TW200815341A - Pharmaceutically and veterinarily suitable salt - Google Patents

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200815341 九、發明說明： 【發明所属之技術領域3 發明領域 本發明係關於一種改良之2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-5 咄咯啶-3-基]节醯胺之醫藥上與獸醫上可接受之鹽及其組 成物。 【先前技術3 發明背景 化合物2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯 10 胺具有作為血清素與正腎上腺素再吸收抑制劑之活性，因 此可用於多個治療領域。例如本化合物可用於治療涉及單 胺轉運因子功能調節之病症之治療，特別為其中涉及血清 素或正腎上腺素的再吸收之抑制作用之病症之治療。此 外，本化合物可用於涉及血清素與正腎上腺素二者之抑制 15 之病症，諸如尿失禁。此外，本化合物期望用於偏好抑制 正腎上腺素或血清素中之一者的再吸收優於另一者之再吸 收之病症，諸如疼痛、纖維肌痛、注意力缺乏過動症(ADHD) 及憂鬱症。 國際專利申請公告案號W02004/110995揭示單胺再吸 20 收抑制劑包括2,3-二氣戊基-N-η比洛σ定-3-基-节酿胺。 今曰出乎意外地發現2,3-二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)·吡咯啶-3_ 基]苄醯胺之半擰檬酸鹽有多項優點，因而讓其適合用於製 備醫藥上與獸醫上可接受之調配物。如此發現本特定鹽形 式具有獨特之良好配方性質的組合，因而讓其特別適合用 5 200815341 於製備醫藥上與獸醫上可接受之調配物。多種此等性質將 於後文就表1、2A及2B中之資料作討論。 C發明内容：！ 發明概要 5 根據本發明提供2,3_二氯A-環戊基_N-[(3S)-吡咯啶_3_ 基]苄醯胺之半檸檬酸鹽。於一較佳實施例中，2,3_二氯_N_ 裱戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽係以粉末χ 光繞射（PXRD)圖樣為其特徵，該pxRD圖樣經由使用 CuKal X光輻射（波長=1.54〇562埃）顯示2Θ主峰於129、 10 15·0、15.2、18·4、及20·0度(±〇.1 度2Θ)。本實施例進一步以 差動掃描量熱術(DSC)執跡為特徵，顯示於如艺/分鐘掃描 速率之尖峰吸熱係於2i3°c。 於本發明之又一態樣中，提供一種2,3-二氯環戊基 -N-[(3S)_%t咯啶_3_基]苄醯胺半檸檬酸鹽連同醫藥上或獸 15醫上可接受之稀釋劑或載劑之醫藥上或獸醫上可接受之組 成物。 特別，本發明提供一種包含2,3-二氣_N_環戊基 -N-[(3S)-咣略咬_3_基]苄醯胺半檸檬酸鹽與賦形劑混合之 錠劑調配物。一種較佳調配物包括該2,3-二氣_N_環戊基 2〇 ·Ν-[(33)·吼略啶-3·基Γ卡醯胺半擰檬酸鹽、壓縮助劑諸如微 晶纖維素、對錠劑提供光澤之添加劑諸如無水二鹼基磷酸 鈣、崩散劑諸如乙醇酸澱粉鈉及潤滑劑諸如硬脂酸鎂。此 外，本發明提供一種包含2,3_二氣_N_環戊基_N_[(3S)_吼咯 啶-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽混合賦形劑之膠囊調配物。較佳 200815341 调配物包括如前文說明之該半檸檬酸鹽、惰性稀釋劑、崩 散劑及潤滑劑。此外，本發明提供2,3-二氯_N_環戊基 N_[(3S)_々t咯啶-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽呈無菌水性溶液 劑供腸道外投藥使用。較佳此種溶液劑含有由1〇%至4〇%體 5積比丙二醇，且較佳也包含足量氯化鈉來避免溶血，例如 包含約l°/〇w/v氯化鈉。 2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)“比咯啶1基]节醯胺半檸 檬酸鹽為有用，原因在於其於哺乳動物包括人類具有藥理 活性。如此，可用於治療或預防其中涉及單胺轉運因子功 10能之調節之病症，更特別為涉及血清素或正腎上腺素再吸 收抑制之病症，及由其涉及血清素與正腎上腺素再吸收抑 制之病症。 如此，2,3·二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吡咯啶_3_基]苄醯胺 半才于板酸鹽可用於治療尿失禁’諸如真性應力型尿失禁 15 (GSI)、應力型尿失禁（SUI)、或老人尿失禁；膀胱過激症 (OAB) ’包括特發型迫尿肌不穩定、繼發於神經疾病（例如 巴金森氏病、多發性硬化、脊索受傷及中風)及迫尿肌活性 過咼及繼發於膀胱流出阻塞(例如良性攝護腺肥大(BpH)、 輸尿管縮窄或再狹窄）之迫尿肌活性過高；夜尿；由於前述 20病症之組合（例如應力型尿失禁與膀胱過激症組合）所造成 的尿失禁；及下尿路症狀，諸如頻尿及迫尿。OAB一詞意 圖涵蓋濕型OAB及乾型OAB。 有鐘於前述藥理活性，2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吡 口各咬_3-基]苄醯胺半擰檬酸鹽也可用於治療憂鬱症諸如重 7 200815341 型憂鬱症、復發型憂鬱症、單次發作型憂鬱症、次症候型 症候型憂鬱症、癌症病人之憂鬱症、巴金森氏病人之憂營 症、心肌梗塞後憂鬱症、小兒憂鬱症、受虐兒誘發憂鬱症、 不孕症婦女憂鬱症、分離後憂鬱症、經前煩躁及乖戾老人 5 症候群。 有鑑於前述藥理活性，2,3-二氯-N-環戊基_N_[(3S)_吼 洛咬-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽也可用於治療認知障礙諸如 癡呆’特別為退化性癡呆（包括老年癡呆、阿茲海默氏病、 皮克氏病（Pick’s disease)、杭丁頓氏舞蹈症、巴金森氏病及 10 庫賈氏病（Creutzfeldt-Jakob disease))及血管性癡呆（包括多 重梗塞性癡呆）以及與顱内空間占據病灶、創傷、感染及相 關病症（包括HIV感染）、代謝、毒素、組織缺氧及維生素缺 乏相關聯的癡呆；與老化相關聯的輕度認知缺損，特別為 老化相關聯的記憶力缺損（AAMI)、失眠症及老化相關聯的 15認知降低(ARCD);精神病症，諸如精神分裂症及躁症；焦 慮症諸如全面性焦慮症、恐懼症(例如廣場恐懼症、社交恐 懼症與單純恐懼症）、恐慌症、強迫症、創傷後壓力症、混 合型焦慮與憂鬱症；人格障礙諸如迴避型人格障礙及注音 力缺乏過動症（ADHD);性功能障礙諸如早發性射精 2〇 (MED)、男性勃起功能障礙（MED)及女性性功能障礙 (FSD)(例如女性性喚醒障礙(FSAD));經前症候群；季節性 情感障礙(SAD);飲食障礙諸如神經性厭食症及神經性貪食 症；肥胖；食欲抑制；由於對藥物或濫用物質成癌所導致 的化學依賴性，諸如對尼古丁、酒精、古柯驗、海洛英、 8 200815341 苯基巴比妥（Phenobairbital)及笨并二 ， J十頰成癮所導致的 5 10 15 化學依賴性；戒斷症候群，諸如可能由於前述化學依 所產生的戒斷症候群；糊諸如偏翻、蔟狀^ ;慢= 陣發性偏頭痛、與血管病症有關之頭痛、與化學依賴二 由於化學依賴性所導致的戒斷症候群相關聯之頭痛及緊張 性頭痛；疼痛；巴金森氏_如巴金森氏病之癡呆、神經 作用藥誘發之巴金森氏病及遲發型運動障礙；内分泌失 調，諸如血中泌乳激素過高；血管痙f諸如腦血管床的灰 管痙攣；小腦性運動失調；妥瑞氏症候群；拔毛癖；偷竊 癖；情緒不穩；病理性哭泣；睡眠障礙(猝倒症)及休克。 前述病症中以ADHD特別令人感興趣。ADHD的診斷係 基於臨床評估(M.Dulcan等人，；八111人(^(1兒童青少年精神 病學，Oct. 1997,36(10 SuPPl)，85s_121s ;美國國家衛生院， 1998年）a「ADHD的主要魏是注意力不集中及/或過動-衝 動的持續樣式，比較典型個體於比較性發育程度時所觀察 到的頻率和嚴重度更高」（精神病症之診斷及統計 (DSM-IV)，美國精神科學會，華盛頓特區，1994年）。為了 哆斷ADHD，病人必須證實於7歲以前有ADHD症狀造成缺 才貝，且症狀必須於至少兩種背景環境(例如學校[或職場]及 家庭)持續超過六個月（參考DSM-IV)。 有鑑於前述藥理活性，2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼 咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽也可用於治療多種其它病情 或病症，包括低血壓；胃腸道病症（涉及胃腸道活動力與分 泌的改變）諸如腸躁症（IBS)、腸阻塞（例如術後腸阻塞及敗 20 200815341 血病期間的腸阻塞）、胃輕癱(例如糖尿病性胃輕癱）、消化 性〉貝瘍、胃食道逆流病（GORD或同義字GERD)、脹氣及其 匕機月b性腸病症，諸如消化不良（例如非潰瘍性消化不良 (NUD))及非心性胸痛（Nccp);及纖維肌痛症候群。 有鐘於前述藥理活性，2,3-二氣-N-環戊基-N_[(3S)_吼 洛唆-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽也可用於治療疼痛。 10 15 里性疼痛是設計用來警告外在環境可能有傷害性刺 激危險的重要的保護機轉。系統係經由特定一組一次感覺 神經元操作，且係由有害刺激透過周邊傳導機制來活化(參 考—，1999，Ρπ^· N_biol.，57，l-164有關其綜論）。此等 感覺纖維稱作為疼痛受體，此種感覺纖維為具有緩慢傳導 速度之特徵性小直徑軸突。疼痛受體編 度、持續時間和品質，由於其局部解剖組織:： 的刺激所在位置。_受體係出現於痛覺神經纖維，包含 ^大類型，亦即A,維(有讎）和C纖維（無_)。由疼痛 受體輸入所產生的活性，於㈣中_複_處理後，直 接傳送’或透過崎巾難而傳送至f側底部視丘，然後 繼續傳送至皮質，於皮質產生痛覺。 2通常可歸類為急性或慢性。急性疼痛的開始突 湖短(通常為12週或以下）。通常係與諸如特定傷 起因有關’且經常為銳痛且嚴重疼痛。屬於因手 =疚特纽、㈣Μ㈣所導致的特β傷後出現的該 種疼痛。急性疼痛通常不會導致任何持久的心理反應。相 反地，慢性疼痛是-種長期疼痛，典型持續時間㈣㈣ 20 200815341 月，結果導致顯著心理問題和情緒上的問題。慢性疼痛的 常見實例為神經病變性疼痛（例如疼痛性糖尿病性神經病 變、疱疹後神經痛）、腕隧道症候群、背痛、頭痛、癌症痛、 關節痛和慢性術後疼痛。 5 當由於疾病或由於創傷而身體組織出現實質受傷時， 疼痛受體活化的特性被改變，於周邊，局部環繞受傷位置 以及以疼痛受體中斷為中心有敏化現象。此等效應可能導 致疼痛感覺增強。於急性疼痛，此等機轉可用於增強保護 性表現，因而更加可進行修補過程。正常預期一旦受傷痊 10 癒之後，敏感度將回復正常。但於多種慢性疼痛狀態，遠 超過痊癒過程之後仍然持續過度敏感，經常係由於神經系 統受傷。此種受傷經常導致與不適應以及活性異常相關聯 的感覺神經纖維異常（Woolf&Salter，2000，科學， 288，1765-1768)。 15 病人症狀中當有不適以及敏感度異常時將出現臨床疼 痛。病人有相當差異’可能存在有多種疼痛症狀。此等疼 痛症狀包括：1)自發性疼痛’該種疼痛可為鈍痛、灼燒痛 或刺痛；2)對有害刺激的誇張性疼痛反應(痛覺過敏）；及3) 由正常無害的刺激所產生的疼痛（痛覺異常-Meyer等人， 20 1994，疼痛教科書，13_44)。雖然有各種形式急性疼痛和慢 性疼痛的病人可能有類似的症狀，但潛在的機轉可能不 同，因此需要有不同的治療策略。根據不同的病理生理學， 疼痛可被劃分成為多種不同亞型，包括疼痛受體性疼痛、 發炎性疼痛及神經病變性疼痛。 11 200815341 备痛見X體性疼痛係由組織傷害所誘發，或經由可能造 成知口的4本刺激所誘發。疼痛的傳入係由受 傷部位的疼 痛又體傳導mm活化’㈣轉人活化於脊索的疼痛受 體、、端同度的神經疋。