RU2825642C1 - Intranasal composition for preventing and/or treating viral and bacterial infections - Google Patents
Intranasal composition for preventing and/or treating viral and bacterial infections Download PDFInfo
- Publication number
- RU2825642C1 RU2825642C1 RU2023124744A RU2023124744A RU2825642C1 RU 2825642 C1 RU2825642 C1 RU 2825642C1 RU 2023124744 A RU2023124744 A RU 2023124744A RU 2023124744 A RU2023124744 A RU 2023124744A RU 2825642 C1 RU2825642 C1 RU 2825642C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- composition
- molecular weight
- poviargol
- virus
- bacteria
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 85
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title description 9
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 title description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 title description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 title description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 claims abstract description 42
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 39
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims abstract description 34
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims abstract description 30
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims abstract description 29
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims abstract description 29
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 26
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims abstract description 22
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims abstract description 22
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 16
- 241001428935 Human coronavirus OC43 Species 0.000 claims abstract description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 13
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims abstract description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 claims abstract description 8
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 claims abstract description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 6
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 claims abstract description 6
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims abstract 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 12
- 108010013480 succinylated gelatin Proteins 0.000 claims description 12
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 9
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 4
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 abstract description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 108010002885 Polygeline Proteins 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 10
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract description 10
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 9
- 244000309467 Human Coronavirus Species 0.000 abstract description 8
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 abstract description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 16
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 14
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- IUAYMJGZBVDSGL-XNNAEKOYSA-N gramicidin S Chemical compound C([C@@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1)C(C)C)=O)CC(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 IUAYMJGZBVDSGL-XNNAEKOYSA-N 0.000 description 12
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 8
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 6
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 6
- 229910019093 NaOCl Inorganic materials 0.000 description 5
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 5
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 5
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 5
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 5
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 5
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 4
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 3
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 3
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 description 3
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 229960004905 gramicidin Drugs 0.000 description 3
- ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N gramicidina Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 ZWCXYZRRTRDGQE-SORVKSEFSA-N 0.000 description 3
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 3
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Inorganic materials Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 3
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 2
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 2
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003253 viricidal effect Effects 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 208000001528 Coronaviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000620209 Escherichia coli DH5[alpha] Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000550081 Renata Species 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002118 antimicrobial polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 229940041011 carbapenems Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000002016 colloidosmotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical class ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- -1 poviargol Chemical compound 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229940007079 succinylated gelatin Drugs 0.000 description 1
- 230000035322 succinylation Effects 0.000 description 1
- 238000010613 succinylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010610 time kill assay Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 210000002229 urogenital system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001183 volemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 208000012313 wound discharge Diseases 0.000 description 1
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеField of technology to which the invention relates
Изобретение относится к области медицины, а именно фармакологии, и может быть использовано для профилактики и/или лечения инфекций вирусной и бактериальной этиологии носоглотки, носовой полости, в том числе коронавирусной инфекции, гриппа, других ОРВИ.The invention relates to the field of medicine, namely pharmacology, and can be used for the prevention and/or treatment of viral and bacterial infections of the nasopharynx, nasal cavity, including coronavirus infection, influenza, and other acute respiratory viral infections.
Уровень техникиState of the art
Возрастающая роль инфекционных вирусных заболеваний в структуре общей заболеваемости населения, появление новых опасных вирусов (в том числе ранее неидентифицированных) способствуют разработке и внедрению перспективных антимикробных композиций широкого спектра активности с пролонгированным действием.The increasing role of infectious viral diseases in the structure of general morbidity of the population, the emergence of new dangerous viruses (including previously unidentified ones) contribute to the development and implementation of promising antimicrobial compositions with a broad spectrum of activity and prolonged action.
Носовая полость является противомикробным фильтром, в котором широко представлена микрофлора воздуха, в том числе споры грибов, бациллы, микрококки, непатогенные нейссерии, эпидермальный стафилококк, бета-гемолитический стрептококк. К факультативным обитателям носа относятся пневмококки, клебсиелла пнеумония, золотистый стафилококк, бактерии инфлюэнции, кандиды. Эти виды могут послужить причиной аутоинфекции: ринитов, бронхитов, назофарингитов, пневмонии, а также источником инфицирования других людей. У детей микрофлора носа еще более многочисленна и многообразна.The nasal cavity is an antimicrobial filter, which is widely represented by air microflora, including fungal spores, bacilli, micrococci, nonpathogenic Neisseria, epidermal staphylococcus, beta-hemolytic streptococcus. Facultative inhabitants of the nose include pneumococci, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, influenza bacteria, Candida. These species can cause autoinfection: rhinitis, bronchitis, nasopharyngitis, pneumonia, and also be a source of infection for other people. In children, the nasal microflora is even more numerous and diverse.
Прототипом заявленного решения является изобретение по патенту RU 2616523 С1 (17.04.2017, МПК A61K 9/06, A61K 31/22, A61K 36/61, A61K 36/53, А61Р 31/04, А61Р 31/16), представляющее собой интраназальную мазь для лечения и профилактики респираторных инфекций. Согласно данным, приведенным в описании, изобретение характеризуется пролонгированным эффектом, который обеспечивается синергизмом отдельных компонентов препарата. Результаты применения лекарственного препарата были показаны у больных с гриппом и ОРВИ.The prototype of the claimed solution is the invention according to patent RU 2616523 C1 (17.04.2017, IPC A61K 9/06, A61K 31/22, A61K 36/61, A61K 36/53, A61P 31/04, A61P 31/16), which is an intranasal ointment for the treatment and prevention of respiratory infections. According to the data provided in the description, the invention is characterized by a prolonged effect, which is provided by the synergism of the individual components of the drug. The results of using the drug were shown in patients with influenza and acute respiratory viral infections.
При этом авторами данного изобретения не указана необходимая кратность и длительность применения интраназальной мази, при которой достигаются заявленные лечение и профилактика.However, the authors of this invention do not indicate the required frequency and duration of use of the intranasal ointment, which will achieve the stated treatment and prevention.
Кроме того, авторы своими результатами исследований in vitro не подтверждают заявленный противовирусный эффект за счет синергетического действия отдельных компонентов мази. Авторами также не указаны данные по эффективности интраназальной мази в отношении коронавирусов человека, вируса гриппа, других РНК- и ДНК-содержащих вирусов, а также не заявлен антибактериальный эффект мази и ее действие в отношении микробных биопленок.In addition, the authors do not confirm the claimed antiviral effect due to the synergistic action of individual components of the ointment with their in vitro study results. The authors also did not provide data on the effectiveness of the intranasal ointment against human coronaviruses, influenza virus, other RNA- and DNA-containing viruses, nor did they declare the antibacterial effect of the ointment and its effect against microbial biofilms.
Раскрытие сущности изобретенияDisclosure of the essence of the invention
Задача настоящего изобретения направлена на решение проблемы отсутствия эффективной композиции широкого спектра действия для профилактики и/или комплексного лечения инфекционно-воспалительных заболеваний носовой полости при интраназальном применении.The objective of the present invention is to solve the problem of the lack of an effective broad-spectrum composition for the prevention and/or complex treatment of infectious and inflammatory diseases of the nasal cavity when administered intranasally.
Техническим результатом изобретения является создание более эффективной по сравнению с прототипом композиции широкого спектра действия для профилактики и/или комплексного лечения инфекционно-воспалительных заболеваний носовой полости при интраназальном применении, обладающей пролонгированной широкой антимикробной активностью, в частности, в отношении коронавируса человека, вируса гриппа, других РНК- и ДНК-содержащих вирусов и бактерий, обладающей способностью препятствовать формированию и разрушать уже сформированные микробные биопленки.The technical result of the invention is the creation of a more effective, compared to the prototype, broad-spectrum composition for the prevention and/or complex treatment of infectious and inflammatory diseases of the nasal cavity with intranasal use, possessing prolonged broad antimicrobial activity, in particular, with respect to human coronavirus, influenza virus, other RNA- and DNA-containing viruses and bacteria, possessing the ability to prevent the formation and destroy already formed microbial biofilms.
Проблема решается и указанный технический результат достигается созданием композиции для аппликации полости носа, характеризующейся тем, что она содержит высокомолекулярную гиалуроновую кислоту, высокомолекулярный поливинилпирролидон (ПВП), гелофузин, гипохлорит натрия, повиаргол, антибактериальный полипептид, представляющий собой грамицидин С или лизоцим при следующем соотношении компонентов, мас. %:The problem is solved and the specified technical result is achieved by creating a composition for application to the nasal cavity, characterized by the fact that it contains high-molecular hyaluronic acid, high-molecular polyvinylpyrrolidone (PVP), gelofusin, sodium hypochlorite, poviargol, an antibacterial polypeptide, which is gramicidin C or lysozyme, in the following ratio of components, wt. %:
• Гиалуроновая кислота высокомолекулярная - 0,1-2,0;• High molecular weight hyaluronic acid - 0.1-2.0;
• Высокомолекулярный ПВП - 4,0-6.0;• High molecular weight PVP - 4.0-6.0;
• Повиаргол - 0,8-1,2;• Poviargol - 0.8-1.2;
• Антибактериальный полипептид (грамицидин С - 0,03-0,15, или лизоцим - 0,1-18,0);• Antibacterial polypeptide (gramicidin C - 0.03-0.15, or lysozyme - 0.1-18.0);
• Раствор гипохлорита натрия с содержанием активного хлора 1566 мг/л - 49,0-51,0;• Sodium hypochlorite solution with an active chlorine content of 1566 mg/l - 49.0-51.0;
• Гелофузин до 100,0.• Gelofusin up to 100.0.
Количественно-качественное сочетание компонентов в составе предлагаемой к патентованию композиции, приводит к проявлению синергетического действия.The quantitative and qualitative combination of components in the composition proposed for patenting leads to the manifestation of a synergistic effect.
Предметом изобретения является также применение заявленной композиции для профилактики и/или лечения (особенно в периоды обострения сезонных инфекционных заболеваний, эпидемий и пандемий) инфекционно-воспалительных заболеваний носовой полости, вызванных коронавирусами, вирусом гриппа, другими РНК- и ДНК-содержащими вирусами и бактериями, сопровождающихся формированием микробных биопленок, характеризующееся тем, что проводят аппликацию композиции на слизистую полости носа в профилактических или лечебных целях один раз в сутки.The subject of the invention is also the use of the claimed composition for the prevention and/or treatment (especially during periods of exacerbation of seasonal infectious diseases, epidemics and pandemics) of infectious and inflammatory diseases of the nasal cavity caused by coronaviruses, influenza virus, other RNA- and DNA-containing viruses and bacteria, accompanied by the formation of microbial biofilms, characterized in that the composition is applied to the mucous membrane of the nasal cavity for prophylactic or therapeutic purposes once a day.
