TW200924774A - Fused pyrrolidine 1,2,4-triazole derivatives as modulators of mGluR5 - Google Patents

Description

200924774 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎化合物、其治療用途及包含該等新穎 化合物之醫藥組合物。 【先前技術】 - 麩胺酸係哺乳動物中樞神經系統（CNS)之主要興奮性神 . 經遞質。麩胺酸藉由與細胞表面受體結合並藉此激活之來 發揮其對中樞神經元的作用。根據受體蛋白之結構特徵、 φ 該等受體將信號轉導至細胞中之方式、及藥理特性可將此 等受體分為兩大類，即離子型麩胺酸受體及代謝型麩胺酸 受體。 代謝型麩胺酸受體（mGluR)係可在麩胺酸結合後激活各 種細胞内第二信使系統之G蛋白偶聯受體。mGluR在完整 哺乳動物神經元中之激活可產生一個或多個下列反應：磷 脂酶C激活；磷酸肌醇（PI)水解增加；細胞内鈣釋放；磷 脂酶D激活；腺苷酸環化酶激活或抑制；單磷酸環腺苷 ® (cAMP)形成增加或減少；鳥苷酸環化酶激活；單磷酸環鳥 苷（cGMP)形成增加；磷脂酶A2激活；花生四烯酸釋放增 - 加；及電壓門控型及配體門控型離子通道活性增加或降 低。Schoepp 等人，7>印£/·? _P/zarmaco/· 5W. 14Ά3 (1993), Schoepp, iVewroc/zew. /«ί. 24:439 (1994)，Pin 等人，

Neuropharmacology 34:1 (1995)， Bordi 及 Ugolini， Prog.

Neurobiol. 59:55 (1999) ° 分子選殖已識別出8種不同的mGluR亞型，以mGluRl至 135278.doc 200924774 mGluR8 命名。Nakanishi，iVewrow. 73:1031 (1994)，Pin 等 人，Neuropharmacology 34:1 (1995), Knopfel 等人，J. C/zem. 3&1417 (1995)。進一步受體分類可藉由某些 mGluR亞型之替代性剪接形式的表現來實現。Pin等人， PNAS 89:\033\ (1992)，Minakami 等人，1136 ' (1994)，Joly等人，·/. 75:3970 (1995)。 • 代謝型麩胺酸受體亞型根據胺基酸序列同源性、該等受 體所用第二信使系統及其藥理特徵可細分成三組，即第I © 組、第II組及第III組mGluR。第I組mGluR包括mGluRl、 mGluR5及其替代性剪接變體。激動劑與此等受體結合可 激活磷脂酶C且接下來細胞内鈣會遷移。 神經、精神及疼痛病症 人們在試圖闡明第I組mGluR之生理作用時，提出激活 此等受體可引起神經元興奮。各種研究已表明第I組mGluR 激動劑在應用於海馬組織、大腦皮質、小腦及丘腦以及其 他CNS區域中之神經元時可產生突觸後興奮。有證據表明 此興奮係由突觸後mGluR之直接激活引起的，但亦提出會 出現突觸前mGluR激活，導致神經遞質釋放增加。Baskys, Trends Pharmacol. Sci. 15:92 (1992), Schoepp, Neurochem. ' Int. 24'A3>9 (1994)，Pin 等人，*54:1 (1995)， Watkins 等人，7>泛《心P/zarmotco/. 5W. /5:33 (1994)。 代謝型麩胺酸受體與哺乳動物CNS之許多正常過程有 關。已經證實，mGluR激活需要誘導海馬組織長期增強及 135278.doc 200924774 小腦長期抑鬱。Bashir 等人，Waiwre 363:347 (1993)， Bortolotto等人，iVaiwre 365:740 (1994), Aiba等人，Ce// 7P:365 (1994)，Aiba等人，Ce// 79:377 (1994)» 亦表明 mGluR激活在傷害感受及痛覺缺失中之作用，Meller等 尺，Neuroreport 4: 879 (1993)，Bordi 及 Ugolini， • Λα.577:223 (1999)。另外，有人提出mGluR激活在各種其 . 他常見過程中起調節作用，該等常見過程包括突觸傳遞、 神經元發育、神經元凋亡、突觸可塑性、空間學習、嗅覺 ® 記憶、心搏之中樞控制、清醒狀態、運動控制及前庭眼反 射控制。Nakanishi，iVewrow 73: 1031 (1994)，Pin等人， 3萃：1，Knopfel 等人，*/. Med. Chem. 3&1417 (1995)。 而且，有人提出第I組代謝型麩胺酸受體（且，特定言 之，係mGluR5)在影響CNS之許多病理生理過程及病症中 起作用。此等包括中風、頭部創傷、缺氧性及缺血性損 傷、低血糖症、癲癇、諸如阿茲海默氏症（Alzheimer's disease)等神經退化性病症及疼痛。Schoepp等人’ 7>e«办 Pharmacol. Sci. 14:13 (1993), Cunningham^ A * Life Sci. . 54:135 (1994)，Hollman等人，d/7:31 - (1994)，Pin等人，以：1 (1 995)，Knopfel 等人，乂 3&1417 (1995)，Spooren等人， 7>e«心 P/mrwaco/. Sc，. 22:331 (2001)，Gasparini等人’ Curr. Opin. Pharmacol. 2:43 (2002), Neugebauer Pain 98\\ (2002)。據認為，此等病況之許多病理係由過量麩胺酸誘 135278.doc 200924774 導之CNS神經元興奮造成的。由於第I組mGluR似乎可藉由 突觸後作用機制增加麩胺酸介導之神經元興奮並增強突觸 前麩胺酸釋放，因此其激活可能造成該病理。因此，第I 組mGluR受體之選擇性拮抗劑在治療上可為有益的，具體 而言，可作為神經保護劑、鎮痛劑或抗痙攣劑。 ' 對（概言之）代謝型麩胺酸受體及（具體而言）第I組代謝型 • 麩胺酸受體之神經生理作用的最新闡明已證明此等受體在 急性及慢性神經及精神病症以及慢性及急性疼痛病症治療 © 中可作為有希望的藥物靶標。 胃腸病症 食道下端括約肌（LES)往往會間歇性地鬆弛。由於此時 會暫時失去機械屏障作用，因此，胃中之流體可能會進入 食道，該事件在下文中稱作"逆流”。 胃食道逆流疾病（GERD)係最普遍的上胃腸道疾病。現 行藥物療法旨在減少胃酸分泌或中和存於食道中之酸。逆 流背後之主要作用機制被視為取決於低滲性食道下端括約 肌。然而，例如，//o/Zoway ά C//«. iV. dmer. 79，第517-535頁已經證實大部分逆流發作 • 出現於暫時性食道下端括約肌鬆弛（TLESR)(即，並非由吞 嚥引發之鬆弛）期間。亦已證實胃酸分泌在患有GERD之患 者中通常為正常的。 假定本發明之新穎化合物可用於抑制暫時性食道下端括 約肌鬆弛（TLESR)且因此可用於治療胃食道逆流病症 (GERD)。 135278.doc 200924774 吾人熟知，某些化合物可對人心臟複極造成不期望的影 響，觀察到的現象係心電圖（ECG)QT間期延長。在極端情 況下，此藥物引發之QT間期延長可能會產生一種稱為

Torsades de Pointes之心律不整（Tdp; 等人， hERG K+ channels: friend and foe. Trends Pharmacol Sci 2001; 22: 240-246)，最終造成心室顫動及猝死。此症候群 之主要事件係該等化合物會抑制延遲矯正鉀電流（IKr)之快 速分量。該等化合物與載有此電流之通道蛋白的形成孔洞 之醺子單元（藉由人類eag相關基因（hERG)編碼之子單元） 結合。由於IKr在該心臟動作電位之複極化中起重要作 用，故其抑制可減緩複極化且此顯示為QT間期之延長。 儘笞QT間期延長本身不是安全關注點，但其可帶來對心 血管不利影響的風險且其在小百分比患者中可導致Tdp並 惡化為心室纖維性顫動。 概言之，本發明之化合物對hERG編碼之鉀通道具有低 活性。在此方面，在活體外對hERG之低活性表明在活體 内之低活性。 亦需要具有良好代謝穩定性之藥物以增強藥物功效。對 活體外人類微粒體代謝之穩定性表明對活體内代謝之穩定 性。 鑒於其生理及病理生理顯著性，人們需要對mGluR亞型 (具體而言，對第Ϊ組受體亞型，最具體而言，對mGiuR5) 顯示高選擇性之新穎強效mGluR激動劑及拮抗劑。 本發明之目標係提供在代謝型麵胺酸受體（mGiuR)處（尤 135278.doc 10 200924774 其是在mGluR5受體處）呈現活性之化合物。特定言之，本 發明之化合物主要在周邊起作用，即，具有經過血腦屏障 之有限能力。 【發明内容】 本發明係關於式I化合物：

其中 R1係曱基、鹵素或氰基； R2係氫或敦； R3係氫、（VC3烷基、烷氧基、OR5或NR5R6 ; R4係烷基或環丙基； R5係氫或CVC3烷基；

R6係氫或CVC3烷基； X係

N· Y係與c3-c5環烷基稠合之吡咯啶； Z係 135278.doc 200924774

135278.doc 12- 200924774 其中 R7係氮、（Vc;院基或（VC3烷氧基； R8係氮、（Vc3烷基或CVC3烷氧基； R9係氫、C〇NR10R"或 NR10Rn ;

Rl0係氫或CrCs烷基；

Rl1係氫或C丨-C3烷基； 同型異構體、互變異 ❹ ❹ 以及其醫藥上可接受之鹽、水合物 構體及/或對映異構體。 在個實施例中 ，R1係甲基。 在另一實施例中 ，R1係鹵素。 在另一實施例中 ，R2係氫。 在另一實施例中 ，R3係氫或CVC3烷基。 在另一實施例中 ，R3係 OR5 或 NR5R6。 在另一實施例中 ，R4係甲基。 在另—實施例中 ，R5係氫或甲基。 在另'實施例中 係氫》 ’ R6係氣或甲基。在另—實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 ，R7係甲基且R8係氫。 ，R7係氫且R8係氫。 ，R9係氫。 在另—實施例中，Y係與環丙基稠合之吨略咬。 ❹施例中，¥係與環丙μ合之㈣咬且該 定在C2-位置與χ連接。 在另一實施例中 ，冗係 135278.doc •13· 200924774