隨後向上通過脊束，#繼至大腦， 5 10 15 20 於大細感見疼痛（Meyer等人，1994，疼痛教科書，13_44)。 疼痛又體的活化可活化兩型傳人神經纖雉。錢勒的^ 纖維的傳輸快速，負責銳痛感和刺痛感，而無㈣的c纖維 ，輸速率Ixk，且傳輪純痛或相。中度至重度急性痛覺 g -疼痛為源自於中樞神經系統創傷、變形/扭傷、燒燙 知。肌梗塞及急性胰炎之疼痛、術後疼痛（任何類似手術 =賴）、創傷後疼痛、腎絞痛、癌症痛和背痛的主要特 :癌症痛可1為慢性疼痛諸如腫瘤相關疼痛（例如骨痛、 化fU或内臟痛)’或與癌症治療相關聯的疼痛(例如 广二二:、V症候群、性術後疼痛症候群或放射性治療後 2群）。癌_可能出現於化學治療、纽治療、激素治 f: 引起。背痛可能與由於椎間盤突出或破 二=:、_關節、脊椎周圍肌肉或後_帶 月痛可自然緩解，但有些病人，背痛持續赶 過12週w«，特财能_廢。 超 神經病變性疼痛目前係__ _病灶或功能異常所弓丨起的疼痛或所引起的疼痛。神 係由創傷和疾病所引起，如此，「神經病變性疼痛」 ::二多:化病因的病症。此等病症包括心 神m、糖尿病性神經病變、後神經痛、三又神經 12 200815341 痛、背痛、癌症神經病變、HIV神經病變、幻肢痛、腕隧道 症候群、中樞中風後疼痛及與慢性酗酒、曱狀腺功能低下、 尿毒症、多發性硬化、脊索受傷、巴金森氏病、癲癇及維 生素缺乏所引發的疼痛。神經病變性疼痛由於不具有保護 5作用故為病理性，經常係於原先的病因已經消失之後仍然 存在’且經常持續多年，顯著降低病人的生活品質（w〇〇lf 及Mannion，1999，刺胳針，353，1959-1964)。神經病變性疼 痛的症狀難以治療，原因在於經常有相同疾病的病人間也 可能有多樣化（Woolf & Decosterd，1999，疼痛 10 Supp”6，S141_S147 ; Woolf 及 Mannion，1999，刺胳針， 353，1959-1964)。神經病變性疼痛包括自發性疼痛，自發性 疼痛可為連續疼痛，及陣發性疼痛或異常激發疼痛例如痛 覺過敏(對有害刺激的敏感度增高及痛覺異常）對正常為無 害的刺激敏感。 15 發炎過程是生化事件與細胞事件的複雜系列，係回應 於組織夂傷或異物的存在而被活化，結果導致腫脹與疼痛 (Levine及Taiwo ’ 1994，疼痛教科書，45-56)。關節痛係最 常見的發炎性疼痛。類風濕性疾病為已開發國家最常見的 慢性發炎病症，而類風濕性關節炎為最常見的病廢失能起 20因。類風濕性關節炎的確切病因為未知，但目前假說提示 遺傳因素和微生物因素相當重要（Grennan & Jayson， 1994,疼痛教科書，397_4〇7)。估計幾乎有丨千6百萬個美國 人患有症候性骨關節炎(0A)或退化性關節病，大部分病人 年齡超過60歲，預期隨著人口族群的老化，病人數目可能 13 200815341 增加至4千萬人，因而變成相當龐大的公共衛生問題(H〇uge & Mersfelder,2002,Ann Pharmacother.,36,679-686;McCarthy 等人，1994，疼痛教科書，387-395)。大部分骨關節炎的病 人由於引發疼痛因此會求診。關節炎對心理社交功能和肉 體功能造成顯著衝擊，已知關節炎係生命晚期病廢失能的 首要起因。僵直性脊椎炎也是-種風濕病，造成脊椎關節 和祕關節的關節炎。由持續終身間歇發作病症至嚴重慢 性病’攻㈣椎 '周邊關節及其它身體器官等不同嚴重^ 度。 10 15 力一 .㈣錄疼痛為内臟痛，包括與發炎性腸病（_ 相關的疼痛。内臟痛是—種與内臟相__，涵蓋腹腔 的器官。此等器官包括性器官、脾臟及其它消化系統；分: 與内臟相關聯的疼痛可分成消化性㈣絲非;肖化性内臟 痛。常見引起疼痛的胃腸道(GI)病症包括機能性腸病(岡 及發炎性腸病卿）。胃腸道病症包括寬廣多種目前只能夠 中等控制的疾病狀態，就刚方面而言包括胃食道逆流、 消化不良、腸躁症(IBS)及機能性腹痛症候群(FAps);而就 IBD方面而言，包括克隆氏病 %九及潰瘍性大腸炎，全 部^㊉規性產生内臟痛。其它類 的内蜮痛包括痛經、膀 胱火及胰久所引發的疼痛及骨盆腔疼痛。 須注意若干類型的疼痛有多重 _代 ㈣，如此可歸成多於 變成分。 另尽痛文體成分及神經病 其它類型的疼痛包括·· 20 200815341 •由肌肉骨骼病症 痛、脊；^ . 蛉致的疼痛，包括肌痛、纖維肌 m 为推穴、血清陰柯如 、、g、&、m $ 、風濕性）關節病變、非關節性風 濕症、肌委縮病變、肝醣 ^ 刀解夕肌炎、及膿性肌炎； •、臟及血管痛，Θ紅 兔,,^ 由心絞痛、心肌梗塞、僧帽瓣狹 的疼、雷諾氏現象、硬腫病、和骨㈣缺血所引起 •頭痛諸如鱗她财職的偏麵和無預兆的偏 頭痛）、義狀頭痛、緊張型頭痛、没合型頭痛以及與血管病 症相關聯的頭痛；以及 面痛包括牙痛、耳痛、烫傷性口腔症候群及顯顆關 節肌筋膜疼痛。 特別7人感興趣的病症包括尿失禁諸如混合型尿失 π GSI及SUI，疼痛；纖維肌痛；adh〇及憂鬱症。 本發明進一步提供2,3_二氯_N_環戊基_N_[(3S)_吼咯啶 15 -3-基]节醯胺半檸檬酸鹽用於人體治療尿失禁、疼痛、纖維 肌痛、過動症及憂鬱症之用途。更特別本發明進一步提供 2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸 鹽用於治療尿失禁諸如真性應力型尿失禁（GSI)、應力型尿 失禁（SUI)、或老人尿失禁；膀胱過激症(oab)，包括特發 20型迫尿肌不穩定、繼發於神經疾病（例如巴金森氏病、多發 性硬化、脊索受傷及中風)及迫尿肌活性過高及繼發於膀胱 流出阻塞(例如良性攝護腺肥大(BPH)、輸尿管縮窄或再狹 窄）之迫尿肌活性過南；仪尿，由於前述病症之組合(例如應 力型尿失禁與膀胱過激症組合)所造成的尿失禁；及下尿路 15 200815341 症狀，諸如頻尿及迫尿。OAB—詞意圖涵蓋濕型OAB及乾 型0AB。本發明進一步提供2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼 咯啶·3_基]苄醯胺半檸檬酸鹽用於動物特別為犬治療尿失 禁。 5 本發明提供一種製備2,3-二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)-吡咯 啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽之方法，係經由讓2,3-二氯-N_ 環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺與檸檬酸於惰性溶劑 反應，以及回收該半檸檬酸鹽。較佳惰性溶劑為異丙醇 (IPA)。 10 本發明也包括2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基] 苄醯胺半檸檬酸鹽之全部適當同位素變化。2,3-二氣-N-環 戊基-N-[(3S)^比咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽之同位素變 化係定義為其中至少一個原子係由有相同原子序的原子所 置換，但該原子之原子量係與自然界所見的原子量不同。 15 可結合入2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3-基]苄醯胺 半檸檬酸鹽之同位素之實例包括氫、碳、氮及氧之同位素 諸如2H、3H、13C、14C、15N、170、及 180。2,3·二氣-N-環 戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半擰檬酸鹽之若干同位 素變化例如其中結合放射性同位素如3H或14C之化合物可 20 用於藥物及/或酶基質組織分布研究。氚化同位素亦即3H及 碳-14同位素亦即14C由於容易準備且容易檢測故為較佳。此 外，以同位素例如氣亦即2H取代，由於代謝安定性較高， 例如於活體内的半生期延長或劑量需求減低，因而於某些 情況下為較佳，可提供若干治療優勢。2,3-二氯-N-環戊基 16 200815341 -N-[(3S)-吡咯啶-3_基]苄醯胺半檸檬酸鹽之同位素變化通 常係經由習知程序諸如於下列實例和製備例中所述程序， 使用適當反應劑之同位素變化而製備。 雖然2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺 5 之自由態鹼形式有活性，但實際上用於配方目的，最佳係 以醫藥上及/或獸醫上可接受之酸之鹽形式投予。已經識別 出數種不同的可能的2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)·吡咯啶-3-基]苄醯胺之醫藥上可接受之鹽形式。特別發現含有醫藥上 及/或獸醫上可接受之陰離子之酸加成鹽為適合，諸如鹽酸 10 鹽、氫溴酸鹽、半乙烷-1,2-二磺酸鹽（半乙二磺酸鹽）、乙烷 -1，2-二磺酸鹽（乙二磺酸鹽）、反丁烯二酸鹽、D-酒石酸鹽、 L-酒石酸鹽、乙酸鹽及半硫酸鹽。 為容易調配2,3_二氯-N-環戊基_N-[(3S)_吼咯啶-3-基] 苄醯胺之醫藥上及/或獸醫上可接受之鹽，必須滿足以下四 15 項物理化學標準：（1)溶解度良好；（2)安定性適當；（3)非吸 濕性；（4)醫藥調配上或獸醫調配上之加工性良好。發現雖 然前文摘述之多種鹽可滿足若干此等標準，但除了較佳的 半檸檬酸鹽以外，並無任一種鹽觀察得可滿足全部標準， 以及提供所需化學安定性及物理安定性。如此發現2,3-二氯 20 -N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半擰檬酸鹽有多項 優點，因而讓其特別適合用於製備2,3-二氣-N-環戊基 -N-[(3S)-咄咯啶-3_基]苄醯胺之醫藥調配物。本發明化合物 有調配優勢之鹽包括··鹽酸鹽、氫溴酸鹽、半乙二磺酸鹽、 乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、L-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、 17 200815341 乙酸鹽及半硫酸鹽。半乙二磺酸鹽可根據國際專利申請案 PCT/IB〇5/〇〇3643(2006 年 6 月 1 日公告為 w〇 2006/056884) 之實例1揭示之方法製備。額外2,3_二氯4環戊基善[(3s)_ 吡咯啶-3-基]节醯胺之鹽可根據技藝界已知之酸加成鹽製 造方法製備，或根據後文(於實例3至實例u)詳細說明之方 法製備。例如，若屬適當，2,3-二氣_N_環戊基_n_[(3s)_^ 咯啶-3-基]节醯胺之其它鹽類方便經由將化合物之溶液與 期望之酸或鹼混合而製備。此等其它鹽類可由溶液中沉 ;廣又，且可藉過濾收集，或可藉蒸發去除溶劑回收。 表1舉例說明根據本發明[實例2]之鹽形式之有利調配 性質之組合之選擇，包括非吸濕性及非溶劑合性質。 表1 性質 半檸檬酸鹽 結晶度1 結晶 熱事件2 206°C (樣本A(實例2A)-第4圖） 213°C (樣本B(實例2)-第5圖） 溶劑合物/水合物3 ^ 非溶劑合 吸濕性4 非吸濕性 2藉後文詳細說明之PXRD測得之結晶度。 15 3根據後文有關第4圖及第5圖討論之程序，藉DSC測定之熔點。 溶劑合/水合係藉熱重分析（TGA)評估，熱重分析係使用德州儀器 公司（丁八11^〇111^加)出-1^8丁0八2950儀器，測定6.3毫克樣本於敞 開的鉑盤中的重量損耗。樣本利用氮氣爐掃除氣體，以2〇。〔:/分 4鐘之速率由周圍溫度加熱至300°C。 20 使用表面測量系統公司（Surface Measurement Systems Ltd)動態蒸 氣吸附設備型號DVS-1評估吸濕性。分析係使用200立方厘米/i 鐘之氮氣流於30°C進行。水的吸附與水的解吸附係於〇%至90%相 對濕度(RH)之範圍，使用15%RH的間隔測定。於各濕度至少暴露 2小時時間，或暴露至重量的改變率低於0.0003%/分鐘（平均超過 25 10分鐘）為止。樣本重量為12.6毫克。樣本係使用CAHND-200稱 重，CAHN D-200是七位數記錄天平，屬於該儀器的整合一體的 一部分。 18 200815341 表2A及表2B顯示根據本發明[實例2A]之鹽形式比較 其它鹽形式之調配性質選擇之實驗室規模調查研究結果。

