TR201619394A2

TR201619394A2 - Di̇yabet, obezi̇te ve i̇li̇şki̇li̇ tüm metaboli̇k hastaliklarin tedavi̇si̇nde bazi pepti̇dleri̇n kullanilmasi

Info

Publication number: TR201619394A2
Application number: TR2016/19394A
Authority: TR
Inventors: Karatuğ Ayşe; Oktayoğlu Selda; Bolkent Şehnaz; Sancar Baş Serap; Önay Uçar Evren; Arda Nazli
Original assignee: Univ Istanbul Rektoerluegue
Priority date: 2016-12-23
Filing date: 2016-12-23
Publication date: 2019-06-21

Abstract

Mevcut bulus?, diyabet, obezite ve ilişkli metabolik hastalıkların tedavisinde E3 ubiquitin-protein ligase RNF181, UPF0361 protein C3orf37 homolog, inhibin beta B chain, aryl-hydrocarbon-interacting-protein-like 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein, steroid hormone receptor ERR1, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-like protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, platelet glycoprotein Ib beta chain, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, Guanin deaminaz ve Alfa-1-asit glikoprotein peptidlerinin tek başına veya ikili/üçlü kombinasyonlar halinde veya bilinen antidiyabetik/antiobezitik ilaçlar ile birlikte kombine olarak kullanımı ile ilis?kilidir.

Description

TARIFNAME DIYABET, OBEZITE VE ILISKILI TUM METABOLIK HASTALIKLARIN TEDAVISINDE BAZI PEPTIDLERIN KULLANILMASI Mevcut bulus, diyabet, obezite ve iliskli metabolik hastaliklarin tedavisinde E3 beta B chain, aryl-hydrocarbon-interacting-protein-like 1, Res-related protein Ral-B, STAM-binding protein, steroid hormone receptor ERR1, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, platelet glycoprotein lb beta chain, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta- hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1i Guanin deaminaz ve Alfa-l-asit glikoprotein peptidlerinin tek basina veya çoklu kombinasyonlar halinde veya bilinen antidiyabetik/antiobezitik ilaçlar ile birlikte kombine olarak kullanimi ile iliskilidir.

Bilinen Teknik Diyabet, pankreatik beta hücre sayisinin neredeyse tamamen (tip 1) yok olmasi veya büyük bir kisminin (tip 2) azalmasiyla karakterize edilen kronik bir hastaliktir. Dolayisi ile beta hücre kütlesinin kontrolü bu hastaligin anlasilabilmesi için kritik bir nokta olarak görülmektedir. Ancak, bu mekanizma halen tam olarak aydinlatilamamistir. Bireylerin dogdugunda sahip olduklari beta hücreleri genel olarak pankreatik progenitor hücrelerin çogalmasi ve farklilasmasi (neogenez) ile meydana gelmektedir. Dogumdan sonra, beta hücre neogenezi durur ve az sayida bölünme yetenegine sahip beta hücresinin çogalmasiyla artmis olan insülin ihtiyaci karsilanir. Düsük seviyeli çogalma kapasitesine sahip olan yetiskin beta hücreleri ileri doku hasarina karsi belirgin bir yenilenmeye imkan vermez. Bu nedenle, kronik olarak artmis olan metabolik gereksinimleri karsilamakta yetersiz kalan beta hücreleri zarar görür. Bu noktada adalarin içinde veya disinda yer alan progenitor hücreler beta hücre kütlesinin artirilmasinda önemli rol oynayabilir.

Ancak, bu hücrelerin farklilasabilmesi için uyarilmalari gerekmektedir.

Terapotik amaçlar için özellikle pankreatik adaciklarda yerlesen kök hücrelerin beta hücrelerine farklilasabilecegi goz Önünde bulundurulmalidir.

Kan glukozunun belirli seviyelerde tutulmasi pankreasin endokrin kismini olusturan Langerhans adaciginda konumlanan hücreler tarafindan kontrol edilir. Ada hücreleri kan glukoz konsantrasyonunu izleyerek yüksek veya düsük seviyeleri normale çekmek için hormon salgilar. Besin alimini takiben kari glukozu yükseldiginde beta hücreleri insülin salgilayarak kan glukozunu düsürür. Insülin, vücuttaki insüline duyarli hücreler tarafindan kandaki glukozun alinmasini uyarir ve glukoz karacigerde glikojene çevrilir. Diger bir deyisle, kan glukoz seviyelerinin kontrolü pankreatik beta hücrelerinde meydana gelen insülin sentezi ve saliniminin hizla degismesiyle saglanir (Kahn, 1996). Bu da hiç kuskusuz direkt olarak beta hücre kütlesi ile iliskilidir.

Glukoz ve hormonal etkilerle düzenlenen beta hücre replikasyonu, apoptotik eliminasyonu ve özel sartlarda progenitor hücrelerden kaynaklanan neogenez beta hücre kütlesini etkileyen faktörlerdir. Hücre kütlesindeki farkliliklar, gebelik, periferal dokularin insüline olan duyarliligi veya doku hasari gibi degisimler kan glukozunun kronik olarak yükselmesi ve ileri seviyelerde diyabete yol açabilir (Kahn, 1996; Mathis et al., 2001). Diyabet hastaliginin global artisi beta hücre sayisinin artirilmasi veya rejeneratif tip gibi yeni teropatik stratejilerin gelistirilmesini zorunlu kilmaktadir. Tip 1-2 diyabet için uygulanmakta olan terapiler arasinda yeralan ekzojen insülin veya hipoglisemik ajan uygulamalari tedavi edici olmadigindan ve diyabet ile iliskili ikincil komplikasyonlarin gelismesini engellemede yetersiz kaldigindan tatmin edici degildir (Nathan, 1993). Yeterli sayida pankreatik beta hücre transplantasyonunun kan glukoz seviyelerini normalize edebilecegi ve diyabetin komplikasyonlarini önleyebilecegi göz önünde bulundurulmalidir (Keymeulen et al.. 1998; Street et al, 2004). Ancak, kadavralarin pankreaslarindan elde edilen beta hücre sayisinin çok az olmasi ve immünolojik problemler transplantasyon yapilabilecek hasta sayisini kisitlamaktadir.

Uygun bir uyaran olmaksizin beta hücrelerinin rejenerasyon kapasitelerinin çok düsük oldugu bilinmektedir. Bu durum muhtemelen beta hücrelerinin kisitli replikasyon kapasitelerinin ve prekürsor hücrelerden neogenez ile beta hücre olusumunun sürekli aktif olmamasinin bir sonucudur. Ancak, uygun kuvvetli bir dis uyaran uygulandiginda belirli bir rejeneratif hücre artisi söz konusu olabilmektedir.

Kalorijenik besinler, özellikle glukoz ve esterlesmemis yag asitleri (NEFA), pankreatik beta hücre fonksiyonunun temel düzenleyicileridir (Prentki, 1996; Prentki et al., 2002). Beta hücrelerine kisa süreli yüksek konsantrasyonda glukoz uygulanmasi insülin salinimini ve biyosentezini arttirir (Prentki, 1996; Alarcon et al., 2002). Ancak, bu durum ayni zamanda kronik hiperglisemi ve insülin biyosentezinin azalmasi ile karakterize edilen beta hücre fonksiyonunda bozulmaya (Marshak et al,. 1999) ve apoptoza (glukotoksisite) neden olur (Fedrici et al., 2001). Benzer olarak, akut NEFA uygulamasi da beta hücrelerinden glukoz ile uyarilan insülin sekresyonunu arttirir (Warnotte et al., 1999), ancak uzun süre yüksek konsantrasyonda NEFA uygulamasi beta hücre apoptozunu tetikler (lipotoksisite) (Lupi et al., 2002). Arastiricilar yüksek konsantrasyonda glukoz ve NEFA'yi birlikte uygulayarak üzerine sinerjistik yikici bir etkiye sahip oldugunu göstermislerdir (Prentki et al., 2002). Besin alimindan sonra meydana gelen hiperglisemi ve devamli hiperglisemiye yüksek seviyelerde NEFA ve trigliserid eklenmesinin beta hücre apoptozunu arttirdigi ve beta hücre fonksiyonlarini bozdugu gösterilmistir (Prentki et al., 2002).

Hizla artan verilere göre beta hücrelerinin veya en azindan beta hücre benzeri hücrelerin farklilasmamis kök hücrelerden in vitro yöntemlerle meydana getirilebilecegi bilinmektedir. Bu bulgularin fizyolojik anlamliligi henüz tam olarak bilinmese de, farklilasabilen bu hücrelerin beta hücre kütlesinin geri kazandirilabilmesi için bir kaynak olarak kullanilmasiyla hücre terapisi uygulamalarinda kullanilabilme potansiyelleri açiktir.

K'ok hücreler klonijenik, kendini yenileyebilen, multipotent hücreler olarak tanimlanirlar ve kemik iligi, barsak, deri, beyin gibi birçok organda bulunurlar.

Ekzokrin kanallarin (Bonner-Weir et al., 2000) ve adalarin (Guz et al., 2001) postnatal pankreasta progenitor hücrelerinin kaynagi olabilecegi ileri sürülmüstür (Bouwens ve Kloppel, 1996). Bu olasilik çok uzun zaman önce ortaya atilmis olsa da sadece bir kac makale yetiskin pankreasta bulunan kök hücrelerin veya gerçek progenitor hücrelerin varligini destekler niteliktedir.

Yayinlanan çalismalardan bir tanesinde bu hücrelerin normal kemirgen pankreasindan izole edilebildigi ve uzun süreler boyunca alt kültürlerinin yapilabildigi ileri sürülmektedir. Ayrica, in vitro farklilastirma sartlarinda kendini yenileyebilen bu hücrelerin insulin üretebilen hücrelere degisebildigi ve transplante edildiklerinde diyabeti iyilestirebildigine dikkat çekilmektedir (Ramiya et al., 2000). Bu progenitör veya kök hücrelerin in vivo beta hücrelerinin yenilenmesi, sayica artmasi veya rejenerasyonunda rol alip almadigi bilinmemektedir. Ancak, bu tip hücrelerin pankreasta yer aldigi ve beta hücrelerinin in vitro üretilmesi için kullanilabilecegi gözardi edilmemelidir.

Diyabet gelisiminin biribirini izleyen 5 basamakta meydana geldigi belirlenmistir. Her bir basamak beta hücre kütlesi, fenotipi ve fonksiyonunda meydana gelen önemli degisikliklerle karakterize edilir. En iyi tanimlanmis olan basamak ilk asama olan ve kompenzasyon olarak adlandirilan basamaktir. Bu asamada normal glukoz seviyelerinin korunabilmesi için insülin sekresyonu artar ki bu tip degisiklik obezite, fiziksel inaktivite ve genetik yatkinliga bagli gelisen insülin direncinin bir bulgusudur. Ikinci basamakta açlik glukoz seviyeleri 5-6.5 mmol/L (89-116 mg/dL) degerlerine yükselir ki bu kararli bir beta hücre adaptasyonunun göstergesidir. Üçüncü basamak erken dekompenzasyonun degisken bir periyodudur ki bu asamadan sonra gelen 4. basamakta yükselmis olan glukoz seviyeleri kararlidir (dekompenzasyon). Son asama olan 5. basamak ise ileri derecede dekompenzasyon, beta hücre yetmezligi ve ketoz gelisimi ile karakterizedir (Weir and Bonner-Weir, 2004).

Diyabet gelisiminin ilk basamagi olan kompenzasyonun en 'Önemli bulgusu glikoz ile uyarilan insülin salinimindaki belirgin artistir. Insülin salnimindaki bu artisin nedeni süphesiz pankreatik beta hücre sayisinda meydana gelen artistir. Normalde pankreatik beta hücre sayisi hücre bölünmesi veya farklilasma sonucunda meydana gelen ve apoptotik hücre `ölümü yoluyla kaybedilen beta hücre sayisi arasindaki dengenin degismesi ile artar veya azalir. Diyabet gelisiminin ilk basamaginda meydana gelen pankreatik beta hücre sayisindaki artisin nedeni ve artan beta hücrelerinin kaynagi henüz tam olarak aydinlatilamamistir. Bu sorunun yaniti diyabetin gelismesinde merkezi rol oynadigi ileri sürülen pankreatik beta hücrelerinin sayica artirilarak hipergliseminin engellenmesi açisindan çok önemlidir. Yukarida ayrintili olarak bahsedildigi gibi pankreasta ß hücrelerini verebilecek potansiyel hücre kaynaklarindan birisi pankreatik mezenkimal k'ok hücreleridir.

Teknigin bilinen durumunda diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklarin ve genel olarak hücre ölümü ve farklilasmasi ile ilgili hastaliklarin tedavisinde çesitli proteinlerin kullanimina dair çalismalar yapilmistir. Tedavisi hedeflenen hastaliklarin çok çesitli olmasi ve hastaligin dogasi geregi karmasik bir yapiya sahip olmasi tedavide farkli moleküllerin kullanimini gerekli hale getirmektedir.

Bulusun Amaci Bulusun öncelikli amaci hücre ölümü ve farklilasmasi ile ilgili tüm hastaliklarin, ozellikle diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklarin tedavisinde yeni moleküllerin kullanilmasinin bnerilmesidir.

Bulusun bir diger amaci bu hastaliklarin tedavisinde kullanima uygun farmasötik bilesimler saglamaktir.

Bulusun Detayli Açiklamasi Mevcut bulus, hücre 'Ölümü ve farklilasmasi ile ilgili tüm hastaliklarin, tercihen diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklarin ve insülin ile iliskili tüm hastaliklarin veya neoplastik hastaliklarin tedavisinde; . E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, . UPF0361 protein C30rf37 homolog, . inhibin beta B chain, . aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, . Ras-related protein Ral-B, . STAM-binding protein, . steroid hormone receptor ERR1, . Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein . NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, - Platelet glycoprotein Ib beta chain, o bifunctional protein NCOAT, . aldolase B, 0 D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, o ATP synthase subunit b mitochondrial, o Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, . Guanin deaminaz ve Alfa-1-asit glikoprotein moleküllerinin veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNA'Iarini hedefleyen miRNA ve IncRNA”Iar gibi tüm RNA tiplerinin ilaç olarak kullanilmasi ile iliskilidir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “mRNA" ifadesi mesajci RNA'lari ifade etmektedir. mRNA molekülleri DNA'dan aldigi genetik bilgiyi ribozoma tasir.