另一實施例係一種醫藥組合物，其包括治療有效量之式 I化合物作為活性成份以及一種或多種醫藥上可接受之稀 釋劑、賦形劑及/或惰性載劑。 Ο ❹ 如下文更具體地所述其他實施例係關於一種式I化合物 在治療中之用途’其用於治療mGluR5介導之病症、製造 用於治療mGluR5介導之病症的藥物。 又一些實施例係關於一種治療inGluRS介導之病症的方 法’其包括對哺乳動物投與治療有效量之式〗化合物。 在另一實施例中，提供一種抑制mGluR5受體激活之方 法，其包括使用有效量之式Ϊ化合物處理含有該受體之細 胞。 本發明之化合物可用於治療，具體而言，用於治療神 經、精神、疼痛及胃腸道病症。 彼等熟習此項技術者亦應理解，本發明之某些化合物可 以溶合（例如水合）以及非溶合形式存在。應進一步理解， 本發明包括式I化合物之所有此等溶合形式。 式I化合物之鹽亦屬於本發明之範圍um 化合物之醫藥上可接受之鹽可使用業内熟知的標準程序來 =，例如’藉由使驗性足夠強之化合物（例如，院基胺） 與適宜酸（例如，㈣、乙酸或甲確酸）反應以提供生理學 上可接受之陰離子鹽。亦可能藉由下心製造㈣⑽$ 135278.doc 200924774 屬（例如’鈉、鉀或鋰）或鹼土金屬（例如，鈣）鹽：在水性 介質中用一當量鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物或烷氧化物 (例如’乙醇鹽或甲醇鹽）或鹼性適宜的有機胺（例如，膽驗 或葡胺）處理具有適宜酸性質子之本發明化合物（例如，缓 酸或盼）’然後藉助習知純化技術純化。另外，四級敍鹽 可藉由向（例如）中性胺中添加烷基化劑來製備。 在一個本發明實施例中，可將式〗化合物轉化成其醫藥 上可接受之鹽或溶合物，特定言之’係酸加成鹽，例如， 氫氣酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、富馬酸鹽、馬來 酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、甲續酸鹽或對甲苯績酸鹽。 【實施方式】 在定義式I時所用一般術語具有下列含義： 如本文所用齒素係選自氣、氟、溴或碘。 C!-C3烧基係具有1個至3個碳原子之直鍵或具支鏈烷 基’例如，甲基、乙基、正丙基或異丙基。 C3_CS環院基係具有3個至5個碳原子之環狀烷基基團， 例如，環丙基 '環丁基及環戊基。 G-C3燒氧基係具有！個至3個碳原子之烷氧基，例如， 甲乳基乙氧基、異丙氧基或正丙氧基。 所有化學名稱係使用八匸〇1^八889.04產生。 在上式I中，X可以兩種可能定位之任一種存在。 醫藥组合物 可將本發明化合物調配成習用醫藥組合物，其包括式j 化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶合物以及醫藥上可接受 135278.doc •15· 200924774 之載劑或職形劑。醫藥上可接受之載劑可為固體或液體。 固體形式製劑包括但不限於粉劑、錠劑、可分散顆粒、膠 囊、藥丸及检劑。 固體载劑可為一種或多種物質，其亦可用作稀釋劑、橋 味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、黏結劑或錠劑崩解劑。 固體載劑亦可為封裝材料。 在粉劑中，該載劑係微細固體，其與微細的本發明化合 e

物或活丨生組份相混合。在錠劑中，該活性組份與具有必需 黏結性質之載劑以適宜比例混合且壓製為期望形狀及尺 寸。 若要製備栓劑組合物’首先，將低熔點蠟（例如，脂肪 酸甘油S曰與可可油之混合物）熔化並藉由（例如）攪拌將該活 性成份分散於其中。’然後，將該炼化均句混合物傾倒至適 且尺寸之模具中並使其冷卻且固化。 適宜載劑包括但不限於碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、乳 糖、糖、果膠、糊精、搬粉、黃、甲基纖維素、幾甲 基纖維素鈉、低熔點蠟、可可油、及諸如此類。 術4組合物"亦欲包括活性組份與作為載劑且提供膠囊 之封裝材料的調配物，纟中該活性組份（有或無其他載劑） 被載劑環繞’該載劑因而與其結合在一起。類似地，亦包 鍵劑、粉劑、藥丸及踢囊 用0 可作為適於口服之固體劑型使 液體形式組合物包括溶液、 懸浮液及乳液。舉例而言 I35278.doc 200924774 活性化合物之無菌水溶液或水_丙二醇溶液可為適於非經 腸投藥之液體製劑。液體組合物亦可在聚乙二醇水溶液中 以溶液形式加以調配。 藉由將活性組份溶於水中並按照需要添加適宜著色劑、 矯味劑、穩定劑及增稠劑可製備口服用之水溶液。適合口 服使用之水性懸浮液可藉由將微細活性組份以及諸如天然 合成膠、樹脂、甲基纖維素、羧曱基纖維素鈉及醫藥調配 技術已知的其他懸浮劑等黏性材料分散於水中來製造。意 > 欲經口使用之例示性組合物可含有一種或多種著色劑、甜 味劑、矯味劑及/或防腐劑。 視投藥模式而定，該醫藥組合物可包含約0.05% w (重量 百分比）至約99% w、或約〇.1〇%评至5〇% w之本發明化合 物’所有重量百分比均以該組合物之總重量計。 一名普通技術人員可藉助已知標準（包括個體患者之年 齡、體重及反應並在欲治療或預防之疾病的理解範圍内加 > 以解釋）來確定實踐本發明之治療有效量。 醫療用途 本發明之化合物可用於治療與mGiuR5之興奮性激活相 關之病況並可用於抑制因mGiuR5之興奮性激活而造成的 神經元損傷。該等化合物可用於在哺乳動物（包括人）中產 生mGluR5抑制作用。 包括mGluR5在内之第I組mGluR受體在中樞及周邊神經 系統中及在其他組織中受到高度表現。因此，預計，本發 明之化合物特別適用於治療mGluR5介導之病症，例如， 135278.doc • 17- 200924774 急性及慢性神經及精神病症、置腺 τ炳屁月腸道病症以及慢性及急性 疼痛病症。 ’其用於治療。 物’其用於治療 本發明係關於如上文所定義式〗化合物 本發明係關於如上文所定義式I化合 mGluR5介導之病症。

本發明係關於如上文所定義幻化合物，其用於治療阿 茲海默氏病型老年性癡呆、由AIDS引發之癡呆、帕金森 氏病（Parkinson’s disease)、肌萎縮側索硬化亨庭頓氏舞 蹈症（HUntington，s Chorea)、偏頭痛、癲癇、精神分裂症、 抑鬱、焦慮症、急性焦慮症、眼科病(例如，視網膜病、 糖尿病性視網膜病、青光眼）、聽覺神經病症（例如，耳 鳴、化學治療誘導之神經病、_後神經痛及三又神經 痛、耐藥性、成癮、脆性X染色體症（Fragile χ)、自閉 症、智力發育遲緩（mental retardation)、精神分裂症及唐 氏症候群（Down’s Syndrome)。 本發明係關於如上文所定義式;[化合物，其用於治療與 偏頭痛、炎症性疼痛、神經性疼痛病症（例如，糖尿病性 神經病變、關節炎及類風濕性疾病）、下背部疼痛、手術 後疼痛有關之疼痛以及與各種病況（包括癌症、心絞痛、 腎絞痛或膽絞痛、月經痛、偏頭痛及痛風）相關之疼痛。 本發明係關於如上文所定義式I化合物，其用於治療中 風 '頭部創傷、缺氧性及局部缺血性損傷、低血糖症、心 灰管疾病及癲癇。 本發明亦係關於如上文所定義式I化合物之用途，其用 135278.doc 200924774 於製造用於治療mGluR第I組受體介導之病症及任一上文所 列示病症之藥物。 本發明之一個實施例係關於式I之化合物在治療胃腸道 病症中之用途。 本發明之另一實施例係關於一種用於抑制暫時性食道下 • 端括約肌鬆弛、治療GERD、預防胃食道逆流、治療反 • 胃、治療哮喘、治療喉炎、治療肺病、管理長勢不能、治 療腸躁症（IBS)及治療功能性消化不良（FD)之式I化合物。 ® 本發明之另一實施例係關於式I化合物之用途，其用於 製造用於抑制暫時性食道下端括約肌鬆弛、治療GERD、 預防胃食道逆流、治療反胃、治療哮喘、治療喉炎、治療 肺病、管理長勢不能、治療腸躁症（IBS)及治療功能性消 化不良（FD)之藥物。 本發明之另一實施例係關於式I化合物之用途，其用於 治療膀胱活動過度或尿失禁。 術語"TLESR(暫時性食道下端括約肌鬆弛）”在本文中可 根據 Mittal, R.K·，Holloway, R.H., Penagini，R·，Blackshaw， L.A., Dent, J., 1995; Transient lower esophageal sphincter ' re/flfxaiz.cn 7 OP ，第 601-61 0 頁來界定0 - 措詞”逆流"在本文中定義為由於機械性屏障作用在有的 時候會暫時失去而使胃之流體能夠進入食道。 術語”GERD(胃食道逆流疾病）”在本文中可根據vim Heerwarden, M.A.，Smout A.J.P.M., 2000; Diagnosis of reflux disease. Bailli6re’s Clin. Gastroenterol. 14，第 Ί59-ΊΊ免 135278.doc 19 200924774 定義。 上文式i化合物可用於治療或預防肥胖症或超重（例如， 促進體重減輕或維持重量減輕）、預防或逆轉體重增加（例 如，藥物誘發性回彈或在停止吸煙後回彈）、調節食慾及/ 或飽滿感、進食障礙（例如，貪食症、食慾減退、食慾亢 •進及強迫症）及渴求症（藥物、煙草、酒精、任一開胃大量 •營養素或非必需食品）。 本發明亦提供一種治療患有或可能患mGluR5介導之病 ® 症及任一上文所列示病症之患者之該病況的方法，其包括 對該患者投與有效量之如上文所定義式〖化合物。 特定病症之治療性或預防性治療所需劑量必須視所治療 主體、投藥途徑及所治療疾病之嚴重程度而有所變化。 除非有相反的明確規定’否則，在本說明書之上下文 中，術語"治療（"therapy"及"treatment")"包括預防 (prevention或prophylaxis)。術語"治療的"及"治療上的，，亦 應作相應解釋。 除非另有說明，否則在本說明書中，術語，，拮抗劑，，及"抑 制劑"應意指如下化合物：其可以任何方式部分或完全阻 • 斷使配體產生反應之轉導途徑。 •除非另有說明，否則術語"病症"意指任何與代謝型麵胺 酸受體活性相關之病況及疾病。 本發明之一個實施例係式I化合物與酸分泌抑制劑之組 合。本發明之"組合"可作為"固定組合"或作為"套件組合" 存在。"固定組合"定義為如下組合：其中⑴至少一種酸分 135278.doc -20 - 200924774 泌抑制劑；及（ϋ)至少一種式〗化合物共存於一個單元 中。"套件組合"定義為如下組合：其中⑴至少一種酸分泌 抑制劑，及（11)至少一種式I化合物存於一個以上之單元 中。”套件組合"之組份可同時、依序或分開投與。本發明 所用酸分泌抑制劑與式〗化合物之莫耳比例應在1:1〇〇至 100:1(如，1:50 至 50:1或1:20至2〇:1或1:1〇至1〇:1)範圍内。 兩種藥物可依相同比例分開投藥。酸分泌抑制劑之實例係 H2阻斷劑，例如，西咪替丁（eimetidine)、#尼替丁 (ranitidine);以及質子幫浦抑制劑，例如，吡啶基曱基亞 磺醯基苯并咪唑，例如，奥美拉唑（〇mepraz〇le)、伊索派 唑（esomeprazole)、南索派唑 〇ans〇praz〇le)、泮托拉唑 (pantoprazole)、雷貝拉唑（rabepraz〇le)或相關藥物何 如，來明拉唑（leminoprazole)。 非醫療用途 式I化合物以及此等化合物之鹽及水合物除可用於治療 用藥物外亦可在開發及標準化活體外及活體内測試系統中 用作藥理學手段以評價在實驗室動物（例如，貓、狗、兔 子、猴子、大鼠及小鼠）中mGluR相關活性抑制劑之效用， 以作為新穎治療藥劑研究的一部分。 製備方法 本發明之另一態樣提供用於製備式j化合物或其鹽或水 合物之方法。本文閣述用於製備本發明化合物之方法。 咸了解，下列說明此等方法之全文中，適當時可以熟習 有機合成之技術人員容易瞭解之方式，在各種反應物及中 I35278.doc -21- 200924774 間產物中加入適宜保護基團且隨後將之去除。用於使用此 等保護基團之習用程序以及適宜保護基團之實例均闡述於 (例如）"Protective Groups in Organic Synthesis", T.W.

