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TW201632520A - 經取代之吡啶並苯並二氮呯酮衍生物及其用途 - Google Patents

經取代之吡啶並苯並二氮呯酮衍生物及其用途 Download PDF

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TW201632520A TW104138682A TW104138682A TW201632520A TW 201632520 A TW201632520 A TW 201632520A TW 104138682 A TW104138682 A TW 104138682A TW 104138682 A TW104138682 A TW 104138682A TW 201632520 A TW201632520 A TW 201632520A
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漢斯 布雷姆
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湯瑪斯 史蘭吉
爾夫 包莫
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Abstract

本申請案係有關一種新穎之(3-羥苯基)胺基-取代之吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮衍生物、其製法、其於治療及/或預防疾病上之單獨用途或組合用途、及其於製造用於治療及/或預防疾病(尤指以新生血管為重要因素之生成血管性病變及過度增生性病變，例如：眼睛病變及癌症與腫瘤)之醫藥上之用途。此等治療法可依單方療法或與其他醫藥或其他醫療法組合進行。

Description

經取代之吡啶並苯並二氮呯酮衍生物及其用途
本申請案係有關一種新穎之(3-羥苯基)胺基-取代之吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮衍生物、其製法、其於治療及/或預防疾病上之單獨用途或組合用途、及其於製造用於治療及/或預防疾病(尤指以新生血管為重要因素之生成血管性病變及過度增生性病變，例如：眼睛病變及癌症與腫瘤)之醫藥上之用途。此等治療法可依單方療法或與其他醫藥或其他醫療法組合進行。
生成血管過程(亦即從現有的血管形成新的血管)係發生在完全成長之生物體之生理條件下(例如：傷口癒合或卵巢週期)及病理過程(尤指癌症與腫瘤事件及特殊眼睛病變、發炎病變、自體免疫病變、心血管病變、腎病變及生成血管作用失調之子宮內膜異位症)[Risau,Nature 386,671(1997)；Jain,Nat.Med.9,685(2003)]。生成血管作用為一種複雜過程，其包括內皮細胞之增生與轉移，血管壁被外周細胞覆蓋造成之細胞外蛋白質水解與修飾，並受到各種不同促生成血管性與抗生成血管性因子影響[Carmeliet及Jain,Nature 407,249-257(2000)]。
癌症為各種不同組織之細胞生長失控的結果。在許多例子中，新細胞會穿透現存組織(侵入性生長)，或會轉移至遠處之器官。癌症會發生在許多種不同器官且經常具有組織專一性過程。因此，「癌症」一詞統稱一大群不同器官、組織及細胞型態之限定疾病。
發展中之腫瘤不會先血管化。要進一步生長至體積超過幾mm3之前提係形成新血管，以供應氧氣與營養素給腫瘤。此舉誘發生成血管作用，亦稱為生成血管性開關機制，係癌症發展之特徵之一[Hanahan與Weinberg,Cell 100,57(2000)]。此外，腫瘤內新生血管會提高腫瘤細胞進入全身循環之可能性，而且如此顯著之血管化會提高轉移潛力。
腫瘤對新生血管之依賴性使得針對生成血管作用之抑制作用可以成為癌症治療之新穎治療原理[Ferrara等人，Nature 438,967(2005)；Carmeliet,Nature 438,932(2005)]。同時，可藉由抑制血管系統之普遍生長來破壞對生長中之腫瘤之供應。此舉經常減緩生長，安定現存狀態或甚至消退腫瘤。最重要之促生成血管性因子之一為血管內皮生長因子(VEGF)。使用可以抑制血管生長之VEGF-中和單株抗體(癌思停(bevacizumab))時，可能延長結腸直腸癌瘤患者之預期壽命。如：索拉非尼(sorafenib)、紓癌特(sunitinib)或帕唑帕尼(pazopanib)之VEGFR激酶抑制劑已成功用於治療腎細胞癌瘤、肝癌瘤或晚期胃腸基底腫瘤(GIST)。然而，目前可採用之抗生成血管性治療之效力經常無法滿足期望，而且必需接受許多副作用。因此，仍然需要一種具有改良醫療效力之新穎化合物與方法。
與年齡相關之黃斑變性(AMD)為老年人最常見之失明原因之一。AMD通常分成兩大類，非血管性(乾性)AMD及血管性(濕性)AMD。濕性AMD佔所有AMD患者約10%，但卻是造成嚴重失明之最主要原因。濕性黃斑變性之特徵在於膠體血管生長；在此過程中，不成熟之病態血管從脈絡膜生長進入視網膜。此等不成熟血管之通透性造成滲液及出血。若未治療，將造成視網膜不可逆性傷害，並喪失中心視力[Bressler,JAMA 291,1900-1901(2004)]。
過去數十年來，自從抗VEGF療法(例如：哌加他尼(pegaptanib)、蘭尼單抗(ranibizumab)、癌思停(bevacizumab)及阿柏西普(aflibercept))上市且用於臨床操作後，濕性黃斑變性之治療已有顯著改善[McGimpsey及Chakravarthy,Expert Rev.Clin.Pharmacol.3(2),243-252(2010)]。例如：由濕性AMD利用各種不同抗VEGF治療療程，可以讓約80%患者改善或穩 定視力，但其條件係在發生視力喪失後早期時即開始治療[Chang等人，Arch.Ophthalmol.125(11),1460-1469(2007)；Brown等人，Ophthalmology 116,57-65(2009)]。僅30-40%患者可以在斯內倫測視力圖(Snellen eye chart)上得到三條線以上，且15-20%患者儘管已接受治療，實際上仍在此量表上喪失高達15個字母[Singer等人，Ophthalmology 119,1175-1183(2012)；Rofagha等人，Ophthalmology 120,2292-2299(2013)]。
生成血管作用之調節作用不僅涉及VEGF-介導之訊號轉導，而且亦涉及許多其他訊號轉導系統，包括PDGF訊號傳導途徑。PDGF(血小板衍生之生長因子)係在受傷時由血小板釋出，以刺激組織癒合，並在胚胎形成作用中扮演重要角色，尤其在腎臟、血管、肺臟與中樞神經系統之發展中。PDGF係由平滑肌細胞與內皮細胞形成，且涉及細胞增生與細胞轉移[Heldin及Westermark,Physiol.Rev.79(4),1283-1316(1999)]。
針對此背景，許多專家之觀點在於透過引進包括亦表現不依賴VEGF之訊號傳導途徑(例如：PDGF訊號傳導途徑)之物質[McGimpsey及Chakravarthy,Expert Rev.Clin.Pharmacol.3(2),243-252(2010)]之組合治療進一步提高治療效力。此點已由許多檢測VEGF與PDGF生長因子對眼睛新生血管之角色之不同臨床前試驗支持。
已顯示，PDGF生長因子在維持血管完整性上扮演重要角色[Goel等人，Physiol.Rev.91,1071-1121(2011)]。新形成血管之內皮細胞分泌PDGF，以主導外周細胞進入血管壁。此過程稱為血管成熟，並造成外周細胞對成熟血管之不同覆蓋程度。在此關係上應述及之重點為成熟細胞之內皮細胞之存活轉成不再主要依賴VEGF訊號傳導。
PDGF訊號傳導對視網膜及脈絡膜新生血管之關鍵功能亦已顯示於臨床前動物模式及甚至顯示於臨床狀態上。在成熟前視網膜病變之大鼠模式中，使用PDGFR抑制劑之全身性治療會誘發內部視網膜中外周細胞之凋亡[Wilkinson-Berka等人，Am.J.Pathol.164(4),1263-1273(2004)]。於囓齒類CNV模式中，PDGFRβ抗體與VEGF-A適體之組合在預防性與醫療性方法 中均造成加成性之降低新生血管作用[Jo等人，Am.J.Pathol.168(6),2036-2053(2006)]。
使用PDGF-B適體(Fovista®)之臨床試驗第II期結果支持靶向PDGF之臨床可應用性。每月使用抗-VEGF治療(蘭尼單抗(ranibizumab))與Fovista®之組合治療歷經24週，造成視敏度比單獨使用抗VEGF療法時提高62%[來自Ophthotech Corp.,13 June 2012之付印本]。此結果強調以除了VEGF訊號傳導外再加上PDGF訊號傳導途徑之醫療法於治療新血管病變(如：濕性AMD)之潛力。
因此本發明之目的在於判別及提供一種新穎之低分子量化合物，其係以強效且雙重方式同時抑制VEGF與PDGF訊號傳導途徑，因此適合治療及/或預防生成血管性病變，尤指眼睛病變及癌症與腫瘤。
適用為各種不同激酶之抑制劑，尤其用於治療癌症之雙稠合1,4-二氮呯-5-酮衍生物係特別自WO 2004/076424-A1、WO 2004/096795-A2、WO 2007/079826-A1、WO 2007/095188-A2、WO 2010/077680-A2、WO 2010/080712-A2及WO 2012/045194-A1中已知者。EP 2 199 295-A1說明雙稠合之1,4-二氮呯酮衍生物用於治療糖尿病。EP 0 393 604-A2、EP 0 410 148-A1、EP 0 429 987-A2、EP 0 767 172-A1及WO 03/097644-A2揭示吡啶并稠合之1,4-二氮呯酮用於治療HIV感染。申請案CN 102690278-A[Chem.Abstr.157：577416；DWPI 2012-R67146]說明嘧啶并苯並氮呯衍生物用於治療細胞素誘發之病變。
本發明提供一種通式(I)化合物 其中R1 為氫、鹵素、羥基或(C1-C4)-烷基或如下式基團-NH-C(=O)-R4、-NH-C(=O)-O-R5或-NH-SO2-R6，其中R4 為氫或(C1-C4)-烷基，R5 為(C1-C4)-烷基及R6 為(C1-C4)-烷基或苯基，R2 為氫、氟、氯、甲基或甲氧基，R3 為氫、氟、氯或甲基，及G 為氰基、羥羰基或如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基或(C1-C4)-烷氧基取代，或經氟至多三取代，R7B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、4-至7-員雜環基或5-至10-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多六取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR9、-O-(CH2CH2O)n-R10、-SR11、-NR12AR12B、-C(=O)-NR13AR13B、(C3-C6)-環烷基、(C4-C6)-環烯基、苯基、4-至7-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中 (i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，及(iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，及其中R9 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經4-至6-員雜環基取代，R10 為氫或(C1-C4)-烷基，R11 為(C1-C4)-烷基，R12A、R12B、R13A及R13B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及n 為1至10包括在內之範圍之整數，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成4-至10-員雜環，其可再包含至多2個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR14、-NR15AR15B、-C(=O)-NR16AR16B及苯基，其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R14 為氫、(C1-C4)-烷基或苯基， 其中(C1-C4)-烷基可經羥基、-C(=O)-NR17AR17B或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R15A、R15B、R16A、R16B、R17A及R17B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基或(C1-C4)-烷氧基取代，或經氟至多三取代，及R8B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、4-至7-員雜環基或5-至10-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多六取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-O-(CH2CH2O)p-R19、-SR20、-NR21AR21B、-C(=O)-NR22AR22B、(C3-C6)-環烷基、(C4-C6)-環烯基、苯基、4-至7-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，及(iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，及其中R18 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經4-至6-員雜環基取代， R19 為氫或(C1-C4)-烷基，R20 為(C1-C4)-烷基，R21A、R21B、R22A及R22B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及p 為1至10包括在內之範圍之整數，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成4-至10-員雜環，其可再包含至多2個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B、-C(=O)-NR25AR25B及苯基，其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫、(C1-C4)-烷基或苯基，其中(C1-C4)-烷基可經羥基、-C(=O)-NR26AR26B或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A、R25B、R26A及R26B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明化合物為式(I)化合物與其鹽類、溶劑合物、與該鹽類之溶劑合物；涵括在式(I)中之如下述式(I-A)、(I-B)、(I-C)與(I-D)化合物，及其鹽類、溶劑合物、與該鹽類之溶劑合物；若下文所示化合物涵括在式(I)中但尚未呈鹽類、溶劑合物與該鹽類之溶劑合物時，則包括下文所述及作為操作實例之涵括在式(I)中之化合物及其鹽類、溶劑合物與及該等鹽類之溶劑合物。
本發明內容中，較佳鹽類為本發明化合物之生理上可接受之鹽類。亦包括本身不適合醫藥用途但可用於例如：單離、純化或儲存本發明化合物之鹽類。
本發明化合物之生理上可接受之鹽類尤其包括礦物酸、羧酸與磺酸之酸加成鹽類，例如：鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘二磺酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、葡糖酸、苯甲酸、與雙羥萘酸之鹽類。
此外，本發明化合物之生理上可接受之鹽類亦包括衍生自習知鹼類之鹽類，例如：較佳為鹼金屬鹽類(例如：鈉與鉀鹽類)、鹼土金屬鹽類(例如：鈣與鎂鹽類)、鋅鹽、與衍生自氨或具有1至20個碳原子之有機胺類之銨鹽類，例如：較佳為乙基胺、二乙基胺、三乙胺、N,N-乙基二異丙基胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲基胺基乙醇、二乙基胺基乙醇、參(羥基甲基)胺基甲烷、膽鹼、苯甲烴銨(benzalkonium)、普魯卡因(procaine)、二苯甲基胺、二環己基胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、精胺酸、離胺酸、及1,2-乙二胺。
本發明內容中，溶劑合物係指彼等由本發明化合物與溶劑分子配位所形成之固態或液態錯化物型式。水合物為其中與水配位之特定溶劑合物型式。本發明內容中之較佳溶劑合物為水合物。
本發明化合物視其結構可能出現不同立體異構物型式，亦即呈組態異構物，或若適當時可呈構形異構物(對映異構物與/或非對映異構物，包括彼等阻轉異構物)。本發明因此包括對映異構物與非對映異構物、及其各混合物。可依已知方式，從此等對映異構物與/或非對映異構物之混合物中單離出立體化學上均一之組成份；為了此目的較佳係採用層析法，尤指於非對掌性或對掌性相上進行之HPLC層析法。若以羧酸為中間物或終產物時，亦可使用對掌性胺鹼類，經由非對映異構性鹽分離。
若本發明化合物出現互變異構型時，本發明包括所有互變異構型。
本發明亦涵蓋本發明化合物之所有合適之同位素變異體。咸了解，本發明化合物之同位素變異體意指本發明化合物中至少一個原子被另一個與天然界經常出現或主要出現之原子序數相同，但原子質量不同之原子置換。可進入本發明化合物中之同位素實例為彼等氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、 氯、溴及碘之同位素，如：2H(氘)、3H(氚)、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I與131I。本發明化合物之特定同位素變異體，尤指彼等其中已納入一個或多個放射性同位素者可能比較有利於例如：用於探討作用機轉或體內之活性成份分佈；基於相當容易之製法及可檢測度，尤以標記3H、14C與/或18F同位素之化合物適合本目的。此外，納入例如：氘之同位素可能得到提高化合物代謝安定性之特別醫療效益，例如：延長其在體內之半衰期或降低所需活性成份之劑量；因此本發明化合物之此等修飾法有時候亦可以構成本發明之較佳具體實施例。本發明化合物之同位素變異體可依熟悉此相關技藝之人士習知之方法製備，例如：下文說明之方法及操作實例中說明之方法，在其中採用經過相應同位素修飾之特定試劑及/或起始化合物製備。
此外，本發明亦包括根據本發明化合物之前藥。術語「前藥」包括其本身可能具有生物活性或沒有生物活性，但可於體內轉化(例如：經過代謝或水解途徑)成本發明化合物之化合物。
本發明內容中，除非另有說明，否則取代基之定義如下：
(C1-C6)-烷基、(C1-C4)-烷基及(C1-C3)-烷基在本發明內容中代表分別具有1至6個、1至4個及1至3個碳原子之直鏈或分支鏈烷基。實例包括：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、新戊基、3-甲基丁基、正己基、2-己基、3-己基及4-甲基戊基。較佳係具有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈烷基，如：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。特別佳者為具有1至3個碳原子之直鏈或分支鏈烷基，如：甲基、乙基、正丙基及異丙基。
(C1-C4)-烷氧基及(C1-C3)-烷氧基在本發明內容中代表分別具有1至4個及1至3個碳原子之直鏈或分支鏈烷氧基。實例包括：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。較佳係具有1至3個碳原子之直鏈或分支鏈烷氧基，如：甲氧基、乙氧基、正丙氧基及異丙氧基。
(C1-C4)-烷氧基羰基在本發明內容中為具有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈烷氧基，且係利用鍵結在氧原子之羰基[-C(=O)-]連接其餘分子。實例包括：甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基、正丁氧基羰基及第三丁氧基羰基。
(C3-C6)-環烷基在本發明內容中為具有3至6個環碳原子之單環系飽和環烷基。實例包括：環丙基、環丁基、環戊基及環己基。
(C4-C6)-環烯基在本發明內容中為具有4至6個環碳原子且環中包含一個雙鍵之單環系環烷基。實例包括：環丁烯基、環戊烯基及環己烯基。
4-至7-員雜環基在本發明內容中為單環系或可視需要為雙環系之飽和雜環，其共具有4至7個環原子，且包含1或2個選自N、O與S之群中之相同或相異環雜原子並利用環碳原子或可視需要利用環氮原子連接。實例包括：氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、硫雜環丁烷、吡咯啶基、吡唑啶基、四氫呋喃基、硫雜環戊烷基、1,2-唑啶基、1,3-唑啶基、1,3-噻唑啶基、哌啶基、哌基、四氫哌喃基、四氫硫哌喃基、1,3-二氧雜環己烷基、1,4-二氧雜環己烷基、1,2-氧氮雜環己烷基、嗎啉基、硫嗎啉基、氮雜環庚基、1,4-二氮雜環庚基、1,4-氧氮雜環庚基及7-氮雜雙環[2.2.1]庚基。本發明內容中較佳係4-至6員雜環基，其為共具有4至6個環原子，且包含1或2個選自N與O之群中之相同或相異環雜原子並利用環碳原子或可視需要利用環氮原子連接之單環系飽和雜環，例如：氮雜環丁烷、氧雜環丁烷、吡咯啶基、吡唑啶基、四氫呋喃基、1,3-唑啶基、哌啶基、哌基、四氫哌喃基、1,4-二氧雜環己烷基、1,2-氧氮雜環己烷基與嗎啉基。特別佳者為5-或6員雜環基，其為共具有5或6個環原子，且包含1或2個選自N與O之群中之相同或相異環雜原子並利用環碳原子或可視需要利用環氮原子連接之單環系飽和雜環，例如：吡咯啶基、吡唑啶基、四氫呋喃基、1,3-唑啶基、哌啶基、哌基、四氫哌喃基、1,4-二氧雜環己烷基、1,2-氧氮雜環己烷基與嗎啉基。
5-至10-員雜芳基在本發明內容中為單環系或可視需要為雙環系之芳香系雜環(雜芳香系)，其共具有5至10個環原子，且包含多4個選自N、O 與S之群中之相同或相異環雜原子並利用環碳原子或可視需要利用環氮原子連接。實例包括：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、1,2-唑基(異唑基)、1,3-唑基、1,2-噻唑基(異噻唑基)、1,3-噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-二唑基、1,3,4-二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、嗒基、吡基、1,2,4-三基、1,3,5-三基、苯並呋喃基、苯並噻吩基、苯並咪唑基、苯並唑基、苯並噻唑基、苯並三唑基、吲哚基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹啉基、噌啉基、酞基、吡唑並[3,4-b]吡啶基、嘌呤基及蝶啶基。本發明內容中較佳係5-或6員雜芳基，其為共具有5或6個環原子，且包含多1或2個選自N、O與S之群中之相同或相異環雜原子並利用環碳原子或可視需要利用環氮原子連接之單環系雜芳香系，例如：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、1,3-唑基、1,3-噻唑基、吡啶基、嘧啶基、嗒基及吡基。
在彼此連接形成一個環之R7A與R7B或R8A與R8B基團之定義中，用語「4-至10-員雜環」意指單環系或可視需要為雙環系之飽和雜環，其共具有4至10個環原子，且包含一個環氮原子，利用該原子連接，且可再包含至多2個選自N、O與S之群中之相同或相異環雜原子。實例包括：氮雜環丁烷、吡咯啶基、吡唑啶基、1,2-唑啶基、咪唑啶基、1,3-唑啶基、1,3-噻唑啶基、哌啶基、哌基、1,2-氧氮雜環己烷基、嗎啉基、硫嗎啉基、氮雜環庚基、1,4-二氮雜環庚基、1,4-氧氮雜環庚基、氮雜環辛烷基、1,5-二氮雜環辛烷基、1,5-氧氮雜環辛烷基、八氫吡咯並[3,4-b]吡咯基、八氫吡咯並[3,4-c]吡咯基、八氫吲哚基、八氫異吲哚基、八氫吡咯並[3,4-b]吡啶基、八氫吡咯並[3,4-c]吡啶基、八氫吡咯並[3,4-b]吡基、十氫喹啉基、十氫異喹啉基、八氫吡啶並[1,2-a]吡基、八氫吡並[1,2-a]吡基、3-氮雜雙環[3.1.0]己基、7-氮雜雙環[2.2.1]庚基、3-氮雜雙環[3.2.0]庚基、2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚基、2-氮雜雙環[2.2.2]辛基、2,5-二氮雜雙環[2.2.2]辛基、3-氮雜雙環[3.2.1]辛基、8-氮雜雙環[3.2.1]辛基及8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛基。較佳係5-至7-員雜環，其為共具有5至7個環原子，且包含一個環氮原子，利用該原子 連接，且可再包含至多1個選自N、O與S之群中之相同或相異環雜原子之單環系飽和雜環，例如：吡咯啶基、吡唑啶基、咪唑啶基、1,3-唑啶基、1,3-噻唑啶基、哌啶基、哌基、1,2-氧氮雜環己烷基、嗎啉基、硫嗎啉基、氮雜環庚基、1,4-二氮雜環庚基及1,4-氧氮雜環庚基。特別佳者為5-至7-員雜環，其為共具有5至7個環原子，且包含一個環氮原子，利用該原子連接，且可再包含1個選自N與O之群中之相同或相異環雜原子之單環系飽和雜環，例如：吡咯啶基、吡唑啶基、咪唑啶基、1,3-唑啶基、哌啶基、哌基、1,2-氧氮雜環己烷基、嗎啉基、氮雜環庚基、1,4-二氮雜環庚基及1,4-氧氮雜環庚基。
側氧基取代基在本發明內容中係利用雙鍵鍵結在碳或硫原子上之氧原子。
鹵素在本發明內容中包括氟、氯、溴與碘。較佳係氯、氟或溴，特別佳為氟或氯。
本發明內容中，所有出現超過一次之基團均具有彼此分別獨立之定義。若本發明化合物中之基團經取代時，該基團可經過單取代或多取代，除非另有說明。以經過1或2個相同或相異取代基取代較佳。以經過1個取代基取代特別佳。
本發明內容中，較佳係式(I)化合物，其中R1 為氫、氟、氯、(C1-C4)-烷基或如下式基團-NH-SO2-R6，其中R6 為(C1-C4)-烷基或苯基，R2 為氫、氟、氯或甲基，R3 為氫、氟、氯或甲基，及G 為氰基或如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫、甲基、乙基、2-羥基乙基、2-甲氧基乙基或2-乙氧基乙基，其中甲基及乙基可經氟至多三取代，R7B 為氫、(C1-C4)-烷基或(C3-C6)-環烷基， 其中(C1-C4)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR9、-SR11、-NR12AR12B、(C3-C6)-環烷基及苯基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、甲基、乙基、甲氧基及乙氧基，及其中R9 為氫、甲基或乙基，R11 為甲基或乙基，及R12A及R12B 係分別獨立為氫、甲基、乙基或2-羥基乙基，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C3)-烷基、側氧基、-OR14、-NR15AR15B、-C(=O)-NR16AR16B及苯基，其中(C1-C3)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R14 為氫、甲基或乙基，及R15A、R15B、R16A及R16B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基、甲氧基或乙氧基取代，或經氟至多三取代，及 R8B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、5-或6-員雜環基或5-或6-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-SR20、-NR21AR21B、-C(=O)-NR22AR22B、(C3-C6)-環烷基、苯基、5-或6-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、(C1-C3)-烷氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、甲基、乙基、甲氧基及乙氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C3)-烷基及(C1-C3)-烷氧基，及其中R18 為氫或(C1-C3)-烷基，R20 為(C1-C3)-烷基，及R21A、R21B、R22A及R22B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C3)-烷基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可 經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B、-C(=O)-NR25AR25B及苯基，其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫或(C1-C3)-烷基，其中(C1-C3)-烷基可經羥基或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A及R25B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C3)-烷基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明內容中，特別佳者為式(I)化合物，其中R1 為氫、氟、氯或(C1-C4)-烷基，R2 為氫或氟，R3 為氫、氟、氯或甲基，及G 為如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫、甲基或乙基，R7B 為甲基、乙基、2-羥基乙基或環己基，其中環己基可經羥基至多二取代，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：甲基、乙基、側氧基及羥基，其中甲基及乙基可再經羥基取代，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，及 R8B 為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基或5-或6-員雜環基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-SR20、-NR21AR21B、(C3-C6)-環烷基、5-或6-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、(C1-C3)-烷氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，(ii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(iii)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C3)-烷基及(C1-C3)-烷氧基，及其中R18 為氫、甲基或乙基，R20 為甲基或乙基，及R21A及R21B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C3)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B及-C(=O)-NR25AR25B，其中(C1-C3)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫或(C1-C3)-烷基，其中(C1-C3)-烷基可經羥基取代，或經氟至多三取代， 及R24A、R24B、R25A及R25B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明一項特別具體實施例包含式(I)化合物，其中R1 為氯或甲基，R2 為氫及R3 為氟，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明另一項特別具體實施例包含式(I)化合物，其中R1及R2 分別為氫，及R3 為甲基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明另一項特別具體實施例包含式(I)化合物，其中G 為如下式基團-C(=O)-NR7AR7B，其中R7A 為氫、甲基或乙基，R7B 為甲基、乙基、2-羥基乙基或環己基，其中環己基可經羥基至多二取代，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：甲基、乙基、側氧基及羥基，其中甲基及乙基可再經羥基取代，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明另一項特別具體實施例包含式(I)化合物，其中G 為如下式基團-CH2-NR8AR8B，其中 R8A 為氫或(C1-C4)-烷基及R8B 為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基或5-或6-員雜環基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-SR20、-NR21AR21B、(C3-C6)-環烷基、5-或6-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、(C1-C3)-烷氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，(ii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(iii)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C3)-烷基及(C1-C3)-烷氧基，及其中R18 為氫、甲基或乙基，R20 為甲基或乙基及R21A及R21B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明另一項特別具體實施例包含式(I)化合物，其中G 為如下式基團-CH2-NR8AR8B，其中R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C3)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B及-C(=O)-NR25AR25B， 其中(C1-C3)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫或(C1-C3)-烷基，其中(C1-C3)-烷基可經羥基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A及R25B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
本發明內容中，極特別佳者為式(I)化合物，其中R1 為甲基，R2 為氫，R3 為氟，及G 為如下式基團-CH2-NR8AR8B，其中R8A 為氫、甲基或乙基，及R8B 為(C1-C6)-烷基或(C3-C6)-環烷基，其中(C1-C6)-烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：羥基、甲氧基及乙氧基，及(C3-C6)-環烷基，其可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：羥基、甲氧基、乙氧基、異丙氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基及正丙氧基，其中甲基及乙基可再經羥基取代， 及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
在基團之特別組合或較佳組合中明確說明之個別基團定義係與該指定基團之特別組合分別獨立，亦可依需要被其他組合之基團定義置換。
極特別佳為如上述二種或多種較佳範圍之組合。
本發明進一步提供一種製備本發明化合物之方法，其特徵在於[A]由式(II)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，及PG1 為合適之保護基，例如：苯甲基、4-甲氧基苯甲基或2,4-二甲氧基苯甲基，於鹼之存在下，與2,4-二氯吡啶-3-羧酸(III)反應
產生式(IV)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義， 然後與3,4-二胺基苯甲腈(V)
在(IV)中羧酸官能基之活化下偶合，產生式(VI)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義，然後由此化合物於惰性溶劑中加熱，環化產生式(VII)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義，然後脫除保護基PG1，得到本發明式(I-A)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，或[B]由式(VIII)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，於酸之存在下，與式(IX)化合物於加熱下反應
產生本發明式(I-A)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，且可視需要[C]由所得式(I-A)化合物使用酸水溶液處理，轉化成本發明式(I-B)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，後者可視需要接著與式(X)化合物 其中R7A及R7B係如上述定義，在式(I-B)中羧酸官能基之活化下偶合，產生本發明式(I-C)化合物 其中R1、R2、R3、R7A及R7B係如上述定義，或可視需要[D]由所得式(I-A)化合物與二異丁基氫化鋁反應，轉化成式(XI)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，後者再於合適還原劑之存在下，與式(XII)化合物反應 其中R8A及R8B係如上述定義，產生本發明式(I-D)化合物 其中R1、R2、R3、R8A及R8B係如上述定義，且可由所得式(I-A)、(I-B)、(I-C)及(I-D)化合物可視需要分離成其對映異構物及/或非對映異構物，及/或可視需要使用適當(i)溶劑與/或(ii)酸或鹼類轉化成其溶劑合物、鹽類及/或其鹽類之溶劑合物。
