Изобретение относитс к получению новых производных пролива общей формулы / RrA-S-CH CHCO-K COOIi где R - ацильна группа, св занна с oL-аминогруппой аминокисло ты и выбранна из группы, содержащей циклопропанкарбонильную , циклегексанкарбон льную или адамаитанкар бонильную группы; А - остаток глицина, саркоэина или ot-D-аминоки слоты и име ет сА-карбонильную группуг котора образует тиольнзпо сложноэфирную св зь с атомом серы; или их фармацевтически пpиeмлe шx солей, обладающих гип9тензивн лм дей ствием. Целью изобретени вл етс разработка на основе изйестного метода, способа получени новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами. Пример I. Получение К-замещенных аминокислот. а)D-Дланин 4,5 г раствор ют в 230 Чп водного 1н.раствора карбонат натри при перемешивании. К этому раствору по капл м добавл ют 100 мл тетрагидрофурана, содержащего 9,0 г циклогексанкарбокилхлорида при 5 , при этой температуре смесь пе ремешивают в течение 30 мин, затем перемешивают при комнатной туре в течение ,5 ч. После этого к реакционной смеси добавл ют 2н.,рас вор НС1 дл доведени значени рН смеси между I и 2. Реакционнуи} смес экстрагируют этилацетатом, органиче кий слой промывают насыщенным раствором NaCl и высушивают над сульфатом магни . Фильтрат выпаривают в вакууме, получа неочищенный продук При перекристаллиза1{ии его из смеси этилацётат/н-гексан получают 4,65 г К-циклогексанкарбонил-О-аланин. +26,6°. б)Сложный эфир адамантанкарбоновой кислоты и Н-оксисук1динамида (3,0 г) раствор ют в 30 мл течграгид офурана. К этому раствору добавлкт 5 мл воды, содержащей 0,89 г Dланина и 1,1 г триэтиламина, и смесь перемешивают в течение ночи ри 5°С. После удалени тетрагидроурана к остатку добавл ют воду и атем добавл ют 2н. раствор НС дл ого, чтобы довести значение рН смеи между 1 и 2. Затем смесь обрабаьшают так же, как в примере 1а, поучают 0,38 г Н-адамантанкарбонил-Вланина . a3j, + П,6(С 1,0, МеОН). Соединени , приведенные ниже, приотовлены одним из методов, описаных в примере 1а и 6. N-Замещенные аминокислоты Метод Ы-Адама:нтанкарбонилглицин б Ы-Циклогексанкарбонил-ифенилаланин .а Н-Циклогексанкарбонил-Олейцина К-Циклогексанкарбонил-Втриптофана Н-Циклогексанкарбонил-Офенклглицина Н-Циклогексанкарбонил-Ометиончна Н-Циклогексанкарбонил-Вглутамина Ы-Циклопропанкарбонил-Валанина N-Циклогексанкарбонилглицина К-циклогексанкарбонил-. саркозЙ На N-Циклопропанкарбонилглицина Пример 2. Ы-(3-(Н-Циклогексанкарбонил-В-аланш1тио )-2-В-метилпропаноклl-L-пролин . Раствор ют в 80 мл сухого тетрагидрофурана 5,98 г К-циклогексанкар,бонил-В-аланина . К раствору добавл ют 5,84 г карбонилдинмидазола при -18С при перемешивании и охлаждении смеси льдом. При этой температуре смесь перемешивают в течение 1 ч и затем к смеси добавл ют 6,29 г N-(3меркапто-2-В-метилпропаноил )-Ъ-пролкна с последующим перемешиванием при -leC в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершени реакции смесь выпаривают в вакууме, удал растворитель . К остатку добавлйют 50 мл воды и к смеси добавл ют 2н. сол ную кислоту, чтобы установить значение рН между 1 и 2. Смесь экстрагируют этилацетатом, и этилацетатный слой промывают насьпценным раствором NaCl, высушивают над сульфатом магни и вы паривают в вакууме. К остатку добавл ют 120 мл ацетонитрила и затем добавл ют 6 нп дициклогексиламина (ДЦГА). Смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре. После выдерживани в течение ночи осадок отфильтровывают и высушивают на воздухе , получа неочищенную соль ДЦГА (12,35 г). Неочищенную соль суспендирую j в 300 мл ацетонитрила, и суспензию кип т т с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждени осадок собирают путем отстаивани и высушивают на воздухе, получа 12,20 г белой соли ДЦГА. Соль ДЦГА (12,2 г) суспендируют в 90 мл этилацетата, к суспензии добавл ют 60 мл 0,5 н.водного раствора бисульфата кали , смесь встр хивают. Органический слой промывают дистиллированной водой, высушивают над сульфатом магни и выпаривают в вакууме, получа резиноподобное вещество (8,64 г). Методами ЯМР и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению. Пример 3. N-ГЗ-(N-Циклoгeксанкарбонилглицилтио )-2-0-метилпропаноил -Ь-пролин . Раствор ют в 10 МП сухого тетрагидрофурана 1,02 г N-циклогексанкарбонилглицина . К раствору добавл ют 20 мл сухого тетрагидрофурана, содержащего 1,07 г карбонилдиимидазола при и перемешивании с охлаждением смеси льдом. Смесь перемешивают при этой температуре в течение I ч и затем добавл ют 6 мл сухого тетра гидрофурана, содержащего 1,09 г N-(3 меркапто-2-Ь-метилпропаноил)-Ъ-проли на с последующим перемешиванием при |-20°С в течение 30 мин, затем при {комнатной температуре в течение I ч. «После заверщени реакции смесь выпаривают в вакууме дл того, 1тобы уда лить растворитель. Остаток подвергают хроматографической очистке на колонке с силикагелем (2x35 см), использу в качестве элюента смесь метанола и хлороформа (от 1:100 до 3:100). Фракции, содержащие, конечный продукт, объедин ют и выпаривают в вакууме, получа резиноподобное вещество (1,16 г). Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено , что это вещество идентично предлагаемому соединению. П р и м е р А. (N-Циклoпp.oпaнкapбoнил-D-aпaнилтиo )-2-D-мeтилпpoпaнoил -L-пpoлин . Раствор ют в 14 мл сухого тетрагидрофурана 635 мг Ы-циклопропанкар бонил-П-аланина и 0,70 мл триэтиламина . К этому раствору добавл ют 0,48 мл этилхлорформиата при при перемешивании и охлаждении смеси льдом. Смесь перемешивают при этой температуре в течение I5 мин и после этого добавл ют ,09 г N-(3меркапто-2-В-метилпропаноил )-L-npoлина и 10 МП сухого тетрагидрофурана , содержащего 0,70 мп триэткламина с последующим перемешиванием при в течение 15 мин, затем при 5°С в течение ночи. После завершени реакции, смесь выпаривают в вакууме при 30-35 с дп того, чтобы удалить растворитель. К остатку добавл ют 10 мл воды, и к смеси добавл ют 2н сол ную кислоту дп доведени значени рН между 1 и 2. Смесь экстрагируют хлороформом, и хлороформовый слой промывают насыщенным раствором NaCI, высушивают над сульфатом магни и выпаривают в вакууме. Остаток подвергают хроматографической очистке .на колонке с силикагелем (2 х X 35 см), использу в качестве элюента смесь метанола и хлороформа (от 1:100 до 3:100). Фракции, содержащие конечный продукт, объедин ют и вьтаривают в вакууме, получа 395 мг резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предпагаемому соединению . П р и м е р 5. (N- tKnoreKанкарбонил-М-метилглицилтио )-2-D етилпропаноилЗ-Ь-пролин. Повтор ют методику примера 4 с ем исключением, что N-циклогексанарбонилглицин замен ют на N-циклоексанкарбонил-Ы-метилглицин (1,09 г) , арбонилдиимидазоп (1,09 г) и N-(3еркапто-2-0-метштрспаноил )-Ь-проин (1,09 г). Получают 0,76 г резиноодобного вещества. Методами ЯМР-анаиза и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещестБО идентично предлагаемому соединению. П р и м е р 6. (N-Циклoпpoпaнкapбoнилглицилтиo )-2-D-мeтилпpoпaнoил -Ъ-пролин. Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин замен ют на N-циклопропанкарбонилглицин (0,96 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и Н-(3-мер капто-2-Б-метилпропаноил)-Ь-пролин (1,09 г). Получают 0,4 г резиноподобного вещества. Методами ЯМЕ-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещества идентично предлагаемому соединению. Пример. (Н-Адамантанкарбонилглицилтио )-2-0-метилпропаноил -Ъ-пролин . Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин замен ют иа Н адаман танкарбонилглицин (1,42 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и Н(3-меркапто-2-0-метилпропанонл )-1.-пролин (1,09 г). Получают 1,7 г резмноподо ного вещества. Методаьш ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено , что это вещество идентично предлагаемому соединению. Примере. N-tЗ(N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-фeннлaлaнилтиd )-2 Dмeтилпpoпaнoил }-Ь-пролин. Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что Н-циклогексанкарбонилглицин замен ют на N-циклогексанкарбонил-В-фенилаланин (1,54 г карбонилдиимидазрл (1,09 i) и N-3меркапто-2-В-метилпропансил )-Ъ-пролин (1,09 г). Получают 0,97 г резиноподобного вещества. Методами ЯМРанализа и тонкослойной хроматографи установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединени1ю. П р и м е р 9. (N-циклoгeкcaнкapбoнил-D-лeйцилтиo )-2-D мeтилпpoпaнoил -Ь-пролин . Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, ч то N-циклогексанкар нилглицин замен ют на N-циклогексан карбонил-ГЬ-лейцин ( ,2Q г) , карбонилдиимидазол (0,97 г) и М-(3-мерка то-2-В-метилпропаноил)-Ь-пролин (0,98 г). Получают 1,17 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анаThis invention relates to the preparation of novel strait derivatives of the general formula (RrA-S-CH CHCO-K COOIi) where R is an acyl group, an amino acid linked to the oL-amino group and is selected from the group consisting of cyclopropanecarbonyl, cyclehexanecarbonyl, or adamantanecarbonyl groups; A is a glycine, sarcoein or ot-D-amino acid residue and has a cA-carbonyl group which forms a thiol ester bond to a sulfur atom; or their pharmaceutically acceptable salts of salts with hypotensive action. The aim of the invention is to develop, on the basis of an excellent method, a method of producing new compounds with valuable pharmacological properties. Example I. Obtaining K-substituted amino acids. a) D-Handan 4.5 g is dissolved in 230 PP of aqueous 1N sodium carbonate solution with stirring. To this solution, 100 ml of tetrahydrofuran containing 9.0 g of cyclohexanecarbonyl chloride are added dropwise at 5, the mixture is stirred at this temperature for 30 minutes, then stirred at room temperature for 5 hours. Thereafter, the reaction mixture is added 2N., HC1 solution to adjust the pH of the mixture between I and 2. The reaction mixture is extracted with ethyl acetate, the organic layer is washed with a saturated solution of NaCl and dried over magnesium sulfate. The filtrate is evaporated in vacuo to give the crude product. Upon recrystallization1 {and it from ethyl acetate / n-hexane, 4.65 g of K-cyclohexanecarbonyl-O-alanine are obtained. + 26.6 °. b) The ester of adamantanecarboxylic acid and H-oxysuc1 dinamide (3.0 g) is dissolved in 30 ml of hydrogravide of furan. To this solution add 5 ml of water containing 0.89 g of Dlanin and 1.1 g of triethylamine, and the mixture is stirred overnight at 5 ° C. After removing the tetrahydrouran, water is added to the residue and then 2n. a solution of HC for it to bring the pH of the mixture between 1 and 2. Then the mixture is treated in the same way as in example 1a, 0.38 g of H-adamantanecarbonyl-Vlanin is obtained. a3j, + P, 6 (C 1.0, MeOH). The compounds listed below are prepared by one of the methods