Green, P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience, New York, (1999) 中。亦應瞭解，可在合成最終產物路徑中之任一中間產物 或最終產物上’藉由化學操作將基團或取代基轉化為另一 基團或取代基’其中可能之轉化類型僅隨該分子在此階段 所攜帶其他官能團之固有不相容性而限制該轉化中所用條 件或試劑。熟習有機合成之技術人員應容易瞭解此等固有 不相谷性可藉由以適宜次序實施適宜轉化及合成步驟來避 免。下文給出轉化實例且應瞭解，所闡述轉化並非僅限於 其所例示轉化法之通用基團或取代基。其他適宜轉化之參 考及說明在"Comprehensive 〇rganic Transformations_A

Guide to Functional Group Preparations" R. C. Larock, VHC Publishers公司，（1989)中給出。其他適宜反應之參 考及說明闡述於有機化學教科書，例如’ "Advaneed

Organic Chemistry"，March，第 4版，McGraw HiU (1992) 或"Organic Synthesis"，Smith，McGraw Hm，（1994)中。用 於純化中間體及最終產物之技術包括（例如）熟習此項技術 者可容易地理解之正相及逆相管柱或旋轉分析板層析法、 再結晶、蒸㈣及液相液相萃取法或固相液相萃取法。 取代基及基團之定義係如在以中所示，& 了在以不同方 式定義時。除非另有明確說明，否則術語"室溫”及"環境 溫度"應意指介於“。(：與乃它間之溫度。 135278.doc -22- 200924774 除非另有說明，否則術語"逆流"應意指在處於或高於指 定溶劑之沸點的溫度下使用該溶劑。 縮略語 aq. 水性 Boc 第三丁氧基羰基 DCM 二氣曱烷 DIBAL-H 二異丁基氫化鋁 DMF 二甲基曱醯胺 ® DMSO 二甲亞礙 Et 乙基 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 Fmoc 9-苐基甲氧基羰基 h 小時 HPLC 高效液相層析 LAH 氫化鋰鋁 LCMS HPLC質譜 LG 離去基團 MeOH 曱醇 分鐘

Me 曱基 MTBE 曱基第三丁基醚 n-BuLi 1-丁基鋰 NMR 核磁共振 135278.doc -23- 200924774 NCS 氯琥ίό醯亞胺 IPA 2-丙醇 PG 保護基團 RT, rt, r.t. 室溫 TEA 三乙胺 TFA —*氣乙酸 THF 四氫呋喃 quant. 定量產率 中間體之製備 在下文所給出合成路徑中所提供中間體可用於進一步製 備式I化合物。其他初始材料可購得或可藉由在文獻中所 述方法來製備。下文所述合成途徑係可使用之製備法的非 限制性實例。一名熟習此項技術者可瞭解可使用的其他途 徑。其中PG係諸如Boc或Fmoc等保護基團之式11-¥1化合物 可購得（在文獻中公開）或可藉由標準轉化使用熟習此項技 術之人員熟知的方法自此等化合物來製備。可能需要第二 保護基團以遮蔽某些氮雜-二環系統之反應性官能團。可 導入與G正交之此保護基團且稍後按照熟習此項技術之人 員熟知的程序去除之。視保護基團之性質而定，該去除可 能需要額外合成步驟。 異噁唑之合成 135278.doc -24- 200924774

0=s( 、PG OH

II

f") 對應於式I之Y-R3

反應圖1 式VI之醛可用於製備異噁唑。可將式II化合物之酸性部 分轉化成式IV之烷基酯（例如，甲酯或乙酯），可使用諸如 DIBAL-H等溫和還原劑在諸如曱苯等溶劑中於低溫（例 φ 如，-78°C )下將該烷基酯轉化成式VI之醛（WO 2005/080386)。 高溫或強還原劑可形成單獨或作為與式VI之醛之混合物的 式V之一級醇。式V之醇亦可藉由使用諸如硼烷-二甲硫醚 複合物等還原劑還原式II化合物之羧酸部分或藉由兩步程 序來獲得，其中首先形成諸如混合酸酐等活性酸衍生物且 接下來使用諸如硼氫化鈉等還原劑還原之。可藉由使用諸 如DMSO/吡啶-三氧化硫複合物等試劑、在諸如DCM等溶 劑中、在介於0°C至室溫之溫度下實施氧化反應來將式V化 135278.doc -25- 200924774 合物之醇部分轉化成式νι之醛。另外，可藉由業内已知的 方法（例如’藉由將酸轉化成一級醯胺）將式II之酸轉化成 式之腈’接下來對該腈實施脫水。可使用業内公認的程 序將此等腈轉化成式VI之醛。 可藉由在諸如吡啶或含有適宜鹼（例如，碳酸鈉）之 MeOH與水之混合物等溶劑中、在介於〇<»c至室溫間之溫度 下使用羥胺處理來將式…之醛轉化成式VII之肟，反應圖 2 °可藉由使用諸如NCS等試劑對式VII之肟實施氣化，繼 而使用R-經適當取代之乙炔實施1，3·偶極環化加成來製備 式IX之異噁唑，其中R可為芳基、經取代芳基、雜芳基或 遮蔽基團（例如，炫基錫院）（Steven，R. V.等人，j. Am Chem. Soc.，(1986)，108，1039)。

或遮蔽基困

X lx 反應圊2 其中R係遮蔽基團之式IX異噁唑可以此方式來製備並藉 135278.doc -26- 200924774 由交又偶合反應將遮蔽基團轉化成期望R基團。舉例而 言，使用三烷基甲錫烷基乙炔可產生三烷基曱錫烷基異噁 唑，其可經歷諸如（例如）Stille型交叉偶合等反應以藉由與 適當芳基自化物偶合來導入芳基取代基。或者，可按照單 罐程序自式VI之醛製備式IX之異噁唑（J. 〇rg. Chem., (2005)，70, 7761_7764)。

Q

Q 氧化

R- -Μ Vg j ° R = H R- OH PG

反應圖3 ❹ 亦可藉由使式XIII之炔酮（ynone)與羥胺或其適宜鹽反應 來製備式IX之異嗯嗤。此等炔嗣可藉由向式幻之衍生物 (例如’醛、Weinreb酿胺或醯氣）中添加諸如炔氧化鋰等金 屬炔氧化物來形成。在其中式ΧΙ之化合物係醛（R,=H)之情 形中’可產生中間體式之炔丙基醇，其接下來可經氧 化以形成炔酮（美國專利US 2007037816)。 135278.doc •27- 200924774

XIV XV IX

LG =諸如烷氧基基團或-Cl等適宜離去基團 反應圖4 或者’可藉由在文獻中公認的方法使式XV之二羰基化 Φ 合物與羥胺或其適宜鹽反應來製備式IX之異噁唑。可藉由 文獻中公認的方法實施克萊森型縮合反應（ciaisen-type condensation)來自式χΐν之羧酸衍生物製備此等二羰基化 合物。 可藉由標準方法對式IX之異噁唑中間體實施脫除保護基 反應以獲得式X之胺，反應圖2。 [1，2,4卜噁二唑之合成

反應圖5 0¾ 式II之羧酸可用於製備對應的式XVI之3-雜芳基取代之 [1，2,4]嗯二吐’此可藉由激活酸性部分、添加適宜雜芳基 135278.doc -28- 200924774 取代之羥基脒XVI以形成酯，繼而環化成噁二唑XVI來達 成。[參見 Tetrahedron Lett”（2001)，42，1495-98，Tetrahedron Lett·, (2001)，42，1441-43及Bioorg. Med. Chem. Lett. (1999)， 9，1869-74]。可使用諸如氣甲酸異丁酯等氣甲酸烷基酯、 於諸如三乙胺等鹼存在時、在諸如THF等適宜溶劑中活化 •作為混合酸酐之酸。或者，可採用活化該酸之其他熟知方 .法，包括於諸如HOBt或DMAP等共試劑存在或不存在時、 在諸如DMF、DCM、THF或MeCN等適宜溶劑中、在自-20 Φ 。(：至100°c之溫度下使用諸如EDCI、DCC、DIC或HBTU等 試劑原位激活該酸。該環化反應可藉由在諸如吡啶或DMF 等溶劑中、於微波輻照下加熱或藉由採用諸如TBAF等觸 媒來完成。雜芳基取代之羥基脒可自腈獲得，此可藉由於 諸如NaOH、NaHC03或Na2C03等鹼存在時、在諸如EtOH 或MeOH或諸如此類等溶劑中、在介於室溫與100°C間之溫 度下添加羥胺氫氣酸鹽以產生游離羥胺來完成。

Q

1. NKjOH-HQ

Q / III 反應圖6

XIX

可藉由有效地反轉連接至[1,2,4]噁二唑之取代基來自式 III之腈製備式XIX之5-雜芳基取代之[1,2,4]噁二唑。式III 135278.doc -29- 200924774 之腈與上文所述羥胺反應以提供中間體羥基脒XXI且可使 用上文對式II化合物至式XVI化合物轉化所述方法藉助含 有雜芳基基團之醯化試劑轉化成式XIX之[1，2,4]噁二唑。 接下來，可藉由標準方法對式XVI及XIX之異噁唑中間體 實施脫除保護基反應以分別獲得式XVII及式XX之胺。 四唑之合成

Q 一 Q 一〇 H 'PG Y XXII XXIII -rixjr2 -c >

XXIV XXV XXVI 反應圖7 式III腈可用於製備對應的式XXII之四唑，此可藉由較佳 ® 使用諸如二丁基錫氧化物或ZnBr2等觸媒、在諸如DMF、 水或甲苯等溶劑中、在50°C至200°C之溫度下藉助習用加 .熱或微波輻照使用諸如NaN3、LiN3、三烷基錫疊氮化物或 三曱基甲矽烷基疊氮化物等疊氮化物處理來達成（參見J. Org. Chem. (2001), 7945-7950; J. Org. Chem. (2000), 7984-7989或 J. Org. Chem. (1993)，4139-4141)。在文獻中已經報 告可使用各種偶合配偶體對5-經取代之四唑實施N2-芳基 化。式XXIII化合物（R1及R2係如在式I中所定義）可使用（例 135278.doc -30- 200924774 如）下列作為受過渡金屬介導之芳基化劑來製備：式XXIV 之硼酸（具有B(OH)2部分）或對應的式XXV之碘鏽鹽[具有 I+-Ar部分]、或對應的三芳基鉍二乙酸鹽XXVI(具有 Bi(OAc)2Ar2 部分）（參見 Tetrahedron Lett·，（2002)，6221-6223; Tetrahedron Lett., (1998)，2941-2944; Tetrahedron • Lett·，（1999)，2747-2748)。對於硼酸而言，在諸如 DCM、 DMF、二噁烷或THF等溶劑中、在室溫至100 °C之溫度下 使用化學計量量之乙酸Cu(II)及吡啶。對於碘鑌鹽而言， Ο 在諸如i-BuOH等溶劑中、於50°c至l〇〇°C之溫度下使用催 化量之Pd(II)-化合物（例如，Pd(OAc)2)或Pd(0)複合物（例 如，Pd(dba)2)或/及催化量之Cu(II)-羧酸鹽（例如，Cu(II)-苯基環丙基甲酸鹽）及雙齒配體（例如，BINAP或DPPF)。 對於三芳基鉍二乙酸鹽而言，可於Ν，Ν，Ν’，Ν·-四曱基胍存 在時、在諸如THF等適宜溶劑中、於40°C-60°C之溫度下加 熱時採用催化量之乙酸銅。式XXV之碘鑌鹽可自（例如）對 應的硼酸獲得，此可藉由使用超價碘取代之芳族烴（例 W 如，羥基（甲苯磺醯氧基)碘代苯或PhI(OAc)2x2TfOH)在二 氣甲烧或諸如此類中處理來達成（參見Tetrahedron Lett.， 2000, 5393-5396)。三芳基鉍二乙酸鹽可在諸如回流THF等 適宜溶劑中自芳基溴化鎂及三氣化鉍獲得三芳基鉍烷、隨 後使用諸如過硼酸鈉等氧化劑在乙酸中將該三芳基鉍烷氧 化成二乙酸鹽來製備（Synth. Commun.，（1996, 4569-75))。 可藉由標準方法對式XXII之四唑中間體實施脫除保護基 反應以獲得式XXIII之胺。 135278.doc •31 · 200924774 炔烴之合成

