TW200306801A - Farnesoid X-activated receptor agonists - Google Patents

Description

200306801 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種化合物，尤指一種調控法尼醇X接受 器以治療與法尼醇X活化型接受器（FXR)相關之疾病，例如 5 與高膽固醇或高三酸甘油酯濃度相關之疾病，以及衰老性認 知受損疾病之治療。 【先前技術】 膽汁酸（bile acid，BA)是屬於人體膽固醇代謝時所產 10 生之一種水溶性終產物，在人體生理機能中扮演一重要的角 色。例如參與人體膽固醇的代謝，以及膽汁生合成與膽汁脂 肪的分泌，其中並有數個相關基因因轉錄而活化，協助將膽 固醇轉化為膽汁酸。請參考Hofmann，drc/z. /Wer. MW·，1999, 159, 2647-2658. 15 法尼醇 X 活化型接受器（Farnesoid X-activated receptor， FXR)為一由膽汁酸活化之核接受器，其功能在調控位於小 腸與肝臟中與表現膽汁酸有關的基因。請參考Makishima et al.5 Science, 1999, 2845 362-365,以及 Parks et al·， 1999，1365-1368.利用FXR基因缺陷之老鼠亦顯示出高膽 20 固醇及高三酸甘油酯（包含高三酸甘油酯之脂蛋白）以及膽 汁酸分泌減低的結果。請參考Edwards，et al，. /· 2002, 43，2_ 12.因此，將FXR拮抗物作為治療與高膽固醇 及高三酸甘油酯相關疾病之藥物將大有可為。 200306801 【發明内容】 本發明之風貌係有關士 为關如下式I之化合物：

在上式中，11為1或2;每一汉3，反4，115及以分別為氫；每 5 — R1G，R13及R17分別為氫或Ci4烷基；χ為Gy次烷基，Cw 次烯基，或Cw次炔基；¥為_00_，_cs-或_CHN_;以及义為 CN8烷基或NRaRb，其中匕與心分別為氫，Gy烷基，烷 氧基，Cw磺醯烷基，Cw烷胺基，Ci4羰烷基，或烷 氧基羰基烷。上述之舉例尚可包括11為1 ;每一Rig， 10分別為甲基；γ為_C0_ ;又為匕8次烷基（如乙烯）；忑為（甲 基）(羧甲基）胺基，（甲基）（甲氧基）胺基，（羧曱基）胺基，（甲 胺基）（曱基）胺基，（甲胺基）（甲基）胺基，（甲醯胺基）胺基， (2,2,2-三氟乙基）胺基，双曱基胺基，乙氧羰曱基，或是（2_ 氣乙基）胺基。 15 本發明之另一風貌亦係關於式I化合物，其中，n，Riq，

Ri3, R17以及χ不變，同上所述；每一 r3, r4, r5，&R6分別為 氫；或是R3及R4—起，115及116—起被去除，以利其所連接之 碳原子之間以雙鍵鍵結；Y為-SO·，-S02-，-PO-或-P02_ ; Z 為經基，烷基，Cm烷氧基或NRaRb，其中Ra與Rb分別為 20 氫’ ci-4烷基，CN4烷氧基，Cm磺醯烷基，CN4烷胺基，（：“ 200306801 幾烧基，或是Cn4烧氧基絲烧。上述之舉例尚 母一尺3, R4, 115及116分別為氫；每一 R ‘·，、 ’ ^ 10，K13及R17分別為甲 基，乂為心_8次烷基（如乙烯）；丫為_8〇广；之為羥基。’ 5 10 本發明化合物！之又另一風貌亦係關於式ι土化合物，复 中^，Rl3，Rl7以及X仍然不變；R3a4—起，或Ml 一起被去除，以利其所連接之碳原子之間以雙鍵鍵結；丫為 -co- ’ -cs-，-CHN_，_so_，_s〇2_，_PO•或 _p(v ; z為經基 Cw烷基，Cl_8烷氧基或NRaRb，其中！^與心分別為氫， 烷基，Cw烷氧基，Cl·4磺醯烷基，Ci_4烷胺基，羰烷 基，或是C!_4烧氧基羰基烧。上述之舉例尚可包括^為丨，每 一 R10，Rl3及Rl7分別為曱基；X為CK8次烧基（如乙烯）；γ為 -CO- ; Z為經基。 每一個字”烷基；alkyl，”，該字首” alk”（例如烷氧基； alkoxy )，以及該字尾”烷基；-alkyi”（如磺醯烷基 15 ’’sdfonyhlkyr’）的使用皆關連到烷基之直鏈或支鏈而定。 -人烧基、次稀基’以及次炔基，各自地關連到雙鍵的二 價自由基烷基（如乙烯）、烯屬烴（如-CH2-CH= CH-CH2-)， 以及炔屬烴（如-CH2-CE C-CH2)。 本發明之特殊例子亦包括N-曱基-N-羰甲基-5冷-膽甾 20 烷酸-24-醯胺，N-曱基_N-甲氧基-5冷贍甾烷酸-24-醯胺， N-罗炭曱基-5 /3 -膽甾烧酸-24-酿胺，N-石黃酿乙基- 5/3 -膽甾烧 酸-24-醯胺，N-甲基-N·曱胺基-5 /3 -膽甾烷酸-24-醯胺，N-N-双甲基-5 /3 -膽甾烷酸-24-醯胺，N-甲基-5 /3 -膽甾烷酸-2心 200306801 醯胺’ N-(2-氯乙基）-5 /3 -膽留烷酸-24-醯胺，5 /3 -膽留烷酸 -甲基酯，以及△ 3,5_5冷_膽甾烷酸。 上述化合物亦包括製藥可接受的載體，以及前驅藥品。 上述化合物如適用，更可包括酯類，醯胺類，鏡像異構物， 5 10 15 異構物，互變異構物，同質多形物，或衍生物。該盘類可由 本發明之化合物上一種帶正電的取代基（如胺基）以及陰離 子相互作用時形成。適合的陰離子包含下列數項，但不限制 於此·氣離子，溴離子，碘離子，硫酸鹽，硝酸鹽，磷酸鹽， 如棣酸鹽，甲磺醯鹽，三氟醋酸鹽，以及醋酸鹽。同樣的， 本發明化合物也可提供一帶負電的取代基與陽離子形成鹽 類。適合的陽離子包含下列數項，但不限制於此：鈉離子， 鉀離子，鎂離子，鈣離子，以及一種銨鹽，如四甲基銨離子。 珂驅藥品包括酯類及其他製藥時可接受的衍生物，而當使用 於一本體時，可產生如上所述之膽留烷酸結構。 —本發明之再另一風貌係有關，其醫藥組合物包括一種製 藥可接受的載體，以及提供一種有效劑量之化合物j如上所 陳。在本化合物j中’…或2;每一R3，R4，R5AR6分別為 虱；或是R3及R4—起，R5及R6 一起被去除，以利其所連接之 碳原子之間以雙鍵鍵結；每一 R1。，Rn及R17分別為氫或是 c“4院基；X為cw欠烷基，C2_8次烯基，或C2 8次块基；丫為 -CO-，-CS-，-CHN_，_S0_，_s〇2 …p〇_ 或 _p〇2_; 2為經基， C»-8烧基，Cl_8烧氧基或NRlR2，其中R#R2分別為氫，^ 院基’ Cw烧氧基，Cl-4績醯烧基，C"烷胺基 ，7 基，或是C丨-4烷氧基羰基烷。 -4厌，元 20 200306801 、上^述本發明之與醫藥組合物相關化合物〗尚可包括：η 為1，母一 R3, R4, R5及R6分別為氫；或是R3及R4—起，匕及 ^-起被去除，以利其所連接之碳原子之間以雙鍵鍵結；每 5基（如乙烯” Z為（甲基）(羧甲基）胺基，（甲基）（甲氧基）胺基， (竣甲基）胺基’（甲胺基）（甲基）胺基，（甲胺基）（甲基）胺基 «基）胺基，（2,2,2-三氣乙基）胺基，双甲基胺基，乙氧幾 甲基，（2-氯乙基）胺基或氫。 10 15 ^月之化合物1為™之拮抗物，因此可用以治療與 R相關的疾病’如鬲膽固醇血症與高三酸甘油酯血症:、因 明之專利範圍為治療與™關疾病的方法（如與血 媒Γ7膽固醇或而二酸甘油g旨相關的疾病）。治療方法包含 發明有效劑量之化合物1予一本體。本發明之專 5%包合降低血液中膽固醇或三酸甘油S旨之治療方 觸。套匕括將本發明之化合物I與肝細胞上之FXR相接 士五盘示』另外定義，本發明中所用到相關之技術與科學| 二項技藝者之認知是相同的。雖然有與… 如方二法與材料可試驗或實施於本發明，但較佳含 章，專利^逑於後。本說明書中所提及之所有發表^ 供參考。為避免t以及其他參考文獻等，全部併入本文c 分將予以^ 書中有矛盾的情形發生，包含定義旬 X 此外，本發明所主張之權利範圍包含材料， 200306801 方法以及實施例，自應以申請專利所述範圍為準而非僅止於 本5兄明書中之貫施例。 本發明之數項化合物將詳述於後。其他關於本發明之特 徵，目的及優點將於實施例及權利要求範圍中詳述。 5 【實施方式】 本發明中可用以貫施於方法、套組、組合以及組合物的 化合物，可藉由任何一種習知的方法，並以固醇類衍生物作 為起始物合成之。更明確的說，這類固醇類衍生物在其環狀 10結構之C-17的位置上具有一取代基，可被本發明化合物上之 X、Y、Z的構形所修飾（見化合物J )。固醇類衍生物如膽 酸，膽留烷酸，3α双氫基-5/3-24-甲基酯，熊脫氧膽 酸（ursodeoxycholic acid)，以及豬脫氧膽酸（hy〇ch〇lic acid)。上述化學物質可以購買或自行合成方式取得，合成的 15方法可參考下列參考文件中所述，如·· Roda et al·，F.

