RU2848325C1

RU2848325C1 - Соединение с двойной агонистической активностью в отношении рецепторов glp-1 и gip и его применение

Info

Publication number: RU2848325C1
Application number: RU2022127800A
Authority: RU
Inventors: Фанчжоу У; Лэй Ван; Сюйчао ХУАН; Жань У; Жэньчжи ЛЮ; Хайцин ХУА
Original assignee: Цзянсу Хэнжуй Фармасьютикалс Ко., Лтд.
Priority date: 2020-05-29
Filing date: 2021-05-28
Publication date: 2025-10-17

Abstract

Группа изобретений относится к области биологической фармацевтики. Предложены соединения с двойной агонистической активностью в отношении рецепторов глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1) и глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP) и их применение. Соединения обладают эффективностью в снижении уровня глюкозы в крови и снижении массы тела, также обладают высокой стабильностью в плазме и имеют фармакокинетические характеристики для подкожной инъекции один раз в неделю. Соединения могут быть использованы для лечения метаболических заболеваний, таких как ожирение, диабет II типа и неалкогольная жировая болезнь печени. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 3 ил., 20 табл., 11 пр.

Description

Настоящее изобретение испрашивает приоритет по заявке на патент Китая № 202010472577,8, поданной 29 мая 2020 года, и заявке на патент Китая № 202110335100.X, поданной 29 марта 2021 г.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области биологической фармацевтики, в частности к соединению и его фармацевтически приемлемой соли, оказывающим двойное агонистическое действие на глюкагоноподобный пептид-1 (GLP-1) человека и глюкозозависимый инсулинотропный полипептидный (GIP) рецептор человека, которые могут быть использованы для лечения метаболических заболеваний, таких как диабет и/или ожирение.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Диабет - это метаболическое заболевание, при котором метаболизм глюкозы, белков и липидов в организме человека нарушается из-за недостаточной секреции инсулина в организме. Диабет в основном классифицируется на инсулинозависимый диабет (диабет I типа) и инсулинонезависимый диабет (диабет II типа) в соответствии с различиями в его патологических механизмах. Среди них 90-95% больных сахарным диабетом во всем мире являются инсулинонезависимыми диабетиками. Инсулинонезависимый диабет - это длительное хроническое метаболическое заболевание, вызванное нарушением функции β-клеток поджелудочной железы и длительной инсулинорезистентностью, которое в первую очередь характеризуется дефицитом уровня инсулина в организме и высокими концентрациями глюкозы в плазме крови. Исследования показали, что инсулиннезависимый диабет связан с высоким риском появления различных осложнений у пациентов и часто может привести к сердечно-сосудистым заболеваниям, почечной недостаточности, слепоте, ампутации и множеству других осложнений.

Одной из основных причин инсулинонезависимого диабета является ожирение. Ожирение определяется как чрезмерное или ненормальное накопление жира в организме, которое наносит ущерб здоровью. Ожирение также можно определить как случай, когда индекс массы тела (ИМТ) человека больше или равен 30 кг/м² в соответствии с ИМТ человека. Рост ожирения может значительно увеличить риск сердечно-сосудистых заболеваний, диабета, скелетно-мышечных расстройств и некоторых видов рака у людей. Кроме того, увеличение индекса массы тела человека также увеличивает риск некоторых неинфекционных заболеваний.

Из-за огромного количества пациентов и значительного экономического бремени, вызванного диабетом и его осложнениями, разработка безопасных и эффективных препаратов для лечения диабета всегда была в центре внимания многих научно-исследовательских институтов и фармацевтических предприятий. В настоящее время лекарства от диабета, одобренные на рынке, в основном включают химически синтезированные низкомолекулярные пероральные гипогликемические препараты, такие как бигуаниды, сульфонамиды, сенсибилизаторы инсулина и α-глюкозиды, и биологически синтезированные инъекционные гипогликемические препараты, такие как рекомбинантный инсулин и его производные. Хотя вышеперечисленные препараты клинически эффективны для контроля уровня глюкозы в плазме крови больных диабетом, их длительное применение часто сопровождается побочными реакциями, такими как увеличение массы тела больных, что в свою очередь приводит к повышенному риску потенциальных сердечно-сосудистых заболеваний и снижению соблюдения режима применения у больных. Учитывая потенциальную патологическую связь между диабетом и ожирением и потенциальный риск осложнений, вызванных ожирением, разработка препарата, который может не только эффективно контролировать уровень глюкозы в крови, но и соответствующим образом снижать вес пациентов с диабетом, имеет несколько значений для эффективного лечения диабета и снижения потенциального риска осложнений, и поэтому является лучшим направлением для клинической разработки.

Глюкагоноподобный пептид-1 (GLP-1) представляет собой регуляторный пептид желудочно-кишечного тракта, содержащий 30 или 31 аминокислотный остаток. Секреция GLP-1 в основном регулируется L-клетками тонкой кишки в ответ на поглощение питательных веществ и колебания уровня глюкозы в крови in vivo. После приема пищи L-клетки тонкой кишки выделяют большое количество GLP-1 для усиления эндокринной функции поджелудочной железы. Полипептид GLP-1 выполняет свои физиологические функции контроля уровня глюкозы в крови и снижения аппетита in vivo в основном за счет активации рецепторов GLP-1, распределенных на поверхности клеточной мембраны. Механизм действия GLP-1 для контроля уровня глюкозы в крови in vivo заключается главным образом в активации рецепторов GLP-1, распределенных в β-клетках поджелудочной железы, чтобы способствовать биосинтезу и секреции инсулина. Между тем, полипептид GLP-1 может ингибировать секрецию глюкагона, опорожнение желудка и прием пищи при наличии высокого уровня глюкозы в крови в организме, а также усиливать деградацию глюкозы в организме посредством специфических неврологических действий. Примечательно, что физиологическая функция полипептида GLP-1 для стимулирования секреции инсулина контролируется концентрацией глюкозы в плазме, так что полипептид GLP-1 не вызывает тяжелой и длительной гипогликемии по сравнению с другими препаратами для лечения диабета. Кроме того, в литературе сообщалось, что полипептид GLP-1 и его аналоги оказывают прямое стимулирующее действие на рост, дифференцировку и пролиферацию β-клеток экспериментальных животных, что указывает на то, что полипептид GLP-1 и его аналоги могут защищать панкреатические островки, задерживать развитие диабета и ингибировать апоптоз β-клеток. Полипептид GLP-1 также оказывает потенциальное влияние на ингибирование секреции гастрина и стимулированной приемом пищи желудочной кислоты. Эти характеристики подразумевают, что полипептид GLP-1 также обладает физиологическим эффектом предотвращения пептических язв. Полипептид GLP-1 также может активировать рецепторы GLP-1, распределенные в центральной нервной системе мозга, для повышения сытости, снижения потребления пищи и достижения физиологического эффекта поддержания или снижения массы тела. Таким образом, обширные механизмы действия и физиологические функции полипептида GLP-1 и его аналогов подразумевают, что полипептид GLP-1 является идеальным лекарственным средством для лечения инсулиннезависимого диабета и ожирения при диабете.

Физиологические функции полипептида GLP-1, такие как контроль уровня глюкозы в крови и снижение массы тела, являются перспективными для лечения инсулиннезависимого диабета/ожирения при диабете. Природная GLP-1 имеет плохую лекарственную способность и легко разлагается дипептидилпептидазой-IV (DPP-IV) in vivo и, таким образом, имеет период полувыведения всего 1-2 мин у людей. Перед лицом этой трудности фармацевтическая промышленность сконструировала аналоги GLP-1 длительного действия и их производные путем сайт-направленного мутагенеза аминокислот в сайте ферментативного расщепления, модификации жирных кислот полипептидного скелета и связывания полипептида GLP-1 с различными белковыми/полимерными высокомолекулярными соединениями. Аналоги GLP-1 длительного действия, которые в настоящее время находятся на рынке и широко используются клинически, включают лираглутид (подкожная инъекция один раз в сутки) и дулаглутид и семаглутид (подкожная инъекция один раз в неделю).

Клинически побочные эффекты полипептида GLP-1 и его производных в основном включают тошноту, рвоту и диарею, вызванные желудочно-кишечным трактом. Кроме того, было обнаружено, что полипептид GLP-1 и его производные также могут вызывать тахикардию у субъектов и, в некоторых случаях, повышать риск развития панкреатита у пациентов. Таким образом, дозировка полипептида GLP-1 и его производных ограничена вызываемыми побочными эффектами, поэтому их клиническое применение не может обеспечить полный контроль уровня глюкозы в крови и потерю веса у пациентов.

Глюкозозависимый инсулинотропный полипептид (GIP) и полипептид GLP-1 оба являются инкретинами, которые играют ключевую физиологическую роль в метаболизме глюкозы крови в организме. GIP в основном состоит из 42 аминокислотных остатков в организме и секретируется K-клетками в двенадцатиперстной кишке и прилегающей тощей кишке в ответ на уровень глюкозы в плазме. Полипептиды GIP оказывают свое физиологическое действие путем связывания с рецепторами GIP, распределенными в β-клетках поджелудочной железы, жировой ткани и центральной нервной системы. Подобно полипептиду GLP-1, полипептид GIP может стимулировать секрецию инсулина из β-клеток поджелудочной железы, тем самым снижая концентрацию глюкозы в плазме крови, и может защищать β-клетки поджелудочной железы, тем самым контролируя метаболизм глюкозы в организме. Кроме того, физиологические функции полипептида GIP дополнительно включают активацию рецепторов GIP в жировой ткани, тем самым способствуя метаболизму жира. Внутрижелудочковая инъекция полипептида GIP у мышей может снизить потребление пищи и массу тела подопытных животных, что, по-видимому, предполагает, что полипептид GIP также имеет физиологическую функцию снижения массы тела. Исследования показали, что у пациентов с инсулиннезависимым диабетом действие инкретина полипептида GIP значительно ослаблено, что приводит к отсутствию или потере эффекта инкретина у пациентов. Исследования показали, что ингибирующие свойства полипептида GIP, вырабатываемого этими пациентами с диабетом, значительно снижаются, когда уровень глюкозы в крови возвращается к норме.

Следовательно, существует клиническая необходимость в способе лечения инсулиннезависимого диабета с использованием полипептида GIP в сочетании с клинически эффективным гипогликемическим препаратом для восстановления толерантности инсулиннезависимых пациентов с диабетом к полипептиду GIP, а также в сочетании с инкретиновым эффектом полипептида GIP для получения более сильного клинического гипогликемического эффекта.

