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TW201705937A - 包含黃柏酮的組合物及在皮膚抗老化應用中使用該組合物的方法 - Google Patents

包含黃柏酮的組合物及在皮膚抗老化應用中使用該組合物的方法 Download PDF

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TW201705937A
TW201705937A TW105114903A TW105114903A TW201705937A TW 201705937 A TW201705937 A TW 201705937A TW 105114903 A TW105114903 A TW 105114903A TW 105114903 A TW105114903 A TW 105114903A TW 201705937 A TW201705937 A TW 201705937A
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張翌
李廷釗
杜軍
李波
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阿爾塞斯商業集團國際有限公司
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Abstract

本文描述了具有抑制蛋白羰基化活性的局部用組合物，其包含有效降低和/或抑制蛋白羰基化的量的約75-100%純的黃柏酮。本文還描述了抑制皮膚中蛋白羰基化和皮膚美白與提亮的方法。

Description

包含黃柏酮的組合物及在皮膚抗老化應用中使用該組合物的方法 發明領域
本文描述了包含黃柏酮(bacunone)的組合物及它們在抑制皮膚蛋白羰基化的方法中的用途，以及改善皮膚外觀或改善至少一種皮膚老化跡象例如皮膚泛黃的方法。
發明背景
氧化應激與在被稱為蛋白羰基化的反應中活性氧的非酶性生成有關。蛋白羰基化是用於描述一種過程的術語，在該過程中，反應活性的醛或酮通過氧化被引入到蛋白中。羰基蛋白(protein carbonyl)已被證明是蛋白氧化的主要產物並可通過以下方式形成：蛋白的氧化裂解、氨基酸殘基的直接氧化或與脂質過氧化衍生的醛的共價反應。
蛋白羰基化是由於氨基酸側鏈的直接金屬催化氧化(初級蛋白羰基化)或反應活性的醛與氨基酸側鏈加成(次級蛋白羰基化)導致的。因此，已知的是，外源性的反應活性醛例如丙烯醛是從香煙煙霧衍生的。然而，反應活性醛也可內源性形成，例如，在人體中隨處可見的多不飽和 脂肪酸的氧化降解可導致形成各種醛，例如丙烯醛和4-羥基壬烯醛(4-HNE)。
先前已經報導，初級蛋白羰基化在活性氧(ROS)信號傳導機制中起著重要作用。具體地，初級蛋白羰基化介導細胞信號傳導並且初級蛋白羰基化是可逆的。
初級蛋白羰基化涉及氨基酸側鏈的直接金屬催化的氧化，尤其是在以下4種敏感的氨基酸殘基上：脯氨酸、精氨酸、賴氨酸和蘇氨酸。脯氨酸或精氨酸側鏈的氧化導致谷氨酸半醛的形成，而賴氨酸氧化產生氨基己二酸半醛，從而將羰基引入到蛋白質結構中。氧化還將蘇氨酸側鏈的羥基基團轉化成羰基，形成2-氨基-3-酮丁酸。次級蛋白羰基化機制包括反應活性醛與賴氨酸、組氨酸和半胱氨酸殘基側鏈的邁克爾加成反應，以及還原糖與賴氨酸和精氨酸上的氨基形成希夫鹼，導致漸進性糖化終極產物的增加。羰基蛋白存在於各種氧化應激和病症中。除了滅活的蛋白，羰基化的細胞蛋白經歷蛋白酶體依賴性降解。初級蛋白羰基化被認為在氧化應激過程中起著標記受損蛋白從而將它們從生物系統中清除的重要作用。
已有充分證明的是，羰基蛋白的產生是氧化應激的標誌，所述氧化應激為例如由於外源性因素，如由紫外線照射或外用氧化性化學製品所誘導的，或由於內源性因素，即由脂質過氧化物的降解衍生出的反應活性羰基進行的化學攻擊。
光損傷的面部皮膚具有各種獨特的特徵，例如黑 斑、皺紋和下垂。老年人，尤其是亞洲人，隨著光老化膚色往往會變泛黃。在中國人中，面部泛黃意味著暗淡或不粉嫩。光損傷或老化的常見臨床跡象包括皮膚呈現特有的蠟黃或黃色外觀。已經表明，皮膚的羰基化既發生在皮膚的表皮層也發生在真皮層。此外，皮膚的羰基化經常會造成面臨氧化應激的皮膚組織和結構的顯著性光損傷，如果沒有長期的預防或治療，會導致不可逆的變色：面部泛黃。
因此，非常需要能夠抑制或預防蛋白羰基化的抗老化組合物和方法以改善皮膚外觀或改善至少一種皮膚老化跡象(例如皮膚泛黃)並增強面部皮膚的皮膚亮度。
發明概要