Bulus kapsaminda kullanilan “mRNA” ve “mesajci RNA” ifadeleri ayni anlama gelmekte olup birbiri yerine kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “miRNA” ifadesi küçük ve kodlama yapmayan RNA molekülünü ifade etmektedir. Bu moleküller RNA sessizlestirilmesinde ve transkripsiyon sonrasi gen ekspresyonunun düzenlenmesinde kullanilabilir. “mikro RNA” ve “miRNA” ifadeleri ayni anlama gelmekte olup birbiri yerine kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan "IncRNA” ifadesi uzun kodlanmayan RNA'lari ifade etmektedir. Bu RNA'lar protein kodlamayan transkriptler olup 200 nükleotitten fazla uzunluga sahiptirler. Bulus kapsaminda "Inc RNA” ve kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “diyabet” ifadesi tip I diyabet, tip II diyabeti ifade etmektedir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “diyabet ve obezite iliskili metabolik hastaliklar” ifadesi Iaktoz intoleransi, früktoz intoleransi, galaktozemi, glikoien depolama hastaligi, insülin direnci sendromu, sendrom Xii ifade etmektedir.

Ayrica, diyabet ve obezite ile iliskili olarak ortaya çikan hastaliklar retinopati, norOpati, nefropati, ayak ülerleri, hipertansiyon, hiperlipidemi, metabolik sendrom, safra kesesi hastaliklari, bazi kanser türleri, osteoartirit, kalp ve damar hastaliklari, felç, uyku apnesi, karaciger hastalagi, astim, solunum zorlugu, menstruasyon düzensizlikleri, kas-iskelet sistemi problemleri, cilt hastaliklari, polikistik over sendromu, immün sistem bozukluklari gibi çesitli hastaliklar olabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “neoplastik hastaliklar” ifadesi habis (malign) tüm'orlere veya kontrolsüz hücre büyümesi ile karakterize olan bir fizyolojik duruma, örnegin kanser hastaligina isaret eder. Bulus kapsaminda kullanilabilir. Kanser ornekleri karsinoma, Ienfoma, blastoma sarkoma ve l'osemiyi içermekte olup bunlarla sinirli degildir.

Karsinoma, burada kullanildigi sekliyle, epitel hücrelerden olusan bir kanser türünü ifade etmektedir.

Lenfoma, burada kullanildigi sekliyle, lenfositlerden gelisen bir kanser türünü anlatmaktadir.

Blastoma, burada kullanildigi sekliyle, blast hücre adiyla da bilinen öncü hücrelerden gelisen bir kanser türünü anlatmaktadir.

Sarkoma, burada kullanildigi sekliyle, mezenkimal kökenli degismis hücrelerden kaynaklanan kanser türünü anlatmaktadir.

Lösemi, burada kullanildigi sekliyle, kemik iliginde baslayan ve yüksek sayida anormal akyuvar hücresi olusumuna neden olan kanser türünü ifade etmektedir.

Kanser türlerine ait daha özel örnekler meme kanseri, prostat kanseri, kolorektal kanser, deri kanseri, küçük hücreli akciger kanseri, küçük hücreli olmayan akciger kanseri, mezotelyom, gastrointestinal kanser, pankreas kanseri, gliyoblastom, vulva kanseri, rahim agzi kanseri, endometriyal karsinom, yumurtalik kanseri, karaciger kanseri, hepatom, mesane kanseri, böbrek kanseri, tükürük bezi karsinomu, tiroid kanseri ve çesitli bas ve boyun kanserlerini içerir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181 adli molekül 153 aminoasitten olusan peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler ES ubiquitin- protein Iigase RNF181'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181”in metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181'in amino asit dizisi: MASYFDEHDCEPSDPEQETRTNMLLELARSLFNRMDFEDLGLVVDWDHHL PPPAAKTVVENLPRTVlRGSQAELKCPVCLLEFEEEETAIEMPCHHLFHSSCI LPWLSKTNSCPLCRYELPTDDDTYEEHRRDKARKQQQQHRLENLHGAMYT (SEO ID No:1) olup, 17,909 Da agirligindadir.

E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, E2 ubikuitin-konjuge enzimden ubiquitin alir ve hedef proteine aktarir. Hücre proliferasyonu ile iliskilidir. Embriyonik kök hücrelerde Trim 25 ve Trim71 adinda RNA”ya baglanan ES ubiquitin- protein ligazlarin farklilasma ile birlikte düstügü tespit edilmistir (Kwon et al., 2013). Ayrica folikuler helper T hücrelerinin farklilasmasi için de E3 ubiquitin- protein Iigazin gerekli oldugu gösterilmistir (Xiao et al., 2014).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda E3 ubiquitin-protein ligase RNF181 kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle ES ubiquitin-protein ligase RNF181'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda ES ubiquitin- protein ligase RNF181 molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. ES ubiquitin-protein ligase olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan UPF0361 protein CSorfST homolog adli molekül 232 aminoasitten olusan peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler UPF0361 protein CSorf37 homolog”un kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden elde edilmis veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. UPF0361 protein C30rf37 homolog'un soluncanlardaki amino asit dizisi: MVSSDVYGRDRMTKSGSHMSVLLVQMEWGLELSWGGSQHDRQIINARAE SVLSKPLFKESMRRGRRCAlLTQGFYEWRKSTSGKQPYFIYMPDDDEDSKS ACSVECDSKLMPLAGLYFPKKDKSPAYTSVIITVDSSPGlEFlHDRMPAILDT DEAVLNWLDCGQFQSDEVVKYLRPYASLRYHAVSTRVNHSAYDDAENIQPI DDSKLSGEKRKSQPPLESFFSPKKEKLK'dir (SEQ lD NO: 2) ve 26,421 Da agirligindadir.

UPF0361 protein C30rf37 homolog, RNA baglayan proteinler sinifinda yer almaktadir ve embriyonik kök hücrelerde üretildigi tespit edilmistir (Kwon et al., 2013). Bu protein k'ok hücrelerde, spesifik olarak 5-hydroxymethylcytosine (5hmC) içeren DNA bölgelerine baglanir. Bu noktada fonksiyonu tam olarak belirlenememis olmakla birlikte UPF0361 protein C30rf37 homologunun bir peptidaz olablecegi düsünülmektedir (Aravind et al., 2013).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda UPF0361 protein C30rf37 homolog kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle UPF0361 protein CSorf37 homolog'un tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda UPF0361 protein C30rf37 homolog molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. UPF0361 protein CSorfS? homolog, HMCES ismiyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Burada kullanilan inhibin beta B ohain adli molekül 407 aminoasitten olusan peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler inhibin beta B chain'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Inhibin beta B chain7in amino asit dizisi: MDGLPGRALGAACLLLLAAGWLGPEAWGSPTPPPTPAAPPPPPPPGSPGG SQDTCTSCGGFRRPEELGRVDGDFLEAVKRHILSRLQMRGRPNITHAVPKA AMVTALRKLHAGKVREDGRVEIPHLDGHASPGADGQERVSEIISFAETDGL ASSRVRLYFFlSNEGNQNLFVVQASLWLYLKLLPYVLEKGSRRKVRVKVYF QEQGHGDRWNMVEKRVDLKRSGWHTFPLTEAIQALFERGERRLNLDVQC DSCQELAVVPVFVDPGEESHRPFVVVQARLGDSRHRIRKRGLECDGRTNL CCRQQFFlDFRLlGWNDWIlAPTGYYGNYCEGSCPAYLAGVPGSASSFHTA VVNQYRMRGLNPGTVNSCClPTKLSTMSMLYFDDEYNIVKRDVPNMlVEEC GCA (SEQ ID NO: 3) olup molekül 45,122 Da agirligindadir.

Inhibinler hipofiz bezinden follitropin salgilanmasini inhibe ederler. Inhibinler hipotalamik ve hipofiz hormon salgilamasi, gonadal hormon sekresyonu, germ hücre gelisimi ve olgunlasmasi, eritroid farklilasmasi, insülin salgilanmasi, sinir hücresi hayatta kalmasi, embriyonik eksenel gelisimi ya da kemik büyümesine bagli olarak çesitli fonksiyonlarin düzenlenmesinde rol oynarlar. Gonadal ve çesitli ekstragonadal dokularda ekspresyonu dokuya özel bir tarzda birkaç kat degisiklik gösterebileceginden, inhibin, bir büyüme/farklilasma faktörü ve bir hormon olarak bnerilmistir. Hepatositlerde, adipositlerde, hematopoietik hücrelerde, dalakta, böbrekte ve birçok diger organlarda bulunan ve hücre proliferasyonu, hücre büyümesi ve farklilasmasinin kontrolü gibi hücre cevaplarinda rol oynayan transkripsiyon faktörlerinin bir ailesi olan “CCAAT-artirici-baglayici proteinler'”in mRNA sentezi Inhibin beta7nin tek basina ya da BTC ile birlikte AR42J-B13 hücrelerine uygulandiginda muamele edilmeyen hücrelere göre 3 kat baskilanmis oldugu gösterilmistir (Palgi ve dig., 2000).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda inhibin beta B chain kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle inhibin beta B chain'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Inhibin beta B chain, Inhbb, inhibin beta-2; activin AB beta polypeptide; inhibin beta B subunit; isimleriyle de taninabilmektedir. Bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1 adli molekülün alternatif splicing sonucu olusabilen 5 izoformu tanimlanmistir, söz konusu izoformlarin hepsi bulus kapsamindadir. Bu molekülün 1. izotormu 384 aminoasitten olusmakta olup aminoasit dizisi: MDAALLLNVEGVKKTlLHGGTGELPNFITGSRVlFHFRTMKCDEERTVlDDSR QVGQPMHIIIGNMFKLEVWEILLTSMRVHEVAEFWCDTIHTGVYPILSRSLRO MAQGKDPTEWHVHTCGLANMFAYHTLGYEDLDELQKEPQPLVFVIELLQV DAPSDYQRETWNLSNHEKMKAVPVLHGEGNRLFKLGRYEEASSKYQEAIlC LRNLQTKEKPWEVQWLKLEKMINTLILNYCQCLLKKEEYYEVLEHTSDILRH HPGlVKAYYVRARAHAEVWNEAEAKADLQKVLELEPSMQKAVRRELRLLEN RMAEKQEEERLRCRNMLSQGATQPPAEPPTEPPAQSSTEPPAEPPTAPSA ELSAGPPAEPATEPPPSPGHSLQH (SEQ ID No:4) olarak belirlenmistir ve molekül 43,903 Da agirligindadir. Molekülün 2. Izoformu ise 324 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MDAALLLNVEGVKKTILHGGTGELPNFITGSRHTGVYPILSRSLRQMAQGKD PTEWHVHTCGLANMFAYHTLGYEDLDELQKEPQPLVFVlELLQVDAPSDYQ RETWNLSNHEKMKAVPVLHGEGNRLFKLGRYEEASSKYQEAIlCLRNLQTK EKPWEVQWLKLEKMlNTLILNYCQCLLKKEEYYEVLEHTSDlLRHHPGlVKAY YVRARAHAEVWNEAEAKADLQKVLELEPSMQKAVRRELRLLENRMAEKQE EERLRCRNMLSQGATQPPAEPPTEPPAQSSTEPPAEPPTAPSAELSAGPP AEPATEPPPSPGHSLQH (SEQ ID No:5) olarak belirlenmistir ve molekül 36,726 Da agirligindadir. 3. Izoformu 321 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MDAALLLNVEGVKKTlLHGGTGELPNFITGSRVlFHFRTMKCDEERTVlDDSR QVGQPMHIIIGNMFKLEVWEILLTSMRVHEVAEFWCDTIVDAPSDYQRETW NLSNHEKMKAVPVLHGEGNRLFKLGRYEEASSKYQEAIlCLRNLQTKEKPW EVQWLKLEKMINTLILNYCQCLLKKEEYYEVLEHTSDILRHHPGIVKAYYVRA RAHAEVWNEAEAKADLQKVLELEPSMQKAVRRELRLLENRMAEKQEEERL RCRNMLSQGATQPPAEPPTEPPAQSSTEPPAEPPTAPSAELSAGPPAEPA TEPPPSPGHSLQH (SEO lD No:6) olarak belirlenmistir ve molekül 36,655 Da agirligindadir. 4. Izoformu 362 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit MDAALLLNVEGVKKTILHGGTGELPNFITGSRVGQPMHIIIGNMFKLEVWEIL LTSMRVHEVAEFWCDTlHTGVYPlLSRSLRQMAQGKDPTEWHVHTCGLAN MFAYHTLGYEDLDELQKEPQPLVFVIELLQVDAPSDYQRETWNLSNHEKMK AVPVLHGEGNRLFKLGRYEEASSKYQEAIICLRNLQTKEKPWEVQWLKLEK MlNTLILNYCQCLLKKEEYYEVLEHTSDILRHHPGIVKAYYVRARAHAEVWNE AEAKADLQKVLELEPSMQKAVRRELRLLENRMAEKQEEERLRCRNMLSQG ATQPPAEPPTEPPAQSSTEPPAEPPTAPSAELSAGPPAEPATEPPPSPGHS LQH (SEQ lD No:7) olarak belirlenmistir ve molekül 41,195 Da agirligindadir.

