RU2823997C1 - Method for differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis - Google Patents
Method for differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2823997C1 RU2823997C1 RU2023108448A RU2023108448A RU2823997C1 RU 2823997 C1 RU2823997 C1 RU 2823997C1 RU 2023108448 A RU2023108448 A RU 2023108448A RU 2023108448 A RU2023108448 A RU 2023108448A RU 2823997 C1 RU2823997 C1 RU 2823997C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pyelonephritis
- urolithiasis
- lactoferricin
- urine
- concentration
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 206010037596 Pyelonephritis Diseases 0.000 title claims abstract description 33
- 206010007027 Calculus urinary Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 208000008281 urolithiasis Diseases 0.000 title claims abstract description 28
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 title abstract description 9
- 101800004361 Lactoferricin-B Proteins 0.000 claims abstract description 29
- CFFMZOZGXDAXHP-HOKBLYKWSA-N lactoferricin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CFFMZOZGXDAXHP-HOKBLYKWSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims abstract 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 description 7
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 6
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 6
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 description 5
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 3
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 3
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 3
- 201000004538 Bacteriuria Diseases 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 2
- 206010038419 Renal colic Diseases 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 2
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 2
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 2
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 2
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 2
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- 206010003011 Appendicitis Diseases 0.000 description 1
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010014418 Electrolyte imbalance Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001672689 Gomesa Species 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 241000186367 Mycobacterium avium Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 206010037597 Pyelonephritis acute Diseases 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- 208000012931 Urologic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 208000005298 acute pain Diseases 0.000 description 1
- 201000001555 acute pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 102000018568 alpha-Defensin Human genes 0.000 description 1
- 108050007802 alpha-defensin Proteins 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 208000033847 bacterial urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 210000000678 band cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000012265 beta-defensin Human genes 0.000 description 1
- 108050002883 beta-defensin Proteins 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 description 1
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 description 1
- POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N cathelicidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C1=CC=CC=C1 POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 206010013990 dysuria Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 1
- 210000004276 hyalin Anatomy 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000008085 renal dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 208000014001 urinary system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007487 urography Methods 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к урологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики пиелонефрита и мочекаменной болезни путем определения в моче человека концентрации антибактериального пептид лактоферрицина.The invention relates to the field of medicine, namely to urology, and can be used for differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis by determining the concentration of the antibacterial peptide lactoferricin in human urine.
Пиелонефрит очень часто сопровождает мочекаменную болезнь (МКБ), доброкачественную гиперплазия простаты, аномалии развития мочеполовых органов и другие урологические заболевания. Наоборот, у большого числа пациентов с уролитиазом (МКБ), нуждающихся в неотложной урологической помощи, наблюдаются почечная колика или вторичный пиелонефрит. Несмотря на многообразие методов лечения и лекарственных средств количество острых пиелонефритов и рецидивов хронического пиелонефрита увеличивается (Лопаткин Н.А., Камалов А.А., Аполихин О.И. и др. Урология. М.: ГЭОТАРМедиа, 2013; 816 с.; Аляев Ю.Г., Глыбочко П.В., Пушкарь Д.Ю. Урология. Российские клинические рекомендации. М.: ГЭОТАРМедиа, 2015; 480 с. ).Pyelonephritis very often accompanies urolithiasis (UL), benign prostatic hyperplasia, malformations of the genitourinary organs and other urological diseases. On the contrary, a large number of patients with urolithiasis (UL) who require emergency urological care have renal colic or secondary pyelonephritis. Despite the variety of treatment methods and drugs, the number of acute pyelonephritis and relapses of chronic pyelonephritis increases (Lopatkin N.A., Kamalov A.A., Apolikhin O.I. et al. Urology. Moscow: GEOTARMedia, 2013; 816 p.; Alyaev Yu.G., Glybochko P.V., Pushkar D.Yu. Urology. Russian clinical guidelines. Moscow: GEOTARMedia, 2015; 480 p.).