一個實施方案涉及具有降低或抑制蛋白羰基化活性的局部組合物，其基本上由以下組成：有效降低或抑制蛋白羰基化的量的約75-100%純的黃柏酮；美容上可接受的媒介物；和任選地，一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。
另一個實施方案涉及具有降低或抑制蛋白羰基化活性的局部組合物，其由以下組成：有效降低或抑制蛋白羰基化的量的約90%純的黃柏酮；美容上可接受的媒介物；和任選地，一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、 油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。
在所述組合物中，所述黃柏酮是從至少一種以下植物的提取物中純化得到的，所述植物選自：吳茱萸(Evodia rutaecarpa)、白蘚皮(Dictamni cortex)、黃柏皮(Phellodendri amurensis cortex)、佛手(Citri sarcodactylis fructus)、枳實(Aurantii frusctus immaturus)和香櫞(Citri fructus)。將吳茱萸提取物相對於吳茱萸鹼、吳茱萸次鹼和檸檬苦素中至少一種的含量進行標準化。在該組合物中，所述黃柏酮是約99.99%純的黃柏酮活性物。該組合物是選自以下的製劑：霜劑、軟膏劑、泡沫劑、洗劑、硬膏劑、片劑、顆粒劑或乳劑。在該組合物中，有效降低或抑制蛋白羰基化的量為約10-1000mg。在該組合物中，所述黃柏酮占該組合物的大約1-99%w/w。可選擇地，所述黃柏酮占該組合物的大約1-75%w/w。或者，所述黃柏酮占該組合物的大約50-70% w/w。
另一實施方案涉及局部組合物，其包含美容上可接受的媒介物和一定量的至少90%純的黃柏酮，其中所述黃柏酮占該組合物的大約1-99% w/w。
其他實施方案涉及改善皮膚外觀或改善至少一種皮膚老化跡象的方法，該方法包括將組合物以美容上有效的量局部施用至皮膚，所述量足以改善皮膚外觀或至少 一種皮膚老化跡象，其中所述組合物包含一定量的約75-100%純的黃柏酮、美容上可接受的媒介物，和任選地，一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。在該方法中，所述組合物是選自以下的產品形式：氣溶膠、霜、乳液、固體、液體、分散體、泡沫、凝膠、洗液、摩絲、軟膏、粉末、貼片、潤髮油、溶液、泵噴霧、棒、小毛巾及它們的組合。
另一實施方案涉及美白皮膚的方法，其包括將本文所述組合物局部施用至皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以可見地(visibly)美白皮膚。
另一實施方案還涉及提亮皮膚的方法，其包括將本文所述組合物局部施用至皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以可見地提亮皮膚。
其他實施方案涉及本文所述的局部組合物在製備具有降低或抑制蛋白羰基化活性的美容劑中的用途。
另一實施方案涉及預防、改善或減少至少一種皮膚老化跡象的方法，其包括將本文所述的組合物施用至該皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以預防、改善或減少至少一種皮膚老化跡象。
圖1描繪的曲線圖顯示了黃柏酮在HepG2細胞中 的低細胞毒性-CTG。
圖2描繪的曲線圖顯示了黃柏酮在HepG2細胞中對蛋白羰基化的劑量依賴性抑制。
發明詳述
應理解的是，本發明並不限於本文所述的具體組合物、方法或方案。此外，除非另外限定，本文所用的所有技術和科學術語均具有與本發明所屬技術領域普通技術人員通常所理解的相同的含義。也應當理解，本文所用的術語僅用於描述具體實施方案且並不旨在限制本發明的範圍，而本發明的範圍僅通過請求項進行限定。本發明是基於一項出人意料的發現，即，黃柏酮作為皮膚美白劑具有積極的效果而且無毒(圖1)且對蛋白羰基化具有抑制作用(圖2)。如圖2所示，隨著黃柏酮劑量的增加蛋白羰基化受到抑制。
因此，本文描述了組合物及其在皮膚的抗老化、美白或提亮方法中的用途，所述組合物包含足以實現降低或抑制蛋白羰基化的量的經純化的黃柏酮。
定義
除非另有說明，所有百分比和比例都以重量計。
術語“組合物”是指治療、改善、促進、增強、管理、控制、維持、優化、修正、降低、抑制或預防與自然狀態、生物過程或疾病或障礙有關的具體狀態的產品。術語“組合物”包括但不限於，藥品(即，藥物)、非處方藥 (OTC)、美容品、食品、食品成分或膳食補充劑組合物，其包含有效量的經純化的化合物、提取物、天然複合物、其至少一種成分或它們的混合物。示例性的組合物包括霜、美容水、面膜(pack)或粉或乳劑、洗劑、搽劑、泡沫劑、片劑、硬膏劑、顆粒劑或軟膏劑形式的組合物。
