RU2834279C1 - Peptide for treating cytokine storm syndrome - Google Patents
Peptide for treating cytokine storm syndrome Download PDFInfo
- Publication number
- RU2834279C1 RU2834279C1 RU2022129160A RU2022129160A RU2834279C1 RU 2834279 C1 RU2834279 C1 RU 2834279C1 RU 2022129160 A RU2022129160 A RU 2022129160A RU 2022129160 A RU2022129160 A RU 2022129160A RU 2834279 C1 RU2834279 C1 RU 2834279C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- syndrome
- pharmaceutical composition
- peptide
- seq
- patients
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 97
- 206010052015 cytokine release syndrome Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 58
- 208000025721 COVID-19 Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 21
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 20
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 206010012310 Dengue fever Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000032672 Histiocytosis haematophagic Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000025729 dengue disease Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 208000001490 Dengue Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 208000004987 Macrophage activation syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 claims abstract description 5
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 claims description 20
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 claims description 20
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 claims description 20
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 12
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 11
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 11
- 208000007386 hepatic encephalopathy Diseases 0.000 claims description 10
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 claims description 9
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 claims description 5
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 claims description 5
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 claims description 5
- 206010014513 Embolism arterial Diseases 0.000 claims description 4
- 206010014522 Embolism venous Diseases 0.000 claims description 4
- 208000004043 venous thromboembolism Diseases 0.000 claims description 4
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 16
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 16
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 13
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 9
- 206010050685 Cytokine storm Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 abstract description 3
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 abstract description 3
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 abstract description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 11
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 9
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 8
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 8
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 8
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 7
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 7
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000002640 oxygen therapy Methods 0.000 description 6
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 102000006303 Chaperonin 60 Human genes 0.000 description 5
- 108010058432 Chaperonin 60 Proteins 0.000 description 5
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 5
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 5
- 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 5
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 4
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 4
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 4
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 4
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 4
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 4
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 3
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 3
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 3
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 3
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 3
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 3
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000005399 mechanical ventilation Methods 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 2
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 2
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000003154 D dimer Substances 0.000 description 2
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 206010034568 Peripheral coldness Diseases 0.000 description 2
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 108010052295 fibrin fragment D Proteins 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 2
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 2
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 1
- LBJYAILUMSUTAM-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LBJYAILUMSUTAM-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CCCCN PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N Asn-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- 241001678559 COVID-19 virus Species 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010051625 Conjunctival hyperaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010013887 Dysarthria Diseases 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- IOFDDSNZJDIGPB-GVXVVHGQSA-N Gln-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IOFDDSNZJDIGPB-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 208000036066 Hemophagocytic Lymphohistiocytosis Diseases 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 description 1
- 206010021036 Hyponatraemia Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 1
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 229940122245 Janus kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 208000015924 Lithiasis Diseases 0.000 description 1
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 description 1
- WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N Lys-Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WINFHLHJTRGLCV-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 208000006816 Neonatal Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- 208000008457 Neurologic Manifestations Diseases 0.000 description 1
- 208000031662 Noncommunicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010037549 Purpura Diseases 0.000 description 1
- 241001026602 Quintana Species 0.000 description 1
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- BKZYBLLIBOBOOW-GHCJXIJMSA-N Ser-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BKZYBLLIBOBOOW-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- QGXCWPNQVCYJEL-NUMRIWBASA-N Thr-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QGXCWPNQVCYJEL-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 206010001053 acute respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940125683 antiemetic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 1
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000004082 barrier epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000006329 citrullination Effects 0.000 description 1
- 238000011961 computed axial tomography Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- TXWRERCHRDBNLG-UHFFFAOYSA-N cubane Chemical compound C12C3C4C1C1C4C3C12 TXWRERCHRDBNLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000000741 diarrhetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021045 dietary change Nutrition 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 238000010228 ex vivo assay Methods 0.000 description 1
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000002637 fluid replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 208000014752 hemophagocytic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000334 hepatotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003082 hepatotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 1
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000007233 immunological mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 206010024378 leukocytosis Diseases 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 239000003580 lung surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100001023 lymphopenia Toxicity 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000004192 neonatal respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100001079 no serious adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 206010034754 petechiae Diseases 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 208000010707 pulmonary consolidation Diseases 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002106 pulse oximetry Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000036387 respiratory rate Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 208000037974 severe injury Diseases 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 208000026473 slurred speech Diseases 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000005070 sphincter Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 229960003989 tocilizumab Drugs 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates
Настоящее изобретение относится к области биомедицины и фармацевтической промышленности, в частности к фармацевтической композиции для лечения и предупреждения синдрома цитокинового шторма.The present invention relates to the field of biomedicine and the pharmaceutical industry, in particular to a pharmaceutical composition for the treatment and prevention of cytokine storm syndrome.
Эта композиция включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, и может быть использована для лечения острого респираторного дистресс-синдрома, синдрома активации макрофагов, респираторного сепсиса, лихорадки денге, печеночной энцефалопатии и перикардита, среди прочих заболеваний.This composition includes a peptide identified as SEQ ID NO: 1 and can be used to treat acute respiratory distress syndrome, macrophage activation syndrome, respiratory sepsis, dengue fever, hepatic encephalopathy, and pericarditis, among other diseases.
Предшествующий уровень техникиPrior art
Среди лиц, инфицированных вирусом SARS-CoV-2, у которых развивается инфекционное заболевание Covid-19, описана подгруппа пациентов, у которых формируется состояние гипервоспаления. У этих пациентов описан «цитокиновый шторм», особенно связанный с интерлейкинами (IL), характеризующийся, среди прочего, повышением уровней IL-2, IL-17, IL-6, TNFα. Это состояние гипервоспаления приводит к смерти пациентов (Mehta, et al. (2020). The Lancet, 395: 1033-1034).Among individuals infected with the SARS-CoV-2 virus who develop the infectious disease Covid-19, a subgroup of patients has been described who develop a state of hyperinflammation. In these patients, a “cytokine storm” has been described, especially related to interleukins (IL), characterized by, among others, increased levels of IL-2, IL-17, IL-6, TNFα. This state of hyperinflammation leads to the death of patients (Mehta, et al. (2020). The Lancet, 395: 1033-1034).
С другой стороны, в ретроспективном исследовании, включавшем 150 подтвержденных случаев Covid-19 в Ухане, Китай, было продемонстрировано значительное повышение концентрации ферритина у невыживших пациентов (1297,6 нг/мл) по сравнению с уровнями этого белка у пациентов, которые выжили (614 нг/мл) (Ruan et al. (2020). Intensive Care Med; https://doi.org/10.1007/s00134-020-05991-x).On the other hand, a retrospective study including 150 confirmed Covid-19 cases in Wuhan, China, demonstrated a significant increase in ferritin concentrations in non-survivors (1297.6 ng/mL) compared with levels of this protein in patients who survived (614 ng/mL) (Ruan et al. (2020). Intensive Care Med; https://doi.org/10.1007/s00134-020-05991-x).
У пациентов с Covid-19, находящихся в тяжелом и критическом состоянии, развивается острый респираторный дистресс-синдром. Этот синдром характеризуется наличием воспалительных явлений в альвеолах, которые расширяются за счет системного кровообращения организма. В ходе этого синдрома происходит вовлечение легочного эндотелия с повышенной проницаемостью сосудов и перемещением клеток и макромолекул в альвеолярное пространство, где они инактивируют легочный сурфактант, формируя типичные гиалиновые мембраны (Janz and Ware (2014). Clin Chest Med; 35: 685-96). Эпителиальный барьер также изменяется, и воспалительный ответ усугубляется с секрецией провоспалительных IL, таких как TNFα, IL-1β и IL-6, и других медиаторов воспаления с последовательной активацией нейтрофилов, моноцитов, макрофагов, и переносом этих молекул и клеток в альвеолярные пространства, увеличивая начальное вовлечение. Развитие этого гипервоспаления происходит при других заболеваниях, таких как респираторный сепсис, синдром активации макрофагов и сепсис у взрослых и новорожденных.Severe and critically ill patients with Covid-19 develop acute respiratory distress syndrome. This syndrome is characterized by the presence of inflammatory phenomena in the alveoli, which are expanded by the body's systemic circulation. During this syndrome, there is involvement of the pulmonary endothelium with increased vascular permeability and the movement of cells and macromolecules into the alveolar space, where they inactivate the pulmonary surfactant, forming typical hyaline membranes (Janz and Ware (2014). Clin Chest Med; 35: 685-96). The epithelial barrier is also altered and the inflammatory response is exacerbated with the secretion of proinflammatory ILs such as TNFα, IL-1β and IL-6 and other inflammatory mediators with subsequent activation of neutrophils, monocytes, macrophages, and the movement of these molecules and cells into the alveolar spaces, increasing the initial involvement. The development of this hyperinflammation occurs in other diseases such as respiratory sepsis, macrophage activation syndrome, and sepsis in adults and neonates.
В настоящее время не существует эффективной терапии для пациентов с заболеванием Covid-19. Одобренные терапии используются для лечения других заболеваний, например введение моноклональных антител против IL-1 (анакинра), IL-6 (тоцилизумаб) и ингибиторов белка Янус-киназы. Однако эти лекарственные средства оказались неэффективными, а также являются иммунодепрессантами, поэтому использование этих терапий для лечения Covid-19 может привести к ухудшению общего состояния пациента, поскольку подтверждена персистенция вируса в течение заболевания, и даже после клинического выздоровления пациентов. Эффективного и безопасного лечения респираторного сепсиса, синдрома активации макрофагов, неонатального сепсиса, а также дыхательной недостаточности также не существует.There is currently no effective therapy for patients with Covid-19. Approved therapies are used to treat other diseases, such as monoclonal antibodies against IL-1 (anakinra), IL-6 (tocilizumab) and Janus kinase inhibitors. However, these drugs have proven ineffective and are also immunosuppressants, so using these therapies to treat Covid-19 may worsen the overall condition of the patient, as the persistence of the virus during the disease and even after clinical recovery of patients has been confirmed. There is also no effective and safe treatment for respiratory sepsis, macrophage activation syndrome, neonatal sepsis, and respiratory failure.
