RU2824577C1

RU2824577C1 - Фармацевтическая композиция, содержащая ингибитор HDAC и антитело к PD1 или антитело к PD-L1

Info

Publication number: RU2824577C1
Application number: RU2022107850A
Authority: RU
Inventors: Юнг-Дэ КИМ; Чоон Мюн ЧХО
Original assignee: Кристалдженомикс, Инк.
Priority date: 2019-09-04
Filing date: 2020-07-30
Publication date: 2024-08-12

Abstract

Настоящее изобретение относится к способу уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD1 или антитела к PD-L1. Настоящее изобретение позволяет эффективно влиять на увеличение выживаемости животных, страдающих раком, опухолями, расстройствами, обусловленными опухолями, и неопластическими заболеваниями, ингибирование роста пролиферативных клеток, связанных с новообразованиями, или на неопластическую дегенерацию. 15 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 1 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к способу ингибирования роста раковых клеток и уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1.

Настоящая заявка испрашивает приоритет по отношению к применению алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или его соли в комбинации с антителом к PD-1 при карциноме, поскольку заявитель в патентном документе Кореи No. 1978364, зарегистрированном 8 мая 2019 г., под названием "Фармацевтически приемлемая соль алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида или его производного и способ ее получения" показал, что специфическая иммунологическая активность ингибитора эпигенетической мишени, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или его соли, проявляет синергизм с противораковым действием антитела к PD-1.

Кроме того, настоящая заявка испрашивает преимущество приоритета по заявке на патент Кореи No. 2019-0109256, поданной 4 сентября 2019 г., содержание которой полностью включено в настоящую заявку как часть данного описания.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Гистоны являются основными белками, связывающимися с ДНК в ядрах эукариотических клеток и подвергающимися обратимому ацетилированию по аминогруппам остатков лизина в определенных положениях в каждой молекуле гистона. Ацетилирование гистонов имеет отношение к образованию хроматиновых структур более высокого порядка или к циклу клеточного деления и, таким образом, участвует в регуляции экспрессии генетической информации и стабильно регулируется гистонацетилтрансферазами (англ. HAT) и гистондеацетилазами (HDAC). Известно, что эти ферменты нейтрализуют положительные заряды остатков лизина (4 остатка в случае Н4) на аминоконце гистонов путем ацетилирования, индуцируя транскрипционную активность, или дезацетилируют их, снова высвобождая заряд для ингибирования транскрипции, тем самым обеспечивая равновесие уровней ацетилирования гистонов и регулируя экспрессию генов в фазе транскрипции.

Недавно было обнаружено, что HDAC участвует в стимулировании клеточной пролиферации, высоко экспрессируясь в неблагоприятных условиях окружающей среды, таких как гипоксия, низкий уровень глюкозы и канцерогенез клеток, подавляя экспрессию ингибиторов клеточной пролиферации. Вследствие этого HDAC была признана важным фактором регуляции канцерогенности и дифференцировки клеток. Другими словами, в случае если высокая степень ацетилирования хроматина ингибирует клеточную пролиферацию и способствует дифференцировке клеток, HDAC играет ключевую роль в индукции пролиферации клеток посредством дезацетилирования гистонов. Это подтверждается тем фактом, что лечение ингибиторами HDAC приводит к ингибированию клеточной пролиферации и ангиогенеза.

Между тем известно, что PD-1 играет важную роль в регуляции иммунных реакций и поддержании периферической толерантности. PD-1 умеренно экспрессируется в интактных Т клетках, В-клетках и NKT клетках (англ. natural-killer T-cells - естественные Т-клетки-киллеры), и его экспрессия регулируется передачей сигналов через Т/В-клеточные рецепторы на лимфоцитах, моноцитах и клетках костного мозга.

PD-1 имеет два известных лиганда, PD-L1 (В7-Н1) и PD-L2 (B7-DC), которые экспрессируются на раковых клетках в различных тканях. В частности, в клетках некоторых видов рака, таких как рак яичника, рак почки, рак толстой и прямой кишки, рак поджелудочной железы, рак печени и меланома, экспрессия PD-L1 коррелирует с неблагоприятным прогнозом и снижает общую выживаемость независимо от последующего лечения.

Таким образом, существует понимание, что взаимодействие PD-L1 на опухолевых клетках с PD-1 на Т-клетках уменьшает активацию Т-клеток и снижает функции иммунного надзора, тем самым способствуя нарушению иммунного ответа на опухоли.

Можно предположить, что эффективность таких антител может быть дополнительно повышена за счет использования их в комбинации с лучевой терапией, хирургическим вмешательством, химиотерапией, таргетной терапией, ингибиторами сигнальных путей, иммунными усилителями и т.п.

Таким образом, существует необходимость в изучении способа лечения комбинацией соответствующего ингибитора и антитела, как описано выше, чтобы эффективно применять его для подавления роста раковых клеток и их некроза.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ТЕХНИЧЕСКАЯ ПРОБЛЕМА

Для решения указанных выше проблем в настоящем изобретении предложен способ уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1.

РЕШЕНИЕ ПРОБЛЕМЫ

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая:

алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль; и

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1.

Согласно одному из вариантов осуществления, массовое соотношение алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или соли и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 может составлять от 1:0,1 до 1:15.

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в дозе от 1 до 200 мг/кг.

Согласно одному из вариантов осуществления,

алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль можно вводить в дозе от 10 до 500 мг/кг.

