RU2811990C2

RU2811990C2 - Кормовой материал для животных

Info

Publication number: RU2811990C2
Application number: RU2020120060A
Authority: RU
Inventors: Тим ГУССЕНС; ИММЕРСЕЛ Филип Флоримонд Магдалена ВАН; Рене КВАККЕЛЬ; Пьер Клеман Антуан МОКЕ; Лоннеке ОНРЮСТ
Original assignee: Нутриэд Интернешнл
Priority date: 2017-12-22
Filing date: 2018-12-20
Publication date: 2024-01-22

Abstract

Изобретение относится к области кормов для сельскохозяйственных животных. Предложен способ в отношении сельскохозяйственных животных для повышения эффективности производства продуктов животноводства. Способ предусматривает пероральное введение бутирилового сложного эфира целлюлозы со среднечисловой молярной массой от 2000 до 1000000 г/моль, дополнительно содержащего ацетильные группы сложного эфира. Изобретение обеспечивает снижение коэффициента конверсии корма, увеличение живой массы и/или увеличение среднесуточного прироста массы. 19 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области кормов для сельскохозяйственных животных, в частности к кормовому материалу, который эффективен для предупреждения и/или лечения патогенных инфекций у сельскохозяйственных животных и/или для повышения эффективности производства продуктов животноводства.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Растущий спрос на продукты животноводства во всем мире требует новых стратегий, повышающих эффективность производства продуктов животноводства. Неотъемлемым элементом таких стратегий является оптимизация использования питательных веществ. Внимание потребителей и правительства к безопасности пищевых продуктов, снижению воздействия на окружающую среду, улучшению условий содержания животных и рациональному использованию противомикробных препаратов создают дополнительные требования к продуктам животноводства.

Особое внимание в животноводстве уделяется уничтожению патогенных микроорганизмов, таких как Salmonella и других патогенных бактерий. Salmonella является одной из наиболее важных причин пищевых инфекций у людей, в основном из-за употребления мяса птицы или зараженных яиц. В сельскохозяйственном секторе предпринимаются попытки уменьшить количество инфекций, вызываемых Salmonella, с помощью различных мер, таких как вакцинация, интенсивные санитарно-гигиенические процедуры и/или введение антибиотиков, пробиотиков, подкислителей или жирных кислот с короткой и средней цепью и их солей.

В последнее время внимание привлекли бактериостатические действия летучих жирных кислот с короткой цепью, оказываемые на грамотрицательные бактерии. Группа летучих жирных кислот с короткой цепью состоит из биоразлагаемых слабых органических кислот, способных уничтожать патогенные микроорганизмы, не оказывая существенного влияния на микрофлору кишечника. Было показано, что летучие жирные кислоты с короткой цепью могут ингибировать рост гемолитических штаммов Escherichia coli на 50 процентов. Был разработан ряд композиций жирных кислот с короткой цепью для применения в качестве кормовой добавки для достижения снижения присутствия патогенных микроорганизмов у животных.

В EP1354520 описана кормовая добавка, представляющая собой микрокапсулу, содержащую н-масляную кислоту в матрице, содержащей липидную структуру (воск), и ее получение путем охлаждения распылением. Согласно EP1354520 микроинкапсулирование масляной кислоты эффективно, в частности, для преодоления сложностей, связанных с летучестью и неприятным запахом масляной кислоты, которые создают трудности при ее использовании в качестве кормовой добавки. Также в EP1354520 предполагается, что препарат является устойчивым к разложению в желудке.

F. Van Immerseel et al. (2005 Poultry Science 84: 1851-1856) сравнили действие масляной кислоты с масляной кислотой, внедренной в жировую матрицу, при использовании в качестве кормовой добавки для домашней птицы. Они сообщили, что колонизация слепой кишки Salmonella и выделение Salmonella с фекалиями были значительно ниже в группе, которой вводили масляную кислоту, внедренную в жировую матрицу.

В WO2007/124949 описано применение соединений 3-гидроксимасляной кислоты и поли-3-гидроксимасляной кислоты в качестве кормовых добавок.

В BE1023491 описана кормовая добавка, содержащая масляную кислоту в восковой матрице, содержащей микрокристаллический воск, и ее получение путем экструзии из расплава.

Задачей настоящего изобретения является создание кормовых добавок для животных, обладающих улучшенной эффективностью в предупреждении или лечении патогенных инфекций у сельскохозяйственных животных и/или в повышении эффективности производства продуктов животноводства.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что эти цели могут быть достигнуты с помощью некоторых сложных эфиров полисахарида и масляной кислоты.

Было обнаружено, что энтеральное введение бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению сельскохозяйственным животным приводит к увеличению концентрации бутирата в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта. Авторы настоящего изобретения предполагают, что это коррелирует с эффективностью бутириловых сложных эфиров полисахарида в отношении присутствия патогенных микроорганизмов в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта и фекалиях, которое наблюдалось во время испытаний in vivo. Также было неожиданно обнаружено, что введение бутириловых сложных эфиров полисахарида приводило к превосходным показателям роста по сравнению с другими препаратами или продуктами на основе бутирата. Бутириловые сложные эфиры полисахарида и согласно настоящему изобретению обеспечивают высоко востребованную комбинацию улучшенного среднесуточного прироста массы (ADG) и среднесуточного потребления корма (ADFI) в сочетании со сниженным коэффициентом конверсии корма (FCR) и смертностью в течение периода введения добавки, не демонстрируя нежелательных явлений в течение заключительного периода откорма.

Предполагается, что масляная кислота стимулирует рост кишечных ворсинок и/или модифицирует развитие микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. Также считается, что масляная кислота может подавлять экспрессию генов, вовлеченных в инвазию Salmonella, в низких дозах. Другие положительные действия, которые, как полагают авторы изобретения, будут оказаны при применении композиций на основе сложных эфиров полисахарида и масляной кислоты согласно настоящему изобретению, могут включать улучшенное удержание кишечного содержимого в тонком кишечнике, улучшенное усвоение/всасывание метионина и/или более разнообразную микрофлору в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта.

Причиной увеличения концентрации масляной кислоты может быть пребиотический эффект (например, не ограничиваясь перечисленным, пребиотический эффект, оказываемый на бактерии, продуцирующие масляную кислоту), непосредственное высвобождение масляной кислоты в результате разложения бутирилового сложного эфира полисахарида, любой другой механизм, приводящий к увеличение концентрации масляной кислоты или их сочетание. Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что эффекты, наблюдаемые для бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению, могут также коррелировать с повышенным присутствием микроорганизмов, способных к ферментации полисахаридов, в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта по сравнению с верхним отделом желудочно-кишечного тракта.

Следовательно, настоящее изобретение относится к новым бутириловым сложным эфирам полисахарида, композициям, таким как кормовые добавки и/или корма, содержащим бутириловые сложные эфиры полисахарида, а также к применениям бутириловых сложных эфиров полисахарида в качестве кормовой добавки, например, для предупреждения или лечения патогенных инфекций у сельскохозяйственных животных и/или для повышении эффективности производства продуктов животноводства.

Эти и другие аспекты изобретения будут более ясны на основании следующего подробного описания и прилагаемых примеров.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Первый аспект изобретения относится к кормовой композиции, содержащей бутириловый сложный эфир полисахарида.

Масляная кислота представляет собой летучую жирную монокарбоновую кислоту с короткой цепью, имеющую молекулярную формулу CH₃-CH₂-CH₂-COOH. Термины «масляная кислота» и «бутират» в контексте настоящего документа используются взаимозаменяемо и должны толковаться как обозначающие протонированные (кислота, масляная кислота) и депротонированные (сопряженное основание, бутират) формы, соответственно. Специалисту ясно, что масляная кислота, так как она является слабой кислотой, обычно присутствует как в протонированной, так и в депротонированной форме при растворении в водной среде, концентрация каждой формы зависит от рН среды. Кислая форма может поглощаться стенками кишечника и клеточными мембранами микроорганизмов.

В контексте настоящего документе термин «бутириловый сложный эфир полисахарида» относится к соединениям, которые в общем случае содержат молекулу полисахарида в качестве центральной части, где указанная молекула полисахарида дериватизирована/замещена множеством молекул масляной кислоты посредством образования сложноэфирных связей между группой карбоновой кислоты молекулы масляной кислоты и гидроксильной группой полисахарида.

В контексте настоящего документа термин «полисахарид» относится к полимерам, содержащим главную цепь, содержащую моносахаридные повторяющиеся звенья и/или дериватизированные моносахаридные повторяющиеся звенья, обычно циклические пентозы, в частности, C₅-альдозы или кетозы, или циклические гексозы, в частности, C₆-альдозы или кетозы. Неограничивающие примеры C₅-C₆-альдоз включают аллозу, альтрозу, глюкозу, маннозу, гулозу, идозу, галактозу, талозу, рибозу, арабинозу, ксилозу, ликсозу. Неограничивающие примеры С₅-С₆-кетоз включают рибулозу, ксилулозу, фруктозу, сорбозу и тагатозу. В контексте настоящего документа термин «производные моносахаридов» относится к любому химически или ферментативно модифицированному моносахаридному звену.

Полисахарид может представлять собой гомополисахарид или гетерополисахарид, предпочтительно гомополисахарид.

Полисахарид может быть модифицированным или немодифицированным. В предпочтительном варианте осуществления изобретения предложен бутириловый сложный эфир полисахарида, где полисахарид выбран из группы, состоящей из крахмалов, модифицированных крахмалов, амилопектина, модифицированного амилопектина, амилозы, модифицированной амилозы, хитозана, хитина, гуаровой камеди, модифицированной гуаровой камеди, камеди рожкового дерева, камеди тары, конжаковой камеди, конжаковой муки, камеди пажитника, камеди мескитового дерева, маннанов алоэ, модифицированной целлюлозы, окисленных полисахаридов, сульфатированных полисахаридов, катионных полисахаридов, аравийской камеди, камеди карайи, ксантана, каппа-, йота- или лямбда-каррагинанов, агар-агара, альгинатов, каллезы, ламинарина, хризоламинарина, ксилана, маннана, галактоманнана, гемицеллюлозы, пектина, арабиноксилана, ксантановой камеди, нигерана, изолихенана, ламинарана, лихенана, гликогена, пуллулана, декстрана, пустулана, инулина, растительных леванов, каррагинана, галактокаролозы, родименана, фукоидана, агарозы, порфирана, альгиновой кислоты, кератосульфата, хондроитина, сульфатов хрондроитина, гепарина и целлюлозы, предпочтительно из группы, состоящей из гемицеллюлозы, крахмала и целлюлозы, наиболее предпочтительно полисахарид представляет собой целлюлозу.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения предложен бутириловый сложный эфир полисахарида, где полисахарид выбран из группы, состоящей из нерастворимых в воде полисахаридов.