Поэтому представляет большой интерес получение лекарственных средств, эффективных для лечения гипервоспаления и характерного для этих патологий «цитокинового шторма».Therefore, it is of great interest to obtain drugs that are effective for the treatment of hyperinflammation and the “cytokine storm” characteristic of these pathologies.
Сущность изобретенияThe essence of the invention
Настоящее изобретение решает проблему, указанную выше, путем предоставления фармацевтической композиции для лечения и профилактики синдрома цитокинового шторма, которая включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, в концентрации 1,8-3,6 мг/мл и сахарозу в концентрации 20-30 мг/мл, что неожиданно синергетически увеличивает биологическую активность указанного пептида, в дополнение к тому, что он является определяющим фактором для индукции регуляторных Т-клеток, которые контролируют степень воспаления. Композиция по изобретению способна уменьшать гипервоспаление, характерное для подгруппы пациентов с Covid-19, у которых заболевание прогрессирует до тяжелой стадии, характеризующейся респираторным дистресс-синдромом, как это происходит при респираторном сепсисе, синдроме активации макрофагов, а также сепсисе у новорожденных и взрослых. Введение пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, снижает уровень провоспалительных цитокинов у пациентов с заболеванием Covid-19, не вызывая иммуносупрессии или серьезных побочных эффектов или тех, которые связаны с пептидной терапией.The present invention solves the problem mentioned above by providing a pharmaceutical composition for the treatment and prevention of cytokine storm syndrome, which comprises a peptide identified as SEQ ID NO: 1, at a concentration of 1.8-3.6 mg / ml and sucrose at a concentration of 20-30 mg / ml, which unexpectedly synergistically increases the biological activity of said peptide, in addition to being a determining factor for the induction of regulatory T cells that control the degree of inflammation. The composition of the invention is capable of reducing hyperinflammation characteristic of a subgroup of patients with Covid-19 in whom the disease progresses to a severe stage characterized by respiratory distress syndrome, as occurs in respiratory sepsis, macrophage activation syndrome, as well as sepsis in neonates and adults. Administration of the peptide identified as SEQ ID NO: 1 reduces the level of proinflammatory cytokines in patients with Covid-19 disease without causing immunosuppression or serious side effects or those associated with peptide therapy.
Пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, получен из области белка HSP60, состоящей из аминокислот с 83 по 109. HSP60 является высокоиммуногенным как у здоровых людей, так и у пациентов с аутоиммунными заболеваниями. Однако уровень антител и Т-клеток, которые может индуцировать этот белок, выше у пациентов с аутоиммунными заболеваниями (de Jong et al (2009). Arthritis Rheum. 7 (60): 1966-1976).The peptide identified as SEQ ID NO: 1 is derived from the region of the HSP60 protein consisting of amino acids 83 to 109. HSP60 is highly immunogenic in both healthy individuals and patients with autoimmune diseases. However, the levels of antibodies and T cells that this protein can induce are higher in patients with autoimmune diseases (de Jong et al (2009). Arthritis Rheum. 7 (60): 1966-1976).
Этот белок обладает большой способностью стимулировать провоспалительную реактивность врожденной иммунной системы. Также было обнаружено, что HSP60 индуцирует экспрессию генов IL-12 и IL-15, цитокинов, вовлеченных в индукцию фенотипа Th1. Эти факты предполагают, что HSP60 действует как сигнал опасности для врожденной иммунной системы (Habich et al. (2005). J.Immunol. 3 (174): 1298-1305). С другой стороны, пептиды, полученные из HSP60, также могут представлять собой сигнал опасности (Quintana and Cohen (2011). Trends Immunol. 2 (32): 89-95).This protein has a great capacity to stimulate the proinflammatory reactivity of the innate immune system. HSP60 has also been found to induce the expression of IL-12 and IL-15 genes, cytokines involved in the induction of the Th1 phenotype. These facts suggest that HSP60 acts as a danger signal for the innate immune system (Habich et al. (2005). J. Immunol. 3 (174): 1298-1305). On the other hand, HSP60-derived peptides may also represent a danger signal (Quintana and Cohen (2011). Trends Immunol. 2 (32): 89-95).
Пептид SEQ ID NO: 1 содержит несколько перекрывающихся Т-клеточных эпитопов. Он увеличивает частоту Treg-клеток с CD4+CD25highFoxp3+ фенотипом в анализах ex vivo с мононуклеарными клетками периферической крови пациентов с ревматоидным артритом. Однако этого не происходит с клетками от здоровых доноров (Barbera et al (2016). Cell Stress. Chaperones 4 (21): 735-744).The peptide SEQ ID NO: 1 contains several overlapping T cell epitopes. It increases the frequency of Treg cells with the CD4+CD25 high Foxp3+ phenotype in ex vivo assays with peripheral blood mononuclear cells from patients with rheumatoid arthritis. However, this does not occur with cells from healthy donors (Barbera et al (2016). Cell Stress. Chaperones 4 (21): 735-744).
В международных патентных заявках № PCT/CU2005/000008 и PCT/CU2009/000009 заявлен пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, и его применение для лечения ревматоидного артрита, болезни Крона, язвенного колита и сахарного диабета I типа, соответственно. Все эти патологии относятся к неинфекционным заболеваниям. Кроме того, в патентной заявке WO 2019/129315 описывается очень стабильная фармацевтическая композиция, содержащая пептид SEQ ID NO: 1, ее введение вызывает снижение антител против цитруллинированных пептидов и других параметров, тесно связанных с цитруллинированием белков.International patent applications No. PCT/CU2005/000008 and PCT/CU2009/000009 claim a peptide identified as SEQ ID NO: 1 and its use for the treatment of rheumatoid arthritis, Crohn's disease, ulcerative colitis and type 1 diabetes mellitus, respectively. All of these pathologies are non-infectious diseases. In addition, patent application WO 2019/129315 describes a highly stable pharmaceutical composition containing the peptide SEQ ID NO: 1, the administration of which causes a decrease in antibodies against citrullinated peptides and other parameters closely related to protein citrullination.
Пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, получают путем химического синтеза. С использованием экспериментов, таких как описанные в настоящем изобретении, можно оценить те иммунологические механизмы, индуцированные пептидом, которые способствуют контролю гипервоспаления. Фармацевтическая композиция хорошо переносилась и имела высокий профиль безопасности без признаков иммуносупрессии. Ни у одного из пациентов не было выявлено серьезных нежелательных явлений.The peptide identified as SEQ ID NO: 1 is obtained by chemical synthesis. Using experiments such as those described in the present invention, it is possible to evaluate those immunological mechanisms induced by the peptide that contribute to the control of hyperinflammation. The pharmaceutical composition was well tolerated and had a high safety profile with no signs of immunosuppression. No serious adverse events were detected in any of the patients.
Для целей настоящего изобретения под синдромом цитокинового шторма понимают повышение уровней провоспалительных цитокинов, когда достигаются концентрации, превышающие нормальные уровни. Этими провоспалительными цитокинами являются IL-6, TNFα, IL-1, IL-17 и другие. Это также относится к повышению уровней других цитокинов, таких как IL-10, IL-8 и IL-5. Также этот термин включает повышение уровней биомаркеров воспаления, таких как С-реактивный белок, фибриноген, D-димер, печеночные трансаминазы, лактатдегидрогеназа и ферритин. Повышение уровней этих молекул, связанное с цитокиновым штормом, происходит у пациентов, страдающих воспалительными патологиями, такими как: острая дыхательная недостаточность, синдром активации макрофагов, респираторный сепсис, лихорадка денге, печеночная энцефалопатия и перикардит. При клиническом обследовании у пациентов могут наблюдаться постоянная лихорадка, слабость, утомляемость и тошнота.For the purposes of the present invention, cytokine storm syndrome is understood to mean an increase in the levels of proinflammatory cytokines, when concentrations exceeding normal levels are reached. These proinflammatory cytokines are IL-6, TNFα, IL-1, IL-17 and others. This also applies to an increase in the levels of other cytokines, such as IL-10, IL-8 and IL-5. This term also includes an increase in the levels of inflammation biomarkers, such as C-reactive protein, fibrinogen, D-dimer, liver transaminases, lactate dehydrogenase and ferritin. An increase in the levels of these molecules, associated with a cytokine storm, occurs in patients suffering from inflammatory pathologies, such as: acute respiratory failure, macrophage activation syndrome, respiratory sepsis, dengue fever, hepatic encephalopathy and pericarditis. On clinical examination, patients may experience persistent fever, weakness, fatigue, and nausea.