. Izoformu 360 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi:MDAALLLNVEGVKKTlLHGGTGELPNFITGSRVIFHFRTMKCDEERTVI DDSRQVGQPMHIllGNMFKLEVWEILLTSMRVHEVAEFWCDTIHTGVYPILS RSLRQMAQGKDPTEWHVHTCGLANMFAYHTLGYEDLDELQKEPQPLVFVI ELLQVDAPSDYQRETWNLSNHEKMKAVPVLHGEGNRLFKLGRYEEASSKY QEAIICLRNLQTKCLLKKEEYYEVLEHTSDILRHHPGIVKAYYVRARAHAEVW NEAEAKADLQKVLELEPSMQKAVRRELRLLENRMAEKQEEERLRCRNMLS QGATQPPAEPPTEPPAQSSTEPPAEPPTAPSAELSAGPPAEPATEPPPSPG HSLQH (SEQ ID No:8) olarak belirlenmistir ve molekül 40,901 Da agirligindadir. Buradaki kullanim bu molekülün teknikte bilinen tüm izoformlarini, türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Aryl-hydrocarbon-interacting-protein-like 1'in protein tasinmasi ve/veya protein katlanmasinda önemli olabilecegi ileri sürülmüstür. Aryl hydrocarbon reseptorü hasarinin fareleri diyet ile uyarilan adipositeden korudugu ve enerji harcanmasini uyardigi belirtilmistir (Xu et al., 2015).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda aryI-hydrocarbon-interacting- protein-like 1 kullanimina iliskin olarak ifade edilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle aryl- hydrocarbon-interacting-protein-like 1'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan Ras-related protein RaI-B adli peptit, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Ras-related protein Ral-B'nin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Burada kullanilan Res-related protein RaI-B adli molekülün alternatif splicing sonucu olusabilen 3 izoformu tanimlanmistir ve söz konusu izoformlarin hepsi mevcut bulusun kapsamina dahildir. 1. izoformu 206 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MAANKSKGQSSLALHKVIMVGSGGVGKSALTLQFMYDEFVEDYEPTKADS YRKKVVLDGEEVQIDILDTAGQEDYAAIRDNYFRSGEGFLLVFSITEHESFTA TAEFREQILRVKAEEDKlPLLVVGNKSDLEERRQVPVEEARSKAEEWGVQY VETSAKTRANVDKVFFDLMRElRTKKMSENKDKNGKKSSKNKKSFKERCCL L (SEQ ID No:9) olarak belirlenmistir ve molekül 23,409 Da agirligindadir. 2.

Izoformu 228 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MKQRQSALQWVICVSQPQKTSEMAANKSKGQSSLALHKVIMVGSGGVGKS ALTLQFMYDEFVEDYEPTKADSYRKKVVLDGEEVQIDlLDTAGQEDYAAlRD NYFRSGEGFLLVFSITEHESFTATAEFREQILRVKAEEDKlPLLVVGNKSDLE ERRQVPVEEARSKAEEWGVQYVETSAKTRANVDKVFFDLMREIRTKKMSE NKDKNGKKSSKNKKSFKERCCLL (SEQ lD NO:10) olarak belirlenmistir ve molekül 25,967 Da agirligindadir. 3. Izoformu 227 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MAANKSKGQSSLALHKVIMVGSGGVGKSALTLQFMNVSKSLAYDKKKYTA NKKVEGILEFVEDYEPTKADSYRKKVVLDGEEVQIDILDTAGQEDYAAIRDN YFRSGEGFLLVFSITEHESFTATAEFREQlLRVKAEEDKIPLLVVGNKSDLEE RRQVPVEEARSKAEEWGVQYVETSAKTRANVDKVFFDLMREIRTKKMSEN KDKNGKKSSKNKKSFKERCCLL (SEO lD NO:11) olarak belirlenmistir ve molekül 25,710 Da agirligindadir. Buradaki kullanim bu molekülün teknikte bilinen tüm izoformlarini, türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Ras-related protein RaI-B'nin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Ras-related protein RaI-B farkli efektbrlere ile etkileserek birden fazla islevi yerine getirebilmektedir. Yogun veziküllerin GTP bagimli ekzositozu için bir GTP sensörü gibi davranir. Hem ekzokist kompleksinin kurulmasi ve stabilizasyonu için hem de fonksiyonel ekzokist komplekslerini göç eden hücrelerin on kenarina lokalize etmek için gereklidir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Res-related protein Ral-B kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Ras-related protein Ral- B'nin tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Res-related protein Ral-B; GTP binding protein; RAS-Iike protein B; v-ral simian Ieukemia viral oncogene homolog B; v-ral simian leukemia viral oncogene homolog B (ras related; GTP binding protein) isimleriyle de taninabilmektedir. Mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim STAM-binding protein adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler STAM-binding protein”nin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Burada kullanilan STAM-binding protein adli molekülün alternatif splicing sonucu olusabilen 2 izoformu tanimlanmistir ve söz konusu izoformlarin hepsi mevcut bulusun kapsamina dahildir. 1. izoformu 424 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MSDHGDVSLPPEDRVRALSQLGSAVEVNEDlPPRRYFRSGVEIIRMASlYSE EGNlEHAFILYNKYlTLFIEKLPKHRDYKSAVIPEKKDTVKKLKEIAFPKAEELK AELLKRYTKEYTEYNEEKKKEAEELARNMAlQQELEKEKQRVAQQKQQQLE QEQFHAFEEMIRNQELEKERLKIVQEFGKVDPGLGGPLVPDLEKPSLDVFPT LTVSSIQPSDCHTTVRPAKPPVVDRSLKPGALSNSESIPTIDGLRHVVVPGR LCPQFLQLASANTARGVETCGILCGKLMRNEFTlTHVLIPKQSAGSDYCNTE NEEELFLlQDQQGLITLGWlHTHPTQTAFLSSVDLHTHCSYQMMLPESVAIV CSPKFQETGFFKLTDHGLEEISSCRQKGFHPHSKDPPLFCSCSHVTVVDRA VTITDLR (SEQ ID NO:12) olarak belirlenmistir ve molekül 48,077 Da agirligindadir. 2. Izoformu 348 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi: MSDHGDVSLPPEDRVRALSQLGSAVEVNEDIPPRRYFRSGVEIIRMASIYSE EGNlEHAFILYNKYlTLFIEKLPKHRDYKSAVIPEKKDTVKKLKEIAFPKAEELK AELLKRYTKEYTEYNEEKKKEAEELARNMAlQQELEKEKQRVAQQKQQQLE QEQFHAFEEMIRNQELEKERLKIVQEFGKVDPGLGGPLVPDLEKPSLDVFPT LTVSSIQPSDCHTTVRPAKPPVVDRSLKPGALSNSESIPTIDGLRHVVVPGR LCPQFLQLASANTARGVETCGILCGKLMRNEFTlTHVLIPKQSAGSDYCNTE NEEELFLlQDQQGLITLGWlHVETLWSLKSLHAP (SEO lD NO:13) olarak belirlenmistir ve molekül 39,596 Da agirligindadir.

STAM-binding protein; 'Lysö3' baglanmis poliübikütin Zincirlerini spesifik olarak ayristiran bir çinko metaloproteazdir. SMADG ve SMADT'nin önleyici etkisini antagonize ederek BMP (kemik morfojenik protein) sinyalini güçlendirir. Hücre yüzey reseptörü aracili endositozda anahtar bir role sahiptir. STAMP'nin endosomal Iokalizasyonu EGFR degradasyonu için gereklidir. Pl3K-AKT-mTOR ve RAS-MAP sinyal yollarinin negatif düzenleyicisidir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda STAM-binding protein'in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle STAM-binding protein”in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. STAM-binding 5730422L11Rik, MlCCAP, Stambp, STAMBP isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim steroid hormon reseptorü ERR1 adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler steroid hormon reseptorü ERR1'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Burada kullanilan steroid hormon reseptorü ERR1 adli molekülün alternatif kesilme sonucu olusabilen 2 izoformu tanimlanmistir. 1. izoformu 423 aminoasitten olusmakta olup, aminoasit dizisi MSSQVVGIEPLYIKAEPASPDSPKGSSETETEPPVALAPGPAPTRCLPGHKE EEDGEGAGPGEQGGGKLVLSSLPKRLCLVCGDVASGYHYGVASCEACKAF FKRTIQGSIEYSCPASNECEITKRRRKACQACRFTKCLRVGMLKEGVRLDR VRGGRQKYKRRPEVDPLPFPGPFPAGPLAVAGGPRKTAAPVNALVSHLLV VEPEKLYAMPDPAGPDGHLPAVATLCDLFDREIVVTlSWAKSlPGFSSLSLS DQMSVLQSVWMEVLVLGVAQRSLPLQDELAFAEDLVLDEEGARAAGLGEL GAALLQLVRRLQALRLEREEYVLLKALALANSDSVHIEDAEAVEQLREALHE ALLEYEAGRAGPGGGAERRRAGRLLLTLPLLRQTAGKVLAHFYGVKLEGKV PMHKLFLEMLEAMMD (SEQ lD NO:14) olarka belirlenmistir ve molekül 45.510 Da agirligindadir. Ikinci izoform 422 amino asitten meydana gelir ve amonoasit dizisi MSSQVVGlEPLYIKAEPASPDSPKGSSETETEPPVALAPGPAPTRCLPGHKE EEDGEGAGPGEQGGGKLVLSSLPKRLCLVCGDVASGYHYGVASCEACKAF FKRTIQGSIEYSCPASNECEITKRRRKACQACRFTKCLRVGMLKEGVRLDR VRGGRQKYKRRPEVDPLPFPGPFPAGPLAVAGGPRKTAPVNALVSLLWE PEKLYAMPDPAGPDGHLPAVATLCDLFDRElVVTlSWAKSlPGFSSLSLSDQ MSVLQSVWMEVLVLGVAQRSLPLQDELAFAEDLVLDEEGARAAGLGELGA ALLQLVRRLOALRLEREEYVLLKALALANSDSVHIEDAEAVEQLREALHEALL EYEAGRAGPGGGAERRRAGRLLLTLPLLRQTAGKVLAHFYGVKLEGKVPM HKLFLEMLEAMMD (SEQ lD NO:15) seklindedir ve molekül 45.439 kDa agirligindadir. Söz konusu ERR1 proteini, 'Östrojen reseptörü ile yakin iliskili bir nuklear reseptördür. DNA üzerindeki belirli bir diziye spesifik olarak transkripsiyon regülatbrü olarak fonksiyon yapar. Bilindigi üzere pankreatik beta hücreleri dogum sonrasinda olgunlasma gibi süreçlerde maksimum glukoza duyarli insülin salgilanmasini saglayabilmek için yogun enerjiye gereksinim duyarlar.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda steroid hormon reseptor'u ERR1 kullanimina iliskin olarak ifade edilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle steroid hormon reseptor'ü ERR1”in t'iLim türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekül'ün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Steroid hormon reseptor'ü ERR1'in sinonimleri Estrogen receptor-like 1, Estrogen-related receptor alpha (Kisa ismi ERR alpha), Nuklear reseptor alt aile 3 grup B üye 1'dir ve mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki diger bir kullanim kullanim Beyine spesifik anjiogenez inhibitör'u 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1 adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Beyine spesifik anjiogenez inhibitörü 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden elde edilmis veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir.

Burada kullanilan beyin-spesifik angiogenez inhibitör 1-iliskili protein 2- benzeri protein 1, 511 amino asitten olusmaktadir ve amino asit dizisi: MSRGPEEVNRLTESTYRNVMEQFNPGLRNLlNLGKNYEKAVNAMILAGKAY YDGVAKlGElATGSPVSTELGHVLIEISSTHKKLNESLDENFKKFHKEIIHELEK KlELDVKYMNATLKRYQTEHKNKLESLEKSQAELKKIRRKSQGSRNALKYEH KElEYVETVTSRQSEIQKFIADGCKEALLEEKRRFCFLVDKHCGFANHIHYYH LQSAELLNSKLPRWQETCVDAIKVPEKIMNMlEElKTPASTPVSGTPQASPMI ERSNVVRKDYDTLSKCSPKMPPAPSGRAYTSPLIDMFNNPATAAPNSQRV NNSTGTSEDPSLQRSVSVATGLNMMKKQKVKTIFPHTAGSNKTLLSFAQGD VlTLLIPEEKDGWLYGEHDVSKARGWFPSSYTKLLEENETEAVTVPTPSPTP VRSlSTVNLSENSSVVIPPPDYLECLSMGAAADRRADSARTTSTFKAPASKP ETAAPNDANGTAKPPFLSGENPFATVKLRPTVTNDRSAPIIR (SEQ ID NO:16) olarak belirlenmistir. Beyine spesifik anjiogenez inhibitör'u 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1 adaptör protein olarak fonksiyon yapabilir. Aktin demet yiginlarinin olusumu ile iliskili olup, bakteri enfeksiyonuna cevaben aktin hücre iskeletinin yeniden organize olmasinda rol oynamaktadir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Beyine spesifik anjiogenez inhibitorü 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1 kullanimina iliskin olarak ifade edilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir.

Bir baska deyisle Beyine spesifik anjiogenez inhibitörü 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir Beyine spesifik anjiogenez inhibitorü 1 ile iliskili protein 2 benzeri protein 1'in kisa ismi, BAl1-iliskili protein 2-benzeri protein 1'dir ve alternatif ismi insulin reseptor tirozin kinaz substrattir mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6 adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6adli peptidin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Burada kullanilan Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6 peptidi 124 amino asitten olusmaktadir ve amino asit dizisi MAAAMTFCRLLNRCGEAARSLPLGARCFGVRVSPTGEKVTHTGQVYDDKD YRRIRFVGRQKEVNENFAIDLIAEQPVSEVETRVIACDGGGGALGHPKVYIN LDKETKTGTCGYCGLQFRQHHH (SEO lD NO:17) seklindedir. Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6 peptidi katalizle iliskili olmadigi düsünülen mitokondrial membran solunum zinciri NADH dehidrogenaz (Kompleks 1),in yardimci altünitesidir. Kompleks ilin görevi elektronlari NADH'tan solunum zincirine aktarmaktir. Bu enzim için acil elektron kabül edici molekül ubiquinondur.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6 peptidi kullanimina iliskin olarak bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Mitokondriyal NADH dehidrogenaz (ubiquinon) demir-sülfür protein 6 peptidinin tüm türevleri ve sinonimleri de bu molekülün endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm bu bulus kapsaminda hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir.

Buradaki kullanim platelet glycoprotein lb beta chain adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler platelet glycoprotein lb beta chain adli peptidin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Burada kullanilan platelet glycoprotein Ib beta chain peptidin alternatif splicing ile meydana gelen 2 izoformu mevcuttur.