Для целей настоящего изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида может быть образован химическим путем, ферментативным путем, под действием ферментов, посредством биосинтеза естественным или генетически модифицированным организмом и т. д. Как правило, в соответствии с изобретением бутириловый сложный эфир полисахарида получен путем этерификации полисахарида, например, кислотно-катализируемой этерификации.

Количество групп заместителей в (ангидро) моносахаридных звеньях полисахаридов может быть выражено в массовых процентах или по среднему количеству групп заместителей, присоединенных к кольцу - понятие, известное химикам в области полисахаридов как «степень замещения» (DS). В случае C₆ моносахарида, если все три доступных положения на каждом звене являются замещенными, DS составляет 3; если замещено в среднем два положения на каждом кольце, DS составляет 2, и т. д. По аналогии, количество групп заместителей в полисахаридах может быть выражено в процентах от доступных положений, которые являются замещенными.

В одном из вариантов осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида имеет среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено (DS) от 0,1 до 4. Например, в соответствии с указанным вариантом осуществления DS может составлять по меньшей мере 0,25, по меньшей мере 0,5, по меньшей мере 0,75, по меньшей мере 1,0, по меньшей мере 1,25, по меньшей мере 1,5, по меньшей мере 1,75, по меньшей мере 2,0, по меньшей мере 2,25 или по меньшей мере 2,5, и/или она может составлять менее 3,75, менее 3,5, менее 3,25 или менее 3. В иллюстративных вариантах осуществления указанная DS составляет от 0,5 до 3,5, от 1,0 до 3,25, от 1,5 до 3 от 2,0 до 2,95.

В особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида представляет собой бутириловый сложный эфир целлюлозы, имеющий среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено (DS) от 0,1 до 4, предпочтительно от 1 до 3,5, предпочтительно от 1,75 до 3,25, предпочтительно от 2,25 до 3, предпочтительно от 2,5 до 2,95.

В других вариантах осуществления бутириловый сложный эфир полисахарида имеет содержание бутирила по меньшей мере 5 мас.% относительно массы бутирилового сложного эфира полисахарида, предпочтительно по меньшей мере 10 мас.%, по меньшей мере 15 мас.%, по меньшей мере 20 мас.%, по меньшей мере 25 мас.%, по меньшей мере 30 мас.%, по меньшей мере 35 мас.%, по меньшей мере 40 мас.%, по меньшей мере 45 мас.%, по меньшей мере 50 мас.% или по меньшей мере 55 мас.%. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида представляет собой бутириловый сложный эфир целлюлозы, характеризующийся содержанием бутирила от 5 до 80 мас.% относительно массы бутирилового сложного эфира полисахарида, предпочтительно от 25 до 70 мас.%, от 40 до 60 мас.% или от 50 до 56 мас.%.

В других вариантах осуществления бутириловый сложный эфир полисахарида имеет содержание бутирила, выраженное в виде процентной доли доступных полисахаридных гидроксильных групп, которые являются замещенными по меньшей мере 5 %, предпочтительно по меньшей мере 10 %, по меньшей мере 15 %, по меньшей мере 20 %, по меньшей мере 25 %, по меньшей мере 25 %, по меньшей мере 30 %, по меньшей мере 35 %, по меньшей мере 40 %, по меньшей мере 45 %, по меньшей мере 50 % или по меньшей мере 55 %. В других вариантах осуществления бутириловый сложный эфир полисахарида имеет содержание бутирила, приводящее к степени замещения, выраженное в виде процентной доли доступных полисахаридных гидроксильных групп, которые являются замещенными, равной 100 % или менее, например, менее 99 %, менее 98 %, менее 97 %, менее 95 %, менее 90 %, менее 85 %, менее 80 % или менее 75 %.

В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида представляет собой бутириловый сложный эфир целлюлозы, характеризующийся содержанием бутирила, выраженным в виде процентной доли доступных полисахаридных гидроксильных групп, которые являются замещенными, равным от 5 до 80 %, предпочтительно от 25 до 70 % или от 50 до 56 %.

В других предпочтительных вариантах осуществления бутириловые сложные эфиры полисахарида согласно изобретению дополнительно содержат ацетильные группы сложного эфира. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида содержит бутирильную и ацетильную группы в молярном соотношении по меньшей мере 1/1, предпочтительно по меньшей мере 1,5/1, по меньшей мере 2/1, по меньшей мере 2,5/1, по меньшей мере 3/1, по меньшей мере 3,5/1, по меньшей мере 4/1, по меньшей мере 5/1, по меньшей мере 6/1, по меньшей мере 7/1, по меньшей мере 8/1, по меньшей мере 9/1 или по меньшей мере 10/1. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида содержит бутирильную и ацетильную группы в молярном соотношении менее 100/1, предпочтительно менее 75/1, менее 50/1, менее 40/1, менее 30/1, менее 25/1, менее 20/1 или менее 15/1. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида содержит ацетильные группы и характеризуется содержанием ацетильных групп, равным по меньшей мере 1 мас.% относительно массы бутирилового сложного эфира полисахарида, предпочтительно по меньшей мере 2 мас.%, предпочтительно по меньшей мере 3 мас.%. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида содержит ацетильные группы и характеризуется содержанием ацетильных групп не более 10 мас.% относительно массы бутирилового сложного эфира полисахарида, предпочтительно не более 8 мас.%, предпочтительно не более 5 мас.%.

Согласно изобретению бутириловый сложный эфир полисахарида представляет собой бутириловый сложный эфир целлюлозы, характеризующийся содержанием ацетила от 0,1 до 60 мас.% относительно массы бутирилового сложного эфира целлюлозы, предпочтительно от 0,5 до 45 мас.%, предпочтительно от 1 до 30 мас.%, предпочтительно от 2 до 15 мас.%, предпочтительно от 3 до 10 мас.%, предпочтительно от 4 до 6 мас.%.

В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида может иметь среднечисловую молярную массу (M_n) от 2000 до 1 000 000 г/моль, предпочтительно от 5000 до 500 000 г/моль, от 7000 до 250 000 г/моль, от 10 000 до 100 000 г/моль, от 12 000 до 50 000 г/моль, от 13 000 до 25 000 г/моль или от 15 000 до 17 000 г/моль. В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида может характеризоваться среднечисловой молярной массой (M_n) по меньшей мере 2000 г/моль, предпочтительно по меньшей мере 4000 г/моль, предпочтительно по меньшей мере 8000 г/моль, предпочтительно по меньшей мере 12 000 г/моль. Кроме того, в вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида может характеризоваться среднечисловой молярной массой (M_n) менее 1 000 000 г/моль, предпочтительно менее 500 000 г/моль, предпочтительно менее 250 000 г/моль, предпочтительно менее 100 000 г/моль, предпочтительно менее 70 000 г/моль, предпочтительно менее 65 000 г/моль, предпочтительно менее 30 000 г/моль, предпочтительно менее 25 000 г/моль, предпочтительно менее 17 000 г/моль. Среднечисловая молярная масса (M_n) может быть определена подходящими методами, известными специалисту в данной области техники, такими как осмос, статическое рассеяние света, седиментационное равновесие, гель-проникающая хроматография, вискозиметрия, скорость седиментации, динамическое рассеяние света, анализ концевых групп и т. д. Предпочтительным методом определения среднечисловой молярной массы (M_n) является гель-проникающая хроматография.

Согласно изобретению композиция, содержащая бутириловый сложный эфир полисахарида, представляет собой кормовую композицию. В контексте настоящего документа термин «кормовой» означает подходящий для потребления животным, в частности, сельскохозяйственными животными. В варианте осуществления он означает, что композиция была определена как безопасная, функциональная и подходящая для ее предполагаемого применения в кормах для животных. Например, она обрабатывается и маркируется соответствующим образом и/или удовлетворяет соответствующим предписаниям, регулирующим использование композиции в кормах для животных в соответствующей юрисдикции.

В вариантах осуществления изобретения кормовая композиция содержит по меньшей мере один дополнительный ингредиент, выбранный из групп, состоящих из кормовых добавок, кормовых рецептурных добавок или вспомогательных веществ, и питательных компонентов.

Ясно, что выбор и (относительные) количества таких дополнительных ингредиентов будут зависеть от точной формы и назначения кормовой композиции. Предусмотрены варианты осуществления, где кормовая композиция представляет собой кормовую добавку или кормовой материал. Также предусмотрены варианты осуществления, где кормовая композиция представляет собой кормовой премикс или готовый к использованию корм или фураж. Если не указано иное, термины «кормовая добавка» и «кормовой материал» используются в настоящем документе взаимозаменяемо и в общем случае относятся к композициям, содержащим бутириловый сложный эфир полисахарида в высоких концентрациях, причем эти композиции разработаны и предназначены для смешивания с кормом или фуражом для обеспечения бутирилового сложного эфира полисахарида в приемлемых количествах/дозировках. Следует понимать, что эти термины в настоящем документе не относятся к правовым определениям, используемым в контексте предписаний в отношении кормов для животных, которые могут различаться в разных юрисдикциях и/или меняться со временем. Несмотря на вышеупомянутое, ясно, что кормовые композиции согласно изобретению могут быть представлены в формах, удовлетворяющих определению кормовой добавки или кормового материала в строгом юридическом (т. е. нормативном) смысле.