Кроме того, в последние годы изменилась и сама клиническая картина пиелонефрита, проявляющаяся в более частом выявлении малосимптомных форм болезни, несмотря на выраженные воспалительно-деструктивные изменения в органах мочевыделительной системы (МВС). В этой связи в качестве альтернативы или дополнения к антибиотикам повышенный интерес представляют антимикробные пептиды (АМП), прежде всего те, которые синтезируются лейкоцитами или эпителиальными клетками МВС (Веснина Ж.В. Новые и потенциальные биомаркеры острого повреждения почек // Клиническая лабораторная диагностика. - 2018. - Т. 63, №7. - С. 388-396.).In addition, in recent years, the clinical picture of pyelonephritis itself has changed, manifested in a more frequent detection of low-symptom forms of the disease, despite pronounced inflammatory and destructive changes in the organs of the urinary system (US). In this regard, antimicrobial peptides (AMPs), primarily those synthesized by leukocytes or epithelial cells of the UUS, are of increased interest as an alternative or supplement to antibiotics (Vesnina Zh.V. New and potential biomarkers of acute kidney injury // Clinical laboratory diagnostics. - 2018. - Vol. 63, No. 7. - P. 388-396.).
Доказано, что и активированные нейтрофилы, и эпителиоциты в моче секретируют такие АМП как лактоферрин, липокалин, кателицидин, α- и β-дефенсины и другие (Захарова И.Н., Османов И.М., Климов Л.Я., Касьянова А.Н., Курьянинова В.А., Лупан И.Н. Роль антимикробных пептидов в защите от инфекций мочевых путей. // Медицинский совет.-2019. - №2. - С.143-150).It has been proven that both activated neutrophils and epithelial cells in urine secrete such AMPs as lactoferrin, lipocalin, cathelicidin, α- and β-defensins and others (Zakharova I.N., Osmanov I.M., Klimov L.Ya., Kasyanova A.N., Kuryaninova V.A., Lupan I.N. The role of antimicrobial peptides in protection against urinary tract infections. // Medical Council.-2019. - No. 2. - P.143-150).
Было обнаружено, что структурным участком белка лактоферрина, ответственным за бактерицидные свойства, является короткий концевой пептид, называемый лактоферрицином (Серебряков А.А., Коханов А.В., Николаев А.А. Уропротеины с антибактериальными свойствами: клинико-диагностическое значение. // Астраханский медицинский журнал. - 2020. - Т.15, №3. - С. 32-47).It was found that the structural region of the lactoferrin protein responsible for the bactericidal properties is a short terminal peptide called lactoferricin (Serebryakov A.A., Kokhanov A.V., Nikolaev A.A. Uroproteins with antibacterial properties: clinical and diagnostic significance. // Astrakhan Medical Journal. - 2020. - Vol. 15, No. 3. - P. 32-47).
По информации, содержащейся в базе данных UniProt, ЛФЦ человека состоят из 48 аминокислотных остатка и имеют молекулярную массу 5345 Да (Silva Т., Magalhães В., Maia S., Gomes P., Nazmi К., Bolscher J.G.M., Rodrigues P.N., Bastos M., Gomesa M.S. Killing of Mycobacterium avium by lactoferricin peptides: improved activity of arginine- and d-amino-acid-containing molecules. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - 2014. - V. 5(6). - P. 3461-3467).According to the information contained in the UniProt database, human LFCs consist of 48 amino acid residues and have a molecular weight of 5345 Da (Silva T., Magalhães B., Maia S., Gomes P., Nazmi K., Bolscher J.G.M., Rodrigues P.N., Bastos M., Gomesa M.S. Killing of Mycobacterium avium by lactoferricin peptides: improved activity of arginine- and d-amino-acid-containing molecules. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - 2014. - V. 5(6). - P. 3461-3467).
Существующие способы дифференциальной диагностики МКБ от обструктивного или необструктивного пиелонефрита основаны на неинвазивных инструментальных или инвазивных лабораторных методах.Existing methods of differential diagnosis of urolithiasis from obstructive or non-obstructive pyelonephritis are based on non-invasive instrumental or invasive laboratory methods.
