RU2845766C1

RU2845766C1 - Агонисты рецептора crf2 и их применение в терапии

Info

Publication number: RU2845766C1
Application number: RU2023106419A
Authority: RU
Inventors: Стефан Иллиано; Лоуренс ЛЮКА; Летиция ЛЕДЕЙН; Филипп БОВЕРЖЕ; Филипп ДЖАНЬЯК; Мари-Лор ОЗУКС; Нис Халланд; Зию ЛИ; Ральф ЭЛЬВЕРТ; Андреас ЭВЕРС; Элизабетта Бьянки; Алессиа САНТОПРЕТЕ; Даньела РОВЕРСИ; Мартина ТРИПЕПИ
Original assignee: Санофи
Priority date: 2020-08-19
Filing date: 2021-08-18
Publication date: 2025-08-25

Abstract

Изобретение относится к соединениям, которые являются агонистами рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2), и к их применению в терапии, особенно в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения и диабета. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 3 ил., 23 табл., 19 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются агонистами рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2), и к их применению в терапии, особенно в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения и диабета.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Урокортины (UCN) являются эндогенными пептидами, которые действуют через рецепторы кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF), которые являются рецепторами 2 типа, сопряженными с G-белком (GPCR). Семейство рецепторов CRF предусматривает рецепторы CRF1, которые кодируются геном CRHR1, и рецепторы CRF2, которые кодируются геном CRHR2.

Известны три эндогенных урокортина, обнаруженных у млекопитающих: UCN1, UCN2 и UCN3. Несмотря на высокую степень гомологии последовательностей, связывание этих пептидов с CRF1 и CRF2 отличается. CRF1 и CRF2 неселективно активируются с помощью CRH и UCN1, тогда как UCN2 и UCN3 являются селективными в отношении CRF2 агонистами. В частности, UCN2 представляет собой пептид из тридцати восьми аминокислот, который селективно активирует рецептор CRF2, включая известные изоформы CRF2-альфа (αα), -бета (β) и -гамма (γ).

Урокортины и их рецепторы участвуют в нейрогуморальных ответах на различные стрессовые и патологические ситуации. В частности, урокортины вызывают положительные гемодинамические эффекты как на доклинических моделях, так и у пациентов с сердечной недостаточностью или гипертонией. Урокортины и рецепторы CRF экспрессируются в сердце и в сосудах, при этом экспрессируется CRF2 в значительной степени, а CRF1 экспрессируется на минимальном уровне, если вообще экспрессируется (см. Waser et al., Peptides, 2006, 27, 3029-3038). На экспериментальных моделях было показано, что урокортины, действующие через активацию CRF2, улучшают сердечно-сосудистую функцию через ослабление сосудистого сопротивления и через сердечные инотропные и лузитропные действия. В клинических исследованиях было показано, что UCN2 и UCN3 характеризуются прямыми вазодилататорными действиями у здоровых добровольцев и у пациентов с сердечной недостаточностью (см. Stirrat et al., Br. J. Clin. Pharmacol., 2016, 82, 974-982), а UCN2 также продемонстрировал увеличение сердечного выброса и снижение сосудистого сопротивления у пациентов с сердечной недостаточностью (см. Davis et al., Eur. Heart J., 2007, 28, 2589-2597 и Chan et al., JACC: Heart Failure, 2013, 1, 433-441). Было показано, что рекомбинантная ацетатная соль UCN3 улучшает сердечный выброс и снижает сосудистое сопротивление в многоцентровом исследовании пациентов с хронической стабильной сердечной недостаточностью (см. Gheorghiade et al., Eur. J. Heart Fail., 2013, 15, 679-89).

Недавние исследования показали, что перенос генов UCN2 и/или UCN3 у мышей улучшает не только сердечную функцию, но и утилизацию глюкозы (см. Giamouridis et al., JACC: Basic to Translational Science, 2018, 3, 2). Кроме того, было показано, что подкожная доставка пегилированного UCN2 улучшает толерантность к глюкозе и увеличивает поглощение глюкозы в скелетных мышцах, снижая при этом массу тела за счет ограничения потребления пищи (см. Borg et al., Diabetes, 2019, 1403-1414). Эти данные позволяют предположить, что урокортины могут быть применимы не только при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, но и при лечении таких заболеваний, как диабет и ожирение.

Тем не менее чрезвычайно короткий период полужизни урокортинов остается основным ограничением для их терапевтического применения (см. Davies et al., JACC, 2007, 49, 461-471). На сегодняшний день лечение урокортинами не может быть продолжительным без хронической внутривенной инфузии. Однако для ведения пациентов с хроническим диабетом или сердечной недостаточностью требуется лечение, пригодное для длительного и самостоятельного введения в домашних условиях.

В попытке преодолеть такие ограничения были предложены различные аналоги урокортинов. Например, в WO 2018013803 (Alsina-Fernandez; Eli Lilly and Company) раскрыты аналоги UCN2, которые, как считается, могут быть применимы при лечении таких заболеваний, как хроническая болезнь почек и диабет II типа.

Однако остается потребность в улучшенных агонистах рецептора CRF2, которые применимы в качестве терапевтических средств, особенно в лечении и предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения и диабета. В частности, существует потребность в агонистах CRF2, обладающих необходимой эффективностью, фармакокинетическими свойствами (например, улучшенным периодом полужизни) и/или физико-химическими свойствами (например, улучшенной стабильностью и/или растворимостью).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В первом аспекте в настоящем изобретении предусмотрено соединение, которое представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность формулы (I) (SEQ ID NO: 186):

X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-X21-X22-X23-X24-X25-X26-X27-X28-X29-X30-X31-X32-X33-X34-X35-X36-X37-X38 (I),

где

X1 представляет собой изолейцин (I) или фенилаланин (F);

X2 представляет собой валин (V) или треонин (T);

X3 представляет собой лейцин (L);

X4 представляет собой серин (S);

X5 представляет собой лейцин (L);

X6 представляет собой аспартат (D);

X7 представляет собой валин (V) или D-валин (v);

X8 представляет собой пролин (P);

X9 представляет собой изолейцин (I) или треонин (T);

X10 представляет собой лизин (K), глутаминовую кислоту (E), гистидин (H) или глицин (G);

X11 представляет собой изолейцин (I) или лейцин (L);

X12 представляет собой лизин (K), где эпсилон-аминогруппа боковой цепи лизина ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом;

X13 представляет собой глутамин (Q) или лизин (K);

X14 представляет собой изолейцин (I), лизин (K) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X15 представляет собой лейцин (L);

X16 представляет собой лейцин (L) или фенилаланин (F);

X17 представляет собой глутаминовую кислоту (E) или лизин (K);

X18 представляет собой глутамин (Q);

X19 представляет собой аланин (A), глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q);

X20 представляет собой лизин (K) или аргинин (R);

X21 представляет собой глутамин (Q) или лизин (K);

X22 представляет собой лизин (K), аргинин (R) или глутаминовую кислоту (E);

X23 представляет собой лизин (K) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X24 представляет собой глутамин (Q), 2-аминоизомасляную кислоту (Aib), лейцин (L) или глутаминовую кислоту (E);

X25 представляет собой аргинин (R), лизин (K) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X26 представляет собой аланин (A), глутаминовую кислоту (E), 2-аминоизомасляную кислоту (Aib) или глутамин (Q);

X27 представляет собой глутамин (Q), 2-аминоизомасляную кислоту (Aib) или лизин (K);

X28 представляет собой аланин (A);

X29 представляет собой глутаминовую кислоту (E) или лизин (K);

X30 представляет собой лизин (K) или треонин (T);

X31 представляет собой аспарагин (N) или аланин (A);

X32 представляет собой лизин (K), аланин (A), валин (V), треонин (T), глутаминовую кислоту (E) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X33 представляет собой аргинин (R), лизин (K) или глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I) или лейцин (L);

X35 представляет собой лейцин (L);

X36 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E);

X37 представляет собой глутамин (Q) или аргинин (R);

X38 представляет собой изолейцин (I) или валин (V); и

где связывающий альбумин фрагмент представляет собой группу формулы (II),

-Y-Z-C(O)R¹ (II),

где

Y представляет собой AEEA, {AEEA}₂ или отсутствует, где AEEA обозначает [2-(2-аминоэтокси)этокси]-ацетил;

Z представляет собой gGlu, {gGlu}₂ или отсутствует; и

R¹ представляет собой -(CH₂)_xCOOH или -(CH₂)_xCH₃, в частности -(CH₂)_xCOOH, при этом x представляет собой целое число от 12 до 22;

или его фармацевтически приемлемая соль.

В одном варианте осуществления в вышеуказанной аминокислотной последовательности формулы (I) (SEQ ID NO: 186):

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X7 представляет собой валин (V) или D-валин (v)

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X13 представляет собой лизин (K) или глутамин (Q);

X14 представляет собой лизин (K) или изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X19 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой глутаминовую кислоту (E), аргинин (R) или лизин (K);

X23 представляет собой лизин (K) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib); в частности лизин (K);

X24 представляет собой глутаминовую кислоту (E), или глутамин (Q), или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X25 представляет собой лизин (K) или аргинин (R);

X26 представляет собой аланин (A), глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q); в частности глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q);

X27 представляет собой 2-аминоизомасляную кислоту (Aib); лизин (K) или глутамин (Q); в частности, лизин (K) или глутамин (Q); более конкретно глутамин (Q);

X29 представляет собой глутаминовую кислоту (E);

X30 представляет собой лизин (K) или треонин (T); в частности лизин (K);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K) или аланин (A);

X33 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q); в частности аргинин (R);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X36 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E); в частности глутаминовую кислоту (E);

X37 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q); и

X38 представляет собой валин (V).

В еще одном варианте осуществления в вышеуказанной аминокислотной последовательности формулы (I) (SEQ ID NO: 186):

X7 представляет собой D-валин (v);

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G); в частности лизин (K);

X19 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E); в частности глутаминовую кислоту (E);

X34 представляет собой 2-аминоизомасляную кислоту (Aib) или лизин (K); в частности лизин (K);

X24 представляет собой 2-аминоизомасляную кислоту (Aib) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X26 представляет собой глутамин (Q), аланин (A) или глутаминовую кислоту (E); в частности глутамин (Q) или глутаминовую кислоту (E); более конкретно глутаминовую кислоту (E);

X27 представляет собой глутамин (Q) или лизин (K); в частности глутамин (Q);

X30 представляет собой треонин (T) или лизин (K); в частности лизин (K);

X33 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q);

X36 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E); в частности аланин (A); и

X37 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q).

X10 представляет собой лизин;

X19 представляет собой глутаминовую кислоту (E);

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X26 представляет собой глутаминовую кислоту (E);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X30 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X36 представляет собой аланин (A); и

X37 представляет собой глутамин (Q).

В одном варианте осуществления в соединении аминокислотный остаток в положении X1 является ацетилированным, и необязательно аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным.

В еще одном варианте осуществления в соединении аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным как С-концевой первичный амид.

В одном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент выбран из следующих групп:

-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH;

-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)18COOH;

-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH;

-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)18COOH;

-C(O)(CH2)16COOH;

-gGlu-C(O)(CH2)16COOH;

-gGlu-C(O)(CH2)14COOH;

-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)14COOH и

-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)14COOH.

В еще одном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент представляет собой -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH или -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид под любым из SEQ ID NO: 1-227 или его фармацевтически приемлемую соль.

В еще одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид под любым из SEQ ID NO: 3, 7, 35, 83, 130, 135, 136, 137, 138, 139,140, 141, 142, 147, 149, 151, 152, 171, 172, 173 и 174 или его фармацевтически приемлемую соль.

Во втором аспекте в настоящем изобретении предусмотрена фармацевтическая композиция обладающая активностью агониста рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2), содержащая от 0,1% до 99,9% по весу соединения, описанного выше, и от 99,9% до 0,1% по весу фармацевтически приемлемых вспомогательного вещества, разбавителя или носителя.

Соединения и фармацевтические композиции, раскрываемые в данном документе, применимы в терапии и могут быть использованы в лечении или предупреждении различных заболеваний за счет механизма агонизма рецептора CRF2. Таким образом, в других аспектах настоящее изобретение относится к применению соединений и фармацевтических композиций в терапии, особенно в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения, диабета, саркопении, мышечной дистрофии, заболевания почек, легочной гипертензии, заболевания периферических артерий, воспаления, аллергии и ишемии тканей; в частности, в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе особенно сердечной недостаточности, ожирения и диабета.

