TW200400947A - N, N-disubstituted diazocycloalkanes - Google Patents

Description

玖、發明說明： I[發曰月所屬_^技射宁領域j 本發明係關於具有血清促進素受激性（serotoninergic) 受體親合性之新穎N，N-雙取代重氮環烷、其藥物組成物以 及此類化合物與組成物之使用。 【先騎技術3 在哺乳動物之中，出尿(排尿)是一種複雜的過程，需配 合膀胱、其内部與外在括約肌、骨盆底肌肉組織與三種層 次肌肉之神經控制（膀胱壁或括約肌本身、脊神經自律中心 以及大腦皮質控制腦幹(P〇ns)之橋腦出尿中心（Pmc)程級 之中柩神經系統）等整體作用（De Groat，σ/ Incontinence, Ciba Foundation Symposium 151:27, 1990)。排 尿起因於迫尿肌收縮，其包含組合平滑肌纖維，並由薦骨 脊神經之副交感自律系統所控制。簡單的排尿反射始於感 覺神經對於疼痛、溫度與膨脹的反應，其由膀胱傳送至薦 骨脊神經。然而，膀胱的感覺神經束亦可傳送至pMc，產 生神經脈衝以正常壓制反射狐皮f抑制作用時薦骨脊神經 之抑制’並且放鬆骨盆底與外在括約肌之肌肉。最後，迫 尿肌收縮並排尿。下尿道功能的異常，例如排尿困難、尿 失不與遺尿症，乃疋-般大見之症狀。排尿困難包括 頻尿、夜尿症與急尿，可由膀胱炎（包括間質性膀胱炎）、攝 護腺炎或良性前列腺肥大症(BpH)(其影響約7()%之年長男 性）、或神經失調所引起。尿失禁症狀包括壓力性尿失苹、 急性尿失禁、溢出性尿失禁與混合性尿失禁。遺尿症意指 400947 尿液於夜晚或睡眠期間不自主的流動。 早期下尿道神經肌失能的治療包含投予直接作用於膀胱 肌之化合物，例如黃酮哌酯（flavoxate) ’為一種解痙藥 (Ruffman，/ /故舱a 丛:317 ’ 1988)，其對於PMC亦有活 5性(Guarneri以（Dr喂o/7bi%，迚:91, 1994)，或抗膽鹼化合 物如奥昔布寧(〇xybutynin)(Anderss〇n，喂延々π，丨娜)與 把特羅定（tolterodine) (Nilvebrant, Zz/e 制·姐(22-23):2549,

20〇1)。利用ar腎上腺素受體拮抗劑治療βρη也很常見，但必 須根據不同的作用機制(Lepor，42:483, 1993)。然而， 10直接抑制骨盆肌肉組織（包括迫尿肌）的治療方式可能有副作 用，例如排尿不全或調節性麻痒、心搏過速與乾嘴症(Andersson, ^:477, 1988)。因此’較佳情況為使用透過中樞神經系 統而作用的化合物，舉例而言，以回復排尿機制正常功能的 方式調控薦骨脊神經反射與/或PMC抑制途徑。 15 美國專利No. 5,346,896揭示了 5-HTia結合劑，其可用於

CNS失調的治療，例如焦慮。 歐洲專利EP 0924205揭示了芳基哌嗪化合物，可結合 於5·ΗΤιΑ受體。 【号务明内】 20 本發明所提供之化合物以一般式I表示：

200400947

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MetaChiml ODM™為第_ csp。溶f _csp複合物形成 的主要機轉係透過吸引性交互作用，不過其包含複合物亦 10扮演重要角色。氫鍵結合、碟酸根-鱗酸根與偶極堆疊對於 跑似^1™ 〇應的轉分解相當《。當溶質分子未含 有溶質-管柱交互作用所需之基團時’常需要進行衍生= 用。仿生作用通常指苯甲基動安類之形成，亦為某些強極 性分子如胺與緩酸所需，否則其會透過非對映特異性與靜 15相進行強力交互作用。 依據本發明之一較佳實施例，式丨之“為氟原子。更佳 之障况為，R1為氟原子且位於笨環上的2號位置。 較佳之R2基為未經取代之環己基。 〃車乂佳之R3取代基為燒氧基，更佳為甲氧基且最佳為甲 20氣基並位於笨環上的2號位置。 一 本發明中較佳之化合物為〖_[4_環己基_4_羥基氟 笨基）丁基]_4_(2_曱氧基笨基)_派嘻且其結構如式Η : 13 2〇〇4〇〇947

其中Z1與Z2代表對稱中心。式II之化合物存在下列四種立體 異構物： ch3

5 這些化合物命名為： l-[(3R，4S)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基)-丁基]_4_(2_ 甲氧基苯基)-°底唤、l-[(3S，4R)-4-環己基-4-經基-3-(2-氟苯 基)-丁基]-4-(2-甲氧基苯基)-〇底嗪、l_[(3R，4R)-4-環己基_4_ 羥基-3-(2-氟苯基）-丁基]-4-(2-甲氧基苯基）_哌嗪以及 10 H(3S，4S)-4-環己基_4-羥基-3-(2-氟苯基）_ 丁基]_4·(2_甲氧 基苯基)-β底秦。 式II化合物可被分離成非對映異構物對，舉例而言，以 14 200400947 TLC進行分離。此處所指之非對映異構物對包括高TLC Rf 值之非對映異構物；以及低TLCRf值之非對映異構物。 依據習知技藝之方法，此類非對映異構物可進一步進 行增量反應以成為特定對映異構物或分解成單一對映異構 5 物，其如此處所描述者。 在另一較佳實施例中，本發明提供了化合物1-[4-環己 基-4-羥基-3-(2-氟苯基)-丁基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)-苯 基)-哌嗪，其中存在四種立體異構物： l-[(3R,4S)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁 10 基]-4-(2-(2,2,2-二氣乙乳基)-苯基)-旅°秦， l-[(3S，4R)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁 基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)-苯基)-哌嗪， l-[(3R,4R)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁 基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)-苯基)-哌嗪，以及 15 1 -[(3S，4S)-4- ί哀己基-4-髮基-3-(2-氟苯基）-丁 基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)-苯基)-哌嗪， 以及其對映異構物、光學異構物、非對映異構物、N-氧化物（例如N-旅嗓氧化物）、結晶形式、水合物、媒合物與 藥學上可接受之鹽類。 20 較佳者為3R,4S與3R，4R。最佳者為3R,4S。 合併療法 在某些實施例中，尿道失調之治療可藉由投予式I之化 合物並另外配合5-HTlA拮抗劑，或配合一或多種其他類受 體之拮抗劑。在較佳之實施例中，式I化合物之投予配合了 15 200400947 〇c 1 -腎上腺素或毒覃驗受體抬抗劑。 在另外的實施例中，下尿道疾病之治療可藉由投予式! 之化合物並配合一或多種環氧酶抑制劑，其可抑制Coxi與 C0X2異構酶’或僅抑制COX2異構酶，及其NO供體衍生物。 5 配合式I化合物治療之抗毒簟驗樂物’其範例有奥昔布 寧（oxybutynin)、托特羅定（tolterodine)、darifenacin 與 temiverine。

式I之化合物可配合％-腎上腺素拮抗劑投予，以治療下 尿道症候群’無論其是否與BPH有關。配合式〗化合物投予 10 之較佳ar腎上腺素拮抗劑為，舉例而言，prazosin、 doxazosin、terazosin、alfuzosin與tamsulosin ° 其他配合式I 化合物投予之ar腎上腺素拮抗劑則揭示於美國專利N〇. 5,990,114 ; 6,306,861 ; 6,365,591 ; 6,387,909 ;與6,403,594。 配合式I化合物治療之5-HT1 a括抗劑，其範例揭示於

15 Leonardi等人，J. Pharmacol. Exp. Ther. 299: 1027-1037， 2001 (例如Rec 15/3079)、美國專利No. 6,071，920，其他笨 0底嗓衍生物則揭示於WO 99/06383與2002年10月7日建標之 美國專利說明書申請號No. 10/266,088與10/266,104。其他 5-HT1A拮抗劑包括DU-125530與其相關化合物則揭示於美 2〇 國專利No. 5,462,942，而robalzotan與其相關化合物揭示於 WO 95/1189卜 配合式I化合物治療之選擇性COX2抑制劑，其範例在 沒有侷限之情況下有 nimesulide、meloxicam、rofecoxib、 西里柯斯比（celecoxib)、parecoxib與valdecoxib。其他選擇 16 200400947 性COX2抑制劑之範例，在沒有侷限之情況下，揭示於US 6,440,963。非選擇性COX1-COX2抑制劑之範例，在沒有侷 限之情況下，包含乙醯柳酸、尼氟滅酸(niflumic acid)、氟 芬那酸（flufenamic acid)、enfenamic acid、曱氯芬那酸 5 (meclofenamic acid)、托芬那酸（tolfenmic acid)、 thiaprophenic acid、布洛芬（ibuprofen)、奈普生（naproxen)、 酮洛芬(ketoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、furprofen、吲 α朵美辛（indomethacin)、acemethacin、proglumethacin、g多 羅多 g(ketorolac)、diclofenac、伊托多雷(etodolac)、舒林酸 10 (sulindac)、fentiazac、替諾昔康（tenoxicam)、氣諾昔康 (lornoxicam) 、cynnoxicam 、ibuproxam 、納沒痛 (nabumetone) ' 托美丁（tolmetin)、氨托美丁（amtolmetin) o 因此’前述之每一藥物為COX抑制劑之非侷限範例，可配 合式I之化合物投予。 15 配合式1化合物投予之COX抑制劑衍生物，其範例為含 有磷酸鹽（硝氧基）或亞硝酸鹽基之c 〇 X抑制劑衍生物，舉例 而言，如WO 98/09948所揭示者，其可於活體内釋放N〇。 #物組成物 本發明進一步提供了藥物組成物，其包含有式I之化合 20物或對映異構物、非對映異構物、N-氧化物、結晶形式、 水合物、媒合物、活性代謝物或化合物之藥學上可接受鹽 類。藥物組成物亦包括選擇性添加物，例如藥學上可接受 載體或稀釋劑、香料、甘味劑、防腐劑 '染料、黏結劑、 懸浮劑、滲透劑、染色劑、粉碎劑、賦形劑、稀釋劑、潤 17 200400947 滑劑、吸收增進劑、殺菌劑及其類似物、安定劑、塑化劑、 食用油、或合併任何兩種或以上之該添加物。 適用之藥學上可接受載體或稀釋劑包括了乙醇、水、 甘油、蘆薈膠、尿囊素、甘油、維生素-A與E油、礦物油、 5 填酸鹽緩衝溶液、PPG2肉豆謹丙酸醋、碟酸鎂、磷酸鉀、 植物油、動物油與solketal，但不偈限於此。