表2A 鹽 半檸檬酸鹽 (實例2A) HC1 (實例3) HBr(實例4) 半乙二磺酸鹽 (實例5) 乙二績酸 鹽（實例6) 結晶度 結晶 結晶 結晶 結晶 結晶 熱事件 鮮明吸熱峰 206〇C 多個吸熱 峰45°C、90 〇C、143〇C 多個吸熱峰 67〇C、73〇C、 96〇C、140〇C 吸熱峰220°C 吸熱峰134 °C 溶劑合物/ 水合物 NS S* S* S* S*

表2B 鹽 半檸檬酸鹽 (實例2A) 反丁烯二酸 鹽（實例7) L-酒石酸 鹽（實例8) D-酒石酸 鹽（實例9) 半硫酸鹽 (實例10) 乙酸鹽 (實例11) 結晶度 結晶 結晶 結晶 結晶有若 干脫序 結晶 結晶 熱事件 鮮明吸熱 峰 206°C 多個吸熱峰 79〇C、202 °C 多個吸熱 峰30-100 〇C、138 〇C、154〇C - 吸熱峰 123〇C 無數個吸 熱峰69 〇C、81〇C 溶劑合物 /水合物 NS NS * S - S* S* NS :非溶劑合 S :溶劑合 $指示溶劑合耗損之重量耗損 結晶度、熱事件及溶劑合/水合係根據前文指示之方法 測定(表1)。 表2A及表2B指出接受試驗的全部鹽中，只有2,3-二氯 -N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半擰檬酸鹽具有下 15 列優異屬性的組合：期望的結晶度；單一鮮明的吸熱峰； 非溶劑合。由於較高溶點容易加工處理，故熱結果為正面。 19 200815341 本發明化合物可單獨投予或作為組合治療的一部分而 投予。若投予治療劑的組合，則活性成分可於分開醫藥調 配物或於組合醫藥調配物中循序或同時投予。 適當輔助治療劑之實例包括： 5 •牙鳥片類止痛劑諸如嗎啡(morphine)、海洛因（heroin)、 氫嗎啡酮(hydromorphone)、氧嗎啡酮（oxymorphone)、立福 法諾（levorphanol)、力法洛方（ievaii〇rphan)、美沙東 (methadone)、美派瑞丁（meperidine)、芬坦尼（fentanyl)、古 柯驗（cocaine)、可待因（c〇deine)、二氫可待因 10 (dihydrocodeine)、氧可待因酮（oxyc〇d〇ne)、氫可待因酉同 (hydrocodone)、普朴賽芬（pr0p0Xyphene)、拿美芬 (nalmefene)、拿洛芬(nalorphine)、拿洛松(naloxone)、拿崔 松（naltrexone)、布普諾芬（buprenorphine)、布妥法諾 (butorphanol)、拿布芬（naibuphine)、或潘塔左辛 15 (pentazocine)； •非類固醇抗炎藥(NSAID)例如阿斯匹靈（aspirin)、戴可 分那（diclofenac)、戴福辛諾（diflusinal)、伊妥朵杈 (etodolac)、分布芬(fenbufen)、芬諾普分(fenoprofen)、福芬 尼所（flufenisal)、福比普芬（flurbiprofen)、伊布普分 20 (ibuprofen)、弓丨朵美沙辛（indomethacin)、凱妥普芬 (ketoprofen)、凱妥洛拉（ketorolac)、美可羅芬那米酸 (meclofenamic acid)、美芬那米酸(mefenamic acid)、美洛西 康（meloxicam)、那布米東(nabumetone)、那普山（naproxen)、 尼美蘇萊(nimesulide)、尼左福必普芬(nitroflurbiprofen)、歐 20 200815341 薩拉辛（olsalazine)、歐薩普辛（OXaprozin)、芬尼布塔宗 (phenylbutazone)、皮洛西康（piroxicam)、蘇法薩拉辛 (sulfasalazine)、蘇林達(sulindac)、妥米丁(tolmetin)、或左 美皮拉(zomepirac); 5 •巴比妥酸鹽（barbiturate)鎮定劑例如阿莫巴比妥 (amobarbital)、阿朴巴比妥（aprobarbital)、布塔巴比妥 (butabarbital)、布塔比妥（butabital)、美福巴比妥 (mephobarbital)、美薩比妥（metharbital)、美索海西妥 (methohexital)、潘妥巴比妥（pentobarbital)、芬諾巴比妥 10 (phenobartital)、色考巴比妥（secobarbital)、塔布妥 (talbutal)、席麥拉（theamylal)、或席潘妥（thiopental); •具有鎮定作用之苯并二吖呼例如可羅戴西普賽 (chlordiazepoxide)、可羅拉西派（clorazepate)、戴贊潘 (diazepam)、福拉西潘（flurazepam)、羅拉西潘（lorazepam)、 15 歐薩西潘（oxazepam)、提馬西潘（temazepam)、或萃左拉 (triazolam)； •具有鎮定作用之氏拮抗劑諸如戴芬海左敏 (diphenhydramine)、派瑞拉明（pyrilamine)、普美沙辛 (promethazine)、可羅芬尼拉明（chlorpheniramine)、或可羅 20 赛林辛（chlorcyclizine); •鎮定劑諸如葛提賽邁（glutethimide)、美普巴麥 (meprobamate)、美沙夸隆(methaqualone)、或戴可羅拉芬那 松(dichloralphenazone); •骨骼肌鬆弛劑例如巴可羅芬(baclofen)、卡瑞索普朵 21 200815341 (carisoprodol)、可羅索薩宗（chl〇rzoxazone)、可羅班薩平 (cyclobenzaprine)、美索卡巴諾(meth〇carbamol)、或歐芬那 丁（orphrenadine); •NMDA受體拮抗劑例如戴左美索方 5 (dextromethorphan)((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡烷）或其代謝產 物戴左芳（dextrorphan)((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡烷）、κ它命 (ketamine)、美馬丁 (memantine)、口比卩各并。套琳、奎寧、武_4_(膊 基甲基)-2-萜啶羧酸、布丁平(budipine)、EN-3231(莫菲戴 (MorphiDex)、嗎啡與戴左美索方之組合調配物）、妥皮拉邁 10 (topiramate)、尼拉美珊(neramexane)或皮辛福特(perzinfotel) 包括NR2B結抗劑例如伊芬普迪（ifenprodil)、萃索普迪 (traxoprodil)或（·)·(ΙΙ)-6-{2-[4-(3-氟苯基）-4-羥基-1-萜啶 基H_羥基乙基-3,4-二氫-2(1H)-喳啉酮； •α-腎上腺素激性劑例如朵薩索辛（doxazosin)、塔蘇羅 15 辛（tamsulosin)、可羅尼丁（clonidine)、夸方辛（quanfacine)、 戴美塔妥米丁 (dexmetatomidine)、莫達費尼(modafinil)、芬 妥拉明（phentolamine)、泰拉薩辛（terazasin)、派薩辛 (prazasin)或4-胺基-6,7·二甲氧基-2-(5-甲磺醯胺基-1，2,3,4-四鼠異17查琳-2-基)-5-(2-吼°定基)唆11坐琳； 20 •三環抗繁劑例如戴希帕明（desipramine)、伊米帕明 (imipramine)、阿米萃泰林（amitriptyline)或諾萃泰林 (nortriptyline)； •抗抽搐劑例如卡巴馬西平(carbamazepine)、拉莫萃金 (lamotrigine)、妥皮拉邁（topiratmate)、或凡普酸鹽 22 200815341 (valproate)； •速激肽(NK)拮抗劑特別為NK-3、NK-2或NK-1拮抗劑 例如（aR，9R)_7_[3,5·貳（三氟曱基）节基]_8,9,1011_四氫_9_ 甲基-5-(4-甲基苯基）-7Η-[1，4]二吖咔并[2,l-g][l,7]-萘啶 5 -6，13-二 _(丁八1<：_637)、5-[[(211，38)-2-[(111)_1_[3,5_武（三氟甲 基）苄基]乙氧基-3-(4-氟苯基)_4_咮啉基]-甲基]-l，2-二氫 -3Η·1，2,4-二唾·3-_(ΜΚ-869)、阿普皮坦(aprepitant)、蘭皮 坦(lanepitant)、達皮坦(dapitant)或3-[[2-甲氧基-5-(三氟曱氧 基)苯基]-曱基胺基]-2-苯基萜啶(2S，3S); 10 •蕈毒驗拮抗劑例如氧布提寧（oxybutynin)、妥特羅丁 (tolterodine)、普皮凡瑞（pr〇piverine)、左席恩（tr〇pSium)氯 化物、達;而务那辛（darifenacin)、索里芬那辛（solifenacin)、 長:米凡^扣11^6141^)、及伊普妥皮恩（ipratr〇pium); •COX-2選擇性抑制劑例如希樂撰（ceiec〇xib)、羅費考 15希（r〇fecoxib)、派瑞考希（parecoxib)、凡得考希 (valdecoxib)、彳寸拉考希（deracoxib)、伊妥瑞考希 (etoricoxib)、或魯米拉考希(iumirac〇xib); •煤焦油止痛劑特別為派拉西塔莫(paraCetam〇l); •神經作用藥諸如左皮瑞朵（droperidol)、可羅普馬辛 20 (chlorPromazine)、哈洛皮瑞朵（haloperidol)、派芬那辛 (perphenazine)、索瑞達辛（thi〇ridazine)、美索瑞達辛 (mesoridazine)、萃福皮拉辛（tri^|u〇perazine)、福芬那辛 (fluphenazine)、可羅薩平（ci〇zapine)、歐蘭薩平 (olanzapine)、皮瑞東（riSperid〇ne)、席帕西東 23 200815341 (ziprasidone)、夸迪平（quetiapine)、色丁朵（sertindole)、阿 瑞皮帕左（aripiprazole)、松皮帕左（sonepiprazole)、布羅那 色林（blonanserin)、伊羅派瑞東（iloperidone)、派羅皮隆 (perospirone)、拉可羅普（raclopride)、左帝平(zotepine)、必 5 芬普諾（bifeprunox)、阿色納平（asenapine)、魯拉西東 (lurasidone)、阿米蘇普萊（amisulpride)、巴拉派瑞東 (balaperidone)、帕林朵（palindore)、伊里凡色林 (eplivanserin)、歐珊坦(osanetant)、瑞莫那班（rimonabant)、 美可林坦（meclinertant)、米拉辛（Miraxion)、或薩瑞左坦 10 (sarizotan)； •類香草素受體激動劑（例如瑞辛法拉妥辛 (resinferatoxin))或類香草素受體拮抗劑（例如卡薩西平 (capsazepine)) i •β-腎上腺素激性劑諸如普帕諾羅(pr〇pran〇l〇l); 15 •局部麻醉劑諸如美希里丁(mexiletine); •皮貝類固醇諸如件沙美沙松(dexamethasone); •5-HT受體激動劑或拮抗劑特別為5-11丁18/11)激動劑諸 如伊勒萃坦(eletriptan)、蘇馬萃坦(sumatriptan)、那拉萃坦 (肅atdptan)、左米萃垣（z〇lmitriptan)或瑞薩萃坦 20 (rizatriptan)； ·5·ΗΤ2α受體拮抗劑諸如R(+)_a_(2,3-二甲氧基_苯 基)-1-[2-(4-氟苯乙基)]-4_萜啶甲醇(MDL1〇〇9〇7); •膽驗激性（於驗類）止痛劑諸如伊斯普尼可林 24 200815341 胺(RJR-2403)、（幻_5_(2_吖咀基甲氧基)_2_氣吡啶(ABT 594) 或於驗； •萃馬朵（Tramadol); •PDEV抑制劑諸如5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-萜讲基-磺 5 I基）本基]甲基-3-正丙基_1，6-二氫-7H-口比唾并[4,3-d]。密 啶I酮（西戴納菲（sildenafil))、（6R，12aR)_2,3,6,7，12，12a-A 氫-2-甲基-6-(3,4-亞甲基二氧基苯基)·吼啡并[2，，Γ ·· 6，^% 啶并[3，4-b]吲哚-丨，4_二酮（IC-35丨或塔達拉菲（tadalafil))、 2-[2-乙氧基-5-(4_乙基_辟畊小基小磺醯基)_苯基]_5_甲基 10 ·7_丙基_3H-味唾并[5，l-f][l，2,4]三畊-4-酮（凡得納菲 (vardenafi1))、5_(5-乙醯基-2-丁氧基-3-咄啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-吖咀基)-2,6-二氫-711-吡唑并[4,34]嘧啶-7-酮、5-(5- 乙醯基-2-丙氧基-3-吼啶基）-3-乙基-2-(1-異丙基-3-吖咀 基)-2,6-二氫·7Η』比唑并[4,3-d]嘧啶-7-酮、5_[2_乙氧基·5_(4-15乙基萜。井-1-基磺醯基）吼啶-3-基]-3-乙基-2_[2-甲氧基乙 基]-2,6-二氫-7Η-口比唑并[4,3_d]嘧啶-7-酮、4-[(3-氯-4-甲氧 基苄基）胺基]-2-[(2S)_2-(經基甲基）吼。各咬_ι_基]_N十密啶 -2-基甲基)嘧啶-5-羧醯胺、3-(1-甲基-7·酮基-3-丙基-6,7-二 氫-1H』比唑并[4,3-d]嘧啶_5_基)善[2-(1·甲基吼咯啶-2-基) 20 乙基]-4_丙氧基苯磺醯胺； •α-2-δ配體諸如嘉巴潘廷（gabapentin)、普嘉巴林 (pregabalin)、3-甲基嘉巴潘廷、（1α 3α 5α)(3-胺基-甲基一二 環[3·2·0]庚-3-基）乙酸、（3S，5R)-3-胺基甲基-5-曱基-庚酸、 (3S，5R)-3-胺基-5·甲基-庚酸、（3S，5R)_3_胺基_5_甲基_辛 25 200815341 酸、（2S，4s)_4_(3-氯苯氧基)脯胺酸、（2S，4S)-4_(3_氟苯氧基) 捕胺酸、[(1R，5R，6S)·6·(胺基甲基）二環[3.2.0]庚基]乙 酸' 3-(1-胺基甲基-環己基甲基哼二唑_5_酮、 C-[1-(1H-四唾_5_基甲基)_環庚基]_甲胺、（3S，4S)-(1_胺基甲 5基-3,4_二甲基-環戊基)-乙酸、（3S，5R)-3-胺基甲基-5-甲基· 辛酸、（3S，5R)-3-胺基_5_甲基-壬酸、（3S，5R)-3-胺基_5_甲基 •辛酸、（3S，4R，5R)-3-胺基-4,5_二甲基-庚酸、及 (3S，4R，5R)-3-胺基-4,5-二甲基-辛酸； •類大麻紛； 10 •代謝作用麵胺酸亞型1受體(mGluRl)拮抗劑； •血清素再吸收抑制劑諸如色左林(sertraline)、色左林 代謝產物去甲色左林、福西丁（fluoxetine)、正福西丁（福西 丁去甲基代謝產物）、福佛薩明（f|uvoxainine)、普羅西丁 (paroxetine) '希坦羅潘（cital〇pram)、希坦羅潘代謝產物去 15 甲希坦羅潘、伊斯希坦羅潘（escitalopram)、d，l-費福拉明 (d，l-fenfluramine)、費莫西丁（femoxetine)、伊福西丁 (ifoxetine)、賽諾朵西平（Cyan〇(j〇thiepin)、伊妥西丁 (litoxetine)、達普西丁（(130〇叉6以1^)、尼法左東（1^[32〇(1〇1^)、 西瑞可拉明（cericlamine)、及萃左東(trazodone); 2〇 •正腎上腺素再吸收抑制劑諸如馬普提林 (maprotiline)、羅菲帕明（lofepramine)、米塔西平 (mirtazepine)、阿薩普提林（oxaprotiline)、費左拉明 (fezolamine)、妥莫西丁（tomoxetine)、邁色林(mianserin)、 布普皮恩(buproprion)、布普皮恩代謝產物羥基布普皮恩、 26 200815341 諾米芬辛（nomifensine)及凡羅薩辛（vil〇xazine)(凡法蘭 (Vivalan)，特別為選擇性正腎上腺素再吸收抑制劑諸如瑞 柏西丁（reboxetine)特別為（S，S)_瑞柏西丁； •血清素-正腎上腺素雙重再吸收抑制劑諸如凡拉法辛 5 (venlafaxine)、凡拉法辛代謝產物〇_去甲凡拉法辛、可米普 拉明（clomipramine)、可米普拉明代謝產物去甲可米普拉 明、杜羅西丁 (duloxetine)、米納西潘(milnacipran)及伊米潘 明（imipramine); •可誘導之氧化氮合成酶(iN0S)抑制劑諸如s_ [2_ ^亞 10胺基乙基)胺基]乙基]-L-南半胱胺酸、S-[2-[(l-亞胺基乙基) 胺基]乙基]-4,4-一酮基半胱胺酸、S-[2-[(l-亞胺基乙基) 胺基]乙基]_2_甲基-L-半胱胺酸、（2s，5Z)_2-胺基-2-甲基 -7-[(l-亞胺基乙基）胺基]-5-庚烯酸、2-[[(lR，3S)-3-胺基-4-羥基-1-(5-噻唑基）-丁基]硫基]_5_氣。