Известны способы диагностики обструктивного (пиелонефрит на фоне МКБ) или необструктивного пиелонефрита (пиелонефрит без клинических признаков МКБ) аппаратными методами с помощью ультразвукового исследования (УЗИ), компьютерной томографии (КТ), магнитнорезонансной томографии (МРТ), внутривенной урографии (Н.А. Лопаткин. Урология. Национальное руководство. Москва. 2013 г. 442-444), которые позволяют диагностировать уже развившийся гнойно-воспалительный процесс, но не позволяющий осуществлять дифференциальную диагностику МКБ и пиелонефрита на ранних доклинических стадиях при впервые возникших приступах почечной колики.There are known methods for diagnosing obstructive (pyelonephritis against the background of urolithiasis) or non-obstructive pyelonephritis (pyelonephritis without clinical signs of urolithiasis) using hardware methods with the help of ultrasound examination (US), computed tomography (CT), magnetic resonance imaging (MRI), intravenous urography (N.A. Lopatkin. Urology. National Guide. Moscow. 2013, 442-444), which allow diagnosing an already developed purulent-inflammatory process, but do not allow differential diagnosis of urolithiasis and pyelonephritis in the early preclinical stages during the first attacks of renal colic.
Известны способ диагностики гнойного пиелонефрита путем лабораторного обследования: общий и биохимический анализ крови, общий анализ мочи, проба Реберга, бактериологический посев мочи с целью выявления возбудителя, его количества и чувствительности к антибактериальным препаратам (Н.А. Лопаткин. Клинические рекомендации. Урология. 2007 г., г Москва. 178-179.). Однако лабораторные анализы указывают на степень тяжести воспалительного процесса, но не определяют наличие или отсутствие гнойного процесса, тем более не могут спрогнозировать развитие гнойного пиелонефрита.There are known methods for diagnosing purulent pyelonephritis by laboratory testing: general and biochemical blood tests, general urine analysis, Reberg test, bacteriological urine culture to identify the pathogen, its quantity and sensitivity to antibacterial drugs (N.A. Lopatkin. Clinical guidelines. Urology. 2007, Moscow. 178-179). However, laboratory tests indicate the severity of the inflammatory process, but do not determine the presence or absence of a purulent process, much less can they predict the development of purulent pyelonephritis.
В настоящее время для диагностики почечного повреждения и нарушений функции почек используются показатели снижения скорости клубочковой фильтрации (СКФ), электролитных нарушений, повышения уровня креатинина, мочевины (Бобкова И.Н., 2005; Бельков В.В., 2011; Захарова Н.Б. с соавт., 2019).Currently, indicators of decreased glomerular filtration rate (GFR), electrolyte disturbances, increased levels of creatinine and urea are used to diagnose renal damage and renal dysfunction (Bobkova I.N., 2005; Belkov V.V., 2011; Zakharova N.B. et al., 2019).
Наибольшее значение для дифференциальной диагностики урологической патологии имеют иммунохимические методы определения в моче различных белковых маркеров с помощью иммуносенсорной технологии, иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунохроматографического анализа (ИХА).The most important methods for differential diagnosis of urological pathology are immunochemical methods for determining various protein markers in urine using immunosensor technology, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunochromatographic assay (ICA).
Наиболее близким к предлагаемому является способ диагностики бактериальной инфекции мочевыводящих путей in vitro, включающий стадию определения концентрации прокальцитонина в пробах мочи и плазмы, и если величина соотношения между концентрациями прокальцитонина в моче (PCTur) и прокальцитонина в плазме крови (PCTpl) более 1 (PCTur/PCTpl отношение > 1), то это является предиктором в отношении наличия инфекции мочевыводящих путей (патент РФ №2611371 опубл. 21.02.2017 Бюл. №6).The closest to the proposed method is the in vitro diagnostic method for bacterial urinary tract infection, which includes the stage of determining the concentration of procalcitonin in urine and plasma samples, and if the ratio between the concentrations of procalcitonin in urine (PCTur) and procalcitonin in blood plasma (PCTpl) is more than 1 (PCTur/PCTpl ratio > 1), then this is a predictor for the presence of urinary tract infection (RU Patent No. 2611371 published on 21.02.2017 Bulletin No. 6).
