[go: up one dir, main page]

SU957835A1 - Method of producing aminoacid and lower peptide mixture - Google Patents

Method of producing aminoacid and lower peptide mixture Download PDF

Info

Publication number
SU957835A1
SU957835A1 SU813247623A SU3247623A SU957835A1 SU 957835 A1 SU957835 A1 SU 957835A1 SU 813247623 A SU813247623 A SU 813247623A SU 3247623 A SU3247623 A SU 3247623A SU 957835 A1 SU957835 A1 SU 957835A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
peptide mixture
amino acids
autolysate
lower peptide
mixture
Prior art date
Application number
SU813247623A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Андрей Николаевич Клюквин
Давид Исаакович Островский
Леонид Васильевич Дмитренко
Вера Александровна Попова
Надежда Федоровна Езерская
Андрис Екабович Гутманис
Андрис Хугович Зицманис
Мара Альбертовна Шавдина
Original Assignee
Научно-Производственное Гидролизное Объединение
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Научно-Производственное Гидролизное Объединение filed Critical Научно-Производственное Гидролизное Объединение
Priority to SU813247623A priority Critical patent/SU957835A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU957835A1 publication Critical patent/SU957835A1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промьшшенности, в частности к способам получени  смё-, си аминокислот и низших пептидов.The invention relates to the microbiological industry, in particular, to methods for the preparation of blended, amino acid and lower peptides.

Известен способ получени  смеси аминокислот и низших пептидов, предусматривающий кип чение дрожжей в кислом растворе в присутствии катионита Ку-2 с последук цей десорбцией аминокислот С11.A known method of producing a mixture of amino acids and lower peptides involves boiling the yeast in an acidic solution in the presence of the Ku-2 cation exchanger followed by desorption of the C11 amino acids.

Недостатком этого способа  вл етс  низкое качество целевого продукта.The disadvantage of this method is the low quality of the target product.

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому по технической сущности и достигаемому эффекту  вл етс  способ получени  смеси аминокислот и низших пептидов, предусматривающий автолиз дрожжей при нагревании в присутствии плазмолизующего и стерилизующего агента с последующей очисткой автолиз&та путем пропускани  его через анионообменную смолу. :огласно известному способу очистку ;автолиза провод т путем пропускани  автЬлиэата через слабоосновной макропористый анионит Иа-1р и катионообменную смолу КУ-2 в водородной форме, элюциеП аминокислот и низших пептидов со смолы Ку-2 аммиаком, упариванием элюата и сушкой целевого продукта С2 .The closest technical solution to the proposed technical essence and the achieved effect is a method of obtaining a mixture of amino acids and lower peptides, which provides for autolysis of yeast when heated in the presence of a plasmolyzing and sterilizing agent, followed by purification of autolysis & that by passing it through an anion exchange resin. : According to a known method of purification, autolysis is carried out by passing the auto-ethyate through the weakly basic macroporous anion exchanger Ia-1p and cation-exchange resin KU-2 in hydrogen form, Py-2 amino acid and lower peptides from Ku-2 resin with ammonia, evaporating the eluate and drying the desired product C2.

Однако процесс выделени  и очистки целевого продукта  вл етс  многоступенчатши , что приводит к потер м продукта в процессе выделени  на каждой стадии; больша  длительность процесса выделени  и очистки целевого продукта в целом и в особенности However, the isolation and purification process of the target product is multistage, which leads to product loss during the isolation process at each stage; long duration of the process of isolation and purification of the target product in general and in particular

10 услови  проведени  фильтрации автолизата через смолу ИА-1р при рН 5-6 приводит к неизбежному включению в технологические стадии неоднократшлх стерилизаций автолизата из-за возмож15 ности бактериального иифицировани  растворов, содержаидах биологически активные вещества; кроме того, продукт содержит в качестве примеси нуклеинов|ле кислоты до 1%, тогда The 10 conditions for filtration of autolysate through resin IA-1p at pH 5-6 lead to the inevitable inclusion in the technological stages of repeated sterilizations of autolysate due to the possibility of bacterial identification of solutions containing biologically active substances; in addition, the product contains as an impurity nucleins | le acid up to 1%, then

20 как содержание их не должно превышать 0,5%; продукт загр знен крас Iqи вI веществами.20 as their content should not exceed 0.5%; the product is contaminated with color Iqi iI substances.