Res. 1994, 35:2268-2279 ； Roda et al.? Dig. Dis. Sci., 1987, 34:24S-35S. 本發明中，於CM7的位置上具有一含醯胺取代基（即γ 為羰基，Z為NRaRb)之化合物的準備，可藉由一種含羰基 20或羧基取代基在其結構C-17的位置上的固醇類衍生物（如膽 W烧5文）’與一種含醯胺的化合物（如双曱胺基，苯胺，甘 油’以及苯丙胺酸）作用後得到。同樣的，本發明中，於C-17 的位置上具有一含酯類取代基（即Y為-CO_，Z為烷氧基） 之化合物的準備，可藉由一種含羰基或羧基取代基在其結構 25 C-P的位置上的固醇類衍生物（如膽甾烷酸），與一種含氫 200306801 基的化合物（如乙醇’異丙醇）作用後得到。醯胺或醋類的 形成反應可於任何一種適合的溶劑下進行。此反應如在水溶 液下進行，此用以進行試管内或活體内實驗的固醇類產物則 毋須再進行離析。 5 10 15 20 本教明中’於C-17的位置上具有—含幾基取代基（即γ 為-CO-)之化合物可被轉化’如欲形成含硫羰基之化合物(即 Υ為-CS-)，則將該化合物與酸式硫酸鹽一起作用，或是將 含亞胺基之化合物（即γ為_CNH_)與聯胺一起作用。請參 考 Janssen et al.(Ed.)，〇rganosuifur Chemistry; Wiley 风 1967,219_240;與咖心(Ed ) TheChem吻 〇f the Carbon-Nitrogen Double Bond; Wiley: New Y〇rk 1970,64-83，·以及同出處之465_5〇4頁。 ， 本l月中於CM 7的位置上具有一含磺醯或鱗酸取代基 之化合物的準備，可藉由—種含南素取代基於(M7的位置上 的固醇類何生物，與魏鹽化合物或硫酸鹽（如硫酸納）化 合物一起作用反應而得之。 —由於該反應為簡單之反應，因此容易以自動化的方式進 :。純的離析與定量可藉由薄層層析法，高壓液相層析 /乳相層析法，毛細管電泳法，或其他分析及前置作業。 本文中「治療」或「治療法」一詞是指對 時的治療::本文所指之生理機能失調或疾= 广之血液中含咼量膽固醇或三酸甘油酯相關，且包含， 心2限於，預防該失調或疾病發生在實驗對象中，其可能易 或疾病感染，但並非終必被診斷出患有該失調=疾 卩制錢調或疾病’舉例如，制止該失調或疾病的發展、 25 200306801 導致該失調或疾病的復原，或 ’舉例如，停止該失調或疾病 減輕該失調或疾病，舉例如， 減輕導致該失調或疾病的情況 的症狀。 本文中「預防」或「^ % # a、主士人一曰 万法」一詞，係與一本體因复 血清中含高量膽固醇或二酴廿、丄& 口其 或庄、广九 馱甘油酯而造成之生理機能失調 或疾病相關，思即血清中沒有含 相關广产日卞人 又男^冋里膽固醇或三酸甘油酯， 产土τ^ 之原本已發生生理機能失調或疾 病者不會再繼續發展下去。 、 本文中高血清膽固醇濃度」或「血清高濃度膽固醇」 10 :詞’係指一本體血清中膽固醇的濃度已超過-般認定為健 康或正常的標準，且會導致或可能導致因血清中含高量膽固 醇而造成之生理機能失調或疾病。「高血清三酸甘油醋濃度」 或、「血清高濃度三酸甘油s旨」—詞，係指—本體血清中三酸 甘油酯的濃纟已超過-般認定為健康或正常的標準，且會導 15致或可能導致因血清中含高量三酸甘油醋而造成之生理機 能失調或疾病。健康或正常的標準值會因種與種，甚至本體 與本體之間的不同而有差異，例如有年齡特定之差異，但是 一熟習本項技藝者將有能力決定一本體之健康或正常的標 準值。膽固醇或二酸甘油酯之健康或正常標準值的計算可參 2〇考科學與醫學發表文獻。一般而言，膽固醇是從一本體之全 血漿膽固醇測知，低密度脂蛋白膽固醇，高密度脂蛋白膽固 醇以及三酸甘油酯則可從全血漿三酸甘油酯中測知。舉一例 說明’一成年人，血清中高膽固醇的濃度通常是指全血漿膽 固醇值超過每公升5.2毫莫耳數（200毫克/分升）；低密度脂 12 200306801 蛋白膽固醇值高於每公升3.36毫莫耳數（13〇毫克/分升）； 血清中高三酸甘油酯的濃度通常是指超過每公升169毫莫 耳數（150宅克/分升）；在另一例中，一成年人，血清中高 膽固醇的濃度通常是指全血漿膽固醇值超過每公升5·2毫莫 5耳數至每公升6.18毫莫耳數（2〇〇至別毫克/分升）之間；低 始、度脂蛋白膽固醇值高於每公升3 36至411毫莫耳數（丨3〇 至159毫克/分升）；血清中高三酸甘油酯的濃度通常是指超 過每公升1.69至2.24毫莫耳數（15〇至199毫克/分升）。更有 另一例中，一成年人，血清中高膽固醇的濃度通常是指血漿 10膽固醇值超過每公升6.21毫莫耳數（24〇毫克/分升）；低密 度脂蛋白膽固醇值高於每公升414毫莫耳數（16〇毫克"分 升）；血清中高三酸甘油酯的濃度通常是指超過每公升225 毫莫耳數（ 200毫克/分升）。 前述之一有效劑量化合物的製備可包括一製藥時可接 15受的載體，於投藥治療因膽固醇值或三酸甘油醇值的升高而 造成之生理機能失調或疾病前形成一醫藥組合物。「一有效 劑X」曰-詞表不，可給予被治療之本體產生治療效果的化合 物質量。動物’人體以及藥物劑量間的關係（以毫克/每平 · 方公尺體表面積為準）描述於文獻Freireich et ai.， 20 Chemothen Hep· 1966, 50, 219•體表面積可大致利用病人的 身高與體重來決定。如可參考：Scientific 丁训叫&㈣ Pharmaceuticais，Ardley，New 197〇,奶·有效劑量也有 多樣化，如熟知本項技藝者之認知，係與投藥途徑，輔藥劑 量，以及與其他治療藥物一起投予時有關。製藥時可接受的 13 200306801 載體包括二氧化矽膠體，硬脂酸鎂，纖維素，十二酸硫酸鈉 鹽’以及D&C黃色1〇號色素添加物。 ^活性組成物的毒性與治療效果可利用標準製藥流程測 疋之，例如，決定半致死劑量（LD5〇，可造成5〇%受試者死 5亡的劑量）以及半有效劑量（ED5G，可使·受試者有治療 效果的劑量）。毒性與治療效果的劑量比率是治療的指標， 且可表不為半致死劑量/半有效劑量的比率。最佳化合物是 $療指標值高的。當使用到可能產生有毒副作用的化合物 時，應特別注意設計一藥物傳送途徑將化合物的標的投予疾 10病發生之組織，以減少對未受感染的細胞所可能造成的傷 害，並可因而減少副作用。 包括在方法、套組、組合以及醫藥組合物的本發明化合 物，同時還有異構物結構以及所述之化合物的互變異構物以 及製藥時可接受的鹽類。製藥時可接受的鹽類可由下列化學 15物質製備出··甲酸，乙酸，丙酸，丁二酸，經基乙酸，葡萄 糖酸，乳酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，抗壞血酸，己四醇 醛酸，順-丁烯二酸，反_丁烯二酸，丙酮酸，丁氨二酸，胺 基戊二酸，苯曱酸，鄰_胺基苯甲酸，甲磺醯酸，硬脂酸， 水揚酸，對-羥基苯甲酸，苯乙酸，苯乙醇酸，雙羥萘酸， 20曱磺酸，乙磺酸，笨磺酸，泛酸，曱苯磺酸，2邊基乙烧磺 酸，磺胺酸，環己胺基磺酸，藻膠酸，3_羥基丁酸，聚半乳 糖酸以及半乳糖醛。 「前驅藥物」一詞於本文中是指，一藥物或一化合物之 藥理學活性（活性治療劑），係來自於體内代謝過程的轉化。 200306801 前驅藥物一般多被認為是藥物前驅物，在投藥予一本體並經 吸收後，會經由一些過程轉化成一被活化或更具活性的形 式，這些過程例如代謝過程。其他經由轉化過程而產生的產 物可輕易的被身體排除。前驅藥物通常多具有會造成其較不 5 具活性以及，或是賦予此藥物更穩定或其他特性的化學基 團。當前驅藥物之化學基團被裂解時，即會產生更具活性的 藥物。前驅藥物可設計成可逆的藥物衍生物作為藥物的改性 劑，以增進藥物傳輸至特定組織。目前前驅藥物的設計是在 增進治療用化合物在目標區附近的有效溶解度，其中主要溶 10 劑為水。例如 Fedorak，et al.，Am. J. Physiol，269: G210 - 218 (1995)中所述之dexamethasone- /5 -D-glucuronide。McLoed， et al·，Gastroenterol·，106: 405-413 (1994)中所述之 dexamethasone-succinate -dextransoHochhaus，et al·，Biomed. Chrom·， 6: 283-286 (1992) 中 所述之 15 dexamethasone-21 -sulphobenzoate sodium ， 以及 dexamethasone-21 -isonicotinate 。 夕卜，J. Larsen 以及 H.Bundgaard [Int. J. Pharmaceutics，37，87 (1987)]中提及， 以N-丙烯磺胺醯作為一種前驅藥物衍生物之評估法。而J. Lasen et al·，[Int. J· Pharmaceutics，47，103 (1988)]中也提 20 及，以N-甲磺醯胺作為一種前驅藥物衍生物之評估法。前驅 藥物在 Sinkula et al·，J· Pharm. Sci·，64: 181-210 (1975)中 也有提及。 「衍生物」一詞於本文中是指，一化合物，由於取代基 上一原子，分子或基團被另一結構所取代而產生出之一具相 200306801 =構合物。例如，一化合物的氫原子可能、 ^基、胺基等所取代，而產生出該化合物的衍生物。 「血漿濃度」一詞於本文中是指 仏所+ 血清中的濃度。 巾一物質存在於血聚或 5 10 15 20 「藥物吸收」或「吸收」_詞於本文中是指，一藥物從 投樂位置到進行全身性循環的移動過程。例如進人―本體之 血流中。 「生體可用率」-詞於本文中是指，—活性 收進入全身循環系統的程度，並可被利用 於本體中之藥物作用部位。 「新陳代謝」一詞於本文中是指，一 行化學變化的過程。 ㈣於-本體中進 「藥：學」一詞於本文中是指，觀察藥物在其作用位置 的/辰度以決定生物反應的一相關係數。 「藥物動力學」一詞於本文中是指， 置達《維持其適當濃度—相_數。讀在其作用位 「半衰期」一詞於本文中是指，血漿 内的量從其最大量降低至其5G%所需的時間;、•又或於體 近乎本專:Γ?中所用到「大約」一詞意思是指「大概、 有效丄安：的：：’在本文中引用的劑量範圍之外也可能為 利要::;的劑*’因此該範圍外的劑量也屬於本發明之權 劑在二治Μ藥 灸及收進入血流中的血清濃度（通常為每毫克、微 16 200306801 克、微毫克的治療用藥劑於每毫升、公升密度、公升血产 中）。 '月 a ίο “「製藥可接受的」-詞於本文中是用以形容—適於 醫藥製品的修飾性名詞。製藥可接受的陽離子包括金屬 或有機離子。較佳金屬離子包含但不限於：驗性金屬（h 族元素）鹽類’鹼土族金屬鹽類（n a族元素）以及且他生 理可接受之金屬離子。最佳離子包括帶正常原子價的銘、 弼、鐘、鎮、鉀、鈉、以及鋅。較佳有機離子包含多加—質 子的三級醢胺，以及部分包含之四級銨陽離子，三甲基胺、， 二乙胺，N-N，-二苯甲基乙烯二胺，氯普魯卡因，膽二二 乙㈣，乙烯二胺’ N _甲基葡萄糖胺，以及普魯卡因。最 佳製藥可接受的酸包括但不限於：鹽酸，氫㈣，鱗酸，硫 20 酸’甲項酸’醋酸’甲酸’酒石酸，順丁烯二酸，蘋果酸: 檸檬酸，異檸檬酸，丁二酸’乳酸，葡萄糖酸，己四醇搭酸， 15丙酮*酸，丁晒二酸，反丁稀二酸，丙酸，天門冬胺酸，麵胺 酸’本甲酸，以及其相似物。本發明組成物通常是以醫藥組 成物的形式提供。這些組合物可以任何適#的途徑給予，包 括但不限於："服的，直腸的，經皮吸㈣，非經腸道投予 的、(例如：皮下注射’肌肉注射’靜脈注射，髓内投予，腹 腔注，，以及真皮内注射，或以輸注技術等投予方式），經 鼻投藥（如鼻胃插管），經黏膜吸收，植入法，吸入式喷霧， «道投^ ’局部投予，以及經口吸收（如舌下投藥）。在 樂物製備時通常會包含緩衝劑’防腐劑’滲透增進劑，相容 的載體’以及其他治療物原才斗。非經腸道投予使用包括一活 17 200306801 性化合物溶於一磷酸鹽 接受载體。可，容性華叫’合攻，或混合任何其他的製藥可 者所習知之可雜環糊精’或是其他熟知本項技藝 U樂劑均可包含作為製藥用原料。 「__丨」包含，或 :==_劑，吸收二及二：’ 何傳= 藥劑於該領域中為習知。除此之外，任 10 15