PPhs，CBr4

h 、PG

XXVIII

XXVII 反應圖8

可在諸如DCM等惰性溶劑中使用三苯基膦及四溴化碳處 理式VI之醛化合物以獲得式XXVII之二溴化合物，其在諸 如THF等醚溶劑中、於-78°C下可與諸如第二-丁基鋰等烷 基鋰試劑反應以獲得式XXVIII之炔烴（參見J. Med. Chem.， (1992)，35 (9)，1550-7及 Eur. Pat. Appl.，408879，23 Jan 1991]。 三唑之合成

炔烴XXIX (PG=保護基團）可轉化成XXX，例如，此藉 由在20°C -l〇〇°C下、於諸如dmso/h2o等溶劑混合物中使 用式XXXI之鹵化取代之苯基（反應圖9，其中LG=I)以及疊 氮化鈉及銅觸媒處理化合物XXIX來達成（參見J. Org. Chem. (2002)，67, 3057) °

QXXIX

XXXI

反應圖9 135278.doc •32- 200924774 另一區域同分異構體（例如，XXXIII，反應圖10)可使用 諸如K2C〇3等無機鹼在DMSO中自可經歷與諸如XXXI(反應 圖1 0，LG=F)等鹵化苯基之親核加成的經取代三唑XXXII 合成（Tetrahedron，（2001)，57 (22)，4781-4785))或者於（例 如）氣化銅存在並加熱時自可與芳基肼XXXV反應的α-羥基 酮XXXIV合成（Synth. Commun.，（2006), 36，2461-2468) 〇

反應圖10 胺基-三唑之合成

XXXVII

反應圖11 135278.doc -33-

XXXVIII 200924774 可對式XXXV之脫除保護基之胺依序實施硫脲形成、烷 基化及二峻形成反應以獲得式I化合物，其中X、Rl_R4及Z 係按照在式I中所定義來選擇（反應圖10)。式χχχνπ之硫 腺可自公認的方法獲得：於R4NH2存在時、在諸如 MeOH、EtOH及諸如此類等溶劑中、在2〇°c _ι〇〇π下使用 • (例如）異硫氰酸酯R4scn或1，1-硫代羰基-二咪唑。可使用 > 諸如碘甲烷（在反應圖11中所示）或碘乙烷等烷基化劑、在 諸如THF、DMF、丙酮、DCM等溶劑中、於諸如（但不限 β 於）碳酸鈉或第三-丁醇鈉等適宜鹼存在或不存在時、在室 溫或高溫下對該等硫脲中間體實施烷基化以獲得式 XXX VIII之異硫脲。當採用械代烧時，可分離作為氮埃酸 鹽之產物[參見 Synth.Commun.，（1998)，28，741-746)。式 XXXVIII之化合物可與醯基肼或相繼與肼及醯化試劑反應 以形成中間體，可藉由在ot：至150t下加熱、在諸如IPA 或DMSO、吡啶或DMF等適宜溶劑中對該中間體實施環化 ©以獲得式I之3-胺基三唑。上文所述醯基肼可購得或可藉由 在諸如MeOH、EtOH或THF等溶劑中、在自環境溫度至1〇〇 °C之溫度下與肼反應來自對應的燒基酯合成。該等酯可藉 由一名熟習此項技術之人員已知的標準方法自緩酸獲得。 實例 現藉由下列非限制性實例對本發明加以闡釋。 一般方法 所有初始材料可賭得或早先在文獻中有所述。除非另有 說明’否則使用 Varian Mercery Plus或Varian INOVA光譜 135278.doc • 34- 200924774 計記錄4譜及13C NMR譜，對於NMR而言，該等光譜 計分別在300、400及600 MHz下作業，使用TMS或殘留溶 劑信號作為參考’在作為溶劑之說代氣仿中進行。所有報 告化學位移均採用δ換算以ppm計及在報告中所出現信號之 精細分類係s:單峰，br s:寬單峰，d:雙重峰，t:三重 . 峰，q:四重峰，m:多重峰。 . 使用由Alliance 2795 (LC)及ZQ單相四極質譜儀構成之

Waters LCMS相繼記錄液相層析分離以及質譜檢測之連線 © 分析。質譜儀配備有以陽及/或陰離子模式作業之電噴射 離子源。離子喷霧電壓係±3 kV且質譜儀以0.8 s掃描時間 自 m/z 100-700 掃描。至於管柱，對 SunFire C18 2.5μ 3x20 mm應用存於pH 3:曱酸緩衝液或ΡΗ 7:乙酸緩衝液中之 5%至100%MeCN之線性梯度。 藉助Waters Delta Prep Systems及二極管陣列檢測器使 用Kromasil C8，10 μιη管柱（使用存於0.2%乙酸水溶液、〇 1

Μ乙酸銨緩衝液（pH 7)或存於0·1 Μ ΝΗ3水（pH 10)中之 A W MeCN梯度）實施製備型逆相層析。亦可藉由急驟層析在填 充有矽膠之玻璃管柱中純化產物。在可產生於2450 MHzf •之連續輻照的Smith Synthesizer Single-mode微波諧振腔 (Personal Chemistry AB，Uppsala ’ 瑞士）中實施微波加 熱。 實例1 ·· (38,538,631^，6匕11)-3-苯基四氩環丙烷[3,4]吡略并 [1，2-(；】[1，3】噁唑-5(111)-酮 135278.doc -35- 200924774

標題化合物可自（3S，7aR)-3-苯基-i,7a_二氫_5H-吡咯并 [1,2-c][ 1，3] °惡峻-5-酮開始按照對對映異構體所述（乂 C/zew·，1999，以，547-555)來合成，獲得η.4 g粗製標題化 合物’其未經進一步純化即可用於實例2中。 Ή NMR (400 MHz, CDC13)： δ 7.37-7.22 (m, 5Η), 6.29 (s, 1H), 4.18 (dd, 1H), 3.86 (dd, 1H), 3.43 (dd, 1H), 2.10 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.29 (m, 1H), 1.11 (m, 1H) ° 實例2 : [(lR，2R，5S)-3-节基-3-氮雜二環[3.1.0】己-2-基】甲酵

在環境溫度下’將實例1之粗製標題化合物（9.4 g，44 mmol)存於無水THF (11〇 mL)中之溶液逐滴添加至LAH (3.32 g，87.3 mmol)存於無水THF (87 mL)之 1 Μ溶液中。 將該混合物在回流下加熱3 0 h且隨後冷卻至〇 。緩慢地 添加飽和硫酸鈉水溶液直至出現沈澱。該混合物用Et0Ac 稀釋且經由石夕藻土過渡。該渡液經由無水硫酸鈉乾燥、過 據並濃縮。藉由急驟層析使用己烧/EtO Ac作為洗脫劑來純 化殘留物以獲得標題化合物（3.63 g，41%)。 ]H NMR (400 MHz, CDC13)： δ CDC13 7.36-7.18 (m, 5H), 135278.doc -36- 200924774 3.81 (d, 1H), 3.67 (d, 1H), 3.56 (dd, 1H), 3.46 (dd, 1H)S 3.21 (dd, 1H) 2.97 (t, 1H), 2.58 (d, 1H), 2.04 (bs, 1H), 1.43 (m，1H)，1.34 (m，1H)，0.72 (dt，1H)，0.27 (q，1H)。 實例3 : (1R，2R，5S)-2-(羥基甲基）·3-氮雜二環[3.1.0】己燒-3-甲酸第三丁基酯

向實例2之標題化合物（3.63 g，17.9 mmol)存於EtOAc (21 mL)之溶液中添加二碳酸二第三丁基酯（4.23 g，19.6 mmol) 及活性炭載鈀（0·76 g)。在8 bar下對該混合物實施氫化直 至實例2之標題化合物耗盡。過濾該反應混合物並濃縮濾 液。藉由急驟層析使用庚烷/EtOAc作為洗脫劑來純化殘留 物以獲得標題化合物（1.36 g，36%)。 ]H NMR (400 MHz, CDC13)： δ CDC13 4.07 (dd, 0.7H), 3.90 φ (t, 0.4H), 3.78-3.71 (m, 0.7H), 3.70-3.60 (m, 1.8), 3.55 (d, 0.7H), 3.46-3.33 (1.7H), 1.51-1.41 (m, 10H), 1.40-1.21 (m, 1H), 0.75-0.66 (m, 1H)，0.19-0.12 (m，1H)。 實例4 : (lR，3R，5R)-2-(第三-丁氧基羰基）-2·氮雜二環 [3.1.0】己烷-3-甲酸

135278.doc -37· 200924774 在5分鐘内向（lR，3R，5R)-2-氮雜二環[3丨〇]己烷·2 3_二 甲酸2·第三丁基酿3-乙基醋（u.7 g，心随叫存於£霞 (40 mL)之經攪拌溶液添加氩氧化鋰單水合物（23i 55〇 ❹

mmol)存於水（20 mL)中之溶液，同時將溫度保持在介於17 充至23艽之間。在氮氣氛中攪拌過夜後，在減壓下、於4〇 °C下濃縮該反應混合物。使殘留物在水與MTBEi間分配 並用第二份MTBE洗滌水性層。丢棄有機層。向該水性層 中添加MTBE並藉由逐滴添加i M hc1a溶液將pH調節至 2。用第一份]VITBE萃取水性層且在減壓下、於3〇 35。〇下 濃縮合併有機層以獲得作為蠟狀固體之標題產物（9 76 g， 94%) 〇 H NMR (400 MHz, CDC13)： δ 4.69-4.49 (m, 1H), 3.60-3.46 (m, 1H), 2.72-2.05 (m, 2H), 1.60-1.32 (m, 10H), 0.95-0.60 (m，2H)。 實例5 : (1R，3R，5R)·3·(羥基甲基）_2_氮雜二環[310】己烷一 2-甲酸第三丁基酯

在環境溫度下，向存於無水THF (210 mL)之實例4標題 化合物（9.60 g，42.2 mmol)中經15分鐘逐滴添加硼烷-二甲 硫趟-複合物存於THF (23.2 mL, 46.5 mmol)中之2 Μ溶液。 將該反應物在回流下加熱1.5 h且隨後藉由冰浴冷卻之。在 135278.doc -38 - 200924774 3 0 min内逐滴添加甲醇（40 mL)，同時將溫度維持在介於4 C至15 C之間。移除冰浴並使反應物經3 5 m i η達環境溫 度。在減壓下、於2 5 °C下濃縮該反應混合物並使殘留物在 DCM與水之間分配。有機層依序使用飽和碳酸氫鈉水溶液 及鹽水洗滌。來自最終洗滌之水性層使用少量DCM洗務且 合併有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾並在減壓下濃縮以獲 得粗製標題產物（9.15g，定量產率 NMR (400 MHz, CDC13): δ 4.82 (bd, 1Η), 4.33 (m, 1H), 3.52-3.40 (m, 3H), 2.45 (m, 1H), 1.53-1.43 (m, 11H), 0.78 (m，1H)，0.39 (m，1H)。 實例6.1 : (lR，3R，5R)-3-甲醮基-2-氮雜二環[3.1.0】己烷-2_ 甲酸第三丁基酯