described in Example 1a and 6. N-Substituted Amino Acids: Adam Method: ntancarbonylglycine N Cyclohexanecarbonyl-ifhenylalanine. A N-Cyclohexanecarbonyl-Omethionna N-Cyclohexanecarbonyl-Vlutamine Y-Cyclopropanecarbonyl-Valanina N-Cyclohexanecarbonylglycine K-cyclohexanecarbonyl-. sarcosy On N-Cyclopropanecarbonylglycine Example 2. S- (3- (H-Cyclohexanecarbonyl-B-alan), -2-B-methylpropanocl-L-Proline. Dissolved in 80 ml of dry tetrahydrofuran, 5.98 g K-cyclohexanecar, bonil- B-alanine. To the solution was added 5.84 g of carbonyldinimidazole at -18 ° C while stirring and cooling the mixture with ice. At this temperature the mixture was stirred for 1 hour and then 6.29 g of N- (3 mercapto-2-B -methylpropanoyl) -l-prolca, followed by stirring at -leC for 30 minutes, then at room temperature for 1 hour. After completion of the reaction and the mixture is evaporated in vacuo, removing the solvent. 50 ml of water is added to the residue and 2N hydrochloric acid is added to the mixture to adjust the pH between 1 and 2. The mixture is extracted with ethyl acetate and the ethyl acetate layer is washed with an NaCl solution and dried over sulfate magnesium and evaporated in vacuo. 120 ml of acetonitrile is added to the residue and then 6 np of dicyclohexylamine (DCA) is added. The mixture is stirred for 1 hour at room temperature. After standing overnight, the precipitate was filtered and dried in air, obtaining a crude DCA salt (12.35 g). The crude salt was suspended in 300 ml of acetonitrile, and the suspension was heated under reflux for 30 minutes. After cooling, the precipitate is collected by settling and air dried, yielding 12.20 g of the white salt of DCA. The DCA salt (12.2 g) is suspended in 90 ml of ethyl acetate, 60 ml of a 0.5N aqueous solution of potassium bisulfate are added to the suspension, and the mixture is shaken. The organic layer is washed with distilled water, dried over magnesium sulphate and evaporated in vacuo to give a rubber-like substance (8.64 g). By NMR and thin layer chromatography, it was established that this substance is identical to the proposed compound. Example 3. N-GZ- (N-Cyclohexanecarbonylglycylthio) -2-0-methylpropanoyl-L-proline. 1.02 g of N-cyclohexanecarbonylglycine is dissolved in 10 MP of dry tetrahydrofuran. To the solution was added 20 ml of dry tetrahydrofuran containing 1.07 g of carbonyldiimidazole while stirring with ice-cooling. The mixture is stirred at this temperature for I h and then 6 ml of dry tetra hydrofuran containing 1.09 g of N- (3 mercapto-2-b-methylpropanoyl) -b-proline are added, followed by stirring at | -20 ° C for 30 minutes, then at {room temperature for 1 hour. After completion of the reaction, the mixture is evaporated in vacuo to remove the solvent. The residue is subjected to chromatographic purification on a column of silica gel (2x35 cm), using as eluent a mixture of methanol and chloroform (from 1: 100 to 3: 100). The fractions containing the final product are combined and evaporated in vacuo to give a rubbery substance (1.16 g). By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is identical to the proposed compound. PRI me R A. (N-Cyclopropanopancabronyl-D-apantio) -2-D-methylpropanoyl-L-pollin. In 14 ml of dry tetrahydrofuran, 635 mg of N-cyclopropanecarbonyl-P-alanine and 0.70 ml of triethylamine are dissolved. To this solution was added 0.48 ml of ethyl chloroformate while stirring and cooling the mixture with ice. The mixture is stirred at this temperature for I5 minutes and thereafter, 09 g of N- (3mercapto-2-B-methylpropanoyl) -L-proline and 10 MP of dry tetrahydrofuran containing 0.70 mp of trietclamine are added, followed by stirring at for 15 min, then at 5 ° C overnight. After completion of the reaction, the mixture is evaporated in vacuo at 30-35 seconds to remove the solvent. 10 ml of water was added to the residue, and 2N hydrochloric acid was added to the mixture to adjust the pH between 1 and 2. The mixture was extracted with chloroform, and the chloroform layer was washed with saturated NaCl solution, dried over magnesium sulfate and evaporated in vacuo. The residue is purified by chromatography on a column of silica gel (2 x X 35 cm), using a mixture of methanol and chloroform (1: 100 to 3: 100) as eluent. The fractions containing the final product are combined and evaporated in vacuo to give 395 mg of rubber-like substance. By NMR analysis and thin-layer chromatography, it was established that this substance is identical to the intended compound. EXAMPLE 5 (N-tKnoreK-Carbonyl-M-methylglycylthio) -2-D ethylpropanoylZ-L-proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that N-cyclohexanarbonylglycine is replaced by N-cyclo-xane-carbonyl-N-methylglycine (1.09 g), arbonyldiimidazop (1.09 g) and N- (3ercapto-2-0-metstrspanoyl) - B-proin (1.09 g). 0.76 g of rubber-like substance is obtained. By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is identical to the proposed compound. PRI me R 6. (N-Cyclopropancanoylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl-b-Proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that N-cyclohexanecarbonylglycine is replaced by N-cyclopropanecarbonylglycine (0.96 g), carbonyldiimidazole (1.09 g) and H- (3-mercapto-2-B-methylpropanoyl) -b -proline (1.09 g). Obtain 0.4 g of rubber-like substance. Using the methods of the JMAE-analysis and thin-layer chromatography, it was established that these substances are identical to the proposed compound. Example. (N-Adamantanecarbonylglycylthio) -2-0-methylpropanoyl -b-proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that N-cyclohexanecarbonylglycine is replaced with H H adaman tancarbonyl glycine (1.42 g), carbonyldiimidazole (1.09 g) and H (3-mercapto-2-0-methylpropanone) -1.