RU2821944C2 - Антагонисты grpr для обнаружения, диагностики и лечения grpr-позитивного онкологического заболевания - Google Patents
Антагонисты grpr для обнаружения, диагностики и лечения grpr-позитивного онкологического заболевания Download PDFInfo
- Publication number
- RU2821944C2 RU2821944C2 RU2019119378A RU2019119378A RU2821944C2 RU 2821944 C2 RU2821944 C2 RU 2821944C2 RU 2019119378 A RU2019119378 A RU 2019119378A RU 2019119378 A RU2019119378 A RU 2019119378A RU 2821944 C2 RU2821944 C2 RU 2821944C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- grpr
- cancer
- tumors
- peptide
- present
- Prior art date
Links
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 5
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 title claims abstract 4
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 title description 17
- 101150032569 Grpr gene Proteins 0.000 title 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 6
- 102100030671 Gastrin-releasing peptide receptor Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 101001010479 Homo sapiens Gastrin-releasing peptide receptor Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 54
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 7
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 claims description 3
- 208000017055 digestive system neuroendocrine neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000023965 endometrium neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000052 gastrinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 claims description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010051066 Gastrointestinal stromal tumour Diseases 0.000 claims description 2
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000015419 gastrin-producing neuroendocrine tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011243 gastrointestinal stromal tumor Diseases 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 abstract description 6
- OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N lutetium-177 Chemical group [177Lu] OHSVLFRHMCKCQY-NJFSPNSNSA-N 0.000 abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 108010073466 Bombesin Receptors Proteins 0.000 description 37
- 102000047481 Gastrin-releasing peptide receptors Human genes 0.000 description 36
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 28
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 24
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- 102100036519 Gastrin-releasing peptide Human genes 0.000 description 21
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 15
- DNDCVAGJPBKION-DOPDSADYSA-N bombesin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1NC2=CC=CC=C2C=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C(C)C)C1=CN=CN1 DNDCVAGJPBKION-DOPDSADYSA-N 0.000 description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- 108010051479 Bombesin Proteins 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 11
- 108090001053 Gastrin releasing peptide Proteins 0.000 description 10
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 10
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 10
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 9
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 9
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 9
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 9
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 9
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 8
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 6
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 6
- 238000011362 radionuclide therapy Methods 0.000 description 6
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 5
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 5
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 5
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 5
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 5
- QCSRNPBXYZCFIZ-QIFSQXIVSA-K 2-[4-[2-[[4-[[2-[2-[[(2R)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-1-(2,6-dimethylheptan-4-ylamino)-3-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-2-oxoethoxy]acetyl]amino]phenyl]methylamino]-2-oxoethyl]-7,10-bis(carboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetrazacyclododec-1-yl]acetate lutetium-177(3+) Chemical compound [177Lu+3].CC(C)CC(CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1cnc[nH]1)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](Cc1ccccc1)NC(=O)COCC(=O)Nc1ccc(CNC(=O)CN2CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC2)cc1)C(C)C QCSRNPBXYZCFIZ-QIFSQXIVSA-K 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 4
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 4
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 4
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 4
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KSSJBGNOJJETTC-UHFFFAOYSA-N COC1=C(C=CC=C1)N(C1=CC=2C3(C4=CC(=CC=C4C=2C=C1)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC(=CC=C1C=1C=CC(=CC=13)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC=C(C=C1)OC Chemical compound COC1=C(C=CC=C1)N(C1=CC=2C3(C4=CC(=CC=C4C=2C=C1)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC(=CC=C1C=1C=CC(=CC=13)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)N(C1=CC=C(C=C1)OC)C1=C(C=CC=C1)OC)C1=CC=C(C=C1)OC KSSJBGNOJJETTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 3
- 102100037283 Neuromedin-B receptor Human genes 0.000 description 3
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 3
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 201000011519 neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 3
- 239000002287 radioligand Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 3
- OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N (2r)-2-azaniumyl-2-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C([C@@](N)(C(O)=O)C)=CC=CC2=C1 OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 2
- FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N (2s)-2,3,3,3-tetrafluoro-2-(n-fluoroanilino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@](F)(C(F)(F)F)N(F)C1=CC=CC=C1 FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MDAXKAUIABOHTD-UHFFFAOYSA-N 1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane Chemical compound C1CNCCNCCCNCCNC1 MDAXKAUIABOHTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=CC=C1O WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 2-[4,7-bis(carboxymethyl)-1,4,7-triazonan-1-yl]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 JHALWMSZGCVVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BKQQPCDQZZTLSE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-naphthalen-1-ylpropanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CC=CC2=C1 BKQQPCDQZZTLSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UQTZMGFTRHFAAM-ZETCQYMHSA-N 3-iodo-L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(I)=C1 UQTZMGFTRHFAAM-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- BFWYZZPDZZGSLJ-UHFFFAOYSA-N 4-(aminomethyl)aniline Chemical compound NCC1=CC=C(N)C=C1 BFWYZZPDZZGSLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QEVGZEDELICMKH-UHFFFAOYSA-N Diglycolic acid Chemical compound OC(=O)COCC(O)=O QEVGZEDELICMKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000600779 Homo sapiens Neuromedin-B receptor Proteins 0.000 description 2
- JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N N(pros)-methyl-L-histidine Chemical compound CN1C=NC=C1C[C@H](N)C(O)=O JDHILDINMRGULE-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 NOTAGA Chemical compound 0.000 description 2
- 102100038819 Neuromedin-B Human genes 0.000 description 2
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 2
- 108050001286 Somatostatin Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000011096 Somatostatin receptor Human genes 0.000 description 2
- 229940121856 Somatostatin receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 2
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 150000007860 aryl ester derivatives Chemical class 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001576 beta-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 2
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 2
- XOYLJNJLGBYDTH-UHFFFAOYSA-M chlorogallium Chemical compound [Ga]Cl XOYLJNJLGBYDTH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 2
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 2
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 2
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- UPWPDUACHOATKO-UHFFFAOYSA-K gallium trichloride Chemical compound Cl[Ga](Cl)Cl UPWPDUACHOATKO-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 2
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- IGSFQSTYARRVAJ-UHFFFAOYSA-N n'-benzylmethanediamine Chemical compound NCNCC1=CC=CC=C1 IGSFQSTYARRVAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 description 2
