SU1673973A1 - Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы - Google Patents
Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1673973A1 SU1673973A1 SU904494776A SU4494776A SU1673973A1 SU 1673973 A1 SU1673973 A1 SU 1673973A1 SU 904494776 A SU904494776 A SU 904494776A SU 4494776 A SU4494776 A SU 4494776A SU 1673973 A1 SU1673973 A1 SU 1673973A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- syringae
- wieringae
- reagent
- plant
- syrlngae
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 10
- 241000589615 Pseudomonas syringae Species 0.000 title claims description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 17
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 3
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 claims description 2
- 240000006677 Vicia faba Species 0.000 claims description 2
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims 2
- 241000145542 Pseudomonas marginata Species 0.000 claims 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 claims 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 claims 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 4
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 abstract description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 abstract 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 235000002096 Vicia faba var. equina Nutrition 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 210000000489 pit eye Anatomy 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к сельскохоз йственной микробиологии, в частности к иммунохимическим методам экспресс-диагностики фитозаболеваний, вызванных PSCUDOMONAS SYRINGAC. Цель изобретени - ускорение диагностики заболевани . Способ диагностики заболеваний растений, вызванныхР. SYRINGAC IV серогруппы заключаетс в следующем. На предметном стекле смешивают 0,05 мл водносолевого экстракта исследуемого растительного материала и 0,025 мл реагента дл диагностики P. SYRINGAC IV серогруппы, который предварительно готов т из антисыворотки к О-специфическому антигену P. WIERINGAC штамм 7923 и 10%-ной суспензии клеток STAPHYLOCOCCUS AUREUS штамм COWAN - 1, вз тых в соотношении 1:5 - 1:50. О наличии фитопатогенных бактерий P. SYRINGAL IV серогруппы суд т через 30 - 60 с реакции агглютинации. Способ позвол ет ускорить врем проведени реакции и уменьшить расход сыворотки на каждый анализ. 5 табл.
Description
Изобретение относитс к сельскохоз йственной микробиологии, в частности к иммунохимическим методам экспресс- диагностики фитозаболеваний, вызванных Pseudomonas syringae
Цель изобретени - ускорение диагностики заболевани .
Способ диагностики заболеваний растений , вызванных Pseudomonas syringae IV серогруппы, заключаетс в следующем.
На предметном стекле смешивают 0,05 мл водносолевою экстракта исследуемого растительного материала и 0,025 мл реагента дл диапностики P.syringae IV серогруппы который предварительно готов т из-антисыворотки к Оспецифическому
агеьту Pw er nggr Х|Тамг РГЗ и суспензии клеток Staphylococcus штэмм Cowan-1. вз тых в соотношении i.5- 1 50. О наличии фитопатогенных бактерий P.syringae IV серогруппы суд т по прохождению через 30-60 с реакции агглютинации
Пример 1. отучение имуннсй сыворотки к экзоцепгюр рному 0-антигену Р wieringae7923.
Дл получени специфической энти- сыворотки кроликов иммунизируют экэо- целлюл рным 0-специфическ1 полиса харидом (ЭОПС). В препарат ЭОПС обнаружено 56% углеводов, менее 1% белка
Кроликов иммунизируют ЭОПС P.wieringae 7923 по комбинированной схеО
VI
сх ю VI
CJ
ме с интервалом между инъекци ми 2 недели .
Iвведение - вунтримышечно 2 мг ЭОПС в 0,5 мл изотонического раствора NaCI и 0,5 мл полного адьюванта Фрейнда.
IIвведение - внутримышечно 5 мг ЭОПС в 0,5 мл изотонического раствора NaCI и 0,5 мл полного адьюванта Фрейнда .
IIIвведение внутривенно 2,5 мг ЭОПС в 1 мл изотонического раствора NaCI.
IVвведение - внутривенно 3 мг ЭОПС в 1 мл изотонического раствора NaCI. Кровь брали на 8-14-й день после последней инъекции. Антисыворотка к ЭОПС агглюти- нировала гомологичную культуру в разведении 1:50000.
Пример 2. Способ получени реагента .
Реагент дл экспресс-диагностики бак- терий P.syrlngae IV серогруппы получают сенсибилизацией клеток Staphylococcus aureus штамм Cowan-1, содержащих белок А, специфической иммунной сывороткой к экзоцеллюл рному 0-антигену P.wierlngae 7923. Дл этого 0,1 мл нативной иммунной сыворотки инкубируют с 1 мл 10%-ной стафилококковой суспензии из клеток, полученных при 18-часовом культивировании на м сопептонном агаре, отмывают от не- присоединившихс к белку А антител в течение 10-15 мин при центрифугировании при 3 тыс. об/мин. Осадок, представл ющий собой белок А-содержащие корпускулы стафилококка , обработанные иммуноглобу- линами к экзоцеллюл рному 0-антигену P.wierlngae 7923, суспендируют в 10 мл физиологического раствора: полученна суспензи вл етс готовым реагентом дл определени антигенов P.syringae IV серо- группы, способным хранитьс без потери активности при +4°С в течение 2 мес цев. .Реагент обладает высокой специфичностью в отношении антигенов P.syringae IV серогруппы (табл.1).
