SU425940A1 - Способ получения синтетическогодвухнитчатого полирибонуклеотидногокомплекса - Google Patents

Description

Изобретение от«оситс  к области ме|Дицины . Известен способ получени  комплексов полирибонуклеотидов путем смешени  соответствующих полинуклеотидов в фосфатном буфере с иоЕной силой 0,15 М с последующим выдерживанием на холоду при 0° С. Полученный комплекс обладает интерфероногенными свойствами. Цель изобретени  - повышение иитерфероногенной активности и снижение токсичности комплекса. Дл  этого в качестве комплементарлого полинуклеотида примен ют полигуаниловую кислоту, смесь инкубируют при температуре от -3° С до 10° С в течение 3-10 суток. Дл  получени  комплексов полилуаниловую кислоту синтезируют инкубированием гуанозин-5-дИфоофата при 60° С в присутствии высокоочИщенной полинуклеотидфосфорилазы из Е. соН и Мп5О4, а лолицитидиловую КИКУЮту - инкубированием лри 37° С .цитидин-5дифосфата с полинуклеотидфосфорилазой из Micrococus lysodeikficus в присутствии MgCl2. Поливуклеотиды охарактеризованы константами седиментации дл  поли-Г 7,665, дл  поли-Ц 2,045. Пример. Смешивают растворы 1 мг поли-Г в 1 мл раствора 0,15М NaCl в 0,006М фосфатном буфере рН 7 и I жг поли-Ц в 1 мл ТОГО же .буфера. Полученный раствор довод т этим же буферным раствором с NaCl до 20 лы. Раствор выдерживают при 0° и через 10 дней испытывают на интерфероногенную активность . Наличие комплекса доказано типерхромным эффектом в 8-10% при 260 нм ,и гипохромным эффектом в 15-17% при 280 нм. И,нтер|фе ра.ны, индуцированные препаратами , активны лишь в использованных гамологичеоких клеточных си стемах и не обладают противовирусными свойствами в гетерологичных культурах -клеток. Их активность в гомологических культурах клеток про вл етс  в отнощении р да вирусов Чигкунгуни , Леса Семлики, 1вез1И1кул 1р 0|ГО стоматита и не ов зана с непосредственным воздействием на вирус , так как услови ми методики предусмотрено отмывание клеток от препарата до добавлени  вируса. При внутрДВенном «ведении препарата |(поли-Г) |(поли-Ц) белым мышам не наблюдают токсичность при максимально используемой дозе 50 мг/кг, терапевтический индекс препарата 5-10X10. Полученные данные показывают чрезвычайно высокую активность комплекса (поли-Г) (поли-Ц), который в концентрации 0,025 мкг/мл уже обуславливает подавление образовани  более 50% бл шек вируса.

Таким образом, разработанный спосо.б лозвол ет получить двухнитчатый комплекс синтетических полирибонуклеотидов (поли-Г) |(поли-Ц), который  вл етс  высокоактивным интерфероногеном.

Предмет изобретени  Способ получени  оинтетического двухиитчатого лолирибоауклеотидного «омплешса путем смешени  в равных количествах поли-Ц с полвнуклеотидом, отличающийс  тем, что, с целью повышени  интерфероногенной активности и снижени  токсичности комплекса, в качестве комплементарного пдлинуклеотида примен ют полигуаниловую кислоту, смесь инкубируют При температуре от -3° С до 10°С в течение 3-10 суток.