- 231100000336 radiotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001690 radiotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 2
- 229910052702 rhenium Inorganic materials 0.000 description 2
- WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N rhenium atom Chemical compound [Re] WUAPFZMCVAUBPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 2
- 235000010378 sodium ascorbate Nutrition 0.000 description 2
- PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M sodium ascorbate Substances [Na+].OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RKJRWTFHSA-M 0.000 description 2
- 229960005055 sodium ascorbate Drugs 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M sodium-L-ascorbate Chemical compound [Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1[O-] PPASLZSBLFJQEF-RXSVEWSESA-M 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 2
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028016 temperature homeostasis Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 description 1
- ONJXCGCIKIYAPL-MLRSDOHDSA-K 2-[2-[[2-[[(2r)-1-[[(4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-16-benzyl-4-[[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]carbamoyl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicos-19-yl]amino]-1-oxo-3-phe Chemical compound [111In+3].C([C@H](C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)NC(=O)CN(CCN(CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O)CC([O-])=O)CC([O-])=O)C1=CC=CC=C1 ONJXCGCIKIYAPL-MLRSDOHDSA-K 0.000 description 1
- 241000269339 Bombina bombina Species 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- 229910021617 Indium monochloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 description 1
- 102000016978 Orphan receptors Human genes 0.000 description 1
- 108070000031 Orphan receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000270940 Rana temporaria Species 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000008430 aromatic amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000008378 aryl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 125000000031 ethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])N([H])[*] 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000005176 gastrointestinal motility Effects 0.000 description 1
- 229960005219 gentisic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- APHGZSBLRQFRCA-UHFFFAOYSA-M indium(1+);chloride Chemical compound [In]Cl APHGZSBLRQFRCA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PSCMQHVBLHHWTO-UHFFFAOYSA-K indium(iii) chloride Chemical compound Cl[In](Cl)Cl PSCMQHVBLHHWTO-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229950010610 lutetium chloride Drugs 0.000 description 1
- AEDROEGYZIARPU-UHFFFAOYSA-K lutetium(iii) chloride Chemical compound Cl[Lu](Cl)Cl AEDROEGYZIARPU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 1
- 229940127059 octreoscan Drugs 0.000 description 1
- 229960002700 octreotide Drugs 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 108700023050 pentetreotide Proteins 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000005258 radioactive decay Effects 0.000 description 1
- 238000003608 radiolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011361 targeted radionuclide therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000036326 tumor accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
Abstract
Настоящее изобретение относится к области диагностики и лечения онкологического заболевания, а именно к соединению, имеющему структуру
,
где M представляет собой 177Lu или 68Ga. Изобретение также относится к лекарственному средству и терапевтической композиции на основе указанного соединения. Изобретение позволяет обеспечить высокую степень захвата и удерживания диагностической и терапевтической радиоактивной метки селективно по отношению как к первичному, так и метастатическому GRPR+ онкологическому заболеванию. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
В настоящей заявке заявляется приоритет предварительной заявки на патент США № 61/705513, поданной 25 сентября 2012, которая включена в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Было показано, что раковые клетки экспрессируют разнообразные специфические биомолекулы, такие как пептидные рецепторы, которые могут служить в качестве участков распознавания для широкого круга циркулирующих векторов, например, пептидных лигандов. В том случае, когда экспрессия мишени-рецептора выше на злокачественных клетках, чем в окружающей здоровой ткани, возникает возможность использовать взаимодействие между указанными двумя молекулярными структурами. Для диагностической визуализации или нацеленных терапевтических применений природные пептидные лиганды могут быть модифицированы таким образом, чтобы стабильно связывать диагностический или терапевтический радионуклид, например, атом радиоактивного металла или атом радиоактивного галогена.
Во многих случаях бифункциональный хелатообразующий агент ковалентно присоединен посредством карбоксильной группы к N-концевой аминогруппе пептидного лиганда с образованием пептидной связи. С целью увеличения биологической устойчивости, гидрофильности, аффинности связывания рецептора и/или эффективности интернализации предпринимались попытки дальнейшей модификации нативных лигандов рецепторов, например, путем замены ключевых аминокислот в пептидной цепи. В качестве альтернативы, включение подходящих разделительных групп между хелатообразующим агентом и участком распознавания пептидного рецептора или гетеро/гомопептидная мультимеризация в равной степени могут привести к улучшению многих биологических параметров, которые, в конечном счете, улучшают в целом фармакокинетику и кумуляцию мишени радиоактивного зонда.
Полученный пептид-хелатный конъюгат после нанесения метки с помощью диагностических или терапевтических радионуклидов (радиопептидов) вводят пациенту. Радиопептид избирательно накапливается на раковых участках за счет специфического взаимодействия с молекулой-мишенью, в частности, с родственным пептидным рецептором, который в высокой степени экспрессируется на опухоли. В случае диагностического радионуклида опухоли и метастазы затем локализуются путем визуализации участка (участков), где происходит радиоактивный распад, с помощью внешнего устройства формирования изображения. Когда в пептид-хелатный конъюгат внесена метка терапевтического радионуклида, радиотоксичная нагрузка доставляется специфично в первичную опухоль и ее метастазы. Терапевтический радионуклид затем распадается на участках злокачественных новообразований, высвобождая корпускулярную энергию, что приводит к уничтожению опухолевых очагов или сокращению их роста.
Указанную стратегию элегантно использовали для соматостатина и его рецепторов. Последние в высокой степени экспрессируются в различных опухолях человека, в особенности в нейроэндокринных опухолях (NET). За внедрением в клиническую практику OctreoScan® ([111In-DTPA]октреотида), позволившего провести успешную диагностическую визуализацию NET, вскоре последовали многие новые улучшенные аналоги соматостатина, содержащие метку широкого круга пригодных для использования в медицине радиоактивных металлов, которые могут применяться не только для обычной визуализации с помощью гамма-камеры, но и для PET и, самое главное, для радионуклидной терапии. Проводимые клинические испытания показали терапевтическую эффективность указанных новых радиопептидов.
Пептидные рецепторы и их лиганды являются привлекательными молекулярными инструментами в диагностике и лечении онкологических заболеваний. Например, высокий уровень экспрессии рецепторов гастриновысвобождающего пептида (GRPR) зарегистрирован в нескольких часто встречающихся опухолях человека, таких как рак предстательной железы, рак молочной железы и рак легких. Как следствие, в последнее время повысилась значимость GRPR в качестве предпочтительных молекулярных мишеней для содержащих радиоактивную метку бомбезиноподобных пептидов с целью повышения диагностического и терапевтического арсенала ядерной онкологии.
Бомбезин (BBN) представляет собой тетрадекапептид, первоначально выделенный из кожи европейской лягушки Bombina bombina. Бомбезин и родственные ему пептиды влияют на терморегуляцию и усвоение пищи после связывания со специфическими рецепторами в организме людей. Указанные рецепторы включают три подтипа, встречающиеся у млекопитающих, а именно, рецептор нейромедина B (NMBR или BB1R), обладающий высоким сродством к NMB, GRPR (или BB2R), обладающий высоким сродством к GRP, и BB3R, представляющий собой рецептор-сироту, лиганд для которого пока еще не определен. BBN земноводных с высоким сродством связывается с подтипами NMBR и GRPR. NMB и GRP являются аналогами млекопитающих для BBN земноводных, и все они имеют родственную структуру.