本文所用術語“提取物”是指包含植物的活性物質成分的固體、半流體或液體物質或製劑，例如濃縮形式的吳茱萸。術語“提取物”旨在不僅包括使用溶劑從植物中制出的粗制提取物，還包括該粗制提取物在該溶劑中的餾分，所述溶劑選自：水、1至4個碳原子的低級醇(例如甲醇、乙醇、丁醇等)、乙烯、丙酮、己烷、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、二甲亞碸(DMSO)、1,3-丁二醇、丙二醇和它們的組合。只要能確保活性成分的提取和保存，則可採取任何提取方法。
本文與黃柏酮連用的術語“純化的”是指通過將黃柏酮從植物提取物的剩餘組分中物理分離出來所製備的黃柏酮。各種純化方法均是已知的且可用於獲得純黃柏酮。例如，可使用諸如分餾或親和純化的方法。作為純化過程的結果，黃柏酮可以為至少約10%純；或者，至少約20%純；或者，至少約30%純；或者，至少約40%純；或者，至少約50%純；或者，至少約60%純；或者，至少約70%純；或者，至少約80%純；或者，至少約90%純；或者，至少約95%純；或者，至少約99%純；但是優選約75%-100%純。
本文所用術語組合物、提取物、提取物混合物、 提取物組分和/或活性劑或活性成分的“有效量”或“治療有效量”是指在一定劑量有效且持續足夠長時間以實現所需結果的量。例如，所述“有效量”或“治療有效量”是指當將本發明的組合物、提取物、提取物混合物、提取物組分和/或活性劑或活性成分給藥於受試者(例如，哺乳動物，例如人)，則所述組合物、提取物、提取物混合物、提取物組分和/或活性劑或活性成分的量足以在受試者中產生治療效果，例如降低或抑制蛋白羰基化、皮膚抗老化、提高或改善皮膚美白和/或提亮、減少或淡化黑斑等。構成“有效量”或“治療學上有效的治療”的本公開組合物、提取物、提取物混合物、提取物組分和/或活性劑或活性成分的量將依據活性劑或化合物、所治療的病症及其嚴重性、給藥方式、治療持續時間或待治療受試者的年齡而變化，但是其可由本領域普通技術人員根據自身知識和本公開的內容進行常規確定。
術語“預防、改善或減少至少一種老化跡象”和“預防、改善或減少老化跡象”在本文中可互換使用以表明預防、阻止、逆轉、緩解、減少和/或降低老化跡象。老化的代表性跡象包括，但不限於，皮膚泛黃、褶(line)、細紋、皺紋、魚尾紋、黑眼圈、瑕疵、老人斑、妊娠紋或它們的組合。
“改善皮膚的外觀”和“改善皮膚的美觀”在本文中可互換使用以指代皮膚的外觀的美學改善。代表性的改善可包括，但不限於，與膚色、色調、肌理、閃耀、 亮度、光澤、白度、乾淨度、厚度、彈性、韌性、保濕性、光滑度、輪廓、硬度、緊致、彎曲性、柔軟性、敏感性、毛孔大小或它們的組合有關的有利的特性和/或性質。這些術語還可用於指代對不利的皮膚狀況的改善。受所述不利的皮膚狀況影響、導致所述不利的皮膚狀況或由所述不利的皮膚狀況所引起的代表性的不利狀態包括，但不限於，皮膚老化、牛皮癬、濕疹、皮脂溢出、皮炎、曬傷、雌激素失調、色素沉著過多、色素沉著不足、變色、發黃、雀斑、皮膚萎縮、皮膚發疹、皮膚脆性、乾燥、觸覺粗糙、龜裂、下垂、變薄、增生、纖維化、毛孔粗大、橘皮組織形成、瘀傷、粉刺形成、細胞凋亡、細胞分化、細胞去分化、腫瘤誘導或腫瘤進展的預防、病毒感染、真菌感染、細菌感染、蜘蛛狀血管病(毛細血管擴張症(telangectasia))、多毛症、紅斑痤瘡、瘙癢症、腁胝、疣、雞眼或它們的組合。
術語“藥學上可接受的”是指適用於與人和低等動物組合接觸且沒有過度毒性、不相容性、不穩定性、刺激性等的那些藥物、藥品、提取物或惰性成分，其與合理的利益/風險比相稱。
術語“給藥”和“施用”的定義是通過本領域已知的途徑將組合物提供至受試者，所述途徑包括但不限於靜脈內、動脈內、口服、胃腸外、含服、局部、透皮、直腸、肌內、皮下、骨內、透黏膜或腹膜內給藥途徑。在優選實施方式中，以局部途徑給藥組合物是合適的。
本文所用術語“受試者”或“個體”包括可給藥該組合物的哺乳動物。哺乳動物的非限制性實例包括人、非人靈長類動物、齧齒類動物(包括轉基因和非轉基因小鼠)等。在一些實施方式中，所述受試者是哺乳動物，且在一些實施方式中，所述受試者是人。
黃柏酮
黃柏酮(CAS：751-03-1)是具有分子量454.52的化合物(即，植物成分)，其可提取自芸香科吳茱萸(Evodia rutaecarpa BENTHAM)(芸香科)。例如，芸香科的果實可用EtOH提取，得到吳茱萸的提取物(“吳茱萸提取物”)，其可用作黃柏酮化合物的來源，而所述黃柏酮化合物用在本發明的獨特組合物中。術語“黃柏酮”是指植物成分以及植物提取物或天然複合物。
黃柏酮(C26H30O7)的示例性結構如下所示：
