TW200407119A - Methods and compositions to treat conditions associated with neovascularization - Google Patents

Description

200407119 (1) 玖、發明說明 互相參照的相關申請案 此申請案係申稱 35 U. S. C· & 119(e)之美國暫時 申請案第6 0 / 4 0 1 J 3 0號，申請日期2 0 0 2年8月5日之權 益，其內容全文在此并如本揭示之參考文獻。 【發明所屬之技術領域】 本發明屬於醫藥學的領域。特定言之，彼相關於抗血 管新生的藥品以預防及治療疾病。 【先前技術】 血管生成作用係透過原先已有的微血管生長產生新的 血管構造。再此作用中，內皮細胞藉由蛋白質分解酵素之 降解得以脫離基底膜。然後此類細胞自母體血管遷移、分 裂、並形成新分化的血管構造（Risau，（ 1 997) Nature 3 8 6:67 1 -6 7 4; Wilting et al..( 1 99 5 ) Cell. Mol. Biol. Res. 4 1 (4):2 1 9-23 2)。 目前已發現書中不同生物因子其功能 可控制血管形成（Bussolino et al·，（1997) Trends in Biochem sci 22(7):251-256;Folkman and D’Amore，（1996)， Cell 8 7:1 1 5 3 - 1 1 5 5 )。此類因子包括各種功能的蛋白質， 例如：生長因子、細胞表面受體、蛋白質、蛋白胞、蛋白 晦抑制劑、及包外基質蛋白質（A c h e n a n d S t a c k e r，（ 1 9 9 8 ) Int. J. Exp. Pathol.79:255-265; Devalaraja and Richmond. (1999) Trends in Pharmacol. Sci. 20(4): 1 51-156; Ha n ah an， (2) (2)200407119 ( 1 99 7) Science 2 7 7:4 8 -50; M a i s o n p i e r r e et a ]; ( 1 9 9 7) Science 2 7 7 : 5 5 - 6 0 ; S u r i et al5 ( 1 9 9 6 ) Cell 8 7:1 1 7 1 - 1 1 8 0; Sato et a ]. ( 1 9 9 5 ) Nature 376:70-74; M i g n a 11 i and Rifkin， ( 1 9 9 6) Enzyme Protein 4 9:1 1 7 - 1 3 7; P i n t u c c i e 1 a t. ? ( 1 9 96) Semin thromb He most 22(6)517-524; Vernon and Sage， (1 995 ) Am. J. Pathol. 1 4 7 (4 ): 8 7 3 - 8 8 3 ; Brooks et al . 5 ( 1 9 9 4 ) Science 264 : 569-571; Koch et al.，（1995)

Nature 3 7 6:5 1 7 - 5 1 9)。血管生成作用的複雜性以及控制 彼進展之因子的多樣性，提供許多適用的治療介入點以控 制活體內血管的形成。 血管生成作用通常發生在胚胎發生期間、生長期間、 及特殊情況，例如：創傷愈合以及女性生殖週期，且需要 受到小心的控制（W i 11 i n g a n d C h r i s t，（ 1 9 9 6) Naturewissenschaften 8 3:1 5 3 - 1 64; Goodger and Rogers, ( 1 9 9 5 ) Microcirulation 2:329-343; Augustin et al.5 (1995) Am. J. Pathol. 14 7 (2):339-35 1 )。在血管生成作用中的一 些重要步驟爲：1)生長因子（即：血管內皮生長因子， VEGF)發出信號；2)基質金屬蛋白晦 （MMP)以及 VEGF受體交互作用：3)內皮細胞遷移至生長因子信號 發出的爲位點：以及4)形成內皮細胞小管。病理性的血管 生成作用在許多人類疾病中扮演主要角色，其係包括：腫 瘤生長及遷移性的癌症、糖尿病性視網膜病變、風濕性 關節炎、及其它發炎性的疾病，列如：牛皮癬 (F 〇 ] k m a η ; ( 1 9 9 5 ) Nature Med. ] (1 ): 2 7 - 3 1 ; P o 1 v e r i n i ? ( 1 9 9 5 ) (3) (3)200407119

Rheumatology 38(2):103-1 12; Healy et al.? (1998) Hum. Reprod. Update 4 ( 5 ):7 3 6 - 3 9 6 )此類案例中，疾病進展受 到未受調控的持續性血管生成作用所驅使。例如，在風濕 性關節炎中，新的微血管入侵關節並破壞軟骨。在糖尿病 性視網膜病變中，視網膜微血管入侵玻璃狀體，造成出血 並引起盲目。重要的是，腫瘤生長及轉移與血管生成作用 極相關。大部份觸及固體腫瘤要度過一段漫長的無血管生 成階段，期間彼之生長被限制在1 - 2毫米直徑。在此大小 下，腫瘤細胞可經被動式擴散取得必須的氧及營養素供 應。此類微小的腫瘤塊最後終究會啓動血管生成作用並徵 募週圍的血管，並使生長出的微血管對腫瘤塊進行供 血，提供腫瘤持續擴張以及惡性細胞遷徙至遠方的潛力。 雖然目前我們對於在病理性血管生成作用期間所發生的省 去現象之了解有長足的進展，但仍未發展出有效的醫藥學 化合物控制活體內的血管生成作用。因此，能控制血管 生成作用之有效治療對於許多人類疾病具有舒緩潛力。 傳統上，硏究醫藥學化合物主要是篩選具有令人滿意 之醫藥學性質的化學合成物，然後在活體內測試彼之毒性 及療效。依次方法選定的化合物往往具有活體內毒性 的副作用，此方法在硏發治療疾病之有效血管生成作用 抑制時並不成功。最近，已應用分子生物學技術發展出血 S生成作用抑制劑’例如：安史達丁（ a n g i 〇 s t a t i η) (O’Reilly et al”（ 1 994)Cell 79(2):3 1 5 -3 2 8)以及內史達丁 (e n d o s t a t i η ) ( Ο 5 R e i ] 1 y et al. ,(1997) Cell 88(2):2 7 7- 285), (4) 200407119 其可在貫驗模式中控制血管的形成。然而，該蛋白質治療 劑之生產價格昂貴且發現彼此不易培植及遞送之病患。目 前’蛋白質血管生成作用抑制劑並未發展成治療的藥物。 因此’人須要一種可安全的投用給病患且可有效的抑制血 管內皮細胞病理性生長的治療化合物。本發明提供適于 此目的及具有相關優點之組成物方法。