Пример 3. Применение реагента дл обнаружени фитопатогенных бактерий P.syringae IV серогруппы.
Представител ми IV серогруппы фитопатогенных P.syringae 2846 и 4394 и P.wierlngae 7923 провод т искусственное заражение пшеницы, фасоли, конских бобов, перца, табака. Из образцов искусственно зараженных растений готов т водно- солевые экстракты путем измельчени растительной массы и экстракцией физиологическим раствором с последующим фильтрованием.
Реакции осуществл ют на предметном стекле: к 0,025 мл реагента добавл ют 0,05 мл растительного экстракта. В течение 30-60 с производ т учет реакции на наличие агглютинатов (табл.2).
Пример 4. Сравнение предлагаемого технического решени с известным.
Дл проведени реакции агглютинации используют сыворотку, полученную аналогично описанной в примере 1, и реагент по примеру 2. Реакцию осуществл ют с чистыми культурами указанных фитопатогенных бактерий.
Полученные результаты представлены е табл.3.
Пример 5. Исследована зависимость чувствительности реакции от концентрации стафилококковой суспензии при приготовлении реагента и концентрации сыворотки при приготовлении реагента.
Данные приведены в табл.4 и 5.
Как видно из табл.4, дл приготовлени реагента дл осуществлени способа экспресс-диагностики заболеваний растений, вызванных P.syringae IV серогруппы, можно использовать 5-15%-ную взвесь стафилококка . При использовании 15%-ной взвеси вследствие большой густоты затрудн етс учет реакции. Сравнива результаты реакции с использованием 5-15%-ной взвеси стафилококка, можно сделать вывод, что наиболее целесообразно использовать 10% ную взвесь.
Как видно из табл.5, оптимальным вл етс соотношение сыворотки и взвеси стафилококка 1:10.
Способ позвол ет ускорить врем проведени реакции и уменьшить расход сыворотки на каждый анализ.
Claims (1)
- Формула изобретени Способ диагностики заболевани растений , вызванных Pseudomonas syrlngae IV серогруппы, включающий нанесение на предметное стекло экстракта исследуемых растений с последующим проведением серологической реакции со специфическим антителосодержащим реагентом и учетом результатов, отличающийс тем, что, с целью ускорени диагностики заболевани , в качестве реагента используют сыворотку к 0-специфическому антигену Pseudomonas wieringae 7923, адсорбированную на клетках Staphylococcus aureus Cowan-1.Таблица 1 Специфичность реагента дл экспресс-обнаружени P.syrlngae IVceporpynnuВидP.syringae, 2846 P.syrlngae 4394 P.wieringae. 7923E. collP. aeruglnosaP. cichorll 9048P. gladioli pv allllcolaВы вление возбудител в экстрактах зараженных растенийВид растенийШтамм, используемый дл заражениПерец P.syrlngae P.syrlngae P.wieringaeКо нтроль-неинфициро ванное растение перца Табак P.syringae P.syringae P.wieringaeКо нтроль-неинфициро ванное растение табака Конские бобььP.syringae P.syrlngae P.wieringaeКонтроль-неинфицированное растение конских бобов Пшеница P.syringae P.syringae P.wieringaeКонтроль-неинфицированное растение пшеницы Фасоль P.syringae P.syringae P.wieringaeКонтроль-неинфицированное растение фасолиТаблица 3 Сравнение способов с применением реагента и нативной сывороткиРезультат реакции++++ ++++-H-f+Таблица 2Результат реакции+-Н-+ ++++ ++++++++ ++++ +++++ -+++++4 -М-++4-4-4-4- 4-1-4-4- ++++++++ ++++ -М-+4Зависимость чувствительности реакции от концентрации стафилококковой суспензии при приготовлении реагентаЗависимость чувствительности реакции от концентрации сыворотки при приготовлении реагентаТаблица 4Таблица 5
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904494776A SU1673973A1 (ru) | 1990-07-21 | 1990-07-21 | Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU904494776A SU1673973A1 (ru) | 1990-07-21 | 1990-07-21 | Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1673973A1 true SU1673973A1 (ru) | 1991-08-30 |
Family
ID=21404459
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU904494776A SU1673973A1 (ru) | 1990-07-21 | 1990-07-21 | Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1673973A1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101865918A (zh) * | 2009-04-15 | 2010-10-20 | 云南农业大学 | 一种快速鉴定烟草野火病菌的试剂盒及其鉴定方法 |
| US8011132B2 (en) | 2004-12-23 | 2011-09-06 | Becker Underwood Inc. | Enhanced shelf life and on seed stabilization of liquid bacterium inoculants |