比啶曱腈、 15 2-[[(lR，3S)-3-胺基-4-羥基-1-(5-噻唑基）丁基]硫基]氯苄 腈、（2S，4R)-2-胺基-4-[[2-氯-5-(三氟甲基）苯基]硫基]_5_噻 峻丁醇、2-[[(lR，3S)-3-胺基-4-羥基-1-(5-嗔唾基)_丁基]硫 基]-6-(三氟甲基)-3-吡啶甲腈、2_[[(1r，3S)_3_胺基_4_羥基 -1-(5-噻唑基）丁基]硫基]-5-氯苄腈、N-[4-[2-(3-氯苄基胺基) 20乙基]苯基]嚷吩羧醯胺或脈基乙基二硫化物； •乙醯膽鹼酯酶抑制劑諸如朵尼派席（d〇nepezil); •前列腺素E2亞型4(EP4)拮抗劑諸如N-[({2-[4-(2-乙基 -4,6-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吼啶_丨·基）苯基]乙基}胺基)_ 羰基]-4-甲基苯磺醯胺或氯_2-(3_氟苯氧基） 27 200815341 咄啶-3-基]羰基}胺基）乙基]苯甲酸； •白三烯B4拮抗劑諸如1-(3-聯苯-4-基甲基冬羥基-咬 。完-7-基）-環戊烷羧酸（cp-1〇5696)、5-[2-(2-羧基乙 基）-3-[6-(4-甲氧基苯基）-5E-己烯基]氧基苯氧基]-戊酸 5 (ONO-4057)或DPC-11870， •5-脂肪氧合酶抑制劑諸如席路東(zileut〇n)、6_[(3-氣 _5-[4-甲氧基-3,4,5,6-四氫-2H-萜喃-4-基])苯氧基-甲基]-1-曱基-2-喳喏酮（ZD-2138)或2,3,5-三甲基-6·(3-吡啶基曱 基)-1,4-苯醌(CV-6504); 10 •鈉通道阻斷劑諸如立杜卡因（lidocaine); •5-HT3拮抗劑諸如翁丹西左（on(jansetron)、葛尼西左 (granisetron)、左皮西左(tropisetron)、阿薩西左（azasetron)、 朵拉西左（dolasetron)、或阿羅西左（ai〇setron); •雌激素激動劑或選擇性雌激素受體調節劑（例如激素 I5補充治療(HRT)或拉索福西芬(lasofoxifene); •α-腎上腺素激性受體激動劑諸如苯丙醇胺或R_45〇 ; •多巴胺受體激動劑（例如阿朴嗎啡，其用作為藥物之 教示可參考US-A-5945117)，包括多巴胺D2受體激動劑（例 如普米皮索（premiprixal)、法瑪西亞普強公司（Pharmacia 20 uPj〇hn)化合物號碼PNU95666 ;或羅皮尼羅(ropinir〇le); •PGE1激動劑（例如阿普史塔迪(alpr〇stadi…； 及其醫藥上可接受之鹽及溶劑合物。 如此於又一態樣中，本發明提供一種包含2,3_二氣-N-環戊基-N_[(3S)-吼洛咬-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽連同一種 28 200815341 額外治療劑之組合物。 供人類使用，2,3-二氯環戊基·Ν-[(38)·吡咯啶、3_美 苄醯胺半檸檬酸鹽可單獨投予，但用於人類，通常係就^ 望之投予途徑及標準製藥規範所選用之適當醫藥賦形= 5稀釋劑或載劑混合投予。 例如2,3-二氯七-環戊基·Ν_[(35)“比略咬_3_基]节酿胺 半檸檬酸鹽可呈錠劑、膠囊劑（包括軟明膠膠囊劑）、猶圓 錠、酏劑、溶液劑、或懸浮液劑劑型經口、口含或舌下浐 予，該等劑型可含有矯味劑或著色劑供即刻釋放、延遲釋 10放、修改釋放、持續釋放、雙重釋放、控制釋放、或脈動 式輸送用途。2,3-二氣環戊基-N-[(3S)-吡ΤΙ各啶_3_基]苄醯 胺半檸檬酸鹽也可透過海綿體内注射投予。2,3-二氣-N-環 戊基-N-[(3S)_%[：咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽也可透過快 速分散劑型或快速溶解劑型而投予。 15 此等錠劑可含有賦形劑諸如微晶纖維素、乳糠、檸檬 酸鈉、碳酸鈣、二鹼基磷酸鈣、甘胺酸及澱粉(較佳為玉米 澱粉、馬鈴薯澱粉、或樹薯殿粉）；崩散劑諸如乙醇酸殿粉 鈉、交聯曱基纖維素鈉、及某些錯合矽酸鹽類；及造粒黏 結劑诸如聚乙稀基吼σ各咬_、經基丙基曱基纖維素 20 (HPMC)、羥基丙基纖維素(HPC)、蔗糖、明膠及金合歡膠。 此外’可含括潤滑劑諸如硬脂酸鎂、硬脂酸、山萸酸甘油 酯及滑石。 類似形式之固體組成物也可用於明膠膠囊劑中作為填 充劑。就此方面而言之較佳賦形劑包括乳糠、澱粉、纖維 29 200815341 素礼糖或回为子1聚乙二醇類。用於水性懸浮液劑及/ 或酏劑，本發明化合物及其醫藥上可接受之鹽類可與多種 甜味劑或矯味劑、色料或染料組合；與乳化劑及/或懸浮劑 、且口，以及於稀釋劑諸如水、乙醇、丙二醇及甘油及其組 5 合組合。 -改貝釋放别型及脈動釋放劑型可含有即刻釋放劑型連 同可作為釋放速率改質劑之賦形劑，釋放速率改質劑係包 衣於裝置本體上及/或含括於裝置本體内。釋放速率改質劑 包括但非排它地限於經基丙基曱基纖維素、甲基纖維素、 ⑺羧基甲基纖維素鈉、乙基纖維素、乙酸纖維素、聚環氧乙 烷、黃膠、卡伯瑪(Carbomer)、甲基丙烯酸銨共聚物、氫化 蓖麻油、巴西棕櫚蠟、石蠟、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、鄰 苯二甲酸羥基丙基曱基纖維素'甲基丙烯酸共聚物及其混 合物。改質釋放劑型及脈動釋放劑型可含有一種釋放速率 15改質賦形劑或其組合物。釋放速率改質賦形劑可存在於劑 型内，亦即於基質内，及/或存在於劑型上，亦即於包衣表 面上。 快速分散或溶解劑型調配物(FDDF)可含有下列成分： 阿斯巴甜、甜精鉀、檸檬酸、交聯甲基纖維素鈉、交聯普 20 維隆(cr〇sp〇vidone)、二抗壞血酸、丙烯酸乙酯、乙基纖維 素、明膠、羥基丙基甲基纖維素、硬脂酸鎂、甘露糖醇、 甲基丙烯酸甲酯、薄荷矯味劑、聚乙二醇、煙燻矽氧、二 氧化矽、乙醇酸澱粉鈉、反丁烯二酸硬脂酯鈉、山梨糖醇、 木糖醇。此處使用之分散或溶解等詞係說明FDDF係與所使 30 200815341 用的藥物溶解度有相依性，亦即當藥物為不溶性時，可製 備快速分散劑型；而當藥物為可溶性時，可製備快速溶解 齊丨J ^1。 2,3 -二氯-N-ί哀戍基-N-[(3S) -口比洛ϋ定-3-基]节酸胺半挣 5 檬酸鹽也可經腸道外投藥，例如經靜脈、動脈内、腹内、 鞘内、腦室内、尿道内、胸内、顱内、肌肉或皮下途徑投 藥；或可藉輸注技術投予。用於此等腸道外投予，最佳係 呈無菌水溶液劑型使用，可含有其它物質例如足量鹽或葡 萄糖來讓溶液與血液變成等張性。若有所需，水性溶液劑 10 須經過適當緩衝(較佳緩衝至pH 3至pH 9)。於無菌條件下適 當腸道外調配劑之製備方便由熟諳技藝人士藉標準製藥技 術完成。 供經口及經腸道外投予病人，2,3-二氣_N-環戊基 -N-[(3S)-啦咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽之每曰劑量通常 15 係由10毫克至500毫克（以單劑或平分多劑投予）。 如此’例如’ 2,3-二氣-Ν-ί哀戍基_N_[(3S)-n比洛咬-3-基] 苄醯胺半檸檬酸鹽之錠劑或膠囊劑若屬適當可含有5毫克 至250毫克活性化合物供單次或兩次或更多次投予。醫師將 判定最適合個別病人的實際劑量，劑量將隨特定病人的年 20 齡、體重及反應而改變。前述劑量屬於平均情況之實例。 當然可能有個別情況，此時更高劑量範圍或更低劑量範圍 為較佳，如此也屬於本發明之範圍。熟諳技藝人士瞭解治 療某些疾病（包括PE)中，2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶 -3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽可以「視需要」為基準（亦即若屬 31 200815341 需要或若屬期望）呈單劑投藥。 實例I定劑配方 通常錠劑配方典型含有約0.01毫克至500毫克2,3-二氯 -N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽，錠劑 5 填充重量係由50毫克至1000毫克之範圍。說明10毫克錠劑 之配方實例： 成分 %w/w 實例2之半擰檬酸鹽 10.000* 10 乳糖 64.125 澱粉 21.375 交聯曱基纖維素鈉 3.000 硬脂酸鎂 1.500 *此種數量典型係根據藥物活性調整，且係以自由態鹼 15 之重量為基準。 2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半檸 檬酸鹽也可經鼻内投予或藉吸入投予，方便呈乾粉吸入劑 或氣溶膠喷霧劑劑型而由加壓容器、幫浦、喷霧器或霧化 20 器使用適當推進劑投藥，推進劑例如為二氯二氟甲烷、三 氣氟甲烷、二氣四氟乙烷、氫氟烷諸如1，1，1，2-四氟乙烷 (HFA 134A [商品名])或 1，1，1，2,3,3,3-七氟丙烷(HFA 227EA [商品名])、二氧化碳或其它適當氣體。於加壓氣溶膠之情 況下，單位劑量可藉裝設閥門來輸送經過計量之數量而測 32 200815341 定。加壓容器、幫浦、 之溶液«浮液，例如#用務化器可含有活性化合物 二有潤滑劑，例如三油酸山梨顧。供用於 :有=人入:的膠囊和卡_如由明膠製成)可調配成 σ物與適當粉狀基胸彳如乳糖《粉之粉末 混合物。 「―喷務』配方或I粉配方較佳係、配置成各次計量劑量或 母一喷」含有1毫克至5G毫克2,3·二氣-Ν·環戊基-Ν倘-料咬-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽供輸送至病人。喷霧劑之總 10每日；里係於1毛克至50毫克之範圍，可於全日以單劑或更 常見平分多劑投予。 2,3-一氣_N-環戊基_n-[(3S)_h比咯唆_3-基]节醯胺半檸 棣酸鹽也可調配成透過霧化器投予。霧化器裝置用之配方 可含有下列成分作為增溶劑、乳化劑或懸浮劑··水、乙醇、 15甘醇、甘油、丙二醇、低分子量聚乙二醇類、氣化鈉、氟 化碳類、聚乙二醇醚類、三油酸山梨聚糖酯、油酸。 另外，2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)·吼咯啶-3-基]苄醯胺 半檸檬酸鹽也可呈栓劑或子宮托劑型投予，或可呈凝膠 劑、膠漿劑、洗劑、溶液劑、乳膏劑、軟膏劑、或撒布粉 20 劑之劑型局部施用。2,3_二氣環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽也可經由使用皮膚貼片來經皮或穿 皮投予。化合物也可經由眼、肺臟或直腸途徑投藥。 供眼用，化合物可調配成於等張、PH經過調整之無菌 食鹽水之微粉化懸浮液劑；或較佳調配成於等張、PH經過 33 200815341 調整之無菌水，且視需要可與保藏劑諸如氯化苄烷矯組人 之溶液劑劑型投予。另外，化合物可調配於乳膏劑諸^ 躐。 供局部施用於皮膚，2,3-二氯環戊基屮_[(38)^比咯 啶-3-基]苄醯胺半檸檬酸鹽可調配成含有活性化合物频2 於或溶解於與下縣射之—種或多種之混合物之適當二 貧劑：礦油、液體石蠟、白軟石蠟、丙二醇、聚氧乙二二 氧丙稀化合物、乳化蠛及水。 κ 10 15 20 另外，化合物可調配成適當洗劑或乳膏劑例如懸浮於 或溶解於下列中之一者或多者之混合物： ； 硬脂酸 山梨聚糖酯、聚乙二醇、液體石蠟、波麗索 (P〇lysorbate)60、鯨蠟S旨類、蠟、綠蠟基硬脂醇、2_辛茂^ 二烷醇、节醇及水。 2,3·二氣-N-環戊基-N-[(3S)_咄咯啶基]节酸胺半_ 檬酸鹽也可組合環糊精使用。已知環糊精可與藥物分子形 成包/函體衩體及無包涵體複體。藥物_環糊精之複體之〒成 可修改藥物分子之溶解度、溶解速率、生物利用率及/或安 定性。藥物-環糊精複體通常可用於大部分劑型及大部分犄 藥途徑。至於於藥物直接複合之替代之道，環糊精可用= 為輔助添加劑，例如用作為載劑、稀釋劑或增溶劑。最^ 使用α-環糊精、β-環糊精及γ-環糊精，及適當實例係說明於 WCM^91/11172、WO-A-94/02518及WO-A-98/55148。 經口或經腸道外投予病人，化合物之每日劑量係由 0.01毫克/千克至30毫克/千克（以單劑或平分多劑投予），且 34 200815341 較佳劑量係於0·01毫克/千克至5毫克/千克之範圍。如此， 姜疋知]S有1毛克至〇_4克化合物，若屬適當供單次或兩次或 更夕夂投予。總而言之，醫師將判定最適合任何特定病人 的實際劑量，劑量將隨該特定病人之年齡、體重及反應而 5改k。别述劑量當然只舉例說明平均情況，可能有些情況 適合更高劑量或更低劑量，如此也屬於本發明之範圍。 以經口投予為佳。 仏獸西上使用，2,3_二氯-N環戊基_义[(38)^比咯啶 基]仏胺半檸檬_係根據正㈣醫實務呈適當可接受 10之调配劑投予，獸醫師將判定最適合特定動物的投藥計劃 及投藥途徑。 如此，根據又一態樣，本發明提供含有2,3-二氯·N-環 戊基-N-[(3S)-咄咯啶_3_基]苄醯胺半檸檬酸鹽及醫藥上可 接文之辅劑、稀釋劑及載劑之醫藥調配物。 15 前述組合物可方便以醫藥調配物形式提供，如此包含 如前文定義之組合物連同醫藥上可接受之輔劑、稀釋劑或 載劑之醫藥調配物構成本發明之又一態樣。此種組合物之 個別成分可於分開醫藥調配物或組合醫藥調配物中楯序於' 予或同時投予。 20 當2,3·二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吼洛嘴-3-基]苄趙胺半 檸檬酸鹽係組合第二治療劑使用時，各化合物之劑量將與 單獨使用該化合物時之劑量不同。適當劑量方便由熟諳技 藝人士決定。 圖式簡早說明 35 200815341 下列圖式係供舉例說明本發明； 第1圖：2,3-二氣-N_環戊基-N-[(3S)_吡咯啶_3_基]节醯 胺半檸檬酸鹽之計算得之粉末X光繞射圖樣。 第2圖：2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]节醯 5 胺半檸檬酸鹽，樣本A [實例2A]之經測量得之粉末X光繞射 圖樣(使用布克-AXS公司（Bmker-AXS ltd)D5000粉末X光繞 射儀）。 第3圖：2,3-二氣環戊基-N-[(3S)_吼咯啶-3-基]节醯 胺半檸檬酸鹽，樣本B[實例2]之經測量得之粉末X光繞射圖 10 樣(使用布克-AXS公司D4粉末X光繞射儀）。 第4圖：2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯 胺半檸檬酸鹽樣本A [實例2A]之DSC溫度記錄圖（使用德州 儀器公司Q1000差動掃描量熱計）。 第5圖：2,3-二氯_Ν·環戊基-N-[(3S)-吡咯啶-3-基]节醯 15 胺半檸檬酸鹽樣本B[實例2]之DSC溫度記錄圖（使用柏金艾 瑪公司（Perkin Elmer)鑽石（Diamond)差動掃描量熱計）。 C資施方式:j 較佳實施例之詳細說明 製備例及實例： 20 2,3-二氯_N-環戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3_基]苄醯胺可經 由國際專利申請公告案W02004/110995及國際專利申請案 PCT/IB05/003643(於2006年6月 1 日公告為WO 2006/056884) 所揭示之方法製備，或如後文說明： 全部溫度皆係以。C表示。急速管柱層析術係使用默克 36 200815341 公司（Merck)矽氧凝膠60(9385)進行。固相萃取(SPE)層析術 係使用凡瑞恩百萬龐德洗提劑(Varian Mega Bond Elut(Si) 卡匣（阿納化學公司（Anachem))於15毫米汞柱之真空下進 行。薄層層析術(TLC)係於默克矽氧凝膠60板(5729)上進 5 行。、J：容點係使用嘉蘭坎普（Gallenkamp)MPD350裝置測定且 未經校正。NMR係使用凡瑞恩公司（Varian)-優涅特-伊諾瓦 (Unity Inova)300MHz及400MHz Nmr光譜儀或凡瑞恩公司 水星(Mercury)400MHznmr光譜儀進行。質譜術係使用費尼 根公司（Finnigan)航行者(Navigator)單一四極電噴霧質譜儀 10 或費尼根公司aQa APCI質譜儀進行。 製備例1 : (3S>3-胺基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯之製備