適用之黏結劑包括了澱粉、凝膠、天然糖類如葡萄糖、 蔗糖與乳糖、玉米糖精、天然與合成膠類如洋槐、黃耆膠、 蔬菜膠、藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇、蠟及其類 10 似物，但不侷限於此。 適用之粉碎劑包括了澱粉如玉米澱粉、曱基纖維素、 瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類似物，但不偈限於此。 適用之潤滑劑包括了油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、 苯甲酸鈉、醋酸鈉、氣化鈉及其類似物，但不侷限於此。 15 適用之懸浮劑包括了膨潤土，但不侷限於此。

適用之滲透劑與懸浮劑包括了合成與天然膠類如蔬菜 膠、黃耆膠、洋槐、藻酸、葡聚糖、羧甲基纖維素鈉、甲 基纖維素、聚乙烯吡咯酮與凝膠，但不侷限於此。 適用之食用油包括了棉籽油、胡麻油、椰子油與花生 20 油，但不偈限於此。 其他添加物之範例包括了山梨醇、滑石、硬脂酸與磷 酸二I弓。 單位劑型 本藥物組成物以單位劑型方式配置，例如錠片、藥丸、 18 200400947

膠囊、大丸藥、粉末、細粒、無菌注射液、無菌注射懸液、 無菌注射乳劑、驰劑(elixirs)、酊劑、計量之氣溶膠或液體 喷劑、滴劑、安瓿、自動注射裝置或栓劑。單位劑型可用 於口服、注射、鼻内、舌下或直腸投予、或以吸入或吹氣、 5 穿皮貼片以及凍乾成分方式投予。一般而言，任何傳輸後 其活性成分能被系統性地吸收的方式均適用。較佳之單位 劑型為口服劑型，最佳為固體口服劑；因此較佳之劑型為碇 片、藥丸與膠囊。不過，注射製劑亦為較佳之選擇。 固體單位劑型之製備係混合本發明之活性藥劑與藥學 10 上可接受載體及任何上述所需之添加物。基本上將其混 合，直到本發明活性藥劑之均質混合物形成，並伴隨載體 與任何其他所需添加物，亦即活性藥劑均勻散佈於整個組 成物中。如此一來，本組成物可製成乾或濕的細粒。

劑型可製成，舉例而言，“立即釋放”劑型。“立即釋放” 15 劑型典型而言製成錠片，當進行藥物溶解試驗如美國藥典 標準<711>時，其活性成分於30-60分鐘内之釋放率為至少 60%-90%。在一較佳實施例中，立即釋放劑型之活性成分 於大約45分鐘内之釋放率為75%。 劑型亦可製成，舉例而言，“控制釋放”劑型。“控制釋 20 放”、“緩慢釋放”、“延長釋放”或“長效釋放”劑型為同等名 稱，用於描述活性藥劑傳輸之種類，該活性藥劑於一定時 間内，通常為幾分鐘、小時或天，典型而言為60分鐘至大 約3天，以一可確定且可操作之速率由傳輸小泡中釋出，而 非於進入消化道或接觸胃液時立即擴散。控制釋放速率之 19 變化為-種子錄。影轉 括顆粒大小、組成、多孔性、電P 口h 电仃、、。構、及傳輸小泡與活 成/刀的水合程度、以及活性藥劑於生理環境中的溶解 度’而生輯财沿著消化叙特定部位。㈣釋放型溶 解釋驗之典型參數列於美國藥典標準<724〉。 劑型可據此而製備並以多相方式傳輸活性藥劑，因此 第—部分活性成分可以第-速率釋放，而第二部分活性成 刀則另以第二速率釋放。在—較佳實施例中，劑型之製備 10 I兩相傳輪其活性藥劑，包含第—“立即釋放相，，，其中部 分之活性成分如前面立即釋放卿所述之方式傳輸，以及 第二“控制釋放相”，纟令剩餘之活性成分如前面控制釋放 劑型所述方式釋出。 錠片或樂丸可裹衣或製成單位劑型以延遲與/或延緩 作用，例如製成控制釋放與緩慢釋放之單位劑型。舉例而 15 S ’旋片或藥丸可包含—内在劑量與-外在劑量成分，後 者以薄層或套膜形式覆於前者。此二部位以一腸溶膜區 隔，其可抵抗胃部的消化作用並使内在成分進入十二指腸 或延遲釋放。 控制活性藥劑釋放之生物可分解性聚合物，包括了聚 2〇乳酸、聚己内西旨、聚經丁酸、聚原酸醋類、聚乙縮搭類、 聚二氫吡喃類、聚氰丙烯酸鹽類以及交聯或兩性團塊之水 膠共聚合物，但不侷限於此。 在液體劑型方面，活性物質或其生理學上可接受鹽類 可被洛解、懸浮或乳化，適用之活性物質如增溶劑 '乳化 20 别或其他辅割。活性組成物與對應之生理學上可接受鹽類 所適用之溶劑包括水、生理鹽類溶液或醇類如乙 一 / 。此外，可使用糖類溶液如葡萄糖或甘露醇溶液。 本發明亦可使用多種溶液。 本發明亦考#穿皮劑型。穿皮型可频散穿皮系統(穿 皮貼布）’其使用液體儲存或藥物黏附基質系統。其他穿皮 劑型包括外用凝膠、塗劑、軟膏、黏膜系統與裝置、以及 離子透入（電子擴散)傳輸系統，但不侷限於此。穿皮劑型可 用於延遲與緩慢釋放本發明之活性藥劑。 10 本發明中用於注射投劑之藥物組成物與單位劑型，典 型而言包括上述之藥學上可接受載體。較佳之液體載體為 植物油。注射方式，舉例而言，包括靜脈注射、脊椎膜上 主射、椎官内注射、肌肉注射、腔内注射、胸内注射或 皮下注射。 15 活性藥劑亦可以微脂粒傳輪系統之形式投予，例如單 層小彳政脂粒、單層大微脂粒與多層微脂粒。微脂粒由多種 磷脂質組成，例如膽固醇、硬脂醯胺或膽鹼磷脂。 本發明之活性藥劑亦可與可溶性聚合物如標的藥物載 體結合。此類聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚合物、 20聚羥基丙基曱基丙烯基醯胺酚、聚羥基乙基天冬醯胺酚、 以及經棕櫚基片段取代之聚乙烯氧聚離胺酸，但不侷限於 此。 投劑 本發明之藥物組成物或單偟劑型可以多種途徑投予， 21 200400947 例如以口服與腸道、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、穿 皮傳輸、黏膜傳輸（包括直腸與口腔）以及吸入等途徑。較佳 情況為使用口服與穿皮傳輸途徑（亦即分別使用固體或液 體配方或皮膚貼片）。 5 藥物組成物或單位劑型包含了本發明之一有效藥量， 其可投至動物身上’較佳對象為人類，以治療下尿道之神 經肌肉失能如E. J. McGuire於“Campbell’s UROLOGY”，第 五版，616-638，1986年，Saunders Company中所述，以及 5-HT1A受體功能障礙相關之生理功能障礙病患。此類功能 10 障礙包括中樞神經系統失調如沮喪、焦慮、飲食障礙、性 功能障礙、成癮與相關問題，但不侷限於此。 此處所用之“有效藥量，，一詞意指一藥量，其可造成可 量測之至少一種症狀或特定失調之參數之改善。在一較佳 實施例中，其化合物可治療尿道之失調症狀，例如急尿、 15 膀耽過動症、頻尿、尿道適應性減弱（膀胱儲量減少）、膀胱 炎（包括間質性膀胱炎）、尿失禁、漏尿、尿床、排尿疼痛、 小便躊躇與膀胱排空困難、或血清促進素受激性功能障礙 所引發之中樞神經失調（例如哺乳動物（特別是人類）的焦 慮、沮喪、過度緊張、睡/醒循環失調、飲食失調、行為失 20 調、性功能失常與認知失調，其係與中風、受傷、痴呆有 關，並源自於神經發育、注意力不足過動障礙(ADHD)、吸 毒癮、戒毒、急躁性腸症候群。） 本發明之藥物組成物或單位劑型可依據前述指導方針 中例行測試所定義之劑量與投劑法投予，以獲得完整之藥 22 200400947 物活性並降低特定病患之毒性與副作用。然而，其藥物治 療的正確調配如指導方針所示。 本發明活性藥劑之劑量依據多項因素而變，例如潛在 疾病狀況、病患狀況、體重、性別與年齡。治療一失調症 5狀之有效量可以習知技藝之經驗法則確定，舉例而言，建 2-投予劑量與頻率之基礎，並於此基礎上比較各組實驗 单位或病患的各項差異。病患之正確投劑量有賴於其本身 失調與身體狀況之狀態與嚴重程度。任何症狀或參數改善 之決定有賴於習知技藝中所述之人員或病患告知醫師。可 W以理解的是，在任何臨床上或統計上，尿道失調之任何症 狀或參數的顯著減小或改善，都屬於本發明範脅。臨床上 的顯著減小或改善意指病患可察覺與/或醫師可察覺之狀 態。 ’丁、 15 20 舉例而言，單一病患可能同時遭受多個排尿困難的症 狀，例如急尿與頻展或兩者都有’而這些症狀可以本發明 之方法改善。在排尿失禁方面，任何不自主排尿頻率與尿 量之減少均被視為本發明方法之效用。藥劑投予旦之^圍 介於大約〇_〇1與大約25mg/kg/day之間，較佳為介於大約〇 1 與大約10mg/kg/day之間，且最佳為介於大約〇 2與大約 5mg/kg/day之間。彻解的是，本發明之藥物配方毋需 涵蓋治療失調症狀之整體有效藥量’而是藉由投予複數個 此類藥物配方而達到其有效用量。 在本發明之一較佳實施例中，化合物配製成勝囊或鍵 片’較佳為含有50至200mg之本發明化合物，且病患較佳之 23 200400947 每曰總投劑量為50至400mg，較佳為150至250mg，且最佳 為大約200mg，以舒緩因處理5-HT|A受體配位體所造成的尿 失禁與失能。每日總投劑量可為複數劑型，例如每日4個次 劑型。在一較佳實施例中，每曰總投劑量為每天處理1或2 5 劑。 以注射方式投劑之藥物組成物含有由大約0.01 %至大 約100%重之本發明活性藥劑，而其總藥物組成物為100%