Большинство содержащих радиоактивную метку BBN-подобных пептидов, разработанных для молекулярной визуализации и радионуклидной терапии опухолей человека, основаны на природном BBN или на его С-концевом октапептидном фрагменте, который все еще в состоянии связывать GRPR. Указанные аналоги, модифицированные, как описано выше, как правило, проявляют агонистические свойства и после связывания с GRPR интернализуются во внутриклеточной области злокачественных клеток. Это свойство приводит к высокому аккумулированию радиоактивной метки в GRPR+ опухолевых очагах и тем самым повышает либо диагностическую чувствительность, либо терапевтическую эффективность.
К сожалению, BBN-подобные пептиды являются действенными агонистами GRPR и вызывают нежелательные эффекты, связанные с желудочно-кишечной подвижностью и терморегуляцией, когда их внутривенно (iv) вводят человеку даже в небольших количествах. Кроме того, BBN-подобные пептиды обладают митогенными свойствами. Вышеуказанные свойства ограничивают тщательную клиническую валидацию и/или, в конечном счете, коммерческое использование нескольких перспективных агонистов на основе содержащих радиоактивную метку бомбезинов. Сказанное особенно актуально в случае целенаправленной радионуклидной терапии, где пациентам необходимо назначать внутривенно большие количества пептидов.
В отличие от содержащих радиоактивную метку агонистов BBN, содержащие радиоактивную метку агонисты соматостатина, которые одинаково хорошо интернализуются в злокачественных клетках, экспрессирующих рецептор соматостатина, не вызывают после внутривенной инъекции нежелательные физиологические эффекты в организме человека. Этот факт способствовал расширенной и систематической клинической валидации нескольких перспективных содержащих радиоактивную метку соматостатинов даже в области радионуклидной терапии опухолей.
Известно радиофармацевтическое средство ([99mTc]-демобезин 1, [99mTc-N4']-DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-NHEt), и оно используется для мышей, имеющих ксенотрансплантаты рака предстательной железы человека PC-3, где [99mTc]-демобезин 1 продемонстрировал выдающиеся фармакокинетические свойства по сравнению с аналогичными аффинными агонистами на основе бомбезина, такими как, например, [99mTc]-демобезин 3-6. Помимо его значительно более высокого накопления в опухоли, [99mTc]-демобезин 1 очень быстро выводится из организма мышей и поджелудочной железы, в высокой степени GRPR-позитивного органа.
Хотя первые исследования на ограниченном количестве больных с раком предстательной железы подтвердили отличную переносимость радиофармацевтического препарата, они показали неоптимальный фармакокинетический профиль для людей, который препятствует дальнейшему расширению клинического применения данного препарата в качестве диагностического инструмента визуализации. В частности, [99mTc]-демобезин 1, несмотря на его быстрое выведение из организма и из поджелудочной железы и на его довольно высокую стабильность в условиях in vivo, демонстрирует недостаточное удерживание в злокачественных новообразованиях у человека по сравнению с содержащими радиоактивную метку BBN-подобными агонистами. Кроме того, [99mTc]-демобезин 1 был разработан для диагностической визуализации с использованием обычной гамма-камеры или однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (SPECT) и непригоден для позитронно-эмиссионной томографии (PET) или приложений радионуклидной терапии. Хотя внесение метки с помощью применяемого для PET радионуклида 94mTc возможно при использовании ациклической N4-системы, применение этого радионуклида в медицине ограничено как вследствие неоптимальных ядерных характеристик, так и трудностей с его получением. С другой стороны, терапевтические возможности ограничиваются 186/188Re, поскольку N4-хелатообразующий агент не может стабильно связывать большинство двух- и трехвалентных радиоактивных металлов, используемых в ядерной медицине.
Таким образом, объектом настоящего изобретения является высокая степень захвата и удерживания диагностической и терапевтической радиоактивной метки селективно по отношению как к первичному, так и метастатическому GRPR+ онкологическому заболеванию.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к зондам для использования с целью обнаружения, визуализации, диагностики, нацеливания, лечения и т.д. онкологических заболеваний, экспрессирующих рецептор гастриновысвобождающего пептида (GRPR). Подобные зонды могут представлять собой молекулы, конъюгированные с детектируемыми метками, которые, предпочтительно, представляют собой химические соединения, пригодные для обнаружения путем гамма-визуализации и SPECT или с помощью позитронно-эмиссионной томографии (PET), или магнитно-резонансной томографии (MRI), или флуоресцентной спектроскопии, или оптических методов визуализации. Подобные зонды также могут представлять собой молекулы, конъюгированные с противораковыми препаратами или фрагментами, включающими терапевтический радионуклид, и способны доставить цитотоксическую нагрузку, такую как цитотоксическое лекарственное средство или терапевтический радионуклид, в участок (участки) болезни.
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения касаются антагониста GRPR общей формулы:
MC-S-P,
где:
- по меньшей мере, один (радиоактивный) атом металла (М) и хелатирующий агент (С), который устойчиво связывает M; в качестве альтернативы, MC может обозначать Tyr- или простетическую группу, несущую (радиоактивный) атом галогена.
S обозначает необязательную разделительную группу, расположенную между N-концом Р и С и присоединенную к ним ковалентными связями, которая может быть выбрана таким образом, чтобы обеспечить условия для введения (радиоактивного) атома галогена;
P обозначает антагонист пептидного рецептора GRP общей формулы:
Xaa1-Xaa2-Xaa3-Хаа4-Xaa5-Хаа6-Хаа7-Z,
Xaa1 отсутствует или выбран из группы, включающей аминокислотные остатки Asn, Thr, Phe, 3-(2-тиенил)аланин (Thi), 4-хлорфенилаланин (Cpa), α-нафтилаланин (α-Nal), β-нафтилаланин (β-Nal), 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновую кислоту (Tpi), Tyr, 3-иод-тирозин (o-I-Tyr), Trp, пентафторфенилаланин (5-F-Phe) (все в виде L- или D-изомеров);
Xaa2 обозначает Gln, Asn, His;
Хаа3 обозначает Trp, 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновую кислоту (Tpi);
Xaa4 обозначает Ala, Ser, Val;
Xaa5 обозначает Val, Ser, Thr;
Хаа6 обозначает Gly, саркозин (Sar), D-Ala, β-Ala;
Хаа7 обозначает His, (3-метил)гистидин (3-Me)His;
Z выбран из -NHOH, -NHNH2, -NH-алкила, -N(алкил)2 или -O-алкила, или
,
где Х представляет собой NH (амид) или О (сложный эфир), а R1 и R2 могут быть одинаковыми или различными и выбраны из протона, (замещенного) алкила, (замещенного) алкилового эфира, арила, арилового эфира или алкил-, галоген-, гидроксил- или гидроксиалкилзамещенной ароматической группы.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения агонист GRPR по настоящему изобретению представляет собой вышеописанное соединение, где Z, предпочтительно, выбран из одной из следующих формул, где Х обозначает NH или О:
Кроме того, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения агонист GRPR представляет собой вышеуказанное соединение, где R1 такой же, как и R2.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где Р выбран из группы, включающей:
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:1);
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-O-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:2);
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH(CH2-CH2-CH2-CH3)2 (SEQ ID NO:3);
DTyr-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:4).