適用於製程步驟(II)+(III)→(IV)之鹼類為非親核性強鹼，如：氫化鈉或氫化鉀、雙(三甲基矽烷基)胺化鋰、雙(三甲基矽烷基)胺化鈉或雙(三甲基矽烷基)胺化鉀、或二異丙基胺化鋰；較佳係使用雙(三甲基矽烷基)胺化鋰。 適用於此反應之惰性溶劑尤其包括醚類，如：乙醚、二異丙基醚、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基甲烷或雙(2-甲氧基乙基)醚；烴類，如：正戊烷、正己烷、異己烷、正庚烷、或環己烷；極性有機溶劑，如：N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N'-二甲基伸丙基脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)或此等溶劑之混合物；較佳係使用四氫呋喃與正己烷之混合物。該反應通常在-78℃至+25℃溫度範圍下進行。
此製程步驟中，在原本相同之反應條件下，亦可改用式(XIII)酯衍生物替代羧酸(III)進行 其中R27為甲基或乙基；所得式(XIV)產物 其中PG1、R1、R2、R3及R27係如上述定義，再依習知方式進行鹼水解，產生式(IV)羧酸。
(IV)+(V)→(VI)偶合反應[醯胺形成法]可藉助於縮合劑或活化劑進行，或可利用(IV)所形成相應之羰基氯中間物進行。
此類合適縮合劑或活化劑為例如：碳化二亞胺，如：N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二異丙基-、N,N'-二環己基碳化二亞胺(DCC)或N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)；碳醯氯衍生物，如：N,N'-羰基二咪唑(CDI)或氯甲酸異丁基酯；1,2-唑鎓化合物，如：2-乙基-5-苯基-1,2- 唑鎓3-硫酸鹽或2-第三丁基-5-甲基異唑鎓過氯酸鹽；醯基胺基化合物，如：2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氫喹啉、α-氯烯胺類，如：1-氯-2-甲基-1-二甲基胺基-1-丙烯；磷化合物，如：丙膦酸酐、氰基膦酸二乙基酯、雙(2-側氧基-3-唑啶基)磷醯氯、苯並三唑-1-基氧參(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽或苯並三唑-1-基氧參(吡咯啶基)鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)；或脲鎓化合物，如：O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HBTU)、2-(2-側氧基-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TPTU)、O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)或O-(1H-6-氯苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TCTU)，可視需要與其他輔劑組合，如：1-羥基苯並三唑(HOBt)或N-羥基琥珀醯亞胺(HOSu)，及如：鹼金屬碳酸鹽之鹼類，例如：碳酸鈉或碳酸鉀，或三級胺鹼類，如：三乙胺、N-甲基嗎啉(NMM)、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶或4-N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)。較佳係使用O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)或O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)，其分別與作為鹼之N,N-二異丙基乙基胺組合。
若為經由(IV)所形成之羰基氯之兩階段反應過程時，與胺組份(V)之偶合法係於習知鹼輔劑之存在下進行，如：碳酸鈉、碳酸鉀、氫化鈉、三乙胺、N-甲基嗎啉(NMM)、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、4-N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)；較佳係使用N,N-二異丙基乙基胺。羰基氯本身之製法係依習知方式，由羧酸(IV)使用亞硫醯氯、磷醯氯或草醯氯處理，可視需要於N,N-二甲基甲醯胺(DMF)之催化作用下，於惰性溶劑(如：二氯甲烷)中進行。
用於上述偶合反應之惰性溶劑為例如：醚類，如：乙醚、二異丙基醚、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷或雙(2-甲氧基乙基)醚；烴類，如：苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷或環己烷；鹵烴類，如：二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯；或 極性非質子性溶劑，如：丙酮、甲基乙基酮、乙腈、丁腈、乙酸乙酯、吡啶、二甲亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N'-二甲基伸丙基脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)。亦可使用此等溶劑之混合物。較佳係使用二氯甲烷、四氫呋喃、N,N-二甲基甲醯胺或此等溶劑之混合物。該等反應通常在-20℃至+40℃，較佳在0℃至+30℃之溫度範圍下進行。
(VI)→(VII)環化反應宜使用微波裝置，在+60℃至+200℃，較佳在+100℃至+180℃之溫度範圍下進行。添加酸，例如：三氟乙酸、鹽酸、對甲苯磺酸或吡啶鎓氯化物可能有利。
適合該環化反應之惰性溶劑為相當高沸點醇類，如：乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、第三丁醇、乙二醇、2-甲氧基乙醇或2-乙氧基乙醇；相當高沸點醚類，如：1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、雙(2-甲氧基乙基)醚或雙(2-乙氧基乙基)醚；相當高沸點烴類或氯烴類，如：苯、甲苯、二甲苯、氯苯或1,2-二氯苯，或如：乙腈、丁腈、二甲亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)或N,N'-二甲基伸丙基脲(DMPU)之溶劑。較佳係使用異丙醇、2-乙氧基乙醇、乙腈或1,2-二氯苯。
製程步驟(VII)→(I-A)中之保護基PG1可依習知方法脫除，其可使用三氟乙酸，於硫苯甲醚之存在下處理，其中可視需要添加惰性溶劑，例如：二氯甲烷或1,2-二氯乙烷，或於合適觸媒(例如：活性碳載鈀)之存在下，於作為溶劑之醇類如：甲醇、乙醇或異丙醇；或醚類，如：乙醚、二異丙基醚、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二烷或1,2-二甲氧基甲烷中進行氫化(氫解)[參見T.W.Greene及P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,Wiley,New York,1999]。該等反應通常在-20℃至+40℃之溫度範圍下進行。
製程步驟(VIII)+(IX)→(I-A)係在酸(例如：鹽酸、對甲苯磺酸或吡啶錫氯化物)之存在下，在+50℃至+200℃，較佳+100℃至+180℃溫度範圍下進行，且可能亦宜使用微波裝置。較佳係使用鹽酸，其係呈1,4-二烷中之無水溶液形式使用，或吡啶鎓氯化物作為酸添加。
此反應所使用之惰性溶劑為相當高沸點之醇類，如：乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、第三丁醇、乙二醇、2-甲氧基乙醇或2-乙氧基乙醇；相當高沸點醚類，如：1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、雙(2-甲氧基乙基)醚或雙(2-乙氧基乙基)醚；相當高沸點烴類或氯烴類，如：苯、甲苯、二甲苯、氯苯或1,2-二氯苯，或如：乙腈、丁腈、二甲亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)或N,N'-二甲基伸丙基脲(DMPU)之溶劑。較佳係使用異丙醇、2-乙氧基乙醇或N,N-二甲基甲醯胺。
由於式(I-A)目標化合物經常具有不適於層析純化法之溶解度，因此來自反應(VIII)+(IX)→(I-A)之粗產物可能需先藉助於標準方法轉化成為矽烷基醚衍生物，例如：式(XV)化合物，來協助並改良此等純化法 其中R1、R2及R3係如上述定義，然後在此階段進行純化，接著再採用已知方法脫除矽烷基，例如：使用四-正丁基銨化氟(TBAF)、三氟乙酸(TFA)或鹽酸水溶液處理。
此時亦為了可選用較佳純化法，若需要時，矽烷基醚衍生物(XV)亦可類似上述製程[D]，轉化成受保護之目標化合物(XX) 其中R1、R2、R3、R8A及R8B係如上述定義，依上述相同方式脫除矽烷基，產生本發明化合物(I-D)。
採用習知方法進行(I-A)→(I-B)轉化法，其係使用酸(例如：鹽酸)水溶液於+50℃至+120℃之反應溫度範圍下水解腈基。
(I-B)+(X)→(I-C)偶合反應[醯胺形成法]通常藉助於縮合劑或活化劑進行，但亦可經由(I-B)所形成之相應羰基氯中間物進行。此等反應係在上述明確說明之相關偶合反應(IV)+(V)→(VI)之類似條件下進行。
(I-A)→(XI)還原反應係依已知方法，藉助於二異丁基氫化鋁(DIBAL-H)進行。該反應較佳係在二氯甲烷與四氫呋喃或甲苯之溶劑混合物中進行，及通常在-78℃至+25℃之溫度範圍下進行。
針對此等目的，適合製程步驟(XI)+(XII)→(I-D)[還原性胺化法]之還原劑係習知之鹼金屬硼氫化物，如：氫硼化鋰、氫硼化鈉、氫硼化鉀、氰基氫硼化鈉或三乙醯氧基氫硼化鈉；較佳係使用氰基氫硼化鈉或三乙醯氧基氫硼化鈉。添加酸，如：特定言之乙酸，及/或脫水劑，例如：分子篩或正甲酸三甲酯或三乙酯可能有利於此等反應。
適合此等反應之溶劑尤其為醇類，如：甲醇、乙醇、正丙醇或異丙醇；醚類，如：二異丙基醚、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二烷或1,2-二甲氧基甲烷；極性非質子性溶劑，如：乙腈或N,N-二甲基甲醯胺(DMF)或此等溶劑之混合物。較佳係使用乙醇、四氫呋喃、1,4-二烷或N,N-二甲基 甲醯胺。該等反應通常在-20℃至+50℃之溫度範圍下進行，依所採用之胺組份(XII)之反應性而定。
上文詳述之式(IX)化合物製法可由式(XVI)化合物 其中PG2 為合適之保護基，例如：烯丙基或甲基，與3,4-二胺基苯甲腈(V)
在式(XVI)中羧酸官能基之活化下偶合，產生式(XVII)化合物 其中PG2係如上述定義，然後於酸之存在下加熱而環化，並脫除保護基PG2，產生式(XVIII)化合物
後者隨後使用磷醯氯，於鹼之存在下氯化，產生式(IX)化合物
(XVI)+(V)→(XVII)偶合法係依上述相關之醯胺形成法(IV)+(V)→(VI)明確說明之方式進行。此例中較適合採用經由從(XVI)所形成之羰基氯之兩階段反應變化。
(XVII)→(XVIII)轉形法[環化同時脫除保護基]係由(XVII)於酸之存在下加熱來完成。該反應通常在+60℃至+200℃溫度範圍下，尤其在+100℃至+180℃溫度下進行，且若使用微波裝置可能有利。合適酸加成鹽尤指三氟乙酸、對甲苯磺酸、吡啶鎓氯化物，無水型鹽酸或鹽酸。
適合此反應之惰性溶劑為相當高沸點醇類，如：乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、第三丁醇、乙二醇、2-甲氧基乙醇或2-乙氧基乙醇；相當高沸點醚類，如：1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、雙(2-甲氧基乙基)醚或雙(2-乙氧基乙基)醚；相當高沸點烴類或氯烴類，如：苯、甲苯、二甲苯、氯苯或1,2-二氯苯，或如乙腈、丁腈、二甲亞碸(DMSO)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)或N,N'-二甲基伸丙基脲(DMPU)之溶劑。較佳係使用2-乙氧基乙醇、乙腈或1,2-二氯苯。
隨後之(XVIII)→(IX)轉形法係由(XVIII)使用過量磷醯氯，可視需要於三級胺鹼(如：三乙胺、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶或2,6-二甲基吡啶)之存在下處理；較佳係使用三乙胺。若該反應使用相對大量磷醯氯時，則不需要再另外添加溶劑；或者，亦可能添加惰性溶劑，例如：乙腈、環丁碸、氯苯或1,2-二氯苯。該反應通常在0℃至+100℃之溫度範圍下進行。
(XVIII)與磷醯氯於上述反應條件下之反應通常會產生單氯化目標化合物(IX)與二氯化化合物(XIX)之各種不同比例混合物。
由於(IX)與(XIX)混合物之難溶解性，此混合物宜直接使用，亦即不再進一步分離即繼續與化合物(VIII)反應。與(VIII)之反應中，從(XIX)產生之不要之副產物將在操作水溶液反應過程中排除，並進一步純化目標化合物(I-A)[亦參見上述經由矽烷基醚衍生物，例如：(XV)之進一步純化選項]。
另一種製備式(I-D)化合物之方法涉及由上述化合物(XVI) 其中PG2 為合適之保護基，例如：烯丙基或甲基，與式(XXI)2-硝基苯胺衍生物 其中R8A及R8B係如上述定義，在(XVI)中羧酸官能基之活化下偶合，產生式(XXII)化合物 其中R8A、R8B及PG2係如上述定義，然後還原後者產生式(XXIII)苯胺衍生物 其中R8A、R8B及PG2係如上述定義，然後由後者於酸之存在下加熱而環化，同時脫除保護基PG2，產生式(XXIV)化合物 其中R8A及R8B係如上述定義，後者再使用磷醯氯進一步氯化，產生式(XXV)化合物 其中R8A及R8B係如上述定義，最後由後者與式(VIII)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，於酸之存在下加熱，產生目標式(I-D)化合物 其中R1、R2、R3、R8A及R8B係如上述定義。
(XVI)+(XXI)→(XXII)偶合法係依上述相關之醯胺形成法(IV)+(V)→(VI)明確說明之方式進行。此例中較適合採用經由從(XVI)所形成之羰基氯之兩階段反應變化，且合適之輔助鹼尤指強鹼，如：氫化鈉。
硝基化合物(XXII)形成苯胺衍生物(XXIII)之還原法係採用針對此目的之習知方法達成，例如：藉助於氯化錫(II)，使用鐵粉於鹽酸中處理或使用鋅粉於乙酸中處理，或於觸媒之存在下(如：活性碳載鈀或阮來鎳(Raney nickel))氫化，較佳係使用氯化錫(II)作為還原劑。
隨後(XXIII)→(XXIV)→(XXV)轉形法係類似上述(XVII)→(XVIII)→(IX)之順序進行；然而，(XXIV)與磷醯氯之反應可以不需添加三級胺鹼。
最後，(XXV)+(VIII)→(I-D)反應係依上述相關反應(VIII)+(IX)→(I-A)之相同條件進行。
式(II)、(III)、(V)、(VIII)、(X)、(XII)、(XVI)及(XXI)化合物可自商品取得或已說明於文獻中，或可由熟悉此相關技術者自商品取得其他化合物，採用熟悉之文獻方法製備。許多詳細製程及進一步參考文獻亦可參見「實驗部份」中有關起始化合物及中間物製法等章節。
下列反應圖舉例說明本發明化合物製法：反應圖1 [PG=苯甲基]。
反應圖2 [PG=烯丙基或甲基]。
反應圖5 [PG=烯丙基或甲基]。
本發明化合物具有有價值之藥理性質，可用於預防及治療人類與動物之疾病。
本發明化合物為VEGF與PDGF訊號傳導途徑之低分子量、強效且雙重作用之抑制劑，因此適於治療及/或預防生成血管性病變(尤指眼睛病變)、癌症與腫瘤、及其中涉及新生血管/新生成血管作用之其他病變與病理過程。
本發明內容中，應了解，可使用本發明化合物治療及預防眼睛病變，意指例如下列病變：與年齡相關之黃斑變性(AMD)，包括乾性(非滲液性)及濕性(滲液性，新血管)AMD、脈絡膜新生血管(CNV)、脈絡膜新血管膜(CNVM)、囊樣黃斑部水腫(CME)、上視網膜(ERM)與黄斑裂孔、與近視相關脈絡膜新生血管、血管樣紋及血管紋、視網膜剝離、糖尿病視網膜病變、糖尿病黃斑水腫(DME)、視網膜色素上皮之萎縮性及肥厚性損傷、視網膜靜脈閉鎖、脈絡膜視網膜靜脈閉鎖、黃斑水腫、與腎靜脈閉鎖相關之黃斑水腫、色素性視網膜炎、斯特格氏症(Stargardt disease)、早產兒視網膜病變、青光眼、眼睛發炎病變，例如：葡萄膜炎、鞏膜炎或心內膜炎、白內障、折射異常，例如：近視、遠視、散光或圓錐形角膜、由例如：角膜炎、角膜移植或角膜成形術造成之角膜生成血管結果、由缺氧(例如：過度配戴隱形眼鏡)、結膜眼翼、角膜下水腫及角膜內水腫造成之角膜生成血管結果。
本發明化合物基於其活性型態，尤其適用於治療及/或預防與年齡相關之黃斑變性(AMD)、脈絡膜新生血管(CMV)、與近視相關脈絡膜新生血管、糖尿病視網膜病變、黃斑水腫及視網膜靜脈閉鎖。
本發明內容中，可使用本發明化合物治療與/預防之癌症與腫瘤包括例如：乳房癌瘤與乳房腫瘤(包括導管型與小葉型、及原位型之乳房癌瘤)、呼吸道腫瘤(小細胞與非小細胞肺癌瘤、枝氣管癌瘤)、腦腫瘤(例如：腫瘤腦幹與下視丘之腫瘤、星形細胞瘤、室管膜瘤、膠質母細胞瘤、膠質瘤、神經髓母細胞瘤、腦膜瘤及神經外胚層與松果體腫瘤)、消化器官腫瘤(食道、胃、膽囊、小腸、大腸、直腸、肛門癌瘤)、肝腫瘤(特別指肝細胞癌瘤、膽管癌瘤及混合肝細胞與膽管細胞癌瘤)、頭與頸部腫瘤(喉、下嚥部、鼻咽、口咽、唇與口腔癌瘤、口腔黑色素瘤)、皮膚腫瘤(基底細胞瘤、棘肌細胞瘤、鱗狀細胞癌瘤、卡波西氏肉瘤、惡性黑色素瘤、非黑色素瘤皮膚癌、梅克爾(Merkel)細胞皮膚癌、肥大細胞腫瘤)、基底與結締組織腫瘤(特別指軟組織肉瘤、骨肉瘤、惡性纖維性組織細胞瘤、軟骨肉瘤、纖維肉瘤、血管肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴肉瘤與橫紋肌肉瘤)、眼睛腫瘤(特別指眼內黑色素瘤與視網膜母細胞瘤)、內分泌腺與外分泌腺腫瘤(例如：甲狀腺與 副甲狀腺、胰臟與唾液腺癌瘤、腺瘤)、泌尿道腫瘤(膀胱、陰莖、腎、腎盂與輸尿管之腫瘤)及生殖器官腫瘤(女性之子宮內膜、子宮頸、卵巢、陰道、外陰與子宮之癌瘤，及男性之攝護腺與睪丸之癌瘤)。此等亦包括實體型及循環細胞之增生性血液疾病(淋巴系統與脊髓)，如：白血病、淋巴瘤、與骨髓增生性疾病，例如：急性骨髓性白血病、急性淋巴母細胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞白血病、與毛狀細胞白血病，多發性骨髓瘤(漿細胞瘤)及與AIDS相關之淋巴瘤、霍奇金氏(Hodgkin’s)淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮膚T細胞淋巴瘤、柏奇氏(Burkitt’s)淋巴瘤及中樞神經系統淋巴瘤。
本發明內容中，上述癌症之治療可包括治療固體腫瘤及治療其轉移或循環型。
本發明化合物基於其活性型態，特別適合治療及/或預防乳房、結腸直腸、肝、腎、與卵巢之癌瘤、膠質母細胞瘤、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)與多發性骨髓瘤。
本發明化合物亦可用於治療血管畸變，如：血管瘤、血管母細胞瘤、海綿狀血管瘤、與淋巴血管瘤，及其他與生成血管作用過度或異常相關之病變。其等包括乾癬、玫瑰斑、晶狀體後纖維增生症、血管纖維瘤、發炎、類風濕關節炎、術後再狹窄、支架內再狹窄及血管植入後再狹窄、微血管病變、腎小球病變、子宮內膜異位症、腎病變(例如：腎小球腎炎、糖尿病性腎病變、惡性腎硬化)與纖維化病變(例如：腎硬化、腎球間質溶解、動脈硬化)。
上述完整確認之人類疾病之病因亦可能同樣發生在其他哺乳動物，且同樣可採用本發明化合物治療。
本發明內容中，術語「治療」或「處理」包括抑制、延遲、檢查、減輕、減弱、限制、降低、壓制、驅除或治癒疾病、病症、病變、損傷或健康問題、或此等狀態與/或此等狀態之症狀之發展、過程或進展。咸了解，術語「療法」係術語「治療」之同義字。
在本發明內容中，術語「預防」、「防止」或「排除」係以同義字使用，並意指避免或降低染上、經歷、罹患或患有疾病、病症、病變、損傷或健康問題、或此等狀態與/或此等狀態之症狀之發展或進程之風險。
疾病、病症、病變、損傷或健康問題可能部份或完全治療或預防。
本發明因此進一步提供一種以本發明化合物於治療及/或預防病變，尤指上述病變上之用途。
本發明進一步提供一種以本發明化合物於製造醫藥上之用途，用於治療及/或預防病變，尤指上述病變。
本發明進一步提供一種醫藥，其包含至少一種本發明化合物，用於治療及/或預防病變，尤指上述病變。
本發明進一步提供一種以本發明化合物於治療及/或預防病變，尤指上述病變之方法上之用途。
本發明進一步提供一種使用有效量之至少一種本發明化合物於治療及/或預防病變，尤指上述病變之方法。
本發明化合物可以單獨使用或若需要時可以組合一或多種其他醫藥活性物質使用，但其條件為此組合不可造成不期望且不接受之副作用。本發明因此進一步提供一種醫藥，其包含至少一種本發明化合物與一或多種其他活性成份，尤指用於治療及/或預防上述病變之成份。適用於本目的之較佳組合活性成份實例包括：‧抑制新血管形成之活性成份，例如：較佳為VEGF與/或PDGF訊號傳導途徑之抑制劑、整合素訊號傳導途徑之抑制劑、血管生成素-Tie訊號傳導途徑之抑制劑、PI3K-Akt-mTor訊號傳導途徑之抑制劑、Ras-Raf-Mek-Erk訊號傳導途徑之抑制劑、MAPK訊號傳導途徑之抑制劑、FGF訊號傳導途徑之抑制劑、神經鞘胺醇-1-磷酸酯訊號傳導途徑之抑制劑、內皮細胞增生之抑制劑或誘發細胞凋亡之活性成份；‧降低血管壁通透性(形成水腫)之活性成份，例如：較佳為皮質激素、ALK1-Smad1/5訊號傳導途徑之抑制劑、VEGF與/或PDGF訊號傳導途 徑之抑制劑、環氧合酶抑制劑、激肽釋放酶-激肽系統(kallikrein-kinin system)之抑制劑或神經鞘胺醇-1-磷酸酯訊號傳導途徑之抑制劑；及/或‧降低氧化壓力下之視網膜傷害之活性成份，例如：較佳為補體系統之抑制劑，尤指補體C5a受體之拮抗劑或5-HT1A受體之促效劑。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與VEGF與/或PDGF訊號傳導途徑之抑制劑組合投藥，例如：較佳為阿柏西普(aflibercept)、蘭尼單抗(ranibizumab)、癌思停(bevacizumab)、KH902、哌加他尼(pegaptanib)、雷莫蘆單抗(ramucirumab)、角鯊胺(squalamin)、貝伐西尼(bevasiranib)、阿帕替尼(apatinib)、阿希替尼(axitinib)、布裏凡尼(brivanib)、希得蘭尼(cediranib)、杜菲替尼(dovitinib)、蘭菲替尼(lenvatinib)、利尼凡尼(linifanib)、莫特塞尼(motesanib)、帕佐帕尼(pazopanib)、利格芬尼(regorafenib)、索拉非尼(sorafenib)、紓癌特(sunitinib)、替瓦參尼(tivozanib)、凡得坦尼(vandetanib)、凡塔蘭尼(vatalanib)、瓦格特夫(vargatef)或E-10030。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與血管生成素-Tie訊號傳導途徑之抑制劑組合投藥，例如：較佳為AMG 386，及/或與Tie2受體酪胺酸激酶之調控劑組合投藥。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與整合素訊號傳導途徑之抑制劑組合投藥，例如：較佳為弗西單抗(volociximab)、西侖吉肽(cilengitid)或ALG-1001。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與PI3K-Akt-mTor訊號傳導途徑之抑制劑組合投藥，例如：較佳為XL 147、哌立福辛(perifosin)、MK-2206、西羅莫司(sirolimus)、登西羅莫司(temsirolimus)或依羅莫司(everolimus)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與皮質激素組合投藥，例如：較佳為阿奈可他(anecortave)、貝他美松(betamethasone)、地塞美松(dexamethasone)、去炎松(triamcinolone)或膚輕松(fluocinolone)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與ALK1-Smad1/5訊號傳導途徑之抑制劑組合投藥，例如：較佳為ACE-041或WO 2013/004551-A1中說明之化合物之一。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與環氧合酶抑制劑組合投藥，例如：較佳為溴芬酸(bromfenac)或奈芬酸(nepafenac)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與激肽釋放酶-激肽系統(kallikrein-kinin system)之抑制劑組合投藥，例如：較佳為薩菲班特(safotibant)或艾卡拉肽(ecallantide)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與神經鞘胺醇-1-磷酸酯訊號傳導途徑抑制劑組合投藥，例如：較佳為松皮珠單抗(sonepcizumab)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與補體C5a受體之拮抗劑組合投藥，例如：較佳為依庫珠單抗(eculizumab)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與5-HT1A受體之促效劑組合投藥，例如：較佳為坦度螺酮(tandospirone)。
本發明化合物亦可與光動力療法組合投藥，其包括如：維替泊芬(verteporfin)之活性成份及光之作用。
此外，本發明化合物亦可組合一或多種選自下列各類之活性成份：‧抗氧化劑/自由基清除劑；‧降血壓活性成份，例如：較佳為選自下列群中：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β受體阻斷劑、α受體阻斷劑、利尿劑、磷酸二酯酶抑制劑、sGC刺激劑、cGMP升高劑、醛固酮拮抗劑、礦物皮質激素受體拮抗劑、ECE抑制劑及血管肽酶抑制劑；‧抗糖尿病劑，例如：較佳為選自下列群中：胰島素及胰島素衍生物、磺醯基脲類、雙胍類、美格列奈類(meglitinide)衍生物、糖苷酶抑制劑、PPAR-γ促效劑、GLP 1受體促效劑、升糖素拮抗劑、胰島素敏化劑、CCK1受體促效劑、瘦體素受體促效劑、鉀通道拮抗劑及涉及刺激葡萄糖生成與/或葡萄糖分解作用之肝臟酵素之抑制劑； ‧抗感染劑，例如：較佳為為選自下列群中：抗細菌劑、抗真菌劑、與/或抗病毒物質；及/或‧治療青光眼之物質，例如：較佳為為選自下列群中：腎上腺素激導性劑、β阻斷劑、碳酸酐酶抑制劑、副交感神經擬似劑及前列腺素。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與抗氧化劑/自由基清除劑組合投藥，例如：較佳為丙丁酚(probucol)。
咸了解，降血壓劑係選自下列各物所組成群中之化合物：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β受體阻斷劑、α受體阻斷劑及利尿劑。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與鈣拮抗劑組合投藥，例如：較佳為硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、維拉帕米(verapamil)或地爾硫卓(diltiazem)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與血管收縮素AII拮抗劑組合投藥，例如：較佳為氯沙坦(losartan)、維沙坦(valsartan)、坎地沙坦(candesartan)、依布沙坦(irbesartan)、歐姆沙坦(olmesartan)或特米沙坦(telmisartan)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與ACE抑制劑組合投藥，例如：較佳為那普利(enalapril)、卡特普利(captopril)、利欣諾普(lisinopril)、阮米普利(ramipril)、得拉普利(delapril)、弗辛普利(fosinopril)、奎諾普利(quinopril)、普靈普利(perindopril)或散得普利(trandopril)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與β受體阻斷劑組合投藥，例如：較佳為普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、汀洛爾(timolol)、本得洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、歐普洛爾(oxprenolol)、本布洛爾(penbutolol)、布普洛爾(bupranolol)、美替洛爾(美替洛爾(metipranolol))、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、咔唑洛爾(carazalol)、索他洛爾(sotalol)、美托洛爾(metoprolol)、貝他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、匹梭洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾 (landiolol)、奈必洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與利尿劑組合投藥，例如：較佳為樂泄錠(furosemide)、布美他尼(bumetanide)、托拉塞米(torsemide)、芐氟噻嗪(bendroflumethiazide)、氯噻嗪(chlorthiazide)、氫氯噻嗪(hydrochlorthiazide)、氫氟噻嗪(hydroflumethiazide)、甲氯噻嗪(methyclothiazide)、聚噻嗪(polythiazide)、三氯甲噻嗪(trichlormethiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、吲達帕胺(indapamide)、美托拉宗(metolazone)、克噻酮(quinethazone)、乙醯唑胺(acetazolamide)、二氯苯醯胺(dichlorphenamide)、甲唑胺(methazolamide)、甘油、異山梨酯(isosorbide)、甘露糖醇、阿米洛利(amiloride)或三胺蝶啶(triamterene)。
抗糖尿病劑，咸了解較佳係指胰島素及胰島素衍生物，及口服降血糖活性成份。此時，胰島素及胰島素衍生物包括源於動物、人類或生物技術之胰島素及其混合物。口服降血糖活性成份較佳包括選自下列群中之化合物：磺醯基脲類、雙胍類、美格列奈類(meglitinide)衍生物、糖苷酶抑制劑及PPAR-γ促效劑。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與胰島素組合投藥。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與磺醯脲類組合投藥，例如：較佳為甲磺丁脲(tolbutamide)、乙磺己脲(glibenclamide)、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)或格列齊特(gliclazide)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與雙胍類組合投藥，例如：較佳為二甲雙胍(metformin)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與美格列奈類(meglitinide)衍生物組合投藥，例如：較佳為瑞格列奈(repaglinide)或那格列奈(nateglinide)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與糖苷酶抑制劑組合投藥，例如：較佳為米格列醇(miglitol)或阿卡波糖(acarbose)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與PPAR-γ促效劑組合投藥，例如：較佳為吡格列酮(pioglitazone)或羅格列酮(rosiglitazone)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與抗細菌成份組合投藥，例如：較佳為愛黴素(amikacin)、胺苄青黴素(ampicillin)、桿菌肽(bacitracin)、頭孢菌素(cefazolin)、頭孢他汀(ceftazidim)、頭孢曲松(ceftriaxon)、環丙沙星(ciprofloxacin)、克林達黴素(clindamycin)、多黏菌素(colistimethat)、紅黴素(erythromycin)、慶大黴素(gentamicin)、莫西沙星(moxifloxacin)、青黴素G、泰百黴素(tobramycin)或萬古黴素(vancomycin)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與抗真菌成份組合投藥，例如：較佳為兩性黴素B(amphotericin B)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與抗病毒活性成份組合投藥，例如：較佳為福米韋生(fomivirsen)或丙氧鳥苷(ganciclovir)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與腎上腺素激導性劑組合投藥，例如：較佳為地匹福林(dipivefrin)、腎上腺素(epinephrine)、阿可樂定(aproclonidine)、溴莫尼定(brimonidine)或氯尼定(clonidine)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與β阻斷劑組合投藥，例如：較佳為貝他洛爾(betaxolol)、苯呋洛爾(befunolol)、左布諾洛爾(levobunolol)、美替洛爾(metipranolol)、汀洛爾(timolol)、卡替洛爾(carteolol)或本得洛爾(pindolol)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與碳酸酐酶抑制劑組合投藥，例如：較佳為布林唑胺(brinzolamide)、得索唑胺(dorzolamide)、乙醯唑胺(acetazolamide)、二氯苯醯胺(dichlorphenamide)或甲唑胺(methazolamide)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與副交感神經擬似劑組合投藥，例如：較佳為毛果芸香(pilocarpine)、醋克立定(aceclidine)、卡巴膽鹼(carbachol)、乙醯膽鹼(acetylcholine)、地美溴銨(demecarium bromide)、碘磷靈(ecothiophate iodide)或毒扁豆鹼(physostigmine)。
本發明較佳具體實施例中，本發明化合物係與前列腺或前列腺素衍生物組合投藥，例如：較佳為比馬前列素(bimatoprost)、拉坦前列素(latanoprost)、他氟前列素(tafluprost)、塔弗前列素(travoprost)或烏諾前列酮(unoprostone)。
此外，本發明化合物亦可與其他醫療法組合使用，如：放射療法與/或手術干預法。
特別佳者為本發明化合物與一或多種選自下列各類之活性成份之組合：抗-VEGF療法(VEGF訊號傳導途徑抑制劑)，如：阿柏西普(aflibercept)、蘭尼單抗(ranibizumab)、癌思停(bevacizumab)或哌加他尼(pegaptanib)。
本發明進一步提供一種醫藥，其包含至少一種本發明化合物，通常共同使用一或多種惰性無毒之醫藥上合適之賦形劑；及其於上述目的之用途。
本發明化合物可具有全身與/或局部作用性。為了此目的，其可依合適方式投藥，例如：經口、非經腸式、經肺、鼻、舌下、舌部、頰內、直腸、皮膚、穿皮式、眼外、眼內、或耳朵途徑，或呈植入物或人工支架投藥。
本發明化合物可針對此等投藥途徑，呈合適之投藥劑型投藥。
適合經口投藥之劑型可為彼等依據先前技藝操作且可以快速及/或依修飾形式傳送本發明化合物之型式，其包含呈結晶及/或非晶型及/或溶解型之本發明化合物，例如：錠劑(無包衣或有包衣錠劑，例如：可阻抗胃酸或可延緩溶解或不會溶解之包衣，以控制本發明化合物之釋放)、可於口腔迅速崩解之錠劑、或膜衣錠/粉片、膜衣錠/冷凍乾燥物、膠囊(例如：硬式或軟式明膠囊)、糖衣錠、粒劑、丸劑、粉劑、乳液、懸浮液、氣霧劑或溶液。
非經腸式投藥法可避開吸收步驟進行(例如：經靜脈內、經動脈內、經心臟內、經脊柱內或經腰椎內)，或包括吸收作用進行(例如：吸入、經肌內、皮下、皮內、經皮膚或經腹膜內)。適合非經腸式投藥之投藥劑型包括呈溶液、懸浮液、乳液、凍乾物或無菌粉末之注射與輸液製劑。
適合眼外(局部)投藥之投藥型式為彼等依據先前技藝操作，可快速釋放及/或以修飾或控制方式釋放本發明化合物並且包含結晶型與/或非晶型與/或溶解型本發明化合物者，例如：眼滴劑、噴液、或洗液(例如：溶液、懸 浮液、囊胞/膠體系統、乳液、氣霧劑)、用於眼滴劑、噴液、或洗液之粉劑(例如：研磨之活性成份、混合物、凍乾物、活性成份沉澱物)、半固體眼用製劑(例如：水凝膠、原位水凝膠、乳霜或油膏)或眼用插入劑(固體或半固體製劑，例如：生物黏著性、膜/粉片、錠劑、隱形眼鏡)。
眼內投藥法包括例如：玻璃體內、視網膜下、鞏膜下、脈絡膜內、結膜下(subconjunctival)、眼球後及Tenon氏囊下(subtenon)投藥。適合眼內投藥之投藥型式為彼等依據先前技藝操作，可快速釋放及/或以修飾或控制方式釋放本發明化合物並且包含結晶型與/或非晶型與/或溶解型本發明化合物者，例如：注射劑及注射劑之濃縮劑(例如：溶液、懸浮液、囊胞/膠體系統、乳液)、用於注射劑之粉劑(例如：研磨之活性成份、混合物、凍乾物、活性成份沉澱物)、注射用凝膠(半固體製劑，例如：水凝膠、原位水凝膠)或植入物(固體製劑，例如：生物降解性與非生物降解性植入物、植入式幫浦)。
其他合適投藥途徑實例為：吸入式醫藥型式(包括粉劑吸入器、噴霧器、定劑量氣霧器)、鼻滴劑、溶液或噴液；供舌部、舌下或頰內投藥之錠劑、膜衣錠/粉片或膠囊；栓劑、耳用製劑、陰道用膠囊、水性懸浮液(洗液、搖溶混合物)、親脂性懸浮液、油膏、乳霜、穿皮式醫療系統(例如：貼布)、乳劑、糊劑、泡沫劑、灑粉、植入物或人工支架。
治療眼睛病變時，較佳係眼外局部及眼內投藥，治療其他病變時，係經口及經靜脈內投藥。