В вариантах осуществления изобретения кормовая композиция представляет собой кормовой материал, содержащий бутириловый сложный эфир полисахарида в сочетании с по меньшей мере одним другим кормовым материалом. В вариантах осуществления изобретения предложен кормовой материал, содержащий от 0,1 до 80 мас.%, предпочтительно от 0,5 до 60 мас.%, от 1 до 50 мас.%, от 2 до 40 мас.%, от 3 до 30 мас.%, от 4 до 20 мас.%, от 5 до 15 мас.% сложного эфира полисахарида и масляной кислоты и один или более других кормовых материалов.

В вариантах осуществления изобретения предложен кормовой материал, как определено в настоящем документе, где указанный по меньшей мере один другой кормовой материал выбран из группы технологических добавок, вкусовых добавок, пищевых добавок, зоотехнических добавок, кокцидиостатиков и гистомоностатиков.

Примеры технологических добавок, которые могут быть подходящим образом объединены со бутириловым сложным эфиром полисахарида согласно настоящему изобретению, включают консерванты, антиоксиданты, эмульгаторы, стабилизаторы, загустители, гелеобразующие агенты, связующие вещества, вещества для контроля радионуклидного загрязнения, антислеживающие агенты, регуляторы кислотности, силосные добавки и денатурирующие агенты.

Примеры вкусовых добавок, которые могут быть подходящим образом объединены со бутириловым сложным эфиром полисахарида согласно настоящему изобретению, включают красители и ароматизирующие соединения. Красители следует понимать в широком смысле, и они могут обозначать вещества, которые придают или восстанавливают цвет в кормах, вещества, которые при скармливании животным придают цвет пище животного происхождения, и/или вещества, которые благоприятно влияют на цвет декоративных рыб или птиц.

Примеры пищевых добавок, которые могут быть подходящим образом объединены со бутириловым сложным эфиром полисахарида согласно настоящему изобретению, включают витамины, провитамины и вещества с четко определенными химическими свойствами, обладающие схожим эффектом; соединения микроэлементов; аминокислоты, их соли и аналоги; мочевину и ее производные.

Примеры зоотехнических добавок, которые могут быть подходящим образом объединены с бутириловым сложным эфиром полисахарида согласно настоящему изобретению, включают усилители перевариваемости, стабилизаторы кишечной флоры и вещества, которые благоприятно влияют на окружающую среду. В предпочтительном варианте осуществления изобретения по меньшей мере один другой кормовой материал, содержащийся в кормовом материале, представляет собой связующее вещество, антислеживающий агент, стабилизирующий агент, носитель и/или консервант. В предпочтительном варианте осуществления изобретения по меньшей мере один другой кормовой материал выбран из группы дрожжевого продукта, глины, соли жирной кислоты, диоксида кремния, сепиолита, бентонита, клиноптилолита, гуаровой камеди, ксантановой камеди, муравьиной кислоты, формиата натрия, формиата кальция, уксусной кислоты, ацетата кальция, пропионата натрия, пропионата кальция, молочной кислоты, лактата кальция, богатых токоферолом экстрактов растительных масел и пшеничных отрубей. В контексте настоящего документа дрожжевой продукт следует понимать в широком смысле, и он может обозначать дрожжи и их производные продукты, такие как инактивированные сухие дрожжи, клеточные стенки дрожжей, аутолизаты или нуклеотиды, полученные, например, из Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces carlsbergensis, Kluyveromyces lactis, Kluyveromyces fragilis, Torulaspora delbrueckii и т. д. В вариантах осуществления изобретения предложен кормовой материал, как определено ранее в настоящем документе, содержащий бутириловый сложный эфир полисахарида в количестве до 50 мас.% относительно общей массы композиции, предпочтительно до 40 мас.%, до 30 мас.%, до 25 мас.%, до 20 мас.%, до 18 мас.%, до 15 мас.%, до 10 мас.% или до 5 мас.%.

В вариантах осуществления изобретения предложен кормовой материал, как определено в настоящем документе, содержащий один или более других кормовых материалов, таких как кормовой материал, как определено выше в настоящем документе, в (совокупном) количестве по меньшей мере 1 мас.% относительно общей массы композиции, предпочтительно по меньшей мере 2 мас.%, по меньшей мере 3 мас.%, по меньшей мере 5 мас.%, по меньшей мере 10 мас.%, по меньшей мере 20 мас.%, по меньшей мере 30 мас.%, по меньшей мере 40 мас.% или по меньшей мере 50 мас.%.

В вариантах осуществления изобретения кормовая композиция представляет собой корм для сельскохозяйственных животных, также называемый фуражом, содержащий бутириловый сложный эфир полисахарида, как описано в настоящем документе, и один или более ингредиентов корма для животных. Как понятно специалистам в данной области техники, термин «кормовой ингредиент» в контексте настоящего документа относится к компонентам корма, которые обеспечивают универсальные питательные вещества, необходимые для нормального роста и развития животного, причем ключевыми питательными веществами являются аминокислоты, углеводы, липиды, витамины и минералы. Как правило, кормовые ингредиенты грубо подразделяются на источники белка, источники энергии, источники жиров и источники минералов.

Таким образом, в вариантах осуществления изобретения предложен корм для сельскохозяйственных животных, как определено в настоящем документе, где один или более кормовых ингредиентов выбраны из группы источников белка, источников энергии, источников жиров и источников минералов. Примеры подходящих источников белка включают соевую муку, муку из рапсового жмыха, пальмовый шрот, подсолнечный жмых, горох, бобы, люпины, рыбную муку, птичью муку и плазму крови. Подходящие примеры источников энергии включают кукурузу, пшеницу, ячмень и рис. Подходящие примеры источников жиров включают рыбий жир, талловое масло, кукурузное масло, соевое масло, масло из рисовых отрубей, пальмовое масло и масло канолы. Подходящие примеры источников минералов включают кальций, магний, фосфор, калий, натрий, медь, селен, цинк, железо, марганец, иод, кобальт.

В вариантах осуществления изобретения предложен корм для сельскохозяйственных животных, как определено в настоящем документе, содержащий бутириловый сложный эфир полисахарида в количестве по меньшей мере 0,0001 мас.% относительно общей массы композиции, предпочтительно по меньшей мере 0,001 мас.%, по меньшей мере 0,005 мас.%, по меньшей мере 0,01 мас.%, по меньшей мере 0,025 мас.%, по меньшей мере 0,05 мас.% или по меньшей мере 0,1 мас.%. В вариантах осуществления изобретения предложен корм для сельскохозяйственных животных, как определено в настоящем документе, содержащий бутириловый сложный эфир полисахарида в количестве до 10 мас.% относительно общей массы композиции, предпочтительно до 5 мас.%, до 2 мас.%, до 1 мас.%, до 0,5 мас.% или до 0,1 мас.%.

В вариантах осуществления изобретения кормовая композиция имеет содержание свободной кислоты менее 5 мас.% относительно массы композиции, предпочтительно менее 2 мас.%, предпочтительно менее 1 мас.%, предпочтительно менее 0,5 мас.%, предпочтительно менее 0,1 мас.%, предпочтительно менее 0,05 мас.%, предпочтительно менее 0,01 мас.%. Содержание свободной кислоты может быть определено подходящими способами, известными специалисту в данной области техники, таким как титрование по Карлу Фишеру.

В вариантах осуществления изобретения кормовая композиция имеет содержание воды менее 5 мас.% относительно массы композиции, предпочтительно менее 2 мас.%, предпочтительно менее 1 мас.%, предпочтительно менее 0,5 мас.%, предпочтительно менее 0,1 мас.%, предпочтительно менее 0,05 мас.%, предпочтительно менее 0,01 мас.%. Содержание воды может быть определено подходящими методами, известными специалисту в данной области техники, такими как титрование по Карлу Фишеру.

Кормовые композиции, содержащие бутириловый сложный эфир полисахарида, как описано выше в настоящем документе, могут быть предоставлены в форме порошка, прессованной, гранулированной или брикетированной форме. В предпочтительных вариантах осуществления бутириловый сложный эфир полисахарида равномерно распределен по всему объему кормовой композиции.

В предпочтительных вариантах осуществления кормовая композиция предоставлена в прессованной, гранулированной или брикетированной форме, и бутириловый сложный эфир полисахарида распределен между основными частицами, составляющими кормовую композицию.

В высоко предпочтительных вариантах осуществления кормовая композиция предоставлена в прессованной, гранулированной или брикетированной форме, где основные частицы, составляющие кормовую композицию, не содержат различимых слоев или фаз. В высоко предпочтительных вариантах осуществления кормовая композиция предоставлена в прессованной, гранулированной или брикетированной форме, где основные частицы, составляющие кормовую композицию, содержащую бутириловый сложный эфир полисахарида, не содержат покрытия, состоящего из сложного эфира масляной кислоты или содержащего его в количествах более 70 мас.%, более 50 мас.% или более 20 мас.% относительно общей массы покрытия.

Второй аспект настоящего изобретения относится к способу лечения животного путем введения бутириловый сложного эфира полисахарида, как определено в настоящем документе. Как правило, как будет ясно из вышеизложенного, такие способы включают энтеральное, в частности, пероральное, введение животному бутирилового сложного эфира полисахарида, предпочтительно в смеси с кормом для животного, с целью воздействия на физиологическое состояние животного, в частности, с целью улучшения здоровья кишечника, состояния и/или продуктивности животного. Таким образом, способы согласно настоящему изобретению могут оказывать профилактическое или терапевтическое действие. Способы согласно настоящему изобретению также могут иметь сугубо экономическое назначение.

Согласно изобретению животное предпочтительно является сельскохозяйственным животным, включая виды птиц, водные виды и виды млекопитающих. Примеры видов птиц включают виды сельскохозяйственной птицы, такие как индейка, утка и курица. Примеры водных видов включают виды рыб, такие как лосось, форель, тилапия, сом и карп, а также виды ракообразных, включая шримсов и креветок. Примеры видов млекопитающих включают виды жвачных животных, таких как овцы, козы и крупный рогатый скот, и виды нежвачных животных, такие как лошади, поросята и свиньи. В предпочтительном варианте осуществления изобретения животное выбрано из группы, состоящей из моногастричных животных с ферментацией в нижней части кишечника. В других предпочтительных вариантах осуществления животное выбрано из группы, состоящей из кур, поросят, лошадей, телят, коз, овец, кроликов, собак, кошек и рыб. В более предпочтительных вариантах осуществления животное выбрано из группы, состоящей из кур, поросят, лошадей, телят, коз, овец и кроликов, более предпочтительно из группы, состоящей из кур, поросят, лошадей и телят, более предпочтительно из группы, состоящей из кур и поросят, наиболее предпочтительно кур.