用愈否：、、舌：：：與樂劑如與本組合物不相容’則須考慮使 /物貝補充物亦可包含於本組合物内。 合，以在Λ造田本發明之化合物中，組合物可與製藥用賦形劑混 名、二賦形劑稀釋，或是以載體封裝，如膠囊，囊袋， 料可為製¥常用^1 物時所用到之載體材 用之賦形劑，且可與預期劑型之活性藥物及釋 =相容為基準作選擇者。舉例說明之，不具藥物活性的 製樂用賦形劑選擇如下：

a、、、、"合劑如：樹膠，褐藻酸及其鹽類，纖維素衍生物， 取土纖、准素，羥乙基纖維素，羥丙基纖維素，鎂鋁矽酸鹽， ^ 醇膠類，皂土，羥丙基甲基纖維素，動物膠，聚乙 20烯^各’聚乙稀口比略咬嗣/乙酸乙醋稀共聚合物，内聚 ^烯比咯°疋酮，聚乙烯吡咯啶酮，聚丁烯酸，羥丙基甲基纖 、、隹素，經丙基纖維素，澱粉，預糊化澱粉，乙基纖維素，黃 曰树膠，糊精，微結晶纖維素，蔗糖，葡萄糖以及其他相似 18 200306801 (b )朋散劑如：、资也、 «物’預糊化玉米澱粉，預糊化澱粉，纖 維素’共父聯後甲美^ ^ I、截維素，羥基乙酸澱粉鈉，内聚咯烷酮， 共交聯聚乙稀η比吃^ 疋類1 ’父羧曱基纖維素納鹽，含約或納的 褐澡酸複合物，勒+ # & " 褐緣酸’勝類，或殿粉乙醇鈉，以及 5任何—種用於製作錠劑的崩散物質。 (C)充真4如.乳糖，碳酸鈣，磷酸鈣，磷酸氫鈣，硫酸 妈’微結晶纖維辛，總祕主 ^ ^ 择畜纖維素粉末，D-葡萄糖，葡萄酯糖，聚 葡萄糖；^粕，預糊化殿粉，蔬糖，木糖醇，乳糖醇，甘露 糖醇，山梨醇，氯化鈉，聚乙二醇以及其他相似物。 10 (d)介面活性劑包括有十二基硫酸納，去水山梨醇單油酸 酯，羥乙烯去水山梨醇單油酸酯，聚己二烯酸鹽，普拉索瑪 (polaxomers) ’ ^，單硬脂酸甘油，，普流羅尼線 【P1Ur〇nicTMline (BASF)】以及其他相似物。 ⑴增溶劑如檸檬酸’ 丁二酸，反丁烯二酸，蘋果酸，酒 15石酸’順丁烯二酸，戊：酸，重碳酸納，碳酸鈉以及其他相 似物。 (〇安定劑如抗氧化劑，緩衝溶液，或酸以及其他相似物 亦可使用。 匕（g)潤滑劑如硬脂酸鎮，氳氧化約，滑石，反丁稀二酸硬 20知馱鈉，氫化蔬菜油，硬脂酸，甘胺酸内鹽，滑石，蠟，硬 脂腦油（stearowet)，硼酸，苯甲酸鈉，乙酸鈉，氯化鈉，dl_ 白胺酸，聚乙二醇’油酸鈉，或十二基硫酸鈉以及其他相似 物。 (h)濕潤劑如油酸，單硬脂酸甘油酯，去水山梨醇單油酸 19 200306801 酯，去水山梨醇單十二酸酯，三乙胺油酸，聚氧乙烯去水山 梨醇單油酸酯，聚氧乙烯去水山梨醇單十二酸酯，或十二基 硫酸納以及其他相似物。 (i )稀釋劑如乳糖，澱粉，甘露糖醇，山梨醇，D-葡萄糖， 5微結晶纖維素’填酸氫#5，蔬糖基料稀釋劑，糖果用葡萄糖， 雄酸二氫妈硫水合物，好硫二水合物，弼硫三水合物，葡萄 酯糖，肌醇，榖類固體水解物，直鏈澱粉，纖維素粉末，碳 酸鈣，甘油，皂土以及其他相似物。 (j )抗黏著劑或流動促進劑如滑石，玉米澱粉，DL-白胺 10 酸，十二基硫酸鈉，硬脂酸鎂、鈣、鈉以及其他相似物。 (k)醫藥相容載體包含樹膠，動物膠，二氧化矽膠體，甘 油構酸#5，乳酸約鹽，麥芽糊精，甘油，石夕酸鎮，赂蛋白納， 大豆卵磷脂，氯化鈉，三鈣磷酸酯，二鉀磷酸酯，十八醯基 乳龜乳酸鈉，單甘油酯，雙甘油酯，預糊化殿粉以及其他相 15 似物。 此外，藥物組成物在以下例子中提及：Hoover，John E.， Remington’s The Science and Practice of Pharmacy(2000) 〇 於 另一例子中亦提及藥物組成物·· Liberman，H. A. and Lachman， L·，Eds·，Pharmaceutical Dosage Forms，Marcel Decker，New 20 York，Ν·Υ·，1980。 除了具治療人體的實用性之外，本發明亦可使用於其他 本體，包括脊椎動物，爬蟲類，鳥類，外來的動物以及畜牧 動物，包括哺乳類，齧齒類以及其他相似者。哺乳類包括靈 長類，例如猴子，狐猴，馬，狗，豬或貓。齧齒類包括大鼠， 25 小鼠’松氣或天竺鼠。 20 200306801 一種試管内試驗可用以初步篩選本發明化合物，其產生 對FXR的拮抗，而有治療與FXR相關疾病之效果。舉一實例 說明，以一螢光酵素報導基因（包含人類心/bs最小啟動子） 以及FXR轉染人類胚胎細胞。在轉染細胞與測試化合物進行 5 培養之後，測試螢光酵素的活性以判定受報導基因影響之範 圍。請參考 Janowski et al_，Nature, 1996，383，728-731 ; Hong，1996, 2987 ;以及Chiang，1994。 於初步篩選中顯現出效果的化合物可進一步利用熟習 本項技藝者習知之動物試驗進行評估。例如，以混合有該化 10 合物之含膽固醇飲食以口服方式餵養老鼠。該化合物之效果 可藉由比較餵食與未餵食老鼠體内，其各組織含膽固醇之程 度來加以評估。 欲治療與FXR相關之生理失調，疾病或是疾病症狀，組 合物中含本發明化合物的劑量可約為5毫微克至1000毫克， 15 或約100毫微克至約600毫克，或約1毫克至約500毫克，或約 20毫克至約400毫克。一劑可於一天提供1-4次，或以可達到 治療效果為主決定每天提供之次數。舉例說明，本發明組合 物之劑量單位基本上可以包含約5毫微克，50毫微克，100 毫微克，500毫微克，1毫克，10毫克，20毫克，40毫克，80 20 毫克，100毫克，125毫克，150毫克，200毫克，250毫克， 300毫克，350毫克，400毫克，450毫克，500毫克，550毫克， 600毫克，700毫克，800毫克，900毫克或1000毫克的本發明 化合物。劑量形式可以依照指定劑量決定供藥需求之頻率。 組合物中投藥單位劑量之形式，以及用以治療病狀或失調的 200306801 劑f法則取決於許多因素，包括本體之年齡，體重，性別以 及醫療狀況，病狀或失調的嚴重程度，投藥途徑與頻率等廣 泛的範圍，且已為習知。 ” 於本發明之一實施例中，一組合物以一有效劑量提供予 5本ϋ亦即，遠組合物是包含一可達治療效果之劑量的本 lx明化a物，投與本體後存在於本體之血清中一段時間，並 達到所需之治療效果。具體言之，以-禁食（-般禁食至少 而10小日守）之成年人為例，投與包含一可達治療效果之劑量 的本發明化合物之組合物，約在投藥5分鐘之後存在於本體 1〇之血/月中。