TR2022020608A2 - Anti̇vi̇ral burun spreyi̇ - Google Patents

Abstract

Buluş, sağlık sektöründe kullanılmak üzere, antiviral burun spreyi ile ilgilidir. Buluş konusu antiviral burun sprey formülasyonu, hücrelere zararlı etkisi olmadan virüsü inaktive eden ve çoğalmasını engelleyen doğal bileşenler içermektedir.

Description

TARIFNAME ANTIVIRAL BURUN SPREYI Teknik Alan Bulus, saglik sektöründe kullanilmak üzere, antiviral burun spreyi ve bundan sonrasinda ayni aktif maddeler ile gelistirilecek olan diger farmasötik ürünler ile ilgilidir. Bulus özellikle, dereotu yagi ve tannik asit etkin madde içerigi sayesinde, virüse karsi yüksek oranda baskilama saglayan yeni bir antiviral burun spreyi ile ilgilidir. Teknigin Bilinen Durumu COVID-19 pandemi sürecinde milyonlarca insan bu viral enfeksiyondan etkilenmis ve yüzbinlerce insan hayatini kaybetmistir. 2022 yili Ekim ayi itibariyle Covid-19 tanisi almis olan toplam insan sayisi Türkiyelde 16,9 milyon iken dünya genelinde 623 milyonu asmistir. Yaklasik 3 yili kapsayan bu süreçte COVID kaynakli ölüm sayilarina iliskin tespit edilebilen vaka sayisi ise Türkiye*de 101000, dünya genelinde ise COVID-19 gibi Coronavirus kökenli olan SARS ve MERS salginlariyla birlikte, Influenza virus kökenli olan kus gribi ve domuz gribi gibi salginlarda önemli düzeyde tehdit ve can kaybina yol açmaktadir. Bu hastaliklarin önemli bir bölümünde bulas yolu olarak solunum sistemi (burun yolu) ön plana çikmaktadir. Hastalik etkeni olan viruslar solunum havasi ile vücuda girdikten sonra agirlikli olarak burun mukozasina tutunup enfeksiyonu baslatir. Burada çogalan virus sonrasinda ya akcigerlere inerek pnömoni (zatürre) olusturur veya kan yoluyla vücuda yayilarak sistemik (genel) hastalik tablosuna yol açar. Hastalik bulgularinin ortaya çiktigi bu ileri asamalara gelindiginde viral enfeksiyonlara iliskin tedavi seçenekleri ve basari sansi oldukça azalmaktadir. Dolayisiyla bu tür enfeksiyonlarin olusturacagi hasari engellemek veya azaltmak için en uygun yol, henüz enfeksiyonun baslangiç asamasi olan vücuda giris noktasinda, yani burun mukozasinda virüsün durdurulabilmesidir. Solunum yoluyla bulasan viral enfeksiyonlardan korunma için takip edilen güncel uygulamalar ve bazi eksiklikleri asagida verilmektedir: Mevcut Uygulamalar Eksiklik/Yetersizlik Dezavantaj Ilaç tedavisi Hastalik bulgulari ortaya çiktiktan sonra uygulamaya baslanir. Coronavirus kaynakli hastalik bulgularini tam olarak tedavi edebilen bir ilaç henüz kesfedilememistir. Hastalik bulgulari ve doku hasari baslamistir. gözlenir. Maliyeti yüksektir. Disa bagimlilik vardir. Plazma tedavisi Hastalik bulgulari ortaya çiktiktan sonra uygulamaya baslanir. Tedavi etkinligi tutarli degildir Özellikle varyant suslara karsi etkinligi kisitIidir. Alerjik ve anaflaktik reaksiyonlar qusabiIir. Dezenfektan/antisepti Dezenfektanlar yüzey temizligi ve mikroptan Vücutta kullanimi uygun degildir. Antiseptikler mukoza mikroptan arindirilmasinda kullanilir. Virus çogalmasi üzerine etkileri yoktur veya çok sinirIidir Burun içinde kullanilamaz. Yüksek dozlarda sitotoksisite gösterir. Burun spreyleri Ticari olarak kullanimda olan nazal spreyler yangi giderici ve burun açici özelliktedir. Hastalik etkeni olan virusa karsi etkisi yoktur. Antiviral burun spreyleri Bunlar genel olarak antiviral etken madde içermez. Direkt olarak virüs üzerine etkisi bilinmemektedir. yapisindadir. Deniz yosunu içeren ürünlerde antiviral etkinlik deneysel olarak Hipertonik çözeltiler burun mukozasinin fizyonomisine zarar verir. gösterilmemistir. Laktoferin içeren Ulasilabilirligi ve üretimi Fiyati oldukça