- proline (1.09 g). 1.7 g of reusable substance is obtained. The method of NMR analysis and thin layer chromatography established that this substance is identical to the proposed connection. Example N-t3 (N-Cyclohexancabronyl-D-fennalaniltid) -2 D methyl propanoyl} -l-proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that H-cyclohexanecarbonylglycine is replaced by N-cyclohexanecarbonyl-B-phenylalanine (1.54 g carbonyldiimidazrl (1.09 i) and N-3 mercapto-2-B-methylpropanyl) -b-proline (1.09 g). Obtain 0.97 g of rubber-like substance. Using NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is identical to the proposed compound. PRI me R 9. (N-cyclohexancabonyl-D-leucylthio) -2-D methylpropropanyl-L-proline. The procedure of Example 4 is repeated, with the exception that N-cyclohexancar nylglycine is replaced by N-cyclohexane carbonyl-Gh-leucine (, 2Q g), carbonyldiimidazole (0.97 g) and M- (3-measure-2- B-methylpropanoyl) -l-proline (0.98 g). 1.17 g of a rubbery substance are obtained. NMR-ana methods
ЛИЗа и тонкослойной хроматографин установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению.LIZA and thin-layer chromatography established that this substance is identical to the proposed connection.
и тонкослойной хроматографии установлено , что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 10„ (N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-тpиптoфилтиo )-2-D-мeтилпpoпaнoил -Ь-пролин . Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбоннлглицин замен ют на N-циклогексанкарбонил-В-триптофан (1,75 г), карбонилДикмидазол (1,09 г) и N-(3меркапто-2-П-метилпропаноил )-Ь-пролин (1,09 г). Получают 0,8 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. П р и м е р 11. (N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-фeнилглицилтиo )-2-D-мeтилпpoпaнoил l-L-пролин. Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин замен ют на Ы- диклогексанкарбонил-П-фенилглицин (1,30 г) , карбонилдиимидазол (0,97 г) и N-(3меркацто-2-Б-метилпропаноил )-L-npoлин (0,98 г). Получают 0,35 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 12. (Ы-Циклогексанкарбонил-В-метионилтио )-2-В-метилпропаноилj-L-лролин . Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что Кгциклогексанкарбонилглицин замен ют на Nциклогексанкарбонил- метионин (1,30 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и N- (3-меркапто-2-В-метш1пропанош1) L-пролин (1,09 г). Получают 0,59 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 13. (Н-Циклогексанкарбони .п-В-глутаминилтио)-2-В-метилпропаноил -Ь-пролин. Повтор ют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин замен ют на Н циклогексанкарбонилглутамин (0,5 i;), карбонилдиимидазол (0,4 г) и К-(3-меркапто-2-В-метилпропанош1 )-L-пролин (0,41 г). Получают 0,3 г резиноподобного вещества, методами ЯМР-анализа П р и м е р 1. (Н-адаман-. танкарбоиш1 0-аланилтио)-2-В-метилпропаноил -1,-пролин, Повтор ют методику примера 4с тем исключением, что Ы7циклогексанкарбонилглицин замен ют на N-адаман танкарбонил-П-аланин (1,2 г), карбо нилдиимидазол (0,97 г) и Н-(3-меркапто-2-В-метилпропаноил )-Ь-пролин (0,98 г). Получают 1,02 г резиноподобкого вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено,что это вещество анало гично предлагаемому соединению. Пример 15 (пример, использующий К,К-тионилимидазол). Тионилхлорид (5,79 г) добавл ют к сухому дихлорметану (80.мл) и охлаждают до -15°С при перемешивании. К раствору добавл ют N-триметидсилил имидазол (15 г), и раствор перемешивают при -13°С в течение 1 ч, а за тем добавл ют N-циклогексанкарбонилD-аЛанин (8,8 г) и перемешивание про извод т при той же температуре в течение 30 мин.. После добавлени к сме . си 3-меркапто-2-В-матилпропаноил-Ьпролина (9,5 г) и перемешивани ее в течение i ч величину рН смеси дово д т до 1 с помощью 3 н.НСГ, органический слой отдел ют и промывают дважды насыщеннымводным раствором NaCl,,сушат над сульфатом магни и упариваютпри пониженном давлении дл удалени дихлорметана. Остаток подвергают хроматографии на колонке с силикагелем (колонка размером 2,5х х50 см), и фракции, содержащие целевое соединение, собирают, объедин ют и упаривают при пониженном давлении дава 12,5 г (циклогексанкарбонил-р-аланилтио )-2-В-метилпропанойл -Ь-пролина в виде бесцветного твердого вещества типа жженого сахара . П р и м ё р 16 (пример, использую щий пивалоилхлорид вкачестве смешан ного ангидрида кислоты). К раствору N-циклопропанкарбонилD-аланина (635 мг) и триэтиламина (0,70 мл) в сухом диоксане (14 мл) добавл ют пивалоилхлорид (0,35 мл), и раствор охлаждают до -15°С при перемешивании . Перемешивание продолжают в течение 15 мин; к смеси добавл ют раствор Н-(3-меркапто-2-В-метил пропаноил)-Ь-пролина (1,09 г) и триэтиламина (0,70 мл) в сухом диоксане ( 10 мл) н перемешивают при -15 С в течение 20 мин, а затем при 5°С в течение ночи. Рракциоиную смесь упаривают при понготенном давлении, к остатку добавл ют воду. После дойедени рН до 4 с помощью 3 н.