重。 一般而言，穿皮劑型含有由大約0.01%至大約100%重 10 之本發明活性藥劑，而其總藥物劑型為100%重。

藥物組成物或單位劑型之投予可為每日一劑，或間隔 投予至達到每日總劑量。此外，亦可共同或依序投予另一 化合物以治療失調症狀。此類合併治療之範例如前面所示。 在合併治療方面，化合物為個別劑型，其可同時或於 15 個別時間投予。舉例而言，本發明之化合物可於晨間投劑， 而抗毒菌驗化合物可於晚間投劑，反之亦然。其他類化合 物亦可於特定區間内投劑。投劑之順序有賴於各種因素， 包括病患的年齡、體重、性別與病況;欲治療之失調嚴重程 度與病因學、投劑途徑、病患之腎與肝功能、病患病史， 20 以及病患的反應。投劑順序的決定可做適當調整，且於此 處指導方針中屬例行之調整。 治療用法 毋須依據理論所示之結合作用，人們認為投予5-HT1A 受體拮抗劑可減少或預防不自主的薦骨反射與/或影響頻 24 200400947 尿之皮質機制。因此，可以理解的是，大範圍的下尿道神 經肌肉失能可以本發明之化合物治療，包括了排尿困難、 尿失禁與尿床(膀胱過動），但不侷限於此。排尿困難包括頻 尿、夜尿症、急尿、尿道適應性減弱（膀胱儲量減少）膀胱排 5 空困難，亦即頻尿期間仍有多餘尿量排出。尿失禁症候群 包括壓力性尿失禁、急性尿失禁與溢出性尿失禁，以及結 合多種形式之尿失禁。遺尿症意指尿液於夜晚或睡眠期間 不自主的流動。 本發明之化合物亦適用於治療因血清促進素受激性功 10 能障礙所致之中樞神經系統失調。 本發明化合物之合成 本發明化合物之製備依據下列流程圖所示： 流程圖1

基團A與R同於R2與R1，其定義可參照式（I)。基團B同於R3-苯基，其定義可參照式(I)。R4代表烷基。 初始物（1)以鹼處理，較佳為第三丁氧鉀，接著以2-溴 甲基乙醛二烷基乙縮醛或其他羰基的2-鹵乙醛(例如R4烷基 25 15 200400947 亦可加人反應巾以提供4錢或環氧己糾）進行烧化 作用。其他纟倍合反應之替代或合適之鹼基包括醯胺鋰、氫 化鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸铯及其類似物， 可配合或毋需相轉移催化劑。 5 反應較佳為於一溶劑如二甲基亞礪或甲苯存在下進 行，其於〇°c下題流。

化合物(2)以酸處理，例如鹽酸或對甲苯磺酸或三氟醋 酸，於一適當之有機溶劑中合成甲醛(3)。一般而言，反應 於貝子/合劑中進行，此酸性水溶液與丙酮或四氫呋喃之混 10合液於5 C至75。(：下反應，較佳為於環境溫度下。較佳且相 同之反應方法為環境溫度下混合三氟醋酸溶液於含氣溶劑 中。

以甲駿(3)結合所欲之重氮環烷(4)，於還原性胺化作用 步驟下製成化合物（5)。較佳之反應為環境溫度下，一非反 15應性溶劑如二氣乙烷或二氯甲烷或氣仿，於三醋酸基硼氫 納存在下貫際反應1至24小時（請見如A. F. Abdel-Magid 等人’ J· 〇rg. Chem·, 61, 3849 (1996))，或於氰硼氫化鈉協 助下以質子溶劑（如甲醇）反應，並選擇性使用分子篩。 化合物（5)之還原為醇類⑴係使用還原劑如硼氫化鈉， 20或者一異丁基銘氫化物或其他紹或硼氫化物，或習知技藝 之其他還原方法，將酮類轉換為醇類以製備羥類⑴。較佳 之反應為由-20°C至環境溫度下，於有機溶劑如甲醇、二氯 曱烷或四氫呋喃中進行。 26 200400947 流程圖2 Ο

初始物（1)為商業上可獲得或結合適量的We i n re b醯胺 (6) (n月見 Nahm與 Weinreb，Tetrahedron Lett·, 22m 3815, (1981))與化合物（7)而製成，如上面流程圖2所示’其中m為 5金屬鹽類，例如鋰或鎂鹵化物。

反應較佳為於惰性環境下，較佳為氮氣，並以非質子 浴劑如四氫呋喃於環境溫度或溫度低至_78〇c下進行。 或者，一酯類結構ACOO烷基，於習知技藝所述之標準 環境下以甲苯氣化鎂或甲笨溴化鎂進行取代反應，產生化 10合物（1)之鲷類結構。 車乂佳且相同之合成化合物（1)之方法為以纪催化酿基鹵 化物與化合物(7)之結合作用’其中Μ為Zni化物。

較特別的是，式（5)化合物之製備可依據流程圖3所述之 步驟。所有的取代物質，除非特別明定，均如前面所定義。 15反應試劑與初始物均可由一般習知技藝中獲知。

27 200400947 在流程圖3之步驟At，舉例而言，將環己烷碳醯氣加入含 適量苯甲基氣化鋅或苯甲基氣化溴以及適量纪催化劑如二 氣雙（三苯基填)1巴(II)之混合物中，〇°C下於溶劑如四氫吱喃 中攪拌。其後’持續於環境溫度下攪拌4-24小時。隨後將 5 反應冷卻’例如加入氯化敍飽和水溶液。通常經過萃取後 可得酮類（8)。酮類（8)可由習知技藝之方法純化，例如石夕膠 之快速層析並配合適當之沖提液如乙酸乙酯/己烷，以獲得 較純之材料。或者，以酮類（8)粗產物進行步驟b。 在流程圖3之步驟B中，酮類（8)以溴乙醛縮二乙醇於習 10知技藝之條件下進行烷化作用，以獲得化合物（9)之構造。 舉例而言，將酮類（8)溶於適當之有機溶劑如二曱基亞颯或 甲苯，並處理輕微過量之適當鹼基如第三丁氧鉀。本反應 為於〇°c與溶劑迴流溫度之間攪拌約15至3〇分鐘，並逐步滴 15 知， 入溴乙醛縮二乙醇於反應中。由其中一項習知技藝中可 知，漠乙雜二f醇、紅賴乙_及其類似物可用於 置換乙搭縮二乙醇部分。

由習知技藝之方法純化， R縮以獲得醛類（10)。醛類（10)可 例如硬膠之快逮層析並配合適當 28 200400947 之沖提液如乙酸乙酯/己烷。或者，醛類（10)粗產物可直接 用於步驟D。

在流程圖3之步驟D中，醛類（10)係以重氮環烷(4)進行 胺化還原作用，在習知技藝所述之條件下，以獲得酮類（5) 5 之相似物，其步驟如流程圖1所述。較特別的是，舉例而言， 將醛類（10)溶於適當之有機溶劑如二氣甲烷。此溶液並加入 約1.05或更大當量之重氮環烷(4)。醋酸可選擇性加入以協 助重氮環烷(4)之分解。隨後加入約1.4至1.5當量之三醋酸基 硼氫化鈉，且反應於室溫下攪拌約3至5小時。本反應隨後 10 加入適當之驗基如碟酸鈉或氫氧化納冷卻之，以調整pH值 為大約8至12。冷卻反應後隨即以適當之有機溶劑如二氯甲 烷萃取。混合有機萃取物並以濃鹽水清洗，乾燥、過濾並 於真空下濃縮以獲得式（5)之化合物。此材料隨後以習知技 藝之方法純化，例如矽膠之快速層析並配合適當之沖提液 15 如乙酸乙酯/石油醚或己烷。

步驟C (15)

Ο

HN N-B Η7) η (4)

0. 步驟E

CHO (3)

Ο 步驟D

29 200400947 或者，結構化合物（5)可依流程圖4所述之步驟製備。所有的 取代物質，除非特別明定，均如前面所定義。反應試劑與 初始物均可由一般習知技藝中獲知。 在流程圖4之步驟八中，醛類（11)於習知技藝所述之條 5件下結合適當之有機金屬試劑（12)，以獲得醇類（13)。適當 之有機金屬試劑之範例包括格林納試劑（Grignard Reagents)、烷基鋰試劑、烷基辞試劑及其類似物。較佳為 格林納試劑。針對典型的格林納試劑與反應條件，其範例 見於 J. March, “Advanced Organic Chemistry: Reactions 10 Mechanisms, and Structure”，第二版，McGraw-Hill，頁 836-841 (1977)。較特別的是，將醛類（丨^溶於適當之有機 溶劑如四氫吱β南或甲苯，冷卻至大約-5°C並處理大約1.1至 1.2當量之式（12)格林納試劑，其中μ為MgCl或MgBr。本反 應攪拌約0.5至6小時’隨後冷卻，而醇類（π)以習知技藝之 15 步驟分離。 在流程圖4之步驟B中’醇類（13)於習知技藝之標準條 件下進行氧化作用，其如J. March，“Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms，and Structure”，第二 版，McGraw-Hill ’ 頁 1082-1084 (1977)所述，以獲得酮類 20 (1)。[酮類（1)為上述流程圖1所用之初始材料。] 舉例而言，上述之氧化作用亦可使用標準Swern氧化作 用條件，其可由一般之習知技藝中獲知（Marx，Tidwell-J. Org· Chem.丛，788, 1984)，或將醇類（π)溶於適當之有機溶 劑如二氯甲烷，而本溶液以丙酮冰浴冷卻，並處理2.5至3.0 30 200400947 虽里之二甲基亞砜。攪拌約3〇分鐘後，本反應隨即以約18 田畺之P2〇5處理。繼續搰拌約3小時並隨即以，較佳之情況 為，約3.5當量之適當胺類如三乙基胺處理約3〇分鐘。隨後 移除冷卻浴，且反應繼續攪拌約8至16小時。酮類（1)隨即以 5習知技藝之標準萃取方法分離出。