yüksektir. antiviral burun zordur. spreyleri Teknigin bilinen durumuna yönelik gerçeklestirilen patent ve literatür arastirmasinda saptanan dokümanlar asagida özetlenmistir. gelistirilen buharlasabilen sivi bilesimi için bir aparat açiklanmaktadir. Ancak, söz konusu basvuruda dereotu yagi ve tannik asidin birlikte kullanimina iliskin bir açiklama bulunmamaktadir. bilesim ile ilgilidir. Ancak, söz konusu basvuruda dereotu yagi ve tannik asidin birlikte kullanimina iliskin bir açiklama bulunmamaktadir. Sonuç olarak, yukarida anlatilan olumsuzluklardan dolayi ve mevcut çözümlerin konu hakkindaki yetersizligi nedeniyle ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli kilinmistir. Bulusun Kisa Açiklamasi Mevcut bulus, yukarida bahsedilen gereksinimleri karsilayan, tüm dezavantajlari ortadan kaldiran ve ilave bazi avantajlar getiren, antiviral burun spreyi ile ilgilidir. Bulus, mevcut durumlardan esinlenerek olusturulup yukarida belirtilen olumsuzluklari çözmeyi amaçlamaktadir. Bulusun ana amaci, yeni bir antiviral burun spreyi formülasyonu gelistirmektir. Bulus konusu formülasyon, hücrelere zararli etkisi olmadan virüsü inaktive eden ve çogalmasini engelleyen dogal bilesenler içermektedir. Bulus konusu antiviral burun spreyi formülasyonunun baslica teknik avantajlari asagida verilmektedir. o Etken madde bilesimi sayesinde direkt olarak virüsü hedef alir ve çogalmasini durdurur veya azaltir. Bu özellige sahip oldugu deneysel laboratuvar çalismalarinda gösterilmistir. 0 Tamamen dogal etken maddelerden olustugu için yan ve istenmeyen etki riski bulunmaz. Bilesiminde kullanilan etken maddeler gida olarak yaygin tüketilen ürünlerden elde edilmistir. Bu ürünler hergün milyonlarca insan tarafindan tüketilmektedir. Ayrica formül içerigindeki etken maddelerin sitotoksisite deneyleri yapilarak zararsiz dozlari laboratuar çalismalarinda tespit edilmistir. 0 Nazal (burun) spreyi seklinde uygulanacagi için enfeksiyonu daha baslamadan durudurur veya henüz baslangiç asamasindayken bloke ederek sonlandirir. Formülasyonundaki etken maddelerin enfektif (canli) coronavirusla yapilan deneylerinde virüsü hem serbest haldeyken bloke ettigi hem de hücreye girisini ve hücrede çogalmasini durdurdugu tespit edilmistir. 0 Kolay temin edilebilen ve ilaç tedavilerine kiyasla çok daha düsük maliyetli hammaddelerle hazirlanir. Içerikte bulunan dereotu yagi ve tannik asit maddeleri kolay temin edilebilecek ürünler olup, fiyat ve lojistik açisindan diger ilaç etken maddelerinden ayrisirlar. Ulusal ve uluslararasi ticaretinde herhangi bir kisitlama yoktur. o Formülasyonda yer alan destekleyici maddeler sayesinde asagidaki gerekçelerle antiviral etkinligi destekler: Polivinil alkol: Etken madde bilesenlerinin burun mukozasinda daha uzun süre ve etkili sekilde kalmasini saglar. Benzalkonyum klorür: Yangi giderici ve dekonjestan etkiye sahiptir. Fosfat tampon çözeltisi (pH 6,00): Formülasyonun tasit maddesi olup ayarlanmis pH,i sayesinde burun mukozasinda antimikrobiyal etkinligi Bulusun yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen sekiller ve bu sekillere atiflar yapilmak suretiyle yazilan detayli açiklama sayesinde daha net olarak anlasilacaktir ve bu nedenle degerlendirmenin de bu sekiller ve detayli açiklama göz önüne alinarak yapilmasi gerekmektedir. Bulusun Anlasilmasina Yardimci Olacak Sekiller Sekil 1*de dereotu yaginin coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi verilmektedir. Sekil 2ide tannik asitin coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi verilmektedir. Sekil 3*te dereotu yagi ve tannik asidin (birlikte) coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi verilmektedir. Sekil 4*te dereotu yagi ve tannik asidin birlikte ve 48 saat arayla etken madde takviyesiyle coronavirus çogalmasina etkisi verilmektedir. Sekil 5*te hücreye tutunma (adsorbsiyon) ve giris (penetrasyon) oranlari verilmektedir. Sekil Gida dereotu yagi ve tannik asidin (birlikte) ortamda bulunan coronavirusun inaktive edilmesine etkisi verilmektedir. Bulusun Detayli Açiklamasi Bu detayli açiklamada, bulusun tercih edilen yapilanmalari, sadece konunun daha iyi anlasilmasina yönelik olarak açiklanmaktadir. Bulus, saglik sektöründe kullanilmak üzere, antiviral burun spreyi ile ilgilidir. Söz konusu antiviral burun spreyi formülasyonu, etken madde olarak dereotu yagi ve tannik asit, yardimci maddeler olarak polivinil alkol, benzalkonyum klorür, fosfat tampon çözeltisi içermektedir. Fosfat tampon çözeltisinin pH*i tercihen 6,dir. Bulusta, dereotu yagi ve tannik asit, antiviral burun spreyinin zorunlu bilesenleridir. Polivinil alkol yerine gliserin kullanilabilmektedir. Benzer sekilde, fosfat tampon çözeltisi yerine fizyolojik Bulusun tercih edilen bir uygulamasinda, antiviral burun spreyi formülasyonu içeriginde yer alan bilesenler, kullanim araliklari ve tercih edilen kullanim miktarlari asagidaki tabloda verilmektedir. Tercih edilen Kullanilabilir Bilesen kullanim miktari miktarlar Tannik asit 30-70 uM 10-90 uM Polivinil Alkol 7-14 mg/ml 5-14,5 mg/ml Fosfat Tampon 1,0 ml 1,0 ml Çözeltisi (pH 6,00) Dereotu yagi; antiviral, antimikrobiyal ve antioksidan etkinlige sahip yag asiti içerikli bir bitkisel ekstrakt ürünüdür. Coronavirus ile yapilan deneysel uygulamalarda ortamdaki viruse karsi 4 saat süreyle %98Uen fazla oranda inaktive ederken, virüsün hücrelere girisini %90Uan fazla oranda, hücrede çogalmasini ise %99,58 oraninda baskiladigi belirlenmistir. Tannik asit; antiviral ve antimikrobiyal etkinlige sahip bir bilesik olup üzere degisik bitkilerde dogal olarak bulunur. Coronavirus ile yapilan deneysel uygulamalarda ortamdaki virusa karsi 4 saat süreyle %98,2*den fazla oranda inaktive ederken, Virüsün hücrelere girisini %58*den fazla oranda, hücrede çogalmasini ise %100,e varan oranda baskiladigi belirlenmistir. Bulus kapsaminda gerçeklestirilen çalismalarda, dereotu yagi ve tannik asitin birlikte kullanimi durumunda sinerjetik etki gösterdigi ve ortamdaki coronaviruslari %99,4 oraninda inaktif ettigi; virüsün hücrelere girisini %99,58den fazla oranda, hücrede çogalmasini ise %99,94,e varan oranda baskiladigi belirlenmistir. Bu sebeple her iki etken maddenin belirlenen miktarlarda birlikte formule edilmesinin uygun olacagi degerlendirilmistir. Polivinil alkol; yapisal özelligi sayesinde etken madde bilesenlerinin burun mukozasinda daha uzun süre ve etkili sekilde kalmasini saglar. Benzalkonyum klorür; yangi giderici ve dekonjestan etkisi nedeniyle virus enfeksiyonuna bagli mukaza harabiyetini azaltici yönde destekleyici etki saglar. Fosfat tampon çözeltisi (pH 6,00); esasen formülasyonda tasit maddesi görevi almakla birlikte dengelenmis pH degeri sayesinde burun mukozasinin fizyolojik savunma bariyerini destekler. pH derecesi burun mukozasinda antimikrobiyel etkinligin en yüksek oldugu seviye olarak seçilmistir. Bu degerin yukari dogru degismesi durumunda Bulus konusu antiviral burun spreyi, solunum yoluyla bulasan virus enfeksiyonlarinin baslamasi veya ilerlemesini önlemek amaciyla kullanilmak üzere hazirlanmistir. Hasta olmayan bireyler virustan korunmak için, hasta bireyler ise hastaligin ilerlemesini yavaslatmak ve bulastiriciligi azaltmak için kullanabilir. Varsa burundaki içerik bosaltildiktan