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где радионуклид, металл М или радиоактивный атом галогена, пригоден для диагностического или терапевтического применения, в частности для визуализации или радионуклидной терапии, и выбран из группы, включающей 111In, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 69Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 169Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 177mSn, 213Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, галогены: 123I, 124I, 125I, 18F и др.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где хелатирующим металлы агентом С является хелатирующий металлы агент для двух- и трехвалентных металлов.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где хелатирующим металлы агентом для двух- и трехвалентных металлов являются хелатирующие металлы агенты на основе DTPA-, NOTA-, DOTA- или ТЕТА или их моно- или бифункциональные производные.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где хелатирующий металлы агент С выбран из группы, которая включает:
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где хелатирующий металлы агент С представляет собой хелатирующий металлы агент для технеция или рения.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где С выбран из ациклических тетрааминовых, цикламовых, PnAO- или тетрадентатных хелатообразующих агентов, содержащих наборы донорных атомов P2S2-, N2S2- и N3S-, и их моно- и бифункциональных производных или из хелатообразующих агентов на основе HYNIC/солигандов, или би- и тридентатных хелатообразующих агентов, формирующих металлоорганические комплексы по трикарбонильному способу.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где C выбран из группы, которая включает:
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где разделительная группа S расположена между Р и С, связана с ними ковалентными связями и может быть выбрана таким образом, чтобы обеспечить возможность для осуществления (радио)иодирования.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, где S выбрана из группы, которая включает:
a) арил, содержащий остатки формул:
где PABA обозначает п-аминобензойную кислоту, PABZA обозначает п-аминобензиламин, PDA обозначает фенилендиамин, а PAMBZA обозначает (аминометил)бензиламин;
b) дикарбоновые кислоты, ω-аминокарбоновые кислоты, α,ω-диаминокарбоновые кислоты или диамины формулы:
где DIG обозначает дигликолевую кислоту, а IDA обозначает иминодиуксусную кислоту;
c) PEG разделительные группы различной длиной цепи, в частности, PEG разделительные группы, выбранные из формул:
,
c) α- и β-аминокислоты, одиночные или в гомологичных цепях с различной длиной цепи или в гетерологичных цепях с различной длиной цепи, в частности:
GRP (1-18), GRP (14-18), GRP (13-18), BBN (1-5) или [Tyr4]-BBN(1-5); или
d) комбинации a, b и c.
В некоторых из любых вышеуказанных вариантов его осуществления настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR, выбранным из группы, которая включает соединения со следующими формулами:
где МС и Р имеют указанные ранее значения.
В некоторых вариантах его осуществления настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR, которые описаны в любом из указанных выше вариантов осуществления настоящего изобретения, для применения в качестве лекарственного средства.
В некоторых вариантах его осуществления настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR, которые описаны в любом из указанных выше вариантов осуществления настоящего изобретения, для применения в качестве диагностического или терапевтического агента с целью обнаружения, диагностики или лечения первичного и/или метастатического GRPR+ онкологического заболевания.
В некоторых вариантах его осуществления настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR, которые описаны в любом из указанных выше вариантов осуществления настоящего изобретения, где онкологическое заболевание выбрано из рака предстательной железы, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, карциномы толстого кишечника, желудочно-кишечных стромальных опухолей, гастриномы, почечно-клеточной карциномы, гастроэнтеропанкреатических нейроэндокринных опухолей, опухолей сквамозных клеток пищевода, нейробластомы, карциномы сквамозных клеток головы и шеи, а также из опухолей яичников, эндометрия и поджелудочной железы, проявляющих связанную с новообразованиями сосудистую систему, и является GRPR+ онкологическим заболеванием.
В некоторых вариантах его осуществления настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR, которые описаны в любом из указанных выше вариантов осуществления настоящего изобретения, где онкологическим заболеванием является онкологическое заболевание человека.
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения относятся к терапевтической композиции, включающей антагонист GRPR, который описан в любом из указанных выше вариантов осуществления настоящего изобретения, и терапевтически приемлемый наполнитель.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фигура 1А. Показывает биораспределение [111In]-NeoBOMB-1 (111In-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6, His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN(6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+).
Фигура 1B. Показывает радиохроматограмму крови мышей ex vivo через 5 мин после инъекции [111In]-NeoBOMB-1.
Фигура 1С. Показывает биораспределение [177Lu]-NeoBOMB-1 (177Lu-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6, His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+).
Фигура 1D. Показывает радиохроматограмму крови мышей ex vivo через 5 мин после инъекции [177Lu]-NeoBOMB-1.
Фигура 1E. Показывает биораспределение [67Ga]-NeoBOMB-1 (67Ga-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6, His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+).
Фигура 1F. Показывает радиохроматограмму крови мышей ex vivo через 5 мин после инъекции [67Ga]NeoBOMB-1.
Фигура 2А. Показывает биораспределение [99mTc]-NeoBOMB-2 (99mTc-N4-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6, His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+).
Фигура 2В. Показывает радиохроматограмму крови мышей ex vivo через 5 мин после введения [99mTc]-NeoBOMB-2.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Исследование, которое привело к настоящему изобретению, неожиданно выявило альтернативный маршрут для эффективного in vivo нацеливания на соматостатин-позитивные опухоли, а именно, использование антагонистов рецептора соматостатина. Самое удивительное заключается в том, что, несмотря на их неспособность к интернализации, подобные аналоги демонстрируют гораздо более сильный захват и удерживание в ксенотрансплантатах животных и очень быстрое вымывание из фоновых тканей.
Предварительным объяснением более сильного захвата опухолью антагонистов рецепторов соматостатина является их способность связываться с существенно большим количеством от общей популяции рецепторов соматостатина, доступных на клеточной мембране раковых клеток, по сравнению с их интернализующимися агонистическими аналогами.
В соответствии с настоящим изобретением, антагонисты GRPR химически модифицированы с тем, чтобы добиться для них устойчивого связывания диагностического и/или терапевтического радионуклида. После введения человеку или животному-субъекту они служат в качестве молекулярного носителя для передачи радиодиагностического сигнала и/или радиотоксичной нагрузки к первичной GRPR+-опухоли и ее метастазам.
В частности, в соответствии с изобретением было неожиданно обнаружено, что введение некоторых новых радиолигандов на основе антагониста GRPR, в отличие от [99mTc]-демобезина 1, приводит к беспрецедентно высокому и специфичному захвату и удивительно длительному удерживанию ксенотрансплантатов GRPR+ человека у мышей. Кроме того, указанные агенты показали значительно более высокую метаболическую стабильность после инъекции мышам по сравнению с [99mTc]-демобезином 1.