Настоящее изобретение направлено на обеспечение производного аналога GLP-1, обладающего агонистической активностью в отношении рецептора GIP человека, который оказывает двойное агонистическое действие на рецептор GLP-1 человека и рецептор GIP человека. Кроме того, некоторые соединения по настоящему изобретению обладают большей эффективностью в снижении уровня глюкозы в крови и снижении массы тела по сравнению с агонистами рецепторов GLP-1, известными в данной области техники. Некоторые соединения по настоящему изобретению обладают чрезвычайно высокой стабильностью в плазме и имеют фармакокинетические характеристики для подкожной инъекции один раз в неделю у людей.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль:

R₁-X₁-X₂-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-X₁₀-Ser-X₁₂-X₁₃-X₁₄-X₁₅-X₁₆-X₁₇-X₁₈-X₁₉-X₂₀-Glu-Phe-X₂₃-X₂₄-Trp-Leu-X₂₇-X₂₈-X₂₉-X₃₀-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-R₂

(I) (SEQ ID NO: 19),

где:

R₁ представляет собой водород (H), алкил, ацетил, формил, бензоил, трифторацетил, pGlu или отсутствует;

R₂ представляет собой -NH₂, -OH или отсутствует;

X₁, X₂, X₁₀, X₁₂, X₁₃, X₁₄, X₁₅, X₁₆, X₁₇, X₁₈, X₁₉, X₂₀, X₂₃, X₂₄, X₂₇, X₂₈, X₂₉ и X₃₀ независимо выбраны из группы, состоящей из любых природных аминокислотных остатков, любых неприродных аминокислотных остатков и пептидных фрагментов, состоящих из природных аминокислотных остатков и/или неприродных аминокислотных остатков.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Tyr и His; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Val и Tyr; X₁₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ser и Ile; X₁₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Tyr и Ala; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asp и Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg, Glu, Gly, Lys и Aib; X₁₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Glu, Ile и Gln; X₁₈ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Aib и His; X₁₉ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Aib и Gln; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln, Glu и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Val и Leu; X₂₈ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Ala; X₂₉ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gly и Gln; и X₃₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gly и Lys.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предлагается аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Tyr и His; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Val и Tyr и Y1; X₁₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ser и Ile и Y1; X₁₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Tyr и Ala и Y1; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle и Y1; X₁₅ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asp и Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg, Glu, Gly, Lys и Aib и Y1; X₁₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Glu, Ile и Gln и Y1; X₁₈ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Aib и His; X₁₉ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Aib и Gln; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln, Glu и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ala, Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Val и Leu; X₂₈ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Ala; X₂₉ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gly и Gln; и X₃₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gly и Lys; Y1 представляет собой замещенный остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys, в частности, с модифицированной группой на боковой цепи остатка Lys, Orn, Dap, Dab или Cys. В некоторых вариантах реализации Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3 (ссылка может быть сделана на 1, 2 или 3); b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30 (ссылка может быть сделана на 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30).

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемую соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из аминокислотного остатка Aib; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из Y1; X₁₅ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asp и Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из аминокислотного остатка Gln; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из аминокислотного остатка Asn; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с боковой цепью, соединенной с заместителем формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a представляет собой целое число от 1 до 3; b равно 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из аминокислотного остатка Aib; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из Y1; X₁₅ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asp и Glu; X₁₆ выбран из аминокислотного остатка Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из аминокислотного остатка Gln; X₂₃ выбран из аминокислотного остатка Val; X₂₄ выбран из аминокислотного остатка Asn; X₂₇ выбран из аминокислотного остатка Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из Y1; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из Y1; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из Y1; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из Y1; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемую соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из аминокислотного остатка Aib; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из Y1; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из аминокислотного остатка Gln; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из аминокислотного остатка Asn; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, где заместитель имеет формулу {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a представляет собой целое число от 1 до 3; b равно 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из Y1; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Aib и D-Ala; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Leu и Nle; X₁₅ выбран из аминокислотного остатка Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из Y1; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Gln и Lys; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn и Gln; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; где a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где каждый из X₁₀, X₁₂, X₁₃, X₁₄, X₁₆ и X₁₇ независимо выбран из Y1; где Y1 представляет собой остаток Lys, Orn, Dap, Dab или Cys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a представляет собой целое число от 1 до 3; b представляет собой 1 или 2; c представляет собой целое число от 10 до 30.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где a равно 2, b равно 1 или 2, и c представляет собой целое число от 16 до 20 (ссылка может быть сделана на 16, 17, 18, 19 или 20).

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где a равно 2, b равно 1 или 2, и c равно 16, 18 или 20.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₀ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₂ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₃ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₄ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₆ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁₇ представляет собой Y1; Y1 представляет собой Lys с заместителем на боковой цепи, причем заместитель имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}_a-(y-Glu)_b-CO-(CH₂)_c-COOH; a равно 2; b равно 1 или 2; c равно 16 или 18.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где аминогруппа боковой цепи остатка Lys в Y1 ковалентно связана с заместителем с образованием амидной связи.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где Y1 представляет собой K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) или K(-OEG-OEG-yGlu-C20-OH), где K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) имеет структуру, показанную ниже:

; и K(-OEG-OEG-yGlu-C20-OH) имеет структуру, показанную ниже:

.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где Y1 представляет собой K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) или K(-OEG-OEG-yGlu-C20-OH), где:

K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) имеет структуру, показанную ниже:

;

K(-OEG-OEG-yGlu-C20-OH) имеет структуру, показанную ниже:

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где в Y1 ε-амин остатка Lys ковалентно связан с заместителем амидной связью, а α-амин остатка Lys связан с пептидной цепью.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где X₁ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₂ выбран из аминокислотного остатка Aib; X₁₀ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₂ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₃ выбран из аминокислотного остатка Tyr; X₁₄ выбран из Y1; X₁₅ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asp и Glu; X₁₆ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Arg и Lys; X₁₇ выбран из аминокислотного остатка Ile; X₁₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₁₉ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₀ выбран из аминокислотного остатка Gln; X₂₃ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Val; X₂₄ выбран из аминокислотного остатка Asn; X₂₇ выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Ile и Leu; X₂₈ выбран из аминокислотного остатка Ala; X₂₉ выбран из аминокислотного остатка Gly; X₃₀ выбран из аминокислотного остатка Gly; Y1 представляет собой K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) или K(-OEG-OEG-yGlu-C20-OH), где K(-OEG-OEG-yGlu-C18-OH) имеет структуру, показанную ниже:

.

;

.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где аналог GLP-1 показан в общей формуле (II) (SEQ ID NO: 20):

H-YAibEGTFTSDYSIYX₁₄X₁₅X₁₆IAAQEFX₂₃NWLX₂₇AGGPSSGAPPPS-NH₂ (II), где X₁₄ представляет собой K или L, X₁₅ представляет собой D или E, X₁₆ представляет собой K или R, X₂₃ представляет собой V или I, и X₂₇ представляет собой I или L.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где аналог GLP-1 выбран из группы, состоящей из соединений, обозначенных номерами 1-18:

SEQ ID NO	Последовательность
1	H-YAibEGTFTSDYSIYKDKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
2	H-YAibEGTFTSDYSIYKDRIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
3	H-YAibEGTFTSDYSIYKDKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
4	H-YAibEGTFTSDYSIYKDRIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
5	H-YAibEGTFTSDYSIYKDKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
6	H-YAibEGTFTSDYSIYKDRIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
7	H-YAibEGTFTSDYSIYKDKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
8	H-YAibEGTFTSDYSIYLEKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
9	H-YAibEGTFTSDYSIYLEKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
10	H-YAibEGTFTSDYSIYLEKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
11	H-YAibEGTFTSDYSIYLEKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
12	H-YAibEGTFTSDYSIYKEKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
13	H-YAibEGTFTSDYSIYKERIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
14	H-YAibEGTFTSDYSIYKEKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
15	H-YAibEGTFTSDYSIYKERIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
16	H-YAibEGTFTSDYSIYKEKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
17	H-YAibEGTFTSDYSIYKERIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
18	H-YAibEGTFTSDYSIYKEKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложен аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль, где аналог GLP-1 выбран из группы, состоящей из соединений, обозначенных номерами 1#-18# ниже:

№	Последовательность
1#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
2#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
3#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
4#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
5#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
6#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
7#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
8#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
9#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
10#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
11#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
12#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
13#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
14#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
15#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
16#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
17#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
18#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂.

В некоторых вариантах реализации изобретения аналог GLP-1 по настоящему изобретению выбран из группы, состоящей из соединений, обозначенных как 7#, 12#, 13#, 14#, 15#, 16#, 17# и 18# на фиг. 3.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложена фармацевтическая композиция, содержащая:

1) аналог GLP-1, имеющий общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемую соль, и

2) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или фармацевтический носитель.

В некоторых конкретных вариантах реализации изобретения фармацевтическая композиция может содержать от 0,01 до 99 мас.% аналога GLP-1 в стандартной дозе, или фармацевтическая композиция может содержать 0,1-2000 мг, а в некоторых конкретных вариантах реализации изобретения 1-1000 мг аналога GLP-1 в стандартной дозе.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения также предложено применение аналога GLP-1, имеющего общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтической композиции, содержащей их, при получении лекарственного средства для лечения инсулиннезависимого диабета/диабета типа II, инсулинзависимого диабета, ожирения, неалкогольной жировой болезни печени, стеатоза печени, дислипидемии, связанной с инсулинорезистентностью, и/или дислипидемии, связанной с диабетом.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения в качестве лекарственного средства предложено применение аналога GLP-1, имеющего общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемой соли.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предлагается применение аналога GLP-1, имеющего общую формулу (I), или его фармацевтически приемлемой соли в качестве лекарственного средства для лечения инсулиннезависимого диабета/диабета типа II, инсулинзависимого диабета, ожирения, неалкогольной жировой болезни печени, стеатоза печени, дислипидемии, связанной с инсулинорезистентностью, и/или дислипидемии, связанной с диабетом.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложен способ лечения инсулиннезависимого диабета/диабета типа II, инсулинзависимого диабета, ожирения, неалкогольной жировой болезни печени, стеатоза печени, дислипидемии, связанной с инсулинорезистентностью, и/или дислипидемии, связанной с диабетом, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, аналога GLP-1, имеющего общую формулу (I), и его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей то же самое.

Настоящее изобретение относится к соединению, способному одновременно активировать рецептор GLP-1 и рецептор GIP, и в некоторых вариантах реализации аналог GLP-1 обладает большей агонистической активностью в отношении GLP-1R, чем в отношении рецептора GIP.