本發明化合物可轉化成上述投藥型式。其可依本身已知方式，與惰性無毒之醫藥上合適之賦形劑混合達成。此等賦形劑包括載劑(例如：微晶纖維素、乳糖、甘露醇)、溶劑(例如：液態聚乙二醇)、乳化劑與勻散劑或濕化劑(例如：十二烷基硫酸鈉、聚氧山梨糖醇酐油酸酯)、結合劑(例如：聚乙烯吡咯啶酮)、合成與天然聚合物(例如：白蛋白)、安定劑(例如：抗氧化劑，例如：抗壞血酸)、著色劑(例如：無機色素，例如：氧化鐵)與香料及/或矯味劑。
通常已發現，以非經腸式投藥為例，適宜投藥量為約0.001至1mg/kg，較佳為約0.01至0.5mg/kg體重，以達到有效結果。以經口投藥為例，劑量 為約0.01至100mg/kg，較佳約0.01至20mg/kg，及最佳為0.1至10mg/kg體重。以眼外投藥為例，劑量為約1至50mg/ml，投藥體積為10至100μl。
儘管如此，有些例子仍可能有必要偏離上述劑量，明確言之依體重、投藥途徑、個人對活性成份之反應、製劑性質及投藥時間或間隔而變化。因此有些例子在低於上述最低量可能即足夠，而其他例子則可能必需超過上述最高限值。若投與較高量時，建議在一天中分成幾個小劑量投藥。
下列操作實例將說明本發明。本發明並不受此等實例限制。
A.實例
縮寫與字頭語：
HPLC、LC/MS與GC/MS方法：
方法1(LC/MS)：
MS儀器機型：Waters(Micromass)Quattro Micro；HPLC儀器機型：Agilent 1100系列；管柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 x 4mm；溶離液A：1 l水+0.5ml 50%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.5ml 50%甲酸；梯度：0.0min 100%A→3.0min 10%A→4.0min 10%A；爐溫：50℃；流速：2ml/min；UV檢測：210nm
方法2(LC/MS)：
MS儀器：Waters ZQ；HPLC儀器：Agilent 1100系列；UV DAD；管柱：Thermo Hypersil GOLD 3μ 20mm x 4mm；溶離液A：1 l水+0.5ml 50%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.5ml 50%甲酸；梯度：0.0min 100%A→3.0min 10%A→4.0min 10%A；爐溫：55℃；流速：2ml/min；UV檢測：210nm。
方法3(LC/MS)：
儀器：Waters Acquity SQD UPLC System；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm；溶離液A：1 l水+0.25ml 99%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 90%A→1.2min 5%A→2.0min 5%A；爐溫：50℃；流速：0.40ml/min；UV檢測：210-400nm。
方法4(GC-MS)：
儀器：Micromass GCT,GC6890；管柱：Restek RTX-35，15m×200μm×0.33μm；恆定氦氣流：0.88ml/min；爐溫：70℃；入口：250℃；梯度：70℃,30℃/min→310℃(維持3min)。
方法5(LC/MS)：
儀器：Waters Acquity SQD UPLC System；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm；溶離液A：1 l水+0.25ml 99%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 90%A→1.2min 5%A→2.0min 5%A；爐溫：50℃；流速：0.40ml/min；UV檢測：208-400nm。
方法6(LC/MS)：
MS儀器：Waters(Micromass)QM；HPLC儀器：Agilent 1100系列；管柱：Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0mm x 50mm 3.5μ；溶離液A：1 l水+0.01mol碳酸銨，溶離液B：1 l乙腈；梯度：0.0min 98%A→0.2min 98%A→3.0min 5%A→4.5min 5%A；爐溫：40℃；流速：1.75ml/min；UV檢測：210nm。
方法7(LC/MS)：
儀器：Agilent MS Quad 6150；HPLC：Agilent 1290；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 2.1mm；溶離液A：1 l水+0.25ml 99%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 90%A→0.3min 90%A→1.7min 5%A→3.0min 5%A；爐溫：50℃；流速：1.20ml/min；UV檢測：205-305nm。
方法8(LC/MS)：
儀器：Waters Acquity SQD UPLC System；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm；溶離液A：1 l水+0.25ml 99%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 95%A→6.0min 5%A→7.5min 5%A；爐溫：50℃；流速：0.35ml/min；UV檢測：210-400nm。
方法9(LC/MS)：
儀器：Micromass Quattro Premier加裝Waters UPLC Acquity；管柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9μ 50 x 1mm；溶離液A：1 l水+0.5ml 50%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.5ml 50%甲酸；梯度：0.0min 90%A→0.1min 90%A→1.5min 10%A→2.2min 10%A；爐溫：50℃；流速：0.33ml/min；UV檢測：210nm。
方法10(LC/MS)：
MS儀器：Waters ZQ 2000；HPLC儀器：Agilent 1100，2-管柱組合；自動取樣器：HTC PAL；管柱：YMC-ODS-AQ，50 x 4.6mm，3.0μm；溶離液A：水+0.1%甲酸，溶離液B：乙腈+0.1%甲酸；梯度：0.0min 100%A→0.2min 95%A→1.8min 25%A→1.9min 10%A→2.0min 5%A→3.2min 5%A→3.21min 100%A→3.35min 100%A；爐溫：40℃；流速：3.0ml/min；UV檢測：210nm。
方法11(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Reprosil C-18 10μm，250 x 30mm；溶離液A：水，溶離液B：乙腈；梯度：0-3min 10%B，3.01-31min 90%B，31min 90%B；流速：50ml/min；UV檢測：210nm。
方法12(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Reprosil C-18 10μm，250 x 30mm；溶離液A：水+0.01%氨，溶離液B：乙腈；梯度：0-3min 10%B，3.01-31min 90%B，31min 90%B；流速：50ml/min；UV檢測：210nm。
方法13(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Reprosil C-18 10μm，250 x 30mm；溶離液A：水+0.1%氨，溶離液B：甲醇；梯度：0-3min 10%B，3.01-31min 90%B，31min 90%B；UV檢測：210nm。
方法14(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Reprosil C-18 10μm，250 x 30mm；溶離液A：水+0.01%氨，溶離液B：乙腈；梯度：0-3min 35%B，3.01-31min 80%B，31min 80%B；流速：50ml/min；UV檢測：210nm。
方法15(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Chromatorex 125 x 30mm，10μm；溶離液A：水+0.1%甲酸，溶離液B：乙腈+0.1%甲酸；梯度：0-3min 90%A，3.01-31min 10%A。
方法16(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Chromatorex 125 x 30mm，10μm；溶離液A：水，溶離液B：乙腈；梯度：0-3min 90%A，3.01-31min 5%A。
方法17(製備性HPLC)：
管柱：Kinetex C18 5μm，100 x 30mm；流速：60ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C，9.5min 45%A，50%B，5%C。
方法18(製備性對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak IF 250 x 20mm，5μm；溶離液：60%異己烷/40%乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：15ml/min；溫度：30℃。
方法19(分析級對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak AZ-H 250 x 4.6mm，5μm；溶離液：50%異己烷/50%乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：1.0ml/min；溫度：35℃。
方法20(製備性HPLC)：
管柱：Kinetex 100 x 30mm，5μm；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1.00min 90%A，5%B，5%C，1.01-6.66min 60%A，35%B，5%C。
方法21(製備性對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak IF 250 x 20mm，5μm；溶離液：75%異己烷/25%乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：15ml/min；溫度：25℃。
方法22(分析級對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak IA 250 x 4.6mm，5μm；溶離液：乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：1.0ml/min；溫度：50℃。
方法23(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Chromatorex 125 x 30mm，10μm；溶離液A：水+0.01%三氟乙酸，溶離液B：乙腈；梯度：0-3min 90%A，3.01-31min 5%A。
方法24(定量性離子層析法)：
採用外標準物定量陽離子與陰離子。儀器：Thermo Scientific ICS 5000+；毛細IC管柱：IonPac AS11-HC及IonPac CS16；溶離液：[OH]- 60mM；梯度：0-3min 1mm，30min 25mm，35-38min 60mm，38.1min 1mM；檢測：電導檢測器。
方法25(LC/MS)：
MS儀器機型：Thermo Scientific FT-MS；HPLC儀器機型：Thermo Scientific UltiMate 3000；管柱：Waters HSS T3,2.1mm x 75mm，C18 1.8μm；溶離液A：1 l水+0.01%甲酸，溶離液B：1 l乙腈+0.01%甲酸；梯度：0.0min 10%B→2.5min 95%B→3.5min 95%B；爐溫：50℃；流速：0.90ml/min；UV檢測：210nm/最佳積分路徑210-300nm。
方法26(LC/MS)：
MS儀器：Waters(Micromass)Quattro Micro；HPLC儀器：Waters UPLC Acquity；管柱：Waters BEH C18 1.7μ，50mm x 2.1mm；溶離液A：1 l水+0.01mol甲酸銨，溶離液B：1 l乙腈；梯度：0.0min 95%A→0.1min 95%A→2.0min 15%A→2.5min 15%A→2.51min 10%A→3.0min 10%A；爐溫：40℃；流速：0.5ml/min；UV檢測：210nm。
方法27(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Sunfire C-18 5μm，125 x 20mm；溶離液A：水+0.05%TFA，溶離液B：乙腈+0.05%TFA； 梯度：15%B等濃度，15%B→50%B，50%B等濃度，50%B→90%B；流速：20ml/min；UV檢測：210nm。
方法28(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Kromasil C-18 10μm，125 x 30mm；溶離液A：水+0.05%TFA，溶離液B：乙腈+0.05%TFA；梯度：15%B等濃度，15%B→50%B，50%B等濃度，50%B→90%B；流速：20ml/min；UV檢測：210nm。
方法29(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Sunfire C-18 5μm，125 x 20mm；溶離液A：水+0.05%TFA，溶離液B：乙腈+0.05%TFA；梯度：5%B等濃度，5%B→25%B，25%B等濃度，25%B→50%B；流速：20ml/min；UV檢測：210nm。
方法30(製備性HPLC)：
系統：Gilson Abimed HPLC，二元幫浦系統；管柱：Kromasil C-18 10μm，125 x 30mm；溶離液A：水+0.05%TFA，溶離液B：乙腈+0.05%TFA；梯度：5%B等濃度，5%B→25%B，25%B等濃度，25%B→50%B；流速：20ml/min；UV檢測：210nm。
方法31(製備性對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak AY-H 250 x 20mm，5μm；溶離液：25%異己烷/75%異丙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：15ml/min；溫度：55℃。
方法32(分析級對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralpak IF 250 x 4.6mm，5μm；溶離液：50%異己烷/50%異丙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：1.0ml/min；溫度：40℃。
方法33(製備性對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralcel OX-H 250 x 20mm，5μm；溶離液：70%異己烷/30%乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：15ml/min；溫度：50℃。
方法34(分析級對掌性HPLC)：
管柱：Daicel Chiralcel OX-H 250 x 4.6mm，5μm；溶離液：70%異己烷/30%乙醇(含0.2%二乙基胺)；流速：1.0ml/min；溫度：50℃。
進一步詳細說明：
若下文說明之本發明合成中間物與操作實例中，任何呈相應鹼或酸之鹽型之化合物通常係採用各製法與/或純化法所得未知確實化學計量組成之鹽類。除非另有更詳細說明，否則外加在名稱與結構式上之如：「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」或「x HCl」、「x CF3COOH」、「x Na+」應了解並無意代表此等鹽類之化學計量，而係僅說明本文所涵括形成鹽組份之特徵。
此點同樣適用於採用說明之製法與/或純化法所製得未知化學計量組成(若有指定型態時)之呈溶劑合物(例如：水合物)之合成中間物或操作實例或其鹽。
除非另有說明，否則下列實例與試驗說明中之百分比係重量百分比；份量數指重量份數。溶劑比例、稀釋比例與液體/液體溶液之濃度數值分別以體積表示。
純度數值通常係依據LC/MS色譜圖中之相應波峰積分，但亦可藉助於1H NMR光譜測定。若沒有出示純度時，該純度通常依據LC/MS色譜圖之自動波峰積分值為>95%，或該純度未明確測定。
若所出示之純度<100%，則以%理論值出示之產量通常已經過純度校正。在含溶劑或含雜質之該批產物中，正式產量可能為「>100%」；此等例子中，產量未經過溶劑或純度校正。
有些例子中，隨後之1H NMR訊號之偶合型態說明係直接取自ACD SpecManager(ACD/Labs Release 12.00,Product version 12.5)之建議，且不一定經過詳細檢查。有些例子中，SpecManager之建議已經過手動調整。手動調整或指定說明通常係依據該相關訊號之光學表現，不一定與嚴格之物理校正說明相關。通常，所出示之化學位移係指該相關訊號之中心。若為寬多裂峰時，則出示間距。被溶劑或水遮蔽之訊號係假設性提出或未列出。
若有出示熔點及熔點範圍時，係未經過校正。
所有未明確說明其製法之反應物或試劑係自一般可取得之來源購得之商品。所有其他同樣未於下文中明確說明製法且未從商品取得或得自一般無法取得來源之反應物或試劑將出示說明其製法之公開文獻。
起始物及中間物：
中間物1A
4-(苯甲基氧)-1-甲基-2-硝基苯
在含4-甲基-3-硝基苯酚(5.00g,32.7mmol)之丙酮(100ml)溶液中添加苯甲基溴(6.14g,35.9mmol)及碳酸鉀(9.03g,65.3mmol)，混合物於60℃下攪拌一夜。冷卻至室溫後，添加水，混合物使用乙酸乙酯萃取。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。得到8.40g(95%理論值)所需產物，純度90%，其未進一步純化即用於轉化。
GC/MS(方法4)：Rt=7.16min,m/z=243[M]+。
中間物2A
5-(苯甲基氧)-2-甲基苯胺
先添加鋅粉(6.72g,103mmol)至乙醇(300ml)中，添加2M鹽酸(103ml)。之後直接滴加含4-(苯甲基氧)-1-甲基-2-硝基苯(5.00g,20.6mmol)(來自中間物1A)之乙醇(100ml)溶液。混合物於室溫下再攪拌1小時後，抽吸過濾，濾液減壓濃縮。此殘質使用飽和碳酸氫鈉水溶液(約200ml)中和至達到pH 7。 抽吸濾出沉澱物，及使用環己烷洗滌。固體於甲醇中加熱至煮沸45min，趁熱抽吸過濾，使用甲醇徹底洗滌。濾液減壓濃縮。殘質乾燥後，得到3.66g標題化合物(84%理論值)之白色固體。
LC/MS(方法1,ESIpos)：Rt=1.88min,m/z=214[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.96(s,3H),4.80(br.s,2H),4.96(s,2H),6.12(dd,1H),6.27(d,1H),6.78(d,1H),7.27-7.43(m,5H).
中間物3A
4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯吡啶-3-羧酸
於-78℃下，添加含5-(苯甲基氧)-2-甲基苯胺(533mg,2.50mmol)(來自中間物2A)之8ml 1：3 THF與己烷混合物溶液。於此溫度下滴加3.30ml 1M LiHMDS之THF溶液，混合物於-78℃下攪拌1h。然後滴加2,4-二氯吡啶-3-羧酸(200mg,1.04mmol)[E.Marzi,A.Bigi,M.Schlosser,Eur.J.Org.Chem. 2001,7,1371-1376]之THF溶液(4ml)。反應混合物隨後回升至室溫，並繼續攪拌一夜。之後，添加1M鹽酸及乙酸乙酯。分相後，水相使用乙酸乙酯萃取2次，合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質與二氯甲烷攪拌，及抽吸濾出固體，使用二氯甲烷洗滌。產生289mg(73%理論值)標題化合物之白色固體。
LC/MS(方法1,ESIpos)：Rt=2.04min,m/z=369[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.05(s,3H),5.09(s,2H),6.28(m,1H),6.85(m,1H),6.89(dd,1H),7.23(d,1H),7.30-7.44(m,5H),7.86(dd,1H),8.46(s,1H),13.3(br.s,1H).
中間物4A
N-(2-胺基-5-氰基苯基)-4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯菸醯胺
取4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯吡啶-3-羧酸(200mg,0.542mmol)(來自中間物3A)溶於2ml DMF中。添加TBTU(192mg,0.596mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(142μl,0.813mmol)，混合物於室溫下攪拌30min。隨後，添加3,4-二胺基苯甲腈(108mg,0.813mmol)，並繼續攪拌混合物一夜。之後，添加飽和氯化銨水溶液至反應混合物中。使用乙酸乙酯萃取。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，及經硫酸鈉乾燥。減壓排除溶劑，殘質利用矽膠管柱層析法純化(溶離液：二氯甲烷/7M氨之甲醇溶液30：1)。隨後再次經矽膠層析法進一步純化(溶離液：環己烷/乙酸乙酯5：1→2：1→1：1)。依此方式得到96g(23%理論值)標題化合物，64%純度。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=1.12min,m/z=484[M+H]+。
中間物5A：
4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
取N-(2-胺基-5-氰基苯基)-4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯菸醯胺(96mg,0.127mmol,64%純度)(來自中間物4A)溶於4ml異丙醇中。混合 物先於微波裝置中加熱至180℃ 20min後，再歷經40min。冷卻後，反應混合物減壓濃縮。依此方式得到94g(全收量)標題化合物，64%純度。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=1.13min,m/z=448[M+H]+。
中間物6A：
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛
取4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(1.69g,4.16mmol,88%純度)(來自實例1)先加至80ml THF中，使用丙酮/乾冰浴冷卻至-70℃。慢慢滴加1M二異丁基氫化鋁之二氯甲烷溶液(41.6ml,41.6mmol)，此期間之內溫保持在-60℃。混合物隨後再攪拌4h，此期間提高溫度至0℃。在使用冰浴冷卻下，慢慢滴加1M鹽酸，直到深紅色溶液退色為止。再攪拌混合物1小時後，再加水稀釋及使用乙酸乙酯萃取。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。粗產物與另一批粗產物(300mg,0.74mmol 4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈，88%純度)合併，一起經矽膠層析法純化(溶離液：四氫呋喃/石油醚25：75→65：35)。依此方式得到685g(34%理論值)標題化合物，88%純度。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.68min,m/z=361[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.07(s,3H),6.31(d,1H),6.56(dd,1H),6.61(d,1H),7.09(d,1H),7.30(d,1H),7.49(d,1H),7.58(dd,1H),7.78(d,1H),8.80(s,1H),9.36(s,1H),9.81(s,1H),9.95(s,1H),10.27(s,1H).
中間物7A
4-(烯丙基氧)-2-氯菸酸
於氮蒙氣與室溫下，先添加氫化鈉(60%於石蠟中，115g,2.87mol)至二烷(448ml)中。於室溫下慢慢添加烯丙醇(1.99kg,2.33升，34.3mol)，混合物再於室溫下攪拌30min，直到得到澄清溶液為止。隨後取2,4-二氯吡啶-3-羧酸(269g,1.40mol)[E.Marzi,A.Bigi,M.Schlosser,Eur.J.Org.Chem. 2001,7,1371-1376]分成四份添加，反應混合物於100℃下攪拌一夜。反應溶液隨後濃縮，殘質與水(1.46升)及石油醚(1.61升)攪拌。排出有機相並棄置不要。水相與乙酸乙酯(1.61升)混合，使用半濃縮鹽酸酸化。排出有機相，乾燥及濃縮。粗產物與來自另一批(30g,156.3mmol 2,4-二氯吡啶-3-羧酸)之粗產物組合，一起經矽膠層析法純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇95：5→90：10)。得到131g(40%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.73min,m/z=214[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=4.75-4.80(m,2H),5.25-5.45(m,2H),5.93-6.06(m,1H),7.23(d,1H),9.32(d,1H).
中間物8A
4-(烯丙基氧)-N-(2-胺基-5-氰基苯基)-2-氯菸醯胺
先添加4-(烯丙基氧)-2-氯菸酸(來自中間物7A)(100g,468mmol)至1000ml二氯甲烷中。添加一滴DMF，混合物冷卻至0℃。慢慢添加草醯氯(119g,936mmol)。讓混合物回升至室溫，並攪拌直到不再觀察到氣體釋出為止。 反應混合物隨後減壓濃縮。再次添加二氯甲烷，混合物再度濃縮，再重覆此操作一次。殘質隨後溶於200ml DMF中，並在溶液中慢慢添加已冷卻至0℃之含3,4-二胺基苯甲腈(62.3g,468mmol)之800ml DMF溶液。混合物於室溫下攪拌一夜。之後，反應混合物攪拌加至4升水與1升乙酸乙酯中，此期間有固體沉澱析出。抽吸濾出此沉澱，使用乙酸乙酯洗滌2次，及減壓乾燥。得到123g(80%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.73min,m/z=329[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=4.80(d,2H),5.30(dd,1H),5.42(dd,1H),5.87(s,2H),5.96-6.07(m,1H),6.84(d,1H),7.28(d,1H),7.38(dd,1H),7.74(d,1H),8.37(d,1H),10.0(s,1H).
中間物9A
4-羥基-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
方法A：
先添加4-(烯丙基氧)-N-(2-胺基-5-氰基苯基)-2-氯菸醯胺(5.00g,15.2mmol)(來自中間物8A)至1,2-二氯苯(50ml)中。懸浮液與對甲苯磺酸(3.04g,16.0mmol)混合，及加熱至145℃(內溫)2h。混合物隨後倒至50ml水上，添加飽和碳酸氫鈉水溶液調整pH至8-9。使用乙酸乙酯萃取混合物3次，合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質與甲醇攪拌，及抽吸濾出固體，使用甲醇洗滌2次。減壓乾燥，產生2.83g(74%理論值)標題化合物。
方法B：
取N-(2-胺基-5-氰基苯基)-2-氯-4-甲氧基菸醯胺(1.10g,3.63mmol)(來自中間物12A)懸浮於乙腈(15ml)中，添加0.9ml 4N鹽酸。混合物於微波裝置中加熱至160℃ 2.5h。之後，混合物減壓濃縮，溶於甲醇中2次，每 次均再度濃縮。此殘質隨後與甲醇攪拌，及抽吸濾出固體，及減壓乾燥。得到0.57g(62%理論值)標題化合物。
方法C：
取N-(2-胺基-5-氰基苯基)-2-氯-4-甲氧基菸醯胺(6.0g,19.8mmol)(來自中間物12A)溶於乙酸(72ml)，添加苯磺酸(3.44g,21.7mmol)，混合物加熱至沸騰約12h。冷卻後，減壓排除溶劑，殘質與水(80ml)混合，攪拌數小時。然後過濾。過濾殘質使用水洗滌及於氮蒙氣與35℃下乾燥。所得固體(2.90g)隨後溶於DMF(120ml)，添加吡啶鎓鹽酸鹽(22.9g,142mmol)，混合物加熱至85℃ 12h。然後減壓蒸餾排除溶劑，殘質與水混合。抽吸濾出所形成之沉澱及使用水洗滌。產物於35℃與氮蒙氣下乾燥至恆重。產量：2.71g(54%理論值)。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=253[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ[ppm]=6.43(d,1H),7.19(d,1H),7.28(d,1H),7.42(dd,1H),7.97(d,1H),9.23(s,1H),10.42(s,1H),13.57(s,1H).
中間物10A
4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈與4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
在先添加之150ml環丁碸中依序滴加磷醯氯(13.0ml,139mmol)及三乙胺(19.4ml,139mmol)，此期間之溫度保持在RT。隨後，混合物於室溫下再攪拌30min。然後添加4-羥基-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(14.1g,55.8mmol)(來自中間物9A)，混合物加熱至70℃ 5h。 之後，混合物倒至1升碳酸氫鈉水溶液上，攪拌10min。抽吸濾出沉澱物，使用水洗滌2次及減壓乾燥。得到12.8g單-與二氯化化合物之1：2混合物，其未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.75min,m/z=271[M+H]+ und Rt=1.03min,m/z=289[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=7.19(d,1H),7.32(d,1H),7.40(d,1H),7.51(dd,1H),8.20(d,1H),9.27(s,1H),10.51(s,1H)及δ[ppm]=7.20(d,1H),7.29(d,1H),7.63(dd,1H),7.67(d,1H),8.25(d,1H),9.12(s,1H).
中間物11A
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛
取4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(5.87g,12.5mmol,80%純度)(來自實例27)先加至240ml THF中，使用丙酮/乾冰浴冷卻至-70℃。慢慢滴加1M二異丁基氫化鋁之二氯甲烷溶液(125ml,125mmol)，此期間內溫保持-60℃。混合物隨後再攪拌4h，此期間溫度提高至0℃。在使用乾冰浴冷卻期間，慢慢滴加1M鹽酸直到深紅色溶液退色為止。混合物再攪拌1小時後，再加水稀釋及使用乙酸乙酯萃取。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質與乙腈攪拌，並抽吸過濾。減壓乾燥，產生3.61g(66%理論值)標題化合物，86%純度。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.78min,m/z=379[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.11(s,3H),6.39(dd,1H),6.72(d,1H),7.05(d,1H),7.29(d,1H),7.48(d,1H),7.58(dd,1H),7.82(d,1H),8.83(s,1H),9.46(s,1H),9.81(s,1H),9.93(s,1H),10.30(s,1H).
中間物12A
N-(2-胺基-5-氰基苯基)-2-氯-4-甲氧基菸醯胺
方法A：
取2-氯-4-甲氧基菸酸(1.00g,5.33mmol)[R.J.Anderson,J.B.Hill,J.C.Morris,J.Org.Chem. 2005,70,6204-6212]懸浮於12ml二氯甲烷，添加一滴DMF。混合物冷卻至0℃後，添加草醯氯(0.93ml,10.7mmol)。再次離開冷卻槽，並繼續攪拌混合物直到氣體停止釋出為止。之後，減壓排除揮發成份。添加二氯甲烷2次，每次均再度濃縮混合物。殘質溶於5ml DMF，滴加至冷卻至0℃之含3,4-二胺基苯甲腈(710mg,5.33mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(1.86g,10.7mmol)之10ml DMF溶液中。反應混合物於室溫下攪拌3h後，加至100ml水中，添加10ml第三丁基甲基醚。再攪拌混合物20min，於高度抽吸下濾出固體及減壓乾燥。產生1.15g(71%理論值)標題化合物。
方法B：
溶液A：取2-氯-4-甲氧基菸酸(5.0g,26.7mmol)懸浮於乙腈(50ml)，添加1滴DMF，混合物冷卻至0℃。慢慢滴加亞硫醯氯(3.90ml,53.3mmol)後，混合物再於80℃下攪拌2h。隨後減壓蒸餾排除溶劑，殘質不再經過操作即溶於50ml DMF中。
溶液B：取3,4-二胺基苯甲腈(3.55g,26.7mmol)溶於DMF(50ml)，添加N,N-二異丙基乙基胺(9.3ml,53.3mmol)。
標題化合物製法：溶液B冷卻至0℃後，慢慢攪拌滴加溶液A。之後，於室溫下攪拌混合物2h。操作時，混合物倒至500ml水上，添加約50ml第三丁基甲基醚，及攪拌混合物。抽吸濾出固體，及乾燥。產量：6.0g(74%理論值)。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=303[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=3.94(s,3H),5.88(br.s,2H),6.84(d,1H),7.30(d,1H),7.37(dd,1H),7.80(d,1H),8.39(d,1H),9.94(br.s,1H).
中間物13A
4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛
於-78℃下，在含4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(439mg,91%純度，1.01mmol)(來自實例37)之THF(20.0ml)溶液中慢慢滴加DIBAL-H(10.1ml,10.1mmol,1M二氯甲烷溶液)。添加結束後，混合物再於-78℃下攪拌30min，然後離開冷卻槽，及讓反應混合物回升至室溫。4h後，於攪拌下小心滴加混合物至水中。隨後，添加乙酸乙酯，濾出不可溶成份。分相，水相再使用乙酸乙酯萃取2次。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，及經硫酸鈉乾燥。排除溶劑，產生標題化合物(170mg,88%純度，37%理論值)之淺褐色固體，其呈此型式進一步轉化。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.82min,m/z=399[M+H]+。
中間物14A
5-胺基-2-丙基苯酚
取N-(3-羥基-4-丙基苯基)乙醯胺(110mg,0.57mmol)於濃鹽酸(37%,224mg)與THF(2ml)中回流加熱一夜。反應混合物隨後濃縮。得到109g標題化合物，其未進一步純化即進行轉化。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=1.88min,m/z=152[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.88(t,3H),1.45-1.60(m,2H),2.51-2.60(m,2H),6.65-6.75(m,1H),6.82-6.90(m,1H),7.06-7.16(m,1H),9.91(s,1H).
中間物15A
5-胺基-2-溴苯酚
取2-溴-5-硝基苯酚(450mg,2.06mmol)先加至水(13.5ml)及乙醇(13.5ml)中。添加氯化銨(596mg,11.15mmol)及鐵屑(691mg,12.39mmol)，混合物於80℃下攪拌5h。反應混合物隨後冷卻至RT，及經矽藻土過濾，濾液濃縮。隨後利用矽膠管柱層析法純化(溶離液：環己烷/乙酸乙酯1：1)，產生359mg(93%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.41min,m/z=188[M+H]+。
中間物16A
5-胺基-2,3-二氟苯酚
取2,3-二氟-5-硝基苯酚(300mg,1.71mmol)先加至水(11ml)及乙醇(11ml)中。添加氯化銨(495mg,9.25mmol)及鐵屑(574mg,10.28mmol)，混合物於80℃下攪拌4h。反應混合物隨後冷卻至RT，及經矽藻土過濾，過濾之殘質使用乙酸乙酯洗滌，濾液濃縮。得到265g(96%理論值)標題化合物，其未進一步純化即進行轉化。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.41min,m/z=146[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=5.07(s,2H),5.86-5.93(m,1H),5.93-5.98(m,1H),9.79(s,1H).