Термин «гиалуроновая кислота высокомолекулярная» в контексте настоящего изобретения характеризует несульфированный гликозаминогликан, входящий в состав соединительной, эпителиальной и нервной тканей. Высокомолекулярная гиалуроновая кислота является одним из основных компонентов внеклеточного матрикса, содержится во многих биологических жидкостях (слюне, синовиальной жидкости и др.), принимает значительное участие в пролиферации и миграции клеток, продуцируется некоторыми бактериями (напр. Streptococcus). В теле человека весом 70 кг в среднем содержится около 15 граммов гиалуроновой кислоты, треть из которой преобразуется (расщепляется или синтезируется) каждый день.The term "high-molecular hyaluronic acid" in the context of the present invention characterizes non-sulfated glycosaminoglycan, which is part of connective, epithelial and nervous tissues. High-molecular hyaluronic acid is one of the main components of the extracellular matrix, is contained in many biological fluids (saliva, synovial fluid, etc.), plays a significant role in the proliferation and migration of cells, is produced by some bacteria (e.g. Streptococcus). The body of a person weighing 70 kg contains on average about 15 grams of hyaluronic acid, a third of which is converted (broken down or synthesized) every day.
Одной из важных функций гиалуроновой кислоты в соединительной ткани является связывание воды. В результате этого межклеточное вещество приобретает характер желеобразного матрикса, поддерживающего клетки. Связывание воды и обусловленное им набухание, определяет биологическую роль гиалуроновой кислоты в регуляции проницаемости тканей. Гиалуроновая кислота является основным структурообразующим гликозаминогликаном, так как имеет способность концентрировать вокруг себя другие гликоаминогликаны и образовывать агрегаты протеогликанов, которые обладают большой гидрофильностью и эластичностью по сравнению со свободными протеогликанами. Связывая коллагеновые волокна, другие белки и компоненты межклеточного вещества и даже клетки в единую систему, гиалуроновая кислота создает «буферный объем», который определяет прочность и упругость механических тканей, помогает им преодолевать временное воздействие (Н.Н. Сигаева, С.В. Колесов, П.В. Назаров, P.P. Вильданова. Химическая модификация гиалуроновой кислоты и ее применение в медицине // Вестник Башкирского университета. 2012. Т. 17. №3. С. 1220-1241).One of the important functions of hyaluronic acid in connective tissue is water binding. As a result, the intercellular substance acquires the character of a gelatinous matrix that supports the cells. Water binding and the swelling caused by it determine the biological role of hyaluronic acid in regulating tissue permeability. Hyaluronic acid is the main structure-forming glycosaminoglycan, since it has the ability to concentrate other glycosaminoglycans around itself and form proteoglycan aggregates that have greater hydrophilicity and elasticity compared to free proteoglycans. By binding collagen fibers, other proteins and components of the intercellular substance and even cells into a single system, hyaluronic acid creates a “buffer volume” that determines the strength and elasticity of mechanical tissues, helping them to overcome temporary impact (N.N. Sigaeva, S.V. Kolesov, P.V. Nazarov, R.R. Vildanova. Chemical modification of hyaluronic acid and its use in medicine // Bulletin of the Bashkir University. 2012. Vol. 17. No. 3. Pp. 1220-1241).
Термин «поливинилпирролидон высокомолекулярный медицинский» (Высокомолекулярный ПВП) в контексте настоящего изобретения характеризует связующее средство. Высокомолекулярный ПВП выпускается в виде порошка марки «фармацевтически чистый», сыпучий белый или желтовато-белый порошок с частицами различного размера, запах специфический. Среднемассовая молекулярная масса ПВП составляет 1000000-1500000 Да [Фолькер Бюлер. Коллидон®. Поливинилпирролидон для фармацевтической промышленности / Перевод с англ. под ред. д.ф.н. К.В. Алексеева. BASF: 2001. - 310 с.]. Водный раствор ПВП представляет собой стерильную вязкую прозрачную слабоокрашенную жидкость со специфическим слабым запахом.The term "high-molecular medical polyvinylpyrrolidone" (High-Molecular PVP) in the context of the present invention characterizes the binder. High-molecular PVP is available in the form of a powder of the "pharmaceutically pure" brand, a free-flowing white or yellowish-white powder with particles of various sizes, a specific odor. The average molecular weight of PVP is 1,000,000-1,500,000 Da [Volker Buhler. Kollidon®. Polyvinylpyrrolidone for the Pharmaceutical Industry / Translation from English edited by Doctor of Physics K.V. Alekseev. BASF: 2001. - 310 p.]. An aqueous solution of PVP is a sterile viscous transparent slightly colored liquid with a specific weak odor.
Несмотря на достаточно широкий набор материалов для иммобилизации лекарственных веществ наибольший интерес представляют биодеградируемые носители на основе высокомолекулярного ПВП, позволяющие обеспечивать длительное присутствие антибактериальных веществ в ране, их местное использование как в целях профилактики при металлоосетесинтезе, так и для лечения хирургических инфекций. Важное значение при этом имеет молекулярная масса ПВП. Модификация биологически-активных веществ высокомолекулярными полимерами осуществляется для направленного изменения их свойств: снижения токсичности, улучшения растворимости, фармакокинетики и биодоступности за счет комплексообразования [Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры, 1993. Изд-во «Гиппократ», СПб. - 260 с.]. Основная функция растворимого высокомолекулярного ПВП заключается в пролонгировании действия лекарственных препаратов с улучшенной биодоступностью.Despite the wide range of materials for immobilization of medicinal substances, the greatest interest is presented by biodegradable carriers based on high-molecular PVP, which allow for the long-term presence of antibacterial substances in the wound, their local use both for the purpose of prevention in metalloosetting synthesis and for the treatment of surgical infections. The molecular weight of PVP is of great importance in this case. Modification of biologically active substances with high-molecular polymers is carried out for the purpose of targeted change of their properties: reduction of toxicity, improvement of solubility, pharmacokinetics and bioavailability due to complexation [Afinogenov G.E., Panarin E.F. Antimicrobial polymers, 1993. Publishing house "Gipppokrat", St. Petersburg. - 260 p.]. The main function of soluble high-molecular PVP is to prolong the action of medicinal preparations with improved bioavailability.
Авторами было обнаружено, что высокомолекулярный ПВП, обладающий сорбирующими и антитоксическими свойствами, в качестве полимерного носителя способствует обеспечению пролонгированного эффекта активных веществ в составе настоящей композиции.The authors found that high-molecular PVP, which has sorbent and antitoxic properties, as a polymer carrier helps to ensure a prolonged effect of the active substances in the present composition.
Термин «повиаргол» в контексте настоящего изобретения характеризует высокодисперсное металлическое серебро, стабилизированное поливинилпирролидоном низкомолекулярным медицинским; представляет собой легкий порошок от зеленовато-серого до зеленовато-коричневого цвета. В медицинской практике повиаргол используют в качестве водного раствора для наружного применения, который готовят непосредственно перед употреблением.The term "poviargol" in the context of the present invention characterizes highly dispersed metallic silver stabilized by low-molecular medical polyvinylpyrrolidone; it is a light powder from greenish-gray to greenish-brown color. In medical practice, poviargol is used as an aqueous solution for external use, which is prepared immediately before use.
Повиаргол - антимикробное средство с широким спектром действия, активное в отношении аэробной и анаэробной микрофлоры, в том числе антибиотикорезистентной. В концентрациях до 100 мкг/мл он подавляет рост большинства бактерий (стафилококков, стрептококков, синегнойной и кишечной палочки, протея, шигелл, сальмонелл и др.).Poviargol is a broad-spectrum antimicrobial agent, active against aerobic and anaerobic microflora, including antibiotic-resistant ones. In concentrations up to 100 μg/ml, it inhibits the growth of most bacteria (staphylococci, streptococci, Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli, Proteus, Shigella, Salmonella, etc.).
Препарат в концентрациях 1-3% обладает противовоспалительным действием и стимулирует репаративные процессы в ране на стадии эпителизации; малотоксичен, не обладает раздражающим действием на кожу и слизистые оболочки, не вызывает аллергических реакций и дерматитов, Повиаргол применяют как антимикробное средство для профилактики и лечения гнойно-септических осложнений ран, язв, ожогов и пролежней, в том числе длительно не заживающих при лечении антибиотиками; при инфекционных заболеваниях верхних дыхательных путей, уха, горла, носа, глаз и полости рта; при заболеваниях мочеполовой системы и опорно-двигательного аппарата [http://sktb-technolog.ru/poviargolum2; «Повиаргол: новое бактерицидное средство для лечения инфицированных ран. (Опыт клинического использования в травматологии, гнойной хирургии, ожоговой терапии, гинекологии, урологии и офтальмологии). Справочное пособие для врачей / Под ред. чл.-корр. РАН Панарина Е.Ф., д.м.н., проф. Благитко Е.М. Новосибирск: Изд-во. 1998. - 66 с.»].The drug in concentrations of 1-3% has an anti-inflammatory effect and stimulates reparative processes in the wound at the epithelialization stage; low toxicity, does not irritate the skin and mucous membranes, does not cause allergic reactions and dermatitis, Poviargol is used as an antimicrobial agent for the prevention and treatment of purulent-septic complications of wounds, ulcers, burns and bedsores, including those that do not heal for a long time when treated with antibiotics; in infectious diseases of the upper respiratory tract, ear, throat, nose, eyes and oral cavity; in diseases of the genitourinary system and musculoskeletal system [http://sktb-technolog.ru/poviargolum2; "Poviargol: a new bactericidal agent for the treatment of infected wounds. (Experience of clinical use in traumatology, purulent surgery, burn therapy, gynecology, urology and ophthalmology). Reference manual for doctors / Ed. Corresponding member RAS Panarina E.F., Doctor of Medical Sciences, Prof. Blagitko E.M. Novosibirsk: Publishing house. 1998. - 66 p.”].