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-1 может включать одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из пембролизумаба, ниволумаба, камрелизумаба, цемиплимаба, синтилимаба и торипалимаба.

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-L1 может включать одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из атезолизумаба, авелумаба и дурвалумаба.

Согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид или его производное может быть одним или более соединениями, выбранными из группы, состоящей из следующих соединений:

1) (E)-N1-(3-(1Н-имидазол-1-ил)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)октендиамида,

2) (Е)-N8-гидрокси-N1-(4-гидроксифенетил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

3) (Е)-N1-(3-(диметиламино)-2,2-диметилпропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)октендиамида,

4) (Е)-N1-(2-(диизопропиламино)этил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)октендиамида,

5) (Е)-N8-гидрокси-N1-(1-метоксипропан-2-ил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

6) (E)-N8-гидрокси-N1-(4-метоксибензил)-2-((нафтаин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

7) (Е)-N1-(4-фторфенетил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

8) (Е)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-N1-(тетрагидрофуран-2-ил)метил)-2-октендиамида,

9) (Е)-N1-(2-циклогексенилэтил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

10) (Е)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-N1-(3-(2-оксопирролидин-1-ил)пропил)-2-октендиамида,

11) (Е)-N1-(фуран-2-илметил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

12) (E)-N1-(4-(диметиламино)бензил)-N8-гид рокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

13) (Е)-N8-гидрокси-N1-(2-метоксиэтил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

14) (Е)-N1-циклогексил-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

15) (Е)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-N1-(тиофен-2-илметил)-2-октендиамида,

16) (Е)-N8-гидрокси-N1-(4-метоксифенетил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

17) (Е)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-N1-(4-(трифторметокси)бензил)-2-октендиамида,

18) (Е)-N1-(1-(циклогексилметил)пирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

19) (E)-N1-(1-циклопентилпиперидин-4-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

20) (E)-N1-(1-бензилпирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

21) (Е)-N8-гидрокси-N1-(1-изопропилпирролидин-3-ил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

22) (Е)-N1-(1-(циклогексанкарбонил)пирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

23) сложного трет-бутилового эфира (Е)-3-(8-(гидроксиамино)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-8-оксо-2-октенамидо)пиррол ид ин-1-карбоновой кислоты,

24) (Е)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-N1-(пирролидин-3-ил)-2-октендиамида,

25) (E)-N1-(1-циклогексилпирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-2-илокси)метил)-2-октендиамида,

26) (E)-N1-(1-циклопропилпирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

27) (E)-N1-(1-циклопропилпиперидин-4-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

28) (E)-N1-(1-этилпиперидин-4-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

29) (E)-N1-(1-этилпирролидин-3-ил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

30) (Е)-N8-гидрокси-N1-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

31) (E)-N8-гидрокси-N1-(1-изопропилпиперидин-4-ил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида и

32) (Е)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида.

Согласно одному из вариантов осуществления, соль алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида может представлять собой фосфат (Е)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида.

Согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить одновременно в виде одного препарата либо можно вводить одновременно или последовательно или в обратной последовательности в виде отдельных препаратов.

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 могут быть изготовлены в виде одного препарата.

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 могут быть изготовлены в виде отдельных композиций, соответственно.

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в дозе, меньшей или равной терапевтически эффективной дозе, соответственно.

Согласно одному из вариантов осуществления, 1) алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль вводят перед введением антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 либо

2) антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить до введения алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или соли.

Согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 могут быть приготовлены в виде отдельных препаратов, так что алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль вводят животному внутривенно или перорально, а антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 вводят животному внутривенно.

Согласно одному из вариантов осуществления, композиция может проявлять синергизм в ингибировании роста или уничтожении раковых клеток.

Согласно одному из вариантов осуществления, раковые клетки могут быть охарактеризованы по экспрессии PD-L1, при этом раковые клетки включают клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита А, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита В, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита С, клетки рака печени, не связанного с вирусами, метастатические клетки рака печени, клетки рака толстой кишки, клетки рака поджелудочной железы, клетки рака крови, клетки меланомы или клетки рака легких.

Согласно одному из вариантов осуществления, раковые клетки могут быть подвергнуты скринингу способом, включающим измерение экспрессии PD-L1 в опухолевой ткани.

Согласно одному из вариантов осуществления, показатель доли опухоли (англ. TPS) PD-L1 в раковых клетках может составлять 1% или более.

Конкретные подробности других вариантов осуществления настоящего изобретения включены в представленное ниже подробное описание.

ЭФФЕКТ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 согласно настоящему изобретению позволяет эффективно уничтожать раковые клетки.

Рак, опухоли, расстройства, обусловленные опухолями, и неопластические заболевания обычно представляют собой опасные для жизни состояния, характеризующиеся ростом быстро пролиферирующих клеток. Настоящее изобретение позволяет эффективно влиять на: увеличение выживаемости животных, страдающих указанными выше заболеваниями или расстройствами; ингибирование роста пролиферативных клеток, связанных с новообразованиями; или неопластическую дегенерацию.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1 и 2 представляют собой графики, иллюстрирующие скорость ингибирования роста опухоли на мышиной модели.

