社(Clarendon Press,London)；W.(1948)，化學結晶學(Chemical Crystallography)，克 拉倫登出版社(Clarendon Press)，倫敦；克盧格H.P.(Klug,H.P.)和亞歷山大L.E.(Alexander,L.E.)(1974)，X射線衍射程序(X-Ray Diffraction Procedures))。
通常，X射線粉末繞射圖中的衍射角的測量誤差大約是±0.2° 2-θ，並且當考慮示於表1中的X射線粉末繞射圖時和當閱讀表1時，這樣的測量誤差程度應該予以考慮。此外，應理解強度可能波動，取決於實驗條件和樣品製備(較佳的是取向)。
提供與在此揭露的那些基本上一致的XRPD-衍射圖或DSC熱譜圖的任何結晶形式落入本揭露的範圍內。熟習該項技術者有能力確定衍射圖、譜和熱譜圖的實質一致性。
XRPD和DSC方法條件在此描述於實例中。
應當理解的是，具有式(I)之化合物的適合藥學上可接受的前藥也形成本揭露的一個方面。因此，本揭露化合物可以按前藥形式給予，該前藥為在人體或動物體內分解以釋放本揭露化合物的化合物。前藥可以用於改變本揭露化合物的物理性質和/或藥物動力學性質。當本揭露化合物包含可能連接修飾基團的適合基團或取代基時，可能形成前藥。前藥的實例包括在體內可裂解的酯或醯胺衍生物，該等酯或醯胺衍生物可以在具有式(I)之化合物中的羧基基團處形成。
因此，本揭露的一個方面包括當藉由有機合成可獲得時以及當經由前藥的裂解而在人體或動物體內可獲得時，如上文所定義的那些具有式(I)之化合物。因此，本揭露包括那些由 有機合成方法產生的具有式(I)之化合物並且也包括在人體或動物體內經由先質化合物代謝而產生的該等化合物，即具有式(I)之化合物可以為合成產生的化合物或代謝產生的化合物。
具有式(I)之化合物的適合藥學上可接受的前藥係基於合理醫學判斷，適合給予人體或動物體而無所不希望的藥理學活性且無不當毒性者。
例如在以下文獻中已描述不同形式的前藥：-a)《酶學方法》(Methods in Enzymology)，第42卷，第309-396頁，由K.韋德爾(K.Widder)等人編(學術出版社(Academic Press)，1985)；b)《前藥設計》(Design of Pro-drugs)，由H.邦加爾德(H.Bundgaard)編，(埃爾塞維爾(Elsevier)，1985)；c)《藥物設計和開發教科書》(A Textbook of Drug Design and Development)，由克洛格斯加德-拉森(Krogsgaard-Larsen)和H.邦加爾德編，第5章“前藥的設計和應用(Design and Application of Pro-drugs)”，H.邦加爾德第113-191頁(1991)；d)H.邦加爾德，《高級藥物遞送綜述》(Advanced Drug Delivery Reviews)，8，1-38(1992)；e)H.邦加爾德，等人，《醫藥科學雜誌》(Journal of Pharmaceutical Sciences)，77，285(1988)；f)F)N.掛穀(N.Kakeya)等人，《化學與藥學通報》(Chem.Pharm.Bull.)，32，692(1984)； g)T.樋口(T.Higuchi)和V.斯黛拉(V.Stella)，《依新穎遞送系統的前藥》(“Pro-Drugs as Novel Delivery Systems”)，ACS研討會系列(A.C.S.Symposium Series)，第14卷；以及h)E.羅奇(E.Roche)(編者)，《藥物設計中的生物可逆載體》(“Bioreversible Carriers in Drug Design”)，培格曼出版社(Pergamon Press)，1987。
具有羧基的具有式(I)之化合物的適合的藥學上可接受的前藥為例如其體內可裂解的酯。包含羧基的具有式(I)之化合物的體內可裂解的酯為例如在人體或動物體內裂解以產生母體酸的藥學上可接受的酯。對於羧基的適合的藥學上可接受的酯包括(1-6C)烷基酯，如甲基酯、乙基酯和三級-丁基酯、(1-6C)烷氧基甲基酯如甲氧基甲基酯；(1-6C)鏈烷醯氧基甲基酯，如新戊醯氧基酯；3-酞基酯；(3-8C)環烷基羰氧基-(1-6C)烷基酯，如環戊基羰氧基甲基酯和1-環己基羰氧基乙基酯；2-側氧-1,3-二氧雜環戊烯基(dioxolenyl)甲基酯，如5-甲基-2-側氧-1,3-二氧雜環戊烯-4-基甲基酯；以及(1-6C)烷氧基羰氧基-(1-6C)烷基酯，如甲氧基羰氧基甲基酯和1-甲氧基羰氧基乙基酯。
具有羧基的具有式(I)之化合物的適合的藥學上可接受的前藥為例如體內可裂解的醯胺，諸如N-C1-6烷基醯胺和N,N-二-(C1-6烷基)醯胺，如N-甲基醯胺、N-乙基醯胺、N-丙基醯胺、N,N-二甲基醯胺、N-乙基-N-甲基醯胺或N,N-二乙基醯胺。
具有式(I)之化合物的體內作用可以部分地由在給予具有式(I)之化合物之後在人體或動物體內形成的一種或多種 代謝物來發揮。如上所述，具有式(I)之化合物的體內作用也可以經由先質化合物(前藥)代謝來發揮。
為避免疑義，應瞭解如果在本說明書中某一基團經‘上文所定義’或‘在此定義限定’，那麼所述基團涵蓋首次出現且最廣泛的定義以及對該基團的每一個和所有可替代性定義。
本揭露的另一個方面提供一種製備具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽的方法。適合方法藉由以下代表性方法變化形式來說明，其中除非另行說明，否則R1至R3具有上文所定義的含義中的任一者。必需的起始物質藉由有機化學的標準程序可以獲得或係可商購的。該等起始物質的製備結合以下代表性方法變化形式並在隨附實例中描述。可替代地，藉由於有機化學家的普通技術中說明的那些程序的類似程序可獲得必要的起始物質。
具有式(I)之化合物可以從具有式(II)之化合物(其中L1係適合的離去基團(例如鹵素或-SO2Me，等))，藉由與具有式(XII)之化合物(其中P1係氫)，與適合的鹼(例如NaH、Na2CO3、Cs2CO3或K2CO3)在適合的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺或N,N-二甲基乙醯胺)中發生反應來製備；或者在適合的Pd催 化劑和膦配位基的存在下，與適合的鹼(例如Cs2CO3)在適合的溶劑(例如二)中，在環境溫度或升高的溫度條件下(例如藉由加熱或藉由微波爐輻射實現)發生反應來製備。可替代地，具有式(I)之化合物可以從具有式(II)之化合物(其中L1係適合的離去基團(例如鹵素或-SO2Me，等))，藉由與具有式(XII)之化合物(其中P1係適合的非氫基團(例如甲醯基或三氟乙醯胺))，與適合的鹼(例如NaH、Na2CO3、Cs2CO3或K2CO3)在適合的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺或N,N-二甲基乙醯胺)中發生反應來製備；或者在適合的Pd催化劑和膦配位基的存在下，與適合的鹼(例如Cs2CO3)在適合的溶劑(例如二)中，在升高的溫度條件下(例如藉由加熱或藉由微波輻射實現的)發生反應隨後在適合的鹼(例如氫氧化鈉)在適合溶劑和水的存在下去除保護基團P1來製備。
應理解的是具有式(I)之化合物可以使用本領域中熟知的條件轉化為另一種具有式(I)之化合物。
具有式(XII)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
具有式(II)之化合物可以從具有式(III)之化合 物(其中L1係適合的離去基團(例如Cl或-SO2Me))，藉由與具有式(XIII)之化合物(其中L2係適合的離去基團(例如鹵素或-OSO2Me、-Tos，等))，在適合的鹼(例如氫化鈉或K2CO3)和適合的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺)的存在下發生反應來製備。
具有式(XIII)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
可替代地，具有式(II)之化合物可以從具有式(VI)之化合物(其中R4烷基基團(例如甲基或乙基))，藉由與具有式(X)之化合物，在適合的還原劑(例如NaBH3CN)和適合的溶劑(例如四氫呋喃)的存在下，隨後在內醯胺化條件下在適合的溶劑(例如MeOH)與適合的鹼(例如氨)，或與路易斯酸催化劑(例如三甲胺)發生反應來製備。
具有式(X)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
具有式(II)之化合物(其中L1離去基團的先質(例如-SMe，等))可以從具有式(V)之化合物(其中L3係適合的金屬基團(例如三甲基錫烷，等))，藉由與具有式(XI)之化合物(其中L2係適合的離去基團(例如鹵素，或OSO2CF3))，在適合的Pd催化劑和膦配位基的存在下，在適合的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺、二甲氧基乙烷、水和乙醇的混合物)在適合的條件(例如加熱或在微波反應器中)下發生反應來製備。
具有式(XI)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
具有式(V)之化合物(其中R1係氫或烷基基團(例如甲基))，可以從具有式(VII)之化合物，藉由與具有式(XIV)之化合物(其中L4係適合的離去基團(例如鹵素或或OSO2CF3))，在適合的鹼(例如氫化鈉或K2CO3)和適合的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺或丙酮)的存在下發生反應來製備。
具有式(XIV)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
具有式(VI)之化合物(其中R4係烷基基團(例如甲基或乙基))，可以從具有式(VIII)之化合物，藉由與或者具有式(XV)之化合物(其中L5係適合的離去基團(例如鹵素、-OSO2Me or-OSO2CF3)並且P3係合適的保護基團(例如-Boc))或者具有式(XVI)之化合物(其中P3係合適的保護基團例如(-Boc))，在適合的鹼(例如氫化鈉或K2CO3)在適合的溶劑(例如二或MeCN)中，在環境或升高的溫度(例如藉由加熱或微波輻射實現)條件下發生反應來製備。在使用具有式(XVI)之化合物的情況下，有必要在水性酸(例如HCL)條件下，在在適合溶劑(例如乙醇)中去除中間體胺基磺酸。可以藉由使用適合的酸(例如HCL)在適合的溶劑(例如二或乙醇)中在環境溫度條件下去除具有式(XV)和(XVI)之化合物中的保護基團P3。具有式(VI)之化合物可以作為鹽，例如鹽酸鹽或二鹽酸鹽被分離。
具有式(XV)和(XVI)之化合物係可商購的或在本領域中熟知的。
具有式(VIII)之化合物和具有式(XVI)之化合物發生反應製備具有式(VI)之化合物係新穎的並且提供了本揭露 的另一個方面。
因此在另外一個方面中，提供了一種用於製備具有式(VI)之化合物之方法，該方法包括：a)在適合的鹼的存在下在適合的溶劑中，在室溫或高溫條件下，將具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物進行反應；
其中R1和R3係如在上文中對於具有式(I)之化合物所定義的；L1係離去基團或離去基團的先質；P3係保護基團；以及R4係烷基基團；以及b)視情況，在水性酸條件下在適合的溶劑中，去除中間體胺基磺酸；以及c)在適合的酸存在下在適合的溶劑中，在環境溫度下，去除保護基團P3。
在一個實施方式中，L1係-SMe或鹵素。
在一個實施方式中，L1係-SMe或Cl。
在一個實施方式中，R4係烷基基團。
在一個實施方式中，R4係C1-4烷基。
在一個實施方式中，R4係甲基或乙基。
在一個實施方式中，R4係甲基。
在一個實施方式中，R4係乙基。
在一個實施方式中，合適的鹼係氫化鈉或K2CO3。
在一個實施方式中，合適的鹼係氫化鈉。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在二或MeCN中進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在二中進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在MeCN中進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在約20℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在18℃-25℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在>20℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在>50℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在>80℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在85℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在85℃並且100℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在100℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在80℃並且110℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物的反應在110℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，合適的水性酸係HCl。
在一個實施方式中，去除中間體胺基磺酸在乙醇中進行。
在一個實施方式中，P3係-Boc。
在一個實施方式中，合適的鹼係K2CO3。
在一個實施方式中，合適的酸係HCl。
在一個實施方式中，去除保護基P3在二或乙醇中進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在乙醇中進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在二中進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在18℃-25℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在22℃-28℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在大約20℃的溫度下進行。
在一個實施方式中，去除保護基P3在大約25℃的溫度下進行。
具有式(VIII)之化合物(其中L1係適合的離去基團(例如鹵素或-SO2Me，等))可以從具有式(IX)之化合物(其中R4係烷基基團(例如甲基，等)並且P4係保護基團(例如SEM)))，藉由與具有式(XVII)之化合物(其中L5係適合的離去基團(例如鹵素，或OSO2CF3))，在適合的Pd催化劑和膦配位基的存在下，與適合的鹼(例如碳酸銫)在適合的溶劑(例如二和水的混合物)中在適合的條件(例如加熱或在微波反應器中)下發生反應來製備。
具有式IX之化合物可以藉由本領域中熟知的方法製備。
具有式(III)之化合物也可以藉由具有式(VI)之化合物(其中R4係烷基基團(例如甲基或乙基))，在適合的溶劑(例如MeOH)中用適合的鹼(例如氨)處理來製備。
當需要具有式(I)之化合物的藥學上可接受的鹽時，它可以藉由例如所述化合物與適合酸或適合鹼的反應獲得。
當需要具有式(I)之化合物的藥學上可接受的前藥時，它可以使用常規程序獲得。舉例來說，具有式(I)之化合物的體內可裂解的酯可以藉由例如包含羧基的具有式(I)之化合物與藥學上可接受的醇的反應獲得。關於前藥的另外的資訊已在上文中提供。
也應瞭解，在上文提及的一些反應中，可能必需或所希望的是保護化合物中的任何敏感性基團。必需或所希望保護的情況和適用於保護的方法為熟習該項技術者所知。常規保護基團可以根據標準實踐使用(出於說明，參見T.W.格林(Green)，有機合成中的保護基團(Protective Groups in OrganicSynthesis)，約翰.威利父子出版公司(John Wiley and Sons)，1991)。因此，如果反應物包括如胺基、羧基或羥基的基團，那麼在此提及的一些反應中可能所希望的是保護該基團。
適合的胺基或烷基胺基保護基為例如醯基，例如烷 醯基，如乙醯基；烷氧羰基，例如甲氧羰基、乙氧羰基或三級-丁氧羰基；芳基甲氧羰基，例如苯甲氧羰基；或芳醯基，例如苯甲醯基。關於以上保護基的去除保護基條件必然隨保護基的選擇而變化。因此，舉例來說，如烷醯基或烷氧羰基或芳醯基的醯基可以例如藉由用如鹼金屬氫氧化物(例如，氫氧化鋰或氫氧化鈉)的適合鹼進行水解來移除。可替代地，如三級-丁氧羰基的醯基可以例如藉由用如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸的適合酸處理來移除，且如苯甲氧羰基的芳基甲氧羰基可以例如藉由經如鈀-碳-的催化劑氫化或藉由用路易斯酸(Lewis acid)(例如三(三氟乙酸)硼)處理來移除。用於一級胺基的適合的替代保護基為例如酞醯基，它可以藉由用例如二甲胺基丙胺的烷基胺或用肼處理來移除。
用於羥基基團的適合的保護基係，例如，醯基基團，例如鏈烷醯基基團，例如乙醯基、芳醯基基團、例如苯甲醯基、或芳基甲基基團，例如苄基。使以上保護基團脫保護的條件將必然隨著保護基團的選擇而變化。因此，例如，醯基基團(例如，鏈烷醯基或芳醯基基團)可以例如藉由與適合的鹼(例如鹼金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰或氫氧化鈉)水解被去除。可替代地，芳基甲基基團如苄基基團可以藉由例如在催化劑(如鈀碳)上的氫化被去除。
適合的羧基保護基為例如酯化基團，例如甲基或乙基，它可以例如藉由用如氫氧化鈉的鹼進行水解來移除；或例如三級-丁基，它可以例如藉由用酸(例如有機酸，如三氟乙酸)進行處理來移除；或例如苯甲基，它可以例如藉由經如鈀/碳的催化 劑進行氫化來移除。
可以使用於化學領域中熟知的常規技術於合成的任何便利階段移除該等保護基。
在此所定義的某些中間體(例如具有式II、III、IV、V、VI和VII之化合物，特別係具有式II和VI之化合物)為新穎的且提供該等中間體作為本揭露的另外多個特徵。
生物分析
使用以下測定來測量本揭露的該等化合物的作用。
化合物處理
使用Echo 555聲學分配器(Labcyte IncTM)，將用於ERK2質譜分析法和A375磷酸-p90RSK測定的所有化合物或DMSO(二甲亞碸)從包含100%(v/v)DMSO或100% DMSO中10mM化合物的來源板直接分配進測定板。取決於測定，隨後是兩個單獨的板製備。在工作流程A中，將10mM化合物原料使用固定-尖96-頭安捷倫V製備型液體處理器(fixed-tip 96-head Agilent VPrep liquid handler)(加利福尼亞聖克拉拉安捷倫科技公司(Agilent Technologies))以1：100稀釋以給出四種中間體稀釋液(10mM、100μM、1μM、10nM)。在工作流程B中，將10mM化合物原料使用Tecan Freedom Evo(Tecan Group Ltd.，瑞士)以1：10進行稀釋，並且使用Echo 555和Labcyte LX以1：100稀釋以產生在三個Labcyte合格的源板(1mM、10μM、100nM)上的三種中間體稀釋液。然後由Echo 555使用該等中間體稀釋液板來生成具有12點劑 量範圍(10、3、1、0.25、0.1、0.03、0.01、0.0025、0.001、0.0003、0.0001、0.0000125μM)的最終測定-就緒化合物板來計算化合物IC50，其中測定中總DMSO濃度係1%。對於ERK2，使用質譜測定工作流程B。對於A375磷酸-p90RSK細胞測定，Echo使用工作流程A中描述的中間體1：100稀釋液板將化合物和DMSO直接分配至具有12點劑量範圍(30、10、3.125、1.25、0.3、0.1、0.03125、0.0125、0.003、0.001、0.0003125、0.00003μM)的細胞板中計算化合物IC50，其中測定中總DMSO濃度係0.3%。
ERK2 Rapidfire質譜抑制的催化測定
使MEK U911-活化的ERK2蛋白質在內部表現和純化。在測定緩衝液中製成酶和底物溶液，該測定緩衝液由50mM Tris(pH 7.5)、10mM MgCl2、0.1mM EGTA(乙二醇四乙酸)、10mM DTT(二硫蘇糖醇)和0.01%(v/v)CHAPS(3-[(3-膽醯胺基丙基)二甲基醯胺]-1-丙烷磺酸鹽)組成。在測定緩衝液中製備1.2nM ERK2蛋白質並且將10μl分配至包含測試和參比對照化合物的聚丙烯384-孔板(#781201，Greiner)的每個孔中。在室溫下使酶和化合物預培養15分鐘之後，添加由在測定緩衝液中16μM Erktide(IPTTPITTTYFFFK，#61777，AnaSpec)和120μM ATP(三磷酸腺苷)(測量Km(measured Km))組成的10μl底物溶液。在添加80μl 1%(v/v)甲酸淬滅之前允許該反應在室溫進行20分鐘。然後在RapidFire質譜平臺(安捷倫)上運行該等測定板來測量底物(非磷酸化的Erktide)和產物(磷酸化的Erktide)水平。分析數據並且使用Genedata Screener®軟體計算IC50(半最大抑制 濃度)。
A375磷酸-p90RSK細胞測定
在A375細胞系中進行磷酸-p90RSK細胞測定，該細胞系係具有上調MAPK通路的BRAF突變的人類惡性黑色素瘤，並且因此具有提高的磷酸-ERK和磷酸-p90RSK的內源水平。將A375細胞在細胞培養基中培養，該細胞培養基由DMEM(杜氏改良的伊格爾氏培養基)、10%(v/v)胎牛血清和1%(v/v)L-穀胺醯胺組成。收穫之後，將細胞分配至黑色384-孔Costar板(#3712，康寧公司(Corning))以給出40μl細胞培養基總體積中每孔2400個細胞，並且在旋轉培養箱中在37℃、90%相對濕度以及5% CO2下培養過夜。使用Labcyte Echo 555聲學分配器將測試化合物和參比對照組直接計量加入至細胞板。然後將該等細胞板在37℃下培養2小時，之後藉由添加在PBS/A(4%最終濃度)中的20μl 12%甲醛進行固定，隨後是20分鐘室溫培養，並且然後使用BioTek Elx405洗板機用150μl PBS/A(含有白蛋白的磷酸鹽緩衝鹽水)洗滌2x。使細胞在室溫下用20μl在PBS/A中的0.1% Triton X-100滲透化，持續20分鐘，並且然後用100μl PBS/A洗滌1x。將初始的磷酸-p90RSK(Thr359)(D1E9)兔單株抗體(#8753，細胞傳訊科技公司(Cell Signaling Technology))以1：1000稀釋於測定緩衝液(0.05%(v/v)Tween，5%(v/v)胎牛血清，在PBS/A)中，每孔添加20μl，並將該等板在4℃下培養過夜。將細胞板用200μl PBS/T(含有Tween-20的磷酸鹽緩衝鹽水)洗滌2x，然後向每孔中添加20μl在Alexa Fluor® 647山羊抗兔IgG二級抗體(#A31573， 分子探針公司，生命科技公司)的測定緩衝液中的1：500稀釋液，以及Hoechst 33342的1：5000稀釋液。在室溫下培養90分鐘後，將板用200μl PBS/T洗滌2x，並將40μl PBS/A添加至每孔中。將染色的細胞板用黑色密封件覆蓋，並且然後在Cellomics Arrayscan成像平臺(賽默科技公司)上使用具有10×物鏡的XF53濾光器讀數，使用LED光源設置來分析細胞核的Hoeschst33342(405nM)染色和二級抗體的磷酸-p90RSK(647nM)染色。分析數據並且使用Genedata Screener®軟體計算IC50。
如在此提出的化合物在以上測定中通常具有<0.5mM，例如<0.2mM的酶活性。
對於該等實例產生以下數據(以下數據可以是來自單個實驗的結果或兩個或更多個實驗的平均值；與本申請要求優先權的申請中呈現的數據的差別係由於測試的進一步重複引起平均值的略微變化)：
在以下MEK自身磷酸化ADP-Glo測定中，實例1、2、3、4、6、7、9、10、11、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27和28的化合物示出對ERK2的選擇性比MEK高出500倍。
MEK自身磷酸化ADP-Glo測定
活化的MEK蛋白由MRC-PPU(DU911，鄧迪(Dundee)，英國)提供或表現並且內部純化。用ADP-GloTM激酶測定套組(普洛麥格(Promega)，麥迪森(Madison)，WI，美國))，在Greiner 384-孔白色低容量板中進行MEK測定。將2μl的6nM活化的MEK蛋白質，在由50mM Tris(pH 7.5)、10mM DTT、0.1mM EGTA、0.01% v/v Tween20和10mM MgCl2組成的測定緩衝液中，分配至含有測試和參比對照化合物的板的每個孔中。在室溫下使酶和化合物預培養15分鐘之後，添加由在測定緩衝液中的20μM ATP(K Mapp ATP)組成的2μl底物溶液。在藉由添加2μl的ADP-Glo試劑以停止該反應之前，允許該測定反應在室溫下進行90min。然後將該等板覆蓋並且在室溫下培養40min。在使用PHERAstar讀板機(TTP萊伯泰科公司(BMG Labtech GmbH)，Offenburg，德國)讀取發光信號之前，添加4μl的激酶檢測試劑並且將該等板培養30min。
組合研究
材料與方法
A549係KRAS基因(G12S)中攜帶致癌性突變的人類非小細胞肺癌細胞系。將雌性裸鼠(哈倫(Harlan)，英國)以5 x 106 A549細胞(ATCC)/小鼠皮下移植(s.c.)到左側腹上。
藉由每週兩次卡尺測量監測腫瘤生長並且使用橢圓公式(π/6×寬度×寬度×長度)計算腫瘤體積。當腫瘤達到約200-300mm3體積時，將動物隨機分成7-11隻動物的組並且用司美替尼(selumetinib)(ARRY-142886)25mg/kg BiD和實例18a 25mg/kg QD(在司美替尼首次給藥後4小時)的持續組合方案治療，兩者藉由經口途徑給藥。開始給藥後每兩周測量腫瘤體積。
在HPMC/Tween(0.5% Methocel(羥丙基甲基纖維素)/0.1%聚山梨醇酯80)中配製司美替尼，將該懸浮液攪拌過夜。在10% DMSO、90%的40% Kleptose溶液(Kleptose係源自羅蓋特藥物公司(Roquette-Pharma)(商標)羥丙基β-環糊精，適於體內使用和配製)中配製實例18a。
藉由實例18a與MEK抑制劑(司美替尼)的組合抑制腫瘤生長
在A549異種移植模型中進行研究。司美替尼以每天給予兩次(BiD)，相隔8小時，並且實例18a每天給予一次(QD)，在第一次司美替尼給藥之後4小時。兩種化合物均持續給予3週。在運載體組中給予兩種運載體。司美替尼和實例18a相對於僅用運載體的對照減少了腫瘤的生長(圖5中所示)。司美替尼加上實例18a的組合導致進一步減少腫瘤的生長，存在在一些動物中消退的證據。
組合研究-細胞生長抑制
細胞系和治療
A549係KRAS基因(G12S)中攜帶致癌性突變的人類非小細胞肺癌細胞系。H2122係KRAS基因(G12C)中攜帶致癌性突變的人類非小細胞肺癌細胞系。H2009係KRAS基因(G12A)中攜帶致癌性突變的人類非小細胞肺癌細胞系。Calu6係KRAS基因(G13K)中攜帶突變的人類非小細胞肺癌細胞系。所有細胞系從美國典型培養物保藏中心獲得。
將所有細胞系在潮濕環境中在37℃和5% CO2保持並且將其在補充有10% FBS和2mmol/L穀胺醯胺的RPMI-1640生長培養基中生長。使用先前描述的短串聯重複分析(大衛斯(Davies)BR，格林伍德(Greenwood)H，達德利(Dudley)P等人：AZD5363 AKT抑制劑臨床前藥理學：藥效學抗腫瘤活性，單一療法與遺傳背景的關聯(Preclinical pharmacology of AZD5363,an inhibitor of AKT：Pharmacodynamics,antitumor activity,and correlation of monotherapy activity with genetic background.)。分子癌症療法(Mol Cancer Ther)11(4)：873-87,2012)確認所有細胞系的一致性。將化合物溶解在DMSO中得到10mmol/L的濃度並且在氮氣下貯藏。
細胞生長測定
將細胞接種到384-孔黑色透明底板中(Greiner Bio-One，Stonehouse，英國)，培育18-24小時並使用增加濃度的 實例18和的司美替尼(0-10μmol/L)以6 x 6給藥矩陣處理。將細胞接種到使得在未處理的孔中的細胞在分析結束時為大約80%鋪滿(confluent)的濃度。處理後3天，使用先前描述的Sytox Green端點(大衛斯(Davies)BR，格林伍德(Greenwood)H，達德利(Dudley)P等人：AZD5363 AKT抑制劑臨床前藥理學：藥效學抗腫瘤活性，單一療法與遺傳背景的關聯。分子癌症療法(Mol Cancer Ther)11(4)：873-87,2012)確定活細胞數目。簡言之，將稀釋於TBS-EDTA緩衝液中的Sytox Green核酸染料以0.13μmol/L的最終濃度添加至細胞，並使用Acumen Explorer(TTP萊伯泰科公司(TTP Labtech)，梅爾本，英國)檢測死細胞數量。然後藉由過夜添加皂苷(0.03%終濃度，稀釋於TBS-EDTA緩衝液中)使細胞滲透化並且測量總的細胞計數。藉由從細胞總數中減去每孔的死細胞數目來確定活細胞計數。進行給藥前測量指出在實驗開始時的活細胞數目並且因此指出治療方案是否已導致細胞死亡。數據使用如下NCI公式作為%生長呈現；{[(Ti-Tz)/(C-Tz)]x 100}+100，針對其中Ti>/=Tz的值{[(Ti-Tz)/Tz]x 100}+100，針對其中Ti<Tz的濃度
其中，Tz代表時間為零時的活細胞數目，C代表對照生長並且Ti代表在每個藥物方案存在下的活細胞數目。這一公式給出從0%到200%的百分比。抗增生作用藉由從0%(對細胞生長無作用)至100%(對細胞生長完全抑制)的分數指示；細胞死亡藉由從100%(無細胞死亡)至200%(殺死所有細胞)的分數指出。
組合活性分析
如先前所述(萊哈爾(Lehar)J，克魯格(Krueger)AS，艾弗裡(Avery)W，等人：協同藥物組合傾向於改進治療相關的選擇性(Synergistic drug combinations tend to improve therapeutically relevant selectivity).Nat Biotechnol 27(7)：659-66,2009和Rickles RJ,Tam WF,Giordano TP,3rd，等人：腺苷β-2腎上腺素能受體激動劑：藉由系統組合篩選發現的新穎的選擇性且協同性多發性骨髓瘤靶(Adenosine A2A and beta-2 adrenergic receptor agonists：Novel selective and synergistic multiple myeloma targets discovered through systematic combination screening).分子癌症療法(Mol Cancer Ther)11(7)：1432-42,201229)，在Genedata篩選器12(Genedata,Basel，瑞士)，在6 x 6劑量矩陣中使用洛伊劑量加和性模型(Loewe dose-additivity model)分析組合活性(協同作用)。這種加和性模型提供了零參比，這種零參比係由如果這兩種試劑為同一種藥物的預期響應而預測的。從源於實驗的3-維劑量作用表面減去由兩種單一試劑響應曲線預測的3-維模型表面以得到不同體積。這種過量矩陣體積可以積分以得到協同分數。協同分數>5用於鑒別在最初高通量篩選中有意義的組合。
該等結果(在圖6-17中示出)展示了變作為單一療法實例18能夠抑制一組具有KRAS突的癌症細胞系的生長並且這種作用藉由使用司美替尼治療協同增強。對每個細胞系的協同分數為25(A549)、14.3(H2122)、67.5(H2009)、以及3(Calu6)。以上的協同分數為三個或更多個獨立實驗的平均數。
根據本揭露的另一個方面，提供一種醫藥組成物， 該醫藥組成物包括一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
用於片劑配製物的適合的醫藥學上可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑、成粒劑和崩散劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑以及抗氧化劑。另外適合的藥學上可接受的賦形劑可以是螯合劑。片劑配製物可以未包覆包衣或包覆包衣，以改變它們的崩散性和隨後活性成分在胃腸道內的吸收，或改良它們的穩定性和/或外觀，在任一種情況下，均使用在本領域中熟知的常規包衣劑和程序。
經口使用的組成物可以可替代地呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體狀稀釋劑混合；或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油混合。
水性懸浮液總體上包含呈細粉形式的活性成分以及一種或多種懸浮劑、分散劑或潤濕劑。水性懸浮液還可以包含一種或多種防腐劑、抗-氧化劑、著色劑、調味劑和/或甜味劑。
油性懸浮液可以藉由將活性成分懸浮於植物油中或礦物油中來配製。油性懸浮液還可以包含增稠劑。可以添加甜味劑(如上文所列的甜味劑)和調味劑，以提供可口的口服製劑。該等組成物可以藉由添加抗-氧化劑來保存。
適於藉由添加水來製備水性懸浮液的可分散性散劑和顆粒劑總體上包含活性成分以及分散劑或潤濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑。也可以存在如甜味劑、調味劑以及著色劑的 另外賦形劑。
本揭露的該等醫藥組成物還可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油或礦物油或任何該等油的混合物。乳液也可以包含甜味劑、調味劑以及防腐劑。
糖漿和酏劑可以使用甜味劑配製，並且也可以包含緩和劑、防腐劑、調味劑和/或著色劑。
醫藥組成物還可以呈無菌可注射水性或油性懸浮液的形式，它可以根據已知程序，使用上述適當分散劑或潤濕劑和懸浮劑中的一者或多者來配製。無菌可注射製劑還可以是於無-毒腸胃外-可接受的稀釋劑或溶劑系統中的無菌可注射溶液或懸浮液。
用於經吸入給藥的組成物可以呈常規加壓氣霧劑的形式，該加壓氣霧劑經安排以分配或者呈包含細粉狀固體的氣霧劑形式或者液滴形式的活性成分。可以使用如揮發性氟化烴或烴的常規氣霧劑推進劑，並且便利地安排氣霧劑設備以分配定量的活性成分。乾粉吸入器也可以是適合的。
對於配製物進一步的資訊，讀者可參考培格曼出版社(Pergamon Press)1990的綜合藥物化學數據庫(Comprehensive Medicinal Chemistry)(科溫漢施(Corwin Hansch)；編輯部)，第5卷第25.2章。
結合一種或多種賦形劑以產生單一劑型的活性成分的量將必然變化，這取決於該治療的主體和具體給藥途徑。舉例 來說，向人類經口給藥將總體上需要例如從1mg到2g活性劑(更適當地從100mg到2g，例如從250mg到1.8g，如從500mg到1.8g，尤其從500mg到1.5g，宜為從500mg到1g)與適當且適宜量的賦形劑混合給予，該等賦形劑可以在總組成物的從約3重量%到約98重量%內變化。應瞭解，如果需要大劑量，那麼可能需要多種劑型，例如兩種或更多種片劑或膠囊，其中活性成分的劑量宜在其間劃分。典型地，單位劑型將包含約10mg至0.5g的本揭露的化合物，儘管單位劑型可以包含高達1g。適宜地，單一固體劑型可以包含1mg與300mg之間的活性成分。
為實現治療或預防目的的本揭露的化合物的劑量大小自然將根據疾病病況的性質和嚴重程度、動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑，根據熟知的醫學原則而變化。
在使用本揭露的化合物以實現治療或預防目的時，總體上將給予具有式(I)之化合物以致接受例如每千克體重1mg到每千克體重100mg的範圍內的日劑量，如果需要那麼分次給藥。總體來講，當採用腸胃外途徑時，將給予更低劑量。因此，例如，對於靜脈內給予來說，總體上將使用介於例如每千克體重1mg到每千克體重25mg範圍內的劑量。類似地，對於經吸入給予來說，將使用介於例如每千克體重1mg到每千克體重25mg範圍內的劑量。然而，經口給予(確切地說以片劑形式)為較佳的。
在本揭露的一個方面，本揭露的化合物或其藥學上可接受的鹽係作為片劑給予的，該等片劑包括10mg至500mg的具有式(I)之化合物(或其藥學上可接受的鹽)，其中一個或多個片 劑係如所需進行給予以實現所希望的劑量。
如上所述，已知經由ERK的傳訊藉由以下作用中的一者或多者引起腫瘤形成：介導癌症和其他細胞的增殖、介導血管生成事件以及介導癌細胞的活動、遷移性以及侵襲性。我們已發現，本揭露化合物具有強力抗腫瘤活性，該活性據相信借助於抑制涉及信號轉導步驟的ERK而獲得，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞增殖和存活以及使腫瘤細胞轉移的侵襲性和遷移能力。
因此，本揭露化合物可以具有作為抗腫瘤劑的價值，具體來說，作為哺乳動物癌細胞增殖、存活、活動、播散以及侵襲的選擇性抑制劑，從而抑制腫瘤生長和存活並抑制轉移性腫瘤生長。確切地說，本揭露化合物可以具有在抑制和/或治療實體腫瘤疾病方面作為抗增殖性及抗侵襲性藥劑的價值。確切地說，本揭露化合物可以有用於預防或治療對ERK的抑制敏感且涉及信號轉導步驟的那些腫瘤，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞增殖和存活以及使腫瘤細胞轉移的遷移能力和侵襲性。另外，本揭露化合物可以有用於預防或治療單獨或部分地藉由抑制ERK來介導的那些腫瘤，即該等化合物可以用於在需要此類治療的溫血動物中產生ERK抑制作用。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，在如人類的溫血動物中用作藥物。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，適用於在如人類的溫血動 物中產生抗增殖性作用。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽之用途，用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽用於製造，在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽用於製造在如人類的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中產生抗增殖性作用之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種藉由在需要此類治療的溫血動物(如人類)中抑制和/或治療實體腫瘤疾病來產生抗侵襲性作用之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中預防或治療癌症。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，用於製造用於在如人類的溫血動物中預防或治療癌症的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中預防或治療癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中預防或治療實體腫瘤疾病。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，用於製造在如人類的溫血動物中預防或治療實體腫瘤疾病所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種在需此類要治療的溫血動物(如人類)中減少個體體內癌細胞的數目之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中減少個體體內癌細胞的數目之方法，該方法包 括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本揭露的另一個方面征，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中減小腫瘤的大小之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本揭露的另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中減小或抑制腫瘤的生長或增殖之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本揭露的另一個方面征，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中防止轉移或減小轉移的範圍之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種在需此類要治療的患有癌症或處於患上癌症的風險的個體中延長存活(包括但不限於無進展存活(PFS)或總體存活)之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
術語“有效量”或“治療有效量”係指(i)治療特定障礙、疾病或病症的量，(ii)減弱、改善或消除一種或多種特定障礙、疾病或病症的症狀，(iii)延遲或預防在此描述的一種或 多種特定障礙、疾病或病症的症狀的發作。在癌症的情況下，有效量可以降低癌細胞的數量；降低腫瘤大小；抑制(例如在某種程度上減慢和較佳的是停止)腫瘤細胞浸潤至外周器官；抑制腫瘤轉移；在某種程度上限制腫瘤生長；和/或在某種程度上減輕與癌症相關的症狀中的一種或多種。對於癌症療法，例如可以藉由評估疾病進展時間(TTP)和/或評估應答率(RR)來測定療效。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於預防或治療過度增生性疾病或由RAS/RAF/MEK/ERK激酶調節的病症。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造預防或治療過度增生性疾病或由RAS/RAF/MEK/ERK激酶調節的病症所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種適用於預防或治療過度增生性疾病或由RAS/RAF/MEK/ERK激酶調節的病症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽，用於預防或治療過度增生性疾病或由ERK介導的病症。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造預防或治療過度增 生性疾病或由ERK介導的病症所使用藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種適用於預防或治療過度增生性疾病或由ERK介導的病症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於預防或治療對ERK的抑制敏感的那些腫瘤。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造預防或治療對ERK的抑制敏感的那些腫瘤所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種適用於預防或治療對ERK的抑制敏感的那些腫瘤之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對ERK的抑制作用。