Birinci izoform 206 amino asitten olusmaktadir ve amino asit dizisi MGSGPRGALSLLLLLLAPPSRPAAGCPAPCSCAGTLVDCGRRGLTWASLP TAFPVDTTELVLTGNNLTALPPGLLDALPALRTAHLGANPWRCDCRLVPLRA WLAGRPERAPYRDLRCVAPPALRGRLLPYLAEDELRAACAPGPLCWGALA AQLALLGLGLLHALLLVLLLCRLRRLRARARARAAARLSLTDPLVAERAGTD ES (SEO lD NO:18) seklinde olup molekül agirligi 21,718 Da'dur. ikinci izoform 411 amino asitten olusmaktadir ve amino asit dizisi MlPSRHTMLRFLPVVNAASCPGDRRTMLVNVAAGVRVLRVPLRAGGSGSL SGLRPPAIVCYLPLQRASAASGLFLARPQHCGRCGRGRGGAALSLGSPAY ASRCRVSRAAVFSPWAPVSLESGRAPGCSLGRPGLRGALVVWLQLGETW VRLRGDFQPACGVVRVERLAGYRDAGHQGLDGAGPAVWVLRDVAQVPAD RSAYCGASLAGPRGALSLLLLLLAPPSRPAAGCPAPCSCAGTLVDCGRRGL TWASLPTAFPVDTTELVLTGNNLTALPPGLLDALPALRTAHLGANPWRCDC RLVPLRAWLAGRPERAPYRDLRCVAPPALRGRLLPYLAEDELRAACAPGPL CWGALAAQLALLGLGLLHALLLVLLLCRLRRLRARARARAAARLSLTDPLVA ERAGTDES (SEO ID NO:19) seklinde olup molekül agirligi 43,158 Da'dur.

Trombositlerin yüzey membran proteini olan Gp-lb, subendotele bagli olan von Willebrand faktörüne baglanarak trombosit tikaçlarinin olusumuna katilir.

Ayrica, transmembran reseptör aktivitesine sahiptir. Hücre adezyonu ve platelet aktivasyonu da bilinen fonksiyonlari arasindadir. Obez bireylerin kan mononuklear hücrelerinde platelet glycoprotein lb beta chain isoform 2”nin azaldigi tespit edilmistir (Abu-Farha et al., 2013).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda platelet glycoprotein Ib beta chain peptidi kullanimina iliskin olarak bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bahsedilen sinonimler glycoprotein Ib (platelet), beta polypeptide, Antigen CD42b-beta; CD_antigen: CD420 olup kisaltmalari BS; GPlBB; BDPLT1 olup bu isimler mevcut bulus kapsaminda birbiri yerine kullanilabilir. Platelet glycoprotein lb beta chain peptidinin tüm türevleri ve sinonimleri bu molekül'un endike oldugu veya olabilecegi belirtilen tüm bu bulus kapsaminda hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir.

Buradaki kullanim Nuklear sitoplazmik O-GIcNAcase ve asetiltransferaz (NCOAT) adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler NCOAT'un kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküller veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Burada kullanilan NCOAT adli molekül'un alternatif kesilme sonucu olusabilen 4 izoformu tanimlanmistir. 1. izoformu 916 amino asitten olusmaktadir, amino asit dizisi MVQKESQATLEERESELSSNPAASAGASLEPPAAPAPGEDNPAGAGGAAV AGAAGGARRFLCGVVEGFYGRPWVMEQRKELFRRLQKWELNTYLYAPKD DYKHRMFWREMYSVEEAEQLMTLISAAREYEIEFlYAlSPGLDITFSNPKEVS TLKRKLDQVSQFGCRSFALLFDDlDHNMCAADKEVFSSFAHAQVSITNEIYQ YLGEPETFLFCPTEYCGTFCYPNVSQSPYLRTVGEKLLPGIEVLWTGPKVVS KElPVESIEEVSKIIKRAPVIWDNlHANDYDQKRLFLGPYKGRSTELIPRLKGV LTNPNCEFEANYVAlHTLATWYKSNMNGVRKDVVMTDSEDSTVSIQlKLENE GSDEDlETDVLYSPQMALKLALTEWLQEFGVPHQYSSRQVAHSGAKASVV DGTPLVAAPSLNATTVVTTVYQEPIMSQGAALSGEPTTLTKEEEKKQPDEEP MDMWEKQEETDHKNDNQlLSEIVEAKMAEELKPMDTDKESIAESKSPEMS MQEDCISDlAPMQTDEQTNKEQFVPGPNEKPLYTAEPVTLEDLQLLADLFYL PYEHGPKGAQMLREFQWLRANSSVVSVNCKGKDSEKIEEWRSRAAKFEE MCGLVMGMFTRLSNCANRTILYDMYSYVWDIKSlMSMVKSFVQWLGCRSH SSAQFLlGDQEPWAFRGGLAGEFQRLLPIDGANDLFFQPPPLTPTSKVYTIR PYFPKDEASVYKICREMYDDGVGLPFQSQPDLIGDKLVGGLLSLSLDYCFVL EDEDGlCGYALGTVDVTPFlKKCKlSWIPFMQEKYTKPNGDKELSEAEKIMLS FHEEQEVLPETFLANFPSLIKMDIHKKVTDPSVAKSMMACLLSSLKANGSRG AFCEVRPDDKRlLEFYSKLGCFEIAKMEGFPKDVVlLGRSL (SEO lD NO:20) seklindedir. 2. izoformu 849 amino asitten olusmaktadir, amino asit dizisi MVQKESQATLEERESELSSNPAASAGASLEPPAAPAPGEDNPAGAGGAAV AGAAGGARRFLCGVVEGFYGRPWVMEQRKELFRRLQKWELNTYLYAPKD DYKHRMFWREMYSVEEAEQLMTLISAAREYEIEFlYAlSPGLDITFSNPKEVS TLKRKLDQVSQFGCRSFALLFDDlDHNMCAADKEVFSSFAHAQVSITNEIYQ YLGEPETFLFCPTEYCGTFCYPNVSQSPYLRTVGEKLLPGIEVLWTGPKVVS KElPVESIEEVSKIIKRAPVIWDNlHANDYDQKRLFLGPYKGRSTELIPRLKGV LTNPNCEFEANYVAlHTLATWYKSNMNGVRKDVVMSRQVAHSGAKASVVD GTPLVAAPSLNATTVVTTVYQEPIMSQGAALSGEPTTLTKEEEKKQPDEEP MDMVVEKQEETDHKNDNQILSEIVEAKMAEELKPMDTDKESIAESKSPEMS MQEDCISDlAPMQTDEQTNKEQFVPGPNEKPLYTAEPVTLEDLQLLADLFYL PYEHGPKGAOMLREFQWLRANSSVVSVNCKGKDSEKIEEWRSRAAKFEE MCGLVMGMFTRLSNCANRTILYDMYSYVWDIKSlMSMVKSFVQWLGCRSH SSAQFLlGDQEPWAFRGGLAGEFQPPPLTPTSKVYTIRPYFPKDEASVYKIC REMYDDGVGLPFQSQPDLIGDKLVGGLLSLSLDYCFVLEDEDGICGYALGT VDVTPFlKKCKlSWIPFMQEKYTKPNGDKELSEAEKIMLSFHEEQEVLPETFL ANFPSLIKMDIHKKVTDPSVAKSMMACLLSSLKANGSRGAFCEVRPDDKRIL EFYSKLGCFEIAKMEGFPKDVVlLGRSL (SEO ID NO:21) seklindedir. 3. izoformu 677 amino asitten olusmaktadir, amino asit dizisi: MVQKESQATLEERESELSSNPAASAGASLEPPAAPAPGEDNPAGAGGAAV AGAAGGARRFLCGVVEGFYGRPWVMEQRKELFRRLQKWELNTYLYAPKD DYKHRMFWREMYSVEEAEQLMTLISAAREYEIEFIYAlSPGLDITFSNPKEVS TLKRKLDQVSQFGCRSFALLFDDlDHNMCAADKEVFSSFAHAQVSITNEIYQ YLGEPETFLFCPTEYCGTFCYPNVSQSPYLRTVGEKLLPGIEVLWTGPKVVS KElPVESIEEVSKIIKRAPVIWDNlHANDYDQKRLFLGPYKGRSTELIPRLKGV LTNPNCEFEANYVAlHTLATWYKSNMNGVRKDVVMTDSEDSTVSIQlKLENE GSDEDlETDVLYSPQMALKLALTEWLQEFGVPHQYSSRQVAHSGAKASVV DGTPLVAAPSLNATTVVTTVYQEPIMSQGAALSGEPTTLTKEEEKKQPDEEP MDMVVEKQEETDHKNDNQILSEIVEAKMAEELKPMDTDKESIAESKSPEMS MQEDCISDlAPMQTDEQTNKEQFVPGPNEKPLYTAEPVTLEDLQLLADLFYL PYEHGPKGAQMLREFQWLRANSSVVSVNCKGKDSEKIEEWRSRAAKFEE MCGLVIVIGMFTRLSNCANRTILYDMYSYVWDIKSIMSMVKSFVQWLGRCTR NNLFSSNlLS (SEO lD NO:22) seklindedir. 4. izoformu 863 amino asitten olusmaktadir, amino asit dizisi: MVQKESQATLEERESELSSNPAASAGASLEPPAAPAPGEDNPAGAGGAAV AGAAGGARRFLCGVVEGFYGRPWVMEQRKELFRRLQKWELNTYLYAPKD DYKHRMFWREMYSVEEAEQLMTLISAAREYEIEFlYAlSPGLDITFSNPKEVS TLKRKLDQVSQFGCRSFALLFDDlDHNMCAADKEVFSSFAHAQVSITNEIYQ YLGEPETFLFCPTEYCGTFCYPNVSQSPYLRTVGEKLLPGIEVLWTGPKVVS KElPVESIEEVSKllKRAPVIWDNlHANDYDQKRLFLGPYKGRSTELIPRLKGV LTNPNCEFEANYVAlHTLATWYKSNMNGVRKDVVMSRQVAHSGAKASVVD GTPLVAAPSLNATTVVTTVYQEPIMSQGAALSGEPTTLTKEEEKKQPDEEP MDMVVEKQEETDHKNDNQILSEIVEAKMAEELKPMDTDKESIAESKSPEMS MQEDCISDlAPMQTDEQTNKEQFVPGPNEKPLYTAEPVTLEDLQLLADLFYL PYEHGPKGAOMLREFQWLRANSSVVSVNCKGKDSEKIEEWRSRAAKFEE MCGLVMGMFTRLSNCANRTILYDMYSYVWDIKSlMSMVKSFVQWLGCRSH SSAQFLlGDQEPWAFRGGLAGEFQRLLPIDGANDLFFQPPPLTPTSKVYTIR PYFPKDEASVYKICREMYDDGVGLPFQSQPDLIGDKLVGGLLSLSLDYCFVL EDEDGlCGYALGTVDVTPFlKKCKlSWIPFMQEKYTKPNGDKELSEAEKIMLS FHEEQEVLPETFLANFPSLIKMDIHKKVTDPSVAKSMMACLLSSLKANGSRG AFCEVRPDDKRlLEFYSKLGCFEIAKMEGFPKDVVlLGRSL (SEO lD NO:23) seklindedir. NCOAT bir glikozidaz olup, 1. izoformu O-glikozillenmis proteinlerden GlcNAc'i ayirir, ancak GalNAc'i ayirmaz. Substrat olarak p- nitrofenil-beta-GIcNAc”i kullanir, ancak p-nitrofenil-beta-GalNAc'i ve p- nitrofenil-alfa-GIcNAc'i kullanmaz. AsetiI-koenzim A'yi baglamaz ve histoasetiltransferaz aktivitesi olabilir. 3. Izoformu benzer sekilde 0- glikozillenmis proteinlerden GlcNAc'i ayirir, ancak GalNAc'i ayirmaz. Substrat olarak p-nitrofenil-beta-GlcNAc'i kullanir, ancak p-nitrofenil-beta-GalNAc'i ve p-nitrofenil-alfa-GlcNAc'i kullanmaz. 3. Izoformun spesifik aktivitesi, 1. izoformdan 6 kat daha düsüktür.

+ N-asetiI-D-glukozamin treonin + N-asetiI-D-glukozamin Terminal indirgen olmayan N-asetil-D-Heksozamin birimlerinindeki N-asetil- beta-D-heksozaminin hidrolizi seklindedir.

NCOAT'un regülasyonu: N-asetilglukozamin ile inhibe olurken, N- asetilgalaktozamin ile inhibe olmaz.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda NCOAT kullanimina iliskin olarak ifade edilen tüm veriler bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle NCOAT'un tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünun endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedaviside kullanilabilir. Protein O-GIcNAcase proteininin kisa ismi, OGA'dir ve alternatif ismi Beta-N-asetilglukozaminidaz, Beta-N- asetilheksozaminidaz, Beta-heksozaminidaz, lVIeningioma-eksprese edilen antijen 5,N-asetiI-beta-D-glukozaminidaz, N-asetiI-beta-glukozaminidaz, Nuklear sitoplazmik O-GlcNAcase ve asetiltransferaz (kisa ismi:NCOAT)'dir ve mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Mevcut bulus Aldolaz B adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tum türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Aldolaz B'nin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekül'ün metabolize olmasiyla olusmus yapilar (metabolitler) olabilir. Aldolaz B fruktoz- bifosfat aldolaz B ya da karaciger tipi aldolaz olarak da bilinen sinif I fruktoz 1,6-bifosfat aldolaz enziminin 3 izoenziminden (A, B, C) biridir. Hem glikolizde hem de glukoneogenezde anahtar bir rol oynar. Memelilerde aldolaz A kasta ve eritrositlerde, aldolaz C beyinde eksprese edilirken, aldolaz B tercihen karacigerde eksprese edilir. Iki substrat (fruktoz 1,6 bifosfat ve fruktoz 1 fosfat) molek'ul için farkli aktiviteler izozim yapisindaki küçük farkliliklar ile sonuçlanir. Aldolaz B hiçbir tercih sergilemez ve böylece fruktoz 1,6 bifosfat yerine aldolaz A ve C'yi tercih ederken her iki reaksiyonu da katalizler.