Термин «гипохлорит натрия» в контексте настоящего изобретения характеризует эффективный антисептик. Спектр областей его применения включает в себя дезинфекцию лабораторного оборудования, обеззараживание воды, местную обработку ран и т.д. Гипохлорит натрия проявляет свою биологическую активность через реакции с нуклеиновыми и аминокислотами. В реакциях с нуклеиновыми кислотами, в частности ДНК, он хлорирует основания, препятствуя формированию водородных связей, что инициирует денатурацию молекулы и, как следствие, потерю биологической активности.The term "sodium hypochlorite" in the context of the present invention characterizes an effective antiseptic. The range of its application areas includes disinfection of laboratory equipment, water disinfection, local treatment of wounds, etc. Sodium hypochlorite exhibits its biological activity through reactions with nucleic and amino acids. In reactions with nucleic acids, in particular DNA, it chlorinates bases, preventing the formation of hydrogen bonds, which initiates denaturation of the molecule and, as a consequence, loss of biological activity.
Термин «лизоцим» в контексте настоящего изобретения характеризует фермент врожденной иммунной системы большого количества различных организмов начиная от прокариотов заканчивая высшими эукариотами. Являясь 1,4-b-D-N-ацетилмурамидазой, он ко всему прочему способен проявлять хитиназную активность, гидролизовать гликозидные связи бактериального пептидогликана, активировать аутолизины и проявлять противовирусную активность, в том числе и против ВИЧ. При этом белок обладает довольно низкой токсичностью, и даже при превышении достаточных для достижения бактерицидного эффекта дозировок существенного влияния на организм больного не было обнаружено.The term "lysozyme" in the context of the present invention characterizes an enzyme of the innate immune system of a large number of different organisms, from prokaryotes to higher eukaryotes. Being 1,4-b-D-N-acetylmuramidase, it is also capable of exhibiting chitinase activity, hydrolyzing glycosidic bonds of bacterial peptide glycan, activating autolysins and exhibiting antiviral activity, including against HIV. At the same time, the protein has a fairly low toxicity, and even when doses sufficient to achieve a bactericidal effect are exceeded, no significant effect on the patient's body was detected.
Термин «грамицидин С» в контексте настоящего изобретения характеризует молекулу органического происхождения и служит природным механизмом защиты палочки Bacillus brevis, которая начинает продукцию вещества в ответ на угрозу своей жизнедеятельности. Антибиотик полипептидной структуры, обладает бактериостатическим (препятствующим размножению бактерий) и бактерицидным (уничтожающим бактерии) действием. Механизм действия грамицидина С связан с повышением проницаемости цитоплазматической мембраны микробной клетки, что нарушает ее устойчивость и вызывает гибель клетки. Грамицидин С представляет циклическую последовательность аминокислот, и такая структура позволяет предупреждать развитие резистентности микроорганизмов к данному антибиотику, при этом на данный момент в доступной литературе не описано возникновение привыкания к препарату у различных бактериальных возбудителей, что важно для эффективности лечения.The term "gramicidin C" in the context of the present invention characterizes a molecule of organic origin and serves as a natural defense mechanism of the Bacillus brevis bacillus, which begins producing a substance in response to a threat to its vital activity. The antibiotic has a polypeptide structure, has a bacteriostatic (preventing the reproduction of bacteria) and bactericidal (destroying bacteria) effect. The mechanism of action of gramicidin C is associated with an increase in the permeability of the cytoplasmic membrane of the microbial cell, which disrupts its stability and causes cell death. Gramicidin C is a cyclic sequence of amino acids, and such a structure allows preventing the development of resistance of microorganisms to this antibiotic, while at the moment, the available literature does not describe the occurrence of addiction to the drug in various bacterial pathogens, which is important for the effectiveness of treatment.
Термин «гелофузин» в контексте настоящего изобретения характеризует 4% раствор сукцинилированного желатина (также известный, как модифицированный жидкий желатин) для внутривенного введения со средней молекулярной массой 23 200 дальтон. Он имеет коллоидно-осмотическое давление 34 мм Hg. Изоэлектрическая точка достигается при рН 4,5. Отрицательные заряды, возникающие в молекуле в результате сукцинилирования, приводят к увеличению молекулы в размерах и, таким образом, формируются более объемные белковые цепи, чем несукцинилированные, при сохранении молекулярной массы. В результате Гелофузин оказывает достаточный волемический эффект в течение 3-4 часов. Гелофузин применяют в качестве коллоидного плазмозамещающего средства.The term "gelofusine" in the context of the present invention characterizes a 4% solution of succinylated gelatin (also known as modified liquid gelatin) for intravenous administration with an average molecular weight of 23,200 daltons. It has a colloid osmotic pressure of 34 mm Hg. The isoelectric point is reached at pH 4.5. Negative charges arising in the molecule as a result of succinylation lead to an increase in the size of the molecule and, thus, more voluminous protein chains are formed than non-succinylated ones, while maintaining the molecular weight. As a result, Gelofusine has a sufficient volemic effect for 3-4 hours. Gelofusine is used as a colloidal plasma substituting agent.
Краткое описание чертежейBrief description of the drawings
ФИГ. 1 - Кинетика взаимодействия вирусной РНК с гипохлоритом натрия.FIG. 1 - Kinetics of interaction of viral RNA with sodium hypochlorite.
ФИГ. 2 - Изменения во времени спектров поглощения поли АУ (С=0,98*10-5 М а.о.) в присутствии гипохлорита натрия (Сгип.=5*10-5 М, или 3,75 мг/л).FIG. 2 - Changes over time in the absorption spectra of poly AU (C = 0.98*10 -5 M a.o.) in the presence of sodium hypochlorite (C hyp. = 5*10 -5 M, or 3.75 mg/l).
ФИГ. 3 - Изменения во времени спектров поглощения комплексов «pAU-гипохлорит» в присутствии повиаргола при λ=260 нм.FIG. 3 - Changes over time in the absorption spectra of pAU-hypochlorite complexes in the presence of poviargol at λ=260 nm.
ФИГ. 4 - Спектры поглощения смеси «гипохлорит натрия - повиаргол» при λ=260 нм.FIG. 4 - Absorption spectra of the mixture "sodium hypochlorite - poviargol" at λ=260 nm.
ФИГ. 5 - Контроль культуры клеток аденокарциномы легкого человека (АТСС® CRL-5800), х600.FIG. 5 - Human lung adenocarcinoma cell culture control (ATCC® CRL-5800), x600.
ФИГ. 6 - Контроль цитотоксического действия коронавируса ОС43 в отношении культуры клеток аденокарциномы легкого человека (АТСС® CRL-5800), х900.FIG. 6 - Control of the cytotoxic effect of coronavirus OC43 on human lung adenocarcinoma cell culture (ATCC® CRL-5800), x900.
ФИГ. 7 - Морфологическая картина состояния культуры клеток аденокарциномы легкого человека (АТСС® CRL-5800) в присутствии коронавируса ОС43 и полимерной композиции из трех полимеров, х600.FIG. 7 - Morphological picture of the state of the culture of human lung adenocarcinoma cells (ATCC® CRL-5800) in the presence of coronavirus OC43 and a polymer composition of three polymers, x600.
ФИГ. 8 - Спектры поглощения комплекса «ДНК-гипохлорит», СДНК=2,2×10-5 Ма.о. (1 - 1 мин. п/п, 2 - 5 мин. п/п, 3 - 15 мин. п/п, 4 - 1 сутки п/п). а) CNaClO=1.46×10-4 М; б) CNaClO=3,5×10-4 М; в) CNaClO=8,0×10-4 М.FIG. 8 - Absorption spectra of the DNA-hypochlorite complex, C DNA = 2.2×10 -5 M a.o. (1 - 1 min. p/p, 2 - 5 min. p/p, 3 - 15 min. p/p, 4 - 1 day p/p). a) C NaClO = 1.46×10 -4 M; b) C NaClO = 3.5×10 -4 M; c) C NaClO = 8.0×10 -4 M.
ФИГ. 9 - А: Кинетика реакции тройной системы Hyp-DNA-Pov; В: производная по времени зависимости поглощения от времени реакции тройной системы DNA-Hyp-Pov (черные квадратики) и DNA-Hyp (красные кружочки).FIG. 9 - A: Kinetics of the reaction of the ternary system Hyp-DNA-Pov; B: time derivative of the dependence of absorbance on the reaction time of the ternary system DNA-Hyp-Pov (black squares) and DNA-Hyp (red circles).
ФИГ. 10 - Зависимость между бактерицидным действием интраназальной композиции и временем ее воздействия на разные микроорганизмы.FIG. 10 - Relationship between the bactericidal action of an intranasal composition and the time of its exposure to different microorganisms.
ФИГ. 11 - Бактерицидное действие интраназальной композиции и антимикробных ингредиентов, входящих в ее состав.FIG. 11 - Bactericidal action of the intranasal composition and the antimicrobial ingredients included in its composition.
ФИГ. 12 - Визуализация интраназальной композиции на слизистой оболочке носовой полости через 8 часов нанесения.FIG. 12 - Visualization of the intranasal composition on the nasal mucosa after 8 hours of application.
ФИГ. 13 - Отсутствие визуализации интраназальной композиции на основе прототипа на слизистой оболочке носовой полости через 8 часов нанесения.FIG. 13 - No visualization of the intranasal composition based on the prototype on the nasal mucosa after 8 hours of application.
ФИГ. 14 (А) - Контроль 0.5 МФ Staphylococcus aureus.FIG. 14 (A) - Control 0.5 MF Staphylococcus aureus.
ФИГ. 14 (Б) - Опытный образец 0.5 МФ Staphylococcus aureus.FIG. 14 (B) - Experimental sample of 0.5 MF Staphylococcus aureus.
ФИГ. 14 (В) - Прототип 0.5 МФ Staphylococcus aureus.FIG. 14 (B) - Prototype 0.5 MF Staphylococcus aureus.
ФИГ. 15 (А) - Контроль 0.5 МФ Pseudomonas aeruginosa.FIG. 15 (A) - Control 0.5 MF Pseudomonas aeruginosa.
ФИГ. 15 (Б) - Опытный образец 0.5 МФ Pseudomonas aeruginosa.FIG. 15 (B) - Experimental sample of 0.5 MF Pseudomonas aeruginosa.
ФИГ. 15 (В) - Прототип 0.5 МФ Pseudomonas aeruginosa.FIG. 15 (B) - Prototype 0.5 MF Pseudomonas aeruginosa.
ФИГ. 16 (А) - Контроль 0.5 МФ Acinetobacter baumannii.FIG. 16 (A) - Control 0.5 MF Acinetobacter baumannii.