根據另一個方面，提供了如在上文中定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽在用於提供對ERK的抑制作用中使用的藥劑的製造中之用途。
根據另一個方面，還提供一種用於提供對ERK的抑 制作用的方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對ERK2的選擇性抑制作用。
根據本揭露的一個另外的方面，提供了如在上文中定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽在用於在提供對ERK2的選擇性抑制作用中使用的藥劑的製造中之用途。
根據本揭露的另一個方面，還提供一種用於提供對ERK2的選擇性抑制作用之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
具有式(I)之化合物可以有效治療RAS/RAF/MEK/ERK激酶通路被活化的任何癌症。已報導的具有此類活化的癌症的實例包括急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓單核球性白血病、多發性骨髓瘤、慢性骨髓性白血病、結腸直腸癌(CRC)、乳癌、膀胱癌、頭頸癌、腦癌、神經膠質母細胞瘤、神經胚細胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、卵巢癌、睾丸癌、甲狀腺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、小細胞肺癌、黑色素瘤、1型神經纖維瘤病(NF1)、膽道癌。
在一個方面中，化合物可以有效治療選自下組的癌症，該組由以下各項組成：NSCLC、胰腺癌、CRC、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌。
在一個方面中，化合物可以有效治療KRAS或BRAF突變型癌症。
在一個方面中，化合物可以有效治療MAPK通路依賴性癌症，例如NSCLC、胰腺癌和CRC；在一些實施方式中，此類癌症係KRAS突變型癌症，如在此描述的。
在另一個方面中，化合物可以有效治療BRAF突變型黑色素瘤。
在另一個方面中，化合物可以有效治療選自下組的癌症，該組由以下各項組成：NRAS突變型黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療NSCLC、胰腺癌、CRC、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療NSCLC、胰腺癌和CRC。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療BRAF突變型黑色素瘤。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療BRAF突變型黑色 素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌。
根據另一個方面，提供了一種如在此之前所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療由ERK介導的癌症，其中該癌症已經對一種或多種其他MAPK通路抑制劑形成抗性。
根據另一個方面，提供一種用於治療選自下組癌症的方法，該組由以下各項組成：NSCLC、胰腺癌、CRC、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌，該方法包括向所述動物給予有效量的如上定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種用於治療選自下組癌症之方法，該組由以下各項組成：NSCLC、胰腺癌和CRC，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供了一種用於治療BRAF突變型黑色素瘤的方法，該方法包括給予有效量的如在上文中所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種用於治療選自下組癌症的方法，該組由以下各項組成：BRAF突變型黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌，該方法包括向所述動物給予有效量的如上文定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供了一種用於治療由ERK介導的癌症的方法，其中該癌症已經對一種或多種其他MAPK通路抑制劑形成抗性，該方法包括給予有效量的如在上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造治療NSCLC、胰腺癌、CRC、黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造治療選自NSCLC、胰腺癌和CRC中的癌症所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造治療BRAF突變型黑色素瘤所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造治療NRAS突變型黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、兒童NF1、甲狀腺分化癌和膽道癌所使用的藥物之用途。
根據另一個方面，提供了一種如上文所定義的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於製造治療由ERK介導的癌症所使用的藥物之用途，其中該癌症已經對一種或多種其他MAPK通路抑制劑形成抗性。
如在上文中所述，具有式(I)之化合物的體內作用可以部分地由在給予具有式(I)之化合物之後在人體或動物體內形成的一種或多種代謝物來發揮。
在以上組成物、方法和用途中，具有式(I)之具體的化合物係具有該等實例的化合物或其藥學上可接受的鹽。組成物、方法和用途的進一步的說明性實例為：2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基 -7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-氯苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-(二氟甲基)苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮； (R)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4- 基)-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3,4-二氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基 -1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物；(R)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)- 酮；以及(R)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮。
在此所定義的抗-癌治療可以按單獨療法形式施用，或除本揭露的化合物外，還可以涉及常規外科手術或放射線療法或化學療法。在某些實施方式中，具有式(I)之化合物可以與另一種具有抗過度增殖性質或在治療過度增生性障礙時起作用的化合物相組合。該另外的化合物可以適當地具有對式(I)之化合物的互補活性，使得它們不會彼此產生不利影響。在一些方面中，此類組合療法可以預防或延遲固有的或獲得性抗性，該抗性可歸因於使用MEK抑制觀察到的的RAS/RAF/MEK/ERK通路的活化以預防或延遲經由RAS通路活化介導的固有或獲得性抗性。
對於給定的過度增生性疾病，除了提供改進的治療，與接受不同治療的相同患者經歷的生命品質相比，給予某些組成物可以提高患者的生命品質。例如，與如果接受僅一種單獨試劑作為治療的相同患者將經歷的生命品質相比，將組成物給予患者可以提供提高的生命品質。例如，組合療法可以降低治療劑所需的劑量。該組成物也可能導致腫瘤負荷減小，並由此減少相關的不良事件。
因此，在一個實施方式中，提供了具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽、以及一種另外的抗腫瘤物質，用於聯合治療癌症。
上文所定義的抗-癌治療可以按單獨療法形式施用，或除本揭露的化合物外，還可以涉及常規外科手術或放射線療法或化學療法。該化學療法可以包括以下抗腫瘤劑類別中的一者或多者：-
(i)抗增生/抗腫瘤藥物和它們的組合，如用於醫學腫瘤學，例如烷化劑(例如-順鉑、奧沙利鉑(oxaliplatin)、卡鉑(carboplatin)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、氮芥(nitrogen mustard)、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)、替莫唑胺(temozolamide)和亞硝基脲)；抗代謝物(例如吉西他濱(gemcitabine)和抗葉酸劑，如氟嘧啶類，像5-氟尿嘧啶和替加氟(tegafur)、雷替曲塞(raltitrexed)、甲胺蝶呤(methotrexate)、阿糖胞苷、以及羥基脲)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環類，像像阿黴素(adriamycin)、博來黴素(bleomycin)、多柔比星(doxorubicin)、道諾黴素(daunomycin)、表柔比星(epirubicin)、伊達比星(idarubicin)、絲裂黴素-C(mitomycin-C)、更生黴素(dactinomycin)和光神黴素(mithramycin))；抗有絲分裂劑(例如長春花生物鹼類，像長春新鹼、長春鹼、去乙醯長春醯胺(vindesine)和長春瑞濱(vinorelbine)，以及紫杉烷類，像泰素(taxol)和多西他賽(taxotere)和保羅激酶(polokinase)抑制劑)；和拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素類(epipodophyllotoxins)，像依託泊苷(etoposide)和替尼泊苷(teniposide)、安吖啶(amsacrine)、拓撲替康(topotecan)以及喜樹鹼(camptothecin))；
(ii)抗激素劑，如抗雌激素(例如他莫昔芬(tamoxifen)、氟 維司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、雷諾昔酚(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)以及艾多昔芬(iodoxyfene))、抗雄激素(例如比卡魯胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼魯米特(nilutamide)以及乙酸環丙孕酮(cyproterone acetate))、LHRH拮抗劑或LHRH激動劑(例如戈舍瑞林(goserelin)、亮丙瑞林(leuprorelin)以及布舍瑞林(buserelin))、孕激素(例如乙酸甲地孕酮(megestrol acetate))、芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑(anastrozole)、來曲唑(letrozole)、維拉唑(vorazole)以及依西美坦(exemestane))以及5α還原酶抑制劑(如非那雄安(finasteride))；
(iii)生長因子功能的和它們的下游傳訊途徑的抑制劑：包括任何生長因子或生長因子受體靶的Ab調節劑、由施特恩(Stern)等人綜述(腫瘤學/血液病學中的關鍵綜述(Critical Reviews in Oncology/Haematology)，2005,54、11-29頁)；還包括的是此類靶的小分子抑制劑，例如激酶抑制劑-實例包括anti-erbB2抗體曲妥珠單抗(trastuzumab)[HerceptinTM]，抗-EGFR抗體帕尼單抗(panitumumab)，抗EGFR抗體西妥昔單抗(cetuximab)[愛必妥、C225]和酪胺酸激酶抑制劑，該等酪胺酸激酶抑制劑包括erb B受體家族的抑制劑，例如表皮生長因子家族受體(EGFR/erbB1)酪胺酸激酶抑制劑，例如吉非替尼(gefitinib)或埃羅替尼(erlotinib)，erbB2酪胺酸激酶抑制劑，例如拉帕替尼(lapatinib)，以及混合的erb1/2抑制劑，例如阿法替尼(afatanib)；類似策略可用於其他類別的生長因子和它們的受體，例如：肝細胞生長因子家族或它們的受體(包括c-met和ron)的抑制劑；胰島素和胰島素 生長因子家族或它們的受體(IGFR、IR)的抑制劑，血小板-衍生生長因子家族或它們的受體(PDGFR)的抑制劑，以及由其他受體酪胺酸激酶，例如c-kit、AnLK和CSF-1R介導的傳訊的抑制劑；還包括在更寬PI3激酶傳訊路徑中靶向傳訊蛋白質的調節劑，例如其他PI3激酶同功型(如PI3K-β)和ser/thr激酶(如AKT、mTOR、PDK、SGK、PI4K或PIP5K)的抑制劑；還包括以上未列出的絲胺酸/蘇胺酸激酶的抑制劑，舉例來說，如維羅非尼(vemurafenib)的raf抑制劑，如司美替尼(AZD6244ARRY-142886)、考比替尼(cobimetinib)或GDC-0623(參見例如WO 2015/0832840)的MEK抑制劑，如伊馬替尼(imatinib)或尼祿替尼(nilotinib)的Abl抑制劑，如依魯替尼(ibrutinib)的Btk抑制劑，如福他替尼(fostamatinib)的Syk抑制劑，極光激酶抑制劑(例如AZD1152)，如JAK、STAT以及IRAK4的其他ser/thr激酶抑制劑，以及細胞週期素依賴性激酶抑制劑；
iv)DNA損傷傳訊路徑的調節劑，例如PARP抑制劑(例如奧拉帕尼)、ATR抑制劑或ATM抑制劑；
v)細胞凋亡和細胞死亡路徑的調節劑，例如Bcl家族調節劑(例如ABT-263/Navitoclax、ABT-199)；
(vi)抗血管生成劑，如抑制血管內皮生長因子的作用的那些藥劑，[例如抗-血管內皮細胞生長因子抗體貝伐單抗(bevacizumab)(AvastinTM)和例如VEGF受體酪胺酸激酶抑制劑，如索拉非尼(sorafenib)、阿西替尼(axitinib)、帕佐泮尼(pazopanib)、舒尼 替尼(sunitinib)以及凡德他尼(vandetanib)(以及藉由其他機制起作用的化合物(例如利諾胺(linomide)、整合素αvβ3功能的抑制劑以及血管生長抑素))]；
(vii)血管破壞劑，如考布他汀A4；
(viii)抗侵襲劑，例如c-Src激酶家族抑制劑，像(達沙替尼(dasatinib)，《藥物化學雜誌》(J.Med.Chem.)，2004,47,6658-6661)和伯舒替尼(bosutinib)(SKI-606)，以及金屬蛋白酶抑制劑，像馬立馬司他(marimastat)、尿激酶纖維蛋白溶酶原活化劑受體功能的抑制劑或針對肝素酶的抗體]；
(ix)免疫療法方法，包括例如增加患者腫瘤細胞的免疫原性的離-體和體-內方法，如以如白介素2、白介素4或颗粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子的細胞因子轉染，減少T-細胞無變應性之方法，使用如細胞因子-轉染的樹突狀細胞的經轉染免疫細胞之方法，使用細胞因子-轉染的腫瘤細胞系之方法，以及使用抗-個體基因型抗體之方法。特定實例包括靶向PD-1(例如BMS-936558)或CTLA4(例如伊匹單抗(ipilimumab)和曲美單抗(tremelimumab))的單株單抗抗體；
(x)反義或基於RNAi的療法，例如有關所列目標的那些療法。
(Xi)基因療法方法，包括例如置換異常基因(如異常p53或異常BRCA1或BRCA2)之方法；GDEPT(基因-定向酶前-藥療法)方法，如使用胞嘧啶脫胺酶、胸苷激酶或細菌性硝基還原酶的那些方法；以及增強患者對化學療法或放射線療法的耐受性之方法 (如多重-耐藥性基因療法)。
根據這一方面，提供一種適用於治療癌症之組合，包括如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽和另一種抗腫瘤劑，尤其是在上文的(i)-(xi)下所列的抗腫瘤劑中的任一者。具體地，在以上(i)-(xi)列出的抗腫瘤劑為要治療的具體癌症的護理標準；熟習該項技術者將理解“護理標準”的含義。
因此，在另一個方面中，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑的組合，尤其是選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑。
根據另一個方面，提供一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據另一個方面，提供一種用於治療癌症的醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(ix)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據另一個特徵，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合之用途，它係用於製造用於溫-血動物(如人類)的癌症之藥物。
根據另一個特徵，提供一種治療需要此類治療的溫-血動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合。
在另一個方面中，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑之組合，尤其是選自在上文的(i)下所列的一者之抗腫瘤劑。
在另一個方面中，提供一種適用於治療癌症之組合，包括如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽和在上文的(i)下所列的任一種抗腫瘤劑。
根據另一個方面，提供一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據另一個方面，提供一種用於治療癌症之醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據另一個特徵，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合用於製造用於溫-血動物(如人類)的癌症的藥物的用途。
因此，在本揭露的另一個特徵中，提供一種治療需要此類治療的溫-血動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合。
在另一個方面中，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑之組合，尤其是選自在上文的(iii)下所列的一者的抗腫瘤劑。
在另一個方面中，提供一種適用於治療癌症之組合，包括如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽和在上文的(iii)下所列的任一種抗腫瘤劑。
根據另一個方面，提供一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(iii)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據本揭露的另一個方面，提供一種用於治療癌症的醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(iii)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合，與藥學上可接受的稀釋劑或載體相聯合。
根據另一個特徵，提供一種具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(iii)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合用於製造用於溫-血動物(如人類)的癌症的藥物之用途。
因此，在本揭露的另一個特徵中，提供一種治療需要此類治療的溫-血動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有式(iii)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)下所列的一者的抗腫瘤劑之組合。
在一個方面中，在上文的(iii)中所列的抗腫瘤劑的適當的實例係也對MAPK激酶起作用，尤其對RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯(例如MEK抑制劑)起作用的那些藥劑。
在另一個方面中，提供一種適用於治療癌症之組合，包括如上文所定義的具有式(I)之化合物或其醫藥學上可接受的鹽和MEK抑制劑(例如司美替尼(ARRY-142886))。
在一個方面中，具有式(I)之化合物與司美替尼(ARRY-142886)的以上組合適用於治療依賴於MAPK通路的任何癌症(例如NSCLC、胰腺癌和CR癌)，視情況與護理性療法標準組合。
具有式(I)之化合物與以上(iii)中列出的抗腫瘤試劑、尤其作用於MAPK激酶的另一種試劑、尤其作用於RAS-RAF-MEK-ERK傳訊級聯(例如MEK抑制劑)之組合/可尤其有用於治療KRAS或BRAF中突變流行率更高的腫瘤。
本揭露的特定組合包括在此之實例化合物(或其醫藥學上可接受的鹽)和如上文所述的MEK抑制劑(例如司美替尼(ARRY-142886))中的任一者。包括本文的任何化合物和MEK抑 制劑(例如司美替尼(ARRY-14288))的本揭露組合的進一步的說明性實例係：2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-氯苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3-(二氟甲基)苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)- 酮；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮；(S)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；7-(3,4-二氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)- 酮 乙磺酸加合物；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物；(R)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；以及(R)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮。
在所有以上組合中，應瞭解，該組合也可以在如熟習該項技術者所瞭解的護理治療標準下給予，如上文(i)到(xi)之其他治療。在其他方面中，適當地，護理標準可以選自以上(i)。
因此，在本揭露的另一個方面中，提供一種適用於治療癌症的三重組合a)具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽；b)從以上(iii)中選擇的化合物(例如作用於MAPK激酶的另一種化合物)或其藥學上可接受的鹽；以及c)用於待治療的癌症的護理療法標準。
適當地，如熟習該項技術者所瞭解，護理療法標準可以根據其常見給藥方案給予。
根據另一個方面，提供一種套組(kit)，包括具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合。
根據另一個方面，提供了一種套組，該套組包括：a)一種處於第一單位劑型的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽；b)一種處於第二單位劑型的選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑；以及c)用於容納所述第一和第二劑型的容器裝置。
根據另一個方面，提供了一種套組，該套組包括： a)一種處於第一單位劑型的具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽；b)一種處於第二單位劑型的選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑；c)用於容納所述第一和第二劑型之容器裝置；以及視情況d)使用說明書。
在此，當使用術語“組合”時，應理解的是這係指同時、分開或順序給藥。在本揭露的一個方面，“組合”係指同時給藥。在本揭露的另一個方面，“組合”係指分開給藥。在本揭露的另一個方面，“組合”係指順序給藥。當給藥係依序或分別進行時，給予第二組分不應延遲以致失去有利的作用。
雖然具有式(I)之化合物主要具有作為用於溫-血動物(包括人類)的治療劑的價值，但它們也有用在需要抑制ERK的任何時候。因此，它們有用於作為用於發展新生物測試以及搜尋新藥理學藥劑中的藥理學標準。
個人化醫療
本揭露的另一個方面係基於鑒別編碼KRAS的狀態和用具有式(I)之化合物治療的易感性之間的聯繫。因此，這一方面提供用於選擇用具有式(I)之化合物治療的患者，尤其是癌症患者和/或避免更不可能與該治療發生治療反應的患者治療而由此避免不必要的治療以及可能與該無效治療有關的任何副作用的機會、方法以及工具。
本揭露涉及患者選擇工具和方法(包括個人化藥物)。該選擇係基於待治療的腫瘤細胞係具有野生型抑或突變型KRAS基因。KRAS基因狀態可以因此用作ERK抑制劑的治療易感性的生物標記。
明確需要將針對以下患者富集或用於選擇該等患者的生物標記：該等患者的腫瘤將對ERK(如具有式(I)之化合物)治療起反應。鑒別最可能對藥劑起反應的患者的患者選擇生物標記在癌症治療中為理想的，因為它們減少具有非反應性腫瘤的患者的不必要治療，從而減少該等藥劑的潛在副作用。
生物標記可以描述為“作為正常生物過程、致病過程或對治療性干預的藥理學反應的指示劑客觀地經測量且評估的特性”。生物標記為與一種特定病狀或疾病有關的任何可鑒別且可測量的指示劑，其中在生物標記的存在或含量與該病狀或疾病的一些方面(包括該病狀或疾病的存在、它的含量或變化含量、它的類型、它的階段、它的易感性或對用於治療該病狀或疾病的藥物的反應)之間存在相關性。相關性可以為定性的、定量的或定性且定量的。典型地，生物標記為化合物、化合物片段或化合物組。該等化合物可以為在生物體中發現或藉由生物體產生的任何化合物，包括蛋白質(和肽)、核酸以及其他化合物。
生物標記可以具有預測能力，並且因此可以用於預測或檢測特定病狀或疾病的存在、含量、類型或階段(包括特定微生物或毒素的存在或含量)、對特定病狀或疾病的易感性(包括遺傳易感性)或對特定治療(包括藥物治療)的響應。據認為在 藥物發現和發展的未來，生物標記將藉由改良研究與發展程序的效率而發揮日益重要的作用。生物標記可以用作診斷劑、疾病進展監測劑、治療監測劑以及臨床結果預測劑。舉例來說，不同生物標記研究專案試圖鑒別出特定癌症和特定心血管疾病以及免疫疾病的標記。據相信新的經驗證的生物標記的發展將使醫療和藥物發展成本顯著降低，並且使多種疾病和病狀的治療顯著改善。
為了最佳設計臨床試驗並且為了從該等試驗獲得最多資訊，生物標記可以為需要的。該標記在替代物和腫瘤組織中可以為可測量的。該等標記理想地也將與功效相關並且由此可以最終用於患者選擇。
因此，本揭露的這一方面的根本技術問題為鑒別對用具有式(I)之化合物治療的患者分類之方法。該技術問題藉由提供在此的申請專利範圍和/或說明書中所表徵的實施方式來解決。
本揭露提供一種測定細胞對具有式(I)之化合物的敏感性之方法。該方法包括測定所述細胞中的KRAS基因狀態。如果該等細胞具有突變的KRAS基因，那麼該等細胞經鑒別為可能對具有式I的化合物敏感。因此預測具有突變的KRAS基因的那些患者尤其易受具有式(I)之化合物治療影響。如果一個細胞在細胞生長分析中抑制細胞數目增加(或者經由抑制細胞增殖和/或者經由增加細胞死亡)，那麼將該細胞定義為對具有式(I)之化合物敏感。本揭露方法有用於藉由生長抑制預測更可能對具有式(I)之化合物響應的細胞。
本揭露進一步部分地基於可以用於測定患者對具有式(I)之化合物的反應之方法，包括確定是否給予具有式(I)之化合物。確切地說，本揭露方法包括測定KRAS的基因狀態。突變的KRAS基因的存在指示腫瘤細胞當與具有式(I)之化合物接觸時更可能藉由生長抑制起反應。KRAS基因狀態可以因此用於選擇用具有式(I)之化合物治療的患者。
“代表腫瘤”的樣品可以為經分離的實際腫瘤樣品或者可以為已進一步加工的樣品，例如從腫瘤樣品進行PCR擴增的核酸樣品。
定義：
在這一個人化醫療部分中：
“等位基因”係指遺傳基因座的特定形式，藉由它的特定核苷酸或胺基酸序列與其他形式相區分。
“擴增反應”為導致目標核酸優於非目標核酸進行特異性擴增的核酸反應。聚合酶鏈反應(PCR)為熟知擴增反應。
“癌症”在此用於指由於細胞轉化成贅生性表型所出現的贅生性生長。該細胞轉化通常涉及遺傳突變。
“基因”為包含關於RNA產物的經調節生物合成的所有資訊的DNA區段，包括啟動子、外顯子、內含子以及可以位於控制表現的5'或3'側接區域內(不在該基因的轉錄部分內)的其他序列元件。
“基因狀態”係指該基因為野生型或者不是(即突變型)。
“標記”係指能夠產生指示在分析樣品中存在目標聚核苷酸的可檢測信號的組成物。適合標記包括放射性同位素、核苷酸發色團、酶、底物、螢光分子、化學發光部分、磁性粒子、生物發光部分等。因此，標記為藉由光譜、光化學、生物化學、免疫化學、電學、光學或化學手段可檢測的任何組成物。
“非同義變異”係指基因編碼序列中或與基因編碼序列重疊的變異(變化)，導致產生不同(經改變的)多肽序列。該等變異可能影響或可能不影響蛋白質功能並且包括錯義變異體(導致一個胺基酸取代另一個)、無義變異體(由於產生過早終止密碼子而產生截短多肽)以及插入/缺失變異體。
“同義變異”係指不影響所編碼多肽的序列的基因編碼序列中的變異(變化)。該等變異可以間接地(例如藉由改變基因表現)影響蛋白質功能，但在不存在相反證據的情況下，總體上假定為無害的。
“核酸”係指單股或雙股DNA和RNA分子，包括自然界中所發現的天然核酸和/或經修飾的具有經修飾的主鏈或鹼基的人工核酸，如本領域中已知。
“引物”係指能夠充當用於合成與待複製的核酸鏈互補的引物延伸產物的起始點的單股DNA寡核苷酸序列。引物的長度和序列必須使其能夠引發延伸產物的合成。典型引物在與目標序列實質上互補的序列長度中包含至少約7個核苷酸，但略微更長的引物為較佳的。通常，引物包含約15-26個核苷酸，但也可以採用更長或更短引物。
“多態位點”為基因座內導致在一個群體中發現至少兩種替代性序列的位置。
“多態現象”係指在個體中在多態位點處所觀察到的序列變異。多態現象包括核苷酸取代、插入、缺失以及微衛星，並且可以(但無需)引起基因表現或蛋白質功能方面可檢測的差異。在不存在對表現或蛋白質功能的影響證據的情況下，包括非同義變異體的常見多態現象總體上視為包括在野生型基因序列的定義中。人類多態現象和相關注釋的目錄包括驗證、觀察的頻率以及疾病關聯，由NCBI(dbSNP：http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/)維護。請注意，當用於基因序列的情形中時的術語“多態現象(polymorphism)”不應與當用於化合物的固態形式(即化合物的結晶或非晶性質)的情形中的術語“多晶型現象(polymorphism)”混淆。熟習該項技術者將藉由其背景瞭解所需的含義。
“探針”係指具有與待檢測的等位基因的目標序列完全互補的序列的單股序列特異性寡核苷酸。
“響應”係藉由根據實體腫瘤反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumours；RECIST)進行的測量來定義，涉及將患者主要分成兩個組：顯示部分響應或穩定疾病的組和顯示進行性疾病的跡象的組。
“嚴格的雜交條件”係指在42℃下在包括50%甲醯胺、5×SSC(750mM NaCl、75mM檸檬酸三鈉)、50mM磷酸鈉(pH 7.6)、5×鄧哈特溶液(Denhardt’s solution)、10%硫酸葡聚糖以及 20pg/mI變性剪切的鮭魚精子DNA的溶液中培養過夜，繼之以在0.1x SSC中在約65℃下洗滌過濾物。
“存活”涵蓋患者的整體存活和無進展存活。
“整體存活(OS)”定義為從給藥開始到由於任何原因死亡的時間。“無進展存活(PFS)”定義為從給藥開始到第一次出現進行性疾病或由於任何原因死亡的時間。
根據一個方面，本揭露提供一種用於選擇適於用具有式(I)之化合物治療的癌症患者之方法，該方法包括：(a)測試癌症患者以確定該患者腫瘤中的KRAS基因係野生型抑或突變型；並且基於以上來選擇用具有式(I)之化合物治療的患者。
在一個實施方式中，患者腫瘤的KRAS基因狀態由從所述患者中獲得的生物樣本決定。在一個實施方式中，該生物樣本係包含腫瘤細胞的樣本。在一個實例中，生物樣本係包含腫瘤DNA(例如血樣)的樣本。根據本揭露的一個方面，提供一種用於選擇用具有式(I)之化合物治療的患者之方法，該方法包括從包含腫瘤細胞或源自腫瘤細胞的核酸的患者中獲取樣本。確定該患者腫瘤細胞中的KRAS基因係野生型抑或突變型；並且基於以上來選擇用具有式(I)之化合物治療的患者。
該方法可以包括或不包括實際患者樣品分離步驟。因此，根據本揭露的一個方面，提供一種用於選擇用具有式(I)之化合物治療的患者之方法，該方法包括確定先前從患者分離的包 含腫瘤細胞或核酸的樣品中的KRAS基因為野生型抑或突變型；並且基於以上來選擇用具有式(I)之化合物治療的患者。
在一個實施方式中，如果腫瘤細胞具有突變型KRAS基因，那麼選擇該患者用具有式(I)之化合物治療。
根據本揭露的另一個方面，提供一種用於預測患者對具有式(I)之化合物的反應之方法，該方法包括確定患者的腫瘤細胞中的KRAS基因為野生型抑或突變型以及基於以上，預測患者對用具有式(I)之化合物治療的反應。
根據本揭露的另一個方面，提供一種用於測定在罹患癌症的人類患者中用具有式I的化合物治療的有效性的可能性的方法，該方法包括：測定患者的腫瘤細胞中的KRAS基因(多個)為野生型抑或突變型以及基於以上，預測患者對用具有式(I)之化合物治療的反應。
為了本揭露的目的，野生型的基因狀態打算表明基因的正常或恰當表現以及所編碼蛋白質的正常功能。相比之下，突變型狀態打算表明異常或不當基因表現，或蛋白質功能改變的表現，與癌症中突變型KRAS的已知作用(如在此所述)一致。任何數目的遺傳或後生變化(包括(但不限於)突變、擴增、缺失、基因組重排或甲基化特徵變化)可以導致突變體狀態。然而，如果該等變化仍然引起正常蛋白質或功能上等效變異體的恰當表現，那麼該基因狀態被視為野生型。典型地將不產生功能突變型基因狀態的變異體實例包括同義編碼變異體和常見多態現象(同義或非同義)。如下文所討論，基因狀態可以藉由功能分析來評 估，或者它可以從與參考序列的檢測偏差的性質推斷。
在某些實施方式中，KRAS基因的野生型或突變型狀態藉由該等基因中非同義核酸變異的存在或缺乏來確定。所觀察的非同義變異對應於未標注功能作用的已知常見多態現象，不促成突變型基因狀態。
KRAS基因庫登記細節：KRAS NM_004985
關於KRAS和KRAS蛋白質序列所揭露的基因和mRNA序列顯然各自為代表性序列。在正常個體中，每種基因存在兩個拷貝(母本和父本拷貝)，該等拷貝將可能具有一些序列差異，此外在一個群體內將存在基因序列的許多等位基因變異體。視為野生型的其他序列包括具有以下的序列：核酸序列的一種或多種同義變化(該等變化不改變所編碼的蛋白質序列)、改變蛋白質序列但不影響蛋白質功能的非同義常見多態現象(例如生殖系多態現象)以及內含子非剪接位點序列變化。
根據本揭露的另一個方面，提供一種用於測定在罹患癌症的人類患者中用具有式(I)之化合物治療的有效性的可能性之方法，該方法包括：檢測所述患者的KRAS基因中相對於野生型基因的至少一種非同義核酸變化的存在或缺乏，其中在KRAS基因中存在至少一種體細胞非同義核酸變化指示用具有式(I)之化合物治療可能為有效的。
根據本揭露的另一個方面，提供一種用於評估個體對用具有式(I)之化合物治療的易感性之方法，該方法包括： (i)確定個體的腫瘤細胞核酸中KRAS基因的非同義突變狀態；並且(ii)藉由參考腫瘤細胞中KRAS基因的非同義突變狀態來測定個體對用具有式(I)之化合物治療的可能易感性。
存在熟習該項技術者可獲得的用以確定KRAS的基因狀態的許多技術。基因狀態可以藉由測定核酸序列來確定。這可以經由對全長基因進行直接測序或分析該基因內的特異性位點，例如一般突變位點。
用於確定KRAS基因為野生型抑或突變型的替代性手段為評估轉錄基因的功能。這一KRAS基因的功能突變產生損害GTP水解能力的蛋白質。變異型KRAS保持活性的、GTP-結合的狀態，引起細胞中該路徑的下游傳訊的組成性和解除管制性刺激，包括(但不限於)Raf、PI3K和Ral路徑的活化。
當KRAS變異體在細胞中表現時，用於評估它們功能狀態的分析包括(但不限於)：(i)增加與Raf1的Ras結合域(RBD)結合；(ii)增加磷酸化ERK1/2、MEK1/2、或Akt的含量；(iii)增加用KRAS變異體轉染的NIH-3T3細胞的聚集和集落形成
樣品
待測試基因狀態的患者樣品可以為從個體獲得或從 個體可獲得的任何包含腫瘤組織、腫瘤細胞或包含腫瘤核酸的樣品。測試樣品宜為從個體獲得的血液樣品、口腔抹片、生檢體或其他體液或組織。特定實例包括：循環腫瘤細胞、血漿或血清中的循環DNA、從卵巢癌患者的腹水液分離的細胞、具有腫瘤的患者肺內的肺痰、來自乳癌患者的細針抽出物、尿液、外周血液、細胞刮片、毛囊、皮膚鑽孔(skin punch)或面頰樣品。
應瞭解，測試樣品同樣可以為對應於測試樣品中的序列的核酸序列，換句話說，樣品核酸中的所有或一部分區域可以在分析之前先使用任何便利技術(例如聚合酶鏈反應(PCR))擴增。核酸可以為基因組DNA或者分級的或全細胞RNA。在特定實施方式中，RNA為全細胞RNA且直接用作使用隨機引物或poly A引物來標記一個第一股cDNA的模板。可以根據標準方法從測試樣品提取該樣品中的核酸或蛋白質(參見格林(Green)和薩姆布魯克(Sambrook)編，《分子選殖實驗指南》(Molecular Cloning：A Laboratory Manual)，(2012，第4版，第1-3卷，ISBN 9781936113422)，紐約州冷泉港的冷泉港實驗室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.))。
本揭露的診斷方法可以使用先前從個體或患者獲取的樣品進行。該等樣品可以藉由冷凍或固定以及嵌埋於福馬林-石蠟或其他介質中來保存。可替代地，可以獲得且使用包含新鮮腫瘤細胞的樣品。
可以使用來自任何腫瘤的細胞應用本揭露方法。用具有式(I)之化合物治療的適合腫瘤已在上文中描述。
檢測核酸的方法
在本揭露的上下文中，可以採用突變型KRAS核酸的檢測來預測對藥物治療的反應。因為該等基因中的突變發生在DNA層面，所以本揭露方法可以基於檢測基因組DNA的突變或變化，以及轉錄物和蛋白質本身。所希望的可以是藉由分析轉錄物和/或多肽來確認基因組DNA突變，以便確保所檢測的突變實際上在該受試者中表現。
熟習該項技術者將清楚，存在可以用於檢測基因中一個或多個位置處變異體核苷酸的存在或缺乏的大量分析程序。一般來說，等位基因變異的檢測需要突變辨別技術、視情況擴增反應(如基於聚合酶鏈反應的擴增反應)以及視情況信號產生系統。在本領域中可獲得多種突變檢測技術並且該等突變檢測技術可以與信號產生系統組合使用，在本領域中可獲得許多信號產生系統。檢測等位基因變異的許多方法由諾勞(Nollau)等人，《臨床化學》(Clin.Chem.)，1997，43，1114-1120；安德森SM.(Anderson SM.)，《分子診斷學專家評論》(Expert Rev Mol Diagn.)，2011，11，635-642；邁耶森M.(Meyerson M.)等人，《自然綜述．遺傳學》(Nat Rev Genet.)，2010，11，685-696綜述；以及綜述於標準教科書中，例如《突變檢測的實驗室方案》(“Laboratory Protocols for Mutation Detection”)，由U.蘭德葛籣(U.Landegren)編，牛津大學出版社(Oxford University Press)，1996和《PCR》(“PCR”)，第2版，由牛頓(Newton)和格雷安(Graham)編，拜爾斯科學出版社有限公司(BIOS Scientific Publishers Limited)，1997。
如上所指出，測定具有癌症的患者中存在或缺乏KRAS基因的特定變化或多種變化可以按多種方式進行。此類測試通常使用從生物樣品收集的DNA或RNA進行，該等生物樣品例如組織生檢體、尿液、大便、痰、血液、細胞、組織刮片、乳房抽出物或其他細胞物質，並且可以藉由多種方法進行，該等方法包括(但不限於)PCR、與等位基因特異性探針雜交、酶突變檢測、錯配的化學裂解、質譜或DNA定序，包括微定序。
適合的突變檢測技術包括擴增阻礙突變系統(ARMSTM)、擴增阻礙突變系統線性延伸(ALEXTM)、競爭性寡核苷酸引發系統(COPS)、塔克曼(Taqman)、分子信標(Molecular Beacons)、限制性片段長度多態現象(RFLP)以及基於限制位點的PCR以及螢光共振能量轉移(FRET)技術。
在特定實施方式中，用於測定生物標記基因內的核苷酸所用的方法係選自：等位基因特異性擴增(等位基因特異性PCR)(如擴增阻礙突變系統(ARMS))、定序、等位基因辨別分析、雜交、限制性片段長度多態現象(RFLP)或寡核苷酸連接分析(OLA)。
從樣品產生用於分析的核酸總體上需要核酸擴增。許多擴增方法依賴於酶鏈反應(如聚合酶鏈反應、連接酶鏈反應或自持續序列複製)或來自已進行選殖的所有或一部分載體。較佳的是，根據本揭露的擴增為指數擴增，如藉由例如聚合酶鏈反應所展現。
許多目標和信號擴增方法已描述於文獻中，例如該 等方法的總體綜述描述於蘭德葛籣U.(Landegren,U.)等人，《科學》，1988 242，229-237和路易士R.(Lewis,R.)，《基因工程新聞》(Genetic Engineering News)1990，10，54-55中。該等擴增方法可以用於本揭露的方法中，並且包括聚合酶鏈反應(PCR)、原位PCR、連接酶擴增反應(LAR)、連接酶雜交、Qβ噬菌體複製酶、基於轉錄的擴增系統(TAS)、基因組擴增與轉錄物定序(GAWTS)、基於核酸序列的擴增(NASBA)以及原位雜交。適用於不同擴增技術的引物可以根據本領域中已知的方法製備。