В некоторых конкретных вариантах реализации изобретения аналог GLP-1 по настоящему изобретению имеет соотношение агонистической активности в отношении GLP-1R к агонистической активности в отношении рецептора GIP (1-10):1, (1,1-10):1, (1,1-9,5):1, (1,1-9):1, (1,1-8,5):1, (1,1-8):1, (1,1-7,5):1, (1,1-7):1, (1,1-6,5):1, (1,1-6):1, (1,2-10):1, (1,2-9,5):1, (1,2-9):1, (1,2-8,5):1, (1,2-8):1, (1,2-7,5):1, (1,2-7):1, (1,2-6,5):1, (1,2-6):1, (1,3-10):1, (1,3-9,5):1, (1,3-9):1, (1,3-8,5):1, (1,3-8):1, (1,3-7,5):1, (1,3-7):1, (1,3-6,5):1, (1,3-6):1, (1,4-10):1, (1,4-9,5):1, (1,4-9):1, (1,4-8,5):1, (1,4-8):1, (1,4-7,5):1, (1,4-7):1, (1,4-6,5):1, (1,4-6):1, (1,5-10):1, (1,5-9,5):1, (1,5-9):1, (1,5-8,5):1, (1,5-8):1, (1,5-7,5):1, (1,5-7):1, (1,5-6,5):1, (1,5-6):1, (2-10):1, (2-9,5):1, (2-9):1, (2-8,5):1, (2-8):1, (2-7,5):1, (2-7):1, (2-6,5):1, (2-6):1, (2,5-10):1, (2,5-9,5):1, (2,5-9):1, (2,5-8,5):1, (2,5-8):1, (2,5-7,5):1, (2,5-7):1, (2,5-6,5):1, (2,5-6):1, (3-10):1, (3-9,5):1, (3-9):1, (3-8,5):1, (3-8):1, (3-7,5):1, (3-7):1, (3-6,5):1, (3-6):1, (3,5-10):1, (3,5-9,5):1, (3,5-9):1, (3,5-8,5):1, (3,5-8):1, (3,5-7,5):1, (3,5-7):1, (3,5-6,5):1, (3,5-6):1, (4-10):1, (4-9,5):1, (4-9):1, (4-8,5):1, (4-8):1, (4-7,5):1, (4-7):1, (4-6,5):1, (4-6):1, (4,5-10):1, (4,5-9,5):1, (4,5-9):1, (4,5-8,5):1, (4,5-8):1, (4,5-7,5):1, (4,5-7):1, (4,5-6,5):1, (4,5-6):1, (5-10):1, (5-9,5):1, (5-9):1, (5-8,5):1, (5-8):1, (5-7,5):1, (5-7):1, (5-6,5):1, (5-6):1, (5-5,5):1, (5,1-5,5):1, (5,2-5,4):1, (5,2-5,3):1 или любой диапазон или точное значение между ними, например, около 1:1, около 1,1:1, около 1,2:1, около 1,3:1, около 1,4:1, около 1,5:1, около 2:1, около 2,5:1, около 3:1, около 3,5:1, около 4:1, около 4,5:1, около 5:1, около 5,2:1, около 5,3:1, около 5,4:1, около 5,5:1, около 6:1, около 6,5:1, около 7:1, около 7,5:1, около 8:1, около 8,5:1, около 9:1, около 9,5:1, или около 10:1. Вышеуказанное соотношение представляет собой нормализованное соотношение данных анализа in vitro соответствующей агонистической активности. Например, соответствующую агонистическую активность можно определить с помощью кинетического набора cAMP-Gs. В этом контексте выражение (1-10):1 и выражение от 1:1 до 10:1 имеют одно и то же значение.

В другом варианте реализации настоящее изобретение относится к вышеуказанному аналогу GLP-1 и его фармацевтически приемлемой соли. Аналог GLP-1, представленный в настоящем описании, представляет собой амфотерное соединение, которое может проявлять как кислотные, так и щелочные свойства. Аналог GLP-1, представленный в настоящем описании, может быть приведен во взаимодействие с кислотными или основными соединениями с образованием солей специалистами в данной области техники с использованием хорошо известных методов.

Фармацевтическая композиция, содержащая аналог GLP-1 согласно настоящему изобретению, может быть использована для лечения пациентов, нуждающихся в таком лечении, путем парентерального введения. Для парентеральных путей введения может быть выбрана подкожная инъекция, внутримышечная инъекция или внутривенная инъекция. Полипептидное соединение с двойной агонистической активностью по настоящему изобретению также может быть введено трансдермальным путем, необязательно через ионофоретический пластырь, или трансмукозальным путем.

Аналог GLP-1, представленный в настоящем описании, синтезировали способом твердофазного синтеза. В качестве примера, синтетический вектор представляет собой амидную смолу Ринка MBHA (Xi'an sunresin Tech Ltd.). Во время синтеза α-аминогруппа используемого производного аминокислоты защищена Fmoc (флуоренилметоксикарбонильной) группой. В качестве примера, для боковой цепи аминокислоты выбирают следующие защитные группы в соответствии с различием функциональных групп: меркаптогруппу боковой цепи цистеина, аминогруппы боковых цепей аспарагина и глутамина и имидазолильную группу боковой цепи гистидина защищают Trt (тритил); гуанидильную группу боковой цепи аргинина защищают Pbf (2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил); индолильную группу боковой цепи триптофана и аминогруппу боковой цепи лизина защищают Boc (трет-бутилоксикарбонил); и карбоксильную группу боковых цепей аспарагиновой кислоты и глутаминовой кислоты, гидроксильную группу боковой цепи треонина, фенольную группу боковой цепи тирозина и гидроксильную группу боковой цепи серина защищают t-Bu (трет-бутил). В качестве примера, в процессе синтеза карбоксильную группу С-концевого аминокислотного остатка полипептида сначала конденсируют с нерастворимой полимерной амидной смолой Ринка и MBHA в форме амидной связи; затем удаляют защитную группу Fmoc на α-аминогруппе с использованием раствора N,N-диметилформамида (DMF), содержащего 20% 4-метилпиперидин; и затем твердофазный носитель конденсируют в избытке со следующим производным аминокислоты в полипептидной последовательности с образованием амидной связи для удлинения пептидной цепи. Процедуры "конденсация → промывка → снятие защиты → промывка → следующий цикл аминокислотной конденсации" повторяют для обеспечения возможности синтеза желаемой длины полипептидной цепи; наконец, смешанный раствор трифторуксусная кислота:вода:триизопропилсилан (например, 90:5:5, об.:об.:об.) подвергают взаимодействию со смолой для отщепления полипептида от твердофазного носителя, и смесь осаждают, используя 5-кратный объем замороженного метил-трет-бутилового эфира с получением твердого неочищенного продукта аналога GLP-1. Неочищенный твердый продукт полипептида растворяют в смешанном растворе ацетонитрил/вода, содержащем 0,1% трифторуксусной кислоты, и очищают и отделяют с использованием обращенно-фазовой препаративной хроматографической колонки C-18 с получением чистого продукта аналога GLP-1.

В соответствии с некоторыми вариантами реализации настоящее изобретение также относится к набору компонентов, который содержит:

- аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемую соль согласно настоящему изобретению; и

- дополнительный терапевтический агент, выбранный из любого из или комбинации: средства против ожирения, противодиабетического средства, антигипертензивного средства и гиполипидемического средства; причем каждый из аналога GLP-1 или его фармацевтически приемлемой соли и дополнительного терапевтического средства помещен в отдельный контейнер. В некоторых вариантах реализации изобретения аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемую соль и дополнительный терапевтический агент вводят субъекту по отдельности или в комбинации (например, одновременно или последовательно).

В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтическая композиция по настоящему изобретению и устройство для введения (например, шприц, шприц-ручка или автоматический шприц) предлагаются в комбинации. В качестве примера, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению предварительно заполнена в устройство для введения для самостоятельного введения композиции субъектом в домашних условиях. В качестве другого примера фармацевтическая композиция по настоящему изобретению и устройство для введения предлагаются по отдельности.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фиг. 1 показано влияние соединения согласно настоящему изобретению на скорость изменения массы тела мышей с ожирением, вызванным диетой.

На фиг. 2 показано влияние соединения согласно настоящему изобретению на суточный рацион потребления пищи мышей с ожирением, вызванным диетой.

На фиг. 3 показаны структуры типовых соединений согласно настоящему изобретению.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Чтобы облегчить понимание настоящего изобретения, некоторые технические и научные термины конкретно определены ниже. Если иное четко не определено в данном документе, все другие технические и научные термины, используемые в данном описании, имеют значения, обычно понятные специалистам в области техники, к которой относится настоящее изобретение.

Аминокислотные последовательности по настоящему изобретению содержат стандартные однобуквенные или трехбуквенные коды для двадцати аминокислот, и все аминокислотные остатки по настоящему изобретению предпочтительно находятся в L-конфигурации, если специально не указано иное. Кроме того, Aib относится к α-аминоизомасляной кислоте, D-Ala относится к D-аланину, Orn относится к орнитину, Dap относится к 2,3-диаминопропионовой кислоте, а Dab относится к 2,4-диаминомасляной кислоте.

Термин "агонист" определяется как вещество, оказывающее активирующее действие на рецептор GLP-1 или на рецептор GIP.

Термин "двойной агонист GLP-1/GIP", используемый в контексте настоящего изобретения, относится к веществу или лиганду, которые могут активировать рецептор GLP-1 и рецептор GIP.

В настоящем описании термин "лечить, лечение или обработка" включает ингибирование, ослабление, остановку или обращение вспять прогрессирования или тяжести существующего симптома или состояния.

Термин "природные аминокислоты" относится к 20 обычным аминокислотам, т.е. аланину (A), цистеину (C), аспарагиновой кислоте (D), глутаминовой кислоте (E), фенилаланину (F), глицину (G), гистидину (H), изолейцину (I), лизину (K), лейцину (L), метионину (M), аспарагину (N), пролину (P), глутамину (Q), аргинину (R), серину (S), треонину (T), валину (V), триптофану (W) и тирозину (Y).