sonra her iki burun bosluguna 1-2 kez sprey uygulamasi yapilir. Bu uygulama günde 4 kez alti saat araliklarla yapilmalidir. Dogal içerige sahip olmasi sebebiyle ihtiyaç duyuldugunda daha kisa araliklarla da uygulanabilir. Bulus konusu antiviral burun spreyinin üretim yönteminde, ilk olarak, fosfat tampon çözeltisi (PBS) hazirlanmaktadir. PBS, kalsiyumsuz hazirlanmakta olup, steril edilmektedir. Tercihen cam bir kap içinde magnetic karistiricida döndürülmeye baslanmaktadir. Hazirlanan çözeltiye Dereotu yagi (tercihen % 0,006-0,015 (v/v) oraninda) ilave edilmekte, ardindan Tannik asit (tercihen ilave edilmektedir. Ilave edilen T toz formdadir. Bir sonraki ilave edilen bilesen poIiviniI alkoldür (tercihen 7-14 mg/ml). Bir sonraki islem adiminda, benzalkonyum kIorür (tercihen 0,01-0,04mg/ml) eklenmektedir. Elde edilen nihai ürün, tercihen oda sicakliginda 200 rpm hizda 30 - 60 dakika karistirilmaktadir. Ardindan, tercihen 0,2 um membran filtreden geçirilerek steril filtrasyon islemi uygulanmaktadir. Son islem adimi, dolum isIemidir. Bu islemde, isik geçirmeyen cam veya plastik sprey siselerine dolum yapilmaktadir. Söz konusu yöntemde, karistirma 21-24"C, sicaklikta 30-60 dakika süreyle, steril filtrasyon 21-24"C, sicaklikta, saklama 21-24"C, sicaklikta gerçeklestirilmektedir. Bulusun beklenmedik etki / sasirtici etki sagladigini kanitlamak üzere yapilan çalismalar asagida özetlenmektedir. Bu çalismalar, herhangi bir kisitlayici anlam tasimaksizin sadece bilgi vermeye yöneliktir. Kisaltmalar: Dereotu yagi: Bitkisel bir uçucu yag Tannik asit: Bitkilerden elde edilen toz halinde bir bilesik BCoV: Çalismada kullanilan coronavirus (Bovine coronavirus) Dereotu Yaginin Coronavirus Çogalmasina Etkisi Dereotu yagi muamalesinde elde edilen virus titreleri (canli virus sayilari) Dereotu yagi muamalesinde elde edilen virus inhibisyon oranlari (%) (virüsü inaktive etme orani) Dereotu yagi coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi Sekil 1,de verilmektedir. Uygulanan bu deney ile Dereotu yaginin etkili konsantrasyonu teyi edilmistir. KONTROL DEREOTU YAGI MU_l_-\MEL_E GRUBU UYGULANAN SURESI (muamele - edilmeyen) (muamele edilen) 24 saat 5,75 3,38 48 saat 6,00 4,88 72 saat 5,88 5,25 96 saat 5,13 5,63 120 saat 3,75 5,00 MU_I_-\MEL_E INHIBISYON ORANLARI 24 saat 99,58 48 saat 92,50 72 saat 76,29 Tannik Asidin Coronavirüs Çogalmasina Etkisi Tannik asit muamalesinde elde edilen virüs titreleri (canli virüs sayilari) Tannik asit muamalesinde elde edilen virüs inhibisyon oranlari (%) (virüsü inaktive etme orani) TANNIK ASIT MUAMELE KONTROL GRUBU UYGULANAN SÜRESI (muamele . . (muamele edilen) edilmeyen) 24 saat 6,25 1,63 48 saat 6,25 2,63 72 saat 5,88 4,13 MUAMELE SÜRESI INHIBISYON ORANLARI 24 saat 100,00 48 saat 99,98 72 saat 98,22 Sekil 2ide Tannik asidin coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi verilmektedir. Uygulanan bu deney ile Tannik asidin en etkili oldugu konsantrasyon teyit edilmistir Dereotu Yagi ve Tannik Asidin (Birlikte) Coronavirus Çogalmasina Etkisi Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) muamalesinde elde edilen virüs titreleri (canli virüs sayilari) MUAMELE DEREOTU YAGI VE SÜRESI KONTROL GRUBU TANNIK ASIT MADDESI UYGULANAN (muamele (muamele edilen) edilmeyen) 24 saat 5,50 3,83 48 saat 6,38 3,17 72 saat 6,25 4,58 96 saat 4,00 4,25 120 saat 2,75 4,58 Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) muamelesinde elde edilen virüs inhibisyon oranlari (%) (virüs inaktive etme orani) SÜRESI INHIBISYON ORANLARI 24 saat 97,85 48 saat 99,94 72 saat 97,85 Sekil Site Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) coronavirus