НС I производ т экстракцию хлороформом. Хлороформный слой промывают дв жды насыщенным водным раствором хлористого натри , сушат над сульфатом магни и упаривают при пониженном давлении дл удалени растворител . Остаток подвергают хроматографии на колонке с силикагелем с использованием колонки размером 2,5x50 см, и фракции , содержащие продукт, собирают н упаривают при пониженном давлении, дава 320 мг (циклoпpoпaнкapбoнил-D-aлaнилтиo ) -2-В-метнлпропаноил j L-пролина в виде камедеообразного вещества . Пример 17. Из (К-цикло гексанкарбонил-П-аланилтио)2-В-метилпропаноилJ-L-пролина образуютс различные соли: а)Кальциева соль. Раствор ют в 40 кл метанола образец (3,98 г) соединени , приготовленного в примере 3. К этому раствору добавл ют 0,84 г гидрата ацетата кальци , смесь кип т т с обратным холодильником в течение ч. Нерастворимое вещество отфильтровывают, фильтрат выпаривают в вакууме. К остатку добавл ют хлороформ, смесь отфильтровывают и -выпаривают в вакууме. К остатку добавл ют диэтиловый эфир и смесь фильтруют и высушивают на воздухе , получа кальциевую соль соединени примера 3 (3,40 г) Гal -47,2° (С 1,0, МеОН). б)Магниева соль. Повтор ют методику а, использу ,09 г соединени , приготовленного примере 3 или 5, и 0,722 г тетраидрата ацетата магни . Получают ,42 г магниевой соли соединени из -46,6° (С«1,0, МеОН) римера 31а5 в), Лизинова соль. , Раствор ют в 22 МП метанола 1,19 г оединени , приготовленного в примее 3, К этому раствору добавл ют ,416 г лизина, смесь перемешивают ч при комнатной температуре н вы- аривают в вакууме. К остатку добав ют хлороформ, смесь фильтруют и выаривают в вакууме. К остатку добавл ют диметиловый эфир, продукт фильт руют с отсасыванием, получа лизиновую соль соединени примера 3 (1 ,,54 г) . -.23,Г(С 1,0, МеОН). г)Натриева соль. Раствор ют в 25 мл метанола, обра зец (2,27 г) соединени , приготовлен ного в примере 3. К этому раствору добавл ют 0,514 г ацетата натри , смесь перемешивают при комнатной тем пературе в .течение 30 мин, и выпаривают в вакууме. К остатку добавл ют 200 мл смеси метанола и хлороформа (3:100 по объему), образовавш пос смесь фильтруют и выпаривают в вакууме . Остаток раствор ют в метаноле, раствор фильтруют и выпаривают в вагкууме . К остатку добавл ют этилацетат , продукт отфильтровывают с отсасыванием , получа натриевую соль сое динени примера 3 (1,85 г).а| -26,7(,0 МеОН). д)Соль дициклогексиламина. Раствор ют в 120 мл ацетонитрила 13,1 г образца соединени из примера 3. К этому раствору при деремешивании добавл ют 6 мл дициклогексиламина . Смесь дополнительно перемешивают в течение 30 мин, затем оставл ют на ночь. Остаток отфильтровывают с отсасыванием и высушивают на воздухе. Образовавшиес неочищенные кристаллы суспендируют в 300 мл ацетонитрила , суспензию кип т т с обрат ным холодильником в течение 30 мин. Суспензию охлаждают, кристаллы отфильтровывают при отсасывании и высушивают на воздухе, получа дицикло гексйламинную соль соединени примера 3 (12,2 г). 1аГ - 24,5(С « 1,0, МеОН). Полученные производные пролина и их фармацевтически приемлемые соли предохран ют образование ангиотензина II из ангиотензина I путем ингиби ровани активности фермента, превращающего ангиотензин. Поэтому они полезны дл снижени повышенного давлени , вызванного ангиотензином II, и в качестве агентов дл лечени сер дечной недостаточности. Была измерена активность некоторых из полученных соединений в отношении ингибироваии фермента, превращающего ангиотензин. 1. Метод. Фермент, превращающий ангиотензин был экстрагирован из легких крол ка. В пробирку помещают 0,6 мл буферного раствора (рН 8,3) 0,1 1Ш борна кислота - карбонат натри , 0,02 мл О,111-мол рного раствора буфера борна кислота - карбонат натри (рН 8,3), содержащего 25 ммоль/л бензоилглицилгистидиллейцина субстрат и 0,1 мл О,111-мол рного раствора буфера борна кислота - карбонат натри (рН 8,3), содержащего от 10 до 10 моль/л испытуемых соедииений (13 конечных продуктов указаны в табл.1) и предварительно культивируют при 37°С в течение 5-10 мин. Затем добавл ют в каждую пробирку 0,1 мл раствора фермента (порошок в ацетоне), и каждую смесь культивируют 30 мин при . Бензоилглицин, получакнЦий с с помощью фермента, экстрагируют этилацататом в присутствии хлористоводородной кислоты и определ ют его количество по УФ-пошлощению при 228 им. Определ ют активность фермента в присутствии испытуемых соединений относительно активности в отсутствие испытуемых соедииений, прин той за 00. Концентрацию каждого испытуемого соединени при которой относительна активность фермента составл ет 50%, называют активностью каждого испытуемого соединени в отиошении ингибировани активности фермента и ее обозначают величиной Ij . 2 Результаты да,иы в табл.1. Т а б л и ц а I 1,6x10 4,8x10 1,3x50 4,0x10 1,8x10 2,4x10 1,0x10 1,5x10 1,7x10 Примечание. Соединение 1: N- 3-(Н-циклогексанкарбонил-Вапанилтио )-2-0-метиппропаноил -Ь-про лин; 2: N-(3-(N-циклoпpoпaнкapбoнил1 )-алайнлтио)-2-В-метилпропаноил1-Ьпролин; 3: (М-циклогексанкарбонилглицилтио )-2-П-метилпропаноил -Lпролин; 4; (Н-циклогексанкарбонил-Н-метилглицилтио )-2-П-метилпропа ноил1-1.-пролин; 5: (Н-цикло.пропанкарбонилглицилти .