Недостатками прототипа являются:The disadvantages of the prototype are:
- не специфичность используемого индикатора в отношении инфекционного агента;- lack of specificity of the indicator used in relation to the infectious agent;
- большое число ложноположительных и ложноотрицательных результатов;- a large number of false positive and false negative results;
- дороговизна процедуры анализа;- high cost of the analysis procedure;
- необходимость для обследования двух жидкостей пациента;- the need for examination of two patient fluids;
- способ не позволяет дифференцировать пиелонефрит от МКБ.- the method does not allow differentiating pyelonephritis from urolithiasis.
Изобретение направлено на повышение точности и упрощение процедуры дифференциальной диагностики пиелонефрита и мочекаменной болезни путем исследования мочи человека.The invention is aimed at increasing the accuracy and simplifying the procedure for differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis by examining human urine.
Поставленная в изобретении цель достигается тем, что в моче у пациентов с подозрением на пиелонефрит и/или мочекаменную болезнь иммунохимическим методом определяют концентрацию антибактериального пептида лактоферрицина и при концентрации лактоферрицина мочи выше 10 нг/мл диагностируют пиелонефрит, при концентрации лактоферрицина мочи ниже 5 нг/мл диагностируют мочекаменную болезнь и при концентрации лактоферрицина мочи от 5 до 10 нг/мл диагностируют пиелонефрит на фоне мочекаменной болезни.The aim set in the invention is achieved in that the concentration of the antibacterial peptide lactoferricin is determined in the urine of patients with suspected pyelonephritis and/or urolithiasis using an immunochemical method, and if the concentration of urinary lactoferricin is above 10 ng/ml, pyelonephritis is diagnosed, if the concentration of urinary lactoferricin is below 5 ng/ml, urolithiasis is diagnosed, and if the concentration of urinary lactoferricin is from 5 to 10 ng/ml, pyelonephritis is diagnosed against the background of urolithiasis.
Иммунохимический метод регистрации антимикробного пептида лактоферрицина, основанный на реакции антиген-антитело, имеет ряд преимуществ перед спектрофотометрическими и другими методами регистрации результата измерения, к числу которых относятся универсальность, избирательность, специфичность, высокая чувствительность.The immunochemical method of recording the antimicrobial peptide lactoferricin, based on the antigen-antibody reaction, has a number of advantages over spectrophotometric and other methods of recording the measurement result, which include versatility, selectivity, specificity, and high sensitivity.
Для получения иммуногенных конъюгатов для неиммуногенного пептида лактоферрицина мы связывали его с молекулой бычьего сывороточного альбумина (БСА) как описано в работах Чехонина В.П. (Чехонин В.П., Дмитриева Т.Б., Жирков Ю.А. Иммунохимический анализ нейроспецифических антигенов. - М.: Медицина, 1999. - 416 с. ).To obtain immunogenic conjugates for the non-immunogenic peptide lactoferricin, we linked it to a molecule of bovine serum albumin (BSA) as described in the works of V.P. Chekhnin (V.P. Chekhnin, T.B. Dmitrieva, Yu.A. Zhirkov. Immunochemical analysis of neurospecific antigens. Moscow: Medicine, 1999. 416 p.).