於本發明之另一實施例中，包含一可達治療效果 之劑篁的本發明化合物之組合物，約在投藥1〇分鐘之後存在 於本體之血清中。於本發明之又一實施例中，包含一可達治 療效果之劑量的本發明化合物之組合物，約在投藥2〇分鐘之 後存在於本體之血清中。於本發明之再一實施例中，包含一 15可達治療效果之劑量的本發明化合物之組合物，約在投藥3 〇 分鐘之後存在於本體之血清中。於本發明之另一實施例中， 包含一可達治療效果之劑量的本發明化合物之組合物，約在 投藥40分鐘之後存在於本體之血清中。於本發明之一實施例 中，包含一可達治療效果之劑量的本發明化合物之組合物， 20約在投藥20分鐘至12小時之後存在於本體之血清中。於本發 明之另一實施例中，包含一可達治療效果之劑量的本發明化 合物之組合物，約在投藥20分鐘至6小時之後存在於本體之 血清中。於本發明之又一實施例中，包含一可達治療效果之 劑量的本發明化合物之組合物，約在投藥2〇分鐘至2小時之 22 200306801 後存在於本體之血清中。於本發明之再—實施例中，包含一 可達療 果之劑1的本發明化合物之組合物，約在投藥仙 刀名里至2小時之後存在於本體之血清中。於本發明之一實施 例中，包合一可達治療效果之劑量的本發明化合物之組合 5物，約在投藥40分鐘至1小時之後存在於本體之血清中。 於本叙明之一貫施例中，本發明組合物提供一劑量可使 本發明化合物存在於也清中之濃度達最大劑量之一半。具體 而言，於投予本發明組合物後的血清濃度可達約㈣至約 刚0毫微莫耳，或約0·1至約750毫微莫耳，或約i至約毫 10微莫彳4約20至約1〇〇〇毫微莫耳，或約⑽至約駕毫微莫 耳’或、約200至約400毫微莫耳。本發明計劃之組合物可提供 本發明化合物於投藥後5分鐘至24小時之間達到治療效果， 可依需求以每日-次或每日二次的方式投藥。於本發明之一 實施例中，投予-可達治療效果之劑量的本發明化合物之組 15合物’使本發明化合物存在於血清中之平均濃度達最大劑量 值之-半’至少在對一本體投予本組合物後1〇,2〇,3〇或 分鐘後’可達每毫升m毫克；或至少為每毫升爾毫克；或 至少為每毫升50微毫克；或至少為每毫^嶋毫克；或至 少為每毫升微毫克；或至少為每毫升删微毫克。 W -可達治療效果之治療劑的懸可藉由實驗結果中的 因素決定’例如藥劑進人血液中的吸收速率，藥劑的生體可 利用率以及調控法尼醇乂接受器的效力。然而，一般習知本 發明治療藥劑針對特定本體所需之特殊劑量取決於多種因 素，包括使用之特定化合物的活性’年齡，體重，整體健康 23 200306801 5 10 15 20 狀^性別以及本體之飲食（如，包括禁食或進食），投率 ^間1物之組合，錢該受治療之特定疾病之嚴重程产 ”其投藥形式。治療用劑量—般可經測試來調整安全性盘= ^生。動物模式的試驗常被用以作為本發明化合物在治療與 二腸相關之功能失調或疾病時有效劑量的參考。治療程序一 列中’應可察知投藥劑量取決於數個因素，包括特定 =，投藥途徑，特定本體之狀況等等。一般而言，為；在 一^時間内有效達到血清中濃度，所投予本化合物之量，合 相專於試管内試驗時達有效濃度之量。因此，_化 : =試驗界以其活性，例如，其半最大有效劑量為2崎 旲=，則會投以該藥物約可達200微莫耳之半最大有效 的樂物量到生體内，以於—段時間後達到預計之治療效果里 例，干擾法尼醇X接受器，並因此治療―與FXR相關之生理 失°周，疾病，或疾病症狀與高膽固醇或三酸甘油酯濃度相 關，如治療動脈硬化，治療衰老性認知受損，治療痴呆，治 f阿茲海默症以及其他由熟習本項才支藝者所選擇為適人之 疾病。這些參數的決定因素為熟習本項技藝者所習σ知。 k些考量為熟習本項技藝者所習知並詳述於一般教科書中。 為了 3：測並確認本發明化合物被運送之本體中之有饮 量，血清中含本發明化合物之量可藉由標準量測技術測知1 本發明之計劃組合物於投藥後30分鐘至24小時期間提 供一治療效果。一實施例中，組合物於投藥後30分鐘達該治 療效果。另一實施例中，組合物於投藥後24小時達該治療 果’有利於每日投藥一次。 ％、乂 24 200306801 於另-態樣中，本發明係應用於治療—病症或生理失調 的治療方法，其中指出與法尼醇χ接受器抬抗之治療方法， 本方法包括口服投予包含一或多個本發明之組合物予一需 5 要，本體。於一實施例中，其病症或生理失調是一血管疾病 或是一神經衰退之失調症狀。 10 ## m月之方法，組合及組合物以可與另—醫療藥劑結合 】（療法）’用以治療或預防血管疾病或是神經衰退 5周症狀，=彳如，抗血脂藥物施得丁（statin)(如 ovastatm) ’血管張力素轉化料抑制物， 受器拮抗物，抗心捸生赍茲&々 目取刀京II接 物，多巴胺接受器括抗物，或是 吕擴張劑’一般多用以治療， 症狀與併發症減1 m ’、 3使〆、該疾病相關之 士甘減取 而這些藥物在使用上有其缺點。J: /、i樂物對於上述之症狀並無特效，且 、古堂- 15 20 化合物結合使用：：進：丄寫等等。然而，當與本發明 部分均可減少或、肖广Γ，。σ療法時，這些不要的副作用大 成/戍肩除。运些藥物副作 表降低了可達到J作用被降低時，通常也代 違引預疋療效所需之結合劑量。 「結合療法」一詞包括 療或預防一本體 八赉明組合物，與另一治 療藥劑，為—特定m病或是神經衰退之失調症狀的治 共同作用提供-r療1广則的一部份，以藉由這些藥劑的 利之影響。料二㈣之失調症狀有 之治療藥劑的—藥二 —療0劑時通常使用於-特定期間（通常大多為; 25 200306801 5 10 15 時，分，時，天，週，月或 合療法」通常不傾向於包含」=於結合物的選擇）。「結 藥劑與本組合物結合使用 /以上的治療藥劑’該治療 覆無常之結果㈣㈣物。rur’呈㈣療效或反 方式投予這些治療藥劑，意即::中療包含以連續 時間投予，或至少二種;、中母一治療樂劑係於不同 明，同-時間投藥可以包同間投予，^ 盆中含固定士彻夕、Λ汰 本體單一錠劑或膠囊， 單-…錠：：藥劑’或是提供以多個該治療藥物之 何投藥途徑達成。本發明之==予或同時投予可藉由任 予，包括但不^、纟 任何適於該藥劑之途徑投 射，肌\、以下.口服途徑，經皮吸收途徑，靜脈注 :肌肉注射，或藉黏膜組織直接吸收。例如，本發明之粗 ;勿：以口服或鼻胃管方式投藥，而結合治療藥劑可以口服 或經皮吸收。提供治療筚南丨 民 包含投予上、t、… 序不結合療法」也可 X予上述〉口療樂劑並結合其他生物活性物質，例如但不 限於.止痛劑’以及結合非藥物治療，例如但不限於·外科 手術。