Соединения и фармацевтические композиции, раскрываемые в данном документе, применимы в качестве агониста рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фигуре 1 представлен график, на котором показано потребление пищи на протяжении периода введения дозы мышами C57BL/6N (DIO), которых кормили рационом с высоким содержанием жира и обрабатывали подкожно каждый второй день соединением под SEQ ID NO: 35 (черные кружочки), эталонным соединением (серые кружочки) или средой-носителем (белые кружочки). По оси x указан день исследования, а по оси y указано потребление пищи (в граммах). Значения выражены как среднее ± стандартная ошибка среднего (SEM).

На фигуре 2 представлен график, на котором показано относительное изменение массы тела на протяжении периода введения дозы мышами C57BL/6N (DIO), которых кормили рационом с высоким содержанием жира и обрабатывали подкожно соединением под SEQ ID NO: 35 (черные кружочки), эталонным соединением (серые кружочки) или средой-носителем (белые кружочки). По оси x указан день исследования, а по оси y указано относительное изменение массы тела (в %). Значения выражены как среднее ± SEM.

Фигура 3. Репрезентативные последовательности пептидов по настоящему изобретению с оптимизированным профилем стабильности, где K[sema] означает K[gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃].

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются производными UCN2 и применимы в качестве агонистов рецептора CRF2. Соединения проявляют необходимую активность и селективность в отношении рецептора CRF2, в частности, в отношении рецептора CRF1, а также улучшенные фармакокинетические свойства и благоприятные эффекты in vivo на соответствующих животных моделях. Кроме того, соединения проявляют необходимые физико-химические свойства, такие как необходимая растворимость и стабильность, что делает их отличными кандидатами для составов растворов для подкожной доставки. Соединения применимы в терапии, особенно в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, ожирения, диабета, саркопении, мышечной дистрофии, заболевании почек, легочной гипертензии, заболевания периферических артерий, воспаления, аллергии и ишемии тканей; в частности, в лечении или предупреждении сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе особенно сердечной недостаточности, ожирения и диабета.

Соединения

Соединения по настоящему изобретению представляют собой пептиды, включающие аминокислотную последовательность формулы (I), приведенной выше, или фармацевтически приемлемые соли указанных пептидов.

В настоящем изобретении аминокислоты обозначают посредством их названия, посредством их общеизвестных трехбуквенных символов или посредством однобуквенных символов, рекомендованных Комиссией по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB. Также могут быть использованы общепринятые трехбуквенные коды для других аминокислот, например Aib для 2-аминоизомасляной кислоты. Если не указано иное, то все аминокислоты, применяемые в соединениях по настоящему изобретению, являются L-аминокислотами. Так, например, L-валин обозначают как «валин», «V» или «Val», в то время как D-валин специально обозначают как таковой.

В одном варианте осуществления X1 представляет собой изолейцин (I).

В одном варианте осуществления X2 представляет собой валин (V).

В одном варианте осуществления X9 представляет собой изолейцин (I).

В одном варианте осуществления X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G).

В одном варианте осуществления X11 представляет собой лейцин (L).

В одном варианте осуществления X14 представляет собой изолейцин (I).

В одном варианте осуществления X16 представляет собой лейцин (L).

В одном варианте осуществления X19 представляет собой аланин (A) или глутаминовую кислоту (E).

В одном варианте осуществления X21 представляет собой глутамин (Q).

В одном варианте осуществления X22 представляет собой лизин (K).

В одном варианте осуществления X24 представляет собой глутамин (Q) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib).

В одном варианте осуществления X25 представляет собой аргинин (R).

В одном варианте осуществления X26 представляет собой аланин (A), глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q).

В одном варианте осуществления X27 представляет собой глутамин (Q).

В одном варианте осуществления X29 представляет собой глутаминовую кислоту (E).

В одном варианте осуществления X31 представляет собой аспарагин (N).

В одном варианте осуществления X32 представляет собой лизин (K).

В одном варианте осуществления X33 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q).

В одном варианте осуществления X34 представляет собой изолейцин (I).

В одном варианте осуществления X35 представляет собой лейцин (L).

В одном варианте осуществления X38 представляет собой валин (V).

В одном варианте осуществления аминокислотный остаток в X38 является амидированным.

В одном варианте осуществления аминокислотный остаток в X1 является ацетилированным.

В одном варианте осуществления

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X24 представляет собой глутамин (Q) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X25 представляет собой аргинин (R);

X26 представляет собой аланин (A), глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L); и

X38 представляет собой валин (V).

В одном варианте осуществления

X10 представляет собой лизин (K);

X24 представляет собой глутамин (Q); и

X26 представляет собой глутаминовую кислоту (E).

В одном варианте осуществления

X33 представляет собой глутамин (Q); и

X37 представляет собой глутамин (Q).

В одном варианте осуществления

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X37 представляет собой глутамин (Q); и

X38 представляет собой валин (V).

Как указано выше, соединения по настоящему изобретению содержат модифицированный остаток лизина (K) в положении, обозначенном X12 в формуле (I), в котором связывающий альбумин фрагмент ковалентно связан с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина.

Используемый в данном документе термин “связывающий альбумин фрагмент” относится к фрагменту, который способен связываться с альбумином путем ковалентного или нековалентного связывания. В вариантах осуществления связывающий альбумин фрагмент способен связываться с альбумином путем нековалентного связывания. Связывающий альбумин фрагмент может включать или состоять из группы, выбранной из жирных кислот, фталоцианинов, кумаринов, флавоноидов, тетрациклинов, нафталинов, арилкарбоновых кислот, гетероарилкарбоновых кислот, липидов, алкиламинов, циклических или линейных тетрапирролов и их металлоорганических соединений, галогензамещенных производных ароматических кислот, органических красителей и производных триптофана и тироксина.

В конкретном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент включают группу C14-C24 жирной кислоты, которая конъюгирована с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина либо прямой связью, либо линкером. Используемый в данном документе термин “C14-C24 жирная кислота” означает карбоновую кислоту, имеющую от 14 до 24 атомов углерода. C14-C24 жирная кислота может быть насыщенной одноосновной кислотой или насыщенной двухосновной кислотой. Под «насыщенной» подразумевается, что жирная кислота не содержит двойных или тройных углерод-углеродных связей.

Примеры насыщенных C14-C24 жирных кислот включают миристиновую кислоту (тетрадекановую кислоту; С14 одноосновную кислоту), тетрадекандиовую кислоту (C14 двухосновную кислоту), пентадециловую кислоту (пентадекановую кислоту; С15 одноосновную кислоту), пентадекановую кислоту (C15 двухосновную кислоту), пальмитиновую кислоту (гексадекановую кислоту; С16 одноосновную кислоту), гексадекандиовую кислоту (C16 двухосновную кислоту), маргариновую кислоту (гептадекановую кислоту; C17 одноосновную кислоту), гептадекандиовую кислоту (C17 двухосновную кислоту), стеариновую кислоту (октадекановую кислоту; C18 одноосновную кислоту), октадекандиовую кислоту (C18 двухосновную кислоту), нонадециловую кислоту (нонадекановую кислоту; C19 одноосновную кислоту), нонадекандиовую кислоту (C19 двухосновную кислоту), арахидоновую кислоту (эйкозановую кислоту; C20 одноосновную кислоту), эйкозандиовую кислоту (C20 двухосновную кислоту), генейкозиловую кислоту (генэйкозановую кислоту; C21 одноосновную кислоту), генейкозандиовую кислоту (C21 двухосновную кислоту), бегеновую кислоту (докозановую кислоту; C22 одноосновную кислоту), докозандиовую кислоту (C22 двухосновную кислоту), лигноцериновую кислоту (тетракозановую кислоту; C24 одноосновную кислоту), трикозановую кислоту (C23 одноосновную кислоту), трикозановую кислоту (C23 двухосновную кислоту) и тетракозандиовую кислоту (C24 двухосновную кислоту).

В одном варианте осуществления группа C14-C24 жирной кислоты выбрана из группы, состоящей из пальмитиновой кислоты (гексадекановой кислоты; C16 одноосновной кислоты), гексадекандиовой кислоты (C16 двухосновной кислоты), стеариновой кислоты (октадекановой кислоты; C18 одноосновной кислоты), октадекандиовой кислоты (C18 двухосновной кислоты), арахидоновой кислоты (эйкозановой кислоты; C20 одноосновной кислоты) и эйкозандиовой кислоты (C20 двухосновной кислоты).

C14-C24 жирная кислота может быть связана непосредственно с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина. В качестве альтернативы, C14-C24 жирная кислота может быть связана с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина посредством линкера. Линкер может содержать одну или более групп, выбранных из [2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетила (называемого в данном документе “AEEA”), глицина (Gly), N-метилглицина (N-MeGly), 3-[2-[2-[2-(2-аминоэтокси)-этокси]-этокси]-этокси]-пропионовой кислоты (№ по CAS 663921-15-1, также известной как амино-PEG4-кислота или (PEO)4-аминопропионовая кислота), амино-PEG6-кислоту (№ по CAS 905954-28-1), амино-PEG8-кислоту (№ по CAS 756526-04-2) и гамма-глутаминовую кислоту (gGlu); в частности, выбранных из AEEA, Gly, N-MeGly и gGlu; более конкретно, выбранных из AEEA и gGlu.

В одном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент представляет собой группу формулы (II),

-Z¹-Y-Z²-C(O)R¹ (II),

где

Y представляет собой AEEA, {AEEA}₂, {AEEA}₃, Gly, {Gly}₂, {Gly}₃, N-MeGly, {N-MeGly}₂, {N-MeGly}₃ или отсутствует;

каждый из Z¹ и Z² независимо выбран из gGlu, {gGlu}₂, {gGlu}₃, {gGlu}₄ или отсутствует; и

R¹ представляет собой -(CH₂)_xCOOH или -(CH₂)_xCH₃; в частности, -(CH₂)_xCOOH, где x представляет собой целое число от 12 до 22.

В одном варианте осуществления Z¹ отсутствует, Y представляет собой {AEEA}₂, и Z² представляет собой gGlu или {gGlu}₂.

В одном варианте осуществления Z¹ представляет собой gGlu или {gGlu}₂, Y представляет собой {AEEA}₂, и Z² представляет собой gGlu или {gGlu}₂.

В одном варианте осуществления Z¹ отсутствует, Y отсутствует, и Z² представляет собой gGlu или {gGlu}₂.

В одном варианте осуществления все из Y, и Z¹, и Z² отсутствуют.

Неожиданно было обнаружено, и как видно из приведенных ниже примеров, что связывающие альбумин фрагменты, содержащие свободную карбоновую кислоту, имеют улучшенную селективность в отношении CRF2. Следовательно, в конкретном варианте осуществления R¹ представляет собой -(CH₂)_xCOOH, где x равняется 14, 16 или 18; в частности 16 или 18; более конкретно 14 или 16; еще более конкретно 14.

В одном варианте осуществления R¹ представляет собой -(CH₂)_xCH₃, где x равняется 14, 16 или 18; в частности 14 и 16.

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆CH₃;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈CH₃;

-(gGlu)_n=1-4 -C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆CH₃;

-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈CH₃;

-(AEEA)_n=1,2-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(gGlu)_n=1-4 (AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆CH₃;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈CH₃;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈COOH.

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(gGlu)_n=1-4 -C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(AEEA)_n=1,2-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₈COOH.

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄CH₃.

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH и

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH.

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH и

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2- -(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₆COOH.

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH и

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH.

-(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH и

-(gGlu)_n=1-4-(AEEA)_n=1,2--(gGlu)_n=1-4-C(O)(CH₂)₁₄COOH.

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-C(O)(CH₂)₁₄COOH и

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH.

В одном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент представляет собой -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH или -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH.