Целью изобретени   вл етс  повышение выхода целевого продукта, а 25 также упрощение и удешевление процесса . ,.The aim of the invention is to increase the yield of the target product, and 25 also to simplify and reduce the cost of the process. ,

Поставленна  цель достигаетс  тем, что согласно способу получени  смеси 1минокислот и низших пепти30 дов, предусматривающему автолиз дрожжей при нагревании в присутствии плазмолизующего и стерилизующего агента с последующей очисткой автолизата путем пропускани  его через анионообмеиную смолу, перед очисткой автолизат обрабатывают щело чным агентом до рН 10-13, фильтруют, а из анионообменных.смол используют высокоосновной анионит АРА в ОН-форме . Сущность способа заключаетс  в том, что обработка автолизата щелочным агентом приводит к быстрой флокул ции высокомолекул рных фрагментов белков, оставшихс  после цеитрифугировани  мелкодисперсных клеточных остатков. Кроме того, поувышение рН до величины 10-13 позво-, л ет исключить стадию стерилизации, так как в этих услови х веро тность бактериального .заражени  мала. Пропускание щелочного автолизата через высокоосновный анионит типа А в ОН-форме позвол ет отделитьнуклео тиды, олигонуклеотиды, не подвергшиес  разрушению при автолизе, пигментирующие вещества. Ионообменна  очистка осуществл етс  в одну стадию. При этом амино кислоты и низшие пептиды не сорбиру ютс  анионитом. Пример. В промытый и просте рилизованный аппарат заливают 250 мл дистиллированной водаа, нагревают до 50°С, загружают при перемешивании 1 кг свежих прессованных дрожжей, добавл ют 1,2 мл толуола. Аппарат герметически закрывают, нагревают до 48°С и при непрерывном перемешив нии выдерживают при этой температуре 20 ч. Автолизат,.. содержащий 58 г/л аминокислот , 20 г/л низших пептидов, 12 г/л нуклеиновых кислот, клеточJ ыe остатки 160 г/л и пигментирующие вещества,центрифугируют при 8000 об/м в течение 10 мин. Осадок промывают 320 мл воды и снова центрифугируют .при 8000 в течение 20 мин. Супернатант и промывные воды объе дин ют и обрабатывают 25%-ным раствором aMNniaKa до рН 11,0. Образовавшийс  осадок мелкодисперсных кле точных остатков, высокомолекул рных фрагментов белков, через 10 мин отфильтровывают на бумажном фильтре. Фильтрат пропускают через колонку с высокоосновным анионитом АРА в ОН-форме (80 г, д 33 мм, и 350 мм) со скоростью 60 мл/ч. Анионит npONttilвают 300 мл аммиачной воды при рН 11,0, присоедин ют их к раствору после прохождени  автолизата через анионит, упаривают под вакуумом и . высушивают. На 1 кг прессованных дрожгкей выход атлинокислот из низших пептидов составл ет 68 г. Из биомассы рожжей при этой схеме выделени  целевого продукта можно получить также эргостерин и смесь нуклеиновых кислот. Полученна  смесь аминокислот и низших пептидов содержит в своем составе все незаменимые аминокислоты , а соотношение незаменимых аминокислот (Н) к общему азоту (О) соответствует требовани м, предъ вл емым к высокопитательным смес м. Определение аминокислотного состава провод т с использованием аминоанализатора фирмы ЛКВ с- точностью по 3%. В таблице приводитс  сравнительна  характеристика смеси аминокислот и низших пептидов, полученной известным и предлагаемым спрсобс ми. Выход целевого продукта на 1 кг прессованных , дрожжей, г Содержание низших пептидов,% Содержание нуклеиновых кислот , % Зольность,% Т желые меОтсутстОтсутстталлы , кач. вуют вуют Содержание незаменимых аминокислот, г/1бг общего азота Изолейцин Лейцин Фенилалании Тирозин Триптофан Метионии ЦистинцистеинThis goal is achieved in that according to the method of obtaining a mixture of 1mino acids and lower peptides, which involves autolysis of yeast when heated in the presence of a plasmolyzing and sterilizing agent, followed by purification of the autolysate by passing it through an anion exchange resin, the autolysate is treated with an alkaline agent to pH 10-13 before purification , filtered, and from anion exchange resins use highly basic anion exchanger APA in OH-form. The essence of the method is that the treatment of the autolysate with an alkaline agent results in the rapid flocculation of high molecular weight protein fragments remaining after zeitrifugation of fine cellular residues. In addition, an increase in pH to a value of 10–13 makes it possible to exclude the sterilization stage, since under these conditions the probability of bacterial contamination is low. The transmission of an alkaline autolysate through a highly basic type A anion exchanger in the OH form allows the separation of nucleotides, oligonucleotides that have not been destroyed during autolysis, and pigment substances. The ion exchange purification is carried out in one step. At the same time, amino acids and lower peptides are not sorbed by anion exchange resin. Example. 250 ml of distilled water are poured into the washed and sterilized apparatus, heated to 50 ° C, loaded with stirring 1 kg of freshly pressed yeast, 1.2 ml of toluene are added. The apparatus is hermetically sealed, heated to 48 ° C and maintained at this temperature for 20 hours at this temperature. Autolysate, containing 58 g / l of amino acids, 20 g / l of lower peptides, 12 g / l of nucleic acids, cell residues 160 g / l and pigment substances, centrifuged at 8000 r / m for 10 min. The precipitate is washed with 320 ml of water and centrifuged again at 8000 for 20 minutes. The supernatant and wash water are combined and treated with a 25% aMNniaKa solution to a pH of 11.0. A precipitate of fine cellular residues, high molecular weight protein fragments, is filtered off on a paper filter after 10 minutes. The filtrate is passed through a column with highly basic anion exchanger APA in OH-form (80 g, d 33 mm, and 350 mm) at a rate of 60 ml / h. Anion exchanger npONttil is 300 ml of ammonia water at pH 11.0, they are added to the solution after the autolysate passes through the anion exchanger, evaporated under vacuum and. dried. For 1 kg of compressed yeast, the yield of atlinic acids from lower peptides is 68 g. Ergosterol and a mixture of nucleic acids can also be obtained from the biomass of rye for this extraction scheme of the target product. The resulting mixture of amino acids and lower peptides contains all essential amino acids, and the ratio of essential amino acids (H) to total nitrogen (O) meets the requirements of high-nutritional mixtures. Determination of the amino acid composition is carried out using an LKB aminoanalyzer - accuracy of 3%. The table gives a comparative description of a mixture of amino acids and lower peptides obtained from known and proposed sprays. The yield of the target product per 1 kg of pressed, yeast, g The content of lower peptides,% The content of nucleic acids,% Ash content,% T ellIoNoNoNoNoNoNoNST tolls, quality. content of essential amino acids, g / 1bg total nitrogen Isoleucine Leucine Phenylalania Tyrosine Tryptophan Methionia Cystincystine