ЛУЧШИЙ ВАРИАНТ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Поскольку в настоящее изобретение могут быть внесены различные модификации и изменения, конкретные варианты осуществления проиллюстрированы графическими материалами и будут детально изложены в подробном описании. Однако следует понимать, что изобретение не ограничивается конкретными вариантами осуществления, а включает все модификации, эквивалентные и альтернативные варианты, подпадающие под сущность и объем изобретения. В последующем описании настоящего изобретения, если будет установлено, что подробное описание известных функций может затруднить понимание сути настоящего изобретения, оно будет опущено.

Далее будет более подробно описан способ уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 в соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения.

При использовании в данном контексте термин "аномальный рост клеток" относится к росту клеток, независимому от нормальных механизмов регуляции, и включает аномальный рост нормальных клеток и рост аномальных клеток, например, потерю контактного торможения. Другими словами, утрачивается механизм, участвующий в ингибировании роста и деления клеток при контакте с соседними клетками или тканями по мере их роста.

При использовании в данном контексте термин "неоплазия" относится к аномальной, нерегулируемой и дезорганизованной пролиферации клеток, отличающихся от нормальных клеток автономным ростом и соматическими мутациями. По мере роста и деления неопластические клетки передают свои генетические мутации и пролиферативные характеристики клеткам-потомкам. Новообразование (неоплазм) или опухоль представляет собой скопление неопластических клеток. Согласно некоторым вариантам осуществления, новообразование может быть доброкачественным или злокачественным.

При использовании в данном контексте термин "метастазирование" относится к диссеминации опухолевых клеток через лимфатическую систему или кровеносные сосуды. Метастазирование также относится к миграции опухолевых клеток путем прямого распространения через серозные полости, субарахноидальные или другие пространства. В процессе метастазирования миграция опухолевых клеток в другие области тела приводит к новообразованиям в областях, удаленных от места первоначального появления опухоли.

При использовании в данном контексте термин "субъект" относится к животным, включая, но не ограничиваясь перечнем, приматов (например, человека), коров, овец, коз, лошадей, собак, кошек, кроликов, крыс или мышей. Термины "субъект" и "пациент" в настоящем документе используются взаимозаменяемо по отношению, например, к субъекту-млекопитающему, такому как субъект-человек.

При использовании в данном контексте термины "лечить", "лечащий" и "лечение" означают облегчение или устранение расстройства, заболевания или состояния; или одного или более симптомов, связанных с расстройством, заболеванием или состоянием; или облегчение или устранение причины (причин) самого расстройства, заболевания или состояния.

При использовании в данном контексте термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству соединения, являющемуся при введении достаточным для предупреждения развития или в некоторой степени облегчения одного или более симптомов расстройства, заболевания или состояния, подлежащих лечению. Термин "терапевтически эффективное количество" также относится к количеству соединения, достаточному для того, чтобы вызвать со стороны клетки, ткани, системы, животного либо человека биологический или медицинский ответ, требующийся исследователю, ветеринарному врачу, лечащему врачу или клиническому врачу.

При использовании в данном контексте термин "фармацевтическая композиция" может использоваться взаимозаменяемо с терминами "фармакологическая композиция" и "фармацевтически приемлемая композиция" и относится к композициям, которые могут быть относительно нетоксичными для субъекта, которому их вводят, и обладают безвредным эффективным действием. Кроме того, данный термин может относиться к любой рецептуре органических или неорганических соединений, побочные эффекты которой не ухудшают эффективности лекарственного средства, и которая не вызывает серьезного раздражения у субъекта, подлежащего введению соединения, и не ухудшает биологической активности и свойств соединения.

При использовании в данном контексте термин "фармацевтически приемлемый носитель", "фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество", "физиологически приемлемый носитель" или "физиологически приемлемое вспомогательное вещество" относится к фармацевтически приемлемым материалу, композиции или несущей среде, таким как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, растворитель или инкапсулирующий материал. Каждый из компонентов должен быть "фармацевтически приемлемым" в плане совместимости с другими ингредиентами фармацевтического препарата. Они также должны подходить для использования в контакте с тканями или органами человека или животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции, иммуногенности либо других проблем или осложнений, в соответствии с разумным соотношением пользы и рисков. См. Remington: The Science and Practice of Pharmacy (Наука и практика фармации), 21st Edition; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005; Handbook of Pharmaceutical Excipients (Руководство по фармацевтическим вспомогательным веществам), 5th Edition; Rowe et al, Eds., The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2005; и справочник 'Pharmaceutical Additives (Фармацевтические добавки), 3rd Edition; Ash and Ash Eds., Gower Publishing Company: 2007; Pharmaceutical Preformulation and Formulation (Фармацевтическая композиция до и после придания ей лекарственной формы), Gibson Ed., CRC Press LLC: Boca Raton, FL, 2004.

При использовании в данном контексте термин "фармацевтическая композиция" относится к смеси соединения, раскрытого в настоящем документе, и других химических ингредиентов, таких как фармацевтически приемлемые разбавители, носители и т.п. Соединение можно легко вводить в организм при посредстве фармацевтической композиции.

В настоящем изобретении каждое лекарственное средство, входящее в состав фармацевтической композиции, может быть представлено в виде самостоятельного препарата либо в виде одного препарата, при этом лекарственные компоненты можно вводить одновременно, последовательно или в обратной последовательности. Кроме того, в настоящем изобретении, фармацевтически эффективное количество, время введения, интервал введения, способ введения, период лечения и т.д. каждого лекарственного средства, входящего в состав фармацевтической композиции, могут быть одинаковыми или отличаться друг от друга.