В вариантах осуществления изобретения подлежащее лечению животное может представлять собой животное, которое находится в периоде отъема, животное, которое находится в стартовом периоде, животное, которое находится в периоде выращивания, или животное, которое находится в заключительном периоде откорма. В предпочтительных вариантах осуществления животное представляет собой животное, которое находится в стартовом периоде.

В вариантах осуществления изобретения способ лечения включает кормление животного кормом или фуражом, обычно кормом или фуражом, как определено в других местах настоящего документа, содержащим бутириловый сложный эфир полисахарида. Оптимальный режим лечения может зависеть от вида, подвергаемого лечению, и/или требуемого эффекта, и, исходя из сведений в настоящем документе, определение подходящих режимов лечения будет находиться в пределах компетенции специалистов в данной области техники. В вариантах осуществления изобретения лечение будет включать энтеральное, например, пероральное, введение бутирилового сложного эфира полисахарида в дозе по меньшей мере 0,0001 мас.% относительно общей массы корма для животных, потребляемого животным в течение 24 часов, предпочтительно по меньшей мере 0,001 мас.%, по меньшей мере 0,005 мас.%, по меньшей мере 0,01 мас.%, по меньшей мере 0,025 мас.%, по меньшей мере 0,05 мас.% или по меньшей мере 0,1 мас.%. В вариантах осуществления изобретения предложено лечение, как определено в настоящем документе, включающее энтеральное, например, пероральное, введение бутирилового сложного эфира полисахарида в дозе до 10 мас.% относительно общей массы корма для животных, потребляемого животным в течение 24 часов, предпочтительно до 5 мас.%, до 2 мас.%, до 1 мас.%, до 0,5 мас.% или до 0,1 мас.%.

В вариантах осуществления изобретения бутириловый сложный эфир полисахарида вводят в таких дозах по меньшей мере один раз в неделю, предпочтительно по меньшей мере один раз в три дня, более предпочтительно по меньшей мере один раз в два дня, наиболее предпочтительно один раз в день.

Способы согласно изобретению могут быть осуществлены по ряду причин, что будет очевидно на основании вышеизложенного, в частности, для улучшения и/или поддержания здоровья животного и/или для улучшения продуктивности животного.

Следовательно, в варианте осуществления изобретения предложен способ, как определено в настоящем документе, где указанный способ является нетерапевтическим. Следовательно, предложен способ, как определено в настоящем документе, где животное, подлежащее лечению, представляет собой животное, которое имеет хорошее или нормальное состояние здоровья. В предпочтительном варианте осуществления изобретения указанный способ направлен на снижение коэффициента конверсии корма, увеличение живой массы и/или увеличение среднесуточного прироста массы.

В вариантах осуществления изобретения способ может быть направлен на увеличение живой массы в определенный момент времени, такой как забой или 35 день, предпочтительно 35 день, более чем на 1 %, предпочтительно более чем на 2 %, предпочтительно более чем на 4 %, предпочтительно более чем на 6 %. В предпочтительном варианте осуществления способ направлен на увеличение живой массы в определенный момент времени на 1-12 %, предпочтительно на 2-6 %. Специалист в данной области техники может определить увеличение живой массы в определенный момент времени путем рутинных экспериментов, например, эксперимента in vivo с использованием контрольной группы.

В вариантах осуществления изобретения способ может быть направлен на снижение коэффициента конверсии корма, рассчитанного за определенный период, такого как период введения добавки или продолжительность жизни, предпочтительно период введения добавки, более чем на 1 %, предпочтительно более чем на 2 %, предпочтительно более чем на 4 %, предпочтительно более чем на 6 %. В предпочтительном варианте осуществления способ направлен на снижение коэффициента конверсии корма, рассчитанного за определенный период, на 1-12 %, предпочтительно на 2-6 %. Специалист в данной области техники может определить снижение коэффициента конверсии корма, рассчитанного за определенный период, путем рутинных экспериментов, например, эксперимента in vivo с использованием контрольной группы.

В вариантах осуществления изобретения способ может быть направлен на увеличение среднесуточного прироста массы, рассчитанного за определенный период, такого как период введения добавки или продолжительность жизни, предпочтительно период введения добавки, более чем на 1 %, предпочтительно более чем на 2 %, предпочтительно более чем на 4 %, предпочтительно более чем на 6 %. В предпочтительном варианте осуществления способ направлен на увеличение среднесуточного прироста массы, рассчитанного за определенный период, на 1-12 %, предпочтительно на 2-6 %. Специалист в данной области техники может определить увеличение среднесуточного прироста массы, рассчитанного за определенный период, путем рутинных экспериментов, например, эксперимента in vivo с использованием контрольной группы.

В вариантах осуществления изобретения предложен способ, как определено в настоящем документе, где указанный способ осуществляется с целью улучшения или поддержания здоровья животного.

Следовательно, в вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, где животное, подлежащее лечению, представляет собой животное, страдающее от расстройства или патологии или подверженное риску их развития. Кроме того, в вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, для терапевтического и/или профилактического лечения расстройства или патологии у животного.

В частности, в вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, где животное, подлежащее лечению, представляет собой животное, страдающее от патогенной инфекции или подверженное риску ее развития, предпочтительно патогенной кишечной инфекции, более предпочтительно патогенной инфекции слепой кишки и/или толстой кишки. В вариантах осуществления изобретения предложен способ, как определено в настоящем документе, для лечения и/или предупреждения патогенной инфекции, предпочтительно патогенной кишечной инфекции, более предпочтительно патогенной инфекции слепой кишки и/или толстой кишки. Согласно изобретению указанный патоген может быть выбран из бактерий, эймерий, вирусов и грибов, более предпочтительно указанный патоген выбран из бактерий, наиболее предпочтительно из Clostridium acetobutylicum, Escherichia coli, Streptococcus cremoris, Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Clostridium perfringens, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Lawsonia intracellullaris, Brachyspira hyodysenteriae, Enterococcus caecorum, Streptococcus suis, Salmonella enteritidis и их комбинаций, предпочтительно Clostridium perfringens, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Lawsonia intracellullaris, Brachyspira hyodysenteriae, Enterococcus caecorum, Streptococcus suis, Salmonella enteritidis и их комбинаций.

В варианте осуществления предложен способ, как определено в настоящем документе, где животное, подлежащее лечению, представляет собой животное, страдающее нарушения кишечной флоры или подверженное риску его развития, в частности, нарушений микрофлоры слепой кишки и/или толстой кишки. В вариантах осуществления изобретения предложен способ, как определено в настоящем документе, для улучшения микрофлоры кишечника животного и/или для поддержания здоровья микрофлоры кишечника у животного, в частности, для улучшения микрофлоры слепой кишки и/или толстой кишки, и/или для поддержания здоровья микрофлоры слепой кишки и/или толстой кишки. В вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, которые приводят к и/или направлены на увеличение микробного числа бактерий рода Lactobacillus или Bifidobacterium в желудочно-кишечном тракте, предпочтительно в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта, предпочтительно в слепой кишке или толстой кишке. В вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, которые приводят и/или направлены на увеличение отношения микробных чисел бактерий рода Lactobacillus или Bifidobacterium по сравнению с микробными числами бактерий семейства Enterobacteriaceae в желудочно-кишечном тракте, предпочтительно нижнем отделе желудочно-кишечного тракта, предпочтительно слепой кишке или толстой кишке. В вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, которые приводят к и/или направлены на увеличение отношения микробных чисел бактерий рода Lactobacillus или Bifidobacterium по сравнению с микробными числами бактерий Salmonella рода в желудочно-кишечном тракте, предпочтительно в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта, предпочтительно в слепой кишке или толстой кишке. В вариантах осуществления изобретения предложены способы, как определено в настоящем документе, которые приводят к и/или направлены на улучшение микрофлоры кишечника, включающие увеличение отношения микробных чисел бактерий рода Lactobacillus или Bifidobacterium по сравнению с микробными числами бактерий рода Salmonella в желудочно-кишечном тракте, предпочтительно в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта, предпочтительно в слепой кишке или толстой кишке, где отношение аппроксимируют путем определения микробного числа одного вида бактерий, репрезентативного для каждого рода, и расчета отношения с использованием микробного числа репрезентативных бактерий. В соответствии с такими вариантами осуществления уменьшение или увеличение микробного числа или отношения микробных чисел следует толковать в широком смысле и, например, можно понимать как означающее одно или более из следующего:

- уменьшение или увеличение числа колониеобразующих единиц (КОЕ), определенного с использованием подходящего метода, известного специалисту в данной области техники, измеренного через 1-10, предпочтительно 1-5, предпочтительно 3 дня после начала лечения, и сравниваемого с группой животных, не подвергавшихся лечению,

- уменьшение или увеличение числа колониеобразующих единиц (КОЕ), определенного с использованием подходящего метода, известного специалисту в данной области техники, измеренное у того же животного (животных) до лечения и через 1-10, предпочтительно 1-5, предпочтительно 3 дня после начала лечения, или

- любой другой метод, известный специалисту в данной области техники, для определения влияния введения в корм добавки на основе сложного эфира полисахарида и масляной кислоты согласно изобретению.

Дополнительный аспект настоящего изобретения направлен на применение бутирилового сложного эфира полисахарида, как определено в настоящем документе, и/или кормовой композиции, содержащей указанный бутириловый сложный эфир полисахарида, как определено в настоящем документе, в способах лечения, как определено выше в настоящем документе.

Дополнительный аспект настоящего изобретения направлен на применение бутирилового сложного эфира полисахарида, как определено в настоящем документе, и/или кормовой композиции, содержащей указанный бутириловый сложный эфир полисахарида, как определено в настоящем документе, для изготовления композиции для применения в способах лечения, как определено выше в настоящем документе.