Химические структуры и названия IUPAC этих групп приведены в таблице 1 ниже, в которой R обозначает точку присоединения каждой группы к эпсилон-аминогруппе остатка лизина в X12:

В конкретном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент представляет собой -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH или -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH. В более конкретном варианте осуществления связывающий альбумин фрагмент представляет собой -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 1-227, или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 3, 7, 35, 83, 130, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 147, 149, 151, 152, 171, 172, 173 и 174, или его фармацевтически приемлемую соль. В другом варианте осуществления соединение представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 35, 130, 135, 137, 140, 142, 149, 151 и 152. В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 35, 130, 83, 135, 136, 137, 138, 139, 147, 151, 174. В следующем варианте осуществления соединение представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность под любым из SEQ ID NO: 35, 130, 135, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 149, 151 и 152, или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид аминокислотной последовательности формулы (I), где необязательно аминокислотный остаток в положении X1 является ацетилированным, и при этом необязательно аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным; или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид аминокислотной последовательности формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль; где

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X7 представляет собой валин (V) или D-валин (v)

X9 представляет собой изолейцин (I) или треонин (T); в частности изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой лизин (K) или изолейцин (I); в частности изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой глутаминовую кислоту (E), или аргинин (R), или лизин (K); в частности аргинин (R) или лизин (K); более конкретно лизин (K);

X24 представляет собой глутаминовую кислоту (E), или глутамин (Q), или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib); в частности глутамин (Q) или 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X25 представляет собой лизин (K) или аргинин (R); в частности аргинин (R);

X27 представляет собой лизин (K) или глутамин (Q); в частности лизин (K) или глутамин (Q); более конкретно глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K) или аланин (A); в частности лизин (K);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X38 представляет собой валин (V);

и необязательно при этом аминокислотный остаток в положении X1 является ацетилированным, и необязательно при этом аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным.

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X7 представляет собой D-валин (v);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X13 представляет собой глутамин (Q);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X25 представляет собой аргинин (R);

X26 представляет собой глутаминовую кислоту (E) или глутамин (Q) или аланин (A);

X27 представляет собой лизин (K) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X36 представляет собой глутаминовую кислоту (E) или аланин (A);

X38 представляет собой валин (V);

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X37 представляет собой глутамин (Q); и

X38 представляет собой валин (V);

X7 представляет собой D-валин (V);

X10 представляет собой лизин;

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X30 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X36 представляет собой аланин (A);

X37 представляет собой глутамин (Q);

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид аминокислотной последовательности формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль; где аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным как первичный амид.

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L); и

X38 представляет собой валин (V);

и при этом аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным как первичный амид.

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K), глутаминовую кислоту (E) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X15 представляет собой лейцин (L)

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K) или глутаминовую кислоту (E);

X23 представляет собой 2-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K) или глутаминовую кислоту (E); в частности глутаминовую кислоту (E);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L); и

X38 представляет собой валин (V);

и при этом аминокислотный остаток в положении X1 является ацетилированным, а аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным как первичный амид.

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X9 представляет собой изолейцин (I);

X10 представляет собой лизин (K);

X11 представляет собой лейцин (L);

X14 представляет собой изолейцин (I);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X22 представляет собой лизин (K);

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X37 представляет собой глутамин (Q); и

X38 представляет собой валин (V);

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид под любым из SEQ ID NO: 1-227 или его фармацевтически приемлемую соль. Эти пептиды приведены в таблице 2 ниже, в которой K* обозначает остаток модифицированного лизина в положении X12, R^a обозначает связывающий альбумин фрагмент, Ac- обозначает, что N-конец является ацетилированным, и -NH2 обозначает, что C-концевой аминокислотный остаток является амидированным как первичный амид.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 7):

IVLSLDvPTKLK*QKLLKQERQRKEREQAEKNARILARV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана с -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; и

-NH2 обозначает, что C-концевой аминокислотный остаток является амидированным как первичный амид;

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 32):

IVLSLDvPTKLK*QKLLKQERQRKEREQAEKNVRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 35):

IVLSLDVPIKLK*KILLEQEKQKKQREQAETNKQILAQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана с -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 83):

IVLSLDvPIGLK*QILLKQERQKKAibREQAETNKRILERV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH и -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 130):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKAibQREQAEKNKQILAQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄CH₃; в частности -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 135):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKAibQRQQAEKNKQILAQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH и -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; в частности -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 136):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKKAibRQKAEKNKQILAQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃;-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄CH_3;; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 137):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKKQREQAEKNKQILEQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; в частности -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 138):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKKQREQAEKNKQILEQV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 139):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKKQRQQAEKNKQILAQV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 140):

IVLSLDvPIKLK*QILLEQARQKAibQRAQAEKNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 141):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQARQKAibQRAQAEKNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 142):

IVLSLDvPIKLK*QILLEQARQKAibQREQAEKNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 147):

IVLSLDvPIGLK*QILLKQERQKKAibREQAETNKQILAQV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃; -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и -{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄CH₃; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 149):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQERQKKAibREQAETNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 150):

IVLSLDvPIGLK*QILLKQERQKKAibRQQAETNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 151):

IVLSLDvPIGLK*QILLKQERQKKAibREQAEKNKRILERV-NH2,

где

остаток K в положении 12 (обозначенный K*) является химически модифицированным, так что эпсилон-аминогруппа его боковой цепи ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом, выбранным из gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH; -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃ и -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; в частности -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH; и

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 152):

IVLSLDVPIKLK*QILLKQERQKKAibREQAETNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления соединение представляет собой пептид следующей аминокислотной последовательности (SEQ ID NO: 174):

IVLSLDvPIKLK*QILLKQARQKAibQRAQAEKNKRILERV-NH2,

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены и применены в форме фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли и способы их получения хорошо известны в уровне техники (см., например, Stahl, et al. “Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use”, Second Revised Edition, Wiley-VCH, 2011 и Berge, et al., “Pharmaceutical Salts,” Journal of Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1). Примеры фармацевтически приемлемых солей включают трифторацетатные соли, ацетатные соли и хлористоводородные соли.

Синтез соединений

Можно применять ряд способов получения соединений по настоящему изобретению. Соединения можно получать путем синтеза в раствор или на твердой подложке с последующим выделением и очисткой. В качестве альтернативы, пептиды можно получать путем генной экспрессии в клетке-хозяине, в которую введена последовательность ДНК, кодирующая пептид. Генной экспрессии также можно достичь без использования клеточной системы. Можно также применять комбинации способов.

В частности, соединения могут быть получены твердофазным синтезом на подходящей смоле. Твердофазный синтез пептидов является хорошо разработанной методикой (см., например, Stewart and Young, “Solid Phase Peptide Synthesis”, Pierce Chemical Co., Rockford, Ill., 1984; and Atherton and Sheppard, “Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach”, Oxford-IRL Press, New York, 1989).

Для получения соединений можно применять стандартные ручные или автоматизированные процедуры твердофазного синтеза. Автоматизированные синтезаторы пептидов коммерчески доступны, например, от Applied Biosystems (Фостер-Сити, штат Калифорния, США) и Protein Technologies Inc. (Тусон, штат Аризона, США). Реагенты для твердофазного синтеза легко доступны из коммерческих источников. Твердофазные синтезаторы можно применять в соответствии с инструкциями производителя для блокирования мешающих групп, защиты аминокислот во время реакции, присоединения, снятия защиты и кэпирования непрореагировавших аминокислот.

Твердофазный синтез может быть инициирован посредством присоединения защищенной с N-конца аминокислоты с помощью ее карбокси-конца к инертной твердой подложке, несущей расщепляемый линкер. Твердая подложка может представлять собой любой полимер, который обеспечивает присоединение первой аминокислоты, например тритильную смолу, хлортритильную смолу, смолу Ванга или смолу Ринка, при этом связывание карбоксильной группы (или карбоксамидной группы для смолы Ринка) со смолой является чувствительным к кислоте (при применении стратегии Fmoc). Подложка должна быть подложной, которая стабильна в условиях, используемых для снятия защиты с α-аминогруппы во время синтеза пептида.

После того как N-концевая защищенная первая аминокислота была соединена с твердой подложкой, защитную группу для α-аминогруппы этой аминокислоты удаляют с помощью реагента, такого как, например, трифторуксусная кислота (TFA) или пиперидин. Затем остальные защищенные аминокислоты соединяют одну за другой или добавляют в виде заранее полученного дипептида, трипептида или тетрапептида в порядке, представленном пептидной последовательностью, с помощью соответствующих реагентов для присоединения амидов. Примеры реагентов для присоединения включают бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония гексафторфосфат (BOP), гексафторфосфатбензотриазол-тетраметил-урония (HBTU), гексафторфосфат азабензотриазол-тетраметил-урония (HATU), диизопропил-карбодиимид (DIC), 1-гидроксибензотриазол (HOBt) и 1-гидрокси-7-азабензотриазол, а также их комбинации. Обычно присоединения проводят при комнатной температуре в инертном растворителе, таком как диметилформамид (DMF), N-метилпирролидон (NMP) или дихлорметан (DCM).

Как правило, реакционноспособные группы боковых цепей аминокислот защищают подходящими блокирующими группами. Эти защитные группы удаляют после сборки необходимых пептидов, и их можно удалять одновременно с отщеплением необходимого продукта от смолы при тех же условиях. Защитные группы и процедуры их введения хорошо известны в уровне техники (см., например, Greene and Wuts, “Protective Groups in Organic Synthesis”, 3^rd ed., 1999, Wiley & Sons). Примеры защитных групп включают трет-бутилоксикарбонил (tBoc) и флуоренилметоксикарбонил (Fmoc).

Связывающий альбумин фрагмент может быть введен путем селективной функционализации остатка лизина (K) в положении, обозначенном X12. Таким образом, остаток лизина может содержать защитную группу боковой цепи, которая может быть селективно удалена, в то время как другие защитные группы боковой цепи остаются интактными, так что остаток лизина со снятой защитой может быть селективно функционализирован связывающим альбумин фрагментом. Конъюгация связывающего альбумин фрагмента с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина может быть достигнута с помощью реакции ацилирования или других подходящих реакций, известных в уровне техники.

В качестве иллюстрации, остаток лизина может быть защищен защитной группой 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1-илиден)-3-метилбутил («ivDde»), которая лабильна к высоконуклеофильным основаниям, таким как 4% гидразина в DMF (см. Chhabra et al., Tetrahedron Lett. 1998, 39, 1603). Таким образом, если N-концевая аминогруппа и все функциональные группы боковой цепи защищены кислотно-лабильными защитными группами, то группа ivDde может быть селективно удалена с помощью высоконуклеофильного основания. Полученная в результате свободная аминогруппа может быть конъюгирована со связывающим альбумин фрагментом, например путем ацилирования. В качестве альтернативы, остаток лизина может быть защищен защитной группой (4-метоксифенил)дифенилметил («Mmt»), которая лабильна к очень мягким кислотам, таким как уксусная кислота, и трифторэтанолу в дихлорметане (см. Dubowchik et al., Tetrahedron Lett., 1997, 38(30), 5257). Таким образом, если N-концевая аминогруппа и все функциональные группы боковой цепи защищены защитными группами, лабильными только к сильным кислотам, то группа Mmt может быть селективно удалена, например, с помощью смеси уксусной кислоты и трифторэтанола в дихлорметане (например, в соотношении 1:2:7). Полученная в результате свободная аминогруппа может быть конъюгирована со связывающим альбумин фрагментом, например путем ацилирования.

В качестве альтернативы, связывающий альбумин фрагмент может быть введен вместе с лизином во время пептидного синтеза с использованием предварительно функционализированного структурного элемента в качестве партнера по присоединению. Примеры таких предварительно функционализированных структурных элементов включают Fmoc-L-Lys(Palm-L-Glu-OtBu)-OH и Fmoc-L-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆-C(O)OtBu]-OH.

При необходимости N-конец пептидной цепи может быть модифицирован, например, путем ацетилирования. Для синтеза пептидов с С-концевым амидом обычно применяют смолы, содержащие линкеры амидной смолы Ринка 4-метилбензгидриламин (MBHA) или амидной смолы Ринка AM, при синтезе Fmoc, а смолу MBHA обычно применяют при синтезе tBoc.

После завершения синтеза пептиды отщепляют от твердофазной подложки с одновременным снятием защиты боковой цепи с помощью стандартных способов обработки. Это может быть достигнуто с помощью смеси Кинга (King et al., Int. J. Peptide Protein Res., 1990, 36, 255-266) или аналогичных смесей для расщепления, известных в уровне техники.

При необходимости исходный материал может быть очищен с помощью хроматографии (например, с помощью препаративной RP-HPLC). Неочищенные пептиды обычно очищают с помощью RP-HPLC на колонках C8 или C18 с использованием градиентов воды-ацетонитрила в 0,05-0,1% трифторуксусной кислоте (TFA). Чистота пептидов может быть проверена с помощью аналитической RP-HPLC. Идентичность пептидов может быть проверена с помощью масс-спектрометрии. Соединения могут быть выделены в твердой форме (например, в виде сухих порошков) с использованием таких методик, как лиофилизация.