【發明內容】

據發現菜菔硫烷以及其衍生物可抑制內皮細胞生長及 增生以及血管生成作用。因此，本發明提供一種抑制內皮 細胞增生的方法，特別是對於達病理程度或組織內之特定 細胞。本發明亦提供抑制組織中新血管形成之方法。各方 法須要將有效量之菜菔硫烷、或其醫藥學上可接受的鹽類 、衍生物或前驅藥遞送至細胞或組織。其中一方法可與其 他化合物、組成物、或其他抑制新血管或過渡的細胞增長 如發生於癌病之療程聯用。此等療程包括，但不限于化學 治療，放射電療及適用抗新血管化合物。 本發明亦提供一種治療與內皮細胞增生及/或新血管 形成相關的疾病之方法，其係對患者投用有效量之菜菔硫 烷、或其醫藥學上可接受的鹽類、衍生物或前驅藥。其中 一方法此發明可與其他化合物，組成物5或與抑制新血管 生成及過渡性的細胞增長，如發生於癌病之療程聯用，此 等療程包括，但不限于化學治療，放射性電療及適用抗新 生血管與化合物。本發明亦提供治療病人之組套。 (5) (5)200407119 本發明進一步的提供一種篩選新治療的方法以確認其 》口療效果與采服硫院、或其醫藥學上可接受的鹽類、衍生 物或前驅藥相同、相似或更佳。篩選時需要比較菜菔硫烷 、或其醫樂學上可接受的鹽類、衍生物或前驅藥與藥劑之 間的抗增値效應。 本發明更給予增長一化合物、組成物或可治療及預防 新血管生長、血管生長、瘤形成或癌病的療程的療效和療 果之方法。此等治療包括，但不限于化學治療，放射性電 療及使用抗新血管生長化合物。 【實施方式】 本揭示中，會引用各種文獻、專利以及已發表的專利 說明作爲參考文獻。此類文獻、專利及已發表的專利說明 書的揭示內容全文在此並入參考文獻，以便在本揭示中更 完整的描述關於本發明之最新技藝。 本發明中除非特別說明，習見得分子生物學（包括重 鲁 組技藝）、微生物學、細胞生物學、生化學以及免疫技 藝、均爲熟知的技藝。該技藝在文獻中有完整的說明。 定義 本文中某些術語之意義如下定義。 在說明以及申請專利範圍中使用之單數形式“a”、 “an”以及“the”除非文中明確的指明，否則亦包括多數之含 義。例如，本文之“一種細胞”其係包括一種多數的細胞 (6) 200407119 ，並包括其混合物。 本文之“包‘含”係指組成物以及方法所包 件，並不派出其他的元件。當用以定義組成 ，“本質上由…組成”應排除組合內重要的元 其他元件。因此，本質上由定義之元件組成 排除源自分離及純化方法和醫藥學上可接受 污染物，例如：磷酸鹽緩衝的生理食鹽水， 其係由…組成”則應排除在投用本發明組 成分及實質方法步驟以外的微量元素。有各 定義的具體實施例均屬于本發明之範圍。所 :酸鹼度、溫度、時間、濃度、及分子量、 爲近似値，其誤差可在（+ )或（-)0.1區間。 不是明確的陳述，但本文中指數値前均使用 ，雖然不是明確的陳述，但本文中描述之試 在技藝上游許多已知遇彼相當的試劑。 本文之“分離”係指分離自組成、細胞以 其中之化合物通常與天然物相關。 “患者”或“宿主”係指脊椎動物，較佳 乳動物，更佳者爲人類病患。哺乳動物包括 鼠科動物、猴子、人類、家畜、競技動物、 本文之“癌症”、“腫瘤”及“腫瘤”可交互 單數或多數形式，意指具有進行惡性轉型 成病變之細胞。初級癌細胞（即’取自接近 位點的細胞）可經已爲大家接受的技藝（尤 括之列舉的元 物以及方法時 件之外的任何 的組合物將不 的載體之微量 、防腐劑等。“ 成物時之其他 個暫定義術語 有數値，例如 包括範圍，均 據瞭解，雖然 “約”。亦瞭解 劑僅係舉例， 及其他部份， 者爲動物或哺 (但非限於）： 及寵物。 使用，並可爲 作用對宿主造 惡性轉型作用 其是糸且織學白勺 -10- (7) (7)200407119 檢驗）與非癌細胞加以區別。本文中癌細胞之定義，不僅 包括初級癌細胞，且亦包括任何源自細胞祖先之細胞。此 包括轉移化的癌細胞，以及活體外的培養細胞以及源自癌 細胞之細胞株。當提到此類型之癌症時通常係指固體腫瘤 ，“臨床上可偵測的”腫瘤是指可用；例如：電腦斷層掃描 、磁力共振掃描（MRI)、X射線、超音波或觸診偵測的腫 瘤塊。單獨之生化和免疫上的發現不符合此定義。 本文之“抑制”係指停止、遲延或減緩組織中的內皮細 胞生長、增生或細胞分裂或血管形成。監視抑制之方法包 括（但非限於）：內皮細胞增生測定、測定血液含量測量血 管床的體積以及定量的測定血管構造的密度。當培養細胞 爲混合之細胞時’新血官形成可用定量測量細胞,表現內皮 細胞專一的標識，例如：血管生成因子、蛋白質分解酵素 以及內皮細胞專一的細胞黏著分子加以監測。 “組合物”係指活性劑與另一個惰性和活性的化合物或 組合物（例如一種可偵測的藥劑或標記）之組合，例如佐劑 〇 “醫藥組合物”意指包括活性劑與惰性或活性載體之組 合，製作的使用於活體外、活體內或體外使用之診斷的或 治療的組合物。 本文之“醫藥學上可接受的載體”包含任何標準醫藥上 的載體，例如磷酸鹽緩衝的生理食鹽水溶液、水、及乳狀 液，例如油/水或水/油乳劑、及各種類型之溼化劑。組成 物亦可包括穩定劑以及防腐劑。例如載體、穩定劑以及佐 -11 - (8) 200407119 劑，參閱 Martin， R Ε ΜIN G Τ Ο N f S P H A R Μ . S D ·， ] 5 1 (MackPubl . Co.，Easton( 1 975))。 “有效量”是指足以達成有利效應或所欲求之結果 量。例如可達成所欲求之治療效果的治療劑量。此劑 與預防有效的劑量（預防疾病或疾病症狀開始作用之赁 相同或不同。有效量可與一種或多種治療、應用或劑 同施用。 正如在此用法，及除非另外描述，“菜菔硫烷，，是 菔硫烷葡萄糖甘”分解的“糖甘配基”產品，這些成分 是存在於十字花科蔬菜（例如卷心菜，硬花甘藍，硬 藍芽，布魯塞爾菜芽，花椰菜，花椰菜芽，白菜，甘 羽衣甘藍，ARUGULA，大頭菜，芥菜，蘿蔔，紅甜 水田芥）。這名詞包括除非另外描述，菜菔硫院的衍 及其醫藥學上可接受 的鹽類及前驅藥新生的西花芽及椰菜花芽，有特 富的菜菔硫烷葡萄糖甘衍生物。菜菔六葡萄甘亦名葡 甘葡萄糖硫烷。菜菔硫烷之分子方程式是C^H^NOSs 其分子量是1 7 7.2 9。他亦名“4-甲基亞硫酸丁烷等硫餐 及（-)-1 -等硫氰.一 4 (R)- “甲基亞硫先丁院”。有認爲菜 烷可能具有抗癌性質由於它能誘導第π期解毒晦，例 谷胱甘太，S-轉移晦及卜苯琨還原晦。這些抗癌性質 抗致癌物及具有毒性的親電子性物質。 本發明申請人發現財富菜菔硫烷可抑制內皮細胞 並具有抗血管生成的性質。依據此類發現，本發明藉 hED. 