üzerine zamana bagli etkinligi verilmektedir. Uygulanan bu deney ile Dereotu yagi ve Tannik asitin daha önce belirlenen en etkili oldugu konsantrasyonlarda birlestirilerek birlikte test edilmistir. Böylelikle sinerjetik etkisine bakilmistir. Böylece 48. saatte %99,94 oraninda inhibisyon elde edilmistir. Bu etkinin 72 saat %99 devam ettigi 72 saatte %97ye düstügü belirlenmistir Dereotu Yagi ve Tannik Asitin Birlikte ve 48 Saat Aravla Etken Madde Takvivesivle Coronavirus Çogalmasina Etkisi Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) muamalesinde elde edilen virüs titreleri (canli virüs sayilari) DEREOTtJ YAgi VE MUAMELE SÜRESI KONTROL GRUBU TANNIK ASIT UYGULANAN (muamele (muamele edilen) edilmeyen) 24 saat 550 3,25 48 saat 6,38 4,00 72 saat (48. saatte takviyeden 24 saat sonra) 6'25 2,33 96 saat (48. saatte takviyeden 48 saat sonra) 4'00 2,08 120 saat 275 0,83 Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) muamalesinde elde edilen virüs inhibisyon oranlari (%) (virüsü inaktive etme orani) MUAMELE SÜRESI INHIBISYON ORANLARI 24 saat 99,44 48 saat 99,58 72 saat 99,99 96 saat 98,79 120 saat 98,79 Sekil 4,te Dereotu yagi ve Tannik asitin birlikte ve 48 saat arayla etken madde takviyesiyle coronavirus çogalmasina etkisi verilmektedir. Uygulanan bu deney ile Dereotu yagi ve Tannik asitin daha önce belirlenen en etkili oldugu konsantrasyonlarda birlestirilerek kullaniminin 48 saat araliklarla takviye edilmesiyle ortaya çikacak sonuç test edilmistir. Böylelikle maksimum kullanim sikligi (süre araligi) degerlendirilmistir. Bu uygulama ile 24. saatte %99,44 olan etkinlik 120. saate kadar uzatilabilmistir. Dereotu yagi ve Tannik asitin (birlikte) Coronavirusun Hücreve Girisine Etkisi Virus Titreleri Üzerine Etkisi: Muamele Muamele edilenler edilmeyen BCOV + BCOV + tannik BCOV BCQV . dereotu asit ve dereotu tannik asit , , Hücreye (adsorbsiyon) Hücreye (Penetrasyon) Inhibisyon oranlari: BCOV+ tannik BCOV BCOV + tannik asit asit , ve dereotu yagi inhibisyonu Sekil Site hücreye tutunma (adsorbsiyon) ve giris (penetrasyon) oranlari verilmektedir. Bu deneyde Dereotu yagi ve Tannik asitin ayri ve ve birlikte kullanimi durumunda ortamda bulunan coronavirusun hücreye girisini engelleme potansiyeli test edilmistir. Elde edilen verilere göre T maddesi tek kullanildiginda hücreye tutunmayi %68,38 oraninda durdururken, T maddesi tek kullanildiginda %90 oraninda basari saglamistir. Oysa iki bilesen birlikte kullanildiginda bu oran %98,58,e çikmaktadir. Bu çalismanin en öne çikan beklenmedik bulgularindan birisidir. Dereotu yagi ve Edilmesine Etkisi Tannik Asidin (Birlikte) Ortamda Bulunan Coronavirusun Inaktive Muamele Muamele Tannik asitin etkisi Dereotu yaginin etkisi Dereotu yagi ve Tannik suresi edilmemis asitin (birlikte) etkisi (BCOV) Virus Inaktivasyon Virus Inaktivasyon Virus Inaktivasyon 0 3 6,00 Sekil Gida dereotu yagi ve tannik asidin (birlikte) ortamda bulunan coronavirusun inaktive edilmesine etkisi verilmektedir. Bu deneyde dereotu yagi ve tannik asitin ayri ve irlikte kullanimi durumunda ortamda bulunan coronavirusun inaktive edilme potansiyeli test edilmistir. Elde edilen verilere göre tannik asitin tek kullanildiginda coronavirusu 1. saatte %99,43 oraninda inaktive ederken 2. saate %90*a düsmekte, dereotu yaginin tek kullanildiginda 1. saatte %94,37 olan inaktivasyon orani 2. saatte ile baslamakta ve 4. saate kadar (%98,22) yüksek devam etmektedir. Dolayisiyla iki bilesenin birlikte kullanilmasi durumunda ortamda mevcut olan viruslarin inaktivasyonunu da basariyla yapabilmektedir. TR TR TR

Claims (1)

1.