Настоящее изобретение также относится к промежуточным соединениям для применения в синтезе соединений по настоящему изобретению. В частности, представлено соединение, которое представляет собой пептид, включающий аминокислотную последовательность формулы (I), раскрываемой в данном документе, в которой остатки в положениях X1 - X11 и X13 - X38 имеют значения, указанные применительно к формуле (I), а X12 представляет собой лизин (K); или его соль. Указанное соединение можно применять в качестве промежуточного соединения для получения соединений по настоящему изобретению, которые могут быть получены путем конъюгирования связывающего альбумин фрагмента с эпсилон-аминогруппой боковой цепи лизина в X12. Добавление связывающего альбумин фрагмента можно осуществлять, пока пептид еще прикреплен к твердой фазе. После добавления связывающего альбумин фрагмента пептид можно высвобождать из смолы и очищать.

Конкретные способы получения соединений по настоящему изобретению описаны в примерах ниже. Конкретные синтетические стадии для каждого из описанных путей можно объединять различными способами для получения соединений. Реагенты и исходные материалы легко доступны или могут быть получены способами, известными в уровне техники.

Фармацевтические композиции

Также в данном документе раскрыты фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые носитель или вспомогательное вещество.

Фармацевтическая композиция может содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 99,9% по весу соединения по настоящему изобретению и от приблизительно 99,9% до приблизительно 0,1% по весу одного или более фармацевтически приемлемых носителей, вспомогательных веществ или разбавителей. В одном примере фармацевтическая композиция содержит от приблизительно 5% до приблизительно 75% по весу соединения по настоящему изобретению, при этом остальную часть составляют подходящие фармацевтические носители, разбавители или вспомогательные вещества. Способы получения фармацевтических композиций известны или будут очевидны специалистам в данной области, например, из литературы, такой как Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22^nd Edition, Pharmaceutical Press.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит одно или более дополнительных терапевтических средств.

Фармацевтическая композиция может быть пригодна для введения парентеральным путем, например перорального, подкожного, внутривенного, внутрибрюшинного, внутримышечного, легочного или трансдермального введения. В частности, фармацевтическая композиция может быть пригодна для подкожного введения. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой готовую к применению композицию, подходящую для введения с помощью шприца-ручки или автоинжекторного устройства.

Соединения могут проявлять необходимую растворимость, химическую стабильность и/или физическую стабильность, особенно в растворителях при физиологических значениях pH и растворителях, содержащих противомикробные консерванты, такие как фенол или мета-крезол. Как следствие, соединения могут быть особенно подходящими для применения в фармацевтических композициях в форме раствора.

В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой раствор, содержащий растворитель, растворенное в нем соединение по настоящему изобретению и противомикробный консервант, выбранный из фенола и мета-крезола; где соединение по настоящему изобретению присутствует в количестве по меньшей мере 1 мг/мл, по меньшей мере 5 мг/мл, по меньшей мере 10 мг/мл или по меньшей мере 20 мг/мл; и при этом раствор имеет pH от 6 до 8 (например, pH 7,0 или pH 7,4), измеренный при 25ºC.

Применение в терапии

Соединения по настоящему изобретению применимы в терапии и могут быть использованы для лечения или предупреждения ряда заболеваний. Таким образом, в других аспектах настоящее изобретение относится к применению соединений в терапии и для терапевтических способов, при которых пациенту вводят эффективное количество соединения по настоящему изобретению. Настоящее изобретение также относится к применению соединений для изготовления лекарственных препаратов для применения в терапии. Соединения особенно применимы в терапии заболеваний, которые можно лечить или предупреждать за счет механизма агонизма рецептора CRF2.

Используемый в данном документе термин «терапия» относится к лечению или предупреждению заболевания у пациента.

Используемый в данном документе термин «лечить» или «лечение» включает предотвращение, сдерживание, замедление, остановку или обращение прогрессирования тяжести имеющегося заболевания у пациента. Лечение может обеспечить устранение заболевания; остановить или замедлить заболевание у пациента; подавить или замедлить развитие нового заболевания у пациента; уменьшить частоту или тяжесть симптомов и/или рецидивов у пациента, который в настоящее время имеет или ранее имел заболевание; и/или продлить, т. е. увеличить, продолжительность жизни пациента. В частности, лечение заболевания может привести к излечению, сокращению продолжительности, смягчению, замедлению или подавлению прогрессирования или ухудшения заболевания или его симптомов.

Термин «предотвращать» или «предотвращение», используемый в настоящем документе, относится к подавлению или задержке начала заболевания или болезни у пациента.

Используемый в данном документе термин «заболевание» относится к любому состоянию или нарушению, которое повреждает или нарушает нормальную функцию клетки, ткани или органа.

Используемый в данном документе термин «пациент» относится к млекопитающему, такому как человек, мышь, морская свинка, крыса, собака или кошка. В конкретном варианте осуществления пациент представляет собой пациента-человека.

Используемый в данном документе термин «эффективное количество» относится к количеству или дозе соединения по настоящему изобретению, которое при введении одной или более доз пациенту обеспечивает необходимый эффект у пациента. Эффективное количество может быть легко определено лечащим врачом путем применения известных методик и путем наблюдения за результатами, полученными в аналогичных обстоятельствах. При определении эффективного количества для пациента лечащий врач учитывает ряд факторов, включая без ограничения вид млекопитающего, его размер, возраст и общее состояние здоровья, конкретные рассматриваемые заболевание или болезнь, степень вовлечения или тяжесть заболевания или болезни, ответ конкретного пациента, конкретное вводимое соединение, способ введения, характеристики биодоступности вводимого препарата, выбранный режим введения, применение сопутствующих лекарственных препаратов и другие соответствующие обстоятельства.

Соединения по настоящему изобретению могут быть эффективны в широком диапазоне доз. Например, суточные дозы могут находиться в диапазоне от приблизительно 0,01 до приблизительно 50 мг/кг веса тела.

Было замечено, что соединения по настоящему изобретению имеют отличную стабильность в различных тестируемых средах. Следовательно, соединения по настоящему изобретению являются особенно подходящими в вариантах осуществления, где соединения вводят один раз в день, один раз в неделю, два раза в месяц или ежемесячно. Это, в частности, относится к соединениям по настоящему изобретению с D-валином в положении 7, лизином, дериватизированным в положении 12 жирной кислотой, как представлено в данном документе, для увеличения периода полужизни, с отличной эффективностью в отношении CRF2 и хорошим профилем селективности по сравнению с CRF1.

Соединения можно вводить в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами. Используемый в данном документе термин «в комбинации с» означает введение соединения по настоящему изобретению одновременно, последовательно или в одном комбинированном составе с одним или более дополнительными терапевтическими средствами.

Соединения по настоящему изобретению могут быть введены парентеральным путем, например путем ингаляции, подкожного, внутривенного, внутрибрюшинного, внутримышечного, легочного или трансдермального введения.

В конкретном варианте осуществления соединения вводят подкожным введением. Соединения может вводить врач или сам пациент с помощью инъекционного устройства. Понятно, что размер калибра и объем инъекции определяет опытный специалист. В одном варианте осуществления объем инъекции меньше или равен 2 мл, например меньше или равен 1 мл. В другом варианте осуществления применяют калибр иглы больше или равный 27, например больше или равный 29. Введение можно осуществлять с помощью автоинжектора или многодозового устройства доставки.

Соединения по настоящему изобретению можно применять в терапии заболеваний, которые можно лечить или предупреждать за счет механизма агонизма рецептора CRF2.

Соединения особенно применимы в лечении или предупреждении саркопении, легочной гипертензии, мышечной дистрофии, заболевания почек, болезни периферических артерий (PAD), сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе, в частности, сердечной недостаточности, ожирения и диабета. Таким образом, варианты осуществления по настоящему изобретению относятся к применению соединений в лечении или предупреждении саркопении, легочной гипертензии, мышечной дистрофии, заболевания почек, болезни периферических артерий (PAD), сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе, в частности, сердечной недостаточности, ожирения и диабета, у пациента. Настоящее изобретение также относится к способам лечения или предупреждения саркопении, легочной гипертензии, мышечной дистрофии, заболевания почек, болезни периферических артерий (PAD), сердечно-сосудистого заболевания, в том числе, в частности, сердечной недостаточности, ожирения и диабета, у пациента, которые включают введение эффективного количества соединения по настоящему изобретению пациенту. Кроме того, настоящее изобретение относится к применению соединений в изготовлении лекарственного препарата для лечения или предупреждения сердечно-сосудистого заболевания, в том числе, в частности, сердечной недостаточности, ожирения или диабета, у пациента.

Примеры сердечно-сосудистых заболеваний, которые можно лечить или предупреждать с помощью соединений по настоящему изобретению, включают сердечную недостаточность, гипертензию, дислипидемию, атеросклероз, артериосклероз, коронарную болезнь сердца и инсульт. Эффект соединений при данных состояниях может быть результатом их эффекта в отношении веса тела или быть связанным с ним, или может быть независимым от него. В конкретном варианте осуществления соединения применяют для лечения или предупреждения сердечной недостаточности. Соединение можно вводить в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, применимыми для лечения сердечной недостаточности, такими как ингибитор ангиотензинпревращающего фермента (ACEi), блокаторы рецептора ангиотензина II (ARB), диуретики, ингибиторы натрий-зависимых котранспортеров глюкозы (SGLTi), бета-блокаторы, антагонисты минералокортикоидов или ингибитор неприлизина.

Соединения также могут быть применимы в лечении или предупреждении ожирения и других заболеваний, вызванных или характеризующихся избыточной массой тела, таких как связанное с ожирением воспаление, связанное с ожирением заболевание желчного пузыря и вызванное ожирением апноэ сна. В случае взрослого пациента-человека ожирение можно определить как индекс массы тела (BMI), значение которого выше или равно 30 кг/м². BMI является простым показателем соотношения веса и роста, который широко применяют для классификации избыточного веса и ожирения у взрослых. Его определяют как вес человека в килограммах, деленный на квадрат его/ее роста в метрах, и, следовательно, выражается в единицах кг/м². Соединение можно вводить в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, применимыми для лечения ожирения. В качестве альтернативы или дополнения, лечение можно сочетать с диетой и физическими упражнениями.

Соединения также могут быть применимы в лечении или предупреждении диабета, особенно диабета II типа. Соединения можно вводить отдельно или в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, применимыми для лечения диабета, например одним или более средствами, выбранными из метформина, тиазолидиндионов (TZD), сульфонилмочевины (SU), ингибиторов дипептидилпептидазы-IV (DPP-IV), агонистов глюкагоноподобного пептида-1 (GLP1) и натрий-зависимых котранспортеров глюкозы (SGLT). В качестве альтернативы или дополнения, лечение можно сочетать с диетой и физическими упражнениями. Соединения также можно применять для лечения или предупреждения гипергликемии, диабета I типа и нарушенной толерантности к глюкозе. Соединения также можно применять в лечении или предупреждении диабета.

Соединения также можно применять в лечении или предупреждении других заболеваний, таких как саркопения, легочная гипертензия, заболевания почек, болезнь периферических артерий (PAD), метаболический синдром, хроническое заболевание почек, дегенеративные заболевания (например, нейродегенеративные заболевания) или заболевания, сопровождающиеся тошнотой или рвотой.

Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими примерами, которые приведены исключительно в иллюстративных целях. Примеры не должны рассматриваться как ограничивающие объем или содержание настоящего изобретения каким-либо образом.

ПРИМЕРЫ

Сокращения

Определенные сокращения используются в примерах и в других местах настоящего документа.