聚合酶鏈反應(PCR)PCR為核酸擴增方法，尤其描述於美國專利第4,683,195號和第4,683,202號中。PCR由DNA聚合酶產生的引物延伸反應的重複週期組成。目標DNA係熱變性的且使兩個寡核苷酸雜交，這兩個寡核苷酸囊括待擴增的DNA相對鏈上的目標序列。該等寡核苷酸變成引物用於DNA聚合酶。藉由引物延伸複製DNA來製造兩個鏈的第二拷貝。藉由重複熱變性、引物雜交以及延伸的週期，目標DNA可以在約二到四小時內擴增一百萬倍或更多。PCR為分子生物學工具，它必須與檢測技術結合用於測定擴增結果。PCR的優點為它藉由將目標DNA的量在約4小時內擴增一百萬到十億倍來增加敏感性。PCR可以用於在診斷背景中擴增任何已知核酸(莫(Mok)等人，《婦科腫瘤學》(Gynaecologic Oncology)，1994，52：247-252)。
如擴增阻礙突變系統(ARMSTM)的等位基因特異性擴增技術(牛頓等人，《核酸研究》，1989，17，2503-2516)也可以用於檢測單鹼基突變。在恰當的PCR擴增條件下，位於引物的3' 末端的單鹼基錯配對完全匹配的等位基因的優先擴增來說已足夠(牛頓等人，1989，前述)，允許辨別密切相關的物質。使用上述引物的擴增系統的基礎係具有錯配3'-殘基的寡核苷酸在恰當的條件下將不充當PCR引物。這一擴增系統允許在瓊脂糖凝膠電泳之後僅藉由檢查反應混合物來進行基因分型。
擴增產物的分析可以使用能夠根據它們的大小分離擴增產物的任何方法來進行，包括自動化和手動凝膠電泳、質譜等。
核酸分離、擴增以及分析方法對熟習該項技術者來說為常規的並且方案的實例可以見於例如格林和薩姆布魯克編，《分子選殖實驗指南》，(2012，第4版，第1-3卷，ISBN 9781936113422)，紐約州冷泉港的冷泉港實驗室出版社)。PCR擴增中所用方法的尤其有用的方案來源係《PCR(基礎：從背景到實驗台)》(PCR(Basics：From Background to Bench))，M.J.麥克弗森(M.J.McPherson)，S.G.梅爾樂(S.G.Mailer)，R.貝農(R.Beynon)，C.豪(C.Howe)，斯普林格出版社(Springer Verlag)；第1版(2000年10月15日)，ISBN：0387916008。
根據本揭露的另一個方面，提供一種具有式(I)之化合物用於治療患有已經鑒別為具有突變型KRAS基因的腫瘤細胞的癌症患者之用途。
根據本揭露的另一個方面，提供一種具有式(I)之化合物，用於治療具有已經鑒別為攜帶突變型KRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
在另一個實施方式中，本揭露涉及包括具有式(I)之化合物的醫藥組成物，它用於預防和治療具有已經鑒別為攜帶突變型KRAS基因的腫瘤細胞的癌症。
對於所有以上方面，所測定/鑒別的KRAS的突變體形式處於基因中的所有位置處。
在另外的方面，本揭露的化合物也可以有用於治療BRAF突變型癌症。上述提供的個人化醫療部分中KRAS突變型癌症的資訊可以類似地應用於BRAF型抗性癌症，除基因庫登錄細節之外。BRAF基因庫登陸細節：BRAF NM_004333。
【實例】
現將於下列實例中說明本揭露，在該等實例中，總體上：
(i)除非另行說明，否則在環境溫度(即在17℃到25℃範圍內)下和在如氮氣的惰性氣體的氣氛下進行操作；
(ii)藉由旋轉蒸發或利用Genevac設施或拜泰齊(Biotage)v10蒸發器在真空中進行蒸發且在藉由過濾移除殘餘固體狀之後進行處理常式；
(iii)在自動化的Teledyne Isco CombiFlash® Rf或Teledyne Isco CombiFlash® Companion®上使用預裝的RediSep Rf GoldTM矽膠柱(20-40μm，球形顆粒)、GraceResolvTM筒(Davisil®二氧化矽)或Silicycle筒(40-63μm)進行快速層析純化。
(iv)在具有UV收集的Gilson製備型HPLC儀器上進行製備層析法；
(v)在具有UV收集的吉爾森(Gilson)儀器(233注射器/級分收集器、333和334泵、155 Uv檢測器)或Interchim PuriFlash 4250-250系統或具有諾爾(Knauer)K2501 UV檢測器的諾華賽(Novasep)LC50系統上進行手性製備層析法；
(vi)產率(當存在時)並不必需為可獲得的最大值；
(vii)一般而言，具有式I的終末-產物的結構藉由核磁共振(NMR)譜確認；NMR化學位移值係以δ級測量的[質子磁共振光譜使用Bruker Avance 500(500MHz)或Bruker Avance 400(400 MHz)儀測定]；測量在環境溫度下進行，除非另行說明；使用以下縮寫：s，單峰；d，二重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；dd，雙二重峰；ddd，雙二重峰的雙重峰；dt，雙三重峰；bs，寬信號；其中“DMSO”係指在所使用的NMR中的溶劑，應當理解為d6-DMSO；
(viii)一般而言，具有式I的終-末產物在液相層析法之後還藉由質譜法來表徵(LCMS或UPLC)；如下進行UPLC：使用配備有沃特斯SQ質譜儀的沃特斯UPLC(柱溫度40，UV=220-300nm，質譜=具有陽性/陰性轉換的ESI)以1mL/min流速使用97% A+3% B至3% A至97% B的溶劑系統進行1.50mins(連同平衡回到起始條件等的總執行時間1.7分鐘)，其中A=在水中0.1%甲酸(用於酸工作)或在水中0.1%氨(用於鹼工作)B=乙腈。對於酸分析使用的柱係沃特斯Acquity HSS T3 1.8μm 2.1 x 50mm，對於鹼分析使用的柱係沃特斯Acquity BEH 1.7μm 2.1 x50 mm；如下進行LCMS：使用裝配有沃特斯ZQ ESCi質譜儀和Phenomenex Gemini-NX(50 x 2.1mm 5μm)柱的沃特斯Alliance HT(2795)以1.1mL/min的流速，95% A至95% B進行4min，具有0.5min的保持時間。將改性劑保持在恒定的5% C(50：50乙腈：含0.1%甲酸的水)或D(50：50乙腈：含0.1%氫氧化銨(0.88 SG)的水，取決於其是酸性還是鹼性方法。
(ix)通常使用SCX-2(拜泰劑(Biotage)，丙磺酸官能化的二氧化矽，使用三官能矽烷製造，未封端的)筒進行離子交換純化。
(x)中間體純度藉由薄層層析、質譜的、HPLC(高效液相層 析)和/或NMR分析來評估；
(xi)使用Bruker D4進行X-射線粉末繞射分析。藉由將結晶物質樣品安裝在Bruker單矽晶體(SSC)晶圓支架上且借助於顯微鏡載片將樣品展布成薄層來測定X射線粉末繞射圖。使樣品以每分鐘30轉離心(以改良計數統計)且用由在40kV和40mA下操作的銅制長細聚焦管產生的具有1.5418埃的波長的X射線來照射。使準直X射線源穿過設定在V20下的自動可變發散狹縫且引導反射的輻射穿過5.89mm防散射狹縫和9.55mm檢測器狹縫。將樣品以反射幾何學以θ-2θ配置在2°到40° 2θ掃描範圍內進行測量，其中每0.02°增量暴露標稱0.12秒。該儀器裝備有位置敏感性檢測器(聯凱(Lynxeye))。X射線粉末繞射領域的技術人員應當理解的是峰值的相對強度可以被例如大小超過30微米並且非統一長寬比的顆粒影響，這可能影響樣品的分析。熟習該項技術者也應當理解，反射位置可以受樣品在衍射計中所處的確切高度和衍射計的零點校正影響。樣品的表面平面性也可能具有細微影響。因此，所呈現的衍射圖數據不應視為絕對值。
(xii)在TA儀器Q2000 DSC上進行差示掃描熱量測定(DSC)。典型地，少於5mg的物質被包含在裝有蓋子的標準鋁盤中，將其以10℃/分鐘的恒定加熱速率在從25℃至300℃的溫度範圍內加熱。以50mL/min的流速使用採用氮氣的淨化氣體。
(xiii)已使用以下縮寫：-
第二代XantPhos預催化劑 氯[(4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基)-2-(2′-胺基-1,1′-聯苯基)]鈀(II)
實例1
2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將NaH(12.05mg，0.50mmol)添加到在THF(1.5mL)中的7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體1；100mg,0.25mmol)和N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲醯胺(中間體2；94mg，0.75mmol)中。將所得的溶液在25℃下攪拌3小時。添加EtOH(2mL)，並且攪拌10min。將反應混合物用水(50mL)進行淬滅，並且用EtOAc(30 x 25mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發以提供粗產物。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯XBridge Prep C18 OBD柱，5μm矽膠，19mm直徑，100mm長度)，使用水(包含0.1% NH4HCO3)和MeCN的漸減極性的混合物作為洗提液進行純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例1；40mg，38%)。1HNMR(300MHz,DMSO,26℃)δ 2.51(3H,s),3.70(3H,s),3.84-3.88(2H,m),4.40-4.44(2H,m),4.76(2H,s),6.30(1H,s),7.14-7.18(2H,m),7.32-7.35(2H,m),7.64-7.69(1H,m),7.93(1H,s),8.46(1H,d),9.38(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=416。
中間體1
7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將過硫酸鉀(1.01g，3.75mmol)分批添加至在MeOH(5mL)中的7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體3；275mg，0.75mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌12小時。然後將該反應加熱至40℃並且進一步攪拌6小時。然後將該反應混合物用DCM(100mL)稀釋，並且用水(25mL x 2)洗滌。將有機層經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發以提供粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到10% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲基磺醯基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體1；210mg，70%)。1HNMR(300MHz,DMSO,26℃)δ 2.50(3H,s),3.46(3H,s),3.85-3.95(2H,m),4.42-4.46(2H,m),4.86(2H,s),7.15-7.20(2H,m),7.64-7.69(1H,m),8.15(1H,d),8.40(1H,s),9.05(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=399。
中間體2
N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲醯胺
將甲酸(3.1mL，67.35mmol)添加至乙酸酐(7.7mL，75.42mmol)中以給出無色溶液。將所得到的溶液在45℃下攪拌持續45分鐘。然後將該反應混合物冷卻至0℃，並且添加1-甲基-1H-吡唑-5-胺(2g，20.59mmol)。將所得到的溶液在0℃下攪拌持續10分鐘。將該反應混合物然後傾倒入水(50mL)和EtOAc(50mL)的混合物中，並且將該反應混合物用飽和K2CO3調節至pH 8。將該水層用EtOAc(6 x 50mL)萃取，並且用水(2 x 50mL)洗滌。將合併的有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出呈白色固體的所希望的N-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)甲醯胺(中間體2；1.21g，47%)1H-NMR(300MHz,CDCl3,26℃)3.80(3H,s),6.11(1H,s),7.44(2H,s),8.35(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=126。
中間體3
7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將4-三丁基錫烷基-2-硫代甲基嘧啶(2.66g，6.41mmol)添加到在DMF(5mL)中的2-溴-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體4；1.87g，5.82mmol)和Pd-118([1,1'-雙(二-三級-丁基膦基)二茂鐵]鈀(II)(0.204g，0.29mmol)中。將所得的溶液在150℃下，在微波反應器中攪 拌8小時。將該反應混合物用矽藻土(celite)過濾，用EtOAc(200mL)稀釋，並且依次用水(50mL x 2)洗滌。將合併的有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物。將粗產物藉由C18-快速層析法，洗提梯度為在水中的0到50% MeCN。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為灰色固體的7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-2-(2-(甲硫基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體3；0.28g，13%)。1H-NMR(400MHz,CDCl3,22℃)δ 2.50(3H,s),2.63(3H,s),3.85-3.89(2H,m),4.39-4.43(2H,m),4.85(2H,s),7.15-7.19(2H,m),7.59-7.69(2H,m),8.23(1H,s),8.63(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=367。
中間體4
2-溴-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將乙酸鈉(3.24g，39.6mmol)分批添加至冷卻至0℃的在MeOH(100mL)中的乙基1-(2-胺基乙基)-4-溴-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體5；5.3g，15.8mmol)和6-甲基-2-吡啶甲醛(1.92g，15.8mmol)中。將所得溶液然後在0℃下攪拌15分鐘。在0℃下分批添加三乙醯氧基硼氫化鈉(10.1g，47.5mmol)，並且將所得的溶液在室溫下攪拌12小時。將該反應混合物然後用飽和NaHCO3調節至pH7-8，並且用DCM(250mL)稀釋。將該DCM 相然後用水(50mL x 2)順序地洗滌。將合併的有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到9% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥，以得到作為白色固體的2-溴-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體4；2.5g，49%)。1H-NMR(300MHz,DMSO,27℃)δ 2.44(3H,s),3.80-3.84(2H,m),4.28-4.32(2H,m)4.73(2H,s),7.13-7.16(2H,m),7.63-7.68(1H,m),7.96(1H,s)。m/z：(ES+)[M+H]+=321。
中間體5
乙基1-(2-胺基乙基)-4-溴-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽
將乙基4-溴-1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體6；4.6g，12.70mmol)添加到在1,4-二(40mL)中的HCl(過量)中，並且將所得溶液在室溫下攪拌2小時。將溶劑在減壓下去除並且將所得固體用庚烷研磨並且過濾以得到呈白色固體的乙基1-(2-胺基乙基)-4-溴-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體5；5.30g，140%)。1H-NMR(300MHz,DMSO,25℃)δ 1.33(3H,t),3.03-3.16(2H,m),4.35(2H,q),4.63(2H,t),7.34(1H,s)。
中間體6
乙基4-溴-1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸 酯
在0℃下，在氮氣下，將NBS(10.05g，56.5mmol)分批添加到在DCM(80mL)和DMF(80mL)中的乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體7；16g，56.5mmol)中。將所得溶液然後在0℃下攪拌12小時。將該反應混合物用DCM(300mL)稀釋，並且依次用水(100mL x 2)洗滌。將有機層經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發以提供粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到20% EtOAc的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的乙基4-溴-1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體6；4.60g，22.49%)。1H-NMR(300MHz,DMSO,27℃)δ 1.39-1.44(12H,m),3.47-3.53(2H,m),4.37-4.44(2H,q),4.53(1H,s),7.04(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=362。
中間體7
乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，將三級丁基(2-溴乙基)胺基甲酸酯(17.59g，78.49mmol)添加到在DMF(200mL)中的乙基1H-咪唑-2-甲酸酯(10g，71.36mmol)和K2CO3(11.83g，85.63mmol)並且將所得混合物在80℃下攪拌8小時。將該反應混合物用EtOAc(300mL)稀釋，並且依次用水(50mL x 2)洗滌。將該水層然後用EtOAc(50mL x 5)進一步萃取。將合併的有機層經MgSO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在石油醚中0至100% EtOAc的洗提梯度純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色液體的乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體7；10.7g，53%)。1HNMR(400MHz,DMSO,21℃)δ 1.20(3H,t),1.29(9H,s),3.26-3.34(2H,m)4.27(2H,q),4.32-4.40(2H,m),6.90(1H,s),7.06(1H,s),7.32(1H,s)。
實例2
(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-7-(3-氯苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體8；216mg，0.56mmol),1-甲基-1H-吡唑-5-胺(59.4mg，0.61mmol)，碳酸銫(363mg，1.11mmol)和BrettPhos第三代預催化劑(25.2mg，0.03mmol)懸浮於三級-丁醇(8mL)中，並且用氮氣脫氣10分鐘。在氮氣下，將該反應混合物加熱至80℃持續2天。然後允許該反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯(100mL)稀釋並且用飽和水性碳酸氫鈉(25mL)洗滌。將該有機相經Na2SO4乾燥，並且在真空在濃縮以給出棕色固體(250mg)。將該固體吸收在DMSO(5mL)中並且過濾。將DMSO溶液藉由製備型HPLC(沃特斯XBridge Prep C18 OBD柱，5μm二氧化矽、30mm直徑、100mm長度)，使用水(含有1% NH3)以及MeCN的漸減極性混合物作為洗提液進行純化。從該包含產物的級分中去除溶劑，將該固體溶解於DCM和甲醇的混合物中，然後吸附到矽膠上。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，洗提梯度為在EtOAc中的0至15% MeOH。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例2；43mg，17.22%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)1.13(3H,d),3.71(3H,s),3.95-4.02(1H,m),4.28-4.45(3H,m),5.07(1H,d),6.31(1H,d),7.32-7.43(5H,m),7.46(1H,s),7.92(1H,s),8.48(1H,d),9.33(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 449。
中間體8
(S)-7-(3-氯苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將氫化鈉(60%分散體)(25.03mg，0.63mmol)添加到在DMF(12mL)中的(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體9；150mg，0.57mmol)中。將所得懸浮液在20℃下攪拌持續30分鐘。添加3-氯苄基氯化物(101mg，0.63mmol)，隨後添加四丁基碘化銨(42.0mg，0.11mmol)並且將所得溶液在20℃下攪拌18小時。將該反應混合物傾倒入飽和水性NH4Cl(25mL)中，並且用EtOAc(75mL)萃取該水相。將該有機相經Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮以給出呈淺棕色固體的(S)-7-(3-氯苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體8；221mg，100%)。1H NMR(400MHz,DMSO,21℃)1.13(3H,d),4.00(1H,td),4.27(1H,dd),4.38(1H,d),4.46(1H,dd),5.07(1H,d),7.36-7.4(2H,m),7.41(1H,dd),7.47(1H,s),7.93(1H,d),8.27(1H,s),8.75(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 388。
中間體9
(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在室溫下，在氮氣下，將(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯，HCl(中間體10；2.16g，6.24mmol)和7N的氨在甲醇(107mL，748.7mmol)中的混合物攪拌1小時。將揮發物在減壓下去除並且將所得固體用二乙醚和DCM研磨以獲得灰白色固體。將該固體用水研磨並且用二乙醚洗滌，並且然後從DCM/甲醇混合物中吸附到二氧化矽上。將粗混合物藉由矽膠層析(以在DCM中的0-10%甲醇來洗提)進行純化。合併純的級分並且蒸發以得到白色固體，將該白色固體用二乙醚研磨以得到呈白色固體的(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體9；0.6g，37%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)1.22(3H,d),3.93-4.08(2H,m),4.39(1H,d),7.89(1H,d),8.23(1H,s),8.36(1H,s),8.73(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 264。
中間體10
(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯鹽酸鹽
向(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體11；2.56g，6.25mmol)在1,4-二 (50mL)中的溶液中添加HCl(4N，在1,4-二，39mL，156.2mmol中)，並且將該反應在環境溫度下攪拌2小時。將揮發物在減壓下蒸發以得到為膠質的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯.HCl(中間體10；2.16g)，將其不經進一步純化用於中間體9的製備。m/z：ES+[M+H]+ 310。
中間體11
(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在22℃下，將K2CO3(4.32g，31.3mmol)添加到在1,4-二(50mL)中的(S)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體12；2.23g，9.38mmol)、乙基4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體14；1.58g，6.25mmol)和1,4,7,10,13,16-六氧雜環十八烷(0.413g，1.56mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌3小時。蒸發該有機相以得到膠質，將其懸浮在二氯甲烷中並且用水萃取，並且藉由穿過相分離筒乾燥。蒸發得到呈固體的(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體11；2.56g，100%)。m/z：ES+[M+H]+ 410。
中間體12
(4S)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物
在15℃下，將氯化釕(III)水合物(0.062g，0.28mmol)添加到乙腈(778mL)和水(419mL)中的三級丁基(4S)-4-甲基-2-氧化(oxido)-氧雜噻唑啉-2-鎓-3-甲酸酯(中間體13；87.36g，394.80mmol)的攪拌混合物中，隨後添加分批添加高碘酸鈉(93g，434.29mmol)。將該雙相混合物在20℃攪拌1小時。添加水(600mL)，並且將該混合物萃取到乙酸乙酯(3 x 600mL)中。將合併的有機物用水(500mL)，鹽水(250mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾並且在真空中濃縮以給出呈灰白色固體的(S)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體12；84.3g，355mmol，90%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,30℃)1.51(3H,d),1.55(9H,s),4.19(1H,dd),4.37-4.46(1H,m),4.66(1H,dd)。
中間體13
三級丁基(4S)-4-甲基-2-氧化-氧雜噻唑啉-2-鎓-3-甲酸酯
向在-55℃下的1H-咪唑(106g，1553.20mmol)和三乙胺(124mL，893.09mmol)在無水二氯甲烷(1427mL)中的溶液中逐滴添加亞硫醯氯(32.6mL，446.54mmol)(放熱，保持T<-40℃)。將該混合物攪拌5分鐘，然後冷卻至-60℃，並且將(S)-三 級丁基1-羥基丙-2-基胺基甲酸酯(Sigma-Aldrich；68.04g，388.30mmol)在無水二氯甲烷(1427mL)中的溶液藉由滴液漏斗經3.5小時逐滴添加。將該反應混合物攪拌然後加溫至室溫過夜。添加水(750mL)並且將該相分離。將該水層進一步萃取到二氯甲烷(500mL)中。將合併的有機物用水(250mL)和飽和鹽水(250mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾並且在真空中濃縮以給出呈淡色油的三級丁基(4S)-4-甲基-2-氧化-氧雜噻唑啉-2-鎓-3-甲酸酯(中間體13；87.3g，395mmol，100%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,30℃)1.50(3H,d),4.29(1H,d),4.68(1H,t),4.77(1H,dd)。
中間體14
乙基4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在環境溫度下，將第二代XPhos預催化劑(0.435g，0.55mmol)添加到在二(100mL)中的乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體15；3.86g，11.05mmol)，4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-雙(1,3,2-二氧雜戊硼烷)(4.21g，16.58mmol)和KOAc(2.17g，22.10mmol)的溶液裡，並且將所得溶液加熱至85℃持續3小時。允許該反應混合物冷卻50℃，並且添加碳酸銫(7.20g，22.10mmol)，2,4-二氯嘧啶(1.646g，11.05mmol)和水(20mL)，隨後添加Pd(PPh3)4(0.638g，0.55mmol)，並且將該反應混合物在85℃加熱2小時。將該反應混 合物然後穿過矽藻土(celite)，並且用MeOH洗滌，並且將揮發物在減壓下去除。添加水和DCM並且萃取有機層，並且藉由穿過相分離筒乾燥。將該等揮發物然後在減壓下去除以得到不純的棕色固體乙基4-(2-氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(4.24g，11.07mmol)。將2,2,2-三氟乙酸(8.48mL，110.73mmol)添加至在DCM中(100mL)的乙基4-(2-氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(4.24g，11.07mmol)中，並且將所得的溶液在環境溫度下攪拌2小時，並且然後在環境溫度下靜置16小時。將揮發物在減壓下去除，將所得固體溶解於DCM和水中並且通過矽藻土層過濾。將該水層分離並且用飽和用飽和碳酸氫鈉鹼化，並且萃取到DCM中，然後藉由穿過相分離筒乾燥，並且將該溶劑去除以得到固體。將該有機層穿過相分離筒，與固體合併並且預吸附到二氧化矽上，並且經受矽膠層析用在DCM中的0-100%二乙醚洗提。合併純的級分並且蒸發以得到呈固體的乙基4-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體14；1.58g，57%)1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)1.35(3H,t),4.38(2H,q),7.93(1H,d),8.19(1H,s),8.73(1H,d),13.95(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 253。
中間體15
乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，將NBS(26.3g，147.93mmol)添加到)在DMF(150mL)中的乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體16；40g，147.93mmol中)，並且將所得化合物在25℃下攪拌20小時。將該反應混合物用水(200mL)淬滅，用EtOAc(2 x 300mL)萃取，將該有機層用鹽水洗滌，並且經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在石油醚中0至10%EtOAc的洗提梯度純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色油的乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體15；21g，41%)，該油在靜置時固化。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)δ 0.02(9H,s),0.92-1.01(2H,m),1.45(3H,t),3.56-3.65(2H,m),4.45(2H,q),5.79(2H,s),7.28(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=349/351。
中間體16
乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在0℃下，將SEM-Cl(18.98mL，107.04mmol) 添加到在DMF(50mL)中的乙基1H-咪唑-2-甲酸酯(10g，71.36mmol)和NaH(4.28g，107mmol)中。將所得混合物然後在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(50mL)淬滅，用EtOAc(2 x 100mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中30%至70% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體16；20g，100%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)δ 0.00(9H,s),0.03-0.08(2H,m),1.37(3H,t),3.53-3.62(2H,m),4.37(2H,q),5.76(2H,s),7.18(1H,d),7.68(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 271。
實例3
(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體17；226mg，0.56mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(59.4mg，0.61mmol)、碳酸銫(363mg，1.11mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(25.2mg，0.03mmol)懸浮於三級-丁醇(8mL)中，並且用氮氣脫氣10分鐘。在氮氣下，將該反應加熱至80℃持續2天。將該反應然後冷卻至室溫，用乙酸乙 酯(100mL)稀釋，並且將該有機層用飽和水性碳酸氫鈉(25mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，並且在真空中濃縮以給出棕色膠狀物。將該膠吸收在DMSO(5mL)中並且過濾。將粗產物的DMSO溶液藉由製備型HPLC(Xbridge Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，100mm長度)，使用水(含有1% NH3)以及MeCN的漸減極性混合物作為洗提液進行純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供粗材料。將該粗材料溶解於最少的DCM中，並且藉由在減壓下濃縮吸附到矽膠上。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，使用在EtOAc中0至15% MeOH的洗提梯度。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為灰白色固體的(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例3；40mg，15%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)δ 1.13(3H,d),3.71(3H,s),3.96-4.03(1H,m),4.26-4.39(2H,m),4.41(1H,dd),5.04(1H,d),6.30(1H,d),7.35(2H,dd),7.39-7.44(2H,m),7.55-7.69(1H,m),7.92(1H,s),8.48(1H,d),9.33(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 467。
中間體17
(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將氫化鈉(60%分散體，25mg，0.63mmol)添加 到在DMF中的(12mL)中的(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體9；150mg，0.57mmol)中將所得懸浮液在20℃下攪拌持續30分鐘。添加2-氯-4-(氯甲基)-1-氟苯(112mg，0.63mmol)，隨後添加四丁基碘化銨(42.0mg，0.11mmol)並且將所得溶液在20℃下攪拌18小時。將該反應混合物傾倒入飽和水性NH4Cl(25mL)中，並且用乙酸乙酯(75mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮以給出呈淺棕色固體的(S)-7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體17；230mg，100%)。1H NMR(400MHz,DMSO,33℃)δ 1.13(3H,d),4.01(1H,ddd),4.26(1H,dd),4.36(1H,d),4.46(1H,dd),5.05(1H,d),7.39-7.41(1H,m),7.42(1H,s),7.59-7.66(1H,m),7.93(1H,d),8.27(1H,s),8.74(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 406。
實例4
(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體18；218mg，0.56mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(59.7mg，0.62mmol)、碳酸銫(364mg，1.12mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(25.3mg，0.03mmol)懸浮 於三級-丁醇(8mL)中並且用氮氣脫氣10分鐘。將該反應在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋(100mL)並且用飽和水性NaHCO3(25mL)洗滌，經Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮以給出棕色固體。將該粗物質溶解於DCM中，在真空中濃縮並且吸附到二氧化矽上。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在EtOAc中的0至15% MeOH。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為灰白色固體的(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例4；88mg，34.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)δ 1.13(3H,d),3.71(3H,s),3.96-4.03(1H,m),4.27-4.38(2H,m),4.43(1H,dd),5.05(1H,d),6.30(1H,d),7.22-7.28(1H,m),7.35(2H,dd),7.37-7.5(2H,m),7.92(1H,s),8.47(1H,d),9.33(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 451。
中間體18
(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將氫化鈉(60%分散體)(25.03mg，0.63mmol)添加到在DMF(12mL)中的(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體9；150mg，0.57mmol)中。將所得懸浮液在20℃下攪拌持續30分鐘。添加4-(溴甲基)-1,2-二氟 苯(130mg，0.63mmol)，隨後添加四丁基碘化銨(42.0mg，0.11mmol)並且將所得溶液在20℃下攪拌18小時。將該反應混合物傾倒入飽和水性NH4Cl(25mL)中，並且用乙酸乙酯(75mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮以給出呈棕色膠狀物的(S)-2-(2-氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體18；222mg，100%)。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)δ 1.14(3H,d),3.94-4.07(1H,m),4.27(1H,dd),4.36(1H,d),4.47(1H,dd),5.06(1H,d),7.26(1H,s),7.37-7.51(2H,m),7.93(1H,d),8.26(1H,s),8.74(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 390。
實例5