的劑 量可 祀量） 量共 「‘菜 通常 花甘 藍， 采及 生物 別豐 萄糖 ，及 I，，， 菔硫 如： 可抵 生長 由遞 - 12 - (9) 200407119 送具生長抑制量的菜菔硫烷、或其醫藥學1 物、鹽類或前驅藥至細胞可提供抑制內皮紐 。本發明亦藉由遞送抗血管生成作用良的菜 醫藥學上可接受的衍生物、鹽類或前驅藥至 抑制組織血管生成之方法。 此方法可在活體外活活體內活活體內施 外施行時，內皮細胞或血管化的組織可在熟 業人士熟知的條件下（例如舉例於下）進行培 組織可取自己建立的細胞株或用取自患者組 樣本培養。然後可將菜菔硫烷或其醫藥學上 物 '鹽類或前驅藥直接加入培養液或以醫藥 遞送。 其中一種菜菔硫烷衍生物爲菜菔亞硝g 菜菔硫烷”除非特別地說明，包含各種分離 例。該名稱包含外消旋酸鹽、以及其純化的 式（D-，L-)以及（D-，L)，衍生物，例如，菜菔 其醫藥學上可接受的鹽類以及前驅藥物。外 的純化方法如下述。其特色之一中，純化的 (D-)形式。在另一特色中則僅爲（Lfc)形式。 (L-)形式係各自可自市售得之以及各自分離 的方法。例如，使用HPLC對掌性，例如： 、對掌性的-CBH以及對掌性的-HAS，彼 Tech I n t e r η a t i ο n a ], A B · P e r k i n s - E1 m e r 亦有 分離組套，其名稱爲Sdfadex對掌性分離組 :可接受的衍生 3胞生長的方法 ;菔硫烷、或其 ί組織、可提供 丨行。當在活體 ί悉此技藝的專 養。細胞及/或 .織切片檢查之 可接受的衍生 組合物之成分 度鹽。本文之“ 的具體實施施 鏡像異構的形 硫烷乙酸鹽、 消&Ε采服硫燒 菜菔硫烷僅爲 外消旋（D-)或 自技藝上已知 對掌性的-AGP 可購自 C h r 〇 m 販售對掌性的 套。 (10) (10)200407119 此鹽類之實施，包括：乙酸鹽、己二酸鹽、藻膠酸鹽 、天門冬安酸鹽、苯甲酸鹽、重硫酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸 鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸 鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸、反丁烯二酸鹽、葡萄糖 庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸酯、己酸脂、氯化 氫、溴化氫、碘化氫、2 -烊基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁 烯二酸脂、甲磺酸脂、2 -奈磺酸鹽、菸鹼酸鹽、草酸鹽、 棕櫚酸鹽、果膠質酸鹽、高硫酸鹽、苯基丙酸鹽、苦味酸 H 鹽、叔戊酸脂、丙酸脂、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氫酸脂 '甲苯磺先鹽以及十一烷酸脂。其它鹽類之實施例包括本 發明化合物之陰離子，例如：Na+、NHT、及NW 4 +(其 中W是C工· 4烷基）。 用於治療時，本發明化合物之鹽類是醫藥學上課接受 的鹽類。然而，非醫藥學上可接受的酸及鹼之鹽類亦可使 例如來製備或純化成醫藥學上可接受的化合物。 並非每次治療均對各個病患都會有效，因此活體外.測 φ 定劑量對各病患之功效將會是有利的。在本發明中提供此 類方法測定菜菔硫烷的治療是否能治療各個病患相關於內 皮細胞病理性增的專一性疾病。例如，將分離自病患之組 織活體與有效量之醫藥組成物和定義於此治療劑，在細胞 有效的生長以及增生的條件下接觸。用習見的方法（例如 :描述於此之CPAE測定）測定，病理細胞生長的抑制， 顯示本發明之組成物及/或治療劑可有效地治療病患者。 血管生成作用或新血管分佈之形成是新血管的基本過 -14 - (11) (11)200407119 程。彼涉及基本的生理現象，例如··生殖發生以及創傷愈 合。在正常的情況下，Ιίϋ管生成作用受到高度調控。然而 ，許多疾病受到持續性未調控的血管生成作用驅動。在風 濕性關節炎中，新的微血管入侵關節並破壞軟骨。在糖尿 病視網膜病變中，視網膜中新的微血管入侵玻璃狀體’造 成出血，以及引起盲目。腫瘤生長以及腫瘤轉移亦與血管 生成作用相互依存。大多數初級固體腫瘤經過長期無血管 的狀（明顯的潛伏期），此時生長的最大限度約2毫米直 φ 徑。至此大小，腫瘤細胞可經簡單的被動擴散取得必須的 氧以及營養素。此類微小的腫瘤塊經由徵募週圍的成熟宿 主血管，最後終究可開啓血管生成作用，並開始向外長出 新的微血管，最後浸潤入腫瘤塊，如此造成腫瘤塊無情的 擴張以及生血性遷移性的散步。血管生成的開啓最初是受 到假設的外來產物之觸發以及接著受方腫瘤細胞生長因子 ，被稱爲“腫瘤血管生成作用因子”（TAF)精巧的操控。 本發明亦提供治療患者相關於病理性的新血管形成病 φ 症之方法，其係對患者投用有效治療量之菜菔硫·烷（外硝 酸鹽），（D-)或（L·)、或內含一種或多種此類物質之醫藥組 成物。本文中“治療”係指緩和相關於病理性新血管生成作 用及/或內皮細胞生長之症狀以及降低新血管生成作用或 內皮細胞生長。該症狀包括（但非限於）：關節炎症狀、新 血管性皮膚症狀、糖尿病性視網膜病變、卡波濟氏 (Kaposi’s)肉瘤、老化性視網膜黃斑變性、毛細血管擴張 、青光眼、瘢瘤、角膜移植排斥、創傷顆粒化症、血管纖 -15- (12) (12)200407119 維瘤、〇 S 1 e r - W e b b e r症候群、心肌血管生成作用、及硬皮 病。舉例的關節炎症狀係選自：風濕性關節炎以及骨關節 炎。治療癌症以及固體腫瘤時，其“治療包括抑制血管生 長，造成腫瘤及/或癌細胞缺少其生長所須要的營養物。 因此腫瘤及生長物將會降低尺寸並可能消失。投藥治療關 節炎症狀，將會導致軟骨（特別是關節）血管形成減低，造成 此類區域移動性以及撓曲性增加。治療牛皮癬時，投藥將 可降低皮膚上的症狀，例如：痂、薄片以及皮膚表面下可 見的血管。在糖尿病性的視網膜病變中，投用活性的溶析 份將可降低視網膜中外來血管之形成，造成無阻礙之視覺 。治療卡波濟氏（Kaposi’s)肉瘤時，投用活性的溶析份將 可抑制生長及/或血管進一步的形成，從而抑制損害之形 成及/或腫瘤之產生。 對患者投用活性的溶析份，例如：老鼠、大鼠或人類 病患，藥劑中可添加醫藥學上可接受的載體及以供患者全 身、口服、經皮或局部投用。