20 -形成結合治療的治療用化合物可以是—結合劑型或不 同劑型的形式’以利A4同時的投藥。形成結合治療的治療 用化合物可以是連續投藥，或將治療用化合物以稱為二階段 方式的治療法則給藥。因此，需要—治療法則用以連續供應 本治療用化合物以及間隔投藥另外的活性藥劑。多次投藥步 驟所間隔的時間’舉例而言，可從數分鐘，數小時到數天， 26 200306801 治：:=物的特性，例如，效力，溶解度，生物可 水、，衰期，以及該治療性化合物之動力學概 :二:ί:決於食物攝取之影響以及本體之年齡及狀況。 才示的分子濃度的全日差里Α么 5 10 /、也曰衫響間隔性給藥的劑量。結合 2 =療用化合物不論是同時投藥，同時大量投藥或是連 =二:都需要一治療法則以將一藉由口服方式投與之治 以及另一治療用化合物係藉由口服，靜脈注 射或經黏膜組織直接吸收等途徑。不論結合療法

療性化合物是以口服，吸人式喷霧，經肛門投予，經口 吸收（如舌下投单），A i 梁）局叫予’非經腸道投予（例如：皮 :二Γ注射，靜脈注射’以及真皮内注射，或以輸注 予方式）’分別或同時，每-治療用化合物將包含 二桌可接受之賦形劑，稀釋劑或其他配方成分於 樂配方中。 < 田旧农 於口服技藥時’製藥成分可包含-所需劑量之法尼醇x ::拮抗物於一劑型，包含下列：藥片，硬或軟膠囊，菱 :U ’錠劑，可分散粉末，細粒，懸浮液，酿劑，液 :他適於口服投藥之劑型。具體而言，在一不同劑量單位： 20 ΐ — ί =量之法尼醇抗物之製藥配方’可以製 ，或-膠囊。口服劑型可以更包含，例如，缓衝藥劑。 Ν ，藥丸及其相似物可同時與腸内膜衣一起被製成。 敕虫製藥成分適於經口吸收（如舌下投藥）者，例如，一調 二風味後，包含一預定劑量之法尼醇X接受器拮抗物之 庶糖，以及樹膠或特拉加康斯樹膠，以及一錠劑包 27 200306801 例如動物膠以及 含有法尼醇x接受器拮抗物於一惰性基底 甘油’或蔗糖以及樹膠。 適於Π服之液體㈣可包括醫藥可接受之乳化劑，溶 5 10 15 20 浮液，糖漿以及_，常料本項技藝之惰性稀釋劑， 如水。這類製藥配方也可包含，例如， ^ 妁如，濕潤劑，乳化劑，懸 子液’甜味劑，風味劑以及香味劑。

*液體劑型之舉Μ ’但不限於以下：水性溶液包含一法尼 知X接受器拮抗物以及/3-環糊精，或一環糊精之水溶性 何生物如磺酸丁酯乙醚点·環糊精；庚二_2,6_二_〇_曱基 -環葡聚糖（heptakis-2,6-di_〇_methyl-beta_ cycl〇dextrinf;經 丙基点•環糊精；以及雙甲基万_環糊精。 、本發明之醫藥組合物亦可以注射方式投藥（例如：靜脈 庄射，肌肉注射，皮下注射）。這類可注射組合物可包含， 例如，生理食鹽水，葡萄糖，或水以作為適當的載體材料。 如有需要，這些組合物的pH值可以調整，利用適當的酸， 鹼或緩衝液。適當的膨脹劑，分散劑，保濕劑或是懸浮劑， 包括甘露糖醇以及聚乙稀甘油（如pEG4〇〇 )，亦可被包含

為組合物。一適當之非經腸道投與之組合物也可包含一法尼 醇X接受器拮抗物於注射管内於注射管内。注射前，一水性 溶液可被用以溶解組合物。 醫藥組合物可以栓劑方式以及相似之劑型投藥。這類經 肛門投藥之配方最佳是包含一法尼醇X接受器拮抗物於一 總劑量為，例如，約為0.075至75%之重量百分比，或約為0.2 至40%之重量百分比，或〇.4至15%之重量百分比。載體材料 28 200306801 例如可可酯，可可豆油， ^ m A ^及/、他油類與聚乙烯甘油栓劑基 5 A甲^ ;此類組合物_。其他載體材料例如膜衣（如經丙 =纖:素薄膜衣)以及崩解劑(如交羧甲 及共:父聯聚乙婦❹各咬酮）亦可依需求加入。 2醫藥組合物可藉心何—種製藥業之適當方 匕和x接受器拮抗物與一個或多個載 合物，盥一、夜體评么 般呪束，廷些組合物是將活性化 10 被均勻充分的混合在_起，：的固，體’或以上二者， 切。你4一-u Γ起然後如有需要，再將產物進行塑 的方弋°樂可猎由將藥粉壓縮，模製或將化合物微粒化 將-自由流動之化合物成。ι縮藥片之製備，係 H ；、田之機态中壓緊，該化合物 釋劑=;並選擇性的與結合劑，潤滑劑，惰性稀 15 器製模的方式，將粉肤介入私 W片可藉由一機 得❺ 化5物以一惰性稀釋劑濕潤化而壓製

本:明之藥片亦可以習知之膜衣材料， TM

White YS-M8〇27A (式 J：仙鈦 a、 P y 2〇驟，被製成提供給病人後可_本2組^物可依習知之步 物之配方。 更了决速維持’或延遲釋放該化合 ，才Γ:::為一稀釋劑時，可以是-固體，半固體或液 合物可以是藥片活性成分之介質。因此組 I丸如末，堯形錠劑，小袋’膠囊’驰 29 200306801 液’礼化劑’溶液，糖聚，氣霧劑（為目體或液體 V軟或硬動物膠之膠囊，以及無菌之袋狀粉末。 5 10 15 20 半'J州型可以包括，例如，一或多乳糖，甘露糖醇，玉 ^ 署杨 u結晶纖維素，樹膠，動物膠，二氣 石:體’父羧甲基纖維素鈉鹽，滑石，硬脂酸鎂，硬脂酸， /、賦形J著色劑，稀釋劑，緩衝劑，濕潤劑，防腐 =，，風味劑以及醫藥可接受之載體。這些錠劑亦可包含薄膜 、可於口服攝取或與稀釋劑接觸時溶解。 於本發明之-實施例中，製造步驟可使用—種或結合數 、方法b括·⑴乾式混合’⑺直接壓縮，⑺研磨，（4)乾式 或…化製粒，（5)濕性製粒，或⑹融合。et al•，〜