Термин "неприродные аминокислоты" относится к аминокислотам, которые не кодируются в природе или не встречаются в генетическом коде какого-либо организма. Например, неприродные аминокислоты могут быть полностью синтетическими соединениями. Примеры неприродных аминокислот включают, но не ограничиваются ими, гидроксипролин, γ-карбоксиглутаминовую кислоту, O-серинфосфат, азетидинкарбоновую кислоту, 2-аминоадипиновую кислоту, 3-аминоадипиновую кислоту, β-аланин, аминопропионовую кислоту, 2-аминомасляную кислоту, 4-аминомасляную кислоту, 6-аминогексановую кислоту, 2-аминогептановую кислоту, 2-аминоизомасляную кислоту, 3-аминоизомасляную кислоту, 2-аминопимелиновую кислоту, трет-бутилглицин, 2,4-диаминоизомасляную кислоту (Dap), десмозин, 2,2'-диаминопимелиновую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту (Dab), N-этилглицин, N-метилглицин, N-этиласпарагин, гомопролин, гидроксилизин, алло-гидроксилизин, 3-гидроксипролин, 4-гидроксипролин, изодесмозин, алло-изолейцин, N-метилалаланин, N-метилглицин, N-метилизолейцин, N-метилпентилглицин, N-метилвалин, нафталанин, норвалин, норлейцин, орнитин (Orn), D-орнитин, D-аргинин, пара-аминофенилаланин, пентилглицин, пипеколевая кислота и тиопролин. Кроме того, термин также включает производные, полученные химической модификацией С-концевой карбоксильной группы (или N-концевой аминогруппы и/или функциональной группы боковой цепи) природной аминокислоты (или неприродной аминокислоты).

Термин "алкил" относится к насыщенной алифатической углеводородной группе, которая представляет собой линейную или разветвленную группу, содержащую от 1 до 20 атомов углерода, например, алкильную группу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, например, алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, например, алкильную группу, содержащую от 1 до 3 атомов углерода. Неограничивающие примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, н-гексил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2-триметилпропил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2-этилбутил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 2,3-диметилбутил, н-гептил, 2-метилгексил, 3-метилгексил, 4-метилгексил, 5-метилгексил, 2,3-диметилпентил, 2,4-диметилпентил, 2,2-диметилпентил, 3,3-диметилпентил, 2-этилпентил, 3-этилпентил, н-октил, 2,3-диметилгексил, 2,4-диметилгексил, 2,5-диметилгексил, 2,2-диметилгексил, 3,3-диметилгексил, 4,4-диметилгексил, 2-этилгексил, 3-этилгексил, 4-этилгексил, 2-метил-2-этилпентил, 2-метил-3-этилпентил, н-нонил, 2-метил-2-этилгексил, 2-метил-3-этилгексил, 2,2-диэтилпентил, н-децил, 3,3-диэтилгексил, 2,2-диэтилгексил и их различные разветвленные изомеры, и т.п. Алкил может представлять собой, например, низший алкил содержащий от 1 до 6 атомов углерода, и неограничивающие примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, н-гексил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2-триметилпропил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2-этилбутил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 2,3-диметилбутил и т.п. Алкил может быть замещенным или незамещенным, и, когда он является замещенным, замещение заместителем может быть выполнено в любом доступном месте соединения, где заместитель может представлять собой одну или более групп, независимо выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, алкилтио, алкиламино, галогена, меркапто, гидрокси, нитро, циано, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, циклоалкокси, гетероциклоалкокси, циклоалкилтио, гетероциклоалкилтио, оксо, карбоксила и карбоксилатной группы. Замещенный алкил согласно настоящему изобретению может представлять собой метил, этил, изопропил, трет-бутил, галогеналкил, дейтерированный алкил, алкокси-замещенный алкил или гидрокси-замещенный алкил.

Выражения "X выбран из группы, состоящей из A, B или C", "X выбран из группы, состоящей из A, B и C", "X представляет собой A, B или C", "X представляет собой A, B и C" и тому подобное все несут одно и то же значение, т.е. X может быть любым одним или более из A, B и C.

"Модификация" аминокислоты, как раскрыто в настоящем описании, относится к замене, добавлению или делеции аминокислоты, включая замену или добавление любой одной или более из 20 природных аминокислот.

Термин "природный GLP-1" относится к встречающейся в природе молекуле пептидных семейств глюкагона или эксендина, где: пептидное семейство глюкагона кодируется геном препроглюкагона и включает три небольших пептида с высокой гомологией, т.е. глюкагон (1-29), GLP-1 (1-37) и GLP-2 (1-33); и эксендины представляют собой пептиды, экспрессируемые в ящерицах и которые, как и GLP-1, являются инсулинотропными. В некоторых вариантах реализации изобретения термин "природная GLP-1" также относится к GLP-1 человека (7-37) и GLP-1 человека (7-36).

Термин "аналог GLP-1" относится к веществу, имеющему до 25, до 24, до 23, до 22, до 21, до 20, до 19, до 18, до 17, до 16, до 15, до 14, до 13, до 12, до 11, до 10, до 9, до 8, до 7, до 6, до 5, до 4, до 3, до 2 или 1 аминокислотной модификации или химической модификации по сравнению с природной GLP-1 (в частности, с GLP-1 (7-37) человека и GLP-1 (7-36) человека), где аминокислотная модификация может представлять собой аминокислотную замену, присоединение и/или делецию; и химическая модификация может представлять собой химическую модификацию группой, выбранной из амида, углевода, алкила, ацила, сложного эфира, полиэтиленгликоля (ПЭГ), сиалилирующей группы, гликозилирующей группы и тому подобного.

Термин "замена" аминокислоты, как описано в настоящем описании, относится к замене одного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком.

Термин "полиэтиленгликоль" или "ПЭГ" относится к смеси поликонденсатов оксида этилена и воды, которая присутствует в линейной или разветвленной форме и представлена общей формулой H(OCH₂CH₂)_nOH, где n по меньшей мере равно 9. Если не указано иное, этот термин включает полимеры полиэтиленгликоля, имеющие среднюю общую молекулярную массу, выбранную из группы, состоящей из 5000-40000 дальтон.

Термин "жирная кислота" относится к карбоновой кислоте с алифатическим длинным хвостом (цепью), которая может быть насыщенной или ненасыщенной. Жирные кислоты в настоящем описании представляют собой карбоновые кислоты, имеющие линейную или разветвленную алифатическую группу C4-C30.

Термин "пептид", используемый в настоящем описании, охватывает категорию пептидов, имеющих модифицированные амино- и карбоксильные концы. Например, аминокислотная цепь, содержащая концевую карбоновую кислоту, замещенную амидной группой, также включена в аминокислотную последовательность, обозначенную как природная аминокислота.

Все атомы водорода, описанные в настоящем изобретении, могут быть замещены их изотопами (протий, дейтерий и тритий), и любой атом водорода в соединении по настоящему изобретению, к которому относится настоящее изобретение, также может быть замещен изотопным атомом.

Термин "необязательный" или "необязательно" означает, что событие или обстоятельство, описанное далее, может, но не безусловно, иметь место, и что такое описание включает случаи, когда событие или обстоятельство происходит или не происходит. Например, "гетероциклильная группа, необязательно замещенная алкилом" означает, что алкил может присутствовать, но не обязательно, и что описание включает случаи, когда гетероциклильная группа является или не является замещенной алкилом.

Термин "замещенный" означает, что один или более, предпочтительно до 5 и более предпочтительно 1-3 атома водорода в группе независимо замещены заместителем. Заместитель находится только в своем возможном химическом положении, и специалисты в данной области техники смогут определить (экспериментально или теоретически) возможную или невозможную замену без особых усилий. Например, она может быть нестабильной, когда амино или гидрокси, имеющие свободный водород, связаны с атомом углерода, имеющим ненасыщенную (например, олефиновую) связь.

Термин "фармацевтическая композиция" относится к смеси, содержащей одно или более раскрытых здесь соединений или их физиологически/фармацевтически приемлемых солей или пролекарств и других химических компонентов, а другие компоненты представляют собой, например, физиологически/фармацевтически приемлемые носители и вспомогательные вещества. Назначение фармацевтической композиции состоит в том, чтобы способствовать введению в организм, что облегчает абсорбцию активного ингредиента, тем самым осуществляя биологическую активность.

Термин "агонистическая активность" относится к способности соединения согласно настоящему изобретению активироваться в отношении рецептора GIP человека и рецептора GLP-1 человека. В некоторых примерах "агонистическая активность" воплощена в относительно активной форме и, в частности, относится к отношению активационной способности соединения по настоящему изобретению в отношении GLP-1R к активационной способности в отношении рецептора GIP.

Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям соединения по настоящему изобретению, которые являются безопасными и эффективными для применения в организме млекопитающего и обладают необходимой биологической активностью.

Семаглутид относится к вводимому один раз в неделю полипептидному препарату с агонистической активностью в отношении GLP-1, разработанному компанией Novo Nordisk в Дании, который в настоящее время одобрен и продается в Соединенных Штатах, Японии и Европейском союзе.

LY3298176 относится к вводимому один раз в неделю полипептидному препарату с двойной агонистической активностью в отношении рецептора GIP/рецептора GLP-1, разработанному компанией Eli Lilly, который в настоящее время находится в фазе III клинических испытаний в нескольких странах. Структура является следующей:

YAibEGTFTSDYSIAibLDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂, где жирная кислота модифицирована на K в положении 20.

Примеры

Следующие конкретные варианты осуществления представлены здесь только для иллюстрации настоящего изобретения более подробно, а не для ограничения настоящего изобретения. Экспериментальные процедуры без конкретных условий, указанных в примерах настоящего изобретения, как правило, проводили в соответствии с общепринятыми условиями или в соответствии с условиями, рекомендованными производителем исходных материалов или коммерческих продуктов. Реагенты без указания конкретного источника являются коммерчески доступными общепринятыми реагентами.