φ 在氮氣氛中，將實例5粗製標題化合物（9.15 g，42.9 mmol)溶於無水 DCM (100 mL)中。添加 DMSO (30 mL，429 mmol)及TEA (18.0 mL，129 mmol)並將反應溶液冷卻至-3 °C。在5分鐘内逐份添加三氧化硫-吡啶複合物（17.7 g，112 mmol)並使反應溫度經85分鐘達環境溫度。將該反應溶液 冷卻至 5°C。添加 DMSO (11.6 mL，163 mmol)、TEA (7.1 mL，51.4 mmol)及吡啶-三氧化硫複合物（6.82 g，42.8 mmol)。使該反應物經45分鐘達環境溫度。該反應物溶液 135278.doc -39- 200924774 用MTBE稀釋並用5%碳酸氫鈉水溶液洗滌。水性層用 ΜΤΒΕ萃取兩次。依序用丨_酸二氫鈉水溶液、水、i μ 磷酸二氫鈉水溶液及水洗滌合併有機層。在減壓下、於3〇 °c下共蒸發合併有機層與甲苯以獲得粗製標題產物(1〇 4 g，70重量％純度，81%)。 NMR (400 MHz, CDC13): δ 9.50-9.36 (m, 1Η), 4.67-4.42 (m, 1Η), 3.65-3.48 (m, 1H), 2.54-2.32 (m, 1H), 2.33-2.11 (m, 1H), 1.60-1.37 (m, 10 H), 0.87-0.72 (m, 1H), 0.38-0.28 ❹ (m, 1H)。 以類似方式合成下列化合物： 實例 結構 名稱 產量 6.2 (1民21^58)-2-曱醯基-3-氮雜二環[3.1,0]己烷_3_曱 酸第三丁基酯 1.13 g 91% 'HNMR (400 Nfflz, CDC13): δ 9.65-9.55 (m, 1H), 4.39-4.17 (m, 1H), 3.70-3.45 (m, 2H), 1.63-1.49 (m, 2H), 1.47-1.35 (m, 9H), 0.89-0.76 (m, 1H), 0.38-0.29 (m, 1H) 實例7.1 : (lR，3R，5R)-3-[(羥基亞胺基）甲基】_2_氮雜二環 [3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁基酯 HO?\ 將實例6·ι之粗製標題化合物（lo.o g，7〇重量％純度， 33.1 mmol)溶於MeOH (50 mL)中。添加水（40 mL)並藉由 135278.doc -40- 200924774 冰洛冷卻所得 〜 添加羥基氣化銨（2.76 g，39.7 mmol)及碳酸鈉 ^ u ^ i9·9 mm〇l)。移除冷卻浴並將反應 物在環境溫度下轉 視件5 h。在減麗下濃縮該反應混合物直 至除大部分Me〇H。所得混合物用MTBE萃取（3次）且合 、機層與甲苯共蒸發。將殘留物在少量DCm中製成漿 液過;慮並在減壓下濃縮以獲得純度為9〇重量。之粗製標 通產物（8.42 g，定量產率）。

(400 MHz，CDC13): δ 8.33-7.76 (4 bs，與 1H-起)，7.36-6.52(若干個 m，與 1H一起$ 52_4 η (m，m)，3 61_3 38 (m, 1H), 2.70-2.31 (m, 1H), 2.23-1.80 (m, 1H), 1.56-1.28 (m，10H)，0.95-0.31 (m，2H)。 以類似方式合成下列化合物： 實例 結構 名稱 產董 7.2 (lR，2R，5S)-2-[(羥基亞胺基）甲基]-3-氮雜二環 [3.1.0]己院-3-甲酸第三丁基酯 1.25 g 96% ^NMR (400 MHz, CDC13): δ 8.04, 7.77, 7.62及7.57 (4s，與 1H—起)，7.42, 7.34, 6.65及6.59(4(1，與111一起)，5.01，4_92,4.55及4.40(4(1，與111一起)，3.67-3.34 (m, 2H), 1.59-1.49 (m, 2H), 1.47-1.39 (m, 9H), 0.80-0.69 (m, 1H), 0.32-0.23 (m, 1H) 實例8.1 : (lR，3R，SR)-3-【氣（羥基亞胺基）甲基1-2-氮雜二環 【3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁基酯

135278.doc • 41 · 200924774 藉由冰浴冷卻實例7.1之粗製標題化合物（8.29 g，90重量 %純度’ 33.0 mmol)存於MTBE (75 mL)中之溶液。在1分 鐘内逐份添加NCS (5.23 g，39.6 mmol)。移除冰浴並將反 應物簡單地加熱至回流，5分鐘。使該反應物冷卻並在環 境溫度下攪拌2 h。用水洗滌（3次）該反應物溶液並在減壓 下共蒸發有機層與甲笨以獲得粗製標題產物（9.3 g，72重量 %純度，78%)。 !H NMR (400 MHz，CDC13): δ 9.07，8.52 (bs，與 1H—起）， ❹ 4·95，4.85 (m ’ 與 1H—起），3.58-3.44 (m, 1H)，2.62-2.45 (m, 1H), 2.13-2.05 (m, 1H), 1.54-1.38 (m, 10H), 0.98 (m, 1H)，0.82-0.65 (m，1H)。 以類似方式合成下列化合物： 實例 結構 名稱 產量 8.2 HOJ^〇 (llUR^S):[氣(羥基亞胺基)甲基]-3-氮雜二環 [3.1.0]己烧-3-甲酸第三丁基酯 1.25 g > 定量 ^NMR (400 MHz, CDC13): δ 8.65-8.55 (m, 1H), 4.75-4.52 (m, 1H), 3.66-3.53 (m, 2H), 1.65-1.52 (m, 2H), 1.48-1.36 (m, 9H), 0.82-0.73 (m, 1H), 0.37-0.22 (m 1H) 實例9.1 : (lR，3R，5R)-3-[5-(3-甲基苯基）異噁唑_3_基】_2-氩 雜二環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁基酯

在環境溫度下，以8 mL/h速率將實例8.1之粗製標題化 合物（1.91 g，5.27 mmol ’純度為72重量％)存於無水二氣甲 135278.doc -42- 200924774 烷（15 mL)中之溶液逐滴添加至1-乙炔基_3-曱基苯（1.36 ml, 10.6 mmol)及 TEA (1.24 mL，8·97 mmol)存於二氣甲烷（15 mL)之經劇烈攪拌溶液中並將該反應物攪拌過夜。在減壓 下去除溶劑並在EtOAc (20 mL)中經30 min將殘留物製成漿 液。過濾該混合物並用EtOAc洗滌固體。在減壓下濃縮合 併濾液並藉由急驟層析（使用乙酸乙酯存於庚烷中之梯度 作為洗脫劑）純化殘留物以獲得標題化合物（1,20 g, 67%)。 'H NMR (400 MHz, CDC13)： δ 7.57-7.50 (m, 2H), 7.37-7.28 ❹ （m，1H)，7.27-7.29 (m，1H)，6.48-6.31 (m，1H)，5.37-5.34 (m, 1H), 3.77-3.59 (m, 1H), 2.78-2.32 (m, 5H), 1.65-1.34 (m，10H)，0.84-0.60 (m，2H)。 以類似方式合成下列化合物： 實例 結構 名稱 產量 9.2 (l!UR，5R)-3-[5-(3-氣苯基)異噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己炫X2-甲酸第三丁基酯 5.36 g 74% *HNMR (400 MHz, CDC13): δ 7.74-7.71 (m, 1H), 7.64-7.58 (m, 1H), 7.43-7.35 (m, 2H), 6.52-6.37 (m, 1H), 5.36-5.24 (m, 1H), 3.78-3.59 (m, 1H), 2.79-2.68 (m, 0.5 H), 2.65-2.52 (m, 1H), 2.40-2.32 (m, 0.5 H), 1.67-1.58 (m, 1H), 1.56-1.34 (m, 9H), 0.84-0.61 (m, 2H) 9.3 γ 名。 (111,2民58)-2-[5-(3-氯苯基)異噁唑-3-基]-3-氮雜二環[3.1.0]己烷-3-曱酸第三丁基酯 0.96 g 58% 】HNMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.77-8.71 (m, 1H), Ί.61-1.61 (m, 1H), 7.44-7.35 (m, 2H), 6.35 (s, 0.4H), 6.40 (s, 0.6H), 5.11 (s, 0.4H), 5.00 (s, 0.6H), 3.80-3.66 (m, 1H), 3.59-3.45 (m, 1H), 1.88-1.60 (m, 2H), 1.48-1.35 (m, 9H), 0.88-0.87 (m, 1H), 0.44-0.32 (m, 1H) 135278.doc •43· 200924774 實例10.1 : (1仏31^，5幻-3-【5-(3-甲基苯基）異噁唑3基】_2-氮雜二環[3.1.0】己烷 Ο-Ν Η Η .在環境溫度下，向實例9.1之標題化合物（1 1〇 g，323 mmol)存於二氣甲烧（5 mL)之經攪拌溶液中添加tfa (5 mL，64.90 mmol)。將該反應物攪拌55 mip濃縮反應溶液 Φ 並將殘留物溶於二氯甲烧中且相繼用1 Μ氫氧化鈉水溶液 及水（phase-separato™)洗滌。濃縮有機層以獲得標題化合 物（0.774 g，100%)。 NMR (400 MHz，CDC13): δ 7.58-7.53 (m，2H)，7.33 (t 1H), 7.23 (d, 1H), 6.38 (s, 1H), 4.69 (dd, 1H), 2.91 (td, 1H)，2.55 (m，1H)，2.40 (s，3H)，2.17 (dd，1H), 2.13 (bs， 1H)，1.54 (m，1H), 0.60 (m，1H)，0.39 (m，1H) 以類似方式合成下列化合物。 實例 結構 名稱 產量 10.2 (1良3反511)-3-[5-(3-氣苯基)異噁唑-3-基]-2- 氮雜二環[3.1.0]己烷 3.70 g 100% ^-NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.75-7.72 (m, 1H), 7.65-7.60 (m, 1H), 7.41-7.35 (m, 2H)，6.43 (s，1H)，4.69 (dd，1H), 2.92 (td，1H)，2.55 (m，1H)，2.22 (bs, 1H)， 2.17 (dd, 1H), 1.54 (m, 1H), 0.61 (m, 1H), 0.36 (m, 1H) 10.3 (lR，2R，5S)-2-[5-(3-氣苯基)異噁唑-3-基]-3-氮雜二環[3.1.0]己烷 0.64 g 95% ^-NMR (400 MHz, CDCI3)： δ 7.76 (m, 1H), 7.68-7.62 (m, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 6.49 (s, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.11 (dd, 1H), 3.02 (d, 1H), 1.89 (bs, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 0.69 (m, 1H), 0.38 (m, 1H) 135278.doc 200924774 實例11.1 : (1R，3R，5R)_N_甲基_3_[5_(3_甲基苯基）異噁唑 3-基】-2-氮雜二環【3.1.0]己燒_2_甲硫斑胺

在環境溫度下，將異硫氰酸甲酯（243 mg，3 32爪出〇1)存 於二氣甲烷（3 mL)之溶液添加至實例1〇」標題化合物（726 ❹ mg，3.02 mmol)存於二氣甲烷（5 mL)之經攪拌溶液中。在 搜摔2 h後’濃縮該反應物並使殘留物在EtOAc與水之間分 配。有機層經由硫酸鈉乾燥、過濾並在減壓下濃縮以獲得 標題化合物產物（0.974 g，95%)。 *H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.57-7.51 (m, 2Η), 7.33 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 6.47 (s, 1H), 5.97-5.90 (m, 1H), 5.82 (bs, 1H), 4.01 (bs, 1H), 3.13 (d, 3H), 2.84 (m, 1H), 2.46 (dd, 1H), 2.40 (s, 3H), 1.75 (m, 1H), 1.02-0.92 (m, 2H) φ 以類似方式合成下列化合物。 實例 結構 名稱 產量 11.2 s 乂 (lR,3R，5R)-3-[5_(3-氣苯基)異噁唑-3-基]-N-甲基-2-氮雜二環[3.1.0]己烷-2-曱硫醯胺 4.57 g 98% (400 MHz, CDC13)： δ 7.74-7.72 (m, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.41-7.36 (m, 2H), !hnmr 6.55 (s, 1H), 5.97-5.82 (m, 2H), 3.86 (bs, 1H), 3.16 (d, 3H), 2.83 (m, 1H), 2.47 (dd, 1H), 1.78 (m, 1H), 1.06-0.99 (m, 1H), 0.99-0.92 (m, 1H) 135278.doc •45 200924774 11.3 (111,21^58)-245-(3-氣苯基)異噁唑-3-基]·Ν-曱基-3-氮雜二環[3.1.0]己院-3-甲硫醯胺 0.71 g 89% S〜H ^NMR (400 MHz, (CD3)2SO): δ 7.96 (bs, 1H), 7.83 (m, 1H), 7.60-7.50 (m, 3H), 7.11 (s, 1H), 5.74 (bs, 1H), 4.50-3.60 (m, 2H), 2.85 (d, 3H), 1.79 (m, 1H) 1.66 (m, 1H), 0.82 (m, 1H), 0.25 (m, 1H) ’ 實例12.1 : (1R，3R，5R)-N-甲基-3-[5·(3-甲基苯基）異噁唑_ 3_基]-2-氮雜二環[3.1.0]己烷-2-硫代甲亞胺酸曱酯