在流程圖4之步驟C中，酮類（1)以適當之驗基處理，隨 後加入烯類（15)，其中X為適當之離去基，以獲得化合物 (14)。舉例而言’酮類（丨）於適當之有機溶劑如四氫呋喃中 混合過量之稀類（15)，並以丙酮冰浴冷卻。適當離去基之範 10 例為Cl、Br、I、tosylate、mesylate及其類似物。車交佳之離 去基為C1與Br。加入約1.1當量之適當鹼基，且本反應於室 溫下攪拌約2小時。適當驗基之範例為第三丁氧鉀、氣化 鈉、NaN(Si(CH3)3)2、二異丙基醯胺鋰、KN(Si(CH3)3)2、 NaNH2、乙醇納、甲醇納及其類似物。第三丁氧鉀為較佳 15 之適當鹼基。本反應接著以酸性水溶液冷卻（quench)，且化 合物（14)以常見步驟進行分離。 在流程圖4之步驟D中，化合物（14)以適當之氧化劑處 理而獲得醛類(3)。（醛類（3)亦可由流程圖1製備。）適當氧 化劑之範例為臭氧、NaI04/锇催化劑及其類似物。臭氧為 20 較佳之催化劑。適當氧化劑與條件之範例見於J. March， “Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure”，第二版，McGraw-HiU，頁 1090.1096 (1977)。 舉例而言，化合物（14)溶於適當之有機溶劑如甲醇中， 加入少量Sudan III ’並將溶液冷卻至約-2(TC。將臭氧以氣 31 200400947 泡方式庄入溶液中約4小時直到顏色由粉紅轉為淡黃。隨後 加入還原劑例如驗^或第三丁基磷。濃縮後產生搭類⑺之 中間物二甲基縮醛。而此二甲基縮醛可於標準酸性環境下 二輕項(3)。或者，針對反應粗混合物進行酸化以獲得 私類(3)。或者’類(3)可於非祕絲劑如二氯甲烧存在 下由化合物（14)直接透過臭氧分解作用而得。 在流裎圖4之步驟E中，醛類（3)於類似上述流程圖3步 驟D之條件下進行胺化還原作用以獲得化合物⑺。（化合物 (5)亦可於流程圖1中製備。） 流程圖5

流程圖5提供了製備酮類(5)的另—種合成方式。所有的 取代物貝，除非特別明定，均如前面所定義。反應試劑與 初始物均可由一般習知技藝中獲知。 在流程圖5之步驟A中，醛類（3)於習知技藝所述之標準 15狀態下與重氮環烧(4)進行縮合以獲得歸胺類（⑸。舉例而 言，將溶於適當有機⑧劑如乙酸異丙fi旨或異丙醇之約1〇5 當量搭類(3)加入純淨之重氮環燒⑷中，其為游離驗狀態。 加入其他有機溶劑以形成泥漿且反顧拌約⑴小時。稀 胺類（15)隨即以標準技術分離，例如過濾法筛選。 2〇 在流程圖5之步驟8中，稀胺類（15)於習知技藝所述之 條件下進行氫化以獲得化合物(5)。舉例而言，以稀胺類（15) 32 200400947 混合適當之有機溶劑如異丙醇以及5%催化量之鈀，其附於 碳上並儲於Parr瓶。此混合物置於5〇 pSi (344850 pascals)之 氫下，並於室溫下搖晃約2天。此泥漿隨後過濾以移除催化 劑部分，並將過濾物濃縮以獲得化合物（5)。 5 無論所用製備方法為何，酮類中間物質（5)均可由與還 原劑之反應而轉變為符合式I之最終產物，還原劑特別是指 那些產生氫陰離子者如硼氫化納或AL-H。

此酮類中間物質（5)，其減少非前述之分解作用，一般 而言產生混合之非對映異構物’且其配對(RS，SR)在數量上 10優於(RR，SS)配對。（RS，SR)配對隨即以石夕膠管柱層析法分 離，並進一步分解為單一（RS)與（SR)對映異構物，例如依 據對稱式靜相層析法或習知技藝所揭示之其他方法。 或者’外消旋酮類（5)可由習知方法分解為其兩個對映 異構物’且(R)-5隨即進行還原作用以產生（s,r)對映異構 15 物，其為本發明之較佳產物且易於物理方法純化。

立體化學 在流程圖1中，化合物I係非對映異構物之syn/anti混合 物’其比例取決於反應條件。該非對映異構物可由一般習 知技術分離，包括以鹼或其鹽類進行分層結晶，或層析技 20 術如LC或快速層析法。對於兩種非對映異構物，（+)對映異 構物可以習知技術及步驟與㈠對映異構物相分離，如J. Jacques等人所著“Enatiomers，Racemates, and Resolutions”, John Wiley and Sons, Inc·, 1981。例如，對映異構物層析法， 配合適合之溶劑，如乙醇/丙酮與Chiralpak AD組，20微米， 33 200400947 亦可有效分離對映異構物。

式I之游離鹼，其非對映異構物或對映異構物可以習知 技術，轉換成相對應之藥學上可接受鹽類。例如，式I化合 物溶於適當之有機溶劑如甲醇中，以1當量之順-丁烯二酸 5 或草酸，或是例如1或2當量之鹽酸或甲基磺酸處理，之後 於真空下濃縮，便得相對應之藥學上可接受鹽類。殘餘物 之後可於適當有機溶劑中或有機溶劑混合物如甲醇/乙 醚，以再結晶方式純化。 式I之N-氧化物可以習知簡單氧化步驟而得。該氧化步 10 驟敘述於P. Brougham等人(5>«淡以以，1015-1017, 1987)，使 哌嗪上的兩個氮有所區別，可得N-氧化物與Ν,Ν-二氧化物。 下列各範例代表式I化合物之一般合成。這些範例僅用 於說明，並不侷限本發明之任何方式。各反應試劑與起始 物為任何習知方式可取得。 15 範例1

l-[(SR-RS)-4-i哀己基-4-¾ 基-3-(2-氣苯基)-丁基]-4-(2 _ 曱氧基苯基)-哌嗪(TLC Rf上方之非對映異構物）（Ex. 1) l-[(3S,4R)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁基]-4-(2-甲氧基苯基)-哌嗪(Ex. IX) 20 l-[(3R,4S)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基)-丁基]-4-(2- 曱氧基苯基)-哌嗪(Ex. 1Y) 範例2 l-[(RR-SS)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基)-丁基]-4-(2-曱氧基苯基)-哌嗪(在TLC Rf下方具非對映異構物）（Ex. 2) 34 200400947 H(3R，4RM_環[基_4_經基_3_(2_氟苯基丁基]_4私 甲氧基苯基)-哌嗪(Εχ. 2χ) 1 -[(3S，4S)-4-環己基冰經基_3_(2_氟苯基)_ 丁基]_4·(2_ 甲氧基苯基)-°底嗪(Εχ. 2Υ) 5逶基氟笔基酮（化合铷1 q

36ml之2-氟笨基鋅氣(〇·5Μ四氫呋喃溶液)與於〇它攪拌 之〇._g二氣雙(三苯基膦）把(II)，以針筒滴加入2.14ml之環 己烷％氣。之後，該反應混合物於室溫下攪拌4小時，以飽 和氣化銨溶液(25ml)終止反應，並以2〇ml Et〇Ac萃取，經 10 (Na2S〇4)除水並於真空下蒸發乾燥，得3.52g如標題之粗產 物，其可使用於下一步驟不需純化。 'H-NMR (CDCl3, δ): 1.00-2.05 (m, 10H), 2.47 (tt, 1H), 3.77 (s, 2H), 6.97-7.32 (m, 4H) 環己基-4-酮-3-(2-氟笨基)-丁醛二乙某縮醛（化合物比） 15 5.02§化合物h之甲笨溶液136ml係回流加熱，得35ml

甲笨’藉由蒸餾去除水分。之後，加入3.i8g第三丁氧基鉀 並攪拌回流加熱30分鐘；該反應混合物冷卻至80。(：，並加 入4.27ml 2-溴化乙醛二乙基縮醛。回流18小時後，該混合 物冷卻至室溫，以飽和氣化銨水溶液(3〇mi)終止反應，並以 2〇 30ml EtOAc萃取。萃取物以Na2S04乾燥，並真空乾燥，得 一粗產物，之後以快速層析法純化（石油醚-EtOAc 92.5:7.5)，得2.97g純標題產物。 lH-NMR (CDCl3, δ): 1.00-2.10 (m, 17H), 2.20-2.52 (m, 2H), 3.30-3.72 (m, 4H), 4.25-4.45 (m, 2H), 6.90-7.35(m, 4H) 35 200400947 酮-3-(2-氣茉基)-丁醛(化合物lc)

Ll2g化合物lb、9ml 50%水性三氟醋酸與18ml CH2C12 混合物係於室溫下混合2小時，之後以10ml CH2C12稀釋。 該有機層係分離出，以濃鹽水洗(2x15ml)、乾燥(Na2S04)， 5 並真空乾燥得一粗產物(〇.88g)，不需進一步純化直接使用 於下一步驟。 'H-NMR {CDCls, δ): 0.90-2.10 (m, 10H), 2.25-2.70 (m, 2H), 3.12-3.52 (m, 1H), 4.60-4.80 (m, 1H), 6.95-7.40 (m, 4H), 9.75(s, 1H) 10 酮-3-(2-氟苯某）-丁臬1-4-(2-甲氣某茉某）-哌 嗪(化合铷 〇.88g化合物lc、〇.84g 1-(2-甲氧基苯基)哌嗪Ha，1.06g 二乙聽氧删氫化鈉與33ml CH2C12係於室溫下攪拌1小時， 靜置隔仗’以20% Na2C〇3水溶液驗化。有機層分離出，以 15濃鹽水洗(2x30m1)、乾燥(Na2S04)，並真空乾燥得一粗產物 (1.46g)，不需純化直接使用於下一步驟。樣本係以快速層 析法(石油醚-EtOAc 6:4)，得一純化產物。 'H-NMR (CDCl3, δ): 1.05-2.00 (m, 11H), 2.20-2.44 (m, 4H), 2.45-2.72 (m, 4H), 2.90-3.20 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 4.38 20 (t, 1H), 6.80-7.30(m, 8H) JISR-RS)-1-環己基-4-『4-(2-甲氧基liv农嗪-1-某1-2-(2-氟 蓋基)-丁-1-醇(TLCRf上方之非對咏異構物） 與