Дополнительный аспект настоящего изобретения направлен на бутириловый сложный эфир полисахарида, как определено в настоящем документе, и/или кормовую композицию, содержащую указанный бутириловый сложный эфир полисахарида, как определено в настоящем документе, для применения в способах лечения, как определено выше в настоящем документе.

Дополнительный аспект изобретения направлен на применение бутирилового сложного эфира полисахарида, как определено в настоящем документе, в качестве компонента или ингредиента корма для животных.

Дополнительный аспект изобретения относится к способу получения композиции корма для животных, как описано в настоящем документе, включающему:

- обеспечение первого компонента корма для животных,

- обеспечение бутиратного сложного эфира полисахарида, и

- смешивание первого компонента корма для животных со сложным бутиратным эфиром полисахарида до получения однородной смеси.

В варианте осуществления указанный способ включает:

- обеспечение бутиратного сложного эфира полисахарида,

- смешивание первого компонента корма для животных со бутиратным сложным эфиром полисахарида до получения однородной смеси, и

- гранулирование указанной гомогенной смеси.

Таким образом, изобретение было описано со ссылкой на отдельные варианты осуществления, обсуждаемые выше. Следует понимать, что для этих вариантов осуществления допускаются различные модификации и альтернативные формы, хорошо известные специалистам в данной области техники. Многие модификации в дополнение к тем, которые описаны выше, могут быть внесены в структуры и методы, описанные в настоящем документе, без отклонения от сущности и объема изобретения. Соответственно, хотя были описаны конкретные варианты осуществления, они являются только примерами и не имеют ограничительного характера в отношении объема изобретения. Кроме того, для правильного понимания данного документа и приведенной в нем формулы изобретения следует понимать, что глагол «содержать» и его спряжения используется в его неограничивающем смысле для обозначения того, что элементы, следующие за словом, включены, но специально не упомянутые элементы не исключены. Кроме того, указание на элемент в единственном числе не исключает возможности того, что присутствует более одного элемента, если контекст явно не требует наличия одного и только одного из элементов. Таким образом, единственное число обычно означает «по меньшей мере один». Следующие примеры предлагаются только для иллюстративных целей и никоим образом не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1: концентрации бутирата, измеренные в примере 1 - инокулят подвздошной кишки.

Фиг. 2: концентрации бутирата, измеренные в примере 1 - инокулят толстой кишки.

Фиг. 3: концентрации бутирата, измеренные в примере 1 - инокулят слепой кишки.

Фиг. 4: концентрации бутирата, измеренные в примере 2 - толстая кишка.

Примеры

Пример 1. Анализ ферментации in vitro

Чтобы оценить способность бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению увеличивать концентрацию бутирата в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) животных, был проведен анализ ферментации in vitro, где инокулировали бактерии из ЖКТ цыплят-бройлеров вместе с продуктом согласно изобретению, положительным контролем и отрицательным контролем.

Среда

1 литр среды состоит из 0,6 г KCL, 0,6 г NaCl, 0,2 г CaCl2⋅2H₂O, 0,5 г MgSO₄⋅7H₂O, 1,5 г буфера Pipes, 0,54 г NH₄Cl, 1,0 г триптиказы, 1 мл раствора резазурина (0,2 г резазурина на 200 мл дистиллированной воды), 10 мл «раствора микроэлементов», 12 мл раствора витаминов/фосфатов, 10 мл раствора гемина (0,1 г гемина/1 л дистиллированной воды), 4 мг/мл NaHCO₃ и 1 мг/мл цистеина HCl.

- Раствор микроэлементов

Раствор 0,025 г CuCl⋅2H₂O, 0,020 г FeSO₄⋅7H₂O, 0,025 ZnCl₂, 0,025 г CuCl₂⋅H2O, 0,050 г CoCl₂⋅6H₂O, 0,050 г SeO₂, 0,250 г NiCl₂⋅6H₂O, 0,250 г Na₂MoO₄⋅2H₂O, 0,0314 г NaVO₃, 0,250 H₃BO₃/1 л 0,02 M HCI

- Раствор витаминов/фосфатов

0,0204 г биотина, 0,0205 г фолиевой кислоты, 0,1640 г D-пантотената кальция, 0,1640 г никотинамида, 0,1640 рибофлавина, 0,1640 г тиамина HCl, 0,1640 г пиридоксина HCl, 0,0204 г пара-аминобензойной кислоты, 0,0205 цианокобаламина (витамина B12) на 1 л дистиллированной воды, содержащей 54,7 г KH₂PO₄.

Инокулят

Был взят образец кишечника из подвздошной кишки, толстой кишки и слепой кишки ЖКТ 4-недельного бройлера Ross 408. Инокулят готовили одинаково для каждого сегмента. Сразу после препарирования образцы помещали в анаэробные условия с температурой 37°С (анаэробная камера, Ruskinn Technology, Бридгенд, Великобритания). Содержимое взвешивали для каждого сегмента и разбавляли в соотношении 1:9 предварительно нагретым (37°С) анаэробным стерильным натрий-фосфатным буфером. После гомогенизации добавляли тестируемые продукты и разбавленный материал инокулировали в соотношении 1:10 в вышеописанную среду.

Исследуемый материал

Как показано в таблице ниже, три различных материала были протестированы на их способность увеличивать концентрацию бутирата в ЖКТ. Все тесты проводили при конечной концентрации 0,5 % мас./об.

В качестве репрезентативного бутирилового сложного эфира полисахарида согласно изобретению использовали ацетобутират целлюлозы. Ксилоолигосахариды были включены в качестве положительного контроля из-за их известного пребиотического действия на бактерии, продуцирующие бутират. Чтобы оценить влияние главной цепи целлюлозы на концентрацию бутирата, был также испытан отрицательный контроль, состоящий из целлюлозы.

Тест	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Ацетобутират целлюлозы (CAB)	Acros Organics®	Содержание бутирила 50-54 %, содержание ацетила менее 4 %
2	Ксилоолигосахариды (XOS)	Longlive®	35 % XOS
3	Целлюлоза	Sigma-Aldrich®

Измерение концентрации бутирата

Образцы жидкости собирали в моменты времени 0 ч, через 4 ч, 6 ч и 24 ч после инокуляции для анализа концентрации бутирата с помощью ВЭЖХ-УФ. Использовали протокол экстракции и оборудование, как описано De Baere et al. (Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 80 (2013) 107- 115.

Результаты

На фиг. 1 показаны концентрации бутирата, измеренные для инокулята подвздошной кишки.

На фиг. 2 показаны концентрации бутирата, измеренные для инокулята толстой кишки.

На фиг. 3 показаны концентрации бутирата, измеренные для инокулята слепой кишки.

Результаты ясно показывают, что CAB способен значительно увеличивать концентрацию бутирата относительно концентрации бутирата, измеренной для отрицательного контроля.

Пример 2. Определение концентрации бутирата в толстой кишке сельскохозяйственных птиц in vivo

Чтобы оценить способность бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению увеличивать концентрацию бутирата в нижнем отделе желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) животных, был проведен эксперимент in vivo. Продукт согласно изобретению добавляли в корм для сельскохозяйственной птицы, определяли концентрацию бутирата в толстой кишке и сравнивали с результатами, полученными для других препаратов или продуктов с отсроченным высвобождением.

Животные

В этом испытании корма использовали цыплят-бройлеров Ross 308. 1-дневных цыплят получали из коммерческого инкубатория и содержали в изоляции. Все экспериментальные группы были размещены в одной комнате в отдельных клетках с подстилкой на полу. 60 цыплят были разделены на восемь групп по 7 или 8 цыплят в каждой (включая контрольную группу).

Тестируемые кормовые композиции

Готовили семь различных тестируемых кормовых композиций путем смешивания тестируемых продуктов, перечисленных в приведенной ниже таблице, с коммерчески доступной мешанкой для бройлеров (Versele-Laga, Бельгия) в концентрации 3 г бутирата натрия на кг корма. Тестируемый корм был впоследствии брикетирован (без пара), чтобы избежать селективного потребления корма. Техника брикетирования, размер брикетов и коммерчески доступный корм для бройлеров были одинаковыми для всех тестируемых продуктов.

Тест	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Контроль - без добавки	НД (Нет данных)	НД
2	Admix 30 Coated®	Nutri-Ad®	30 % бутирата натрия, покрытого пальмовым маслом
3	Бутириловый сложный эфир полисахарида: ацетобутират целлюлозы (CAB)	Acros Organics®	Содержание бутирила 50-54 %, содержание ацетила менее 4 %
4	Полигидроксибутират (Ralstonia)	Metabolix®	100 % гидроксибутират
5	Восковая матрица с 10 % крахмала	Приготовлена самостоятельно	30 % бутирата натрия в кристаллической матрице Lunacera M® и крахмале.
6	Трибутирин	Приготовлен самостоятельно	60 % трибутирина (Proviron) на диоксиде кремния (Caldic, Бельгия)
7	Незащищенный бутират (бутират натрия)	Nutri-Ad®	100 % бутират натрия

Методика эксперимента

На 19, 20 и 21 день жизни измеряли среднесуточное потребление корма на загон. Цыплятам мужского и женского пола в возрасте 22 дней была случайным образом назначена одна из описанных выше композиций тестируемых кормов, и цыплята получали ограничительный рацион (95 % от ранее измеренного среднего потребления) в течение периода 22-27 дней.

В возрасте 28 дней птиц умерщвляли и собирали толстую кишку.

Измерение концентраций бутирата

Один грамм кишечного содержимого толстой кишки каждого цыпленка взвешивали и разбавляли 1 мл дистиллированной воды. После разбавления образцы гомогенизировали и центрифугировали при 13000 об/мин в течение 20 минут и хранили при минус 20°С до экстракции для анализа методом ВЭЖХ-УФ. Использовали протокол экстракции и оборудование, как описано De Baere et al. (Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 80 (2013) 107- 115). Для теста 4, полигидроксибутирата, была измерена концентрация гидроксибутирата, показанная на фиг. 4.