ФИГ. 16 (Б) - Опытный образец 0.5 МФ Acinetobacter baumannii.FIG. 16 (B) - Experimental sample of 0.5 MF Acinetobacter baumannii.
ФИГ. 16 (В) - Прототип 0.5 МФ Acinetobacter baumannii.FIG. 16 (B) - Prototype 0.5 MF Acinetobacter baumannii.
ФИГ. 17 (А) - Контроль 0 5 МФ Klebsiella pneumoniae.FIG. 17 (A) - Control 0 5 MF Klebsiella pneumoniae.
ФИГ. 17 (Б) - Опытный образец 0.5 МФ Klebsiella pneumoniae.FIG. 17 (B) - Experimental sample of 0.5 MF Klebsiella pneumoniae.
ФИГ. 17 (В) - Прототип 0.5 МФ Klebsiella pneumoniae.FIG. 17 (B) - Prototype 0.5 MF Klebsiella pneumoniae.
Осуществление изобретенияImplementation of the invention
Заявляемая композиция для профилактики и/или лечения самостоятельно или в составе комплексной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний носовой полости при интраназальном применении, обладающая пролонгированной антимикробной активностью в отношении коронавируса человека, вируса гриппа, других РНК- и ДНК-содержащих вирусов и бактерий, способностью препятствовать формированию и разрушать уже сформированные микробные биопленки, включает компоненты в следующем соотношении, мас. %:The claimed composition for the prevention and/or treatment, alone or as part of a complex therapy of infectious and inflammatory diseases of the nasal cavity with intranasal use, which has prolonged antimicrobial activity against human coronavirus, influenza virus, other RNA- and DNA-containing viruses and bacteria, the ability to prevent the formation and destroy already formed microbial biofilms, includes components in the following ratio, wt. %:
• Гиалуроновая кислота высокомолекулярная - 0,1-2,0;• High molecular weight hyaluronic acid - 0.1-2.0;
• Высокомолекулярный ПВП - 4,0-6,0;• High molecular weight PVP - 4.0-6.0;
• Повиаргол - 0,8-1,2;• Poviargol - 0.8-1.2;
• Антибактериальный полипептид (грамицидин С - 0,03-0,15, или лизоцим - 0,1-18,0);• Antibacterial polypeptide (gramicidin C - 0.03-0.15, or lysozyme - 0.1-18.0);
• Раствор гипохлорита натрия с содержанием активного хлора (АХ) 1566 мг/л - 49,0-51,0;• Sodium hypochlorite solution with an active chlorine (AC) content of 1566 mg/l - 49.0-51.0;
• Гелофузин до 100,0.• Gelofusin up to 100.0.
Количество гиалуроновой кислоты высокомолекулярной также может составлять 0,5-2 мас. %, 0,5-1 мас. %, или 1-2 мас. %.The amount of high molecular weight hyaluronic acid can also be 0.5-2 wt.%, 0.5-1 wt.%, or 1-2 wt.%.
Количество высокомолекулярного ПВП также может составлять 4,5-5,5 мас. %.The amount of high molecular weight PVP can also be 4.5-5.5 wt%.
Количество повиаргола также может составлять 0,8-1 мас. %.The amount of poviargol can also be 0.8-1 wt.%.
Количество лизоцима также может составлять 1-16,0 мас. %.The amount of lysozyme can also be 1-16.0 wt.%.
Заявленная композиция может использоваться для профилактики самостоятельно, а также в составе комплексной терапии инфекционно-воспалительных заболеваний носовой полости, вызванных коронавирусами, вирусом гриппа, другими РНК- и ДНК-содержащими вирусами и бактериями, путем ее нанесения (аппликации) на слизистую носовой полости.The claimed composition can be used for prevention on its own, as well as as part of complex therapy for infectious and inflammatory diseases of the nasal cavity caused by coronaviruses, influenza virus, other RNA- and DNA-containing viruses and bacteria, by applying it (application) to the mucous membrane of the nasal cavity.
Для получения композиции все порошкообразные компоненты (гиалуроновая кислота, поливинилпирролидон, повиаргол, грамицидин С (или лизоцим)) растворяют последовательно в растворе гипохлорита натрия с соблюдением вышеуказанных количественных соотношений и добавляют раствор гелофузина до 100,0 мас. %, перемешивают до получения гомогенной массы.To obtain the composition, all powdered components (hyaluronic acid, polyvinylpyrrolidone, poviargol, gramicidin C (or lysozyme)) are dissolved sequentially in a sodium hypochlorite solution, observing the above-mentioned quantitative ratios, and a gelofusin solution is added to 100.0 wt. %, mixed until a homogeneous mass is obtained.
Приготовление заявляемой композиции на основе гелофузина, высокомолекулярных гиалуроновой кислоты и поливинилпирролидона обеспечивает пролонгированное действие за счет образования защитной барьерной пленки на слизистой поверхности носовой полости, которая способствует длительному антимикробному эффекту повиаргола и гипохлорита натрия, увлажнению носовых ходов, что, в свою очередь, снижает риск развития раздражения, сухости носовой слизистой, болевой реакции, кровотечения.The preparation of the claimed composition based on gelofusin, high-molecular hyaluronic acid and polyvinylpyrrolidone provides a prolonged effect due to the formation of a protective barrier film on the mucous surface of the nasal cavity, which contributes to the long-term antimicrobial effect of poviargol and sodium hypochlorite, moisturizing the nasal passages, which, in turn, reduces the risk of developing irritation, dryness of the nasal mucosa, pain reaction, bleeding.
Соотношение компонентов заявляемой композиции является результатом широких экспериментальных исследований и оптимально подходит для достижения указанных выше результатов. При этом существенным преимуществом заявляемой композиции является наличие пролонгированного антимикробного эффекта в отношении широкого спектра РНК- и ДНК-содержащих вирусов и бактерий, микробных биопленок, отсутствие побочных эффектов.The ratio of the components of the claimed composition is the result of extensive experimental studies and is optimally suited to achieve the above results. At the same time, a significant advantage of the claimed composition is the presence of a prolonged antimicrobial effect against a wide range of RNA- and DNA-containing viruses and bacteria, microbial biofilms, and the absence of side effects.
Особенностью заявляемой композиции является образование тонкой полимерной барьерной пленки на слизистой поверхности носовой полости при однократной аппликации, что обеспечивает высокую сорбцию вирусных и бактериальных частиц в течение уже одного часа. Кроме того, присутствие повиаргола в течение первых 50 секунд ускоряет денатурирующее действие гипохлорита натрия в отношении вирусных РНК или вирусных и бактериальных ДНК.The peculiarity of the claimed composition is the formation of a thin polymer barrier film on the mucous surface of the nasal cavity with a single application, which ensures high sorption of viral and bacterial particles for one hour. In addition, the presence of poviargol during the first 50 seconds accelerates the denaturing effect of sodium hypochlorite with respect to viral RNA or viral and bacterial DNA.
В качестве неограничивающих примеров представляются следующие экспериментальные данные.The following experimental data are presented as non-limiting examples.
Пример 1.Example 1.
Изучена антивирусная активность в отношении РНК-содержащих вирусов предлагаемой интраназальной композиции следующего состава, мас. %:The antiviral activity against RNA-containing viruses of the proposed intranasal composition of the following composition, wt. %, was studied:
Гипохлорит натрия раствор (АХ 1566 мг/л) - 49,0Sodium hypochlorite solution (AX 1566 mg/l) - 49.0
Гиалуроновая кислота - 1,0Hyaluronic acid - 1.0
ПВП - 5,0PVP - 5.0
Повиаргол - 1,0Poviargol - 1.0
Грамицидин С - 0,03Gramicidin C - 0.03
Гелофузин - 43,97.Gelofusine - 43.97.
Использованы следующие штаммы вирусов:The following virus strains were used:
- коронавирус человека, штамм ОС43,- human coronavirus, strain OC43,
- вирус гриппа A/PuertoRico/8/34 (H1N1).- influenza virus A/PuertoRico/8/34 (H1N1).
Для анализа противовирусной активности 1 мл образца предлагаемой интраназальной композиции смешивали в пробирке объемом 1,5 мл с 0,1 мл вируссодержащей жидкости (исходный титр коронавируса ОС43 6,5 lg; вируса гриппа 7,5 lg). В контрольную пробирку вместо композиции вносили 0,1 мл среды для клеток. Пробирки инкубировали при комнатной температуре в течение 3 минут, после чего в вируссодержащей жидкости определяли инфекционную активность соответствующего вируса. В каждой исследуемой группе использовали по три аналитические параллели.To analyze the antiviral activity, 1 ml of the sample of the proposed intranasal composition was mixed in a 1.5 ml test tube with 0.1 ml of virus-containing liquid (initial titer of coronavirus OC43 6.5 lg; influenza virus 7.5 lg). Instead of the composition, 0.1 ml of cell medium was added to the control test tube. The test tubes were incubated at room temperature for 3 minutes, after which the infectious activity of the corresponding virus was determined in the virus-containing liquid. Three analytical parallels were used in each study group.
Как следует из приведенных данных, предлагаемая интраназальная композиция достоверно снижала титры вируса гриппа и коронавируса ОС43 в культуре клеток.As follows from the presented data, the proposed intranasal composition reliably reduced the titers of the influenza virus and coronavirus OC43 in cell culture.
Эффективность противовирусного действия в отношении РНК-содержащих вирусов составила не менее 99,9% в течение 3-минутной экспозиции.The antiviral efficacy against RNA-containing viruses was at least 99.9% within 3 minutes of exposure.
Пример 2.Example 2.
Изучена антивирусная активность в отношении РНК-содержащих вирусов предлагаемой интраназальной композиции следующего состава, мас. %:The antiviral activity against RNA-containing viruses of the proposed intranasal composition of the following composition, wt. %, was studied:
Гипохлорит натрия раствор (АХ 1566 мг/л) - 49,0Sodium hypochlorite solution (AX 1566 mg/l) - 49.0
Гиалуроновая кислота - 1,0Hyaluronic acid - 1.0
ПВП - 5,0PVP - 5.0
Повиаргол - 1,0Poviargol - 1.0
Лизоцим - 16,0Lysozyme - 16.0
Гелофузин - 28,0.Gelofusine - 28.0.