2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(10.72mg，0.01mmol)添加到在1,4-二(3mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體19；50mg，0.12mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(22.97mg，0.24mmol)和Cs2CO3(96mg，0.30mmol)中。將所得的溶液在120℃下攪拌8小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供粗產物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例5；23.5mg，41%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20.1℃)δ 2.51(3H,s),3.70(3H,s),3.90-3.98(2H,m),4.43-4.51(2H,m),4.91(2H,s),6.31(1H,d),7.34(1H,d),7.76(1H,d),7.84(1H,d),7.95(1H,s),8.10(1H,t),8.33(1H,s),9.24(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=484。
中間體19
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在空氣下，在25℃，將NH3(7N在MeOH中，3mL)添加到乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體20；60mg，0.13mmol)中並且將所得的溶液在50℃下攪拌12小時。將該溶劑在減壓下藉由蒸餾去除以得到2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體19；50 mg，92%)。m/z(ES+),[M+H]+=423。
中間體20
乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，在25℃，將6-(三氟甲基)吡啶甲醛(114mg，0.65mmol)添加到在DCM(10mL)中的乙基1-(2-胺基乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體21；250mg，0.65mmol)中。將所得的溶液在40℃下攪拌3小時。在25℃，將三乙醯氧基硼氫化鈉(415mg，1.96mmol)添加到該反應混合物中，並且將所得的溶液在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(10mL)淬滅並且用DCM(3 x 15mL)萃取。將該有機層合併並且用鹽水(15mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且將揮發物在減壓下去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的2%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)乙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體20；60mg，19.6%)。m/z(ES+),[M+H]+=469。
中間體21
1-(2-胺基乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯。HCl
在空氣下，在25℃下，將HCl(在1,4-二中4N，50mL)添加到乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體22；3.2g，7.81mmol)中，並且將所得的溶液在25℃下攪拌12小時。將該溶劑藉由在真空下蒸餾去除，並且將粗殘餘物用EtOAc研磨以給出固體，其藉由過濾來收集並且在真空下乾燥以得到呈白色固體的乙基1-(2-胺基乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯.HCl(中間體21；2.90g，97%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20.1℃)δ 1.35(3H,t),2.60-2.65(3H,m),4.38(2H,q),4.75(2H,t),8.37(3H,s),8.46(1H,s),8.63(1H,d),10.17(2H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=310。
中間體22
乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，在100℃，將三級丁基1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯 2,2-氧化物(2.76g，12.37mmol)分批添加至在1,4-二(60mL)中的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；3.0g，11.25mmol)、K2CO3(4.66g，33.75mmol)和18-冠醚-6醚(0.595g，2.25mmol)中。將所得的溶液在100℃下攪拌2小時。將該混合物冷卻，過濾並且將所得固體用乙酸乙酯洗滌。將該濾液然後在減壓下濃縮。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中25%至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體22；3.20g，69.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20.2℃)δ 1.25(9H,s),1.35(3H,t),2.62(3H,s),3.35(2H,dd),4.37(2H,q),4.49(2H,t),6.93(1H,t),8.18(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=410。
中間體23
乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在25℃下，將三氟乙酸(20mL，259.60mmol)添加到在DCM中(20mL)中的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體24；5.6g，14.11mmol)中，並且將所得混合物在25℃下攪拌12小時。將揮發物然後在減壓下去除，並且將該反應混合物用飽和NaHCO3鹼化。將所得的沈澱藉由過濾收集，用水洗滌(100mL)並且在真空下乾燥以得到 呈白色固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；3.50g，93%)。1H NMR(400MHz,DMSO,23℃)δ 1.35(3H,t),2.62(3H,s),4.37(2H,q),8.13(1H,s),8.62(1H,s),NH未觀察到。m/z(ES+),[M+H]+=267。
用於製備中間體23的替代方法：
將乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體24；176g，443.38mmol)添加到在DCM(500mL)中的TFA(500mL，6489.91mmol)中。將所得反應混合物在室溫下攪拌16小時。將揮發物然後在減壓下去除。添加過量飽和水性Na2CO3，並且將所得沈澱藉由過濾收集，用水(1L)洗滌並且在真空下乾燥。將粗固體用MeCN研磨以給出固體，其藉由過濾來收集並且在真空下乾燥以得到呈白色固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；106g，90%)。1H NMR(300MHz,DMSO,19.7℃)δ 1.34(3H,t),2.61(3H,s),4.33-4.41(2H,m),8.13(1H,s),8.61(1H,s),13.99(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=267。
用於一鍋法合成中間體23的替代方法：
步驟1：
在氮氣氛圍下，向3,4,7,8-四甲基-1,10-菲咯啉(3.72g，15,41mmol)和二-mu-甲氧基雙(1,5-環辛二烯)二銥(I)(5.21g，7.71mmol)在無水MeTHF(900mL)中的攪拌溶液中依次地添加 雙(合)二硼(108g，423.86mmol)，並且添加在MeTHF(100mL) 中的乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(114.5g，385.33mmol)溶液。將所得混合物在氮氣下脫氣3次，加熱至70℃並且攪拌3小時。將該反應混合物用水(25mL)淬滅，將該有機相分離並且濃縮至500mL。將這種溶液不需要純化直接用於步驟2。
步驟2：
在40℃下經3小時，將產自步驟1的MeTHF(500mL)溶液緩慢添加到在水(500mL)中的水性K2CO3(161g，1156mmol)、2,4-二氯-5-甲基嘧啶(77g，462.4mmol)和在MeTHF(500mL)中的1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯鈀(II)二氯甲烷加成物(9.44g，15.56mmol)的攪拌混合物中。在添加完成之後，將各層分離並且將該有機層用水(500mL)洗滌並且濃縮至500mL。將其不需要純化直接用於步驟3。
步驟3：
在室溫下，將在異-丙醇(5-6N，116mL，578mmol)中的HCl添加至產自於步驟2的溶液中，並且攪拌30分鐘。將該反應混合物然後用水(500mL)稀釋。將該水層用MeTHF(500mL)萃取，並且將合併有機層用水性碳酸氫鈉(4% w/w溶液，500mL)和水(200mL)洗滌。將該有機相濃縮至一半，並且用庚烷(1000mL)攪拌。將得到的沈澱過濾，用MeTHF/庚烷混合物(1：4，500mL)洗滌，並且在真空下乾燥以得到呈固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23，60.5g，59%，包括經3個步驟)。1H NMR(400MHz,DMSO,23℃)δ 1.35(3H,t),2.62(3H,s), 4.37(2H,q),8.13(1H,s),8.62(1H,s),NH未觀察到。m/z(ES+),[M+H]+=267。
中間體24
乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃，將Pd(Ph3P)4(1.158g，1.00mmol)添加到在1,4-二(120mL)和水(20mL)中的(2-(乙氧羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)硼酸(中間體25；6.3g，20.05mmol)、2,4-二氯-5-甲基嘧啶(3.27g，20.05mmol)和Cs2CO3(13.07g，40.10mmol)中，並且將所得混合物在下85℃攪拌2小時。將該反應混合物傾倒入水(200mL)中，用DCM(2 x 250mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至10% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供為淡黃色固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體24；5.60g，70.4%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,23℃)δ 0.02(9H,s),0.93-1.03(2H,m),1.48(3H,t),2.71-2.76(3H,m),3.59-3.69(2H,m),4.48(2H,q),5.85(2H,s),8.16(1H,s),8.42-8.47(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=397。
製備中間體24的替代方法：
在氮氣下，將批次1：Pd(Ph3P)4(1.655g，1.43mmol)添加到在1,4-二(80mL)和水(20mL)中的(2-(乙氧羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)硼酸(中間體25；9g，28.64mmol)、2,4-二氯-5-甲基嘧啶(4.67g，28.64mmol)和Cs2CO3(28.0g，85.93mmol)中。將該反應混合物然後在85℃下攪拌2小時，並且然後冷卻至室溫。
在氮氣下，將批次2：Pd(Ph3P)4(24.82g，21.48mmol)添加到在1,4-二(2000mL)和水(400mL)中的2,4-二氯-5-甲基嘧啶(70.0g，429.64mmol)，(2-(乙氧基羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)硼酸(中間體25；135g，429.64mmol)和Cs2CO3(420g，1288.91mmol)中。將該反應混合物然後在85℃下攪拌2小時，並且然後冷卻至室溫。將以上的批次1和2合併並且蒸發至乾燥。將殘餘物溶解在EtOAc(2L)中，並且順序地用飽和水性NaHCO3(450mL)，水(300mL)和鹽水(350mL)洗滌。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且將揮發物在減壓下去除。將粗產物藉由快速柱層析法(在石油醚中0至5% EtOAc的洗提梯度)純化。將包含純產物的級分蒸發至乾燥以得到呈固體的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體24；123g，67.4%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,23℃)δ 0.02(9H,s),0.93-1.03(2H,m),1.48(3H,t),2.71-2.76(3H,m),3.59-3.69(2H,m),4.48(2H,q),5.85(2H,s),8.16(1H,s),8.42-8.47(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=397。
中間體25
乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(0.788g，1.00mmol)添加到在1,4-二(100mL)中的乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體25a，也可商購；7g，20.04mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-八甲基-2,2’-雙(1,3,2-二氧雜戊硼烷)(7.63g，30.06mmol)和KOAc(3.93g，40.08mmol)中。將所得混合物然後在85℃下攪拌3小時。將該反應混合物過濾，並且將其不經進一步純化直接用於下一步驟。m/z(ES+),[M+H]+=315。
用於製備中間體25的替代方法：
在氮氣下，在室溫下，將2-二環己基膦基-2',4',6'-三-異-丙基-1,1’-聯苯基(12.28g，25.77mmol)添加到在1,4-二(2000mL)中的三(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)-氯仿加成物(11.11g，10.74mmol)中。將所得混合物然後在室溫下攪拌45小時。在氮氣下，在室溫下，添加乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(150g，429.43mmol)，雙(并)二硼(131g，515.32mmol)和乙酸鉀(126g，1288.29mmol)。將所得的混合物在80℃ 下攪拌8小時。將該反應混合物然後通過矽藻土過濾。將該溶劑在減壓下去除以得到呈黃色油的(2-(乙氧羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)硼酸(中間體25；135g，100%)。m/z(ES+),[M+H]+=315。
中間體25a
乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在0℃下，將NBS(158g，887.56mmol)分批添加至在DMF(1200mL)和DCM(1300mL)中的乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體25b；160g，591.71mmol)中。將所得反應在25℃下攪拌48小時。將揮發物在減壓下去除，並且添加EtOAc(7L)。將該有機相然後順序地用飽和NaHCO3(1L)、水(1L)、和飽和鹽水(750mL)洗滌。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物，將其藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至4%EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色油的乙基4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體25a；106g，51.3%)該油在靜置時固化。1H NMR(300MHz,DMSO)δ -0.07(9H,s),0.77-0.85(2H,m),1.29(3H,t),3.53(2H,t),4.30(2H,q),5.66(2H,s),7.83(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=349/351。
中間體25b
乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在0℃下，將SEM-Cl(286g，1712.55mmol)逐滴添加至在丙酮(3L)中的乙基1H-咪唑-2-甲酸酯(200g，1427.12mmol)和K2CO3(592g，4281.37mmol)中。將所得混合物在環境溫度下攪拌16小時。將所得沈澱藉由蒸發去除，並且用EtOAc(1L)洗滌。將合併的有機層然後經Na2SO4乾燥，並且將揮發物在減壓下去除。將所得粗材料藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色油的乙基1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體25b；328g，85%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ -0.01(9H,s),090-0.97(2H,m),1.45(3H,t),3.50-3.63(2H,m),4.43(2H,q),5.81(2H,s),7.22(1H,s),7.28(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=271。
實例6
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(20.95mg，0.02mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體26；100mg，0.24mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(中間體26；57.2mg，0.59mmol)和Cs2CO3(154mg，0.47mmol)中，並且將所得混合物在100℃下攪拌8小時。將揮發物在減壓下去除，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例6；16.00mg，14%)。1H NMR(400MHz,DMSO,22℃)δ 1.15(3H,d),3.71(3H,s),4.00(1H,s),4.34(2H,d),4.47(1H,dd),5.07(1H,d),6.32(1H,s),7.27(1H,s),7.35(1H,d),7.38-7.51(2H,m),8.19(1H,s),8.54(1H,s),9.73(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=485。
中間體26
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫 咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在NH3(7N在MeOH中，5mL，35.00mmol)中的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3,4-二氟苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體27；200mg，0.43mmol)溶液在50℃下攪拌2小時。將該溶劑然後在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(洗提梯度為在DCM中的0至5% MeOH)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體26；100mg，55.4%)。m/z(ES+),[M+H]+=424。
中間體27
(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3,4-二氟苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在25℃下，在氮氣下，將3,4-二氟苯甲醛(74.9mg，0.53mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯 嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；200mg，0.48mmol)中。在40℃下攪拌3小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(305mg，1.44mmol)並且將所得混合物在25℃下攪拌3小時。然後將該反應混合物用飽和NaHCO3(300mL)淬滅，用DCM(2 x 50mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出作為黃色固體的粗產物(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3,4-二氟苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體27；200mg，89%)。將該產物不經進一步純化直接用於下一步驟。m/z(ES+),[M+H]+=470。
中間體28
(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽
將在HCl(4N，在1,4-二，20mL中)中的(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體29；2.8g，6.30mmol)的溶液在25℃下攪拌過夜。將沈澱藉由過濾收集，用EtOAc洗滌(20mL)，並且在真空下乾燥以得到作為白色固體的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體28；2.50g，95%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ 1.26(3H,d),1.37(3H,t),3.75(1H,s),4.40 (2H,d),4.63(2H,d),8.05(3H,s),8.61(1H,s),8.94(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=344。
中間體29
(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，在25℃下，將1M HCl(20mL，20.00mmol)添加到在EtOH(20mL)中的(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸(中間體30；6g，11.44mmol)中。將所得混合物在50℃下攪拌20分鐘。將該反應混合物用飽和NaHCO3(50mL)淬滅，用DCM萃取(3 x 100mL)，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體29；2.80g，55.1%)。1H NMR(300MHz,CDCl3,27℃)δ 1.24(3H,d),1.35(9H,s),1.46(2H,t),4.03-4.17(1H,m),4.46(2H,q),4.58-4.69(2H,m),5.30(1H,s),8.08(1H,s),8.58(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=444。
中間體30
(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸
在氮氣下，在80℃下，將(S)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體12；4.59g，19.33mmol)分批添加至在乙腈(30mL)中的乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體31；3.7g，12.89mmol)和K2CO3(5.34g，38.66mmol)中。將所得的混合物在85℃下攪拌12小時。將該反應混合物然後過濾並且用MeCN洗滌。將該溶劑在減壓下去除以得到作為黃色油的所希望的產物(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸(中間體30；6.00g，89%)。將該產物不經進一步純化直接用於下一步驟。m/z(ES+),[M+H]+=524。
中間體31
乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在25℃下，將三氟乙酸(20mL，259.60mmol)添加到在DCM(20mL)中的乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體32；5.6g，13.42mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌12小時。將該溶劑在減壓下去除，並且將該反應混合物用過量飽和NaHCO3鹼化。將所得的沈澱藉由過濾收集，用水洗滌(100mL)並且在真空下乾燥以得到作為白色固體的乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體31；3.70g，96%)。1H NMR(400MHz,DMSO,25℃)δ 1.36(3H,t),4.39(2H,q),7.59(1H,s),8.32(1H,s),8.90(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=287。
中間體32
乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃下，將Pd(Ph3P)4(1.14g，0.99mmol)添加到在1,4-二(160mL)和水(40mL)中的(2-(乙氧羰基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)硼酸(中間體25；6.2g，19.73mmol)、2,4,5-三氯嘧啶(3.62g，19.73mmol)和Cs2CO3(9.64g，29.60mmol)中。將所得的混合物在85℃下攪拌2小時。將該反應混合物傾倒入水(150mL)中，用DCM萃取(2 x 250mL)，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至10% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體32；5.60g，68%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)δ 0.01(9H,s),0.93-1.02(2H,m),1.48(3H,t),3.60-3.69(2H,m),4.48(2H,q),5.89(2H,s),8.29(1H,s),8.63(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=417。
實例7
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(31.9mg，0.04mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體33；150mg，0.36mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(87mg，0.90mmol)和Cs2CO3(234mg，0.72mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該殘餘物進 一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例7；31.0mg，18.05%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 1.13(3H,d),3.71(3H,s),3.76(3H,s),3.96(1H,d),4.26-4.36(2H,m),4.41(1H,dd),5.09(1H,d),6.32(1H,s),6.84-6.91(1H,m),6.96(2H,d),7.24-7.38(2H,m),8.20(1H,s),8.54(1H,s),9.74(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=479。
中間體33
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在空氣下，在25℃下，將TEA(0.162mL，1.16mmol)添加到在甲苯(8mL)中的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3-甲氧基苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體34；180mg，0.39mmol)中。將所得混合物在140℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0%到3% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作 為黃色固體的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體33；150mg，93%)。m/z(ES+),[M+Na]+=418。將(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體33)不經進一步純化用於下一步驟中。
中間體34
(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3-甲氧基苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃下，將3-甲氧基苯甲醛(71.8mg，0.53mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；200mg，0.48mmol)中。在40℃下攪拌3小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(305mg，1.44mmol)並且將所得混合物在25℃下攪拌3小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，用DCM萃取(2 x 50mL)，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色 固體的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-((3-甲氧基苄基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體34；180mg，81%)m/z(ES+),[M+H]+=464。
實例8
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(12.41mg，0.01mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35；64mg，0.14mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(33.9mg，0.35mmol)和Cs2CO3(91mg，0.28mmol)中，並且將所得混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該殘餘物進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基 -7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例8；15.2mg，21%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20.1℃)δ 1.25(3H,d),3.71(3H,s),4.18(1H,ddd),4.42(1H,dd),4.60-4.69(2H,m),5.23(1H,d),6.32(1H,d),7.35(1H,d),7.94(1H,d),8.25(1H,s),8.55(1H,s),9.03(1H,d),9.74(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=519。
中間體35
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在空氣下，在25℃下，將TEA(0.129mL，0.93mmol)添加到在甲苯(3mL)中的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體36；156mg，0.31mmol)中。將所得的混合物在140℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35；64.0mg，45.2%)。m/z(ES+),[M+H]+=458。
中間體36
(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4- 基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，在25℃下，將2-(三氟甲基)嘧啶-4-甲醛(127mg，0.72mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；300mg，0.72mmol)中。將所得的溶液在40℃下攪拌3小時。在25℃下，將三乙醯氧基硼氫化鈉(457mg，2.16mmol)添加到該反應混合物中。將所得的溶液在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(10mL)淬滅，並且用DCM(3 x 15mL)萃取。將該有機層合併並且用鹽水(15mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的2%到3% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體36；156mg，43%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.2℃)δ 1.26-1.38(3H,m),1.44(3H,t),2.85(1H,s),4.01(2H,q),4.33-4.51(2H,m),4.55-4.70(1H,m),4.92(2H,s),7.65(1H,d),8.65(1H,d),8.74-8.85(1H,m),8.91(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=504。
實例9
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(24.28mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體37；120mg，0.27mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(66.3mg，0.68mmol)和Cs2CO3(178mg，0.55mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該殘餘物進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例9；27mg，19.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO,23℃)δ 1.21(3H,d),3.71(3H,s),4.12(1H,s),4.38(1H,d),4.48-4.63(2H,m),5.22(1H,d),6.32(1H,s),6.97(1H,t),7.35(1H,d),7.59-7.67(2H, m),8.00(1H,t),8.23(1H,s),8.54(1H,s),9.72(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=500。
中間體37
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體38；200mg，0.41mmol)在NH3(在MeOH中7N，5mL，35.00mmol)中的溶液在50℃下攪拌2小時。將溶劑在減壓下除去，並且將粗產物藉由快速二氧化矽層析進行純化，洗提梯度為在DCM中的0至5% MeOH。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體37；120mg，66.3%)。m/z(ES+),[M+H]+=439。
中間體38
(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃下，將6-(二氟甲基)吡啶甲醛(中間體39；226mg，1.44mmol)添加到在DCM(15mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；200mg，0.48mmol)中。在40℃下攪拌3小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(305mg，1.44mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌3小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，並且用DCM萃取(2 x 50mL)。將合併的有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出作為黃色固體的所希望的產物(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體38；200mg，86%)。m/z(ES+),[M+H]+=485。
中間體39
6-(二氟甲基)吡啶甲醛
在氮氣下，將LiAlH4(1.141g，30.07mmol)添加到冷卻至-78℃的THF(80mL)中的6-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺(中 間體40；5g，23.13mmol)中，並且將所得的溶液在-78℃下攪拌1小時。將該反應用EtOAc(6mL)稀釋，然後在-78℃下用水(1mL)淬滅。添加NaOH(15%水性，3.0mL)和水(1.0mL)，並且將所得固體過濾出。將該濾液經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出作為黃色油的6-(二氟甲基)吡啶甲醛(中間體39；3.60g，99%)。將該產物不經進一步純化用於下一步驟中。m/z(ES+),[M+H]+=158。
中間體40
6-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺
在氮氣下，在25℃下，將草醯二氯化物(7.92g，62.39mmol)逐滴添加至在DCM(30mL)中的6-(二氟甲基)吡啶甲酸(中間體41；5.4g，31.19mmol)和DMF(0.242mL，3.12mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌2小時。將該溶劑然後在減壓下去除以得到作為黃色油的所希望的產物6-(二氟甲基)吡啶甲醯氯(6.00g，100%)將其直接使用。在氮氣下，在25℃下，將N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(4.58g，46.98mmol)分批添加至在DCM(50mL)中的6-(二氟甲基)吡啶甲醯氯(6.0g，31.32mmol)和TEA(17.46mL，125.29mmol)中。將所得混合物然後在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(50mL)淬滅，用DCM(2 x 100mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該 粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色液體的6-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺(中間體40；5.00g，73.8%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20℃)δ 3.42(3H,s),3.80(3H,s),6.68(1H,t),7.74(2H,d),7.98(1H,t)。m/z(ES+),[M+H]+=217。
中間體41
6-(二氟甲基)吡啶甲酸
將在HCl(30mL，360.00mmol)中的甲基6-(二氟甲基)吡啶甲酸酯(中間體42；6.2g，33.13mmol)在90℃加熱8小時。將該溶劑在減壓下去除以得到作為白色固體的所希望的產物6-(二氟甲基)吡啶甲酸(中間體41；5.40g，94%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 7.05(1H,t),7.94(1H,t),8.16-8.22(2H,m),13.56(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=174。
中間體42
甲基6-(二氟甲基)吡啶甲酸酯