Insanlarda aldolaz B kromozom 9 üzerinde lokalize olan ALDOB geni tarafindan kodlanir. Bu gen 14500 baz çifti uzunlugundadir ve 9 ekzon bölgesi içerir. Bu gendeki defektler kalitsal fruktoz toleranssizliginin sebebi olarak tanimlanmistir. Aldolaz B homotetramerik bir enzimdir. Aldolaz B karbonhidrat metabolizmasinda anahtar bir rol oynar. Glikolitik- glikoneogenetik yolagin onemli adimlarindan birini katalizler. Glukozun yikimini kataliz etmesine ragmen, çogunlukla karaciger, renal korteks ve ince bagirsak mukozasinda meydana gelen fruktoz metabolizmasinda onemli bir rol oynar. Fruktoz absorbe edildigi zaman fruktoz 1-fosfat formuna fruktokinaz tarafindan fosforillenir. Aldolaz B daha sonra gliseraldehit ve dihidroksiaseton fosfat haline truktoz 1 fosfatin yikimini kataliz eder. Aldolaz B mekanizmasinin düzenlenmesi bilinmemesine ragmen, karacigerde transkripte edilen artan ALDOB geni diyet karbonhidratlarda artis ve glukagon konsantrasyonunda azalis ile bildirilmistir. Katalitik aktivitesi; D-fructose 1,6- bisphosphate = glycerone phosphate + D-glyceraldehyde 3-phosphate seklindedir. Bu protein D-glucose dan D-gliseraldehit 3-fosfat ve gliseron fostat sentezinde yolagin 4. asamasinda ilgilidir. 364 amino asite, 39,473 Da molekül agirligina sahiptir. Amino asit dizisi: MAHRFPALTQEQKKELSEIAQSIVANGKGILAADESVGTMGNRLQRlKVENT EENRRQFRElLFSVDSSINQSIGGVILFHETLYQKDSQGKLFRNILKEKGlVVG CPSSLAlQENANALARYASlCQQNGLVPIVEPEVIPDGDHDLEHCQYVTEKV LAAVYKALNDHHVYLEGTLLKPNMVTAGHACTKKYTPEQVAMATVTALHRT VPAAVPGICFLSGGMSEEDATLNLNAINLCPLPKPWKLSFSYGRALQASALA AWGGKAANKEATQEAFMKRAMANCQAAKGQYVHTGSSGAASTQSLFTAC YTY (SEO lD NO:24) olarak belirlenmistir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Aldolaz B'nin kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Aldolaz B'nin tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Aldolaz B; Fructose-bisphosphate aldolase B (ALDOB), RP11-490D19.1, ALDB, ALDOZ, aldolase 2, aldolase B; fructose-bisphosphatase, aldolase B, fructose-bisphosphate isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim D-beta-hidroksibutirat dehidrogenaz adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler D-beta-hidroksibutirat dehidrogenaz'inn kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. D-beta-hidroksibutirat dehidrogenaz mitoohondrial insanda BDH1 geni tarafindan kodlanan bir enzimdir. Bu geni kisa zincirli dehidrogenaz/redüktaz gen ailesinin bir üyesi kodlar. Kodlanan protein mitokondriyal membranin homotetramerik Iipid gerektiren bir enzim formudur. Kodlanan protein yag asit metabolizmasi süresince üretilen iki büyük keton grubu olan asetoasetat ve (R)-3-hidr0ksibutiratin birbirine dönüstürülebilmesini kataliz eder. Katalitik aktivitesi; (R)-3-hidr0ksiutanat + NAD+ = asetoasetat + NADH seklindedir. Enzim düzenlenmesinde enzimatik aktivite için bir allosterik aktivat'ör olarak fosfotidilkoline gereksinim duyar. 132 amino asite, 15,007 Da agirliga sahiptir. Amino asit dizisi: AVLVTGCDSGFGFSLAKHLHSKGFLVFAGCLLKEVAEVNLWGTVRSFLPLL RRVVNISSMLGRSPYCITKFGVEAFSDCLRYEMHPLGVKVSVVEPGNFIAAT SLYSPERMWDELPEVVRKYHPMDYYWWLR'dir (SEO lD NO:25).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda D-beta-hidroksibutirat dehidrogenaz”in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle D-beta- hidroksibutirat dehidrogenaz'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Mitokondriyal D-beta-hidroksibutirat dehidrogenaz; BDH; EC=1.1.1.30; 3-hydroxybutyrate dehydrogenase isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Mevcut bulus bir diger açidan mitokondriyal ATP sentaz alt ünite b adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler mitokondriyal ATP sentaz alt ünite b”nin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Mitokondriyal ATP sentaz alt ünite b, insanda ATP5F1 geni tarafindan kodlanan bir enzimdir. Bu gen mitokondriyal ATP sentazin alt ünitesini kodlar. Mitokondriyal membran ATP sentaz (F1FO ATP sentaz ya da Kompleks V) solunum zincirinin elektron transport kompleksi tarafindan olusturulan membran içinde bir proton gradienti varliginda ADP'den ATP üretir. ATP sentaz iki baglantili multi-alt ünite kompleksinden olusur; çözülebilir katalitik çekirdek, F1, ve membran kapsayan bilesen, FO (proton kanallari içerir). Mitokondriyal ATP sentaz'in katalitik kismi 5 farkli alt ünite (alfa, beta, gama, delta ve epsilon) içerir. 5 farkli alt 'ünite 3 alfa, 3 beta ve diger 3 alt ünitenin birer tanesinin katlanmasi ile birlesir. Proton kanalinin 9 alt 'üniteye (a, b, c, d, e, f, 9, F6 ve 8) sahip oldugu görülür. Bu gen proton kanalinin b alt ünitesini kodlar. 256 amino asite, 28,909 Da agirliga sahiptir. Amino asit dizisi: MLSRVVLSAAATAAPSLKNAAFLGPGVLQATRTFHTGQPHLVPVPPLPEYG GKVRYGLlPEEFFQFLYPKTGVTGPYVLGTGLlLYALSKEIYVISAETFTALSV LGVMVYGlKKYGPFVADFADKLNEQKLAQLEEAKQASIQHlQNAIDTEKSQQ ALVQKRHYLFDVQRNNIAMALEVTYRERLYRVYKEVKNRLDYHISVQNMMR RKEQEHMlNWVEKHVVQSISTQOEKETIAKCIADLKLLAKKAQAQPVM'dir (SEQ lD NO:26). Miyokondriyal ATP sentaz bes farkli alt üniteden olusan, ATP sentezini katalizleyen ve oksidatif fosforilasyon sirasinda mitokondrinin iç zari boyunca proton elektrokimyasal gradiyentini kullanan bir enzimdir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda mitokondriyal ATP sentaz'in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle mitokondriyal ATP sentazin tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülün'un endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir.

Mitokondriyal ATP sentaz; mitochondrial ATP synthase complex delta-subunit precusor, mitochondrial ATP synthase, delta subunit, ATP synthase, H+ transporting, mitochondrial F1 complex, delta subunit isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Mevcut bulus Betain-homositein metiltransferaz adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu t'ürevler Betain-homositein metiltransferaz'in kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküllerden veya bu molekül'un metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Betain-homositein metiltransferaz (BHMT) homosistein metabolizmasinin düzenlenmesi ile ilgilidir. Sirasi ile dimetilglisin ve metionin bir çinko metallo enzimdir. Katalitik aktivitesi; Trimetilammonioasetat + L- homosistein -› dimetilglisin + L-metionin seklindedir. Bu reaksiyon kolin'in dönüsümsüz oksidasyonu için de gereklidir. Bu enzim kolin oksidasyon yolagina yardimci olan 5 enzimin (kolin oksidaz, betain aldehit dehidrogenaz, BHMT, dimetilglisin dehidrogenaz ve sarkozin dehidrogenaz) üçüncüsüdür.

Bu enzim Özellikle bir karbon grubu metiltransferazlara transfer edilen transferazlarin bir ailesine aittir. Bu enzim glisin, serin, treonin ve hatta metioninin metabolizmasina katilir. Insanda herbiri iki ayri gen tarafindan kodlanan iki izozim (BHMT ve BHMT2) vardir. En fazla karaciger ve bbbrekte eksprese edilir. Bu peptid 406 amino asite, 44,998 Da agirliga sahiptir. Amino asit dizisi: MPPVGGKKAKKGILERLNAGEIVIGDGGFVFALEKRGYVKAGPWTPEAAVE HPEAVRQLHREFLRAGSNVMQTFTFYASEDKLENRGNYVLEKISGQEVNEA ACDlARQVADEGDALVAGGVSQTPSYLSCKSETEVKKVFLQQLEVFMKKNV DFLlAEYFEHVEEAVWAVETLIASGKPVAATMCIGPEGDLHGVPPGECAVRL VKAGASIIGVNCHFDPTISLKTVKLMKEGLEAARLKAHLMSQPLAYHTPDCN KQGFIDLPEFPFGLEPRVATRWDIQKYAREAYNLGVRYIGGCCGFEPYHlRA GRPYNPSMSKPDGWGVTKGTAELMQQKEATTEQQLKELFEKQKFKSQ'dir (SEQ lD NO:27). Betain-homosistein metiltransferaz ekspresyonunun ZDF siçanlarin karacigerinde yükseldigi belirlenmistir (Kwak et al., 2015).

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Betain-homositein metiltransferaz'in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Betain-homositein metiltransferaz'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Betain-homositein metiltransferaz; BHMT, Betaine Homocysteine S-Methyltransferase, Betaine Homocysteine S- Methyltransferase 1, BHMT1 isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim Guanin deaminaz benzeri adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Guanin deaminaz benzeri peptidin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküller veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Guanin deaminaz, guanin'in hidrolitik deaminasyon ile ksantin ve amonyaga dönüsümün'u katalize eder. Hücre içinde sitozolik kompartmanda hücre disinda ise eksozomlarda konumlanir. Bu peptidin alternatif kesilme ile meydana gelen 3 izoformu mevcuttur. 1. izoformu 454 amninoasit uzunlugunda ve 51,003 Da agirliginda olup, kanonik dizi olarak bilinir. Amino asit dizisi:l\/ICAAQMPPLAH|FRGTFVHSTWTCPMEVLRDHLLGVSDSGKIVFLEE ASQQEKLAKEWCFKPCEIRELSHHEFFMPGLVDTHIHASQYSFAGSSIDLPL LEWLTKYTFPAEHRFQNIDFAEEVYTRVVRRTLKNGTTTACYFATIHTDSSLL LADlTDKFGQRAFVGKVCMDLNDTFPEYKETTEESlKETERFVSEMLQKNYS RVKPIVTPRFSLSCSETLMGELGNIAKTRDLHlQSHISENRDEVEAVKNLYPS YKNYTSVYDKNNLLTNKTVMAHGCYLSAEELNVFHERGASIAHCPNSNLSL SSGFLNVLEVLKHEVKIGLGTDVAGGYSYSMLDAIRRAVMVSNlLLINKVNEK SLTLKEVFRLATLGGSQALGLDGEIGNFEVGKEFDAILINPKASDSPIDLFYG DFFGDlSEAVIQKFLYLGDDRNlEEVYVGGKQVVPFSSSV (SEQ ID NO:28) seklindedir. 2. izoformu kanonik izoformdan farkli olarak 1-74. diziyi tasimaz. 380 aminoasit uzunlugunda ve 42,445 Da agirligindadir. Amino asit dizisi: MPGLVDTHlHASQYSFAGSSIDLPLLEWLTKYTFPAEHRFQNIDFAEEVYTR VVRRTLKNGTTTACYFATIHTDSSLLLADITDKFGQRAFVGKVCMDLNDTFP EYKETTEESIKETERFVSEMLQKNYSRVKPIVTPRFSLSCSETLMGELGNIAK TRDLHlQSHISENRDEVEAVKNLYPSYKNYTSVYDKNNLLTNKTVIVIAHGCYL SAEELNVFHERGASIAHCPNSNLSLSSGFLNVLEVLKHEVKlGLGTDVAGGY SYSMLDAlRRAVMVSNILLINKVNEKSLTLKEVFRLATLGGSQALGLDGEIGN FEVGKEFDAlLINPKASDSPIDLFYGDFFGDISEAVlQKFLYLGDDRNIEEVYV GGKQVVPFSSSV (SEO ID NO:29) seklindedir. 3. izoformu kanonik izoformdan farkli olarak 454. aminoasitte 52,837 Da agirligindadir. Aminoasit dizisi: MCAAQMPPLAHIFRGTFVHSTWTCPMEVLRDHLLGVSDSGKIVFLEEASQQ EKLAKEWCFKPCEIRELSHHEFFMPGLVDTHIHASQYSFAGSSlDLPLLEWL TKYTFPAEHRFQNIDFAEEVYTRVVRRTLKNGTTTACYFATIHTDSSLLLADI TDKFGQRAFVGKVCMDLNDTFPEYKETTEESIKETERFVSEMLQKNYSRVK PlVTPRFSLSCSETLMGELGNIAKTRDLHIQSHlSENRDEVEAVKNLYPSYKN YTSVYDKNNLLTNKTVMAHGCYLSAEELNVFHERGASlAHCPNSNLSLSSG FLNVLEVLKHEVKIGLGTDVAGGYSYSMLDAIRRAVMVSNlLLlNKVNEKSLT LKEVFRLATLGGSQALGLDGElGNFEVGKEFDAILlNPKASDSPlDLFYGDFF GDISEAVlQKFLYLGDDRNIEEVYVGGKQVVPFSSSVKETIHLPASSPHPPPF P (SEQ ID NO:30) seklindedir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Guanin deaminaz'in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Guanin deaminaz'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülün'un endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Guanin deaminaz; GDA, KIAA1258, CYPlN, GAH, GUANASE, Guanase, Guanine aminase isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Buradaki kullanim Alfa-1 asit glikoprotein adli peptidi, bu molekülün teknikte bilinen tüm türevlerini ve sinonimlerini içermektedir. Söz konusu türevler Alfa- 1 asit glikoprotein peptidin kimyasal modifikasyonu ile elde edilen moleküller veya bu molekülün metabolize olmasiyla olusmus yapilar olabilir. Alfa-1 asit glikoprotein kanda tasiyici olarak görev yapar. Onun beta-barrel domaini araciligiyla farkli ligandlari baglayabilir. Ayrica sentetik ilaçlari da baglar ve vücuttaki dagilimini ve kullanilabilirligini etkiler. Akut faz reaksiyonlari sirasinda bagisiklik sisteminin aktivitesinin düzenlenmesinde islev görür.

Karacigerde sentezlenip plazmaya salinir. Alfa-1 asit glikoproteinîn sentezi glukokortikoidler, interlökin-1 ve interlokin-G tarafindan kontrol edilir. Alfa-1 asit glikoprotein, 201 amninoasit uzunlugunda ve 23,512 Da agirligindadir.

Amino asit dizisi: MALSWVLTVLSLLPLLEAQlPLCANLVPVPITNATLDQlTGKWFYIASAFRNEE YNKSVQEIQATFFYFTPNKTEDTlFLREYQTRQDQCIYNTTYLNVQRENGTlS RYVGGQEHFAHLLlLRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLSVYADKPETTKEQLGE FYEALDCLRlPKSDVVYTDWKKDKCEPLEKQHEKERKQEEGES (SEQ lD NO:31) seklindedir.