在環境溫度下’將第三-丁醇鈉（218 mg，2.27 mmol)添加 至實例11.1標題化合物（910 mg, 2.90 mmol)存於無水2_ MeTHF (10 mL)之經授拌溶液中。將該反應物攪拌5 min， 此後添加峨甲烧（0.211 mL，3.40 mmol)。將該反應物在環 境溫度下攪拌總共5 h，在此期間再添加第三-丁醇鈉（6〇 © mg，0·62 mm〇l)。該反應物用 2-MeTHF (5.00 mL)稀釋且用 水洗滌。有機層經由硫酸鈉乾燥、過濾並在減壓下濃縮以 . 獲得標題化合物產物（945 mg，99%，純度為83重量％)。 'H NMR (400 MHz, CDC13): δ 7.56-7.51 (m, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.22 (d, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.79 (dd, 1H), 3.76 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.71 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.40 (S} 3H), 2.33 (dd, 1H), 1.66 (m, 1H), 0.88 (m, 1H), 0.76 (m, 1H) 以類似方式合成下列化合物。 135278.doc •46- 200924774 實例 結構 名稱 產量 12.2 1 r 甲基(1艮3艮511)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-N-曱基-2-氮雜二環[3.1.0]己烷-2-硫代甲 亞胺酸曱酯 4.65 g 78% ^NMR (400 MHz, CDC13)： δ 7.70 (m, 1H), 7.63-7.59 (m, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 6.31 (s, 1H), 5.78 (dd5 1H), 3.79-3.72 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.71 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (dd, 1H), 1.66 (m, 1H), 0.89 (m, 1H), 0.72 (m, 1H) 12.3 (lR，2R，5S)-2-[5-(3-氣苯基)異噁唑-3-基]-N-曱基-3-氮雜二環[3.1.0]己烷-3-硫代曱亞胺酸 曱酯 0.68 g 99% ^NMR (400 MHz, CDCI3): δ 7.75-7.73 (m, 1H) 7.67-7.62 (m, 1H), 7.41-7.37 (m, 2H), 6.41 (s, 1H), 5.46 (s, 1H), 3.74 (d, lh), 3.66 (dd, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.74-1.63 (m, 2H), 0.78 (m, 1H), 0.53 (m, 1H) 實例 13·1 : 1-甲基-4-(4-甲基-5-{(lR，3R，5R)-3-[S-(3-甲基 苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0】己-2-基}-411-1，2,4-三 唑-3-基）吡啶-2(1H)-酮 Η

將實例12.1之標題化合物（160 mg，0.410 mmol)及1-曱 基-2-氧代基-1,2-二氫 〇 比咬-4-甲醯肼（67.8 mg，0.410 mmol) 存於無水DMSO (1·6 mL)中之懸浮液在12(TC下加熱5 h。 使該反應物冷卻至環境溫度並過濾反應溶液且藉由rP_ HPLC純化之以獲得標題化合物（1〇9 mg, 63%)。 'H NMR (500 MHz, CDC13): δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.34 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.77 (d, 1H), 6.69 (s, 1H), 135278.doc -47- 200924774 6.38 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 5.89 (dd, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.28 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.40-2.32 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.86 (m, 1H), 1.09 (m, 1H), 1.00 (m, 1H) 以類似方式分別自實例12. i_i 2.3以及相關醯肼開始合成 下列化合物： 實例 結構 名稱 產量 13.2 4-(4-曱基-5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-曱基 苯基)異噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0] 己-2-基}-411-1，2,4-三唑-3-基）嘧啶-2(1H)-酮 68 mg 40% 】HNMR (500 MHz, CDC13): δ 13.15 (bs, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.46-7.50 (m, 2H), 7.42 (d, 1H), 7.26-7.30 (m, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.35 (s9 1H), 5.97 (dd, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.38 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.36 (2, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.15 (m, 1H), 1.02 (m, 1H) 13.3 5-(4-甲基-5-{(11^311，511)-3-[5-(3·曱基 苯基)異噁唑-3-基]2-氮雜二環[3.1.0] 己-2-基} -4H-1，2,4-三唑-3 -基）噠嗪-3(2H)-酮 38 mg 23% !hnmr (500 MHz, CDCI3): δ 11.50 (bs, 1H), 8.48 (d, 1H), 7.52-7.46 (m, 2H), 7.29 (t, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.92 (dd, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.32 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.41-2.34 (m, 1H)S 2.37 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.14 (m, 1H), 1.08-1.04 (m, 1H) 13.4 。▲: 4-(5-((111,3^511)-345-(3-氣苯基）異 噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己-2-基甲基_4H_1,2,4-三唑-3-基)-1-曱 基吡啶-2(1H)-酮 55 mg 41% ^NMR (500 MHz, CDCI3): δ 7.91 (bs, 1H), 7.81-7.75 (m, 2H), 7.56-7.50 (m 2H) 7.08 (s, 1H), 6.64 (m, 1H), 6.54 (m, 1H), 5.73 (dd, 1H), 3.73 (s 3H) 3 50 (m, 1H), 3.45 (s5 3H), 2.83 (m, 1H), 1.98 (dd, 1H), 1.85 (m, 1H) 1 08 (m 1H), 0.90 (m, 1H) 13.5 nh2 4-(5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-氣苯基）異 噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3 1 .〇]己_2一 基M-曱基-4H-1，2,4-三唑-3-基)苯甲 醯胺 25 mg 18% 135278.doc -48- 200924774 ❹

!hnmr (500 MHz, (CD3)2SO): δ 8.07 (bs, 1H), 8.00 (d, 2H), 7.92 (bs, 1H), 7.81-7.77 (m, 2H), 7.75 (bd, 1H), 7.55-7.52 (m, 2H), 7.46 (bs, 1H), 7.10 (s, 1H), 5.73 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.50 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 1.99 (dd, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.08 (m, 1H), 0.90 (m, 1H) 13.6 5-(5-{(1民3民51〇-3-[5-(3-氣苯基）異 噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己-2-基}-4-曱基-4H-1，2,4-三唑-3-基)噠嗪· 3(2H)-酮 70 mg 54% JHNMR (500 MHz, (CD3)2SO): δ 13.19 (bs, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.98 (bs, 1H), 7.79-7.75 (m, 1H), 7.55-7.50 (m, 2H), 7.09-7.06 (m, 2H), 5.75 (dd, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.48 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 1.98 (dd, 1H), 1.87 (m, 1H), 1.11 (m, 1H), 0.93 (m, 1H) 13.7 H 4-(5-{(lR，3民5R)-3-[5-(3-氣苯基）異 噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己-2-基}_4_甲基-4H-1，2,4-三峻-3-基)〇比咬-2(1H)-酮 52 mg, 40% ^NMR (500 MHz, (CD3)2SO): δ 11.73 (bs, 1H), 7.91 (bs, 1H), 7.80-7.75 (m, 1H), 7.58-7.50 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 6.50 (d, 1H), 5.73 (dd, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.51 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 1.98 (dd, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.08 (m, 1H), 0.90 (m, 1H) 13.8 4-(5-{(1艮211，58)-2-[5-(3-氱苯基)異噁 唑-3-基]-3-氮雜二環[3.1.0]己-3-基}-4-甲基-4H-1，2,4-三唑-3-基)-1-曱基吡 啶-2(1H)-酮 69 mg, 51% ^NMR (500 MHz, CDC13): δ 7.72-7.69 (ms 1H), 7.61 (m, 1H), 7.40-7.32 (m, 3H), 6.71-6.66 (m, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.07 (bd, 1H), 3.66 (d, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 1.87 (m, 2H), 0.90 (m, 1H), 0.80 (m, 1H) 13.9 氣苯基)異噁 唑_3·基]·3_氮雜二環[3,1.0]己-3-基}-4-甲基-4Η-1，2,4-三峻-3-基）嗓0秦-3(2Η)-酮 26 mg, 20% !hnmr (500 MHz, CDCI3): δ 10.84 (bs, 1H), 8.38 (bs, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 6.99 (s, 1H), 6.50 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.12 (dd, 1H), 3.71 (d, 1H), 3.68 (s, 3H), 1.93-1.86 (m, 2H), 0.94 (m, 1H), 0.79 (m, 1H) 實例l4 : 6-氧代基-1H-噠嗪·4·甲醢肼

135278.doc -49- 200924774 在78°C下將步驟14C之標題化合物與肼水合物（ι 2叫）一 起加熱過夜。使反應混合物冷卻並在真空巾濃I殘q留物 用EtOAc研磨、過濾並乾燥以獲得標題產物（99%)。 丨H-NMR (4_z，(CD3)2SO): δ 8 〇5 ⑷ 1H)，7 〇9 6·40(寬 s，4H)。 ’ 乂 步驟14A: 5-甲基-2H-噠嗪-3-明

Ah ❹ 在室溫下’混合4,4-二甲氧基_3_甲基-丁 _2_烯酸乙於 (Qi-Ying Hu, Pankaj D. RegeAE. J. Corey, J. Am. CheJ.

Soc.，2004, 126’ 5984)(82 g，440 mmol)與肼水合物（5〇 § 999 mm〇1)。將該混合物在6〇t下加熱4 i^在蒸發容劑 後，在真空中進一步乾燥油狀殘留物。向所得殘留物中添 加6 M aq· HC1。將該混合物在6〇t下加熱5 h。在真空中 去除溶劑。向殘留物中添加Me〇H，3次，繼而濃縮。使用 乾燥EtOH處理所得殘留物，繼而過濾以去除不溶性固 體。將濾液濃縮至乾燥。向所得殘留物中添加乾燥ιρΑ及 g無水KAO3。將該混合物在6〇。〇下加熱2〇。在過渡 後’將遽液濃縮至乾燥。#助急驟層析使用顧則請A (10:1:0.3)純化殘留物以獲得標題化合物（i34g28%)。 lH NMR (4〇〇 黯，⑶刪：d 2.24 (s，3H)，6.73 (s，1H), 7.82 (s，1H)。 步驟14B: 6-氧代基-1H-噠嗪_4_甲酸 135278.doc -50 200924774

Ο 在50·60 c下，向步驟i4Α之標題化合物⑷… 存於濃硫酸（8GmL)之經㈣溶液中添加少量研磨成細粉 之重鉻酸卸08 g，61 在^in内向該混合物中添 ❹ 加初始材料…(TC下持續再授拌1〇_，隨後將黏性綠 色混合物傾倒至碎冰上。收集分離得固體粉末，用冷水洗 滌且乾燥以獲得標題化合物（4.5 g，77%)。 NMR (400 MHz, (CD3)2SO): δ 7.22 (s, 3Η), 8.13 (s, 1H) 13.38 (s，寬，1H)。 ’ 步称14C: 6-氧代基甲酸乙酯