Использованы следующие штаммы вирусов:The following virus strains were used:
- коронавирус человека, штамм ОС43,- human coronavirus, strain OC43,
- вирус гриппаА/PuertoRico/8/34 (H1N1).- influenza virus A/Puerto Rico/8/34 (H1N1).
Для анализа противовирусной активности 1 мл образца предлагаемой интраназальной композиции, смешивали в пробирке объемом 1,5 мл с 0,1 мл вируссодержащей жидкости (исходный титр коронавируса ОС43 4,7 lg; вируса гриппа 5,5 lg). В контрольную пробирку вместо композиции вносили 0,1 мл среды для клеток. Пробирки инкубировали при комнатной температуре в течение 3 минут, после чего в вируссодержащей жидкости определяли инфекционную активность соответствующего вируса. В каждой исследуемой группе использовали по три аналитические параллели.To analyze the antiviral activity, 1 ml of the sample of the proposed intranasal composition was mixed in a 1.5 ml test tube with 0.1 ml of virus-containing liquid (the initial titer of coronavirus OC43 was 4.7 lg; influenza virus 5.5 lg). Instead of the composition, 0.1 ml of cell medium was added to the control test tube. The test tubes were incubated at room temperature for 3 minutes, after which the infectious activity of the corresponding virus was determined in the virus-containing liquid. Three analytical parallels were used in each study group.
Как следует из приведенных данных, предлагаемая интраназальная композиция достоверно снижала титры вируса гриппа и коронавируса ОС43 в культуре клеток. Эффективность противовирусного действия в отношении РНК-содержащих вирусов составила не менее 99% в течение 3-минутной экспозиции.As follows from the data provided, the proposed intranasal composition reliably reduced the titers of the influenza virus and coronavirus OC43 in cell culture. The effectiveness of the antiviral action against RNA-containing viruses was at least 99% during a 3-minute exposure.
Пример 3.Example 3.
Для доказательства усиления противовирусного эффекта компонентов заявленной композиции изучена антивирусная активность в отношении РНК-содержащего вируса (коронавируса) ингредиентов предлагаемой интраназальной композиции в следующих концентрациях, мас. %:To prove the enhancement of the antiviral effect of the components of the claimed composition, the antiviral activity against the RNA-containing virus (coronavirus) of the ingredients of the proposed intranasal composition was studied in the following concentrations, wt. %:
Образец №1Sample No. 1
Грамицидин (полипептидный антибиотик) - 0,03Gramicidin (polypeptide antibiotic) - 0.03
Образец №2Sample #2
Повиаргол (наночастицы серебра) - 1,0Poviargol (silver nanoparticles) - 1.0
Образец №3Sample #3
Грамицидин (полипептидный антибиотик) - 0,03Gramicidin (polypeptide antibiotic) - 0.03
Повиаргол (наночастицы серебра) - 1,0Poviargol (silver nanoparticles) - 1.0
Образец №4Sample No. 4
Лизоцим (антибактериальный полипептид) - 16,0Lysozyme (antibacterial polypeptide) - 16.0
Повиаргол (наночастицы серебра) - 1,0Poviargol (silver nanoparticles) - 1.0
Образец №5Sample #5
Лизоцим (антибактериальный полипептид) - 16,0Lysozyme (antibacterial polypeptide) - 16.0
Грамицидин (полипептидный антибиотик) - 0,03Gramicidin (polypeptide antibiotic) - 0.03
Образец №6Sample No. 6
Лизоцим (антибактериальный полипептид) - 16,0,Lysozyme (antibacterial polypeptide) - 16.0,
Использованы следующие штаммы вирусов:The following virus strains were used:
- коронавирус человека, штамм ОС43.- human coronavirus, strain OC43.
Для анализа противовирусной активности 1 мл каждого образца смешивали в пробирке объемом 1,5 мл с 0,1 мл вируссодержащей жидкости (исходный титр коронавируса ОС43 5,5 lg). В контрольную пробирку вместо соответствующего образца вносили 0,1 мл среды для клеток (полная среда RPMI-1640, содержащая 2 mM L-глугамина, 250 мг/л гентамицина, 10% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота). Пробирки инкубировали при комнатной температуре в течение 3 минут, после чего в вируссодержащей жидкости определяли инфекционную активность соответствующего вируса. В каждой исследуемой группе использовали по три аналитические параллели.To analyze the antiviral activity, 1 ml of each sample was mixed in a 1.5 ml test tube with 0.1 ml of virus-containing fluid (the initial titer of coronavirus OC43 was 5.5 lg). Instead of the corresponding sample, 0.1 ml of cell medium (complete RPMI-1640 medium containing 2 mM L-glutamine, 250 mg/l gentamicin, 10% fetal bovine serum) was added to the control tube. The tubes were incubated at room temperature for 3 minutes, after which the infectious activity of the corresponding virus was determined in the virus-containing fluid. Three analytical parallels were used in each study group.
Впервые показано наличие собственной антивирусной активности грамицидина С, так как в доступной литературе отсутствуют данные о его антивирусном действии.For the first time, the presence of gramicidin C's own antiviral activity has been demonstrated, since there is no data on its antiviral action in the available literature.
При этом наблюдали аддитивный эффект (отличительный признак) взаимодействия грамицидина C с повиарголом и лизоцима с повиарголом в отношении штамма коронавируса ОС43. Такое взаимодействие дает преимущество в интраназальной композиции пролонгированного действия, когда постепенно снижаются исходные концентрации антимикробных составляющих.In this case, an additive effect (distinctive feature) of the interaction of gramicidin C with poviargol and lysozyme with poviargol was observed in relation to the coronavirus strain OC43. Such interaction provides an advantage in the intranasal composition of prolonged action, when the initial concentrations of antimicrobial components are gradually reduced.
Пример 4.Example 4.
Изучена способность повиаргола (наночастиц серебра) ускорять процесс разрушения гипохлоритом натрия вирусной и синтетической РНК.The ability of poviargol (silver nanoparticles) to accelerate the process of destruction of viral and synthetic RNA by sodium hypochlorite was studied.
В исследовании использовали коронавирус человека ОС43 из коллекции вирусных штаммов ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера (Санкт-Петербург). Исходный образец вирусной РНК (С=3*10-4 М а.о.) разбавляли 0.001 М NaCl до достижения объема, минимально необходимого для измерения в специальной кювете спектрофотометра (600 мкл). Используемая в эксперименте концентрация вирусной РНК составила С=1*10-5 М а.о.The study used human coronavirus OC43 from the collection of viral strains of the Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology (St. Petersburg). The original sample of viral RNA (C = 3 * 10 -4 M a.o.) was diluted with 0.001 M NaCl to achieve the minimum volume required for measurement in a special spectrophotometer cuvette (600 μl). The concentration of viral RNA used in the experiment was C = 1 * 10 -5 M a.o.
Концентрация гипохлорита натрия (молярная) во всех экспериментах была в 5 раз больше концентрации нуклеотидов в растворе, т.е. Сгип.=5*10-5 М, или 3,75 мг/л.The concentration of sodium hypochlorite (molar) in all experiments was 5 times greater than the concentration of nucleotides in the solution, i.e. C hyp. = 5*10 -5 M, or 3.75 mg/l.
Результаты взаимодействия вирусной РНК и разных концентраций гипохлорита натрия представлены на фигуре 1.The results of the interaction of viral RNA and different concentrations of sodium hypochlorite are presented in Figure 1.
Различный ход временных зависимостей в разных областях спектра свидетельствует о взаимодействии гипохлорита натрия с различными компонентами РНК, присутствующими в растворе. При этом именно область длины волны 260 нм может отражать взаимодействие гипохлорита натрия с азотистыми основаниями полинуклеотида.The different course of time dependences in different regions of the spectrum indicates the interaction of sodium hypochlorite with various RNA components present in the solution. In this case, it is the wavelength region of 260 nm that can reflect the interaction of sodium hypochlorite with the nitrogenous bases of the polynucleotide.
Аналогичный эксперимент проводили с синтетической РНК (поли АУ). Результаты представлены на фигуре. 2.A similar experiment was carried out with synthetic RNA (poly AU). The results are shown in Figure 2.
Характер временных зависимостей относительного изменения поглощения и его скорости в области λ=260 нм, которая характеризует состояние азотистых оснований в полинуклеотидах, аналогичен для вирусной и синтетической РНК. Он свидетельствует, что процесс взаимодействия полинуклеотидов с гипохлоритом имеет, по крайней мере, 2 стадии. Первая - быстрая, выражается в возрастании интенсивности поглощения, которое обычно связывают с денатурацией или разрушением вторичной структуры полинуклеотида. На этой же стадии происходит хлорирование азотистых оснований. На второй стадии происходит постепенное разрушение азотистых оснований, вызванное продуктами, образовавшимися на первой стадии взаимодействия.The nature of the time dependences of the relative change in absorption and its rate in the region of λ=260 nm, which characterizes the state of nitrogenous bases in polynucleotides, is similar for viral and synthetic RNA. It indicates that the process of interaction of polynucleotides with hypochlorite has at least 2 stages. The first is rapid, expressed in an increase in the intensity of absorption, which is usually associated with denaturation or destruction of the secondary structure of the polynucleotide. At this stage, chlorination of nitrogenous bases occurs. At the second stage, gradual destruction of nitrogenous bases occurs, caused by the products formed at the first stage of interaction.
Изменения во времени спектров поглощения комплексов «поли АУ + гипохлорит натрия» в присутствии повиаргола показаны при следующих концентрациях компонентов: CpAU=7,6*10-5 М, CNaOCl=3,8*10-4 М, Cповиаргол=0,002%. Результаты представлены на фигуре 3.Changes in the absorption spectra of the poly AU + sodium hypochlorite complexes in the presence of poviargol over time are shown at the following component concentrations: C pAU = 7.6*10 -5 M, C NaOCl = 3.8*10 -4 M, C poviargol = 0.002%. The results are presented in Figure 3.
В присутствии повиаргола значительно усиливается разрушение нуклеотидов, происходящее в первые 2 минуты взаимодействия гипохлорита натрия с полинуклеотидом.In the presence of poviargol, the destruction of nucleotides, which occurs in the first 2 minutes of interaction of sodium hypochlorite with the polynucleotide, is significantly enhanced.
Механизм этого действия заключается в том, что гипохлорит натрия взаимодействует с повиарголом. Об этом свидетельствуют спектры поглощения смеси «гипохлорит натрия - повиаргол» (ФИГ. 4).The mechanism of this action is that sodium hypochlorite interacts with poviargol. This is evidenced by the absorption spectra of the "sodium hypochlorite - poviargol" mixture (FIG. 4).