在10atm下，在CO氛圍下，將在MeOH(100mL)中的2-溴-6-(二氟甲基)嘧啶(中間體43；8.5g，40.86mmol)、乙酸鉀(8.02g，81.73mmol)Pd(dppf)Cl2(1.495g，2.04mmol)在70℃下攪拌6 小時。將該反應混合物然後過濾，並且將該濾液在減壓下蒸發。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至20% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色液體的甲基6-(二氟甲基)吡啶甲酸酯(中間體42；6.20g，81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20℃)δ 4.06(3H,s),6.79(1H,t),7.89(1H,d),8.05(1H,t),8.24-8.31(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=188。
中間體43
2-溴-6-(二氟甲基)吡啶
將DAST(17.76mL，134.40mmol)逐滴添加至在DCM(150mL)中的6-溴吡啶甲醛(10g，53.76mmol)中，經10分鐘的時段冷卻至0℃。將所得的混合物在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(20mL)淬滅，並且藉由另外的NaHCO3(飽和水性)鹼化。將該水相用DCM(3 x 150mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出棕色液體。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至8% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色液體的2-溴-6-(二氟甲基)吡啶(中間體43；9.00g，80%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,22℃)δ 6.59(1H,t),7.58-7.65(2H,m),7.71(1H,t)。m/z(ES+),[M+H]+=208/210。
實例10
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基 -7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(14.97mg，0.02mmol)添加到在1,4-二(3mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體44；77mg，0.17mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(40.9mg，0.42mmol)和Cs2CO3(110mg，0.34mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌6小時。將該溶劑在減壓下去除，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的5%到6% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色粗產物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例10；18.5mg，21%)。1H NMR(400MHz,DMSO,23.0℃)δ 1.22(3H,d),3.71(3H,s),4.15(1H,ddd),4.40(1H,dd),4.53-4.64(2H,m),5.23(1H,d),6.32(1H,d),7.35(1H,d),7.75-7.87(2H,m),8.10(1H,t),8.23(1H,s),8.54(1H,s),9.73(1H,s)。 m/z(ES+),[M+H]+=518。
中間體44
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將NH3(在MeOH中7N，3mL)添加到(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體45；98mg，0.19mmol)中將所得的溶液在50℃下攪拌2小時。將該溶劑在減壓下藉由蒸餾去除以得到作為無色油的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體44；77mg，86%)。將該產物不經進一步純化直接用於下一步驟。m/z(ES+),[M+H]+=457。
中間體45
(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在20℃下，將6-(三氟甲基)吡啶甲醛(115mg，0.66mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；250mg，0.60mmol)中。將所得的溶液在40℃下攪拌4小時。然後在20℃下添加三乙醯氧基硼氫化鈉(254mg，1.20mmol)，並且將所得的溶液在20℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(10mL)淬滅，用DCM(3 x 15mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(15mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的2%到2.5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為呈黃色油的(S)-乙基4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體45；98mg，32.5%)。m/z(ES+),[M+H]+=503。
實例11
(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(26.4mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(8mL)中的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體46；120mg，0.30mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(72.2mg，0.74mmol)和Cs2CO3(194mg，0.60mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該殘餘物進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(5-氯-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例11；50mg，36.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO,22℃)δ 1.19(3H,d),2.47(3H,s),3.70(3H,s),4.08(1H,d),4.32-4.43(2H,m),4.53(1H,dd),5.15(1H,d),6.31(1H,d),7.21(2H,dd),7.34(1H,d),7.68(1H,t),8.21(1H,s),8.53(1H,s),9.72(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=464。
中間體46
(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲 基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在20℃下，將乙酸鈉(118mg，1.44mmol)添加到在MeOH(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體28；200mg，0.48mmol)和6-甲基吡啶甲醛(63.9mg，0.53mmol)中。將所得混合物在25℃下攪拌30分鐘。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(203mg，0.96mmol)，並且將該反應混合物在25℃下攪拌18小時。將該反應用飽和水性NaHCO3(25mL)淬滅，並且將該水相用DCM(3 x 50mL)萃取。將合併的有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-甲基吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體46；120mg，62.1%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,24℃)δ 1.33(3H,d),2.60(3H,s),4.09(1H,d),4.19-4.46(2H,m),4.52(1H,d),5.42(1H,d),7.15(1H,s),7.34(1H,s),7.63(1H,s),8.02(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=403。
實例12
7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(63.9mg，0.07mmol)添加到在1,4-二(3mL)中的7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體47；292mg，0.72mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(140mg，1.44mmol)和Cs2CO3(585mg，1.80mmol)中。將所得的溶液在100℃下攪拌4小時。將該溶劑在真空下藉由蒸餾去除並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0到7% MeOH的洗提梯度)來純化。並且將包含產物的級分蒸發至乾燥，以給出粗產物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例12；59.7mg，17.79%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.1℃)δ 2.70(3H,s),3.72(2H,dd),3.81(3H,s),4.26-4.34(2H,m),4.77(2H,s),6.31(1H,d),6.98(1H,s),7.15(1H,t),7.23-7.32(1H,m),7.45(1H,dd),7.49(1H,d),7.73(1H,s),8.30(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=467。
中間體47
7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將NaH(68.3mg，1.71mmol)添加到在DMF(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體48；150mg，0.57mmol)中。將所得溶液然後在25℃下攪拌30分鐘。在25℃下添加4-(溴甲基)-2-氯-1-氟苯(254mg，1.14mmol)，並且持續攪拌2小時。將該反應混合物用飽和水性NaHCO3(25mL)淬滅，將所得到的沈澱藉由過濾收集，用水(50mL)洗滌，並且在真空下乾燥以得到作為黃色固體的7-(3-氯-4-氟苄基)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體48；292mg，>100%)，將其不經進一步純化使用。1H NMR(400MHz,DMSO,20.1℃)δ 2.64(3H,s),3.74-3.82(2H,m),4.35-4.43(2H,m),4.70(2H,s),7.34-7.49(2H,m),7.60(1H,ddd),8.25(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=406。
中間體48
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在空氣下，在20℃下，將NH3(在MeOH中7N，15mL)添加到乙基1-(2-胺基乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體21；1.3g，3.40mmol)，並且將所得的溶液在20℃下攪拌12小時。將該溶劑藉由在真空下蒸餾去除，將所得固體用水(50mL)成漿，過濾並且在真空下乾燥以得到作為白色固體的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體48；0.80g，89%)，將其不經進一步純化使用。1H NMR(400MHz,DMSO,20.3℃)δ 2.62(3H,s),3.61(2H,ddd),4.29-4.37(2H,m),8.26(1H,s),8.35(1H,t),8.59(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=264。
實例13
7-(3-氯苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(62.0mg，0.07mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體49；271mg，0.70mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(136mg，1.40mmol)和Cs2CO3(569mg，1.75mmol)中。將所得的溶液在100℃下攪拌4小時。將該溶劑然後在真空下藉由蒸餾去除，並且將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的0到7% MeOH的洗提梯度) 來純化。並且將包含產物的級分蒸發至乾燥，以給出粗產物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-(3-氯苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例13；43.5mg，13.9%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.1℃)δ 2.69(3H,s),3.68-3.76(2H,m),3.81(3H,s),4.29(2H,dd),4.80(2H,s),6.31(1H,d),7.06(1H,s),7.25-7.29(1H,m),7.30-7.34(2H,m),7.36-7.39(1H,m),7.49(1H,d),7.73(1H,s),8.29(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=449。
中間體49
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將NaH(68.3mg，1.71mmol)添加到在DMF(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體48；150mg，0.57mmol)。將所得到的溶液在25℃下攪拌持續30分鐘。添加1-(溴甲基)-3-氯苯(234mg，1.14mmol)，並且將所得的溶液在25℃下攪拌2小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(25mL)淬滅，將所得到的沈澱藉由過 濾收集，用水(50mL)洗滌，並且在真空下乾燥以得到作為黃色固體的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體49；271mg)，將其不經進一步純化使用。1H NMR(400MHz，CDCl3,20.1℃)δ 2.64(3H,s),3.74-3.82(2H,m),4.36-4.44(2H,m),4.72(2H,s),7.39-7.48(4H,m),8.26(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+)[M+H]+=388。
實例14
7-(3-(二氟甲基)苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(61.6mg，0.07mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體50；280mg，0.69mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(135mg，1.39mmol)和Cs2CO3(565mg，1.73mmol)中。將所得的溶液在100℃下攪拌4小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到7% MeOH的洗提梯度來純化。將包含所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以提供不純的產物。將不純的產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。 將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-(3-(二氟甲基)苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例14；14；69.6mg，21.6%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.2℃)δ 2.70(3H,s),3.68-3.76(2H,m),3.81(3H,s),4.24-4.32(2H,m),4.88(2H,s),6.31(1H,d),6.66(1H,t),6.98(1H,s),7.43-7.56(5H,m),7.73(1H,s),8.30(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=465。
中間體50
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將NaH(68.3mg，1.71mmol)添加到在DMF(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(150mg，0.57mmol)，並且將所得的溶液在25℃下攪拌30分鐘。添加1-(溴甲基)-3-(二氟甲基)苯(251mg，1.14mmol)並且將所得的溶液在25℃下攪拌2小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(25mL)淬滅，並且將所得沈澱藉由過濾收集，用水(50mL)洗滌，並且在真空下乾燥以得到作為黃色固體的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體50；280mg)，將其不經進一步純化使用。1H NMR(400MHz,DMSO,19.9℃)δ 2.64(3H,s),3.74-3.82(2H, m),4.36-4.44(2H,m),4.79(2H,s),7.06(1H,td),7.49-7.56(4H,m),8.26(1H,s),8.61(1H,s)。
實例15
7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(22.95mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(8mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體51；205mg，0.51mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(123mg，1.27mmol)和Cs2CO3(330mg，1.01mmol)中，並且將所得混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將包含化合物的級分蒸發至乾燥，以得到黃色殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例15；122mg，51.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 2.50(3H, s),3.70(3H,s),3.87-3.95(2H,m),4.42-4.50(2H,m),4.87(2H,s),6.30(1H,d),6.95(1H,t),7.33(1H,d),7.61(2H,t),7.94(1H,s),8.00(1H,t),8.32(1H,s),9.24(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=466。
中間體51
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將6-(二氟甲基)吡啶甲醛(中間體39；123mg，0.78mmol)添加到在DCM(10mL)中的乙基1-(2-胺基乙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體21；200mg，0.52mmol)，DIPEA(0.274mL，1.57mmol)和AcOH(0.090mL，1.57mmol)中。在25℃下攪拌1小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(332mg，1.57mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌1小時並且然後在50℃下加熱3小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，用DCM(2 x 75mL)萃取，將合併的有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體51；205mg，97%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20℃)δ 2.74(3H,d),3.95-4.04 (2H,m),4.27-4.39(2H,m),4.94(2H,s),6.43-6.73(1H,m),7.57(2H,d),7.84(1H,t),7.96(1H,s),8.42(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=405。
實例16
(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(30.3mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(8mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體52；150mg，0.33mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(81mg，0.84mmol)和Cs2CO3(218mg，0.67mmol)中，並且將所得混合物在120℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將所得殘餘物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中0至6% MeOH的洗提梯度)進行純化，以得到黃色殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺 基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例16；27mg，15.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO,25℃)δ 2.50(3H,s),3.20(3H,s),3.34-3.42(1H,m),3.52(1H,dd),3.71(3H,s),4.15(1H,s),4.59(3H,d),5.24(1H,d),6.28-6.33(1H,m),6.97(1H,t),7.34(1H,d),7.59-7.66(2H,m),7.95-8.04(2H,m),8.32(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=510。
中間體52
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(R)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)-3-甲氧基丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體53；360mg，0.73mmol)在MeOH(20mL，140.00mmol)中的NH3中的溶液在25℃下攪拌48小時。將揮發物然後在減壓下去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體52；300mg，92%)。m/z(ES+),[M+H]+=449。
中間體53
(R)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)-3-甲氧基丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，在25℃下，將6-(二氟甲基)吡啶甲醛(442mg，2.81mmol)添加到在DCM(20mL)中的(R)-乙基1-(2-胺基-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體54；400mg，0.94mmol)中。在40℃下攪拌3小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(596mg，2.81mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌3小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，用DCM(2 x 50mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(R)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)-3-甲氧基丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體53；360mg，78%)。m/z(ES+),[M+H]+=495。
中間體54
(R)-乙基1-(2-胺基-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4- 基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽
將在1,4-二/HCl(20mL)中的(R)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體55；1g，2.20mmol)溶液25℃下攪拌過夜。將沈澱藉由過濾收集，用EtOAc(20mL)洗滌，並且在真空下乾燥以得到(R)-乙基1-(2-胺基-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體54；0.80g，85%)。1H NMR(400MHz,DMSO,22℃)δ 1.36(3H,t),2.64(3H,s),3.48-3.66(5H,m),3.85(1H,s),4.39(2H,q),4.64-4.79(2H,m),8.36(2H,s),8.41(1H,s),8.62-8.67(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=354。
中間體55
(R)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，在25℃下，將1M HCl(20mL，20.00mmol)添加到在EtOH(20mL)中的(R)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基 嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基丙-2-基)胺基磺酸(中間體56；5g，9.36mmol)中，並且將所得混合物在50℃下攪拌20分鐘。將該反應混合物用飽和NaHCO3(50mL)淬滅，用DCM(3 x 100mL)萃取，將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至30%EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(R)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體55；1.0g，23.53%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,22℃)δ 1.32(9H,s),1.47(3H,t),2.71(3H,s),3.40(3H,s),3.51(2H,qd),4.24(1H,d),4.41-4.57(3H,m),4.73(1H,dd),5.11(1H,d),7.98(1H,s),8.41(1H,s)。
中間體56
(R)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基丙-2-基)胺基磺酸
在氮氣下，在100℃下，將(S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體57；3.26g，12.19mmol)分批添加至在1,4-二(30mL)中的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4- 基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；2.5g，9.37mmol)，K2CO3(3.89g，28.12mmol)和18-冠醚-6(0.496g，1.87mmol)中，並且將所得混合物在100℃下攪拌12小時。將該反應混合物然後過濾，並且用DCM洗滌，並且將該溶劑在減壓下去除以得到呈黃色油的所希望的產物(R)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)-3-甲氧基丙-2-基)胺基磺酸(5.00g，100%)，將其直接用於下一階段中。m/z(ES+),[M+H]+=534。
中間體57
(S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物
在氮氣下，在0℃下，向(4S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2-氧化物(中間體58；3.34g，13.29mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中順序地添加高碘酸鈉(3.13g，14.62mmol)、氯化釕(III)(0.276g，1.33mmol)和水(30.0mL)，並且然後攪拌在0℃下攪拌3小時。將該反應混合物用水(100mL)稀釋並且過濾以去除不溶性無機鹽。將所得溶液用醚(2 x 100mL)萃取，用鹽水(2 x100mL)洗滌，並且經MgSO4乾燥以給出呈油的(S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體57；2.86g，80%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.56(9H,s),3.41(3H,s),3.59(1H,t),3.66(1H,ddd),4.38(1H, dddd),4.52-4.67(2H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 268。
中間體57的替代性製備：
在10℃下，將在水(800mL)中的高碘酸鈉(95g，444.49mmol)和氯化釕(0.349g，1.33mmol)添加到在乙腈(800mL)中的三級丁基(4S)-4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2-氧化物(中間體58；111.7g，444.49mmol)溶液中。該反應藉由在添加之後立即1H NMR顯示完成。將該反應混合物用MTBE(1000mL)稀釋，並且將各層分離。將該有機層用水(2 x 500mL)洗滌，並且濃縮以得到呈油的(S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體57；115g，95%)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 1.54(s,9H),3.40(s,3H),3.61(d,2H),4.46(qd,1H),4.60(dd,1H),4.68(dd,1H)。
中間體58
(4S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2-氧化物
在氮氣下，將咪唑(1.629g，23.92mmol)一次性添加至在DCM(100mL)中的亞硫醯氯(1.75mL，23.92mmol)和三乙胺(3.33mL，23.92mmol)中，並且冷卻至-78℃。將所得溶液攪拌20分鐘。將在DCM(26.7mL)中的(R)-三級丁基(1-羥基-3-甲氧基 丙-2-基)胺基甲酸酯(中間體59；4.91g，23.92mmol)經10分鐘逐滴添加。將所得的溶液在-78℃下攪拌3小時，並且然後允許升溫至室溫。向該反應混合物中添加水(100mL)，並且然後用DCM(2 x 100mL)萃取。合併該有機物，並且用鹽水(100mL)洗滌，經MgSO4乾燥並且蒸發，以得到粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在DCM中的10% MeOH的洗提梯度)來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色油和作為2：1非鏡像異構物混合物的(4S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2-氧化物(中間體58；3.34g，55.6%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.55-1.58(9H,d),3.31(0.5H,t),3.41(3H,s),3.52-3.63(1H,m),3.90(0.5 H,dd),4.17-4.4(1H,m),4.64-4.92(1H,m),4.94-5.07(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 252。
中間體58的替代製備：
向在二氯甲烷(5L)中的1H-咪唑(672g，9.76mol)中添加三乙胺(568g，5.61mol)，並且將所得溶液冷卻至-60℃。將亞硫醯氯(377g，3.17mol)逐滴添加至混合物中，保持溫度低於-50℃(2h)。將(R)-三級丁基(1-羥基-3-甲氧基丙-2-基)胺基甲酸酯(中間體59；500g，2.44mol)溶解於二氯甲烷(5L)中，然後經4至5小時過程逐滴添加，添加中保持溫度低於-55℃。一旦所有的起始物料添加，將該反應放置升至室溫過夜。將該反應混合物然後傾倒入水(~3L)中，將各層分離，並且將該水層用DCM(1L)萃取。將合併的有機層經MgSO4乾燥，並且將混合物通過矽膠塞(2Kg)用二氯甲烷洗提過濾，並且在減壓下濃縮以給出油。將 該油置於高真空下攪拌，以去除殘餘物二氯甲烷，以給出作為油和作為36：64非鏡像異構物混合物的(4S)-三級丁基4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2-氧化物(中間體58；489g，80%)。
中間體59
(R)-三級丁基(1-羥基-3-甲氧基丙-2-基)胺基甲酸酯
將異-丁基氯甲酸酯(0.599mL，4.56mmol)逐滴添加至在THF(6mL)中的(S)-2-((三級-丁氧基羰基)胺基)-3-甲氧基丙酸(1g，4.56mmol)和N-甲基嗎啉(0.501mL，4.56mmol)中，並且在氮氣下，經15分鐘時間冷卻至0℃。將所得懸浮液在0℃下攪拌15分鐘。在0℃下，將硼氫化鈉(0.500g，13.23mmol)溶解於水(1.2mL)中緩慢添加到該反應中。將該反應在用EtOAc(50mL)稀釋之前攪拌30分鐘，並且用水性HCl(2M)中和。添加水(50mL)，並且將該有機層分離，用鹽水(50mL)洗滌並且經MgSO4乾燥。將該溶劑蒸發，給出粗產物，將其通過快速二氧化矽層析(在庚烷中0至50%EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為呈無色油的(R)-三級丁基(1-羥基-3-甲氧基丙-2-基)胺基甲酸酯(中間體59；0.510g,54.5%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.45(9H,s),3.36(3H,s),3.5-3.62(2H,m),3.64-3.73(1H,m),3.74-3.84(2H,m),5.16(1H,s)。m/z：ES+[M+Na]+ 228。
實例17
(R)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(30.8mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體60；150mg，0.35mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(84mg，0.87mmol)和Cs2CO3(226mg，0.69mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將包含產物的級分蒸發乾燥，以得到黃色殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含所希望的化合物的級分蒸發至乾燥，以得到作為白色固體的(R)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例17；34.0mg，19.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ 2.51(3H,s),3.18(3H,s),3.29(1H,s),3.40(1H,dd),3.70(3H,s),4.04(1H,s),4.39-4.57(3H,m),5.09(1H,d),6.30(1H,d),7.31-7.50(5H,m),7.94 (1H,s),8.32(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=493。
中間體60
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將1-(溴甲基)-3-氯苯(187mg，0.91mmol)添加到在DMF(5mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61；140mg，0.45mmol)和NaH(54.6mg，1.36mmol)中，並且將所得混合物在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(25mL)淬滅，並且用EtOAc(3 x 25mL)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體60；150mg，76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)δ 2.81(3H,s),3.30(4H,s),3.41(1H,s),3.84(1H,s),4.17-4.28(2H,m),4.43(1H,d),5.44(1H,d),7.33(2H,d),7.40(2H,s),7.97(1H,s),8.04(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=432。
中間體61
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在MeOH(15mL，105.00mmol)中的NH3中的(R)-乙基1-(2-胺基-3-甲氧基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體54；400mg，0.94mmol)溶液在25℃下攪拌過夜。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61；280mg，97%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,23℃)δ 2.78(3H,s),3.43(3H,s),3.49-3.58(2H,m),4.16-4.33(2H,m),4.37(1H,dd),6.56(1H,s),8.01(1H,s),8.45(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=308。
中間體61的替代製備：
在室溫下，將三級丁基(S)-4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體57；105g，383.60mmol)在丙酮(500mL)中的溶液添加到乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；93g，348.73mmol)和K2CO3(57.8g，418.47mmol)在丙酮(500mL)和1,4二(500mL)的混合物中的懸浮液中。將所得的混合物在25℃下攪拌16小時。將該反應混合物過濾，並且將該濾液濃縮至500mL。為了該溶液濃縮，添加在異-丙醇 (5-6N，500mL，2500mmol)中的HCl，並且25℃下攪拌24小時。將Et3N(486mL，3487.26mmol)然後添加至混合物，並且在55℃下攪拌16小時。將該反應混合物用水(1500mL)淬滅，並且將所得固體過濾。將該固體餅用水(400mL)和1：1丙酮/水(200mL×2)混合物洗滌，以得到作為固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(82g，76%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 2.62(s,3H),3.27(s,3H),3.39(dd,2H),3.99(s,1H),4.30(dd,1H),4.43(dd,1H),8.26(s,1H),8.42(d,1H),8.59(s,1H)。m/z(ES+),[M+H]+=308。