Результаты

Результаты показаны на фиг. 4 в виде концентрации бутирата в миллимолях (мМ)/грамм кишечного содержимого, нанесенного на график для каждой группы лечения. Если кишечного содержимого было недостаточно или экстракция не удавалась, данные для этого измерения не включали.

Результаты ясно показывают, что CAB способен значительно увеличивать концентрацию бутирата в кишечнике относительно концентрации бутирата, измеренной для контроля, или других препаратов или продуктов с отсроченным высвобождением.

Пример 3. Определение постинфекционного присутствия Salmonella в слепой кишке in vivo

Чтобы оценить способность сложных эфиров полисахарида и масляной кислоты согласно настоящему изобретению уменьшать колонизацию Salmonella кишечника животных, инфицированных Salmonella Enteritidis, был проведен эксперимент in vivo. Продукт согласно изобретению добавляли в корм для домашней птицы, определяли присутствие Salmonella Enteritidis в слепой кишке и сравнивали с результатами, полученными для других препаратов или продуктов на основе бутирата с отсроченным высвобождением.

Животные

В этом испытании использовали цыплят-бройлеров Ross 308. 1-дневных цыплят получали из коммерческого инкубатория. Все экспериментальные группы были размещены в одних и тех же условиях в отдельных клетках с подстилкой на полу. 160 цыплят были разделены на восемь групп по 20 цыплят в каждой (включая контрольную группу). Четыре тестируемых кормовых композиции были испытаны в двух параллельных анализах. Все цыплята имели свободный доступ к воде и корму.

Тестируемые кормовые композиции

Готовили четыре различных тестируемых кормовых композиции путем смешивания тестируемых продуктов, перечисленных в приведенной ниже таблице, с коммерчески доступной мешанкой для бройлеров (Versele-Laga, Бельгия) в концентрации 3 г бутирата натрия на кг корма. Тестируемый корм был впоследствии брикетирован (без пара), чтобы избежать селективного потребления корма. Техника брикетирования, размер брикетов и коммерчески доступный корм для бройлеров были одинаковыми для всех тестируемых продуктов.

Тест	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Контроль - без добавки	НД	НД
2	Admix 30 Coated®	Nutri-Ad®	30% бутирата натрия, покрытого пальмовым маслом
3	Восковая матрица с 10% крахмала	Приготовлена самостоятельно	30% бутирата натрия в кристаллической матрице Lunacera M® и крахмале
4	Бутириловый сложный эфир полисахарида: ацетобутират целлюлозы (CAB)	Acros Organics®	Содержание бутирила 50-54%, содержание ацетила менее 4%

Штамм Salmonella

В этом эксперименте использовали штамм Salmonella Enteritidis SE147, хорошо охарактеризованный устойчивый к стрептомицину штамм, выделенный на птицефабрике (Methner et al., 1995). Штамм выращивали в течение 6 ч в среде Луриа-Бертани (LB, Sigma, Сент-Луис, Миссури), после чего определяли число КОЕ на миллиграмм, высевая 10-кратные разведения бактериальной суспензии на ксилоза-лизин-дезоксихолатный агар (XLD, Oxoid, Бейзингсток, Великобритания), содержащий 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma, Сент-Луис, Миссури). Бактериальную суспензию хранили при 4°С во время подсчета на чашках и разводили в PBS (Фосфатно-солевой буфер) для получения желаемой инфицирующей дозы.

Методика эксперимента

Через 17 дней после вылупления всех цыплят перорально инокулировали 10⁵ КОЕ Enteritidis на птицу. На 4 день после инфицирования всех птиц умерщвляли и отбирали образцы слепой кишки для бактериологического анализа. Эксперимент был одобрен этическим комитетом факультета ветеринарной медицины Гентского университета.

Бактериологический анализ

Образцы слепой кишки гомогенизировали в объеме забуференной пептонной воды (BPW, Oxoid, Бейзингсток, Великобритания) и готовили 10-кратные разведения в PBS. Для каждого разведения 6×20 мкл инокулировали на чашки XLD , содержащие 100 мкг/мл стрептомицина. После инкубации в течение ночи при 37°С определяли число КОЕ на грамм ткани. Образцы, которые были отрицательными после прямого посева, предварительно обогащали в течение ночи при 37°С в забуференной пептонной воде (BPW, Oxoid, Basingstoke, UK), после чего все образцы обогащали добавлением 1 мл этой суспензии к 9 мл бульона с тетратионатом бриллиантового зеленого (Oxoid, Бейзингсток, Великобритания). Считали, что образцы, которые были отрицательными по Salmonella после титрования, но положительными после обогащения, содержали 1×10¹ КОЕ/г ткани. Считали, что образцы, которые оставались отрицательными после обогащения, содержали 0 КОЕ/г ткани.

Результаты

Как показано в таблице ниже, введение корма, содержащего бутириловый сложный эфир полисахарида, такой как CAB, обеспечивает значительно улучшенные результаты в отношении колонизации Salmonella слепой кишки по сравнению с другими препаратами или продуктами с отсроченным высвобождением.

Присутствие Salmonella	Контроль	2	3	4
Отрицательный	0	0	0	0
Положительный после обогащения	6	14	13	27
x более 10², менее10³ КОЕ/г	12	8	7	4
x более 10³, менее 10⁴ КОЕ/г	6	14	5	8
Более 10⁴ КОЕ/г	15	4	15	1

Пример 4. Определение постинфекционного присутствия Salmonella в клоакальных мазках in vivo

Чтобы оценить способность бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению уменьшать выделение Salmonella с фекалиями у животных, инфицированных Salmonella Enteritidis, был проведен эксперимент in vivo. Продукт согласно изобретению добавляли в корм для сельскохозяйственной птицы, определяли присутствие Salmonella Enteritidis в клоакальных мазках и сравнивали с результатами, полученными для других препаратов или продуктов на основе бутирата с отсроченным высвобождением.

Животные

В этом испытании использовали цыплят-бройлеров Ross 308. 1-дневных цыплят получали из коммерческого инкубатория. Все экспериментальные группы были размещены в одних и тех же условиях в отдельных клетках с подстилкой на полу. 80 цыплят были разделены на четыре группы по 20 цыплят в каждой (включая контрольную группу). Были протестированы четыре тестовые кормовые композиции, перечисленные ниже. Все цыплята имели свободный доступ к воде и корму.

Тестируемые кормовые композиции

Готовили четыре различных тестируемых кормовых композиций путем смешивания тестируемых продуктов, перечисленных в приведенной ниже таблице, с коммерчески доступной мешанкой для бройлеров (Versele-Laga, Бельгия) в концентрации 3 г бутирата натрия на кг корма. Тестируемый корм был впоследствии брикетирован (без пара), чтобы избежать селективного потребления корма. Техника брикетирования, размер брикетов и коммерчески доступный корм для бройлеров были одинаковыми для всех тестируемых продуктов.

Тест	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Контроль - без добавки	НД	НД
2	Admix 30 Coated®	Nutri-Ad®	30 % бутирата натрия, покрытого пальмовым маслом
3	Восковая матрица с 10 % крахмала	Приготовлена самостоятельно	30 % бутирата натрия в кристаллической матрице Lunacera M® и крахмале.
4	Бутириловый сложный эфир полисахарида и: ацетобутират целлюлозы (CAB)	Acros Organics®	Содержание бутирила 50-54 %, содержание ацетила менее 4 %

Штамм Salmonella

В этом эксперименте использовали штамм Salmonella Enteritidis SE147, хорошо охарактеризованный устойчивый к стрептомицину штамм, выделенный на птицефабрике (Methner et al., 1995). Штамм выращивали в течение 6 ч в среде Луриа-Бертани (LB, Sigma, Сент-Луис, Миссури), после чего определяли число КОЕ на миллиграмм, высевая 10-кратные разведения бактериальной суспензии на ксилоза-лизин-дезоксихолатный агар (XLD, Oxoid, Бейзингсток, Великобритания), содержащий 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma, Сент-Луис, Миссури). Бактериальную суспензию хранили при 4°С во время подсчета на чашках и разводили в PBS для получения желаемой инфицирующей дозы.

Методика эксперимента

Через 17 дней после вылупления всех цыплят перорально инокулировали 10⁵ КОЕ Enteritidis на птицу. За 1 день до инфицирования и в 1 и 3 день после инфицирования брали клоакальные мазки для бактериологических анализов. Эксперимент был одобрен этическим комитетом факультета ветеринарной медицины Гентского университета.

Бактериологический анализ

Клоакальные мазки высевали на чашки XLD, содержащие 100 мкг/мл стрептомицина, и инкубировали в течение ночи при 37°С. Образцы, которые были отрицательными после прямого посева, предварительно обогащали в течение ночи при 37°С в забуференной пептонной воде (BPW, Oxoid, Бейзингсток, Великобритания), после чего образцы обогащали добавлением 1 мл этой суспензии к 9 мл бульона с тетратионатом бриллиантового зеленого (Oxoid, Бейзингсток, Великобритания). Эту суспензию снова инкубировали в течение ночи при 37°С и затем высевали на XLD, содержащий 100 мкг/мл стрептомицина. После инкубации в течение ночи при 37°С определяли число КОЕ на клоакальный мазок. Образцы, которые были отрицательными по Salmonella после титрования, но положительными после обогащения, были обозначены как положительные на наличие Salmonella. Образцы, которые оставались отрицательными после обогащения, были обозначены как отрицательные на наличие Salmonella.

Результаты

Как показано в таблице ниже, введение корма, содержащего бутириловый сложный эфир полисахарида, такой как CAB, обеспечивает значительно улучшенные результаты в отношении выделения Salmonella с фекалиями по сравнению с другими препаратами или продуктами с отсроченным высвобождением.

Дней после инфицирования	Присутствие Salmonella	Контроль	2	3	4
-1	Отрицательный	20	20	20	20
-1	Положительный	0	0	0	0
1	Отрицательный	5	14	17	16
1	Положительный	15	6	3	4
3	Отрицательный	5	14	13	17
3	Положительный	15	6	7	3

Пример 5. Определение показателей роста in vivo

Чтобы оценить способность бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению влиять на параметры роста при неоптимальных методах ведения сельского хозяйства, был проведен эксперимент in vivo. Продукт согласно изобретению добавляли к неполноценному рациону из муки из рапсового жмыха (RSM), определяли влияние на показатели роста и сравнивали с результатами, полученными с другими препаратами или продуктами на основе бутирата с отсроченным высвобождением.