黃柏酮可商業購自各種來源，包括ChemStrong Scientific Co.,Ltd或Chengdu Biopurify Phytochemicals Ltd。此外，黃柏酮可從以下植物的提取物中純化，所述植物包括，例如吳茱萸、白鮮(芸香科)的乾燥根皮、黃柏(PhellodendronamurenseRupr.)(Fam.Rutaceae)的幹皮、川黃 柏(PhellodendronchinenseSchneid.)(Fam.Rutaceae)的幹皮、柑橘屬金桔(Citrus sp.Fortunella margarita)、香肉果(Casimiroaedulis)、佛手、枳實和香櫞。在一些方面，植物的花、頭狀花序或果實，或葉子用作提取物的來源。當被提取後，可將該提取物標準化為活性標記化合物。例如，可將黃柏提取物相對於小檗鹼、巴馬丁、檸檬苦素和黃柏酮中至少一種的濃度進行標準化。
各種純化和提取技術在下文中進行更加充分的討論或為本領域已知的。
示例性的提取工藝
在一個實施例中，本發明獨特組合物中所使用的提取物和/或活性化合物可使用有機溶劑提取技術獲得。
在另一實施例中，使用H2O、H2O-EtOH、H2O-MeOH或H2O-丙酮等作為溶劑的溶劑連續分餾可用於獲得在本發明獨特組合物中使用的提取物和/或活性化合物。
還可使用全水-乙醇提取技術(total hydro-ethanolic extraction technique)來獲得本發明獨特組合物中使用的提取物和/或活性化合物。通常，這稱為一次性提取。在此工藝中產生的提取物將含有存在於所提取的物質中的各種各樣的植物化學物質，包括脂溶性和水溶性物質。在收集提取物溶液後，將溶劑蒸發，得到所述提取物。
還可將全乙醇提取用於本發明。這種技術使用的 是乙醇，而不是水-乙醇作為溶劑。該提取技術得到的提取物除了包含水溶性化合物外，還可包含脂溶性和/或親脂性化合物。
可用於獲得在本發明中使用的提取物和/或活性化合物的提取技術的另一實例是超臨界流體二氧化碳提取(SFE)。在這個提取步驟中，待提取的物質未暴露於任何有機溶劑。相反，該提取溶劑是二氧化碳，含有或不含調節劑，並且在超臨界條件下(>31.3℃且>73.8巴)。本領域技術人員將理解，可改變溫度和壓力條件以獲得最佳產率的提取物。這一技術得到脂溶性和/或親脂性化合物的提取物，類似於上述全己烷和乙酸乙酯提取技術。
本領域技術人員將理解，還有許多其他的提取和純化工藝可用於獲得在實施本發明中所使用的提取物和/或活性化合物，所述工藝為本領域已知的和在各個專利和出版物中所描述的工藝。例如，以下參考文獻中所描述的提取操作可用在本發明的實施中，將這些參考文獻引入本文作為參考：Murga等人，“Extraction of natural complex phenols and tannins from grape seeds by using supercritical mixtures of carbon dioxide and alcohol.”J.Agric Food Chem.2000 August：48(8)：3408-12；Hong等人，“Microwave-assisted extraction of phenolic compounds from grape seed.”Nat Prod Lett.2001；15(3)：197-204；Ashraf-Khorassani等人，“Sequential fractionation of grape seeds into oils,polyphenols,and procyanidins via a single system employing CO2-based fluids.”J.Agric Food Chem.，2004 May 5；52(9)：2440-4。
根據本發明的一個實例，黃柏酮提取物可通過將吳茱萸果實用70%EtOH提取來製備。最終提取物具有>5.0%的含水量從而制得天然提取率為植物：成品=5-7：1的植物提取物。
然後將該黃柏酮提取物進行測定並相對於活性標記物的含量例如吳茱萸鹼、吳茱萸次鹼、小檗鹼、巴馬丁和檸檬苦素的含量進行標準化。
然後將所述黃柏酮活性物通過溶劑-水分配進行純化，例如二氯甲烷-水、乙酸乙酯-水、正丁醇-水系統。
可選擇地，所述黃柏酮活性物可用不同的色譜法進行純化，例如大孔樹脂、矽酮樹脂、MCI樹脂、凝膠等。
此外，所述黃柏酮活性物可用製備型色譜、半製備型色譜(例如製備型HPLC、半製備型HPLC)等進行純化。
此外，所述黃柏酮活性物可用高速反流色譜進行純化。
組合物
可將黃柏酮配製到組合物中。具體地，一些實施方案涉及具有降低或抑制蛋白羰基化活性的組合物，其包含有效降低或抑制蛋白羰基化的量的黃柏酮。一些其他實施方案涉及用於皮膚美白和/或皮膚提亮的組合物，其包含有效美白或提亮皮膚的量的黃柏酮。