Kg^-ss)-l-環己基基茉某、哌嗪_丨_某 36 200400947 苯基)-丁-卜醇(TLC Rf下方之非對映異構物） 1.46g化合物Id溶於33ml甲醇，於0°C攪拌，加入0.19g 硼氫化鈉，該混合物於室溫下攪拌4小時。蒸發掉該溶劑， 反應粗產物加入水，並以EtOAc萃取。有機層分離出，以濃 5鹽水洗(2xl5ml)、乾燥(Na2S04)，並真空乾燥得一粗產物， 接著以連續快速層析法進行純化(石油醚_Et〇Ac_2N氨水甲 醇溶液75:25:2 ;石油醚-EtOAc-2N氨水甲醇溶液80:20:2)， 得〇.82g範例1化合物（上方TLC Rf ;沖提液：石油醚 -EtOAc-2N氨水甲醇溶液70:3〇:2)，之後得〇 〇62g範例2化合 10 物（下方TLC Rf ;相同沖提液）。 E2U: *H-NMR (CDCh, δ): 0.80-l.4〇 (m? 6Η),ι.50-1.82 (m，4Η), 1.85-2.10 (m，3Η)，2.21-2.45 (m，2Η)，2 52_2 85 (m， 4Η)，2.98-3.26 (m，4Η)，3.28-3.42 (m，1Η)，3 5〇_3 6〇 (m， 1H), 3.85 (s, 3H), 6.80-7.30 (m, 7H), 7.62-7.80 (m, 1H); OH 15 峰未偵測到。 120： *H-NMR iCDCls, δ): 0.75-2.〇〇 (m, 13Ηχ 2.〇〇_ 2.30 (m, 1H), 2.31-2.55 (m, 2H), 2.56-2.95 (m, 4H), 3.00-3.30 (m，4H 與 OH)，3·60 (dd，1H)，3 85 (s，3H)， 6.80-7.38 (m, 8H)。 20 H(3S’4R)-4-農羥基-M2-氟羞丁某 1-4_r2_ 甲氣 基笨基)-哌嗪ΠΕχ IX) 此化合物係將範例丨化合物以不對稱管柱層析而得，使 用 Chirdpak AD(0.46x25cm)，以正己烷,(^95:5 (流速= 0.5ml/min ;偵測器 uv 247nm)。 37 200400947 基笨基V哌嗪(Ex. 1Υ) 此化合物係將範例丨化合物以不對稱管柱㈣而得，使 用 ChMpak AD (〇.46x25cm)，以正己垸伽h 95:5 (流速= 5 〇.5ml/min ;偵測器 UV 247nm)。 Η通，4胞-1£^.-4-經基基^丁某卜“2_甲氣 基笨基)-旅嗪(Ex. 2X)

此化合物係將範例2化合物以不對稱管柱層析而得，使 用 Chiralpak AD (2x25cm)，以正己烷_ 乙醇 85:15(流速= 10 8ml/min ;偵測器 UV 254nm)。 1-K3S，4SM’H 基_4-羥基基 V·丁芊[4吖2-甲氣 基笨基)-哌嗪(Έχ. 2Υ) 此化合物係將範例2化合物以不對稱管柱層析而得，使 用 Chiralpak AD (2x25cm) ’ 以正己烷.乙醇 85:15(流速= 15 8ml/min ;偵測器UV 254nm)。

化合物IX與2Y的絕對立體化學，與氫漠酸形成之鹽類 形式，係以單晶X光繞射決定，如下所述。 單晶X光繞射實驗： 一針狀單晶用於進行單X光繞射分析，並放置一玻璃纖 20 維。該數據係以Rigaku Rapid圓柱形影像平面X光區域偵測 器收集，偵測孔徑=45.0x25.6cm。其係以載裝有RapidAut〇 1.06版軟體（Rigaku，2000)之Windows 2〇〇〇 pc電腦控制， 低溫（-120K)，Micromax-002微共扼焦鏡CuD輻射 [X(Cu尺α)=1.5405Α]。 38 200400947

Indexing係以三次暴露360秒3。振盪晶格進行。所有反 射皆於五次影像組内進行，每組有六晶格；暴露時間為每 度160秒。在這其中，五組影像在phi角=0。、90。、180。、270。， chi角=50。； phi角=0。，chi角=0。’所有晶格的omega改變量 5 =30° ’並使26>max=136_3°。該樣本/偵測器距離為12.74cm。

該資料簡化程式Rapid Auto 1.06版軟體(Rigaku, 2000)，測 量出Laue區為-1，所有7,986反射係統整決定結構解析度與 修飾。 單晶結構結果： 10 結構係以直接方法決定，使用SIR92 (Altomare等人，

1994)。所有計算皆使用 CrystalStrucutre 3.0 (MSC/Rigaku, 2002; Watkin等人 ’ 1996，Carruthers 與Watkin，1979)結晶 學軟體套件。嘗試解(Trial solution)得到不對稱單元中38個 非氫原子。Least square refinement包括所有非氫原子配位 15 以及非等向性熱參數。F 的 full matrix least square refinement 最終循環係基於6,297次反射’ Ι>3σ(Ι)，收斂於一致因數 (agreement factors) : R=0.071，S=2.224，Rw=0.073。該絕 對組態係使用Flack x參數計算，其為0.00，esd=0.04。期望 值為0.0(3 esd)用於校正，反轉絕對結構為+ 1.〇。 20 參考文獻：

Altomare, A., Cascarano, G., Giacovazzo, C. Guagliardi, A., Burla, M., Polidori, G., and Camali, M., (1994) SIR92, J. Appl. Cryst., 27, 435.

Carruthers, J.R. and Watkin, D.J.(1979), Acta Cryst, 39 200400947 A35, 698-699.

Rigaku (2000), Rapid Auto, Rigaku Corporation, Tokyo, Japan.

Rigaku and Rigaku/MSC, (2000-2002), Crystal Structure 5 Analysis Software, Crystal Structure Version 3.00, Rigaku/MSC, 9009 New Trails Drive, The Woodlands, TX, USA 77381-5209.

Rigaku, 3-9-12 Akishima, Tokyo 196-8666, Japan. Watkin. D. J., Prout, C.K. Carruthers, J. R. & Betteridge, 10 P.W” CRYSTALS Issue 10, Chemical Crystallography Laboratory, Oxford, UK. 範例3 l-[(RS，SR)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁 基]-4_1>(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]-旅嗪(TLC Rf上方之非對 15 映異構物）

範例4 l-[(RR，SS)-4-環己基 _4_ 羥基 _3-(2-氟苯基）-丁 基]-4-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]_哌嗪(TLC Rf下方之非對 映異構物） 20 1:Γ4-環己基趙IzMl-氟苯基)-丁基1-4-Γ2-(2,2.2-三氤乙 氧基!苯棊1_旅隻(也合物3a、 心題化合物係依化合物1 d所述程序製備，但改用 1-(2,2,2_二氟乙氧基）苯基]-哌嗪HC1取代1-(2-甲氧基苯基)-哌嗪HCb以快逮層析法(石油醚_Et〇Ac 7:3)純化得標題化 40 2〇04〇〇947 合物(51%) ° ^-NMR (CDCl3, δ): 1.00-1.85 (m, 10H), 1.86-2.05 (m, lfl)? 2.20-2.44 (m, 4H), 2.45-2.70 (m, 4H), 2.95-3.18 (m, 4fi), 4.25-4.60 (m, 3H), 6.850-7.30(m, 8H) 5 1-[(RS, SR)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁 基]_4-[2-(2,2,2-三氟己氳某）茉某1-哌嗪(TLC Rf上方之非對 以及 l-[(RR，SS)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）-丁基]-4-