В другом аспекте изобретение раскрывает применение фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, для получения лекарственного средства для лечения и профилактики синдрома цитокинового шторма. К удивлению, лечение композицией, включающей указанный пептид, позволяет отменить искусственную вентиляцию легких у пациентов с Covid-19, улучшить течение интерстициальной пневмонии, снизить уровень реагентов острой фазы воспаления между 24 и 48 часами и снизить уровень биомаркеров воспаления. Быстрое снижение уровня С-реактивного белка всего за 24 часа является неожиданным открытием. Ранее у пациентов с ревматоидным артритом, получавших лечение этим пептидом, не удавалось продемонстрировать значительное снижение С-реактивного белка. (Prada, et al (2018). J Clin Trials 1 (8): 1-11).In another aspect, the invention discloses the use of a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 for the preparation of a medicament for the treatment and prevention of cytokine storm syndrome. Surprisingly, treatment with a composition comprising the peptide allows for the discontinuation of mechanical ventilation in patients with Covid-19, improvement in the course of interstitial pneumonia, a decrease in the level of acute phase reactants of inflammation between 24 and 48 hours, and a decrease in the level of inflammatory biomarkers. The rapid decrease in C-reactive protein levels in just 24 hours is an unexpected finding. Previously, patients with rheumatoid arthritis treated with this peptide failed to demonstrate a significant decrease in C-reactive protein. (Prada, et al (2018). J Clin Trials 1 (8): 1-11).
Настоящее изобретение демонстрирует способность пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, вводимого внутривенно, уменьшать дыхательную недостаточность, гипервоспаление, уровень реагентов острой фазы воспаления и провоспалительных цитокинов у пациентов с Covid-19. К удивлению, эти результаты были воспроизведены у пациентов с респираторным сепсисом, у которых наблюдался респираторный дистресс-синдром.The present invention demonstrates the ability of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, administered intravenously, to reduce respiratory failure, hyperinflammation, acute phase reactants and proinflammatory cytokines in patients with Covid-19. Surprisingly, these results were reproduced in patients with respiratory sepsis who experienced respiratory distress syndrome.
В конкретном примере фармацевтическую композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, используют для получения лекарственного средства для лечения и профилактики синдрома цитокинового шторма, проявляющегося в виде острого респираторного дистресс-синдрома, синдрома активации макрофагов, респираторного сепсиса у взрослых или новорожденных, синдрома системного воспалительного ответа, венозной или артериальной тромбоэмболии, острого повышения уровней ферритина, тяжелого перикардита, острого повышения печеночных трансаминаз, вызывающего печеночную энцефалопатию, или заболевания, связанного с терапией Т-клетками с химерным антигенным рецептором. Патологии, которые лечат фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, включают синдром цитокинового шторма, лежащий в основе синдрома системного воспалительного ответа, который возникает у пациентов после ожогов или тяжелых травм или при острых воспалительных заболеваниях. В одном варианте осуществления изобретения лекарственное средство вводят внутривенно.In a specific example, a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1 is used to prepare a medicament for the treatment and prevention of cytokine storm syndrome manifested as acute respiratory distress syndrome, macrophage activation syndrome, respiratory sepsis in adults or neonates, systemic inflammatory response syndrome, venous or arterial thromboembolism, acute increase in ferritin levels, severe pericarditis, acute increase in liver transaminases causing hepatic encephalopathy, or a disease associated with chimeric antigen receptor T-cell therapy. Pathologies treated with a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1 include cytokine storm syndrome underlying systemic inflammatory response syndrome that occurs in patients after burns or severe injuries or in acute inflammatory diseases. In one embodiment of the invention, the drug is administered intravenously.
В примере изобретения лекарственное средство применяют для лечения и профилактики синдрома цитокинового шторма, вызываемого инфекционным заболеванием. В конкретном варианте осуществления указанное инфекционное заболевание представляет собой Covid-19 или лихорадку денге.In an example of the invention, the medicinal product is used to treat and prevent cytokine storm syndrome caused by an infectious disease. In a specific embodiment, said infectious disease is Covid-19 or dengue fever.
Объектом настоящего изобретения является способ лечения или предупреждения синдрома цитокинового шторма, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, фармацевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1. В конкретном примере синдром цитокинового шторма проявляется в виде острого респираторного дистресс-синдрома, синдрома активации макрофагов, респираторного сепсиса у взрослых или новорожденных, синдрома системной воспалительной реакции, венозной или артериальной тромбоэмболии, острого повышения уровня ферритина, тяжелого перикардита, острого повышения печеночных трансаминаз, вызывающего печеночную энцефалопатию, или заболевания, связанного с терапией Т-клетками с химерным антигенным рецептором. Например, цитокиновый шторм (который лечат или предотвращают способом по изобретению) вызывается инфекционным заболеванием.The subject of the present invention is a method for treating or preventing cytokine storm syndrome, which comprises administering to a patient in need thereof a pharmaceutically effective amount of a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1. In a specific example, cytokine storm syndrome is manifested as acute respiratory distress syndrome, macrophage activation syndrome, respiratory sepsis in adults or neonates, systemic inflammatory response syndrome, venous or arterial thromboembolism, acute increase in ferritin, severe pericarditis, acute increase in liver transaminases causing hepatic encephalopathy, or a disease associated with chimeric antigen receptor T-cell therapy. For example, cytokine storm (which is treated or prevented by the method of the invention) is caused by an infectious disease.
В качестве примера, способ по изобретению полезен для лечения инфекционного заболевания, такого как Covid-19 или лихорадка денге. В другом примере изобретения в указанном способе композицию вводят внутривенно.As an example, the method of the invention is useful for treating an infectious disease such as Covid-19 or dengue fever. In another example of the invention, in said method, the composition is administered intravenously.
Введение фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, пациентам для индукции уменьшения событий, связанных с дыхательной недостаточностью. Это патологическое состояние вызывает у пациентов необходимость в:Administration of a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1 to patients to induce a reduction in respiratory failure events. This pathological condition causes patients to require:
• Кислородной терапии для поддержания насыщения кислородом (SO2) выше 93%• Oxygen therapy to maintain oxygen saturation (SO2) above 93%
• Насыщении кислородом более чем на 3 процентных пункта или снижении парциального давления кислорода в артериальной крови (PaO2) более чем на 10% при стабильной фракции вдыхаемого кислорода (FiO2) за последние 24 часа• Oxygen saturation by more than 3 percentage points or a decrease in arterial partial pressure of oxygen (PaO2) by more than 10% with a stable fraction of inspired oxygen (FiO2) over the past 24 hours
• Повышении FiO2 для поддержания стабильного уровня SO2 или другой потребности в искусственной вентиляции легких за последние 24 часа.• Increasing FiO2 to maintain stable SO2 levels or other need for mechanical ventilation over the past 24 hours.
• Увеличении количества и/или размеров областей легочной консолидации.• Increase in the number and/or size of areas of pulmonary consolidation.
Кроме того, введение композиции по изобретению полезно для лечения пациентов с инфекционным заболеванием Covid-19, когда указанные пациенты нуждаются в кислородной терапии не менее 6 л/мин плюс имеют одно из следующих состояний:In addition, administration of the composition of the invention is useful for treating patients with the infectious disease Covid-19, when said patients require oxygen therapy of at least 6 L/min plus have one of the following conditions:
• Хрипы или прерывистая речь• Wheezing or slurred speech
• Частота дыхания более 22 вдохов/мин при кислородотерапии при 6 л/мин• Respiratory rate greater than 22 breaths/min with oxygen therapy at 6 L/min
• PaO2: менее 65 мм рт.ст.• PaO2: less than 65 mmHg
• Ухудшение рентгенологической картины• Deterioration of the radiographic picture
• Повышение температуры до 39°C или выше• Temperature rise to 39°C or higher
• Снижение исходных значений гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов (гемоглобин ≤9,2 г/дл, лейкоциты ≤5000/мм3, тромбоциты ≤110000/мм• Decreased baseline values of hemoglobin, platelets and leukocytes (hemoglobin ≤9.2 g/dL, leukocytes ≤5000/mm3, platelets ≤110000/mm
• Снижение оседания эритроцитов в отличие от С-реактивного белка, уровень которого повышен или не изменен.• Decreased erythrocyte sedimentation, in contrast to C-reactive protein, the level of which is increased or unchanged.
• Повышение исходного уровня триглицеридов выше 3 ммоль/л• Increase in baseline triglyceride levels above 3 mmol/L
• Увеличение исходного значения ферритина от 500 нг/мл или абсолютное значение ферритина больше или равное 2000 нг/мл• Increase in baseline ferritin value from 500 ng/ml or absolute ferritin value greater than or equal to 2000 ng/ml
• Уровень трансаминазы аспартатаминотрансферазы больше или равен 30 МЕд/л• Aspartate aminotransferase transaminase level is greater than or equal to 30 IU/L
• Повышение уровня D-димера• Increased D-dimer levels
• Фибриноген менее 2,5 г/л• Fibrinogen less than 2.5 g/l
• Неврологические проявления• Neurological manifestations
Композиция по изобретению также полезна для лечения пациентов с Covid-19, которые переходят в тяжелое состояние без необходимости в кислородотерапии, но у которых наблюдается повышение исходного значения ферритина от 500 нг/мл или абсолютное значение ферритина больше или равное 2000 нг/мл, при прогрессирующих рентгенологических признаках мультифокальной интерстициальной пневмонии.The composition of the invention is also useful for treating patients with Covid-19 who become severely ill without the need for oxygen therapy, but who have an increase in baseline ferritin of 500 ng/ml or an absolute ferritin value greater than or equal to 2000 ng/ml, with progressive radiographic evidence of multifocal interstitial pneumonia.
Композиция по изобретению также полезна для лечения заболеваний, характеризующихся состоянием острого гипервоспаления, таких как заболевание, при котором развивается респираторный сепсис у взрослых или новорожденных; и при заболеваниях, при которых развивается респираторный дистресс-синдром, а также при указанном синдроме, вызванном механическими и физическими причинами.The composition according to the invention is also useful for treating diseases characterized by a state of acute hyperinflammation, such as a disease in which respiratory sepsis develops in adults or neonates; and in diseases in which respiratory distress syndrome develops, as well as in said syndrome caused by mechanical and physical causes.