о)-2-В-метилпропаноил -Ь-пролин; 6: N-t3-(N-aflaMaHтанкарбонилглицилтио )-2-Ю-метилпропаноилу-Ь-прол н; 7: К-{3-(К-циклогексанкар6онил-В-фенш1аланилтио )-20-метилпропаноил -Ь-пролин; 8: N-13 (И-циклогексанкарбонил-В- ейцилтио)2-0-метилпропаноил -Ь-пролии; 9: (Ы-циклогексанкарбонил-В-триптофиптио ) -f 2-р-метилпропаноил l-L-пролин 10; (N-циклогексанкар бонил-В-фе нилглицилтио)-2-В-метилпроианоил -Lпролин} 11: (К-циклогексанкарбо нип-В-метионилтио)-2-В-метилпропанош13-Ь-пролин5 12; Н-13-(Н-циклогек . санкарбонил-В-глутаминилтио)-2-D-Meтилпропанош1 -Ь-пролин} 13: (Nадамантанкарбонил-В-аданилтио ) -2-Вметилпропаноил -Ь-пролин . Дл проведени сравнительного ана лиза были вз ты.следующие соединени предлагаемое - А) N- 3- (N-imiojoreKсанкарбоню1-В-аланилтио )-2-В-метилпропаноилl-L-пролин; известные - В) N-СЗ-(Ы-ацетил-Ь-пролилтио)-2-В-метил пропаноил -Ь-пролин; С) (N-aueтШ1-Ь-фенилаланиптио )-пропаноил1-Ьпролин; В) Ы-СЗ-(Н-трет.бутилоксикарбонилглицилтио )-2-В-метилпропаноил L-пролин; Е) (N-бeнзoил-L-фeнилаланилтио )-2-В-метнппропаноил}-Ь-пролин; F) М-Гз-(К-циклопентанкарбонил1 .-эланилт 1о)-2-В-метилпропанош1 l-Lпролин , Методика испытаний. I) Ферментативньй гидролиз витро. 1 МП 5%-ного гомогената печенн крысы в 0,1 М кгзлийфосфатного буфера (рН 7) смешали с 1 m 10 М раствора испытьшаемого соединени в том же самом фосфатном буфере, после чего смесь инкубировали при 37°С в те-чение заданного промежутка времени, указанного в табл.2. К 100 мкл такой смеси добавили 6 капель I и.сол ной кислоты и 5 мл этилацетата. После мег ханического перемешивани в течение 10 мин смеси подвергли центрифугированию , а полученный этилацетатный слой отделили и выпарили. Остаток растворили в мл воды и к водному раствору добавили 6,5 мкл 0,4 М фос« фатного буфера (рН 6,85) и 5 мкл 5 10 М (Н-п-(2-бензимидазолил)-фенилмалеимид (БИФМ), а затем смесь оставили сто ть в течение АО мин при 0°С. Подсчет уменьшени количества производили путем возбуждени пробы при 310 нм и измерени излуче;ни при 365 нм (предел измерени : более 0,1 мкг 3-меркапто-2-В-метилпpoпaиoил-L-пpoлинa ). 2) Иигибирование сосудосужающей реакции на ангиотензин I. Испытываемое соединение вводили в организм через рот в дозировках 0,4 мкмоль/кг веса животного (крысы)j подвергнутого анестезии, а спуст эаданный промежуток времени после введени в организм подопытным живoтны Внутривенно вводили ангиотензин 1 в дозировке 300 мг/кг, после чего наблюдали ингибирование сосудосуживающей реакции на ангиотензин I. В качестве испытываемых соединеий использовали соединени А, В и , которые были теми се, что и в koе осуществлени методики испытаи 1), Результаты испытаний приведены s а0л.2. Как проиллюстрировано результатаи испытаний, приведенных в табл.2 се известные соединени про вл ют олее высокло чувствительность тиолфирной св зи к ферментативно «у ин витро) гидролизу, чем предлааемые соединени . Известные соединени за исключеием соединени В, подвергались ферментативному гидролизу при уровне деструкции свьше 50% после инкубиро вани в течение 60 мин с образовани ем соответствующего количества свободных меркаптогрупп. С другой стороны , хот соединение В про вл ет значительную стойкость к фермента82 тинному гидролизу тиолэфирной группы , оно способно ингибировать сосудосуживающую реакцию на ангистезин I на уровне только Приблизительно 50% от того уровн , который достигаетс с использованием предпагаемых соединений . Таблица 2and thin-layer chromatography found that this substance is similar to the proposed connection. Example 10 "(N-Cyclohexancabonyl-D-triptophiltio) -2-D-methylpropanoyl-L-proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that N-cyclohexanecarbonylglycine is replaced by N-cyclohexanecarbonyl-B-tryptophan (1.75 g), carbonylDicmidazole (1.09 g) and N- (3mercapto-2-P-methylpropanoyl) - L-proline (1.09 g). Obtain 0.8 g of rubber-like substance. By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is similar to the proposed compound. PRI me R 11. (N-Cyclohexancabronyl-D-phenylglycylthio) -2-D-methylpropanoyl l-L-proline. The procedure of Example 4 is repeated, with the exception that N-cyclohexanecarbonylglycine is replaced by L-diclohexanecarbonyl-P-phenylglycine (1.30 g), carbonyldiimidazole (0.97 g) and N- (3-mercato-2-B-methylpropanoyl) - L-nplin (0.98 g). 0.35 g of rubber-like substance is obtained. By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is similar to the proposed compound. Example 12. (N-Cyclohexanecarbonyl-B-methionylthio) -2-B-methylpropanoylj-L-lrolin. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that the Cycliclohexanecarbonylglycine is replaced by Ncyclohexanecarbonylmethionine (1.30 g), carbonyldiimidazole (1.09 g) and N- (3-mercapto-2-B-metsh1propanosh1) L-proline (1 , 09 g). Obtain 0.59 g of rubber-like substance. By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is similar to the proposed compound. Example 13. (N-Cyclohexanecarboni. P-B-glutaminylthio) -2-B-methylpropanoyl -b-proline. The procedure of Example 4 is repeated with the exception that N-cyclohexanecarbonylglycine is replaced by H, cyclohexanecarbonylglutamine (0.5 i;), carbonyldiimidazole (0.4 g) and K- (3-mercapto-2-B-methylpropanosh1) -L- proline (0.41 g). 