При использовании в данном контексте термин "субъект, подлежащий введению чего-либо" может быть использован взаимозаменяемо с терминами "индивидуум, подлежащий введению чего-либо" и "организм, подлежащий введению чего-либо" и относится ко всем животным, включая человека, которые были инфицированы или могут быть инъецированы бактериями или резистентными штаммами.

При использовании в данном контексте термин "смерть" включает в себя оба значения - некроз и апоптоз.

Как было указано в настоящем документе, "ангиогенез" важен для онкогенеза и метастазирования опухоли. Было установлено, что ангиогенные факторы связаны с некоторыми солидными опухолями, такими как рабдомиосаркома, ретинобластома, саркома Юинга, нейробластома и остеосаркома. Опухоли не могут разрастаться без кровоснабжения, обеспечивающего их питательными веществами и выводящего клеточные отходы. Опухоли, для которых значим ангиогенез, включают солидные опухоли, такие как почечно-клеточная карцинома, гепатоклеточная карцинома, и доброкачественные опухоли, такие как акустическая невринома и нейрофиброматоз. Ангиогенез связан с переносимыми с кровью опухолями, такими как лейкоз. Считается, что ангиогенез может играть некоторую роль в аномалиях костного мозга, приводящих к лейкозам. Блокирование ангиогенеза может остановить рост раковых опухолей и вызванное этим причинение вреда субъекту из-за наличия опухоли.

В настоящем изобретении предложены фармацевтическая композиция и способ ингибирования роста или уничтожения раковых клеток с использованием комбинации ингибитора HDAC и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1.

HDAC представляют собой семейство, состоящее из по меньшей мере восемнадцати ферментов, разделенных на три класса (классы I, II и III). HDAC I класса включают, не ограничиваясь перечнем, HADC 1, 2, 3 и 8. HDAC I класса могут быть обнаружены в ядре, при этом считается, что они связаны с репрессорами регуляции на уровне транскрипции. HDAC II класса включают, не ограничиваясь перечнем, HDAC 4, 5, 6, 7 и 9 и могут быть обнаружены в цитоплазме и ядре. Считается, что HDAC III класса являются NAD-зависимыми белками (англ. NAD, nicotinamide adenine dinucleotide - никотинамидадениндиеуклеотид) и включают, не ограничиваясь перечнем, членов семейства белков сиртуинов. Неограничивающие примеры белков сиртуинов включают SIRT1-7. При использовании в данном контексте термин "селективная HDAC" относится к ингибитору HDAC, не взаимодействующему со всеми тремя классами HDAC.

Ингибиторы HDAC представляют собой класс терапевтических агентов, способствующих дифференциации и апоптозу при гематологических и солидных злокачественных опухолях посредством реконструкции хроматина и регуляции экспрессии генов. Было идентифицировано несколько ингибиторов HDAC, включая бензамиды (энтиностат), короткоцепочечные жирные кислоты (т.е., фенилбутират натрия); гидроксамовые кислоты (т.е., вориностат и трихостатин А); циклические тетрапептиды, содержащие 2-амино-8-оксо-9,10-эпоксидеканоильный фрагмент (т.е., трапоксин А), и циклические пептиды без 2-амино-8-оксо-9,10-эпоксидеканоильного фрагмента (т.е., FK228).

Ингибиторы HDAC можно в целом разделить на пан-ингибиторы HDAC и селективные ингибиторы HDAC. Несмотря на большое структурное разнообразие известных ингибиторов HDAC, у них имеются общие признаки: часть, взаимодействующая с активным центром фермента, и боковая цепь, расположенная внутри канала, ведущего к активному центру. Это можно наблюдать в случае гидроксаматов, таких как SAHA (субероиланилидгидроксамовая кислота), где, как полагают, гидроксаматная группа взаимодействует с активным центром. В случае депсипептидов полагают, что внутриклеточное восстановление дисульфидной связи приводит к образованию свободной тиольной группы (которая взаимодействует с активным центром), присоединенной к 4-углеродной алкенильной цепи.

Различие между ингибиторами HDAC заключается в том, каким образом они взаимодействуют с краем канала HDAC, находящимся на противоположном от активного центра конце канала. Считается, что такое взаимодействие между ингибитором HDAC и краем канала объясняет, по меньшей мере частично, некоторые наблюдаемые различия в селективности HDAC между пан-ингибиторами HDAC, такими как SAHA, и селективными ингибиторами HDAC, такими как депсипептиды.

Алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид представляет собой ингибитор HDAC, проходящий клинические исследования при различных типах солидных опухолей и гематологических раковых заболеваниях. Алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид быстро абсорбируется и имеет период полувыведения приблизительно от 7 до 8 часов, при этом важно отметить, что изменения в ацетилировании гистонов сохраняются в течение нескольких дней после введения.