1. Экспериментальный реагент

Таблица 1. Реагенты и источники
№	Реагент	Источник
1	Амидная смола Ринка MBHA	Xi'an sunresin Tech Ltd.
2	HCTU (O-(6-хлор-1-бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурониягексафторфосфат)	Highfine Tech Ltd., Суньчжоу
3	Fmoc-Aib-OH	GL Biochem
4	Fmoc-L-Lys(Mtt)-OH	GL Biochem
5	N,N-диметилформамид	SinoPharm
6	Дихлорметан	SinoPharm
7	Трифторуксусная кислота	SinoPharm
8	Триизопропилсилан	Sigma-Aldrich
9	Гексафторизопропанол	Sigma-Aldrich
10	Ацетонитрил	Merck-Millipore
11	Диизопропилэтиламин	Sigma-Aldrich
12	4-метилпиперидин	TCI Chemicals
13	Метил-трет-бутиловый эфир	TCI Chemicals
14	Boc-L-Tyr(tBu)-OH	GL Biochem
15	Fmoc-NH-PEG₂-COOH	GL Biochem
16	Fmoc-L-Glu-OtBu	GL Biochem
17	HOOC-(CH₂)₁₈-COOtBu	ChinaPeptides Co., Ltd, Сучжоу
18	4-метилморфолин	TCI Chemicals

2. Экспериментальные приборы

Таблица 2. Приборы и источники
№	Прибор	Источник
1	Аналитический ультраэффективный жидкостный хроматограф H-CLASS	WATERS
2	Agilent 1290-6530 ультраэффективный жидкостный хроматограф/масс-спектрометр	Agilent
3	Многофункциональный лиофилизатор Labconco	Thermo Fisher Scientific
4	Препаративный высокоэффективный жидкостный хроматограф Prep150	WATERS
5	Автоматический синтезатор полипептидов Prelude-X	Protein Technology Inc
6	Многоканальная высокоскоростная центрифуга	Sigma

Пример 1. Химический синтез Соединения 18#

1. Синтез полипептидного скелета

Амидную смолу Ринка MBHA (степень замещения: 0,48 ммоль/г, 0,1 ммоль) брали и помещали в полипропиленовую реакционную пробирку для твердофазного синтеза полипептида; добавляли N,N-диметилформамид (ДМФА, 10 мл) для набухания смолы в течение 10 мин при продувке азотом; удаляли ДМФА в вакууме и добавляли свежий ДМФА (10 мл) для промывки смолы; после повторной промывки смолы дважды проводили твердофазный синтез полипептида на автоматическом полипептидном синтезаторе Prelude-X с использованием стратегии Fmoc/tBu, в которой 10 эквивалентов аминокислотных остатков, активированных HCTU (O-(1H-6-хлорбензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат) и 4-метилморфолином (мольное отношение HCTU к 4-метилморфолиновым аминокислотным остаткам составляло 1:2:1), реагировали с ДМФА при комнатной температуре 25 мин для связывания. Удаление N-концевой Fmoc-защитной группы проводили с помощью 2 реакций (10 мин каждая) при комнатной температуре с использованием раствора ДМФА, содержащего 20% 4-метилпиперидин. При синтезе полипептидного скелета N-концевой аминокислотный остаток конструировали с использованием Boc-L-Tyr(tBu)-OH и подвергали вторичной конденсации, которая была необходима для улучшения качества неочищенного пептида.

2. Селективное удаление защитной группы Mtt смолы-пептида и модификации боковой цепи жирными кислотами

После удлинения полипептидного скелета (или называемого смолой-пептидом) добавляли смешанный раствор (10 мл) дихлорметана, содержащего 30% гексафторизопропанола, и смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 45 мин, а затем удаляли смешанный раствор; добавляли смешанный раствор (10 мл) метиленхлорида, содержащего 30% гексафторизопропанола, и смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 45 мин, а затем удаляли смешанный раствор. После завершения реакции смолу промывали 6 раз ДМФА. Боковую цепь лизина в положении 14 удлиняли с использованием автоматического синтезатора полипептидов Prelude-X с дополнительным циклом связывания/снятия защиты, включающим аминокислотные компоненты Fmoc-NH-PEG₂-COOH и Fmoc-L-Glu-OtBu. Все соединения проводили в ДМФА при комнатной температуре в течение 25 мин с использованием 10 эквивалентов аминокислотных остатков, активированных HCTU и 4-метилморфолином (молярное отношение HCTU к 4-метилморфолину к аминокислотным остаткам составляло 1:2:1). Удаление N-концевой Fmoc-защитной группы проводили с помощью 2 реакций (10 мин каждая) при комнатной температуре с использованием раствора ДМФА, содержащего 20% 4-метилпиперидин. После того, как окончательно полученную смолу трижды промывали ДХМ и ДМФА по отдельности, добавляли смешанный раствор (8 мл) ДМФА, содержащий 10 эквивалентов HOOC-(CH₂)₁₈-COOtBu, 10 эквивалентов HCTU и 20 эквивалентов диизопропилэтиламина (DIEA), и смесь реагировали при комнатной температуре в течение 4 часов для завершения модификации боковой цепи жирными кислотами.

3. Расщепление продукта

Смолу-пептид, полученный на предыдущей стадии, последовательно промывали 3 раза ДМФА и ДХМ и сушили в вакууме с последующим добавлением свежеприготовленного буфера для расщепления (трифторуксусная кислота:триизопропилсилан:вода = 90:5:5, об.:об.:об.), и смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 3-4 ч. После завершения реакции смесь фильтровали и смолу дважды промывали трифторуксусной кислотой. Фильтраты объединяли перед добавлением большого количества замороженного метил-трет-бутилового эфира для осаждения твердого вещества. Смесь центрифугировали и супернатант отбрасывали с получением неочищенного полипептида соединения 18#.

4. Очистка с помощью обращенно-фазовой жидкостной хроматографии

Неочищенный полипептид соединения 18# растворяли в смешанном растворителе, содержащем 0,1% трифторуксусной кислоты, 20% ацетонитрила и 20% уксусной кислоты/воды, и раствор фильтровали через мембрану 0,22 мкм; фильтрат разделяли с использованием системы высокоэффективной жидкостной хроматографии с обращенной фазой WATERS Prep150 LC с буферами A (0,1% трифторуксусная кислота, 10% ацетонитрил и вода) и B (0,1% трифторуксусная кислота, 90% ацетонитрил и вода). Хроматографическая колонка представляла собой обращенно-фазовую хроматографическую колонку X-SELECT OBD C-18, и в процессе очистки длина волны обнаружения хроматографа была установлена равной 220 нм, а скорость потока составляла 15 мл/мин. Родственные фракции продукта собирали и лиофилизировали с получением чистого полипептидного продукта соединения 1# с выходом 18%. Чистоту чистого полипептидного продукта определяли с помощью комбинации аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии и ультраэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии с чистотой 92,81%. Молекулярная структура соединения 18# представляла собой H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂, при этом структурная формула показана как структура 18# на фиг. 3.

Пример 2. Химический синтез других соединений

Соединения в Таблице 3 синтезировали с использованием экспериментального протокола Примера 1.

Таблица 3. Соединения по настоящему изобретению
№ соединения	Молекулярная структура
1#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
2#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
3#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
4#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
5#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
6#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DRIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
7#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
8#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
9#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
10#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
11#	H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
12#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
13#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
14#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
15#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂
16#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂
17#	H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂

Чистоту соединений определяли с помощью комбинации аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии и ультраэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии с чистотой некоторых соединений, показанных в таблице 4 ниже.

Таблица 4. Комбинация аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии и жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии для определения чистоты и молекулярной массы соединений 8#-11#
№ соединения	Чистота
8#	96,30%
9#	93,28%
10#	94,56%
11#	92,18%

Биологическая оценка

Настоящее изобретение дополнительно описано ниже со ссылкой на примеры, но эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

1. Экспериментальный реагент

Таблица 5. Реагенты, использованные в этом эксперименте, и источники
№	Реагент	Источник
1	DMEM/F12	Gibco 11330032
2	Казеин	Sigma C3400-500G
3	3-изобутил-1-метилксантин	Sigma I7018-250MG
4	cAMP - набор Gs Dynamic - 20000 тестов	Cisbio 62AM4PEC
5	384-луночный планшет Corning®, малый объем	Sigma CLS4514-50EA
6	96-луночная V-образная пластина (PS)	Кислород WIPP02280
7	Камеры для подсчета клеток Countess®	Invitrogen C10228
8	пуромицин	ThermoFisher A1113803
9	Гигромицин B	Sigma A1720
10	PBS	Gibco 10010023
11	0,25% трипсин-ЭДТА (1×), феноловый красный	ThermoFisher 25200-114
12	Эмбриональная бычья сыворотка Gibco™, квалифицированная, австралийское происхождение	ThermoFisher 10099-141
13	Глюкоза	Sigma G8270-100G

2. Экспериментальные приборы

Таблица 6. Прибор, используемый в этом эксперименте, и источники
№	Прибор	Источник
1	СО₂-инкубатор	Thermo 311
2	Бокс биологической безопасности	BOXUN BSC-1300IIA2
3	Холодильная центрифуга	Eppendorf 5702R
4	Двухдверный бытовой холодильник Haier	HaierBCD-268TN
5	Счетчик ячеек	Life Technologies Countess II
6	Ящик для хранения медикаментов	Haier hyc-940
7	Холодильник при -20°C	HaierDW-25L262
8	Холодильная центрифуга 5810R	Eppendorf 5810R
9	Автоматический дозатор (Multidrop)	Thermo 5840300
10	Считывающее устройство для микропланшетов	BioTek H₁MFD
11	Бактериальный СО₂-инкубатор	BOXUN BC-J80S
12	Активный глюкометр.	Roche

Пример 3. Оценка агонистической активности соединений по настоящему изобретению в отношении рецептора глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1R)

1. Цель эксперимента

Данный тестовый пример предназначен для определения агонистической активности соединений по настоящему изобретению в отношении глюкагоноподобного рецептора пептида-1 (GLP-1R).

2. Экспериментальные процедуры

Криоконсервированные стабильные клеточные штаммы CHO-K1/GLP-1R/CRE-luc (которые могут быть получены обычными способами в данной области техники) извлекали из резервуара с жидким азотом, быстро размораживали на водяной бане при 37°С, ресуспендировали в среде DMEM/F12 (Gibco кат.№ 11330032) и центрифугировали, и клетки промывали один раз, ресуспендировали в буфере для анализа, т.е. среде DMEM/F12, содержащей 0,1% казеина (Sigma кат.№ C3400), корректировали на плотность клеток с помощью буфера для анализа и высевали в 384-луночный планшет (Sigma кат.№ CLS4514) при плотности 2500 клеток/5 мкл/лунку. Затем в каждую лунку добавляли 2,5 мкл рабочего раствора IBMX (Sigma кат.№ I7018), приготовленного в буфере (конечная концентрация IBMX составляла 0,5 мМ), и 2,5 мкл образцов полипептида с градиентным разведением, и планшет центрифугировали при 1000 об./мин в течение 1 мин, встряхивали в течение 30 с для хорошего перемешивания и оставляли для инкубации при комнатной температуре в течение 30 мин. Детектирование проводили с использованием набора Cisbio cAMP-Gs Dynamic (Cisbio кат.№ 62AM4PEC), и cAMP-d2 и анти-cAMP-Eu³⁺-криптат отдельно разбавляли в 20-кратном градиенте и хорошо смешивали с буфером для лизиса и детекции cAMP. В каждую лунку добавляли 5 мкл разбавленного раствора cAMP-d2, затем добавляли 5 мкл разбавленного раствора анти-cAMP-Eu³⁺-криптата, и смесь встряхивали в течение 30 секунд для хорошего перемешивания и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч в темноте.