一些其他實施方案涉及抗皮膚老化的組合物，其 包含有效預防或治療皮膚老化的量的黃柏酮。
一些實施方案涉及降低或抑制蛋白羰基化的組合物，其包含有效降低或抑制蛋白羰基化的量的黃柏酮，其中黃柏酮為至少約75%純。或者，在該組合物中，黃柏酮為至少約80%純；或者，至少為約85%純；或者，至少約90%純；或者，至少約95%純；或者，至少約96%純；或者，至少約97%純；或者，至少約98%純；或者，至少約99%純；或者，在該組合物中，黃柏酮為約99.99%純。
黃柏酮占該組合物的大約至少50% w/w，更優選地，占該組合物的大約至少55% w/w、占該組合物的大約至少60%、占該組合物的大約至少65% w/w、占該組合物的大約至少70% w/w、占該組合物的大約至少75% w/w、占該組合物的大約至少80% w/w、占該組合物的大約至少85% w/w、占該組合物的大約至少90% w/w、占該組合物的大約至少95% w/w、占該組合物的大約至少99% w/w。或者，黃柏酮占該組合物的大約1-99% w/w；或者，黃柏酮占該組合物的大約1-90% w/w；或者，黃柏酮占該組合物的大約1-75% w/w；或者，黃柏酮占該組合物的大約50-70% w/w。
在該組合物中，黃柏酮可以約0.001%至約10%的量存在。
當然，本領域技術人員將理解，結合到該組合物中的黃柏酮的量可取決於經標準化的標記物的含量。例如，對於從吳茱萸提取物製備的黃柏酮，標記物可為吳茱萸鹼、吳茱萸次鹼和/或檸檬苦素。因此，如果將黃柏酮標 準化為約40%標記化合物，則上述黃柏酮的量將被減半。例如，可將黃柏酮提取物標準化為約0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%、4.5%、5.0%、5.5%、6.0%、6.5%、7.0%、7.5%、8.0%、8.5%、9.0%、9.5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%標記化合物含量。
該組合物可具有約6.0至約8.0的pH，或者該組合物可具有基本上中性的pH。在一些實施方案中，其中使用了黃柏酮的組合物具有大體上中性的pH。
一些實施方案涉及用於增強皮膚美白或提亮的組合物。該組合物包含有效量的黃柏酮以增強皮膚美白或提亮。該組合物可包含美容上可接受的媒介物。
一些其他實施方案涉及增強皮膚美白或提亮的方法，其包括向受試者給藥包含黃柏酮提取物的組合物，其中所述組合物降低或抑制皮膚的蛋白羰基化，從而增強皮膚美白或提亮。
可將本發明組合物配製在可接受的載體、媒介物或賦形劑中，並可將其製備、包裝並標記為美容品或藥品，用於受試者的皮膚美白或提亮中。在一些實施方案中，黃柏酮占該組合物的大約50-70% w/w，而載體、媒介物或賦形劑占該組合物的大約50-30% w/w。
通常，所述組合物包含美容上可接受的媒介物。適用於本發明全部實施方案的美容上可接受的媒介物的實例包括，但不限於，水；甘油；各種醇(例如乙醇、丙醇)； 植物油；礦物油；矽油；脂肪醚；脂肪酸酯；脂肪醇；二醇；聚二醇或它們的任意組合。配製方法是本領域熟知的且被公開於，例如，Remington's Pharmaceutical Sciences,Gennaro,Mack Publishing Co.,Easton Pa.,1990中，將其引入本文作為參考。
在一些實施方案中，該組合物還可包含一種或多種美白劑來提高該組合物的美白效果。示例性的美白劑包括所有已知的美白劑和將來可被研發的那些。優選地，所述美白劑選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。合適的酪氨酸酶抑制劑的實例包括，但不限於，曲酸及其衍生物、熊果苷及其衍生物、甘草提取物及其衍生物、抗壞血酸及其衍生物和氫醌及其衍生物。合適的自由基清除劑的實例包括，但不限於，甘草提取物及其衍生物、維生素E及其衍生物、維生素A及其衍生物、維生素C及其衍生物、迷迭香提取物及其衍生物和超氧化物歧化酶。優選的美白劑選自：曲酸、曲酸衍生物、熊果苷、熊果苷衍生物、熊果提取物、檸檬提取物、黃瓜提取物、維生素C及其衍生物、針葉櫻桃提取物和針葉櫻桃發酵物。
維生素C衍生物非排他性實例為，例如，L-抗壞血酸的烷基酯，例如L-抗壞血酸棕櫚酸酯、L-抗壞血酸異棕櫚酸酯、L-抗壞血酸二棕櫚酸酯、L-抗壞血酸異硬脂酸酯、L-抗壞血酸二硬脂酸酯、L-抗壞血酸二異硬脂酸酯、L-抗壞血酸肉豆蔻酸酯、L-抗壞血酸異肉豆蔻酸酯、L-抗壞血酸2-乙基己酸酯、L-抗壞血酸-二-2-乙基己酸酯、L-抗 壞血酸油酸酯和L-抗壞血酸二油酸酯；L-抗壞血酸的磷酸酯，例如L-抗壞血酸基-2-磷酸酯和L-抗壞血酸基-3-磷酸酯；L-抗壞血酸的硫酸酯，例如L-抗壞血酸基-2-硫酸酯和L-抗壞血酸基-3-硫酸酯；與鹼土金屬(例如鈣和鎂)形成的鹽。它們可以單獨使用或以兩或更多種的混合物形式使用。