[2一(2,2,2-三氟乙氣某某1-哌嗪（TLC Rf下方之非對映显 \ 0 L 標題化合物係依範例1與範例2化合物所述程序製備， 俱夜用化合物3a作為起始物，取代化合物Id。以快速層析 法進行純化(石油醚-EtOAc-2N氨水甲醇溶液60:40:2)，得範 15 例3化合物，為上方TLC Rf之非對映異構物(79%)。含有範 例4化合物部分則為下方TLC Rf之非對映異構物，並經由快 速層析法進行純化(石油醚-EtOAc-2N氨水甲醇溶液75:25:1 > 得純產物（3.5%)。 *H-NMR (CDCl3, δ): 0.80-1.40 (m, 6Η),1.45-1.80 20 (m, 4H), 1.85-2.10 (m, 3H), 2.21-2.45 (m, 2H), 2.52-2.75 (m, 4H), 2.95-3.26 (m, 4H), 3.30-3.42 (m, 1H), 3.50-3.60 (m? 1H), 3.70-4.30 (br, 1H, OH), 4.38 (q, 2H), 6.85-7.30 (m, 8H), 7.65-7.75(m, 1H)。 E2L4： !H-NMR (CDCls, δ): 0.75-1.95 (m, 12H), 2.05- 41 200400947 2.90 (m, 7H 與〇H)，3.00-3.30 (m, 5H), 3.65(d, iH)，4 38 (q 2H), 6.85-7.40 (m, 8H)。 範例5 (比較例） l-[(RS，SR)-4-J展己基-4-¾ 基-3-苯基-丁基]_4_(2_ 甲氧 5 苯基)-派嗪 苯甲基?哀己基酮f化合物5 a) 11ml 0.5M苯甲鋅溴之無水四氫吱喃溶液係於〇。匚加入 5mg雙-三笨基膦鈀二氣，以及〇.66ml環己基羰基氣。該混 合物於室溫下攪拌1.5小時，以飽和氣化銨溶液終止反應， 10並以乙酸乙酯萃取。收集之有機層以水清洗，以（Na2s〇4;> 乾燥’並將溶劑真空乾燥。粗產物以快速層析法純化，以 石油醚-EtOAc95:5沖提，得〇.78g(52%)標題產物。 'H-NMR (200 MHz, CDCl3, δ): 1.09-1.92 (m, 1〇Η), 2.32-2.53 (m, 1H), 3.72(s, 2H), 7.12-7.39 (m, 5H) 15 ii環己基-4-酮-3-笨某-丁醛二乙某縮醛（化合物5b) 1.78g化合物5a之無水二甲基醯胺溶液3〇ml係於室溫 下加入0.37g之60%氫化納油懸浮液，且該混合物於室溫下 攪拌1小時。加入1.46ml之2-溴乙醛二乙基縮醛，該混合物 於室溫下攪拌1小時，於80。(：攪拌1小時，冷卻至室溫，以 20水終止反應，並以乙酸乙酯萃取。收集之有機層以水清洗， 以（NaJO4)乾燥，並將溶劑真空乾燥。粗產物以快速層析 法純化’以石油醚-EtOAc95:5沖提，得iJ7g(42%)標題產 物0 'H-NMR (200 MHz, CDCl3, δ): 1.01-1.98 (m, 17H), 42 200400947 U2.48 (m，2H), 3.30-3.71(m，4H)，3.98 (t，1H)，4‘25 (t, !H), 7.12-7.39(m, 5H) 酮-3-笨基-丁醛（化合物 1.17经化合物51)之丙酮溶液1〇11：11與22.11111之2]^11(：1係 5於室溫下攪拌5小時。靜置隔夜後，水層以EtOAc萃取。收 集之有機層以水清洗，以（Na2S〇4)乾燥，並將溶劑真空乾 秌’得0.84g(l〇〇%)標題產物，可立即使用不需進一步純化。

基)-4-(2-甲氮基茉某表(化合 物5d) 10 0·84§化合物5c溶液與Ug之1-(2-甲氧基苯基)-娘嗪之 30ml二氣甲烷加入i.48g三乙醯氧硼氫化鈉與〇 98mi醋酸， 所4于&合物於至溫下授拌5小時。靜置隔夜後，有機層以過 量1M NaOH清洗，之後以水清洗，並以（Na2S〇4)乾燥，並 將溶劑真空乾燥。粗產物以快速層析法純化，以石油醚 15 _EtOAc 7:3沖提，得 l.45g (99%)標題產物。

'H-NMR (200 MHz, CDCl3, δ): 1.01-2.05 (m, 11H), 2.20-3.30 (m, 12H), 3.82(s, 3H), 3.91-4.02 (m, 1H), 6.75-7.08 (m, 4H), 7.12-7.39(m, 5H) 卜f(RS，SR)-4-%<己__基_士經某_3_茉某__丁某甲i某茉 20 基)-哌嗪 含1.21g化合物5d之二氣乙烷溶液6〇m卜於78艽滴加 入11.5ml之1M二異丁基氫化銨(DIBAL_H)甲苯溶液中。該 混合物於-78C攪拌1小時，於_6〇t：以飽和ΝΗ4(：&κ溶液終 止反應，並以氯仿萃取。收集之有機層以水清洗，並以 43 200400947 (NaAO4)乾燥’並將溶劑真空乾燥。粗產物以快速層析法 純化，以石油醚-EtOAc-2N氨水曱醇溶液30:70:2沖提，得 1.06g(80%)標題產物。 !H-NMR (200 MHz, CDCls, δ): 1.01-1.38 (m, 6Η), 5 1.51-1.78 (m, 4H), 1.86-2.02(m, 3H), 2.22-2.38 (m, 3H), 2.52-2.78 (m, 4H), 2.75-2.95 (m, 1H), 3.02-3.20 (m, 4H), 3.48 (t, 1H), 3.82 (s, 3H), 6.80-7.03(m, 4H), 7.10-7.38(m, 5H) 範例6 :放射配體之結合至不同受體 10 6A.人類重組5-HT1A受體 方法： 將基因組選殖譯碼之人類5-HT1A-血清促進素受激性 受體穩定轉染至人類細胞株(HeLa)。HeLa細胞株以單層方 式培養於Dulbecco’s modified Eagle medium (DMEM)培養 15 基中，其中包含10%胎牛血清、健大黴素(O.lmg/ml)與5% 二氧化碳，並於37°C下培養。細胞貼滿95%培養瓶時以細 胞刮杓刮下，並以冷的5mM Tris與5mM EDTA缓衝溶液(pH 7.4)溶解細胞。細胞均質液於40000xg下離心20分鐘，其離 心顆粒以少量冷的5mM Tris與5mM EDTA緩衝溶液(pH 7.4) 20 再懸浮並立即冰凍於-70°C備用。 「3H18-0H-DPAT結会作用：實驗進行當天，將細胞膜再 懸浮於培養緩衝溶液中：50mM Tris-HCl (pH 7.4)、2.5mM MgCl2、lOmM pargyline (Fargin等人，Nature 335. 358-360, 1988)。細胞膜液最終體積為lml，其於測試化合物存在或 44 200400947 不存在下並加入InM [3H]8-OH-DPAT，30°C下培養30分 鐘。非特異性結合作用係於ΙΟμΜ 5-HT存在下決定。反應 之停止係加入冷的Tris-HCl緩衝溶液並以0·2°/〇-聚次乙亞胺 前處理之 Whatman-GF/Β 或 Schleicher-&-Schuel丨-GF52 濾膜 5 快速過濾。 測試化合物之親合性係以非線性曲線凝合程式評估放 射配體特異結合至5-HTia受體(IC5〇)之抑制情形(De Lean等 尺 ’ Am. J. Physiol. 235, E97-E102, 1978)。IC50值可依Cheng 等人之方程轉化為一親和常數(Ki)，^oc/2em. /Tzarmaco/. 22, 10 3099-3108 (1973)。 『35S1GTPyS結合作用：膏驗淮扞當夭，將轉染人類殖株 5-HT1A受體之HeLa細胞膜再懸浮於pH 7.4之緩衝溶液中， 其含有 20mM HEPES、3 rtiM MgCb與 120 mM NaCl (Stanton, J. A., Beer, M. S. Eur. J. Pharmacol. 320, 267-275，1997)。細 15 胞膜以1〇μΜ GDP培養，並減少測試藥物濃度（由ΐ〇〇μΜ至 O.lnM)或減少5-ΗΤ濃度（由ΐ〇〇μΜ至O.lnM，作為參考曲 線），其最終體積約為0.25ml，並於30°C下培養20分鐘。將 [35S]GTPyS(l(^l内含200-250pM)加入樣本中，並於3(TC下 另外培養30分鐘。非特異性結合作用係於ι〇μΜ GTPyS存在 20 下進行。反應之停止係加入冰冷的HEPES緩衝溶液，並以 Unifilter GF/C濾膜配合FUtermate細胞收取器（Packard)快速 過濾。濾膜以總量1.2ml之相同缓衝液清洗四次。放射活性 之判讀係使用效率>90%之液體閃爍光譜儀（T〇pc〇unt Packard)。由測試化合物所誘發S]GTPl/S結合之刺激作用 45 200400947 以高於基準值之增加％表示，結合5-HT之最大刺激作用定 為100%。促進活性之濃度反應曲線以非線性曲線凝合程式 評估（De Lean等人，乂所_ 尸/235, Ε97-Ε102, 1978)。 [35S]GTPYS結合之刺激作用表示5-HT,Α受體上促進劑 5 化合物結合之功能關聯性。内生性配體5-HT所誘發之刺激 作用被認為是可獲得之最大刺激。化合物刺激[35S]GTPYS 之結合作用若屬低階狀態則被視為部分促進劑。化合物若

無法刺激[35S]GTPYS之結合作用則被視為中性拮抗劑。 結果 10 表1之結果顯示本發明之測試藥物對5 -HT i A受體具有 高度親和性。範例1、範例1Y '範例2與範例2χ之化合物比 範例5具備更大功效（統計顯著性p<〇 〇1)。關於[35s]gtPys 之結合作用，範例IX與範例2Υ為部分促進劑，其可誘發刺 激严S]GTPYS之結合作用。其他化合物則無法刺激 15 [35s]GThs之結合，可視為中性拮抗劑。