Bu baglamda, mevcut bulus kapsaminda Alfa-1 asit glikoprotein'in kullanimina iliskin olarak verilen tüm veriler, bu molekülün türevlerini ve sinonimlerini de kapsamaktadir. Bir baska deyisle Alfa-1 asit glikoprotein'in tüm türevleri ve sinonimleri bu bulus kapsaminda bu molekülünün endike oldugu ya da olabilecegi tüm hastaliklarin tedavisinde kullanilabilir. Alfa-1 asit glikoprotein; ORM1 ve AGP1, isimleriyle de taninabilmekte olup mevcut bulus kapsaminda bu isimler birbiri ile degisebilir sekilde kullanilabilir.

Bulus bir diger açindan hücre 'Ölümü ve farklilasmasi ile ilgili tüm hastaliklarin, tercihen diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklarin veya neoplastik hastaliklarin tedavisinde; 0 E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, o UPF0361 protein C30rf37 homolog, o inhibin beta B chain, o aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, o Ras-related protein Ral-B, . STAM-binding protein, . steroid hormone receptor ERR1, . Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-like proteini, . NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, o Platelet glycoprotein Ib beta chain, o bifunctional protein NCOAT, . aldolase B, 0 D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, o ATP synthase subunit b mitochondrial, o Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, o Guanin deaminaz ve AIfa-1-asit glikoprotein moleküllerinin veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNA'Iarini hedefleyen miRNA ve IncRNA'Iar gibi tüm RNA tiplerinin en az bir antidiyabetik ajan veya antiobezite ajani veya antiinflamatuvar ajan veya bunlarin kombinasyonu ile kombine olarak kullanimina iliskindir.

Bulus kapsaminda kullanilan “antidiyabetik ajan” ifadesi diyabet tedavisinde kullanilan ajanlari; “antiobezite ajani" ifadesi obezite tedavisinde kullanilan alanlari ve “antiinflamatuvar aajan" ifadesi ise inflamatuvar hastaliklarin tedavisinde kullanilan ajanlari isaret etmektedir. Bu bulus kapsaminda tespit edilen yukarida ayrintili olarak açiklanmis olan tüm peptidler (tek basina veya kombine olarak), iliskili tüm RNA”Iar ve DNA”si antidiyabetik, antiobezite veya antiinflamatuvar ilaçlar ile birlikte tedavide kullanilabilir.

Bahsi geçen antidiyabetik ajanlar insülin analoglari, insülin duyarlastirici ajanlar, insülin sekretegoglar, aldoz redüktaz inhibitörleri, alfa glukosidoz inhibitörleri, amilin analoglari, peptid analoglari, sodyum glikoz trasporter 2 (SGLT) inhibitörleri, glikosurik ajanlardan olusan ana gruplarin içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek insülin; insülin, insülin Iispro, insülin aspart, insülin glusin, insülin çinko, izofen insülin, insülin glarjin, insülin detemirfden olusan grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek insülin duyarlastirici ajanlar metformin, fenformin, buformin, siglitazon, darlitazon, englitazon, Iobeglitazon, netoglitazon, rivoglitazon, aleglitazar, saroglitazar, tesaglitazar, rosiglitazon, pioglitazon, troglitazon'dan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek insülin sekretegoglar asetohekzamid, karbutamid, klorpropamid, metahekzamid, tolbutamid. tolazamid, glibenklamid, glibornurid, glisetanil, gliklazid. gliflumid, glipizid, glikuidon, glisoksepid, gliklopiramid, glimepirid, repaglinid, mitiglinid, ekzenatid, liraglutid, taspoglutid, albiglutid, Iiksisenatid, dulagutid, semaglutid, alogliptin, anagliptin, gemigliptin, Iinagliptin, omarigliptin, saksagliptin, sitagliptin, tenegliptin, vildagliptin, fasiglifam, nateglinid'den olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek aldoz red'üktaz inhibitörleri epalrestat, fidarestat, ranirestat, tolrestat, zenarestattan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek alfa glukosidoz inhibitörleri miglitol, acarbose, voglibose'dan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek amilin analogu pramlintid'tir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek sodyum glikoz trasporter 2 (SGLT) inhibitörleri kanaglifozin, dapagliflozin, empagliflozin, remogliflozin, sergliflozin, tofogliflozin”den olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Yukarida sayilanlara ilave olarak antidiyabetik ajan benfluoreks veya bromocriptin de olabilir.

Bahsi geçen anti obezite ajanlari 4-metil amfetamin, amfekloral, amfepentoreks, amfepramon, aminoreks, amfetamin, atomoksetin, benfluroreks, benzfetamin, bupropion, katin, katinon, klorfentermin, siklazindol, klobenzoreks, kloforeks, clominoreks, clotermin, deksfenfluramin, dektroamfetamin, deksmetilfenidat, difemetoreks, dimetilkatinon, difemetoksidin, efedrin, efedrai etilamfetamin, etoloreks, fenbutrazat, fenkamfamin, fenetilin, fenfluramin, fenproporeks, fludoreks, fluminoreks, furfenoreks, indanoreks, khat, Ievopropilheksedrin, lisdeksamfetamin, manifaksin, mazindol, mefenoreks, metamfetamin, metilfenidat, norfenfluramin, pemolin, pentoreks, fendimetrazin, fenetilamin, fenmetrazin, fentermin, fenilpropanolamin, pisiloreks, pipradrol. prolintan, propilheksedrin, psödoefedrin, pirovaleron. radafaksin, reboksetin, setazindol, sibutramin, sinefrin, tesofensin, viloksazin, ksilopropamin, zilofuramin, drinabant, ibipinabant, otenabant, rimonabant, rosonabant, surinabant, taranabant, 5- HTP, galaktomannan, glukomannan, L-DOPA, L-fenilalanin, L-triptofan, L- tirosin, lorkaserin, Lu AA-33810, neltrekson, nalokson, oksintomodulin, PS7, peptit YY, topiramat, yohimbin, zonisamid, su, setilistat, 2,4-dinitrofenol, dirlotapid, miltratapid, oleoyl estron, orlistat, simmondsin, sterkulia'dan olusan bir grubun içerisinden veya bunlarin ikili veya üçlü kombinasyonlarindan oluan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek antiinflamatuvar ajanlar pirazolon/pirazolidinler, salisilatlar, asetik asit türevleri, oksikamlar, propiyonik asit türevleri, N-arilantralinik asitleri. koksibler ve diger ajanlardan olusan genel gruplarin içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek pirazolon/pirazolidinler, aminofenazon, ampiron, klofenazon, famprofazon, feprazon, kebuzon, metamizol, mofebutazon, morazon, nifenazon, oksifenbutazon, fenazon, fenilbutazon, propifenazon, sülfinpirazon, suksibuzonidan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek salisilatlar asetilsalisilik asit, aloksipirin, benorilat, karbasalat kalsiyum, diflunisal, etenzamid, guasetisal, magnezyum salisilat, metil salisilat, salsalat, salisilamid, salisiklik asit, sodyum salisilat7tan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek asetik asit türevleri aseklofenak, asemetasin, alklofenak, amfenak, bendazak, bromfenak, bumadizon, bufeksamak, diklofenak, difenpiramid, etodolak, felbinak, fenklozik asit, fentiazak, indometazin, indometazin farnesil, isokspak, ketorolak, Ionazolak, aksametasin, prodolik asit, proglumetasin, sulindak, tiopinak, tolmetin, zomepirak'tan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek oksikamlar ampiroksikam, droksikam, Iornoksikam, meloksikam, piroksikam, tenoksikam'dan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek propiyonik asit türevleri alminoprofen, benoksaprofen, karprofen, deksibuprofen, deksketoprofen, fenbufen, fenoprofen, flunoxaprofen, flurbiprofen, ibuprofen, ibuproksam, indoprofen, ketoprofen, loksoprofen, miroprofen, naproksen, oksaprozin, pirprofen, suprofen, tarenflurbil, tepoksalin, tiyaprofenik asit, vedaprofen, naproksinod'dan olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek N-arilantralinik asitler azaprOpazon, etofenamat, flufenamik asit, fluniksin, meklofenamik asit, mefenamik asit, morniflumat, niflumik asit, tolfenamik asit, flutiazin'den olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek koksibler aprikoksib, selekoksib, simikoksib, derakoksib, etorikoksib, firokoksib, Iumirakoksib, mavakoksib, parekoksib, robenakoksib, rofekoksib, valdekoksib'den olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulus kapsaminda yukarida sayilan peptitlerle kombine olarak kullanilabilecek diger ajanlar aminopropionitril, benzidamin, konroitin sülfat, diaserin, fluprokuazon, glukozamin, glikozaminoglikan, hiperforin, nabumeton, nimesulid, okzaseprol, prokuazon, tenidep, orgotein'den olusan bir grubun içerisinden seçilebilir.

Bahsi geçen bu patentle koruma altina alinacak t'um peptidlerin antidiyabetik, antiobezitik ve antiinflamatuvar ilaçlar ile kombine kullanimindan bahsedilirken, yukarida verilen listeler disinda ve bu listelerde yer almayan, yeni sentezlenecek veya sentezlenmis ancak ilaç gelisimi asamasindaki tüm ilaçlarla kombine kullanimini da kapsar.

Bulus sahiplerinin kullandigi yöntemler asagida detayli olarak anlatilmaktadir.

Bulus sahipleri pankreatik adacik kökenli mezenkimal kök hücrelerin (Pl- MSC) izolasyonu için 1 mg/ml konsantrasyonda kollagenazi perfüzyon y'otemiyle pankreasa verip 37°C'de 12 dakika 100 rpm hizda çalkanarak sindirim isleminin gerçeklesmesini saglamistir. Takiben %11, %20, %23 konsantrasyonda ficol gradiyenti uygulayarak pankreatik adaciklarin izole edilmesini takiben adaciklardan Pl-MSC'lein ayrilmasi için kültür ortamina almislardir. Elde edilen PI-MSC'Ierin karakterizasyonu için yaptiklari flow sitometrik analizler sonucunda bu hücrelerin %0.18'inin CD45'i, %98.1'inin hücre yüzeylerinde tasidigini tespit etmisleridir. Ayrica yaptiklari western blotlama analizleri sonucunda bu hücrelerin Endoglin, Nestin, Vimentin ve Fibronectin'i eksprese ettiklerini göstermislerdir. ilaveten bu hücrelerin sayisinin ilerleyen günlerde beligin olarak arttigi WST1 testi ile belirlenmistir.

Karakterizasyon için yapilan bir diger çalismada ise bu hücrelerin ß hücreleri, adiposit ve osteositlere farklilasabildigi mikroskobik olarak ve RT-PCR yöntemiyle spesifik gen ekspresyonlarinin gösterilmesiyle belirlenmistir.

Bulus sahipleri yaptiklari çalismalarda ikili kültür sistemleri (ko-kültür) olusturmuslardir. Pankreatik adacik kaynakli mezenkimal kök hücreleri primer ß hücreleri ile kültüre edilmis ve bu sisteme yüksek miktarda glikoz, NEFA (esterlesmemis yag asidi; palmitik asit) ve glikoz+NEFA uygulanarak sirasi ile glukotoksisite, lipotoksisite ve glukolipotoksisite sartlari olusturulmustur.

Uygulama süresinin (96 saat) sonunda pankreatik adacik kaynakli mezenkimal k'ok hücrelerde ß hücrelerine özgün olan bazi moleküllerin gen ekspresyon seviyeleri biçülerek hangi hücrenin insülin üreten hücrelere degistigi tespit edilmistir. Son asama olarak sekresyonlarda (hücre medyumlarinda) proteomik analizler yapilmis ve ß-hücrelerinin olusumunu tetikleyebilecek potansiyele sahip olan farklilasma faktörleri tespit edilmistir.

Bulus sahipleri 25 mmol/L glukoz veya 0.4 mmoI/L palmitat varliginda yaptiklari 96 saat süreli ko-kültür uygulamalari sonucunda ß-hücrelerinin ap0ptoz ile öldügünü tespit etmislerdir.

Bulus sahipleri 25 mmoI/L glukoz veya 25 mmol/L glukoz+0.4 mmol/L palmitat varliginda yaptiklari 96 saat süreli ko-kültür uygulamalari sonucunda ß-hücrelerinin nekroz ile öldügünü tespit etmislerdir.

Bulus sahipleri 25 mmoI/L glukoz veya 25 mmol/L glukoz+0.4 mmol/L palmitat varliginda yaptiklari 96 saat süreli ko-kültür uygulamalari sonucunda pankreatik adacik kaynakli mezenkimal kök hücrelerin ß-hücrelerine farklilastigini göstermislerdir. Bunu göstermek için ß-hücrelerine özgü moleküller olan ins1-2, glut2, nkx6.1 ve paxö gen ekspresyon ürünlerini RT- PCR metoduyla elde etmis ve agaroz jel elektrotoreziyle ürün bantlarini görüntülemislerdir.

Bulus sahipleri 25 mmoI/L glukoz veya 25 mmol/L glukoz+0.4 mmol/L palmitat varliginda yaptiklari 96 saat süreli ko-kültür uygulamalari sonucunda pankreatik adacik kaynakli mezenkimal kök hücrelerden farklilasan ß- hücrelerinin artan glukoz seviyelerine cevaben artan insülin sekresyonu yaptigini göstererek yeni olusan bu hücrelerin fonksiyonel olduklarini belirlemislerdir.

Bulus sahipleri 25 mmol/L glukoz veya 25 mmol/L glukoz+0.4 mmol/L palmitat varliginda yaptiklari 96 saat süreli ko-kültür uygulamalari sonucunda elde ettikleri deney medyunlarinda iki boyutlu jel elektroforezini takiben mass spektrofotometri ile medyumlarda tam proteom analizi yapmislardir. Bu analiz sonucunda elde edilen moleküller: E3 ubiquitin-protein ligase RNF181, UPF0361 protein C30rf37 homolog, inhibin beta B chain, aryI-hydrocarbon- interacting-protein-Iike 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein, steroid hormone receptor ERR1, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1- associated protein 2-Iike protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron- sulfur protein 6 mitochondrial, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D- beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial. Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, Guanin deaminaz ve Alfa-1 asit glikoprotein7dir.