當將黃柏酮與任何已知的美白劑混合時，所述黃柏酮與已知的美白劑的比例為約1：100至約100：1，優選為約1：50至約50：1，更有選為約1：10至約10：1。最優選地，黃柏酮與已知美白劑的比例為約1：5至約5：1。
本發明的組合物可製成各種形式。例如，它們可以是美容製劑的形式，例如霜、美容水、面膜或粉的形式，或為乳劑、洗劑、搽劑、泡沫劑、片劑、硬膏劑、顆粒劑、氣溶膠噴霧劑、凝膠劑、摩絲、香膏劑或軟膏劑的形式。在各製劑中，可結合各種已知的常規美容成分。例如，可包含美容成分如醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料。一些其他實施方案涉及組合物，可將其配製成適用於局部施用至皮膚的任意方便形式。合適的乳劑包括水包油、油包水和矽包水(water-in-silicone)乳劑。
在一些實施方案中，提供了一種改進類型的美白皮膚組合物，其包含皮膚美白劑，其中所述改進在於添加了黃柏酮。所述組合物可包含美容上可接受的媒介物。
本發明組合物可局部給藥。
該組合物可根據需要每天給藥一次、給藥多次或 以任意合適的給藥方案進行給藥，從而實現所需效果。該組合物可連續給藥或間歇給藥。
方法
本文所述的組合物可用於各種美容和/或藥物應用，包括抑制或降低蛋白羰基化和/或增強或改善皮膚美白、提亮和亮白。
一些實施方案涉及美白皮膚的方法，其包括將上述任意組合物及其任意組合局部施用至皮膚。
一些具體實施方案涉及美白皮膚的方法，其包括將組合物局部施用至皮膚，所述組合物包含有效降低或抑制皮膚中的蛋白羰基化的量的黃柏酮。該組合物的施用量和持續時間足以可見地美白皮膚。
在含有一種或多種美容成分的局部美白皮膚用美容組合物中，所述美容成分選自：醇、脂肪、油、表面活化劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料，所述改進在於包含有效量的黃柏酮以美白皮膚。
在該方法中，局部施用的頻率將取決於多種因素，包括所期望的對蛋白羰基化的抑制程度及黃柏酮在該組合物中的含量。一種合適的示例性給藥方案包括每日兩次施用至皮膚，早晚各施用一次。
其他實施方案涉及改善皮膚外觀或至少一種皮膚老化跡象的方法，所述方法包括向皮膚局部施用美容上有效量的足以改善該皮膚的外觀或至少一種皮膚老化跡象 的組合物，其中所述組合物包含一定量的約75-100%純的黃柏酮；美容上可接受的媒介物；和任選地，一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。在該方法中，所述組合物是選自以下的產品形式：氣溶膠、霜、乳液、固體、液體、分散體、泡沫、凝膠、洗液、摩絲、軟膏、粉末、貼片、潤髮油、溶液、泵噴霧、棒、小毛巾及它們的組合。
一些實施方案涉及本文所述的局部組合物在製備具有降低或抑制蛋白羰基化活性的美容劑中的用途。
一些其他實施方案涉及預防、改善或減少至少一種皮膚老化跡象的方法，其包括將上述任意組合物施用至皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以預防、改善或減少所述至少一種皮膚老化跡象。代表性的老化跡象包括，但不限於，皮膚泛黃、褶、細紋、皺紋、魚尾紋、黑眼圈、瑕疵、老人斑妊娠紋或它們的組合。
實施例
實施例1：在HepG2細胞中，通過CellTiter-Glo®(CTG)發光細胞存活力測試對黃柏酮進行細胞毒性/安全性評估
為了確定黃柏酮的細胞安全性，進行了如下測試。
根據製造商的說明書進行CellTiter-Glo®(CTG) 發光細胞存活力測試(獲自Promega)，以根據所存在的ATP(代謝活性細胞的指示劑)的定量來確定培養基中的活細胞數。在該測試中使用的是具有相同梯度濃度(100、33.3、11.1、3.7、1.23、0.41、0.14、0.05、0.02(ug/mL))的99.99%純的黃柏酮和氫醌(用作參照)。該測試是使用HepG2細胞進行的。
通過CTG進行的基於細胞的安全性評估，黃柏酮顯示無細胞毒性(參見表1)。
該結果如圖1所示。
實施例2：黃柏酮被證明在HepG2細胞中劑量依賴性降低蛋白羰基化
為了確定黃柏酮是否影響蛋白羰基化，進行以下基於細胞的測試，該測試使用OxiSelectTM Protein Carbonyl ELISA試劑盒(Cell Biology #STA-310)。