將步驟14B之化合物溶於Et〇H (l〇 mL)中並添加濃h2S〇4 O (4.2 mL)且隨後在回流下加熱5 h。將該反應混合物冷卻、 在真空中濃縮並用飽和NazCCb鹼化。在過濾後，水性相用 . EtOAc萃取、經無水Na2S〇4乾燥、過濾並濃縮以獲得標題 化合物（83%)。 'H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.27 (d, 1H), 7.42 (d, 1H), 4.40 (q，2H)，1.39 (t，3H)。 實例l5 : 2-氧代基-1.2-二氩嘧啶-4-甲醢肼 135278.doc -51 - 200924774

將步驟15A之標題化合物（〇·5〇〇 g，3.24 mmol)溶於EtOH (125 mL)中並在環境溫度下攪拌1 h。添加肼單水合物 (0.325 g，6.49 mmol)並將反應物在65t：下加熱3天。在減 -壓下去除部分溶劑。過濾出固體並用Et〇H洗滌以獲得標 > 題產物（0.351 g，2.28 mmol)。 NMR (400 MHz, (CD3)2SO)： δ 10.05 (bs, 1H), 8.15 (d, Ο 1H)，6.84 (d，1H)，4.81 (bs，2H)。 步麻15A: 2 -氧代基-1，2-二氩鳴咬-4·甲酸甲箱

〇、 將氣三甲基矽烧（2.36 g, 21.4 mmol)添加至2-氧代基-l，2-二氫响0定-4-甲酸（1.50 g，10.7 mmol)存於 MeOH (15 mL)之 懸浮液中並將該反應混合物在回流下加熱5.5 h。在冷卻至 環境溫度後’將反應混合物濃縮至乾燥。添加曱醇並濃縮 所得懸浮液。固體殘留物用水及MTBE洗蘇、過渡並在減 壓下、於40°C下乾燥1 h以獲得標題產物（1.25 g, 76%)。 'H NMR (400 MHz, (CD3)2SO): δ 8.28 (d, 1H), 6.88 (d, 1H)，3.86 (s，3H)。 生物分析法 mGluRS在表現mGluR5D之細應系中之拮抗作用的功能評定 可使用藥理活性標準分析來分析本發明化合物之性質。 135278.doc -52· 200924774 麩胺酸受體分析之實例為業内所熟知，例如，如在Aramori 專 k，Neuron 8:757 (1992)，Tanabe 等人，8:169 (1992)，Miller等人，·/. 15: 6103 (1995)，Balazs 等人，J. 69:151 (1997)中所述。在此等出 版物中所述方法以引用方式併入本文中。方便地，可藉助 可量測細胞内鈣[Ca2+]i在表現mGluR5之細胞中遷移的分析 .法（FLIPR)或可量測磷酸肌醇轉換之另一分析法（IP3)來研 究本發明之化合物。 〇 FLIPR分析法

取WO 97/05252中所述表現人類mGluR5d之細胞在含高 葡萄糖DMEM與 Glutamax (31966-021)(500 mL)、10%透析 胎牛血清（Hyclone #SH30079.03)(56 mL)、200 pg/mL潮黴 素 B (Invitrogen 45-0430，50 mg/mL)(2.2 mL)、200 pg/mL 勻黴素（Zeocin)(Invitrogen #R250-01; 100 mg/mL)(l.l mL) 之混合物中培養，以每孔100,000個細胞之密度接種在黑 壁面及透明底板之已塗覆膠原之96-孔板中，並在實驗前 w 使細胞黏附過夜。所有分析均在含有146 mM NaC卜5 mM KC1、1 mM MgCl2、1 mM CaCl2、20 mM HEPES、1 •111§/1111^葡萄糖及11]1§/1111^88八？1&〇1;丨〇111\^(卩117.4)之緩衝 液中進行。將96-孔板中之細胞培養物加至上述含有含6 μΜ乙醯氧基曱基醋形式之螢光妈指示劑fluo-3 (Molecular Probes, Eugene，Oregon)之 0.025% 普流羅尼酸（pluronic acid)(—種專門的非離子型表面活性劑多元醇-CAS編號 9003-11-6)之緩衝液中，歷時60分鐘。添加後，去除fluo-3 135278.doc -53- 200924774 緩衝液並用新鮮分析緩衝液代替。使用〇 7〇〇 W及〇, 4秒 CCD照相機快門速度之雷射設定進rFLIPR實驗，其中激 發波長及發射波長分別為488 nm及562 nm。使用存於該孔 板每一孔中之160 μΐ緩衝液開始每一次實驗。添加4〇…來 自拮抗劑板之添加物’繼而添加5〇 μΕ來自激動劑板之添 加物。在黑暗中於2 5。(：下以3 0分鐘間期分離拮抗劑與激動 • 劑添加物。在兩次添加之每一次後以丨秒間期對螢光信號 取樣50次’繼而以5秒間期取樣3次，響應被量測為激動劑 〇 響應之峰高減去取樣期内背景螢光之峰高之差值》使用線 性最小平方擬合圖來實施IC5〇測定。 IP3分析 用於mGluR5d之額外功能分析闡述於w〇 97/05252中且 係基於磷脂醯基肌醇周轉。受體激活可刺激磷脂酶C活性 並增加肌醇1，4,5,三磷酸（IP3)形成。在24孔經聚-L-離胺酸 塗覆之平板上以4〇x 1 04個細胞/孔將穩定地表現人類 mGluR5d之GHEK播種於含有1 MCi/孔[3Η] myo_肌醇之介 質中。將細胞培育過夜（16 h)，隨後洗務三次並在3 7 °C 下、於補充有1個單位/mL麩胺酸丙嗣酸轉胺酶及2 丙 酮酸鹽之 HEPES 緩衝鹽水（146 mM NaCl、4.2 mM KC1、 〇.5 111]\4 1^(：12、0.1%葡萄糖、2〇11114 1^?丑8，卩117.4)中 培育1 h。將細胞在HEPES緩衝鹽水中洗滌一次並在含有1〇 mM LiCl之HEPES緩衝鹽水中預培育10 將化合物以 一式兩份之方式在37t下培育15 min，隨後添加麵胺酸鹽 (80 μΜ)或DHPG (30 μΜ)並再培育30 min。藉由添加0.5 135278.doc -54- 200924774 mL冰冷高氯酸（5%)來終止該反應，在4°C下培育至少30 min。在1 5 mL聚丙烯試管中收集試樣並使用離子交換樹脂 (Dowex AG1-X8 曱酸鹽形式，200-400 網目，BIORAD)管 柱分離磷酸肌醇。藉由首先用8 mL 30 mM甲酸銨洗脫甘油 磷脂醯基肌醇來實施磷酸肌醇分離。接下來，使用8 mL 700 mM甲酸銨/100 mM甲酸洗脫總磷酸肌醇並收集於閃爍 瓶中。隨後將此洗脫液與8 mL閃爍材料混合且藉由閃爍計 數來測定[3H]肌醇納入。對兩份試樣之dpm計數繪圖並使 〇 用線性最小平方擬合圖來獲得ic5〇測定值。 縮略語 BSA 牛血清白蛋白 CCD 電荷耦合裝置 CRC 濃度響應曲線 DHPG 3,5-二羥基苯基甘胺酸 DPM 崩解每分鐘 EDTA 乙二胺四乙酸 FLIPR 螢光成像板讀數器 GHEK 含有GLAST之人類胚胎腎 GLAST 麩胺酸/天冬胺酸轉運蛋白 HEPES 4-(2-羥基乙基）-1-哌嗪乙磺酸（緩衝液） IPs 三磷酸肌醇 概言之，該等化合物在以上分析中具有活性及小於10 〇〇〇 nM之IC5〇值。在一個本發明態樣中，該IC50值係小於1 000 nM。在本發明又一態樣中，IC50值係小於100 nM。 135278.doc -55- 200924774 大鼠之觸與血漿比率之測定 在雌性斯普把-言也< 血漿比率。 _來氏（Sprague Dawley)大鼠中評定腦與 定腦與血漿Π化合物溶於水或另一適當媒劑中。為了測 ,,^ 以皮下、或靜脈大丸劑注射、或靜脈輸 f,级 樂方式投與該化合物。在投藥後之預定時間 合 、臟穿刺採集血樣。藉由切開心臟來終止大鼠生 立、刻保存腦1血樣㈣於含肝素試管中並在3〇分鐘 :Μ自血細胞分離血漿。將血漿轉移至％•孔板中並 在_2〇C下儲存直至分析。將腦分成兩半且將每一半置於 :先塗覆有焦油之試管中且在·2〇β。下儲存直至分析。在 刀析之則，對腦試樣實施解凍並向該等試管中添加3 mL蒸 館水/克腦組織。在冰浴中對腦試樣實施超聲波處理直至 將該等試樣句質化。腦及血㈣樣均與乙腈—起沈殺。在 離u後’用0.2%甲酸稀釋上清液。藉助短逆相HpLc管柱 及迅速梯度洗脫實施分析並使用三重四極儀器及電喷霧電 離及選擇性反應監測（SRM)取得系統實施MSMS檢測。液 相·液相萃取法可用作另一種試樣淨化法。在添加適宜緩 衝液後，藉由振盪法，將該等試樣萃取至有機溶劑中。將 等伤有機層轉移至新瓶子中，並在氮氣流中蒸發至乾 燥。在殘質重新組成後’即可將該等試樣注入HplC管柱 中。 概言之’本發明之化合物在外周受到限制，在大鼠中存 於腦中之藥物與存於血漿中之藥物的比率係<0.5。在一個 實施例中，該比率係小於〇. 15。 13527g.doc -56- 200924774 活髏外穩定性測定 自斯普拉·道來氏大鼠肝試樣製備大鼠肝微體。人類肝 微體可自人類肝試樣製備或自BD Gentest獲得。在37°C 下、於總微體蛋白之濃度為〇·5 mg/mL時、在0·1 m〇i/L磷 酸鉀緩衝液（pH7.4)中、於輔因子NADPH(l·0mmol/L)存 在時培育該等化合物。化合物之初始濃度係1.0 μπιοΙ/L。 在開始培育後，於5個時間點（0、7、15、20及30分鐘）時對 試樣實施分析。藉由添加3.5倍體積之乙腈來立即終止收 ® 集試樣之酶活性。藉助LC-MS終止保留在每一收集試樣中 之化合物的濃度。將mGluR5抑制劑之消除速度常數（k)計 算為In[mGluR5抑制劑]對培育時間（分鐘）所繪製曲線之斜 率。隨後使用消除速度常數來計算mGluR5抑制劑之半衰 期（T 1/2) ’其接下來用於計算mGluR5抑制劑在肝微艘中 之固有清除率（CLint) : CLint.=(ln2x培育體積）/(Τ 1/2χ蛋 白濃度）=pl/min/mg 薛選對TLESR具有活性之化合物 ® 使用兩種性別的成年拉布拉多獵犬（Adult Labrador retriever)進行訓練使其可在PaW〇v吊索上站立。實施黏膜 • 層皮膚食道造口術並在實施任何實驗之前使該等犬完全恢 -復。 運動性量測 簡而言之，在可自由獲取水的情況下禁食大約17 h後， 藉由食道造口術導入多腔套管/側孔總成（Dentsleeve， 剔―’南澳大利亞）以量測胃部、食道下端括約肌 135278.doc -57- 200924774 (LES)及食道塵力。使用低順從性量壓式灌注幫浦 (Dentsleeve，Adelaide，南澳大利亞）對該總成灌注水。使 空氣灌注管經口腔進入以量測吞辕並使用綈電極監測， 其在LES上3 cm處。所有信號可經擴大並使用個人電腦在 10 Hz下獲取。 在不實施胃禁食/LES第III階段運動活動的情況下獲得基 .準量測後’在前肢靜脈處經靜脈（i,v.，〇·5 mL/kg)投與安慰 劑（0.9¾ NaCl)或測s式化合物。在靜脈投藥後1 〇分鐘，將富 ® 含營養素之膳食（丨〇%蛋白脒、5% D-葡萄糖、5%