Белок запрограммированной гибели клеток-1 (PD-1) представляет собой рецептор клеточной поверхности, являющийся членом семейства CD28 регуляторов Т-клеток, в составе рецепторов суперсемейства иммуноглобулинов. Ген PD-1 человека расположен на хромосоме 2q37, а полноразмерная кДНК PD-1 кодирует белок, содержащий 288 аминокислотных остатков, на 60% гомологичный мышиному PD-1. Он присутствует на CD4-CD8 (двойных негативных) тимоцитах во время развития тимуса и экспрессируется при активации в зрелых гемопоэтических клетках, таких как Т- и В-клетки, NKT-клетки и моноциты, после длительного воздействия ангигена. Недавно было показано, что PD-L1 экспрессируется в ряде мышиных и человеческих опухолей (и индуцируется гамма-IFN (англ. IFN, interferon - интерферон) в большинстве PD-LI-негативных опухолевых клеточных линий) и, как полагают, опосредует иммунное уклонение (Iwai Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99: 12293-12297 (2002); Strome S. E. et al., Cancer Res., 63: 6501-6505 (2003). У человека экспрессия PD-1 и/или PD-L1 была обнаружена в биоптатах ряда первичных опухолей рака легких, печени, яичников, шейки матки, кожи, толстой кишки, глиомы, мочевого пузыря, молочной железы, почек, пищевода, желудка, плоскоклеточного рака полости рта, уротелиальноклеточного рака и рака поджелудочной железы, а также опухолей головы и шеи (Brown J. A. et al., J. Immunol. 170: 1257-1266 (2003); Dong H. et al., Nat. Med. 8: 793-800 (2002); Wintterle et al., Cancer Res. 63: 7462-7467 (2003); Strome S. E. et al., Cancer Res., 63: 6501-6505 (2003); Thompson R.H. et al., Cancer Res. 66: 3381-5 (2006); Thompson et al., Clin. Cancer Res. 13: 1757-61 (2007); Nomi T. et al., Clin. Cancer Res. 13: 2151-7. (2007)). Экспрессия PD-лиганда на опухолевых клетках коррелирует с неблагоприятным прогнозом у онкологических больных при различных типах опухолей (обзор Okazaki and Honjo, Int. Immunol. 19: 813-824 (2007)).

Также известно, что высокая экспрессия PD-L1 на опухолевых клетках коррелирует с неблагоприятным прогнозом и выживаемостью при множестве других типов солидных опухолей. Предполагается, что путь PD-1/PD-L1 играет важную роль в иммунном уклонении опухоли и может рассматриваться в качестве привлекательной мишени для терапевтического вмешательства на некоторых типах солидных органов. Несколько антител к PD-1 и PD-L1 находятся в стадии клинической разработки и в целом, как сообщается, хорошо переносятся, причем большинство из них не достигает дозолимитирующей токсичности в исследованиях I фазы. Некоторые исследования показали, что взаимодействие PD-1 с его лигандами (PD-L1 и PD-L2) приводит к ингибированию пролиферации лимфоцитов in vitro и in vivo. Таким образом, можно предположить, что связывание лиганда PD-L1 с PD-1 понижающе регулирует активность противоопухолевых эффекторных Т-клеток и облегчает иммунное уклонение.

Кроме того, было показано, что нарушение взаимодействия PD-1/PD-L1 увеличивает пролиферацию Т-клеток и выработку цитокинов и блокирует развитие клеточного цикла. Исследования in vitro блокады PD-1 с помощью PD-1-специфического антитела показали усиление ответов цитотоксических Т-клеток на специфические антигены рака печени, включая повышенную частоту IFN-γ-секретирующих антиген-специфических клеток. Вместе с тем предполагается, что нацеливание на PD-1 может служить эффективной терапевтической стратегией при раке.

Основным способом нацеливания на PD-1 является разработка генетически модифицированных моноклональных антител, ингибирующих функции путем вмешательства в связывание PD-1 с PD-L1. Антитело к PD-1 и его антигенсвязывающая часть связываются с PD-1 с высокой специфичностью и аффинностью, блокируют связывание PD-L1 и/или PD-L2 и ингибируют иммуносупрессивный эффект сигнального пути PD-1. Согласно некоторым вариантам осуществления, комбинированная терапия включает в себя введение алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или соли и антитела к PD-1 или его антигенсвязывающей части, где антитело или его антигенсвязывающая часть представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое моноклональное антитело или его часть. Согласно некоторым вариантам осуществления, антитело к PD-1 или его антигенсвязывающая часть представляет собой гуманизированное антитело. Согласно некоторым вариантам осуществления, антитело к PD-1 или его антигенсвязывающая часть представляет собой человеческое антитело. Согласно некоторым вариантам осуществления, антитело к PD-1 или его антигенсвязывающая часть представляет собой моноклональное антитело или его антигенсвязывающую часть.

Согласно одному из вариантов осуществления, ингибитор HDAC может включать алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или его соль. Алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид представлен формулой 1:

Формула 1

где R₁ представляет собой С_1-3 алкил, незамещенный или замещенный заместителями; пирролидин, незамещенный или замещенный С_3-8 циклоалкилом, С₃.₈ циклоалкил-С_1-3 алкилом, бензилом, C_1-3 алкилом или С_3-8циклоалкилкарбонилом; пиперидин, замещенный C_1-3 алкилом или С_3-8циклоалкилом; фуран; или С_3-8 циклоалкил,

при условии, что незамещенный С_1-2 алкил и С_1-2 алкил, замещенный С_1-2 алкилпирролидинилом, исключены,

где соль может быть выбрана из соли фосфорной кислоты, соли винной кислоты, соли стеариновой кислоты, соли глюконовой кислоты, соли фумаровой кислоты, соли нафтойной кислоты, соли 1-гидрокси-2 и их смеси, например, представляет собой соль фосфорной кислоты.