HepG2細胞(ATCC)用於該測試。將細胞以每孔100,000個細胞接種於板中並將該測試板(獲自Costa的96孔板)在37℃，5%CO2的潮濕條件下孵育24小時。
測試了0ug/mL、33ug/mL、100ug/mL和300ug/mL的黃柏酮。將0ug/mL、33ug/mL、100ug/mL和300ug/mL的維生素C(公知的蛋白羰基化抑制劑)在該測試中用作陽性抑制劑對照。
根據板圖(platemap)製備參照物和測試化合物溶液(200x)。將黃柏酮溶於MEM(最低基礎培養基)中並將其加至如上所述的在處理前24小時被接種的HepG2細胞中。該測試化合物的最終濃度為1x(表2)。然後將該板在37℃，5%CO2的潮濕條件下培養72小時。
在第3天，將培養基從細胞中除去。將孔用HBSS(漢克氏平衡鹽溶液)洗滌兩次。將100μM 8-OH喹啉和100μM FeCl3加至孔中並將該板孵育1小時。然後將細胞用HBSS洗滌一次。洗滌步驟之後，將新鮮的培養基加到各孔中。然後將該板在37℃，5% CO2的潮濕條件下孵育72小時。
第4天，將培養基從細胞中除去並將該細胞用HBSS洗滌兩次。將100μL HBSS(含有混合劑(市售可得的 蛋白酸抑制劑混合物片劑(Roche#04 693 124 001))加至各孔中。然後將該板在-80℃放置30分鐘，解凍並重複冷凍/解凍步驟至少3次。然後將細胞溶解液混合並測試25μL的細胞溶解產物以確定蛋白質濃度。表3顯示BCA試劑盒的製備，從而在第4天確定蛋白質濃度。
然後調整蛋白質濃度。接著將100μL樣品(使用經誘導的BSA稀釋液)加至該96孔蛋白結合板並在4℃孵育過夜。
在第5天，進行ELISA測試。將孔用250μL 1XPBS(磷酸鹽緩衝鹽水)/孔洗滌3次。然後將過量的洗液從各孔中除去。將100μL DNPH(二硝基苯基肼)操作溶液加至各孔(表4)並將板在室溫避光培養45分鐘。
然後將孔用250μL 1XPBS/乙醇(1：1)洗滌5次，在定軌搖床上孵育5分鐘(表5)。
然後將該孔用250μL 1XPBS洗滌2次。將200μL阻斷液加至各孔(表6)並在將該板室溫在定軌搖床上孵育1-2小時。
然後將該孔用250μL 1X洗滌緩衝液洗滌3次(表7)，每次洗滌之間進行徹底抽吸。
接下來，將100μL抗-DNP(抗-二硝基苯基肼)抗體加入各孔(表8)並將該板在室溫在定軌搖床上孵育1小時。
接下來，將條形孔洗滌3次(1*洗滌緩衝液)。將100μL與次級抗體結合的稀HRP加至所有孔並將該板在室溫在定軌搖床上孵育1小時。參見表9。
接下來，將該條形孔洗滌5次(1*洗滌緩衝液)。將底物溶液溫熱至室溫並將100μL該底物溶液加至各孔。然後將該條形孔孵育15分鐘。通過將100μL終止液加至各孔來使該酶反應終止。一旦顏色隨著時間減退，立即讀取結果。
結果如表10和圖2中所示。
黃柏酮的平均蛋白羰基化抑制率為1.6%、23.6%、37.75%、39.15%；維生素C的羰基化抑制率為-3.05%、31.05%、55.35%和62.65%。
這表明，在HepG2細胞中，相比於已知的陽性對照維生素C而言，黃柏酮具有極好的抑制蛋白羰基化的效力。這還表明了可使用含有黃柏酮的產品來提亮皮膚和抗老化。
因此，前述詳盡的描述應被認為是說明性的而非限制性的，且應理解，所附申請專利範圍，包括所有等效內容，均旨在限定本發明的主旨和範圍。

Claims (18)

  1. 一種具有降低或抑制蛋白羰基化活性的局部組合物，其基本上由以下組成：a)有效降低或抑制蛋白羰基化的量的約75-100%純的黃柏酮；b)美容上可接受的媒介物；和c)任選地，i)一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或ii)皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。
  2. 一種具有降低或抑制蛋白羰基化活性的局部組合物，其由以下組成：a)有效降低或抑制蛋白羰基化的量的至少約90%純的黃柏酮；b)美容上可接受的媒介物；和c)選擇地，i)一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或ii)皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。
  3. 如請求項1-2中任一項的組合物，其中所述黃柏酮是從選自以下的至少一種植物的提取物中純化的：吳茱萸、白蘚皮、黃柏皮、佛手、枳實和香櫞。
  4. 如請求項3的組合物，其中將所述吳茱萸提取物相對於吳茱萸鹼、吳茱萸次鹼和檸檬苦素中至少一種的含量進行標準化。
  5. 如請求項1-4中任一項的組合物，其中所述黃柏酮是約99.99%純的黃柏酮活性物。