Полученные конъюгаты далее использовали для иммунизации кроликов по стандартным протоколам до получения гипериммунной поликлональной антисыворотки. После процедуры истощения (адсорбции) полученной антисыворотки препаратами БСА получали моноспецифическую антисыворотку к лактоферрицину человека. Для различных иммунохимических методов определения лактоферрицина в пробах мочи в качестве тест-системы использовали либо полученную антисыворотку, либо выделенную из нее иммуноглобулиновую фракцию, содержащую антитела против лактоферрицина человека.The resulting conjugates were then used to immunize rabbits according to standard protocols to obtain a hyperimmune polyclonal antiserum. After the procedure of depletion (adsorption) of the obtained antiserum with BSA preparations, a monospecific antiserum to human lactoferricin was obtained. For various immunochemical methods for determining lactoferricin in urine samples, either the obtained antiserum or the immunoglobulin fraction isolated from it containing antibodies against human lactoferricin were used as a test system.
Предложенный нами способ внедрен в работу урологического отделения Александро-Мариинской областной клинической больницы (АМОКБ) и ГКБ №3 г. Астрахани и использован при обследовании 38 пациентов с МКБ, 47 больных с необструктивным пиелонефритом и 64 больных обструктивным пиелонефритом.The method we proposed was implemented in the work of the urology department of the Alexandro-Mariinsky Regional Clinical Hospital (AMRKH) and City Clinical Hospital No. 3 in Astrakhan and was used in examining 38 patients with urolithiasis, 47 patients with non-obstructive pyelonephritis and 64 patients with obstructive pyelonephritis.
Ниже приводятся результаты апробации.The results of the testing are presented below.
Пример 1. Больной М. 55 лет, поступил 17.04.20 г. через двое суток от начала заболевания в приемное отделение городской клинической больницы №3 г. Астрахани с жалобами на тошноту, не уменьшающиеся боли в правой подвздошной области, ноющего характера.Example 1. Patient M., 55 years old, was admitted on 17.04.20, two days after the onset of the disease, to the emergency department of City Clinical Hospital No. 3 in Astrakhan with complaints of nausea, persistent pain in the right iliac region, of a nagging nature.
Общее состояние больного при поступлении удовлетворительное. Температура тела 37,3°С, частота пульса 76 ударов в минуту, АД 125/75 мм рт. ст. Со стороны сердца и легких изменений нет.The patient's general condition upon admission was satisfactory. Body temperature 37.3°C, pulse rate 76 beats per minute, blood pressure 125/75 mm Hg. There were no changes in the heart and lungs.
Анализ крови: гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4,8×1012/л, гематокрит 0,4 л/л, СОЭ 5 мм/ч, лейкоциты - 6,8×109/л, эозинофилы - 2%, палочкоядерные нейтрофилы - 4%, сегментоядерные - 69%, лимфоциты - 22%, моноциты - 3%. Общий белок 62 г/л, общий билирубин - 13,3 мкмоль/л. При исследовании мочи изменений не обнаружено.Blood test: hemoglobin 134 g/l, erythrocytes 4.8×10 12 /l, hematocrit 0.4 l/l, ESR 5 mm/h, leukocytes - 6.8×10 9 /l, eosinophils - 2%, band neutrophils - 4%, segmented neutrophils - 69%, lymphocytes - 22%, monocytes - 3%. Total protein 62 g/l, total bilirubin - 13.3 μmol/l. No changes were found in urine analysis.
Бактериологические исследования мочи проведенное на бактериологический анализатор гемокультур Bact/Alert 3D 60, bioMerieux Inc. США не обнаружило в моче признаков бактериурии.Bacteriological examination of urine conducted on the bacteriological analyzer of blood cultures Bact/Alert 3D 60, bioMerieux Inc. USA did not reveal signs of bacteriuria in urine.
В лаборатории приемного отделения выполнен анализ мочи на лактоферрицин методом ИФА. Результат исследования: концентрация лактоферицина в образце мочи - 3 нг/мл (таблица).In the laboratory of the admission department, urine was analyzed for lactoferricin using the ELISA method. The result of the study: the concentration of lactoferricin in the urine sample is 3 ng/ml (table).
Полученные значения лактоферрицина мочи соответствуют клиническому диагнозу: МКБ.The obtained values of urinary lactoferricin correspond to the clinical diagnosis: ICD.
