SU1314251A1 - Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation - Google Patents
Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation Download PDFInfo
- Publication number
- SU1314251A1 SU1314251A1 SU843822723A SU3822723A SU1314251A1 SU 1314251 A1 SU1314251 A1 SU 1314251A1 SU 843822723 A SU843822723 A SU 843822723A SU 3822723 A SU3822723 A SU 3822723A SU 1314251 A1 SU1314251 A1 SU 1314251A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- biological tissues
- fixation
- galascorbine
- ethyl alcohol
- histological investigation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000011835 investigation Methods 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 abstract description 5
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 abstract description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract 1
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000489 osmium tetroxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012285 osmium tetroxide Substances 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- -1 azure-eosin Chemical compound 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- YBGOLOJQJWLUQP-UHFFFAOYSA-N gallocyanin Chemical compound OC(=O)C1=CC(=O)C(O)=C2OC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 YBGOLOJQJWLUQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 239000000983 mordant dye Substances 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к гистологии . Цель изобретени - улучшение качества фиксации тканей. Образцы биологических тканей обрабатывают жидкостью, содержащей формалин, лед ную уксусную кислоту, этиловый спирт и галаскорбин. Затем осуществл ют обработку материала по известным методикам. Способ позвол ет лучше сохранить р д микроструктур и повышает сродство к красител м.This invention relates to histology. The purpose of the invention is to improve the quality of tissue fixation. Samples of biological tissues are treated with a liquid containing formalin, glacial acetic acid, ethyl alcohol and galascorbine. Then, the material is processed by known methods. The method allows better retention of a number of microstructures and increases the affinity for dyes.
Description
1 one
Изобретение относитс к медицине а именно к гистологии.This invention relates to medicine, namely histology.
Цель изобретени - улучшение качества фиксации тканей.The purpose of the invention is to improve the quality of tissue fixation.
Способ осуществл ют путем обработки образцов биологических тканей в течение 1-5 сут при 15-25°С жидкостью , содержащей формалин, лед ну уксусную кислоту и 96%-ный этиловый спирт, а также галаскорбин при следующем соотнощении компонентов, мас.%:The method is carried out by processing biological tissue samples for 1-5 days at 15-25 ° C with a liquid containing formalin, ice and acetic acid and 96% ethyl alcohol, as well as galascorbine at the following ratio of components, wt.%:
Галаскорбин 3-5Galascorbine 3-5
Формалин3-5Formalin 3-5
Этиловый спиртEthanol
96%32-5296% 32-52
Лед на уксусна Acetic acid ice
кислотаОстальноеAcid Remaining
По окончании фиксации материал обрабатывают по известным методикам обезвоживают в 96%-ном и 100%-ном спирте, заключают в парафин, изготавливают срезы, окрашивают известными методами окраски.At the end of fixation, the material is processed by known methods and dehydrated in 96% and 100% alcohol, enclosed in paraffin, sections are made, and stained with known coloring methods.
Дополнительное улучшение, окраски достигают обработкой полученных после указанной фиксации гистологических срезов 1-2%-ным водным растворо четырехокиси осми в течение 5 мин при 15-25 0, после чего окрашивают по известным методикам.An additional improvement, staining is achieved by processing the histological sections obtained after the specified fixation with a 1-2% aqueous solution of osmium tetroxide for 5 min at 15-25 0, and then stained by known methods.
П р и мер. Кусочки органов и тканей толщиной 0,3-0,5 см фиксируют в течени е 1-5 сут при 15-25°С методом погружени в фиксирующей жидкости , приготовленной следующим образом ,Pr and measures. Pieces of organs and tissues 0.3-0.5 cm thick are fixed for 1-5 days at 15-25 ° C by immersion in fixing fluid prepared as follows,
4 г галаскорбина раствор ют в 47,5 мл лед ной уксусной кислоты до полного растворени , добавл ют 3,6 мл концентрированного формалина и 52 мл 96%-ного этилового спирта. -Объем фиксатора должен в 7-10 раз превышать объем фиксируемого материала . Оптимальный срок фиксации 3 сут. Фиксацию провод т в плотно закрывающихс емкост х. Хорошо про- фиксированные кусочки приобретают коричневый оттенок в св зи с под- кращиваюпдам эффектом галаскорбина. Повторно фиксатор не используют. По ле фиксации кусочки, не промыва в воде, обезвоживают в двух порци х этилового спирта в течение суток, заключают в парафин и приготавливают срезы толщиной 3-10 мк по известным методикам.4 g of galascorbine is dissolved in 47.5 ml of glacial acetic acid until completely dissolved, 3.6 ml of concentrated formalin and 52 ml of 96% ethyl alcohol are added. -The volume of the lock should be 7-10 times the amount of material to be fixed. The optimal fixation period is 3 days. The fixation is carried out in tightly closed containers. Well-fixed pieces acquire a brown tint due to the underlaying effect of galascorbine. Re-lock does not use. After fixation, the pieces, not rinsing in water, are dehydrated in two portions of ethyl alcohol during the day, enclosed in paraffin wax, and sections of 3-10 microns thick are prepared by known methods.