«AA» относится к аминокислоте;

«AEEA» относится к [2-(2-аминоэтокси)этокси]ацетилу;

«Aib» относится к 2-амино-изомасляной кислоте;

«AUC» относится к площади под кривой;

«cAMP» относится к циклическому аденозинмонофосфату;

«Boc» относится к трет-бутилоксикарбонилу;

«BOP» относится к (бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфония гексафторфосфату;

«BSA» относится к бычьему сывороточному альбумину;

«tBu» относится к третичному бутилу;

«DCM» относится к дихлорметану;

«Dde» относится к 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-этилу;

«IvDde» относится к 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-3-метил-бутилу;

«DIC» относится к N,N'-диизопропилкарбодиимиду;

«DIPEA» относится к N,N-диизопропилэтиламину;

«DMEM» относится к среде Игла, модифицированной по способу Дульбекко;

«DMF» относится к диметилформамиду;

«DMSO» относится к диметилсульфоксиду;

«EDT» относится к этандитиолу;

«FA» относится к муравьиной кислоте;

«FBS» относится к фетальной бычьей сыворотке;

«Fmoc» относится к флуоренилметилоксикарбонилу;

«gGlu» относится к гамма-глутаминовой кислоте (γE);

«HATU» относится к O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N′,N′-тетраметилурония гексафторфосфату;

«HBSS» относится к сбалансированному солевому раствору Хэнкса;

«HBTU» относится к 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетрометилурония гексафторфосфату;

«HEPES» относится к 2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоновой кислоте;

«HOAt» относится к 1-гидрокси-7-азабензотриазолу;

«HOBt» относится к 1-гидроксибензотриазолу;

«HOSu» относится к N-гидроксисукцинимиду;

«HPLC» относится к высокоэффективной жидкостной хроматографии;

«ч» относится к часу;

«HTRF» относится к гомогенной флуоресценции с временным разрешением;

«IBMX» относится к 3-изобутил-1-метилксантину;

«i. v.» относится к внутривенному;

«кДа» относится к килодальтонам;

«LC/MS» относится к жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии;

«Mmt» относится к монометокси-тритилу;

«MS» относится к масс-спектрометрии;

«OtBu» относится к O-трет-бутилу;

«Palm» относится к пальмитоилу;

«Pbf» относится к 2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонилу;

«PBS» относится к забуференному фосфатом солевому раствору;

«PK» относится к фармакокинетическим параметрам;

«RP-HPLC» относится к обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии;

«s. c.» относится к подкожному;

«SEM» относится к стандартной ошибке среднего;

«Stea» относится к стеарилу;

«TIPS» относится к триизопропилсилану;

«TFA» относится к трифторуксусной кислоте;

«Trt» относится к тритилу; и

«UV» относится к ультрафиолету.

Материалы и способы

В синтетических процедурах, описанных в примерах, применяли следующие исходные материалы и способы.

Различные амидные смолы Ринка (например, 4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)феноксиацетамидо-норлейциламинометильная смола, Merck Biosciences; 4-[(2,4-диметоксифенил)(Fmoc-амино)метил]феноксиацетамидометильная смола, Agilent Technologies) применяли для синтеза пептидных амидов с загрузками в диапазоне 0,2-0,7 ммоль/г. В качестве альтернативы, предварительно загруженные смолы Ванга (например, ((S)-(9H-флуорен-9-ил)метил-(1-(трет-бутокси)-3-оксопропан-2-ил)карбаматная смола, Fmoc-Ser(tBu)-смола Ванга, Bachem) применяли для синтеза пептидных кислот с загрузками в диапазоне 0,2-0,7 ммоль/г.

Защищенные Fmoc природные аминокислоты приобретали у Protein Technologies Inc., Senn Chemicals, Merck Biosciences, Novabiochem, Iris Biotech, Bachem, Chem-Impex International или MATRIX Innovation. В синтезах применяли следующие стандартные аминокислоты: Fmoc-L-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-L-Asn(Trt)-OH, Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-L-Cys(Trt)-OH, Fmoc-L-Gln(Trt)-OH, Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-L-His(Trt)-OH, Fmoc-L-Ile-OH, Fmoc-L-Leu-OH, Fmoc-L-Lys(Boc)-OH, Fmoc-L-Met-OH, Fmoc-L-Phe-OH, Fmoc-L-Pro-OH, Fmoc-L-Ser(tBu)-OH, Fmoc-L-Thr(tBu)-OH, Fmoc-L-Trp(Boc)-OH, Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-L-Val-OH. Кроме того, следующие аминокислоты приобретали у тех же поставщиков, которые указаны выше: Fmoc-L-Lys(ivDde)-OH, Fmoc-L-Lys(Dde)-OH, Fmoc-L-Lys(Mmt)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-D-Ser(tBu)-OH, Fmoc-D-Ala-OH и Boc-L-Tyr(tBu)-OH.

Следующие структурные элементы боковой цепи либо приобретали из коммерческих источников, либо синтезировали посредством постадийного синтеза или твердофазного синтеза, как описано, например, в CN 104356224 (Liu; Hangzhou Adlai Nortye Pharmaceutical Technology Co. Ltd.): Fmoc-L-Lys(Palm-L-Glu-OtBu)-OH; Fmoc-L-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu]-OH; Fmoc-AEEA-OH; Fmoc-AEEA-AEEA-OH; Fmoc-L-Ile-Aib-OH и Boc-L-Tyr-Aib-OH.

Следующие структурные элементы боковой цепи либо приобретали из коммерческих источников (например, Chengdu Pukang), либо синтезировали посредством постадийного синтеза или твердофазного синтеза, как описано в WO 2009022006 (Madsen; Novo Nordisk A/S), WO 2009115469 (Madsen; Novo Nordisk A/S) или WO2015028966 (Barlos; Chemical & Biopharmaceutical Laboratories of Patras S.A.): HO-{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu; HO-{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)-(CH₂)₁₈C(O)OtBu; HO-{AEEA}₂-{gGlu(OtBu)}₂C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu; HO-{AEEA}₂-{gGlu(OtBu)}₂-C(O)(CH₂)₁₈-C(O)OtBu; HO-C(O)(CH₂)₁₈C(O)OtBu; HO-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu и HO-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₈C(O)OtBu.

Неочищенные пептиды очищали либо в Äkta Purifier System, либо в системе полупрепаративной HPLC Jasco, либо в системе HPLC Agilent 1100, либо в аналогичной системе HPLC. Препаративные колонки RP-C18-HPLC различных размеров и с различными скоростями потока применяли в зависимости от количества неочищенного пептида, подлежащего очистке. В частности, применяли следующие колонки: Waters XSelect CSH C18 OBD Prep, 5 мкм, 30 × 250 мм, Waters SunFire C18 OBD Prep, 5 мкм, 30 × 250 мм, Waters SunFire C18 OBD Prep, 5 мкм, 50 × 150 мм и Phenomenex Luna Prep C18, 5 мкм, 21,2 × 250 мм. В качестве элюентов применяли ацетонитрил (B) и воду плюс 0,1% TFA (A) или воду плюс 0,1% FA (A). Фракции, содержащие продукт, собирали и лиофилизировали с получением очищенного продукта, как правило, в виде соли TFA.

В качестве альтернативы, соединения выделяли в виде ацетатных солей посредством приведенной ниже процедуры. Соединение растворяли в воде и раствор доводили до pH 7,05 с помощью NaHCO₃. Затем растворенное соединение очищали с помощью RP Kinetex 21,2 × 250 мм (объем колонки, CV составляет 88 мл, 5 мкм, C18, 100A, Äkta avant 25). Колонку уравновешивали растворителем А (3 × CV), вводили соединение и затем промывали смесью растворителя А (95%) и растворителя В (5%) с помощью 3 CV. Затем применяли градиент растворителя от A:B (95:5) до A:B (20:80) с помощью 15 CV. Очищенный пептид собирали и лиофилизировали. Колонка: Kinetex AXIA, 5 мкм, C18 21,2 × 250 мм; растворитель: A (H₂O плюс 0,5% уксусной кислоты): B (ACN, плюс H₂O, плюс 0,5% уксусной кислоты) (расход 7 мл/мин); градиент: от 95:5 (0 мин) до 95:5 (37 мин), до 20:80 (180 мин), до 0:100 (6 мин).

Аналитическую HPLC/UHPLC выполняли согласно одному из приведенных ниже способов.

Способ A:

выявление при 214 нм;

колонка: Waters ACQUITY UPLC® CSH™ C18, 1,7 мкм (150 × 2,1 мм) при 50°C;

растворитель: H₂O плюс 0,05% TFA : ACN плюс 0,045%TFA (расход 0,5 мл/мин);

градиент: от 80:20 (0 мин) до 80:20 (3 мин), до 25:75 (23 мин), до 5:95 (23,5 мин), до 5:95 (26,5 мин), до 80:20 (27 мин), до 80:20 (33 мин);

необязательно с масс-анализатором: LCT Premier, режим электрораспыления положительно заряженных ионов.

Способ B:

выявление при 214 нм;

растворитель: H₂O плюс 0,05% TFA : ACN плюс + 0,035% TFA (расход 0,5 мл/мин);

градиент: от 80:20 (0 мин) до 80:20 (3 мин), до 25:75 (23 мин), до 2:98 (23,5 мин), до 2:98 (30,5 мин), до 80:20 (31 мин), до 80:20 (37 мин);

масс-анализатор: Agilent 6230 Accurate-Mass TOF или Agilent 6550 iFunnel Q-TOF; оба оснащенные источником ионов Dual Agilent Jet Stream ESI.

Способ C:

выявление при 214 нм;

колонка: Waters ACQUITY UPLC® CSH™ C18, 1,7 мкм (150 × 2,1 мм) при 70°C;

градиент: от 63:37 (0 мин) до 63:37 (3 мин), до 45:55 (23 мин), до 2:98 (23,5 мин), до 2:98 (30,5 мин), до 63:37 (31 мин), до 63:37 (38 мин);

масс-анализатор: Agilent 6230 Accurate-Mass TOF, источник ESI Agilent Jet Stream.

Пример 1. Синтез соединений с помощью автоматизированной процедуры твердофазного синтеза пептида

Соединения получали путем твердофазного синтеза с применением Prelude Peptide Synthesizer (Mesa Laboratories/Gyros Protein Technologies) или автоматизированного синтезатора CS Bio с применением стандартной химии Fmoc и активации HBTU/DIPEA или HATU/DIPEA. В качестве растворителя применяли DMF.

Применяли приведенные ниже условия.

Снятие защиты: 20% пиперидина/DMF, 2 × 2,5 мин.

Циклы промывания: 7 × DMF.

Присоединение 2:5:10 200 мM AA/500 мM HBTU/2 M DIPEA в DMF 2 × в течение 20 мин. Циклы промывания: 5 × DMF.

Активацию HBTU/DIPEA применяли для всех стандартных присоединений. Активацию HATU/DIPEA применяли для следующих вариантов присоединения: Ile-Aib, Aib-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu], Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu]-Asp, Gln-Aib и Leu-Leu. Обеспечивали осуществление реакции присоединений HATU всего 2 × в течение 40 мин, иногда 2 × в течение 1 ч, а также до 12 ч.

Для модифицированной боковой цепи лизина применяли Fmoc-L-Lys(Mmt)-OH в положении, обозначенном как X12 в формуле (I). После завершения синтеза группу Mmt удаляли путем повторной обработки с помощью AcOH/TFE/DCM (1/2/7) в течение 15 минут при комнатной температуре, после чего смолу повторно промывали DCM, 5% DIPEA в DCM и 5% DIPEA в DCM/DMF.

После удаления группы Mmt смолу обрабатывали раствором связывающего альбумин фрагмента в защищенной форме. В качестве иллюстрации, пептиды, содержащие фрагмент -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH, получали путем обработки смолы раствором HO-{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu (1 экв.) в DMF, предварительно активированным HATU (3 экв.), HOAt (3 экв.) и DIPEA (4 экв.). Затем смолу промывали, как описано выше. Защитные группы OtBu расщеплялись при окончательном отщеплении пептидов от смолы.

Отщепление пептидов от смолы выполняли с применением расщепляющей смеси Кинга, состоящей из 82,5% TFA, 5% фенола, 5% воды, 5% тиоанизола и 2,5% EDT или модифицированной расщепляющей смеси, состоящей из 82,5% TFA, 5% фенола, 5% воды, 5% тиоанизола и 2,5% DODT. Смолы, используемые в синтезе, характеризовались тем, что С-конец отщеплялся от смолы в виде первичного амида.

Затем неочищенные пептиды осаждали в диэтиловом или диизопропиловом эфире, центрифугировали и лиофилизировали. Пептиды анализировали с помощью аналитической HPLC и проверяли с помощью масс-спектрометрии ESI. Неочищенные пептиды очищали с помощью стандартной процедуры очистки с помощью препаративной RP-HPLC.

Пример 2. Синтез соединений с помощью ручной процедурой твердофазного синтеза

Соединения также получали с помощью ручной процедурой синтеза. Иллюстративная процедура описана ниже.