3. Обработка данных

Считывание сигнала HTRF выполняли с использованием считывателя микропланшетов Biotek Synergy H1 при длине волны возбуждения 320 нм и длинах волны излучения 620 нм и 665 нм. Отношение сигналов (665 нм/620 нм × 10000) рассчитывали и подгоняли нелинейно к концентрациям образца в GraphPad Prism 6 с использованием уравнения с четырьмя параметрами для получения значений EC₅₀ с конкретными данными, показанными в таблице 7 ниже.

Пример 4. Оценка агонистической активности соединений по настоящему изобретению в отношении глюкозозависимого инсулинотропного полипептидного рецептора (GIP-рецептора)

1. Цель эксперимента

Этот пример предназначен для определения агонистической активности соединений по настоящему изобретению в отношении рецептора глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (рецептора GIP).

2. Экспериментальные процедуры

Клетки CHO-K1 дикого типа собирали, и клеточную суспензию доводили до соответствующей плотности, высевали в 6-луночный планшет при 2 мл/лунку и помещали в инкубатор при 37°C с 5% CO₂ для адгезии культуры в течение ночи. Смесь для трансфекции (плазмида рецептора hGIP, Fugene HD (Promega кат.№ E2311) и OptiMEM (Gibco кат.№ 31985070)) хорошо перемешивали и оставляли стоять при комнатной температуре в течение 15 минут, добавляли в соответствующие клеточные лунки в объеме 100 мкл и трансфицировали в течение 24 ч для обеспечения сверхэкспрессии рецептора hGIP на поверхности клеток CHO-K1. После завершения переходной трансфекции клетки в 6-луночном планшете собирали, промывали один раз аналитическим буфером, то есть средой DMEM/F12 (Gibco кат.№ 11330032), содержащей 0,1% казеина (Sigma кат.№ C3400), корректировали на плотность клеток с использованием аналитического буфера и высевали в 384-луночный планшет (Sigma кат.№ CLS4514) при плотности 5000 клеток/5 мкл/лунку. Затем в каждую лунку добавляли 2,5 мкл рабочего раствора IBMX (Sigma кат.№ I7018), приготовленного в буфере (конечная концентрация IBMX составляла 0,5 мМ), и 2,5 мкл образцов полипептида с градиентным разведением, и планшет центрифугировали при 1000 об./мин в течение 1 мин, встряхивали в течение 30 с для хорошего перемешивания и оставляли для инкубации при комнатной температуре в течение 30 мин. Детектирование проводили с использованием набора Cisbio cAMP-Gs Dynamic (Cisbio кат.№ 62AM4PEC), и cAMP-d2 и анти-cAMP-Eu³⁺-криптат отдельно разбавляли в 20-кратном градиенте и хорошо смешивали с буфером для лизиса и детекции cAMP. В каждую лунку добавляли 5 мкл разбавленного раствора cAMP-d2, затем добавляли 5 мкл разбавленного раствора анти-cAMP-Eu³⁺-криптата, и смесь встряхивали в течение 30 секунд для хорошего перемешивания и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч в темноте.

3. Обработка данных

Считывание сигнала HTRF выполняли с использованием считывателя микропланшетов Biotek Synergy H1 при длине волны возбуждения 320 нм и длинах волны излучения 620 нм и 665 нм. Отношение сигналов (665 нм/620 нм × 10000) рассчитывали и подгоняли нелинейно к концентрациям образца в GraphPad Prism 6 с использованием уравнения с четырьмя параметрами для получения значений EC₅₀ с конкретными значениями, показанными в таблицах 7 и 8 ниже.

Таблица 7. Результаты определения агонистической активности в отношении GLP-1R человека и GIP-рецептора человека
Соединение	Активность GLP-1R человека (EC₅₀ нМ)	Активность рецептора GIP человека (EC₅₀ нМ)
Природный GLP-1	0,010	НД
Природный GIP	НД	0,011
Семаглутид	0,024	>10
LY3298176	0,13	0,056
7#	0,021	0,11

Таблица 8. Результаты определения агонистической активности в отношении GLP-1R человека и GIP-рецептора человека
Соединение	Активность GLP-1R человека (EC₅₀ нМ)	Активность рецептора GIP человека (EC₅₀ нМ)
Природный GLP-1	0,006	НД
Природный GIP	НД	0,006
Семаглутид	0,014	>10,0
LY3298176	0,078	0,031
9#	0,049	0,040
10#	0,065	0,056
12#	0,030	0,170
13#	0,017	0,130
14#	0,013	0,130
15#	0,015	0,230
16#	0,029	0,095
17#	0,022	0,110
18#	0,013	0,060

4. Заключение по результатам эксперимента

Благодаря конструкции полипептидного скелета и последующей сайт-специфической модификации жирных кислот соединения по настоящему изобретению обладают более сильной агонистической активностью в отношении рецептора GLP-1/GIP, чем многие полипептиды с двойной агонистической активностью к рецептору GLP-1/GIP в данной области техники, и, таким образом, имеют лучший потенциал для лечения метаболических заболеваний. Кроме того, LY3298176 демонстрирует преимущественную активность в отношении рецептора GIP, в отличие от соединений 12#-18# по настоящему изобретению, которые демонстрируют преимущественную активность в отношении GLP-1R.

Пример 5. Испытание стабильности некоторых соединений по настоящему изобретению

Стабильность в плазме важна для терапевтических полипептидных препаратов, поскольку полипептидные препараты, вероятно, будут чувствительны к полипептидным гидролазам и белковым гидролазам в плазме. Будут затронуты период полувыведения и эффективность полипептидов, которые нестабильны в плазме.

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент направлен на проверку стабильности некоторых соединений по настоящему изобретению в плазме крови человека.

2. Экспериментальные процедуры

5 мкл каждого из образцов в концентрациях 20 нг/мл, 50 нг/мл, 100 нг/мл, 200 нг/мл, 500 нг/мл, 1000 нг/мл, 2000 нг/мл, 5000 нг/мл и 10000 нг/мл добавляли к 45 мкл человеческой плазмы. Содержание соединений в образцах определяли методом ЖХ-МС и формировали стандартную кривую. К 45 мкл плазмы человека добавляли 5 мкл раствора полипептида в концентрации 1 мг/мл. Для каждого тестируемого соединения готовили пять образцов, и отбирали образцы через 0 мин, 30 мин, 60 мин, 120 мин и 240 мин, соответственно, и определяли содержание удерживаемого соединения методом ЖХ-МС. При содержании в 0 мин в качестве стандарта (100%) рассчитывали относительное содержание удерживаемых соединений в образцах в другие моменты времени. Метод ЖХ-МС для детектирования соединений был следующим: 5% раствор ацетонитрила готовили в виде раствора А, 95% раствор ацетонитрила готовили в виде раствора В, градиент раствора формировали при скорости потока 0,6 мл/мин в соответствии с временными точками и пропорциями раствора, показанными в таблице 9, и вводили 15 мкл образца и определяли содержание соединения с использованием колонки детектирования Raptor Biphenyl 2,7 мкм, см. таблицу 9.

Таблица 9. Временные точки испытания и пропорции раствора
Время (мин)	A (%)	B (%)
0,20	95,0	5,00
1,70	5,00	95,0
2,00	5,00	95,0
2,01	95,0	5,00
2,50	95,0	5,00

3. Результаты экспериментов

Данные по стабильности некоторых соединений по настоящему изобретению в плазме приведены в таблице 10 ниже.

Таблица 10. Результаты испытаний стабильности соединений в плазме
Соединение	Относительное содержание соединений, удерживаемых в плазме (%)
Соединение	0 мин	30 мин	60 мин	120 мин	240 мин
LY3298176	100,00	102,89	114,76	117,59	113,35
7#	100,00	101,45	101,66	103,28	102,15

Вывод

В ходе исследования было обнаружено, что соединение 7# по настоящему изобретению имеет аналогичную стабильность (относительное содержание больше 90%) в плазме крови человека по сравнению с соединением LY3298176 в 4-часовой момент времени.

Пример 6. Фармакокинетические свойства некоторых соединений по настоящему изобретению у мышей

Стабильность в плазме является одним из факторов, влияющих на фармакокинетику полипептидных препаратов. На фармакокинетику полипептидных препаратов in vivo также влияют такие факторы, как абсорбция и клиренс полипептидных препаратов in vivo.

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент направлен на оценку фармакокинетического поведения соединений по настоящему изобретению у Balb/c мышей (плазма) после одной внутривенной инъекции путем взятия мышей в качестве подопытных животных.

2. Экспериментальные процедуры

Самцы мышей Balb/c в возрасте от семи до девяти недель весом 18-30 г были приобретены у Shanghai Jiesijie Laboratory Animal Co., Ltd. После того, как соединение 7# получали в буфере, содержащем 20 мМ лимонной кислоты (pH 7,0), соединение 7# вводили внутривенно мышам в дозе 30 нмоль/кг массы тела через хвостовую вену, и 0,2 мл крови отдельно собирали в моменты времени 0 ч, 0,083 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч, 24 ч и 32 ч. Собранную кровь мышей центрифугировали при 6000 об./мин в течение 6 мин при 4°C для отделения плазмы. Содержание соединения 7# в плазме мышей анализировали с помощью экспериментальных методик примера 3,3.

3. Результаты экспериментов

С помощью вышеуказанных экспериментальных методик конкретные данные приведены в таблице 11 ниже.

Таблица 11. Фармакокинетика однократной внутривенной инъекции у мышей (плазма)
Фармакокинетические параметры	Единицы измерения	Соединение 7#
T_1/2	ч	13,0
AUC_Inf	ч•нг/мл	16133

4. Заключение по результатам эксперимента

Было обнаружено, что соединение 7# по настоящему изобретению обладает хорошими фармакокинетическими свойствами после внутривенной инъекции мышам, что указывает на то, что это соединение является полезным при лечении заболеваний, например, оно может поддерживать подкожную инъекцию один раз в неделю у людей.