經1小時時間，2N鹽酸（水溶液)(21.81升，43.62莫耳） 於0°C添加至（3S)-3·胺基吡咯啶^3.76千克，43.62莫耳)於甲 15醇（18·8升)之溶液。反應攪拌15分鐘，此時加入b〇c2〇(9.52 千克，43.62莫耳)於曱醇(3.8升）之溶液，同時將反應混合物 維持於5°C或低於5。〇。讓反應混合物以2小時時間溫熱至室 溫，此時於減壓下藉蒸餾去除甲醇。所得水溶液之pH使用 2N鹽酸(水溶液)調整至低於6,然後以ΤΒΜΕ(7·52升）洗滌， 20有機相經分離及拋棄。水相冷卻至5°C，以水性碳酸鉀(6·63 千克，48莫耳於水7·52升)鹼化，產物以二氣甲烷(DCM)(3 X 18.8升）萃取。組合DCM層以水(7 52升)洗滌，溶劑經蒸餾， 37 200815341 且於減壓下以異丙醇IPA(31.3升）置換，獲得標題化合物於 約15升IPA之IPA溶液(5.81千克產物，31.2莫耳，71%)。 'H NMR (MeOD?400MHz)8 ： 1.45 (br s?9H)?1.69 (m，lH)，2.05(m，lH)，3.03(m，lH)，3.33(m，lH)，3.49(m，3H) 5 1透過福羅化學公司（Fluorochem)可得自TCI日本公司 製備例2 : (3S)_3-(環戊基胺基)吡咯啶-1-羧酸第三丁醋