Высушенную амидную смолу Ринка MBHA (0,3 г; 0,5-0,8 ммоль/г) помещали в полиэтиленовый сосуд, оснащенный полипропиленовым фильтром. Обеспечивали набухание смолы в DCM (15 мл) в течение 1 ч и в DMF (15 мл) в течение 1 часа. Снятие защитной Fmoc-группы на смоле осуществляли путем ее обработки дважды с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидин/DMF в течение 5 и 15 мин. Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера (количественный способ; см. Kaiser et al., Anal. Biochem., 1970, 34, 595-598) применяли для подтверждения удаления Fmoc с твердой подложки. С-концевую аминокислоту, защищенную Fmoc (5-экв. избыток, соответствующий нагрузке смолы), в сухом DMF добавляли к смоле с удаленной защитной группой и инициировали присоединение следующей защищенной Fmoc аминокислоты с 5-эквивалентным избытком DIC и HOBT в DMF. Концентрация каждого реагента в реакционной смеси составляла примерно 0,4 M. Смесь перемешивали на роторе при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения присоединения был отрицательным (т.е. окрашивание смолы отсутствовало). После присоединения первой аминокислоты не вступившую в реакцию аминогруппу, при наличии такой, в смоле кэппировали с помощью смеси уксусный ангидрид/пиридин/DCM (1/8/8) в течение 20 мин, чтобы избежать какого-либо удаления в последовательности. После кэппирования смолу промывали с помощью DCM/DMF/DCM/DMF (6/6/6/6 раз каждым). Защитную Fmoc-группу на С-концевой аминокислоте, присоединенной к пептидильной смоле, удаляли путем ее обработки дважды с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидин/DMF в течение 5 и 15 мин. Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Остальные аминокислоты в целевой последовательности на амидной смоле Ринка MBHA последовательно присоединяли с применением способа Fmoc AA/DIC/HOBt с помощью 5-эквивалентного избытка, соответствующего нагрузке смолы, в DMF. Концентрация каждого реагента в реакционной смеси составляла примерно 0,4 M. Смесь перемешивали на роторе при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). После каждой стадии присоединения и стадии снятия Fmoc-защиты проводили тест Кайзера для подтверждения завершенности реакции.

После завершения формирования линейной последовательности с эпсилон-аминогруппы лизина (защищенной с помощью Dde) снимали защиту с помощью 2,5% гидрата гидразина в DMF в течение 15 мин × 2 и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). γ-Карбоксильный конец глутаминовой кислоты присоединяли к эпсилон-аминогруппе Lys с применением Fmoc-Glu(OH)-OtBu посредством способа DIC/HOBt (5-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь перемешивали на роторе при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым, 30 мл каждого). Снятие защитной Fmoc-группы на глутаминовой кислоте осуществляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидин/DMF в течение 5 и 15 мин (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Для пептидов, в которых разветвление боковой цепи содержало дополнительную γ-глутаминовую кислоту, применяли второй Fmoc-Glu(OH)-OtBu для присоединения к свободной аминогруппе γ-глутаминовой кислоты посредством способа DIC/HOBt (5-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь перемешивали на роторе при комнатной температуре в течение 2 ч. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым, 30 мл каждого). Снятие защитной Fmoc-группы на γ-глутаминовой кислоте осуществляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидин/DMF в течение 5 и 15 мин (25 мл). Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Присоединение связывающих альбумин фрагментов выполняли, как описано в примере 1. Трет-бутилсложноэфирные защитные группы расщеплялись при окончательном отщеплении пептидов от смолы.

В качестве альтернативы, связывающий альбумин фрагмент вводили с помощью предварительно функционализированного структурного элемента, при этом фрагмент был уже присоединен к лизину как партнер по присоединению в пептидном синтезе. Данная процедура позволяет избежать необходимости в стадии селективного снятия защиты, а также селективного присоединения структурных элементов боковой цепи на очень распространенное промежуточное соединение одной из поздних стадий синтеза. В качестве иллюстрации, применяли следующую процедуру для включения Fmoc-L-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu]-OH в пептид. 0,67 ммоль смолы с пептидом, несущей аминогруппу, промывали с помощью 20 мл диметилформамида. 2,93 г Fmoc-L-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆-C(O)OtBu]-OH растворяли в 20 мл диметилформамида вместе с 310 мг гидрата гидроксибензотриазола и 0,32 мл диизопропилкарбодиимида. После перемешивания в течение 5 мин раствор добавляли к смоле. Смолу перемешивали в течение 20 ч и затем промывали 3 раза, при этом каждый раз с помощью 20 мл диметилформамида. Отбирали небольшой образец смолы и подвергали тесту Кайзера и тесту с хлоранилом (см. Vojkovsky, Peptide Research 1995, 8, 236-237).

После присоединения связывающего альбумин фрагмента пептидильную смолу промывали с помощью DCM (6 × 10 мл), MeOH (6 × 10 мл) и эфира (6 × 10 мл) и сушили в вакуумных эксикаторах в течение ночи. Отщепления пептида от твердой подложки достигали путем обработки смолы с пептидом коктейлем реагентов (92% TFA, 2% тиоанизола, 2% фенола, 2% воды, 2% TIPS) при комнатной температуре в течение 3-4 часов. Смесь для отщепления собирали путем фильтрации и смолу промывали с помощью TFA (2 мл) и DCM (2 × 5 мл). Избыток TFA и DCM концентрировали до небольшого объема в атмосфере азота, и небольшое количество DCM (5-10 мл) добавляли к остатку и выпаривали в атмосфере азота. Процесс повторяли 3-4 раза, чтобы удалить большую часть летучих примесей. Остаток охлаждали до 0°С и добавляли безводный эфир для осаждения пептида. Осажденный пептид центрифугировали, надосадочную жидкость с эфиром удаляли, свежий эфир добавляли к пептиду и повторно центрифугировали. Неочищенный образец очищали с помощью препаративной HPLC и лиофилизировали. Идентичность пептида подтверждали с помощью LCMS.

Пример 3. Синтез пептида под SEQ ID NO: 35

Соединение под SEQ ID NO: 35 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 1. Применяли амидную смолу Ринка от Novabiochem (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейцил-аминометильную смолу), 100-200 меш, загрузка 0,36 ммоль/г. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией HBTU/DIPEA или активацией HATU/DIPEA в зависимости от аминокислотной последовательности. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-Lys(Mmt)-OH. Группу Mmt отщепляли от пептида, как описано в примере 1. Далее HO-{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu присоединяли к освобожденной аминогруппе с использованием DIPEA в качестве основания и HATU/HOAt в качестве реагентов для присоединения. Пептид отщепляли от смолы с помощью смеси Кинга. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной HPLC на колонке Waters (Waters SunFire C18 OBD Prep, 5 мкм, 50 × 150 мм) с применением градиента ацетонитрил/вода (вода с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LCMS (способ В). Деконволюция сигналов массы, обнаруженных под пиком со временем удерживания 11,19 мин, обеспечила выявление массы пептида 5154,09, которая соответствовала ожидаемому значению 5154,06.

Пример 4. Синтез пептида под SEQ ID NO: 141

Соединение под SEQ ID NO: 141 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 1. Применяли амидную смолу Ринка от Novabiochem (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейцил-аминометильную смолу), 100-200 меш, загрузка 0,34 ммоль/г. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией HBTU/DIPEA или активацией HATU/DIPEA в зависимости от аминокислотной последовательности. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys[{AEEA}₂-gGlu(OtBu)-C(O)(CH₂)₁₆-C(O)OtBu]. Пептид отщепляли от смолы с помощью смеси Кинга. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной HPLC на колонке Waters (Waters SunFire C18 OBD Prep, 5 мкм, 50 × 150 мм) с применением градиента ацетонитрил/вода (вода с 0,1% TFA), а затем посредством препаративной HPLC на колонке Waters (Waters Xselect CSH Prep C18, 5 мкм, 30 × 250 мм) с применением градиента ацетонитрил/вода (вода с 0,1% муравьиной кислоты). Очищенный пептид собирали и лиофилизировали. Очищенный пептид анализировали с помощью LCMS (способ В). Деконволюция сигналов массы, обнаруженных под пиком со временем удерживания 9,97 мин, обеспечила выявление массы пептида 5163,18, которая соответствовала ожидаемому значению 5163,17.

Пример 5. Синтез пептида под SEQ ID NO: 171

Соединение под SEQ ID NO: 171 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 1. Применяли амидную смолу Ринка от Novabiochem (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейцил-аминометильную смолу), 100-200 меш, загрузка 0,35 ммоль/г. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией HBTU/DIPEA или активацией HATU/DIPEA в зависимости от аминокислотной последовательности. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-Lys(Mmt)-OH. Группу Mmt отщепляли от пептида, как описано в примере 1. Далее HO-{AEEA}₂-{gGlu(OtBu)}₂-C(O)(CH₂)₁₆C(O)OtBu присоединяли к освобожденной аминогруппе с применением DIPEA в качестве основания и HATU/HOAt в качестве реагентов для присоединения. Пептид отщепляли от смолы с помощью смеси Кинга. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной HPLC на колонке Waters (Waters SunFire C18 OBD Prep, 5 мкм, 50 × 150 мм) с применением градиента ацетонитрил/вода (вода с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LCMS (способ В). Деконволюция сигналов массы, обнаруженных под пиком со временем удерживания 9,94 мин, обеспечила выявление массы пептида 5294,21, которая соответствовала ожидаемому значению 5294,13.

Пример 6. Синтез дополнительных пептидов

Следующие пептиды синтезировали в соответствии с процедурой, описанной в примерах 1-5. Рассчитанные и установленные значения массы и времени удерживания этих пептидов указаны в таблице 3 ниже, наряду с таковыми соединений из примеров 3-5.

Пример 7. Оценивание активности в отношении рецептора CRF2α человека

Агонизм соединений в отношении 2α кортикотропин-высвобождающего фактора (рецептора CRF2α) человека определяли с помощью функциональных анализов измерения степени cAMP-ответа в клеточной линии TeloHEAC, стабильно экспрессирующей рецептор CRF2α человека.

Клетки выращивали в культуральной колбе Т175, помещенной при 37°C, до близкого к конфлюэнтному состояния в среде (DMEM/10% FBS) и собирали в 2-мл флаконы в среду для культивирования клеток, содержащую 10% DMSO в концентрации 10-50 миллионов клеток/мл. Каждый флакон содержал 1,8 мл клеток. Флаконы медленно замораживали до -80°C в изопропаноле, а затем переносили в жидкий азот для хранения. Перед применением замороженные клетки быстро размораживали при 37°C и промывали (5 мин при 900 об./мин) в 20 мл буфера для клеток (1 × HBSS; 20 мМ HEPES; 0% или 0,1% HSA). Клетки ресуспендировали в буфере для анализа (буфер для клеток плюс 2 мМ IBMX) и доводили до плотности клеток 1 миллион клеток/мл. Для измерения в 384-луночный планшет добавляли 5 мкл клеток (конечное количество 2000 клеток/лунка) и 5 мкл тестируемого соединения, после чего инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре.

Содержание cAMP в клетках определяли с использованием набора от Cisbio Corp. (Номер по каталогу 62AM4PEC) по результатам HTRF (гомогенная флуоресценция с временным разрешением). После добавления реагентов для HTRF, разбавленных в буфере для лизиса (компоненты набора), планшеты инкубировали в течение 1 ч с последующим измерением соотношения интенсивности флуоресценции при 665/620 нм. Процентное значение активности (E%) рассчитывали, принимая 1000 нМ урокортина 2 (UCN2) за 100%. Эффективность соединений in vitro количественно оценивали путем определения концентраций, которые вызывали 50% активацию максимального ответа (EC50).

Типичные значения EC50 представлены в таблице 4 ниже.

Пример 8. Оценивание активности в отношении α-рецептора CRF2 крысы

С применением процедуры, описанной в примере 7, оценивали активность соединений в отношении α-рецептора CRF2R крысы. В данном исследовании применяли линию гладкомышечных клеток аорты крысы A7R5.

Типичные значения EC50 представлены в таблице 5 ниже.

Пример 9. Оценивание активности в отношении антитела к целевому рецептору CFR1R

С применением процедуры, описанной в примере 7, оценивали активность соединений в отношении антитела к целевому рецептору CRF1R. В данном исследовании применяли линию экспрессирующих CRF1R на высоком уровне клеток CHO.

Типичные значения EC50 и Emax представлены в таблице 6 ниже.

Пример 10. Оценивание активности в клетках, экспрессирующих эндогенный CRF2 человека

Агонистический эффект соединений оценивали на клетках NCI-H82, экспрессирующих эндогенный CRF2 человека.