Краткое описание чертежейBrief description of the drawings
Фиг. 1. Частота Т-клеток, определенная методом проточной цитометрии, которые экспрессируют CD4+ Foxp3+ фенотип, выделенных из селезенки мышей BALB/c после инокуляции фармацевтической композицией пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 10 мг/мл (10), 30 мг/мл (30) и 80 мг/мл (80). Для анализа данных использовали статистические критерии Крускала-Уоллиса и Данна. Разные буквы означают статистически значимые различия (P <0,05).Fig. 1. Frequency of T cells, determined by flow cytometry, expressing the CD4+ Foxp3+ phenotype isolated from the spleen of BALB/c mice after inoculation with a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, where sucrose was added at a concentration of 10 mg/ml (10), 30 mg/ml (30) and 80 mg/ml (80). Kruskal-Wallis and Dunn statistical tests were used to analyze the data. Different letters indicate statistically significant differences (P < 0.05).
Фиг. 2. Частота Т-клеток, определенная методом проточной цитометрии, которые экспрессируют CD4+ Foxp3+ фенотип, выделенных из селезенки мышей BALB/c после инокуляции фармацевтической композицией пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 20 мг/мл (20), 30 мг/мл (30) и 40 мг/мл (40). Для анализа данных использовали статистические критерии Крускала-Уоллиса и Данна. Разные буквы означают статистически значимые различия (P <0,05)Fig. 2. Frequency of T cells, determined by flow cytometry, expressing the CD4+ Foxp3+ phenotype isolated from the spleen of BALB/c mice after inoculation with a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, where sucrose was added at a concentration of 20 mg/mL (20), 30 mg/mL (30) and 40 mg/mL (40). Kruskal-Wallis and Dunn statistical tests were used to analyze the data. Different letters indicate statistically significant differences (P < 0.05)
Подробное представление примеров/ПримерыDetailed presentation of examples/Examples
Пример 1. Лечение пациентов с заболеванием Covid-19 фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 1. Treatment of patients with Covid-19 disease with a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Это иллюстрируется на примере десяти пациентов, поступивших в отделение интенсивной терапии военного госпиталя Luis Dias Soto, с инфекционным заболеванием Covid-19. Эти пациенты получали медицинскую помощь в соответствии с протоколом, установленным Министерством здравоохранения Кубы для лечения этого заболевания. У этих пациентов развился острый респираторный дистресс-синдром, и в тот же день им была проведена искусственная вентиляция легких/вентиляция со сбросом давления в дыхательных путях (VAM APRV). После получения информированного согласия, установленного кубинским регулирующим органом и Комитетом по этике и наблюдению указанного госпиталя, пациенты получали фармацевтическую композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1. Указанный пептид был получен путем химического синтеза методом, хорошо известным в данной области техники.This is illustrated by the example of ten patients admitted to the Intensive Care Unit of the Luis Dias Soto Military Hospital with the infectious disease Covid-19. These patients received medical care in accordance with the protocol established by the Cuban Ministry of Health for the treatment of this disease. These patients developed acute respiratory distress syndrome and were treated with artificial ventilation/ventilation with airway pressure release (VAM APRV) on the same day. After obtaining informed consent established by the Cuban regulatory authority and the Ethics and Monitoring Committee of said hospital, the patients received a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1. Said peptide was obtained by chemical synthesis using a method well known in the art.
Фармацевтическую композицию вводили внутривенно один раз каждые 12 часов. Восьми пациентам вводили 1 мг пептида на пациента при каждом применении. Пациенты с кодом 5 и 6 получали по 2 мг каждые 12 часов. Среди сопутствующих заболеваний у этих пациентов были онкологические заболевания. Демографические характеристики пациентов, а также дни VAM APRV и введения пептида отражены в Таблице 1.The pharmaceutical composition was administered intravenously once every 12 hours. Eight patients were administered 1 mg of peptide per patient at each administration. Patients with codes 5 and 6 received 2 mg every 12 hours. Among the comorbidities in these patients were oncological diseases. The demographic characteristics of the patients, as well as the days of VAM APRV and peptide administration are reflected in Table 1.
Характеристики пациентов, получавших лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1Table 1
Characteristics of patients treated with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1
HTA
ожирение курениеdiabetes mellitus
HTA
obesity smoking
ожирение синдром
Кушинга
множественные узлы в щитовидной железе
опухоль надпочечниковdiabetes mellitus
obesity syndrome
Cushing's
multiple nodules in the thyroid gland
adrenal tumor
рак мочевого пузыряdiabetes mellitus
bladder cancer
рак мочевого пузыряdiabetes mellitus
bladder cancer
Как видно из таблицы, у десяти пациентов с заболеванием Covid-19, получавших лечение пептидом, были факторы риска, предрасполагающие к тяжелому или критическому состоянию заболевания. Только у одного пациента не было сопутствующих заболеваний, но его преклонный возраст (80 лет) является фактором риска. В частности, этот пациент идентифицирован как не имеющий сопутствующих заболеваний. У 5 пациентов был тромбоз глубоких вен. Однако клиническое течение у десяти пациентов при введении пептида было благоприятным. К моменту экстубации острый респираторный дистресс-синдром считается устраненным. Эти результаты показывают, что лечение пептидом было эффективным при остром респираторном дистресс-синдроме. Исчезновение этого синдрома у пациентов совпало с их клиническим и рентгенологическим улучшением. У пациента с тромбозом глубоких вен также было благоприятное развитие. У этих пациентов не было никаких симптомов иммуносупрессии. До терапии у них была лимфопения, характерный признак пациентов с Covid-19. В результате лечения пептидом постепенно нормализовались уровни циркулирующих лимфоцитов.As shown in the table, ten patients with Covid-19 disease treated with the peptide had risk factors predisposing to severe or critical disease. Only one patient had no comorbidities, but his advanced age (80 years) is a risk factor. In particular, this patient was identified as having no comorbidities. Five patients had deep vein thrombosis. However, the clinical course of ten patients with the peptide administration was favorable. At the time of extubation, acute respiratory distress syndrome was considered to be resolved. These results indicate that the peptide treatment was effective in acute respiratory distress syndrome. The disappearance of this syndrome in patients coincided with their clinical and radiographic improvement. The patient with deep vein thrombosis also had a favorable development. These patients did not have any symptoms of immunosuppression. Before therapy, they had lymphopenia, a characteristic feature of patients with Covid-19. As a result of treatment with the peptide, the levels of circulating lymphocytes gradually normalized.
В специальной литературе сообщается, что 85-90% пациентов с острым респираторным дистресс-синдромом не выживают. На Кубе среди пациентов с подтвержденным SAR-COV-2, перешедшим в критическую или тяжелую стадию, уровень летальности составил 68,6% у лиц, не получавших лечение фармацевтической композицией, которая включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1. Напротив, уровень летальности составил 13,0% у критических или тяжелобольных пациентов с подтвержденным SAR-COV-2, которых лечили фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.The literature reports that 85-90% of patients with acute respiratory distress syndrome do not survive. In Cuba, among patients with confirmed SAR-COV-2 who progressed to a critical or severe stage, the case fatality rate was 68.6% in those who did not receive treatment with the pharmaceutical composition that includes the peptide identified as SEQ ID NO: 1. In contrast, the case fatality rate was 13.0% in critical or severely ill patients with confirmed SAR-COV-2 who were treated with the pharmaceutical composition that includes the peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Пример 2. Введение фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, для предотвращения развития респираторного дистресс-синдрома.Example 2. Administration of a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1 for preventing the development of respiratory distress syndrome.
У тяжелобольных и критически больных пациентов с Covid-19 развивается респираторный дистресс-синдром, который может привести к летальному исходу. К удивлению, введение фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, предотвращало развитие острого респираторного дистресс-синдрома. Пептид вводили на ранней стадии, после появления первых признаков (прогрессирующие рентгенологические показатели мультифокальной интерстициальной пневмонии, повышенный ферритин (в 2 раза выше нормы), пульсоксиметрия: кислородная сатурация ниже 94). Таким образом, введение указанного пептида предотвращало необходимость в искусственной вентиляции легких. Таким образом удалось избежать вероятной эволюции до нозокомиального сепсиса.Severely and critically ill patients with Covid-19 develop respiratory distress syndrome, which can be fatal. Surprisingly, the administration of a pharmaceutical composition including the peptide identified as SEQ ID NO: 1 prevented the development of acute respiratory distress syndrome. The peptide was administered at an early stage, after the first signs appeared (progressive radiographic indicators of multifocal interstitial pneumonia, elevated ferritin (2 times higher than normal), pulse oximetry: oxygen saturation below 94). Thus, the administration of this peptide prevented the need for artificial ventilation. Thus, it was possible to avoid the likely evolution to nosocomial sepsis.