治療量可用於治療方法中溶 析份之毒性形成而變化。活性的溶析份可經口服地、靜脈 內地、腹腔內的、或經皮地遞送。當遞送至動物時，本方 法適用於進一步的證實活性溶析份的功效。 在動物模式之實施例中，將一群裸鼠（Balb/ cNCRnu/nu 雌性，S i m ο n s e η，G Π r o y 5 C A )各自以皮下接種 約1 〇5至約1 〇9如本文定義之過渡增値的細胞。當移植完 成後，投用化合物，例如在移植處附近皮下注射。每週二 次使用venier測驗器測定移植之面積是否降低。 -16 - (13) (13)200407119 可適當的使用 MRL/lpr 老鼠（MRL/MpJ-Fas5 Jackson Labs，Maine)測試或監視關節炎症狀的功效。正性治療的 利益包括降低關節及動物後腳之腫脹以及降低軟骨降解（ 可用X射線監測）. 將路易斯大老鼠群（8 星期年齡，130-150 克重， JACKSON LABS，MAINE，USA)接受牛交原蛋白II類 (B II)之免疫反應注射，從而產生類風濕病狀。可溶解於 0.1M乙酸至400微克/毫升（ug/mi)濃度相容積的BII及 ICFA(不完全的彿羅因德佐劑）混合成的乳膠在 20微克 /1 〇〇微升的濃度下注射於大老鼠之尾巴基部，當類風濕情 況出現時，觀察連串的引起的物理病狀並記錄四等級之分 類於2 8天時間內。其他的動物模型亦可適合地使用。整 個療程可爲單一劑量、多重劑量、連續地間歇地於活體內 投藥。決定最有效的方式以及投藥劑量之方法則爲熟悉此 技藝的專業人士所熟知，並將視治療組合物、治療之目的 、治療之標的細胞、以及治療之患者而變化。可進行單一 和多重投藥，劑量水準以及模式係經治療醫師加以選擇。 適當劑量的製劑以及投用試劑之方法可發現於下。 本發明之組成物及藥學調配物可用於製作藥劑及健康 食品補充劑，依據習見的程序投藥（例如含有效成分之醫 藥組合物），用於治療人類及其它動物。 醫藥組合物可口服地、鼻內地’、非經腸地或經吸氣治 療，其形式可爲：藥片、錠劑、顆粒、膠囊、藥九、安瓶 、拴劑或氣溶膠形式。內含有效成份之水溶性或非水溶性 -17 - (14) (14)200407119 稀釋劑、糖漿、顆粒或粉末亦可爲懸浮液、溶液以及乳狀 液形式。除了本發明化合物之外，醫藥組合物亦可含有其 它醫藥學上的有效成份。 更明確的說，本文中活性的溶析份之有效成份，在治 療時可經任何適當的路徑投用，其係包括：口服的、直腸 的、鼻腔的、塗覆的（其係包括經皮的、氣溶膠、口頰的 以及舌下的）、陰道的、非經腸的（其係包括皮下的、肌肉 內的、靜脈內的以及皮膚內的）、以及肺部的投用路徑。 φ 較佳的路徑將視症狀以及接受者年齡、以及治療的疾病而 變化。 當進行活體內治療時，患者之病理性內皮細胞生長或 新血管形成會受到移植。其係將有效達成預期結果之有效 治療量的菜菔硫烷，（外消旋酸鹽、D -，L -)、或其醫藥學 上可接受的衍生物、鹽類或前驅藥遞送至患者。本發明亦 經由投用有效治療量之或生長抑制量的菜菔硫烷，（外消 方疋酸鹽、D -，L，）或其醫藥學上可接受的衍生物、鹽類或前 鲁 驅藥。對患者提供治療相關於病理性新血管形成病症之方 法。δ亥症狀包括（但非限於）：關節炎症狀、新血管性皮膚 症狀、糖尿病性視網膜病變、卡波濟氏（Kap〇si，s)肉瘤、 老化性視網膜黃斑變性、毛細血管擴張、青光眼、瘢瘤、 角膜移植排斥、創傷顆粒化症、血管纖維瘤、〇Siei·-Webber症候群、心肌血管生成作用、及硬皮病。舉例的 關節炎症狀係選自：風濕性關節炎、牛皮癖關節炎以及骨 關節炎。 - 18- (15) (15)200407119 當對患者，例如：老鼠、大鼠或人類病患、藥劑中可 添加醫藥學上可接受的載體及以供患者全身、口服、經皮 地或局部投用至患者。治療量可經實驗測定，並將視治療 的病理狀況，治療的患者以及治療的症狀而變化。 並非每一個別地治療都會有效，因此在活體外對各病 患進行功效測定將會是有利的前置步驟。在本發明中提供 此類測定組成物或治療是否可對患者相關於內皮細胞病理 性增生或血管生成作用之特定的疾病進行治療之方法。例 如’從病患中分離組織活體檢查樣品在有效進行細胞生長 以及增生條件下與有效量之醫藥組成物本文定義之治療物 接觸。用習見的方法，例如：描述於此之CPAE測定，測 定病理細胞生·長的抑制，結果顯示本發明之組成物及治療 劑可有效地治療病患。 樂物成分雖可單獨投用，但宜以包含至少一個有效成 份（定義如上）與一種或多種醫藥學上可接受的載體以及視 需要包含其它治療劑之藥血調配物進行投用。各載體必須 是“可接受的”並與調配物種其他成分相容以及對病患無害 〇 製劑包括適用於口服的、直腸的、鼻腔的、塗覆的（ 其係包含：經皮的、口頰的及舌下的）、陰道的、非經腸 的（含皮下的、肌肉內的、靜脈內的以及皮膚內的）以及肺 部的投藥之製劑。製劑方法可方便地爲單位劑量形式以及 可用任何W樂技蟄上已知的方法製備。該方法包括結合有 效成份與載體以構成一種或多種附件成份之步驟。一般而 -19- (16) (16)200407119 言’製備製劑係均勻及緊密地結合有效成份與液體載體或 細分的固體載體或以上二者，然後視須要的將產物定形。 適用於口服投藥的本發命製劑可爲各自內含預定量有 效成份的不連接單位（例如：膠囊、澱粉囊劑或藥片）；其 可爲'粉末或顆粒；水溶性或非水溶性液體溶液或懸浮液； 或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。有效成分亦可爲大 九藥、藥糖劑或糊狀醬料。藥片可爲可經壓縮或模製加以 製作，可視爲需要包含一種或多種附件成分。製備壓縮藥 片時’可用適當的機器壓縮鬆散形式（例如粉末或顆粒）的 有效成份，並可視需要混合結合劑（例如：聚乙烯比咯酮 、明膠、烴基丙基甲基纖維素）、潤滑劑、惰性稀釋劑、 防腐劑、崩解劑（例如：澱粉乙醇酸鈉、交聯的聚乙烯比 咯酮、交聯的甲基纖維素鈉）表面活性的或分散藥劑。模 製藥片可用適當的機器將粉末狀的化合物混合物用惰性液 體稀釋劑濕化後經模製加以製作。藥片可視需要塗覆或分 散，並可將有效成份調制成提供緩釋或控制釋放之形成， 例如適用各種比例之基丙基甲基纖維素提供所欲求之釋放 形式。藥片可視需要提供腸內釋放而非在胃部釋放。 適用於口腔局部投藥的製劑包括：錠劑，其係包含通 常用蔗糖以及阿拉伯膠和特拉加康斯膠樹風味化之有效成 分；該製劑可爲包含有效成分與惰性物，，例如：明膠以 及甘油、或蔗糖以及阿拉伯膠之錠劑；以及該製劑可爲包 含有效成份與適當液體的漱口水。 