實例18
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(0.784g，0.86mmol)添加到在1,4-二(200mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體62；7.5g，17.29mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-胺(4.20g，43.22mmol)和Cs2CO3(11.27g，34.58mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗 提梯度來純化。將包含產物的級分蒸發到乾燥，以得到殘餘物。將該殘餘物進一步藉由C18-快速層析法進行純化，洗提梯度為在水(0.1% NH4HCO3)中的5%至50% MeCN。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為固體的(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例18；5.50g，64.3%)。(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮，藉由XRPD測定為非結晶。
實例18的替代製備：
在氮氣下，在25C下，向在2-甲基四氫呋喃(1200mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體62；104.7g，225.64mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(33.5g，338.47mmol)和在水(120mL)中的Cs2CO3(147g，451.29mmol)的混合物中添加2'-(二環己基膦烷基)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯基]-2-胺(7.10g，18.05mmol)和Pd2(dba)3(8.27g，9.03mmol)。在氮氣下將所得混合物脫氣3次，並且然後在70℃下攪拌24小時。將該反應混合物冷卻至室溫，並且將各層分離。將該有機層用依次地用水(500mL)，水性檸檬酸(1N，600mL)和水(200mL)洗滌。將Silicycle(Si-SH，150g)在40℃下添加到該有機層，並且攪拌20小時。過濾之後，將濾液濃縮並且將殘餘物藉由SFC層析法使用Kromasil DIOL柱進行純化，洗提梯度為在CO2(140巴)中的25% EtOH/NH3 100/0.5。 將純的級分蒸發至乾燥以提供作為呈固體的(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例18；72.6g，65%)。1H NMR(500MHz,DMSO)δ 2.51(3H,s),3.17(3H,s),3.30(1H,dd),3.39(1H,dd),3.69(3H,s),4.03(1H,dtd),4.38(1H,d),4.44(1H,dd),4.51(1H,dd),5.08(1H,d),6.30(1H,d),7.22-7.28(1H,m),7.33(1H,d),7.41(1H,dt),7.47(1H,ddd),7.93(1H,s),8.31(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=495。
實例18a
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮乙磺酸加成物形式1的製備
在55℃下，向在MeCN(500mL)中的(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例18；114g，200.56mmol)的熱溶液中添加在乙腈(100mL)中的乙磺酸(17.02mL，210.59mmol)。將該反應混合物經24小時緩慢冷卻至5℃，將所得固體過濾，並且用冷的MeCN(200mL)洗滌，以得到呈固體的該乙磺酸加成物形式1的(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡-8(5H)-酮形式1(實例18a；119g，98%)。藉由1H NMR確定該加成物為1：1莫耳比乙磺酸：(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ 1.08(3H,t),2.44-2.49(2H,m),2.51(3H,s),3.16(3H,s),3.32(1H,dd),3.41(1H,dd),3.76(3H,s),3.97-4.12(1H,m),4.32-4.62(3H,m),5.08(1H,d),6.48(1H,d),7.17-7.30(1H,m),7.34-7.52(2H,m),7.55(1H,d),8.04(1H,s),8.39(1H,s),9.67(1H,s)。(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加成物形式1藉由XRPD確定為晶體(圖1)，並且具有203.8℃(開始)(圖樣2)熔點。
中間體62
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(6.05g，29.25mmol)添加到在DMF(80mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61；6g，19.50mmol)和NaH(2g，50.mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌2小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(400mL) 淬滅，用EtOAc(3 x 250mL)萃取，將有機層用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為作為淺黃色固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體62；8.00g，95%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 2.76(3H,s),3.25-3.35(1H,m),3.28(3H,s),3.35-3.42(1H,m),3.78-3.85(1H,m),4.18-4.26(2H,m),4.42(1H,d),5.34(1H,d),7.08-7.30(3H,m),7.95(1H,s),8.43(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=434。
中間體62的替代製備：
在氮氣下，在25℃下，將Cs2CO3(115g，354.44mmol)添加到在MeCN(800mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61：79.5g，253.17mmol)中。將所得混合物加熱至40℃，並且將MeCN(100mL)蒸餾掉。在60℃下，添加4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(64.2g，303.80mmol)，並且在60℃-70℃下攪拌20小時。將該反應混合物濃縮至500mL並且用EtOAc(1000mL)和水(500mL)稀釋。將各層分離，並且將該有機層用水(2 x 500mL)洗滌，並且將揮發物在減壓下去除。在40℃下，將該殘餘物在MTBE(120mL)和庚烷(480mL)的混合物中攪拌，將所得固體過濾，並且用庚烷(250mL)洗滌，以得到呈固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(100g， 91%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ 2.37(3H,s,),3.04(3H,s),3.11-3.19(1H,m),3.28(1H,dd),3.92(1H,m),4.27(1H,d),4.35(2H d),4.95(1H,d),7.06-7.22(1H,m),7.22-7.48(2H,m),8.13(1H,s),8.47(s,1H)。m/z(ES+),[M+H]+=434。
實例19
(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(33.1mg，0.04mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體63；150mg，0.37mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(91mg，0.93mmol)和Cs2CO3(243mg，0.75mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)- 酮(實例19；71.0mg，41.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ1.14(3H,d),2.53(3H,s),3.70(3H,s),4.00(1H,s),4.30-4.48(3H,m),5.07(1H,d),6.30(1H,d),7.31-7.45(4H,m),7.48(1H,s),7.93(1H,s),8.33(1H,s),9.22(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=463。
中間體63
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將1-(溴甲基)-3-氯苯(1332mg，6.48mmol)添加到在DMF(10mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體64；300mg，1.08mmol)和NaH(259mg，6.48mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌2小時。將該反應混合物用水(25mL)淬滅，用EtOAc(2 x 25mL)萃取，將該有機層用鹽水洗滌，並且經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中10%至60% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體63；300mg，69.0%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,22℃)δ 1.24-1.34(3H,m),2.81(3H,s),3.84-3.92(1H,m),4.03-4.19(2H,m),4.37(1H,dd),5.45(1H,d),7.27(1H,d),7.30-7.34(2H,m),7.38 (1H,s),7.99(1H,s),8.45(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=402。
中間體64
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在NH3(7N，在MeOH中，20mL，140mmol)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體65；2.8g，7.77mmol)的溶液在25℃下攪拌過夜。將該溶劑在減壓下去除以得到作為白色固體的所希望的產物(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(2.1g，97%)，將其不經純化用於下一步驟中。m/z(ES+),[M+H]+=278。
中間體65
(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽
將在EtOH(20mL)中的33% Hcl(氣體)中的(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2- 甲酸酯(中間體66；3.4g，8.02mmol)在25℃下攪拌過夜。將該溶劑在減壓下去除以得到呈白色固體的所希望的產物(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體65；2.80g，97%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24℃)δ 1.28(3H,d),1.35(3H,t),2.64(3H,s),3.74(1H,s),4.39(2H,q),4.58-4.76(2H,m),8.37(2H,s),8.47(1H,s),8.61-8.67(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=324。
中間體66
(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，25℃下，將1M HCl(20mL，20.00mmol)添加到在EtOH(20mL)中的(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸(中間體67；5g，9.92mmol)中。將所得混合物在50℃下攪拌20分鐘。將該反應混合物用飽和NaHCO3(50mL)淬滅，用DCM(3 x 100mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(S)-乙基1-(2-((三級-丁氧基羰基)胺基)丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧 啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體66；3.40g，81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,24℃)δ 1.27(3H,dd),1.35(9H,s),1.48(3H,t),2.72(3H,s),4.09-4.18(1H,m),4.47(3H,qd),4.64(2H,dd),8.01(1H,s),8.42(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=424。
中間體67
(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸
在氮氣下，在80℃，將(S)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體12；3.34g，14.06mmol)分批添加至在乙腈(3mL)中的乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；3g，11.25mmol)和K2CO3(3.11g，22.50mmol)中。將所得的混合物在85℃下攪拌4小時。將該反應混合物過濾，並且用MeCN洗滌，將該溶劑在減壓下去除以得到呈黃色油狀的所希望的產物(S)-(三級-丁氧基羰基)(1-(4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-2-(乙氧羰基)-1H-咪唑-1-基)丙-2-基)胺基磺酸(5.00g，88%)。m/z(ES+),[M+H]+=504。
實例20
(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體68；189mg，0.47mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(91mg，0.94mmol)，Cs2CO3(457mg，1.40mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(42.4mg，0.05mmol)在氮氣氛圍下，在110℃攪拌8小時。將該溶劑在減壓下藉由蒸餾去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的4%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.01% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例20；63.8mg，29.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO,24.8℃)δ 1.14(3H,d),2.53(3H,d),3.70(3H,s),3.95-4.03(1H,m),4.29-4.38(2H,m),4.44(1H,dd),5.06(1H,d),6.30(1H,d),7.27(1H,s),7.34(1H,d),7.37-7.53(2H,m),7.93(1H,s),8.33(1H,d),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=465。
中間體68
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在0℃，將NaH(108mg，2.70mmol)添加到在DMF(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體64；250mg，0.90mmol)中。將所得到的溶液在0℃下攪拌持續30分鐘。然後添加4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(373mg，1.80mmol)，並且將所得的溶液在20℃下攪拌12小時。將該反應混合物用水(15mL)淬滅，用EtOAc(4 x 10mL)萃取。將該有機層合併，並且用水(3 x 20mL)，鹽水(20mL)洗滌。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到3% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體68；189mg，52%)。m/z(ES+),[M+H]+=404。
實例21
(S)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將第三代BrettPhos預催化劑(12.44mg，0.02mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的Cs2CO3(304mg，0.93mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(91mg，0.93mmol)和(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體69；130mg，0.31mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供殘餘物。將殘餘物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.1%甲酸)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例21；85mg，57.1%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.12(3H,s),2.40(3H,s),3.70(3H,s),3.90-4.10(1H,m),4.36-4.44(3H,m),5.14(1H,d),6.29(1H,d),7.04(1H,t),7.33(1H,d),7.50-7.59(4H,m),7.93(1H,s),8.32(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=479。
中間體69
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基 -6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將1-(溴甲基)-3-(二氟甲基)苯(207mg，0.94mmol)添加到在DMF(3mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體64；130mg，0.47mmol)和NaH(56.2mg，1.40mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌18小時。將該反應混合物傾倒入飽和NaHCO3(50mL)中，用EtOAc(2 x 50mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(130mg，66.5%)。m/z(ES+),[M+H]+=418。
實例22
(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將第三代BrettPhos預催化劑(12.88mg，0.02mmol) 添加到在1,4-二(5mL)中的1-甲基-1H-吡唑-5-胺(94mg，0.97mmol)，(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體70；130mg，0.32mmol)和Cs2CO3(315mg，0.97mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到7% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.1%甲酸)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例22；60mg，40.1%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.15(3H,d),2.60(3H,s),3.70(3H,s),3.90-4.10(1H,m),4.32-4.38(2H,m),4.46-4.52(1H,dd),5.08(1H,d),6.29(1H,d),7.12-7.18(3H,m),7.33(1H,s),7.93(1H,s),8.32(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=465。
中間體70
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將1-(溴甲基)-3,5-二氟苯(194mg，0.94mmol)添加到在DMF(3mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體64；130mg，0.47mmol)和NaH(37.4mg，0.94mmol)中，並且將所得混合物在25℃下攪拌18小時。將該反應混合物傾倒入飽和NaHCO3(50mL)中，用EtOAc(2 x 50mL)萃取，將有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗產物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體70；130mg，68.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 1.15(3H,d),2.64(3H,s),4.02(1H,s),4.26-4.42(2H,m),4.47-4.57(1H,m),5.09(1H,d),7.15(3H,d),8.27(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=404。
實例23
(S)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體71；193mg，0.49mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(94mg，0.97 mmol),Cs2CO3(474mg，1.46mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(44.0mg，0.05mmol)在氮氣氛圍下，在120℃下攪拌8小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在DCM中的3%至5%MeOH，將包含的化合物的級分蒸發至乾燥，以得到黃色固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.01% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例23；81mg，36.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO,22.4℃)δ 1.12(3H,d),2.53(3H,d),3.70(3H,s),3.76(3H,s),3.90-3.99(1H,m),4.25-4.44(3H,m),5.09(1H,d),6.31(1H,d),6.87(1H,ddd),6.92-7.00(2H,m),7.29(1H,t),7.34(1H,d),7.93(1H,s),8.33(1H,d),9.22(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=459。
中間體71
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
批次1：在氮氣下，在25℃下，將NaH(8.64mg，0.22mmol)添加到在DMF(1mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體64；20mg，0.07mmol)中。將所得的溶液在25℃下攪拌30分鐘。將1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(29.0mg，0.14mmol)添加到將該反應混合物中，到並且將所得的溶液在25℃下攪拌2小時。批次2：在氮氣下，在20℃下，將NaH(56.2mg，1.40mmol)添加到在DMF(3mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(130mg，0.47mmol)中。將所得到的溶液在20℃下攪拌持續30分鐘。將1-(溴甲基)-3-甲氧基苯(188mg，0.94mmol)添加到該反應混合物中，並且將所得的溶液在20℃下攪拌2小時。將2個批次的材料合併，並且將下面的程序用於合併的批次：將該反應混合物用飽和NaHCO3(15mL)淬滅，並且用EtOAc(3 x 15mL)萃取。將有機層合併，並且用水(2 x 15mL)，鹽水(15mL)洗滌，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體71；193mg，89%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,23.0℃)δ 1.29(3H,d),2.81(3H,s),3.80-3.93(4H,m),3.98-4.13(1H,m),4.34(1H,dd),5.32(1H,s),5.50(1H,d),6.84-6.99(3H,m),7.31(1H,d),7.97(1H,s),8.45(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=398。
實例24
(S)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體72；205mg，0.49mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(96mg，0.99mmol)，Cs2CO3(482mg，1.48mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(44.7mg，0.05mmol)在氮氣氛圍下，在120℃下攪拌8小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.01% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例24；59.0mg，25.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO,22.3℃)δ 1.13(3H,d),2.53(3H,d),3.70(3H,s),3.85(3H,s),3.95(1H,dd),4.23-4.44(3H,m),5.10(1H,d),6.31(1H,d),6.96(1H,ddd),7.14-7.24(2H,m),7.34(1H,d),7.93(1H,s),8.33 (1H,d),9.22(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=477。
中間體72
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
批次1：在氮氣下，在20℃下，將NaH(56.2mg，1.40mmol)添加到在DMF(3mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(130mg，0.47mmol)中。將所得到的溶液在20℃下攪拌持續30分鐘。將4-(溴甲基)-1-氟-2-甲氧基苯(205mg，0.94mmol)添加到將該反應混合物中，並且將所得的溶液在下20℃下攪拌2小時。批次2：在氮氣下，在20℃下，將NaH(8.64mg，0.22mmol)添加到在DMF(1mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(20mg，0.07mmol)中。將所得到的溶液在20℃下攪拌持續30分鐘。將4-(溴甲基)-1-氟-2-甲氧基苯(31.6mg，0.14mmol)添加到將該反應混合物中，並且將所得的溶液在下20℃下攪拌2小時將2個批次的材料合併，並且將下面的程序用於合併的批次：將該反應混合物用飽和NaHCO3(15mL)淬滅，並且用EtOAc(3 x 15mL)萃取。將有機層合併，並且用水(2 x 15mL)，鹽水(15mL)洗滌，並且將有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。 將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(4-氟-3-甲氧基苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(205mg，91%)。m/z(ES+),[M+H]+=416。
實例25
(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將第三代BrettPhos預催化劑(0.541g，0.60mmol)添加到在1,4-二(100mL)中的Cs2CO3(11.67g，35.81mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(3.48g，35.81mmol)和(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體73；5g，11.94mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌4小時。將該反應混合物然後過濾，並且將該溶劑在減壓下去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供殘餘物。將該殘餘物進一步藉由C18-快速層析法進行純化，洗提梯度為在水(包含0.1% NH4CO3)中的5%至50% MeCN。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-((6-(二氟甲 基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例25；3.50g，61.1%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.19(3H,d),2.45(3H,s),2.61(3H,s),3.70(3H,s),4.03-4.17(1H,m),4.33-4.41(1H,dd),4.45-4.520(2H,m),5.22(1H,d),6.30(1H,d),6.97(1H,t),7.34(1H,d),7.60-7.69(2H,m),7.96(1H,s),7.97-8.02(1H,t),8.33(1H,s),9.23(1H,s)；m/z(ES+),[M+H]+=480。
中間體73
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將乙酸鈉(2.047g，24.95mmol)添加到在乙醇(無水，99.5%，100mL)中的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體74；5.8g，12.48mmol)中。將所得的混合物在70℃下攪拌18小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體73；5.00g，96%)。m/z(ES+),[M+H]+=419。
中間體74
(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
將三乙醯氧基硼氫化鈉(9.62g，45.37mmol)添加到在DCM(100mL)中的DIPEA(7.92mL，45.37mmol)，(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體65；6g，15.12mmol)、6-(二氟甲基)吡啶甲醛(3g，19.09mmol)和乙酸(2.60mL，45.37mmol)中。將所得的混合物在25℃下攪拌1小時。將該反應混合物傾倒入飽和NaHCO3(300mL)中，並且用DCM(2 x 150mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥，並且將揮發物在減壓下去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色油的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體74；5.8g，82%)。m/z(ES+),[M+H]+=465。
實例26
(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在1,4-二(2.5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體75；60mg，0.14mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(39.9mg，0.41mmol),Cs2CO3(134mg，0.41mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(12.42mg，0.01mmol)在氮氣氛圍下，在120℃下攪拌8小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.01% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為淺黃色固體的(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例26；21mg，30.7%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,25.5℃)δ 1.44(3H,d),2.74(3H,s),3.88(3H,s),4.21(1H,dd),4.30(1H,t),4.42(1H,d),4.63(1H,dd),5.48(1H,d),6.38(1H,d),7.52(1H,d),7.68(1H,d),8.09(1H,s),8.31(1H,s),8.53(1H,s),8.90(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=499。
中間體75
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在空氣下，在20℃下，將NH3(在MeOH中7N，10mL)添加到(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體76；100mg，0.21mmol)中。將得到的溶液在50℃攪拌16小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體75；60mg，66.3%)。m/z(ES+),[M+H]+=438。
中間體76
(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在空氣下，將2-(三氟甲基)嘧啶-4-甲醛(147mg，0.83mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體65；250mg，0.69mmol)中。將所得的溶液在40℃下攪拌12小時。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(441mg，2.08mmol)，並且將所得的溶液在20℃下攪拌12小時。將該反應用水(5mL)淬滅，並且用DCM(5 x 10mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的2%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色油的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體76；110mg，32.8%)。m/z(ES+),[M+H]+=484。
實例27
(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將第三代BrettPhos預催化劑(11.90mg，0.01mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的1-甲基-1H-吡唑-5-胺(87mg，0.89mmol)，Cs2CO3(291mg，0.89mmol)和(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑 并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體77；130mg，0.30mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在DCM中的0至6% MeOH，將包含產物的級分蒸發，以得到固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.1%甲酸)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例27；100mg，67.5%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.20(3H,d),2.56(3H,s),3.70(3H,s),4.05-4.18(1H,m),4.37-4.41(1H,m),451-4.60(2H,m),5.212(1H,d),6.30(1H,d),7.34(1H,d),7.76-7.83(2H,m),7.96(1H,s),8.06-8.11(1H,m),8.32(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=498。
中間體77
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體78；140mg，0.29 mmol)添加到NH3(在MeOH中7N)溶液(10mL)中，並且將所得混合物在50℃下攪拌5小時。將該溶劑在減壓下去除。這提供了呈白色固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體77；110mg，87%)。m/z(ES+),[M+H]+=437。
中間體78
(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
將6-(三氟甲基)吡啶甲醛(110mg，0.63mmol)添加到在DCM(15mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；250mg，0.63mmol)中，並且將所得混合物在40℃下攪拌4小時。冷卻至室溫之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(267mg，1.26mmol)，並且將該反應攪拌1小時。然後將該反應用飽和NaHCO3(50mL)淬滅，並且用DCM(2 x 50mL)萃取。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出淡黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供 作為淡黃色油的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體78；140mg，46%)。m/z(ES+),[M+H]+=483。
實例28
(S)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將第三代BrettPhos預催化劑(11.99mg，0.01mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的1-甲基-1H-吡唑-5-胺(87mg，0.90mmol)，(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體79，130mg，0.30mmol)中，並且將所得混合物在100℃下攪拌4小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在DCM中的0至7% MeOH，將包含化合物的級分蒸發，以得到固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.1%)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實 例28；80mg，54%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.11(3H,d),2.60(3H,s),3.70(3H,s),3.90-4.10(1H,m),4.31-4.45(3H,m),5.10(1H,d),6.29(1H,d),7.00-7.50(4H,m),7.92(1H,s),7.83(1H,s),8.21(1H,s),8.32(1H,s),9.21(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=495。