Это продемонстрировано на примере 42-летней пациентки с заболеванием Covid-19, госпитализированной в палату интенсивного ухода госпиталя “Pedro Kouri” Института тропической медицины. Эта пациентка получила медицинскую помощь в соответствии с протоколом, установленным Министерством здравоохранения Кубы для лечения этого заболевания, но у нее возникла внезапная одышка с повышением температуры до 39°C и концентрацией ферритина 700 нг/мл. После получения информированного согласия фармацевтическую композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, вводили внутривенно в дозе 1 мг каждые 12 часов. Через 2 часа исчезло состояние одышки и снизилась температура тела. У пациенки не развился острый респираторный дистресс-синдром, а концентрация ферритина снизилась ниже 500 нг/мл через 72 часа.This is demonstrated in the case of a 42-year-old female patient with Covid-19 admitted to the intensive care unit of the Pedro Kouri Hospital, Institute of Tropical Medicine. The patient received care according to the protocol established by the Cuban Ministry of Health for the treatment of this disease, but she developed sudden dyspnea with a fever of 39°C and a ferritin concentration of 700 ng/mL. After obtaining informed consent, a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was administered intravenously at a dose of 1 mg every 12 hours. After 2 hours, the dyspnea disappeared and the body temperature decreased. The patient did not develop acute respiratory distress syndrome, and the ferritin concentration decreased below 500 ng/mL after 72 hours.
Кроме того, осуществляли лечение еще трех пациентов в тяжелом состоянии, демографические характеристики которых и сопутствующие заболевания представлены в Таблице 2. Эти пациенты были госпитализированы в отделение интенсивного ухода Центрального военного госпиталя Luis Dias Soto.In addition, three additional patients in severe condition were treated, whose demographic characteristics and comorbidities are presented in Table 2. These patients were admitted to the Intensive Care Unit of the Luis Dias Soto Central Military Hospital.
Возраст и сопутствующие заболевания тяжелобольных пациентов, получавших лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1Table 2
Age and comorbidities of critically ill patients treated with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1
Сахарный диабет
Ишемия сердцаArterial hypertension
Diabetes mellitus
Cardiac ischemia
Сахарный диабет
Ишемия сердцаArterial hypertension
Diabetes mellitus
Cardiac ischemia
У этих пациентов также были первые настораживающие признаки, такие как: устойчивая повышенная температура выше 38°C, одышка, требующая кислородотерапии с использованием маски или назальной вилки, чтобы поддерживать насыщение кислородом выше 93. У них также было учащенное дыхание с частотой более 25 вдохов в минуту, и им требовалась кислородотерапия при помощи маски или назальной вилки, чтобы поддерживать насыщение кислородом выше 93.These patients also had early warning signs such as: persistent fever above 38°C, shortness of breath requiring oxygen therapy using a mask or nasal prong to maintain oxygen saturation above 93. They also had rapid breathing with a rate of more than 25 breaths per minute and required oxygen therapy using a mask or nasal prong to maintain oxygen saturation above 93.
Введение фармацевтической композиции, содержащей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, осуществляли внутривенно в дозе 1 мг каждые 24 часа. Через 2 часа после начала лечения исчезла одышка, снизилась температура тела. У пациентов не развился острый респираторный дистресс-синдром. Концентрация ферритина упала ниже 200 нг/мл через 72 часа.The pharmaceutical composition containing the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was administered intravenously at a dose of 1 mg every 24 hours. Dyspnea disappeared and body temperature decreased 2 hours after the start of treatment. Patients did not develop acute respiratory distress syndrome. Ferritin concentration fell below 200 ng/ml after 72 hours.
Эти результаты демонстрируют, что лечение пациентов с заболеванием Covid-19 фармацевтической композицией, содержащей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, до того, как у них разовьется острый респираторный дистресс-синдром, позволяет избежать использования искусственной вентиляции легких для этих пациентов.These results demonstrate that treatment of patients with Covid-19 disease with a pharmaceutical composition containing the peptide identified as SEQ ID NO: 1 before they develop acute respiratory distress syndrome allows avoiding the use of mechanical ventilation for these patients.
Пример 3. Снижение уровня С-реактивного белка у пациентов с заболеванием Covid-19, получавших фармацевтическую композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 3. Reduction in C-reactive protein levels in patients with Covid-19 disease treated with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1.
С-реактивный белок является одним из наиболее часто используемых маркеров воспалительных процессов; его считают одним из реагентов острой фазы воспаления. Фармацевтическую композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, вводили внутривенно. Восемь из десяти пациентов с Covid-19, лечение которых описано в Примере 1, получали 1 мг пептида каждые 12 часов. Пациенты с кодом 5 и 6, у которых был рак среди сопутствующих заболеваний, получали по 2 мг пептида каждые 12 часов. Неожиданно, лечение пептидом SEQ ID NO: 1 заметно снижало уровни С-реактивного белка у пациентов, получавших лечение. Эти результаты представлены в Таблице 3.C-reactive protein is one of the most commonly used markers of inflammatory processes; it is considered one of the acute phase reactants of inflammation. A pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was administered intravenously. Eight out of ten patients with Covid-19, the treatment of which is described in Example 1, received 1 mg of the peptide every 12 hours. Patients with code 5 and 6, who had cancer among their comorbidities, received 2 mg of the peptide every 12 hours. Unexpectedly, treatment with the peptide SEQ ID NO: 1 significantly reduced C-reactive protein levels in the treated patients. These results are presented in Table 3.
Концентрация С-реактивного белка (мг/мл) у пациентов, получавших лечение пептидом, идентифицированным как SEQ ID NO: 1Table 3
C-reactive protein concentration (mg/mL) in patients treated with the peptide identified as SEQ ID NO: 1
Снижение С-реактивного белка при лечении этих пациентов является прямым указанием на то, что пептид SEQ ID NO: 1 уменьшает воспаление, и этот результат согласуется с исчезновением острого респираторного дистресс-синдрома, а также с клиническим и рентгенологическим улучшением состояния пациентов.The reduction in C-reactive protein during treatment of these patients is a direct indication that the peptide SEQ ID NO: 1 reduces inflammation, and this result is consistent with the resolution of acute respiratory distress syndrome, as well as with the clinical and radiographic improvement in the patients' condition.
Результаты, полученные в этом исследовании, удивительны. В ходе клинического исследования у пациентов с ревматоидным артритом, получавших лечение тем же пептидом, не было обнаружено снижения этого реагента в острой фазе воспаления.The results obtained in this study are surprising. In a clinical study in patients with rheumatoid arthritis treated with the same peptide, no reduction of this reagent in the acute phase of inflammation was found.
Пример 4. Снижение уровня провоспалительных цитокинов у пациентов с заболеванием Covid-19, получавших лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 4. Reduction in the level of proinflammatory cytokines in patients with Covid-19 disease treated with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1.
В этом исследовании уровни провоспалительных цитокинов IL-6, IL-17, IL-1, IFNγ и TNFα определяли у пациентов с заболеванием Covid-19, получавших композицию, включающую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1. Пациенты были в критическом состоянии. Лечение этих пациентов описано в Примере 1.In this study, levels of proinflammatory cytokines IL-6, IL-17, IL-1, IFNγ and TNFα were determined in patients with Covid-19 disease who received a composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1. The patients were critically ill. The treatment of these patients is described in Example 1.
Указанные цитокины количественно определяли в сыворотке пациентов, обозначенных номерами 1, 2, 3, 4, 7 и 8, которые указаны в Таблице 1, Пример 1. Для определения цитокинов в образцах сыворотки вирус инактивировали при строгих мерах биобезопасности. Количественную оценку осуществляли непосредственно перед применением первой дозы пептида, а также через 48, 72 и 96 часов после начала лечения пептидом.The cytokines were quantified in the serum of patients designated as patients 1, 2, 3, 4, 7, and 8 listed in Table 1, Example 1. To determine the cytokines in the serum samples, the virus was inactivated under strict biosafety precautions. Quantification was performed immediately before the first dose of the peptide, and 48, 72, and 96 hours after the start of peptide treatment.
Все определения цитокинов осуществляли с использованием специфического для каждого из них ELISA (иммуноферментного анализа) в соответствии с рекомендациями изготовителя (Quantikine® R&D Systems, USA). Вкратце, в лунки добавляли 50 мкл указанного разбавителя для каждого цитокина, а затем 200 мкл стандартного раствора, образца или контроля. Планшет инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре, после чего содержимое каждой лунки удаляли. Затем осуществляли три промывки 1X промывочным раствором, в каждую лунку добавляли по 200 мкл конъюгированного антитела и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Промывку повторяли и в каждую лунку добавляли по 200 мкл раствора субстрата. Планшет инкубировали в течение 20 мин при комнатной температуре и защищенным от света, в каждую лунку добавляли по 50 мкл стоп-раствора и определяли оптическую плотность при 450 нм в считывающем устройстве для микропланшетов (Thermo Scientific Multiskan Go, Finland). Второе считывание осуществляли при 570 нм, и полученные значения вычитали из показания при 450 нм, чтобы скорректировать оптические дефекты на планшете. Определение концентрации каждого цитокина осуществляли в трех повторах. Результаты, полученные для IL-6, представлены в Таблице 4.All cytokine determinations were performed using a cytokine-specific ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) according to the manufacturer's recommendations (Quantikine® R&D Systems, USA). Briefly, 50 µl of the indicated diluent for each cytokine was added to the wells, followed by 200 µl of standard, sample, or control. The plate was incubated for 2 h at room temperature, after which the contents of each well were discarded. Three washes with 1X wash solution were then performed, 200 µl of conjugated antibody were added to each well, and the plate was incubated for 1 h at room temperature. The wash was repeated, and 200 µl of substrate solution were added to each well. The plate was incubated for 20 min at room temperature and protected from light, 50 μl of stop solution was added to each well and the optical density was determined at 450 nm in a microplate reader (Thermo Scientific Multiskan Go, Finland). A second reading was performed at 570 nm and the obtained values were subtracted from the reading at 450 nm to correct for optical defects on the plate. The concentration of each cytokine was determined in triplicate. The results obtained for IL-6 are presented in Table 4.