如WO 2006/056884之製備例1之詳細說明，環戊_ 10 (12.7毫升，143毫莫耳）添加至(3S)-3-胺基咄咯啶-1-羧酸第 三丁酯（26·6克，143毫莫耳)於甲醇：甲苯3 : 1(600毫升： 200毫升）之混合物内，反應混合物於室溫於氮下攪拌1.5小 時。然後反應混合物蒸發至50毫升，與甲醇：甲苯3 ·· 1(600 毫升：200毫升）共沸蒸餾三次及於減壓下濃縮。所得殘餘 15 物攝取於甲醇(250毫升），冷卻至〇°C，分成數份加入硼氫化 鈉（7.5克，200.2毫莫耳）。於反應完成後，加水(50毫升）， 蒸發去除溶劑。殘餘物以額外量之水（150毫升)稀釋’以二 氣甲烷(250毫升）萃取三次。有機相經組合，以硫酸鎂脫水 及於減壓下濃縮，獲得標題化合物呈膠狀物，36.1克 20 (99.4%)。 1HNMR(CDC13?400MHz)6 ： 1.18 (brs?lH)?1.28(m52H)? 1.44(s，9H)，1.52(m，2H)，1.67(m，3H)，1.83(m，2H)，2.05(m，lH)，2 38 200815341 • 98(m，lH)，3.08(m，lH)，3.30(m，2H)，3.45(m，lH)，3.58(m，lH); MS APCrm/z 255 [MH]+ 製備例2A : (3S)-3-(環戊基胺基)吡咯啶-1-羧酸第三丁 5 酯之另一種製法 (3S)-3_胺基吼咯啶-1-羧酸第三丁酯於IPA之溶液（約 5.81千克，31.2莫耳於總量約15升IPA之溶液）以異兩醇 (ΙΡΑ)(17·1升）稀釋。以30分鐘時間加入環戊酮(2.62千克， 31.2莫耳），溫度未升高至高於30°C，添加後之殘餘物以異 10 丙醇(3升）洗滌。此種亞胺反應混合物於室溫至少攪拌5小 時。NaBH4(1.3千克，34.3莫耳）於第三丁基甲基_ (ΤΒΜΕ)(11·62升)及IPA(3升)之漿液冷卻至5°C，於此速率添 加甲醇(5.2升）來維持反應溫度低於10°C。然後亞胺於IPA之 溶液以反應溫度維持低於5 °C之速率添加至叾朋氫化鈉混合 15 物，管線以IPA(3升）洗滌。然後反應混合物溫熱至室溫及至 少攪拌8小時。小心以水（11.6升）淬熄反應，然後以 TBME(11.6升）稀釋，此時分離各相。有機相以水（〖I 6升) 洗滌，組合水性洗液以ΤΒΜΕ(11·6升）回萃取。然後組合 ΤΒΜΕ層於減壓下蒸發成油，油溶解於乙酸乙酿，再度蒸發 2〇 一次’獲知標通化合物主油（7·75千克相當於7 61千克產 物，39.9莫耳，96%)。 製備例3 · (3S)-3-(環戊基胺基)吼略σ定_ι_繞酸第三丁酉旨 甲苯磺酸鹽 39 200815341

(^^-(環戊基胺基”比咯啶-丨-羧酸第三丁醋^以千 克，29.9莫耳)於乙酸乙酯（38升）之溶液冷卻至〇〇c，此時加 入曱苯磺酸(5.69千克，29.9莫耳）於乙酸乙酯（85·4升）之溶 5液。所付漿液於〇 C授拌1小時，讓其溫熱至室溫及攪拌隔 夜。漿液經過濾及以乙酸乙酯（7·6升）洗滌，且於55。〇減壓 乾燥隔仪’獲得標題化合物呈白色固體（10.48千克，24.6莫 耳，82%) 〇 'Η NMR(MeOD5300MHz)6 ： 1.49(s59H)?1.68 - 1.83(br 10 m，6H)，2.18(br m，3H)，2.38 (br s，4H)，3.44 _ 3.63(br m，4H)， 3.77(m，lH)，3.92(m，lH)，7.24(d，J= 7.9Hz，2H)，7.72(d，J= 7·9Ηζ，2Η) 製備例4: (3S)-3-[環戊基(2,3-二氣苯甲醯基)胺基]吼咯 啶-1-羧酸第三丁酯

如WO 2006/056884之製備例2之詳細說明，於氮下，三 乙基胺(24毫升，170毫莫耳）添加至製備例2之胺（36.1克， 142毫莫耳)於二氯甲烷(350毫升）之溶液。反應混合物冷卻 至〇°C，逐滴加入2,3-二氯苯甲醯氯(29.8克，142毫莫耳)於 40 200815341 二氣甲烷，將溫度維持低於5°C。然後反應混合物攪拌6小 時，隨後加水(200毫升），分離有機相。然後水層以二氣曱 烷(250毫升）萃取。組合有機相以2M水性氫氧化鈉及10%擰 檬酸溶液洗滌，以硫酸鎂脫水及於減壓下濃縮。粗產物於 5 矽氧凝膠藉管柱層析術純化，以乙酸乙酯：環己烷（1 : 6至 1 : 4至1 : 2至1 : 1體積比)獲得標題產物，50克（82.4%)。 1HNMR(CDCl3?400MHz?rotamers)5 ： 1.43-1.47 (d,9H)? 1.56_1.66(m，5H)，1.79(m，0.5H)，1.98(m，3H)，2.37(m，lH)，2.92( m，0.5H)，3.15(m，0.5H)，3.40(m，lH)，3.58(m，1.5H)，3.74(m，2H)， 10 3.97(m，lH)，7.10(m，lH)，7.24(m，lH)，7.46(d，lH) ; MS APCI+ m/z 427 [MH]+and m/z 327[MH-Boc]+ 製備例4A : (3S)-3-[環戊基(2,3-二氣苯甲醯基)胺基]吡 咯啶-1-羧酸第三丁酯之另一種製法 15 氫氧化鈉溶液([2M水溶液]，31.4升，62.8莫耳）添加至 製備例3之化合物（3 s)-3-(環戊基胺基）吼洛咬· 1 _叛酸第三 丁酯甲苯磺酸鹽（10·48千克，24.6莫耳)於甲苯(34.54升)之經 攪拌之漿液。二相混合物冷卻至〇它，2,3_二氯苯甲醯氣(5 66 千克’ 27.0莫耳)於曱苯(5 4升)之溶液及甲苯容器洗液(3升) 2〇係以反應溫度不超過15(之速率添加。讓所得混合物授摔 至ν 5 j日守恤熱至室溫，此時分離各相。有機相以鹽酸 (陶’ M.4升’ M.4莫耳)及水(M *升)洗滌錄於減壓 下藉添加及蒸错去除又一份甲苯(2〇升）而共沸蒸德乾燥。標 題產物維持呈甲苯溶液(38.25千克溶液含有ι〇·4千克產 41 200815341 物，24.3莫耳，99%)。 實例1 : 2,3·二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)-吡咯啶各基]苄醯胺

如WO 2006/056884實例1之詳細說明，（標題產物之自 5由態鹼）製備例4之經第三丁氧羰基（Boc)保護之產物（46 克，107毫莫耳)於氮下溶解於二氯甲烷(85毫升），反應混合 物以三氟乙酸(85毫升，1莫耳）處理，三氟乙酸係於0°c逐滴 添加。然後反應混合物於室溫擾拌4小時，隨後於減壓下蒸 發去除，與甲苯共沸蒸餾兩次及於減壓下濃縮。所得殘餘 10 物攝取於二氣曱烷(400毫升），以1M水性氫氧化鈉(2〇〇毫升) 洗滌。有機相經分離，以硫酸鎂脫水及於減壓下濃縮。殘 餘物以乙酸乙酯（10倍）共沸蒸餾，然後於減壓下乾燥獲得標 題產物之自由態鹼呈膠狀物，34克(97%)。 實例ΙΑ: 2,3-二氣環戊基-N-[(3S)_吡洛咬·3_基]节醯 15 胺之替代製法 甲苯(4.4升)添加至前述(3S)-3-[環戊基(2,3-二氣苯甲醯 基）胺基]吼咯啶-1-羧酸第三丁酯（製備例4A)於曱苯之溶 液，溶液冷卻至〇°C。加入三氟乙酸(TFA)(13.85·千克，121.5 莫耳，5當量），添加速率維持溫度低m15°c，管線以甲笨(5 20升）清洗。反應混合物加熱至45°C3小時。反應完成時，藉 兩次減壓蒸餾及以甲苯(2 x 20升）置換去除TFA，收集2 X 2〇 升餾出物且拋棄。甲苯溶液冷卻至室溫，以水性氫氧化鈉 42 200815341 ([2M]，36.4升，36·4莫耳)驗化，至水相高於pH 1〇。分離 各相，產物回萃取入水性鹽酸([1M]，31.2升，31.2莫耳）。 有機相進一步以水（1〇·4升）萃取，與鹽酸萃取物組合。組合 酸性水相以甲苯（10·4升）洗滌，然後以水性氫氧化鈉

5 ([5Μ] ’ 10.4升’ 52莫耳)驗化至南於pjj 9。水相以τβμΕ(2 X 31·2升）萃取’組合有機相以水(2〇·8升）洗條。τβμΕ經蒸 顧’於減壓下置換成ΙΡΑ(2χ20升），獲得標題化合物呈jpA 溶液(26.2千克溶液，6.95千克產物，21.2莫耳，87%)。 H NMR(MeOD，300MHz)5 : 1.37 - 1.98(br m，8H)，2.07 -10 2.42(br m，2H)，2.84 - 3.03 (br m，2H)，3.36 (m，2H)，3·77 (m，lH)，3.96(m，lH)，7.27(m，lH)，7.41 (br t，J= 7.9Hz，1H)7 62(br d，J=8.0Hz，lH)， κ例2 · 2,3_二氣善環戊基善[(3s)_口比咯啶基]苄醯 15 胺半檸檬酸鹽之製備

一/争樣酸(2·04千克’ 〇·5當量)於水(2升)之溶液添加至2,3_ 2〇 一㈣一核戊基l[(3S)-吼口各咬-3-基]节醯胺自由態驗(6·95 升高至高於25^。 20千^，1當#)於異丙醇(35升)之溶液，添加速率讓内溫不會 所得漿液於25°C攪拌2小時，隨後經蒸 43 200815341 餾。濾餅經抽吸乾燥，以異丙醇(20.8升）洗滌，且再度抽吸 成儘可能乾燥。潮濕產物於50°C減壓下乾燥隔夜，獲得 (S)-2,3-二氯七-環戊基-N-[(3S)·吡咯啶-3-基]节醯胺半檸檬 酸鹽，呈白色固體(7.7千克，86%)。 NMR(MeOD?300MHz)8 ： 1.37 - 2.04(br m?8H)52.49 (m，2H)，2.69 (d，J= 15·2Ηζ，1Η)，2·78 (d，J= 15·2Ηζ，1Η)，3·27 (m，lH)，3.56(m，lH)，3.75(br m，3H)，4.29(m，lH)，7_33 (m，lH)，7·43 (br t，J= 7.9Hz，lH)，7.64(br* d，J= 7·9Ηζ，1Η)· 實例2A:2,3-二氯善環戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3-基]苄醯 胺半檸檬酸鹽之製備

才宁檬酸(30¾克，〇·ΐ6毫莫耳，〇·5當量)於甲醇(2毫升) 5之/谷液添加至—氣環戊基-N-[(3S)-吼洛咬-3-基]苄 醯胺自由態驗⑽毫克，〇_32毫莫耳)於甲醇(25毫升)之溶 液。於減壓下療發去除溶劑，殘餘物由甲醇(2毫升)_二異丙 基醚（10毫升）結晶。固楚 壓下脫水，獲得（S)-2,3- 20 基]节醯胺半檸檬酸鹽， 固體以一異丙基_(2毫升）洗滌及於減 H—氯環戊基-N-[(3S)-吼洛ϋ定_3· 【，呈白色固體。 44 200815341 lH NMR(400 MHz，MeOH-A)5 : 7.65(lH，d)，7·43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m),3.85-3.68(3H，m)，3.52(lH，m )，3.26(lH，m)，2.72(2H，dd)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，1.92-1.65(3H，m)，1.65-1.40(4H，m). 實例3 : 2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)·-比咯啶-3-基]苄醯 胺鹽酸鹽之製備

10 水性鹽酸溶液(0.32毫升，1.0M，0.32毫莫耳，1.0當量) 添加至2,3-二氯-N-環戊基-N_[(3S)-咄咯啶-3_基]苄醯胺自 由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳）於甲醇(2.5毫升）之溶液。於 減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由甲醇(2毫升)-二異丙基醚 (10毫升）結晶。固體以二異丙基醚(2毫升）洗滌及於減壓下 15 脫水，獲得（S)_2,3-二氯-N_環戊基_N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄 醯胺鹽酸鹽，呈無色晶體。 NMR(400 MHz?MeOH-^)5 : 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m)，3.52(lH，m )，3.26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，1.92-1.65(3H，m)， 20 1.65-1.40(4H，m)· 45 200815341 實例4 : 2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3_基]苄醯 胺氫溴酸鹽之製備