Intralipid，pH 3.0)以1〇〇 mL/min經由該總成之中央官腔輸 注至胃中達30 mL/kg最終體積《在輸注富含營養素之膳食 後’以500 mL/min之速度輸注空氣直至獲得1〇±1 mmHg之 胃内壓。隨後在整個實驗中使用用於進一步輸注空氣或用 於自胃排空空氣之輸注泵將該壓力保持在此大小。自營養 素輸注開始至空氣吹入結束之間的實驗時間係45 min。以 引發TLESR之可靠方式驗證該程序。 TLESR定義為食道下端括約肌壓力以>1 mmHg/s速度降 低（相對於胃内壓）。在鬆弛發生前<2s應不存在吞嚥信號， 在此情形中鬆弛歸類為吞嚥引發之鬆弛。。在LES與胃之 間之壓力差應小於2 mmHg且完全鬆弛之時程應大於1 s。 樣本結果顯示於下表中： 135278.doc -58- 200924774 實例 FLIPR hmGluR5d (nM) 化合物在大鼠中之联/ 血聚比率 13.1 73 0.01 13.2 131 13.3 71 13.4 39 <0.01 13.5 14 13.6 32 <0.01 13.7 33 <0.01 13.8 51 13.9 46 135278.doc _59·

Claims (1)

1. 200924774 十、申請專利範圍： 1. 一種式（I)化合物 R1

   其中 R1係甲基、鹵素或氰基； R2係氫或氟； R3係氫、CVC3烷基、CVC3烷氧基、OR5或NR5R6 ; R4係烷基或環丙基； R5係氫或CVC3烷基； R6係氫或CVC3烷基； X係

   Y係與C3-C5環烷基稠合之吼咯啶； Z係 135278.doc 200924774

   135278.doc -2- 200924774 其中 r7係氣、Ci-q烷基或（VC3烷氧基； R係氣、Cl_c3烷基或Cl-C3烷氧基； R 係氣、CONR^R11 或NR10Rn ; R 〇係氫或CVC3烷基； R係氣或CVC3烷基； 以及其醫藥上可接受之鹽、水合物、同型異構體、互變 異構體及/或對映異構體。 ❹2. *請求項1之化合物，其中R1係甲基。 3·如請求項1之化合物，其中R丨係鹵素。 4·如請求項1至3中任一項之化合物，其中R2係氫。 5. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中r3係氫或Cl-。烷 基。 6. 如請求項}至4中任一項之化合物，其中R3係〇尺 NR5R6。 5 _ 7.如請求項6之化合物，其中R5係氫或曱基。 8. 如請求項6之化合物，其中R6係氫或甲基。 9. 如*月求項1至8中任一項之化合物，其中r4係甲基。 • 10.如請求項1至9中任一項之化合物，其中R7係甲基且…係 • 氫。 、 11. 如請求項1至9中任一項之化合物，其中R7係氫且R8係 12. 如請求項1至11中任一項之化合物，其中R9係氫。 13. 如請求項1至12中任一項之化合物，其中γ係與環丙基稠 135278.doc 200924774 合之吼洛咬。 14. 如請求項13之化合物，其中Y係與環丙基稍合之°比嘻咬 且其中該吡咯啶在C2-位置與X連接。 15. 如請求項1至14中任一項之化合物，其中Z係

   1 6.如請求項1之化合物，其中 R1係鹵素； R2係氫； R3係氫或Ci-Cs烷基； R4係曱基； R7係氫或曱基； R8係氫或甲基； R9係氫； X係

   Y係與環丙基稠合之吡咯啶； Z係 135278.doc 200924774

   以及其醫藥上可接受之鹽、水合物、同型異構體、互變 異構體及/或對映異構體。 1 7.如請求項1之化合物，其選自 4- (4-甲基-5-{(lR,3R，5R)-3-[5-(3-甲基苯基）異噁唑-3- ❹ 基]-2-氮雜二環[3.1_0]己_2-基}-4Η-1，2,4-三唑-3-基）嘧 ^-2(1H)-嗣， 1_ 甲基-4-(4-甲基-5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-甲基苯基）異噁 唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己-2-基}-4士1，2,4-三唑-3-基） 吡啶-2( 1H)-酮； 5- (4-甲基-5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-甲基苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環[3.1.0]己-2-基}-4Η-1，2,4-三唑-3-基）噠 嗪-3(2H)-酮； ® 4-(5-{(lR,3R，5R)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二 環[3丄0]己-2-基}-4-甲基-4Η·1，2,4-三唑-3-基）-1-甲基吡 啶-2(1H)-酮； 4- (5-{(111,311,511)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二 環[3.1.0]己-2-基}-4-曱基-4H-1，2,4-三唑-3-基）苯曱醢 胺； 5- (5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二 環[3.1.0]己-2-基}-4-甲基-4H-1，2,4-三唑-3-基）噠嗪- 135278.doc 200924774 3(2H)-酮； 4-(5-{(lR，3R，5R)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二 環[3.1.0]己-2-基}_4-甲基-4Η-1，2,4-三唑-3-基）吡啶-2(1Η)-酮； 4-(5-{(lR，2R，5S)-2-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-3-氮雜二 環[3.1.0]己-3-基卜4-甲基_4H-1，2,4-三唑-3-基）-1-甲基吡 啶-2(1H)-酮；及 5_(5_{(111’211，5 8)-2-[5-(3-氣苯基）異噁唑_3-基]-3-氮雜二 ® 環[3.1.0]己_3_基卜4-曱基_4H-1,2,4-三唑-3-基）¾嗪- 3(2H)_ 酮； 以及其醫藥上可接受之鹽、水合物、同型異構體、互變 異構體及/或對映異構體。 1 8·如明求項1至丨7中任一項之化合物其用於治療。 19. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至17中任一項之化 合物作為活性成份以及藥理上及醫藥上可接受之載劑。 20. —種如請求項丄至丨？中任一項之化合物或其醫藥上可接 乂之鹽或光學異構體的用途，其用於製造用於抑制暫時 性食道下端括約肌鬆弛之藥物。 ， 21· —種如請求項丨至17中任一項之化合物或其醫藥上可接 . 文之鹽或光學異構體的用途，其用於製造用於治療或預 防胃食道逆流疾病之藥物。 22. —種如請求項1至17中任一項之化合物或其醫藥上可接 受之鹽或光學異構體的用途，其用於製造用於治療或預 防疼痛之藥物。 135278.doc 200924774 23* 種如清求項1至】7Φ紅 s λ 受之… 項之化合物或其醫藥上可接 之-或光學異構體的用途，其用於製 防焦慮症之藥物。 ^療或預 24.—種如請求項^ 受之撞化合物或其醫藥上可接 r學異構體的用途，其用於製造 防腸躁症(IBS)之藥物。 、-療或預 A:種抑制暫時性食道下端括約肌鬆他之方法，其 φ ❹ 要此抑制之個體投與有效量之如請求項】至 之化合物。 τ仕項 一種❹治療或預防胃食道逆流疾病之方法，Μ 要此治療或預防之個體投與有效量之如請求項… 任一項之化合物。 2入2料治療或預防疼痛之方法，其中對需要此 個體投與有效量之如請求項1至1”任一項之化 種用於治療或預防焦慮症之方法，其中對需要此 或預防之個體投與有效量之如請求们至之 化合物。 哨& Α 一種用於治療或預防腸躁症（IBS)之方法，其中 治療或預防之個體投與有效量之如請求項中任一 項之化合物。 3〇. 一種組合，其包含：⑴至少-種如請求項!至17中任一 項之化合物及（u)至少一種酸分泌抑制劑。 3i.如請求項30之組合，其中該酸分泌抑制劑係選自西啤替 135278.doc 200924774 丁（cimetidine)、雷尼替丁（ranitidine)、奥美拉》坐（omeprazole)、 伊索派唑（esomeprazole)、南索派唑（lansoprazole)、泮托 拉唑（pantoprazole)、雷貝拉唑（rabeprazole)或來明拉唑 (leminoprazole) 〇 32. —種化合物，其選自 (3S，5aS，6aR，6bR)-3-苯基四氫環丙烷[3,4]吼咯并[1，2-, c][l，3]噁唑-5(1H)-酮； [(111，211，58)-3-苄基-3-氮雜二環[3.1.〇]己-2-基]甲醇； ❹ （lR，2R，5S)-2-(羥基甲基）-3·氮雜二環[3.1.0]己烷-3-甲酸 第三丁基酯； (lR，3R，5R)_2-(第三丁氧基羰基）_2-氮雜二環[3.1 .〇]己烷-3-曱酸； (111，311，511)-3-(羥基甲基）_2-氮雜二環[3,1.〇]己烷-2-甲酸 第三丁基酯； (1尺，311，51〇-3-甲醯基-2-氮雜二環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三 丁基酯； ® (111，2尺，58)-2-曱醯基-3-氮雜二環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三 丁基酯； * (1R，3R，5R)_3-[(羥基亞胺基）甲基]-2-氮雜二環P.1.0]己 ， 烷-2-甲酸第三丁基酯； (lR，2R，5S)-2-[(羥基亞胺基）曱基]_3_氮雜二環[3·1.〇]己 炫> -3 -甲酸第三丁基醋； (lR，3R，5R)-3-[氣（羥基亞胺基）甲基]·2-氮雜二環[3·1.0] 己烷-2-甲酸第三丁基酯 135278.doc 200924774 (111，2尺，5 8)-2-[氣（羥基亞胺基）甲基]-3-氮雜二環[3.1.0]己 烷-3-甲酸第三丁基酯； (lR，3R,5R)-3-[5-(3-曱基苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環 [3.1.0] 己烷-2-甲酸第三丁基酯； (lR,3R，5R)-3-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環 [3.1.0] 己烷-2-甲酸第三丁基酯； (lR,2R，5S)-2-[5-(3-氯苯基）異噁唑-3-基]-3-氮雜二環 [3.1.0] 己烷-3-甲酸第三丁基酯； 〇 (lR，3R，5R)-3-[5-(3-甲基苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環 [3.1.0] 己烷； (lR，3R，5R)-3-[5-(3-氯苯基）異噁唑-3-基]-2-氮雜二環 [3.1.0] 己烷； (lR，2R，5S)-2-[5-(3-氯苯基）異噁唑-3_基]-3-氮雜二環 [3.1.0] 己烷； (1R，3R，5R)-N-甲基-3-[5-(3-曱基苯基）異噁唑-3-基]-2-氮 雜二環[3.1.0]己烷-2-曱硫醯胺； • (lR，3R，5R)-3-[5-(3-氯苯基）異噁唑-3-基]-N-曱基-2-氮雜 二環[3.1.0]己烷-2-甲硫醯胺； • (lR，2R，5S)-2-[5-(3-氯苯基）異噁唑-3-基]-N-甲基-3-氮雜 ，二環[3.1.0]己烷-3-曱硫醯胺； (1R，3R，5R)-N-曱基-3-[5-(3-曱基苯基）異嚼嗤-3-基]-2-氮 雜二環[3.1.0]己烷-2-硫代甲亞胺酸曱酯； (lR，3R，5R)-3-[5-(3-氣噻吩基）異噁唑-3-基]-N-甲基-2-氮 雜二環[3· 1.0]己烷-2-硫代甲亞胺酸曱酯； 135278.doc 200924774 (111，211，5 8)-2-[5-(3-氣苯基）異噁唑-3-基]-；^-曱基-3-氮雜 二環[3.1.0]己烷-3-硫代曱亞胺酸甲酯；及 2-氧代基-1，2-二氫嘧啶-4-曱醯肼。

   135278.doc 10- 200924774 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：

   八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： R1

   ⑴ ❹ 135278.doc