Антагонисты GRPR по настоящему изобретению имеют важные структурные различия, по сравнению с исходным фрагментом [99mTc]-демобезина 1. Во-первых, введение в них метки с помощью широкого круга двух- и трехвалентных радиоактивных металлов, а также с 99mTc и 186/188Re стало возможным благодаря связыванию подходящими бифункциональными хелатообразующими агентами, имеющимися на их N-конце в дополнение к родственной тетраамину структуре. Таким образом, рентгенодиагностическая визуализация возможна при использовании SPECT и PET с источниками гамма-излучения и позитронов, хотя введение метки бета-, Оже- и альфа-излучателей также осуществимо, что открывает возможности для терапевтических применений. Кроме того, их метаболическая стабильность и фармакокинетический профиль, в особенности с точки зрения удерживания опухолью, значительно улучшились, как показывают результаты длительного доклинического изучения биораспределения для самок SCID мышей, имеющих ксенотрансплантаты PC-3 человека.
Более конкретно, структура новых аналогов включает следующие части:
a) Хелатообразующий агент присоединен к N-концу; им может быть любой из ациклических или циклических тетрааминов, HYNIC, N3S-хелатообразующие агенты и их производные, линейные или циклические полиамины и полиаминополикарбоксилаты, такие как DTPA, EDTA, DOTA, NOTA, NOTAGA, TETA и их производные, и др. Кроме того, в указанную позицию может быть введена подходящая группа, например, простетическая группа или Tyr- с целью введения радиоактивного атома галогена.
b) Радионуклиды; ими могут быть i) источник гамма-излучения, такой как 99mTc, 111In, 67Ga, 131I, 125I и др., который пригоден для визуализации с помощью обычной гамма-камеры, SPECT или гибридной системы SPECT/CT или SPECT/MRI; ii) источник позитронов, такой как 68Ga, 66Ga, 64Cu, 86Y, 44Sc, 124I, 18F и др., который подходит для визуализации с помощью PET или гибридной системы PET/CT или PET/MRI, или iii) источник бета-, Оже- или альфа-излучателей, такой как, 186Re, 188Re, 90Y, 177Lu, 111In, 67Cu, 212Bi, 175Yb, 47Sc, 131I, 125I и т.д., который подходит для радионуклидной терапии.
c) Промежуточная группа между хелатообразующим и пептидным фрагментом, которая может отличаться по длине, типу и липофильности и может включать PEGx (х=0-20), природные и не встречающиеся в природе аминокислоты, сахара, алкиламиновые остатки или их комбинации.
d) Пептидная цепь, в которой проведена замена ключевых аминокислот с помощью D-аминокислот, не встречающихся в природе аминокислот и других подходящие остатков.
e) С-конец, где отсутствуют оба Leu13 и Met14-NH2 в нативной последовательности BBN. Концевой His12 присутствует в амидной или сложноэфирной форме, при этом амиды или сложные эфиры могут быть представлены несколькими моно- и диалкиламидами, ароматическими амидами или смешанными алкил-арильными амидами или алкиловыми и/или ариловыми сложными эфирами.
Таким образом, настоящее изобретение относится к антагонистам GRPR общей формулы
MC-S-P,
где:
MC обозначает хелатирующий металлы агент, который включает:
- по меньшей мере, один (радиоактивный) атом металла (М) и хелатирующий агент (С), который устойчиво связывает M; в качестве альтернативы, MC может обозначать Tyr- или простетическую группу, несущую (радиоактивный) атом галогена;
S обозначает необязательную разделительную группу, расположенную между N-концом Р и С и присоединенную к ним ковалентными связями, которая может быть выбрана таким образом, чтобы обеспечить условия для введения (радиоактивного) атома галогена;
P обозначает антагонист пептидного рецептора GRP общей формулы:
Xaa1-Xaa2-Xaa3-Хаа4-Xaa5-Хаа6-Хаа7-Z,
где:
Xaa1 отсутствует или выбран из группы, включающей аминокислотные остатки Asn, Thr, Phe, 3-(2-тиенил)аланин (Thi), 4-хлорфенилаланин (Cpa), α-нафтилаланин (α-Nal), β-нафтилаланин (β-Nal), 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновую кислоту (Tpi), Tyr, 3-иод-тирозин (o-I-Tyr), Trp, пентафторфенилаланин (5-F-Phe) (все в виде L- или D-изомеров);
Xaa2 обозначает Gln, Asn, His;
Хаа3 обозначает Trp, 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновую кислоту (Tpi);
Xaa4 обозначает Ala, Ser, Val;
Xaa5 обозначает Val, Ser, Thr;
Хаа6 обозначает Gly, саркозин (Sar), D-Ala, β-Ala;
Хаа7 обозначает His, (3-метил)гистидин (3-Me)His;
Z выбран из -NHOH, -NHNH2, -NH-алкила, -N(алкил)2 или -O-алкила, или
,
где Х представляет собой NH (амид) или О (сложный эфир), а R1 и R2 одинаковы или различны и выбраны из протона, (замещенного) алкила, (замещенного) алкилового эфира, арила, арилового эфира или алкил-, галоген-, гидроксил- или гидроксиалкилзамещенной ароматической группы.
Z, предпочтительно, выбран из одной из следующих формул, где Х обозначает NH или О:
Предпочтительно, R1 такой же, как R2.
В антагонистах GRPR по настоящему изобретению, предпочтительно, Р выбран из группы, включающей:
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:1);
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-O-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:2);
DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH(CH2-CH2-CH2-CH3)2 (SEQ ID NO:3);
DTyr-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2 (SEQ ID NO:4).
Радионуклид, металл М или радиоактивный атом галогена, пригоден для диагностического или терапевтического применения, в частности для визуализации или радионуклидной терапии, и, преимущественно, выбран из группы, включающей 111In, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 69Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 169Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 177mSn, 213Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, 123I, 124I, 125I, 18F и др.
Хелатирующий металлы агент С, преимущественно, представляет собой хелатирующий металлы агент для двух- и трехвалентных металлов и, в частности, является хелатирующим металлы агентом на основе DTPA-, NOTA-, DOTA- или ТЕТА или на основе их моно- или бифункционального производного.
Хелатирующий металлы агент С, преимущественно, выбран из группы, которая включает:
В том случае, когда хелатирующий металлы агент С представляет собой хелатирующий металлы агент для технеция или рения, он, преимущественно, выбран из ациклических тетрааминовых, цикламовых, PnAO- или тетрадентатных хелатообразующих агентов, содержащих наборы донорных атомов P2S2-, N2S2- и N3S-, и их моно- и бифункциональных производных или из хелатообразующих агентов на основе HYNIC/солигандов, или би- и тридентатных хелатообразующих агентов, формирующих металлоорганические комплексы по трикарбонильному способу.