依據本發明進行塗覆投藥的醫藥組合物可調製成··藥 •20- (17) (17)200407119 膏、乳油、懸浮液、塗劑、粉末溶液、軟膏 '噴灑、氣容 膠或油狀物。此外，製劑可包含貼片劑或調料，例如··含 浸有效成分以及視需要一種或多種賦形劑或稀釋劑的繃帶 或黏合劑膏藥。 治療眼睛或其它外部的組織，例如：口以及皮膚疾病 時，較佳者係施用內含有效成分之塗覆藥膏或乳油製劑。 當調製成藥膏時，藥物可使用石蠟或可與水混合之物質調 製成藥膏。此外，藥物成分可與水包油乳油性的物質調製 成乳油。 視需要，乳油之水相克包括，例如：至少約3 0%w/w 之多元醇，即具有兩個或多個基之醇，例如··丙二醇、丁 烷-1，3 -二醇、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油以.及聚乙二醇 及以上之混合物。塗覆製劑可視需要包括可促進藥物有效 成分經由皮膚或其它感染區域吸收或穿透之化合物。該真 皮穿透增強劑之實施例包括：二甲（基）亞風以及相關的類 似物。 本發明乳狀液之油相可用習知的成分以任何習知的方 法構成。此油相可僅包含乳化劑（即爲習知的乳化劑）視需 要彼可包含至少一種乳化劑與脂肪或油或脂肪與油之混合 物。較佳之親水性乳化劑中可包括親脂的乳化劑作爲穩定 劑。較佳者亦可包括油以與脂肪。乳化劑可含或不含穩定 劑可製作成所謂的乳化蠟，蠟與油及/或脂肪可製作成所 謂的乳化藥膏，其可形成乳油製劑之油性分散相。 適用於調制本發明之乳化劑及乳化穩定劑，包括： -~ (18) (18)200407119 T、veen6 0、Span80、鯨硬脂醇、肉豆蔻基醇、單硬脂酸甘 油脂以及月桂基硫酸鈉。 由於活性化合物在大多數用於醫藥學乳劑製劑的油中 其溶解度非常低，所以可根據所欲求之化妝品性質選擇適 當的油或脂肪進行調製。因此較佳之乳油應具有適當的堅 硬度以避免從食管或其它容器中漏出非油腻的、非染色的 以及可淸洗的產物。可使用直鏈的或支鏈、單-或二鹽基 的烷基酯類，例如：二-異己二酸酯、硬脂酸異鯨蠟酯、 椰子脂肪酸丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸酯、棕櫚 酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2 ·乙基己酯、或鏈酯類 參合物，習知的Crodamol CAP，後三者爲較佳的酯類。此 類酯類可取決於性質須而要單獨結合使用。此外，可使用 高熔點脂質，例如：白色軟石蠟或液體石蠟或其它礦物油 〇 適用於眼睛塗覆投藥的製劑，亦包括眼藥水其中之有 效成分可溶解於或懸浮於適當的載體，尤其是水溶性溶劑 肇 。直腸投藥的製劑可爲含適當的鹽基，其係包含，例如： 可可油或水楊酸鹽之拴劑。 適用於陰道投藥的製劑可爲陰道藥栓、塡塞物、乳膏 、凝膠、軟膏、泡沫或噴灑製劑，其中除了內含前驅藥成 分之外亦可含技藝已知的適當的載體。 適用於鼻腔投藥的製劑，其中載體可爲包括粗粉末之 固體，其具有之粒度例如，介於約2 0至約5 0 0微米，其 可用吸入之方法投用，即從靠近鼻子含有粉末之容器經由 -22 - (19) (19)200407119 鼻腔快速的吸入。適用於，例如：鼻噴液、鼻腔滴液、或 噴霧器之氣溶膠投藥的載體包括前藥五成分之水溶性或_ 性溶液的液體。 適用於不經腸道的方法給藥之製劑包括水溶性以及非 水溶性的等張液；滅菌之注射溶液，彼可含有抗氧化齊(j、 緩衝溶液、抑菌劑以及賦予調配物與與其的接受者血液等 張的溶質；以及水溶性以及非水溶性滅菌之懸浮液，其可 包括懸浮劑以及增稠劑、及微脂粒或其它設計來將化合物 標定至血液組成物或一個更多個器官的爲例系統。製劑可 存在於單位-劑量或多劑量封密容器中，例如安瓶以及管 形瓶，以及可儲存於冷凍乾燥的狀況，在使用之前僅須要 加入滅菌之液體載體，例如水，即可作爲注射劑。即用的 注射溶液以及懸浮液可製備自先前描述之滅菌粉末、顆粒 以及藥片。 較佳的單位劑量形式，其中內含每日劑量或單位、每 曰劑量（列舉如上）、或其適當溶析份之藥物成分。 除了以上成分之外，本發明製劑可包括其它在此技藝 中習見得與調配相關之各型試劑，例如適當的口服投藥製 劑中，該試劑可進一步的包括：甜劑、粘稠劑以及調味劑 。彼亦可含有額外的活性劑，例如：抗-腫瘤、抗-癌症、 抗-血管生成劑或免疫增強子。 菜菔硫烷（外消旋酸鹽或旋光上純的組合）其前驅藥， 鹽類或其衍生物以及相同之組成物亦可作爲獸醫製劑的形 式使用，其可例如用技藝中習知的方法製備。 -23- (20) (20)200407119 本發明進一步的提供餘選抑制新血管形成或內皮細胞 生長之治療劑的方法。篩選方法包含： (a )將藥物與適當的細胞或組織樣本接觸； (b )將適當的細胞分離樣本或組織樣本與有效治療 夏之采Μ硫院或其醫樂學上可接受的衍生物、 鹽類或前驅藥接觸，以及 (c )比較步驟（a)與步驟（b)中樣本之生長，若步驟 (a )中任何藥劑對生長之抑制效果與步驟（b )樣 本中之程度相同或相似，彼即爲抑制新血管形 成或內皮細胞生長之治療劑。 其他在此描述的治療以及試劑，可視需要與樣品合倂 〇 本發明亦提供治療患者相關於病理性新血管形成病症 的組套。該組套包括有效治療量之菜菔硫烷（外消旋酸鹽 、（D-)或（L〇、或其醫藥學上可接受的衍生物、鹽類或前 驅藥以及說明。適用於該組套治療的病症，係選自：關節 炎症狀、新血管性皮膚症狀、糖尿病性視網膜病變、再狹 窄症狀、加博氏K ap 〇 s i ’ s肉瘤、老化性視網膜黃斑變性 、毛細管擴張、青光眼、瘢瘤、角膜移植排斥、創傷顆粒 化症、血管纖維瘤、〇 s 1 e r - W e b b e r症候群、心肌血管生成 作用、硬皮病風濕性關節炎、牛皮癬的關節炎以及骨關節 炎。 下列實施例預期用以說明，但非限制本發明。 實施例 一 24 - (21) (21)200407119 實施例一：菜菔硫烷之提煉及純化菜菔硫烷是從十字 花科植物種子提煉及分純，這些方法是根據 MATUSHESKI 及其同僚（】.八§1^〇:，？〇〇(^1以茁.，49;1 8 67 -1 8 7 2 ).( D;L)-菜菔硫烷是從有機化學合成而得（（Kim，Sj Yi，（]8 96).J. Org. Chem.5]，26 1 3 -2 6 1 5 ) D-菜菔硫烷是由其 外消旋混合物，（D，L)-菜菔硫烷使用對掌性管柱分離而 獲得。所有菜菔硫烷皆可以從 LKTLABORATORIES購買