水性氫溴酸溶液(0.32毫升，1.0M，0.32毫莫耳，1.0當 量）添加至2,3 -二氯-Ν-ί哀戊基-N-[(3S)-吼洛咬-3 -基]卡酿胺 自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳）於甲醇(2·5毫升）之溶液。 於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由甲醇(2毫升)-二異丙基醚 (10毫升）結晶。固體以二異丙基醚(2毫升）洗滌及於減壓下 10 脫水，獲得（S)-2,3-二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)_吼咯啶-3-基]苄 醯胺氫溴酸鹽，呈無色晶體。 NMR(400 MHz，MeOH-A)8 ： 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m)，3.52(lH，m )，3.26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，1.92-1.65(3H，m)， 15 1.65-1.40(4H，m). 實例5 ·· 2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3_基]苄醯 胺半乙二磺酸鹽之製備

46 200815341 1，2-乙二磺酸(30毫克，0.16毫莫耳，0.5當量）於曱醇(2 毫升）之溶液添加至2,3-二氯-Ν-ί哀戊基-Ν·[(38)-σΗ：洛°定-3-基]苄醯胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2.5毫升) 之溶液。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5毫 5 升）結晶。固體以二異丙基醚(2毫升）洗滌及於減壓下脫水， 獲得（S)-2,3-二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺半 乙二磺酸鹽，呈白色固體。 lR NMR(400 MHz?MeOH-^)5 : 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m)，3.52(lH，m 10 )，3.26(lH，m)，3.22(2H，s)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，l .92-1. 65(3H，m)，1.65-1.40(4H，m). 實例6 : 2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)·吡咯啶-3-基]苄醯 胺乙二磺酸鹽之製備

1,2-乙二磺酸(61毫克，0.32毫莫耳，1.0當量)於甲醇(2 毫升）之溶液添加至2,3 -二氣-N-ί辰戍基-N-[(3S)-吼ϋ各11定-3-基]苄醯胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2.5毫升) 20 之溶液。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5毫 升）結晶。固體於減壓下脫水，獲得（S)-2,3-二氯_Ν_環戊基 47 200815341 -N_[(3S)-咄咯啶-3_基]苄醯胺乙二磺酸鹽，呈白色固體。 !H NMR(400 MHz5MeOH-^)8 ： 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m)，3.52(lH，m )，3.26(lH，m)，3.22(4H，s)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，l .92-1. 5 65(3H，m)，1.65-1.40(4H，m)· 實例7 : 2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)_吼咯啶-3-基]苄醯 胺反丁烯二酸鹽之製備

10 反丁烯二酸(37毫克，0.32毫莫耳，1.0當量）於甲醇(2 宅升）之溶液添加至2,3 -二氣-N-壞戊基-N-[(3S) -π比洛σ定-3_ 基]苄醯胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2.5毫升) 之溶液。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5毫 15 升）結晶。固體於減壓下脫水，獲得（S)-2,3-二氯-Ν-環戊基 -N-[(3S)-咄咯啶-3-基]苄醯胺反丁烯二酸鹽，呈白色固體。 lH NMR(400 MHz，MeOH-A)5 ： 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，6.70(2H，s)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m) ，3.52(lH，m)，3.26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，1.92-l· 20 65(3H，m)，1.65-1.40(4H，m). 48 200815341 實例8 : 2,3·二氯-Ν-ί辰戍基-N-[(3S) -σ比洛唆-3-基]节酿 胺L-酒石酸鹽之製備

n L-(+)-H02CCH(0H)CH(0H)C02H L-(+)-酒石酸(48毫克，0.32毫莫耳，1.0當量）於甲醇(2 5 毫升）之溶液添加至2,3 -二氣-N-ί哀戍基-N-[(3S)-吼洛ϋ定-3_ 基]苄醯胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2.5毫升) 之溶液。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5毫 升）結晶。固體於減壓下脫水獲得（S)-2,3-二氯-Ν-環戊基 -N-[(3S)-吡咯啶-3-基]苄醯胺L-酒石酸鹽，呈白色固體。 10 !H NMR(400 MHz?MeOH-^)§ : 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.40(2H，s)，4.34(lH，m)，3.85-3.68(3H，m) ，3.52(lH，m)，3.26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，l .92-1. 65(3H，m)，1.65-1.40(4H，m)· 15 實例9 : 2,3_二氯-N-環戊基_N-[(3S)-吼咯啶_3_基]苄醯 胺D·酒石酸鹽之製備

D_㈠-酒石酸(48毫克，0.32毫莫耳，1.0當量）於甲醇(2 49 200815341 毫升）之洛液添加至2,3-二氯·Ν-環戊基_N_[(3S)•吡咯啶_3_ 基]苄醢胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2·5毫升) 之溶浪於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5毫 升）結晶。固體於減壓下脫水，獲得(s)_2,3_二氣_Ν_環戊基 5 -N-[(3S)』比略咬_3_基]苄醯胺D-酒石酸鹽，呈白色固體。 iji NMR(400 MHz?MeOH-^)8 : 7.65(lH?d)?7.43 (lH，dd)，7.3〇(lH，dd)，4.40(2H，s)，4.34(lH，m)，3.85-3.68^ 3.52(lHM3.26(lH?m)?2.60-2.42(2H?m)a.95(lH?m)?1.92-l. 實例10 · 2,3_一氣-N-環戊基-N-[(3S)-吡咯啶_3_基]苄醯 胺半瑞酸鹽之製備

水性瑞1(〇」6毫升，1.0M，0.16毫莫耳，〇 5當量)於甲 15醇(2毫井）之浴液添加至2,3_二氯-N-環戊基-N_[(3S)-吼咯啶 _3-基]节醢胺自由態鹼（105毫克，〇·32毫莫耳)於甲醇(2.5毫 升）之溶浪。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5 毫升）結晶。固體於減壓下脫水，獲得(S)_2,3_二氯環戊 基-N-[(3Sh吡咯啶-3-基]苄醯胺半硫酸鹽，呈結晶性白色固 20 體。 50 200815341 NMR(400 MHz?MeOH-^)8 ·· 7.65(lH，d)， 7.43(lH5dd) 57.30(lH5dd)?4.34(lH?m)?3.85-3.68(3H5m)53.52(lH? m)，3.26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.95(lH，m)，1.92_1.65(3H，m)，1.6 5-1.40(4H，m)· 實例11 : 2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吡咯啶-3-基]苄醯 胺乙酸鹽之製備

10 水性乙酸(0.32毫升，1.0M，0.32毫莫耳，1.0當量）於甲 醇(2毫升）之溶液添加至2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶 -3-基]苄醯胺自由態鹼（105毫克，0.32毫莫耳)於甲醇(2.5毫 升）之溶液。於減壓下蒸發去除溶劑，殘餘物由乙酸乙酯（5 毫升）結晶。固體於減壓下脫水，獲得（S)-2,3-二氯-N-環戊 15 基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]苄醯胺乙酸鹽，呈結晶性白色固 體。 !H NMR(400 MHz，MeOH-A)5 ： 7.65(lH，d)，7.43 (lH，dd)，7.30(lH，dd)，4.34(lH，m)，3.85_3.68(3H，m)，3.52(lH，m)，3 •26(lH，m)，2.60-2.42(2H，m)，1.96(3H，m)，1.95(lH，m)，l.92-1.65(3 20 H，m)，1.65-1.40(4H，m)。 51 200815341 藉PXRD及DSC分析決定2,3_二氯-Ν·環戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽之特性 (a)PXRD 分析 ⑴計算值 模擬粉末X光繞射圖樣（第1圖）係經由使用阿色拉利材 料工作室（Accelrys Materials Studio)[第3版]之「反射粉末繞 射」模組，於室溫測得之2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)-吼口各 啶_3-基]苄醯胺單晶結構求出。各案中之相關計算參數為： 波長= 1.540562埃(Cu κα〇 偏光因數=0.5 假-福各特輪廓線（Pseudo_Voigt Profile) (U=0.0i，V=-0.001，w=0.002) 所得具有相對強度高於20%之粉末X光繞射峰及其2Θ 值顯示於表3。 表3 2,3_二氯-Ν-環戊基-N-[(3S)-吼咯啶-3-基]节醯胺半檸 檬酸鹽之計算得之PXRD峰值資料 2Θ/度 相對強度/% 2Θ/度 相對強度 8.6 20.0 18.5 25.7 12.9 100.0 19.5 28.7 14.5 33.1 20.0 75.7 15.0 49.9 21.2 33.6 15.2 36.8 22.5 32.7 15.6 22.5 23.5 23.8 16.9 20.6 25.4 25.2 18.4 41.3 27.3 25.4 52 200815341 如热清技藝之晶相學技師已知，於給定表中各峰之相 對強度因多項因素而改變，例如又光束中晶體之方向性影 響，或分析材料之純度或樣本結晶度。尖峰位置也可遷移 來獲得樣本向度變化，但於給定表中之尖峰位置將維持實 5質上如所定義。 热ό曰技藝之晶相學技師也瞭解使用不同波長之測量值 將根據布拉格方程式-ηλ=2(1 sin Θ獲得不同的位移。 經由使用其它波長所產生的額外PXRD圖樣被視為本 發明之結晶材料之PXRD圖樣之另_個代表圖，如此也屬於 10 本發明之範圍。 (ii)測量值 ’3氣環戊基-N-[(3S)-吼略咬—3-基]苄醯胺半檸 樣酸鹽[樣本A]之粉末χ光圖樣（第2圖）係使用布克 (驗er_⑻繞㈣獲得，計算巾係使用粉 化α石英(ICDD 4卜1〇45)標準品。資料係於室溫於2㊀角度範 圍2度40度才木用0 〇2度之階級大小收集。資料係於各階級 收集3.5秒。有相對強度大於2〇%之所得粉末χ光繞射峰及 其2Θ值±〇·1度顯示於表4。經由與^圖所示計算得之粉末χ 光繞射圖樣對齊，可進一步校準尖峰位置。 20 53 200815341 表4 2,3-二氯-N-環戊基-Ν__，各紅基]节醯胺半檸