Продукты этого взаимодействия способствуют разрушению нуклеотидов в составе РНК.The products of this interaction contribute to the destruction of nucleotides in RNA.
Впервые выявлен и описан эффект ускорения процесса разрушения РНК гипохлоритом натрия, в присутствии повиаргола. Механизм этого действия заключается в том, что гипохлорит натрия взаимодействует с повиарголом. Продукты этого взаимодействия способствуют более быстрому разрушению нуклеотидов в составе РНК.The effect of acceleration of the process of RNA destruction by sodium hypochlorite in the presence of poviargol has been identified and described for the first time. The mechanism of this action is that sodium hypochlorite interacts with poviargol. The products of this interaction contribute to faster destruction of nucleotides in the RNA.
Пример 5.Example 5.
Изучена сорбционная активность в отношении РНК-содержащих вирусов полимерных комбинаций следующего состава, мас. %:The sorption activity of polymer combinations of the following composition, wt. %, in relation to RNA-containing viruses was studied:
Образец №1Sample No. 1
Высокомолекулярный ПВП - 5,0High molecular weight PVP - 5.0
Среда для культуры клеток - до 100,0.Cell culture medium - up to 100.0.
Образец №2Sample #2
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота - 1,0High molecular weight hyaluronic acid - 1.0
Гелофузин (4% жидкий желатин) - до 100,0.Gelofusin (4% liquid gelatin) - up to 100.0.
Образец №3Sample #3
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота - 1,0High molecular weight hyaluronic acid - 1.0
Высокомолекулярный ПВП - 5,0High molecular weight PVP - 5.0
Гелофузин (4% жидкий желатин) - до 100,0.Gelofusin (4% liquid gelatin) - up to 100.0.
Использованы следующие штаммы вирусов:The following virus strains were used:
- коронавирус человека, штамм ОС43,- human coronavirus, strain OC43,
- вирус гриппа A/PuertoRico/8/34 (H1N1).- influenza virus A/PuertoRico/8/34 (H1N1).
В 1 мл соответствующей полимерной комбинации вносили 100 мкл вируссодержащей жидкости (исходный титр коронавируса ОС43 6,5 lg; вируса гриппа 7,5 lg) и полученные смеси инкубировали 1 час при комнатной температуре. После этого образцы центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин и в надосадке определяли инфекционную активность вируса. В контрольных образцах вместо полимерной комбинации использовали среду для клеточных культур.100 μl of virus-containing liquid (initial titer of coronavirus OC43 6.5 lg; influenza virus 7.5 lg) were added to 1 ml of the corresponding polymer combination and the resulting mixtures were incubated for 1 hour at room temperature. After that, the samples were centrifuged for 20 minutes at 3000 rpm and the infectious activity of the virus was determined in the supernatant. In the control samples, cell culture medium was used instead of the polymer combination.
Как следует из приведенных данных, при совместной прединкубации в течение 1 часа показана способность высокомолекулярного ПВП снижать титр обоих тест-вирусов на 1 lg; смеси высокомолекулярной гиалуроновой кислоты с желатином - на 2,5 lg; смеси трех полимеров - высокомолекулярных ПВП и гиалуроновой кислоты на гелофузине - на 3,5 lg.As follows from the presented data, during combined pre-incubation for 1 hour, the ability of high-molecular PVP to reduce the titer of both test viruses by 1 lg was demonstrated; a mixture of high-molecular hyaluronic acid with gelatin - by 2.5 lg; a mixture of three polymers - high-molecular PVP and hyaluronic acid on gelofusin - by 3.5 lg.
Впервые установлено исключительное противовирусное действие полимерной композиции за счет высокой способности полимеров и их комбинаций сорбировать частицы РНК-содержащих вирусов. Это обеспечивает способность изученной комбинации полимеров препятствовать прикреплению вирусных частиц к слизистой носовой полости, удерживать их в составе полимерной матрицы, облегчая действие антимикробных агентов в составе антимикробной интраназальной композиции.For the first time, an exceptional antiviral effect of the polymer composition has been established due to the high ability of polymers and their combinations to sorb particles of RNA-containing viruses. This ensures the ability of the studied polymer combination to prevent the attachment of viral particles to the mucous membrane of the nasal cavity, to retain them in the polymer matrix, facilitating the action of antimicrobial agents in the antimicrobial intranasal composition.
На фигурах 5-7 показана морфологическая картина состояния культуры клеток в присутствии тест-коронавируса ОС43 и полимерной композиции из трех полимеров - высокомолекулярных ПВП и гиалуроновой кислоты на гелофузине.Figures 5-7 show the morphological picture of the state of the cell culture in the presence of the test coronavirus OS43 and a polymer composition of three polymers - high-molecular PVP and hyaluronic acid on gelofusin.
Как видно из фигуры 6, коронавирус ОС43 оказывает выраженный цитотоксический эффект, полностью разрушая монослой культуры клеток.As can be seen from Figure 6, coronavirus OC43 has a pronounced cytotoxic effect, completely destroying the cell culture monolayer.
Как видно из фигуры 7, полимерная композиция оказывает протективное действие на монослой культуры клеток, предупреждая его разрушение за счет цитотоксического эффекта коронавируса.As can be seen from Figure 7, the polymer composition has a protective effect on the cell culture monolayer, preventing its destruction due to the cytotoxic effect of the coronavirus.
Пример 6.Example 6.
Изучена способность повиаргола (наночастиц серебра) ускорять процесс разрушения плазмидной ДНК микроорганизмов гипохлоритом натрия.The ability of poviargol (silver nanoparticles) to accelerate the process of destruction of plasmid DNA of microorganisms by sodium hypochlorite has been studied.
Использована плазмидная ДНК штамма EscherichiacoliDH5-Alpha, размер 5,5-6 тыс. пар нуклеотидов, используемая в эксперименте концентрация С=2,2⋅10-5 Ма.о. The plasmid DNA of the Escherichia coli DH5-Alpha strain was used, the size is 5.5-6 thousand nucleotide pairs, the concentration used in the experiment was C = 2.2⋅10 -5 M a.o.
Для проведения спектрального исследования приготовлены 3 комплекса гипохлорита с плазмидной ДНК. Для каждого комплекса приготовили три разных раствора с постоянной концентрацией ДНК и различной концентрацией гипохлорита натрия;To conduct the spectral study, 3 hypochlorite complexes with plasmid DNA were prepared. For each complex, three different solutions with a constant DNA concentration and different sodium hypochlorite concentrations were prepared;
1) CNaOCl=1,46⋅10-4 M;1) C NaOCl = 1.46⋅10 -4 M;
2) CNaOCl=3,5⋅10-4 М;2) C NaOCl = 3.5⋅10 -4 M;
3) CNaOCl=8,0⋅10-4 M.3) C NaOCl = 8.0⋅10 -4 M.
Комплексы приготовлены прямым смешиванием. В качестве растворителя использовали водный раствор хлорида натрия NaCl ионной силы 0,015М.The complexes were prepared by direct mixing. An aqueous solution of sodium chloride NaCl with an ionic strength of 0.015 M was used as a solvent.
На фигуре 8 представлены спектры поглощения комплексов плазмидной ДНК E.coli c гипохлоритом натрия при различных концентрациях NaOCl.Figure 8 shows the absorption spectra of complexes of E.coli plasmid DNA with sodium hypochlorite at different concentrations of NaOCl.
Как видно из полученных спектров, независимо от концентрации гипохлорита натрия, в течение первой минуты после смешения поглощение раствора увеличивается во всей области поглощения ДНК. При этом суммарный спектр близок к сумме спектров ДНК и гипохлорита натрия используемых концентраций.As can be seen from the obtained spectra, regardless of the sodium hypochlorite concentration, during the first minute after mixing, the absorption of the solution increases in the entire absorption region of DNA. In this case, the total spectrum is close to the sum of the spectra of DNA and sodium hypochlorite of the concentrations used.
Заметные изменения формы спектра и интенсивности поглощения при длине волны 260 нм наблюдали через 10-15 минут.Noticeable changes in the spectrum shape and absorption intensity at a wavelength of 260 nm were observed after 10-15 minutes.
Через сутки полоса поглощения ДНК (λmax=260 нм) практически исчезает. При концентрации CNaClO=8,0×10-4 М полоса поглощения гипохлорита натрия сохранялась в течение суток. Это говорит о том, что при данной концентрации антисептик взят в избытке и после взаимодействия остается в растворе.After 24 hours, the DNA absorption band (λ max = 260 nm) practically disappears. At a concentration of C NaClO = 8.0×10 -4 M, the sodium hypochlorite absorption band persisted for 24 hours. This indicates that at this concentration, the antiseptic is taken in excess and remains in the solution after the interaction.
Таким образом, установлено, что при взаимодействии с гипохлоритом натрия происходит как разрушение вторичной структуры микробной ДНК (денатурация), так и химическая модификация азотистых оснований, предположительно хлорирование. Наличие вторичной структуры замедляет химическую реакцию гипохлорита натрия с азотистыми основаниями ДНК.Thus, it has been established that when interacting with sodium hypochlorite, both the secondary structure of microbial DNA is destroyed (denaturation) and the nitrogenous bases are chemically modified, presumably chlorination. The presence of a secondary structure slows down the chemical reaction of sodium hypochlorite with the nitrogenous bases of DNA.
Раствор повиаргола готовили из сухого порошка навеской. В качестве растворителя выступал водный раствор соли NaCl ионной силой I=0.001 М. Концентрацию приготовленного раствора уменьшали еще в два раза для достижения условия смешивания равных объемов реагентов CPoυ=0.5%.The poviargol solution was prepared from a dry powder sample. An aqueous solution of NaCl salt with an ionic strength of I=0.001 M served as a solvent. The concentration of the prepared solution was further reduced by half to achieve the condition of mixing equal volumes of reagents C Poυ =0.5%.