Подходящими примерами C являются:
Разделительная группа S расположена между Р и С, связана с ними ковалентными связями и может быть выбрана таким образом, чтобы обеспечить возможность для осуществления (радио)иодирования. Разделительная группа, преимущественно, выбрана из группы, которая включает:
a) арил, содержащий остатки формул:
,
где PABA обозначает п-аминобензойную кислоту, PABZA обозначает п-аминобензиламин, PDA обозначает фенилендиамин, а PAMBZA обозначает (аминометил)бензиламин;
b) дикарбоновые кислоты, ω-аминокарбоновые кислоты, α,ω-диаминокарбоновые кислоты или диамины формулы:
где DIG обозначает дигликолевую кислоту, а IDA обозначает иминодиуксусную кислоту;
c) PEG разделительные группы различной длиной цепи, в частности, PEG разделительные группы, выбранные из формул:
d) α- и β-аминокислоты, одиночные или в гомологичных цепях с различной длиной цепи или в гетерологичных цепях с различной длиной цепи, в частности:
GRP (1-18), GRP (14-18), GRP (13-18), BBN (1-5) или [Tyr4]-BBN(1-5); или
e) комбинации a, b и c.
Антагонисты GRPR по настоящему изобретению, преимущественно, выбраны из группы, которая включает соединения со следующими формулами:
где МС и Р имеют указанные ранее значения.
Следует понимать, что конкретные химические структуры, описанные здесь, являются иллюстративными примерами различных вариантов осуществления настоящего изобретения и что антагонисты GRPR общей формулы: MC-S-P не ограничиваются приведенными примерами структур.
Настоящее изобретение также относится к терапевтической композиции, включающей приведенный в формуле изобретения антагонист GRPR и терапевтически приемлемый инертный наполнитель.
Настоящее изобретение также относится к приведенному в формуле изобретения антагонисту GRPR для использования в качестве лекарственного средства. Лекарственное средство, предпочтительно, представляет собой диагностический или терапевтический агент для диагностики или лечения первичных и/или метастатических GRPR+ онкологических заболеваний, таких как, среди прочих, рак предстательной железы, рак молочной железы, мелкоклеточный рак легкого, карцинома толстого кишечника, желудочно-кишечные стромальные опухоли, гастринома, почечно-клеточные карциномы, гастроэнтеропанкреатические нейроэндокринные опухоли, опухоли сквамозных клеток пищевода, нейробластомы, карциномы сквамозных клеток головы и шеи, а также сосудистая система опухолей яичников, эндометрия и поджелудочной железы.
Настоящее изобретение дополнительно иллюстрируется приведенными ниже примерами, которые не следует рассматривать как каким-либо образом ограничивающие настоящее изобретение.
ПРИМЕР
ВВЕДЕНИЕ
Соединения по настоящему изобретению готовят и испытывают, как описано ниже. Следующие раскрытые варианты осуществления настоящего изобретения являются просто характерными примерами осуществления изобретения, которые могут быть воплощены в различных формах. Таким образом, конкретные структурные, функциональные и процедурные детали, раскрытые в следующих примерах, не следует рассматривать как ограничивающие настоящее изобретение.
СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ
Введение радиоактивной метки и контроль качества
Введение метки
111
In
Хлорид индия (In-111) в 50 мМ растворе HCl приобретают у компании Mallinckrodt Medical B.V., Петтен, Нидерланды, с концентрацией активности 10-20 мКи/мл. В общем случае в конъюгаты DOTA-пептид по настоящему изобретению вносят радиоактивную метку индия-111 с удельной активностью 0,1-0,2 мКи In-111/нмоль конъюгата DOTA-пептид. Вкратце, 3-15 нмоль конъюгата DOTA-пептид, растворенного в воде, смешивают с 2,5-12,5 мкл 1,0 М буферного раствора ацетата натрия с рН 4,6, 1-5 мкл 0,1 М раствора аскорбата натрия в воде и 30-150 мкл раствора 111InCl3 (0,3-3,0 мКи). Реакционную смесь для введения радиоактивной метки инкубируют на бане с кипящей водой в течение 20-30 мин. Для контроля качества аликвоту 2 мкл раствора для введения радиоактивной метки гасят с помощью 28 мкл ацетатного буферного раствора Na2-EDTA (5 мМ, рН 4,6). После успешного внесения радиоактивной метки (более 95% связанной пептидом радиоактивности) к раствору для введения радиоактивной метки добавляют Na2-EDTA (0,1 М, рН 4,6) до конечной концентрации 1 мМ.
Введение метки
67
Ga
Хлорид галлия (Ga-67) получают либо в разбавленном растворе НСl с концентрацией активности 498-743 мКи/мл от компании Nordion, Wesbrook Mall, Ванкувер, Канада, либо с концентрацией активности 80 мКи/мл от компании Mallinckrodt Medical B.V., Петтен, Нидерланды.
В общем случае в конъюгаты DOTA-пептид по настоящему изобретению вносят радиоактивную метку галия-67 с удельной активностью 0,1-0,2 мКи Ga-67/нмоль конъюгата DOTA-пептид. Вкратце, 3-15 нмоль конъюгата DOTA-пептид, растворенного в воде, смешивают с 50-125 мкл 1,0 М буферного раствора ацетата натрия с рН 4,0 и 5-15 мкл раствора 67GaCl3 (0,5-3,0 мКи). Реакционную смесь для введения радиоактивной метки инкубируют на бане с кипящей водой в течение 30 мин. Аликвоту 2 мкл раствора для введения радиоактивной метки, которую используют для контроля качества методом ВЭЖХ, гасят с помощью 28 мкл ацетатного буферного раствора Na2-EDTA (5 мМ, рН 4,0). После успешного внесения радиоактивной метки (более 95% связанной пептидом радиоактивности) к раствору для введения радиоактивной метки добавляют Na2-EDTA (0,1 М, рН 4,0) до конечной концентрации 1 мМ.
Введение метки
177
Lu
Хлорид лютеция (Lu-177) в 50 мМ растворе НСl приобретают у компании IDB Radiopharmacy, Нидерланды с концентрацией активности 100 мКи/мл.
В общем случае в конъюгат DOTA-пептид по настоящему изобретению вводят радиоактивную метку лютеция-177 с удельной активностью до 0,5 мКи Lu-177/нмоль конъюгата DOTA-пептид. Вкратце, 3-15 нмоль конъюгата DOTA-пептид, растворенного в воде, смешивают с 4-16 мкл 1,0 М буфера ацетата натрия с рН 4,6 и 15-75 мкл раствора 67GaCl3 (1,5-7,5 мКи). Радиолиз сводят к минимуму путем добавления 5 мкл гентизиновой кислоты (80 мМ), растворенной в 0,2 М растворе аскорбата натрия. Реакционную смесь инкубируют на бане с кипящей водой в течение 30 мин. Аликвоту 2 мкл раствора для введения радиоактивной метки, которую используют для контроля качества методом ВЭЖХ, гасят с помощью 28 мкл ацетатного буферного раствора Na2-EDTA (5 мМ, рН 4,6). После успешного внесения радиоактивной метки (более 95% связанной пептидом радиоактивности) к раствору для введения радиоактивной метки добавляют Na2-EDTA (0,1 М, рН 4,6) до конечной концентрации 1 мМ.