Продолжение таблицы Таким образом, предложенный спо-. соб позвол ет повысить выход целевого продукта на 13-26% по сравнению с известным, а также сократить расход реактивов и врем  выделени  про- дукта за счет резкого снижени  в нем концентрации нуклеиновых кислот.Continuation of the table Thus, the proposed method. This method allows to increase the yield of the target product by 13-26% in comparison with the known product, as well as to reduce the consumption of reagents and the time of product isolation due to a sharp decrease in the concentration of nucleic acids.

Claims (2)

1. Авторское свидетельство СССР 355219, кл. С 12 D 13/06, 1972, 1. USSR author's certificate 355219, cl. C 12 D 13/06, 1972, 2. Авторское свидетельство СССР 602543, кл. С 12 D 13/06, 1978.2. USSR author's certificate 602543, cl. C 12 D 13/06, 1978.
SU813247623A 1981-02-12 1981-02-12 Method of producing aminoacid and lower peptide mixture SU957835A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU813247623A SU957835A1 (en) 1981-02-12 1981-02-12 Method of producing aminoacid and lower peptide mixture

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU813247623A SU957835A1 (en) 1981-02-12 1981-02-12 Method of producing aminoacid and lower peptide mixture

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU957835A1 true SU957835A1 (en) 1982-09-15

Family

ID=20942918

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU813247623A SU957835A1 (en) 1981-02-12 1981-02-12 Method of producing aminoacid and lower peptide mixture

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU957835A1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2284356C1 (en) * 2005-03-14 2006-09-27 Давид Исаакович Островский Method for preparing amino acids and lower peptides mixture
RU2544959C1 (en) * 2014-04-04 2015-03-20 Александр Владимирович Бубнов Method of production of peptides

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2284356C1 (en) * 2005-03-14 2006-09-27 Давид Исаакович Островский Method for preparing amino acids and lower peptides mixture
RU2544959C1 (en) * 2014-04-04 2015-03-20 Александр Владимирович Бубнов Method of production of peptides

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS63284199A (en) Production of k-caseinglycomacropeptide
EP0200944A2 (en) Process for purifying tryptophan
SU957835A1 (en) Method of producing aminoacid and lower peptide mixture
CN110117310B (en) Purification method of daptomycin
JP3347822B2 (en) Extraction and purification method of quinic acid
EP1159295B1 (en) Method of purifying whey of lactic acid fermentation by electrodialysis
RU2055585C1 (en) Method of shilagit isolation
SU654612A1 (en) Method isolating c cytochrome
JPS6160050B2 (en)
SU698980A1 (en) Method of preparing mixture of aminoacids
RU2119495C1 (en) Method of isolation of antibiotic gentamycin
WO1994012197A1 (en) Process for the manufacture of a preparation having immunomodulating activity and stimulating cytokine formation by extracting plants and plant residues
JPH05117195A (en) Purification of polyglycerol
US4072667A (en) Process for recovering microbial cellular proteins
RU2284356C1 (en) Method for preparing amino acids and lower peptides mixture
KR102441251B1 (en) Method for Removal of Residual Solvent from Vancomycin
JPH0718256A (en) Method for treating coffee grounds
JPH03198762A (en) Making of condiment
RU2079555C1 (en) Method for isolation of biologically active substances
RU2195316C1 (en) Method of proteinase basic inhibitor preparing
RU2042358C1 (en) Method of preparing factor ix concentrate
SU1740417A1 (en) Method for obtaining enzyme preparation
RU2025488C1 (en) Method for preparation of mixture of amino acids and nuclein components
SU1708854A1 (en) Method for obtaining tanning extract from tannin-containing material
JPS62215564A (en) Purification of tryptophan