Согласно одному из вариантов осуществления, соль может быть выбрана из соли фосфорной кислоты, соли винной кислоты и их смеси, обладающих относительно высокой стабильностью и растворимостью в воде, например, соль может включать в себя соль фосфорной кислоты.

Предпочтительные соединения, такие как алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид формулы 1 или его производное, могут быть выбраны из группы, состоящей из следующих соединений:

1) (Е)-N1-(3-(1Н-имидазол-1-ил)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)октендиамида,

6) (Е)-N8-гидрокси-N1-(4-метоксибензил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

7) (E)-N1-(4-фторфенетил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

12) (E)-N1-(4-(диметиламино)бензил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

14) (E)-N1-циклогексил-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

30) (E)-N8-гидрокси-N1-(2-(1-метилпирролидин-2-ил)этил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида,

31) (Е)-N8-гидрокси-N1-(1-изопропилпиперидин-4-ил)-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида и

Согласно одному из вариантов осуществления, ингибитор HADC, входящий в настоящее изобретение, может включать в себя соль фосфорной кислоты (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида), имеющую структурную формулу, изображенную формулой 2.

Формула 2

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-1 по настоящему изобретению может включать в себя одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из пембролизумаба, ниволумаба, камрелизумаба, цемиплимаба, синтилимаба и торипалимаба.

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-1 по настоящему изобретению может быть заменено антителом к PD-L1, и, например, антитело к PD-L1 может включать в себя одно или более соединений, выбранньк из группы, состоящей из атезолизумаба, авелумаба и дурвалумаба.

Согласно другому варианту осуществления, анти-PD-U может быть заменено антителом KCTLA4, антителом к VEGFR или антителом к VEGF.

Согласно одному из вариантов осуществления, массовое соотношение алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или соли и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 может составлять от 1: 0,1 до 1: 15, например, от 1: 1 до 1: 5.

алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль можно вводить в дозе от 10 до 500 мг/кг, например, от 40 до 250 мг/кг, например, от 5 до 50 мг/кг.

Согласно одному из вариантов осуществления, антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в дозе от 1 до 200 мг/кг, например, от 1 до 10 мг/кг. Согласно другому варианту осуществления, антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в фиксированной дозе 200 мг независимо от веса субъекта, подлежащего введению антитела.

Согласно одному из вариантов осуществления, целевые раковые клетки могут быть охарактеризованы экспрессией PD-L1 и проверены путем измерения экспрессии PD-L1 в опухолевых тканях. Например, раковые клетки могут характеризоваться сверхэкспрессией или пониженной экспрессией PD-L1. Кроме того, в качестве целевых раковых клеток могут быть выбраны, например, клетки, у которых показатель доли опухоли PD-L1 (TPS) в раковых клетках составляет 1% или более, например, 20% или более, например, 50% или более.

Раковые клетки могут включать, в частности, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита А, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита В, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита С, клетки рака печени, не связанного с вирусами, метастатические клетки рака печени, клетки рака толстой кишки, клетки рака поджелудочной железы, клетки рака крови, клетки меланомы или клетки рака легких. Например, меланома может быть нерезектабельной или метастатической меланомой, а рак легких может быть немелкоколеточным раком легкого, при этом немелкоколеточный рак легкого выбран из аденокарциномы, плоскоклеточной карциномы, неплоскоклеточной карциномы и крупноклеточной карциномы.

Кроме того, раковые клетки могут реагировать или не реагировать уменьшением роста либо гибелью на лечение существующими лекарственными средствами, включая сорафениб, ленватиниб, регорафениб, ниволумаб или пембролизумаб, и могут быть подвергнуты предшествующей терапии с использованием указанных выше веществ.

Согласно одному из вариантов осуществления, раковые клетки, к которым применяется настоящее изобретение, могут демонстрировать или не демонстрировать прогресс в результате предшествующей терапии с использованием антитела к CTLA4 или ингибитора BRAF в дополнение к веществам, описанным выше.

Согласно одному из вариантов осуществления, последовательность лечения алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамидом или его солью и антителом к PD-1 или антителом к PD-L1 не ограничена особым образом, лечение может выполняться в любом порядке, одновременно или последовательно. Таким образом, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить одновременно, последовательно или в обратной последовательности и, в частности, их можно вводить одновременно в виде одного препарата либо можно вводить одновременно или последовательно или в обратной последовательности в виде отдельных препаратов.

Согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить одновременно, поскольку они изготовлены в виде одного препарата.

Кроме того, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 могут быть изготовлены в виде отдельных композиций, соответственно.

Согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в дозе, меньшей или равной терапевтически эффективной дозе, соответственно. Например, при введении в комбинации с противоопухолевыми терапевтическими средствами другого типа дозировка может быть скорректирована и использована как для вспомогательного лекарственного средства.

Согласно одному из вариантов осуществления, при введении в комбинации с другими терапевтическими агентами 1) алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль вводят перед введением антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 или 2) антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить до введения алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида, его производного или соли.

Согласно одному из вариантов осуществления, гибель раковых клеток может быть вызвана лечением животных двумя веществами в течение от 1 до 40 дней, например, от 3 до 21 дней. В частности, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль можно вводить многократно в течение 3 недель, например, в виде 1 курса лечения, состоящего из 5 последовательных дней приема лекарственного средства с 2 последующими днями без приема. Кроме того, антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 можно вводить в первый день курса лечения и можно вводить раз в две недели.