Theory and Practice 〇f Industriai ph_acy(]^6)。， 於本發明之另-實施例中，固體組合物，如錠劑，係將 本^明之/口療用製劑與醫藥用賦形劑混合，形成—固體預備 配方、、且口 4勿3均質化之治療用製劑與賦形劑混合物。預備 配方、、且口物之均貝化係指治療用製劑均句分散於組合物 中，以便於將其平均細分成含有均等功效之劑型，例如鍵 劑’藥丸以及膠囊。固體預備配方接著被細分為上述之單位 齊丨J g 0 直接壓縮之錠劑係一固體劑型，藉由壓縮含有一活性物 質以及用以處理並增進產物特性之賦形劑之配方而形成。 「直接壓祕劑」—詞通常是指―不摻雜，不覆膜之鍵劑提 仏以口服攝取Μ用―單—I縮法或是經預先輕敲使緊密後 接著進行壓縮的方法製備。 30 200306801 =明之藥鍵或藥片可包裹上外衣或進行複合以提供 ::長樂效的劑型。例如，藥鍵或藥片可包含—内部劑型鱼 外部劑型，後者覆蓋住前者。多種材料可用以作為腸. :溶^包括數種聚合的酸以及聚合酸的混合物，例如蟲 膠’十六醇以及乙酸纖維素。 ίο 15 20 S/f錠」4於本文中係用以說明—愿縮銳劑，在放 分==快=崩散’且同時很快的分散成一含準確劑量成 〜斤…乂羧甲基纖維素納鹽在鍵劑配方中係為一習知 p之朋散劑，且可購自FMC corp⑽ti〇n，咖啊仏

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Si:::式混合於壓縮製'配方中，以使該㈣達到快 縮製:二=:=其他材料-起使用時，亦為* I之添加物，同時具有增進不易壓縮成錠 可驢i㈣性的能力。於本項技藝中習知，商品化之產品已 二挪传並可與本發明—起使用。舉—例說明，該例為已註冊 商才示之「Avicel® --Γ /士 m 「 · 」。可使用二種不同的「Avicel⑧」， AV1Cel PH」微結晶纖維素，以及「Avicel⑧AC-815」，一 :將微結晶纖維素殘餘物與鈣·鈉褐藻酸鹽複合物一起加工 喷霧1中鈣-鈉褐藻酸鹽之鈣-鈉比率約在0.40: i 至2.5 : 1之間〇 c —人上 15匕3有微結晶纖維素85% ( MCC)以 _-納褐藻酸鹽複合物15%，當與本發明化合物一起使用 八匕率將有所不同，可從與褐藻酸鹽到Μ% MCC與5%褐藻酸鹽。取決於特殊配方以及活性組成份，該 31 200306801 一種成刀可以近似相等或不相等的值存在，也可以於一錠劑 中以其重羞之10〇/〇至50〇/。包含於其中。 、乾式口服配方可包含賦形劑如結合劑（例如羥丙基甲基 纖、准素’聚乙烯吡咯啶酮，其他纖維化材料以及澱粉），稀 5Γ如礼糖及其他糖類，殿粉，構酸二趟以及纖維化材 料）朋政劑（例如澱粉聚合物以及纖維化材料）以及潤滑 劑（例如硬脂酸以及滑石）。 卞人二< 錠背丨可犯被製成可快速崩解的可嚼式旋劑，菱形旋 劑’含片或可吞式_;其中間配方以及其製備之過程提供 10 了本發明之多態樣。 、乳泡錠及粉末亦可與本發明—起製備之。冒泡性鹽類$ 用以刀政水中藥物以利口服投藥。氣泡性鹽類為含藥劑之系 粒或粗物末形成之一乾混合物，通常由重碳酸氣納，轉樣趣 及酒石酸所組成。 15 20

當這些鹽類加入水中時，酸及鹼即發生反 化碳氣體，因而形成「冒泡」。 样出-爭 製備本發明之氣泡細粒的方法包括了三種基

驟·濕式製粒，乾式迤物 式“以及融合。融合的方法係用於製備 夕市.之氣泡式粉末。必須注意的是，雖然這些方法 ，本發明氣泡性鹽類之配方亦可製借成鏡劑，、藉 由白知先刖技藝之錠劑製備技術。 曰 濕式製㈣最古老之製㈣。製備錠劑 :步驟包括成分㈣碎及過筛，乾粉混合，濕性團塊： 以及彔後的研磨。 氣粒 32 200306801 乾式製粒包括將一粉末混合物壓 是將一半固態原料於—高功率 糙的鍵劑或 5 條塊。接著半固態原料即裂解並經研轉磨^;内進门行擠愿成 通常會通過-振動式製粒機。分項 ：成圓形粒子’ 昼（製條）以及研磨（條塊裂解或製 的:口擠 未有結合劑或濕潤劑之參與。 於任—步驟中並 於另一態樣巾，本發„期法尼紅 治療一不適狀況或生理失調之方法，本方法包含 10 以上之本發明化合物口服提供給一需要之 ^ 中，不適狀況或生理失調係一血管 ° ;一實施例 狀。 疾病或神經衮退之失調症 用以===、主^劑型包括無菌水溶液或分散液以及 用以備無囷注射溶液或分散液之無菌藥粉。於 例中，注射用劑型必須經滅菌且必須流動性、； 15射性。 以/、爾』庄 20 ，必須在製造與保存之狀態下維持其安定性，且必須維 持在抗w生物之π染，例如細菌與真菌。醫藥可接受之 可以是-溶劑或分散介質，例如水，乙醇，多元醇（例如， 甘油:丙二醇或液態丙二醇及其相似物），適用的混合物以 及喊采油等。適當的流動性可以藉由一些方式維持，例如外 膜的使用’如μ脂’以藉此維持分散液中所需粒子的體積 以及介面活性劑的使用。適用於口服，皮下注射，靜脈注射、， 肌肉注射等劑型的載體，可夂目D .， J ^ ^Remmgton^s The Science and Practice of Pharmacy(2000) 〇 33 200306801 經腸投藥如投以一水溶液，如有需要，溶液必須經適當 的緩衝處理，且先以等滲壓之足夠的生理食鹽水或葡萄糖進 行溶液之稀釋。這些特殊的溶液特別適用於靜脈注射，肌肉 注射，皮下注射以及腹膜内投藥。由此關聯，可使用之無菌 水相介質可按照本文揭示之習知技藝。舉例說明，一劑量可 溶於一毫升之等滲壓氣化鈉中，再加入1〇〇〇毫升之皮下注射 或靜脈注射溶液，或是適於注射之位置。（參見如 Remington^ Pharmaceutical Sciences, 15th Edition, pages 1035-1038以及 157(M580。）

於另貫細例中，本文揭示之組合物亦可用於局部敷 用。這些組合物可以與乳霜，塗劑，溶液，凝膠，膏狀，粉 取決於特殊應用之固體劑型同時進行配製。局部敷用之 西条了接受載體配方為熟知本項技藝者所習知。

本發明之另-實施例中，治療藥劑係被配製成一經皮傳 v之$置（貼片）。③些經皮渗透貼片可用以提供連續性或 間續性的將本發明化合物以—經控制之量渗人。藉由經皮渗 透貼片傳送藥劑之構型及制為熟知本項技藝者所習知。如 J參考吴國專利案號5,023,252 ’於1991年6月U日核發。這 :貼片可以製備成連續性，脈動式或依藥物需求傳送之構 ^他傳送系統可包括定時釋放，延遲釋放或持續的㈣ 二糸二這些系統可避免本發明化合物治療劑的重複鲜 ^ 百齐夕傳迗糸統可利用並已 句热知本項技藝者所習知言 李…… 些糸統包括以聚合物為基底的 糸、冼例如聚乳酸以及聚乙二酸 水口酐以及聚己内酯；非聚 34 25 200306801 b物系統為油脂’包含固醇類例如膽固醇，膽固醇酯，以及 脂肪酸或中性脂肪如單甘油酯，双甘油酯，三酸甘油酯；水 口膠體釋放系統；有機矽聚合物系統；胜肽基底系統；蠟質 外膜，壓製成錠時所使用之傳統結合劑與賦形劑，部分融於 5植入物與其相似者。特殊的例子包括但不限於：（a)侵蝕性 系、·先係於基材上含有一形式之多醣，請見美國專利號 M52,775(Kent)，美國專利號4,667,〇14(Nest〇retal·)，美國 ，利號4,748，G34以及5,239,66G(Leonard)，以及⑻滲入式系

統，係&一活性成分以一受控制之速率透過聚合物進行滲透效 10果，請見美國專利號3,832,253(Higuchi et ai )以及美國專利 说^854,480(Zaff〇r〇ni)。此外，也可利用一種幫浦式硬體傳 运裝置，其中一些係與植入式系統結合。 ^長寺間持、，、貞釋放之植入物可適用於治療本體中與膽 一 ^相關之疾病’這些病人需要連續性的以本發明化合物進 「長時間釋放」一詞於本文中係指-植入物是配製 性釋=°療性活性物質至少3G天，最佳為60天。長時間持續 之植入物為熟知本項技藝者所習知且包含上述之一

2。成以一實施例中，治療高膽固醇之化合物精 或夕個本發明治療性化合物之套組或套件之 續性本發明治療性化合物之套組或套件是以適當的 月（I I日守^的投藥方法，配製成每小時，每日，每週或 位之ί組的劑量。本發明更提供-含複數種劑量 次套件，以利連續性的每曰投藥，每一劑量單位 35 200306801 少包含—種本發明之治療用化合物 以協助本發明治療用化合物 =物傳以統可用 例中，系統包含-複數種劑型，以== 藥。於-實施 5 10 適當的==:套==藥劑，該劑型 用說明。#、^件形式亦可包含—組對於本體之使 文所引再進述’相信上述已能充分表達本發明。本