實施例二：菜菔硫烷之移植肉皮細胞測定 肉皮細胞測定：本測定之進行係一句 CONALLY，etal. ( 1 9 8 6)，ANAL· BI0CHEM，152，1 3 6 -4 0,而加以修飾之方法 (LIANG AND WONG ( 1 9 99) ANGIOGENESIS: FROM THE MOLECULAR TO INTEGRATIVE PHARMACOLOGY， edited by MARADOUD-AKIS. Kluwes Academic/Plenm Pu NEW YORK)，牛 CPAE 細胞係購自 American Type φ Culture Collection (ATCC)，培養於 MEM-10E 至百分之九 十五之匯合生成狀態。此細胞可用 0.2 5 %胰蛋白酶溶液由 組織的培養瓶，然後鋪平於24升的組織培養板片用同樣 的培養基液及每升具有1 0，Q 0 0細胞的密度。這些板片在 保溫器培養於37°C及5%二氧化碳氣8小時後，可加上測 定樣品及對照每一 1 0 0微升樣品都放於二個不同的井內可 使重現性得到保證。這些樣品於保溫60小時後，培養基 液可吸收掉，然後細胞數目可用酸性磷酸酶的比色法去、測 -25- (22) 200407119 定。 結果以及討論：

表I.L-菜菔硫烷抑制內皮細胞測定。 L-菜菔硫 烷濃度(微 克/毫升） 0.78 微克/毫升 1.56 微克/毫升 3.13 微克/毫升 6.25 微克/毫升 12.5 微克/毫升 25 微克/毫升 內皮細胞 增長之抑 制(百分比） 0% 28.33% 71.38% 92.13% 94.5% 94.5% 表 LLD- 菜菔硫烷抑制內皮細胞測定。 L-菜菔硫 烷濃度(微 克/毫升） 0.78 微克/毫升 1.56 微克/毫升 3.13 微克/毫升 6.25 微克/毫升 12.5 微克/毫升 25 微克/毫升 內皮細胞 增長抑制（ 百分比） 0% 35.94% 74.13% 94.4% 95.8% 95.6% -26- (23) 200407119 表iu.d5l-菜菔硫烷抑制內皮細胞測定。 L-菜菔硫 烷濃度(微 克/毫升） 0.78 微克/毫升 1.56 微克/毫升 3.13 微克/毫升 6.25 微克/毫升 12.5 微克/毫升 25 微克/毫升 內皮細胞 增長之抑 制(百分比） 0% 31.85% 69.65% 92.72% 95.05% 95.08%