中間物17A
3-胺基-4-氟苯酚
取4-氟-3-硝基苯酚(300mg,1.91mmol)先加至水(12.5ml)及乙醇(12.5ml)中，添加氯化銨(552mg,10.31mmol)及鐵屑(640mg,11.46mmol)，混合物於80℃下攪拌4h。反應混合物隨後冷卻至RT及經矽藻土過濾，濾液使用乙酸乙酯萃取。有機相乾燥，過濾及濃縮。得到126mg(39%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=0.99min,m/z=128[M+H]+。
中間物18A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
取4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(8.50g,22.6mmol,81%純度)(來自實例27)加至DMF(170ml)，添加1H-咪唑(9.25g,136mmol)、第三丁基(氯)二甲基矽烷(18.4g,122mmol)及DMAP(691mg,5.66mmol)。所得混合物於室溫下攪拌一夜。之後，添加水(800ml)。懸浮液再攪拌30min後，抽吸過濾，及所得固體乾燥。水相使用4份各75ml MTBE萃取，有機相使用50ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及濃縮。所得兩份粗產物使用環己烷/乙酸乙酯為溶離液，使用矽膠進行層析法。產量：4.60g(96%純度，40%理論值)。
LC/MS(方法25)：Rt=2.66min；MS(ESIpos)：m/z=490[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=-0.18(s,3H),0.00(s,3H),0.78(s,9H),1.97(s,3H),6.15(d,1H),6.55(d,1H),6.98(d,1H),7.09(d,1H),7.15(s,1H),7.28(d,1H),7.64(d,2H),8.65(s,1H),9.67(s,1H),10.25(s,1H).
中間物19A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(10.20g,20.83mmol)(來自中間物18A)先加至THF(600ml)，於丙酮/乾冰浴中冷卻至-70℃。慢慢滴加二異丁基氫化鋁(1M之THF溶液，94ml,94mmol)，此期間之溫度保持低於-60℃。混合物先於-78℃下攪拌30min，然後於室溫下5h。之後，反應混合物攪拌加至750ml 5%檸檬酸溶液，添加375ml乙酸乙酯及245ml飽和氯化鈉水溶液。然後減壓蒸餾排除有機溶劑，此過程中有標題化合物沉澱析出。抽吸濾出固體，及乾燥。產量：8.70g(92%純度，80%理論值)。
LC/MS(方法25)：Rt=2.59min；MS(ESIpos)：m/z=493[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.00(s,3H),0.19(s,3H),0.96(s,9H),2.15(s,3H),6.37(d,1H),6.72(d,1H),7.17(d,1H),7.30(d,1H),7.49(s,1H),7.84(d,1H),8.85(s,1H),9.82(s,1H),9.90(s,1H),10.30(s,1H).
中間物20A
8-{[(2-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(8.45g,17.2mmol；中間物19A)溶於THF(210ml)。添加正甲酸三甲酯(38ml,340mmol)、2-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-N-乙基乙胺(20.9g,103mmol)、及最後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(21.8g,103mmol)。混合物於室溫下攪拌1h。反應混合物隨後加至1.5升濃碳酸氫鈉水溶液中，每次使用約200ml乙酸乙酯萃取4次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質以二氯甲烷/甲醇20：1為溶離液使用矽膠進行層析法。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質使用50ml正己烷洗滌，及乾燥。產量：10.2g(87%理論值)。
LC/MS(方法25)：Rt=2.10min；MS(ESIneg)：m/z=678[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=-0.40(s,6H),0.17(s,6H),0.78(s,9H),0.96(s,9H),0.97(t,3H),2.13(s,3H),3.29(d,2H),3.47(m,2H),3.55(m,2H),6.36(d,1H),6.70(d,1H),6.95(m,2H),7.04(d,1H),7.15(d,1H),7.79(d,1H),8.11(br.s,1H),9.86(br.s,1H),10.89(br.s,1H).
中間物21A
4-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌-1-羧酸第三丁基酯
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(35mg,0.071mmol；中間物19A)溶於THF(3.5ml)，添加哌-1-羧酸第三丁基酯(52.9mg,0.284mmol)及乙酸(0.033ml,0.57mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，於室溫下，以4.5小時時間，取氰基氫硼化鈉(22.32mg,0.36mmol)分三份添加。採用HPLC-LC/MS監測，指示已轉化。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(46mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法8)：Rt=3.61min；MS(ESIneg)：m/z=661[M-H]-。
中間物22A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2-羥基乙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(30mg,0.061mmol；中間物19A)溶於THF(3ml)，添加N-甲基-2-[(三甲基矽烷基)氧]乙胺(35.88mg,0.244mmol)及乙酸(0.028ml,0.487mmol)。混合物於室溫下攪拌2h。隨後，取氰基氫硼化鈉(19.14mg,0.304mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(50mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.19min；MS(ESIneg)：m/z=550[M-H]-。
中間物23A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(二甲基胺基)乙基](乙基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加N,N-二甲基-N'-乙基-1,2-伸乙基二胺(0.064ml,0.406mmol)及乙酸(0.046ml,0.812mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。採用HPLC-LC/MS監測，顯示未完全轉化。因此再次添加氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)，並再於室溫下攪拌混合物6h。反 應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(57mg)直接用於下一個反應。
中間物24A
{2-[({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)(乙基)胺基]乙基}胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加N-Boc-N'-乙基-1,2-伸乙基二胺鹽酸鹽(91.2mg,0.406mmol)、乙酸(0.07ml,1.218mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(45.9mg,0.355mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)分批添加，反應混合物續於室溫下攪拌一夜。採用HPLC-LC/MS監測，顯示未完全轉化。因此再次添加氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)，並再於室溫下攪拌混合物6h。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(59mg)直接用於下一個反應。
中間物25A
8-{[(2-胺基乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取{2-[({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)(乙基)胺基]乙基}胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物24A；59mg,0.076mmol)溶於二氯甲烷(10.8ml)，添加三氟乙酸(5.4ml)。混合物於室溫下攪拌30min。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(42mg)未進一步純化即用於下一個反應。
中間物26A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2R)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加(2R)-1-(甲基胺基)丙-2-醇鹽酸鹽(51mg, 0.406mmol)、乙酸(0.046ml,0.812mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(0.071ml,0.406mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(73mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.22min；MS(ESIneg)：m/z=564[M-H]-。
中間物27A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2S)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加(2S)-1-(甲基胺基)丙-2-醇(36.19mg,0.406mmol)及乙酸(0.046ml,0.812mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.56mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(74.8mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.22min；MS(ESIneg)：m/z=564[M-H]-。
中間物28A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(40mg,0.081mmol；中間物19A)溶於THF(4ml)，添加N,N,N'-三甲基乙-1,2-二胺(33.19mg,0.325mmol)及乙酸(0.037ml,0.65mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(7.65mg,0.122mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(54mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法5)：Rt=0.92min；MS(ESIpos)：m/z=579[M+H]+。
中間物29A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[乙基(2-羥基丙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(40mg,0.081mmol；中間物19A)溶於THF(4ml)，添加1-(乙基胺基)丙-2-醇(33.51mg,0.325mmol)及乙酸(0.037ml,0.65mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(7.65mg,0.122mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(40mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法5)：Rt=0.97min；MS(ESIpos)：m/z=580[M+H]+。
中間物30A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(40mg,0.081mmol；中間物19A)與(3S)-吡咯啶-3-醇(28.30mg,0.325mmol)反應。結果產生50mg標題化合物。
LC/MS(方法5)：Rt=0.93min；MS(ESIpos)：m/z=564[M+H]+。
中間物31A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(40mg,0.081mmol； 中間物19A)溶於THF(4ml)，添加(3R)-吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(40.14mg,0.325mmol)、乙酸(0.056ml,0.974mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(0.057ml,0.325mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(7.65mg,0.122mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(47mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法5)：Rt=0.92min；MS(ESIpos)：m/z=564[M+H]+。
中間物32A
{2-[({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)(甲基)胺基]乙基}胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加[2-(甲基胺基)乙基]胺甲酸第三丁基酯鹽酸鹽(85.44mg,0.406mmol)、乙酸(0.046ml,0.812mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(0.071ml,0.406mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，並繼續於室溫下攪拌混合物5h。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法28)。合併含產物之溶出液，及濃縮。殘質(26mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.29min；MS(ESIneg)：m/z=649[M-H]-。
中間物33A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3,4-順式-二羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加順式-吡咯啶-3,4-二醇鹽酸鹽(56.66mg,0.406mmol)、乙酸(0.046ml,0.812mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(0.071ml,0.406mmol)。於室溫下攪拌混合物一夜。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，並繼續於室溫下攪拌混合物5h。採用HPLC-LC/MS監測，顯示未完全轉化。因此再次取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法28)。合併含產物之溶出液，及濃縮。所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，及使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(22.8mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.17min；MS(ESIneg)：m/z=578[M-H]-。
中間物34A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[4-(二甲基胺基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)與4-(二甲基胺基)哌啶(52.1mg,0.406mmol)反應。得到63.5mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.05min；MS(ESIneg)：m/z=603[M-H]-。
中間物35A
[(3R)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)與(3R)-哌啶-3-基胺甲酸第三丁基酯(81.3mg,0.406mmol)反應。得到71.5mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.31min；MS(ESIneg)：m/z=675[M-H]-。
中間物36A
[(3S)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)吡咯啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50 mg,0.101mmol；中間物19A)與(3S)-吡咯啶-3-基胺甲酸第三丁基酯(75.6mg,0.406mmol)反應。得到61mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.28min；MS(ESIneg)：m/z=661[M-H]-。
中間物37A
[(3R)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)吡咯啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)與(3R)-吡咯啶-3-基胺甲酸第三丁基酯(75.6mg,0.406mmol)反應。得到30.2mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.32min；MS(ESIneg)：m/z=661[M-H]-。
中間物38A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)與(R)-3-(二甲基胺基)吡咯啶(46.4mg,0.406mmol)反應。得到53.2mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.12min；MS(ESIneg)：m/z=589[M-H]-。
中間物39A
[1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-4-基]胺甲酸第三丁基酯
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(45mg,0.091mmol；中間物19A)溶於THF(4.5ml)，添加哌啶-4-基胺甲酸第三丁基酯(73.18mg, 0.365mmol)及乙酸(0.042ml,0.731mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(8.61mg,0.137mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物(其中添加幾滴TFA)，及經製備性HPLC純化(方法27)。合併含產物之溶出液，及濃縮。所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(46.7mg)直接用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.27min；MS(ESIneg)：m/z=675[M-H]-。
中間物40A
[(3S)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯三氟乙酸鹽
類似中間物29A，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(45mg,0.091mmol；中間物19A)與(3S)-哌啶-3-基胺甲酸第三丁基酯(73.18mg,0.365mmol)反應。得到81.3mg標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=1.29min；MS(ESIneg)：m/z=675[M-H]-。
中間物41A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加(S)-3-(二甲基胺基)吡咯啶(47.79mg,0.406mmol)及乙酸(0.046ml,0.812mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，及使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(82mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法25)：Rt=1.55min；MS(ESIneg)：m/z=589[M-H]-。
中間物42A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-羥基丙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加3-(N-甲基胺基)-1-丙醇(37.3mg,0.406mmol)及乙酸(0.046ml,0.812mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，及使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(96mg,70%純度)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法5)：Rt=0.93min；MS(ESIpos)：m/z=566[M+H]+。
中間物43A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[乙基(3-羥基丙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.101mmol；中間物19A)溶於THF(5ml)，添加3-(N-乙基胺基)丙-1-醇(44mg,0.406mmol)及乙酸(0.046ml,0.812mmol)。混合物於室溫下攪拌45min。隨後，取氰基氫硼化鈉(9.57mg,0.152mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後濃縮，所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合及使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(70mg,75%純度)未進一步純化即用於下一個反應。
中間物44A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(494mg,1.003mmol；中間物19A)溶於THF(50ml)，添加(S)-3-羥基哌啶鹽酸鹽(552mg,4.011mmol)、乙酸(0.459ml,8.023mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(0.70ml,4.011mmol)。混合物於50℃下攪拌一夜。隨後，取氰基氫硼化鈉(94.5mg,1.50mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(796mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.21min；MS(ESIneg)：m/z=576[M-H]-。
中間物45A
4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(30mg,0.061mmol；中間物19A)溶於THF(3ml)，添加(R)-3-羥基哌啶鹽酸鹽(33.52mg,0.244mmol)及乙酸(0.028ml,0.487mmol)。混合物於室溫下攪拌30min。隨後，取氰基氫硼化鈉(19.14mg,0.304mmol)分批添加，混合物續於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，及使用乙酸乙酯萃取反應混合物3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。殘質(16.9mg)未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法7)：Rt=1.19min；MS(ESIneg)：m/z=576[M-H]-。
中間物46A
3,4-二胺基-N-(3-氯苯甲基)苯甲醯胺
於室溫下，在含3,4-二胺基苯甲酸(5.00g,32.9mmol)之二氯甲烷(300ml)懸浮液中添加3-氯苯甲基胺(4.65g,32.9mmol)、DMAP(4.42g,36.1mmol)及DCC(7.46g,36.1mmol)。混合物於室溫下攪拌一夜後，添加矽膠，混合 物於旋轉蒸發器上濃縮至乾。殘質利用矽膠管柱層析法純化(二氯甲烷/甲醇梯度30：1→20：1)。得到10.8g(>100%理論值)標題化合物，仍含有二環己基脲雜質。此產物未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=1.66min,m/z=276[M+H]+。
中間物47A
N-{2-胺基-5-[(3-氯苯甲基)胺甲醯基]苯基}-4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯菸醯胺
在含4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯吡啶-3-羧酸(中間物3A；200mg,0.542mmol)之DMF(2.0ml)溶液中添加TBTU(192mg,0.596mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(142μl,0.813mmol)。混合物於室溫下攪拌30min。隨後，添加3,4-二胺基-N-(3-氯苯甲基)苯甲醯胺(中間物46A；224mg,0.813mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。反應混合物隨後與飽和氯化銨水溶液混合，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及濃縮。所得殘質利用矽膠管柱層析法純化(溶離液A：二氯甲烷，溶離液B：7M氨之甲醇溶液；梯度：0-3%B)。得到160mg(47%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=1.21min,m/z=626[M+H]+。
中間物48A
4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-N-(3-氯苯甲基)-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
取含N-{2-胺基-5-[(3-氯苯甲基)胺甲醯基]苯基}-4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-2-氯菸醯胺(中間物47A；160mg,0.255mmol)之異丙醇(4.0ml)溶液於微波反應器中加熱至180℃ 20min。排除溶劑，產生151mg(84%純度，84%理論值)標題化合物，其未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=1.16min,m/z=590[M+H]+。
中間物49A
N-乙基-N-(3-氟-4-硝基苯甲基)乙胺
在含4-(溴甲基)-2-氟-1-硝基苯(5.04g,21.5mmol)之二氯甲烷(100ml)溶液中添加二乙基胺(2.5ml,24mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(5.6ml,32mmol)，混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後使用二氯甲烷及水稀釋，分相，有機相經硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮。乾燥殘質，產生4.99g(95%理論值)標題化合物，其未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法26,ESIpos)：Rt=1.64min；m/z=227[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.17-8.00(m,1H),7.49(d,1H),7.41(d,1H),3.64(s,2H),2.48(q,4H),1.02-0.94(m,6H).
中間物50A
5-[(二乙基胺基)甲基]-2-硝基苯胺
取N-乙基-N-(3-氟-4-硝基苯甲基)乙胺(中間物49A；4.00g,17.7mmol)分裝成8個微波反應容器(各500mg)並溶於乙醇(各5ml)，添加25-30%氫氧化銨水溶液(各10ml)。混合物於微波反應器中加熱至90℃ 3h。冷卻後，合併反應混合物及濃縮。殘質利用矽膠管柱層析法純化(100g矽膠，溶離液：2.5-10%之二氯甲烷溶液)。依此方式得到3.29g(83%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26,ESIpos)：Rt=1.16min,m/z=224[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=7.90(d,1H),7.40(br.s,2H),7.00(s,1H),6.58(d,1H),3.44(s,2H),2.45(q,4H),0.98(t,6H).
中間物51A
2-氯-N-{5-[(二乙基胺基)甲基]-2-硝基苯基}-4-甲氧基菸醯胺
於0℃下，在含2-氯-4-甲氧基菸酸(2.62g,13.9mmol)之二氯甲烷(30ml)及DMF(2滴)溶液中慢慢滴加草醯氯(2.4ml,28mmol)。添加完畢後，混合物於室溫下再攪拌2h後，於槽溫30℃之旋轉蒸發器上排除溶劑，並乾燥殘質。
在另一個反應器中，於0℃下，取氫化鈉(1.23g,60%含於礦物油中，31mmol)分批加至含5-[(二乙基胺基)甲基]-2-硝基苯胺(中間物50A；3.27g,14.6mmol)之DMF(15ml)溶液中。添加完畢後，續於0℃下再攪拌15min 後，慢慢滴加先前製備之含醯基氯之DMF(15ml)溶液。添加完畢後，混合物再於0℃下攪拌15min，然後取反應混合物倒至冰-水上。使用乙酸乙酯(4 x 100ml)萃取混合物，合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，及濃縮。殘質利用矽膠管柱層析法純化(100g矽膠，溶離液：0.5-5%乙醇之二氯甲烷溶液)。得到6.08g(89%純度，99%理論值)標題化合物，依據1H NMR，其中仍含有DMF(約1：1)。此產物未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.48min,m/z=393[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=10.79(s,1H),8.39(d,1H),7.95(s,1H),7.75(s,1H),7.36(d,1H),7.28(d,1H),3.93(s,3H),3.64(s,2H),0.99(t,6H).
中間物52A
N-{2-胺基-5-[(二乙基胺基)甲基]苯基}-2-氯-4-甲氧基菸醯胺
在含2-氯-N-{5-[(二乙基胺基)甲基]-2-硝基苯基}-4-甲氧基菸醯胺(中間物51A；6.08g,89%純度，13.8mmol)之乙醇(27ml)及乙酸乙酯(27ml)溶液中添加氯化錫(II)(7.84g,41.3mmol)。混合物於超音波槽中處理5min後，於RT下攪拌一夜。添加2.5M氫氧化鈉溶液(至pH>12)後，使用乙酸乙酯(4x 100ml)萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，及濃縮。乾燥殘質，產生5.01g(93%理論值)標題化合物，其未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.26min,m/z=363[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=9.80(s,1H),8.36(d,1H),7.27(d,1H),7.22(d,1H),6.90(dd,1H),6.69(d,1H),4.77(s,2H),3.93(s,3H),3.38(s,2H),2.43(q,4H),0.96(t,6H).
中間物53A
8-[(二乙基胺基)甲基]-4-羥基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取N-{2-胺基-5-[(二乙基胺基)甲基]苯基}-2-氯-4-甲氧基菸醯胺(中間物52A；4.90g,13.5mmol)分裝成9個微波反應容器(各544mg,1.50mmol)及溶於乙腈(各315ml)，添加鹽酸溶液(4M二烷溶液，各525μl，2.10mmol)。混合物於微波反應器中加熱至120℃ 2.5h。冷卻後，合併反應混合物及濃縮。乾燥殘質，產生5.35g(65%純度，82%理論值)標題化合物，其未進一步純化即用於下一個反應。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.37min,m/z=313[M+H]+。
中間物54A
4-氯-8-[(二乙基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
在激烈攪拌下，於室溫下添加8-[(二乙基胺基)甲基]-4-羥基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物53A；4.80g,15.4mmol)至磷醯氯(29ml,310mmol)中。添加環丁碸(3.8ml)至混合物中，加熱至80℃一夜。冷卻後，反應混合物倒至冰-水上，同時激烈攪拌。混合物使用20%氫氧化鈉溶液鹼化，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水 溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，及濃縮。殘質與甲苯攪拌，及抽吸濾出固體，及乾燥。依此方式得到第一份標題化合物(1.24g,88%純度，22%理論值)。取母液濃縮。殘質利用矽膠管柱層析法純化(50g矽膠，溶離液：2.5-17.5%乙醇之二氯甲烷溶液)，產生第二份標題化合物(309mg,62%純度，4%理論值)。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.44min,m/z=331[M+H]+。
操作實例：
實例1
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
方法A：
取94mg(0.209mmol)4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(中間物5A)溶於2ml三氟乙酸。然後添加49μl(0.418mmol)(甲基硫基)苯。混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後於旋轉蒸發器上濃縮，殘質利用製備性HPLC純化。得到23mg(31%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法1,ESIpos)：Rt=1.52min,m/z=358[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),6.29(d,1H),6.51-6.64(m,2H),7.09(d,1H),7.26(d,1H),7.33(d,1H),7.46(dd,1H),7.77(d,1H),8.80(s,1H),9.36(s,1H),9.91(s,1H),10.22(s,1H).
方法B：
取含4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(2.80g,10.3mmol)及3-胺基-4-甲基苯酚(1.40g,11.4mmol)先加至36.4ml異丙醇中。添加2.8ml 4M鹽酸之二烷溶液，混合物分裝成3個反應容器，於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物加水稀釋，並攪拌10min。抽吸濾出沉澱物，使用乙腈洗滌。濾液在減壓下部份濃縮，水溶液使用乙酸乙酯萃取3次。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。產生2.33g(55%理論值)標題化合物，87%純度。
方法C：
取4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(2.00g,4.47mmol)(中間物5A)溶於20ml三氟乙酸。添加硫代苯甲醚(1.05ml,8.34mmol)，於室溫下攪拌反應混合物2天。然後再次添加等量之硫代苯甲醚，再於室溫下攪拌混合物一天。反應混合物隨後減壓濃縮，添加甲苯，混合物再濃縮一次。殘質與含二氯甲烷/甲醇/N,N-二異丙基乙基胺(100：10：1)之混合物攪拌，抽吸濾出所形成之固體。濾液濃縮，殘質再與上述溶劑混合物攪拌一次。抽吸過濾，再度得到一份固體。固體最後利用矽膠層析純化。得到1.19g(71%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法1,ESIpos)：Rt=1.52min,m/z=358[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),6.29(d,1H),6.57(dd,1H),6.61(d,1H),7.09(d,1H),7.26(d,1H),7.33(d,1H),7.46(dd,1H),7.77(d,1H),8.80(s,1H),9.36(s,1H),9.91(s,1H),10.22(s,1H).
實例2
4-[(3-羥基-4-丙基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將5-胺基-2-丙基苯酚(中間物14A)(50mg,0.33mmol)及4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈與4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(81mg,0.301mmol)溶於異丙醇(1.47ml)與4M鹽酸之二烷溶液(83μl,0.33mmol)中。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1.5h。抽吸濾出所形成之沉澱，使用異丙醇洗滌及減壓乾燥。得到52mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.91min,m/z=386[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.90(t,3H),1.49-1.62(m,2H),2.45-2.55(m,2H),6.55(d,1H),6.60(d,1H),6.66(s,1H),7.10(d,1H),7.25(d,1H),7.39(s,1H),7.54(d,1H),7.83(d,1H),9.61(br.s,1H)。
實例3
4-[(3-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈與4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(135mg,0.5mmol)及5-胺基-2-甲基苯酚(68mg,0.55mmol)溶於異丙醇(3ml) 與4M鹽酸之二烷溶液(138μl,0.55mmol)。混合物於微波裝置中，於160℃下攪拌1h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及抽吸濾出所形成之沉澱。經矽膠層析法(溶離液：二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇10：1)及進一步經製備性HPLC純化(方法12)，產生105mg(59%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.75min,m/z=358[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),6.51-6.56(m,2H),6.61(d,1H),7.06(d,1H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.46(dd,1H),7.77(d,1H),8.77(s,1H),9.49(s,1H),9.92(s,1H),10.21(s,1H).
實例4
{4-[(8-氰基-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-4-基)胺基]-2-羥苯基}胺甲酸乙基酯
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈與4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(50mg,0.19mmol)及(4-胺基-2-羥苯基)胺甲酸乙基酯(40mg,0.20mmol)溶於異丙醇(3ml)與4M鹽酸之二烷溶液(51μl,0.20mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌2h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及濃縮。殘質與DMF混合，及過濾，濾液再度濃縮。利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex 5μ C18，100mm x 21.2mm；流速：25ml/min；溶離液A：水60%，溶離液B：乙腈35%，溶離液C：1%甲酸水溶液5%；等濃度)，產生44mg(52%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.77min,m/z=431[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.23(t,3H),4.10(q,2H),6.53(d,1H),6.62(dd,1H),6.67(d,1H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.45(dd,1H),7.51(d,1H),7.78(d,1H),8.22(s,1H),8.77(s,1H),9.89(s,1H),9.91(s,1H),10.2(s,1H).
實例5
4-[(4-溴-3-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(135mg,0.50mmol)及5-胺基-2-溴苯酚(中間物15A)(103mg,0.55mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(138μl,0.55mmol)中。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及濃縮。殘質直接經矽膠層析(溶離液：二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇10：1)，然後進一步利用製備性HPLC純化(方法13)及再經製備性HPLC純化一次(管柱：Kinetex C18 5μm，100mm x 30mm；流速：60ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C→10min 0%A，95%B，5%C)。依此方式得到16mg(8%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.83min,m/z=423[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.59(dd,1H),6.62(d,1H),6.79(d,1H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.44(d,1H),7.46(dd,1H),7.83(d,1H),8.80(s,1H),9.93(s,1H),10.2(s,1H).
實例6
N-{4-[(8-氰基-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-4-基)胺基]-2-羥苯基}苯磺醯胺
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(50mg,0.19mmol)及N-(4-胺基-2-羥苯基)苯磺醯胺(54mg,0.20mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(51μl,0.20mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌2.5h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於DMF及過濾，濾液再度濃縮。經製備性HPLC純化(管柱：Kinetex 5μ C18，100mm x 21.2mm；流速：25ml/min；溶離液A：水52%，溶離液B：乙腈35%，溶離液C：1%甲酸水溶液13%；等濃度)，產生19mg(21%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=2.17min；m/z=499(Cl同位素型態，M+H)+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.44-6.52(m,3H),7.03(d,1H),7.25(d,1H),7.30(d,1H),7.40-7.55(m,4H),7.70-7.73(m,2H),7.75(d,1H),8.74(s,1H),9.84(s,1H),10.17(br.s,1H).
實例7
4-[(4-溴-2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(135mg,0.50mmol)及5-胺基-2-溴-4-氟苯酚(113mg,0.55mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(137μl,0.55mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於DMF及過濾，濾液再次濃縮。經製備性HPLC純化(方法14)，再經製備性HPLC純化一次(管柱：Kinetex C18 5μm，100mm x 30mm；流速：60ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C，10min 0%A，95%B，5%C)，產生6mg(3%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.87min,m/z=442[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.50(d,1H),6.92(d,1H),7.27(d,1H),7.33(d,1H),7.47(dd,1H),7.53(d,1H),7.87(d,1H),8.85(s,1H),9.97(s,1H),10.29(br.s,1H).
實例8
4-[(3,4-二氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(135mg,0.50mmol)及5-胺基-2,3-二氟苯酚(中間物16A)(80mg,0.55mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(137μl,0.55mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及抽吸過濾。殘質使用水洗滌，利用矽膠層析法(溶離液：二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇10：1)初次純化。再進一步利用製備性HPLC純化2次(第一次使用方法12，然後使用方法17)，產生76mg(38%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法8,ESIpos)：Rt=2.09min,m/z=380[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.57-6.62(m,2H),6.69-6.76(m,1H),7.27(d,1H),7.32(d,1H),7.47(dd,1H),7.83(d,1H),8.82(s,1H),9.83(s,1H),10.25(s,1H),10.57(s,1H).
實例9
4-[(3-羥基-5-甲氧基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(135mg,0.50mmol)及3-胺基-5-甲氧基苯酚(77mg,0.55mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(137μl,0.55mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。反應混合物隨後與飽和碳酸鈉水溶液混合，及抽吸濾出所形成之沉澱。利用製備性HPLC純化(方法12)，隨後與乙醚攪拌，產生14mg(7%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.69min,m/z=374[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=3.69(s,3H),6.13-6.15(m,1H),6.18-6.22(m,2H),6.67(d,1H),7.26(d,1H),7.32(d,1H),7.46(dd,1H),7.82(d,1H),8.80(s,1H),9.61(s,1H),9.91(s,1H),10.24(s,1H).
實例10
4-[(2,4-二氯-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(80mg,0.296mmol)及5-胺基-2,4-二氯苯酚(58mg,0.325mmol)溶於異丙醇(3ml)及4M鹽酸之二烷溶液(37μl,0.148mmol)。混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。隨後，再次添加5-胺基-2,4-二氯苯酚(58mg,0.325mmol)及4M鹽酸之二烷溶液(137μl,0.55mmol)，混合物於微波爐中，於160℃下再攪拌1.5h。隨後抽吸濾出所形成之固體，使用乙腈洗滌。利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18 5μ，100 x 30mm；流速：75ml/min； 溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C，7.3min 23.3%A，71.7%B，5%C)，產生25mg(20%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.91min,m/z=412[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.62(d,1H),7.01(s,1H),7.28(d,1H),7.33(d,1H),7.47(dd,1H),7.57(s,1H),7.89(d,1H),8.89(s,1H),10.23(s,1H),10.33(s,1H),10.61(br.s,1H).
實例11
4-[(4-氯-3-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(80mg,0.296mmol)及2-氯-5-胺基苯酚(47mg,0.325mmol)溶於異丙醇(1.45ml)。添加4M鹽酸之二烷溶液(81μl,0.325mmol)，反應混合物於微波裝置中於160℃下攪拌1h。冷卻至室溫後，抽吸濾出固體，自異丙醇中結晶，得到46mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.78min,m/z=378[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.61(d,1H),6.65-6.70(m,1H),6.81(d,1H),7.25(d,1H),7.32-7.38(m,2H),7.51(d,1H),7.85(d,1H),9.23(s,1H),10.23(s,1H),10.37(s,1H),10.44(s,1H).
實例12
4-[(3,4-二羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
類似實例11，4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A)(80mg,0.296mmol)與4-胺基兒茶酚氫溴酸鹽(67mg,0.325mmol)反應。結果產生80mg(74%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.55min,m/z=360[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.43(d,1H),6.51(dd,1H),6.61(d,1H),66.79(d,1H),7.23(d,1H),7.36-7.41(m,2H),7.55(dd,1H),7.80(d,1H),9.27(s,1H),9.61(s,1H),10.37-10.50(m,2H).
實例13
4-[(2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
類似實例11，4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物 (中間物10A)(80mg,0.296mmol)與3-胺基-4-氟苯酚(中間物17A)(41mg,0.325mmol)反應。結果產生63mg(59%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.72min,m/z=362[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.48(d,1H),6.60-6.68(m,1H),6.70-6.76(m,1H),7.10-7.20(m,1H),7.26(d,1H),7.35-7.38(m,1H),7.52(dd,1H),7.88(d,1H),9.28(s,1H),9.65(s,1H),10.27(s,1H),10.42(s,1H).
實例14
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-{[(2,2,2-三氟乙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(49.8mg,0.138mmol)(來自中間物6A)及2,2,2-三氟乙基胺(20.5mg,0.207mmol)加至2.0ml乙醇中，及添加乙酸(12μl,0.207mmol)。添加氰基氫硼化鈉(17.4mg,0.276mmol)，混合物於室溫下攪拌2h。反應混合物隨後加至飽和碳酸氫鈉水溶液中，使用乙酸乙酯萃取。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質經製備性HPLC純化。得到57.9mg(85%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.73min,m/z=444[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),2.75-2.85(m,1H),3.16(qd,2H),3.67(d,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.61(d,1H),6.92-6.98(m,2H),7.04-7.09(m,2H),7.75(d,1H),8.10(s,1H),9.35(s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例15
8-{[(3-氯苯甲基)胺基]甲基}-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(78%純度，77.0mg,0.166mmol)(來自中間物6A)與3-氯苯甲基胺(35mg,0.249mmol)反應。得到72.1mg(88%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.69min,m/z=486[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),4.08-4.14(m,2H),4.15-4.21(m,2H),6.27(d,1H),6.59(d,1H),6.64(dd,1H),7.09-7.15(m,3H),7.19(dd,1H),7.42-7.50(m,3H),7.58-7.60(m,1H),7.79(d,1H),8.93(br.s,1H),9.20(br.s,1H),10.25(br.s,1H),10.43(s,1H).
實例16
N 2-({4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)甘胺醯胺
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(35.0mg,0.097mmol)(來自中間物6A)與甘 胺醯胺鹽酸鹽(16mg,0.146mmol)反應。得到21.6mg(53%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.46min,m/z=419[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),3.13(s,2H),3.67(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.97-7.02(m,2H),7.05-7.10(m,2H),7.16(br.s,1H),7.36(br.s,1H),7.75(d,1H),9.37(br.s,1H),9.85(s,1H),10.11(s,1H).