Пример 2. Больной Н. 45 лет, доставлен бригадой скорой помощи в приемное отделение ГБУЗ АО ГКБ №3 г. Астрахани ночью 27.01.21 г. через 12 часа от начала болевого приступа с направительным диагнозом «Острый аппендицит». Жалобы на боли постоянного характера по всему животу и в правой поясничной области, тошноту, учащенное и болезненное мочеиспускание. Была рвота; озноба не было. Аналогичный приступ болей 19 лет тому назад, других заболеваний не отмечает.Example 2. Patient H., 45, was delivered by an ambulance team to the emergency department of the State Budgetary Healthcare Institution of the Arkhangelsk Region City Clinical Hospital No. 3 of Astrakhan on the night of 27.01.21, 12 hours after the onset of a pain attack with a referral diagnosis of "Acute appendicitis". Complaints of constant pain throughout the abdomen and in the right lumbar region, nausea, frequent and painful urination. There was vomiting; there were no chills. A similar attack of pain 19 years ago, no other diseases noted.
Объективно: общее состояние при поступлении удовлетворительное. Температура тела 37,3°С, частота пульса 96 ударов в минуту, ритмичный, удовлетворительного наполнения, АД 140/90 мм рт. ст. Сердце и легкие без изменений. Язык влажный, слегка обложен.Objectively: the general condition upon admission is satisfactory. Body temperature is 37.3°C, pulse rate is 96 beats per minute, rhythmic, of satisfactory filling, blood pressure is 140/90 mm Hg. Heart and lungs are unchanged. Tongue is moist, slightly coated.
Анализ крови: лейкоциты 7,6×109/л, незначительный сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Уровень мочевины крови - 6,1 ммоль/л, креатинин - 82,4 ммоль/л, скорость клубочковой фильтрации (СКФ) расчетным методом - 62,3 мл/мин/1,73 м2.Blood test: leukocytes 7.6×10 9 /l, slight shift in the leukocyte formula to the left. Blood urea level is 6.1 mmol/l, creatinine is 82.4 mmol/l, glomerular filtration rate (GFR) by the calculated method is 62.3 ml/min/1.73 m 2 .
Общий анализ мочи: белок - 0,8 г/л, лейкоциты - до 30-40 в поле зрения, эритроциты - до 300 в поле зрения.General urine analysis: protein - 0.8 g/l, leukocytes - up to 30-40 in the field of view, erythrocytes - up to 300 in the field of view.
Посев мочи для бактериологического исследования взят 27.01.2021 г., результаты бактериологического исследования мочи получены 3 февраля 2021 г. - выявлен рост Е. coli.Urine culture for bacteriological examination was taken on 01/27/2021, the results of bacteriological examination of urine were received on February 3, 2021 - growth of E. coli was detected.
Анализ мочи на лактоферрицин методом ИФА - 15 нг/мл (таблица).Urine analysis for lactoferricin by ELISA method - 15 ng/ml (table).
Полученные значения лактоферицина мочи соответствуют клиническому диагнозу: Пиелонефрит.The obtained values of urinary lactoferrin correspond to the clinical diagnosis: Pyelonephritis.
Пример 3. Больная Ю., 64 года, доставлена в приемное отделение городской клинической больницы №3 г. Астрахани 7.09.2020 г. с жалобами на острые боли в правой подвздошной и правой поясничной области. Со слов больной в анамнезе хронический пиелонефрит свыше 10 лет.Example 3. Patient Yu., 64 years old, was admitted to the emergency department of City Clinical Hospital No. 3 in Astrakhan on September 7, 2020, complaining of acute pain in the right iliac and right lumbar regions. According to the patient, she has a history of chronic pyelonephritis for over 10 years.