Mevcut bulus, bir diger açidan E3 ubiquitin-protein ligase RNF181, UPF0361 protein Cßorf37 homolog, inhibin beta B chain, aryI-hydrocarbon-interacting- protein-like 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein, steroid hormone receptor ERRl, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta- hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, Guanin deaminaz ve Alfa-1 asit glikoprotein peptitlerini içeren bir farmasbtik bilesime iliskindir. Söz konusu farmasbtik bilesim içerisinde burada adi geçen peptidler tek basina veya kombine olarak veya bir antidiyabetik, anti obezite, antiinflamatuvar ajanlarla kombine olarak bulunabilir.

Bu farmasotik bilesim hücre ölümü ve farklilasmasi ile iliskili t'L'im hastaliklarin, tercihen diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklarin veya neoplastik hastaliklarin tedavisinde kullanima uygun bir farmasotik bilesimdir.

Mevcut bulus kapsaminda kullanilan “farmasotik bilesim” ifadesi etken madde olarak adi geçen molekülleri veya yukarida açiklanan türevlerinden birini içeren ve istege bagli olarak en az bir yardimci madde içeren kompozisyonlari ifade etmektedir. Mevcut bulusa uygun farmas'otik bilesimler teknigin bilinen durumunda var olan, bilinen metodlar kullanilarak hazirlanabilir.

Bahsi geçen yardimci maddeler teknigin bilinen durumunda var olan farmasotik olarak bilinen tüm yardimci maddelerin içerisinden seçilebilir.

Farkli özellikteki yardimci maddeler istenilen sekilde kombine olarak bu bulusa uygun formasbtik bilesimin hazirlanmasinda kullanilabilir. Elde edilecek farmas'otik bilesim teknigin bilinen durumunda var olan dozaj formlarindan herhangi biri formunda hazirlanabilir. Söz konusu dozaj formu oral yoldan, rektal yoldan, vajinal yoldan veya intratumoral, subk'ütan, intrakutan, intravenöz, intraserebroventrikuler, intram'üsküler, intra-arteryal, intratrakeal veya interperitonel olarak, parenteral olarak, topikal olarak veya medikal cihazlar vasitasi ile hastaya uygulanabilir.

Mevcut bulusa uygun formülasyonlar nanopartiküller, lipozomlar ve diger benzer tasiyicilar araciligiyla, hücrelere hedeflenerek veya hücreler ile tasinmaya uygun sekilde formüle edilebilir veya bu yollardan hastaya verilebilir.

Mevcut bulusa uygun formülasyonlar nazal, spray, oral, aerosol, rektal veya vajinal olarak hastaya verilmeye uygun sekilde formüle edilebilir veya bu Mevcut bulusa uygun farmasötik kompozisyonlar enjekte edilebilir formülasyon formunda parenteral olarak verilebilir. Enjeksiyona uygun formülasyonlar steril bir çözücü veya farmasötik olarak uygun herhangi bir tasiyici kullanilarak formüle edilebilir. Farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici, steril su, serum fizyolojik veya tekigin bilinen durumunda var olan hücre kültürü ortamlari içerisinden seçilebilir olmakla beraber bunlarla sinirli degildir.

Bir baska açidan mevcut bulus bahsi geçen moleküllerin en az bir diger terapötik ajanla beraber kullanilmasina iliskindir.

Burada bahsi geçen diger terapötik ajan antidiyabetik veya antiobezite etkisine sahip maddeler içerisinden veya antiinflamatuar özellikte maddeler içerisinden seçilebilir.

Mevcut bulusa uygun adi geçen moleküller teknigin bilinen durumunda var olan teknikler kullanilarak elde edilebilir.

Mevcut bulusa uygun adi geçen peptidleri içeren farmasötik bilesimler içerisinde kullanilabilecek diger etken madde için antidiyabetik ve antiobezite ilaçlari seçilebilir ancak bunlarla sinirli degildir. Mevcut bulusa uygun yukarida adi geçen peptidleri içeren farmasötik bilesim içerisinde kullanilabilecek ikinci etken madde; bilinen tüm antidiyabetik veya antiobezite ajanlardan ve/veya otoimmün hastaliklarin tedavisinde kullanilan aktif maddelerden ve/veya antiinflamatuar özellige sahip etken maddelerden seçilebilir.

Bu bulus kapsaminda açiklanan özellikler istenildigi takdirde birbiri ile kombine edilebilir.

Bulusun çalisma prensibini gösteren ve bulus hakkinda detayli bilgi veren örnekler asagida verilmektedir. Ornekler bulusun daha iyi anlasilmasini saglamak amaciyla verilmis olup herhangi bir sekilde bulusun kapsami bu örneklerle sinirlandirilmamaktadir.

Ornek 1: Pankreatik Adacik Morfolojisinin ve Ondan Ayrilan Mezenkimal Kök Hücrelerin Morfolojisinin Gösterilmesi Eriskin siçanlarin pankreasindan Langerhans adaciklari izole edildikten sonra insulin isaretleyen dithizone ile boyanmistir. Ayrica, adaciklar fluorescein diacetate (yesil) ve propidium iodide (kirmizi) ile isaretlenerek canliliklari belirlenmistir. Hemen hemen tüm adaciklarin canli oldugu kaydedilmistir.

Adaciklar kültür ortamina alindiktan 1 ve 3 gün sonra adaciklardan ayrilip sayica artan fibroblast benzeri hücreler gözlenmistir (Sekil 1). 3. Günün sonunda adaciklar kültürden uzaklastirilmis ve Pl-MSC'Ierin çogalarak komplifiye oldugu gözlenmistir.

Ornek 2: Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre yüzey belirteçlerinin gösterilmesi 3. Pasaj Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre yüzey belirteçleri flow sitometrik analiz ile gösterilmistir. Elde edilen sonuçlara göre Pl-MSC'ler negatif kontrol belirteci olan CD45'i %018, pozitif belirteçler olan Ornek 3: Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre içi belirteçlerinin gösterilmesi 3. Pasaj Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre içi belirteçleri olarak bilinen Endoglin, Nestin, Vimentin ve Fibronectin'i eksprese ettikleri western blotlama ile gösterilmistir (Sekil 3).

Ornek 4: Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin canliliginin gösterilmesi 1., 4., 7., 11. ve 14. günlerde WST-1 testi ile canli pankreatik adacik kaynakli kök hücre miktari gösterilmistir. Ilerleyen günlerde canli hücre miktarini gösteren absorbans degerlerinin beligin olarak arttigi kaydedilmistir (Sekil 4).

SEM olarak verilmistir.

Ornek 5: Pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin farklilasma potansiyellerinin gösterilmesi Pankretik adacik kaynakli mezenkimal kök hücrelere in vitro endokrin, adipojenik ve osteojenik farklilasma protokolleri uygulanarak bu süreç sonunda endokrin, adipojenik ve osteojenik farklilasma parametreleri RT- PCR ve mikroskopik teknikler ile gösterilmistir. Endokrin farklilasmanin tespiti için pankreatik ß-hücrelerine özgün moleküller olan ins-1, ins-2, pdx-1, nkx2- B, pax-6, and glut-2'nin RT-PCR ürünleri agaroz jelde gösterilmis ve insulin pozitif ß-hücreleri immünohistokimyasal olarak isaretlenmistir. Adipojenik farklilasmanin tespiti için adipositlere özgün moleküller olan lpl ve ppar2'nin RT-PCR ürünleri agaroz jelde gösterilmis ve yag vakuolleri oil red O ile histokimyasal olarak isaretlenmistir. Osteojenik tarklilasmanin tespiti için osteositlere özgün moleküller olan sparc, bglap ve bgp'nin RT-PCR ürünleri agaroz jelde gösterilmis ve mineral nodül vakuolleri Alizarin red S ile histokimyasal olarak isaretlenmistir (Sekil 5).

Ornek 6: Tekli ve kokültür sistemlerinin hücrelerinde glukotoksisite, lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda apoptoz oranlarinin belirlenmesi Glukotoksisite, liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulandiginda ß- hücreleri, pankreatik adacik kaynakli kök hücreler, ß-hücreleri+PI-MSCs kokültür sisteminden alinan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl-MSC kokültür sisteminden alinan Pl-MSC”lerin apoptoz oranlarinn belirlenmis ve istatistiksel olarak anlamli olmakla birlikte genel olarak düsük oranda degisimler tespit edilmistir. Pl-MSC'Ierdeki apoptotik degisimlerin ß-hücrelerinden bagimsiz oldugu, buna karsin ß-hücrelerinin Pl-MSC varliginda daha yüksek oranlarda apoptoza gittigi belirlenmistir (Sekil 6). Bu bulgudan yola çikilarak glukotoksisite sartinda ß-hücrelerinin kokültür sartinda kismen apoptotik yolla öldügü söylenebilir.

Ornek 7: Tekli ve kokültür sistemlerinin hücrelerinde glukotoksisite, lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda nekroz oranlarinin belirlenmesi Glukotoksisite, Iiptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulandiginda ß- hücreleri, pankreatik adacik kaynakli kök hücreler, ß-hücreleri+PI-MSCS kokültür sisteminden alinan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl-MSC kokültür sisteminden alinan PI-MSC'lerin nekroz oranlari salinan LDH miktarina göre belirlenmis ve istatistiksel olarak anlamli belirgin degisimler tespit edilmistir. ß-hücrelerindeki nekrotik ölümün Pl-MSC'Ierden bagimsiz oldugu, buna karsin PI-MSC'Ierin ß-hücreleri varliginda çok daha düsük oranda nekrotik ölüme gittigi tespit edilmistir (Sekil 7). Bu bulgudan yola çikilarak özllikle glikotoksisite sartinda ß-hücrelerinin baskin olarak nekrotik yolla öldügü söylenebilir.

Ornek 8: Tekli ve kokültür sistemlerinin ß-hücrelerinde glukotoksisite, lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda proliferasyon oranlarinin belirlenmesi Glukotoksisite, Iiptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulandiginan (3- hücreleri ve ß-hücreleri+PI-MSCs kokültür sisteminden alinan ß-hücrelerinin proliferasyon oranlari BrdU isaretlenmesine göre hesaplanmistir. Genel olarak ß-hücre proliferasyonun tek kültür ortaminda bahsi geçen sartlardan etkilenmedigi, buna karsin Pl-MSC varliginda glukotoksisite sartinda proliferasyon belirgin olarak artarken lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda anlamli olarak azaldigi tespit edilmistir (Sekil 8). Bu bulgudan yola çikilarak glikotoksisite sartinda meydana gelen kompensatuvar adacik kütlesindeki artisa ß-hücre proliferasyonunun kismen katki sagladigi söylenebilir.

Ornek 9: Tekli ve kokültür sistemlerinin Pl-MSC hücrelerinde glukotoksisite, lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda ß-hücre farklilasmasinin belirlenmesi Glukotoksisite, liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulanan PI-MSC'Iere ve ß-hücreleri+Pl-MSC kokültür sisteminden alinan Pl-MSClerde RT-PCR teknigi ile ß-hücrelerine özgün ins-1, ins-2, pdx-1, glut-2, nkx2-2 ve pax-6 gen ekspresyonlari RT-PCR teknigiyle belirlenmistir. Glukotoksisite ve glukolipotoksisite uygulanan ß hücreleri+PI-MSC kokültür sisteminden alinan Pl-MSC'lerde bahsi geçen genlerin eksprese edildigi tespit edilmistir.

Glukotoksisite sartinda elde edilen ürün bantlarinin glikolipotoksisite sartindakinden çok daha belirgin oldugu kaydedilmistir. Bu bulgudan yola çikilarak glikotoksisite sartinda daha fazla olmakla birliklte glukolipotoksisite sartinda da kompensatuvar adacik kütlesindeki artisa PI-MSC'lerin ß- hücrelerine farklilasmasinin önemli bir katki sagladigi söylenebilir.

Ornek 10: Tekli kültür ve kokültür sistemlerinin hücrelerinde glukotoksisite, lipotoksisite ve glikolipotoksisite sartlarinda glukoza duyarli insülin sekresyon oranlarinin belirlenmesi ß-hücreleri, Pl-MSC, ß-hücreleri+PI-MSC kokültür sisteminden alinan [3- hücreleri ve B-hücreleri+Pl-MSC kokültür sisteminden alinan Pl-MSC”Ierin yükselen glukoz ile uyarilan insüin sekresyon miktarlari ELISA yöntemiyle ölçülmüstür. ß-hücrelerinde tekli kültür ve de kokültür sisteminde benzer sonuçlar elde edilmistir. Bulgulara gore ß-hücreleri glikotoksisite sartinda yüksek glukoz uyarisina karsi duyarsizlasip insulin sekresyonlarini azaltmaktadir. Diger taraftan, Pl-MSCilerin tekli kültür ortaminda hiçbir sekilde anlamli miktarlarda insulin salmmasi farklilasma deney sonuçlarini desteklemektedir. Kokültür sistemlerinden alinan PI-MSC*Ierde ise glukotoksisite sartinda yükselen glikoz seviyelerine karsin insulin salinimi da artmistir (Sekil 10). Bu bulgu bahsi geçen glukotoksisite sartinda PI-IVlSC'lerin fonksiyonel ß-hücrelerine farklilastigini göstermektedir.

Ornek 11: ß-hücre farklilasmasinin tespit edildigi glukotoksisite ve glikolipotoksisite uygulanmis kokültür sisteminden alinan medyumlar 2D elektroforez yöntemiyle analiz edilmis, kontrol medyumlarla farklilik gözlenen spotlardan elde edilen örneklerde mass spektrometri ile peptidler belirlenmistir.

Glukotoksisite ve glukolipotoksisite uygulanan kokültür sistemlerinin medyumlarinda control medyumlardan farkli olarak E3 ubiquitin-protein ligase hydrocarbon-interacting-protein-like 1, Res-related protein RaI-B, STAM- binding protein, steroid hormone receptor ERR1, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-like protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, platelet glycoprotein lb beta chain, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1 peptidlerinin varligi gösterilmistir (Tablo 1).

Bulusu açiklayan sekiller bu tarifnamenin ekinde bulunmaktadir. Sekillerin kisa açiklamalari asagida verilmektedir.