0.3 g of rubber-like substance is obtained by NMR analysis. EXAMPLE 1. (H-adaman- .tankaroish1 0-alanylthio) -2-B-methylpropanoyl -1, -proline. Repeat the procedure of Example 4 with the exception that L7 cyclohexanecarbonylglycine is replaced by N-adaman tancarbonyl-P-alanine (1.2 g), carbonyldiimidazole (0.97 g) and H- (3-mercapto-2-B-methylpropanoyl) -b-proline (0, 98 g). Obtain 1.02 g of rubber-like substance. By NMR analysis and thin layer chromatography, it was established that this substance is similar to the proposed compound. Example 15 (an example using K, K-thionylimidazole). Thionyl chloride (5.79 g) was added to dry dichloromethane (80 ml) and cooled to -15 ° C with stirring. N-trimetidsilyl imidazole (15 g) was added to the solution, and the solution was stirred at -13 ° C for 1 hour, and then N-cyclohexanecarbonyl D-aLanine (8.8 g) was added and stirring was performed with the same temperature for 30 minutes. After adding to the mix. sy 3-mercapto-2-B-matyl propanoyl-b-proline (9.5 g) and stirring it for i h the pH of the mixture is adjusted to 1 with 3 n sHH, the organic layer is separated and washed twice with saturated aqueous NaCl solution Dry over magnesium sulfate and evaporate under reduced pressure to remove dichloromethane. The residue was subjected to silica gel column chromatography (2.5 x 50 cm column), and the fractions containing the desired compound were collected, combined, and evaporated under reduced pressure to give 12.5 g (cyclohexanecarbonyl-p-alanylthio) -2-B- methylpropanoyl β-proline as a colorless solid, such as burnt sugar. Example 16 (an example using pivaloyl chloride as a mixed acid anhydride). To a solution of N-cyclopropanecarbonyl-D-alanine (635 mg) and triethylamine (0.70 ml) in dry dioxane (14 ml) was added pivaloyl chloride (0.35 ml), and the solution was cooled to -15 ° C with stirring. Stirring is continued for 15 minutes; a solution of H- (3-mercapto-2-B-methyl propanoyl) -b-proline (1.09 g) and triethylamine (0.70 ml) in dry dioxane (10 ml) was added to the mixture and stirred at -15 ° C for 20 min, and then at 5 ° C overnight. The racratic mixture is evaporated under reduced pressure, and water is added to the residue. After the pH was adjusted to 4 with 3NHC I, extraction was performed with chloroform. The chloroform layer is washed twice with a saturated aqueous solution of sodium chloride, dried over magnesium sulfate and evaporated under reduced pressure to remove the solvent. The residue was subjected to silica gel column chromatography using a 2.5 x 50 cm column, and the fractions containing product were collected and evaporated under reduced pressure, to give 320 mg (cyclopropanacarbonyl-D-gelanyltio) -2-B-methylpropanoyl j L-proline in form of gummy substance. Example 17. From (K-cyclohexanecarbonyl-P-alanylthio) 2-B-methylpropanoylJ-L-proline, various salts are formed: a) Calcium salt. A sample (3.98 g) of the compound prepared in Example 3 is dissolved in 40 cl of methanol. 0.84 g of calcium acetate hydrate is added to this solution, the mixture is heated under reflux for an hour. The insoluble matter is filtered off and the filtrate is evaporated. in a vacuum. Chloroform is added to the residue, the mixture is filtered and the mixture is evaporated in vacuo. Diethyl ether was added to the residue and the mixture was filtered and air-dried to obtain the calcium salt of Example 3 (3.40 g) Gal -47.2 ° (C 1.0, MeOH). b) Magnesium salt. Procedure a was repeated using 09 g of the compound prepared in Example 3 or 5 and 0.722 g of magnesium acetate tetrahydrate. 42 g of a magnesium salt of the compound are obtained from -46.6 ° (C "1.0, MeOH) reamer 31a5c), Lysine salt. , 1.19 g of the compound prepared in Example 3 is dissolved in 22 MP of methanol. 416 g of lysine is added to this solution, the mixture is stirred at room temperature for 1 h and evaporated in vacuo. Chloroform is added to the residue, the mixture is filtered and evaporated in vacuo. Dimethyl ether was added to the residue, and the product was filtered with suction to give the lysine salt of the compound of Example 3 (1 ,, 54 g). -.23, G (C 1.0, MeOH). d) Sodium salt. Dissolve in 25 ml of methanol, a sample (2.27 g) of the compound prepared in Example 3. To this solution add 0.514 g of sodium acetate, the mixture is stirred at room temperature for 30 minutes and evaporated in vacuo. 200 ml of a mixture of methanol and chloroform (3: 100 by volume) are added to the residue, the resulting mixture is filtered and evaporated in vacuo. The residue is dissolved in methanol, the solution is filtered and evaporated in a vacuum. Ethyl acetate is added to the residue, and the product is filtered off with suction to obtain the sodium salt of the compound of Example 3 (1.85 g). A | -26.7 (, 0 MeOH). e) Dicyclohexylamine salt. A 13.1 g sample of the compound from Example 3 is dissolved in 120 ml of acetonitrile. To this solution, 6 ml of dicyclohexylamine are added while stirring. The mixture is further stirred for 30 minutes, then left overnight. The residue is filtered with suction and dried in air. The resulting crude crystals are suspended in 300 ml of acetonitrile, and the suspension is refluxed for 30 minutes. The suspension is cooled, the crystals are filtered off with suction and dried in air to give the dicyclohexylamine salt of the compound of Example 3 (12.2 g). 1aH - 24.5 (C "1.0, MeOH). The resulting proline derivatives and their pharmaceutically acceptable salts prevent the formation of angiotensin II from angiotensin I by inhibiting the activity of the enzyme that converts angiotensin. Therefore, they are useful for reducing the elevated pressure caused by angiotensin II and as agents for treating heart failure. The activity of some of the compounds obtained in relation to the inhibition of the enzyme that converts angiotensin was measured. 