Окраску депарафинированных срезов провод т по известным методикамColoring of the dewaxed sections was carried out according to known methods.
142512142512
например гематоксилином и эозином, азур-эозином, крезил-виолетом по Нисслю, галлоцианином по Эйнарсону, железным гематоксилином по Гейденг гайну, с сокращением сроков выдержки в красител х в 2-10 раз и более раз по сравнению с прин тыми, контролиру визуально достаточность прокрашивани , или -после депарафинироJO вани и промывки в воде срезы вначале обрабатывают 1-2%-ным водным раствором четырехокиси осми в течение 5 мин при 15-25 С, промывают в воде 1 мин и затем окрашивают поfor example, hematoxylin and eosin, azure-eosin, cresyl-violet according to Nissl, gallocyanin according to Einarson, iron hematoxylin according to Heidengain, with a reduction in the aging time in dyes by 2-10 times or more compared to accepted ones; , or after vanishing and washing in water, the sections are first treated with a 1-2% aqueous solution of osmium tetroxide for 5 minutes at 15-25 ° C, washed in water for 1 minute and then stained by
15 известным методикам. При окраске протравными красител ми предпочтительно использовать 2%-ный раствор четырехокиси осми , при окраске Другими красител ми - 1%-ный. 20 Сравнительное исследование проводили на образцах тканей 0,3 - 0,5 см из головного мозга, сердца, печени, почек и легких. Образцы из каждого органа обрабатыва25 ли раздельно по известному и предлагаемому способам фиксации. Все последующие этапы подготовки материала к исследованию проводились тождественно .15 known techniques. When staining with mordant dyes, it is preferable to use a 2% solution of osmium tetroxide, and when staining with other dyes, it is preferable to use a 1% solution. 20 A comparative study was performed on tissue samples of 0.3-0.5 cm from the brain, heart, liver, kidneys and lungs. Samples from each organ were processed separately according to the known and proposed methods of fixation. All subsequent stages of preparation of the material for the study were carried out identically.
30 Варианты фиксатора, в которых соотношени ингредиентов выход т за пределы предлагаемого диапазона, дают менее эффективные результаты, В частности, увеличение концентра ,5 ции галаскорбина приводит к грубозернистой фиксации.30 Fixer options in which the ratios of ingredients go beyond the proposed range give less effective results. In particular, an increase in the concentration of galascorbine 5 leads to coarse-grained fixation.
Предлагаемый способ в более полном объеме обеспечивает стабилизацию и сохранение в ткан х белков и .The proposed method more fully ensures stabilization and preservation in the tissues of proteins and.