菜菔硫烷的每一對影體都能抑制內皮細胞之生長。內 皮細胞測定的結果顯示菜菔硫烷加入內皮細胞測定中可有 效地抑制內皮細胞之生長，在這些測定，L-菜菔硫烷，D-菜菔硫烷，及D，L-菜菔硫烷在6.25微克/毫升的濃度可 抑制92%以上的內皮細胞增長。這些結果正是菜菔硫烷是 一個十分有效的內皮細胞抑制劑。 L-菜菔硫烷，D-菜菔硫烷，及D，L-菜菔硫烷在不同 Φ 濃度下對血管增生抑制的測定已列於圖1。菜菔硫烷甚至 在十分低的濃度是很強烈的內皮細胞生長抑制劑。 例3 菜菔硫烷對各種不同癌細胞系之抑制癌細胞系。 這些測定是依據下列步驟操作：所用的癌細胞系包括 LncaP(前列腺），SW4 8 0 (直腸）與HTB72(黑色素癌），都從 AMERICAN TYPE CUTURE COLLECTION (ATTC),購買， -27- (24) (24)200407119 癌細胞放於2 5平方厘米之培養瓶。培養每種細胞之培養 基至90%匯合生狀態，這些細胞使用胰蛋白晦處理，點數 ，及稀釋至每厘升有1 0 5 0 0 0細胞，將一毫升的細胞放於 2 4 -孔培養板之每一孔。讓細胞粘連過夜。不同濃度的測 定樣本加上5 0微升（u 1)水，p B S (磷酸鹽緩衝劑生理食鹽 水），或1 X培養基。對比樣品孔內將有同樣容積之溶液， 細胞可生長6 0小時於3 7 ° C溫度及5 %二氧化碳氣體中， 每一孔之培養基液被吸掉，然後細胞洗淨用1毫升P B S 然後開始細胞測定。5 0 0微升之底物溶液（1 〇 〇毫克分子鈉 乙酸鹽，ρΗ5·5，0.2%Trit〇n Χ-].〇〇表面活性劑毫克/毫 升對硝基苯酚磷酸鹽）加入細胞孔內，細胞板片保溫二小 時於37。0，然後加上1毫升0.^(0.1毫克分子），之鈉氫 氧化物，這些樣品之41 0nm(微米）之光密度可自一微量板 片器測定。 結果及討論 L -菜菔硫烷對各種癌細胞系的抑制已列於下列表之 IV 至 VI: - 28- (25) 200407119 表IV，L-菜菔硫烷對HTB72細胞生長抑制之測定。 L·菜菔硫 烷濃度(微 克/毫升） 0.39 微克/毫升 1.57 微克/毫升 3.13 微克/毫升 6.25 微克/毫升 12.5 微克/毫升 25 微克/毫升 HTB72 細 胞生長抑 制百分率 17.21% 48.5% 89.6% 95.09% 95.83% 96.3%

表V.L-菜菔硫烷對Lncap細胞生長抑制之測定。 菜菔硫 烷濃度(微 克/毫升） 0.39 微克/毫升 ]·57 微克/毫升 3.13 微克/毫升 6.25 微克/毫升 12.5 微克/毫升 25 微克/毫升 Lncap細胞 生長抑制 百分率 56.77% 74.22% 97.9% 97.9% 97.9% 97.9% 表VI， L-菜菔硫烷對SW4 8 0細胞生長抑制之測定 〇 L-菜菔硫 0.39 1.57 3.13 6.25 12.5 25 烷濃度(微 微克/毫升 微克/ 微克/ 微克/ 微克/ 微克/ 克/毫升） 毫升 毫升 毫升 毫升 毫升 SW480 細 胞生長抑 制百分率 15.13% 40.75% 83.27% 93.02% 94.3% 94.44%

-29- (26) (26)200407119 吾等發現L -菜菔硫烷抑制幾種癌病細胞系，包括 L11 cap(前列腺癌細胞系）及 SW 4 8 0 (直腸癌細胞系）及 HTB72(黑色素癌細胞系），L-菜菔硫烷於極低濃度（6.25微 克/毫升）對這些各種癌細胞表現有強烈之抑制，，這抑制 作用尤其是於對付Ln cap (前列腺癌細胞系）特別有效。 雖然爲了便於了解起見，前述的發明已用於一些詳細 之說明以及實施例加以描述，因此熟悉此技藝的專業人士 可據此對本。發明加以改變以及修飾。例如對那些熟悉此 技藝的專業人士而言，本發明方法可合倂一種或多種習知 的抗腫瘤、抗血管生成劑或免疫提高治療劑以及組成物， 例如：鯊魚、鯊魚軟骨、咯肯安醇。因此，上述之描述以 及實施例不應用以限制本發明申請專利範圍之真正的範圍 【圖式簡單說明】 圖1顯示在內皮細胞測定試驗下，L-菜菔硫烷，D —菜 服硫院及D ’ L -采服硫院在不同濃度下對內皮細胞增生的 抑制作用的圖。 -30 -

Claims (1)