Общий анализ крови: лейкоцитов - 14400, зозинофилов - 1%, палочкоядерных - 8%, сегментоядерных - 68%, лимфоцитов - 19%, моноцитов - 4%. Общий анализ мочи: белок - 0,3 г/л, лейкоцитов - до 30-40 в поле зрения, эритроцитов - 1-3 в поле зрения, гиалиновые цилиндры - 1-2 в поле зрения.Complete blood count: 14,400 leukocytes, 1% eosinophils, 8% band cells, 68% segmented cells, 19% lymphocytes, 4% monocytes. Complete urine analysis: protein - 0.3 g/l, 30-40 leukocytes per field of vision, 1-3 erythrocytes per field of vision, 1-2 hyaline casts per field of vision.
Бактериологическое исследование не обнаружило в моче признаков бактериурии, а анализ мочи на лактоферрицин методом ИФА выявил лактоферрицин в концентрации 8 нг/мл (таблица).Bacteriological examination did not reveal any signs of bacteriuria in the urine, and urine analysis for lactoferricin by ELISA revealed lactoferricin at a concentration of 8 ng/ml (table).
Данная концентрация лактоферрицина в моче заставляет предположить диагноз: пиелоневрит на фоне МКБ (обструктивный пиелонефрит).This concentration of lactoferricin in urine suggests a diagnosis of pyelonephritis against the background of urolithiasis (obstructive pyelonephritis).
Предлагаемым способом достигается упрощение и повышение точности дифференциальной диагностики МКБ от пиелонефрита, а именно:The proposed method simplifies and increases the accuracy of differential diagnostics of urolithiasis from pyelonephritis, namely:
- быстрота способа, достаточно только одного исследования, с затратой времени на исследование менее 1 часа;- the speed of the method, only one study is required, with the time spent on the study being less than 1 hour;
- техническая простота, незначительные трудозатраты (для практического исполнения способа достаточно 1 специалиста);- technical simplicity, low labor costs (for practical implementation of the method, 1 specialist is sufficient);
- экономичность (способ не требует эксклюзивного и дорогостоящего оборудовании и реактивов, вспомогательной аппаратуры и высококвалифицированного медперсонала);- cost-effectiveness (the method does not require exclusive and expensive equipment and reagents, auxiliary equipment and highly qualified medical personnel);
- доступность реактивов необходимых для практической реализации данного способа;- availability of reagents necessary for the practical implementation of this method;
- универсальность способа (возможность определения лактоферрицина в моче любым доступным способом);- universality of the method (the ability to determine lactoferricin in urine by any available method);
- неинвазивность способа (для анализа используется моча пациента)- non-invasiveness of the method (the patient's urine is used for analysis)
Предлагаемый способ может быть использован в ургентной клинической практике урологических и приемных отделений больниц любого уровня как дополнительный тест в случаях дифференциальной диагностики пиелонефрита и мочекаменной болезни.The proposed method can be used in urgent clinical practice of urological and emergency departments of hospitals of any level as an additional test in cases of differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis.
Claims (1)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2823997C1 true RU2823997C1 (en) | 2024-07-31 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU8189891A (en) * | 1990-08-08 | 1992-03-02 | Nauchno-Issledovatelsky Institut Klinicheskoi I Experimentalnoi Immunologii Ministerstva Zdravookhranenia Rsfsr (Nii Kei) | Methods for diagnosis of complex urolithiasis and prognosis of urolithiasis |
| RU2236176C1 (en) * | 2003-02-27 | 2004-09-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Method for diagnosing stages of acute pyelonephritis in children |
| RU2795322C1 (en) * | 2022-11-21 | 2023-05-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Method for obtaining monospecific antibodies to human lactoferricin |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU8189891A (en) * | 1990-08-08 | 1992-03-02 | Nauchno-Issledovatelsky Institut Klinicheskoi I Experimentalnoi Immunologii Ministerstva Zdravookhranenia Rsfsr (Nii Kei) | Methods for diagnosis of complex urolithiasis and prognosis of urolithiasis |