中間體79
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將3-(二氟甲氧基)苯甲醛(108mg，0.63mmol)添加到在DCM(15mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；250mg，0.63mmol)中，並且將所得混合物在40℃下攪拌4小時。然後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(267mg，1.26mmol)，並且將該反應進一步攪拌1小時。將該反應混合物然後傾倒入飽和NaHCO3(50mL)中，並且用DCM(2 x 50mL)萃取。將合併的有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出粗物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供白色固體。將該固體然後用NH3(在MeOH中7N，15.00mL)處理，並且在50℃下加熱5小時。將該等揮發物然後在減壓下去除以得到 作為淺黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲氧基)苄基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(130mg，47.5%)。m/z(ES+),[M+H]+=434。
實例29
(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(31.1mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(8mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體80；300mg，0.69mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(167mg，1.72mmol)和Cs2CO3(448mg，1.37mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將包含化合物的級分蒸發至乾燥，以得到黃色殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4- 基)-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例28；141mg，41.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 1.21(3H,d),2.52(3H,s),3.71(3H,s),4.13(1H,dd),4.37(1H,dd),4.52(1H,dd),4.58(1H,d),5.26(1H,d),6.31(1H,d),7.34(1H,d),7.71(1H,d),7.82(1H,s),7.95(1H,s),8.33(1H,s),8.84(1H,d),9.24(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=498。
中間體80
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將4-(三氟甲基)吡啶甲醛(136mg，0.78mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；280mg，0.71mmol)，DIPEA(0.37mL，2.12mmol)和AcOH(0.121mL，2.12mmol)中。在25℃下攪拌1小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(449mg，2.12mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌2小時，並且然後在50℃加熱持續8小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，並且用DCM(2 x 75mL)萃取。將合併的有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的 (S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體80；300mg，97%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20℃)δ 1.60(3H,s),2.79(3H,s),4.07-4.20(1H,m),4.26(1H,s),4.36-4.45(1H,m),4.50(1H,dd),5.54(1H,d),7.49(1H,d),7.72(1H,s),8.00(1H,s),8.45(1H,s),8.75(1H,d)。
實例30
(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)吡啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(31.1mg，0.03mmol)添加到在1,4-二(8mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基吡啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體81；300mg，0.69mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(167mg，1.72mmol)和Cs2CO3(448mg，1.37mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌5小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將包含化合物的級分蒸發至乾燥，以得到黃色殘餘物。將該殘餘物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使 用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例30；200mg，58.5%)。1H NMR(300MHz,DMSO,23℃)δ 1.18(3H,d),2.61(3H,s),3.70(3H,s),4.00-4.13(1H,m),4.30-4.40(1H,d),4.45-4.60(2H,m),5.18(1H,d),6.30(1H,s),6.20(1H,d),7.73(1H,d),7.91(1H,s),7.96(1H,s),8.33(1H,s),8.73(1H,d),9.23(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=498。
中間體81
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將2-(三氟甲基)異煙醛(170mg，0.97mmol)添加到在DCM(15mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；350mg，0.88mmol)，DIPEA(0.462mL，2.65mmol)和AcOH(0.152mL，2.65mmol)中。在25℃下攪拌1小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(561mg，2.65mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌1小時，並且在50℃加熱持續18小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(50mL)淬滅，並且用DCM(2 x 75mL)萃取。將該有 機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(320mg，83%)。m/z(ES+),[M+H]+=437。
實例31
(S)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(51.9mg，0.06mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體82；240mg，0.57mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(111mg，1.15mmol)和Cs2CO3(373mg，1.15mmol)中。將所得的溶液在120℃下攪拌8小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的4%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將包含產物的級分蒸發到乾燥，以得到固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使 用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例31；92mg，33.5%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.2℃)δ 1.36(3H,d),2.69(3H,s),3.82(3H,s),4.09(1H,dd),4.22(1H,tt),4.37-4.49(2H,m),5.50(1H,d),6.31(1H,d),6.64(1H,t),7.01(1H,s),7.36-7.43(1H,m),7.50(1H,d),7.61(1H,s),7.75(1H,s),8.29(1H,s),8.69(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=480。
中間體82
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將4-(二氟甲基)吡啶甲醛(中間體83；154mg，0.98mmol)添加到在DCM(10mL)中的(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；300mg，0.76mmol)，DIPEA(0.396mL，2.27mmol)和AcOH(0.130mL，2.27mmol)中。在25℃下攪拌0.5小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(481mg，2.27mmol)，並且將該反應在25℃下攪拌0.5小時，並且在50℃加熱持續12小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，並且用DCM(2 x 75mL)萃 取。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((4-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體82；240mg，76%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.5℃)δ 1.37(3H,d),2.79(3H,d),4.10(1H,dd),4.25(1H,tdd),4.35-4.53(2H,m),5.50(1H,d),6.64(1H,t),7.33-7.47(1H,m),7.61(1H,s),7.99(1H,s),8.44(1H,d),8.69(1H,dd)。m/z(ES+),[M+H]+=419。
中間體83
4-(二氟甲基)吡啶甲醛
在氮氣下，將LiAlH4(0.274g，7.22mmol(添加到冷卻至-78℃的THF(10mL)中的4-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺(中間體84；1.2g，5.55mmol)中。將所得到的溶液在-78℃下攪拌持續20分鐘。添加EtOAc(1mL)，然後將該反應在-78℃下用水(0.3mL)淬滅。添加15% NaOH水性溶液(1.5mL)，另外的水(0.3mL)，並且將所得固體藉由過濾去除。將該濾液經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出作為綠色油的4-(二氟甲基)吡啶甲醛(中間體83；1.09g)。將該產物不經進一步純化直接用於下一步驟。m/z(ES+)，[M+H]+=158。
中間體84
4-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺
在0℃下經20分鐘的時間在氮下將三甲銨(在n-己烷中2M，40.1mL，80.15mmol)添加到在DCM(80mL)中的N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(6.25g，64.12mmol)中。將所得到的溶液在0℃下攪拌持續20分鐘。在0℃下，將在DCM(20mL)中的甲基4-(二氟甲基)吡啶甲酸酯(中間體85；3.0g，16.03mmol)添加到該反應混合物中，並且將所得的溶液在0℃下攪拌2小時。在0℃下，將該反應混合物用2M NaOH(50mL)淬滅，並且用DCM(3 x 100mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中30至40% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的4-(二氟甲基)-N-甲氧基-N-甲基吡啶醯胺(中間體84；2.47g，71.3%)。1H NMR(400MHz,MeOD,20.3℃)δ 3.42(3H,s),3.73(3H,s),6.94(1H,t),7.65-7.72(1H,m),8.75-8.82(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=217。
中間體85
甲基4-(二氟甲基)吡啶甲酸酯
將在MeOH(150mL)中的2-氯-4-(二氟甲基)吡啶(中間體86；6.9g，42.19mmol)，乙酸鉀(8.28g，84.38mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.543g，2.11mmol)在10大氣壓下的CO氣氛下，在70℃攪拌持續24h。將該混合物然後過濾，並且將該濾液在減壓下蒸發。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中20%至30% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的甲基4-(二氟甲基)吡啶甲酸酯(中間體85；6.30g，80%)。1H NMR(400MHz,MeOD,20.1℃)δ 4.03(3H,s),6.98(1H,t),7.79-7.86(1H,m),8.30(1H,dd),8.86(1H,dd)。m/z(ES+),[M+H]+=188。
中間體86
在0℃下，經10分鐘的時段在氮氣下將2-氯-4-(二氟甲基)吡啶
DAST(20.53mL，155.42mmol)逐滴添加至在DCM(150mL)中的2-氯異煙醛(10g，70.64mmol)中。將溫度加熱至室溫並且攪拌12小時。將該反應混合物淬滅，並且在0℃下用飽和NaHCO3調節至pH 7-8。將該水相用DCM(3 x 150mL)萃取，將有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中5%至10% EtOAc的洗提梯度)純化。 將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的2-氯-4-(二氟甲基)嘧啶(中間體86；7.00g，60.6%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.5℃)δ 6.65(1H,t),7.38(1H,dd),7.49(1H,s),8.55(1H,dd)。m/z(ES+),[M+H]+=164。
實例32
(S)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(12.42mg，0.01mmol)添加到在1,4-二(4mL)中的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體87；120mg，0.27mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(66.5mg，0.69mmol)和Cs2CO3(179mg，0.55mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該粗產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(S)-6-甲基 -2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例32；60mg，43.9%)。1H NMR(300MHz,DMSO)δ 1.25(d,3H),3.71(s,3H),4.14-4.21(m,1H),4.34-4.46(m,1H),4.56-4.71(m,2H),5.27(d,1H),6.32(d,1H),7.35(d,1H),7.98(s,1H),8.13(d,1H),8.34(s,1H),9.24(s,1H),9.41(s,1H)。m/z(ES+),[M+H]+=499。
中間體87
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將乙酸鈉(212mg，2.58mmol)添加到在EtOH(5mL)中的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體88；250mg，0.52mmol)中，並且將所得混合物在80℃下攪拌20小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體87；120mg，53.1%)。1H NMR(300MHz,CDCl3,20.5℃)δ 1.45(d,3H),2.79(s,3H),4.43(d,1H),4.15-4.25(m 1H),4.60(dd,1H),5.50(d,1H),7.82(d,1H),8.03(s,1H),8.46(s,1H),9.34(s,1H)。 m/z(ES+),[M+H]+=438。
中間體88
(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)嘧啶-4-基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯
在氮氣下，將Cp2ZrHCl(492mg，1.91mmol)添加到在THF(10mL)中的N-甲氧基-N-甲基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲醯胺(中間體89；300mg，1.28mmol)中。將所得混合物在25℃下攪拌20分鐘，並且然後直接使用。添加在DCM(15mL)中的三乙醯氧基硼氫化鈉(385mg，1.81mmol)，乙酸(0.104mL，1.81mmol)，(S)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體64；240mg，0.60mmol)和DIPEA(0.317mL，1.81mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌1小時。進一步添加三乙醯氧基硼氫化鈉(385mg，1.81mmol)，並且攪拌再1小時。將該反應混合物然後傾倒入飽和NaHCO3(75mL)中，並且用DCM(3 x 25mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在DCM中的0至5% MeOH。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為淡黃色固體的(S)-乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(((6-(三氟甲基)嘧啶-4- 基)甲基)胺基)丙基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體88；250mg，85%)。m/z(ES+),[M+H]+=484。
中間體89
N-甲氧基-N-甲基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲醯胺
在0℃下經20分鐘的時段在氮氣下將三甲銨(在n-己烷中2M，72.8mL，145.54mmol)逐滴添加至在DCM(150mL)中的N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(10.65g，109.16mmol)中。將所得到的溶液在0℃下攪拌持續20分鐘。在0℃下，將在DCM(70mL)中的甲基6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲酸酯(中間體90；7.5g，36.39mmol)逐滴添加至該反應混合物中。在0℃下，將該反應混合物然後攪拌1小時。將該反應用2M NaOH(100mL)淬滅，並且用DCM(3 x 150mL)萃取。將該有機相經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至25% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色油的N-甲氧基-N-甲基-6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲醯胺(中間體89；5.63g，65.8%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.2℃)δ 3.42(3H,s),3.79(3H,s),7.90(1H,s),9.41-9.47(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=236。
中間體90
甲基6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲酸酯
將在MeOH(300mL)中的4-氯-6-(三氟甲基)嘧啶(10g，54.79mmol)，乙酸鉀(10.75g，109.57mmol)和Pd(dppf)Cl2(2.00g，2.74mmol)在10大氣壓下的CO氣氛下並且在70℃下攪拌持續6小時。將混合物過濾，並且將該濾液在減壓下蒸發。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析(在石油醚中0至20% EtOAc的洗提梯度)純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的甲基6-(三氟甲基)嘧啶-4-甲酸酯(中間體90；7.86g，69.6%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.3℃)δ 4.11(3H,s),8.37(1H,d),9.55-9.61(1H,m)。m/z(ES+),[M+H]+=207。
實例33
7-(3,4-二氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第二代XPhos預催化劑(78mg，0.09mmol)添加到在1,4-二(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體 91；340mg，0.87mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(169mg，1.74mmol)和Cs2CO3(568mg，1.74mmol)中。將所得的溶液在100℃下攪拌12小時。將溶劑藉由在真空下蒸餾除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供固體。將該固體進一步藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.05% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的7-(3,4-二氟苄基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例33；89mg，22.6%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,20.1℃)δ 2.68(3H,d),3.68-3.76(2H,m),3.80(3H,s),4.25-4.33(2H,m),4.77(2H,s),6.29(1H,d),6.90(1H,s),7.07-7.28(3H,m),7.49(1H,d),7.69(1H,s),8.29(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=451。
中間體91
2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將NaH(91mg，2.28mmol)添加到在DMF(5mL)中的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體48；200mg，0.76mmol)中。將所得到的 溶液在25℃下攪拌持續30分鐘。添加4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(314mg，1.52mmol)，並且將所得的溶液在25℃下攪拌12小時。將該反應混合物傾倒入水(50mL)中，將沈澱藉由過濾收集，用水(50mL)洗滌並且在真空下乾燥以得到作為黃色固體的2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體91；340mg)，將其不經進一步純化直接使用。1H NMR(400MHz,DMSO,19.9℃)δ 2.64(3H,s),3.74-3.82(2H,m),4.36-4.44(2H,m),4.70(2H,s),7.37-7.51(3H,m),8.26(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=390。
實例34
(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮己二酸加成物，形式1的製備
將50mg(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例18)溶解於大約0.5mL甲醇中。使用熱槍助溶解。將16mg己二酸溶解在大約0.5mL甲醇中。使用熱槍助溶解。然後將(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮溶液緩慢添加至己二酸溶液中。這仍然為溶液。添加磁 性攪拌棒，並且允許該溶液在環境溫度下攪拌。大約15分鐘之後觀察沈澱物。添加更多體積的甲醇直到獲得游離漂浮沈澱物並且允許該沈澱物攪拌過夜。將該沈澱物然後過濾，以得到(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮己二酸加成物(實例34)，形式1，1：2莫耳比己二酸：(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮，如藉由1H NMR確定的。1H NMR(500MHz，甲醇-d 4,27℃)δ 8.24(1H,s),7.82(1H,s),7.41(1H,d),7.35(1H,ddd),7.28-7.20(3H,m),6.31(1H,d),5.18(1H,d),4.52-4.39(3H,m),4.03-4.00(1H,m),3.73(3H,s),3.46-3.43(1H,m),3.39-3.35(1H,m),3.23(3H,s),2.53(3H,s),2.30(2H,m),1.63(2H,m)，未觀察到可交換質子。該樣品藉由XRPD(參見圖3)和DSC(參見圖4)分析。(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮己二酸加成物形式1，藉由XRPD確定為晶體，並且具有185.4℃的熔點(開始)。
實例35
(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮的乙磺酸加成物的製備
將(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35a；2.2g，5.07mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(0.754g，7.61mmol)和碳酸銫(3.30g，10.14mmol)溶解在2-MeTHF(25mL)和水(2.5mL)中，並且用氮氣進行脫氣。添加2'-(二環己基膦烷基)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯基]-2-胺(0.160g，0.41mmol)和Pd2dba3(0.186g，0.20mmol)，並且將該混合物進一步用氮氣進行脫氣。將該反應然後加熱至80℃持續24小時。將該反應冷卻至環境溫度，並且進一步添加2'-(二環己基膦烷基)-N,N-二甲基-[1,1'-聯苯基]-2-胺(0.160g，0.41mmol)和Pd2dba3(0.186g，0.20mmol)，並且將該反應用氮氣進行脫氣。將該反應然後在80℃下攪拌16小時。添加Silicycle(1.2g，SiliaMetS Thiol)並且將該反應冷卻至環境溫度。將該反應混合物通過矽藻土過濾，用EtOAc洗滌。將該反應用乙酸乙酯萃取，用水性檸檬酸(0.5M)和飽和碳酸氫鈉洗滌。將揮發物然後在減壓下去除。藉由製備型超臨界流體層析法(Kromasil DIOL column，250mm x 50mm，10um，流動相25% EtOH/NH3 100/0.5在CO2中，140巴)進行純化，得到(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(1.38g)，將其不經進一步純化用於下一步驟。將來自之前步驟的(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲 基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(1.3g，1.93mmol)溶解在乙腈(2mL)中，並且加熱至66℃。然後添加在乙腈(2mL)中乙磺酸(0.22mL，2.63mmol)。將該反應然後在環境溫度攪拌1小時。觀察到沈澱物。進一步添加乙腈(3mL)，並且將該沈澱物過濾，用乙腈(3mL)洗滌，並且在真空下乾燥66小時，以得到(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮的乙磺酸加成物(0.41g)。將該濾液在減壓下蒸發，並且添加乙腈(3mL)和MTBE(2mL)。將所得沈澱物過濾並且在真空下乾燥以得到(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮的另外的乙磺酸加成物(0.73g)。合併2個批次以得到(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮的乙磺酸加成物(實例35；1.14g，72%)，以1：2莫耳比乙烷磺酸：(S)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮，如藉由1H NMR確定的。1H NMR(500MHz,DMSO,27℃)1.08(1.5H,t),2.42(1H,q),2.52(3H,m),3.18(3H,s),3.32(1H,dd),3.41(1H,dd),3.73(3H,s),4.05(1H,dtd),4.39(1H,d),4.43-4.56(2H,m),5.09(1H,d),6.38(1H,d),7.19-7.32(1H,m),7.38-7.45(2H,m),7.48(1H,ddd),7.98(1H,s),8.36(1H,d),9.38(1H,s)。m/z(ES+)[M+H]+ 495。
中間體35a
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35b；1.8g，5.85mmol)和Cs2CO3(2.67g，8.19mmol)在乙腈(20mL)下漿液化，並且在氮氣下加熱至70℃。將在乙腈(3mL)中的4-(溴甲基)-1,2-二氟苯(1.48g，7.02mmol)經注射器添加至該漿液，並且將該反應在70℃下攪拌23小時。將揮發物在減壓下去除，並且然後將乙酸乙酯(30mL)並且隨後是水(20mL)添加到殘餘物中。將各相分離，將該水相用乙酸乙酯(2 x 20mL)萃取。將有機相合併，並且將揮發物在減壓下去除。將得到的固體懸浮於在庚烷/MTBE(4：1，30mL)中，並且在50℃下攪拌2小時。將該固體濾出並且在減壓下乾燥以得到呈固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35a；2.36g，93%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)δ 2.77(3H,s),3.28(4H,s),3.38(1H,dd),3.81(1H,m),4.22(2H,m),4.41(1H,dd),5.37(1H,d),7.10-7.26(3H,m),7.94(1H,s),8.42(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=434。
中間體35b
(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并 [1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將乙基4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯(中間體23；2g，7.42mmol)和K2CO3(1.23g，8.91mmol)懸浮於1,4-二(20mL)和丙酮(20mL)中。在環境溫度下添加在丙酮(15mL)中的三級丁基(R)-4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物(中間體35c；2.18g，8.17mmol)持續3天。將混合物通過矽藻土過濾並且將固體用丙酮(15mL)沖洗。將該濾液然後濃縮至總體積(10mL)。添加HCl(在異丙醇中5M，10.39mL)溶液，並且將該反應在環境溫度下攪拌16小時。緩慢添加三乙胺(10.33mL，74.24mmol)，隨後添加異丙醇(15mL)以得到懸浮液。將該反應然後加熱至50℃持續3小時。添加水(40mL)，其產生細懸浮液。將該懸浮液在50℃下攪拌30分鐘，並且然後在環境溫度下攪拌16小時。將沈澱物然後過濾，並且用在水(2 x 25mL)中的50%丙酮洗滌，並且在減壓下，在40℃下乾燥4天，以得到呈固體的(S)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體35b；1.95g，85%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 2.61(s,3H),3.26(s,3H),3.33-3.45(m,2H),3.99(br s,1H),4.30(dd,1H),4.44(dd,1H),8.26(s,1H),8.42(d,1H),8.58(s,1H)。m/z(ES+),[M+H]+=308。
以類似於中間體57的方式從(S)-三級丁基(1-羥基-3-甲氧基丙 -2-基)胺基甲酸酯起始來製備中間體35c
中間體35c
三級丁基(R)-4-(甲氧基甲基)-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物
1H NMR(400MHz,MeOD)δ 1.54(s,9H),3.40(s,3H),3.61(d,2H),4.46(qd,1H),4.60(dd,1H),4.68(dd,1H)。m/z：ES+[M+H]+ 268。
實例36
(R)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將在1,4-二(5mL)中(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體91；187mg，0.43mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(104mg，1.07mmol),Cs2CO3(279mg，0.86mmol)和的第二代XPhos預催化劑(38.0mg，0.04mmol)在110℃下於氮氣氛圍 下攪拌6小時。將該溶劑在減壓下藉由蒸餾去除。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析法進行純化，洗提梯度為在DCM中的3%至5% MeOH。將該產物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行純化，使用水(含有0.01% NH4HCO3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(R)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(112mg，52.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20.9℃)δ 1.22(3H,d),2.52(3H,s),3.35(1H,s),3.71(3H,s),4.13(1H,ddd),4.40(1H,dd),4.51-4.63(2H,m),5.22(1H,d),6.31(1H,d),7.34(1H,d),7.78(1H,d),7.84(1H,d),7.97(1H,s),8.10(1H,t),8.33(1H,d),9.24(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=498。
中間體92
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將6-(三氟甲基)吡啶甲醛(126mg，0.72mmol)添加到在DCM(10mL)中的(R)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體93；260mg，0.66mmol)，DIPEA(0.343mL，1.97mmol)和AcOH(0.113 mL，1.97mmol)中。將所得到的溶液在25℃下攪拌持續20分鐘。將三乙醯氧基硼氫化鈉(417mg，1.97mmol)添加至該反應混合物中，並且將所得的溶液在25℃下攪拌1小時，並且然後在50℃下攪拌12小時。將該反應混合物傾倒入水(10mL)中，用DCM(3 x 15mL)萃取，將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色油。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的3%到4% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為無色油狀的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-甲基-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體92；187mg，65.3%)。m/z(ES+),[M+H]+=437。
中間體93
(R)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽
中間體93以類似中間體65的方式，用(R)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-氧化物製備。中間體93表現出以下分析數據。1H NMR(400MHz,DMSO,22℃)δ 1.27(3H,d),1.36(3H,t),2.64(3H,s),3.57(3H,s),3.74(1H,s),4.33-4.44(2H,m),4.58-4.75(2H,m),8.33(3H,s),8.47(1H,s),8.64(1H,s)。m/z(ES+),[M+H]+=324。
實例37
(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將第三代BrettPhos預催化劑(60.6mg，0.07mmol)添加到在1,4-二(10mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體94；280mg，0.67mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(162mg，1.67mmol)和Cs2CO3(436mg，1.34mmol)中。將所得的混合物在100℃下攪拌8小時。將溶劑在減壓下除去。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到6% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供黃色殘餘物。將該殘餘物藉由製備型HPLC(XSelect CSH Prep C18 OBD柱，5μ二氧化矽，19mm直徑，150mm長度)進行進一步純化，使用水(含有0.03% NH3)和MeCN的極性遞減混合物作為洗提液。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為固體的(R)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例37；119mg，37.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 1.20(3H,d),2.51(3H,s),3.70(3H,s),4.10(1H,d),4.34-4.43(1H, m),4.47-4.61(2H,m),5.21(1H,d),6.30(1H,d),6.97(1H,t),7.34(1H,d),7.59-7.66(2H,m),7.94-8.04(2H,m),8.33(1H,s),9.23(1H,s)。m/z(ES+)[M+H]+ 480。
中間體94