Клетки NCI-H82 в суспензии высевали в малообъемные 384-луночные планшеты при плотности 30000 клеток/лунка в 5 мкл тестовой среды (RPMI + 1 мM IBMX). Планшеты кратковременно центрифугировали при 800 об./мин, чтобы суспензия клеток переместилась на дно лунок, а затем инкубировали в течение 2 часов при 37°C в 5% CO2. Затем 5 мкл тестовых соединений в соответствующих концентрациях (от 10^-11 до 3 × 10^-7), разведенных в тестовой среде, переносили в 384-луночные планшеты. После 5 мин активации реакцию останавливали добавлением реагентов для выявления HTRF с помощью многокапельного дозатора. Эти два реагента представляли собой 5 мкл/лунка антитела к cAMP-криптату, разбавленного в 20 раз в буфере для конъюгирования и лизиса, и 5 мкл/лунка cAMP-D2, разбавленного в 20 раз в буфере для конъюгирования и лизиса. После часовой инкубации при комнатной температуре в темноте планшеты считывали на приборе Clariostar. Сигнал HTRF считывали при 620 и 665 нм и рассчитывали приведенным ниже образом. Отношение HTRF = [(сигнал при 665 нм)/(сигнал при 620 нм)] × 104. Измерение уровня cAMP рассчитывали с помощью стандартной кривой cAMP (от 0,17 нМ до 712 нМ), построенной по каждому планшету, на основании которой определяли значения EC50.

Типичные значения EC50 представлены в таблице 7 ниже.

Пример 11. Исследования связывания на клетках HEK, экспрессирующих рекомбинантный CRF2

Связывание соединений с рецептором оценивали с помощью анализа CRF2α(h) (агонистический радиолиганд).

В качестве источника рецептора для получения мембран применяли клетки HEK, экспрессирующие рекомбинантный CRF2 человека. [125I]саувагин применяли в качестве конкурирующего лиганда для рецептора CRF2. Тестируемые соединения инкубировали в течение часа при нескольких концентрациях в конкуренции с [125I]саувагином (0,1 нМ) для определения остаточного связывания. Связывание соединения рассчитывали как % ингибирования связывания [125I]саувагина, специфичного для CRF2.

Значения IC50 (концентрация, вызывающая полумаксимальное ингибирование специфического связывания в контроле) и коэффициенты Хилла (nH) определяли путем нелинейного регрессионного анализа кривых конкуренции, построенных со средними значениями повторностей с помощью подгонки кривой по уравнению Хилла. Константы ингибирования (Ki) рассчитывали с помощью уравнения Ченга-Прусоффа [Ki = IC50/(1 + L/KD), где L представляет собой концентрацию радиолиганда в анализе, а KD представляет собой аффинность радиолиганда в отношении рецептора]. Для определения KD использовали график Скэтчарда.

Типичные значения Ki и nH представлены в таблице 8 ниже.

Пример 12. Оценивание химической стабильности

Химическую стабильность соединений оценивали путем хранения соединений в различных условиях и последующего определения потери чистоты с помощью UPLC-UV.

Перед измерением химической стабильности партии тестируемого соединения определяли чистоту соединения с помощью UPLC/MS. Для тестирования стабильности целевая концентрация составляла 300 мкМ чистого соединения. Поэтому получали растворы из твердых образцов в системе 20 мМ ацетатного буфера, pH 4,5, с концентрацией 300 мкМ соединения на основании предварительно определенного % чистоты.

Растворы тестируемых соединений фильтровали через фильтр (размер пор 0,22 мкм) и разливали на аликвоты в асептических условиях. В начальный момент времени UPLC-UV проводили с введением 2 мкл неразбавленного образца. Затем аликвоты хранили в течение 28 дней при температуре 5 и 40°C. По истечении этого периода времени образцы центрифугировали в течение 15 мин при 2500 RCF. Затем образцы неразбавленной надосадочной жидкости объемом 2 мкл анализировали посредством UPLC-UV. Химическую стабильность рассчитывали по уравнению: [(чистота через 28 дней при 5°C) - (чистота через 28 дней при 40°C)]/(чистота через 28 дней при 5°C)] × 100%. Чистоту рассчитывали следующим образом: [(площадь пика соединения)/(общая площадь пика)] × 100%.

Типичные данные стабильности представлены в таблице 9 ниже.

Пример 13. Оценивание растворимости

Растворимость соединений оценивали в следующих буферных системах: 100 мM ацетатный буфер, pH 4,5 (буфер A); 100 мM ацетатный буфер, pH 4,5, 2,7 мг/мл м-крезола (буфер B) и 100 мM фосфатный буфер, pH 7,4 (буфер C).

Перед выполнением измерений растворимости определяли чистоту соединений посредством UPLC/MS. Для испытания на растворимость целевая концентрация составляла 10 мг чистого соединения/мл. Таким образом, растворы из твердых образцов получали в буферной системе с концентрацией соединения, составляющей 10 мг/мл, на основании предварительно определенного % чистоты.

UPLC-UV проводили после 1 часа легкого перемешивания с надосадочной жидкостью, которую получали центрифугированием при 2500 RCF (относительное центробежное ускорение) в течение 15 минут. Растворимость определяли путем сравнения площади UV-пика забуференного образца, разбавленного 1:10, который вводили в объеме 2 мкл, со стандартной кривой эталонного соединения с известной концентрацией. Различные коэффициенты экстинкции UV-излучения для образца и эталонного соединения рассчитывали на основании различных аминокислотных последовательностей и учитывали их при расчете концентрации.

Типичные данные растворимости представлены в таблице 10 ниже.

Пример 14. Оценивание физической стабильности с помощью анализа с тиофлавином T

Физическую стабильность соединений оценивали с помощью анализа с тиофлавином T (ThT).

Низкая физическая стабильность раствора с пептидом может приводить к образованию амилоидных фибрилл, которые наблюдаются в образце в виде высокоупорядоченных нитевидных макромолекулярных структур, что в конечном итоге может приводить к образованию геля. ThT широко применяют для визуализации и количественной оценки присутствия агрегатов неправильно свернутых белков (см. Biancalana et al., Biochim. Biophys. Acta, 2010, 1804(7), 1405). При его связывании с фибриллами, такими как фибриллы в амилоидных агрегатах, краситель проявляет характерный признак флуоресценции (см. Naiki et al., Anal. Biochem., 1989, 177, 244 и LeVine et al., Methods. Enzymol., 1999, 309, 274). Промежуток времени образования фибрилл часто соответствует характерной форме сигмоидальной кривой и может быть разделен на три области: лаг-фазу, фазу быстрого роста и фазу плато. Типичный процесс образований фибрилл начинается с лаг-фазы, при которой количество частично свернутого пептида, превращенного в фибриллы, является недостаточно значительным для его выявления. Лаг-период соответствует периоду времени, в ходе которого наращивается критическая масса ядра. За этим следует фаза резкого удлинения, и при этом быстро повышается концентрация фибрилл. Поэтому, измеряя увеличение интенсивности флуоресценции, связанное с ThT, а также время задержки этого увеличения, можно определить склонность пептида к фибрилляции, тем самым обеспечивая меру физической стабильности пептида.

В настоящем исследовании тестируемые соединения разбавляли буфером до конечной концентрации 3 мг/мл. Затем 20 мкл раствора 10,1 мМ ThT в воде добавляли к 2 мл раствора пептида для получения конечной концентрации 100 мкМ ThT. Эксперименты проводили с помощью двух буферов: 100 мМ ацетатный буфер, pH 4,5 (буфер A) и 100 мМ ацетатный буфер, pH 4,5, и 2,7 мг/мл м-крезола (буфер B).

Склонность пептидов к фибрилляции определяли, подвергая стрессу, с помощью флуорометра Fluoroskan Ascent FL или Fluoroskan Ascent. 200 мкл образцов помещали в 96-луночный микротитровальный планшет PS с плоским дном Greiner Fluotrac № 655076. Планшеты запечатывали клейкой лентой (Quiagen). Образцы подвергали стрессу с помощью непрерывных циклов встряхивания при 960 об./мин в течение 10 с и периода отдыха при 37°C в течение 50 с. Развитие фибрилл отслеживали путем измерения интенсивности флуоресценции каждые 20 минут. Каждый образец тестировали в восьми повторностях.

Репрезентативные данные стабильности, полученные в буфере А, представлены в таблице 11 ниже, где «FI» относится к интенсивности флуоресценции.

Типичные данные стабильности, полученные в буфере В, представлены в таблице 12 ниже.

Пример 15. Оценивание физической стабильности с помощью анализа динамического рассеяния света

Физическую стабильность соединений также оценивали с помощью анализа динамического рассеяния света.

С помощью динамического рассеяния света (DLS) измеряли свет, рассеянный частицами (1 нм ≤ радиус ≤ 1 мкм), которые совершали броуновское движение. Данное движение вызвано столкновениями между частицами и молекулами растворителя, которые сами двигаются за счет своей тепловой энергии. Диффузионное движение частиц приводит к флуктуациям рассеянного света во времени (Pecora, “Dynamic Light Scattering: Applications of Photon Correlation Spectroscopy”, Plenum Press, 1985). Флуктуации интенсивности рассеянного света регистрируют и преобразуют в автокорреляционную функцию. Путем подгонки автокорреляционной кривой к экспоненциальной функции можно получить коэффициент диффузии D частиц в растворе. Коэффициент диффузии затем применяют для расчета гидродинамического радиуса R_h (или эффективного радиуса Стокса) с помощью уравнения Стокса-Эйнштейна, принимая, что частицы имеют сферическую форму. Данный расчет определен в международном стандарте ISO13321, Methods for Determination of Particle Size Distribution Part 8: Photon Correlation Spectroscopy, International Organisation for Standardisation (ISO) 1996 и International Standard ISO22412 Particle Size Analysis – Dynamic Light Scattering, International Organisation for Standardisation (ISO) 2008.

DLS параметр взаимодействия (k_D) является показателем, описывающим взаимодействия между частицами, где частицы представляют собой свернутые белки или пептиды (Yadav et al., J. Pharm. Sc. 2010, 99(3), 1152 и Connolly et al., Biophys. J. 2012, 103, 69). Высокие значения указывают на сильные результирующие отталкивающие взаимодействия, тогда как низкие значения указывают на результирующие силы притяжения. Таким образом, k_D можно применять для относительного качественного сравнения.

В настоящем исследовании физическую стабильность тестируемых соединений оценивали путем определения кажущегося гидродинамического радиуса (R_h), интенсивности рассеяния (I) и вклада массы (M) после синтеза (0 недель) и после хранения в течение 4 недель при 40°C.

Стабильность соединений оценивали в пяти различных буферных системах: 100 мМ ацетатный буфер, pH 4,5 (буфер A); 100 мМ ацетатный буфер, pH 4,5, 2,7 мг/мл м-крезола (буфер B); 20 мМ фосфатный буфер, pH 6,2 (буфер C); 20 мМ фосфатный буфер, pH 7,4 (буфер D) и 20 мМ ацетатный буфер, pH 4,5 (буфер E).

Для каждого раствора тестируемого соединения гидродинамический радиус R_h и константу диффузии D (связанные с помощью уравнения Стокса-Эйнштейна) определяли как средние значения из трех повторностей. Оба параметра определяли при различных концентрациях соединения (например, R_h1 и D₁: 1 мг/мл и R_h5 и D₅: 5 мг/мл, R_h10 и D₁₀: 10 мг/мл) в одной и той же буферной системе. Разница таких параметров между низкой и высокой концентрациями пептида является заменой для DLS параметра взаимодействия k_D. Увеличение значений D или уменьшение значений R_h при увеличении концентрации пептида соответствует k_D больше 0 и, следовательно, отталкивающим взаимодействиям между частицами, которые приводят к улучшенной физической (или коллоидной) стабильности. Кроме того, гидродинамический радиус R_h и соответствующую интенсивность рассеяния (%) определяли как среднее значение из двух повторностей. Целевая концентрация составляла 300 мкМ. Таким образом, растворы из твердых образцов получали в буферной системе с концентрацией соединения, составляющей 300 мкМ, на основании предварительно определенного % чистоты.

Измерения DLS проводили на DynaPro Plate Reader I (Wyatt Technology, Санта-Барбара, штат Калифорния, США) с лазерным источником света 837 нм при угле рассеяния 150°. Данные собирали и обрабатывали с помощью программного обеспечения Dynamics вер. 7.8.1.3 или 7.8.2.18, предоставленного компанией Wyatt Technology.

Гидродинамические радиусы определяли c помощью способов неотрицательно ограниченных наименьших квадратов (NNLS) с помощью алгоритмов DYNALS с подгонкой путем регуляризации. Для сравнения для всех образцов применяли показатель преломления n = 1,330 и η = 0,89 сП воды. Образцы темперировали в течение 1 часа при +25°C и визуально проверяли перед анализом.

Образцы перемешивали с помощью наконечника пипетки. Измерения проводили в 5 повторностях. Таким образом, 5 аликвот по 15 мкл пипетировали в полистироловый 384-луночный аналитический планшет с прозрачным дном (Greiner Bio-One, Германия) и запечатывали. Планшет центрифугировали в течение 2 минут при 600 кубических футах в условиях резервуара. После удаления покрытия образцы измеряли при +25°C.