Уровни цитокина IL-6 (пг/мл), обнаруженные у пациентов, получавших пептидTable 4
IL-6 cytokine levels (pg/ml) detected in patients receiving the peptide
Как видно из таблицы, произошло снижение уровня цитокина IL-6, так как пациенты в критическом состоянии получали пептид SEQ ID NO: 1. Это цитокин, уровень которого заметно повышается при воспалительных процессах. Было описано, что у пациентов с болезнью Covid-19, которые переходят в тяжелую стадию, уровень этого цитокина повышен, в отличие от пациентов с легкими симптомами заболевания. Точно так же у этих пациентов было обнаружено снижение IL-17, IL-1, IFNγ и TNFα.As can be seen from the table, there was a decrease in the level of the cytokine IL-6, as critically ill patients received the peptide SEQ ID NO: 1. This is a cytokine whose level is significantly increased in inflammatory processes. It has been described that in patients with Covid-19 disease who progress to a severe stage, the level of this cytokine is increased, in contrast to patients with mild symptoms of the disease. Similarly, in these patients, a decrease in IL-17, IL-1, IFNγ and TNFα was found.
Эти результаты подтверждают, что лечение пептидом уменьшает гипервоспаление и цитокиновый шторм, развивающийся у пациентов с заболеванием Covid-19, переходящим в тяжелую стадию.These results confirm that treatment with the peptide reduces hyperinflammation and cytokine storm that develops in patients with severe Covid-19 disease.
Пример 5. Лечение пациента с заболеванием Covid-19, у которого наблюдались высокие концентрации ферритина без дыхательной недостаточности, с использованием фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 5. Treatment of a patient with Covid-19 disease who had high ferritin concentrations without respiratory failure using a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Пациентка 66 лет, страдающая сахарным диабетом 2 типа, экзогенным ожирением, жировой болезнью печени 4 степени в анамнезе. Она была госпитализирована из-за диагноза COVID-19, у нее были симптомы, связанные с пищеварением, такие как диспепсия, тошнота, периодическая диарея, для лечения которых были показаны прокинетики и противорвотные средства. Кроме того, у пациентов наблюдались высокие концентрации ферритина, более 1500 нг/мл, и увеличение скорости оседания эритроцитов при падении гемоглобина.A 66-year-old female patient with type 2 diabetes mellitus, exogenous obesity, and a history of stage 4 fatty liver disease. She was hospitalized due to the diagnosis of COVID-19, and had digestive symptoms such as dyspepsia, nausea, and intermittent diarrhea, for which prokinetics and antiemetics were indicated. In addition, patients had high ferritin concentrations, over 1500 ng/ml, and an increase in the erythrocyte sedimentation rate with a decrease in hemoglobin.
Из-за этого клинического состояния специалисты назначили лечение фармацевтической композицией, которая включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, в дозе 1 мг каждые 12 часов. К удивлению, через 96 часов после начала лечения значения ферритина снизились до концентрации 350 нг/мл.Due to this clinical condition, specialists prescribed treatment with a pharmaceutical composition that includes the peptide identified as SEQ ID NO: 1, at a dose of 1 mg every 12 hours. Surprisingly, 96 hours after the start of treatment, ferritin values decreased to a concentration of 350 ng / ml.
Лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, продолжалось еще 72 часа.Treatment with the pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was continued for an additional 72 hours.
По окончании лечения концентрация ферритина нормализовалась, и у пациентки не было никаких симптомов.At the end of treatment, ferritin levels returned to normal and the patient had no symptoms.
Эти результаты показывают, что лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, способно снижать концентрацию ферритина, когда она повышается из-за вирусной инфекции.These results demonstrate that treatment with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 is capable of reducing ferritin concentration when it is elevated due to a viral infection.
Пример 6. Лечение пациента с перикардитом вирусной этиологии с использованием фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 6. Treatment of a patient with pericarditis of viral etiology using a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Проходящему лечение пациенту было 48 лет, у него подтвердился Covid-19, и он был госпитализирован в военный госпиталь Holguin. Через два дня после госпитализации у пациента наблюдалось повышенная температуры 38°C и два стула с диареей, и был диагностирован перикардит как осложнение миокардита, вирусной этиологии (Covid-19), без гемодинамических нарушений. У пациента не было дыхательной недостаточности. Лечение начинали с фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, в дозе 1 мг каждые 12 часов.The patient being treated was a 48-year-old man with confirmed Covid-19 and was admitted to the Holguin Military Hospital. Two days after admission, the patient developed a fever of 38°C and two diarrheal stools, and was diagnosed with pericarditis as a complication of myocarditis, viral etiology (Covid-19), without hemodynamic compromise. The patient did not have respiratory failure. Treatment was initiated with a pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1, at a dose of 1 mg every 12 hours.
К удивлению, через 24 часа после начала лечения электрокардиограмма показала улучшение, а через 96 часов лечения пациент был бессимптомным со значительным клиническим улучшением. Эти результаты подтвердили, что фармацевтическая композиция, включающая пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, уменьшает воспаление, возникающее при таких патологиях, как перикардит на фоне миокардита, без гемодинамических нарушений вирусной этиологии.Surprisingly, 24 hours after the start of treatment, the electrocardiogram showed improvement, and after 96 hours of treatment, the patient was asymptomatic with significant clinical improvement. These results confirmed that the pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 reduces inflammation occurring in pathologies such as pericarditis against the background of myocarditis, without hemodynamic disturbances of viral etiology.
Пример 7. Лечение пациента с Covid-19 и печеночной энцефалопатией с использованием фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 7. Treatment of a patient with Covid-19 and hepatic encephalopathy using a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Пациентка 55 лет, европеоидной расы, с патологическим анамнезом артериальной гипертензии. Эта пациентка была госпитализирована в госпиталь Luis Diaz Soto, в изолятор службы внутренних болезней, с положительным результатом на коронавирус, вызывающий заболевание Covid-19. Поэтому она начала лечение от этого заболевания, согласно установленному в стране протоколу. При поступлении она была бессимптомной вплоть до десятого дня. Она сообщила, что в этот день у нее были эпизоды беспокойства или нервозности, связанные с высокими цифрами артериального давления (160/90 мм рт.ст.). Ее осмотрели специалисты в области психиатрии, и были сделаны дополнительные лабораторные анализы. У пациентки не было дыхательной недостаточности. Психиатр поставил диагноз: синдром беспокойства с элементами психопатического синдрома. На 11-е сутки у пациентки ухудшились клинические проявления, появились рвота, высокое артериальное давление, тенденция к тахикардии, без расслабления сфинктера, в связи с чем она была переведена в реанимационное отделение. Гемогазометрия показала наличие выраженной гипонатриемии (концентрация Na 105 ммоль/л). Компьютерная аксиальная томография не показала краниоэнцефалических изменений, а дополнительные тесты показали заметное повышение активности печеночных ферментов, а также лейкоцитоз. На основании этих результатов у пациентки была диагностирована печеночная энцефалопатия. Все гепатотоксические препараты были отменены у пациентки, внесены изменения в диету, продолжено постепенное замещение натрия и начато лечение фармацевтической композицией, которая включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, при 1 мг каждые 12 часов, внутривенно. Ежедневно осуществлялось клиническое наблюдение с дополнительными лабораторными исследованиями. К удивлению, через 72 часа после начала лечения фармацевтической композицией, которая включает пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, динамика была благоприятной, со снижением печеночных ферментов, прогрессивным снижением креатининкиназы и соединений азота в крови, а также нормализацией концентрации натрия. Через 96 часов после начала лечения клинические характеристики, соответствующие печеночной энцефалопатии, были полностью реверсированы, лечение фармацевтической композицией, включающей пептид, продолжалось еще три дня. Эти результаты подтвердили, что введение фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, уменьшает воспаление, возникающее при таких патологиях, как печеночная энцефалопатия.The patient is a 55-year-old Caucasian woman with a history of hypertension. This patient was admitted to the Luis Diaz Soto Hospital, Internal Medicine Service Isolation Unit, after testing positive for the coronavirus that causes Covid-19. She was therefore treated for the disease according to the protocol established in the country. Upon admission, she was asymptomatic until the tenth day. She reported that on that day she had episodes of anxiety or nervousness associated with high blood pressure readings (160/90 mmHg). She was examined by psychiatrists and additional laboratory tests were performed. The patient did not have respiratory failure. The psychiatrist diagnosed anxiety syndrome with elements of psychopathic syndrome. On the 11th day, the patient's clinical manifestations worsened, vomiting, high blood pressure, a tendency to tachycardia, without relaxation of the sphincter appeared, and therefore she was transferred to the intensive care unit. Hemogasometry showed the presence of severe hyponatremia (Na concentration 105 mmol / L). Computed axial tomography did not show craniocerebral changes, and additional tests showed a marked increase in the activity of liver enzymes, as well as leukocytosis. Based on these results, hepatic encephalopathy was diagnosed in the patient. All hepatotoxic drugs were discontinued in the patient, dietary changes were made, gradual sodium replacement was continued, and treatment with a pharmaceutical composition that includes a peptide identified as SEQ ID NO: 1, at 1 mg every 12 hours, intravenously was started. Clinical observation with additional laboratory tests was carried out daily. Surprisingly, 72 hours after the start of treatment with the pharmaceutical composition, which includes the peptide identified as SEQ ID NO: 1, the dynamics were favorable, with a decrease in liver enzymes, a progressive decrease in creatinine kinase and nitrogen compounds in the blood, as well as normalization of sodium concentration. 96 hours after the start of treatment, the clinical characteristics corresponding to hepatic encephalopathy were completely reversed, treatment with the pharmaceutical composition including the peptide continued for three more days. These results confirmed that the administration of the pharmaceutical composition including the peptide identified as SEQ ID NO: 1 reduces inflammation occurring in pathologies such as hepatic encephalopathy.