l±i TC/ί! tt>fe Γ I 2Θ/度 相對強度/% 8.6 36.5 8.7 42.0 12.9 22.9 14.5 22.0 15.0 24.0 16.9 27.2 17.3 24.3 17.4 29.5 18.4 24.7 19.5 24.3 20.0 100.0 21.7 59.4 21.7 61.2 227? 23.5 25.3 26.1 26.1 26.3 27.3 30.3 33.1 35.4 39.6 39.7 相對強度/%^ 20.9 29.9 41.0 35.1 45.8 24.0 41.0 25.4 20.2 20.0 23.1 28.6 5 $外’2,3·二氯·Ν.環戊基_Ν_[(斗比批3_基]节酿胺 半檸檬酸鹽[樣本Β]之粉末Χ光繞射圖樣(第3圖）係使用布克 -AXS公司光繞射儀獲得，該財X光繞射儀裝配 有自動樣本更換n、θ__角器、自動光束發散裂隙及pSD 凡泰克(Vantec)，測器。經由將樣本安襄於低背景腔穴石夕 10晶圓试驗件座上來準備接受分析。試驗件旋轉同時以銅 κ-od X光(波長= 1.5406埃）照射，X光管係於4〇 kV/35mA操 作。以測角器於連續模式集合進行分析，每〇 〇18度階級進 行0.2秒的計數經歷2度至55度之2Θ範圍。有相對強度大於 25%之所得粉末X光繞射峰及其20值±〇1度顯示於表5。經 15由與第1圖所示計算得之粉末X光繞射圖樣對齊，可進一步 校準尖峰位置。 54 200815341 表4 2,3_二氯鼻環戊基善[(38)-吼略咬_3-基]节||胺半檸檬酸鹽[樣本B]之測量得之PXRD尖峰資料 2Θ/度 8.5 12.9 14.5 15.0 15.1 17.2 18.4 15.5 19.5 20.0 21.2 21.6 22.5 23.5 相對強度/% 41.9 97.5 32.9 52.0 35.7 49.9 56.8 39.3 40.1 100.0 40.8 86.1 45.5 44.2 2Θ/度 23.5 25.3 26.0 26.0 26.4 26.5 26.9 27.3 27.5 30.3 31.2 39.5 39.6 相對強度/% 44.1 52.6 73.5 77.8 41.6 41.1 38.0 61.6 26.3 32.9 29.8 37.2 30.3 5 (b)DSC 分析 DSC溫度記錄圖（第4圖）係由2.382毫克2,3-二氯環 戍基_N_[(3S)-吼咯啶冬基]节醯胺半檸檬酸鹽[樣本A]之樣 本於有盍鋁盤内使用德州儀器公司卩1〇〇〇差動掃描量熱計 計算。樣本係於氮氣爐氣氛下以50立方厘米/分鐘掃除以每 1〇分鐘2〇°C之速率由3〇°C加熱至300°C。於206°C觀察得鮮明 熔體吸熱峰，接著為多次分解事件。 另外’ DSC溫度記錄圖（第5圖）係使用柏金艾瑪公司鑽 石差動掃描量熱計由與通風盤中的3.008毫克2,3-二氯-N-%戊基况[(3S)_P比咯啶-3-基]节醯胺半檸檬酸鹽[樣本B]樣 15本f生。樣本於以4〇立方厘米/分鐘掃除之氮氣爐氣氛中， 乂每刀4里2〇(：之速率由周圍溫度加熱至3〇(rc。於213。〇觀 $彳_體吸熱峰，接著為多個分解事件。η%峰溫由娜。c 55 200815341 (第4圖）升高至2i3°c (第5圖）歸因於可能因樣本B(第5圖）相 對於樣本A(第4圖）之純度增高而非指示形式的改^ ° 生物活性 藥理活性部分2,3-二氯-N-環戊基-N-[(3S)4洛咬I基] 5苄酿胺之生物活性係於國際專利申睛案 PCT/IB05/003643(於2006年6月 1 日公告為WO 2006/056884) 中說明。該案之實例1顯示NRIKi=15 nM及SRIKi=5 mM。 該案中實例化合物之NRIKi及SRIKi測定如下。 化合物係使用閃爍近端檢定分析（SPA)技術，藉其抑制 1〇 選擇性放射性配體於人血清素及正腎上腺素轉運因子（分 別為SERT及NET)之結合能力來測試生物活性。SPA結合係 使用放射性配體3H-希坦羅潘（citalopram)及3H-尼索西丁 (nisoxetine)，使用由可表現編碼SERT或NET之人 cDNA(hSERT、hNET)對人cDNA(hSERT、hNET)之細胞系 15 所製備之細胞膜製劑進行SPA結合反應。 i)細胞培養方法 可表現各種轉運因子之人胎腎細胞（HEK-293)係使用 標準細胞技術，於37°C於潮濕氣氛含5%二氧化碳存在下， 維持於225平方厘米燒瓶中之50毫升生長培養基（參考培養 20基及緩衝液之組成）成為連續培養。細胞係以1 : 3-1 : 4之比 由90%融合單層繼代培養。 為了收穫細胞，由單層中取出生長培養基，細胞以細 胞溶解溶液（西格瑪公司（Sigma))共同培養至顯示解離現 象。隨後由燒瓶底部敲擊倒出細胞，於進一步使用前藉離 56 200815341 心造粒供儲存(於_8(rc冷凍儲存）。 ii) 細胞膜製劑 、、田I丸粒於冰上解;東，相對於每丨毫升填充之細胞量， 再度懸浮於3毫升膜製劑緩衝液(參考培養基及缓衝液之組 5成^使用渴旋混合機來分散細胞丸粒。 於冰上i口養10分鐘後，使用手持式均化器又個別均化 四-人間^ 10秒。然後均化物於1〇75 X g於4。〇離心2〇分鐘。 然後收集上清液且維持上清液。初步細胞和細胞核丸 粒(P1)再度均化，隨後使用前述條件再度均化及離心，上清 10液經收集且與第一次離心所得之上清液匯集。 匯集之上清液於35000 x g於4°c離心3〇分鐘，拋棄上清 液，然後丸粒(P2)相對於每丨毫升原先填充之細胞量，再度 懸洋於1¾升膜製劑緩衝液。然後測定蛋白質濃度，膜懸浮 液最後以設定量之整份冷凍，儲存於_8(rc供檢定分析使 15用。 iii) 檢定分析方法 A·個別膜批次之最佳檢定分析條件之測定 特定SPA珠粒類型依各轉運因子而異，小麥胚芽凝集素 包衣之矽酸釔(YSi WGA)SPA珠粒用於hSERT檢定分析，而 20 WGA包衣之聚乙烯基甲苯(PVT WGA)SPA珠粒用於hNET 檢定分析。對使用之各批次膜，測定珠粒及膜之最佳濃度。 使用各轉運因子之特定氚化放射性配體(3H-希坦羅潘 用於hSERT，而3H-尼索西丁用於hNET)。檢定分析之自由 態放射性配體濃度係以總自由態放射性配體濃度之百分比 57 200815341 表示，來算出放射性配體之耗盡估值。兩種轉運因子之檢 定分析中放射性配體之耗盡係低於3 〇 %，來確保有足量放 射性配體可供用於結合。放射性配體的耗盡值也可用來當 使用新批次膜時選擇最佳檢定分析條件之用。 5 較放射性配體對個別轉運因子之親和力係於選定之 蛋白質濃度和珠粒濃纟’對各批次膜;則定。係藉測定〖〇濃 度亦即5 0 %轉運因子結合位置被占用的自由態放射性配體 濃度來達成。 於各批次膜之放射性配體之平均KD係由至少三次分開 10檢定分析所得資料測定。隨後平均KD使用膜批次的輪廓資 料用於全部檢定分析，來允許使用Cheng&Pruss〇ff所測定 之方法判定所研究之化合物之Κι值（Cheng YC及Rrus〇ff WH，造成酶反應之50%抑制之抑制常數(Κι)與抑制劑濃度 間之關係。Biochem Pharmacol 1973;22 ·· 2099-3108)。 15 B.檢定分析方案 珠粒/膜錯合物之製備 而要里之膜於冰上解凍，添加至預定量珠粒於檢定分 析緩衝液之懸浮液。於振搖器上於代溫度相對於每毫克珠 粒培養預定量之蛋白f來將雜預先偶合2小時。 20 隨如純/频體於865 X g離^5分鐘。所得丸粒再懸 洋於檢m緩崎，重㈣絲步驟。然後最終丸粒 於最終檢定分析所需特定濃度再懸浮於檢定分析緩衝液。 配體之製備 [H]放射性配體備料整份於檢定分析緩衝液中稀釋，獲 58 200815341 得預定最終檢定分析濃度低於平衡解離常數(kd)值。 化合物板之製備 全部試驗化合物皆係以4 mM於100%二甲亞颯(DMSO) 之濃度而由乾樣本製備。化合物於0.75% DMSO於重蒸餾水 5中稀釋，獲得於384孔板之適當試驗濃度來獲得終容積2〇微 升。 最終檢定分析緩衝液添加至板之特定孔，允許隨後測 量總放射性配體之結合。此外，對各轉運因子檢定分析為 特異性之高濃度化合物20微升隨後添加至預定孔，來測定 10 非特異性結合(NSB)。福西丁（flUOXetine)(l〇pM終檢定分析 漠度）用於hSERT，及戴希帕明（desipramine)(40pM終檢定分 析濃度）用於hNET。 用於個別轉運因子檢定分析，20微升所製備之特定放 射性配體添加至最終檢定分析板之各孔（含有化合物溶 15 液）。隨後，20微升相對應之珠粒/膜複體添加至最終檢定分 析板之各孔’確保懸浮液徹底混合。各板經密封於室溫土立 養1小時伴以振搖。隨後板又培養6小時，適應於暗處，隨 後讀取。 C.資料分析 20 經由從總結合讀數的平均值中扣掉平均NSB讀數（每 分鐘計數或以cpm表示）算出每板的檢定分析窗（特異性衾士 合）。隨後每孔的cpm讀數(扣除平均NSB)係以板窗的百分比 表示，來測定與轉運因子結合之放射性配體量。 此等數值係對試驗化合物濃度作圖，彎曲抑制濃度效 59 200815341 應曲線使用四參數邏輯方程式及自由匹配參數匹配資料， 獲得冗5〇值(於神經傳遞物質轉運因子抑制5〇%特異性結合 之所需化合物濃度）。 然後使用Cheng-Prusoff方程式由iCs〇值算出抑制解離 5 常數(Ki)值。 於測定爻試化合物之個別值之後，計算總幾何平 均，連同95%信度間隔和n值，此處n為個別心值的總數。 iv)培養基和緩衝液

hSERT細胞生長培養基 10 DMEM，10%(w/v)透析 FCS 2 mM L-麩胺（由200 mM備料稀釋） 25 mM HEPES(由1 Μ備料稀釋）

250微克/¾升基因提辛(genetecin) hNET細胞生長培養基 15 DMEM，10%(w/v)FCS 2 mM L-麩胺（由200 mM備料稀釋） 25 mM HEPES(由1 Μ備料稀釋） 250微克/毫升基因提辛 膜製備緩衝液 20 20 mM HEPES(以重蒸館水由1 Μ備料稀釋獲得），ρΗ 7.4於室溫，儲存於代，於使用前，每5Q毫升緩衝液溶解 一顆完整蛋白酶抑制劑錠。 檢定分析緩衝液(1.5倍終檢定分析濃度） 30 mM HEPES(以重蒸餾水由丨“備料稀釋），及1⑽ 200815341 mM NaCl(以重蒸餾水由5 Μ備料稀釋），pH 7·4於室溫儲存 於4〇C。 I：圖式簡單說明3 第1圖：2,3_二氯-N-環戊基_N-[(3S)-咄咯啶-3-基]节醯 5 胺半擰檬酸鹽之計算得之粉末X光繞射圖樣。 第2圖：2,3_二氣_N-環戊基-N-[(3S)-吡咯啶-3-基]节醯 胺半檸檬酸鹽，樣本A [實例2A]之經測量得之粉末X光繞射 圖樣(使用布克-AXS公司（Bruker-AXS ltd)D5000粉末X光繞 射儀）。 10 第3圖：2,3-二氣-N-環戊基-N-[(3S)-咄咯啶-3-基]节醯 胺半檸檬酸鹽，樣本B[實例2]之經測量得之粉末X光繞射圖 樣(使用布克-AXS公司D4粉末X光繞射儀）。 第4圖：2,3_二氯-N-環戊基-N-[(3S)“比略啶冬基]苄醯 胺半檸檬酸鹽樣本A [實例2A]之DSC溫度記錄圖（使用德州 15 儀器公司Q1000差動掃描量熱計）。 第5圖：2,3_二氯·Ν_環戊基-N-[(3S)“比略啶_3-基]苄醯 胺半檸檬酸鹽樣本B[實例2]之DSC溫度記錄圖（使用柏金艾 瑪公司（Perkin Elmer)鑽石（Diamond)差動掃描量熱計）。 【主要元件符號說明】

Claims (1)

1. 200815341 十、申請專利範圍： 匕一種2,3-二氯|環戊基_N_[(3S)·吡咯啶各基]节醯胺半 檸檬酸鹽。 2·如申請專利範圍第1項之化合物，係以粉末χ光繞射圖樣 5 (PXRD)樣式為其特徵，該PXRD樣式當使用Cu Κα輻射 (波長— 1.5406埃）測定時顯示主峰於12.9、15.0、15.2、 H4、及2〇_〇度2Θ±0·1 度。 3·種醫藥或獸醫組成物，包含如申請專利範圍第1或2項 之化合物連同醫藥上或獸醫上可接受之稀釋劑或載劑 10 以及額外選擇性賦形劑。 4·如申請專利範圍第3項之組成物，其係呈錠劑劑型。 5·如申請專利範圍第4項之組成物，其中該額外選擇性成 为係達自於壓縮助劑、對錠劑提供光澤之添加劑、崩散 劑及潤滑劑。 15 6·如申請專利範圍第3項之組成物，其係呈膠囊劑劑型。 7.如申凊專利範圍第6項之組成物，其中該額外選擇性賦 形劑係選自於惰性稀釋劑、經乾燥之崩散劑及潤滑劑。 8· —種無菌水性溶液劑，包含如申請專利範圍第丨或2項之 化合物，且適合供腸道外投藥使用。 9.如申明專利範圍笫1或2項之化合物，其係用於人體治療 尿失禁、疼痛、纖維肌痛、注意力缺乏過動症(ADHD)、 或憂誊症。 10·如申請專利範圍第9項之化合物，其係用於人體治療尿 失禁。 62 200815341 11. 如申請專利範圍第1或2項之化合物，其係用於動物治療 尿失禁。 12. 如申請專利範圍第10或11項之化合物，其中該尿失禁為 真性尿失禁（GSI)、應力型尿失禁（SUI)、或老年人類或 5 動物之尿失禁。 13. —種如申請專利範圍第1或2項之化合物用於製造用於 人類治療尿失禁、疼痛、纖維肌痛、ADHD、或憂鬱症 之藥物之用途。 14. 如申請專利範圍第13項之用途，其係用於人體治療尿失 10 禁。 15. —種如申請專利範圍第1或2項之化合物用於製造動物 體尿失禁治療用藥之用途。 16. 如申請專利範圍第14或15項之用途，其中該尿失禁為真 性尿失禁（GSI)、應力型尿失禁（SUI)、或老年人類或動 15 物之尿失禁。 63