述之特硖ί所有公告將全部併人本文以供參考。接下來所敘 述之特殊範例為本發明中數項化合物之合成以及生物活性 測試僅解釋為說明性’非以任何方式限制於本揭示之其餘 者0 實施例一 合成 15 (1) Cholamide :

Cholamide ’ N-甲基羰曱基-5 /3 -膽甾烧酸-24-醯胺之 製備係根據下圖反應式：

具體說明’ 5/5-膽甾烷酸（丨〇〇毫克）以及肌胺酸乙基酯 20 (100毫克）溶於I5毫升之二曱基甲醯胺（DMF)，加入50毫克 之焦碳酸二乙酿（DEPC)以及0.2毫升之三乙基胺（TEA)。溶液 36 200306801 於70°C下攪拌16小時，將反應混合物以水稀釋，並以乙酸乙 酯進行萃取。再以1N氫氯酸以及1N氫氧化鈉溶液清洗後， 在降壓狀態下去除乙酸乙酯，並形成一淡黃色油脂（80毫 克）。此油脂溶於0.5毫升之0.5N氫氧化鈉溶液中，並於80°C 5 下攪拌16小時。再將反應混合物以水稀釋，並以乙酸乙酯進 行萃取。乙酸乙酯層以1N氫氣酸以及水清洗。在降壓狀態 下去除乙酸乙酯，並形成白色粉末的Cholamide。 1H-NMR(ppm):0.648(3H)? 0·913(3Η)，0·936-0·952(3Η)， 3·11(3Η)以及4·09(2Η)。 10 (2)Cholanosulfonic acid 5 β -cholanosulfonic acid， 3_(10,13-Dimethyl-hexa decahydro-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl)-butane-l-sulfonic acid是將膽汁酸衍生物進行磺化，使於環狀結構之 15 C-17的位置形成一鹵烷，如下圖反應式：

-1 〇513-Dimethyl-hexadecahydro-5 β -cyclopenta [a] phenanthren(100毫克）溶於30毫升之乙醇中，再加入溶於25 20 毫升水之Na2S03(1.25克）混勻。混合物於迴流中處理10小 時。最後將乙醇蒸餾掉，水溶液留存於20°C中16小時。將水 37 200306801 溶液進行離心並收集沉澱物。沉澱物以水清洗後待乾即為 Cholanosulfonic acid 〇 (3) Δ 3’1 2-膽留烷酸 5 △ 3,2-5 /3 -膽甾烷酸，4-(10，13-Dimethyl-2,7,8,9，10，ll， 12,13,14,15,16,17-dodecahydro - lH-cyclopenta[a] phenanthren-17-yl)-pentanoic acid之合成係藉由 Chang et al·， 心c·，1957, 75, 4404.中所述製備得。具體說明， 將 3 α，6 a -dihydroxy-cholanoic acid 24-methyl ester(2克）以 10 及p-toluensulfonic chloride溶於25毫升。比σ定並於20°C中授拌 16小時。完成後產物再回溶於30毫升2,6-雙甲基吡啶中並於 迴流中加熱6小時。待回溫至20°C，將反應混合物以冰及水 混合液稀釋，再以乙酸乙酯萃取。之後收集乙酸乙酯層並以 10%鹽酸清洗三次，8%碳酸氩鈉一次，以及水一次。於降壓 15 狀態下去除乙酸乙酯，再將殘餘物回溶於氫氧化鉀甲醇溶液 中並於90°C下攪拌3小時。完成後即可收集產物Δ3,2-膽甾烷 酸。 38 1 附加化合物 2 20 N-甲基-N -曱氧基-5冷-膽甾烷酸-24-醯胺，N -羰曱基-5 /5 -膽留烷酸-24-醯胺，N -磺醯乙基-5々-膽留烷酸-24-醯 胺，N -曱基-N -曱胺基-5/3 -膽留烷酸-24-醯胺，N -甲醯胺 -5/5 -膽留烷酸-24-醯胺，N -(2,2,2-三氟乙烯）-5/3 -膽留烷酸 -24-醯胺，N - N 双曱基-5/3 -膽留烷酸-24-醯胺，N -甲基-5 25 /5 -膽留烷酸-24-醯胺，乙氧羰甲基-5/S -膽留烷酸-24-醯胺， 200306801 以及N -(2-氯乙基）-5万-膽留烷酸-24-醯胺等，均分別按照上 述方法合成，除了含羥基化合物或其他胺基化合物以肌胺酸 乙基酯取代之外。 實施例二 5 報導基因轉錄活化試驗

將人類胚胎腎臟細胞293以每孔2X104個細胞之濃度接 種至 48孔培養盤中，加入 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)培養液以及外加10%胎牛血清進行細胞培養。24小 時後，將250ng之報導基因，40ng之pSG5/hRXRa，40ng之 10 pR5/rFXR，10ng 之 pSG5/hGripl，0.4ng 之 CMV/R-luc (transfection normalization reporter，Promega)以及 250ng之 載體DNA加入於每一孔中，藉由磷酸鈣共沉澱的方法將報導 基因轉染至培養之細胞中。報導基因為pGL-3/DR-4-luc，包 含有3個拷貝數的AGGTCAagccAGGTCA(DR-4);或是 15 pGL-3/IR-4-luc ， 包含有 3 個拷 貝數的 GGGTCAcTGACCC(IR-l)。這些報導基因係與-56至+109之 人類c-/w啟動子融合，啟動子位於pGL3質體之螢火蟲螢光 基因序列之前。這些報導基因並未含對COUP-TF Π或HNF4 發生反應之要素。在12_24小時後，細胞以磷酸鹽緩衝液（PBS) 20 清洗，並再加入DMEM及外加的4%去脂胎牛血清進行培 養。將化學物質溶於乙醇中，並分二次加入培養液中使其含 乙醇之最後濃度為0.2%。在24-48小時後收集細胞並以一市 售之套組（Promega Dual luciferase Π )，以及 Monolight 螢光儀 (Becton Dickenson，Mountain View，CA)檢驗螢光活性。FXR 200306801 與RXR形成雙分子，為Fxr/rxr異體雙分子，與dr-4以及 IR-1反應要素以配位子從屬之規則進行結合，且將報導基因 轉錄表現出螢光。 測 5式用化合物包含 cholamide，Cholanosulfonic acid， 5 膽甾烷酸，N-曱基-N-甲氧基-5/3 -膽甾烷酸-24-醯胺， N省甲基-5冷_膽甾烷酸-24-醯胺，N·石黃醯乙基-5冷_膽甾烷 酸-24-酿胺，N_甲基_N•甲胺基·5召_膽甾烷酸_24_醯胺，沁 甲蕴胺-5 yS -膽留烷酸-24-醯胺，Ν-(2,2,2·三氟乙烯）-5万-膽 留烧酸-24-醯胺，Ν-Ν-双曱基_5 /3 膽甾烷酸-24-醯胺，Ν-甲 10基_5 /5 -膽留烷酸_24_醯胺，乙氧羰甲基_5万-膽留烷酸_24_ 酿胺’以及Ν-(2-氯乙基）-5召-膽甾烷酸-24-醯胺等。結果顯 示以上化合物均為具效果之FXF拮抗物。 舉~例說明，如Cholamide非預期的顯示出比一已知之 非固醇類FXR拮抗物GW4064具有更高（200倍）的效果。 15 實施例三 共活化子接受子配位試驗 一融合蛋白GST-rFXR係藉由表現質體pGEX表現於大 腸桿菌菌株BL21之中。細胞藉由一循環的凍結-解凍以及超 20 音波震盪溶解之。收集於45000g離心1小時之後的上清液與 麩胱甘肽-瓊脂糖一起培養於4 °C，1 〇分鐘。瓊脂糖以一 ρΗ7·5，含20mM Hepes，10mM EDTA，lOmM Na2Mo04， ImM b-mercaptoethanol，ImMTT，0.5mM PMSF以及每毫升 含2pg aprotinin之結合液清洗。人類Grip 1的製造係藉由兔 25 子之網狀細胞溶解液以[35S]-曱硫胺酸標記後，於試管外轉 200306801 譯而成。網狀細胞溶解液（2毫升）中的[35S]- Grip 1加進内含 與結合有GST-UR之瓊脂糖微粒的結合液中。一含測試化合 物之乙醇溶液加入混合物中，將此半固體於室溫下搖晃30 分鐘。瓊脂糖微粒再以結合液沖洗三次。結合的蛋白質再藉 5 由SDS-PAGE載入緩衝液進行離析，並以8%之SDS-PAGE膠 體進行分離。將膠體乾燥並進行自動放射顯影。具放射反應 的Grip 1再以填光影像掃描分析儀（Molecular Dynamics)進 行量測。 10 實施例四 北方墨點分析法 本試驗使用8週大的公鼠Fischer 344-HSD。本試驗採用 一低脂口服飲食。一測試用化合物以不同之濃度混合於食物 中供應經口攝取。平均食物消耗量為每隻老鼠每日食用25 15 克。光照狀況係控制以12小時照光，12小時黑暗（早上七點 至晚上七點）的交替循環。本發明化合物有不同劑量，但不 影響消耗食物之總量。前述之所有化合物均有降低血清膽固 醇與三酸甘油酯之效果。藉由犧牲老鼠之肝臟組織進行北方 墨點分析法，結果顯示出這些化合物可誘導肝臟中FXR基因 20 的表現。 其他實施例 數種關於本發明之實施例已詳述於上。且在不背離本發 明之精神與範疇下，能夠對本發明有種種改變及修飾，以適 41 200306801 用於種種用途與情況。因此其他具體實施例亦在本申請專利 範圍内。 【圖式簡單說明】 5 無 【圖號說明】 無