Вещества, используемые в работе, имеют характерный спектр поглощения в областях длин волн от 220 до 500 нм. Измерения спектров проводились на спектрофотометре Shimadzu 1800, в кварцевых кюветах с длиной оптического пути d1=1 см и d2=0,101 см. Вышеуказанный спектрофотометр работает в двулучевом режиме. Во всех измерениях место кюветы для фонового раствора оставалось пустым, то есть измерения проводились относительно атмосферного воздуха, поглощение которого в рассматриваемом диапазоне не превышало DAir≤0.005. После каждого измерения кювета с раствором промывалась и использовалась для измерения растворителя, использовавшегося в предыдущем измерении. Спектр растворителя вычитался на стадии обработки данных с помощь программного пакета Origin. Растворы готовились с помощью лабораторных электронных весов (точность 0,0002 г) и дозаторов, размешивание проводилось с помощью Vortex.The substances used in the work have a characteristic absorption spectrum in the wavelength range from 220 to 500 nm. The spectra were measured on a Shimadzu 1800 spectrophotometer in quartz cuvettes with an optical path length of d 1 = 1 cm and d 2 = 0.101 cm. The above spectrophotometer operates in a dual-beam mode. In all measurements, the cuvette space for the background solution remained empty, i.e. the measurements were carried out relative to atmospheric air, the absorption of which in the range under consideration did not exceed D Air ≤ 0.005. After each measurement, the cuvette with the solution was washed and used to measure the solvent used in the previous measurement. The solvent spectrum was subtracted at the data processing stage using the Origin software package. The solutions were prepared using laboratory electronic scales (accuracy 0.0002 g) and dispensers, stirring was carried out using a Vortex.
Анализ производной изменения поглощения на длине волны 260 нм (ФИГ. 9) во времени позволяет определить, что первый этап реакции разрушения ДНК проходит намного быстрее. Этот факт согласуется с тем, что повиаргол (наночастицы серебра) индуцирует денатурацию микробной ДНК в присутствии гипохлорита натрия, делая азотистые основания более доступными для реакции хлорирования.Analysis of the time derivative of the change in absorption at 260 nm (FIG. 9) shows that the first step of the DNA destruction reaction occurs much faster. This is consistent with the fact that poviargol (silver nanoparticles) induces denaturation of microbial DNA in the presence of sodium hypochlorite, making nitrogenous bases more accessible for the chlorination reaction.
Таким образом, в присутствии повиаргола на начальной стадии взаимодействия разрушение молекулы микробной ДНК гипохлоритом натрия происходит быстрее. Продукты реакции наночастиц серебра с гипохлоритом натрия облегчают денатурацию двойной спирали микробной ДНК, что ускоряет реакцию хлорирования азотистых оснований гипохлоритом натрия.Thus, in the presence of poviargol at the initial stage of interaction, the destruction of the microbial DNA molecule by sodium hypochlorite occurs faster. The reaction products of silver nanoparticles with sodium hypochlorite facilitate the denaturation of the double helix of microbial DNA, which accelerates the reaction of chlorination of nitrogenous bases by sodium hypochlorite.
Таким образом, предлагаемая интраназальная композиция разрушает РНК- и ДНК-содержащие вирусы и бактерии.Thus, the proposed intranasal composition destroys RNA- and DNA-containing viruses and bacteria.
Пример 7.Example 7.
Изучена зависимость бактерицидного действия от времени воздействия предлагаемой интраназальной композиции следующего состава, масс. %:The dependence of the bactericidal action on the time of exposure of the proposed intranasal composition of the following composition, mass %, was studied:
Гипохлорит натрия раствор (АХ 1566 мт/л) - 49,0Sodium hypochlorite solution (AX 1566 mt/l) - 49.0
Гиалуроновая кислота - 2,0Hyaluronic acid - 2.0
ПВП - 5,0PVP - 5.0
Повиаргол - 1,0Poviargol - 1.0
Грамицидин С - 0,03Gramicidin C - 0.03
Гелофузин - 42,97.Gelofusine - 42.97.
Из локусов от пациентов разных отделений многопрофильного ЛПУ получены бактериальные изоляты, в отношении которых тестировали предлагаемую антимикробную композицию методом «шахматной доски».Bacterial isolates were obtained from loci of patients from different departments of a multidisciplinary healthcare facility, and the proposed antimicrobial composition was tested using the “checkerboard” method.
Результаты оценки зависимости бактерицидного действия от времени воздействия представлены на фигуре 10.The results of the assessment of the dependence of the bactericidal effect on the exposure time are presented in Figure 10.
Уже через 1,5 часа воздействия интраназальной композиции наблюдали полное отсутствие роста тестируемых микроорганизмов. При этом необходимо отметить, что антисептики - гипохлорит натрия, повиаргол, входящие в состав интраназальной композиции, использовали в суббактерицидных дозах, которые в сотни и тысячи раз ниже разрешенных доз отдельно взятых препаратов для клинического местного применения.After just 1.5 hours of exposure to the intranasal composition, a complete absence of growth of the tested microorganisms was observed. It should be noted that the antiseptics - sodium hypochlorite, poviargol, included in the intranasal composition, were used in subbactericidal doses, which are hundreds and thousands of times lower than the permitted doses of individual drugs for clinical local use.
Пример 8.Example 8.
Изучено бактерицидное действие предлагаемой интраназальной композиции следующего состава, мас. %:The bactericidal action of the proposed intranasal composition of the following composition, wt. %, was studied:
Гмпохлорит натрия раствор (АХ 1566 мг/л) - 49,0Sodium chloride solution (AX 1566 mg/l) - 49.0
Гиалуроновая кислота - 1,0Hyaluronic acid - 1.0
ПВП - 5,0PVP - 5.0
Повиаргол - 1,0Poviargol - 1.0
Лизоцим - 16,0Lysozyme - 16.0
Гелофузин - 28,0.Gelofusine - 28.0.
Известно, что лизоцим оказывает очень слабое антибактериальное действие на грамотрицательные микроорганизмы [Renata Cegielska-Radziejewska ⋅ Grzegorz Lesnierowski ⋅ Tomasz Szablewski ⋅ Jacek Kijowski. Physico-chemical properties and antibacterial activity of modiWedeggwhite-lysozyme // Eur Food Res Technol (2010) 231:959-964; DOI 10.1007/s00217-010-1347-у; Гончарова А.И., Окулич B.К., Земко В.Ю., Сенькович С.А. Антимикробная активность лизоцима как фактор неспецифической резистентности // Вестник Витебского государственного медицинского университета. -2019. - том 18, №4. - с. 40-45: DOI: https://doi.org/10.22263/2312-4156.2019.4.40].It is known that lysozyme has a very weak antibacterial effect on gram-negative microorganisms [Renata Cegielska-Radziejewska ⋅ Grzegorz Lesnierowski ⋅ Tomasz Szablewski ⋅ Jacek Kijowski. Physico-chemical properties and antibacterial activity of modiWedeggwhite-lysozyme // Eur Food Res Technol (2010) 231:959–964; DOI 10.1007/s00217-010-1347-у; Goncharova A.I., Okulich B.K., Zemko V.Yu., Senkovich S.A. Antimicrobial activity of lysozyme as a factor of non-specific resistance // Bulletin of Vitebsk State Medical University. - 2019. - Vol. 18, No. 4. - p. 40-45: DOI: https://doi.org/10.22263/2312-4156.2019.4.40].
В исследовании использовали клинический мультирезистентный (устойчив более чем к 5 группам антибиотиков, в том числе к гентамицину) Staphylococcus epidermidis 8242008, выделенный из гемокультуры пациента.The study used clinical multiresistant (resistant to more than 5 groups of antibiotics, including gentamicin) Staphylococcus epidermidis 8242008, isolated from the patient's blood culture.
Использовали клинический штамм Klebsiella pneumoniae 5299639, выделенный из раневого отделяемого пациента челюстно-лицевого профиля. Данный изолят характеризовался устойчивостью к 8 группам антимикробных препаратов, включая карбапенемы.The clinical strain Klebsiella pneumoniae 5299639, isolated from the wound discharge of a maxillofacial patient, was used. This isolate was characterized by resistance to 8 groups of antimicrobial drugs, including carbapenems.
Тестировали предлагаемую интраназальную композицию методом «шахматной доски» с экспозицией 1,5 часа.The proposed intranasal composition was tested using the “checkerboard” method with an exposure time of 1.5 hours.
Результаты оценки бактерицидного действия интраназальной композиции и антимикробных ингредиентов, входящих в ее состав, представлены на фигуре 11.The results of the evaluation of the bactericidal action of the intranasal composition and the antimicrobial ingredients included in its composition are presented in Figure 11.
В отношении грамотрицательной K. pneumoniae наблюдали отсутствие антимикробного действия лизоцима; повиаргол снижал уровень микробной контаминации на 1 lg уже через 1,5 часа воздействия; при действии интраназальной композиции наблюдали снижение числа K. pneumoniae на 2 lg.In relation to gram-negative K. pneumoniae, the absence of antimicrobial action of lysozyme was observed; poviargol reduced the level of microbial contamination by 1 lg after just 1.5 hours of exposure; with the action of the intranasal composition, a decrease in the number of K. pneumoniae by 2 lg was observed.
В отношении грамположительного S. epidermidis наблюдали снижение контаминации в присутствии лизоцима на 1 lg через 1,5 часа воздействия; повиаргол снижал уровень микробной контаминации стафилококка на 2 lg; при действии интраназальной композиции наблюдали снижение числа S. epidermidis на 3 lg.In relation to gram-positive S. epidermidis, a decrease in contamination by 1 lg was observed in the presence of lysozyme after 1.5 hours of exposure; poviargol reduced the level of microbial contamination of staphylococcus by 2 lg; when exposed to the intranasal composition, a decrease in the number of S. epidermidis by 3 lg was observed.
Таким образом, показано усиление бактерицидного действия лизоцима в присутствии повиаргола в отношении патогенных микроорганизмов.Thus, an increase in the bactericidal effect of lysozyme in the presence of poviargol against pathogenic microorganisms was demonstrated.
Пример 9.Example 9.
Оценка пролонгированного действия интраназальной композиции следующего состава, масс. %:Evaluation of the prolonged action of the intranasal composition of the following composition, mass %:
Гипохлорит натрия раствор (АХ 1566 мг/л) - 49,0Sodium hypochlorite solution (AX 1566 mg/l) - 49.0
Гиалуроновая кислота - 1,0Hyaluronic acid - 1.0
ПВП - 5,0PVP - 5.0
Повиаргол - 1,0Poviargol - 1.0
Грамицидин С - 0,03Gramicidin C - 0.03
Гелофузин - 43,97.Gelofusine - 43.97.