| US8020343B2 (en) | 2004-12-23 | 2011-09-20 | Becker Underwood Inc. | Enhanced shelf life and on seed stabilization of liquid bacterium inoculants |
| CN104360069B (zh) * | 2014-11-26 | 2016-04-13 | 江南大学 | 一种检测丁香假单胞菌丁香致病变种的双抗体夹心酶联免疫法 |
-
1990
- 1990-07-21 SU SU904494776A patent/SU1673973A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Защита растений, 1978, М 11, с.40-41, * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8011132B2 (en) | 2004-12-23 | 2011-09-06 | Becker Underwood Inc. | Enhanced shelf life and on seed stabilization of liquid bacterium inoculants |
| US8020343B2 (en) | 2004-12-23 | 2011-09-20 | Becker Underwood Inc. | Enhanced shelf life and on seed stabilization of liquid bacterium inoculants |
| CN101865918A (zh) * | 2009-04-15 | 2010-10-20 | 云南农业大学 | 一种快速鉴定烟草野火病菌的试剂盒及其鉴定方法 |
| CN104360069B (zh) * | 2014-11-26 | 2016-04-13 | 江南大学 | 一种检测丁香假单胞菌丁香致病变种的双抗体夹心酶联免疫法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cinader et al. | Acquired immune tolerance to human albumin and the response to subsequent injections of diazo human albumin | |
| Diaz et al. | Radial immunodiffusion test with a Brucella polysaccharide antigen for differentiating infected from vaccinated cattle | |
| Tripp | Hemagglutinin in the blood of the oyster Crassostrea virginica | |
| CA1086224A (en) | Neisseria meningitides antigens sorbent compositions for neisseria gonorrhoeae test | |
| Baker et al. | Importance of Actinomyces and certain gram-negative anaerobic organisms in the transformation of lymphocytes from patients with periodontal disease | |
| Corbel et al. | Differentiation of the serological response to Yersinia enterocolitica and Brucella abortus in cattle | |
| The et al. | Conjugation of fluorescein isothiocyanate to antibodies: II. A reproducible method | |
| Magnadóttir et al. | A comparison of total and specific immunoglobulin levels in healthy Atlantic salmon (Salmo salar L.) and in salmon naturally infected with Aeromonas salmonicida subsp. achromogenes | |
| Kaufman et al. | Occurrence of serotypes among Histoplasma capsulatum strains | |
| US3636192A (en) | Meningococcal polysaccharide vaccines | |
| Baughn et al. | Detection of circulating immune complexes in the sera of rabbits with experimental syphilis: possible role in immunoregulation | |
| SU1673973A1 (ru) | Способ диагностики заболеваний растений, вызванных РSеUDомоNаS SYRINGae 1у серогруппы | |
| Chun | Identification and detection of Corynebacterium michiganese in tomato seed using the indirect enzyme-linked immunosorbent assay | |
| Lerner et al. | “Rheumatoid” serologic reactions in experimental animals. II. Bentonite flocculation test in rats with experimental arthritis | |
| Rake et al. | STUDIES ON MENINGOCOCCUS INFECTION: IV. The Antigenic Complex of the Meningococcus—Group-Specific Carbohydrate and Protein Fractions | |
| Kaplan et al. | Serotyping Cryptococcus neoformans by immunofluorescence | |
| Baer et al. | The Immunochemistry of Blood Group O: I. The Production of Precipitating and Agglutinating Antibodies in Chickens to Various Human and Hog Blood Group Substances | |
| Hill | Laboratory aspects of immune deficiency in children | |
| Palm et al. | Immunogenetic analysis of microsomal and non‐microsomal lipoproteins from normal and malignannt mouse tissues for histocompatibility‐2 (H‐2) antigens | |
| SU1762242A1 (ru) | Способ приготовлени диагностикума дл определени антигенов в реакции коагглютинации | |
| Phillips et al. | Identification of encapsulated and non-encapsulated Yersinia pestis by immunofluorescence tests using polyclonal and monoclonal antibodies | |
| RU2232989C1 (ru) | Способ получения тест-системы для определения антигенов цитотоксинассоциированных белков helicobacter pylori в биологическом материале инфицированных лиц реакцией коагглютинации | |
| Hirschberg et al. | Fractions of Brucella for adsorbed antigens for collodion agglutination and hemagglutination tests | |
| Marx, jr et al. | Antibody-independent complement consumption by Micropolyspora faeni | |
| Yap et al. | The use of cyst antigen in the serodiagnosis of amoebiasis |