| RU2236176C1 (en) * | 2003-02-27 | 2004-09-20 | Новокузнецкий государственный институт усовершенствования врачей | Method for diagnosing stages of acute pyelonephritis in children |
| RU2795322C1 (en) * | 2022-11-21 | 2023-05-02 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Method for obtaining monospecific antibodies to human lactoferricin |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| СЕРЕБРЯКОВ А.А. и др. Лактоферрин и лактоферрицин в моче и фекалиях у больных с ургентной урологической и хирургической патологией. Современные проблемы науки и образования. 2021, 5, doi 10.17513/spno.31082. * |
| СЕРЕБРЯКОВ А.А. и др. Эффекты антимикробного пептида из лактоферрина в сыворотке крови и моче пациентов с почечной коликой при уролитиазе и пиелонефрите. Урология. 2023, 1, стр.28-33. MERRIKHI A. diagnostic value of lactoferrin in diagnosis of urinary tract infections in children. Journal of Isfahan Medical School. 2018, 36 (465), p.8-13. FATAH M.H. et al. Detection of urinary lactoferrin as an indicator of urinary tract infection in girls. Zanco J. Med. Sci. 2016, 20 (3), p.1485-1489. SPENCER J.D. et al. Expression and significance of the HIP/PAP and RegIIIγ antimicrobial peptides during mammalian urinary tract infection. PLoS One. 2015, 10(12): e0144024. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Garay et al. | A new test showing abnormal net Na+ and K+ fluxes in erythrocytes of essential hypertensive patients | |
| Boyle et al. | Serum uric acid levels in normal pregnancy with observations on the renal excretion of urate in pregnancy | |
| de Man et al. | Bacterial attachment as a predictor of renal abnormalities in boys with urinary tract infection | |
| Chen et al. | Comparative studies of asymptomatic proteinuria and hematuria | |
| RU2823997C1 (en) | Method for differential diagnosis of pyelonephritis and urolithiasis | |
| Saksouk et al. | Acute suppurative thyroiditis caused by Escherichia coli | |
| ES2352045T3 (en) | DIFFERENTIATION BETWEEN BACTERIAL AND VIVIC MENINGITIS. | |
| ES2903132T3 (en) | Delta-Like Ligand 1 for Diagnosis of Serious Infections | |
| RU2679629C1 (en) | Diagnostic method of an inflammatory process of urinary system in young children | |
| RU2823995C1 (en) | Diagnostic technique for bacterial abdominal surgical infection in appendicitis | |
| Corwin et al. | Special Report: The Clinical Significance of Eosinophiluria | |
| Khalifa et al. | Ascitic fluid lactoferrin as a diagnostic marker for spontaneous bacterial peritonitis | |
| RU2523413C1 (en) | DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR RHEUMATOID ARTHRITIS IF MUTATED CITRULLINATED VIMENTIN ANTIBODIES (Anti-MCV) ARE FOUND IN ORAL FLUID | |
| Keusch et al. | Role of opsonins in clinical response to granulocyte transfusion in granulocytopenic patients | |
| RU2498311C2 (en) | Method for assessing tuberculosis activity in children and adolescents | |
| Mohamed et al. | Ascitic Fluid Calprotectin as an Accurate Diagnostic Marker for Spontaneous Bacterial Peritonitis | |
| RU2402768C1 (en) | Method of diagnosing abacterial prostatitis by means of lymphocytes immunophenotyping | |
| WO2000037943A1 (en) | Diagnosis of sepsis using the lps-binding moiety of alkaline phosphatase | |
| RU2187818C2 (en) | Method for detecting the activity of pulmonary tuberculosis | |
| EP3431988B1 (en) | Method to determine the state of the humoral immune system in a patient | |
| RU2800821C1 (en) | Method for early diagnosis of sepsis using determination of absolute number of neutrophilic extracellular traps | |
| RU2127883C1 (en) | Method of an express-diagnosis of diphtherial infection | |
| RU2760837C1 (en) | Method for determining time remoteness of injury that caused posttraumatic hemarthrosis | |
| RU2614723C1 (en) | Method for early differential diagnostics of acute appendicitis and acute intestinal infection | |
| Luoma et al. | Saliva and plasma clearance of antipyrine as reflectors of liver function |