Способ введения может быть выбран из ряда способов введения соединения, существующих в данной области, включая, но не ограничиваясь перечнем, пероральное, инъекционное, аэрозольное, парентеральное и местное введение. Фармацевтические композиции также могут быть получены взаимодействием соединения с неорганической или органической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфокислота, салициловая кислота и т.п.

Способ лечения не ограничивается особым образом, но согласно одному из вариантов осуществления, алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или его соль фосфорной кислоты можно вводить животному внутривенно или перорально, а антитело к PD1 или антитело к PD-L1 можно вводить животному внутривенно.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть представлена в форме таблеток, гранул, порошков, капсул, сухих сиропов или инъекций. В частности, композиция может быть представлена в любой удобной форме, например, в форме таблеток, пеллет, гранул, капсул, суспензий, эмульсий или порошков, пригодных для разведения водой или другой подходящей жидкой средой. Кроме того, композиция может быть представлена в виде пероральных лекарственных форм или инъекций.

Фармацевтическая композиция для перорального применения может содержать один или более разбавителей, выбранных из группы, состоящей из микрокристаллической целлюлозы, маннита, лактозы и лактозы, одно или более смазывающих веществ, выбранных из группы, состоящей из талька, стеарата магния, стеарилфумарата натрия и глицерилбегената, и одно или более связующих веществ, выбранных из группы, состоящей из поливинилпирролидона, гидроксипропилметилцеллюлозы и гидроксипропилцеллюлозы. Кроме того, может быть включен, например, слой покрытия в количестве от 1 до 10 мас. % в расчете на 100 массовых частей таблетки или капсулы. В частности, например, слой покрытия может включать в себя водорастворимую покрывающую основу, при этом в качестве покрывающей основы может быть использована общепринятая покрывающая основа. Более конкретно, например, слой покрытия может включать покрывающую основу, содержащую производные поливинилового спирта, производные метакриловой кислоты и производные полиакриловой кислоты, например, могут быть использованы один или два или более продуктов, выбранных из группы, состоящей из Opadry®, Kollicoat® и гидроксипропилметилцеллюлозы (англ. НРМС), например, содержащий поливиниловый спирт Opadry®, обладающий достаточно высокими влаго- и светоизоляционными свойствами.

При изготовлении гранулированной композиции для перорального применения предпочтительно не использовать в качестве связующего растворителя очищенную воду, учитывая нестабильные характеристики влагостойкости, однако можно использовать этанол, который легко удаляется в процессе изготовления. Поскольку стеарат магния, являющийся общепринятым смазывающим веществом, применяемым в композициях для перорального применения, может быть несовместим с алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамидом по настоящему изобретению, можно использовать альтернативу стеарата магния.

Согласно одному из вариантов осуществления, помимо описанных выше добавок может быть добавлено фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, обладающее хорошей совместимостью с соединением.

Композиция для введения путем инъекции может быть представлена в жидкой форме, поскольку алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид является водорастворимым соединением, хорошо растворяющимся в воде. Композиция, как правило, не требует использования усилителей растворимости и других добавок, применяемых для плохо растворимых соединений. Предпочтительно использовать минимум добавок, поскольку совместимость с добавками может быть нестабильной. Более конкретно, композиция может быть изготовлена путем растворения в продутой азотом воде для инъекций с последующей лиофилизацией.

Согласно одному из вариантов осуществления, способ также может включать в себя стадию стерилизации. Способы стерилизации могут включать стерилизацию сухим жаром, стерилизацию при повышенном или пониженном давлении, стерилизацию фильтрацией, стерилизацию газом, стерилизацию облучением и т.п. При стерилизации фильтрацией можно использовать, например, нитроцеллюлозный мембранный фильтр, например, фильтр 0,45 мкм или фильтр 0,2 мкм и т.д. Согласно настоящему изобретению, способ также может включать в себя, например, стадию стерилизации при высокой температуре и стадию стерилизации при пониженном давлении или асептической фильтрации.

Согласно другому варианту осуществления настоящего изобретения, может быть предложена фармацевтическая композиция противоопухолевого средства, содержащая алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамид, его производное или соль и антитело к PD-1 или антитело к PD-L1.

Далее будут более подробно описаны варианты осуществления настоящего изобретения, что позволит специалистам в данной области легко осуществить настоящее изобретение. Однако настоящее изобретение может быть осуществлено в различных формах и не ограничивается описанными в настоящем документе вариантами осуществления.

ОПИСАНИЕ ПРИМЕРОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Экспериментальный пример 1

Скорость ингибирования роста опухоли на мышиной модели

Как следует из Таблицы 1, на 9 мышиных моделях рака печени, где мышам (C57BL/6) трансплантировали клетки гепатомы Нера1-6, было показано, что способность ингибировать рост опухоли улучшалась при лечении алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамидом (ингибитором HDAC) или антителами к PD-1, и подтверждено, что опухоль исчезала при лечении комбинацией двух веществ.

В качестве соединения алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида использовали фосфат (Е)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида (CG-745, CAS No. 2173017-02-0), а в качестве антитела к PD-1-ВР0146 (BioXcell, Западный Лебанон, Нью-Гэмпшир, США).