План эксперимента

План эксперимента представлял собой полную блочную рандомизацию. Экспериментальные группы были распределены как 3×2 факториал плюс контроль с 3 препаратами или продуктами на основе бутирата с отсроченным высвобождением и двумя уровнями введения добавки (0,25 или 1 г бутирата/кг потребленного корма). Каждая экспериментальная группа была представлена шесть раз, в результате чего было получено в общей сложности шесть блоков. Рационы были основаны на стартерном, ростовом и заключительном рационах RSM-кукуруза-пшеница, подробно описанных в таблицах ниже. Экспериментальные стартерные и ростовые рационы были получены из основного рецепта путем добавления кормовых добавок вместо соевого масла.

	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Контроль - без добавки	НД	НД
2	Admix 30 Coated®	Nutri-Ad®	30% бутирата натрия, покрытого пальмовым маслом
3	Восковая матрица	Приготовлена самостоятельно	30% бутирата натрия в кристаллической матрице Lunacera M®.
4	Бутириловый сложный эфир полисахарида: ацетобутират целлюлозы (CAB)	Acros Organics®	Содержание бутирила 50-54%, содержание ацетила менее 4%

Стартерная композиция

Продукт	1-CTR	2-H	2-L	3-H	3-L	4-H	4-L
Ингредиент
Кукуруза	295,96	295,96	295,96	295,96	295,96	295,96	295,96
Пшеница	200	200	200	200	200	200	200
Мука из рапсового жмыха	350	350	350	350	350	350	350
Рыбная мука	75	75	75	75	75	75	75
Соевое масло	55,29	51,96	54,46	51,96	54,46	53,29	54,79
Премикс	5	5	5	5	5	5	5
Измельченная известь	9	9	9	9	9	9	9
Монокальцийфосфат	5,5	5,5	5,5	5,5	5,5	5,5	5,5
Соль	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9	0,9
NaHCO3	2,8	2,8	2,8	2,8	2,8	2,8	2,8
L-лизин HCl	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Natuphos 1000G	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05
Admix 30 Coated®	0	3,33	0,83	0	0	0	0
Восковая матрица	0	0	0	3,33	0,83	0	0
CAB	0	0	0	0	0	2	0,5
ИТОГО	1000	1000	1000	1000	1000	1000	1000

Ростовая композиция

Продукт	1-CTR	2-H	2-L	3-H	3-L	4-H	4-L
Ингредиент
Кукуруза	215,35	215,35	215,35	215,35	215,35	215,35	215,35
Пшеница	300	300	300	300	300	300	300
Мука из рапсового жмыха	350	350	350	350	350	350	350
Рыбная мука	55	55	55	55	55	55	55
Соевое масло	63,00	59,67	62,17	59,67	62,17	61,00	62,50
Премикс	5	5	5	5	5	5	5
Измельченная известь	8	8	8	8	8	8	8
Соль	1,2	1,2	1,2	1,2	1,2	1,2	1,2
NaHCO3	1,4	1,4	1,4	1,4	1,4	1,4	1,4
L-лизин HCl	1	1	1	1	1	1	1
Natuphos 1000G	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05	0,05
Admix 30 Coated®	0	3,33	0,83	0	0	0	0
Восковая матрица	0	0	0	3,33	0,83	0	0
CAB	0	0	0	0	0	2	0,5
ИТОГО	1000	1000	1000	1000	1000	1000	1000

Заключительная композиция

Продукт	1-CTR
Ингредиент
Кукуруза	229,35
Пшеница	300
Мука из рапсового жмыха	350
Рыбная мука	40
Соевое масло	64,00
Премикс	5
Измельченная известь	7,5
Соль	1,2
NaHCO3	1,4
L-лизин HCl	1,5
Natuphos 1000G	0,05
Бутират с жировым покрытием	0
Бутират с восковым покрытием	0
CAB	0
ИТОГО	1000

Премикс, предоставляемый на кг рациона: витамин А, 12,000 МЕ (Международная единица); витамин D3, 2,500 МЕ; витамин Е, 50 мг; витамин В2, 7,5 мг; витамин В6, 3,5 мг; витамин В1, 2,0 мг; витамин K3, 1,5 мг; витамин В12, 20 мкг; хлорид холина, 460 мг; антиоксидант (oxytrap PXN), 125 мг; ниацин, 35 мг; пантотеновая кислота, 12 мг; биотин 0,2 мг; фолиевая кислота, 1 мг; Mn, 85 мг; Fe, 80 мг; Zn, 60 мг; Cu, 12 мг; I, 0,8 мг; Se, 0,15 мг.

Стартерные рационы давали с 0 по 21 день, ростовые рационы - с 22 по 35 день, а заключительный рацион давали с 36 дня до забоя на 42 день. Рационы были разработаны для удовлетворения или превышения потребностей цыплят-бройлеров и были произведены компанией Research Diet Services (Вибби-Дурстек, Нидерланды).

Птицы и методики экспериментов

Эксперимент проводили на исследовательской ферме Carus Вагенингенского университета. В общей сложности 357 самцов однодневных бройлеров (исходная масса тела 47 г; Ross 308, Aviagen Group, Ньюбридж, Великобритания) были получены из коммерческого инкубатория (Morren Breeders BV, Люнтерен, Нидерланды). По прибытии каждую птицу взвешивали и относили к категории по массе тела (небольшие - менее μ-0,68×σ; средние - более μ-0,68×σ и менее μ+0,68×σ; крупные - более μ+0,68×σ). Птицы каждой категории были случайным образом распределены в один из 42 загонов для содержания цыплят двух комнат с контролируемым микроклиматом. В каждом загоне содержали от 8 до 9 птиц, и он имел размер 1,85×1 м (Д × Ш) и содержал шест. В качестве материала для подстилки была использована древесная стружка. Температуру окружающей среды поддерживали на уровне 32°С до 3 дня, а затем постепенно снижали до 22°С на 23 день. Световой день 23L:1D применяли до 3 дня, а затем изменяли на 16L:8D. Птицам был предоставлен свободный доступ к корму и воде. Массу птиц в загоне, а также потребление корма на загон регистрировали на 21, 35 и 42 день. Смертность контролировали ежедневно и регистрировали массу тела погибших птиц.

Результаты

В приведенных ниже таблицах показаны коэффициент конверсии корма (FCR), среднесуточный прирост массы (ADG) и среднесуточное потребление корма (ADFI), а также показатель смертности. FCR рассчитывали на уровне загона с использованием ADG и ADFI. Результаты также пересчитывали как процент изменения относительно их соответствующего контроля.

В таблицах ниже приведены результаты по смертности, среднесуточному приросту массы (ADG), среднесуточному потреблению корма (ADFI) и коэффициенту конверсии корма (FCR), полученные в этом эксперименте. Данные демонстрируют, что добавление в корм бутирилового сложного эфира полисахарида, такого как CAB, обеспечивает превосходные результаты по показателям роста по сравнению с другими препаратами или продуктами на основе бутирата с отсроченным высвобождением. Бутириловый сложный эфир полисахарида согласно настоящему изобретению обеспечивает высоко востребованную комбинацию улучшенных ADG и ADFI в сочетании со сниженным FCR и смертностью в течение периода введения добавки, не демонстрируя нежелательных явлений в течение заключительного периода откорма.

Результаты также демонстрируют, что в стартовой фазе и в фазе выращивания увеличение включения сложного эфира и масляной кислоты (4-L против 4-H) приводит к повышению продуктивности (в отличие от эффекта, наблюдаемого для восковых композиций 3-L против 3-H).

Влияние диетической терапии на показатели производительности в стартовом периоде, периоде выращивания и заключительном периоде откорма.

Продукт	Диетическая терапия
	1 CTR	2		3		4
	1 CTR	L	H	L	H	L	H
0-21 день
Смертность, %	5,9	2,0	0,0	0,0	0,0	0,0	0,0
ADG, г/птица	39,9	39,7	42,0	41,8	40,4	40,6	41,4
ADFI, г/птица	54,5	53,8	56,7	56,6	54,2	55,3	56,9
FCR, г:г	1,37	1,36	1,35	1,35	1,34	1,36	1,38
22-35 день
Смертность, %	0,0	0,0	3,9	3,9	2,0	0,0	0,0
ADG, г/птица	89,8	90,8	90,5	89,4	87,6	93,8	96,4
ADFI, г/птица	140,3	139,9	154,0	147,0	139,0	141,0	146,3
FCR, г:г	1,58	1,55	1,73	1,65	1,59	1,51	1,52
35-42 день
Смертность, %	4,2	0,0	0,0	2,0	4,0	0,0	2,0
ADG, г/птица	131,9	107,3	125,0	120,3	116,4	115,7	116,9
ADFI, г/птица	224,1	197,6	211,5	198,6	214,7	213,0	211,2
FCR, г:г	1,71	1,85	1,71	1,66	1,84	1,85	1,81

Влияние диетической терапии на показатели производительности в течение периода введения добавки и всего периода эксперимента.