Пример 8. Лечение пациента с лихорадкой денге с использованием фармацевтической композиции, включающей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1.Example 8. Treatment of a patient with dengue fever using a pharmaceutical composition comprising a peptide identified as SEQ ID NO: 1.
Пациентка 19 лет, обратившаяся в госпиталь Luis Diaz Soto с жалобами на высокую температуру 38,5°C в течение более 72 часов и сильную голокраниальную головную боль. Кроме того, у пациентки была ретроокулярная боль, связанная с дискретной конъюнктивальной инъекцией. На основании этих симптомов пациентка была госпитализирована с подозрением на лихорадку денге. При медицинском осмотре у этой пациентки выявлены гипертермия 39,9°C, кровяное давление 90/60 мм рт.ст., тахикардия, умеренное похолодание конечностей. При осмотре кожных покровов врач обнаружил петехии в области предплечий и живота с положительной петлевой пробой. Пациентку лечили терапевтически с поддержкой объемом 30 мл/кг массы тела в течение 24 часов.A 19-year-old female patient presented to Luis Diaz Soto Hospital complaining of a high fever of 38.5°C for more than 72 hours and severe holocranial headache. In addition, the patient had retroocular pain associated with discrete conjunctival injection. Based on these symptoms, the patient was hospitalized with suspected dengue fever. On physical examination, this patient had hyperthermia of 39.9°C, blood pressure of 90/60 mmHg, tachycardia, and moderate cold extremities. On skin examination, the physician found petechiae on the forearms and abdomen with a positive loop test. The patient was treated therapeutically with a support volume of 30 ml/kg of body weight for 24 hours.
Через 24 часа после госпитализации у пациентки начались боли в животе и рвота. Дополнительные анализы показали лейкопению (общие количество лейкоцитов 2,9×109), скорость оседания эритроцитов 95 мм/ч, С-реактивный белок 150 мг/мл, лактатдегидрогеназа 918 Ед/л, глутамино-щавелевоуксусная трансаминаза 93 МЕд/л, глутаминово-пировиноградная трансаминаза 58 МЕд/л. УЗИ брюшной полости показало наличие свободной жидкости во всех четырех углах, умеренной интенсивности. Желчный пузырь имел утолщенные стенки и перивезикулярный отек, без литиаза. Были применены поддерживающие терапевтические меры для этой пациенки, которые включали кристаллоидные растворы из расчета 35-45 мл/кг массы тела в течение 24 часов.Twenty-four hours after admission, the patient developed abdominal pain and vomiting. Additional tests showed leukopenia (total white blood cell count 2.9 × 109), erythrocyte sedimentation rate 95 mm/h, C-reactive protein 150 mg/mL, lactate dehydrogenase 918 U/L, glutamic-oxaloacetic transaminase 93 IU/L, glutamic-pyruvic transaminase 58 IU/L. Abdominal ultrasound showed free fluid in all four corners, moderate intensity. The gallbladder had thickened walls and perivesicular edema, without lithiasis. Supportive care measures were used for this patient, which included crystalloid solutions at the rate of 35-45 ml/kg of body weight for 24 hours.
Торпидная динамика пациентки и плохой ответ на терапевтические меры, основанные на возмещении жидкости, указали команде медиков на то, что у пациентки развился синдром активации макрофагов вследствие заражения вирусом, вызывающим лихорадку денге. Этот диагноз был подтвержден значениями лабораторных показателей, связанных с данным синдромом, ферритин: 1893 мг/л; фибриноген: 2,31 г/л; С-реактивный белок: 150 мг/мл; оседание эритроцитов: 53 мм/ч.The patient's sluggish dynamics and poor response to fluid replacement therapy suggested to the medical team that the patient had developed macrophage activation syndrome due to infection with the virus that causes dengue fever. This diagnosis was confirmed by laboratory values associated with this syndrome: ferritin: 1893 mg/L; fibrinogen: 2.31 g/L; C-reactive protein: 150 mg/mL; erythrocyte sedimentation rate: 53 mm/h.
На основании этих результатов пациентка была переведена в отделение интенсивной терапии, и фармацевтическую композицию, содержащую пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, вводили внутривенно при 1 мг каждые 12 часов. Целью введения указанной композиции была модуляция иммунного ответа и, таким образом, контроль цитокинового шторма, который, согласно клиническим характеристикам и лабораторным параметрам, развивался у этой пациентки. Через 48 часов после начала лечения у пациентки наблюдалось заметное улучшение, так как исчезли боли в животе, артериальная гипотензия и похолодание конечностей. Пациентка начала принимать пищу. Через 72 часа продолжилось клинико-рентгенологическое улучшение состояния пациентки, поэтому частоту введения фармацевтической композиции, включающей пептид, уменьшили до 1 мг каждые 24 часа. После седьмого дня лечения пациентка была клинически и рентгенологически бессимптомной.Based on these results, the patient was transferred to the intensive care unit and the pharmaceutical composition containing the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was administered intravenously at 1 mg every 12 hours. The purpose of administering the said composition was to modulate the immune response and thus control the cytokine storm that, according to the clinical characteristics and laboratory parameters, was developing in this patient. 48 hours after the start of treatment, the patient showed a noticeable improvement, as abdominal pain, arterial hypotension and cold extremities disappeared. The patient began to eat. After 72 hours, the clinical and radiological improvement of the patient's condition continued, so the frequency of administration of the pharmaceutical composition including the peptide was reduced to 1 mg every 24 hours. After the seventh day of treatment, the patient was clinically and radiologically asymptomatic.
Инфицирование вирусом денге было подтверждено, так как IgM был положительным в серологическом тесте.Dengue virus infection was confirmed as IgM was positive in the serological test.
Все лабораторные показатели нормализовались, и пациентка была выписана из госпиталя.All laboratory parameters returned to normal and the patient was discharged from the hospital.
Эти результаты являются подтверждением того, что изложено в предыдущих примерах, этот пример подтверждает, что фармацевтическая композиция, включающая пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, контролирует цитокиновый шторм, который может быть связан с гемофагоцитарным синдромом, который может быть связан с различными патологиями, такими как лихорадка денге, которые переходят в тяжелую стадию заболевания.These results are confirmation of what is stated in the previous examples, this example confirms that the pharmaceutical composition comprising the peptide identified as SEQ ID NO: 1 controls the cytokine storm that may be associated with hemophagocytic syndrome, which may be associated with various pathologies such as dengue fever, which progress to a severe stage of the disease.
Пример 9. Эффекты концентрации сахарозы на фармакологическое потенциирование пептида SEQ ID NO: 1 для уменьшения воспаления. Example 9. Effects of sucrose concentration on the pharmacological potentiation of the peptide of SEQ ID NO: 1 to reduce inflammation .
Для того чтобы использовать пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, в качестве индуктора молекулярных механизмов, снижающих гипервоспаление у пациентов с COVID-19 и другими патологиями, авторы изобретения исследовали влияние сахара сахарозы на композицию в диапазоне концентраций, чтобы выбрать оптимальную концентрацию этого сахара, связанную с индукцией регуляторных Т-клеток, при внутривенном введении композиции. Для получения композиции использовали 1,8 мг/мл - 3,5 мг/мл пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, и его растворяли в натрий-ацетатном буфере, рН 4; к которому добавляли сахарозу в различных концентрациях, как описано ниже.In order to use the peptide identified as SEQ ID NO: 1 as an inducer of molecular mechanisms that reduce hyperinflammation in patients with COVID-19 and other pathologies, the inventors studied the effect of sucrose sugar on the composition in a range of concentrations in order to select the optimal concentration of this sugar associated with the induction of regulatory T cells when the composition is administered intravenously. To obtain the composition, 1.8 mg / ml - 3.5 mg / ml of the peptide identified as SEQ ID NO: 1 was used and dissolved in sodium acetate buffer, pH 4; to which sucrose was added in various concentrations, as described below.
Самцов мышей линии BALB/c случайным образом разделяли на три группы по 10 мышей в каждой. Мышей, разделенных на группы, инокулировали внутривенно следующим образом:Male BALB/c mice were randomly divided into three groups of 10 mice each. The mice in the groups were inoculated intravenously as follows:
- Группа 1: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 10 мг/мл.- Group 1: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose has been added at a concentration of 10 mg/ml.
- Группа 2: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 30 мг/мл.- Group 2: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose has been added at a concentration of 30 mg/ml.
- Группа 3: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 80 мг/мл.- Group 3: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose has been added at a concentration of 80 mg/ml.