1. Method. An angiotensin converting enzyme was extracted from rabbit lung. 0.6 ml of a buffer solution (pH 8.3), 0.1 ml of boric acid — sodium carbonate, 0.02 ml of O, a 111-molar solution of boric acid buffer — sodium carbonate (pH 8.3) containing 25 mmol / l benzoylglycyl histidyl leucine substrate and 0.1 ml of a 111-molar solution of boric acid-sodium carbonate buffer (pH 8.3) containing from 10 to 10 mol / l of test compounds (13 final products are listed in Table 1 ) and pre-cultured at 37 ° C for 5-10 min. Then 0.1 ml of an enzyme solution (powder in acetone) is added to each tube, and each mixture is cultured for 30 minutes at. Benzoyl glycine, prepared with an enzyme, is extracted with ethyl acetate in the presence of hydrochloric acid, and its amount is determined by UV conversion at 228%. The enzyme activity in the presence of test compounds relative to activity in the absence of test compounds taken as 00 is determined. The concentration of each test compound at which the relative activity of the enzyme is 50% is called the activity of each test compound in inhibiting the activity of the enzyme and is denoted by Ij. 2 Results yes, iy in table.1. T a b l i c i 1,6x10 4,8x10 1,3x50 4,0x10 1,8x10 2,4x10 1,0x10 1,5x10 1,7x10 Note. Compound 1: N- 3- (H-cyclohexanecarbonyl-Vapanylthio) -2-0-methypropanoyl-L-pro ling; 2: N- (3- (N-cyclopropanaparbonyl1) -alynylthio) -2-B-methylpropanoyl1-L proline; 3: (M-cyclohexanecarbonylglycylthio) -2-P-methylpropanoyl-L-proline; four; (N-cyclohexanecarbonyl-N-methylglycylthio) -2-P-methylpropanoyl1-1.-proline; 5: (H-cyclo-propanecarbonylglycylthy .o) -2-B-methylpropanoyl-L-proline; 6: N-t3- (N-aflaMaH tancarbonylglycylthio) -2-Yu-methylpropanoyl-b-prol n; 7: K- {3- (K-cyclohexancar6onyl-B-fensh1-alanylthio) -20-methylpropanoyl-L-proline; 8: N-13 (I-cyclohexanecarbonyl-B-neucylthio) 2-0-methylpropanoyl-L-prolii; 9: (N-cyclohexanecarbonyl-B-tryptophyptio) -f 2-p-methylpropanoyl 1-L-proline 10; (N-cyclohexancar bonyl-B-phenylglycylthio) -2-B-methylpropioyl-L-proline} 11: (K-cyclohexanecarbo-nip-B-methionylthio) -2-B-methylpropanosh13-b-proline 5 12; H-13- (H-Cyclohex. Sancarbonyl-B-glutaminylthio) -2-D-Methylpropanosh1-L-proline} 13: (Na admantanecarbonyl-B-adanylthio) -2-Vmethylpropanoyl-L-proline. For the comparative analysis, the following compounds were proposed: - A) N-3- (N-imiojoreK -sancarbonyu1-B-alanylthio) -2-B-methylpropanoyl-1-L-proline; known - B) N-СЗ- (L-acetyl-L-prolylthio) -2-B-methyl propanoyl-L-proline; C) (N-aue-Sh1-b-phenyl-alaniptio) -propanoyl 1-b-proline; B) L-C3- (H-tert.butyloxycarbonylglycylthio) -2-B-methylpropanoyl L-proline; E) (N-benzoyl-L-phenyl-alanylthio) -2-B-metnpropanoyl} -l-proline; F) M-Hz- (K-cyclopentanecarbonyl1.-Elanilt 1o) -2-B-methylpropanosh1 l-Lprolin, Test method. I) Vitro enzymatic hydrolysis. 1 MP of a 5% rat hepatic homogenate in 0.1 M kgzliphosphate buffer (pH 7) was mixed with 1 m 10 M solution of the test compound in the same phosphate buffer, after which the mixture was incubated at 37 ° C for a given period time specified in the table.2. To the 100 µl of this mixture, 6 drops of hydrochloric acid 1 and hydrochloric acid and 5 ml of ethyl acetate were added. After megachic stirring for 10 minutes, the mixture was centrifuged, and the resulting ethyl acetate layer was separated and evaporated. The residue was dissolved in ml of water and 6.5 μl of 0.4 M phosphate buffer (pH 6.85) and 5 μl of 5 10 M (H-p- (2-benzimidazolyl) -phenylmaleimide (BIFM) were added to the aqueous solution, and then the mixture was left to stand for AO minutes at 0 ° C. The reduction was calculated by exciting the sample at 310 nm and measuring the radiation; not at 365 nm (measurement limit: more than 0.1 µg 3-mercapto-2-B- methylpropanol-L-proline). 2) Inhibition of angiotensin-1 vasoconstrictor reaction. The test compound was administered through the mouth in dosages of 0.4 µmol / kg body weight of the animal (rat) j After anesthesia, and after a prescribed period of time after injection into the body of the experimental animals, angiotensin 1 was injected intravenously at a dosage of 300 mg / kg, after which inhibition of the angiotensin-1 vasoconstrictive reaction was observed. Compounds A, B and, which were those As in the case of the implementation of the test procedure 1), the test results are given in s a.2. As illustrated by the results of the tests listed in Table 2, the known compounds exhibit a higher sensitivity of the thioliferous bond to enzymatically "in vitro) hydrolysis than the proposed compounds. The known compounds, with the exception of compound B, were subjected to enzymatic hydrolysis at a destruction level of more than 50% after incubation for 60 minutes with the formation of an appropriate amount of free mercapto groups. On the other hand, although compound B shows significant resistance to the enzyme 82 hydrate of the thiol-ester group, it is able to inhibit the vasoconstrictor response to angystezin I at a level of only about 50% of the level achieved using the intended compounds. table 2
п - число циклов испытаний. n is the number of test cycles.