實例17
8-{[(4-羥基丁基)胺基]甲基}-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(49.8mg,0.138mmol)(來自中間物6A)與4-胺基-1-丁醇(18mg,0.207mmol)反應。得到14.0mg(23%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=434[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.39-1.49(m,2H),1.53-1.64(m,2H),2.06(s,3H),2.74-2.83(m,2H),3.39(t,1H),3.91(s,2H),6.30(d,1H),6.55(dd,1H),6.60(d,1H),7.02-7.15(m,4H),7.76(d,1H),8.25(s,1H),9.35(br.s,1H),9.84(s,1H),10.22(s,1H).
實例18
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(嗎啉-4-基)乙基]胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(49.8mg,0.138mmol)(來自中間物6A)與2-嗎啉基乙基胺(27mg,0.207mmol)反應。得到7.0mg(11%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法2,ESIpos)：Rt=1.07min,m/z=475[M+H]+。
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),3.20(br.s,4H),3.32(s,4H),4.15(s,2H),6.26(d,1H),6.60(d,1H),6.69(dd,1H),7.11-7.19(m,3H),7.23(d,1H),7.81(d,1H),9.43(s,1H),10.46(s,1H),10.51(s,1H).
實例19
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-[(異丙基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(49.8mg,0.138mmol)(來自中間物6A)與異丙基胺(12mg,0.207mmol)反應。得到28.0mg(50%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法2,ESIpos)：Rt=1.12min,m/z=404[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.12(d,6H),2.06(s,3H),2.91-3.02(m,1H),3.80(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),7.00-7.14(m,4H),7.75(d,1H),8.18(s,1H),8.25(s,2H),9.84(s,1H),10.16(s,1H).
實例20
8-[(環丁基胺基)甲基]-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(49.8mg,0.138mmol)(來自中間物6A)與環丁基胺(15mg,0.207mmol)反應。得到22.4mg(37%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.58min,m/z=416[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.51-1.69(m,2H),1.69-1.82(m,2H),2.02-2.11(m,2H),2.06(s,3H),3.57(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.94-6.99(m,2H),7.03-7.09(m,2H),7.73-7.77(m,1H),8.11(s,1H),8.18(s,1H),9.85(s,1H),10.10(s,1H).
實例21
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-羥基丙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.139mmol)(來自中間物6A)與3-胺基-1-丙醇(15mg,0.208mmol)反應。得到31.4mg(53%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法2,ESIpos)：Rt=1.07min,m/z=418[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.58-1.66(m,2H),2.06(s,3H),2.65(t,2H),3.45(t,2H),3.72(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.98-7.03(m,2H),7.05-7.10(m,2H),7.75(d,1H),8.15(s,1H),8.24(s,2H),9.85(s,1H),10.13(s,1H).
實例22
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-[(甲基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.139mmol)(來自中間物6A)與甲基胺鹽酸鹽(14mg,0.208mmol)反應。得到21.0mg(36%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.50min,m/z=376[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),2.28(s,3H),3.60(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.92-6.99(m,2H),7.04-7.10(m,2H),7.75(d,1H),8.11(s,1H),9.33(s,1H),9.85(s,1H),10.10(s,1H).
實例23
8-[(丁基胺基)甲基]-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.139mmol)(來自中間物6A)與正丁基胺(15mg,0.208mmol)反應。得到18.5mg(30%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.61min,m/z=418[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.86(t,3H),1.24-1.35(m,2H),1.44(d,2H),2.06(s,3H),2.58(t,2H),3.72(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.98-7.03(m,2H),7.05-7.10(m,2H),7.75(d,1H),8.14(s,1H),8.27(s,1H),9.85(s,1H),10.13(s,1H).
實例24
8-{[(2-羥基乙基)胺基]甲基}-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.139mmol)(來自中間物6A)與乙醇胺(13mg,0.208mmol)反應一夜。得到7.8mg(13%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.50min,m/z=406[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),2.57(t,2H),3.44-3.49(m,2H),3.63(s,2H),4.51(br.s,1H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.95-6.99(m,2H),7.03-7.09(m,2H),7.74(d,1H),8.09(s,1H),9.33(br.s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例25
8-[(乙基胺基)甲基]-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.139mmol)(來自中間物6A)與乙基胺(9mg,0.208mmol)反應一夜。得到15.5mg(27%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法3,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=390[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.08(t,3H),2.06(s,3H),2.67(q,2H),3.76(s,2H),6.30(d,1H),6.54(dd,1H),6.60(d,1H),6.99-7.05(m,2H),7.06-7.11(m,2H),7.75(d,1H),8.16(s,1H),8.23-8.25(m,1H),9.84(s,1H),10.15(s,1H).
實例26
8-苯胺基甲基-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例14，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(73.9mg,0.205mmol)(來自中間物6A)與苯胺(28.6mg,0.308mmol)反應一夜。得到22.4mg(24%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法9,ESIpos)：Rt=0.94min,m/z=438[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),4.13(d,2H),6.11(t,1H),6.29(d,1H),6.47-6.56(m,4H),6.60(d,1H),6.97-7.09(m,6H),7.74(d,1H),8.07(s,1H),9.31(br.s,1H),9.84(s,1H),10.08(s,1H).
實例27
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
方法A：
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(3.14g,11.6mmol)(來自中間物10A)與5-胺基-4-氟-2-甲基苯酚(1.80g,12.8mmol)先加至36ml異丙醇中。添加3.2ml 4M鹽酸之二烷溶液，混合物於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物加水稀釋，並攪拌10min。抽吸濾出所形成之沉澱及減壓乾燥。產生3.57g(71%理論值)標題化合物，87%純度。
方法B：
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之混合物(中間物10A；9.0g,33.3mmol)及吡啶鎓鹽酸鹽(3.84g,33.3mmol)及5-胺基-4-氟-2-甲基苯酚(5.16g,36.6mmol)溶於2-乙氧基乙醇(210ml)後，於槽溫150℃下攪拌1h。冷卻後，混合物倒至600ml水上，於室溫下攪拌1h後，抽吸濾出沉澱物。濕產物與甲醇攪拌10h，再次抽吸過濾，洗滌及減壓乾燥。產量：7.7g(62%理論值)。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.82min,m/z=376[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.11(s,3H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),7.05(d,1H),7.26(d,1H),7.33(d,1H),7.47(dd,1H),7.82(d,1H),8.83(s,1H),9.46(s,1H),9.89(s,1H),10.27(s,1H).
實例28
8-[(二乙基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
方法A：
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(3.61g,9.54mmol)(來自中間物11A)溶於94ml DMF。添加二乙基胺(2.79g,38.2mmol)及正甲酸三甲酯(20.3g,191mmol)，於室溫下攪拌反應混合物1h。之後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(8.09g,38.2mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。反應混合物隨後倒至1升碳酸氫鈉水溶液上，攪拌30min。抽吸濾出所形成之沉澱後，連續與甲醇攪拌2次，每次均再抽吸濾出一次。殘質經340g矽膠快速層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇；梯度：2CV 5%甲醇，8CV梯度5%→20%甲醇，2CV 20%甲醇，3.1CV 50%甲醇；流速：100ml/min)。產生1.84g(44%理論值)標題化合物之無色晶體。為了排除殘留甲醇。取產物於水/異丙醇(5：1)中煮沸，並濾出。乾燥，留下1.60g(38%理論值)標題化合物。
方法B：
將4-氯-8-[(二乙基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物54；1.31g,3.95mmol)分裝於兩個微波反應容器(各650mg)，溶於DMF(各15ml)，添加吡啶鎓氯化物(各320mg,2.77mmol)及5-胺基-4-氟-2-甲基苯酚(各283mg,2.08mmol)。混合物於微波反應器中加熱至140℃ 1h。冷卻後，合併反應混合物，加至飽和碳酸氫鈉水溶液中。濾出固體，乾燥後，分三份利用矽膠管柱層析法純化(50g矽膠，溶離液：5-15%甲醇之二氯甲烷溶液)。依此方式得到第一份標題化合物(994mg,58%理論值)。 先前得到之母液使用乙酸乙酯萃取，合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，及濃縮。殘質利用矽膠管柱層析法純化(50g矽膠，溶離液：5-15%甲醇之二氯甲烷溶液)，產生第二份標題化合物(232mg,13%理論值)。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.60min,m/z=436[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.96(t,6H),2.10(s,3H),2.42(q,4H),3.40(s,2H),6.38(dd,1H),6.73(d,1H),6.93(dd,1H),6.96(d,1H),7.03(d,1H),7.05(d,1H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.44(s,1H),9.88(s,1H),10.10(s,1H).
實例29
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(嗎啉-4-基甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2.3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(110mg,0.291mmol)(來自中間物11A)溶於2.75ml DMF。添加嗎啉(101mg,1.16mmol)及正甲酸三甲酯(617mg,5.81mmol)，於室溫下攪拌反應混合物1h。之後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(246mg,1.16mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。反應溶液隨後溶於水/乙酸乙酯及分相。有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，及經硫酸鈉乾燥。減壓排除溶劑後，殘質經25g矽膠快速層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇；梯度：2.5CV 5%甲醇，6CV 10%甲醇，7CV 20%甲醇，4.5CV 35%甲醇；流速：15ml/min)。產生30.3mg(22%理論值)標題化合物之黃色固體。
LC/MS(方法5,ESIneg)：Rt=0.60min,m/z=448[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.28-2.36(m,4H),3.51-3.59(m,4H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.01-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.16(s,1H),9.44(s,1H),9.85(s,1H),10.11(s,1H).
實例30
8-[(環丙基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50mg,0.13mmol)(來自中間物11A)先加至1.25ml THF及125μl乙酸中。添加環丙基胺(30mg,0.53mmol)，混合物於室溫下攪拌1h。之後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(112mg,0.53mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。反應溶液隨後與碳酸氫鈉水溶液混合後，使用乙酸乙酯/THF(2：1)萃取3次。合併之有機相使用水與飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質經10g矽膠層析(溶離液A：二氯甲烷，溶離液B：二氯甲烷/甲醇1：1；梯度：3.0CV 10%B，13.5CV梯度10%→55%B，7.5CV 55%B；流速：15ml/min)。產生16.6mg(30%理論值)標題化合物之無色固體。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=420[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.20-0.26(m,2H),0.31-0.37(m,2H),1.99-2.07(m,1H),2.10(s,3H),3.61(s,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.93-6.98(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.43(s,1H),9.84(s,1H),10.10(s,1H).
實例31
8-[(乙基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(60mg,0.16mmol)(來自中間物11A)先加至1.5ml DMF中。添加乙酸(150μl,2.62mmol)及2M乙基胺之THF溶液(95μl,0.19mmol)，混合物於室溫下攪拌2h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(134mg,0.63mmol)，混合物於室溫下再攪拌2h。之後，添加碳酸氫鈉水溶液，混合物使用THF/乙酸乙酯萃取3次。合併之有機相使用水及飽和氯化鈉溶液洗滌及經硫酸鈉乾燥。壓減濃縮後，殘質與第三丁基甲基醚/二氯甲烷攪拌，及抽吸濾出固體。依此方式得到26.4mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=408[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.17(t,3H),2.10(s,3H),2.90(q,2H),3.99(s,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),7.02-7.08(m,2H),7.12-7.18(m,2H),7.80(d,1H),8.33(s,1H),9.46(s,1H),9.81(s,1H),10.30(s,1H).
實例32
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(吡咯啶-1-基甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.264mmol)(來自中間物11A)溶於2.5ml DMF。添加吡咯啶(75.2mg,1.06mmol)及正甲酸三甲酯(561mg,5.29mmol)，於室溫下攪拌反應混合物1h。之後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(224mg,1.06mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後倒至碳酸氫鈉水溶液上，使用乙酸乙酯/THF(2：1)萃取3次。合併之有機相使用水與飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質自第三丁基甲基醚/二氯甲烷中結晶。所得產物進一步經10g矽膠層析純化(溶離液A：二氯甲烷，溶離液B：二氯甲烷/甲醇5：1；梯度：3.5CV 20%B，6.5CV 40%B，6.5CV 55%B，7.5CV 70%B，5.0CV 100%B；流速：20ml/min)。產生19.5mg(16%理論值)標題化合物之無色結晶。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.60min,m/z=434[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.65-1.69(m,4H),2.10(s,3H),2.36-2.41(m,4H),3.44(s,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.96(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.43(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例33
8-[(二甲基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.264mmol)(來自中間物11A)溶於2.5ml DMF。添加2M二甲基胺之THF溶液(529μl,1.06mmol)及正甲酸三甲酯(561mg,5.29mmol)，於室溫下攪拌反應混合物1h。之後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(224mg,1.06mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後倒至碳酸氫鈉水溶液上，使用乙酸乙酯/THF(2：1)萃取3次。合併之有機相使用水與飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。殘質自第三丁基甲基醚/二氯甲烷中結晶。此物質部份溶於少量乙腈中，添加水後，混合物冷凍乾燥。產生60.5mg(53%理論值)標題化合物之黃色凍乾物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=408[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.12(s,6H),3.28(s,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.95(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.16(s,1H),9.44(s,1H),9.87(s,1H),10.11(s,1H).
實例34
8-[(環戊基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮乙酸鹽
類似實例31，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(60mg,0.16mmol)(來自中間物11A)與環丁基胺(16mg,0.19mmol)反應。得到34.1mg(40%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.61min,m/z=448[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.43-1.60(m,4H),1.61-1.71(m,2H),1.85-1.95(m,2H),2.10(s,3H),3.91(br.s,2H),6.37(dd,2H),6.54(s,1H),6.72(d,1H),7.02-7.07(m,2H),7.10-7.15(m,2H),7.80(d,1H),8.29(br.s,1H),9.46(s,1H),9.82(s,1H),10.25(s,1H).
實例35
4-[(3-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈與4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之1：1混合物(100mg,0.37mmol)(來自中間物10A)與3-胺基苯酚(44mg,0.41mmol)先加至2.0ml異丙醇中。添加102μl 4M鹽酸之二烷溶液，混合物於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物使用10ml水稀釋，添加2滴飽和碳酸鈉水溶液。攪拌混合物10min後，抽吸濾出所形成之沉澱及使用乙腈洗滌。固體與乙腈及幾滴甲醇攪拌，再次抽吸濾出後，減壓乾燥。得到55.6mg(42%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.69min,m/z=344[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.60(d,1H),6.62-6.73(m,3H),7.23(d,1H),7.27(d,1H),7.40(d,1H),7.56(dd,1H),7.87(d,1H),9.79(br.s,2H),10.45-10.52(m,1H),10.59(br.s,1H).
實例36
4-[(2-氯-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之1：1混合物(100mg,0.37mmol)(來自中間物10A)及3-胺基-4-氯苯酚(58mg,0.41mmol)先加至2.0ml異丙醇中。添加102μl 4M鹽酸之二烷溶液，混合物於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物使用10ml水稀釋，添加2滴飽和碳酸鈉水溶液。攪拌混合物10min後，抽吸濾出所形成之沉澱，及使用乙腈洗滌。固體與乙腈及幾滴甲醇攪拌，再次抽吸濾出後，減壓乾燥。得到55.4mg(36%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.80min,m/z=378[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.59(dd,1H),6.62(d,1H),6.81(d,1H),7.28(d,1H),7.31-7.35(m,2H),7.48(dd,1H),7.89(d,1H),8.89(s,1H),9.86(br.s,1H),10.24(s,1H),10.34(br.s,1H).
實例37
4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之1：1混合物(100mg,0.37mmol)(來自中間物10A)及5-胺基-2-氯-4-氟苯酚(66mg,0.41mmol)先加至2.0ml異丙醇中。添加102μl 4M鹽酸之二烷溶液，混合物於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物使用10ml水稀釋，添加2滴飽和碳酸鈉水溶液。攪拌混合物10min後，抽吸濾出所形成之沉澱，及使用乙腈洗滌。固體與乙腈及幾滴甲醇攪拌，再次抽吸濾出後，減壓乾燥。得到91.8mg(57%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.87min,m/z=396[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.49(d,1H),6.95(d,1H),7.27(d,1H),7.37(s,1H),7.49(d,1H),7.52(d,1H),7.90(d,1H),9.38(br.s,1H),10.26(br.s,1H),10.44(br.s,2H).
實例38
4-[(2,4-二氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈
將4-氯-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈及4,5-二氯-11H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈之1：1混合物(100mg,0.37mmol)(來自中間物10A)及5-胺基-2,4-二氟苯酚(59mg,0.41mmol)先加至2.0ml異丙醇中。添加102μl 4M鹽酸之二烷溶液，混合物於微波裝置中加熱至160℃ 20min。之後，反應混合物使用10ml水稀釋，添加2滴飽和碳酸鈉水溶液。攪拌混合物10min後，抽吸濾出所形成之沉澱，及使用乙腈洗滌。固體與乙腈及幾滴甲醇攪拌，再次抽吸濾出後，減壓乾燥。得到68.8mg(44%理論值)標題化合物，88%純度。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.77min,m/z=380[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=6.33(d,1H),6.91(t,1H),7.26(d,1H),7.34-7.36(m,1H),7.39(d,1H),7.48-7.51(m,1H),7.84(d,1H),9.09(br.s,1H),9.99(br.s,1H),10.08(br.s,1H),10.35(br.s,1H).
實例39
8-[(二乙基胺基)甲基]-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(50.0mg,0.14mmol)(來自中間物6A)加至1.5ml THF中，添加0.13μl乙酸。添加二乙基胺(40.6mg,0.56mmol)，混合物於室溫下攪拌1h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(118mg,0.56mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。操作時，添加稀釋之碳酸氫鈉水溶液，直接進行製備性HPLC純化(方法15)。產生13.4mg(23%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=418[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.97(t,6H),2.07(s,3H),2.46(q,4H),3.45(s,2H),6.31(d,1H),6.53(dd,1H),6.61(d,1H),6.92-6.98(m,2H),7.04(d,1H),7.08(d,1H),7.75(d,1H),8.11(s,1H),8.17(br.s,1H),9.87(s,1H),10.07(s,1H).
實例40
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-(吡咯啶-1-基甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.277mmol)(來自中間物6A)加至3.0ml THF及0.26ml乙酸中。添加吡咯啶(79mg,1.11mmol)，混合物於室溫下攪拌5h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(235mg,1.11mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。操作時，添加碳酸氫鈉水溶液，直接進行製備性HPLC純化(方法15)。產生44.2mg(38%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.46min,m/z=416[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.67-1.75(m,4H),2.07(s,3H),2.51-2.55(m,4H),3.58(s,2H),6.31(d,1H),6.54(dd,1H),6.61(d,1H),6.93-7.00(m,2H),7.04-7.10(m,2H),7.75(d,1H),8.12-8.24(m,2H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例41
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-(嗎啉-4-基甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮甲酸鹽
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.277mmol)(來自中間物6A)加至3.0ml THF及0.26ml乙酸中。添加嗎啉(97mg,1.11mmol)，混合物於室溫下攪拌5h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(235mg,1.11mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。操作時添加碳酸氫鈉水溶液，直接進行製備性HPLC純化(方法15)。得到76.6mg(64%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.45min,m/z=432[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.07(s,3H),2.30-2.38(m,4H),3.36(s,2H),3.56(t,4H),6.31(d,1H),6.54(dd,1H),6.61(d,1H),6.91-6.97(m,2H),7.07(t,2H),7.75(d,1H),8.12-8.17(s,4H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例42
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例39，4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.28mmol)(來自中間物6A)與4-羥基哌啶(112mg,1.11mmol)反應。得到70.3mg(53%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.44min,m/z=446[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.29-1.42(m,2H),1.62-1.73(m,2H),1.92-2.03(m,2H),2.07(s,3H),2.58-2.69(m,2H),3.31(s,2H),4.53(d,1H),6.31(d,1H),6.53(dd,1H),6.61(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.04(d,1H),7.08(d,1H),7.75(d,1H),8.11(s,1H),9.34(s,1H),9.87(s,1H),10.06(s,1H).
實例43
4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-8-[(4-甲基哌-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.277mmol)(來自中間物6A)加至3.0ml THF及0.26ml乙酸中。添加1-甲基哌(111mg,1.11mmol)，混合物於室溫下攪拌3h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(235mg,1.11mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。操作時添加碳酸氫鈉水溶液，直接進行製備性HPLC純化(方法15)。所得產物(甲酸鹽)溶於水中，添加1N氫氧化鈉溶液，使用乙酸乙酯萃取3次。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。得到83.2mg(67%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.46min,m/z=445[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.07(s,3H),2.14(s,3H),2.32(br.s,8H),3.32(br.s,2H),6.31(d,1H),6.51-6.56(m,1H),6.61(d,1H),6.88-6.95(m,2H),7.05(d,1H),7.08(d,1H),7.75(d,1H),8.12(s,1H),9.34(s,1H),9.87(s,1H),10.06(s,1H).
實例44
8-{[4-(2-羥基乙基)哌-1-基]甲基}-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(100mg,0.277mmol)(來自中間物6A)加至3.0ml THF及0.26ml乙酸中。添加N-(2-羥基乙基)哌(145mg,1.11mmol)，混合物於室溫下攪拌3h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(235mg,1.11mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。操作時添加碳酸氫鈉水溶液，直接進行製備性HPLC純化(方法15)。所得產物(甲酸鹽)溶於水中，添加1N氫氧化鈉溶液，使用乙酸乙酯萃取3次。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，及減壓濃縮。得到59.9mg(45%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.44min,m/z=475[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.07(s,3H),2.26-2.45(m,6H),3.32(br.s,2H),3.39-3.52(m,6H),4.35(t,1H),6.31(d,1H),6.53(dd,1H),6.61(d,1H),6.89-6.94(m,2H),7.04(d,1H),7.08(d,1H),7.75(d,1H),8.12(s,1H),9.34(s,1H),9.87(s,1H),10.06(s,1H).
實例45
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例39，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(90mg,0.24mmol)(來自中間物11A)與4-羥基哌啶(96mg,0.95mmol)反應。得到32.4mg(26%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.54min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.29-1.42(m,2H),1.63-1.72(m,2H),1.92-2.02(m,2H),2.10(s,3H),2.58-2.67(m,2H),3.30(s,2H),4.54(d,1H),6.38(d,1H),6.72(d,1H),6.88-6.94(m,2H),7.04(d,2H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.46(s,1H),9.87(s,1H),10.10(s,1H).
實例46
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-甲基哌-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例39，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(90mg,0.24mmol)(來自中間物11A)與1-甲基哌(95mg,0.95mmol)反應。得到84.7mg(77%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.55min,m/z=463[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.13(s,3H),2.19-2.43(m,8H),3.32(s,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.94(m,2H),7.03(d,1H),7.05(s,1H),7.79(d,1H),8.16(s,1H),9.47(s,1H),9.86(s,1H),10.11(s,1H).
實例47
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[4-(2-羥基乙基)哌-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例39，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(90mg,0.24mmol)(來自中間物11A)與N-(2-羥基乙基)哌(124mg,0.95mmol)反應。得到124.1mg(98%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.53min,m/z=493[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=inter al.6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.95(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.46(br.s,1H),9.86(s,1H),10.10(s,1H).
實例48
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(異丙基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(110mg,71%純度，0.206mmol)加至2.0ml DMF及0.2ml乙酸中，於室溫下，添加異丙基胺(49mg,0.83mmol)，混合物於室溫下攪拌9h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(175mg,0.83mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後與碳酸氫鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於15ml DMF。過濾，再濃縮一次。進一步進行製備性HPLC純化(管柱：Sunfire C18 5μ，150 x 19mm；流速：25ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；等濃度56%A，30%B，14%C)。所得產物溶於乙腈(5ml)，與少量碳酸氫鈉水溶液混合。於旋轉蒸發器上排除有機溶劑，殘質加水稀釋。抽吸濾出殘餘固體，及使用少量水洗滌。得到0.29mg(27%理論值；LC/MS測得純度82%)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=422[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.97(d,6H),2.08(s,3H),2.63-2.76(m,1H),3.52-3.61(m,2H),6.37(d,1H),6.68(d,1H),6.89-7.05(m,4H),7.75(d,1H),8.06(s,1H),9.83(s,1H),10.06(s,1H).
實例49
8-{[乙基(甲基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)加至2.5ml DMF中。於室溫下，添加N-乙基甲基胺(59mg,1.0mmol)及正甲酸三甲酯(531mg,5mmol)，混合物於室溫下攪拌5h。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(212mg,1.0mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後與碳酸氫鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於15ml DMF，過濾及再濃縮一次。經製備性HPLC純化(方法16)，產生14mg(13%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=422[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.02(t,3H),2.10(s,3H),2.12(s,3H),2.35-2.45(m,2H),3.35-3.50(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-7.00(m,2H),7.00-7.10(m,2H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例50
8-{[(2-乙氧基乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與N-(2-乙氧基乙基)乙基胺(117mg,1mmol)反應。得到86mg(71%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.85min,m/z=478[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.14(t,3H),1.24(t,3H),2.11(s,3H),3.05-3.25(m,4H),3.58-3.75(m,2H),4.18-4.34(m,2H),6.32-6.44(m,1H),6.71(d,1H),7.05(d,1H),7.12(s,1H),7.18(s,1H),7.81(d,1H),8.50(br.s,1H),9.21(br.s,1H),9.47(s,1H),9.87(br.s,1H),10.31(s,1H).
實例51
8-{[乙基(異丙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與N-乙基異丙基胺(87mg,1mmol)反應。得到57mg(48%理論值，95%純度)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=450[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.93(t,3H),0.96(d,6H),2.10(s,3H),2.39(q,2H),2.85-2.95(m,1H),3.39(s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.92-6.97(m,1H),6.99(s,1H),7.02(s,1H),7.04(d,1H),7.78(d,1H),8.08(s,1H),9.41(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例52
8-{[乙基(2-羥基乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
方法A：
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與2-(乙基胺基)乙醇(89mg,1mmol)反應。得到60mg(53%理論值)標題化合物。
方法B：
將8-{[(2-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(10.2g,12.89mmol)(來自中間物20A)溶於4N鹽酸與4N鹽酸之1,4-二烷溶液之混合物(1：1混合物，50ml)及於室溫下攪拌混合物20min。之後，減壓排除溶劑，殘質與100ml甲苯混合，及再濃縮一次。所得殘質與350ml飽和碳酸氫鈉溶液混合。抽吸濾出沉澱固體，使用少量水洗滌及乾燥。產量：5.82g(86%理論值)。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=452[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.96(t,3H),2.10(s,3H),2.43-2.48(m,4H),3.41-3.47(m,4H),4.26(t,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.92-6.97(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.43(s,1H),9.87(s,1H),10.07(s,1H).
實例53
8-{[丁基(乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與N-乙基-正丁基胺(101mg,1mmol)反應。得到87mg(73%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.66min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.85(t,3H),0.95(t,3H),1.20-1.33(m,2H),1.33-1.45(m,2H),2.10(s,3H),2.30-2.45(m,4H),3.39(s,2H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.94(m,1H),6.95(s,1H),7.02(s,1H),7.04(d,1H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.44(s,1H),9.88(s,1H),10.11(s,1H).
實例54
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-丙基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250 mmol)與4-正丙基哌啶(127mg,1mmol)反應。得到31mg(25%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.74min,m/z=490[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.84(t,3H),1.01-1.32(m,8H),1.52-1.63(m,2H),1.77-1.91(m,2H),2.10(s,3H),2.70-2.82(m,2H),3.45-3.60(m,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.92(m,1H),6.93(s,1H),7.01-7.04(m,1H),7.05(s,1H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),9.87(s,1H),10.07(s,1H).
實例55
8-{[乙基(2-甲氧基乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與N-(2-甲氧基乙基)乙基胺(103mg,1mmol)反應。得到96mg(78%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.60min,m/z=466[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.96(t,3H),2.10(s,3H),2.42-2.48(m,2H),2.52-2.57(m,4H),3.21(s,3H),3.37-3.42(m,2H),3.45-3.50(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.89-6.98(m,2H),7.03(s,1H),7.04-7.07(m,1H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.44(s,1H),9.87(s,1H),10.11(s,1H).
實例56
8-[(4,4-二甲基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與4,4-二甲基哌啶(113mg,1mmol)反應。得到57mg(48%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=476[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.88(s,6H),1.26-1.34(m,4H),2.10(s,3H),2.25-2.35(m,4H),2.54(s,2H),6.38(d,1H),6.72(d,1H),6.87-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.43(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例57
rac-1-({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-羧醯胺
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250 mmol)與哌啶-3-羧醯胺(128mg,1mmol)反應。得到58mg(45%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.54min,m/z=491[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.23-1.35(m,1H),1.35-1.48(m,1H),1.54-1.65(m,1H),1.65-1.76(m,1H),1.80-1.89(m,1H),1.90-1.98(m,1H),2.10(s,3H),2.24-2.35(m,1H),2.54(s,2H),2.64-2.80(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.68-6.75(m,2H),6.88-6.94(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.78(d,1H),8.15(s,1H),9.86(s,1H),10.11(s,1H).
實例58
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例49，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(158mg,60%純度，0.250mmol)與2-(哌啶-3-基)乙醇(129mg,1mmol)反應。得到29mg(22%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.81min,m/z=490[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.76-0.91(m,1H),1.20-1.48(m,3H),1.50-1.70(m,4H),1.75-1.88(m,1H),2.10(s,3H),2.60-2.76(m,2H),3.22-3.30(m,2H),3.36-3.42(m,2H),4.31(t,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.02(d,1H),7.05(s,1H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.44(s,1H),9.87(s,1H),10.10(s,1H).
實例59
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基-4-甲基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)加至1.5ml 1,4-二烷中。於室溫下，添加4-甲基哌啶-3-醇鹽酸鹽(76mg,0.5mmol)、三乙胺(51mg,0.5mmol)及正甲酸三甲酯(265mg,2.5mmol)，於45℃下攪拌混合物一夜。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(106mg,2.5mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後與碳酸氫鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於15ml DMF，過濾，並再濃縮一次。經矽膠層析法純化(溶離液：二氯甲烷→16.5%甲醇之二氯甲烷溶液)，隨後經製備性HPLC純化(方法16)，產生28mg(47%理論值)標題化合物之立體異構物混合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.85(d,3H),1.3-1.6(m,3H),1.98-2.18(m,2H),2.09(s,3H),3.45-3.55(m,1H),3.85-4.05(m,1H),6.34-6.40(m,1H),6.70(d,1H),6.90-6.97(m,2H),6.98-7.07(m,2H),7.77(d,1H),8.11(s,1H),9.86(s,1H),10.05(s,1H).