Пример 7. Фармакокинетические свойства некоторых соединений по настоящему изобретению у мышей

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент направлен на оценку фармакокинетического поведения соединений по настоящему изобретению у Balb/c мышей (плазма) после одной подкожной инъекции путем взятия мышей в качестве подопытных животных.

2. Экспериментальные процедуры

Самцы мышей Balb/c в возрасте от семи до девяти недель весом 18-30 г были приобретены у Shanghai Jiesijie Laboratory Animal Co., Ltd. После того, как соединение 7# получали в буфере, содержащем 20 мМ лимонной кислоты (pH 7,0), соединение 7# вводили подкожно мышам в дозе 30 нмоль/кг массы тела через левую сторону живота, и 0,2 мл крови отдельно собирали в моменты времени 0 ч, 0,083 ч, 0,25 ч, 0,5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч, 24 ч и 32 ч. Собранную кровь мышей центрифугировали при 6000 об./мин в течение 6 мин при 4°C для отделения плазмы. Содержание соединения 7# в плазме мышей анализировали с помощью экспериментальных методик примера 5,2.

3. Результаты экспериментов

С помощью вышеуказанных экспериментальных методик конкретные данные приведены в таблице 12 ниже.

Таблица 12. Фармакокинетические результаты для соединения 7# у мышей
Фармакокинетические параметры	Единицы измерения	Соединение 7#
T_1/2	ч	10,1
AUC_Inf	ч•нг/мл	14488

4. Заключение по результатам эксперимента

Было обнаружено, что соединение по настоящему изобретению обладает хорошими фармакокинетическими свойствами после подкожной инъекции мышам, что указывает на то, что это соединение является полезным при лечении заболеваний, например, оно может поддерживать подкожную инъекцию один раз в неделю у людей.

Пример 8. Эффективность in vivo некоторых соединений по настоящему изобретению

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент был предназначен для проверки регуляторного действия некоторых соединений по настоящему изобретению и соединения LY3298176 на уровень глюкозы в крови у нормальных мышей после одной подкожной инъекции.

2. Экспериментальные процедуры

Самцы мышей C57BL/6 в возрасте от 10 до 12 недель были приобретены у Shanghai Jiesijie Laboratory Animal Co., Ltd. Мышам C57BL/6 подкожно вводили соединение 7# или соединение LY3298176 (доза: 10 нмоль/кг массы тела) и контрольный буфер, а затем подвергали голоданию без лишения воды. Через 18 ч внутрибрюшинно вводили раствор глюкозы в концентрации 0,2 г/мл. Значения глюкозы в крови измеряли путем сбора крови из хвоста мышей в моменты времени 0 мин, 15 мин, 30 мин, 60 мин и 120 мин в соответствии с экспериментальной схемой. Конкретные процедуры были следующими: мышь физически иммобилизовали с обнаженным хвостом, и немного надрезали хвост, затем хвост сдавливали до кровотечения, а глюкозу крови определяли с помощью активного глюкометра Roche после того, как отбрасывали 1-ю каплю крови. Площадь под кривой уровня глюкозы в крови (AUC) рассчитывали по результатам всех точек.

3. Результаты экспериментов

С помощью вышеуказанных экспериментальных методик конкретные данные приведены в таблице 13 ниже.

Таблица 13. Изменение уровня глюкозы в крови мышей после однократного подкожного введения

Тестируемые соединения	Доза	Глюкоза крови (ммоль/л, среднее ± СО)					AUC (ммоль/л⋅ч)
Тестируемые соединения	Доза	0 мин	15 мин	30 мин	60 мин	120 мин	AUC (ммоль/л⋅ч)
Плацебо	-	5,3 ± 0,6	20,5±2,0	24,0±1,4	19±1,3	10,9±1,2	34,5±2,4
7#	10 нмоль/кг	4,4±0,8	6,7±0,8	6,2±1,3	5,7±1,2	3,8±1,1	10,7±1,8
LY3298176	10 нмоль/кг	3,2±0,2	9,1±1,3	8-1,4.	6,4±1,0	4,5±0,7	12,7±1,6

СО - стандартное отклонение

4. Заключение по результатам эксперимента

В этом эксперименте соединение 7# по настоящему изобретению демонстрирует значительный эффект снижения уровня глюкозы в крови у нормальных мышей в дозе 10 нмоль/кг массы тела, при этом площадь под кривой уровня глюкозы в крови группы соединения 7# уменьшается более чем на 60% по сравнению с площадью плацебо (т.е. холостого носителя).

Пример 9. Эффективность некоторых соединений по настоящему изобретению в отношении снижениия массы тела

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент был предназначен для проверки регуляторного эффекта нумерованных соединений на массу тела мышей с ожирением, вызванным диетой, после подкожного введения.

2. Экспериментальные процедуры

Были протестированы самцы мышей C57BL/6 с ожирением, вызванным пищей с высоким содержанием жиров (весом 35-55 г, в возрасте 10-12 недель, приобретенные у Shanghai Jiesijie Laboratory Animal Co., Ltd.). Мышам с ожирением C57BL/6, вызванным диетой, отдельно подкожно вводили соединение LY3298176 (10 нмоль/кг массы тела), соединение 7# (10 нмоль/кг массы тела) и соединение 18# (три дозы 3 нмоль/кг, 10 нмоль/кг и 100 нмоль/кг массы тела, вводимые один раз каждые 3 дня). В соответствии с экспериментальной схемой массу тела каждой мыши измеряли и регистрировали в сутки 0, сутки 3, сутки 6 и так далее до суток 27, рассчитывали среднюю массу тела каждой группы мышей и строили графики изменения массы тела, принимая массу тела в первые сутки в качестве стандарта. В конце, жир и другие внутренние органы каждой части мышей вынимали и взвешивали, и рассчитывали соотношение внутренностей/головного мозга к жиру в каждой части каждой мыши. Влияние препарата на жир определяли путем сравнения изменения соотношения орган/мозг к жиру разных частей каждой группы мышей.

3. Результаты экспериментов

На основе вышеуказанных экспериментальных методик конкретные данные показаны в таблицах 14-16 ниже и на фиг. 1.

Таблица 14. Снижающее массу тела действие соединений на мышей с индуцированным ожирением
Тестируемые соединения	Доза	Изменение массы тела (%, среднее значение ± стандартное отклонение)
Тестируемые соединения	Доза	сутки 1	сутки 4	сутки 7	сутки 10	сутки 13	сутки 16	сутки 19	сутки 22	сутки 25	сутки 28
Плацебо	-	0	-0,9±1,6	-2,6±1,5	-3,0±2,4	-3,5±3,7	-2,7±4,8	-2,8±6,7	-2,5±8,4	-1,4±8,9	-2,1±9,6
7#	10 нмоль/ кг	0	-11,0±1,0	-17,6±2,6	-22,6±5,9	-22,3±6,3	-22,7±6,9	-25,9±6,2	-23,9±5,6	-23,9±5,6	-25,5±5,3

4. Заключение по результатам эксперимента

В этом эксперименте в дозах 3 нмоль/кг, 10 нмоль/кг и 100 нмоль/кг соединения 7# и 18# по настоящему изобретению демонстрируют значительное снижение массы тела на мышах с ожирением, вызванным пищей с высоким содержанием жиров, и демонстрируют значительную зависимость от дозы. Масса тела мышей тестируемой группы, получавших дозу 10 нмоль/кг соединения 18# снижена более чем на 20,0% на 27 сутки, напротив, масса тела мышей в той же дозовой тестируемой группе контрольного соединения LY3298176 снижена примерно на 13,4%. Кроме того, содержание жира в каждой части (за исключением лопаточного жира) мышей во всех группах испытания на дозу соединения 18# значительно снижено по сравнению с таковым в группе плацебо (т.е. холостой носитель).

Пример 10. Влияние соединений по настоящему изобретению на рацион потребления пищи мышей

Пищевой рацион мышей в каждой группе измеряли ежедневно во время теста. Результаты показаны в таблице 17 и фиг. 2

Среднесуточный рацион питания мышей DIO (вызванное диетой ожирение) в контрольной группе модели составлял 2,5 г на протяжении всего эксперимента. После подкожной инъекции соединения 18# или соединения LY3298176 в различных дозах, рацион потребления пищи мышами во всех группах был снижен в разной степени.

В первые сутки после введения рацион потребления корма мышами в каждой группе введения был значительно снижен, при этом рацион потребления корма мышами в дозовых группах 3 нмоль/кг, 10 нмоль/кг и 100 нмоль/кг соединения 18# составлял 0,6 г, 0,3 г и 0,2 г, соответственно, что значительно отличалось от такового в модельной контрольной группе (2,5 г) и демонстрировало лучшую зависимость от дозировки.

Совокупный рацион потребления корма мышами в модельной контрольной группе в течение 5 суток после введения составлял 12,8 г, в то время как совокупный рацион потребления корма мышами в дозовых группах 3 нмоль/кг, 10 нмоль/кг и 100 нмоль/кг соединения 18# в течение 5 суток после введения составлял 7,2 г, 3,9 г и 1,8 г, соответственно, что было значительно ниже, чем в модельной контрольной группе, и демонстрировало лучшую зависимость от дозировки.

Суточный рацион питания мышей в каждой группе введения начал уменьшаться на 1 сутки и возобновился на 2 и 3 сутки после каждого введения. Ежедневный рацион потребления корма показал общую тенденцию к восстановлению во время введения. Через 28 суток после введения суммарный рацион приема пищи трех групп доз соединения 18# составлял 58,2 г, 46,8 г и 36,7 г, соответственно, что было значительно ниже, чем в модельной контрольной группе (70,8 г), и показало лучшую зависимость от дозы. Таким образом, соединение 18# может значительно снизить рацион потребления пищи мышами DIO.

Пример 11. Благоприятный эффект некоторых соединений по настоящему изобретению на уровень метаболизма глюкозы у мышей db/db

1. Цель эксперимента

Этот эксперимент был предназначен для проверки эффекта улучшения нумерованных соединений на уровень метаболизма глюкозы у мышей db/db после подкожного введения.