Sekil 1: Pankreatik adaciklarin ve bu adaciklardan kökenlernen mezenkimal kök hücrelerin morfolojisi (A) Siçanlardan izole edilen adacik insülini isaretleyen dithizone ile boyanmistir. (B) Siçanlardan izole edilen adaciklar h fluorescein diacetate (yesil) ve propidium iodide (kirmizi) ile isaretlenerek canliliklari belirlenmistir. Hemen hemen tüm adaciklarin canli oldugu kaydedilmistir. Adaciklara kültür ortamina alindiktan 1 ve 3 gün sonra adaciklardan ayrilip sayica artan fibroblast benzeri hücreler (ok) gözlenmistir.

Orjinal büyütmeler: (A,C,D) x 200; (B) X100, I: Pankreatik adacik.

Sekil 2: Pasaj 3 pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre yüzey belirteçlerini gösteren flow sitometri analiz sonuçlari.

Sekil 3: Pasaj 3 pankreatik adacik kaynakli kök hücrelerin spesifik hücre içi belirteçlerini gösteren western blotlama analiz sonuçlari. ENG: Endoglin; NES: Nestin; VIM: Vimentin; FN: Fibronectin.

Sekil 4: Grafik 1., 4., 7., 11. Ve 14. Günlerde canli pankreatik adacik kaynakli kök hücre miktarini göstermektedir. Canli hücre miktari WST1 testi ile hesaplanmis ve absorbans degerleri 450 nm dalga boyunda ölçüsmüstür.

Ilerleyen günlerde canli hücre miktarini gösteren absorbans degerlerinin beligin olarak arttigi kaydedilmistir. ap<0.001 vs. 1. Gün , bp<0.00'l vs. 4. gün, 14. Günde 1.99±O.12. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak verilmistir.

Sekil 5: Pankretik adacik kaynakli mezenkimal kök hücrelerin in vitro endokrin, adipojenik ve osteojenik farklilasma deneyi ile ilgili RT-PCR ürünleri ve fotomikrograflari. Ust panelde endokrin farklilasma pankreatik ß- hücrelerine özgün moleküller olan ins-1, ins-2, pdx-1, nkx2-6, pax-6, and glut- 2”nin RT-PCR ürünlerinin gösterilmesiyle ve insulin pozitif ß-hücrelerinin immünohistokimyasal olarak isaretlenmesiyle gösterilmistir. Orta panelde adipojenik farklilasma adipositlere özgün moleküller olan Ipl ve ppar2”nin RT- PCR ürünlerinin gösterilmesiyle ve yag vakuollerinin oil red O ile histokimyasal olarak isaretlenmesiyle gösterilmistir. Alt panelde ise osteojenik farklilasma osteositlere özgün moleküller olan sparc, bglap ve bgp'nin RT- PCR ürünlerinin gösterilmesiyle ve mineral nodül vakuollerinin Alizarin red S ile histokimyasal olarak isaretlenmesiyle gösterilmistir. Orjinal büyütme: x Sekil 6: (A) Grafik glukotoksisite. liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulandiginda ß-hücreleri, pankreatik adacik kaynakli kök hücreler, ß- hücreleri+Pl-lVlSCs kokültür sisteminden alinan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl- MSC kokültür sisteminden alinan PI-MSC'lerin ap0ptoz oranlarinn degisimini katli artis olarak göstermektedir. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak verilmistir.

Sekil 7: (A) Grafik glukotoksisite, liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulanan ß-hücreleri, pankreatik adacik kaynakli kök hücreler, B- hücreleri+Pl-MSCs kokültür sisteminden alinan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl- MSC kokültür sisteminden alinan PI-MSClerin LDH salinimina gore hesaplanmis olan nekroz oranlarinn degisimini göstermektedir. *p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001. (B) Tablo nekroz oranlarini salinan LDH (mU/mg protein) degerleri olarak göstermektedir. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak verilmistir.

Sekil 8: Grafik glukotoksisite, liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulandiginan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl-MSCs kokültür sisteminden alinan ß-hücrelerinin BrdU isaretlenmesine gore hesaplanmis olan proliferasyon oranlarinn degisimini göstermektedir. ***p<0.001, #p<0.05, göstermektedir. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak verilmistir.

Sekil 9: (A) Glukotoksisite, liptoksisite ve glikolipotoksisite sartlari uygulanan Pl-MSC'lere ve ß-hücreleri+PI-MSC kokültür sisteminden alinan Pl-MSClerin RT-PCR analiz sonuçlari. PI-MSCs-M: FBS ve BSA içeren medyum uygulanan kök hücreler, Pl-MSCs-G, and [3 cells+Pl-MSCs (PI-MSCs)-G: Glukotoksisite uygulanan PlMSC'Ier ve glukotoksisite uygulanip kokültür sisteminden alinan PI-MSC'ler, Pl-MSCs-L and [3 cells+PI-MSCS (Pl-MSCS)- L: Lipotoksisite uygulanan PIMSC'ler ve lipotoksisite uygulanip kokültür sisteminden alinan PI-MSC'ler, Pl-MSCs-GL, and [3 cells+Pl-MSCs (Pl- MSCs)-GL: Glukolipotoksisite uygulanan PIMSC'Ier ve glukolipotioksisite uygulanip kokültür sisteminden alinan PI-MSC'ler. Pankreatik ß-hücre farklilasmasi bu hücrelere özgün olan ins-1, ins-2, pdx-1, glut-2, nkx2-2,and pax-6 gen ekspresyonunun RT-PCR teknigiyle belirlenmesiyle gösterilmistir.

Sekil 10: (A) ß-hücreleri, pankreatik adacik kaynakli kök hücreler, ß- hücreleri+Pl-MSC kokültür sisteminden alinan ß-hücreleri ve ß-hücreleri+Pl- MSC kokültür sisteminden alinan PI-MSCilerin yükselen glukoz ile uyarilan insüin sekresyon sonuçlari. p<0.001 her bir deney sartinin 5.5 mmol/L Glukoz degerine gore , #p<0.05 ve ##p<0.001 her bir deney sartinin medyum uygulanip 5.5 mmol/L glukoz uygulanan degerine göre. M: FBS ve BSA içeren medyum; G: Glukotoksisite, L: Lipotoksisite ve GL: Glukolipotoksisite.

(B) Tablo insülin seviyelerini (ng/mg protein) göstermektedir. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak verilmistir.

Claims

ISTEMLER .
Hücre ölümü ve farklilasmasi ile iliskili tüm hastaliklarin tedavisinde, E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, UPF0361 protein C30rf37 homolog, Inhibin beta B chain, AryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, Res-related protein Ral-B, STAM-binding protein Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein 'l, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, Platelet glycoprotein Ib beta chain, Bifunctional protein NCOAT, Aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitoohondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1 Guanin deaminaz Alfa-1 asit glikoprotein Moleküllerinin veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNA*larini hedefleyen miRNA ve IncRNA'Iar gibi tüm RNA tiplerinin ilaç olarak kullanilmasi. .
Istem 1'e göre bir kullanim olup 'Özelligi diyabet, obezite ve iliskili metabolik hastaliklar ve insülin ile iliskili tüm hastaliklarin tedavisinde; ES ubiquitin-protein Iigase RNF181, UPFO361 protein C30rf37 homolog, inhibin beta B chain, aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, Platelet glycoprotein Ib beta chain, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, Guanin deaminaz ve AIfa-l-asit glikoprotein moleküllerinin veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNAilarini hedefleyen miRNA ve IncRNA”Iar gibi tüm RNA tiplerinin ilaç olarak kullanilmasidir.
Istem 2”ye göre bir kullanim olup diyabet tip l diyabet veya tip II diyabet olabilir.
Istem 2'ye göre bir kullanim olup diyabet ve obezite iliskili metabolik hastaliklar laktoz intoleransi, früktoz intoleransi, galaktozemi, glikojen depolama hastaligi, insülin direnci sendromu, sendrom X,dir.
Istem 2”ye göre bir kullanim olup diyabet ve obezite ile iliskili olarak ortaya çikan hastaliklar retinopati, noropati, nefropati, ayak ülerleri, hipertansiyon, hiperlipidemi, metabolik sendrom, safra kesesi hastaliklari, bazi kanser türleri, osteoartirit, kalp ve damar hastaliklari, felç, uyku apnesi, karaciger hastalagi, astim, solunum zorlugu, menstruasyon düzensizlikleri, kas-iskelet sistemi problemleri, cilt hastaliklari, polikistik over sendromu, immün sistem bozukluklari gibi çesitli hastaliklardir. .
Istem 1”e göre bir kullanim olup neoplastik hastaliklarin tedavisinde E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, UPF0361 protein Cßorfß? homolog, inhibin beta B chain, aryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein, Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, Platelet glycoprotein lb beta chain, bifunctional protein NCOAT, aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial, Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1, Guanin deaminaz ve AIfa-1-asit glikoprotein moleküllerinin veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNA5larini hedefleyen miRNA ve IncRNA'Iar gibi tüm RNA tiplerinin ilaç olarak kullanilmasidir. . istem öiya göre bir kullanim olup neoplastik hastalik meme kanseri, prostat kanseri, kolorektal kanser, deri kanseri, küçük hücreli akciger kanseri, küçük hücreli olmayan akciger kanseri, mezotelyom, gastrointestinal kanser, pankreas kanseri, gliyoblastom, vulva kanseri, rahim agzi kanseri, endometriyal karsinom, yumurtalik kanseri, karaciger kanseri, hepatom, mesane kanseri, böbrek kanseri, tükürük bezi karsinomu, tiroid kanseri ve çesitli bas ve boyun kanserlerini içerir. .
Istem 1-7iden herhangi birine göre bir kullanim olup söz konusu moleküller en az bir antidiyabetik ajan veya antiobezite ajani veya antiinflamatuvar ajan veya bunlarin kombinasyonu ile kombine olarak kullanilir.
Istem 8'e göre bir kullanim olup antidiyabetik ajan insülin analoglari, insülin duyarlastirici ajanlar, insülin sekretegoglar, aldoz redüktaz inhibitörleri, alfa glukosidoz inhibitörleri, amilin analoglari, peptid analoglari, sodyum glikoz trasporter 2 (SGLT) inhibitörleri, glikosurik ajanlardan olusan ana gruplarin içerisinden seçilebilir 10.
Istem 8'e göre bir kullanim olup anti obezite ajani 4-metil amfetamin, amfekloral, amfepentoreks, amfepramon, aminoreks, amfetamin, atomoksetin, benfluroreks, benzfetamin, bupropion, katin, katinon, klorfentermin, siklazindol, klobenzoreks, kloforeks, clominoreks, clotermin, deksfenfluramin, dektroamfetamin, deksmetilfenidat, difemetoreks, dimetilkatinon, difemetoksidin, efedrin, efedra, etilamfetamin, etoloreks, fenbutrazat, fenkamfamin, fenetilin, fenfluramin, fenproporeks, fludoreks, fluminoreks, furfenoreks, indanoreks, khat, Ievopropilheksedrin, lisdeksamfetamin, manifaksin, mazindol, mefenoreks, metamtetamin, metilfenidat, norfenfluramin, pemolin, pentoreks, fendimetrazin, fenetilamin, fenmetrazin, fentermin, fenilpropanolamin, pisiloreks, pipradrol, prolintan, propilheksedrin, psödoefedrin, pirovaleron, radafaksin, reboksetin, setazindol, sibutramin, sinefrin, tesofensin, viloksazin, ksilopropamin, zilofuramin, drinabant, ibipinabant, otenabant, rimonabant, rosonabant, surinabant, taranabant, 5-HTP, galaktomannan, glukomannan, L-DOPA, L- fenilalanin, L-triptofan, L-tirosin, Iorkaserin, Lu AA-33810, neltrekson, nalokson, oksintomodulin, P57, peptit YY, topiramat, yohimbin, zonisamid, su, setilistat, 2,4-dinitrofen0l, dirlotapid, miltratapid, oleoyl estron, orlistat, simmondsin, sterkulia'dan olusan bir grubun içerisinden veya bunlarin ikili veya üçlü kombinasyonlarindan olusan bir grubun içerisinden seçilir. .
Istem 8'e göre bir kullanim olup antiinflamatuvar ajanlar pirazolon/pirazolidinler, salisilatlar, asetik asit türevleri, oksikamlar, propiyonik asit türevleri, N-arilantralinik asitleri, koksibler ve diger alanlardan olusan genel gruplarin içerisinden seçilir.
12.H'ucre ölümü ve farklilasmasi ile iliskili tüm hastaliklarin tedavisinde kullanima uygun, etken madde olarak E3 ubiquitin-protein Iigase RNF181, UPF0361 protein C30rf37 homolog, Inhibin beta B chain, AryI-hydrocarbon-interacting-protein-Iike 1, Ras-related protein Ral-B, STAM-binding protein Brain-specific angiogenesis inhibitor 1-associated protein 2-Iike protein 1, NADH dehydrogenase (ubiquinone) iron-sulfur protein 6 mitochondrial, Platelet glycoprotein Ib beta chain, Bifunctional protein NCOAT, Aldolase B, D-beta-hydroxybutirate dehydrogenase mitochondrial, ATP synthase subunit b mitochondrial. Betaine-homocysteine S-methyltransferase 1 Guanin deaminaz Alfa-1 asit glikoprotein moleküllerini veya iliskili DNA, mRNA veya bunlarin mRNA*larini hedefleyen miRNA ve lncRNA'Iar gibi tüm RNA tiplerini içeren farmasötik bilesimler.
13.Istem 12'ye göre bir farmas'otik bilesim olup en az bir diger etken madde içerir.
14.Istem 13'e göre bir farmasötik bilesim olup diger etken madde antidiyabetik, antiobezite, antiinflamatuvar ajanlar içerisinden seçilir.
15.Istem 12-14'ten herhangi birine göre bir farmasötik bilesim olup en az bir yardimci madde içerir.
16.Istem 12-15'dan herhangi birine göre bir farmasötik bilesim olup oral yoldan, rektal yoldan, vajinal yoldan veya intratumoral, subk'i'itan, intrak'utan, intravenöz, intraserebroventriküler, intram'üsk'üler, intra- arteryal, intratrakeal, intranazal, veya interperitonel olarak, parenteral olarak, topikal olarak veya medikal cihazlar vasitasi ile hastaya uygulanabilir bir dozaj formunda hazirlanir.
17.Istem 12-16*den herhangi birine göre bir farmasbtik bilesim olup mevcut bulusa uygun formülasyonlar nanopartik'uller, lipozomlar ve diger benzer tasiyicilar araciligiyla, hücrelere hedeflenerek veya hücreler ile tasinmaya uygun sekilde hazirlanir.