實例60
rac-8-{[3-(環丁基甲氧基)哌啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例59，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)與rac-3-(環丁基甲氧基)哌啶鹽酸鹽(103mg,0.500mmol)反應。得到20mg(30%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.73min,m/z=532[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.00-1.13(m,1H),1.30-1.45(m,1H),1.55-1.69(m,3H),1.71-1.99(m,7H),2.10(s,3H),2.35-2.45(m,1H),2.55-2.60(m,1H),2.80-2.89(m,1H),3.20-3.30(m,1H),3.33-3.36(m,3H),6.35-6.42(m,1H),6.72(d,1H),6.89-6.94(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.14(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例61
rac-N,N-二乙基-2-{[1-({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-基]氧}乙醯胺
先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)加至1.5ml 1,4-二烷中。於室溫下，添加rac-N,N-二乙基-2-(哌啶-3-基氧) 乙醯胺(107mg,0.5mmol)及正甲酸三甲酯(265mg,2.5mmol)，於45℃下攪拌混合物一夜。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(106mg,2.5mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。混合物隨後與碳酸氫鈉水溶液混合，及濃縮。殘質溶於15ml DMF，過濾，並再濃縮一次。經矽膠層析法純化(溶離液：二氯甲烷→16.5%甲醇之二氯甲烷溶液)，及隨後經製備性HPLC純化(方法16)，產生34mg(46%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.68min,m/z=577[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),1.02(t,3H),1.10-1.20(m,1H),1.30-1.45(m,1H),1.58-1.67(m,1H),1.82-1.97(m,3H),2.10(s,3H),2.79-2.85(m,1H),3.14-3.25(m,4H),3.32-3.43(m,3H),4.05(s,2H),6.37-6.42(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.93(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例62
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基氮雜環庚-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(70mg,0.185mmol)與rac-氮雜環庚-4-醇(85mg,0.740mmol)反應。得到13mg(15%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.35-1.70(m,4H),1.72-1.85(m,2H),2.10(s,3H),3.40-3.50(m,1H),3.65-3.77(m,1H),4.31-4.40(m,1H),6.36-6.39 (m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.98(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.41(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例63
8-(氮雜環庚-1-基甲基)-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(70mg,0.185mmol)與氮雜環庚烷(74mg,0.740mmol)反應。得到21mg(24%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.66min,m/z=461[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.56(s,8H),2.10(s,3H),2.51-2.55(m,4H),3.47(s,2H),6.36-6.39(m,1H),6.73(d,1H),6.92-6.98(m,2H),7.01-7.05(m,2H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.41(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例64
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2S,4R)-4-羥基-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例59，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)與(3R,5S)-5-(羥基甲基)吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(77mg,0.500mmol)反應。得到24mg(40%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.52min,m/z=480[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.64-1.76(m,2H),2.00-2.10(m,2H),2.10(s,3H),2.70-2.82(m,1H),2.90-3.30(m,1H),3.38-3.45(m,1H),3.85-3.95(m,1H),4.00-4.11(m,1H),4.25-4.40(m,1H),4.59-4.70(m,1H),6.36-6.39(m,1H),6.72(d,1H),6.86-6.96(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.05(s,1H).
實例65
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基吡咯啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)與rac-吡咯啶-3-醇(44mg,0.500mmol)反應。利用製備性HPLC 純化2次(第一次方法16，然後方法17)，產生32mg(58%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.55min,m/z=450[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.46-1.59(m,1H),1.90-2.03(m,1H),2.10(s,3H),2.30(dd,1H),2.36-2.46(m,1H),2.55-2.60(m,1H),2.65-2.72(m,1H),3.47(dd,2H),4.14-4.25(m,1H),4.70(br.s,1H),6.35-6.39(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.96(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),8.17(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例66
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-甲氧基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例59，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)與rac-3-甲氧基哌啶鹽酸鹽(76mg,0.500mmol)反應。得到44mg(74%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.00-1.12(m,1H),1.30-1.45(m,1H),1.55-1.66(m,1H),1.75-1.83(m,1H),1.84-1.96(m,2H),2.10(s,3H),2.53-2.60(m,1H),2.82-2.89(m,1H),3.15-3.23(m,1H),3.20(s,3H),3.32-3.37(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例67
rac-8-[(3-乙氧基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(137mg,69%純度，0.250mmol)與rac-3-乙氧基哌啶(129mg,1.00mmol)反應。得到66mg(54%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.64min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.00-1.12(m,1H),1.05(t,3H),1.30-1.45(m,1H),1.55-1.66(m,1H),1.70-1.80(m,1H),1.80-1.96(m,2H),2.10(s,3H),2.55-2.63(m,1H),2.83-2.89(m,1H),3.22-3.30(m,1H),3.32-3.37(m,2H),3.37-3.48(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例68
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-丙氧基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(137mg,69%純度，0.250mmol)與rac-3-丙氧基哌啶(143mg,1.00mmol)反應。得到85mg(67%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.69min,m/z=506[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.82(t,3H),1.00-1.13(m,1H),1.30-1.50(m,3H),1.57-1.66(m,1H),1.72-1.80(m,1H),1.81-1.95(m,2H),2.10(s,3H),2.55-2.62(m,1H),2.82-2.91(m,1H),3.22-3.33(m,3H),3.34-3.37(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例69
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(120mg,0.317mmol)與rac-3-羥基哌啶(128mg,1.27mmol)反應。得到61mg(42%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.98-1.10(m,1H),1.30-1.47(m,1H),1.52-1.70(m,2H),1.71-1.86(m,2H),2.10(s,3H),2.58-2.63(m,1H),2.70-2.78(m,1H),3.21-3.41(m,2H),3.39-3.47(m,1H),4.51(d,1H),6.36-6.40(m,1H), 6.72(d,1H),6.87-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.41(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例70
ent-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物1)
利用製備性對掌性HPLC(方法18)由40mg消旋性化合物(來自實例69)分離成對映異構物，得到標題化合物。
產量：15mg。
HPLC(方法19)：Rt=7.42min,ee=98%。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.98-1.10(m,1H),1.30-1.47(m,1H),1.52-1.70(m,2H),1.71-1.86(m,2H),2.10(s,3H),2.58-2.63(m,1H),2.70-2.78(m,1H),3.21-3.41(m,2H),3.39-3.47(m,1H),4.51(d,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例71
ent-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物2)
利用製備性對掌性HPLC(方法18)由40mg消旋性化合物(來自實例69)分離成對映異構物，得到標題化合物。
產量：15mg。
HPLC(方法19)：Rt=9.04min,ee=96%。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.98-1.10(m,1H),1.30-1.47(m,1H),1.52-1.70(m,2H),1.71-1.86(m,2H),2.10(s,3H),2.58-2.63(m,1H),2.70-2.78(m,1H),3.21-3.41(m,2H),3.39-3.47(m,1H),4.51(d,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.41(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例72
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-苯氧基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(137mg,69%純度，0.250 mmol)與rac-3-苯氧基哌啶(177mg,1.00mmol)反應。得到94mg(70%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.72min,m/z=540[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.29-1.40(m,1H),1.45-1.60(m,1H),1.67-1.79(m,1H),1.92-2.07(m,3H),2.10(s,3H),2.58-2.67(m,1H),2.85-2.95(m,1H),3.35-3.47(m,2H),4.29-4.40(m,1H),6.36-6.42(m,1H),6.72(d,1H),6.80-6.87(m,1H),6.87-6.95(m,3H),6.95-6.98(m,1H),7.00-7.07(m,2H),7.17-7.25(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.90(s,1H),10.09(s,1H).
實例73
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基-3-苯基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(137mg,69%純度，0.250mmol)與rac-3-苯基哌啶-3-醇(177mg,1.00mmol)反應。得到56mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=540[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.40-1.49(m,1H),1.51-1.60(m,1H),1.73-1.89(m,2H),2.10(s,3H),2.12-2.20(m,1H),2.38-2.44(m,2H),2.57-2.65(m,1H),3.39-3.43(m,2H),4.55(s,1H),6.34-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.95-7.00(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.15-7.23(m,1H),7.25-7.33(m,2H), 7.48-7.55(m,2H),7.78(d,1H),8.14(s,1H),9.41(s,1H),9.88(s,1H),10.06(s,1H).
實例74
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(吡啶-4-基)乙基]胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
在先添加至甲醇(5.0ml)中之4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(51.6mg,80%純度，0.110mmol)中添加2-(吡啶-4-基)乙胺(108mg,0.884mmol)、乙酸(50.6μl,0.884mmol)及氰基氫硼化鈉(34.7mg,0.552mmol)。混合物於室溫下攪拌1h後，與水混合，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，及濃縮至乾。殘質利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18 5μ，100 x 30mm；溶離液A：水，溶離液B：甲醇，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C→1-5.50min 66.2%A，28.8%B，5%C→5.51-5.92min 0%A，95%B，5%C)。得到19.8mg(37%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=2.10min,m/z=485[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.70-2.81(m,4H),3.63(s,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.99(m,2H),6.99-7.07(m,2H),7.23(d,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),8.19(br.s,1H),8.43(d,2H),9.85(s,1H),10.11(s,1H).
實例75
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(1-羥基-3-甲基丁-2-基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(60.0mg,80%純度，0.127mmol)類似實例74，與2-胺基-3-甲基-1-丁醇(105mg,1.02mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18，100 x 30mm，5μm；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C→6.66min 60%A，35%B，5%C)。得到38.0mg(64%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=2.18min,m/z=466[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.86(dd,6H),1.73-1.87(m,1H),2.10(s,3H),2.32(m,1H),3.33(dd,1H),3.47(dd,1H),3.64(d,1H),3.70(d,1H),6.37(d,1H),6.72(d,1H),6.96-7.09(m,4H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),8.18(br.s,1H),9.86(s,1H),10.11(s,1H).
實例76
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(反式-4-羥基環己基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(60.0mg,80%純度，0.127mmol)，類似實例74，與反式-4-胺基環己醇(119mg,1.02mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18，100 x 30mm，5μm；流速：60ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C→1.01-4.96min 69%A，26%B，5%C→5.11min 0%A，95%B，5%C)。得到17.3mg(27%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=1.95min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.04-1.20(m,4H),1.73-1.85(m,2H),1.85-1.97(m,2H),2.10(s,3H),3.28-3.40(m,1H),3.73(s,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.96-7.12(m,4H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),8.22(br.s,1H),9.84(s,1H),10.14(s,1H).
實例77
rac-8-{[(1-環己基乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(60.0mg,80%純度，0.127mmol)，類似實例74，與rac-1-環己基乙基胺(129mg,1.02mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(方法20)。得到42mg(67%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=2.65min,m/z=490[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.89-1.02(m,5H),1.03-1.25(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.55-1.75(m,5H),2.10(s,3H),2.39-2.48(m,1H),3.56-3.62(m,1H),3.65-3.77(m,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.96-7.08(m,4H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),8.21(br.s,1H),9.85(s,1H),10.11(s,1H).
實例78
8-{[(1,3-二羥基丙-2-基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(60.0mg,80%純度，0.127mmol)，類似實例74，與2-胺基丙-1,3-二醇(92.5mg,1.02mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(方法20)。得到34mg(57%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法6,ESIpos)：Rt=1.88min,m/z=454[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.55-2.62(m,1H),3.34-3.39(m,2H),3.40-3.46(m,2H),3.71(s,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.94-7.08(m,4H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),8.18(br.s,1H),9.85(s,1H),10.10(s,1H).
實例79
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸
將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(實例27)(100mg,0.27mmol)與濃鹽酸(37%水溶液，1.5ml)於回流下加熱一夜。混合物隨後冷卻至室溫，並與飽和碳酸鈉水溶液混合。經製備性HPLC純化(方法16)，產生38mg(36%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.70min,m/z=395[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.09(s,3H),6.37-6.42(m,1H),6.75(d,1H),6.95(d,1H),7.02(d,1H),7.44-7.49(m,1H),7.51(d,1H),7.78(d,1H),8.09(s,1H),9.88(s,1H),10.07(s,1H).
實例80
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
於氬氣氛圍下，將來自實例79之化合物(12mg,0.032mmol)溶於DMF(0.45ml)及冷卻至0℃。添加HATU(24mg,0.064mmol)，攪拌混合物20min。 隨後，添加氯化銨(9mg,0.16mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(29mg,0.44mmol)，於室溫下攪拌反應混合物90min。直接進行製備性HPLC純化(方法16)，產生8mg(63%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.64min,m/z=394[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),6.37-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.04(d,1H),7.14(d,1H),7.22(s,1H),7.49-7.54(m,2H),7.75-7.82(m,2H),8.45(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.19(s,1H).
實例81
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-N-(3-羥基環己基)-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
類似實例80，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)與3-胺基環己醇(146mg,1.267mmol)反應。得到13mg(10%理論值)標題化合物之立體異構物混合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.88min；m/z=492(Cl同位素型態，M+H)+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95-1.60(m,5H),1.60-1.85(m,3.2H),1.91-2.01(m,0.8H),2.10(s,3H),3.40-3.55(m,2H),3.70-3.85(m,0.8H),3.93-4.00(m,0.3H),4.10-4.20(m,0.2H),4.35-4.50(m,0.3H),4.60-4.75(m,0.6H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),7.03(d,1H),7.14(d,1H),7.42-7.60(m,2H),7.79(d,1H),7.93(d,0.3H),8.11(d,0.7H),8.40-8.50(m,1H),9.85(s,1H),9.98(s,0.2H),10.17(s,0.8H).
實例82
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基哌啶-1-基)羰基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例80，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)與3-羥基哌啶(128mg,1.267mmol)反應。利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇10：1)後，得到118mg(97%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.62min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.25-1.40(m,2H),1.64-1.80(m,2H),2.10(s,3H),3.07-3.20(m,2H),3.40-4.10(m,3H),4.76(d,1H),6.36-6.40(m,1H),6.71(d,1H),7.00-7.08(m,3H),7.12-7.18(m,1H),7.81(d,1H),8.41(s,1H),9.43(s,1H),9.88(s,1H),10.18(s,1H).
實例83
N-乙基-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
類似實例80，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)與乙基胺(57mg,1.267mmol)反應。利用製備性HPLC純化(方法11)後，再利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18 5μ，100 x 21.2mm；流速：25ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；等濃度52%A，35%B，13%C)後，得到35mg(33%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.68min,m/z=421[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.10(t,3H),2.10(s,3H),3.25(q,2H),6.38(d,1H),6.72(d,1H),7.04(d,1H),7.14(d,1H),7.45-7.51(m,2H),7.80(d,1H),8.29(t,1H),8.44(s,1H),9.43(s,1H),9.86(s,1H),10.19(s,1H).
實例84
N,N-二乙基-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
於氬氣氛圍下，先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)加至DMF(1ml)及冷卻至0℃。添加HATU(193mg,0.507mmol)，攪拌混合物20min。隨後，添加二乙基胺(93mg,1.267mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(229mg,1.775mmol)，續於室溫下攪拌混合物一夜。反應混合物隨後與水混合，及使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇10：1)後，再利用製備性HPLC純化(方法16)，產生19mg(17%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.77min,m/z=450[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.09(t,6H),2.10(s,3H),3.15-3.40(m,4H),6.36-6.41(m,1H),6.73(d,1H),6.96-6.98(m,1H),7.00(dd,1H),7.04(d,1H),7.14(d,1H),7.81(d,1H),8.40(s,1H),9.43(s,1H),9.89(s,1H),10.17(s,1H).
實例85
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(嗎啉-4-基羰基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
於氬氣氛圍下，先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)加至DMF(1ml)及冷卻至0℃。添加HATU(193mg,0.507mmol)，攪拌混合物20min。隨後，添加嗎啉(110mg,1.267mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(229mg,1.775mmol)，於室溫下攪拌混合物一夜。反應混合物隨後 濃縮。殘質利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇10：1)後，再利用製備性HPLC純化(方法16)，產生20mg(17%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.69min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),3.40-3.70(m,8H),6.35-6.41(m,1H),6.72(d,1H),7.02-7.09(m,3H),7.16(d,1H),7.80(d,1H),8.44(s,1H),9.43(s,1H),9.87(s,1H),10.19(s,1H).
實例86
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基吡咯啶-1-基)羰基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例85，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧酸(實例79)(100mg,0.253mmol)與3-羥基吡咯啶(111mg,1.267mmol)反應。得到49mg(40%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.63min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.70-2.00(m,2H),2.10(s,3H),3.17(d,1H),3.40-3.60(m,3H),4.19-4.33(m,1H),4.89-5.01(m,1H),6.38(d,1H),6.73(d,1H),7.04(d,1H),7.10-7.27(m,3H),7.81(d,1H),8.44(s,1H),9.43(s,1H),8.80(s,1H),9.89(s,1H),10.18(br.s,1H).
實例87
8-(胺基甲基)-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
於氬氣氛圍下，先添加4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲腈(實例27)(188mg,0.500mmol)至THF(5ml)中，於室溫下添加氫化鋰鋁(2N THF溶液，1.25ml,2.50mmol)，混合物於回流下加熱90min。反應混合物隨後與水混合，經矽藻土抽吸過濾。殘質使用甲醇洗滌，取濾液濃縮。利用製備性HPLC純化(方法16)後，利用製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18 5μ，100 x 21.2mm；流速：25ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C，7min 30%A，65%B，5%C)，產生5mg(3%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=380[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),3.72(s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.96-7.10(m,4H),7.78(d,1H),8.14(s,1H),8.28(s,1H),9.45(br.s,1H),9.83(s,1H),10.16(s,1H).
實例88
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(120mg,0.317mmol)與rac-甲基哌啶-3-醇(146mg,1.27mmol)反應。得到58mg(38%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.77min,m/z=476[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.10(s,3H),1.28-1.50(m,3H),1.52-1.68(m,1H),2.00-2.08(m,1H),2.10(s,3H),2.12-2.24(m,1H),2.25-2.35(m,1H),3.25-3.42(m,3H),4.07(s,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例89
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2,2,2-三氟乙氧基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例61，4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(137mg,69%純度，0.250mmol)與rac-3-(2,2,2-三氟乙氧基)哌啶(183mg,1.00mmol)反應。得到82mg(60%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=546[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.08-1.20(m,1H),1.30-1.45(m,1H),1.57-1.70(m,1H),1.81-1.98(m,2H),2.09(s,3H),2.83-2.90(m,1H),3.36-3.38(m,2H),3.45-3.55(m,1H),3.96-4.11(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.70(d,1H), 6.88-6.95(m,2H),6.99-7.08(m,2H),7.77(d,1H),8.13(s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例90
4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-8-{[乙基(2-羥基乙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
在4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物13A)(60.0mg,88%純度，0.132mmol)之DMF(1.30ml)溶液中添加2-(乙基胺基)乙醇(47.2mg,0.530mmol)及正甲酸三甲酯(281mg,2.65mmol)，混合物於室溫下攪拌5h。隨後，添加三乙醯氧基氫硼化鈉(112mg,0.530mmol)，混合物於室溫下攪拌一夜。然後添加飽和碳酸氫鈉水溶液，混合物使用乙酸乙酯萃取3次。合併之有機相使用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，及濃縮至乾。所得粗產物利用製備性HPLC純化(管柱：Sunfire C18，75mm x 30mm，5μm，流速：75ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：0-1min 90%A，5%B，5%C→1.01-9.50min 0%A，95%B，5%C)。得到14.5mg(23%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=472[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.97(t,3H),2.44-2.49(m,4H),3.44(t,2H),3.47(s,2H),6.48(d,1H),6.90-6.98(m,3H),7.04(d,1H),7.42(d,1H),7.84(d,1H),8.16(br.s,1H),8.17(s,1H),9.98(s,1H),10.12(s,1H).
實例91
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({3-羥基-4-[(2-羥基乙基)胺基]吡咯啶-1-基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例59，由4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A)(69mg,69%純度，0.125mmol)與4-[(2-羥基乙基)胺基]吡咯啶-3-醇鹽酸鹽(91mg,0.500mmol)反應。經製備性HPLC純化(管柱：Kinetex C18 5μ，100 x 21.2mm；流速：25ml/min；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；等濃度48%A，40%B，12%C)後，再經製備性HPLC純化(方法16)，得到5mg(7%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=509[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.09-2.17(m,1H),2.30-2.39(m,1H),2.50-2.70(m,3H),2.72-2.81(m,1H),2.82-2.94(m,1H),3.33-3.49(m,4H),3.75-3.85(m,1H),4.40-4.49(m,1H),4.74-4.80(m,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.86-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.50-7.70(m,1H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.41(s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例92
8-({[(1-乙基吡咯啶-2-基)甲基]胺基}甲基)-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
在先加至96-孔多重滴定盤中之19mg(0.15mmol)1-(1-乙基吡咯啶-2-基)甲胺中添加含36mg(0.10mmol)4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物6A)之0.6ml乙醇溶液。在此溶液中添加9mg(0.15mmol)乙酸及13mg(0.2mmol)氰基氫硼化鈉。蓋上多重滴定盤，於室溫下振盪18h。隨後濾出混合物，濾液完全濃縮。所得殘質溶於0.6ml DMSO，及依下列方法進行製備性LC/MS：MS儀器：Waters,HPLC儀器：Waters；管柱：Waters X-Bridge C18，18mm x 50mm，5μm；溶離液A：水+0.05%三乙胺，溶離液B：乙腈+0.05%三乙胺；梯度：0.0min 95%A→0.15min 95%A→8.0min 5%A→9.0min 5%A；流速：40ml/min；UV檢測：DAD,210-400nm。或MS儀器：Waters,HPLC儀器：Waters；管柱：Phenomenex Luna 5μ C18(2)100A,AXIA Tech.,50mm x 21.2mm；溶離液A：水+0.05%甲酸，溶離液B：乙腈+0.05%甲酸；梯度：0.0min 95%A→0.15min 95%A→8.0min 5%A→9.0min 5%A；流速：40ml/min；UV檢測：DAD,210-400nm。
使用離心乾燥機將含產物之溶出液減壓濃縮。各溶出液殘質溶於0.6ml DMSO中，並合併。隨後，於離心乾燥機中完全蒸發排除溶劑。依此方式得到16.5g(35%理論值)目標產物，純度100%。
LC/MS(方法10,ESIpos)：Rt=0.94min；m/z=473(M+H)+。
採用類似實例92之平行合成法，由4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物6A)及適當胺組份製備下列化合物：
實例158
ent-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物1)
由來自實例58之消旋性化合物(14mg)利用製備性對掌性HPLC(方法21)分離成對映異構物，得到標題化合物。產量：2mg。
HPLC(方法22)：Rt=9.91min,ee=97%.
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.53min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.76-0.91(m,1H),1.20-1.48(m,3H),1.50-1.70(m,4H),1.75-1.88(m,1H),2.10(s,3H),2.60-2.76(m,2H),3.36-3.42(m,2H),4.30(t,1H),6.35-6.41(m,1H),6.74(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.03(d,1H),7.06(s,1H),7.80(d,1H),8.14(s,1H),9.42(s,1H),9.89(s,1H),10.09(s,1H).
實例159
ent-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物2)
由來自實例58之消旋性化合物(14mg)利用製備性對掌性HPLC(方法21)分離成對映異構物，得到標題化合物。產量：2mg。
HPLC(方法22)：Rt=13.19min,ee=87%。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.76-0.91(m,1H),1.20-1.48(m,3H),1.50-1.70(m,4H),1.75-1.88(m,1H),2.11(s,3H),2.63-2.77(m,2H),3.36-3.42(m,2H),4.30(t,1H),6.35-6.41(m,1H),6.74(d,1H),6.87-6.96(m,2H),7.03(d,1H),7.06(s,1H),7.80(d,1H),8.14(s,1H),9.42(s,1H),9.89(s,1H),10.09(s,1H).
實例160
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2S,4R)-4-羥基-2-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]羰基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
於氬氣氛圍下，取來自實例79之化合物(99mg,0.250mmol)溶於DMF(1ml)，及冷卻至0℃。添加HATU(190mg,0.5mmol)，再攪拌混合物20min。隨後，添加(3R,5S)-5-羥基甲基-3-吡咯啶醇鹽酸鹽(77mg,0.5mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(129mg,1mmol)，於室溫下再攪拌反應混合物30min。經矽膠層析法純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇9：1→8：2)後，經製備性HPLC純化(方法16)，產生15mg(12%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=494[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.85-1.93(m,1H),1.94-2.03(m,1H),2.11(s,3H),3.50-3.57(m,2H),3.59-3.65(m,1H),4.13-4.20(m,1H),4.20-4.30(m,1H),4.73(br.s,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.04(d,1H), 7.10-7.20(m,3H),7.81(d,1H),8.45(s,1H),9.43(s,1H),9.91(s,1H),10.19(s,1H).
實例161
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[4-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]羰基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
於氬氣氛圍下，取來自實例79之化合物(100mg,0.253mmol)溶於DMF(1ml)，及冷卻至0℃。添加HATU(193mg,0.507mmol)，再攪拌混合物20min。隨後，添加4-哌啶乙醇(66mg,0.507mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(66mg,0.507mmol)，於室溫下再攪拌反應混合物30min。經矽膠層析法純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇95：5→85：15)後，經製備性HPLC純化(方法16)，產生30mg(23%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.89min,m/z=506[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.00-1.15(m,2H),1.37(q,2H),1.58-1.74(m,3H),2.10(s,3H),2.60-3.10(m,2H),3.40-3.50(m,2H),3.51-3.80(m,1H),4.10-4.50(m,1H),4.36(t,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.99-7.07(m,3H),7.15(d,1H),7.81(d,1H),8.40(s,1H),9.43(s,1H),9.88(s,1H),10.17(s,1H).
實例162
N-乙基-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-N-(2-羥基乙基)-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
類似實例161，由來自實例79之化合物(100mg,0.254mmol)與2-(乙基胺基)乙醇(45mg,0.507mmol)反應。得到29mg(25%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.86min,m/z=466[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.02-1.15(m,3H),2.01(s,3H),3.35-3.60(m,4H),4.73(t,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.99-7.07(m,3H),7.14(d,1H),7.81(d,1H),8.38(s,1H),9.43(s,1H),9.88(s,1H),10.16(s,1H).
實例163
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[4-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取中間物11A(95mg,80%純度，0.200mmol)溶於1.2ml DMF。於室溫下添加4-哌啶乙醇(103mg,0.8mmol)及正甲酸三甲酯(531mg,4mmol)。所得混合物於室溫下攪拌一夜。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(170mg,0.8mmol)，於室溫下再次攪拌混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，混合物濃縮。殘質溶於15ml DMF，及過濾，濾液再濃縮一次。經製備性HPLC純化(方法16)，產生25mg(24%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.74min,m/z=490[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.05-1.16(m,2H),1.26-1.40(m,3H),1.53-1.65(m,2H),1.84(t,2H),2.10(s,3H),2.70-2.78(m,2H),3.36-3.45(m,2H),4.29(t,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.41(s,1H),9.87(s,1H),10.07(s,1H).
實例164
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[順式-2-(羥基甲基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取中間物11A(200mg,60%純度，0.317mmol)溶於1.9ml DMF。添加順式-3-氮雜雙環[3.1.0]己-2-基甲醇(143mg,1.269mmol)[其製法可參見例如：WO 2008/150364-A1,p.34]及正甲酸三甲酯(673mg,6.34mmol)。所得混合物於40℃下攪拌一夜。然後於室溫下添加三乙醯氧基氫硼化鈉(269mg,1.27mmol)，再次於室溫下攪拌混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，混合物濃縮。殘質溶於5ml DMF及過濾，濾液再濃縮一次。經製備性HPLC純化(方法16)，產生49mg(32%理論值)標題化合物之異構物混合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.58min,m/z=476[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.14-0.25(m,1H),0.57-0.62(m,1H),1.20-1.33(m,2H),1.48-1.55(m,1H),2.10(s,3H),2.26-2.35(m,1H),2.66-2.70(m,1H),2.77-2.82(m,1H),3.13-3.18(m,1H),3.52-3.59(m,1H),3.82-3.88(m,1H),4.53(t,1H),6.36-6.40(m,1H),6.74(d,1H),6.83-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.09(s,1H),9.48(s,1H),9.87(s,1H),10.05(s,1H).
實例165
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基-3,4-二甲基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例164，由中間物11A(200mg,60%純度，0.317mmol)與3,4-二甲基哌啶-4-醇(164mg,1.27mmol)反應。得到90mg(58%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.78(d,3H),0.95(s,3H),1.47-1.55(m,2H),1.55-1.65(m,1H),1.70-1.85(m,1H),1.97-2.09(m,1H),2.10(s,3H),4.13(s,1H),6.36-6.40(m,1H),6.73(d,1H),6.88-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.44(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例166
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基-3,3-二甲基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例164，由中間物11A(200mg,60%純度，0.317mmol)與rac-3,3-二甲基哌啶-4-醇(164mg,1.27mmol)反應。得到123mg(71%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.82(s,3H),0.88(s,3H),1.47-1.55(m,2H),1.60-1.70(m,1H),1.91-2.00(m,1H),2.10(s,3H),2.27-2.33(m,1H),2.61-2.70(m,1H),3.02-3.09(m,1H),3.20-3.30(m,2H),4.41(d,1H),6.36-6.40(m,1H),6.76(d,1H),6.88-6.95(m,2H),7.01-7.05(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.49(s,1H),9.88(s,1H),10.10(s,1H).
實例167
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2-羥基乙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取中間物11A(110mg,71%純度，0.206mmol)溶於DMF(2ml)及乙酸(0.2ml)。添加乙醇胺(50mg,0.826mmol)，於室溫下攪拌混合物一夜。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(175mg,0.826mmol)，再於室溫下攪拌混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，混合物濃縮。殘質溶於10ml DMF及過濾，濾液再濃縮一次。經製備性HPLC純化(方法16)，產生19mg(22%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.68min,m/z=422[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.11(s,3H),2.88-2.98(m,2H),3.60-3.65(m,2H),4.03-4.07(m,2H),5.18(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),7.01-7.09(m,2H),7.12-7.18(m,2H),7.80(d,1H),8.37(s,1H),8.70(br.s,1H),9.44(s,1H),9.84(s,1H),10.28(s,1H).
實例168
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(1-羥基丙-2-基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例167，由中間物11A(110mg,71%純度，0.206mmol)與rac-2-胺基丙-1-醇(62mg,0.826mmol)反應。進行製備性HPLC純化(方法23)。合併含產物之溶出液，與碳酸氫鈉水溶液混合，及濃縮。殘質與二氯甲烷/甲醇(2：1,30ml)磨製，及抽吸濾出固體。濾液濃縮，殘質溶於乙酸乙酯，使用水萃取。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。依此方式得到29mg(29%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.52min,m/z=438[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.11(d,3H),2.10(s,3H),2.86-3.05(m,1H),3.35-3.45(m,1H),3.46-3.60(m,1H),3.80-4.05(m,2H),5.09(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.01-7.07(m,2H),7.10-7.16(m,2H),7.79(d,1H),8.25(s,1H),9.43(s,1H),9.83(s,1H),10.22(s,1H).
實例169
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[1-羥基-3-(甲基硫基)丙-2-基]胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例167，由中間物11A(110mg,70%純度，0.204mmol)與rac-2-胺基-3-(甲基硫基)丙-1-醇(123mg,0.814mmol)反應。進行製備性HPLC純化(方法23)。合併含產物之溶出液，與碳酸氫鈉水溶液混合及濃縮。殘質與二氯甲烷/甲醇(2：1,30ml)磨製，及抽吸濾出固體。濾液濃縮，殘質溶於乙酸乙酯，使用水萃取。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到71mg(66%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.03(s,3H),2.10(s,3H),2.55-3.00(m,3H),3.40-3.53(m,2H),3.70-3.80(m,2H),4.74(br.s,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.01-7.09(m,4H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.43(s,1H),9.85(s,1H),10.14(s,1H).
實例170
rac-8-[(3,4-順式-二羥基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例164，由中間物11A(200mg,60%純度，0.317mmol)與rac-順式-3,4-哌啶二醇(149mg,1.27mmol)反應。得到34mg(21%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.54min,m/z=480[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.45-1.56(m,1H),1.57-1.67(m,1H),2.10(s,3H),2.17-2.37(m,4H),3.40-3.57(m,2H),3.60-3.65(m,1H),4.17(d,1H),4.26(d,1H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.95(m,2H),7.01-7.05(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例171
rac-8-[(3,4-反式-二羥基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例164，由中間物11A(200mg,60%純度，0.317mmol)與rac-反式-3,4-哌啶二醇(149mg,1.27mmol)反應。得到25mg(15%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.55min,m/z=480[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.29-1.39(m,1H),1.64-1.75(m,2H),1.85-1.93(m,1H),2.09(s,3H),2.61-2.69(m,1H),2.70-2.76(m,1H),3.06-3.15(m,1H),3.15-3.23(m,1H),4.63(br.s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.70(d,1H),6.87-6.93(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.77(d,1H),8.12(s,1H),9.86(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例172
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2S,3R)-1-羥基-3-甲基戊-2-基]胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例167，由中間物11A(110mg,70%純度，0.204mmol)與(S)-(+)-異白胺醇(95mg,0.814mmol)反應。進行製備性HPLC純化(方法23)。合併含產物之溶出液，與碳酸氫鈉水溶液混合後，大幅濃縮。殘留之水相使用乙酸乙酯重覆萃取。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到64mg(60%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.79min,m/z=478[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.80-0.90(m,6H),1.08-1.17(m,1H),1.41-1.49(m,1H),1.49-1.60(m,1H),2.10(s,3H),2.30-2.40(m,1H),3.40-3.52(m,1H),3.57-3.65(m,2H),4.35(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.92-7.00(m,2H),7.01-7.06(m,2H),7.78(d,1H),8.10(s,1H),9.41(s,1H),9.86(s,1H),10.10(br.s,1H).