Q нуклеиновых кислот, эффективнее предохран ет ткани от возникновени артефактов, св занных с заключением образцов в парафин (в частности, разрывов ткани), лучше сохран ет некото 5 рые легко разрушающиес микростур- туры, например щеточную каемку эпители извитых канальцев почки, повышает сродство к красител м, что позвол ет сокращать врем окраски в 10 и более раз, повышает прочность св зывани тканевых структур с красител ми , что преп тствует быстрому выцветанию срезов, а также позвол ет вы вл ть с помощью обычных общегис55 тологических окрасок (гематоксилином и эозином, азур-эозином) р д микроструктур, которые при фиксации по известному способу вы вл ютс только при использовании специальныхQ nucleic acids, more effectively protects tissues from artifacts associated with the conclusion of samples in paraffin (in particular, tissue breaks), better retains some easily destroyed microsturtures, for example, the brush border of the convoluted tubule of the kidney, increases the affinity for dyes, which allows to reduce the dyeing time by a factor of 10 or more, increases the strength of the binding of tissue structures to dyes, which prevents the sections from fading rapidly, and also makes it possible to identify colors (hematoxylin and eosin, azure-eosin) are a series of microstructures that, when fixed by a known method, are detected only when using special
313142514313142514
методов окрасок, например тигроид с целью улучшени качества фиксации нервных клеток и поперечную исчер- тканей, фиксатор дополнительно, со- ченность кардиомиоцитов,держит галаскорбин при следующихstaining methods, for example, tigroid, in order to improve the quality of fixation of nerve cells and transverse stripping, the fixative additionally, the cardiomyocyte content, keeps galascorbin in the following
соотношени х компонентов, мас.%:the ratio of components, wt.%:
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843822723A SU1314251A1 (en) | 1984-12-05 | 1984-12-05 | Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU843822723A SU1314251A1 (en) | 1984-12-05 | 1984-12-05 | Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1314251A1 true SU1314251A1 (en) | 1987-05-30 |
Family
ID=21150628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU843822723A SU1314251A1 (en) | 1984-12-05 | 1984-12-05 | Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1314251A1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2389017C1 (en) * | 2008-11-07 | 2010-05-10 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Амурская Государственная Медицинская Академия Росздрава | Method of preparation of blood clot for investigation |
| CN105823665A (en) * | 2016-05-13 | 2016-08-03 | 北京九州柏林生物科技有限公司 | Biological tissue sample preparation sleeve solution |
| RU2793545C2 (en) * | 2018-08-14 | 2023-04-04 | Апакор Лимитед | Fixing solution and method for obtaining a biological sample for testing |
-
1984
- 1984-12-05 SU SU843822723A patent/SU1314251A1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Лилли Р. Патогистологическа техника и практическа гистохими , 1969, с. 40-645. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2389017C1 (en) * | 2008-11-07 | 2010-05-10 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования Амурская Государственная Медицинская Академия Росздрава | Method of preparation of blood clot for investigation |
| CN105823665A (en) * | 2016-05-13 | 2016-08-03 | 北京九州柏林生物科技有限公司 | Biological tissue sample preparation sleeve solution |
| RU2793545C2 (en) * | 2018-08-14 | 2023-04-04 | Апакор Лимитед | Fixing solution and method for obtaining a biological sample for testing |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Goto | Discriminative staining methods for the nervous system: luxol fast blue–periodic acid-Schiff–hematoxylin triple stain and subsidiary staining methods | |
| US20150285718A1 (en) | Kit for producing cleared biological specimens and method for producing cleared biological specimens | |
| Bencosme | A trichrome staining method for routine use | |
| SU1314251A1 (en) | Method of fixing specimens of biological tissues for histological investigation | |
| King | The effects of various fixatives on the brain of the albino rat, with an account of a method of preparing this material for a study of the cells in the cortex | |
| Stark et al. | Methylene blue staining of axons in the ventral nerve cord of insects | |
| CN111398000B (en) | A method for enhancing the contrast of micro-CT plant samples | |
| Troyer et al. | A hematoxylin and eosin-like stain for glycol methacrylate embedded tissue sections | |
| Hardesty | Neurological technique | |
| DE3016548A1 (en) | METHOD FOR REDUCING THE THERMAL STABILITY OF MICROBIAL MUCOR-RENNIN AND THE USE THEREOF FOR CHEESE PREPARATION | |
| US3440317A (en) | Cell coloring process and composition for cytological examination | |
| SU1091058A1 (en) | Method of dyeing blood vessels in internal parts of a body on hystological preparation | |
| JPH03167472A (en) | Method for dyeing embryo skeletal of experimental animal | |
| EP0011716A1 (en) | Reagent for the determination of infectious mononucleosis and process for its preparation | |
| SU1515091A1 (en) | Fixative for histological preparations | |
| CN115005197A (en) | Method for manufacturing fish bone anatomy specimen for integral two-side display | |
| SU1264040A1 (en) | Method for preparing histological preparations for microscopic investigations | |
| JPH0368865A (en) | Inspection of pathological tissue and dehydrating agent therefor | |
| Bowen | The methods for the demonstration of the Golgi apparatus. II. Silver and gold methods | |
| SU1171690A1 (en) | Method of detecting nerve fibers and microcirculatory capillaries | |
| Garvey et al. | A new method for melanin at acid pH | |
| Blankenhorn | Acholuric jaundice | |
| Love et al. | Durable staining of cartilage in foetal rat skeleton by methylene blue | |
| SU1597667A1 (en) | Method of preparing histologic preparations of lymphonodus | |
| JP2016211929A (en) | Collagen fiber staining method and collagen fiber staining method |