Через четыре дня мыши получили вторую дозу в идентичных условиях. 10 животных в группе умерщвляли на 8-й день после первой инокуляции. Клетки селезенки мышей предварительно инкубировали с Mab 2.4G2 (eBiosciences, USA) для блокирования неспецифического связывания с FC-рецепторами. Затем клетки метили в PBS, содержащем трехпроцентную телячью сыворотку и насыщающие количества следующих моноклональных антител (eBiosciences, USA): конъюгата APC-Cy7-анти-CD4 (клон RM4-5) и конъюгата APC-анти-CD25 (PC61). Транскрипционный фактор Foxp3 оценивали с использованием анти-Foxp3 mAb, конъюгированного с PE (FJK-16s; eBioscience, USA), следуя рекомендациям изготовителя. В качестве контроля использовали изотипически нерелевантное mAb (крысиное PE-Cy5 IgG2a; eBioscience, USA). Область, соответствующая лимфоцитам, обрамлена в соответствии с характеристиками их распределения на гистограммах проточной цитометрии, полученных на цитометре LSR-II™. Анализы осуществляли с использованием программы FlowJo® (Tree Star).Four days later, mice received the second dose under identical conditions. Ten animals per group were sacrificed on day 8 after the first inoculation. Mouse spleen cells were pre-incubated with Mab 2.4G2 (eBiosciences, USA) to block non-specific binding to FC receptors. The cells were then labeled in PBS containing 3% calf serum and saturating amounts of the following monoclonal antibodies (eBiosciences, USA): APC-Cy7-anti-CD4 conjugate (clone RM4-5) and APC-anti-CD25 conjugate (PC61). The transcription factor Foxp3 was assessed using anti-Foxp3 mAb conjugated to PE (FJK-16s; eBioscience, USA) following the manufacturer's recommendations. An isotype-irrelevant mAb (rat PE-Cy5 IgG2a; eBioscience, USA) was used as a control. The area corresponding to lymphocytes is framed according to their distribution characteristics in flow cytometry histograms obtained on an LSR-II™ cytometer. Analyses were performed using FlowJo® software (Tree Star).
Как видно на этой Фиг. 1, у мышей, инокулированных композицией, содержащей пептид, идентифицированный как SEQ ID NO: 1, и сахарозу в концентрации 30 мг/мл, значительно увеличился процент регуляторных Т-клеток, что показывает синергетический эффект между этими компонентами композиции.As can be seen in this Fig. 1, mice inoculated with a composition containing the peptide identified as SEQ ID NO: 1 and sucrose at a concentration of 30 mg/ml had a significant increase in the percentage of regulatory T cells, demonstrating a synergistic effect between these components of the composition.
Чтобы определить, является ли сахароза в этой концентрации решающей для индукции частоты регуляторных Т-клеток, был осуществлен эксперимент в условиях, очень схожих с предыдущим экспериментом, но с сужением диапазона концентраций указанного сахара.To determine whether sucrose at this concentration is critical for the induction of regulatory T cell frequency, an experiment was performed under conditions very similar to the previous experiment, but with a narrower range of concentrations of the indicated sugar.
Мышей случайным образом разделяли на три группы по 10 мышей в каждой. Мышей, разделенных на группы, инокулировали внутривенно следующим образом:Mice were randomly divided into three groups of 10 mice each. Mice in the groups were inoculated intravenously as follows:
- Группа 1: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 20 мг/мл.- Group 1: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose was added at a concentration of 20 mg/ml.
- Группа 2: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 30 мг/мл.- Group 2: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose has been added at a concentration of 30 mg/ml.
- Группа 3: фармацевтическая композиция пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахароза была добавлена в концентрации 40 мг/мл.- Group 3: a pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, wherein sucrose has been added at a concentration of 40 mg/ml.
К удивлению, мыши, для обработки которых использовали эти концентрации сахарозы в пределах 20-40 мг/мл, показали значительное увеличение процента регуляторных Т-клеток по сравнению с группами, для обработки которых использовали концентрации 10-80 мг/мл в предыдущем эксперименте, при этом наблюдался синергетический эффект между компонентами композиции, демонстрируя больший эффект в группах мышей, обработанных фармацевтической композицией пептида, идентифицированного как SEQ ID NO: 1, где сахарозу добавляли в концентрациях 20 и 30 мг/мл (Фиг. 2).Surprisingly, mice treated with these sucrose concentrations in the range of 20-40 mg/mL showed a significant increase in the percentage of regulatory T cells compared to the groups treated with concentrations of 10-80 mg/mL in the previous experiment, with a synergistic effect between the components of the composition being observed, showing a greater effect in the groups of mice treated with the pharmaceutical composition of the peptide identified as SEQ ID NO: 1, where sucrose was added at concentrations of 20 and 30 mg/mL (Figure 2).
Эти результаты позволяют сделать вывод о том, что добавление сахарозы в концентрациях в диапазоне 20-30 мг/мл является определяющим фактором для индукции регуляторных Т-клеток, которые контролируют степень воспаления, эта композиция, вводимая внутривенно, обладает способностью контролировать патологии, характеризующиеся гипервоспалением.These results allow us to conclude that the addition of sucrose at concentrations in the range of 20-30 mg/ml is a determining factor for the induction of regulatory T cells that control the degree of inflammation, this composition, administered intravenously, has the ability to control pathologies characterized by hyperinflammation.
--->--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ SEQUENCE LIST
<110> CENTRO DE INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA<110> CENTRO DE INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA
<120> ПЕПТИД ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СИДРОМА ЦИТОКИНОВОГО ШТОРМА.<120> PEPTIDE FOR THE TREATMENT OF CYTOKINE STORM SYNDROME.
<130> APL ANTIV<130> APL ANTIV
<140> CU 2020-0026<140>CU 2020-0026
<141> 13.04.2020<141> 04/13/2020
<160> 1 <160> 1
<170> PatentIn Ver. 2.1<170> PatentIn Ver. 2.1
<210> 1<210> 1
<211> 27<211> 27
<212> Белок<212> Protein
<213> Искусственная последовательность<213> Artificial sequence
<220> <220>
<223> Описание искусственной последовательности: Пептид<223> Description of the artificial sequence: Peptide
типа APLtype APL
<400> 1<400> 1
Ser Ile Asp Leu Lys Asp Lys Tyr Lys Asn Ile Gly Ala Lys Leu Val Ser Ile Asp Leu Lys Asp Lys Tyr Lys Asn Ile Gly Ala Lys Leu Val
1 5 10 15 1 5 10 15
Gln Leu Val Ala Asn Asn Thr Asn Glu Glu Ala Gln Leu Val Ala Asn Asn Thr Asn Glu Glu Ala
20 25 20 25
<---<---
Claims (11)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU2020-0026 | 2020-04-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2834279C1 true RU2834279C1 (en) | 2025-02-05 |
Family
ID=
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2581110A1 (en) * | 2004-09-24 | 2006-03-30 | Centro De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia | Peptides and apl-type derivatives of hsp60 and pharmaceutical compositions |
| WO2019069307A1 (en) * | 2017-10-06 | 2019-04-11 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Peptides for use in the treatment of viral infections |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2581110A1 (en) * | 2004-09-24 | 2006-03-30 | Centro De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia | Peptides and apl-type derivatives of hsp60 and pharmaceutical compositions |
| WO2019069307A1 (en) * | 2017-10-06 | 2019-04-11 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. | Peptides for use in the treatment of viral infections |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ТЮЛЯНДИНА Е.В. и др. Цитокиновый шторм: Особенности патогенеза, роль в развитии вирусной инфекции. Литературный обзор, Устойчивое развитие науки и образования, 2019, Номер 1, стр. 256-260. CHOUSTERMAN B.G. et al. Cytokine storm and sepsis disease pathogenesis, Semin Immunopathol, 2017, Volume 39(5), pp. 517-528. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2020183389A5 (en) | ||
| KR20170015517A (en) | Pharmaceutical composition for use in prevention and/or treatment of disease that develops or progresses as a result of decrease or loss of activity of blood coagulation factor viii and/or activated blood coagulation factor viii | |
| US11052073B1 (en) | Sphingosine kinase 2 inhibitor for treating coronavirus infection | |
| EP4021482A1 (en) | Pegloticase for treatment of gout in renal transplant recipients | |
| UA125971C2 (en) | Il-15 protein complex pharmaceutical composition and uses thereof | |
| EP4126961A1 (en) | Anti-cd6 antibody compositions and methods for treating and reducing negative effects of a coronavirus including covid-19 | |
| JP7737395B2 (en) | Peptides for the treatment of cytokine storm syndrome | |
| US9084761B2 (en) | Use of interleukin-15 to treat cardiovascular diseases | |
| RU2834279C1 (en) | Peptide for treating cytokine storm syndrome | |
| Meira et al. | Experience with the use of siltuximab in patients with SARS-CoV-2 infection | |
| CA3172251C (en) | Peptide for the treatment of cytokine storm syndrome. | |
| US20230172912A1 (en) | Compounds for treating pneumonia, sepsis, and coronavirus infection | |
| US8691752B2 (en) | Protein product for treatment of infectious diseases and related inflammatory processes | |
| Baykan et al. | Scorpion envenomation-induced acute thrombotic inferior myocardial infarction | |
| Kluckow | Furosemide for packed red cell transfusion in preterm infants: a randomized controlled trial | |
| CN111588850A (en) | New uses of IL-6 receptor antibodies | |
| RU2828013C1 (en) | Compositions of anti-cd6 antibodies and methods of treating and reducing negative consequences of coronavirus, including covid-19 | |
| Kurosawa et al. | A case of an increase in prothrombin Time-International normalized ratio by interaction between warfarin and baloxavir marboxil in a patient on implantable ventricular assist device | |
| CN107184956B (en) | Application of Metrnl protein or gene in preventing and treating sepsis | |
| AU2023326807A1 (en) | Treatment of acute respiratory failure | |
| WO2019059303A1 (en) | Teriparatide-containing liquid pharmaceutical composition having excellent pharmacodynamics and/or stability | |
| Filgueira et al. | Treatment of Systemic Inflammation with Itolizumab: A Single Center Experience | |
| Chen et al. | Preliminary Efficacy of Tocilizumab Treatment in the Patients with COVID-19 | |
| WO2021207051A1 (en) | Methods of treating acute respiratory disorders | |
| Insiripong et al. | Autoimmune Hemolytic Anemia After Inactivated Virus COVID-19 Vaccination: A Report of 2 Cases |