Введение метки
99
m
Tc
Конденсированные с тетраамином пептиды растворяют в смеси 50 мМ раствора уксусной кислоты/этанол 8/2 об/об до конечной концентрации 1 мМ пептида. Каждый базовый раствор в виде аликвот по 50 мкл размещают в пробирки Эппендорфа и хранят при температуре -20°С. Внесение метки осуществляют в склянке Эппендорфа, в которую последовательно добавляют следующие растворы: i) 0,5 М фосфатный буфер с рН 11,5 (50 мкл), ii) 0,1 М раствор цитрата натрия (5 мкл), iii) экстракт генератора [99mTc]-NaTcО4 (415 мл, 10-20 мКи), iv) маточный раствор конъюгата пептида (15 мкл, 15 нмоль) и v) свежеприготовленный раствор SnCl2 в этаноле (30 мкг, 15 мкл). После проведения реакции в течение 30 мин при комнатной температуре рН доводят до ~7, добавляя 1 М раствор НСl (10 мкл).
Контроль качества
Анализ методом ВЭЖХ проводят на хроматографе Waters (Waters, Вена, Австрия), успешно работающем вместе с системой 600 подачи растворителя; хроматограф сопряжен с двойным устройством обнаружения, включающим фотодиодную матрицу УФ-детектора (Waters модели 996 или модели 2998) и счетчик гамма-излучения Gabi компании Raytest (RSM Analytische Instrumente GmbH, Германия). Обработку данных и процесс хроматографии контролируют с использованием программного обеспечения Millennium или Empower 2 (Waters, США). Колонку XBridge Shield RP18 (5 мкм, 4,6×150 мм, Waters, Ирландия) в сочетании с соответствующей 2 см защитной колонкой элюируют при скорости потока 1 мл/мин в линейном градиенте, начиная с 10% B с последующим 70% B в течение 60 мин, при этом растворитель А=0,1%-ный водный раствор трифторуксусной кислоты, а растворитель В = ацетонитрил.
Метаболическое исследование на мышах
Инъекции радиолиганда и отбор крови
Болюс, содержащий радиолиганд в нормальном физиологическом растворе (100-150 мкл, ≈3 нмоль, 200-500 мкКи), вводят в хвостовую вену швейцарских мышей-альбиносов. Животных содержат в течение 5 мин в клетке с доступом к воде, а затем быстро умерщвляют путем пункции сердца под мягким эфирным наркозом. Кровь (500-900 мкл) отбирают из сердца с помощью шприца и переносят в предварительно охлажденную пробирку Эппендорфа на льду.
Разделение плазмы и подготовка проб
Кровь центрифугируют для удаления клеток крови (10 мин, 2000 g/4°C). Плазму собирают, смешивают с ацетонитрилом (MeCN) в соотношении 1/1 об/об и снова центрифугируют (10 мин, 15000 g/4°C). Супернатанты концентрируют до небольшого объема (в слабом потоке N2 при 40°С), разводят физиологическим раствором (≈400 мкл) и фильтруют через фильтр Millex GV (0,22 мкм).
Анализ методом ВЭЖХ для обнаружения радиометаболитов
Аликвоты образцов плазмы (полученной, как описано выше) помещают в колонку Symmetry Shield RPM, которую элюируют при скорости подачи 1,0 мл/мин в следующем градиенте: от 100% A до 90% A в течение 10 мин и от 90% A до 60% A в течение следующих 60 мин (A=0,1% водный раствор трифторуксусной кислоты (об./об.) и B=MeCN). Элюирование радиокомпонентов контролируют с помощью детектора гамма-излучения. Для 99mTc-радиопептидов проводят параллельно анализ ITLC-SG, используя ацетон в качестве элюента, чтобы обнаружить следы высвобожденного TcO4ˉ (TcO4ˉ, Rf=1,0).
Исследования на мышах, имеющих опухоль GRPR
+
Индукция опухолевого роста
Болюс ≈150 мкл, содержащий суспензию 1,5×107 свежеотобранных PC-3 клеток человека в нормальном физиологическом растворе, подкожно водят в боковую поверхность живота самок мышей SCID. Животных содержат в асептических условиях и по прошествии 2-3 недель у них развиваются хорошо пальпируемые опухоли в месте прививки (80-150 мг).
Биораспределение и расчет результатов
В день эксперимента выбранный радиопептид вводят в хвостовую вену мышей с опухолями в виде 100 мкл болюса (1-2 мкКи, в общей сложности 10 пмоль пептида; в смеси физиологический раствор/EtOH 9/1 об/об). Животных умерщвляют в группах по четыре особи под легкой эфирной анестезией путем пункции сердца в заданные моменты времени pi (после инъекции). Дополнительным группам, включающим от трех до четырех животных, совместно вводят избыток [Tyr4]-BBN (≈40 нмоль) вместе с тестируемым радиопептидом и умерщвляют в 4 час pi (блокированные животные). Представляющие интерес образцы крови и ткани сразу же отбирают, взвешивают и измеряют радиоактивность с помощью счетчика гамма-излучения. Содержимое желудка и кишечника не опорожняется, а их измерение проводят в том виде, как они получены. Данные по биораспределению рассчитывают в виде процента введенной дозы на грамм ткани (%ID/г), используя программу Microsoft Excel, с помощью подходящих стандартов введенной дозы.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Результаты различных иллюстративных испытаний приведены ниже в данном описании со ссылкой на соответствующую фигуру. Конкретные структурные, функциональные и процедурные детали, описанные в приведенных результатах, не должны истолковываться как ограничивающие настоящее изобретение.
Фигура 1А: Биораспределение [111In]-NeoBOMB-1 (111In-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6,His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+) в момент 4 час и 24 час pi. Столбцы показывают средний захват как % введенной дозы на грамм (% ID/г), по крайней мере, для 4 животных со стандартным отклонением; дополнительная группа животных получает избыток [Tyr4]-BBN (100 мкг) для in vivo блокады рецепторов в момент 4 час pi. Bl = кровь, Li = печень, He = сердце, Ki = почки, St = желудок, In = кишечник, Sp = селезенка, Mu = мышцы, Lu = легкие, Pa = поджелудочная железа, Fe = бедро и Tu = опухоль PC-3. Высокая степень захвата и удерживания наблюдается в экспериментальной опухоли с величиной 28,6±6,0% ID/г в момент 4 час и 25,9±6,6% ID/г в момент 24 час. Указанный высокий процент захвата может быть существенно снижен путем совместной инъекции избытка нативного аналога бомбезина.
Фигура 1B: Радиохроматограмма ex vivo образцов крови мышей через 5 мин после инъекции [111Ιn]-NeoBOMB-1. Процент исходного пептида, оставшегося неизменным, составляет >91%.