  6. 如請求項1-5中任一項的組合物，所述組合物為選自以下的製劑：霜劑、軟膏劑、泡沫劑、洗劑、硬膏劑、片劑、顆粒劑或乳劑。
  7. 如請求項1-2中任一項的組合物，其中黃柏酮與皮膚美白劑的比例為約100：1至約1：100。
  8. 如請求項1-7中任一項的組合物，其中有效降低或抑制蛋白羰基化的量為約10-1000mg。
  9. 如請求項1-8中任一項的組合物，其中所述黃柏酮占該組合物的大約1-99% w/w。
  10. 如請求項1-8中任一項的組合物，其中所述黃柏酮占該組合物的大約1-75% w/w。
  11. 如請求項1-8中任一項的組合物，其中所述黃柏酮占該組合物的大約50-70% w/w。
  12. 一種局部組合物，其包含美容上可接受的媒介物和占該組合物的大約1-99% w/w的量的至少90%純的黃柏酮。
  13. 一種改善皮膚外觀或至少一種皮膚老化跡象的方法，所 述方法包括將美容上有效的足以改善皮膚外觀或至少一種皮膚老化跡象的量的組合物局部施用至該皮膚，其中所述組合物包含a. 一定量的約75-100%純的黃柏酮；b. 美容上可接受的媒介物；和c. 任選地，i)一種或多種美容成分，其選自：醇、脂肪、油、表面活性劑、脂肪酸、矽油、濕潤劑、保濕劑、黏度調節劑、乳化劑、穩定劑、著色劑和香料；和/或ii)皮膚美白劑，其選自：酪氨酸酶抑制劑、自由基清除劑及它們的混合物。
  14. 如請求項13的方法，其中所述組合物為選自以下的產品類型：氣溶膠、霜、乳液、固體、液體、分散體、泡沫、凝膠、洗液、摩絲、軟膏、粉末、貼片、潤髮油、溶液、泵噴霧劑、棒、小毛巾及它們的組合。
  15. 一種美白皮膚的方法，其包括將請求項1-12中任一項的組合物局部施用至皮膚，其中所述組合物的施用量和持續時間足以可見地美白皮膚。
  16. 一種提亮皮膚的方法，其包括將請求項1-12中任一項的組合物局部施用至皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以可見地提亮該皮膚。
  17. 一種請求項1-12中任一項的局部組合物在製備具有降低或抑制蛋白羰基化活性的美容劑中的用途。
  18. 一種預防、改善或減少至少一種皮膚老化跡象的方法， 其包括將請求項1-12中任一項的組合物施用至皮膚，其中該組合物的施用量和持續時間足以預防、改善或減少所述至少一種皮膚老化跡象。
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7132935B2 (ja) * 2017-03-06 2022-09-07 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 適合溶質の使用
FR3114241A1 (fr) * 2020-09-18 2022-03-25 C F E B Sisley Compositions cosmétiques amincissantes contenant un ou plusieurs limonoïdes
CN117281801B (zh) * 2023-09-15 2025-09-02 云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司 α-酮丁酸盐在制备预防和或治疗皮肤光老化护肤品和药物中的应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6447820B1 (en) * 2001-01-22 2002-09-10 Sarfaraz K Niazi Pharmaceutical composition for the prevention and treatment of scar tissue
WO2006058299A2 (en) * 2004-11-29 2006-06-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Manufacture of limonoid compounds
US20090202581A1 (en) * 2008-02-12 2009-08-13 Nathalie Schlemer Cosmetic formulation
CN105816342A (zh) * 2015-01-09 2016-08-03 捷通国际有限公司 包括黄柏酮的组合物和其在皮肤美白应用中的使用方法
CN104873405A (zh) * 2015-04-23 2015-09-02 河南栖美生物科技有限公司 一种平衡修复液及其制备方法

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