Исследования проведены на 10 волонтерах, мужчинах и женщинах в возрасте от 18 до 83 лет. Предварительно в состав композиции вводили измельченный активированный уголь для улучшения визуализации. Всем испытуемым наносили предлагаемую интраназальную композицию однократно в оба носовых хода, затем испытуемые сжимали пальцами крылья носа для равномерного распределения композиции по поверхности слизистой. В условиях передней риноскопии с использованием аппаратного метода (прибор STORZ Karl Storz Endoscope tele pack XLEDTP100) оценивали распределение интраназальной композиции по слизистой полости носа через 8 часов после нанесения.The studies were conducted on 10 volunteers, men and women aged 18 to 83 years. The composition was preliminarily supplemented with crushed activated carbon to improve visualization. All subjects were given the proposed intranasal composition once in both nasal passages, then the subjects squeezed the wings of the nose with their fingers to distribute the composition evenly over the mucosal surface. Under anterior rhinoscopy conditions using a hardware method (STORZ Karl Storz Endoscope tele pack XLEDTP100 device), the distribution of the intranasal composition over the nasal mucosa was assessed 8 hours after application.
У всех волонтеров на все сроки наблюдали сплошное равномерное распределение интраназальной композиции по слизистой передних отделов полости носа, что свидетельствовало о нахождении предлагаемой интраназальной композиции в течение 8 часов наблюдения (ФИГ. 12).In all volunteers, a continuous, uniform distribution of the intranasal composition over the mucous membrane of the anterior sections of the nasal cavity was observed at all times, which indicated the presence of the proposed intranasal composition during the 8 hours of observation (FIG. 12).
При проведении аналогичного испытания при использовании интраназальной композиции на основе прототипа на слизистой оболочке носовой полости через 8 часов нанесения визуализация отсутствовала (ФИГ. 13).When conducting a similar test using an intranasal composition based on the prototype, there was no visualization on the nasal mucosa after 8 hours of application (FIG. 13).
Пример 10.Example 10.
Сравнительные испытания интраназальной композиции (гидрогель) и прототипа.Comparative tests of intranasal composition (hydrogel) and prototype.
При оценке вирулицидной активности по представленной выше методике выявлено, что при совместной инкубации коронавируса ОС43 с мазью-прототипом в течение 3 минут снижение титра вируса составило 1,3 lg TCID50 (титр вируса в контроле 5,3 lg).When assessing the virucidal activity using the above method, it was found that when coronavirus OC43 was incubated with the prototype ointment for 3 minutes, the reduction in the virus titer was 1.3 lg TCID50 (the virus titer in the control was 5.3 lg).
Для сравнения представленный выше пример 1 показал снижение титра коронавируса ОС43 при совместной инкубации с интраназальной композицией в течение 3 минут, которое составило 3 lg (титр вируса в контроле 6,5 lg). В примере 2 снижение титра вируса ОС43 при инкубации с интраназальной композицией с лизоцимом составило 1,5 lg (когда титр вируса в контроле 4,7 lg).For comparison, example 1 presented above showed a decrease in the titer of the coronavirus OC43 during co-incubation with the intranasal composition for 3 minutes, which was 3 lg (the titer of the virus in the control was 6.5 lg). In example 2, the decrease in the titer of the virus OC43 during incubation with the intranasal composition with lysozyme was 1.5 lg (when the titer of the virus in the control was 4.7 lg).
Следовательно, предложенный гидрогель обладает более высокой эффективностью по сравнению с прототипом.Therefore, the proposed hydrogel has higher efficiency compared to the prototype.
Пример 11.Example 11.
Сравнительная оценка бактерицидной активности интраназальной композиции (гидрогель) и прототипа в зависимости от времени совместной инкубации (по методике Примера 7, метод Time-kill assay - оценка зависимости «время - летальное действие») и дозы тест-культур микроорганизмов в дозе 105 КОЕ/мл (Staphylococcus aureus (ФИГ. 14 (А-В)), Pseudomonas aeruginosa (ФИГ. 15 (А-В)), Acinetobacter baumannii (ФИГ. 16 (А-В)), Klebsiella pneumoniae (ФИГ. 17 (А-В)) при экспозиции 1 час.Comparative evaluation of the bactericidal activity of the intranasal composition (hydrogel) and the prototype depending on the time of joint incubation (according to the method of Example 7, Time-kill assay method - evaluation of the "time - lethal effect" relationship) and the dose of test cultures of microorganisms at a dose of 10 5 CFU/ml (Staphylococcus aureus (FIG. 14 (A-B)), Pseudomonas aeruginosa (FIG. 15 (A-B)), Acinetobacter baumannii (FIG. 16 (A-B)), Klebsiella pneumoniae (FIG. 17 (A-B)) with an exposure of 1 hour.
Получены следующие результаты.The following results were obtained.
Препарат из прототипа не оказывал бактерицидного действия в отношении тест-культур микроорганизмов. На чашках Петри отмечен рост микробов (ФИГ. 14 (В), ФИГ. 15 (В), ФИГ. 16 (В), ФИГ. 17 (В)).The prototype preparation did not have a bactericidal effect on test cultures of microorganisms. Microbial growth was noted on Petri dishes (FIG. 14 (B), FIG. 15 (B), FIG. 16 (B), FIG. 17 (B)).
При этом интраназальная композиция по примеру 7 приводит к снижению микробной популяции на 4-5 lg в отношении всех грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.Moreover, the intranasal composition according to example 7 leads to a decrease in the microbial population by 4-5 lg in relation to all gram-positive and gram-negative microorganisms.
Таким образом, заявленная композиция более эффективна, чем препарат из прототипа как по вирулицидной, так и по бактерицидной активности.Thus, the claimed composition is more effective than the prototype drug in terms of both virucidal and bactericidal activity.
Claims (13)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/RU2024/050226 WO2025071439A1 (en) | 2023-09-26 | 2024-09-25 | Intranasal composition for the prophylaxis and/or treatment of viral and bacterial infections |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2825642C1 true RU2825642C1 (en) | 2024-08-28 |
| RU2825642C9 RU2825642C9 (en) | 2024-12-06 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2846896C1 (en) * | 2024-10-10 | 2025-09-18 | Альберт Николаевич Денисов | Antimicrobial preparation and a method for production thereof |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2616523C1 (en) * | 2016-05-27 | 2017-04-17 | Отия Варламович Сичинава | Intranasal ointment for treatment and prevention of respiratory infection |
| CN111135141A (en) * | 2020-01-20 | 2020-05-12 | 蓝佳堂生物医药（福建）有限公司 | Preparation method of composite hydrogel for nasal cavity |
| WO2020247730A1 (en) * | 2019-06-05 | 2020-12-10 | The Florida International University Board Of Trustees | Biotherapy for viral infections using biopolymer based micro/nanogels |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2616523C1 (en) * | 2016-05-27 | 2017-04-17 | Отия Варламович Сичинава | Intranasal ointment for treatment and prevention of respiratory infection |
| WO2020247730A1 (en) * | 2019-06-05 | 2020-12-10 | The Florida International University Board Of Trustees | Biotherapy for viral infections using biopolymer based micro/nanogels |
| CN111135141A (en) * | 2020-01-20 | 2020-05-12 | 蓝佳堂生物医药（福建）有限公司 | Preparation method of composite hydrogel for nasal cavity |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| М.С. Жаркова и др. Синергизм действия антимикробных пептидов PG-1 и ChBac3.4 с антисептиками в отношении антибиотикоустойчивых бактерий / Медицинский академический журнал. 2018. Том 18. N.4, стр.47-57. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2846896C1 (en) * | 2024-10-10 | 2025-09-18 | Альберт Николаевич Денисов | Antimicrobial preparation and a method for production thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Makhayeva et al. | Polymeric iodophors: preparation, properties, and biomedical applications | |
| US10494451B2 (en) | Chitosan-derivative compounds and methods of controlling microbial populations | |
| EP2525803B1 (en) | Antimicrobial agentcomprising peroxide, alcohol and chelating agent | |
| CN106236708B (en) | Antimicrobial compositions containing free fatty acids | |
| CN1089587C (en) | Stable cross-linked compound of polyvinyl pyrrolidone and iodine and method for preparation of said compound | |
| US20190202998A1 (en) | Visible light-curable water-soluble chitosan derivative, chitosan hydrogel, and preparation method therefor | |
| BR112014023321B1 (en) | COMPOSITIONS INCLUDING ANTIBACTERIAL PHAGES AND THEIR USES | |
| US10272108B2 (en) | Antimicrobial silver hydrogel composition for the treatment of burns and wounds | |
| Kuwabara et al. | Healing of Pseudomonas aeruginosa-infected wounds in diabetic db/db mice by weakly acidic hypochlorous acid cleansing and silver nanoparticle/chitin-nanofiber sheet covering | |
| US11957698B2 (en) | Synergistic combination of thermolysin and an antibacterial agent to reduce or eliminate bacterial biofilms from surfaces | |
| LV13745B (en) | Silver/water, silver gels and silver based compositions, and methods for making and using the same | |
| RU2825642C1 (en) | Intranasal composition for preventing and/or treating viral and bacterial infections | |
| RU2825642C9 (en) | Intranasal composition for preventing and/or treating viral and bacterial infections | |
| RU2504396C1 (en) | Pharmaceutical composition containing enzyme ribonuclease and glycyrrhizic acid or salts thereof: ammonium or dipotassium or trisodium glycyrrhizinate | |
| KR101983679B1 (en) | Alpha-helical peptide having antimicrobial actvity against drug-resistant bacteria and biofilm and antimicrobial composition comprising the same | |
| WO2025071439A1 (en) | Intranasal composition for the prophylaxis and/or treatment of viral and bacterial infections | |
| EP4192491A2 (en) | Antimicrobial matrix formed from peptide hydrogels | |
| Moon et al. | Antibacterial efficacy of a chitosan-based hydrogel modified with epsilon-poly-l-lysine against Pseudomonas aeruginosa in a murine-infected burn wound model | |
| JP2008266276A5 (en) | ||
| US20240350579A1 (en) | Antifungal matrix formed from peptide hydrogels | |
| ES2916806T3 (en) | Anti-inflammatory composition to help and promote the healing of chronic ulcerative lesions | |
| Horaitou | Comparative study of Povidone-Iodine and Chlorhexidine used in surgical procedures of dogs and cats. | |
| CN120860225A (en) | Antibacterial composition and application thereof | |
| JP7755994B2 (en) | Antimicrobial peptides and methods of use thereof | |
| RU2697869C1 (en) | Pharmaceutical substance for treating infected wounds of various origins |