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，在25℃下，將6-(二氟甲基)吡啶甲醛(214mg，1.36mmol)添加到在DCM(10mL)中的(R)-乙基1-(2-胺基丙基)-4-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-咪唑-2-甲酸酯二鹽酸鹽(中間體93；270mg，0.68mmol)，DIPEA(0.357mL，2.04mmol)和AcOH(0.117mL，2.04mmol)中。在25℃下攪拌1小時之後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(433mg，2.04mmol)，並且將所得混合物在25℃下攪拌1小時，並且在50℃加熱持續5小時。將該反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)淬滅，並用DCM(2 x 75mL)萃取。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾並且蒸發以給出黃色殘餘物。將該粗產物藉由快速二氧化矽層析，在DCM中的0%到5% MeOH的洗提梯度來純化。將純的級分蒸發至乾燥以提供作為黃色固體的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體94；280mg，98%)。1H NMR(400MHz,DMSO,20℃)δ 1.21(3H,d),2.64(3H,d),4.09- 4.16(1H,m),4.35(1H,dd),4.49-4.64(2H,m),5.22(1H,d),6.82-7.12(1H,m),7.60-7.68(2H,m),7.95-8.05(1H,m),8.30(1H,s),8.61(1H,s)。m/z(ES+)[M+H]+ 419。
實例38
(R)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體95；288mg，0.64mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(68.7mg，0.71mmol)，碳酸銫(419mg，1.29mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(29.1mg，0.03mmol)懸浮於三級-丁醇(6mL)中，並且脫氣10分鐘。將該反應在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應然後用乙酸乙酯(75mL)稀釋，並且用飽和水性碳酸氫鈉(25mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，並且真空濃縮以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯Xbridge製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，30mm直徑，100mm長度)，使用水(包含1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為白色固體的(R)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫 咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例38；88mg，26.9%)。1H NMR(500MHz,DMSO,30℃)2.53(2H,s),3.19(1H,d),3.33(3H,d),3.40(1H,dd),3.71(3H,d),4.03(1H,q),4.09(1H,q),4.4-4.57(3H,m),5.17(1H,d),6.31(1H,d),7.05(1H,t),7.34(1H,d),7.5-7.56(2H,m),7.56-7.63(2H,m),7.95(1H,s),8.33(1H,s),9.20(1H,s)。m/z ES+[M+H]+ 509。
中間體95
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將氫化鈉(60%分散體)(28.6mg，0.71mmol)添加到在DMF(15mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61；200mg，0.65mmol)中。將所得懸浮液在20℃下攪拌持續30分鐘。添加1-(氯甲基)-3-(二氟甲基)苯(126mg，0.71mmol)，隨後添加四丁基碘化銨(24.01mg，0.06mmol)，並且將所得溶液在20℃下攪拌18小時。將其用飽和水性氯化銨(30mL)稀釋，並且用乙酸乙酯(2 x 70mL)萃取。將合併的有機層乾燥，並且在真空中濃縮以給出作為膠狀物的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-(二氟甲基)苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體95；321mg，>100%)，將其不經進一步純化用於下一步驟中。1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)2.64(3H,s),3.17(3H,s),3.40(2H,dd),3.99-4.11(1H,m),4.4-4.59(3H,m),5.15(1H,d),7.03(1H,t),7.5-7.53(2H,m),7.59(1H,d),7.96(1H,s),8.25(1H,s),8.59(1H,s)。m/z ES+[M+H]+ 448。
實例39
(R)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體96；201mg，0.43mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(46.0mg，0.47mmol)，碳酸銫(281mg，0.86mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(19.51mg，0.02mmol)懸浮於三級-丁醇(5mL)中，並且脫氣10分鐘。將該反應在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應然後用乙酸乙酯(75mL)稀釋，並且用飽和水性碳酸氫鈉(25mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，並且在真空中濃縮以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯Xbridge製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，30mm直徑，100mm長度)，使用水(包含1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為固體的(R)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲 基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例39；68mg，29.9%)。1H NMR(500MHz,DMSO,30℃)3.18(1H,d),3.20(3H,d),3.32(3H,s),3.39(1H,dd),3.54(1H,dd),3.71(3H,d),4.51-4.63(2H,m),4.66(1H,d),5.24(1H,d),6.31(1H,d),7.34(1H,dd),7.78(1H,d),7.83(1H,d),7.98(1H,s),8.09(1H,t),8.33(1H,s),9.20(1H,s)。m/z ES+[M+H]+ 528。
中間體96
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
在氮氣下，將氫化鈉(60%分散體)(19.16mg，0.48mmol)添加到在DMF(10mL)中的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體61；134mg，0.44mmol)中。將所得懸浮液在20℃下攪拌持續30分鐘。添加2-(溴甲基)-6-(三氟甲基)嘧啶(115mg，0.48mmol)並且將所得溶液在20℃下攪拌18小時。將該反應用飽和水性氯化銨(30mL)淬滅並用乙酸乙酯(2 x 70mL)萃取。將合併的有機層乾燥，並且在真空中濃縮以給出作為膠狀物的(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-6-(甲氧基甲基)-7-((6-(三氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體96；203mg，100%)。1H NMR(400 MHz,DMSO,30℃)2.63(3H,s),3.20(3H,s),3.37-3.42(1H,m),3.54(1H,dd),4.20(1H,dt),4.56(2H,d),4.67(1H,d),5.23(1H,d),7.80(2H,dd),8.09(1H,t),8.29(1H,s),8.59(1H,d)。m/z ES+[M+H]+ 467。
實例40
(R)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體97；280mg，0.65mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(68.9mg，0.71mmol)，碳酸銫(421mg，1.29mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(29.3mg，0.03mmol)懸浮於三級-丁醇(6mL)中，並且脫氣10分鐘。將該反應在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應混合物用乙酸乙酯(75mL)稀釋，並且用飽和水性碳酸氫鈉(25mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，並且在真空中濃縮以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯Xbridge製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，30mm直徑，100mm長度)，使用水(包含1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為灰白色固體的(R)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基 甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例40；80mg，25.1%)。1H NMR(500MHz,DMSO,30℃)2.52(3H,s),3.19(1H,s),3.19(3H,s),3.35(1H,dd),3.43(1H,dd),3.71(3H,s),4.43(1H,d),4.48-4.57(2H,m),5.12(1H,d),6.30(1H,d),7.15(3H,td),7.34(1H,d),7.94(1H,s),8.32(1H,s),9.18(1H,s)。m/z ES+[M+H]+ 495。
中間體97以類似於中間體96的方式，使用中間體61和1-(溴甲基)-3,5-二氟溴苯製備。
中間體97
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3,5-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)2.64(3H,s),3.18(3H,s),3.44(2H,dd),4.08(1H,dd),4.4-4.59(3H,m),5.10(1H,d),7.13(3H,dt),8.25(1H,s),8.56-8.62(1H,m)。m/z ES+[M+H]+ 434。
實例41
(R)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
將(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(中間體98；164mg，0.38mmol)，1-甲基-1H-吡唑-5-胺(40.9mg，0.42mmol)，碳酸銫(250mg，0.77mmol)和第三代BrettPhos預催化劑(17.37mg，0.02mmol)懸浮於三級-丁醇(5mL)中，並且脫氣10分鐘。將該反應在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應用乙酸乙酯(75mL)稀釋，並且用飽和水性碳酸氫鈉洗滌(25mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)，並且在真空中濃縮以給出棕色膠狀物。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯Xbridge製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，30mm直徑，100mm長度)，使用水(包含1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將包含希望的化合物的級分蒸發至乾燥以提供作為灰白色固體的(R)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮(實例41；58.0mg，31%)。1H NMR(500MHz,DMSO,30℃)2.53(3H,s),3.18(3H,d),3.19(1H,d),3.38(1H,dd),3.70(3H,s),3.76(3H,s),3.95-4.02(1H,m),4.33-4.43(2H,m),4.49-4.55(1H,m),5.12(1H,d),6.30(1H,d),6.88(1H,dd),6.98(2H,s),7.27-7.31(1H,m),7.34(1H,d),7.93(1H,s),8.29-8.36(1H,m),9.18(1H,s)。m/z ES+[M+H]+ 489。
中間體98以類似於中間體96的方式製備，使用中間體61和 1-(溴甲基)-3-甲氧基苯。
中間體98
(R)-2-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-7-(3-甲氧基苄基)-6-(甲氧基甲基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡 -8(5H)-酮
1H NMR(400MHz,DMSO,30℃)2.64(3H,s),3.17(3H,s),3.37-3.42(2H,m),3.76(3H,s),3.98(1H,s),4.33-4.45(2H,m),4.49(1H,d),5.04-5.19(1H,m),6.88(1H,d),6.97(2H,d),7.29(1H,t),8.24(1H,s),8.60(1H,s)。m/z ES+[M+H]+428。
圖1示出了(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1的X射線粉末繞射圖(實例18a)。
圖2示出了(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 乙磺酸加合物，形式1的DSC熱譜圖(實例18a)。
圖3示出了(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1的X射線粉末繞射圖(實例34)。
圖4示出了(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基 -2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮 己二酸加合物，形式1的DSC熱譜圖(實例34)。
圖5示出了在A549異種移植物模型中藉由實例18a與司美替尼(ARRY-142886)的組合的腫瘤生長抑制。
圖6：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)A549細胞系中的細胞生長抑制。表示從擬合的劑量反應曲線獲取的生長抑制百分率的劑量矩陣。
圖7：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)A549細胞系中的細胞生長抑制。從單一療法劑量反應曲線計算的Loewe加和性模型。
圖8：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)A549細胞系中的細胞生長抑制。藉由從源自擬合數據減去Loewe加和性模型數據計算出的過熱圖(協同作用)。
圖9：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2122細胞系中的細胞生長抑制。表示從擬合的劑量反應曲線獲取的生長抑制百分率的劑量矩陣。
圖10：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2122細胞系中的細胞生長抑制。從單一療法劑量反應曲線計算的Loewe加和性模型。
圖11：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2122細胞系中的細胞生長抑制。 藉由從源自擬合數據減去Loewe加和性模型數據計算出的過熱圖(協同作用)。
圖12：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2009細胞系中的細胞生長抑制。表示從擬合的劑量反應曲線獲取的生長抑制百分率的劑量矩陣。
圖13：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2009細胞系中的細胞生長抑制。從單一療法劑量反應曲線計算的Loewe加和性模型。
圖14：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)H2009細胞系中的細胞生長抑制。藉由從源自擬合數據減去Loewe加和性模型數據計算出的過熱圖(協同作用)。
圖15：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)Calu6細胞系中的細胞生長抑制。表示從擬合的劑量反應曲線獲取的生長抑制百分率的劑量矩陣。
圖16：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)Calu6細胞系中的細胞生長抑制。從單一療法劑量反應曲線計算的Loewe加和性模型。
圖17：藉由實例18與司美替尼(ARRY-142886)的組合在KRAS-突變的非小細胞肺癌(NSCLC)Calu6細胞系中的細胞生長抑制。藉由從源自擬合數據減去Loewe加和性模型數據計算出的過熱圖(協同作用)。

Claims (23)

  1. 具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物 其中：R1係氫、C1-3烷基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：C1-3烷基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：C1-3烷基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：鹵素、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；並且R3係氫、C1-3烷基或氯。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基 取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基和-OCHF2；並且R3係氫、甲基或氯。
  3. 如申請專利範圍第1項或如申請專利範圍第2項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物，其中：R1係氫、甲基或-CH2OMe；R2係吡啶基，視情況在1個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：甲基、二氟甲基和三氟甲基；或者R2係嘧啶基，視情況在1個環碳原子上被三氟甲基取代；或者R2係苯基，視情況在1或2個環碳原子上被獨立地選自下組之取代基取代，該組由以下各項組成：氟、氯、二氟甲基和甲氧基；並且R3係氫、甲基或氯。
  4. 如申請專利範圍第1至3項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基、3-氯苯基、3,4-二氟苯基或3,5-二氟苯基。
  5. 如申請專利範圍第1至4項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中R2係6-(二氟甲基)吡啶-2-基。
  6. 如申請專利範圍第1至4項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物， 其中R2係3-氯苯基。
  7. 如申請專利範圍第1至4項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中R2係3,4-二氟苯基。
  8. 如申請專利範圍第1至4項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中R2係3,5-二氟苯基。
  9. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，或其藥學上的加合物，其中所述化合物係實例1至41中的任一者。
  10. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中所述化合物係；(S)-7-(3-氯苄基)-6-甲基-2-(2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(S)-7-((6-(二氟甲基)吡啶-2-基)甲基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮；或者(S)-7-(3,5-二氟苄基)-6-甲基-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮。
  11. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，或其藥學上可接受的加合物，其中所述化合物係(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮。
  12. 如申請專利範圍第1項所述之具有式(I)之化合物的藥學上可接受的加 合物，其係(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物。
  13. 如申請專利範圍第12項所述之(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮乙磺酸加合物之晶體形式。
  14. 如申請專利範圍第1項所述之具有式(I)之化合物的藥學上可接受的加合物，其係(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮己二酸加合物。
  15. 如申請專利範圍第14項所述之(R)-7-(3,4-二氟苄基)-6-(甲氧基甲基)-2-(5-甲基-2-((1-甲基-1H-吡唑-5-基)胺基)嘧啶-4-基)-6,7-二氫咪唑并[1,2-a]吡-8(5H)-酮己二酸加合物之晶體形式。
  16. 如以上申請專利範圍中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的加合物，用作藥物。
  17. 如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之化合物或其藥學上可接受的加合物，用於在預防或治療例如人類的溫血動物的癌症中使用。
  18. 如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物，用於在治療NSCLC、胰腺或結腸直腸癌中使用。
  19. 一種用於預防或治療需要此類治療的例如人類的溫血動物中癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物。
  20. 一種醫藥組成物，包括如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物以及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
  21. 一種適用於治療癌症之組合，該組合包括如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物以及另一種抗腫瘤劑。
  22. 如申請專利範圍第21項所述之組合，包括如申請專利範圍第1至15項中任一項所述之具有式(I)之化合物或其藥學上可接受的加合物以及MEK抑制劑，例如司美替尼(ARRY-142886)。
  23. 一種用於製備具有式(VI)之化合物之方法，所述方法包括：a)在適合的鹼的存在下在適合的溶劑中，在室溫或高溫條件下，將具有式(VIII)之化合物與具有式(XVI)之化合物進行反應； 其中R1和R3係如在上文中對於具有式(I)之化合物所定義的；L1係離去基團或離去基團的先質；P3係保護基團；並且R4係烷基基團；並且b)視情況，在水性酸條件下在適合的溶劑中，去除中間體胺基磺酸；並且 c)在適合的酸存在下在適合的溶劑中，在環境溫度下，去除保護基團P3。
TW105136236A 2015-11-09 2016-11-08 化學化合物 TWI730012B (zh)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562252726P 2015-11-09 2015-11-09
US62/252,726 2015-11-09
US201662401351P 2016-09-29 2016-09-29
US62/401,351 2016-09-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201728586A true TW201728586A (zh) 2017-08-16
TWI730012B TWI730012B (zh) 2021-06-11

Family

ID=57241113

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW105136236A TWI730012B (zh) 2015-11-09 2016-11-08 化學化合物

Country Status (35)

Country Link
US (2) US9902731B2 (zh)
EP (1) EP3374359B1 (zh)
JP (1) JP6877423B2 (zh)
KR (1) KR20180074788A (zh)
CN (1) CN108349983B (zh)
AU (1) AU2016351813B2 (zh)
BR (1) BR112018008397B1 (zh)
CA (1) CA3003549A1 (zh)
CL (1) CL2018001226A1 (zh)
CO (1) CO2018004857A2 (zh)
CR (1) CR20180316A (zh)
CY (1) CY1123627T1 (zh)
DK (1) DK3374359T3 (zh)
EA (1) EA038028B1 (zh)
ES (1) ES2780650T3 (zh)
HR (1) HRP20200342T1 (zh)
IL (1) IL258953A (zh)
LT (1) LT3374359T (zh)
ME (1) ME03770B (zh)
MX (1) MX376639B (zh)
MY (1) MY197626A (zh)
NI (1) NI201800058A (zh)
PE (1) PE20181288A1 (zh)
PH (1) PH12018500987A1 (zh)
PL (1) PL3374359T3 (zh)
PT (1) PT3374359T (zh)
RS (1) RS60155B1 (zh)
SG (1) SG11201803066VA (zh)
SI (1) SI3374359T1 (zh)
SM (1) SMT202000152T1 (zh)
SV (1) SV2018005687A (zh)
TN (1) TN2018000119A1 (zh)
TW (1) TWI730012B (zh)
WO (1) WO2017080979A1 (zh)
ZA (1) ZA201803742B (zh)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3365334T3 (pl) 2015-10-21 2024-11-25 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Związki benzolaktamu jako inhibitory kinazy białkowej
PE20181288A1 (es) * 2015-11-09 2018-08-07 Astrazeneca Ab Derivados de dihidroimidazopirazinona usados en el tratamiento del cancer
GB201706327D0 (en) 2017-04-20 2017-06-07 Otsuka Pharma Co Ltd A pharmaceutical compound
JP7352981B2 (ja) * 2018-10-10 2023-09-29 深▲チェン▼市塔吉瑞生物医薬有限公司 ジヒドロイミダゾピラジノン化合物、該化合物を含む組成物およびその使用
TW202102511A (zh) 2019-03-28 2021-01-16 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 噻吩并雜環類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
CN113825757B (zh) 2019-05-24 2023-10-20 江苏恒瑞医药股份有限公司 取代的稠合双环类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CA3140475A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Wei-Guo Su Tricyclic compounds and their use
CA3157504A1 (en) * 2019-12-05 2021-06-10 Astrazeneca Ab Process and intermediates for the production of formula (i)
AU2020398022B2 (en) * 2019-12-06 2023-04-27 D3 Bio (Wuxi) Co., Ltd. Thiazololactam compound as ERK inhibitor and use thereof
EP4223758A4 (en) 2020-09-29 2024-04-03 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. CRYSTALLINE FORM OF A PYRROLO-HETEROCYCLIC DERIVATIVE AND PREPARATION METHOD THEREFOR
AR126166A1 (es) * 2021-06-18 2023-09-27 Antengene Discovery Ltd Combinación de un inhibidor de erk y un inhibidor de kras y usos de estos
WO2022268065A1 (en) * 2021-06-22 2022-12-29 Fochon Biosciences, Ltd. Compounds as erk inhibitors
CN117677398A (zh) 2021-07-27 2024-03-08 东丽株式会社 用于癌的治疗和/或预防的药品
WO2023081857A1 (en) 2021-11-04 2023-05-11 Skyhawk Therapeutics, Inc. Condensed pyridazine amine derivatives treating sca3
WO2023212237A1 (en) 2022-04-27 2023-11-02 Skyhawk Therapeutics, Inc. Compositions useful for modulating splicing
US20250304593A1 (en) 2022-05-12 2025-10-02 Skyhawk Therapeutics, Inc. Compositions useful for modulating splicing
WO2024006971A2 (en) * 2022-07-01 2024-01-04 The Scripps Research Institute Antimalarial compounds

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US7485640B2 (en) * 2002-11-06 2009-02-03 Merck Sharp & Dohme Limited Imidazopyrazinones as GABA-A receptor anxiolytics
GB0520958D0 (en) * 2005-10-14 2005-11-23 Cyclacel Ltd Compound
JP5178738B2 (ja) * 2006-12-20 2013-04-10 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 新規なｊｎｋ阻害剤
US9840507B2 (en) * 2010-12-22 2017-12-12 Janssen Pharmaceutica, Nv 5,6-dihydro-imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamine derivatives useful as inhibitors of beta-secretase (BACE)
HK1211023A1 (zh) * 2011-10-10 2016-05-13 H. Lundbeck A/S 具有咪唑并吡嗪骨架pde9i
JP2013166727A (ja) * 2012-02-16 2013-08-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co Ltd ジヒドロイミダゾピラジノン誘導体
SI2820009T1 (en) 2012-03-01 2018-05-31 Array Biopharma, Inc. Serine / Threonine kinase inhibitors
US9532987B2 (en) 2013-09-05 2017-01-03 Genentech, Inc. Use of a combination of a MEK inhibitor and an ERK inhibitor for treatment of hyperproliferative diseases
JP6449293B2 (ja) * 2013-12-06 2019-01-09 ジェネンテック， インコーポレイテッド セリン／トレオニンキナーゼ阻害剤
KR102379517B1 (ko) 2013-12-30 2022-03-25 제넨테크, 인크. 세린/트레오닌 키나아제 억제제
KR102396710B1 (ko) 2013-12-30 2022-05-10 어레이 바이오파마 인크. 세린/트레오닌 키나제 저해제
AR099989A1 (es) 2014-04-09 2016-08-31 Genentech Inc Proceso de preparación de (s)-1-(1-(4-cloro-3-fluorofenil)-2-hidroxietil)-4-(2-((1-metil-1h-pirazol-5-il)amino)pirimidin-4-il)-2(1h)-ona y sus sales
US10412619B2 (en) * 2014-11-14 2019-09-10 Qualcomm Incorporated Buffer status report for eDCS
WO2016162325A1 (en) * 2015-04-07 2016-10-13 Astrazeneca Ab Substituted 3,4-dihydropyrrolo[1,2-a]pyrazin-1 (2h)-one derivatives as kinase inhibitors
EP3303335B1 (en) 2015-06-03 2021-07-28 JS Innopharm (Shanghai) Ltd. Heterocyclic compounds for treating psoriasis
CN107849046B (zh) 2015-06-03 2020-06-12 常州捷凯医药科技有限公司 作为erk抑制剂的杂环化合物
PE20181288A1 (es) * 2015-11-09 2018-08-07 Astrazeneca Ab Derivados de dihidroimidazopirazinona usados en el tratamiento del cancer

Also Published As

Publication number Publication date
EA038028B1 (ru) 2021-06-24
MY197626A (en) 2023-06-29
HRP20200342T1 (hr) 2020-06-12
AU2016351813A1 (en) 2018-06-21
PT3374359T (pt) 2020-03-27
CR20180316A (es) 2018-10-05
US9902731B2 (en) 2018-02-27
EA201891063A1 (ru) 2018-12-28
BR112018008397B1 (pt) 2023-12-12
CO2018004857A2 (es) 2018-07-19
SMT202000152T1 (it) 2020-05-08
CN108349983B (zh) 2021-02-26
LT3374359T (lt) 2020-03-25
JP2019503337A (ja) 2019-02-07
ZA201803742B (en) 2020-08-26
PE20181288A1 (es) 2018-08-07
AU2016351813B2 (en) 2019-05-30
US20170204100A1 (en) 2017-07-20
SV2018005687A (es) 2018-07-20
MX376639B (es) 2025-03-07
KR20180074788A (ko) 2018-07-03
CY1123627T1 (el) 2022-03-24
NI201800058A (es) 2018-10-18
RS60155B1 (sr) 2020-05-29
EP3374359B1 (en) 2020-01-08
MX2018005725A (es) 2018-08-14
DK3374359T3 (da) 2020-03-30
IL258953A (en) 2018-06-28
US10202391B2 (en) 2019-02-12
EP3374359A1 (en) 2018-09-19
CL2018001226A1 (es) 2018-10-05
PL3374359T3 (pl) 2020-06-29
CN108349983A (zh) 2018-07-31
PH12018500987A1 (en) 2019-01-28
SI3374359T1 (sl) 2020-04-30
BR112018008397A2 (pt) 2018-10-23
ES2780650T3 (es) 2020-08-26
TN2018000119A1 (en) 2019-10-04
ME03770B (me) 2021-04-20
SG11201803066VA (en) 2018-05-30
WO2017080979A1 (en) 2017-05-18
HK1256283A1 (zh) 2019-09-20
JP6877423B2 (ja) 2021-05-26
CA3003549A1 (en) 2017-05-18
US20180237443A1 (en) 2018-08-23
TWI730012B (zh) 2021-06-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI730012B (zh) 化學化合物
CN106459010B (zh) 用作fgfr激酶调节剂的喹喔啉衍生物
EP2948447B1 (en) Chemical compounds
WO2017080980A1 (en) Dihydropyrrolopyrazinone derivatives useful in the treatment of cancer
EP3683220A1 (en) 8-[6-[3-(amino)propoxy]-3-pyridyl]-1-isopropyl-imidazo[4,5-c]quinolin-2-one derivatives as selective modulators of ataxia telangiectasia mutated (atm) kinase for the treatment of huntigton&#39;s disease
JP6898919B2 (ja) 新規化合物
WO2018019793A1 (en) N-(2-(4-((1r,3r)-3-methyl-2,3,4,9-tetrahydro-1h-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenoxy)ethyl)propan-1-amine derivatives and related compounds as selective down-regulators of the estrogen receptor for treating cancer
CN108137546B (zh) 双杂芳基取代的1,4-苯并二氮杂卓化合物及其用于治疗癌症的用途
HK1256283B (zh) 治疗癌症有用的二氢咪唑并吡嗪酮衍生物
HK1214592B (zh) 化合物
HK1254965B (zh) 新化合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees