TW200836722A

TW200836722A - Cyclized derivatives as Eg-5 inhibitors

Info

Publication number: TW200836722A
Application number: TW097100432A
Authority: TW
Inventors: Rustum Boyce; Eric Martin; Weibo Wang; Hong Yang; Paul A Barsanti
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2007-01-05
Filing date: 2008-01-04
Publication date: 2008-09-16
Also published as: HN2009001262A; JP2010515687A; EP2106399A2; US20120189623A1; CA2674318A1; WO2008086122A2; KR20090097210A; CR10879A; DOP2009000169A; ZA200904175B; PE20081850A1; CO6561828A2; AU2008205169B2; GT200900192A; US20080207589A1; MX2009007260A; TN2009000287A1; MA31080B1; SMAP200900065A; SMP200900065B

Description

200836722 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於經取代咪唑化合物及其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥。本發明進一步係關於該等化合物與醫藥上可接受載劑之組合物及該等化合物之用途。本申睛案根據35 U.S.C.§119(e)規定主張2〇〇7年1月5曰申明的美國5品時申請案第號之權利，其全文以引用之方式併入本文中。【先前技術】驅動蛋白係使用三磷酸腺苷結合至微管並產生機械力之 =達蛋白。驅動蛋白之特徵在於馬達結構域具有約350個胺基酸殘基。已經分辨出若干驅動蛋白馬達結構域之晶體結構。目月），已鑒定出約100個驅動蛋白相關之蛋白（KRp)。驅動蛋白涉及各種細胞生物過程’其包括細胞器官及囊泡之 f輸、及内質網之維持。若干KRP與有絲分裂紡錘體之微管或直接與染色體相互作用且顯示在細胞循環之有絲分裂期期間起關鍵作用。對於開發癌症治療劑尤其感興趣者係該等有絲分裂的KRP。驅動蛋白紡錘體蛋白（KSP)(亦稱為Eg5、HsEg5、knsli 或咖u)係若干驅動蛋白樣馬達蛋白中的-種，㈣馬達 ;有4刀裂紡錘體且習知為雙極有絲分裂紡錘體之形成及/或起作用所需。一年使用針對KSP之C-末端的抗體來消耗Ksp展 α尸止有、、、糸刀裂中之海拉細胞（HeLa all)具有單星形微 127871.doc 200836722 管陣列（Blangy 等人，Cell 83:1 159-1 169，1995)。bimC 及 cut7基因（認為該等係KSP之同源染色體）中之突變致使構巢麴菌似）（Enos，A.P.及 N.R. Morris， Cell 60:1019-1027, 1990)及稷酒裂殖酵母菌 {Schizosaccharomyces pombe) (Hagan， I.及 M. Yanagida， Nature 347:5 63-5 66，1990)中中心體分離失敗。利用ATRA (全反式視黃酸）處理細胞（此在蛋白質水平上上降低KSP表現）或使用反義寡核苷酸消耗KSP在DAN-G胰腺癌細胞中展示明顯的生長抑制，此表明KSP可能涉及全反式視黃酸之抗增殖活動（Kaiser，A.等人，J. Biol. Chem. 274，18925-18931，1999)。令人感興趣的是，有爪蟾蜍極光（Ze⑽ /aevb dwrora)相關的蛋白激酶pEg2展示結合及填酸化 XlEg5 (Giet，R·等人之 J. Biol. Chem. 274:15005-15013, 1999)。癌症藥物開發所感興趣者係極光相關激酶（Aurora-related kinase)之可能底物。舉例而言，Aurora 1及2激酶表現於蛋白質和RNA層面且該等基因會在結腸癌患者中擴增。 KSP之第一細胞可滲透小分子抑制劑”monastrol’’展示利用單極紡錘體捕獲細胞，而不會如傳統化學治療劑（例如紫杉烷及長春花生物鹼）所引起的一樣影響微管聚合 (Mayer，T.U.等人，25(5:971-974，1999)。經鑒定 Monastrol在基於表型之篩選中作為抑制劑且此暗示此化合物可作為抗癌藥物開發的先導。經測定此抑制相對於三磷酸腺苷並不具競爭性且快速可逆（DeBonis，S.等人之卑2:338-349，2003 ; Kapoor，T.M.，等人，J. 127871.doc 200836722

Cell Bi〇l,} 750:975-988, 2000) 〇赛於、、改良化學治療劑之重要性，業内需要為KSp及 KSP相關蛋白質之有效活體内抑制劑的Ksp抑制劑。【發明内容】本發明係關於式（I)之經取代咪唑化合物、其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥、其製備、包括該等化合物之醫藥組合物、且係關於其用於治療KSP介導的疾病的用途：

其中： R係選自由烷基及經取代烧基組成之群； R係選自由氫、烷基及經取代烷基組成之群； L係選自由以下組成之群： a) -0-， b) -OCH2-、-CH20、-C(0)NR7-; c) -CH2〇CH2·、_CH2NR7CH2_、_CH2CH20_、 -C(0)NR7CH2-、及-CH2CH2NR7-; R3及R4獨立選自由鹵素、烷基及經取代烷基組成之群； R5及R6獨立選自由氰基、烷基、經取代烷基、烷氧基、經取代烧氧基、鹵素及經基組成之群； R7係選自由氫、烷基及-S02烷基組成之群； m 為〇、1、2 或 3 ; 127871.doc 200836722 η為0、1、2或3 ;及 Ρ為0或1。【實施方式】 Α. 本發明化合物本發明化合物包括彼等具有式（I)者或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥：

其中： R1係選自由烷基及經取代烷基組成之群； R2係選自由氫、烷基及經取代烷基組成之群； L係選自由以下組成之群： a) -0-; b) -OCH2-、-CH20-、-C(0)NR7-; c) -CH2OCH2-、-CH2NR7CH2-、-CH2CH20-、 -c(o)nr7ch2-、及-CH2CH2NR7-; R3及R4獨立選自由鹵素、烷基及經取代烷基組成之群； R5及R6獨立選自由氰基、烷基、經取代烷基、烷氧基、經取代烷氧基、i素及羥基組成之群； R7係選自由氫、烷基及_S〇2烷基組成之群； m 為 0、1、2 或 3 ; 127871.doc 200836722 n為0、1、2或3 ;及 ρ為〇或1。在一個實施例中 R2為甲基。 R1及R2為烧基。在一個態樣中 R1及在個貝施例中，R1為嫁其H R 2氣扣 , τ尺马烷基且R為虱。在一些態樣中， R係選自由異丙基、第三丁基及丙基組成之群。在一個實施例中，Ρ為〇。

在另一實施例中，ρ為卜在一些態樣中，R3為炫基，例如甲基。在其他態樣中，R3為鹵素。當Ρ為1時，V可連接至該環適宜取代之任何碳原子，其包括^之可取代碳原子。在—個實施例中，r3可位於連接至R之石反原子上，例如在以下式中：

C 取代基R3及R4不包括環化形成螺環之基團。該等環括在烷基與經取代烷基之定義中。、在-個實施例中，R、經取代烧基。在一些態樣中，反4 為經1至5個選自由胺基、經取代胺基、鹵素、烷氧基、經取代烷乳基及羥基組成之群之取代基取代的烷基。 127871.doc 200836722 在一個實施例中，R 4係選自由鹵素' -C Η 2 Ν Η 2、 -(CH2)2NH2、-(CH2)3NH2及-CH2OH組成之群。在一個實施例中且獨立於R 4，R 3係選自由函素、 -CH2NH2、-(CH2)2NH2、-(ch2)3nh2 及 _(：η2οή 組成之群。在一個實施例中，㈤為0。在一個實施例中，R6為鹵素。 Γ: 在一個實施例中，R6及與其連接之苯基環係選自由以下組成之群：苯基、3-漠苯基、3-氣苯基、4_氰基苯基、 2,5-二氟笨基、3_氟苯基、2_甲氧基苯基、3·甲氧基苯基广甲氧基苯基、4·甲基苯基、2·三氧甲基苯基、及3_ 三氟甲基苯基。示於-C(0)-L-CHR4-

連接體L為二價連接體且在本文中揭定向中。 U 之原子連同（R3)p及R4 — 在一個實施例中，L及與其結合起形成選自由以下組成之群的環：

127871.doc 200836722

在一個實施例中，提供具有式（la)之化合物或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥：

127871.doc -12- 200836722 在一個實施例中，提供具有式（Ib)_(Id)之化合物或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥： /^V(R5)m

Η

其中Ri、R3、R4、R5、r6、η、瓜及ρ皆如針對式（1)所定義。在一個實施例中，提供具有式（Ie)-(Ii)之化合物或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥： 127871.doc -13- 200836722

127871.doc -14- 200836722

在式(la) (Ii)之化合物的一個實施例中，r f

另一實施例中，R1係選自由異丙基、第三丁基及丙；組: 之群。在個實知例中，R係經取代烧基。在一些態樣中，汉4 為經1至5個選自由胺基、經取代胺基、齒素、烷氧基、經取代烷氧基及羥基組成之群之取代基取代的烷基。在一個實施例中，R4係選自由鹵素、-ch2Nh2、 -(CH2)2NH2、-(CH2)3NHj_CH2OH組成之群。在一個實施例中且獨立於R4，R3係選自由_素、 _CH2NH2、_(CH2)2NH2、-(CH2)3NH2A-CH2〇H組成之群。在些態樣中’ m為1。在一個實施例中，R5為鹵素。在一個實施例中，m為〇。在些悲樣中’ η為1或2。在一個實施例中，r6為鹵素。在一個實施例中，R6及與其連接之苯基環係選自由以下組成之群：苯基、3_溴苯基、3-氯苯基、4_氰基苯基、 2,5_二氟苯基、3-氟苯基、2-曱氧基苯基、％曱氧基苯 127871.doc -15- 200836722 基、4-f氧基苯基、4_甲其1 # ^基本基、2-三氟甲基苯基、及3· 三氟f基苯基。在一個實施例中，接供杈供下表1中之化合物或其醫藥上可化合物之立體異構體。在一個態樣中，該立體異構體係對映異構癉。在另一態樣中，該立體異構體係非對映異構體。表1 ---—---- 化合物 ______ 結構 ^-------—___ 名稱 1 Ol σ1武、νη2 -------~____ (5R)-5-(2-胺基乙基）-3-[(IR)-l-(l-苄基-4-苯基_ 1H-咪唑·2-基）_2,2-二甲基丙基]-1，3-σ惡峻咬-2-¾ 2 α H3XCH3 σ1^ 、νη2 ^-----—______ (5S)-5-(2-胺基乙基）-3-[(lR)-l-(l-苄基 _4_ 苯基_ 1H-咪嗤-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，3-°惡嗤咬 3 Clx/Nti^2 〆----—-______ 5-(胺基甲基）-3-{(lR)-：u [1-苄基_4-(3-氯苯基）-ih- 咪唑-2-基]-2-甲基丙基卜 1，3-噁唑啶-2-酮 4 α c^v)·' Ο""7 νη2 〆--------____ (5S)-5-(胺基甲基）_3_ [(1R)_1_(1-苄基-4·苯基_ 1H-咪唆-2-基）-2,2-二甲基丙基]_1，3_噁嗪-2-酮 127871.doc -16- 200836722 5 h3c CHj σ Nn>NH2 (5R)-5·(胺基甲基）-3-[(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H_咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，3-σ惡唤- 2-_ 6 h3c 〇h3 rV< CHa a N〇=0"v (6S)-6-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑_2_基）-2,2-二曱基丙基]嗎琳-3 -酬 7 a n〇〇NH2 (6R)-6-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]嗎琳· 3 -調 8 h3c iV^CH3 coV>NH2 (6R)-6-(胺基甲基）-4· {(1R)-1-[1-苄基-4-(3-氯苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2_甲基丙基}嗎琳-3 -酉同 9 ,c rV< CH3 coV)' (6S)-6-(胺基甲基）-4· {(1R)-1-[1-苄基-4-(3-氯苯基）-1H-咪唑-2-基]-2-曱基丙基丨嗎嚇^ - 3 -闕 10 C^N〇，NH2 (6R)_6-(2-胺基乙基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4·苯基-111-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]嗎琳-3 -酮 11 N-\ /-NH2 (J (6S)-6-(2-胺基乙基）-4-[(lR)-l-(l·苄基-4-苯基-111-咪唑_2-基）-2,2-二曱基丙基]嗎1^ - 3 -嗣 127871.doc -17- 200836722 12 H3C rV< CH3 Cl^x N〇=0'''VNH2 (6S)-6-(2-胺基乙基）-4-{(1R)-1-[1-节基-4-(3-氯苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2-甲基丙基}嗎啉-3-酮 13 iV^CH3 c,^tx n〇<kNH2 、6R)-6-(2·胺基乙基）-4_ {(1R)-1-[1-节基-4-(3氯苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2-甲基丙基}嗎- 3 -嗣 14 FtJ N°i>NH2 h3c (2S，6R)_6-(胺基甲基）-4-{(1R)-1-[1-节基-4-(3-氟苯基）-1Η -u米 ϋ坐-2 -基]-2，2 -二甲基丙基} - 2 -甲基嗎琳-3 -酮 15 h3c (2R，6R)-6-(胺基甲基）-4-{(1R)-1-[1-节基-4-(3-氣苯基）-1Η-咪唑-2_基]_2,2_二曱基丙基}-2-甲基嗎琳-3_ 酮 16 (5R)-5-(胺基甲基）_1_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1士咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]哌嗪-2,3-二酮 17 σΗ>ν (5S)-5-(胺基甲基）_1-[(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]旅嘻-2,3 -二明 127871.doc -18- 200836722 18 0 ch3 (5R)-5-(胺基甲基）-l_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1Η·咪唑-2-基）-2,2·二甲基丙基]-4 -甲基略唤-2,3 -二酮 19 Ο1办 (2S)-4-[(lR)-l-(l_ 苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）_2,2_ 二甲基丙基]-2-(經甲基）_ 1，4-二氮雜環庚_5-酮 20 υ Ν〇ι>- (2R)-2-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，4-二氮雜環庚- 5-酮 21 (2R)-2-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2·二甲基丙基]-1 -(甲基石黃酿基）-1，4 _ 二氮雜環庚-5-酮 22 ^ H}C iV?^CH3 σΝ〇=〇-'ν (2S)-2-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l -节基-4-苯基-1H·咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，4-氧氣雜ί哀庚- 5-酮 23 h3c χν<^εΗ3 a N〇〇- (2R)-2-(胺基甲基）-4_ [(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二曱基丙基]-1，4-氧氣雜ί哀庚- 5- 127871.doc -19- 200836722 24 (6S)-6-(胺基甲基）-4-[(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-111-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，4·氧氮雜環庚-3- 酮 25 α Η>-2 0 、6R)-6-(胺基甲基）-4-[(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1Η - 口米。坐-2 -基）-2，2 -二甲基丙基]-1，4-氧氮雜環庚-3- 26 FXJ ν〇〇ΝΗ2 \〇、6R)-6-(胺基甲基）-4_ {(lR)-l-[l-(3,5-二氟苄基）-4-(3 -氟苯基）-1Η-米唑-2-基]-2,2·二甲基丙基}-1，4-氧氮雜環庚-3_酮 27 FXJ Ν°〇Νη2 (6R)-6-(胺基甲基）-4_ {(1R)_1-[1·苄基-4_(3-氟苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2,2-二曱基丙基}-1，4 -氧氮雜環庚-3-酮 28 FtJ ν〇〇ΝΗ2 、0〆 (6R)-6-(胺基甲基）-4-{(lR)-l-[l-(3-氟苄基）-4_ (3-氟苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2,2-二甲基丙基}-1，4_ 氧氮雜環庚-3-酮 29 (6S)-6-(胺基甲基）-4_ {(lR)-l-[l-(3-氟苄基）-4-(3-氟苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2,2-二甲基丙基卜1，4- 氧氮雜環庚-3-酮 127871.doc -20- 200836722 30 (6S)-6-(胺基甲基）_le [(1R)_1-(1-苄基·4_ 苯基 _ 1H-咪唑-2·基）_2,2·二甲基丙基]-1，4-二氮雜環庚烷_ 2,3_ 二酮 31 U =尺)_1-[(1尺)-1-(1•苄基 _4- 苯基-1Η-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]_6_氟_1，4_二氮雜環庚-2_ig 32 cx aShl-KlRhi-d-苄基-4_ 苯基-1 Η-味嗤-2-基）-2，2-一甲基丙基]-6-氟-i，4-二氮雜環庚-2-酮 33 y nh2 (R)-5-(胺基甲基）_3_((r)_ 1-(1-苄基-4-(2,5-二氟苯基）_1H-咪唑 _2_基）-2,2-二甲基丙基）°惡嗤咬-2-酮 34 y nh2 (S)-5·(胺基甲基）-3-((R> 1-(1-苄基-4-(2,5-二氟苯基）·1Η_咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基）噁唑啶-2-酮本發明之方法及組合物亦提供者係包含式⑴或（1勾_(川之化合物（包括其混合物及/或鹽）及醫藥上可接受之賊形劑或載劑的組合物。在另一態樣中，本發明提供治療患有至少部分地由Ksp 介導之病症的哺乳動物患者的方法。因此，本發明提供治療需要治療的哺乳動物患者的方法，纟包括向該患者投與 127871.doc -21. 200836722 治療有政量的式⑴或（la)-(Ii)之化合物（包括其混合物），其單獨或與其他抗癌劑組合投與。 B. 定義及概述如上文所討論，本發明部分地關於新穎經取代吼唆及三唆化合物。 (、應瞭解，本文所用術語僅用於闡述具體實施例的目的而並非意欲限制本發明範圍。必須注意，除非上下文中明確地另有況明，否則此處及申請專利範圍中所用單數形式及為白包括複數個指示物。在本說明書及隨附申請專利範圍十，將提及經定義具有以下含義之大量術語：本文所用，，烷基”係指具有個碳原子且較佳個碳原子之單價飽和脂肪族烴基團。該術語係由（例如）甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、正戊基、及諸如此類基團來例示。且較佳1至2個選自由以下經取代烷基”係指具有丨至3 組成之群之取代基的烷基：烷氧基、經取代烷氧基、醯基、基胺基、醯氧基、胺基、經取代胺基、胺基酿基、芳基、經取代芳基、芳氧基、經取代芳氧基、氰基、鹵素皂基肖基、羧基、羧基酯、環烷基、經取代環烧基、螺環烧基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環、經取代雜環、-S〇2_烷基及-S〇2_經取代烷基。 ’’伸烷基”係指較佳具有i至5個且較佳丨至3個碳原子之二價飽和脂肪族煙基團，其可為直料具支鏈。該術語係由 (例如）亞甲基（-ch2·)、伸乙基（_CH2CH2·)、伸正丙基 127871.doc -22- 200836722 (-ch2ch2ch2_)、伸異丙基（_CH2CH(CH3)_r(-CH(CH3)CH2_) 及諸如此類基團來例示。 "烷氧基"係指基團”烷基，其包括（例如）甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第三丁氧基、第二丁氧基、正戊氧基及諸如此類。 ”經取代院氧基”係指基團，，經取代烷基 "醯基’’係指基團H-c(0)-、烷基-c(0)-、經取代烷基 -c(o)-、烯基-c(o)-、經取代烯基·(；；（〇)_、炔基_c(〇)_、經取代炔基-C(o)-、環烷基_c(0)·、經取代環烷基_c(〇)·、芳基-c(0)-、經取代芳基_c(0)_、雜芳基_c(〇)_、經取代雜芳基-C(O)-、雜環_c(〇)_、及經取代雜環_c(〇)_，其中烧基、經取代烧基、烯基、經取代烯基、块基、經取代块基、環烷基、經取代環烷基、芳基、經取代芳基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環及經取代雜環皆如本文所定義。 ”胺基醯基”係指基團_C(0)NRR，其中各尺獨立選自由氫、烧基、經取代燒基、縣、經取代稀基、块基、經取代炔基、芳基、經取代芳基、環院基、經取代環院基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環、經取代雜環組成之群且其中各R連同該氮原子-起連接形成雜環或經取代雜環，其中烧基、經取代院基、烯基、經取代稀基、块基、經取^块基、環烧基、經取代環烧基、芳基、經取代芳基、㈣基、經取代雜芳基、雜環及經取代雜環皆如本文所定義。 "酿氧基"係指基團烧基偉)〇_、經取代院基-c(0)0_、烯基-c(叫、經取代縣部⑼Q_、 127871.doc -23-

U 200836722 代炔基-c(0)0-、芳基-c(o)o-、經取代芳基-c(o)o-、環燒基-c(o)〇_、經取代環烷基_c(〇)0-、雜芳基_c(〇)〇… 經取代雜芳基-C(〇)〇_、雜環4(0)0-、及經取代雜環 -c(o)〇-，其中烷基、經取代烷基、烯基、經取代烯基、炔基、經取代炔基、環烷基、經取代環烷基、芳基、經取代芳基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環及經取代雜環皆如本文所定義。 ’’氧基醯基”或，，緩基酯，，係指基團-C(0)0-烷基、-C(0)0-經取代烧基、-c(〇)〇_烯基…c(0)0_經取代烯基、 •c(o)o-炔基、_C(〇)〇'經取代炔基、c(〇)〇芳基' -c(o)o-經取代芳基、_c(〇)〇-環烷基、_c(〇)〇-經取代環烷基、-c(0)0-雜芳基、_c(0)CMf取代雜芳基、-C(〇)〇_ 雜環、及-c(o)o_經取代雜環，其中烷基、經取代烷基、烯基、經取代稀基、絲 ' 經取代快基、魏基、經取代環烷基、芳基、經取代芳基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環及經取代雜環皆如本文所定義。 "稀基”係指具有2至6個碳原+且較佳為2至4個碳原子且具有至少1個且較佳為1至2個掄其π糾』7 1U埤基不飽和位點之烯基。該等基團係由乙烯基、烯丙基、签 j _3-烯·1·基、及諸如此類例示。 ’’經取代烯基”係指具有丨至3個基的烯基，該等取代基係選自由經取代烧氧基、酿基、酿基胺義經取代芳基、芳氧基 '經取代芳胺基、胺基醯基、芳基取代基且較佳1至2個取代以下組成之群：烷氧基、、酿氧基、胺基、經取代 127871.doc -24· 200836722 氧基、氰基、•素、羥基、硝基、羧基、羧基酯、環烷基、、絲代環烧基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環、及經取代雜ί衣，其中限制條件是任何經基取代皆不連接至乙稀基（不飽和）碳原子。炔基係私具有2至6個碳原子且較佳2至3個碳原子且具有至y 1個且較佳1至2個炔基不飽和位點之炔基。 (、 "經取代炔基”係指具有⑴個取代基且較佳m個取代基之块基，該等取代基係選自由以下組成之群：烧氧基、經取代院氧基、醯基、醯基胺基、醯氧基、胺基、經取代胺基、胺基醯基、芳基、經取代芳基、芳氧基、經取代芳氧基：氰基、齒素、羥基、破基、羧基、羧基醋、環烷基、經取代壤燒基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環、及經取⑽環，其中限制條件是任何《取代皆不連接至乙快糸碳原子。 π胺基”係指基團_NH2。 π氰基π係指基團_CN。，，經取代胺基”係指基團_NR，R”，其中R，及R"皆獨立選自由、下、’且成之群.氫、烷基、經取代烷基、烯基、經取代烯基、快基、經取代炔基、芳基、經取代芳基烧基、、㈣代環院基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環：、、工取代雜％、-SOr烧基、_s〇2_經取代烧基，且直中汉，及R"連同鍵結至其的氮一起形成雜環或雜 :，條件是R，與R”二者不能皆為氯。當R|為氯且R":; 基時，該經取代胺基在本文中有時稱為㈣ 4 與R"皆為院基時，該經取代胺基在本文中有時稱為 1 127871.doc -25- 200836722 烷基胺基。當提及經單取代胺基時，其意指R’或Rn中之一為氫但不能二者均為氫。當提及經二取代胺基時，其意指 R’或R’’均不為氫。 ”醯基胺基”係指基團-NRC(O)烷基、-NRC(O)經取代烷基、-NRC(O)環烷基、-NRC(O)經取代環烷基、-NRC(O)烯基、-NRC(O)經取代烯基、-NRC(O)炔基、-NRC(O)經取代炔基、-NRC(O)芳基、-NRC(O)經取代芳基、-NRC(O)雜芳基、-NRC(O)經取代雜芳基、-NRC(O)雜環、及_NRC(0)經取代雜環，其中R為氫或烷基，且其中烷基、經取代烷基、烯基、經取代烯基、炔基、經取代炔基、環烷基、經取代環烷基、芳基、經取代芳基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環及經取代雜環皆如本文所定義。 ’’硝基”係指基團-N02。 ”芳基”或” Ar”係指具有單一環（例如，苯基）或多個稠合環（例如，萘基或蒽基）之6至14個碳原子之單價芳香族碳環基團，其中該等稠合環可為或可不為芳香族（例如，2-苯并噁唑啉酮、2H-1，4-苯并噁嗪-3(4H)-酮-7-基及諸如此類），限制條件為連接點位於芳香族碳原子處。較佳芳基包括苯基及萘基。 ’’經取代芳基n係指經1至3個取代基且較佳1至2個取代基取代之芳基，該等取代基係選自由以下組成之群：羥基、酉&基、酿基胺基、酿氧基、烧基、經取代烧基、烧氧基、經取代烷氧基、烯基、經取代烯基、炔基、經取代炔基、胺基、經取代胺基、胺基醯基、芳基、經取代芳基、芳氧 127871.doc -26-

Ο 200836722 基、經取代芳氧基、幾基基、經取代烷护Α、# 土§日、鼠基、硫醇基、烷硫瓜土方硫基、經取代蒡石亡美、雜癸石六| 經取代雜芳硫基U 方-基雜方&基、基、經取代雜環硫基衣、“基、雜環硫基、雜若美έ-„ ,衣烷基、經取代環烷基、鹵素、硝美’、、至雜芳基、雜環、經取代雜環、雜芳氧基、經取代雜芳氧基、虱胺基續醯基⑽2_s〇2) VT基、絲代雜環基氧基、 …& 2Scv)、及經取代胺基續醯基。方氧基••係指基團芳美〇 1 基、及諸如此類。其包括（例如）苯氧基、蔡氧 ”經取代芳氧基"係指經取代芳基_〇_基團。 ”羧基’’係指-COOH或其鹽。 ’’環烧基”係指具有單一哎多個 ,,^ ^ ^ 次夕個％狀娘之3至10個碳原子的壤烧基，其包括（例如基及諸如此類。“丁基、環戍基、環辛 =環烧基”係指具有環燒基環且具有螺環接（該環 =Γ:Γ成員之單一原子形成)之3至10個碳原子蜋狀基團，如由以下結構所例示：

"經取代環烷基"係指具有丨至5個選自由以下組成之群之取代基的環烷基：烷基、經取代烷基、氣代（=0)、硫代 (=S)、烷氧基、經取代烷氧基、醯基、醯基胺基、2氧基、胺基、經取代胺基、胺基醯基、芳基、經取代芳基、 127871.doc -27- 200836722 方氧基、經取代芳氧基、氰基、_素、羥基、硝基、羧，、羧基、環烧基 '經取代環烧基、雜芳基、經取代雜芳基、雜環、經取代雜環、_S02_烷基及so广環烷基。 "鹵代”或，，函素，，係指氟、氯、漠及碘且較佳為氟或氯。 ”經基”係指基團-OH。 "雜芳基，，係指具有m個碳原子且環内具有⑴個選 2由氧、氮及硫組成之群之雜原子的芳香族基團。該等雜芳基可具有單一環（例如，°比°定基或咬喃基）或多個稠合環例如^⑽基或苯并㈣基），其+該等稠合環可為或芳香族及/或包含雜原子，限制條件為連接點經由該方香_芳基之原子。在一個實施例中，該雜芳基之氮及/或硫％原子視情況經氧化以提供N-氧化物(N—〇)、亞績醯基、或確醯基部分。較佳雜芳基包括。比咬基、㈣基、吲哚基、硫代苯基、及呋喃基。

等雜芳基"係指經1至3個取代基取代的雜芳基，該 =取代基選自與針對經取代芳基心義相同之取代基群 "含氮雜芳基"及"含氮經取代雜芳基氮環原子且顏蜱、α ^^ ^ 諸如錢料原子（❹硫、氧及 X雜方基及經取代雜芳基。 A團Si :指基團_〇-雜芳基且"經取代雜芳氧基"係指 :文所定1 基，其中雜芳基與經取代雜芳基皆如雜％或雜環狀"或"雜環炫基”或"雜環基"係指具有單 127871.doc -28· 200836722 &或多個掮合環（包括稠橋接及至1〇個碳屌；n , 衣糸統）且该％内具有1 人原子及！至4個選自由氮、子飽和或不餘和(但非芳香族)基團，原或多個環可為s ^ 、在稠衣糸、、先中一經由雜^^ 或雜芳基，限制條件是連接點原子 4雜％基團之氮及/或硫部分。錢化吨仰氧化物、亞伽基、及確醯基

'經取代雜環狀，，或係指經1至3個與針對代之雜環基。經取代雜環烷基”或”經取代雜環基，，經取代環烷基所定義相同之取代基取 ϋ 雜％基及雜芳基之實例包括但不限於氮雜環丁基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、嗒嗪基、中氮茚基、異吲哚基、吲哚基、二氫吲哚基、吲唑基^\基、喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、呔嗪基、萘基吡啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、啐啉基、蝶啶基、咔唑基弄啉基、啡啶基、吖啶基 '菲咯啉基、異噻唑基、吩嗪基、異噁唑基、吩噁嗪基、吩噻嗪基、咪唑啶基、咪唑啉基、六氫吡啶基、哌嗪基、二氫吲哚基、鄰苯二甲醯亞胺基、1，2,3,4-四氫異喹啉基、4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩基、噻唑基、噻唑啶基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、嗎啉基、硫嗎啉基（thiomorpholinyl，亦稱作 thiamorph〇linyl)、 1，1 - 一氣代基硫嗎淋基、六氫。比σ定基、吼π各淀基、四氫〇夫 σ南基及諸如此類。含氮雜環π及”含氮經取代雜環”係指包含至少一個氮環 127871.doc -29- 200836722 原子且視情況包含其他非氮雜環原子(例如硫、氧及諸如此類）之雜環基團及經取代雜環基團。 π硫醇基π係指基團。 ’’烷硫基，，或，，硫代烷氧基”係指基團_s_烷基。 ”經取聽硫基"或"經取代硫代絲基"係指基n經取代烷基。 ”芳硫基，•係指基團各芳基，其中芳基係如以上所定義。 ’’經取代芳硫基"係指基團_s•經取代芳基，其中經取代芳基係如以上所定義。 "雜芳硫基”係指基團-s_雜芳基，其中雜芳基如以上所定義。經取代雜芳硫基”将#莫，,L丞係扣基團-s-經取代雜芳基，其中經取代雜芳基如以上所定義。 τ丄取雜ί衣硫基”係指美園 C, 團-S-經取代雜二二：…取代雜環硫基"係指基義。％其巾料與絲代料b以上所定雜裱基氧基”係指基團雜 #沪其圍π & 基-〇-且經取代雜環基氧基” 係私基團經取代雜環基七…1 皆如以上所定義。〃中雜衣基與經取代雜環基 π環烷硫基”係指基團基團-s-經取代環烧基，心二且二取代環烧硫基”係指以上所定義。、衣兀基及經取代環烷基皆如本文所用"生物活m 測試時且如在复5 + 乂本文所列示分析中 …一個實例中所定義的抑制濃度。 127871.doc 30 200836722 本文所用術語，，醫藥上可接受之鹽”係指式⑴及（ia)_(ii) 之化合物的無毒酸或驗土金屬鹽。該等鹽可在最終分離及純化式（I)及（Ia)-(Ii)之化合物帛間原位製得或藉由獨立使驗或酸官能團分別與適宜有機或無機酸或鹼反應製得。代表性鹽包括（但不限於）以下··乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡萄糖酸鹽、環戊丙酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2_羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、煙鹼酸鹽、2_萘磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3_苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽 '琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。而且，鹼性含氮基團亦可用諸如下列試劑四級銨化：烷基_ 化物，例如氯代、溴代及碘代甲烷、乙烷、丙烷及丁烷；硫酸二烷基酯，例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯、硫酸二丁酯及硫酸二戊酯；長鏈鹵化物，例如癸基、月桂基、肉豆蔻基及硬脂基氣、溴及碘；芳烷基齒化物，例如苄基溴及苯乙基演及其他。藉此得到水或油溶性或可分散產品。可用於形成醫藥上可接受之酸加成鹽之酸的實例包括無機酸（例如，鹽酸、硫酸及磷酸）及有機酸（例如，草酸、馬來酸、甲烷磺酸、琥珀酸及檸檬酸）。鹼加成鹽可在式⑴ 及之化合物的最後分離及純化期間原位製備或者 127871.doc -31 - 200836722 單獨藉㈣酸部分與合適驗（例如醫藥上子之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸气“屬陽離飞厌®夂虱鹽）或與氨或有機—級、

Lj -、、及或三級胺反應來製備。醫藥上可接受之鹽作限於)基於鹼金屬及驗土金屬(例如納、鋰、鉀、鈣二不紹鹽及諸如此類)之陽離子，以及包括(但不限於)錄二甲基銨、四乙基銨、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、三乙其胺、乙基胺及諸如此類之銨、四㈣及胺陽離子。:料用於形成鹼加成鹽之代表性有機胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、六氫吡啶及諸如此類。一女、酸及烧二酸者，其中各個燒基或稀基部分有利地具有不超過6個碳原子。具體酯之代表性實例包括（但不限於）曱酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯及乙基琥珀酸酉旨0 本文所用術語"醫藥上可接受的醋，，係指在活體内水解的酯且包括彼等在人體内分解留下母體化合物、其鹽活醫藥活性代謝物者。適宜的酿團基包括（例如）彼等衍生自醫藥上可接受的脂肪族羧酸者，尤其衍生自烷酸、烯酸、環烷本文所用術語”醫藥上可接受前藥”係指本發明化合物在合理的醫學判斷範圍内適用於接觸人類或低等動物之組織而無異常毒性、刺激、過敏反應及諸如此類、具有合理的效盈/風險比且對其預期用途而言有效之前藥、以及（若可能）本發明化合物之兩性離子形式。術語”前藥”係指在活體内藉由（例如）在企液中水解迅速轉化以獲得式⑴或之母體化合物、醫藥活性代謝物之化合物。討論提供於τ. 127871.doc -32- 200836722

Higuchi及 V· Stella之 Pro-drugs as Novel Delivery Systems (A.C.S. Symposium Series的第 14卷）及 Edward B. Roche編輯之 Bioreversible Carriers in Drug Design(American

Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987) 中，一者皆以引用的方式倂入本文中。本文所用’’抗癌劑’’或”用於治療癌症之藥劑”係指包括（僅以實例方式提供）以下之藥劑：誘導細胞凋亡之藥劑；多核苷酸（例如，核糖酶）；多肽（例如，酵素）；藥物；生物學模擬物；生物鹼；烷基化藥劑；抗腫瘤抗生素；抗代謝物，激素，鉑化合物；與抗癌藥物、毒素及/或放射性核素接合之單株抗體；生物反應調節劑（例如，干擾素及介白素等）；接受免疫治療劑；造血生長因子；誘導腫瘤細胞分化之藥劑（例如，所有及4-視黃酸等）；基因治療試劑，反義治療試劑及核苷酸；腫瘤疫苗；血管生成抑制劑、及諸如此類。許多其他藥劑肯定在熟悉該項技術者之範圍内。應瞭解，在所有上文所定義經取代基團中，藉由定義自身具有其他取代基之取代基（例如，具有經取代芳基作為取代基之經取代芳基其自身經經取代芳基取代等）獲得之聚合物皆不欲包括在本文中。在該等情況下，該等取代基之最大數量係3個。換言之，以上各個定義受（例如）經取代芳基限於'經取代芳基經取代芳基)'經取代芳基之限制條件的約束。同樣，應瞭解以上定義皆不欲白虹丁人^ 我白小^包括不允許取代模式（例 127871.doc •33- 200836722 如，甲基經5個氟基團取代或羥基位於乙烯系或乙炔系不飽和之α位）。該等不允許取代模式已為熟習此項技術者所熟知。本發明化合物可因化合物中存在一或多個不對稱或對掌性中心而展示立體異構現象。本發明涵蓋各種立體異構體及其混合物。除非另外指明具體立構中心之立體化學，否則式（I)及（Ia)-(Ii)化合物之闡述包括其立體異構體。某些本發明化合物t含不對稱經取代碳斜。料不對稱經取代石反原子可使得本發明化合物包含在具體不對稱經取代碳原子處之立體異構體混合物或單一立體異構體。因此，本發明化合物之外消旋混合物、非對映異構體混合物、單一對映異構體以及單-非對映異構體皆包括在本發明内。本文所用術語T及” R ”構型係如mpAc i974 I。顧嶋聊s FOR Section E, Fundamental Stereochemistry„ Pure Appl 13-30’ 1976中所定義。期望期望對映異構體可藉由自

C 市售對掌性起始材㈣由該項技術巾f知之方法對掌性合成來獲得，或可自對映里椹、/、構體化合物精由使用習知技術分離出期望對映異構體來獲得。明:物亦可展示幾何異構。幾何異構體包括本發 :I或烯基部分之化合物的順式及反式形式。本發。括個別幾何異構體及立體異構體及其混合物。 C·化合物製備本發明化合物可自裳县僅4日各易獲仵之起始材料使用以下普通方去及程序來製備。除非另有有說明，否則起始材料為市售品 127871.doc •34- 200836722 可如 PCT/US2005/ )及 PCT/US2006/ 且已為該項技術習知。適宜起始材料 022062(以 WO 2006/002236 所公開者 03n29(以WO 2007/021794所公開者）中製備，二者其整體皆以引用的方式倂入本文中。應瞭解，其中給出典型或較佳製程條件（即，反應溫度、時間、反溶劑、壓力等非另有說明，否則亦可使程條件。最佳反應條件可隨所用特定反應物或溶劑而變，但

該等條件可由熟㈣項技術者藉由f規最優化程序來確定0 可能需要常用保。用於各種官能此外，如彼等熟習此項技術者所瞭解，護基團以防止某些官能團發生不期望反應團之適宜保護基團以及用於保護及去保護教官能團之適宜條件已為此項技術所熟知。舉例而言，冑多保護基團闊 w. Greene^P. G. M. ^U^Pr〇tecting Groups in 办祕仙，第2版，WUey，⑽γ_，i99i及本文所引用參考文獻中。口乃叫γ丨印野手丨「王r心。因此右而要，則該等化合物可以純淨立體異構體形式 (即，以個別對映異構體或非對映異構體形式或以富含立體異構體之混合物形式)製備或分離。除非另有說明，否則：有該等立體異構體(及富含其之混合物)皆包括在本發明，圍内。純淨立體異構體(或富含其之混合物)可使用(例 :、技術自知之光學活性起始材料或立體選擇性試劑 "乂 f或者，可使用（例如清掌性管柱層析、對掌性拆 127871.doc 200836722 刀劑及諸如此類來分離該等化合物之外消旋混合物。該等中間體自反應混合物回收之後可直接用於下一步驟’或者視情況中間體可經重結晶或經由常用方式純化，然後用於下一步驟。所有R基團皆如針對式I所定義。步驟A :酮-酯合成

特定而言，在步驟A中，將適當經保護胺基酸ia溶於適星h性溶劑（例如甲醇、乙醇或丙_)中。適宜保護基團 (PG)包括習知B〇c保護基團。應注意，胺基酸^通常為市售品’如 α，α-經二取代胺基酸（PG_nh_c(ri)(r2)-C〇〇h)。

向1a中添加化學計量量的單價陽離子（例如碳酸鉋（Cs2C03) 及碳酸鉀（K2C〇3))，形成羧酸鹽（未圖示）。該反應實質上完成通常需要約15分鐘至約2小時，藉由在降低壓力下蒸發去除過量溶劑。然後將殘餘铯鹽重新溶於適宜溶劑（例如DMF)中’且然後用1至4當量適宜心鹵代-酮lb(1當量）（例如2-溴苯乙酮）處理並於室溫下攪拌直至反應實質上完成為止。或者，化合物^及^可與於丙酮中含〇之 K2C〇3混合，獲得化合物ic。然後將產物1 e藉由常用方法（例如萃取、過濾、蒸發及諸如此類）回收或者不經進一步純化及/或分離直接用於下 127871.doc -36- 200836722 一步驟。步驛B :味嗤形成

向來自步驟A之酮-酯lc於適量惰性溶劑（例如甲苯及二甲苯）中之攪拌溶液中添加過量乙酸銨，通常約2至約“當量且較佳約5當量。在一個實施例中，添加迪安-斯達克分水器（Dean-Stark trap)並將反應混合物加熱至約12〇。〇至約 160 C直至反應實質上完成為止。&另—實施例中，使用甲苯而不使用迪安斯達克分水器。&應實質上完成後，將混合物冷卻至室溫。然後藉由常用方法（例如萃取、過濾、蒸發及諸如此類）回收產物咪唑ld。其通常足夠純可直接用於下一步驟。步驟C :咪唑之N_烷基化 /=\(R5)m

j後使咪唑Id與適當經芳基_或雜芳基-取代烷基鹵化物 (例如苄基氣）反應。通常，此可藉由將咪唑ld與過量碳酸鉀及DMF —起攪拌且然後添加至少一等莫耳量的經芳基_ 或雜芳基-取代烷基函化物來實施。反應實質上完成後， 127871.doc -37- 200836722 藉由常用方法（例如萃取、過濾、蒸發、重結晶、及諸如此類）回收N-烷基咪唑le。在任一情況下，p米嗤1 e用於以下步驟D。步驟D:游離胺之去保護

然後藉由常用技術去除保護基團PG以提供胺lf，其然後視情況藉由常用方法（例如萃取、過濾、蒸發及諸如此類）純化。胺If直接用於下一步驟。步驟E··胺雜環之形成使用各種環形成方法將胺lf轉化成式⑴化合物。某些該

等方法繪示於方案1_9及實例^32中。在該等方案中，胺Η ^米唾基部分簡寫為”Ar"。該等方法之修改或改變形式亦可用於製備本發明化合物。該等修改將為熟f此項技術者方案1 R1 Ar-^R2 + NH2 1f <J.R4 1.1

R4 1.4

R4 127871.doc -38- 200836722 方案1展示式（I)化合物之合成，其中用以說明之L為_〇_ 或-CH2〇-且p為〇。胺1£與環氧化物1β1(其t R4如先前針對式⑴所疋義）在路易斯酸（Lewis acid)(例如Yb(〇Tf)3)之存在下反應’獲得胺基醇j·2。用光氣或光氣等效物在環化條件下處理1.2，獲得五員胺基甲酸酯1.3。此轉化的實例在實例3中給出。或者，le2與氯乙醯氯在有機鹼（例如三乙胺）之存在下反應，獲得六員内醯胺1.4。方案2

R3

R4 2.3 方案2展示式（I)化合物之合成，其中用以說明之[為 -CH2〇_且Ρ為1。胺基醇1·2在醯化條件下與化合物2el(其中 X及X為離去基團例如氯，且R3係如先前所定義）反應，押得醯胺2·2。將2.2曝露於鹼性條件（例如CsC〇3)且視情況在於DMF中之催化量TBAI(四丁基碘化銨）之存在下，獲得内酸胺2 · 3。方案3

方案3展示式（I)化合物之合成，其中用以說明之l為 -OCH2-。使胺ι·2在還原胺化條件下與醛3·1(其中pg為氧保 127871.doc -39- 200836722 護基團且R4如先前胺。適官、f馬此 f式（1)所定義）反應’以獲得相應月女。通且運原胺化條 P、左诒制田挪斤匕括I2與3.1在二氣甲烷中縮合，隧後利用硼氣化物（例如二 .^ ^ ^ χ 二乙隨氧基硼氫化鈉）還原亞胺。自所得胺去除氧保護基團，獲得胺基醇3·2。3·2與光氣或先虱4效物在環化條件节1千下反應，獲得六員胺基甲酸酯 3·3 〇方案4

方案4展示式⑴化合物之合成，丨中用以說明之^為 _C(〇)NR7-。胺12在還原胺化條件下與醛^(其中為氮保護基團例如Boc#如先前針對式⑴所定義）反應，以獲得相應胺4.2。適宜還原胺化條件包括j.2與4·〗在二氣甲烷中縮合，隨後利用硼氫化物（例如三乙醯氧基硼氫化鈉）還原亞胺。胺4.2與草醯氯ClC(0)C(0)Ci在三乙胺存在下反應’獲得相應醯胺。分離該中間體醯胺並去除保護基團，隨後加熱，獲得環化二-酮化合物4·3，其然後可使用習知程序官能化，以形成4·4。該等方法包括將該胺用烷基鹵化物烷基化或與烷基磺醯函反應以獲得相應磺醯胺。 127871.doc -40- 200836722 方案s

Ar

NH2

1.2

方案5展示式（I)化合物之人 7 口成，其中用以說明之L;% -CH2CH2NR7-。胺L2在還原胺您L為俅件下與醛53(其中p為氮保護基團例如Boc且R4如先前斜斜斗w 從〜成對式⑴所定義）反應，以獲得相應胺。適宜還原胺化條侔 G括1·2與5.1在二氯甲烧中縮合，隨後利用硼氫化物（例如二一乙酿氧基棚氫化納）還原亞胺。去除保護基團獲得5·2，i 去基團’例如氯)反應。所得醯胺中間體然後與酸(例如三鼠乙酸）反應，獲得邁克加成產物（Michaei product) 5·4。使用習知程序使5.4官能化，獲得5·5。該等方法包括將該胺用烷基!|化物烷基化或與烷基磺醯_反應具Ik後與5·3(其中X係離以獲得相應確醯胺。 127871.doc

Ar

0 R4

Ar

6.5 方案6

6.4 -41 - 200836722 J案6展示式⑴化合物之合成’其中用以說明之L為前Γ/ΓΓ。胺1,2在還原胺化條件下與酸叫其中如先引針對式（I)所定義）反應以獲得相靡鉻杜—1 于相應胺6·2。適宜還原胺化条件包括1.2與6· 1在二氯甲烷中縮合心後利用硼氫化物 (例如二乙醯氧基硼氫化鈉）還原私（1 妝妝2·2與丙烯醛化合物6·3(其中X係離去基團，例 ^ ]如鼠）反應以獲得相應醯胺 6·4。6.4與乙酸汞（例如三氟乙 ,^ ^ 文水’丨通後硼氫化鈉在環化條件下反應，獲得6.5。方案7

R4 7.3 方案7展示式（”化合物人甘士 C；奶< 口成，其中用以說明之乙為 _CH2〇CH2·。胺1·2在還焉脸外片疋承如化條件下與醛7·1(其中ps為氯保護基團且R4如先前斜斟4,τ、引針對式（1)所定義）反應以獲得相應胺。適宜還原胺化條件句杠 G括1.2與7.1在二氯甲烷中縮合，隨後利用硼氫化物（例如二、』如二乙醯氧基硼氫化鈉）還原亞胺。胺7·2與氯乙醯氯反廊以獾〜 …乂獲侍相應醯胺7·3。自7·3去除保護基團並將所得醇曝露於瑗、衣化條件（例如CsC03)及視情況於 DMF中之催化量TBAI(四丁 Α Λ 丁基峨化銨），獲得内醢胺7·4。 127871.doc -42. 200836722 方案8

ϋ 方案8展示式（I)化合物之合成， ΧΤΤ)7 ”中用以說明之la -CH2NRCH2_。胺1<2在還原胺化條件下與㈣叫中= 氮保護基團例如Boc且R4如先前斜斟4"、马 _ , ^ 對式（I)所定義）反應以獲

付相應胺8.2。適宜還原胺化條件& X 丁匕祜1.2與8.1在二氣甲烷中縮合，隨後利用删氫化物（例如三乙醒氧基钱化鈉）還原亞胺。胺8.2與氣乙醯氯反應以獲得相應醯胺8.3。自去除保護基團並將所得胺曝露於環化條件（例如在極性溶劑中加熱），獲得内醯胺8·4，其可使用習知程序進一步官月色化以形成8 · 5。該等方法包括將該胺利用烷基函化物烷基化或與烷基磺醯鹵反應以獲得相應磺醯胺。方案9

127871.doc -43- 200836722 方案9展示式⑴化合物之合成，#中用以說明之匕為 C(〇)NR CH2•且R4為CH2qH。胺μ在還原胺化條件下與輕9·1(其中pg係氧保護基團）反應以獲得相應胺μ。適宜還原胺化條件包括U與“在二氣甲烷中縮合，隨後利用硼氫化物（例如二乙醯氧基删氣化納）還原亞⑮。胺Μ與l 氯-2-氧代乙酸甲酯反應以獲得相應醯胺9·3。自9·3去除保護基團並將所得二醇曝露於環化條件（例如CsC〇3)及視情況於DMF中之催化量TBAI(四丁基埃化銨），獲得内酿胺 9.4。利用pPhs、偶氮二甲酸二異丙酯（diad)、及 (EtO)2P(〇)NHBoc在Mitsunobu條件下處理9.4，獲得經保護胺9·5。藉由（例如）曝露於酸性條件去除保護基團，獲得重排二酮化合物9·6，其可進一步經官能化以獲得額外式⑴ 化合物。在另一實施例中，提供製備式⑴或（Ia)_(Ii)之化合物游離驗之方法’該方法包含使該化合物之酸加成鹽與鹼反應以形成相應游離鹼。在另一實施例中，提供製備式⑴或化合物之鹽的方法，其包含： a) 使式（I)或（la)-(Ii)化合物之游離驗與酸反應以獲得酸加成鹽；或 b) 將式（I)或（Ia)-(Ii)化合物之鹽轉化成式（1)或（la)-(li) 之另一化合物。 D· 醫藥調配物當作為醫藥使用時，本發明化合物通常以醫藥組合物之 127871.doc -44- 200836722 形式投與。該等組合物可藉由包括經口、非經腸、經皮膚、局部、經直腸、及經鼻内在内的多種途徑投與。化合物作為(例如)可注射及口服兩種組合物皆有效。：組合物係以醫藥技術中習知之方式製備且其包含二活性化合物。夕種 (、本發明亦包括含有-或多種上述本發明化合物作為活性成份連同醫藥上可接受載劑之醫藥組合物。在製備本發明組合物時’通常將該活性成份與賦形劑混合，藉由賊形劑稀釋或密封於可為膠囊、小袋、紙或其他容器形式之載劑中。所用賦形劑通常係適於投與給人類個體或其他哺乳動物之賦形劑。當該賦形劑用做稀釋劑時，其可為固體、半固體或液體材料，其對活性成份起媒劑、載劑或媒介作用。因此，該等組合物可呈錠劑、丸劑、散劑、菱形錠月！小衣、藥丸、酿劑、懸浮液、乳液、溶液、糖聚、氣 =膠(作為固體或於液體媒介中）、軟膏（包含例如多達10重量％活性化合物)、軟及硬明膠膠囊、栓劑、無菌可注射溶液及無菌包裝的粉末之形式。在製備調配物時，可能需要將該活性化合物礙磨以在與其=成份組合之前提供適宜粒徑。若該活性化合物實質上則通吊將其碾磨至粒徑小於200網目。若該活性化口物只貝上可溶於水，則通常藉由碾磨調節粒徑以在調配物中提供實貝上均勻分佈，例如約彻罔目。適宜賦形劑之一些實例包括乳糖、葡萄糠、蔗糖、山梨糖醇甘路醇、殿粉、阿拉伯膠、填酸妈、藻酸鹽、黃蓍 127871.doc -45- 200836722 膠月膠矽酸鈣、微晶纖維素'聚乙烯吡咯啶酮、纖維素…、菌良、糖漿及甲基纖維素。該等調配物可另外包括·潤滑劑，例如滑石粉、硬脂酸鎂及礦物油；潤濕劑；礼化及懸浮劑；防腐劑，例如羥基苯甲酸甲酯及羥基苯甲文丙3曰’乓甜劑，及矯味劑。本發明之組合物可藉由採用該項技術中習知之程序調配以便在投與給患者後提供活性成份之快速、持久或延遲釋放。 f生、、且伤（亦即，本發明化合物）在醫藥組合物及其單位背J 中之數畺可端視具體應用、具體化合物之效能及期望濃度在寬範圍内改變或調節。该等組合物較佳調配成單位劑型，各劑量含有約丨_約 5〇〇毫克、通常約5·約1〇〇毫克、有時約1〇_約3〇毫克活性成伤術單位劑型係指適宜作為單一劑量用於人類個體及其他哺乳動物之物理離散單位，各單位包含經計算與適宜醫藥賦形劑結合可產生期望治療效果之預定量活性材料。較佳地’上述本發明化合物係以不超過醫藥組合物的約20重量％、更佳不超過約15重量％使用，其中剩餘部分為醫藥上惰性載劑。違活性化合物在寬劑量範圍内有效且通常以醫藥或治療有效量投與。然而，應瞭解，化合物之實際投與量將由醫生根據相關情況決定，其包括欲治療之病狀、欲治療病狀之嚴重程度、所選投與途徑、實際投與的化合物、個別患者的年齡、重量及反應、患者症狀之嚴重程度及諸如此類。 127871.doc 46- 200836722 在用於治療或對抗哺乳動物癌症之治療用途中，該化合物或其醫藥組合物應藉由任何適宜途徑（例如經口、經局部、經皮膚及/或非經腸）以一定劑量投與以在正治療之哺乳動物中獲得並維持活性組份的治療有效濃度（亦即，數量）或血液水平。通常，活性組份之該治療有效量劑量（亦即，有效劑量）應在約0」至約1〇〇、更佳約i 〇至約5〇毫克/ 公斤體重/天之範圍内。

為製備諸如錠劑等固體組合物，將主要活性成份與醫藥賦幵y d5以形成包含本發明化合物之均勻混合物的固體預調配組合物。當提及該等預調配組合物呈均相時，意指該活性成份係均勾分散於整個組合物中，以便可容易地將該組合物再分成相等單位劑型’例如，錠劑、丸劑及膠囊。然後’將此固體預調配物再分成上述類型之單位劑型，其包含（例如川.1-約500毫克本發明活性成份。本發明之錠#丨或丸劑可經包覆或者複合以提供具有持久仙優點之劑型。舉例而言，該錠劑或丸劑可包含内部劑里=料部劑量組份，後者為前者之包膜形式。該 :可=腸溶性層分開，該腸溶性層用以抵抗胃内的分内部組份完整地進入十二指腸或延遲釋放。 μ 4腸洛性層或包衣可使用多種聚合酸及聚合酸與諸如蟲膠 1 ^材料包括大量料之混合物。十/、垸知及乙酸纖維素等材 ΤΤ/ ι, > . 、"工口或藉由注射投血之该體形式包括水溶液、經適當射u之液之搪水、水性或油性懸浮 127871.doc •47· 200836722 液及利用可食用油（例如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油）矮味之乳液以及醜劑及類似醫藥媒劑。供吸入或吹入用之組合物包括於醫藥上可接受、水性或有機溶劑中之溶液及懸浮液、或其混合物及粉末。該等液 : μ或固體組合物可含有上文所述醫藥上可接受之適當賦形齊i。該等組合物較佳藉由口或鼻呼吸途徑投與以獲得局部或全身效果。於較佳醫藥上可接受溶劑中之組合物可藉由使用惰性氣體霧化。經霧化溶液可直接自霧化裝置吸入或可將該霧化裝置附裝至面罩帷罩或間歇式正壓呼吸機。溶液、懸浮液或粉末組合物可較佳經口或經鼻自卩恰當方式遞送調配物之裝置投與。以下調配物實例閣述本發明之代表性醫藥組合物。調配物實例1 製備含有以下成份的硬明膠膠囊：數量 ; 成份（毫克/膠囊） J 活性成份 30.0 殿粉 305.0 硬脂酸鎂 5.0 將以上成份混合並以340毫克的量填充於硬明膠膠囊中〇 127871.doc -48- 200836722 調配物實例2 用以下成份製備錠劑調配物：數量成份（毫克/錠劑）活性成份 25.0 微晶纖維素 200.0 膠體二氧化矽10.0 硬脂酸 5.0

將該等組份摻合併壓製成錠劑，每片重24〇毫克。調配物實例3 製備含有以下組份之乾燥粉末吸入器調配物：成份重量％活性成份 5 乳糖 95 將活性成份與乳糖混合並將混合物添加於乾燥粉末吸入器具中。調配物實例4 如下製備每片含30毫克活性成份之鍵劑：數量 (毫克/錠劑） 3〇·〇毫克 45.0毫克 35.0毫克 4.0毫克中之溶液）成份活性成份澱粉微晶纖維素 ί：^乙細基σ比洛咬_ (作為10%於無菌水 127871.doc •49- 200836722 4·5毫克〇_5毫克 1·〇毫克 120毫克羧甲基澱粉鈉硬脂酸鎂滑石粉總計使活性成份、殿粉及纖維素穿過2G號則美國篩並充分混合。將聚乙㈣$相溶液與所得粉末混合，然後使盆穿過16網目美國筛。將如此製得之顆粒在⑽域下乾 f並使其穿過16網目美國篩。然後將縣穿過30網目美國師之叛甲基澱粉鋼、硬脂酸鎂及滑石㈣加於該等顆粒中，混合後，在製錠機上壓製，得到每片重12〇毫克之錠劑0 調配物實例5 如下製得每粒含40毫克醫藥之膠囊：數量成份 (毫克/膠囊）活性成份 40.0毫克澱粉 109.0毫克硬脂酸鎮 1.0毫克總計 150.0毫克將活性成份、澱粉及硬脂酸鎂摻合，使其穿過20號網目美國篩，並以150毫克的量填充於硬明膠膠囊中。調配物實例6 如下製得每個包含25毫克活性成份之栓劑：成份數量活性成份 25毫克飽和脂肪酸甘油酿至2,000毫克 127871.doc -50- 200836722 使居性成份穿過6〇網目美國篩，並懸浮於預先用最少所需熱量炫化夕 <飽和脂肪酸甘油脂中。然後將該混合物傾倒於標稱2 〇吉交3 •兄谷Ϊ之栓劑模具中並使其冷卻。調配物實例7 下製得每5.0毫升劑量含5 0毫克醫藥之懸浮液：成份數量活性成份 5〇·〇毫克黃原膠 4.0毫克羧甲基纖維素鈉（11%) /微晶纖維素（89%) 5〇.〇毫克蔗糖 1·75 克苯甲酸鈉 1〇.〇毫克矯味劑及著色劑適量純水至 5.0毫升將’舌性成份、蔗糖及黃原膠摻合，使其穿過10號網目美國缔’且然後與預先製得之微晶纖維素與羧甲基纖維素鈉

之火’各液混合。將苯甲酸鈉、矯味劑及著色劑用一些水稀釋’並邊添加邊攪拌。然後添加足量的水以得到所需體積。調配物實例8 數量成份 (毫克/膠囊）活性成份 15.0毫克澱粉 407.0毫克硬脂酸鎮 3.0毫克總計 425.0毫克將’舌性成份、殿粉及硬脂酸鎂摻合，使其穿過20號網目 127871.doc -51 - 200836722 美國時’並以425.0毫克的量填充於硬明膠膠囊中。調配物實例9 可如下製備皮下用調配物：成份數量活性成份 5·0毫克玉米油 1·〇毫升調配物實例10 可如下製備局部用調配物：成份數量活性成份 1-10克乳化蠟 30克液體石蠟 20克白色軟石蠟至100克將白色軟石蠟加熱至熔化。納入液體石蠟及乳化蠟並攪拌至溶解。添加活性成份並繼續攪拌至分散。然後將該混合物冷卻直至成固體。 t 調配物實例11 可如下製備靜脈内調配物：數量成份活性成份 250毫克等滲鹽水 1000毫升本發明方去中所用另一較佳調配物使用經皮遞送裝置 (貼片）、"亥等故皮貼片可用於以控制量提供本發明化合物之連績或不連續輸注。用於醫藥試劑遞送之構造及經皮貼片之用述已為該項技術習知。參見（例如）i 99 i年6月丨i曰 127871.doc -52 - 200836722 頒發之美國專利第5,023,252號，其以引用方式倂入本文中°亥專貼片可經構造用於持續 '脈動或按需遞送醫藥試劑。通吊，期望或需要將該醫藥組合物直接或間接引入大腦中。直接技術通常涉及將藥物遞送導管放置於宿主腦室系統中以繞過血腦障壁。美國專利第M1M72號揭示一種用於將生物學因子輸送至身體的特定解剖學區域之該可植入遞藥系統，該專利案以引用的方式倂入本文中。通常較佳間接技術一般涉及藉由將親水性藥物轉變成脂 /合性藥物來調配該組合物以提供藥物潛伏化作用。潛伏化作用通常借助阻滯藥物上存在之經基、幾基、硫酸根及一、及胺基團來使得藥物更易溶於脂質中且更易穿過血腦障 ^或者，可藉由動脈内輸注能迅速打開血腦障壁的高滲溶液來增強親水性藥物之遞送。用於本發明之其他適宜調配物可在以…邮⑽之 Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia，PA，第 17版（1985)中找到。 Ε· 劑量及投與如上文所提及，本文所述化合物適用於許多上述藥物遞送系統。此外，為增強所投與化合物之活體内血清半衰期ΚΙ:合物可經囊封’引入脂質體之腔，製成膠體，或者可使用其他提供該化合物經延長血清半衰期之常用技術有許夕方法適用於製備脂質體，如鬧述於（例如如心等人之美國專利第4,235,871號、第4,5〇1，728號及第 4,837,028號中者，其各自以引用的方式倂入本文中。 127871.doc -53- 200836722 人：發明化合物係用於抑制或治療至少部分地由㈣活性介導之病症。在一個能；1¾ tb ^ 心樣中，該至少部分地由KSp介導之 Ο 病症係細胞性增以症1語"_㈣m 增瘦病症"係指包括（例如）癌症、腫瘤、增殖、再狹窄、心臟月大《疫病症及炎症在内的疾病。本發明提供治療需要治療的人類或哺乳動物個體的方法，該方法包括向該個體技與/U療有效f的式⑴或叫⑴)之化合物，其單獨或與其他抗癌劑組合投與。在其他態樣中，提供式⑴或（Ia)- (1〇之化口物的用途’其用於製備治療Ksp介導的病症之醫藥0 本發明化合物亦在分析中用於評價KSP驅動蛋白抑制之相對活性。在該等分析中，式⑴或叫⑼之化合物可用於測定m式化合物（例如糊或（IaHii)之另—化合物或另 - KSP抑制劑)之相對抑制活性。當如此使用時，式⑴或 (Ia)-(I〇之化合物係以足以使熟悉該項技術者檢測㈣驅動蛋二之抑制的量使用。此一量在本文中有時稱為，，有效抑制篁’’。在較佳實施例中，該抑制量係與在不存在式⑴或 (IaHIl)之化合物的情況下的活性相比將使KSP驅動蛋白活性降低約5G%之量。然後可以在相同濃度下提供更多或更 v抑制來砰‘測試化合物，以便提供相對活性之分級。該等貝Λ用於確定測試化合物之結構改變及其他修飾以改良其活性。因此，本發明提供抑制KSp驅動蛋白活性之方矢該方去包括使該驅動蛋白與有效抑制量的式⑴或（Ia)_ (Ιι)之化a物接觸。亦提供一種抑制細胞中KSp驅動蛋白活 127871.doc -54- 200836722 性之方法，該方法包括使該細胞與有效抑制量的式⑴或 (Ia)-(Ii)之化合物接觸。本發明化合物用於在活體外或活體内抑制癌症細胞之生長。術語"癌症”係指包括（例如）以不之癌症：肺及支氣管癌’别列腺癌；乳癌；胰腺癌；結腸及直腸癌；甲狀腺癌；胃癌；肝及肝内膽管癌；腎及腎盂癌；膀胱癌；子宮體癌；宮頸癌；卵巢癌；多發性骨髓瘤；食道癌；急性骨叙性白血病，慢性骨髓性白血病；淋巴細胞性白血病；髓細胞性白血病；腦癌；口腔及咽癌；喉癌；小腸癌；非霍奇金淋巴瘤；黑素瘤；及絨毛狀結腸腺瘤。癌症亦包括選自由癌瘤、腺癌、肉瘤及血液惡性腫瘤組成之群之瘤或腫瘤。此外，癌症類型可選自由以下組成之群：實體瘤/惡性腫瘤之生長、黏液及圓細胞癌、局部晚期瘤、人類軟組織癌瘤、癌症轉移、鱗狀細胞癌、食道鱗狀細胞癌、口腔癌 '皮膚τ細胞淋巴瘤、何傑金氏淋巴瘤（H〇dgkin，s lymphoma)、非何傑金氏淋巴瘤、腎上腺皮質癌、產生 ACTH的腫瘤、非小細胞癌、乳癌、胃腸癌、膀胱癌、女性生殖道惡性腫瘤、男性生殖道惡性腫瘤、腎癌、腦癌、月癌、皮膚癌、甲狀腺癌、視網膜母細胞瘤、神經母細胞瘤、腹膜滲出液、惡性胸膜滲出液、間皮瘤、維爾姆斯 (Wilms’s)瘤、膽囊癌、滋養層腫瘤、血管外皮細胞瘤、及卡波西（Kaposls)肉瘤。本發明之化合物或組合物可藉由適宜途徑（例如經口、 127871.doc -55- 200836722 靜脈内、非經腸、經皮H經直腸、或經鼻内）投與給哺乳動物。哺礼動物包括（例如）人類及其他靈長類動物、寵物或伴信動物（例如狗及猶）、實驗室動物（例如大鼠、小鼠及兔子）及豕畜（例如馬、豬、山羊及牛）。瘤或腫瘤包括組織細胞其中該等細胞之增殖不受控制之生長及發展。一些該等生長係良性的，但其他的稱為，，惡性的且可導致有機體死亡。惡性腫瘤或"癌症，，有別與良性生長，此乃因其除展示攻擊性細胞增殖以外，其可侵略周圍組織並轉移。此外，惡性腫瘤的特徵在於相對於彼此及周圍組織其展示分化之較大損失（較大"反分化及組織化。此性質稱為，，間變”。具有期望生物活性之化合物可根據需要經修飾以提供期望性質，例如改良藥理性質（例如，活體内穩定性、生物利用度）、或在診斷應用中檢測之能力。穩定性可以各種方式分析，例如藉由量測在利用肽酶或人類血漿或血清培月期間化合物之半衰期。出於診斷目的，可將各種標記連接至該等化合物，其可直接或間接提供可檢測信號。因此，本發明化合物及/或組合物可以各種方式修飾用於各種最終目的而同時仍保持生物活性。此外，可引入多種反應性位點用於連接至粒子、固體基質、大分子、及諸如此類。經標記化合物可用於各種活體内或活體外應用。可使用各種標記，例如放射性核素（例如，γ射線放射性同位素， 127871.doc -56- 200836722 例如！于—99或銦-ln)、螢光劑（例如，螢光素）、酵素、酵素底物、酵素辅因子、酵素抑制劑、化學發光化合物、生物^光化合物及諸如此類。彼等熟悉該項技術者應習知其他=於結合至錯合物之適於標記，或應能約使用常規試驗 : #疋該等。該等標記之結合係使用彼等熟悉該項技術者通用的標準技術達成。 &本U之醫藥組合物適用於各種藥物遞送系統。用於本 f、 ·月之適且凋配物係在 Remington，s Pharmaceutical nces，Mace Publishing公司，Philadelphia，pa，第口版 0985)中找到。投與給患者的量將視所投與藥物、投與目的(例如預防或治療）、該患者之狀況、投與方式等而有所不同。在治療應用中，將組合物以足以治癒或至少部分地阻止疾病及其並發症之發展或症狀的量投與給已患該疾病的患者。足 :達，此目的之里定義為„治療有效劑量，，。有效用於此用 *之量將取決於所治療疾病狀況以及臨床主治醫師依照諸如疾病、病症或病狀的嚴重程度、患者的年齡、體重及綜合情況等因素所作出的判斷。 . #與給患者之化合物通常為上述醫藥組合物形式。該等 - 一物可藉由㊅規的滅菌技術滅菌或可經無菌過濾。所得水命液可經包裝以按原樣使用或束乾，投與前將此滚乾製劑與無菌水性載劑組合。該化合物製劑之PH通常介於約3 之間更佺約5至9且最佳約7至8。應瞭解，應使用某些上述賦形劑、載劑或穩定劑以形成醫藥鹽。 127871.doc •57- 200836722

本發明化合物及/或組合物之治療劑量將視（例如）所進行冶療之特定用途、化合物的投與方式、患者的健康狀況和狀怨及處方醫師的判斷而不同。舉例而言，對於口服投與而言’該劑量通常應介於約5微克至約50毫克/公斤體重/天之間、較佳約1毫克至約1〇毫克/公斤體重/天。或者，對於靜脈内投與，該劑量通常應介於約5微克至約5〇毫克/公斤體重之間、較佳約500微克至約5〇〇〇微克/公斤體重。預期替代投與途徑包括（但不限於）鼻内、經皮、吸入、經皮下及經肌内。有效劑量可根據得自活體外或動物模型測試系統之劑量反應曲線外推獲得。通#，本發明之化合物及/或組合物應藉由任何投與類似效用Μ劑之可接受方式以治療有效量投與。肖等化合物之毒性及治療效用可在細胞培養物或實驗動物中藉由標準醫藥程序來測^，例如，用於载LD5G(使群體中抓死亡的劑量）及ed5。(對群體中5〇%治療有效之劑量）的程序。毒性及治療效果之間的劑量tb即為治療指數，且其可表示為率LD^/EDso。展示尚治療指數之化合物較佳。'' 一自細胞培養分析及動物研究所獲得之數據可用於擬定適 ==劑量範圍。該等化合物之劑量較佳位於具有較 "戈一性之循環濃度（包括D範圍内。該劑量可端視 =劑型及利投與途徑在此㈣㈣化1於養=任：化合物及/或組合物而言，皆可根據細胞培 ί::估計治療有效劑量。可在動物模型中擬定劑里以達成循核灰漿濃度範圍，盆 /、匕括在細胞培養物中所測 127871.doc -58- 200836722 定之ic5G(達成最大活性抑制一半的測試化合物濃度）。此資訊可用於更精確地確定可人類中之有用劑量。血漿中之水平可藉由（例如）高效液相層析來量測。提供以下合成及生物學實例以舉例說明本發明，且無論如何不能將其理解為限制本發明的範圍。實例參照以下實例，使用本文所闡述之方法或其他該項技術習知之方法合成本發明化合物。化合物及/或中間體係藉由高效液相層析（HPLC)使用具有2690分離模塊之Waters Millenium層析系統（Milford， ΜΑ)來表徵。分析管柱為自Alltech (DeerHeld，IL)購得之 Alltima C-18逆相，4.6x250毫米。使用梯度溶析，其通常以5%乙腈/9 5%水開始且在40分鐘時期内發展至100%乙腈。所有溶劑皆包含0.1%三氟乙酸（TFA)。藉由在220或 254奈米下之紫外光（UV)吸收檢測化合物。HPLC溶劑係購自 Burdick and Jackson (Muskegan，MI)或 Fisher Scientific (Pittsburgh，PA)。在一些情況下，藉由薄層層析（TLC)使用玻璃或塑膠作為背之矽膠板（例如，Baker-Flex矽膠1B2-F撓性薄板）分析純度。TLC結果係在紫外光下、或藉由使用習知碘蒸氣及其他各種染色技術容易地目視檢測。質譜分析係在兩種LC/MS儀器中的一個上實施：Waters System (Alliance HT HPLC 及 Micromass ZQ 質譜儀；管柱： Eclipse XDB-C18，2·1 X 50毫米；溶劑系統：5-95%(或 35-95%、或65-95%或95-95%)於水中之乙腈連同0.05%TFA ; 127871.doc -59- 200836722 々’l速0.8¾升/分鐘；分子量範圍5〇〇-i5〇〇;錐電壓2〇 v; 管柱溫度40。〇或Hewlett Packard 系統（Series 11〇〇 HPLC ; 管柱：Eclipse XDB-C18, 2.1x50毫米；溶劑系統：1-95% 於水中之乙腈連同0.05% TFA ;流速0.4毫升/分鐘；分子量範圍1 50-850 ;錐電壓50 V ;管柱溫度3〇。〇。所有質量皆以彼等質子化母離子報告。 GC/MS分析係在Hewlett Packard儀器（HP6890系列氣體層析連同質量選擇性檢測器5973 ;注射器體積：1毫升；初始管柱溫度：50°C ;最終管柱溫度：25(rc ;斜坡時間· 2 0分鐘，氣體流速：1毫升/分鐘；管柱：5 %苯基甲基石夕氧烧，型號HP 190915-443，尺寸：30·〇米χ25米χ〇·25 米）上實施。核磁共振（NMR)分析係利用Varian 300 MHz NMR (Palo

Alto，CA)針對一些化合物實施。光譜參照物為TMS或已知化學位移之溶劑。一些化合物樣品係在高溫（例如，7rc) 下試驗以促使樣品溶解性增加。一些本發明化合物之純度係藉由元素分析（Desert Analytics，Tucson，AZ)來估計。熔點係在實驗室裝置Mel-Temp裝置（H〇1Hst〇n，MA)上實製備型分離係使用Flash 4〇層析系統及κρ-Sil，60A (Biotage，Charlottesville，VA)、或藉由急驟管柱層析使用矽膠（23 0-400網目）填充材料、或藉由]91>1^使用（：_18逆相管柱來實施。通常用於Flash 40 Bi〇tage系統及急驟管柱層 127871.doc -60- 200836722 析之溶劑係二氯甲烷、甲醇、EtOAc、己烷、丙酮、水性羥基胺及三乙胺。通常用於逆相HPLC之溶劑係乙腈與水之變化濃度連同0.1°/。三氟乙酸。除非另有說明，否則所有溫度皆以攝氏溫度錶示。而且，在該等實例及別處，縮寫具有以下含義：

AcOH = 乙酸 aq. = 含水 ATP = 三磷酸腺苷

Boc = 第三丁氧幾基 BSA = 牛血清白蛋白 CAM = 鈽鉬酸銨 DCM = 二氯甲烷 DIAD = 偶氮二甲酸二異丙酯 DIBAL = 二異丁基氫化鋁 DIEA = 二異丙基乙基胺 DIPEA = 二異丙基乙基胺 DMAP = 二甲基胺基吡啶 DMF = 二甲基甲醯胺 DMSO = 二甲亞颯 DTT = 二硫蘇糖醇 eq.= 當量 Et2〇乙鍵

Et3N = 三乙胺

EtOAc = 乙酸乙酯

EtOH = 乙醇 g = 克 h = 小時 HPLC = 高效液體層析 L = 升 127871.doc -61 - 200836722 LC/MS = 液體層析/質譜 Μ = 克分子 m = 米 m/z = 質量/電荷比 MeNH2 = 甲基胺 mg = 毫克 min = 分鐘 mL = 毫升 mm = 毫米 mM = 毫克分子 mmol = 毫莫耳 mol = 莫耳 N = 標稱 nm = 奈米 nM = 毫微克分子 NMR = 核磁共振 PPh3 = 三苯基膦 PhCF3 = 三氟甲基苯 psi = 磅/平方英吋 RT = 室溫 sat. = 飽和 TEA = 三乙基胺 THF = 四氫呋喃 TFA = 三氟乙酸 TLC = 薄層層析 TMS = 三甲基甲矽烷基 TMSC1 = 氣化三甲基矽烷 Yb(OTf)3 = 三氟甲烷磺酸鏡（III) μg = 微克 \\1j = 微升 μΜ = 微克分子 127871.doc -62- 200836722 實例1 W_1-(1H4·苯基_1H•咪唾_2_基)_2,2二f基丙小胺㈣

ij 將適宜N-Boc-酸（4.0毫莫耳）（例如第三丁基白胺酸}1-1於 Et〇H(10毫升）中之攪拌溶液用Cs2CO3(2.0毫莫耳）處理。45 分鐘後，藉由在降低壓力下蒸發去除Et0H。將殘餘鉋鹽重新溶解於DMF(15毫升）中並然後用適宜心鹵代·酮（例如 2-溴苯乙酮）(4.0毫莫耳）處理並於室溫下攪拌直至反應完成為止。然後使反應混合物在EtOAc與H20之間分配，並將有機物分離，然後用H20 (x3)、鹽水（χ3)洗滌，然後乾燥（Na2S〇4)，過濾，並在降低壓力下蒸發以獲得酮酯1-2，其足夠純可直接用於下一步驟。 127871.doc -63 · 200836722

步驟B

向酮-酯1-2 (4.0毫莫耳）於二甲苯（4〇毫升）中之攪拌溶液中添加乙酸銨（20毫莫耳）。添加迪安_斯達克分水器2 將反應加熱至140°C。反應完成後，將混合物冷卻至室溫，然後在EtOAc與飽和NaHC〇3水溶液之間分配。將有機物分離，然後用飽和NaHC〇3水溶液（χ2)、HW (X3)、鹽水（x3)洗滌，然後乾燥（Na2S〇4)，過濾，並在降低壓力下蒸發以獲得苯基咪唑丨_3，其足夠純可直接用於下一步

U

步驟C

向咪。坐1-3 (4.0毫莫耳）及K2C03 (8.0毫莫耳）於DMF (1〇 $升）中之攪拌溶液/懸浮液中添加苄基化試劑（例如苄基 >臭）(4.40毫莫耳）。反應完成後，使混合物在Et〇Ac與h2〇之間分配。將有機層分離並用H20 (x3)、鹽水（x3)洗滌，然後乾燥（Na2S〇4)，過濾，並在降低壓力下蒸發以獲得粗 127871.doc •64- 200836722 ^ 笨基"米嗤。然後使粗反應物質結晶（EtOAc，己烧）’獲得純產物1-4。

步驟D

10%TFA處理。反應完成後，將反應混合物在真空中濃縮且然後在EtOAc與飽和NaHC〇3水溶液之間分配。將有機物分離，然後用飽和NaHCCh水溶液（x2)、HW (χ2)、鹽水 (χ2)洗滌’然後乾燥（Na2S〇4)，過濾，並在降低壓力下蒸發以獲得苯基咪唑游離胺1-5。實例2 (R)-l-(l-苄基-4_(2,5_二氟苯基）_1!!_咪唑 _2_基）-2,2-二甲基丙-1-胺（2-6)

127871.doc •65- 200836722 步驟A :化合物2-3之製備向含1當量化合物2-1之5頸燒瓶中添加〇·7當量K2c〇3，以獲得於丙酮中之〇·25Μ ΚΑ〇3溶液。於n2下攪拌45分鐘後，添加1·0當量於1 Μ丙酮中之化合物2-2，隨後添加0.2 當量於5 Μ丙酮中之ΚΙ。當反應完成時（約3小時），將反應混合物用冰浴冷卻。經由添加漏斗以溫度不超過15它之速度添加冰水（等於反應中所用丙酮體積的約2·5倍。於冰浴中攪拌1小時後，藉由真空過濾收集產物。將濾餅用2〇% 丙酮洗滌3次且用水洗滌3次。將濾餅空氣乾燥且進一步在烘箱中於50°C/5托下乾燥直至達到恆定重量為止。產量 92.7克（96%)。册1^純度：99〇/〇。步称B :化合物2_4之製備向於反應燒瓶中之2-3的0.19 Μ甲苯溶液中添加2〇當量 NH4〇Ac。將混合物於回流下攪拌直至反應完成為止（約8 小時）。將其冷卻至室溫且然後添加水（等於反應中所用甲醇體積的約四分之一）。將有機相分離並用水、飽和 NaHCCb洗滌，並經MgS〇4乾燥。在真空中去除溶劑以獲得 2-4。產量：59.5 0克（99.6%)。HPLC純度：91.4%。步驟C :化合物2-5之製備於〇-5°C下將含0.5 Μ 2_4之DMF及KWO3溶液的燒瓶於％下攪拌30分鐘，且然後將當量phc：H2Br添加於其中。然後將混合物於室溫下攪拌過夜。然後將其在冰浴中攪拌，在此期間逐滴添加冰水（約等於反應中所用DMF的體積）。藉由真空過濾收集產物，用5〇%DMF洗滌兩次，用 127871.doc -66- 200836722 25%DMF洗滌兩次且用水洗滌三次。將固體在烘箱中於 50°C/5托下乾燥。產量：69.20克（95%)。HPLC純度： 94%。步驟D :化合物2-6之製備將MeOH添加於燒瓶中並放置於冰浴中。在3〇分鐘内向其中逐滴添加9.85當量CH3COCl，隨後添加1當量2-5，以形成2-5於MeOH中之0.25M溶液。將混合物於室溫下授拌直至反應完成為止（約12小時）。在降低壓力下去除溶劑後，將所得固體懸浮於MeOH(等於反應中所用MeOH體積的大約一半）中並於0-5°C下攪拌。向此混合物中逐滴添加 2.5 M NaOH/MeOH溶液直至pH達到約10為止且然後添加水。於0-5°C下攪拌1小時後，藉由過濾收集產物2-6。將其在烘箱中於50°C/5托下乾燥。產量：26.12克（90.5%)。 HPLC純度：97.0%。經測定光學純度為>99%(對映異構體超量（ee))。實例3 (5R) -5-(2-胺基乙基）-3-[(lR)-i-(i_苄基冬苯基-n味也-2·基）-2,2_二曱基丙基]-1，3_嚼唾咬_2_酮（1)及（5R) ·5-(2_ 胺基乙基）-3-[(1R)-1-(1-苄基-4-苯基-1 Η-咪嗅-2-基）-2,2-二甲基丙基]-1，3-噪唾咬_2·酮（2) 127871.doc -67- 200836722

1 2

步驟A

於室溫下向胺3-1 (1當量）於二氯甲烷中之溶液中添加環氧化物3-2 (1當量），隨後添加Yb(OTf)3 (1當量）。將反應於40°C下加熱14小時。反應完成後，添加EtOAc，隨後用水（2x)洗滌。將有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用0-100%EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供

化合物3-3。

步驟B

於室溫下向胺3-3 (1當量）於二氣曱烷中之溶液中添加光 127871.doc -68- 200836722 氣浴液（1 · 1當ΐ )，隨後添加三乙胺（2〇當量）。將反應於 30°C下加熱直至觀察到完全結晶為止。將反應用水洗滌並分離有機層’乾餘’濃縮並在石夕膠上利用〇_1〇〇%Et〇Ac/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物弘4。

步驟C

於室溫下向鄰苯二甲醯胺3-4 (1當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於60°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。藉由逆相HPLC純化所得油，以提供期望化合物1及2 ; MH+ 433.2。實例4 5-(胺基曱基）-3-{(lR)-l-[l-苄基-4-(3-氣苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2-甲基丙基}-1，3-11 惡嗤咬-2-酮（3)

步驟A ί

於室溫下向4-1胺（1當量；以類似於實例1及3之方式製 127871.doc -69- 200836722 得）於二氣甲烷中之溶液中添加光氣溶液（1 · 1當量），隨後添加三乙胺（20當量）。將反應於30°C下加熱直至觀察到完全結晶為止。將反應用水洗滌並分離有機層，乾燥，濃縮並在矽膠上利用0-100%EtOAc/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物4-2。

步驟B 於室溫下向鄰苯二甲醯胺4-2 (1當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於60°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過滤並ί辰縮。措由逆相HPLC純化所得油，以提供期望化合物3 ; ΜΗ+ 439.2。實例5 (5S)_5-(胺基甲基）-3-[(lR)-l-(l•苄基_4_苯基-in-味唾-2. 基）·2,2-二甲基丙基]-1，3-噁嗪-2-酮（4)及（5R)-5-(胺基甲基）-3-[(lR)-l_(l_节基-4-苯基-1H_咪唑-2-基）-2,2·二甲基丙基]-1，3-嗔嗪(5)

127871.doc -70- 200836722 於至溫下向胺i-5及醛5-1 (11當量）於二氯甲烷中之溶液中分多次添加三乙醯氧基硼氫化鈉（5當量）。將反應攪拌12 小時並用水驟冷。將有機層分離，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。將所得殘餘物在矽膠上利用〇_1〇〇%Et〇Ac/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物5-2。

步驟B

於室溫下向胺5-2 (1當量）於二氯甲烧中之溶液中添加光氣溶液（1.1當量），隨後添加三乙胺（2〇當量）。將反應於 30 C下加熱直至觀察到完全結日日日為止。將反應用水洗務並为離有機層，乾燥，濃縮並在矽膠上利用〇_1〇〇%扮〇八以己烷梯度溶析來純化，以提供化合物5-3。

步驟C

127871.doc 200836722 向醇5_3 (1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的 PPh (2當量）並隨後於室溫下攪拌1〇分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二甲醯胺（2當量）及DIAD (2當量）。將反應於 40°C下加熱30分鐘且冷卻後用Et0Ac稀釋，借助矽藻土塞過濾’濃縮並藉由逆相HPLC純化以提供化合物5-4。

步驟D

於室溫下向鄰苯二甲醯胺5_4 (1當量）於玢〇11中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於60°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。藉由逆相HPLC純化所得油，以提供期望化合物4及5 ; MH+43 3.2。實例6 (6S)-6-(胺基甲苄基-4-苯基-1H-咪唑-2. 基）-2,2-二曱基丙基]嗎啉酮（6)及（6R)-6-(胺基甲基卜4-[(lR)-l-(l-苄基-4_苯基·1H·咪唑小基）_2,2·二甲基丙基】嗎琳-3-嗣（7)

U 127871.doc 72- 200836722 於室溫下向胺6-1 (1當量）於二氣甲烷中之溶液中添加環氧化物6·2 (1當量），隨後添加Yb(OTf)3 (1當量）。將反應於40 C下加熱14小時。反應完成後，添加EtOAc，隨後用水（2x)洗滌。將有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用〇-1〇〇°/。EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物6-3。

步驟B

於〇°C下向胺6-3(1當量）於二氣甲烷中之溶液中添加三乙胺（3當量）隨後添加氯乙醯氣（1·5當量）。將反應於室溫下攪拌直至元成為止，隨之將溶液用水驟冷，隨後用二氣甲烧萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在石夕膠上利用〇-l〇〇%EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供中間體醯胺化合物。向該醯胺之DMF溶液中添加csc〇3 (1當量）及TBAI(催化量）。將反應於50°c下加熱5小時且完成後藉由添加碳酸氫鈉（飽和水溶液）驟冷，隨後用Et0Ac (3x)萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用〇-1 〇〇% EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物6·4。 127871.doc -73- 200836722 步驟c 於室溫下向鄰苯二甲醯胺6-4 (1當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於60°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過滤·並農縮。藉由逆相HPLC純化所得油，以提供期望化合物6及7 ; MH+43 3.2。實例7 (6R)-6-(胺基曱基）_4-{(lR)-l-[l-苄基-4-(3-氣苯基）-lH-咪唑-2-基]-2-甲基丙基}嗎啉_3_酮⑻及（6S)-6-(胺基甲基）_ 4-{(lR)_l_[l-苄基_4-(3·氣苯基）-1Η-咪唑_2_基卜2-甲基丙基}嗎啉-3·酮（9)

化合物8及9係以類似於實例6之方式來製備，mh+ 453.2 〇實例8 (6RM令胺基乙基）义[(1R)-WU基-4·笨基巧㈣嗤_2-基）-2,2-二甲基丙基】嗎琳·3-酮⑽及（6S)i(2-胺基乙基）-4-[(lR)-：U(l·节基笨基·1H_味唑1基上二甲基丙基】嗎啉-3-酮（11) 127871.doc -74- 200836722

化合物10及11係以類似於實例6之方式來製備；MH+ 447.3 〇 '

(6S)-6-(2-胺基乙基）_4_{(1R)小(1节基_4卜氣苯基）_ 1H-咪唑-2-基】-2-甲基丙基}嗎啉_3,⑽及叫乙基）-4-{(1R)小U-m(3_氣苯基）_1H_咪仏基】·2甲基丙基}嗎琳-3-_(13)

化合物12及13係以類似於 467.2 〇

實例6之方式來製備；ΜΗ+

Ά 1U (2S，6R)_6_(胺基甲基^.((叫小口爾节 1H-咪唑_2·基卜2,2_二甲基丙篡、, _氟本基卜基}_2·曱基嗎啉_3-酮（14)及 (2IMRHH胺基甲基）_4·{叫Wm_4_(3氟苯基)川基】_2’2·二甲基丙基卜2-甲基嗎啉-3姆5) 127871.doc •75- 200836722

步驟A

10·3 於室溫下向胺10-1及表氯醇10-2於二氣甲焓由— 机τ况中之溶液中添加Yb(OTf)3 〇將反應於45°C下加熱直至完全消耗掉起始材料為止。將反應濃縮並將所得殘餘物在秒膠上利用〇 100% EtOAc/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物3

步驟B

於f溫下向胺10_3 (1當量）於Me0H中之溶液中添加NaN (4當量）。將反應攪拌3天並濃縮以獲得1〇·4，其未經進一步純化即用於下一步驟。 127871.doc -76· 200836722 步驟c

一於=下向粗胺ΠΜ (1當量）於二氯甲烧中之溶液中添加一乙胺（5當幻’隨後添加2_氯丙醯氯（2·5當量）。將反應於至下攪拌直至完成為止，隨之將溶液用水驟冷，隨後用二氯甲烷萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在料上利用〇·刚％ Et〇Ae/己烧梯度溶析純化以提供化合物1 〇-5。

步驟D

向醇10-5於DMF中之溶液中添加csC03(l當量）及TBAI (催化量）。將反應於50°C下加熱5小時且完成後藉由添加碳酸氫鈉（飽和水溶液）驟冷，隨後用EtOAc(3x)萃取。將合倂的有機物經疏酸納乾燥，過遽並濃縮。將粗產物在石夕膠上利用0-100% EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物ιο ί 2787 l.doc -77· 200836722

步驟E

於室溫下向疊氮化物10_6於THF/H z T之溶液中添加二苯絲。將反應於40t下加熱14小時，隨之添加tfa (1〇：當量），並將反應於40它下再加熱1小時，然後於8(TC下1 小時。然後將反應冷卻至室溫並用U0H於乙腈/水中之溶 • 液處理。使此反應經受超音波10分鐘且然後借助矽藻土墊過濾。將濾液濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得期望產物〇 14及 15 ; MH+465.3 ° 實例11a (5R)-5-(胺基甲基）_l_[(iR)-i-(i_苄基-4_苯基-1H_咪唑 _ 2-基）-2,2-二曱基丙基】哌嗪_2,3-二嗣（16)

步驟A

11-1 11-2 127871-doc -78 200836722 於室溫下向胺11-1(如實例丨3中所製得）於二氯甲烷中之溶液中添加三乙胺（5當量），隨後於室溫下添加草醯氣（2·5 當量）。將反應於室溫下攪拌直至觀察到起始材料完全消耗掉為止。之後，反應用水洗滌並將有機層分離，乾燥並濃縮。然後將所得粗物質用50〇/。於二氯甲烷中之TFA處理並於4(TC下加熱直至完全環化。然後將反應濃縮並將粗製油溶於THF中並用TBAF(2.5當量；1M於THF中）處理。反應於40 C下加熱，完成去保護後進行濃縮並藉由逆相 HPLC純化以獲得11-2。

步驟B及C

向醇11-2 (1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的pph3 (2當量）且隨後於室溫下授拌1 〇分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二曱醯胺（2當量）及DIAD(2當量）。將反應於4〇°C下加熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化。然後於室溫下將肼（25當量）添加於鄰苯二甲醯胺（1當量）之EtOH溶液中。將反應於60 °c下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。將所得油藉由逆相HPLC來純化以提供16 ; MH+446.2。 127871.doc -79- 200836722 實例lib (5S)-5-(胺基甲基）·1-[(1Κ)-ΐ_(ΐ-苄基_4_苯基-1H_咪唑 _2 基）-2,2-一甲基丙基]娘嗓-2,3-二嗣（17)

NH, 〇以類似於實例1 la之方式製備， m 但係自Boc-D-絲胺酸甲酯開始；MH+446.2。實例12 ㈣-5-(胺基甲基）小[(1R)小(1_节基_4苯基m味唾 2-基）_2,2·二甲基丙基M_甲基料_2,3·二嗣⑽

〇 127871.doc

於室溫下向CsC〇3(3當量)於二氧雜環己烧中之懸浮液中 -80- 200836722 添加醯胺12-1(如實例11中所製備），並將反應攪拌1〇分鐘。然後添加碘曱烷，隨後攪拌i小時。用水使反應驟冷並將有機物分離，經N^SO4乾燥並濃縮。將粗產物在碎膠上利用0-100% EtOAc/己烧梯度溶析純化以提供化合物

步驟B

將醇12-2溶於THF中並用TBAF(2,5當量1M於THF中）處理。將反應於40°C下加熱且去保護完成後濃縮並藉由逆相 HPLC純化以獲得12-3。

步驟C及D

向醇i2_3(1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的m3 (2當量）並隨後於室溫下授拌10分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二甲醢胺（2當量）及01八0(2當量卜將反應於4〇χ：下加 127871.doc -81 - 200836722 熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化。於室溫下向鄰苯二甲醯胺（1當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於6(TC下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。藉由逆相 HPLC純化所得油，以提供期望化合物18 ; MH+460.3。實例13 (2S)_4-[(1R)-1-(1_ 苄基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2_二甲基丙基]-2-(羥基甲基）-1，4-二氮雜環庚-5-酮（19)

0 〇Η 0 OTBS MeO^V 一^ MeO^V NHBOC NHBOC ί 13-1 13-2 向醇13-1 (1當量）於DMF中之溶液中添加三乙胺（3當量）、DMAP (0.2當量）及TBDMSC1(2.2當量）。將反應於室溫下攪拌5小時且完成後藉由添加碳酸氫鈉（飽和水溶液）驟冷，隨後用EtOAc(3x)萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過滤並濃縮。將粗產物在矽膠上利用0-1 〇〇% EtOAc/ 己烷梯度溶析純化以提供化合物13-2。 127871.doc -82- 200836722

步驟B 0 OTBS 〇Η ?tbs

MeO^^ -► ^

NHBOC NHBOC 13-2 13-3 於0°C下向BOC-L-絲胺酸甲酯13-2於甲苯中之溶液中添加DIBAL-H(3當量2.5 Μ於甲苯中）。將反應升溫至室溫並攪拌直至觀察到完全轉化為止。此後，將反應用甲醇處理並濃縮。向此殘餘物中添加2 Μ酒石酸钟納溶液（飽和水溶液）並劇烈攪拌30分鐘。使所得殘餘物在EtOAc與水之間分配，分離層並將水層用EtOAc萃取3次。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用0-100% EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物13-3。

步驟C

Ο OTBS

hV

NHBOC

OH OTBS V

NHBOC 13-3 13-4 於-78 °C下向草醯氣（1.4當量）於無水二氯甲烷中之溶液中添加DMSO (2.2當量），隨後攪拌10分鐘。然後逐滴引入醇13-3(1當量）於二氯甲烷中之溶液並使其反應5分鐘。然後緩慢引入三乙胺（5當量）且當添加完成後，將反應於-78 °C下攪拌1〇分鐘，隨後於室溫下30分鐘。完全轉化後，將反應用EtOAc稀釋並用碳酸氫鈉（飽和水溶液）洗滌3次。將有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利 127871.doc •83- 200836722 用0-100% EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物13-4。

步驟D

於室溫下向醛13-4及胺1-5(1.1當量）於二氯曱烷中之溶液中分批添加三乙醯氧基硼氫化鈉（5當量）。將反應攪拌12 小時並用水驟冷。將有機層分離，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。將所得殘餘物在矽膠上利用0-100% EtOAc/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物13-5。

步驟E 於室溫下向胺13-5於二氯曱烷中之溶液中添加三乙胺 (5當量），隨後於室温下添加丙烯醯氯（3.3當量）。將反應於室溫下攪拌直至觀察到起始材料完全消耗掉為止。此後，將反應用水洗滌並將有機層分離，乾燥並濃縮。然後將所得粗物質用50%於二氣甲烷中之TFA處理並於40 °C下加熱所需時間以實施環化。此後，將反應濃縮並將粗製油溶於THF並用TBAF(2.5當量1M於THF中）處理。將反應於 40°C下加熱且去保護完成後濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得 19 ; MH+447.3 ° 實例14 (2R)_2-(胺基曱基）-4-[(lR)_l-(l•苄基-4-苯基-1H_ 咪唑- 127871.doc • 84 - 200836722

於(TC下向胺14-1(如實例13中所製備）於Me〇H中之溶液中添加BOC酸肝（1.2當量），隨後添加三乙胺（3當量）。將反應於室溫下授拌直至觀察到起始材料完全消耗掉為止。將 C；纟缝縮並將所得殘餘物在韓上利用G-HH)%EtOAc/己院梯度溶析來純化，以提供化合物14-2。

步驟B 127871.doc

向醇14_2(1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的pph3 -85- 200836722 (2 ^里）且後於至溫下擾拌1 〇分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二甲醯胺（2當量）及DIAD(2當量）。將反應於40。(：下加熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化。於室溫下向鄰苯二甲醯胺〇當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於6〇°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。將所得油溶於 20%於二氯甲烷中之TFA中並於40°C下加熱直至去保護完成為止。然後將反應濃縮並藉由逆相HPLC純化以提供 20 ; MH+446.3 ° 實例15 (2R)-2_(胺基甲基）-4-[(lR)-l_(l-苄基-4·苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基】-1-(甲基續酿基）_1，4-二氮雜環庚_5_ 酮（21)

〇

步驟A

15-1 15·2 127871.doc -86- 200836722 於0°c下向胺15-1(1當量）（如實例丨3中表備）於二氯曱烷中之溶液中添加三乙胺（5當量），隨诒决丄、、、田里）炚後添加甲烷磺醯氯 (2.5虽罝）。將反應於室溫下攪拌直至完取馬止，隨之將溶液用水驟冷，隨後用二氯甲烷萃取。將人將口倂的有機物經硫酸納乾燥，過濾並ί辰縮。將粗產物在夕 % /膠上利用0-100%

EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物j 5_2。

步驟B

15-3 將磺醯胺;15-2溶於THF中並用TBAF(2 5當量11；4於thf 〇中）處理。將反應於40〇C下加熱且去保護完成後濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得15-3。

步驟C

15-4 向醇15-3(1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的PPh3 (2 ‘里）且後於至’皿下擾拌1 Q分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二曱醯胺（2當量）及DIAD(2當量將反應於4〇〇c下加 127871.doc -87- 200836722 熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得15_4。

步驟D 於室溫下向鄰苯二甲醯胺15·4(1當量）於Et〇H中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於6〇°C下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。將所得油藉由逆相HPLc來純化以供 21，Μ Η+5 2 4 · 3 〇實例16 (2S)-2·(胺基甲基）-4_[(1R)-]U(le_苄基 _4_苯基 _1Η_咪唑-2-基>2,2-二甲基丙基卜1，4·氧氮雜環庚-5·酮（22)及（2R)_2_ (胺基甲基）-4_[(lR)-l-(l-苄基_4·苯基-m-咪唑-2_基）-2,2-二甲基丙基]-1，4-氧氮雜環庚-5-酮（23)

於至溫下向16-1胺及駿16_2(11當量）於二氣甲烷中之溶 127871.doc •88- 200836722 液中分批添加三乙醯氧基硼氫化鈉（5當量）。將反應攪拌12 小時並用水驟冷。將有機層分離，經硫酸鎂乾燥，過濾並激縮。將所得殘餘物在矽膠上利用〇」〇〇% EtOAc/己烷梯度溶析來純化，以提供化合物16-3。

步驟B

16-2

於〇°C下向胺16_2(1當量）於二氯甲烷中之溶液中添加三乙胺（5當量）’隨後添加丙烯醯氣（2 5當量）。將反應於室溫下擾掉直至完成為止，隨之將溶液用水驟冷，隨後用二氯甲烧萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃 1；縮。將粗產物在矽膠上利用〇_1〇〇% Et〇Ac/己烷梯度溶析純化以提供化合物16_3。

步驟C

127871.doc -89· 200836722 於室溫下向酿胺16-3於THF中之溶液中添加三氟乙酸汞 (Π)(1當量）並將反應攪拌1小時。此後，將反應冷卻至

並用 2N NaOH(2 當量）、隨後 NaBH4(0.6 當量〇·5 2N

NaOH中）處理。將反應攪拌直至觀察到完全轉化為止且然後用EtOAc稀釋並用水洗滌。將有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗物質藉由逆相HPLC純化以提供16_4。

步驟D

於室溫下向醯胺16-4於EtOH中之溶液中添加Pd/C(0.5當量）。使氫氣鼓泡穿過混合物10分鐘並將反應於H2氣氛下擾拌3小時。此後，將反應借助矽藻土墊過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得22及23 ; MH+447.3。實例17 (2,2-二甲基-[1，3]二氧雜環己-5-基）·甲醇

將三醇17-1(1當量）以大約0·5 Μ之濃度溶於DMF中並添 127871.doc -90- 200836722 加2,2 - 一甲氧基丙烧（1·16當量）及對-曱苯石黃酸單水合物 (0.03當量）。將溶液攪拌1天或數天，並用τεα(〇·5當量）驟冷。在真空中去除盡可能多的溶劑並藉由在真空下蒸餾來純化17-2。實例18 2,2_二甲基-1，3-二氧雜環己烧_5_甲搭

18-1 18-2 在A氣氛下，將草醯氣〇·4當量）溶於dcm中，然後冷卻至-78°C。逐滴添加DMS0 (2·2當量）。將此溶液攪拌約1〇分鐘，然後將18-1(1當量）溶於更多dcM中以使總濃度為〇·2 Μ。反應5分鐘後，添加ΤΕΑ(5當量）。於_78。〇下將此混合物攪拌10分鐘，然後於室溫下再攪拌1〇分鐘。藉由 TLC使用1:1比例的己烷：乙酸乙酯作為顯影溶劑且利用 CAM斑點肉眼觀察結果來最好地監測此反應。使用含以^ 之反應混合物而不經進一步處理。實例19 (6S)-6-(胺基甲基）-4-[(1κ)_1-(1-苄基4苯基1H咪唑2 基）_2,2-二甲基丙基]-M·氧氮雜環庚-3-酮（24)及（6R)-6_ (胺基甲基苄基·‘苯基_1H-咪唑-2-基）_2,2_ 一曱基丙基]·1，4·氧氮雜環庚-3-酮（25) 127871.doc -91 - 200836722

(R)_6-(胺基甲基）-4-((10-1-(1 苄基-3-苯基·1Η-1，2,4-三唑-5-基）-2,2-二甲基丙基）-1，4-氧氮雜環庚酮步驟A :還原胺化

19-1

將胺19-1(1當量）溶於DCM中並添加於醛18-2中以使總濃度介於0.1-0.1 5 Μ之間。5分鐘後，將反應冷卻至0°C並添

加Na(OAc)3BH(1.5當量）及冰乙酸（1當量）。藉由LCMS監測反應是否完成。將反應用乙酸乙酯稀釋，然後用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌3次。最後，將產物用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空中去除溶劑。步驟B :乙醯化

19-3 127871.doc -92· 200836722 將胺19-2溶於DCM中以製得〇2 並冷心代。| ，添加TEA(5當量）並擾袢5分鐘。逐滴添加氯乙酿氯㈣ S )。將反應用乙酸乙醋稀釋，用飽和碳酸氯納水溶液洗務3次，經無水硫酸納乾燥，過遽並在真空中濃縮。藉由 : 層析使用約〇_7〇%於己炫中之乙酸乙醋梯度來純化產物19- 3 〇步驟C:二醇去保護

將氣化物19-3溶於乙腈中並冷卻至〇。逐滴添加3N HC1並藉由LCMS監測該反應，同時進一步添加HCi直至去保護完成為止。將溶液在真空中濃縮，用乙酸乙酯稀釋，並用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌3次。最後，將產物19-4經無水硫酸納乾燥，過濾並在真空中去除溶劑。步驟D :環化

將去保護的醇19-4溶於DMF中以製得0.1 Μ溶液。添加J 127871.doc -93- 200836722 當量Cs2C〇3及催化量的ΤΒΑΙ(四丁基碘化銨）。將反應於約 40-55°C下加熱4-6小時。完成後，將反應在真空中濃縮，用EtOAc稀釋並用飽和碳酸氫鹽洗滌。將EtOAc層在真空中濃縮並藉由層析使用約0-75%於己烷中之乙酸乙酯梯度純化，獲得19-5。

步驟E:醛形成外消旋醇

在A氣體下，將草醯氯（1·4當量）溶於DCM中並然後冷卻至-78°C下。逐滴添加DMSO(2.2當量）。將此溶液攪拌約10 分鐘’然後將醇19-5(1當量）溶於更多DCM中以使總濃度為 0.2 Μ。反應5分鐘後，添加ΤΕΑ(5當量）。將此混合物於-78°C下擾拌1〇分鐘，然後於室溫下10分鐘。將反應用乙酸乙i旨稀釋’然後用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌3次。最後，將產物19_6經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空中去除溶劑。

步驟F

：轉化成（R)及（S)醇

19-7a 19-7b 127871.doc -94- 200836722 將醛19-6溶於曱醇中以形成〇·2 M溶液並冷卻至〇它。添加硼氫化鈉（1.5當量），並將反應保持5_1〇分鐘。將溶液在真空中/辰縮，用EtOAc稀釋並用飽和碳酸氫鹽洗滌。將 EtOAc層在真空中濃縮並藉由層析純化。在此步驟中，藉由逆相HPLC分離該醇之兩種非對映異構體。步驟G:轉化成胺

向溶於T H F中之各經拆分醇非對映異構體中添加5當量樹脂結合的PPL、5當量鄰苯二甲醯亞胺及5當量DIAD。將反應於約5 5 °C下加熱3 0分鐘。完全轉化成鄰苯二甲醯亞胺基衍生物後’將反應用EOAc稀釋，借助;^藻土過淚，並用飽和NaHCCh洗滌。將EtOAc層經無水Na2S04乾燥並在真空中濃縮’並耩由HPLC純化。使經純化鄰苯二甲醯亞胺基衍生物與於甲醇（用作溶劑）中之2M MeNH2 —起於 60°C下經受最後去保護步驟約1小時。藉由逆相HPLC純化粗產物；MH+447.3。實例20 (6R)-6-(胺基甲基）-4_{(lR)_l-[l-(3,5_二氟苄基）冰(3-氟苯基）-1Η-咪唑-2-基】-2,2·二甲基丙基卜ι，4-氧氮雜環庚 127871.doc -95- 200836722 酮（26) 化合物26係以類似於實，之方式製備；mh+训2。實例21 (6RHK胺基甲节基氟苯基）ιη· 紗2-基】-2’2-二甲基丙基η斗氧氣雜環庚_3酮⑼ 化合物27係以類似於實例19之方式製備；ΜΗ+465.3。實例22

t； (6R)_M胺基甲基）-4-((^ + 1(3^)-4-(3-氟苯基）-1Η-味嗤-2-基】_2,2_二甲基丙基卜1>4氧氮雜環庚_3_嗣 (28)及（叫6·(胺基f基）邻氣苯基)-1Η-咪唑-2-基】_2,2•二甲基丙基}_M_氧氮雜環庚_3_ 酮（29) 化合物28及29係以類似於實例19之方式製備；MH+ 483.2。實例23 (6S)_6-(胺基甲基）-1-Κ1κνΐ-(1_苄基_4_笨基_ih咪唑基卜2,2-二甲基丙基】-1，4-二氮雜環庚烷-2,3-二酮（3〇)

127871.doc -96- 200836722

步驟A

23-1 於0°c下向胺19-2(1當量）於二氣胃、虱T烷中之溶液中添加三 Ο 乙胺（5當S)，隨後添加2_氯·2_ 礼代乙酸曱酯（2.5當量）。將反應於室溫下攪拌直至完成Λ 几战為止’隨之將溶液用水驟冷’隨後用一氣甲燒萃取。將人你丄平取將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥’㈣並濃縮。將粗產物切膠上利嶋⑽Ac/ 己烷梯度溶析純化以提供化合物23-1。

步驟B

23*1 23-2 於〇°C下向醯胺23-1於乙腈（1當量）中之溶液中逐滴添加 HC1 (3N水溶液）（15當量）。將反應於室溫下攪拌且完全轉化後，將反應用EtOAc稀釋並用碳酸氫鈉（飽和水溶液）洗滌3次。將有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用〇-1 〇〇〇/〇 EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供所 127871.doc •97- 200836722 得二醇，其然後經純化，懸浮於DMF中並用CsC03(l當量）及TBAI(催化量）處理。將反應於50°C下加熱5小時且完成後藉由添加碳酸氫納（飽和水溶液）驟冷，隨後用EtOAc(3x) 萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用0-100% EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物23-2。

步驟C

23-2

向醇23-2(1當量）於THF中之溶液中添加樹脂結合的PPh3 (2當量）且隨後於室溫下攪拌10分鐘。然後向此反應中添加 N-BOC膦酸酯（2當量）及DIAD(2當量）。將反應於40°C下加熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化以獲得23-3。

步驟D

23-4 將醯胺23-3於20%於苯中之HC1溶液於室溫下攪拌。完 127871.doc -98- 200836722 全轉化後’將反應用EtOAc稀釋並用水洗務。將有機物㉛硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗產物在矽膠上利用〇_1〇〇0/。 EtOAc/己烷梯度溶析純化以提供化合物23-4。

步驟E

ϋ 向醇23-4(1¾里）於THF中之溶液中添加樹脂結合的ρρ^ (2當量）並隨後於室溫下攪拌1 〇分鐘。然後向此反應中添加鄰苯二甲醯胺（2當量）及DlAD(2當量）。將反應於糾它下加熱30分鐘且冷卻後用EtOAc稀釋，借助矽藻土塞過濾，濃縮並藉由逆相HPLC純化。於室溫下向所得鄰苯二甲醯胺 (1當量）於EtOH中之溶液中添加肼（25當量）。將反應於6〇。〇下加熱。完成後，將冷卻的反應過濾並濃縮。將所得油藉由逆相HPLC來純化以提供30 ; MH+460.3。實例24 (6R)-1-[(1R)-1-(1-苄基苯基-1H-咪唑 _2_ 基）-2,2-二甲基丙基】-6-氟-1,4-二氮雜環庚-2·酮（31)及（32)

127871.doc •99 200836722

步驟A

於〇°c下向胺25-6(如實例25中所製備）於二氣甲燒中之溶液中添加三乙胺（5當量），隨後添加氯乙醯氣（2.5當量）。將反應於至酿下攪拌直至完成為止，隨之將溶液用水驟 ^ ’隨後用m萃取。將合倂的有機物經硫酸納乾蚝過濾並/辰縮。將粗產物在矽膠上利用〇_1〇〇% Et〇Ac/ 己烷梯度溶析純化以提供氯化物24_2。

步驟B

向氯化物24-2(1當量）於DMS0中之溶液中添加四唑（丨❹當量）及NaOH(10當量）。將反應於室溫下攪拌16小時，隨之將溶液用水驟冷，隨後㈣Ae萃取。將合倂的有機物經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。然後將粗物質用5〇%於二氯甲烷中之TFA處理，且完成後濃縮並藉由逆相HpLc純化以提供期望化合物32 ; MH+435.2。 127871.doc -100- 200836722 以類似方式自24-1的另一氟-側鏈非對映異構體開始製備另一非對映異構體31 ; MH+435.2。實例25 (s)-3-((R)-l-(l-苄基·4-苯基-1H-咪唾 _2_基）_2,2_二甲基丙基胺基）-2_氟丙基胺基甲酸第三丁基酯之合成步驟E:還原胺化

1-5

25-1 將來自實例1步驟D之苯基咪唑1-5(1當量，2.0克）與於30 毫升二氯甲烷中之醛（1·3當量，i·%*)及三乙醯氧基硼氫化鈉（2當量’ 2.65克）組合。隨後添加乙酸（2當量，〇·72毫升）並在氮氣氛下將反應於室溫下攪拌過夜。將反應用

水、飽和碳酸氫鈉然後飽和氯化鈉處理。將有機層用琉酸鎂乾煉’過濾並濃縮。將材料在管柱上純化並獲得2·丨5克白色固體狀所得產物25-1。實例26 (R)-5-(胺基甲基苄基兴2,5-二氟苯基）_ 1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基）噁唑啶酮及 (S)-5-(胺基甲基苄基 _4_(2,5_二氟苯基）_ 1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基）噁唑啶_2•酮之合成

HO

NHCbz

TBDMSO

HO QTBDMS N/NHCbz OTBDMS v^k/NHCbz 127871.doc -101 - 200836722 Ο 於室溫下向2,3-二羥基丙基胺基甲酸苄基酯於DMF中之溶液（〇·1 M)中添加TBDMSC1(2.2當量）及咪唑（2.5當量）。授拌20小時後，將反應混合物用EtOAc處理，其用水及鹽水洗滌。將有機層分離，乾燥並濃縮以獲得粗雙曱矽烷基化產物，將該產物溶於甲醇中（0.16 M)，隨後於〇°C下添加對-甲苯磺酸（〇· 1當量）。將反應混合物於相同溫度下攪拌 1.5小時。用飽和NaHC03水溶液驟冷後，將反應混合物用 EtOAc萃取，其用水及鹽水洗滌。將有機層分離，乾燥，漢縮並在矽膠上利用〇-l〇〇%EtOAc/己院梯度溶析來純化，獲得純淨2-(第三丁基二甲基甲矽烷基氧基）_3_羥基丙基胺基甲酸节基酉旨。 H0 ?TBDMS ,NHCbz

?TBDMS <NHCbz

於〇°C下向2-(第三丁基二甲基甲矽烷基氧基）_3_羥基丙基胺基甲酸苄基酯（1·〇當量）於二氯曱烷（0.1 M)中之溶液中添加吡啶（5.0 當量）及 Dess_Martin Periodinane®(1.5當量）。將反應混合物攪拌3小時並用5% NaHC〇3水溶液及1〇 m

Na2S203水溶液驟》°攪拌1小時1 ’將有機層分離，用水及鹽水洗滌，乾燥並濃縮。於室溫下將粗製醛添加於（r)_ 1-(1-苄基-4-(2,5_二氟苯基）-1H_咪唑_2_基）_2,2_二甲基丙_ 127871.doc -102- 200836722 1-胺（1.2當量）（根據先前所報道之程序製備）於二氯甲烷中含有一滴乙酸之溶液（0·2 M)中。攪拌〇·5小時後，於0°C下將三乙醯氧基硼氫化鈉（15當量）添加於反應混合物中，隨後於室溫下加熱1小時。用飽和NaHC03水溶液驟冷後，將反應混合物用EtOAc處理，其用水及鹽水洗滌。分離有機層’乾燥並濃縮。在矽膠上利用20% EtOAc/己烷溶析來分離粗非對映異構體混合物以提供純淨非對映異構體，亦即 (S)-3-((R)-l-(l·苄基-4-(2,5-二氟苯基）-1Η·咪唑-2-基）-2,2·

二甲基丙基胺基）-2-(第三丁基二甲基甲矽烷基氧基）丙基胺基甲酸苄基酯及（R)-3-((R)-l-(l-苄基_4-(2,5-二氟苯基> 1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基胺基）-2-(第三丁基二甲基甲石夕烧基氧基）丙基胺基甲酸苄基酯，其中在連接至氧原子之碳處的立體化學係任意指定（在TLC上（足7?)非對映異構體較（足*S)異構體具有更多極性）。

於室溫下向適當經TBDMS保護化合物（1_〇當量）於THF中 127871.doc -103- 200836722 之溶液（0.1 Μ)中添加TBAF(5當量）。將反應混合物攪拌20 小時，用飽和NH4C1水溶液驟冷後，將反應混合物用 EtOAc處理，其用水及鹽水洗滌。分離有機層，乾燥並濃縮。在矽膠上利用30_50% EtOAc/己烷梯度溶析來純化粗產物以提供純淨醇（（S)-3-((R)-1-(1-苄基-4-(2,5-二氟苯基）-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基胺基）-2-羥基丙基胺基甲酸苄基酯及（R)-3-((R)-l-(l-苄基_4-(2,5-二氟苯基）-1Η·咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基胺基）-2-羥基丙基胺基曱酸苄基酯）。

於室溫下向適宜醇（1·〇當量）於二氯甲烷中之溶液（〇·3 M) 中相繼添加三光氣（1·5當量）及三乙胺（2·5當量）。攪拌1小時後’將反應混合物用飽和NaHC〇3水溶液驟冷並用二氯甲烷處理。分離有機層，乾燥並濃縮。將粗產物溶於乙腈 (〇·1 M)中，隨後添加碘三曱基矽烷（1〇當量）。攪拌丨小時後，將反應混合物用Nad2。3水溶液驟冷並用£1〇^處理。將所得油藉由逆相HPLC來純分離有機層，乾燥並濃縮。將所得油藉化並凍乾以作為TFA鹽提供期望化合物。 127871.doc -104- 200836722 (R) -5-(胺基甲基）-3_((R)-l-(l-苄基-4-(2,5·二氟苯基）-1H-咪唑-2·基）-2,2-二甲基丙基）噁唑啶-2-酮，LCMS 〇/z) : 455·2(ΜΗ+) ; LC Rt=3.66分鐘 (S) -5-(胺基曱基）-3-((R)-l-(l-苄基-4-(2,5-二氟苯基）-1Η-口米嗤-2-基）_2,2_二甲基丙基）0惡σ坐咬-2-嗣，LCMS(m/z): 455.1(MH+) ; LC Rt=3.68分鐘實例27 測定KSP活性之分析 () 此實例提供測定KSP活體外活性之代表性活體外分析。自牛腦獲得之經純化微管係自Cytoskeleton公司（Denver， Colorado，USA)購得。將人類KSP之馬達結構域（Eg 5, KNSL1)經選殖，表現並純化至大於95%純合度。Biomol Green 係購自 Affinity Research Products 公司（Matford Court，Exeter，Devon，United Kingdom)。及微管將 KSP 馬達蛋白（亦即，KSP馬達結構域）稀釋於分析緩衝液（20 mM Tris-HCl (pH 7.5)、1 mM MgCl2、10 mM DTT及 0.25 毫克 / L) 毫升BSA)至最終濃度為35微克/毫升微管及45 nM KSP。然後將微管/KSP混合物於37°C下預培育10分鐘以促使KSP結 : 合至微管。 . 向含1.25微升抑制劑或於DMSO中之測試化合物（或在對照情況下僅DMSO)之測試板（384-孔板）各孔中添加25微升 ATP溶液（將ATP在分析緩衝液中稀釋至濃度為300 μΜ)及 25微升上述微管/KSP溶液。將該等板於室溫下培育1小時。培育後，向各孔中添加65微升Biomol Green( —種檢測 127871.doc -105- 200836722 無機碌酸鹽釋放的基於孔雀綠之染料）。將該等板再培育5-10分鐘，然後使用Victor π板讀取器測定63〇奈米下之吸收。於630奈米下之吸收量對應於樣品中KSp活性之量。然後根據在各濃度下在63〇奈米下吸收之降低經由非線性口歸使用用於Excel之XLFit或GraphPad Software公司之 Prism資料分析軟體測定各抑制劑或測試化合物之IC5〇。在此實例所闡述之分析中，較佳本發明化合物具有生物活性，如由小於約i π”所量測，其中較佳實施例具有小於約25 μΜ之生物活性，其中尤其較佳實施例具有小於約1000 nlV[之生物活性，且其中最佳實施例具有小於約 100 nM之生物活性。實例28 在用KSP抑制劑治療之瘤細胞系中細胞增殖之抑制將細胞以約500個細胞/96-孔板之孔的密度鋪於96-孔板中並使其生長24小時。然後將細胞用不同濃度的化合物處理 72 小時。然後，添加 100微升 CellTiter Glo。CellTiter Glo係基於四唑鑌之分析，其使用試劑3-(4,5-二甲基噻唑-2_基）5-(3-羧基甲氧基苯基）-2_(4·磺苯基）-2H-四唑鏽（MTS) (美國專利第5，185,450號）（參見Promega產品目錄編號 G3580，CellTiter 96 Aqueous單溶液細胞增瘦分析）。然後將該等細胞於黑暗中培育30分鐘。使用Walloc Trilux板讀取器測定各孔之發光量，將發光量與每一孔細胞之數目相關聯。該等孔中僅接受DMSO(0.5%)之活細胞數目作為0% 抑制的指示，而沒有細胞的孔作為細胞生長的1 〇〇%抑 127871.doc -106- 200836722 制。以圖表方式根據對數-轉換的劑量值對在72小時持續化合物曝露下細胞計數（％對照）之S形劑量-反應曲線測定導致50%生長抑制之化合物濃度（GI50)。所用細胞系列示於以下。如上所述實施細胞增殖分析。癌症細胞系 : Colo 205-結腸癌 RPMI 1640+10%FBS+1% L-穀胺酸 +1% P/S + l%NaPyr. + Hepes C +4.5克/升葡萄糖+ 1 %碳酸氫鈉 MDA 435·乳癌-高 met EMEM+10%FBS + 1%P/S + 1% L-穀胺酸 +1%NEAA + l%NaPyr+l%維生素 11(：丁-15及11(：丁116-結腸癌 RPMI 1640+10°/〇FBS+1% L-榖胺酸+ 1%P/S 耐藥細胞系 KB3.1-結腸表皮癌；母細胞系