46 200400947 表1 5-；^1丁^受體之結合作用 化合物 親合性:Ki (nM) „功能性效應 ([35S]GTPyS 結合性） 範例1 0.13 中性拮抗劑 範例IX 0.50 部分促進劑 範例1Y 0.37 中性拮抗劑 範例2 0.29 中性拮抗劑 範例2X 0.24 中性拮抗劑 範例2Y 0.98 部分促進劑 範例3 0.29 中性拮抗劑 範例4 0.68 中性拮抗劑 範例5 0.65 中性拮抗劑 6B.人類重組ar腎上腺素受體亞型 5 方法： 人類選殖之ar腎上腺素受體亞型之結合作用於CHO 細胞膜上進行（中國倉鼠卵巢細胞），並以電擊方式將各種表 現Od-腎上腺素受體亞型之譯碼基因DNA轉染至該細胞 内。人類a!-腎上腺素受體基因之選殖與穩定表現於細胞， 10 其作法如前人所述(Testa等人，Pharmacol. Comm·, 6: 79-86, 1995)。 將 CHO細胞懸浮培養於Iscove’s modified Dulbecco’s medium培養基，其中包含1〇〇/〇胎牛血清與健大黴素 (gentamycin) (50pg/ml)，並於7°/。二氧化破及37°C 下培養。 細胞以離心方式收取，並以冰冷的Tris與5mM EDTA 緩衝溶液（pH 7.4)溶解且和缓地均質化。細胞均質液於 47 200400947 40000xg下離心20分鐘，其離心顆粒以少量冷的5mM Tris 與5mM EDTA緩衝溶液(pH 7.4)再懸浮並立即冰凍於_8〇t 備用。 將CHO細胞膜液再懸浮並培養於5〇mM Tris、pH7.4， 5再加入0·2ηΜ [3H] Prazosin ’其最終體積ι·〇2ηιΐ並於25°C時 以加入或不加入競爭藥物之下培養30分鐘。非特異性結合 作用係於ΙΟμΜ芬妥胺(phentolamine)存在下進行。反應之停 止係以〇.2%-聚次乙亞胺前處理之Schleicher_&—Schuell_ GF52渡膜配合Tomtec(PerkinElmer)細胞收取器快速過濾。 10濾、膜以1ml冰冷的Tris緩衝溶液清洗3次，乾燥並以Betaplate (Wallac)液體閃爍計數器量測。 由化合物抑制之特異性結合作用係藉由非線性曲線凝 合程式Α_分析並評估其IC5〇值（De Lean等人，^义 />/—_〇/· 211，E97-E102, 1978)。IC50值可依Cheng & Pmsoff 15等人之方程轉化為一親和常數(Ki)，伤⑽Marmaco/.益， 3099-3108 (1973)。 結果 表2之結果顯示本發明之測試化合物對於上腺素 受體亞型具有不同的親合性，尤其*aid_亞型。本發明化合 20物之選擇性（其評估係為-腎上腺素受體亞型Ki值與 5-HT1A受體Ki值間之比率）一般而言優於先前技藝所揭示 者(範例5)。 48 200400947 表2 〇tr腎上腺素受體亞型之結合作用親合性(Ki, nM)與 對5-HT1A受體之選擇性 化合物 aia ^lb OCid aj 5-HT1A aib/ 5-HT1A OCld/ 5·ΗΤ1Α 範例1 18 5.9 1.0 138 45 7.7 範例1Y 24 11 1.2 65 30 3.2 範例2X 44 11 0.5 183 46 2.1 範例5 51 12 0.5 78 18 0.8

5 6C.大鼠重組D3多巴胺受體 方法：

利用永久表現於CHO細胞之選殖大鼠D3多巴胺受體 {Ch\〇l 尺，Mol. Pharmacol. 45, 51-60，1994)。細胞膜之製 備係於冰冷之50mM Tris、5mM EDTA、5mM EGTA，pH 7.4 10 緩衝液内將細胞顆粒進行機械性破壞，並隨即進行低速 (lOOOg)、中速(20000g)與高速(80000g)離心步驟。競爭性放 射配體結合實驗係利用11種藥物濃度，以二重複方式進行 閃爍標記測定(SPA)。所使用之放射配體為[3H]-7-OH-DPAT (154Ci/mmol)。非特異性結合(佔總量的75-95%)之確認係配 15 合加入過量（3μΜ)之冰冷haloperidol。總結合作用之取決係 配合緩衝溶液：20mM HEPES、10mM MgS04、150mM NaCl、ImM EDTA (pH 7.4)。結合作用之混合物可彈性製 備，以96-孔之Wallac Micro-Beta細胞盤加入11 口1藥物稀釋 液、11μ1放射配體與178μ1細胞膜/SPA珠懸浮液（將100mg 20 WGA-彼覆之SPA珠於室溫下培養於含5-15pg蛋白質/盤之 49 200400947 lOmi結合缓衝溶液達30分鐘’隨後以低速離心並且再懸浮 於2ml之結合緩衝溶液）。在密封與室溫培養1小時後，細胞 盤以Wallac Micro-Beta閃燦計數器判讀。 上述兩種分析法之ICso值之評估係將數據凝合至單邊 5競爭模式+ :作7V(1+I0lt)gw•丨°g(IC5Q))，其中7為濃度X時之特 定CPM結合度且Γ為競爭劑不存在時之特定cpm結合度。抑 制常數（Ki)係利用Cheng-Prusoff方程計算（杨咖所 P/mrmaco/. 21，3099-3108, 1973)。 結果 10 表3之結果顯示本發明之測試化合物對於〇3亞型之多 巴胺受體具有親合性。本發明化合物之選擇性（其評估係為 心多巴胺亞型Ki值與5-HTlA受體Ki值間之比率')優於先前 技藝所揭示者(範例5)。 表3 D3多巴胺受體之結合作用親合性斑 對5-ΗΤ1Α受體之選擇性

範包2 收縮之影響 20 麻醉大鼠膀胱充滿後對節律性膀脱排空 Α-方法： 50 200400947 使用重225-275g之雌性Sprague-Dawley大鼠（Crl: CD® (SD) IGS BR，Charles River Italia)。大鼠均置放於自由供應 食物與飲水之處，其以12小時畫夜循環並於22-24°C下維持 至少一周，除了實驗進行時以外。節律性膀胱排空收縮活 5 動之評量係依據Dray之方法(Dray J.， 11:157, 1985)，經Guarneri之少量修正（Guarneri, P/wrmaco/. ^s·, 22:173, 1993)。簡單而言’大鼠以皮下注射i.25g/kg (5ml/kg) urethane進行麻醉，之後尿道膀胱以充滿生理食鹽 水之PE50聚乙烯導管由尿道處接管。導管以細線沿外尿道 10 口周圍固定，並以另一端連接於普通的壓力轉換器上 (Statham P23 ID/P23 XL)。膀胱内壓會持續表現在繪圖紀錄 器上（Battaglia Rangoni KV 135配合DCI/TI放大器）。膀胱以 紀錄導管逐漸充滿溫熱（37°C )之生理食鹽水直到發生迴流 膀胱排空收縮（通常需〇.8-1.5ml)。就靜脈注射生物活性化合 15物而言，其將充滿生理食鹽水之PE50聚乙烯導管插入頸靜 脈。 藉由膀胱壓力圖’處理前（基值）與後15分鐘之收縮次數 以及收縮之平均幅度（尖峰之平均mmHg高度）均可被計算 出。 由於大多數化合物所產生之效應多為發生迅速且導致 膀胱收細元全中斷，故生物活性之評估一般而言為量測其 膀胱不活動期（亦即膀胱不發生收縮之時間長）。測試動物相 車又於基期，其收縮次數之降低明顯達3〇%以上時亦作紀錄。 為了比較測試化合物抑制膀胱排空收縮之效用，將1〇 i

51 200400947 分鐘（EDlr„、)内收縮消失之等效劑量以最小平方法進行線 性迴歸運算。50%受測老鼠(ED^)其誘發收縮次數減少者達 30%以上時之推斷劑量，以(Biiss c. I., J. P/wtrmaco/. jj_，192-216, 1938)之方法進行評估。 5 B.結果

Urethane麻醉大鼠尿道膀胱之快速膨脹會產生一系列 節律性膀胱排空收縮，其特性已述(Maggi等人，以. M〇：83, 1996; Maggi等人，J. P/jarwaco/·五平 7%er.，230: 500, 1984)。其收縮頻率係與排尿反射的感覺傳入及排尿中 1〇 心的完整性有關，而其幅度則與反射傳出之功能有關。在 此模式系統中，主要作用於中樞神經系統的化合物（例如嗎 β非）會阻斷排空收縮，而作用於膀胱迫肌層次的藥物如奥昔 布寧（oxybutynin)則會降低膀胱收縮的幅度。 投予先前技藝所揭示化合物及本發明化合物後之結果 15 如表4所示。