1. (1) (1)200407119 拾、申請專利範圍 1 . 一種用於抑制內皮細胞生長之醫藥組成物，包含 遞送生長抑制量的菜菔硫烷、或其醫藥學上可接受的衍生 物、鹽類或前驅藥至細胞。 2. 如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中菜菔 硫烷係選自：D-菜菔硫烷、L-菜菔琉烷以及D，L·菜菔硫烷 外消旋酸鹽。 3. 如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中菜菔 φ 硫烷衍生物爲菜菔硫烷亞硝酸鹽。 4. 一種用於抑制組織血管生成作用的醫藥組成物， 包含遞送抗血管生成作用量的菜菔琉烷、或其醫藥學上可 接受的衍生物、鹽類或前驅藥至組織。 5. 如申請專利範圍第4項之醫藥組成物，其中菜菔 硫烷係選自：D-菜菔硫烷、L-菜菔琉烷以及D，L-菜菔硫烷 外消旋酸鹽。 6. 如申請專利範圍第4項之醫藥組成物，其中菜簸 # 硫烷衍生物爲亞硝酸鹽。 7 . —種用於抑制主要器官血管生成作用之醫藥組成 物，包含遞送抗血管生成作用量的（D-菜簸硫烷，菜菔 硫烷，或菜菔硫烷外消旋酸鹽、或其醫藥學上可接受的衍 生物、鹽類或前驅藥至組織。 8.如申請專利範圍第1，4或7項中任一項之醫藥組 成物，其中遞送爲活體外，活體內，或體外之遞送醫藥組 成物。 -31 - (2) (2)200407119 9 · 一·種用於治療宿主中與病理組織血管生成有關連 之病症之醫藥組成物，包含遞送抗血管生成作用量的菜菔 硫烷、或其醫藥學上可接受的衍生物、鹽類或前驅藥至組 織。 10·如申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其中菜菔 硫院可選自全組合包括D -菜菔硫院，L -菜菔硫院及D，L -菜菔硫烷外消旋酸鹽。 11·如申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其中該病 症係選自：腫瘤、關節炎症狀、新血管性皮膚症狀、糖尿 病性視網膜病變、Kaposi’s肉瘤、老化性視網膜黃斑變性 、再狹窄症、毛細血管擴張、青光眼、瘢瘤、角膜移植排 斥、創傷顆粒化症、血管纖維瘤、Osier-Webber症候群、 心肌血管生成作用、牛皮癬關節炎及硬皮病。 12·如申請專利範圍第9項醫藥組成物，其中該病症 係選自前列腺癌’直腸癌及黑色素癌之癌症。 13.如申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其中該病 症係選自風濕性關節炎及骨關節炎之關節炎症狀。 1 4 .如申請專利範圍第9項之醫藥組成物，其中菜菔 硫烷衍生物爲菜菔硫烷亞硝酸鹽。 15· —種用於治療相關於患者主要器官病理性新血管 性形成之病症的醫藥組成物，其係包含有效治療量之D -菜菔硫烷，L-菜菔硫烷，及D，L-菜菔硫烷，或其醫藥學 上可接受的衍生物、鹽類或前驅藥。 ]6 ·如申請專利範圍第9至]5項中任一項之醫藥組 -32- (3) 200407119 成物，其係經口服的、靜脈內的 '腹腔內的、或經皮下 的投藥方式投用。 1 7 ·如申請專利範圍第9至1 5項中任一項之醫藥組 成物’進一步包括投予有效量的抗血管生成劑。 18·如申請專利範圍第1 6項之醫藥組成物，其中宿 主或患者是動物。

   19·如申請專利範圍第1 7項之醫藥組成物，其中動 物係選自：寵物、家畜或人類病患者。 2 0· —種改進患者一般的健康狀況以及福祉之醫藥組 成物，其包含投予患者有效量之菜菔硫烷。 2 1·如申請專利範圔第2 0項之醫藥組成物，其係以 健康食品補充劑的方式遞送。 22·如申請專利範圍第20項之醫藥組成物，其中宿 主或患者是動物。

   23. 如申請專利範圍第2 1項之醫藥組成物，其中動 物係選自：寵物、家畜或人類病患。 24. 如申請專利範圍第20項之醫藥組成物，其中菜 菔硫烷係選自：D-菜菔硫烷，L-菜菔琉烷以及D，L-菜菔硫 院外消旋酸鹽。 2 5.如申請專利範圍第2 0項之醫藥組成物，其中菜 菔硫烷衍生物是菜菔硫烷亞硝酸鹽。 2 6. —種篩選供抑制新血管形成和內皮細胞生長之治 療劑之醫藥組成物，其係包含以下之步驟： a.將藥劑與適當的細胞或組織樣本接觸； - 33· (4) (4)200407119 b.將適當的細胞和組織樣本之分離樣本與有效治療 厘之采菔硫烷和其醫藥學上可接受的衍生物、鹽 類或前驅藥接觸；以及 c*比較步驟（a)與步驟（b)中樣本之生長，且其中步 驟（a)中任何藥劑對生長之抑制效果與步驟（b)樣 本中之程度相同和相似，彼即爲抑制新血管形成 或內皮細胞生長之治療劑。 2 7 ·如申請專利範圍第2 6項之醫藥組成物，其中接 觸爲活體外或活體內之接觸。 2 8 .如申請專利範圍第2 6項之醫藥組成物，其中菜 菔硫烷係選自：D -菜菔硫院，L -菜菔琉烷以及D，L _菜菔 硫烷外消旋酸鹽。 2 9 ·如申請專利範圍第2 4項之醫藥組成物，其中菜 菔硫烷衍生物爲菜菔硫烷亞硝酸鹽。 3 0 .如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中進 一步的包含將步驟a及b之樣品與有效量之抗血管生成劑 進行接觸。 3 1 * 一種治療患者相關於病理性新血管形成之病症之 組套’其係包含有效治療量之菜菔硫烷，和其醫藥學上可 接受的衍生物，鹽類或前驅藥以及使用說明。 3 2.如申請專利範圍第3 1項之組套，其中該病症係 選自··癌病腫瘤、關節炎症狀、新血管性皮膚症狀、糖尿 病性視網膜病變、Kap0Si，s肉瘤、老化性視網膜黃斑變 性、再狹窄症、毛細血管擴張、青光眼、瘢瘤、角膜移植 -34 - (5) (5)200407119 排斥、創傷顆粒化症、血管'纖維瘤、Osier-Webber症候群 、心肌血管生成作用以及硬皮病。 3 3.如申請專利範圍第3 1項之組套，其中該病症是 選自前列腺癌，直腸癌及黑色素癌。 3 4.如申請專利範圍第3 1項之組套，其中該病症是 選自風濕性關節炎及骨關節炎之關節炎症狀。 3 5.如申請專利範圍第3 1項之組套，其中菜菔硫烷 係選自：D-菜菔硫烷，L-菜菔琉烷以及D，L-菜菔硫烷外消 旋酸鹽。 3 6.如申請專利範圍第 3 1項之組套，其中菜菔硫烷 衍生物爲菜菔硫烷亞硝酸鹽。 -35>