10 42

Claims (1)

1. 200306801 拾、申請專利範圍： 1· 一種如下式I之化合物：

   其中 η為1或2 ; 母一 R3, R4, 115及R6分別為氫； 每一 RlG，Rl3&Rl7分別為氫或是C1-4烷基； X為cNS次烷基，次烯基，或次炔基； Y 為-CO_ ’ -CS«^_CHN_ ;以及 z為Cl_8烷基或NRaRb，其中每一心與化分別為氫，Cw 貌基’ cv4烧氧基’ Ci 4績醢烧基’ Ci 4烧胺基，CL烷基， 或是Cw烷氧基羰基烷。

   2·如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中η為1 ;每 R3, R4, :^及心分別為氫，及每一Ri〇, Ri3&R”分別為甲基。 3·如申請專利範圍第2項之化合物，其中Y為-CO-。 4·如申請專利範圍第2項之化合物，其中X為Cl_8次烷 基。 5·如申請專利範圍第4項之化合物，其中γ為_c〇-。 6·如申請專利範圍第4項之化合物，其中X為乙烯。 43 200306801 7.如申請專利範圍第6項之化合物，其中Y為_c〇-。 8·如申請專利範圍第7項之化合物，其中Z為（曱基）(羰 甲基）胺基，（甲基）（曱氧基）胺基，（羰甲基）胺基，（曱胺基）（甲 基）胺基，（甲胺基）（曱基）胺基，（甲醯胺基）胺基，（2,2,2_三 5氟乙基）胺基，双曱基胺基，乙氧羰甲基，或是（2-氯乙基）胺 基。 9·如申請專利範圍第8項之化合物，其中Ζ為（甲基）(羰 曱基）胺基。 !〇·如申請專利範圍第8項之化合物，其中X為c^8次烷 10 基。 11·如申請專利範圍第10項之化合物，其中¥為_〇〇_。 12. 如申請專利範圍第u項之化合物，其中γ為_c〇_。 13. —種如下式I之化合物

   15 其中 η為1或2 ; 每一 R3，R4，R5&R6分別為氫；或是化及仏一起，或r5 及R6—起被去除’以利其所連接之碳原子之間以雙鍵鍵結； 每一 RlG，Rl3&Rl7分別為氫或是Ch烷基； 44 200306801 乂為匚“次烷基，CM次烯基，或C2 8次炔基； M_so_，-s〇n〇-或-p〇2-;以及 Z為羥基，Cl_8烷基，Ci8烷氧基或，其中每一 r _分別為氫’ 况氧基，L賴絲，Cl_4燒 5胺基Cq羰烷基，或是Cw烷氧基羰基烷。 14·如申請專利範圍第13項之化合物，其 及〜分別為氣；Rl〇，Rl3M17分別為甲基。 ，1 2 3, 4

   j4·如申請專利範圍第14項之化合物，其中¥為-8〇2_。 ι〇浐美 如申清專利範圍第14項之化合物，其中又為匚!·8次 17·如申請專利範圍第16項之化合物，其中Y為。 •如申請專利範圍第16項之化合物，其中又為乙烯。 9·如申請專利範圍第18項之化合物，其中丫為_§〇2_。 如申睛專利範圍第19項之化合物，其中z為經基。 浐美 如申請專利範圍第13項之化合物，其中X為Gy次

   45 1 2 2 如申晴專利範圍第13項之化合物，其中乂為_sq2-。 3 23 — 4 •—種如下式I之化合物： 200306801 其中 n為1或2 ; & Wr4-起’或是R5&R「起被去除，以利其所連接之 碳原子之間以雙鍵鍵結； 5 每一 RlG，Rl3&Rl7分別為氫或是Cw烷基； 又為。^8次烷基，C2-8次烯基，或c28次炔基； Y為-CO·，-CS-，-CHN-，_S〇_，_s〇2_，_?〇_或心 以及

   _ Z為經基，C丨·8烷基或NRaRb，其中匕與化分別為氫，^ 4 ίο烷基，Cm烷氧基，Cl_4磺醯烷基，Ci_4烷胺基，Ci 4羰烷基·， 或疋c1-4烧氧基幾基烧。 24·如申請專利範圍第23項之化合物，其中^為丨·，每 R1 0，R1 3及R1 7分別為甲基。 25.如申請專利範圍第24項之化合物，其中又為乙烯； 15 Y為-CO- ; Z為羥基。 26· —醫藥品組成物包含有： 一種有效劑量之化合物I，如下式：

   46 200306801 其中 η為1或2 ; 母一 R3，R4，R5及尺6分別a气·々β 6刀乃J馮虱，或是化及^一起，或 及R6—起被去除，以利其& ^ /、所連接之奴原子之間以雙鍵鍵結； 5 ^，〜及〜分別為氫或是一烧基； X為c卜8次烧基，c28次嫌其 H 2·8人席基，或是c2-8次炔基； Y-CO- ’ -CS- ’ -CHN 〇^ N" -S〇-，-SCV，邛〇_或邛〇2-;以 及 Z為羥基，Cu烷基，Γ ^ ^ ^ . χ ίο li-8烷乳基或NRiR2，其中1^與1^2 ”為氫，Cl.4烧基，Cl.4燒氧基，CM醯烧基，CM烧 基’ CN4碳烧基，或是〇14院氧基幾基烧；以及 一種製藥可接受的載體。 • —27.如申請專利範圍第26項之醫藥品組成物，其中福 1 ’母'一 R3，R4，R5及Rg分別為鈣.β — η 6刀〜馬虱，及母一 Ri〇, Ru及Rn分別 15 為曱基。 28·如申凊專利乾圍第27項之醫藥品組成物，其中γ為 -CO-或-S〇2_ 〇 29·如申請專利範圍第27項之醫藥品組成物，其中X為 C 1 -8次烧基。 20 30. 如申請專利範圍第29項之醫藥品組成物，其中γ為 -CO-或-S〇2·。 31. 如申請專利範圍第29項之醫藥品組成物，其中χ為 乙稀。 47 200306801 32.如申請專利範圍第31項之醫藥品組成物，其中丫為 -CO-。 33·如申請專利範圍第32項之醫藥品組成物，其中z為 (甲基）（羰曱基）胺基，（曱基）（甲氧基）胺基，（羰甲基）胺基，（甲 5胺基）（曱基）胺基，（甲胺基）（曱基）胺基，（甲醯胺基）胺基， (2,2,2-二氟乙基）胺基，双曱基胺基，乙氧羰曱基，或是（2_ 氣乙基）胺基。 34.如申請專利範圍第33項之醫藥品組成物，其中2為 (甲基）（羰曱基）胺基。

   〇 35·如申請專利範圍第31項之醫藥品組成物，其中丫為 -S〇2·。 36.如申請專利範圍第35項之醫藥品組成物，其中2為 羥基。 37·如申請專利範圍第26項之醫藥品組成物，其中又為 15 Ci-g次烧基。 38.如申請專利範圍第37項之醫藥品組成物，其中 -CO-或是-s〇2_。

   /9.如申請專利範圍第37項之醫藥品組成物，其中乂為 20 復如申請專利範圍第38項之醫藥品組成物 -CO-或是-S〇2_。 41.如申請專利範圍第26項之醫藥品組成物 -CO-或是-s〇2_。 其中Y為 其中Y為 48 200306801 42.如申請專利範圍第26項之醫藥品組成物，其中^ 及R4〆起，或是r5&r「起被去除，以利其所連接碳原 間以雙鍵鍵結。 、 43·如申請專利範圍第43項之醫藥品組成物，其中口為 1，每R3, R4,心及116分別為氫；及Rio, Rn及R17分別為甲 基0 44·如申請專利範圍第43項之醫藥品組成物，其中X為 乙烯；Y為-CCK; z為羥基。

   45· —種治療一本體與法尼醇X接受器（FXR)相關之疾 10病所須之治療方法，該治療方法包含提供一種有效劑量之化 合物I如申睛專利範圍第i項至第13項所述之該醫藥品組成 物。 46· 一種治療一本體與法尼醇X接受器（FXR)相關之疾 瑪所須之治療方法，該治療方法包含提供一種醫藥品組成 15 物，如申請專利範圍第26項所述。 47·如申請專利範圍第46項或第47項所述之治療方 法，其中該本體係指人體。

   49 200306801 柒、指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：無。 (二) 本代表圖之元件代表符號簡單說明:

   捌、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式:

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