2. Экспериментальные процедуры

Мышам C57BL/KsJ-db/db по отдельности подкожно вводили холостой носитель (20 мМ цитрат натрия + 0,05% Твин-80, pH 7,5), соединение LY3298176 (100 нмоль/кг массы тела) и соединение 18# (три дозы 10 нмоль/кг массы тела, 30 нмоль/кг массы тела и 100 нмоль/кг массы тела) в сутки 0, 3, 7, 10, 14, 17, 21, 24 и 27. Каждая группа введения включала 10 мышей db/db. Согласно дизайну эксперимента, кровь из хвостовой вены собирали путем укола иглой в сутки 0, 7, 14, 21 и 28 и определяли уровни глюкозы в крови натощак с помощью глюкометра и глюкозных тест-полосок, и мышей подвергали голоданию за 6 часов до сбора крови в каждый момент времени. Кровь из хвостовой вены собирали путем прокалывания иглой в сутки 3, 10, 17, 24 и 27 и случайным образом определяли уровни глюкозы в крови с помощью глюкометра. Наконец, в конце эксперимента на 28 сутки все животные в группах введения подвергались 2-5% ингаляционной анестезии изофлураном, и 100 мкл антикоагулированной цельной крови ЭДТА-К2 собирали через орбиту каждой мыши и использовали для определения гликированного гемоглобина.

3. Результаты экспериментов

На основе вышеуказанных экспериментальных методик конкретные данные показаны в таблицах 18-20 ниже.

Таблица 18. Влияние долгосрочного введения соединения 18# на уровень глюкозы в крови мышей db/db натощак
Группа введения	Концентрация глюкозы в крови натощак (ммоль/л, среднее ± СО)
Группа введения	сутки 0	сутки 7	сутки 14	сутки 21	сутки 28
Холостой контроль	14,25±1,27	17,92±1,33	22,89±1,88	24,95±1,52	25,94±1,32
LY3298176 (100 нмоль/кг)	14,35±1,41	7,44±0,76	7,56±0,88	9,42±1,67	9,89±1,28***
#18 (10 нмоль/кг)	14,77±1,30	6,05±0,42	6,30±0,46	7,89±0,81	9,41±0,97***
#18 (30 нмоль/кг)	14,13±1,32	6,21±0,26	6,40±0,57	7,03±0,52	9,68±1,03***
#18 (100 нмоль/кг)	14,67±1,46	5,85±0,33	6,25±0,32	6,13±0,19	7,89±0,41***
***: p < 0,001 по сравнению с контрольной группой, получавшей холостой контроль.

Таблица 19. Влияние долгосрочного введения соединения 18# на уровень глюкозы в крови мышей db/db натощак
Группа введения	Концентрация глюкозы в крови натощак (ммоль/л, среднее ± СО)
Группа введения	сутки 0	сутки 10	сутки 17	сутки 24
Холостой контроль	23,06±0,97	26,40±0,90	27,64±1,15	30,22±0,74
LY3298176 (100 нмоль/кг)	18,60±1,52	17,10±1,96	17,98±1,37	20,70±1,27***
#18 (10 нмоль/кг)	20,42±1,56	20,66±1,48	18,91±1,33	21,17±2,07**
#18 (30 нмоль/кг)	16,73±1,59	15,88±1,86	17,30±1,17	17,43±1,92***
#18 (100 нмоль/кг)	9,11±1,25	12,34±1,12	11,89±1,15	11,51±0,95***
: p < 0,01 в сравнении с контрольной группой холостого раствора; *: p < 0,001 в сравнении c контрольной группой холостого раствора.

Таблица 20. Влияние долгосрочного введения соединения 18# на уровень гликированного гемоглобина у мышей db/db
Группа введения	Гликированный гемоглобин (%, среднее ± СО)
Холостой контроль	6,54±0,17
LY3298176 (100 нмоль/кг)	4,58±0,23**
#18 (10 нмоль/кг)	4,71±0,23***
#18 (30 нмоль/кг)	4,53±0,17***
#18 (100 нмоль/кг)	3,78±0,13***
: p < 0,01 в сравнении с контрольной группой холостого раствора; *: p < 0,001 в сравнении c контрольной группой холостого раствора.

4. Заключение по результатам эксперимента

В этом эксперименте в дозах 10 нмоль/кг, 30 нмоль/кг и 100 нмоль/кг соединение 18# по настоящему изобретению демонстрирует превосходный эффект улучшения уровня метаболизма глюкозы у мышей db/db и показывает значительную зависимость от дозы. Уровень гликированного гемоглобина в дозовой группе 100 нмоль/кг соединения 18# составляет 3,78% в конце эксперимента, напротив, уровень гликированного гемоглобина в той же дозовой группе контрольного соединения LY3298176 составляет 4,58%. Таким образом, эффективность соединения 18# в улучшении уровня метаболизма глюкозы у мышей db/db значительно лучше, чем у контрольного соединения LY3298176 в той же дозе.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> БЭЙЦЗИН ТО ЦЗЕ БИОФАРМАСЬЮТИКАЛ КО. ЛТД.

<120> СОЕДИНЕНИЕ С ДВОЙНОЙ АГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ РЕЦЕПТОРОВ

GLP-1 И GIP И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

<130> 721055CPCT

<140> PCT/CN2021/096568

<141> 2021-05-28

<150> 202010472577.8

<151> 2020-05-29

<150> 202110335100.X

<151> 2021-03-29

<160> 20

<170> Patent-In 3.5

<210> 1

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 1

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 2

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 2

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 3

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 3

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 4

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 4

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 5

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 5

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 6

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 6

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 7

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 7

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Asp Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 8

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 8

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Leu Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 9

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 9

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Leu Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 10

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 10

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Leu Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 11

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 11

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Leu Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 12

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 12

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 13

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 13

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 14

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 14

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 15

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 15

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Ile Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 16

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 16

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Ile Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 17

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 17

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Arg

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 18

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<400> 18

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Lys Glu Lys

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Val Asn Trp Leu Leu Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 19

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (1)..(1)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Tyr и His

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Aib и D-Ala

<220>

<221> Вариант

<222> (10)..(10)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Val и Tyr

<220>

<221> Вариант

<222> (12)..(12)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Ser и Ile

<220>

<221> Вариант

<222> (13)..(13)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Tyr и Ala

<220>

<221> Вариант

<222> (14)..(14)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Leu и Nle

<220>

<221> Вариант

<222> (15)..(15)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Asp и Glu

<220>

<221> Вариант

<222> (16)..(16)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Arg, Glu, Gly, Lys и Aib

<220>

<221> Вариант

<222> (17)..(17)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Glu, Ile и Gln

<220>

<221> Вариант

<222> (18)..(18)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Ala, Aib и His

<220>

<221> Вариант

<222> (19)..(19)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Ala, Aib и Gln

<220>

<221> Вариант

<222> (20)..(20)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Gln, Glu и Lys

<220>

<221> Вариант

<222> (23)..(23)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Ile и Val

<220>

<221> Вариант

<222> (24)..(24)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Ala, Asn и Gln

<220>

<221> Вариант

<222> (27)..(27)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Val и Leu

<220>

<221> Вариант

<222> (28)..(28)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Arg и Ala

<220>

<221> Вариант

<222> (29)..(29)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Gly и Gln

<220>

<221> Вариант

<222> (30)..(30)

<223> Xaa выбран из группы, состоящей из Gly и Lys

<400> 19

Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10 15

Xaa Xaa Xaa Xaa Glu Phe Xaa Xaa Trp Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 20

<211> 39

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Вариант

<222> (2)..(2)

<223> Xaa представляет собой Aib

<220>

<221> Вариант

<222> (14)..(14)

<223> Xaa представляет собой Lys или Leu

<220>

<221> Вариант

<222> (15)..(15)

<223> Xaa представляет собой Asp или Glu

<220>

<221> Вариант

<222> (16)..(16)

<223> Xaa представляет собой Lys или Arg

<220>

<221> Вариант

<222> (23)..(23)

<223> Xaa представляет собой Val или Ile

<220>

<221> Вариант

<222> (27)..(27)

<223> Xaa представляет собой Ile или Leu

<400> 20

Tyr Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Ile Tyr Xaa Xaa Xaa

1 5 10 15

Ile Ala Ala Gln Glu Phe Xaa Asn Trp Leu Xaa Ala Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<---

Claims

1. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль, оказывающий двойное агонистическое действие на рецептор GLP-1 (глюкагоноподобный пептид-1) и рецептор GIP (глюкозозависимый инсулинотропный полипептид), где аналог GLP-1 представляет собой один из следующих:

7# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)DKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂ 9# H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 10# H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 11# H-YAibEGTFTSDYSIYLEK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)IAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂ 12# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 13# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 14# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 15# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFINWLIAGGPSSGAPPPS-NH₂ 16# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFINWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂ 17# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)ERIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂ 18# H-YAibEGTFTSDYSIYK(OEG-OEG-yGlu-C20-OH)EKIAAQEFVNWLLAGGPSSGAPPPS-NH₂,

где заместитель на лизине OEG-OEG-yGlu-C20-OH имеет структуру формулы {[2-(2-амино-этокси)-этокси]-ацетил}₂-(y-Glu)₁-CO-(CH₂)₁₈-COOH.

2. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль, оказывающий двойное агонистическое действие на рецептор GLP-1 и рецептор GIP, где аналог GLP-1 выбран из группы, состоящей из соединений 7#, 12#, 13#, 14#, 15#, 16#, 17# и 18#, где

соединение 7# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 12# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 13# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 14# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 15# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 16# имеет структуру, как показано ниже:

,

соединение 17# имеет структуру, как показано ниже:

, и

соединение 18# имеет структуру, как показано ниже:

.

3. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 7#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

4. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 12#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

5. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 13#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

6. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 14#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

7. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 15#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

8. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 16#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

9. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 17#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

10. Аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемая соль по п. 2, где аналог GLP-1 представляет собой соединение 18#, имеющее структуру, как показано ниже:

.

11. Фармацевтическая композиция, оказывающая двойное агонистическое действие на рецептор GLP-1 и рецептор GIP, содержащая: 1) аналог GLP-1 или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп. 1-10, и 2) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество или фармацевтический носитель.

12. Применение аналога GLP-1 или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-10 или композиции по п. 11 для лечения инсулиннезависимого диабета, инсулинзависимого диабета, ожирения, неалкогольной жировой болезни печени, стеатоза печени, диабетической ретинопатии, диабетической нейропатии, диабетической нефропатии, инсулинорезистентности, дислипидемии, связанной с инсулинорезистентностью, и/или дислипидемии, связанной с диабетом.

13. Применение по п. 12, предназначенное для лечения инсулинорезистентности.

14. Применение по п. 12, предназначенное для лечения дислипидемии, связанной с диабетом.

15. Применение по п. 12, предназначенное для лечения дислипидемии, связанной с инсулинорезистентностью.