實例173
N 2 -({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)-L-絲胺醯胺
類似實例167，由中間物11A(110mg,70%純度，0.204mmol)與L-絲胺醯胺鹽酸鹽(114mg,0.814mmol)反應。進行製備性HPLC純化(方法23)。合併含產物之溶出液，與碳酸氫鈉水溶液混合後，大幅濃縮。殘留之水相使用乙酸乙酯重覆萃取。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到61mg(64%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.66min,m/z=467[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.95-3.00(m,1H),3.40-3.54(m,3H),3.60-3.67(m,1H),4.68(t,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.95-7.00(m,2H),7.01-7.11(m,3H),7.26(m,1H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.42(s,1H),9.85(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例174
4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-8-[(二乙基胺基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
由中間物13A(65mg,88%純度，0.143mmol)類似實例90，與二乙基胺(42mg,0.574mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(方法16)。得到6mg(9%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.63min,m/z=456[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,6H),2.42(q,4H),3.40(s,2H),6.49(d,1H),6.91-6.98(m,3H),7.04(d,1H),7.42(d,1H),7.84(d,1H),8.17(s,1H),9.99(s,1H),10.13(s,1H),10.24(br.s,1H).
實例175
4-[(4-氯-2-氟-5-羥苯基)胺基]-8-[(4-羥基哌啶-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
由中間物13A(65mg,88%純度，0.143mmol)類似實例90，與4-羥基哌啶(58mg,0.574mmol)反應。粗產物利用製備性HPLC純化(方法16)。得到7mg(10%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5)：Rt=0.59min,m/z=484[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.30-1.42(m,2H),1.62-1.74(m,2H),1.92-2.05(m,2H),2.57-2.71(m,2H),3.38-3.51(m,1H),4.51(d,1H),6.49(d,1H),6.87-6.97(m,3H),7.05(d,1H),7.42(d,1H),7.84(d,1H),8.19(s,1H),9.98(s,1H),10.13(s,1H),10.24(s,1H).
實例176
(3S,4S)-4-{[({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)胺基]甲基}-3-羥基哌啶-1-羧酸第三丁基酯
取中間物11A(250mg,60%純度，0.396mmol)溶於0.95ml DMF。添加(3S,4S)-4-(胺基甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸第三丁基酯(365mg,1.586mmol)， 添加正甲酸三甲酯(841mg,7.93mmol)，於40℃下攪拌混合物一夜。然後於室溫下添加三乙醯氧基氫硼化鈉(336mg,1.59mmol)，續於室溫下攪拌反應混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，隨後濃縮混合物。殘質溶於10ml DMF，過濾，並再濃縮一次。殘質經製備性HPLC純化(方法16)，產生40mg(17%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.68min,m/z=593[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95-1.05(m,1H),1.37(s,9H),1.55-1.70(m,1H),2.10(s,3H),2.2-2.45(m,3H),2.6-2.75(m,3H),3.09-3.17(m,1H),3.50-3.62(m,2H),3.80-4.00(m,3H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.83-6.97(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.10(s,1H),9.85(s,1H),10.10(s,1H).
實例177
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(羥基甲基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例176，由中間物11A(250mg,60%純度，0.396mmol)與吡咯啶-3-基甲醇(160mg,1.59mmol)反應。得到31mg(17%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.52min,m/z=464[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.31-1.36(m,1H),1.74-1.85(m,1H),2.10(s,3H),2.15-2.25(m,2H),2.37-2.43(m,2H),3.22-3.29(m,2H),3.38-3.60(m,3H),4.50(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.47(br.s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例178
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-羥基哌啶-1-基)羰基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
於氬氣氛圍下，取來自實例79之化合物(100mg,0.254mmol)溶於DMF(1.0ml)，及冷卻至0℃。添加HATU(193mg,0.507mmol)，攪拌混合物20min。隨後，添加4-羥基哌啶(51mg,0.507mmol)及N,N-二異丙基乙基胺(66mg,0.507mmol)，於室溫下攪拌反應混合物30min。直接經製備性HPLC純化(方法16)，產生40mg(31%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.82min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.31-1.35(m,2H),1.70-1.75(m,2H),2.10(s,3H),3.10-3.18(m,2H),3.47-3.71(m,1H),3.71-3.73(m,1H),3.73-4.00(m,1H),4.76(d,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.00-7.04(m,1H),7.03-7.06(m,1H),7.12-7.17(m,1H),7.80(d,1H),8.41(s,1H),9.44(br.s,1H),9.88(s,1H),10.18(s,1H).
實例179
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]羰基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例178，來自實例79之化合物(100mg,0.254mmol)與2-(哌啶-3-基)乙醇(66mg,0.507mmol)反應。利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇9：1)後，再經製備性HPLC純化(方法16)，得到32mg(25%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.92min,m/z=506[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.13-1.40(m,4H),1.50-1.71(m,2H),1.79-1.85(m,1H),3.10(s,3H),2.60-3.00(m,2H),3.36-3.72(m,3H),4.00-4.40(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.00-7.07(m,3H),7.12-7.17(m,1H),7.80(d,1H),8.41(s,1H),9.43(s,1H),9.89(s,1H),10.17(s,1H).
實例180
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-N-(反式-4-羥基環己基)-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
類似實例178，來自實例79之化合物(100mg,0.254mmol)與反式-4-胺基環己醇(58mg,0.507mmol)反應。利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷/甲醇95：5→二氯甲烷/甲醇90：10)後，再經製備性HPLC純化(方法16)，得到30mg(22%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.86min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.17-1.40(m,4H),1.75-1.86(m,4H),2.10(s,3H),3.33-3.39(m,1H),3.63-3.71(m,1H),4.53(d,1H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),7.04(d,1H),7.13(d,1H),7.46-7.50(m,1H),7.80(d,1H),7.99(d,1H),8.52(s,1H),9.44(s,1H),9.85(s,1H),10.16(s,1H).
實例181
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基]羰基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例178，來自實例79之化合物(100mg,0.254mmol)與2-(吡咯啶-3-基)乙醇(58mg,0.507mmol)反應。利用矽膠層析純化(溶離液：二氯甲烷→二氯甲烷/甲醇90：10)後，再經製備性HPLC純化(方法16)，得到14mg(11%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.39-1.57(m,3H),1.93-2.09(m,1H),2.11(s,3H),2.13-2.24(m,1H),3.00-3.15(m,1H),3.38-3.66(m,5H),6.35-6.40(m,1H),6.71(d,1H),7.04(d,1H),7.11-7.21(m,3H),7.81(d,1H),8.46(s,1H),9.43(s,1H),9.91(s,1H),10.18(s,1H).
實例182
rac-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3-(2-羥基乙基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
取中間物11A(135mg,70%純度，0.250mmol)溶於2.6ml二烷中。添加2-(吡咯啶-3-基)乙醇(115mg,1.00mmol)及正甲酸三甲酯(530mg,5.00mmol)，於40℃下攪拌混合物6h。然後於室溫下添加三乙醯氧基氫硼化鈉(212mg,1.00mmol)，續於室溫下攪拌反應混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，隨後濃縮混合物。殘質溶於15ml DMF，過濾，並再濃縮一次。殘質經製備性HPLC純化(方法16)，產生70mg(56%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.72min,m/z=476[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.26-1.36(m,1H),1.43-1.50(m,2H),1.83-1.93(m,1H),1.96-2.02(m,1H),2.09-2.17(m,1H),2.10(s,3H),2.30-2.38(m,1H),2.62-2.68(m,1H),3.34-3.37(m,2H),3.42(s,2H),4.34(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.12(s,1H),9.45(br.s,1H),9.87(s,1H),10.08(s,1H).
實例183
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4a-羥基八氫異喹啉-2(1H)-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例176，中間物11A(250mg,60%純度，0.396mmol)與八氫異喹啉-4a(2H)-醇(246mg,1.59mmol)反應。得到31mg(14%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.64min,m/z=518[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.00-1.65(m,12H),2.10(s,3H),2.17-2.25(m,1H),2.45-2.49(m,1H),3.25-3.29(m,2H),4.00(s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.94(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.11(s,1H),9.41(br.s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例184
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2R)-1-羥基-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-基]胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將中間物11A(110mg,70%純度，0.204mmol)溶於2ml DMF與0.197ml乙酸。添加L-(-)-組胺醇二鹽酸鹽(174mg,0.814mmol)，於室溫下攪拌混合物一夜。然後於室溫下添加三乙醯氧基氫硼化鈉(173mg,0.814mmol)，續於室溫下攪拌反應混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，隨後濃縮混合物。殘質溶於15ml DMF，過濾，並再濃縮一次。殘質經製備性HPLC純化(方法16)，產生28mg(26%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.62min,m/z=502[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.80-1.90(m,1H),2.09(s,3H),2.50-2.60(m,2H),2.66-2.73(m,1H),3.60-3.64(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.70(d,1H),6.87-6.96(m,2H),6.99-7.07(m,2H),7.49(s,1H),7.77(d,1H),8.07(s,1H),9.85(s,1H),10.06(br.s,1H).
實例185
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜-26-氮雜二十七碳烷-27-基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(81mg,70%純度，0.150mmol)與2,5,8,11,14,17,20,23-八氧雜二十五碳烷-25-胺(230mg,0.600mmol)反應。得到58mg(52%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.65min,m/z=746[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.61(t,2H),3.40-3.55(m,30H),3.59(s,2H),6.36-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.87-6.97(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.09(s,1H),9.42(br.s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例186
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(13-羥基-5,8,11-三氧雜-2-氮雜十三碳烷-1-基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與2-{2-[2-(2-胺基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙醇(155mg,0.800mmol)反應。得到59mg(49%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.55min,m/z=556[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.83-1.95(m,1H),2.09(s,3H),2.58-2.63(m,2H),3.35-3.54(m,16H),3.56-3.61(m,2H),6.36-6.40(m,1H),6.70(d,1H),6.93-6.97(m,2H),6.98-7.07(m,2H),7.76(d,1H),8.08(s,1H),9.85(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例187
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-羥基環丁基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與3-胺基環丁醇鹽酸鹽(99mg,0.800mmol)反應。得到29mg(31%理論值)標題化合物之順式與反式異構物之混合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.52min,m/z=450[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.47-1.53(m,1.4H),1.88-1.97(m,1.2H),2.10(s,3H),2.33-2.43(m,1.5H),3.19-3.23(m,0.2H),3.45-3.49(m,2H),3.67-3.75(m,0.7H),4.21-4.25(m,0.2H),4.78(d,0.2H),4.84(d,0.7H),6.35-6.40(m,1H),6.70(d,1H),6.88-6.97(m,2H),6.98-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.08(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例188
8-[(環丁基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與環丁基胺(57mg,0.800mmol)反應。得到38mg(42%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.57min,m/z=434[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.46-1.72(m,6H),2.00-2.08(m,2H),2.10(s,3H),3.06-3.15(m,1H),3.48(s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.99(m,2H),6.99-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.08(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例189
8-{[(3,3-二氟環丁基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與3,3-二氟環丁基胺(115mg,0.800mmol)反應。得到57mg(58%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.58min,m/z=470[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.22-2.38(m,2H),2.62-2.75(m,2H),3.03-3.15(m,1H),3.51(s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.99(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.10(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.09(s,1H).
實例190
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-異丙氧基環丁基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與3-異丙氧基環丁基胺(103mg,0.800mmol)反應。得到63mg(61%理論值)標題化合物之順式與反式異構物之混合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.67min,m/z=492[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.02(d,3H),1.03(d,3H),1.48-1.57(m,1H),1.91-2.00(m,1.6H),2.10(s,3H),2.38-2.46(m,1H),2.61-2.68(m,0.7H),3.15-3.21(m,0.4H),3.46-3.54(m,3H),3.57-3.66(m,0.6H),4.12-4.17(m,0.4H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.99(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.08(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例191
順式-3-[({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)胺基]環丁烷羧酸乙基酯
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與順式-3-胺基環丁烷羧酸乙基酯鹽酸鹽(97mg,0.800mmol)反應。進行製備性HPLC純化(方法23)。合併含產物之溶出液，與碳酸氫鈉水溶液混合。混合物幾乎完全濃縮後，使用乙酸乙酯萃取。合併之有機相經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到9mg(9%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIneg)：Rt=0.82min,m/z=504[M-H]-。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.16(t,3H),1.95-2.05(m,2H),2.10(s,3H),2.20-2.31(m,2H),2.90-3.05(m,1H),3.45-3.60(m,2H),4.05(q,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.99(m,2H),7.01-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.10(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.10(s,1H).
實例192
反式-3-[({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)胺基]環丁烷羧酸乙基酯
類似實例184，中間物11A(108mg,70%純度，0.200mmol)與反式-3-胺基環丁烷羧酸乙基酯鹽酸鹽(97mg,0.800mmol)反應。得到47mg(45%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.61min,m/z=506[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.16(t,3H),1.77-1.87(m,2H),2.10(s,3H),2.24-2.34(m,2H),2.60-2.73(m,1H),2.99-3.06(m,1H),3.49(s,2H),4.02(q,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.88-6.99(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.10(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.08(s,1H).
實例193
8-[(二乙基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮鹽酸鹽
將來自實例28之化合物(138mg,0.317mmol)溶於丙酮(16.5ml)，添加1N鹽酸(317μl,0.317mmol)。混合物於室溫下2天慢慢濃縮至乾。得到133mg(89%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.56min,m/z=436[M+H]+。
離子層析法(方法24)：實測值：8.5%氯離子；換算成單鹽酸鹽：7.51%氯離子。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.23(t,6H),2.11(s,3H),3.01(q,4H),4.10-4.20(m,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),7.04(d,1H),7.13(s,1H),7.16-7.20(m,1H),7.23-7.30(m,1H),7.81(d,1H),8.48(s,1H),9.51(s,1H),9.89(s,1H),10.02(br.s,1H),10.27(s,1H).
實例194
rac-8-({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)-3-甲基四氫-2H-吡並[1,2-a]吡-1,4(3H,6H)-二酮
將中間物11A(250mg,60%純度，0.396mmol)溶於1.8ml DMF。添加3-甲基四氫-2H-吡並[1,2-a]吡-1,4(3H,6H)-二酮(291mg,1.586mmol)及正甲酸三甲酯(841mg,7.93mmol)，混合物於室溫下攪拌一夜。然後於室溫下添加三乙醯氧基氫硼化鈉(336mg,1.59mmol)，續於室溫下攪拌反應混合物一夜。然後添加碳酸氫鈉水溶液，隨後濃縮混合物。殘質溶於15ml DMF，過濾，並再濃縮一次。殘質經製備性HPLC純化(方法16)，產生19mg(8%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7,ESIpos)：Rt=0.77min,m/z=546[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.29(d,3H),1.84-1.94(m,2H),2.09(s,3H),2.60-2.70(m,1H),2.77-2.85(m,1H),3.10-3.20(m,1H),3.43(s,2H),3.87-4.04(m,2H),4.20-4.30(m,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.98(m,2H),7.00-7.09(m,2H),7.78(d,1H),8.16(s,1H),9.30(s,1H),9.85(s,1H),10.11(br.s,1H).
實例195
反式-3-[({4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)胺基]環丁烷羧酸
先將來自實例192之化合物(43mg,0.085mmol)加至THF/水(4：1,5ml)中，於室溫下添加氫氧化鋰(2mg,0.1mmol)，混合物於室溫下攪拌90min。反應溶液隨後濃縮，殘質溶於THF(5ml)，添加1N氫氧化鈉溶液(408μl,0.408mmol)。於室溫下攪拌30min後，添加1M鹽酸(0.306ml)，混合物完全濃縮。殘質利用製備性HPLC純化(方法16)，產生28mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.51min,m/z=478[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.77-1.87(m,2H),2.10(s,3H),2.24-2.34(m,2H),2.55-2.64(m,1H),2.99-3.10(m,1H),3.52(s,2H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.98(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.78(d,1H),8.09(s,1H),9.41(s,1H),9.85(s,1H),10.09(s,1H).
實例196
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-[(4-異丙基-3,3-二甲基-5-側氧基哌-1-基)甲基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例176，中間物11A(250mg,60%純度，0.396mmol)與1-異丙基-6,6-二甲基哌-2-酮(270mg,1.59mmol)反應。得到39mg(19%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.82min,m/z=533[M+H]+。
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.21(s,6H),1.31(d,6H),2.10(s,3H),2.32(s,2H),2.87(s,2H),3.34(s,2H),3.44-3.54(m,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.00-7.09(m,2H),7.78(d,1H),8.17(s,1H),9.41(s,1H),9.88(s,1H),10.12(s,1H).
實例197
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-(哌-1-基甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌-1-羧酸第三丁基酯(中間物21A；46.4mg,0.070mmol)溶於4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1,3.3ml)，於室溫下攪拌20min。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物，經製備性HPLC純化(方法29)。合併含產物之溶出液，及濃縮。所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到12mg(38%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.33min；MS(ESIneg)：m/z=447[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.25(br.s,4H),2.66(t,4H),6.38(dd,1H),6.73(d,1H),6.88-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.43(br.s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例198
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2-羥基乙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(2-羥基乙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物22A；50mg,0.091mmol)溶於1,4-二烷(3.7ml)與37%鹽酸(1.8ml)之混合物，於室溫下攪拌混合物30min。反應混合物隨後濃縮，殘質溶於乙腈與水之混合物，及經製備性HPLC純化(方法30)。合併含產物之溶出液，及濃縮。所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到15.4mg(40%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.70min；MS(ESIpos)：m/z=438[M+H]+
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.10-2.19(m,3H),2.36-2.45(m,2H),3.34-3.43(m,2H),3.44-3.55(m,2H),4.32(br.s,1H),6.35-6.40(m,1H),6.72(d,1H),6.89-6.99(m,2H),6.99-7.09(m,2H),7.79(d,1H),8.13(br.s,1H),9.41(s,1H),9.87(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例199
8-({[2-(二甲基胺基)乙基](乙基)胺基}甲基)-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(二甲基胺基)乙基](乙基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物23A；57mg,0.081mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到30.1mg(39%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.49min；MS(ESIneg)：m/z=477[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),2.10(s,9H),2.27-2.34(m,2H),2.40-2.48(m,4H),3.43(s,2H),6.38(d,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.03(d,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例200
8-{[(2-胺基乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，8-{[(2-胺基乙基)(乙基)胺基]甲基}-4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物25A；40.5mg,0.072mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到31mg(96%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.64min；MS(ESIneg)：m/z=449[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.96(t,3H),2.10(s,3H),2.37(t,2H),2.43(q,2H),2.57(t,2H),3.42(s,2H),3.45-3.52(m,1H),3.65-3.73(m,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.93(dd,1H),6.98(s,1H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.88(s,1H),10.10(br.s,1H).
實例201
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2R)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2R)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物26A；73.1mg,0.129mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到22mg(38%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.74min；MS(ESIneg)：m/z=450[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.04(d,3H),2.10(s,3H),2.11(s,3H),2.14-2.31(m,2H),3.37(q,2H),3.69-3.80(m,1H),4.21(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.41(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例202
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2S)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[(2S)-2-羥基丙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物27A；74.8mg,0.132mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到24.2mg(41%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.73min；MS(ESIneg)：m/z=450[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.04(d,3H),2.10(s,3H),2.11(s,3H),2.14-2.31(m,2H),3.37(q,2H),3.70-3.81(m,1H),4.21(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.08(s,1H).
實例203
8-({[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}甲基)-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
將4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-({[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}甲基)-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽；中間物28A；50mg,0.072mmol)溶於4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1；3.3ml)，於室溫下攪拌混合物20min。反應混合物隨後濃縮。所得殘質與飽和碳酸氫鈉水溶液混合，使用乙酸乙酯萃取3次。合併有機相，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮。得到30.5mg(91%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.66min；MS(ESIneg)：m/z=463[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.07-2.11(m,6H),2.11(s,6H),2.29-2.43(m,4H),3.35(s,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.95(m,2H), 7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例204
rac-8-{[乙基(2-羥基丙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[乙基(2-羥基丙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物29A；40mg,0.058mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到30.2mg(全收量)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.73min；MS(ESIneg)：m/z=464[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),1.03(d,3H),2.10(s,3H),2.22-2.36(m,2H),2.38-2.47(m,2H),3.46(q,2H),3.65-3.73(m,1H),4.15(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.92-6.98(m,2H),7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.41(s,1H),9.89(s,1H),10.08(s,1H).
實例205
ent-8-{[乙基(2-羥基丙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物1)
利用製備性HPLC將30mg來自實例204之消旋性化合物於對掌性固相上分離(方法31)，得到標題化合物。
產量：5mg
HPLC(方法32)：Rt=7.32min,ee-Wert=98%
LC/MS(方法25)：Rt=0.87min；MS(ESIneg)：m/z=464[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),1.03(d,3H),2.10(s,3H),2.22-2.28(m,1H),2.30-2.35(m,1H),2.40-2.46(m,2H),3.46(q,2H),3.65-3.73(m,1H),4.15(d,1H),6.37(dd,1H),6.73(d,1H),6.92-6.99(m,2H),7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.44(br.s,1H),9.89(s,1H),10.08(s,1H).
實例206
ent-8-{[乙基(2-羥基丙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物2)
利用製備性HPLC將30mg來自實例204之消旋性化合物於對掌性固相上分離(方法31)，得到標題化合物。
產量：3.5mg
HPLC(方法32)：Rt=8.62min,ee=98%
LC/MS(方法25)：Rt=0.87min；MS(ESIneg)：m/z=464[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),1.03(d,3H),2.10(s,3H),2.22-2.28(m,1H),2.29-2.34(m,1H),2.40-2.46(m,2H),3.46(q,2H),3.65-3.74(m,1H),4.15(d,1H),6.37(dd,1H),6.73(d,1H),6.92-6.99(m,2H),7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.42(s,1H),9.89(s,1H),10.08(s,1H).
實例207
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，由4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物30A；50mg,0.074mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到30mg(91%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.68min；MS(ESIneg)：m/z=448[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.47-1.57(m,1H),1.92-2.01(m,1H),2.10(s,3H),2.26(dd,1H),2.38(td,1H),2.48-2.56(m,1H),2.65(dd,1H),3.43(q,2H),4.13-4.21(m,1H),4.63(d,1H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.96(m,2H),7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.08(s,1H).
實例208
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物31A；47mg,0.069mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到28mg(90%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.69min；MS(ESIneg)：m/z=448[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.46-1.57(m,1H),1.91-2.02(m,1H),2.10(s,3H),2.26(dd,1H),2.38(td,1H),2.49-2.56(m,1H),2.65(dd,1H),3.43(q,2H),4.13-4.21(m,1H),4.63(d,1H),6.38(d,1H),6.72(d,1H),6.88-6.96(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.41(s,1H),9.87(s,1H),10.07(s,1H).
實例209
8-{[(2-胺基乙基)(甲基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，{2-[({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)(甲基)胺基]乙基}胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物32A；26mg,0.035mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到14.3mg(93%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法25)：Rt=0.67min；MS(ESIneg)：m/z=435[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.09(s,3H),2.10(s,3H),2.30(t,2H),2.61(t,2H),3.44-3.54(m,2H),3.62-3.76(m,2H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.88-7.00(m,2H),7.00-7.09(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.87(s,1H),10.07(br.s,1H).
實例210
8-{[(3,4-順式-二羥基吡咯啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[3,4-順式-二羥基吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物33A；22.8mg,0.039mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到11.5mg(58%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.67min；MS(ESIneg)：m/z=464[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.10(s,3H),2.26(dd,2H)，2.82(dd,2H),3.45-3.53(m,1H),3.64-3.74(m,1H),3.88-3.95(m,2H),4.50(d,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.88-6.93(m,2H),7.00-7.06(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.41(s,1H),9.86(s,1H),10.07(s,1H).
實例211
8-{[4-(二甲基胺基)哌啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[4-(二甲基胺基)哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物34A；61mg,0.085mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到35.8mg(79%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.55min；MS(ESIneg)：m/z=489[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.36-1.45(m,2H),1.67-1.75(m,2H),1.88(t,2H),2.10(s,3H),2.24(br.s,6H),2.81(d,2H),3.43-3.53(m,1H),3.65-3.73(m,1H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.86-6.96(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.08(s,1H).
實例212
8-{[(3R)-3-胺基哌啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，[(3R)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物35A；71mg,0.09mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到37.6mg(91%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.61min；MS(ESIneg)：m/z=461[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.11-1.22(m,1H),1.39-1.52(m,1H),1.59-1.70(m,1H),1.71-1.88(m,2H),1.96-2.06(m,1H),2.10(s,3H),2.63-2.71(m,1H),2.83-2.94(m,1H),3.42-3.51(m,1H),3.65-3.73(m,1H),5.57(br.s,2H),6.36(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.97(m,2H),7.00-7.09(m,2H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.44(br.s,1H),9.85(s,1H),10.10(br.s,1H).
實例213
ent-8-[(3,4-順式-二羥基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物1)
利用製備性HPLC將21mg來自實例170之消旋性化合物於對掌性固相上分離(方法33)，得到標題化合物。
產量：5mg
HPLC(方法34)：Rt=10.25min,ee=97.5%
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.47-1.56(m,1H),1.59-1.67(m,1H),2.10(s,3H),2.18-2.38(m,4H),3.43-3.50(m,1H),3.59-3.66(m,1H),4.18(d,1H),4.27(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.95(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.08(s,1H).
實例214
ent-8-[(3,4-順式-二羥基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(對映異構物2)
利用製備性HPLC將21mg來自實例170之消旋性化合物於對掌性固相上分離(方法33)，得到標題化合物。
產量：5mg
HPLC(方法34)：Rt=11.21min,ee=98.1%
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.47-1.57(m,1H),1.58-1.68(m,1H),2.10(s,3H),2.18-2.38(m,4H),3.43-3.50(m,1H),3.59-3.66(m,1H),4.18(d,1H),4.27(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.96(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.12(s,1H),9.43(s,1H),9.86(s,1H),10.07(s,1H).
實例215
8-{[(3S)-3-胺基吡咯啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，[(3S)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基} 甲基)吡咯啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物36A；61mg,0.079mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到27.6mg(74%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.25min；MS(ESIneg)：m/z=447[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.37-1.45(m,1H),1.98-2.05(m,1H),2.10(s,3H),2.15-2.20(m,1H),2.35-2.43(m,1H),2.57-2.63(m,1H),3.43-3.53(m,1H),3.64-3.74(m,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.90-6.97(m,2H),6.99-7.09(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.45(br.s,1H),9.86(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例216
8-{[(3R)-3-胺基吡咯啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，[(3R)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)吡咯啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物37A；30.2mg,0.039mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到9.6mg(55%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.24min；MS(ESIneg)：m/z=447[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.44-1.55(m,1H),2.00-2.11(m,1H),2.10(s,3H),2.30(dd,1H),2.35-2.42(m,1H),2.54-2.65(m,1H),3.43-3.54(m,1H),3.64-3.74(m,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.98(m,2H), 7.00-7.09(m,2H),7.79(d,1H),8.14(s,1H),9.43(br.s,1H),9.85(s,1H),10.09(br.s,1H).
實例217
8-{[(3R)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(三氟乙酸鹽，中間物38A；53.2mg,0.075mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到25.3mg(69%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法25)：Rt=0.72min；MS(ESIneg)：m/z=475[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.54-1.65(m,1H),1.77-1.89(m,1H),2.10(br.s,9H),2.24(t,1H),2.35-2.44(m,1H),2.59-2.76(m,2H),3.43-3.54(m,1H),3.64-3.74(m,1H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.95(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例218
8-[(4-胺基哌啶-1-基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例203，[1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-4-基]胺甲酸第三丁基酯(中間物39A；46mg,0.068mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到32mg標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.24min；MS(ESIneg)：m/z=461[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.36-1.50(m,2H),1.72-1.84(m,2H),1.88-1.98(m,2H),2.10(s,3H),2.72-2.81(m,2H),2.81-2.91(m,1H),3.45-3.53(m,1H),3.64-3.74(m,1H),6.38(dd,1H),6.73(d,1H),6.88-6.94(m,2H),7.04(m,2H),7.79(d,1H),8.15(s,1H),9.44(br.s,1H),9.87(s,1H),10.11(br.s,1H).
實例219
8-{[(3S)-3-胺基哌啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，由[(3S)-1-({4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-基}甲基)哌啶-3-基]胺甲酸第三丁基酯(三氟乙酸鹽，中間物40A；81mg,0.102 mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到26mg(47%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5)：Rt=0.45min；MS(ESIneg)：m/z=461[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.90-1.01(m,1H),1.37-1.46(m,1H),1.53-1.65(m,2H),1.70(d,1H),1.84-1.92(m,1H),2.10(s,3H),2.54-2.74(m,3H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.86-6.95(m,2H),6.99-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.43(br.s,1H),9.86(s,1H),10.08(br.s,1H).
實例220
8-{[(3S)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-(二甲基胺基)吡咯啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物41A；82mg,0.139mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到35mg標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.28min；MS(ESIneg)：m/z=475[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.54-1.66(m,1H),1.76-1.90(m,1H),2.10(br.s,9H),2.24(t,1H),2.35-2.45(m,1H),2.59-2.78(m,2H),3.43(q,2H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.87-6.96(m,2H),6.99-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.87(s,1H),10.09(s,1H).
實例221
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-羥基丙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3-羥基丙基)(甲基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物42A；90mg,0.111mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到31mg標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.26min；MS(ESIneg)：m/z=450[M-H]-
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.59(quin,2H),2.07(s,3H),2.10(s,3H),2.36(t,2H),3.43(t,2H),4.39(br.s,1H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.88-6.96(m,2H),7.00-7.07(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例222
8-{[乙基(3-羥基丙基)胺基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[乙基(3-羥基丙基)胺基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物43A；68mg,0.088mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到24.3mg(59%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法26)：Rt=1.29min；MS(ESIneg)：m/z=464[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.95(t,3H),1.56(quin,2H),2.10(s,3H),2.35-2.45(m,4H),3.35-3.45(m,4H),4.37(br.s,1H),6.38(dd,1H),6.72(d,1H),6.89-6.97(m,2H),7.03(m,2H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.42(s,1H),9.88(s,1H),10.09(s,1H).
實例223
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3S)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物44A；796mg,1.38mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到301mg(47%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.73min；MS(ESIneg)：m/z=462[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.96-1.11(m,1H),1.32-1.49(m,1H),1.53-1.70(m,2H),1.73-1.86(m,2H),2.10(s,3H),2.57-2.66(m,1H),2.71-2.80(m,1H),3.33-3.49(m,2H),4.51(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.87-6.97(m,2H),7.04(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例224
4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
類似實例197，4-[(5-{[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧}-2-氟-4-甲基苯基)胺基]-8-{[(3R)-3-羥基哌啶-1-基]甲基}-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮(中間物45A；16.9mg,0.029mmol)與4N鹽酸之1,4-二烷溶液/水(1：1)反應。得到8mg(59%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法7)：Rt=0.71min；MS(ESIneg)：m/z=462[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=0.97-1.11(m,1H),1.31-1.47(m,1H),1.53-1.69(m,2H),1.73-1.87(m,2H),2.10(s,3H),2.57-2.65(m,1H),2.72-2.79(m,1H),3.34-3.49(m,2H),4.51(d,1H),6.37(dd,1H),6.72(d,1H),6.87-6.96(m,2H),7.00-7.08(m,2H),7.79(d,1H),8.13(s,1H),9.42(s,1H),9.86(s,1H),10.09(s,1H).