Iscove’s +10%FBS + 1% L-縠胺酸+ 1%P/S KBVl-p-糖蛋白相關多耐藥細胞系〇 RPMI 1640+10%FBS+1% L-穀胺酸+ l%P/S + 0.2微克 /毫升長春驗 KB8 5-p-糖蛋白相關多耐藥細胞系 DMEM+10%FBS+1% L-穀胺酸 +1 %P/S+10 毫微克 / 毫升秋水仙驗 ^ 在所述分析方案中，較佳本發明化合物具有生物活性，如由GI5〇小於約1 mM所量測，其中一些實施例具有小於約 25 μΜ之生物活性，其中其他實施例具有小於約1000 nM 之生物活性，且再其他實施例具有小於約1〇〇 nM之GI50。 127871.doc -107- 200836722 表2展示表1中所列示所選化合物根據實例27及28中闡述之分析所量測之活性。’’ +π表明該化合物在所示分析中具有大於1 μΜ之IC5G或GI5〇 ; 表明該化合物在所示分析中具有小於或等於1 μΜ且大於100 nM之IC5〇或GI50 ; ”+++”表明該化合物在所示分析中具有小於或等於100 nM 之 IC5〇或 GI50。表2 化合物生物化學活性 IC5〇細胞基本活性gi50 HCT- 15 HCT- 116 KB3.1 KB8.5 1 ++ + ++ ++ + 3 ++ + + + + 4 + + + + 5 +++ ++ ++ 6 ++ + ++ ++ + 7 +++ ++ ++ ++ ++ 8 + 9 + ++ ++ ++ + 10 + + 11 ++ 12 + 14 + + + + + 15 ++ + + + + 16 +++ + ++ ++ + 17 +++ + + + + 18 +++ ++ ++ ++ + 19 + + + + 20 ++ + ++ ++ + 21 +++ +++ + 127871.doc 108 - 200836722 22 ++ + + 23 ++ + ++ + ++ 24 +++ ++ ++ 25 +++ ++ +++ +++ ++ 26 +++ ++ ++ ++ 27 +++ ++ +++ +++ +++ 28 +++ +++ +++ +++ +++ 29 +++ ++ ++ ++ ++ 30 +++ 31 ++ 32 ++ + +

實例29 選殖發生軟瓊脂分析方案將人類癌細胞以3xl05個細胞/孔之密度鋪於6-孔板中。第二天，向各孔中以某一濃度添加感興趣的化合物。培育 24及48小時後，收集細胞，洗滌並計數。使用Multimek 96機器人設施以下步驟。然後，以500個活細胞/孔鋪於96-孔板中，該孔板塗佈有PolyHema以防止細胞附著於孔底部。將瓊脂糖（3%原液）熔融，稀釋於溫熱介質中並添加於該等細胞中至最終濃度為0.5%。該軟瓊脂固化後，將該等板於37°C下培育培育6天。將阿爾瑪藍（Alamar Blue)染料添加於細胞中並將板再培育6小時。在Tecan板讀取器上量測光學密度變化且認為與軟瓊脂中所形成菌落之數目相關聯。癌細胞能夠在瓊脂上生長且因此應展示光學密度增加。降低的光學密度讀數意味著癌細胞被抑制。預計本發明化合物應展示光學密度降低。 127871.doc -109·

Claims

200836722 十、申請專利範圍： 1· 一種具有下式（I)之化合物或其醫藥上可接受之鹽、酿或前藥： /

其中： Rl係選自由烷基及經取代烷基組成之群； R係選自由氫、烷基及經取代烷基組成之群； L係選自由以下組成之群： a) -0_ ; b) -〇CH2-、-CH2〇-、-C(0)NR7-; c) -CH2〇CH2-、_CH2NR7CH2-、_CH2CH2〇·、 -C(〇)NR7CH2-、及-CH2CH2NR7-; r3及R4獨立選自由鹵素、烷基及經取代烷基組成之群； r5及R6獨立選自由氰基、烷基、經取代烷基、烷氧基、經取代烧氧基、_素及經基組成之群； 7 夕 R係選自由氫、烷基及-S〇2烷基組成之群； m為〇、1、2或 3 ; η為0、1、2或3 ;且 ρ為〇或1。 2·如睛求項1之化合物，其中R1及R2為燒基。 127871.doc 200836722 3·如請求項1之化合物，其中ri為烷基且&2為氫。 4·如請求項3之化合物，其中R1係選自由異丙基、第三丁基及丙基組成之群。 5 ·如請求項1之化合物，其中R4係經取代烷基。 6·如請求項5之化合物，其中R4為烷基，其經1至5個選自由胺基、經取代胺基、_素、烷氧基、經取代烷氧基及經基組成之群之取代基取代。

Cj 7·如請求項1之化合物，其中R 4係選自由齒素、 -CH2NH2、-(ch2)2NH2、-(ch2)3nh2及-ch2〇h組成之群。 8·如請求項1之化合物，其中㈤為^。 9·如請求項1之化合物，其中R6為鹵素。 ίο.如請求们之化合物，其中r6及與其連接之苯基環係選 …下組成之群：笨基、3·漠苯基、3_氯苯基、4_氰，本=、2,5-二氟笨基、3_氟笨基、2_甲氧基苯基、3_曱虱基苯基、4-曱氧基苯基、4_甲基苯基、基、及3-三氣甲基笨基。氣甲基本 U·如研求項1之化合物’丨中L及與其結合之屌子由以下組成之群的環：原子形成選自

127871.doc 200836722 Γ'

12.如請求項1之化合物，其具有式（la)，或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥：

13.如請求項1之化合物，其具有式（Ib)-(Id)，或其醫藥上可 127871.doc 200836722 接受之鹽、酯或前藥：

14.如請求項1之化合物，其具有式（Ie)-(Ii)，接受之鹽、酯或前藥：或其醫藥上可 127871.doc 200836722 Ο

(Ie)

(If)

(Ig) (Ih)

(Ii) 〇 127871.doc 200836722 I5· —種化合物，其為（S)-5-(胺基甲基苄基-4-(2,5-二氟苯基）-lH-咪峻-2-基）-2,2-二甲基丙基）噁唑啶-2-酮或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥：

16· —種化合物，其係（R)-5-(胺基甲基）-3-((R)_i_(卜节基.4-(2,5-二氟苯基）-1Η-味嗤-2-基）-2,2-二甲基丙基）σ惡嗅咬· 2_酮或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥：

17 · —種化合物，其係 (5R)-5-(2-胺基乙基+ -苄基_4_苯基_ιη-咪唆-2-基）·2,2 -一甲基丙基]_1，3-°惡°坐σ定·2__ ; (5S)-5-(2-胺基乙基）节基 _4_ 苯基咪唑-2-基）·2,2-二甲基丙基卜！，％噁唑啶_2·_ ; 5-(胺基甲基）-3-{(1R)小[1-苄基-4_(3_氯苯基）_m-咪唑-2-基]-2-甲基丙基卜噁唑啶_2_酮； 127871.doc 200836722 (5S)-5-(胺基甲基）-3-[(lR)-l-(l-苄基 _4_苯基-1H-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]_1，3-嗯嗪-2-酮； (5R)-5-(胺基甲基苄基_‘苯基_1H•咪唑_ 2 -基）-2,2-二甲基丙基]惡π秦_2•酮； (6S)-6·(胺基甲基）-4-[(lR)-l-(l-苄基-4-苯基-1H-咪唑-2 -基）-2,2-^—甲基丙基]嗎琳; (6R)-6-(胺基甲基）-4-[(lR)_l-(l-苄基-4-苯基·1Η-咪唑-2-基）-2,2-二甲基丙基]嗎琳_3-_ ; (6R)-6-(胺基甲基）-4-{(lR)-l-[l_ 苄基 _4_(3-氯苯基）· 1H-口米嗤-2-基]-2-甲基丙基}嗎琳_3__ ; (6S)_6_(胺基甲基）-4-{(lR)-l-[i -苄基 _4_(3_ 氣苯基）_ 1H-口米唾-2-基]-2-甲基丙基}嗎淋_3__ ; (6R)-6-(2-胺基乙基）-4-[(lR)-l_(i_ 苄基 _4_ 苯基-1H__ 唆-2-基）-2,2-二甲基丙基]嗎琳_3-顚I ; (6S)-6-(2-胺基乙基）-4-[(1化)-1_(1_苄基_4_苯基-111_咪唾-2-基）-2,2-二甲基丙基]嗎琳; (6S)-6-(2-胺基乙基苄基_4_(3_氯苯基） 1H-咪吐-2-基]-2-甲基丙基}嗎琳_3_酮； (6R)-6-(2-胺基乙基苄基_4·(3·氣苯基）_ 1Η-咪唑-2-基]-2-曱基丙基}嗎啉-3_酮； (2S，6R)-6-(胺基甲基苄基 _4_(3_ 氟苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2,2-二曱基丙基卜2_曱基嗎啉」·酮； (2R，6R)-6-(胺基甲基苄基 _4_(3_ 氟苯基）-1Η-咪唑-2-基]-2,2-二甲基丙基}_2•甲基嗎啉_3_酮； 127871.doc 200836722 (5R)-5-(胺基甲基）小[⑽小（1_节基斗苯基_mn 2-基）-2,2-二甲基丙基]哌嗪-2,3_二嗣； (5S)-5·(胺基甲基）]_[⑽.K(1•节基_4苯基_ΐΗ^ 2-基）-2,2·二甲基丙基]哌嗪_2,3-二_ ; (5R)-5-(胺基曱基节基_4_苯基·ιη “米唾 2-基）-2,2-二甲基丙基]_4_甲基哌嗪_2,3_二酮；

节基-4-笨基·1Η“米唑 _2_ 基）_2,2_二甲基丙基]-2-(經基甲基Η，4-^雜環庚I酮；’ (2R)-2-(胺基甲基）.4·[_小UH4·苯基_1Η•咪嗤_ 2-基）-2,2-二甲基丙基]-L4-二氮雜環庚_5_酮； (2R)-2·(胺基甲基）_4·[⑽小（1_m苯基_ιη_味唾· 2-基）-2,2-二甲基丙基W•(曱基項醯基）々-二氣雜環庚-5-酮； (2S)-2-(胺基甲基）-4-[(lR)小⑴节基冰苯基-1Hn 2-基）-2,2·二甲基丙基]-i，4-氧氮雜環庚巧·酮； (2R)-2-(胺基甲基）-4_[(叫小（1_节基|苯基-见味嗤_ 2-基）-2,2-二甲基丙基]_1，4_氧氮雜環庚_5_酮； (6S)-6·(胺基甲基）.4-[(lR)-l.(1^ 基·4 苯基· mn 2-基）-2,2-二甲基丙基]-14-氧氮雜環庚_3•酮； (6R)-6-(胺基甲基节基_4_苯基味唾_ 2-基）-2,2-二甲基丙基]_ι，4-氧氮雜環庚·3_酮； (6R)-6-(胺基甲基）-4-U1R)小[…义二氟节基）·4_(3_ 氟苯基）·1Η-口米唑_2_基]_2,2_二甲基丙基} —氧氮雜環庚-3-酮； 127871.doc 200836722 下丞-4 ( 3 - _贫甘 m-㈣W2,2-二甲基丙基}·Μ•氧氮雜環基)- (6R)-6-(胺基甲基）-4-{(1R)小π_(3·氣节基沁…一’# 基…-2-基]·2,2-二甲基丙基H，4·氧二酮；衣厌_3、基）·1Η-咪唑-2-基]-2,2-二甲基丙基卜i • 土 1 A，4_虱虱雜環庚_3. 嗣；

U (6S)-6·(胺基甲基）-w(1R)_wln4m米唾 2-基)-2,2-二甲基丙基]_M_二氮雜環庚烷_2,3_二酮； (6R)小[(1RH_(1_ 节基·4.苯基 _m•味唑 _2_ 基）2 2_二甲基丙基]-6-氟-1，4-二氮雜環庚_2_酮；或 (6S)_1-[(1R)-1-(i_ 苄基 _4_ 苯基 _m_ 咪唑-2_ 基）_2 1 二甲基丙基]-6-氟-1，4-二氮雜環庚·2·酮；或其醫藥上可接受之鹽、酯或前藥。 18. —種醫藥組合物，其包含治療有效量的如請求項1至p 中任一項的化合物及醫藥上可接受的載劑。 19·如請求項18之組合物，其進一步包括至少一種治療癌症之額外藥劑。 20.如睛求項1 9之組合物，其中該治療癌症之額外藥劑係選自由以下組成之群：伊立替康（irin〇tecan)、托泊替康 (topotecan)、吉西他濱（gemcitabine)、伊馬替尼 (imatinib)、曲妥珠單抗（trastuzumab)、5_氟尿嘧啶、甲醯四氫葉酸（leucovorin)、卡鉑（carboplatin)、順鉑 127871.doc 200836722 (cisplatin)、多西他賽（docetaxel)、太平洋紫杉醇 (paclitaxel)、替紮他濱（tezacitabine)、環填醯胺、長春花生物驗（vinca alkaloid)、蒽環類抗生素 (anthracycline)、利妥昔單抗（rituximab)及曲妥珠單抗。 2 1 · —種如清求項1 8之組合物之用途’其用於製造治療哺乳動物患者至少部分地由KSP介導之病症的藥物。 22.如請求項2 1之用途，其中該病症係細胞增殖性疾病。 23 ·如請求項22之用途，其中該細胞增殖性疾病係癌症。

24·如請求項23之用途，其中該癌症係選自由以下組成之群：肺及支氣管癌；前列腺癌；乳癌；胰腺癌；結腸及直腸癌；甲狀腺癌；胃癌；肝及肝内膽管癌；腎及腎盂癌；膀胱癌；子宮體癌；宮頸癌；卵巢癌；多發性骨髓瘤；食道癌；急性骨髓性白血病；慢性骨髓性白血病；淋巴、、、田胞f生白灰病，體細胞性白血病；腦癌；口腔及咽癌，喉癌；小腸癌；非霍奇金淋巴瘤；黑素瘤；及絨毛狀結腸腺瘤。 25·如明求項23之用途，其進—步包含向該哺乳動物患者投與一種治療癌症之額外藥劑。 26·如#求項24之用途’其中該治療癌症之額外藥劑係選自由以下組成之群：伊立替康、托泊替康、吉西他濱、伊鬲替尼曲文珠單抗、5_氟尿嘧啶、甲醯四氫葉酸、卡 :::順鉑、：西他賽、太平洋紫杉醇、替紮他濱、環磷讀、長春花生物鹼、蒽環類抗生素、利妥昔單抗、及曲妥珠單抗。文曰早柷及 127871.doc 200836722 27 28. 29. 一種抑制細胞内KSP驅動蛋法包含使該細胞與有效抑制觸0 白活性之活體外星的如請求項1 方法，該方之化合物接 .....ο n 驅動蛋白、、* k 觸使該細胞與有效抑制量的长項之方法’該月衣項1之化合物接 127871.doc -11- 200836722 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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