Фигура 1C: Биораспределение [177Lu]-NeoBOMB-1 (177Lu-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6,His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+) в момент 4 час, 24 час и 72 час pi. Столбцы показывают средний захват как % введенной дозы на грамм (% ID/г), по крайней мере, для 4 животных со стандартным отклонением; дополнительная группа животных получает избыток [Tyr4]-BBN (100 мкг) для in vivo блокады рецепторов в момент 4 час pi. Bl = кровь, Li = печень, He = сердце, Ki = почки, St = желудок, In = кишечник, Sp = селезенка, Mu = мышцы, Lu = легкие, Pa = поджелудочная железа, Fe = бедро и Tu = опухоль PC-3. Захват в поджелудочной железе снижается с течением времени более быстрыми темпами, чем захват в опухоли, что приводит к более высоким отношениям опухоль/поджелудочная железа, в частности в момент 72 час pi.
Фигура 1D: Радиохроматограмма ex vivo образцов крови мышей через 5 мин после инъекции [177Lu]-NeoBOMB-1 показывает, что >92% исходного пептида остается неизменным.
Фигура 1E: Биораспределение [67Ga]-NeoBOMB-1 (67Ga-DOTA-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6,His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+) в момент 1 час и 4 час pi. Столбцы показывают средний захват как % введенной дозы на грамм (% ID/г), по крайней мере, для 4 животных со стандартным отклонением; дополнительная группа животных получает избыток [Tyr4]-BBN (100 мкг) для in vivo блокады рецепторов в момент 4 час pi. Bl = кровь, Li = печень, He = сердце, Ki = почки, St = желудок, In = кишечник, Sp = селезенка, Mu = мышцы, Lu = легкие, Pa = поджелудочная железа, Fe = бедро и Tu = опухоль PC-3. Высокие значения в опухолях (>30% ID/г) достигаются радиофармацевтическим средством в момент 1 час и 4 час pi.
Фигура 1F: Радиохроматограмма ex vivo образцов крови мышей через 5 мин после инъекции [67Ga]-NeoBOMB-1 показывает, что >97% исходного пептида остается неизменным.
Фигура 2А: Биораспределение [99mTc]-NeoBOMB-2 (99mTc-N4-(п-аминобензиламиндигликолевая кислота)-[D-Phe6,His-NHCH[(CH2CH(CH3)2]2 12, des-Leu13, des-Met14]-BBN (6-14)) у самок мышей SCID, имеющих опухоли PC-3 (hGRPR+) в момент 1 час, 4 час и 24 час pi. Столбцы показывают средний захват как % введенной дозы на грамм (% ID/г), по крайней мере, для 4 животных со стандартным отклонением; дополнительная группа животных получает избыток [Tyr4]-BBN (100 мкг) для in vivo блокады рецепторов в момент 4 час pi. Bl = кровь, Li = печень, He = сердце, Ki = почки, St = желудок, In = кишечник, Sp = селезенка, Mu = мышцы, Lu = легкие, Pa = поджелудочная железа, Fe = бедро и Tu = опухоль PC-3. Высокие значения в опухолях (~30% ID/г) достигаются радиофармацевтическим средством в момент 1 час и 4 час pi, которые остаются исключительно высокими (>25% ID/г) в момент 24 час pi.
Фигура 2В: Радиохроматограмма ex vivo образцов крови мышей через 5 мин после инъекции [99mTc]-NeoBOMB-2 показывает, что >88% исходного пептида остается неизменным.
Claims (9)
1. Соединение, имеющее следующую структуру:
.
2. Соединение, имеющее следующую структуру:
,
где М представляет собой 68Ga.
3. Лекарственное средство, содержащее соединение по п. 1 или 2, для обнаружения, диагностики или лечения первичного и/или метастатического GRPR+ онкологического заболевания.
4. Лекарственное средство по п. 3, где онкологическое заболевание выбрано из рака предстательной железы, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, карциномы толстого кишечника, желудочно-кишечных стромальных опухолей, гастриномы, почечно-клеточных карцином, гастроэнтеропанкреатических нейроэндокринных опухолей, опухолей сквамозных клеток пищевода, нейробластом, карцином сквамозных клеток головы и шеи, а также из опухолей яичников, эндометрия и поджелудочной железы, проявляющих связанную с новообразованиями сосудистую систему, и является GRPR+ онкологическим заболеванием.
5. Лекарственное средство по п. 3, где онкологическим заболеванием является онкологическое заболевание человека.
6. Терапевтическая композиция, содержащая соединение по п. 1 или 2 и терапевтически приемлемый инертный наполнитель, для обнаружения, диагностики или лечения первичного и/или метастатического GRPR+ онкологического заболевания.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261705513P | 2012-09-25 | 2012-09-25 | |
| US61/705,513 | 2012-09-25 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015115529A Division RU2693465C9 (ru) | 2012-09-25 | 2013-09-25 | Антагонисты grpr для обнаружения, диагностики и лечения grpr-позитивного онкологического заболевания |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019119378A RU2019119378A (ru) | 2020-10-23 |
| RU2821944C2 true RU2821944C2 (ru) | 2024-06-28 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5019647A (en) * | 1988-05-24 | 1991-05-28 | Merck & Co., Inc. | Gastrin releasing peptide antagonist |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5019647A (en) * | 1988-05-24 | 1991-05-28 | Merck & Co., Inc. | Gastrin releasing peptide antagonist |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ABD-ELGALIEL W. R., et al., Design, Synthesis, and Biological Evaluation of an Antagonist−Bombesin Analogue as Targeting Vector, Bioconjugate chemistry, 2008, vol. 19, no. 10, p. 2040-2048. HEIMBROOK D. C., et al., Gastrin releasing peptide antagonists with improved potency and stability, Journal of medicinal chemistry, 1991, vol. 34, no. 7, p. 2102-2107. * |
| YANG M. et al., 18F-labeled GRPR agonists and antagonists: a comparative study in prostate cancer imaging, Theranostics, 2011, vol. 1, p. 220-229. DARKER J. G. et al., Discovery of potent and selective peptide agonists at the GRP‐preferring bombesin receptor (BB2), Journal of Peptide Science: An Official Publication of the European Peptide Society, 2001, vol. 7, no. 11, p. 598-605. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7534498B2 (ja) | Ｇｒｐｒ陽性ガンの検出、診断及び治療のためのｇｒｐｒアンタゴニスト | |
| WO2011066521A2 (en) | Compounds with reduced ring size for use in diagnosing and treating melanoma, including metastatic melanoma and methods related to same | |
| KR102061366B1 (ko) | 환자 선정방법 | |
| De et al. | Radiolabeled new somatostatin analogs conjugated to DOMA chelator used as targeted tumor imaging agent: synthesis and radiobiological evaluation | |
| RU2821944C2 (ru) | Антагонисты grpr для обнаружения, диагностики и лечения grpr-позитивного онкологического заболевания | |
| JP2015083546A (ja) | 癌の原発巣・骨転移の検査・治療用放射性標識薬剤 |