實例225
N-(3-氯苯甲基)-4-[(5-羥基-2-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺
將4-{[5-(苯甲基氧)-2-甲基苯基]胺基}-N-(3-氯苯甲基)-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-羧醯胺(中間物48A；151mg,0.256mmol)及硫代苯甲醚(60μl,0.511mmol)之三氟乙酸(2.0ml)溶液於室溫下攪 拌一夜。減壓排除揮發成份，殘質利用製備性HPLC純化(溶離液A：0.2%甲酸水溶液，溶離液B：0.2%甲酸之乙腈溶液；梯度)。得到74.4mg(55%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法9,ESIpos)：Rt=1.00min,m/z=500[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=2.06(s,3H),4.45(d,2H),6.30(d,1H),6.56(dd,1H),6.61(d,1H),7.09(d,1H),7.17(d,1H),7.25-7.32(m,2H),7.32-7.39(m,2H),7.53-7.58(m,2H),7.77(d,1H),8.49(s,1H),8.92(t,1H),9.34(s,1H),9.91(s,1H),10.18(s,1H).
實例226
8-[(環戊基胺基)甲基]-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
在含4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A；80.0mg,211μmol)之甲醇(8.0ml)懸浮液中添加乙酸(100μl,1.7mmol)及氰基氫硼化鈉(66.4mg,1.06mmol)。混合物於室溫下攪拌16h.The混合物隨後減壓濃縮，殘質溶於DMSO，利用製備性HPLC純化。產量：19mg(20%理論值)。
LC/MS(方法5)：Rt=0.67min；MS(ESIneg)：m/z=446[M-H]-
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=1.23-1.75(m,8H),2.08(s,3H),2.96(s,1H),3.57(m,2H),6.37(d,1H),6.72(d,1H),6.96-7.06(m,4H),7.79(d,1H),8.11(s,1H),9.44(s,1H),9.85(s,1H),10.11(s,1H).
實例227
8-{[4-(2,2-二氟乙基)哌-1-基]甲基}-4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-5-酮
先將4-[(2-氟-5-羥基-4-甲基苯基)胺基]-5-側氧基-6,11-二氫-5H-吡啶並[2,3-b][1,5]苯並二氮呯-8-甲醛(中間物11A；150mg,54%純度，0.21mmol)加至2.5ml NMP中。添加1-(2,2-二氟乙基)哌二鹽酸鹽(191mg,0.86mmol)及正甲酸三甲酯(454mg,4.28mmol)，混合物於室溫下攪拌一夜。然後添加三乙醯氧基氫硼化鈉(181mg,0.86mmol)，混合物再次於室溫下攪拌一夜。反應混合物隨後倒至飽和碳酸氫鈉水溶液中，攪拌30min。濾出所形成之沉澱，使用水洗滌，及乾燥。此粗產物利用製備性HPLC純化[管柱：Sunfire C18；溶離液A：水，溶離液B：乙腈，溶離液C：1%甲酸水溶液；梯度：90%A，5%B，5%C→0%A，95%B，5%C]。取含產物溶出液濃縮至乾。殘質溶於二氯甲烷及甲醇(1：1)混合物中，加至StratoSpheresTM PL-HCO3 MP濾筒上。殘質經過再濃縮及乾燥後，得到5mg(5%理論值)標題化合物。
LC/MS(方法5,ESIpos)：Rt=0.59min,m/z=513[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=10.07(br.s,1H),9.86(s,1H),9.36(br.s,1H),8.12(s,1H),7.77(d,1H),7.04(d,1H),7.01(d,1H),6.94-6.88(m,2H),6.70(d,1H),6.41-6.33(m,1H),6.10(tt,1H),2.73-2.65(m,2H),2.40-2.25(m,4H),2.09(s,3H).
B. 藥理效力分析法
可利用相關技藝上習知之活體外與活體內試驗法證實本發明化合物之藥理活性。下列應用實例說明本發明化合物之生物活性，但此等實例並未限制本發明。
縮寫及字頭語：
w/w (溶液之)重量對重量比
B-1. KDR(VEGFR-2)激酶分析法
採用下文說明之KDR-HTRF分析法測定本發明化合物之KDR-抑制活性。
所採用之激酶為由N-末端GST與人類KDR之C-末端片段組成之重組體融合蛋白質(胺基酸D807-V1356)(於感染桿病毒之昆蟲細胞(Sf9)中表現，並採用親和性層析法純化)(來自ProQinase GmbH,Freiburg,Germany)。該激酶反應採用之受質為生物素基化肽生物素-Ahx-DFGLARDMYDKEYYSVG(C末端呈酸型)(來自Biosynthan GmbH,Berlin-Buch,Germany)。
分析時，吸取50nl之於DMSO中之100-倍試驗物質濃縮溶液加至黑色"低體積384孔"微量盤(來自Greiner Bio-One,Frickenhausen,Germany)中後，添加2μl KDR含於分析緩衝液[50mM HEPES/HCl pH 7.0，25mM MgCl2，5mM MnCl2，1.0mM二硫蘇糖醇，0.1mM原釩酸鈉，0.001%(v/v)Nonidet-P40(來自Sigma)]中之溶液，混合物培養15min，讓試驗物質預先與酵素結合後再進行激酶反應。然後添加3μl含於分析緩衝液中之ATP溶液(16.7μM，於分析體積5μl中之最終濃度為10μM)與受質溶液(0.835μM，於分析體積5μl中之最終濃度為0.5μM)開始激酶反應，所得混合物於22℃下培養45min。依各酵素之活性調整KDR濃度，以使分析法可以在線性範圍內進行。添加5μl HTRF檢測試劑溶液[0.1μM鏈親和素-XL665(來自Cisbio Bioassays,Codolet,France)及2nM PT66-Eu螯合物，係一種標記銪螯合物之抗磷酸化酪胺酸抗體(來自PerkinElmer)，含於EDTA水溶液(125mM EDTA，0.2%(w/v)BSA含於50mM HEPES/HCl pH 7.0)]中止反應。所得混合物於22℃下培養1h，讓生物素基化磷酸化受質與檢測試劑形成複合物。
隨後，測定由PT66-Eu螯合物轉移至鏈親和素-XL665之共振能量，來分析磷酸化受質量。因此於HTRF儀器[例如：PHERAstar(來自BMG Labtechnologies,Offenburg,Germany)或ViewLux(來自PerkinElmer)]中，在 350nm下激發後，在620nm及665nm下測定發射螢光。量取665nm與620nm之發射比值，作為磷酸化受質量測定值。此等數據經過校正(無抑制劑之酵素反應=0%抑制；除了酵素外包含所有其他分析組成份=100%抑制)。通常，試驗物質係於同一個微量盤上，依20μM至0.073nM之11種不同濃度測試(20μM、5.7μM、1.6μM、0.47μM、0.13μM、38nM、11nM、3.1nM、0.89nM、0.25nM及0.073nM)，每種濃度有兩個重覆數值。先由100-倍濃縮溶液製備連續稀釋液(亦即於100%DMSO中連續稀釋成2mM至7.3nM)後再進行分析，但其確實濃度可能隨每次使用之定量吸管而有差異。採用4-參數擬合法計算IC50值。
B-2. PDGFRβ激酶分析法
採用下文說明之PDGFRβ-HTRF分析法測定本發明化合物之PDGFRβ-抑制活性。
所採用之激酶為由N-末端GST與人類PDGFRβ之C-末端片段組成之重組體融合蛋白質(胺基酸R561-L1106)(於感染桿病毒之昆蟲細胞(Sf9)中表現，並採用親和性層析法純化)(來自ProQinase GmbH,Freiburg,Germany)。該激酶反應採用之受質為生物素基化聚-Glu,Tyr(4：1)共聚物(來自Cisbio Bioassays,Codolet,France)。
分析時，吸取50nl之於DMSO中之100-倍試驗物質濃縮溶液加至黑色"低體積384孔"微量盤(來自Greiner Bio-One,Frickenhausen,Germany)中後，添加2μl PDGFRβ含於分析緩衝液[50mM HEPES/NaOH pH 7.5，10mM MgCl2，2.5mM二硫蘇糖醇，0.01%(v/v)Triton-X100(來自Sigma)]中之溶液，混合物培養15min，讓試驗物質預先與酵素結合後再進行激酶反應。然後添加3μl含於分析緩衝液中之ATP溶液(16.7μM，於分析體積5μl中之最終濃度為10μM)與受質溶液(2.27μg/ml，於分析體積5μl中之最終濃度為1.36μg/ml，~30nM)開始激酶反應，所得混合物於22℃下培養25min。依各酵素之活性調整PDGFRβ濃度，以使分析法可以在線性範圍內進行(典型酵素濃度為125pg/μl)。添加5μl HTRF檢測試劑溶液[0.2μM鏈親和素 -XL665(來自Cisbio Bioassays,Codolet,France)及1.4nM PT66-Eu螯合物，係一種標記銪螯合物之抗磷酸化酪胺酸抗體(來自PerkinElmer)，含於EDTA水溶液(100mM EDTA，0.2%(w/v)BSA含於50mM HEPES/HCl pH7.0)]中止反應。所得混合物於22℃下培養1h，讓生物素基化磷酸化受質與檢測試劑形成複合物。
隨後，測定由PT66-Eu螯合物轉移至鏈親和素-XL665之共振能量，來分析磷酸化受質量。因此於HTRF儀器[例如：PHERAstar(來自BMG Labtechnologies,Offenburg,Germany)或ViewLux(來自PerkinElmer)]中，在350nm下激發後，在620nm及665nm下測定發射螢光。量取665nm與620nm之發射比值，作為磷酸化受質量測定值。此等數據經過校正(無抑制劑之酵素反應=0%抑制；除了酵素外包含所有其他分析組成份=100%抑制)。通常，試驗物質係於同一個微量盤上，依20μM至0.073nM之11種不同濃度測試(20μM、5.7μM、1.6μM、0.47μM、0.13μM、38nM、11nM、3.1nM、0.89nM、0.25nM及0.073nM)，每種濃度有兩個重覆數值。先由100-倍濃縮溶液製備連續稀釋液(亦即於100%DMSO中連續稀釋成2mM至7.3nM)後再進行分析，但其確實濃度可能隨每次使用之定量吸管而有差異。採用4-參數擬合法計算IC50值。
下表1對照本發明各操作實例之KDR與PDGFRβ激酶分析法所得之IC50值(其中有些為多次分別獨立測定之平均值)。
表1 [讀取實例：3.92E-09mol/l=3.92 x 10-9M=3.92nM；1.64E-07mol/l=1.64 x 10-7M=164nM；5.80E-10mol/l=5.80 x 10-10M=0.58nM]。
B-3. 細胞pPDGFRβ抑制分析法
取正常人類皮膚纖維母細胞(NHDF；Promocell,Cat.No.C-12300；傳代2-7次)依7 x 103個細胞/孔接種在48-孔盤(FalconTM MultiWell Cell Culture Plates,Falcon,Cat.No.B3668-3B)，並於37℃、5%CO2及95%相對空氣濕度下，在補充GlutaMAXTM、10%經加熱失活(56℃下30min)之胎牛血清(FBS；BioWhittaker,Lonza,Cat.No.DE14-801F)及5μg/ml胰島素(Insulin solution human,Sigma,Cat.No.I9278)之最基本培養基(Minimum Essential Medium,Gibco,Cat.No.41090-028)中培養。次日，將補充GlutaMAXTM之最基本培養基換成Opti-MEM® I低血清培養基(Reduced Serum Medium)(Gibco,Cat.No.31985-047)，再於上述條件下培養3h。之後，在細胞中添加50ng/ml重組體人類PDGF-BB(R&D Systems,Cat.No.220-BB-050)及待檢測試驗物質含於DMSO中之連續稀釋液。每孔總體積為100μl。於上述條件下培養1小時後，吸出Opti-MEM® I低血清培養基並棄置。隨後，依據製造商指示製備溶胞緩衝液[Phospho PDGFRβ(Tyr751)全細胞溶胞物分析套組(Assay Whole Cell Lysate Kit),MSD,Cat.No.K150DVD-2]，每孔添加70μl此混合物。溶胞樣本存放在-20℃下或在溶胞後立即在Meso Scale SECTOR® Imager 2400中，依據上述製造商的指示分析。所測定之數據係呈相對於PDGF-BB-刺激但未經處理之細胞之PDGFRβ刺激百分比表示。採用GraphPad Prism 6(La Jolla,CA,USA)之非線性迴歸(曲線擬合)函數計算IC50值。
下表2出示本發明代表性操作實例於本分析法所得之IC50值(其中有些為多次分別獨立測定之平均值)
表2 [讀取實例：4.09E-08mol/l=4.09 x 10-8M=40.9nM]。
B-4. 抑制VEGF所誘發之內皮細胞增生
測試物質係來自臍帶之3000個人類靜脈內皮細胞(HUVEC；CellSystems,Cat.No.FC-0003)，於96-孔盤(Greiner Bio-one,Cat.No.655090)中，於100μl完全培養基(含VEGF LifeFactors之VascuLife®基礎培養基(VascuLife® basal medium with VEGF LifeFactors)，CellSystems,LM-0002及LS-1020)中培養(Heraeus培養箱，37℃，5%CO2)。6小時後，排除完全培養基，換成包含肝素(Heparin Sulfate LifeFactor,CellSystems,Cat.No.LS-1017)、抗壞血酸(Ascorbic Acid LifeFactor,CellSystems,Cat.No.LS-1005)、L-麩醯胺(L-Glutamine LifeFactor,CellSystems,Cat.No.LS-1013)及0.2%FCS(FBS LifeFactor,CellSystems,Cat.No.LS-1005)之饑餓培養基(VascuLife®基礎培養基(VascuLife® Basalmedium)，CellSystems,Cat.No.LM-0002)。細胞維持在饑餓培養基中約18h。之後，添加試驗物質至新鮮之饑餓培養基中。針對此目的，取試驗物質(於100%DMSO中溶解成10mM)於饑餓培養基中稀釋成10-6M、10-7M、10-8M、10-9M、10-10M及10-11M，最終濃度不超過0.1%DMSO。然後使用VEGF-A(20ng/ml,R&D Systems,Cat.No.293 VE)刺激細胞。對照組使用維持在最基本培養基與VEGF(陽性對照組)中之細胞及僅維持在最基本培養基中之細胞(陰性對照組)。細胞依此方式培養72h。然後每孔添加5μl AlamarBlue®(CellTiter-Blue® Cell Viability分析法，Promega,Cat.No.G8080)。再培養4h後，於微量盤判讀儀(Infinite® M200,Tecan；設定：激發波長535nm，發射波長590nm，增幅70V)中測定螢光。測定值經過微量盤背景值校正後，採用GraphPad Prism 6(La Jolla,CA,USA)之非線性S-型迴歸(曲線擬合)函數計算IC50值。比較經過刺激之細胞與未刺激之細胞之隨濃度變化之抑制性。
下表3出示本發明代表性操作實例於本分析法所得之IC50值(其中有些為多次分別獨立測定之平均值)。
表3 [讀取實例：4.27E-08mol/l=4.27 x 10-8M=42.7nM]。
B-5. 在雷射誘發脈絡膜新生血管模式中之局部效力
採用下文說明之試驗，在雷射誘發脈絡膜新生血管之大鼠模式中探討呈眼滴劑型式之試驗物質用於降低滲液/水腫形成與/或脈絡膜新生血管上之效力。
針對此目的，取Brown-Norway品系之色素沉積大鼠，選擇沒有眼睛病變者隨機分成處理組。第0天，動物接受腹膜內注射麻醉(15mg/kg塞拉嗪(xylazine)及80mg/kg氯胺酮(ketamine))。滴下一滴0.5%托平卡胺(tropicamide)溶液放大瞳孔，使用532nm氬氣雷射光凝固儀(直徑50μm，強度150mW，持續100ms)在眼神經周圍6個指定位點啟動脈絡膜血管新生作用。在整個實驗23天期間，以眼滴劑施加試驗物質與適當媒劑至經過雷射處理的眼睛上，每天2次(施加間隔：10至14h；體積：10μl)。試驗物質懸浮於100%液態石蠟或媒劑水溶液(羥基丙基甲基纖維素3.5%、聚山梨酸酯80 0.5%、NaCl 0.9%水溶液)中。
第21天，採用螢光眼底相機(Kowe)進行血管照相。在麻醉下再次散瞳後，經皮下(s.c.)注射10%鈉螢光素染劑。2min後，為眼底照相。由三位不知情觀察者分析螢光素滲漏程度來代表滲液/水腫程度，並將嚴重程度分成0(無滲液)至3(在確實損傷上方發現深色)。
於第23天殺死動物後，取出眼睛，固定在於室溫之4%多聚甲醛溶液中1h。洗滌一次後，小心取出視網膜，使用FITC同工凝集素B4抗體為鞏膜-脈絡膜複合物染色後，平鋪在顯微鏡玻片上。使用螢光顯微鏡(Keyence Biozero)，於激發波長488nm下分析所得標本。利用ImageTool軟體之形態測量法測定脈絡膜新生血管面積(μm2)。
B-6. 氧誘發之視網膜病變模式
已顯示，氧誘發之視網膜病變為值得用於研究病理性視網膜生成血管作用之動物模式[Connor等人，Nature Protocols 4,1565-1573(2009)]。此模式係依據觀察產後早期發展期間之視網膜在高氧下造成正常視網膜血管生長 遏止或延遲。若動物在高氧期下第7天回到正常氧氣室後，等同已相對缺氧，因為視網膜已缺少會在正常氧氣條件下適當供應神經組織之正常血管。依此方式造成之絕血狀態造成異常之新生血管，即有些類似如：濕性AMD之眼睛病變中之病變生理性新生血管。此外，所造成之新生血管具有高度再現性及可定量性，係研究疾病機轉及各種不同視網膜病變可能治療法之重要參數。
因此下文所說明試驗目的係檢測試驗化合物在氧誘發之視網膜病變之小鼠模式中對視網膜血管生長之效力。
針對此目的，讓新生C57BL/6小鼠及其母親在產後第7天(PD7)接受高氧(70%氧)處理5天。從PD12起，小鼠維持在正常氧氣條件下(室內空氣，21%氧)直到PD17。從第12天至第17天，小鼠每天經腹膜內(i.p.)接受試驗物質或適當媒劑處理。第17天時，所有小鼠接受異氟烷(isoflurane)麻醉後，安樂死。取出眼睛，於4%福馬林中固定。於磷酸鹽緩衝生理食鹽水中洗滌後，切下視網膜，產生其平鋪標本，使用同工凝集素B4抗體染色。使用Zeiss ApoTome定量新生血管。
B-7. VEGF-誘發之高通透性模式
在許多眼睛病變中，受到此方式傷害之眼睛中血管會造成血管中滲出液體。滲出之液體累積在斑部，造成組織腫大，使患者視力顯著減弱，因此視力大幅衰退。可在動物模式中有效誘發這種因血管通透性提高造成之滲液並定量。
針對此目的，依據試驗物質之動力學，在數天或數小時間隔下投與一次或多次試驗物質後，再誘發提高血管通透性。
對兔子之誘發法係在眼睛輪部後面注射500ng hVEGF165至玻璃體內，造成視網膜滲液增加。誘發血管通透性2天後，經全身投與螢光素(每公斤體重50mg/ml之生理食鹽水溶液)。投與螢光素後不久(約50min)，動物接受麻醉鎮定。讓要檢測的眼睛放在螢光光度計(Fluorotron,OcuMetrics Inc.,CA)的鏡頭下，開始測定。測量眼睛後方與前方之相對螢光素濃度。定量滲 液時，計算每個眼睛螢光素濃度之AUC，並以經過VEGF處理的眼睛與未經過處理的對側眼睛之間比值表示。
C. 醫藥組成物之操作實例
本發明化合物可如下方式轉換成醫藥調配物：
錠劑：
組成：
100mg本發明化合物、50mg乳糖(單水合物)、50mg玉米澱粉(天然)、10mg聚乙烯基吡咯啶酮(PVP 25)(BASF,Ludwigshafen,Germany)與2mg硬脂酸鎂。
錠劑重量212mg，直徑8mm，彎曲半徑12mm。
製法：
將含本發明化合物、乳糖與澱粉之混合物使用5%之PVP水溶液(w/w)製成顆粒。顆粒乾燥後，與硬脂酸鎂混合5分鐘。採用傳統壓錠機壓縮此混合物(錠劑格式參見上文說明)。此壓縮之指導值為壓縮力15kN。
口服懸浮液：
組成：
1000mg本發明化合物、1000mg乙醇(96%)、400mg Rhodigel®(來自FMC(Pennsylvania,USA)之黃原膠)與99g水。
10ml口服懸浮液相當於單劑100mg本發明化合物。
製法：
將Rhodigel懸浮於乙醇中，添加本發明化合物至懸浮液中。攪拌添加水。攪拌混合物約6h，直到Rhodigel完全膨脹為止。
口服溶液：
組成：
500mg本發明化合物，2.5g聚山梨酸酯與97g聚乙二醇400。20g口服溶液相當於單劑100mg本發明化合物。
製法：
將本發明化合物於攪拌下懸浮於聚乙二醇與聚山梨酸酯之混合物中。繼續攪操作，直到本發明化合物完全溶解為止。
i.v.溶液：
將本發明化合物溶於生理上可接受之溶劑(例如：等滲性生理食鹽水、葡萄糖溶液5%與/或PEG 400溶液30%)中低於飽和溶解度之濃度。溶液經過無菌過濾，及分配至無菌且無熱原菌之注射瓶中。
局部投藥至眼睛之溶液或懸浮液(眼滴劑)：
可由本發明化合物之凍乾物於無菌之生理食鹽水中復水製成用於局部投藥至眼睛之無菌醫藥製劑。適合此等溶液或懸浮液之防腐劑為例如：苯甲烴氯銨(benzalkonium chloride)、硫柳汞或苯基汞硝酸鹽，濃度範圍為0.001至1重量百分比。

Claims (12)

  1. 一種式(I)化合物 其中R1 為氫、鹵素、羥基或(C1-C4)-烷基或如下式基團-NH-C(=O)-R4、-NH-C(=O)-O-R5或-NH-SO2-R6，其中R4 為氫或(C1-C4)-烷基，R5 為(C1-C4)-烷基，及R6 為(C1-C4)-烷基或苯基，R2 為氫、氟、氯、甲基或甲氧基，R3 為氫、氟、氯或甲基，及G 為氰基、羥羰基或如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基或(C1-C4)-烷氧基取代，或經氟至多三取代，R7B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、4-至7-員雜環基或5-至10-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多六取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR9、-O-(CH2CH2O)n-R10、-SR11、-NR12AR12B、 -C(=O)-NR13AR13B、(C3-C6)-環烷基、(C4-C6)-環烯基、苯基、4-至7-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，及(iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，及其中R9 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經4-至6-員雜環基取代，R10 為氫或(C1-C4)-烷基，R11 為(C1-C4)-烷基，R12A、R12B、R13A及R13B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及n為1至10包括在內之範圍之整數，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成4-至10-員雜環，其可再包含至多2個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR14、-NR15AR15B、-C(=O)-NR16AR16B及苯基， 其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R14 為氫、(C1-C4)-烷基或苯基，其中(C1-C4)-烷基可經羥基、-C(=O)-NR17AR17B或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R15A、R15B、R16A、R16B、R17A及R17B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基或(C1-C4)-烷氧基取代，或經氟至多三取代，及R8B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、4-至7-員雜環基或5-至10-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多六取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-O-(CH2CH2O)p-R19、-SR20、-NR21AR21B、-C(=O)-NR22AR22B、(C3-C6)-環烷基、(C4-C6)-環烯基、苯基、4-至7-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、(C1-C4)-烷氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C4)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基及(C1-C4)-烷氧基羰基， 及(iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C4)-烷基及(C1-C4)-烷氧基，及其中R18 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經4-至6-員雜環基取代，R19 為氫或(C1-C4)-烷基，R20 為(C1-C4)-烷基，R21A、R21B、R22A及R22B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及p為1至10包括在內之範圍之整數，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成4-至10-員雜環，其可再包含至多2個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B、-C(=O)-NR25AR25B及苯基，其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫、(C1-C4)-烷基或苯基，其中(C1-C4)-烷基可經羥基、-C(=O)-NR26AR26B或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A、R25B、R26A及R26B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C4)-烷基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
  2. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 R1 為氫、氟、氯、(C1-C4)-烷基或如下式基團-NH-SO2-R6，其中R6 為(C1-C4)-烷基或苯基，R2 為氫、氟、氯或甲基，R3 為氫、氟、氯或甲基，及G 為氰基或如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫、甲基、乙基、2-羥基乙基、2-甲氧基乙基或2-乙氧基乙基，其中甲基及乙基可經氟至多三取代，R7B 為氫、(C1-C4)-烷基或(C3-C6)-環烷基，其中(C1-C4)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR9、-SR11、-NR12AR12B、(C3-C6)-環烷基及苯基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、甲基、乙基、甲氧基及乙氧基，及其中R9 為氫、甲基或乙基，R11 為甲基或乙基及R12A及R12B 係分別獨立為氫、甲基、乙基或2-羥基乙基，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N、O與S之群中之環雜 原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C3)-烷基、側氧基、-OR14、-NR15AR15B、-C(=O)-NR16AR16B及苯基，其中(C1-C3)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R14 為氫、甲基或乙基及R15A、R15B、R16A及R16B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，其可經羥基、甲氧基或乙氧基取代，或經氟至多三取代，及R8B 為氫、(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基、苯基、5-或6-員雜環基或5-或6-員雜芳基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-SR20、-NR21AR21B、-C(=O)-NR22AR22B、(C3-C6)-環烷基、苯基、5-或6-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、(C1-C3)-烷氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，(ii)所述及之苯基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、甲基、乙基、甲氧基及乙氧基，(iii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及 (iv)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C3)-烷基及(C1-C3)-烷氧基，及其中R18 為氫或(C1-C3)-烷基，R20 為(C1-C3)-烷基及R21A、R21B、R22A及R22B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C3)-烷基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N、O與S之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C4)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B、-C(=O)-NR25AR25B及苯基，其中(C1-C4)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫或(C1-C3)-烷基，其中(C1-C3)-烷基可經羥基或(C3-C6)-環烷基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A及R25B 係分別獨立為氫或可經羥基取代之(C1-C3)-烷基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
  3. 根據請求項1或2之式(I)化合物，其中R1 為氫、氟、氯或(C1-C4)-烷基，R2 為氫或氟，R3 為氫、氟、氯或甲基， 及G 為如下式基團-C(=O)-NR7AR7B或-CH2-NR8AR8B，其中R7A 為氫、甲基或乙基，R7B 為甲基、乙基、2-羥基乙基或環己基，其中環己基可經羥基至多二取代，或R7A及R7B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：甲基、乙基、側氧基及羥基，其中甲基及乙基可再經羥基取代，R8A 為氫或(C1-C4)-烷基，及R8B 為(C1-C6)-烷基、(C3-C6)-環烷基或5-或6-員雜環基，其中(C1-C6)-烷基可經氟至多三取代，及經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：-OR18、-SR20、-NR21AR21B、(C3-C6)-環烷基、5-或6-員雜環基及5-或6-員雜芳基，及其中(i)所述及之環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、(C1-C3)-烷氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，(ii)所述及之雜環基可經選自以下群中之相同或相異基團至多三取代：氟、(C1-C3)-烷基、羥基、側氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，及(iii)所述及之雜芳基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：氟、氯、(C1-C3)-烷基及(C1-C3)-烷氧基， 及其中R18 為氫、甲基或乙基，R20 為甲基或乙基，及R21A及R21B 係分別獨立為氫、甲基或乙基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多四取代：氟、(C1-C3)-烷基、側氧基、-OR23、-NR24AR24B及-C(=O)-NR25AR25B，其中(C1-C3)-烷基部份可經羥基取代，或經氟至多取代三次，及其中R23 為氫或(C1-C3)-烷基，其中(C1-C3)-烷基可經羥基取代，或經氟至多三取代，及R24A、R24B、R25A及R25B係分別獨立為氫、甲基或乙基，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
  4. 根據請求項1、2或3之式(I)化合物，其中R1 為甲基，R2 為氫，R3 為氟，及G 為如下式基團-CH2-NR8AR8B，其中R8A 為氫、甲基或乙基，及 R8B 為(C1-C6)-烷基或(C3-C6)-環烷基，其中(C1-C6)-烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：羥基、甲氧基及乙氧基，及(C3-C6)-環烷基可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：羥基、甲氧基、乙氧基、異丙氧基、羥羰基、甲氧基羰基及乙氧基羰基，或R8A及R8B 可彼此結合並與其等所鍵結之氮原子共同形成5-至7-員雜環，其可包含另一個選自N與O之群中之環雜原子，且可經選自以下群中之相同或相異基團至多二取代：甲基、乙基、羥基、甲氧基、乙氧基及正丙氧基，其中甲基及乙基可再經羥基取代，及其鹽類、溶劑合物與鹽類之溶劑合物。
  5. 一種製備如請求項1至4所定義之化合物之方法，其特徵在於[A]式(II) 其中R1、R2及R3係如請求項1至4中之定義，及PG1 為合適之保護基，例如：苯甲基、4-甲氧基苯甲基或2,4-二甲氧基苯甲基，於鹼之存在下，與2,4-二氯吡啶-3-羧酸(III)反應 產生式(IV)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義，然後與3,4-二胺基苯甲腈(V) 在(IV)中羧酸官能之活化下偶合，產生式(VI)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義，然後由此化合物於惰性溶劑中加熱而環化，產生式(VII)化合物 其中PG1、R1、R2及R3係如上述定義，然後脫除保護基PG1，得到本發明式(I-A)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，或[B]式(VIII)化合物 其中R1、R2及R3係如請求項1至4中之定義，於酸之存在下及加熱下，與式(IX)化合物反應 產生本發明式(I-A)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，及視需要[C]所得式(I-A)化合物使用酸水溶液處理，轉化成本發明式(I-B)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，及後者可視需要與式(X)化合物 其中R7A及R7B係如請求項1至3中之定義，在(I-B)中羧酸官能之活化下偶合，產生本發明式(I-C)化合物 其中R1、R2、R3、R7A及R7B係如上述定義，或視需要[D]上述所得(I-A)化合物與二異丁基氫化鋁反應，轉化成式(XI)化合物 其中R1、R2及R3係如上述定義，後者再於合適還原劑之存在下，與式(XII)化合物反應 其中R8A及R8B係如請求項1至4中之定義，產生本發明式(I-D)化合物 其中R1、R2、R3、R8A及R8B係如上述定義，且所得式(I-A)、(I-B)、(I-C)、與(I-D)化合物視需要分離成其對映異構物及/或非對映異構物，及/或視需要使用適當(i)溶劑與/或(ii)酸或鹼類轉化成其溶劑合物、鹽類及/或其鹽類之溶劑合物。
  6. 根據請求項1至4中任一項所定義之化合物，其係用於治療及/或預防疾病。
  7. 根據請求項1至4中任一項所定義之化合物，其係用於治療及/或預防眼睛病變及癌症與腫瘤之方法。
  8. 一種以如請求項1至4中任一項所定義之化合物於製造用於治療及/或預防眼睛病變及癌症與腫瘤之醫藥上之用途。
  9. 一種醫藥品，其包含如請求項1至4中任一項所定義之化合物，與一或多種惰性、無毒性之醫藥上合適之賦形劑組合。
  10. 一種醫藥品，其包含如請求項1至4中任一項所定義之化合物，與一或多種選自VEGF訊號傳導途徑抑制劑類別之活性成份組合：如：阿柏西普(aflibercept)、蘭尼單抗(ranibizumab)、癌思停(bevacizumab)或哌加他尼(pegaptanib)。
  11. 根據請求項9或10之醫藥品，其係用於治療及/或預防眼睛病變及癌症或腫瘤。
  12. 一種治療及/或預防人類與動物之眼睛病變及癌症或腫瘤之方法，其係投與有效量之至少一種如請求項1至4中任一項所定義之化合物，或如請求項9至11中任一項所定義之醫藥品。
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