本發明化合物在阻斷由體積所誘發之節律性膀胱收縮 上優於參考標準。範例1Y之效用優於範例5，其可誘發10 分鐘收縮消失之推斷劑量至少減少兩倍。此外，在投予 0.3mg/kg之範例1Y後，膀胱收縮會停止24min，而在投予 20 0.3mg/kg之範例5後則僅有14min。 相較於本發明化合物，奥昔布寧在降低收縮幅度的效 用上具有劑量相關性’其ED50值(於50%處理大鼠中誘發收 縮幅度減少30%之推斷劑量）為240pg/kg。在此劑量下’ oxybutynin並不會阻斷膀胱收縮，此乃因為其特殊作用機轉 52 200400947 (抗毒菌驗）不同於本發明之化合物。 表4 靜脈注射後對節律性膀胱排空收縮之影響 以下數據代表EDio'—a值（誘發10分鐘收縮能力喪失之推斷 5 劑買）、ED5〇(頻率）值（5〇〇/0受測老鼠誘發收縮次數減少者達3〇% 以上之推斷劑量）、以及E D 5 c (幅度）值（5 〇 %受測老鼠誘發收縮幅 度減少達30%者之推斷劑量）。 化合物 ED10 分鐘 pg/kg ED5〇(頻率） Pg/kg ed5〇(幅度） μβ/kg 範例1 198 30 n.a. 範例1Y 23 15 n.a. 範例5 66 18 n.a. Flavoxate >10000 2648 n.a. Oxybutynin 7770 >10000 240 n.a.=活性不佳；尖峰高度無顯著減少。 10 範例8 口服後對於具知覺大鼠膀胱參數之影響 A.方法： 使用由Charles River Italia提供之重300-400g雄性 Sprague-Dawley大鼠（Crl: CD® (SD) IGS BR)。大鼠均置於 15自由供應食物與飲水之處，其以12小時晝夜循環並於22-24 °C下維持至少一周，除了實驗進行期間以外。為了量化具 知覺大鼠之尿液動力學參數，依據前述步驟進行膀胱壓力 學研究（Guarneri, P/mrmaco/. , 24:175, 1991) ° 簡單而言，大鼠以腹腔注射3ml/kg Equithensin溶液麻 20 碎（戊巴比妥30mg/kg與水合三氣乙搭125mg/kg)並以仰臥 53 200400947 姿勢放置。以手術刀沿著腹部中線切開一道大約10mm長的 切口並清洗腹腔壁。和緩地由黏附的組織中取出尿道膀胱 部分，切開膀胱部分以清除内部並進行插管，其係使用聚 乙稀插管（0.58-mm内徑，0.96-mm外徑）並以絲線永久縫 5 合。插管於外肩胛部位由皮下向體外拉出，其連接一塑膠 接合器以防止動物將其移開。就藥物測試而言，大鼠在移 植—天後就能適應。 在實驗當天，大鼠被置於修改過的Bollman獸籠内，亦 即限制性獸籠，其大小足以允許動物作蹲伏姿勢，但不可 10 側翻。在穩定適應20分鐘後，將插管開放端經T型管連接至 壓力轉換器（Statham P23 XL)與蠕動幫浦（Gilson minipuls 2) 以持續灌流溫熱(37°C)生理食鹽水至尿道膀胱，其灌流速率 維持在O.lml/min。生理食鹽水灌流至膀胱期間，腔内壓訊 號可持續紀錄於多項紀錄器上（Rectigraph-8K San-ei配合 15 BM614/2放大器，源自Biomedica Mangoni)。膀胱壓力圖可 用於評估膀胱容積（BVC)與排尿壓（MP)等尿液動力學參 數。BVC (ml)定義為排尿時誘發膀胱迫肌之收縮所需輸注 膀胱之鹽水量。MP (mmHg)定義為排尿時因收縮所導致之 最大膀胱内壓。基礎BVC與MP值係膀胱壓力圖於初期30-60 20 分鐘内所紀錄之平均值。在決定基礎BVC與MP值後’將灌 流中斷並由胃管口服投予測試化合物。膀胱恢復灌流，其 BVC與MP值在投劑1、2、3、4與5小時後之變化可由膀胱 壓力圖之平均值獲知。測試藥物之投劑體積為2mi/kg且控 制組老乳亦接受相同口服置之包藥（0.5%美施樂（methocel) 54 溶於水）。 結果顯不於附圖： 第1圖為口服才又予包藥（環狀）或1〇〇叫~範例方塊 狀)化合叫環己基_4例2_甲氧基笨基H_派嗪基]_2_(2_ 5說苯基)-丁小醇;TLC Rf上方)後大鼠跳與嫌值變化之時 权。數據代表不同處理時間％變化對基礎值之情況。“n，，= 每組之大鼠數目。其顯著性以ρ< ·.表示(各處理組之間：相 對變異數AN0 VA)意指控制組（包藥）與處理組間所觀察之 差異。星號(*=p<0.05, **=p<〇〇m_=p<〇〇〇1)意指各時 10間之觀祭值與其基礎值（無處理藥物）之間的顯著性。 第2圖為口服投予包藥（環狀）或3 〇111§/吆奥昔布寧（方 塊狀)後大m^BVC與MP值變化之時程。其表現之數據同圖卜 統計分析 數據以平均值±標準差表示。BVC與MP值對基礎值之 15百分比變化，以及BVC與MP(BVC或MP在“X”時點時減去基 礎值）之Δ值(ml或mmHg之差異），而各時間下每隻大鼠亦有 所評估。在各圖中，數據以％變化對基礎值表示。 BVC與MP值以及A值之統計分析，均以612版之 S.A.S/STAT軟體運算。包藥組(控制組)與測試藥物處理組之 20間以評估BVC與MP之Δ值觀察其差異，而各時間之值對基 礎值間之差異則為分析其原始BVC與MP數據。 範例9 8-OH-DPAT誘發之大鼠固定模式（節奏性前腳步行）之抑制 (突觸後拮抗作用） 55 200400947 A.方法： 5-HT, A-受體拮抗劑對於皮下注射8-OH-DPAT誘發之 大鼠其固定前腳步行抑制作用之評估源自於Tricklebank (Tricklebank等人，/. P/wrmaco/., 117: 15, 1985)之方法 5 並作些許修正，如以下所述。

使用由Charles River Italia提供之重150-175g雄性 Sprague-Dawley大鼠[Crl: CD® (SD) IGS BR]。大鼠均置於 自由供應食物與飲水之處，並於22-24°C下以12小時晝夜循 環。在實驗當天，大鼠於處理包藥或測試化合物前10-15分 10 鐘單獨置於乾淨之塑膠容器内。為了評估靜脈注射或口服 投劑後之拮抗活性，在以8-OH-DPAT (lmg/kg皮下處理）誘 發固定模式之前，先以化合物處理1與4小時。觀察動作持 續30秒且在8-OH-DPAT處理後開始3分鐘，並於15分鐘内每 3分鐘重複一次。 I5 紀錄5-HT1A受體之突觸後刺激所誘發之症狀，並以強 度評分表評量其強度，其中：0=不存在，1=模稜兩可，2= 存在與3=強烈。在整體觀察時間内（5個觀察期）將處理紐大 鼠之行為評分累積，且每個劑量的四隻大鼠以平均值表 示。處理組相較於控制（包藥）組之平均值變化以抑制百分比 2〇 表示，以量化拮抗活性。 B ·結果： 結果如表5所示。結果證實處理本發明化合物會造成明 顯且持久的突觸後5-ΗΤ1Α-受體拮抗活性。為了評估本發明 化合物抑制8-OH-DPAT誘發之大鼠固定模式（節律性前腳 56 200400947 步行），以最小平方法進行線性廻歸運算而評估ed75值(抑制 前腳步行達75%之等效劑量）。 在靜脈注射後，範例2X、範例1Y與範例5之化合物實 際上為等效。在口服投劑後，範例1Y之效用優於範例5，尤 5 其是在投予四小時後。 57 200400947 表5 8 - Ο Η - D PAT誘發之大鼠前腳步行之抑制（突觸後拮抗作用） 化合物 劑量(mg/kg) 前腳步行之抑制％ 1 h 4h 範例1 10 p.o. 100 96 範例1 3 p.o. 84 72 範例1 1 p.o. 35 37 範例1 lh p.o.:ED75=3.3 mg/kg /4 h p.o.:ED75=4.0 mg/kg 範例1Y 0.3 i.v. 100 84 範例1Y 0.1 i.v. 100 65 範例1Y 0.03 i.v. 72 35 範例1Y 0.01 i.v. 37 11 範例1Y lh i.v.:ED75=0.038 mg/kg /4 h i.v.:ED75=0.182 mg/kg 範例1Y 3 p.o. 92 85 範例1Y 1 p.o. 58 38 範例1Y 0.3 p.o. 18 18 範例1Y lhp.o.:ED75=1.7 mg/kg/4 hp.o.:ED75=2.6 mg/kg 範例2X 0.3 i.v. 100 89 範例2X 0.1 i.v. 100 63 範例2X 0.03 i.v. 65 49 範例2X 0.01 i.v. 39 6 範例2X lh i.v.:ED75=0.041 mg/kg /4 h i.v.:ED75=0.152 mg/kg 範例5 0.3 i.v. 100 85 範例5 0.1 i.v. 100 72 範例5 0.03 i.v. 82 54 範例5 0.01 i.v. 41 26 範例5 lh i.v.:ED75=0.032 mg/kg /4 h i.v.:ED75=0.138 mg/kg 範例5 3 90 67 範例5 1 42 46 範例5 0.3 8 20 範例5 lh p.ojEDmH mg/kg /4 h p.o.:ED75=4.6 mg/kg 58 200400947 I：圖式簡單言兒明】 第1圖為口服投予包藥（環狀）或10.0mg/kg範例1(方塊 狀）化合物（1 -環己基-4-[4-(2-曱氧基苯基)-1 -哌嗪基]-2-(2-氟苯基)-丁-1-醇;TLC Rf上方)後大鼠BVC與MP值變化之時 5 程。 第2圖為口服投予包藥（環狀）或3.0mg/kg奥昔布寧（方 塊狀)後大鼠BVC與MP值變化之時程。 【圖式之主要元件代表符號表】 益 4 59

Claims (1)

1. WU400947 拾、申請專利範圍： L —種化合物，其具有通式I

   R1代表一齒素原子， R2代表一 C3-C8之環烷基， R3代表一 c丨-C4之烷氧基或(:丨-匕之齒化烷氧基， m為1或2，以及 η為1或2， 10 或其對映異構物、光學異構物、非對映異構物、Ν_ 氧化物、結晶形式、水合物、媒合物或藥學上可接受之 鹽類。 2·如申請專利範圍第丨項之化合物，其中R3代表CPC#之烷 氧基。 15 3·如申請專利範圍第1項之化合物，其中R3代表C|_C4之鹵 化烷氧基。 4. 如申請專利範圍第丨、2或3項之化合物，其中該含有r1 本基之碳原子具備(R)構形。 20 5. 如申請專利範圍第4項之化合物，其中該含有R2與羥基 之碳原子具備（S)構形。 6·如申凊專利範圍第1項之化合物，其為1-[4-環己基

   60 基-3-(2-氟笨基)_丁基]_4-(2-甲氧基苯基)_哌嗪之任何單 離立體異構物形式： l-[(3R，4S)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基）_ 丁 基]-4-(2-甲氧基苯基)_哌嗪， l-[(3S，4R)-4-環己基-4-羥基·3-(2-氟笨基）_ 丁 基]-4-(2-甲氧基苯基)_哌嗪， H(3R，4R)-4-環己基-4-羥基-3-(2-氟苯基丁 基]-4-(2-甲氧基苯基)_哌嗪，以及 1-[(3S，4S)-4-環己基_4_羥基_3·(2_氟苯基）丁 基]-4-(2-甲氧基苯基)_哌嗪， 或一由其中任二或更多者呈任何比例所構成之混 合物。 15 如申請專利範圍第丨項之化合物’其為丨_[4_環己基_4_类 基-3-(2-氟苯基)-丁基]_4_(2_(2,2,2_三氟乙氧基)·苯基) 哌嗪之任何單離立體異構物形式： l-[(3R，4S)-4-環己基_4_羥基_3 (2氟苯基巧 基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)_苯基)_哌嗪， H(3S，4R)-4-環己基_4_羥基，2_氟笨基η 基]-4-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)_苯基)_d底嗪， 20 H(3R，4R)|環己基_4_經基，2_氟苯基η 基]-4-(2·(2,2,2-三敦乙氧基)_苯基卜辰噪，以及 1偶4Sm-環己基_4，基外氟苯基）_了 基]-4-(2-(2,2,2-三氧乙氧基)苯基)_呢嗓， 或-由其中任二或更多者呈任何比例所構成之湛 61 8. 合物。 4一·物紐成物，其包含有如_請專利第卜2、3、 ,、6或7項之化合物，或其對映異構物、光學異構物、 非對映異構物、N·氧化物、結晶形式、水合物、媒合物 或藥學上可接受之鹽類，並混合藥學上可接受 载體。 释蜊或 62