6-недельным мышам линии C57BL6 инъецировали в левый бок 1×10⁶ клеток гепатомы Нера1-6. По истечении 5 дней животных разделяли на 4 группы для введения несущей среды, только CG-745, только антитела к PD-1 или комбинации CG-745 и антитела к PD-1. Объем опухоли определяли как (размер по длинной оси) × (размер по короткой оси)²× 0,5. При измерении объема опухоли мышей с объемом опухоли менее 1 мм считали безопухолевыми и наблюдали за ними в течение по меньшей мере 50 дней. Несущую среду, CG-745 и антитело к PD-1 вводили внутрибрюшинно (I.P). CG-745 вводили в дозе 20 мг/кг в течение 5 дней подряд с последующим 2-дневным перерывом (1 курс лечения), курс лечения повторяли 3 раза. Антитело к PD-1 вводили однократно в дозе 5 мг/кг вместе с CG-745 на пятый день первого курса лечения CG-745.

Средняя скорость ингибирования роста опухоли для 9 мышей представлена на Фиг. 1, а результаты для каждой из 9 мышей представлены на Фиг. 2.

Как следует из графика Фиг. 1, было установлено, что на 32-й день в Сравнительном примере 1 скорость ингибирования роста опухоли составляла 73,8%, а в Сравнительном примере 2 - 84,59%, соответственно. Кроме того, было установлено, что при лечении в соответствии со Сравнительным примером 1 опухоль исчезала у 4 мышей. В частности, было установлено, что в Примере 1 на 32-й день скорость ингибирования роста опухоли составляла 111,18%, при этом опухоль исчезала у всех 9 мышей. Таким образом, было подтверждено, что прямая или косвенная противоопухолевая активность алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида повышается под влиянием антитела к PD-1.

Как было описано выше, настоящим изобретение было подтверждено, что комбинация алкилкарбамоилнафталинилоксиоктеноилгидроксамида в качестве ингибитора HDAC и антитела к PD-1 оказывает эффективное действие на уничтожение раковых клеток.

Представленные выше описания являются лишь иллюстрацией технической идеи настоящего изобретения, так что специалисты в области техники, к которой относится настоящее изобретение, могут вносить различные модификации и изменения без отступления от существенных характеристик настоящего изобретения. Кроме того, варианты осуществления, раскрытые в настоящем изобретении, предназначены не для ограничения технической идеи настоящего изобретения, а для пояснения технической идеи, причем объем технической идеи настоящего изобретения не ограничивается данными вариантами осуществления. Объем патентной охраны настоящего изобретения следует интерпретировать в соответствии с прилагаемой формулой изобретения, а все технические идеи в пределах эквивалентного им объема следует рассматривать как входящие в объем настоящего изобретения.

Claims

1. Способ лечения или предупреждения рака, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, где указанная фармацевтическая композиция содержит:

фосфатную соль (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида и

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1.

2. Способ по п. 1, где массовое соотношение фосфатной соли (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида и антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 составляет от 1:0,1 до 1:15.

3. Способ по п. 1 или 2, где доза антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 составляет от 1 до 200 мг/кг.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где доза фосфатной соли (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида составляет от 10 до 500 мг/кг.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где антитело к PD-1 включает одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из пембролизумаба, ниволумаба, камрелизумаба, цемиплимаба, синтилимаба и торипалимаба.

6. Способ по любому из пп. 1-5, где антитело к PD-L1 включает одно или более соединений, выбранных из группы, состоящей из атезолизумаба, авелумаба и дурвалумаба.

7. Способ по любому из пп. 1-6, где

фосфатная соль (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида и

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 находятся в виде одного препарата.

8. Способ по любому из пп. 1-6, где

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 изготовлены в виде двух отдельных препаратов для одновременного или последовательного введения.

9. Способ по любому из пп. 1-8, где

фосфатная соль (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1- илокси)метил)-2-октендиамида и

антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 предназначены для введения в дозе, меньшей или равной терапевтически эффективной дозе в монотерапии, соответственно.

10. Способ по любому из пп. 1-6, где

1) фосфатная соль (Е)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида предназначена для введения перед введением антитела к PD-1 или антитела к PD-L1 или

2) антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 предназначено для введения до введения фосфатной соли (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида.

11. Способ по любому из пп. 1-6, где фосфатная соль (E)-N1-(3-(диметиламино)пропил)-N8-гидрокси-2-((нафталин-1-илокси)метил)-2-октендиамида предназначена для внутривенного или перорального введения, а антитело к PD-1 или антитело к PD-L1 предназначено для внутривенного введения.

12. Способ по любому из пп. 1-11, где фармацевтическая композиция проявляет синергизм в ингибировании роста или уничтожении раковых клеток.

13. Способ по п. 12, где раковые клетки характеризуются экспрессией PD-L1.

14. Способ по п. 12 или 13, где раковые клетки представляют собой клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита А, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита В, клетки рака печени, вызванного вирусом гепатита С, клетки рака печени, не связанного с вирусами, метастатические клетки рака печени, клетки рака толстой кишки, клетки рака поджелудочной железы, клетки рака крови, клетки меланомы или клетки рака легких.

15. Способ по любому из пп. 12-14, где раковые клетки подвергают скринингу способом, включающим измерение экспрессии PD-L1 в опухолевой ткани.

16. Способ по любому из пп. 12-15, где показатель доли опухоли (TPS) PD-L1 в раковых клетках составляет 1% или более.