Продукт	Диетическая терапия
	1 CTR	2		3		4
	1 CTR	L	H	L	H	L	H
Период введения добавки (0-35 день)
Смертность, %	7,8	2,0	3,9	5,9	3,9	0,0	0,0
ADG, г/птица	59,51	60	61,3	60,8	59,1	61,9	63,4
ADFI, г/птица	88,26	88	95,5	92,5	87,8	89,6	92,7
FCR, г:г	1,49	1,47	1,56	1,53	1,49	1,45	1,46
Весь период эксперимента (0-42 день)
Смертность, %	9,8	2,0	3,9	5,9	5,9	0,0	2,0
ADG, г/птица	70,42	67,9	71,6	70,3	68,4	70,9	72,3
ADFI, г/птица	108,9	106	114	110	108	110	112
FCR, г:г	1,55	1,57	1,60	1,56	1,58	1,56	1,56

Влияние диетической терапии на показатели производительности, пересчитанные как процент изменения относительно их соответствующего контроля в течение периода введения добавки (0-35 день)

	2		3		4
	L	H	L	H	L	H
ADG, % изменения	0,9	3,0	2,0	Минус 0,7	3,8	6,1
ADFI, % изменения	Минус 0,3	7,6	4,6	Минус 0,6	1,5	4,7
FCR, % изменения	Минус 1,4	4,8	2,3	Минус 0,2	Минус 2,7	Минус 1,8

Пример 6. Определение коэффициента конверсии корма in vivo

Чтобы оценить способность бутириловых сложных эфиров полисахарида согласно настоящему изобретению влиять на коэффициент конверсии корма при неоптимальных методах ведения сельского хозяйства, был проведен эксперимент in vivo. Продукт согласно изобретению добавляли к неполноценному рациону из муки из рапсового жмыха (RSM), определяли влияние на показатель конверсии корма, проводили статистический анализ и сравнивали с результатами, полученными с другими препаратами или продуктами на основе (гидрокси)бутирата с отсроченным высвобождением.

План эксперимента

План эксперимента представлял собой полную блочную рандомизацию. Экспериментальные группы были распределены по 10 птиц/загон × 8 повторений × 4 вида лечения: контрольный и 3 препарата или продукта на основе бутирата с отсроченным высвобождением (содержали 1 г (гидрокси)бутирата/кг корма). Рационы были основаны на стартерном и ростовом рационах RSM-кукуруза-пшеница, подробно описанных в таблицах ниже. Экспериментальные стартерные и ростовые рационы были получены из основного рецепта путем добавления кормовых добавок вместо соевого масла.

	Продукт	Поставщик	Характеристики
1	Контроль - без добавки	НД	НД
2	Admix 30 Coated®	Nutri-Ad®	30 % бутирата натрия, покрытого пальмовым маслом
3	Полигидроксибутират (PHB)	Nutri-Ad®	0,10 % биомассы бутирата
4	Бутириловый сложный эфир полисахарида: ацетобутират целлюлозы (CAB)	Fisher-Scientific, Waltham, USA	Содержание бутирила 50-54 %, содержание ацетила 4 %

Стартерная композиция

Продукт	1-CTR	2	3	4
Ингредиент
Кукуруза	296	296	296	296
Пшеница	200	200	200	200
Мука из рапсового жмыха	350	350	350	350
Рыбная мука	75	75	75	75
Соевое масло	55,3	52,0	54,3	53,5
Премикс	5	5	5	5
Измельченная известь	9	9	9	9
Монокальцийфосфат	5,5	5,5	5,5	5,5
Соль	0,9	0,9	0,9	0,9
NaHCO3	2,8	2,8	2,8	2,8
L-лизин HCl	0,5	0,5	0,5	0,5
Natuphos 1000G	0,05	0,05	0,05	0,05
Admix 30 Coated®	0	3,33	0	0
PHB	0	0	1	0
CAB	0	0	0	1,8
ИТОГО	1000	1000	1000	1000

Ростовая композиция

Продукт	1-CTR	2	3	4
Ингредиент
Кукуруза	215,4	215,4	215,4	215,4
Пшеница	300,0	300,0	300,0	300,0
Мука из рапсового жмыха	350,0	350,0	350,0	350,0
Рыбная мука	55,0	55,0	55,0	55,0
Соевое масло	63,0	59,7	62,0	61,2
Премикс	5	5	5	5
Измельченная известь	8	8	8	8
Монокальцийфосфат	-	-	-	-
Соль	1,2	1,2	1,2	1,2
NaHCO3	1,4	1,4	1,4	1,4
L-лизин HCl	1	1	1	1
Natuphos 1000G	0,05	0,05	0,05	0,05
Admix 30 Coated®	0	3,33	0,00	0
PHB	0	0	1	0
CAB	0	0	0	1,8
ИТОГО	1000	1000	1000	1000

Премикс приведен на кг рациона: витамин А, 12,000 МЕ; витамин D3, 2,500 МЕ; витамин Е, 50 мг; витамин В2, 7,5 мг; витамин В6, 3,5 мг; витамин В1, 2,0 мг; витамин К3, 1,5 мг; витамин В12, 20 мкг; хлорид холина, 460 мг; антиоксидант (oxytrap PXN), 125 мг; ниацин, 35 мг; пантотеновая кислота, 12 мг; биотин 0,2 мг; фолиевая кислота, 1 мг; Mn, 85 мг; Fe, 80 мг; Zn, 60 мг; Cu, 12 мг; I, 0,8 мг; Se, 0,15 мг.

Стартерные рационы давали с 0 по 21 день, а ростовые рационы - с 22 по 35 день. Рационы были разработаны для удовлетворения или превышения потребностей цыплят-бройлеров и были произведены компанией Research Diet Services (Вибби-Дурстек, Нидерланды).

Птицы и методики экспериментов

Эксперимент проводили в экспериментальном птичнике № 12 ILVO-DIER (Бург, Мерелбеке, Бельгия). В общей сложности 320 самцов однодневных бройлеров (Ross 308, Aviagen Group, Ньюбридж, Великобритания) были получены из коммерческого инкубатория (Belgabroed NV, Мерксплас, Бельгия). По прибытии птицы были случайным образом распределены в один из 32 загонов для содержания цыплят в одной комнате с контролируемым микроклиматом. Каждый загон содержал 10 птиц и имел размер 2,1×1 м. Температуру окружающей среды поддерживали на уровне 29-30°С до 7 дня, а затем снижали на 2°С в неделю. Световой день 23L:1D применяли до 7 дня, а затем изменяли на 16L:8D. Птицам был предоставлен свободный доступ к корму и воде. Массы каждой птицы и массы в загоне, а также потребление корма на загон регистрировали каждую неделю.

Статистический анализ

Параметры продуктивности анализировали с использованием PROC GLM от SAS (версия 9.3, SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина) с использованием следующей модели

Y_ijk = μ+D_i+W_j+B_k+AW_ij+ε_ijk

где Y_ijk - наблюдаемый отклик k-го параллельного анализа (k = 1-8), получавшего i-й рацион (i = CTR, FCB, PHB, CAB) в течение j-й недели (j = 1-5), D_i - i-й зафиксированное влияние рациона, B_k - k-й зафиксированное влияние блока, W_j - j-й случайный эффект периода измерения, а AD_ij - эффект взаимодействия между рационом и периодом измерения, и ε_ijk - член остаточной ошибки k-го параллельного анализа, получавшего i-й район в j-й период измерения. При установлении значительного влияния рациона средства разделяли с использованием апостериорного критерия Тьюки. При установлении значительного взаимодействия между рационом и периодом измерения средства разделяли с использованием апостериорного критерия Тьюки, а срок взаимодействия был разделен на неделю с помощью теста простого эффекта.

Результаты

Влияние введения бутирата в качестве пищевой добавки на коэффициент конверсии корма (FCR) в течение периода введения добавки в 0-35 дни показано в таблице ниже.

Данные демонстрируют, что добавление в корм сложного эфира полисахарида и масляной кислоты, такого как CAB, обеспечивает превосходный коэффициент конверсии корма по сравнению с другими препаратами или продуктами на основе бутирата с отсроченным высвобождением. Улучшение коэффициента конверсии корма для CAB было статистически значимым.

Влияние введения бутирата в качестве пищевой добавки на показатели роста в течение всего 0-35 дневного периода

Продукт					Объединенные SEM
Продукт	1-CTR	2	3	4		Рацион	Неделя	Блок	Рацион×неделя
BWG	48,41	48,26	48,36	48,56	1,62	0,9981	Менее 0,0001	0,2511	0,0032
VFI	79,15	76,52	77,42	76,08	1,93	0,6898	Менее 0,0001	0,5882	0,5192
FCR	1,64	1,59	1,60	1,57	0,02	0,0164	Менее 0,0001	0,7997	0,0194

Claims

1. Нетерапевтический способ в отношении сельскохозяйственных животных для повышения эффективности производства продуктов животноводства,

где сельскохозяйственные животные выбраны из моногастричных животных с ферментацией в нижней части кишечника, которые имеют хорошее состояние здоровья,

путем перорального введения бутирилового сложного эфира целлюлозы, дополнительно содержащего ацетильные группы сложного эфира, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 2000 до 1000000 г/моль.

2. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 5000 до 500000 г/моль.

3. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 7000 до 250000 г/моль.

4. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 10000 до 100000 г/моль.

5. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 12000 до 50000 г/моль.

6. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 13000 до 25000 г/моль.

7. Нетерапевтический способ по п. 1, где бутириловый сложный эфир целлюлозы характеризуется среднечисловой молярной массой от 15000 до 17000 г/моль.

8. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-7, где среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено составляет от 0,1 до 4.

9. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-7, где среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено составляет от 1 до 3,5.

10. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-7, где среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено составляет от 1,75 до 3,25.

11. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-7, где среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено составляет от 2,25 до 3.

12. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-7, где среднее количество бутирильных групп на моносахаридное звено составляет от 2,5 до 2,95.

13. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-12, где бутириловый сложный эфир полисахарида характеризуется содержанием ацетила по меньшей мере 1 мас.% относительно общей массы бутирилового сложного эфира целлюлозы.

14. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-13, где бутириловый сложный эфир полисахарида характеризуется содержанием ацетила по меньшей мере 2 мас.% относительно общей массы бутирилового сложного эфира целлюлозы.

15. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-13, где бутириловый сложный эфир полисахарида характеризуется содержанием ацетила по меньшей мере 3 мас.% относительно общей массы бутирилового сложного эфира целлюлозы.

16. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-13, где бутириловый сложный эфир полисахарида характеризуется содержанием ацетила по меньшей мере 4 мас.% относительно общей массы бутирилового сложного эфира целлюлозы.

17. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-16, где животное представляет собой вид сельскохозяйственной птицы или свиньи.

18. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-17, который предназначен для снижения коэффициента конверсии корма.

19. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-18, который предназначен для увеличения живой массы.

20. Нетерапевтический способ по любому из пп. 1-19, который предназначен для увеличения среднесуточного прироста массы.