Типичные данные стабильности представлены в таблице 13 ниже.

Пример 16. Оценивание фармакокинетических свойств

Фармакокинетические свойства типичных пептидов SEQ ID NO: 35 и SEQ ID NO: 24 оценивали на мышах и крысах.

Тестируемое соединение вводили в подходящей буферной системе (буферный раствор PBS при pH 7,4 или раствор DPBS) в концентрациях 0,05, 0,1, 0,5 или 1 мг/мл в зависимости от дозы, вида и объема введения. Самкам мышей C57Bl/6 и самцам крыс SD вводили дозы 0,1 мг/кг или 0,3 мг/кг внутривенно или подкожно. Животных умерщвляли, а образцы крови собирали через 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 32 и 48 часов после внутривенного введения и через 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 32 и 48 часов после подкожного введения, соответственно. Образцы плазмы крови анализировали после осаждения белка посредством жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии (LC/MS). Фармакокинетические параметры и период полужизни рассчитывали с помощью Phoenix-WinNonlin 8.1 с применением некомпартментной модели и вычисления с применением линейной трапецеидальной интерполяции.

Результаты данного исследования для этих пептидов представлены в таблице 14 ниже.

Пример 17. Оценивание эффекта в отношении кровяного давления

Эффект соединений в отношении кровяного давления определяли в телеметрических исследованиях на крысах Sprague Dawley при дозе 0,1 мг/кг, SC.

Крысам предварительно имплантировали телеметрическое устройство (DSI, Сент-Пол, США, HD-S10, HD-S11 или HD S21) и обеспечивали восстановление в течение наименьшего периода, составляющего 2 недели, перед обработкой средой-носителем или различными пептидами. Кровяное давление (ВР) регистрировали через катетер, введенный в брюшную аорту. Корпус устройства помещали в брюшную полость. По окончании операции животных помещали в индивидуальные клетки до конца исследования.

Сигналы давления регистрировали в течение одного часа до начала обработки (исходный период). Затем проводили подкожное введение тестируемого соединения или его среды-носителя при непрерывной регистрации сигнала в течение 48-часового периода. Сбор данных выполняли с помощью программного обеспечения Hem 4.3 (Notocord®, Ле Пек, Франция), подключенного к телеметрическому устройству. Гемодинамические параметры регистрировали в течение 2-часового периода до обработки и каждые 4 часа после подкожного введения в течение 48 часов.

Исследуемыми параметрами (рассчитанными по сигналу ВР) были частота сердечных сокращений (HR) в ударах в минуту (bpm), диастолическое и систолическое кровяное давление (DBP) в мм рт.ст. и среднее кровяное давление (МВР) в мм рт.ст.

Данные из Hem обрабатывали с помощью Microsoft Excel®. Для каждого параметра исходное значение определяли как среднее значение, рассчитанное за 1-часовой период во время последовательности до обработки, а значения после обработки рассчитывали за 4-часовые периоды ([0-4], [4-8], [8-12], [12-16], [16-20], [20-24], [24-28], [32-36], [36-40], [40-44] и [44-48] часов), охватывающие 48-часовой период после введения.

Типичные данные представлены в таблице 15 ниже, где «n» означает количество животных, для которых получали индивидуальные значения, а «продолжительность» указывает последнюю временную точку, в которой еще наблюдали значительный эффект в отношении ВР: таблица 15.

Пример 18. Оценивание эффекта в отношении массы тела и содержания жира в организме

Пептид под SEQ ID NO: 35 оценивали в отношении его способности снижать массу тела и содержание жира в организме у мышей. Его эффективность сравнивали с эффективностью эталонного соединения, а именно соединения из примера 4 из WO2018013803 (Alsina-Fernandez; Eli Lilly and Company), называемого в данном документе «соединение A».

Самок мышей C57BL/6N Crl содержали группами в условиях вивария, которые включали 12-часовой цикл свет/темнота и комнатную температуру 23 ± 1°C. Все животные имели свободный доступ к воде и пище (рацион с высоким содержанием жиров, скорректированный по Ssniff: TD.97366, Зоест, Германия) в течение 18 недель до фармакологического вмешательства (фазы введения доз). После периода предварительного кормления мышей содержали отдельно и рандомизировали по массе тела в группы обработки с n = 8, чтобы каждая группа имела одинаковый средний вес тела. В начале исследования возраст мышей составлял 25-26 недель, вес тела составлял 42-50 г. Мышей обрабатывали каждый второй день в предвечерние часы до выключения света подкожной инъекцией 8 нмоль/кг тестируемых соединений или их среды-носителя (забуференного фосфатом солевого раствора (PBS)). Вес тела и потребление пищи измеряли ежедневно на протяжении всей фазы введения дозы, а содержание жира в организме измеряли в день 0 до начала обработки и в день 15. Исследование прекращали в день 15.

Для анализов статистических данных проводили однофакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с помощью SigmaStat 3.5. Тест выполняли с риском альфа 0,050, а сравнение с группой, получавшей рацион с высоким содержанием жира и среду-носитель, выполняли с помощью тестов Даннетта.

Результаты этого исследования показаны на фигурах 1 и 2. Из фигуры 1 видно, что первое введение SEQ ID NO: 35 и соединения А вызвало значительное снижение потребления пищи, что нормализовалось после второй обработки, параллельно с мышами, обрабатываемыми средой-носителем. Масса тела значительно снижалась после 15-дневного периода обработки у мышей, обрабатываемых SEQ ID NO: 35 или соединением A, по сравнению с получавшим среду-носитель контролем (P меньше 0,001). Вес тела мышей, обрабатываемых средой-носителем, оставался практически неизменным в течение 15 дней (-1,9 ± 1,6% за две недели), в то время как мыши, обрабатываемые SEQ ID NO: 35 теряли -10,8 ± 1,4% веса тела, а мыши, обрабатываемые соединением А, теряли -7,1 ± 1,3% (см. фигуру 2). Снижение веса тела соответствует значительному снижению содержания жира в организме: -34,2 ± 2,9% для SEQ ID NO: 35 и -27,5 ± 1,9% для соединения А. Кроме того, при сравнении в том же исследовании с семаглутидом, вводимым подкожно при 10 нмоль/кг каждый второй день, SEQ ID NO.35 снижал ожирение в такой же степени, но с меньшей частотой потребления пищи (кумулятивное потребление пищи за 15 дней: 39,3 ± 2,5 г для SEQ ID NO: 35 и 29,6 ± 0,9 г для семаглутида против 43,7 ± 1,3 г для среды-носителя) и с лучшим сохранением массы нежировой ткани: -6,3 ± 1,7% для SEQ ID NO: 35 и -14,8 ± 0,7% для семаглутида против -8,6 ± 1,1% для среды-носителя.

Пример 19. Модификации жирных кислот

Эффект модификаций жирных кислот оценивали для тех раскрываемых в данном документе пептидов из таблицы 2, которые характеризуются EC₅₀ в отношении hCRF2 меньше 0,2 нМ, профилем селективности в отношении hCRF1/hCRF2 больше 500 и отсутствием известных метаболических и химических подверженностей. Предпочтительные последовательности характеризуются наличием D-валина в положении 7 и предпочтительно объемных аминокислот, фланкирующих N31.

Десять оптимизированных последовательностей, характеризующихся вышеупомянутым профилем, выбраны из перечня таблицы 2 и показаны на фигуре 3. Для указанных пептидов синтезировали следующие дополнительные пептиды (таблица 16). Эти соединения характеризуются теми же аминокислотными последовательностями, что и ранее раскрытые соединения в патентной заявке из фиг. 3, но отличаются линкером/дериватизацией жирных кислот. В таблице 16 ниже для каждого из новых предложенных соединений также указан исходный № Seq ID из поданной патентной заявки, с которым они имеют одну и ту же аминокислотную последовательность.

Синтез пептидов. Материалы и способы

В синтетических процедурах, описанных в примерах, применяли следующие исходные материалы и способы. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола, Novabiochem), 100-200 меш, для синтеза всех амидных форм пептида. Fmoc-защищенные природные аминокислоты приобретали у Novabiochem, Iris Biotech, Bachem или Chem-Impex International. В синтезах применяли следующие стандартные аминокислоты: Fmoc-L-Ala-OH, Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-L-Asn(Trt)-OH, Fmoc-L-Asp(OMpe)-OH, Fmoc-L-Gln(Trt)-OH, Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-L-Gly-OH, Fmoc-L-Ile-OH, Fmoc-L-Leu-OH, Fmoc-L-Lys(Boc)-OH, Fmoc-L-Pro-OH, Fmoc-L-Ser(tBu)-OH, Fmoc-L-Thr(tBu)-OH, Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-L-Val-OH.

Кроме того, следующие аминокислоты приобретали у тех же поставщиков, которые указаны выше: Fmoc-L-Lys(Dde)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-D-Val-OH.

Синтез пептидов. Материалы и способы - продолжение

Следующие структурные элементы боковых цепей приобретали у Iris Biotech, TCI, Merck: Fmoc-AEEA-OH, Fmoc-L-Glu-OtBu, пальмитиновая кислота (HO-C(O)(CH₂)₁₄CH₃), гексадекандиовая кислота (HO-C(O)(CH₂)₁₄COOH).

Неочищенные пептиды очищали на системе препаративной HPLC Waters с колонкой C4. В частности, использовали следующую колонку: Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм. В качестве элюентов применяли ацетонитрил плюс 0,1% TFA и воду плюс 0,1% TFA. Фракции, содержащие продукты, собирали и лиофилизировали для получения очищенного продукта, обычно в виде соли TFA.

В качестве альтернативы, соединения выделяли в виде ацетатных солей по следующей процедуре. Ионный обмен проводили с помощью колонки HiTrap™ Q HP (GE Healthcare). Чистые пептиды растворяли в 0,16 М растворе уксусной кислоты при концентрации 2 мг/мл, медленно загружали на колонку и элюировали 0,16 М раствором уксусной кислоты. Собранный раствор высушивали с помощью сублимации.

Неочищенные и очищенные пептиды анализировали сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографией с UV и масс-спектрометрическим выявлением (UPLC-UV-MS). Аналитическую UPLC проводили в соответствии с одним из приведенных ниже способов.

Способ A

Выявление при 214 нм.

Колонка: Acquity Waters BEH130 C4, 1,7 мкм (2,1 × 100 мм) при 45°C.

Растворитель: H₂O плюс 0,1% TFA : ACN плюс 0,1% TFA (расход 0,4 мл/мин).

Градиент: от 70:30 (0 мин) до 70:30 (1 мин), до 50:50 (5 мин), до 10:90 (5,2 мин), до

10:90 (5,5 мин) до 70:30 (5,7 мин) до 70:30 (6 мин).

Масс-анализатор: детектор Waters SQ с ионизацией электрораспылением в режиме выявления положительных ионов.

Способ B

Выявление при 214 нм.

Градиент: от 65:35 (0 мин) до 65:35 (1 мин), до 45:55 (5 мин), до 10:90 (5,2 мин), до

10:90 (5,5 мин) до 65:35 (5,7 мин) до 65:35 (6 мин).

Пример 19.1. Общая процедура синтеза SEQ ID NO: 187-222

Синтез всех пептидов (SEQ ID NO: 187-222) выполняли с помощью стандартного стадийного твердофазного синтеза с участием Fmoc (SPPS) на микроволновом синтезаторе Liberty Blue (CEM corp.). Сборку проводили с помощью амидной смолы Ринка AM LL 0,29 ммоль/г в масштабе 0,1 ммоль, с активацией DIC/Oxyma. В качестве растворителя применяли DMF. Для модифицированной боковой цепи лизина применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH в положении 12.

Применяли приведенные ниже условия.

Стандартное снятие защиты: 20% пиперидина в DMF в течение 2 × 120 с, 90°C.

Циклы промывания: 4 × DMF.

Стандартное одиночное присоединение: 5 экв. AA 0,4 M/5 экв. DIC 1 M/5 экв. Oxyma 1 M, 120 с, 90°C.

Циклы промывания: 4 × DMF.

В конце сборки N-конец пептида защищали с помощью трет-бутоксикарбонил-трет-бутилкарбоната (10-эквивалентный избыток по отношению к загрузке смолы, FluoroChem) в DMF; смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 30 минут и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера.

Удаление группы Dde на Lys12 достигали путем капания 2% моногидрата гидразина и промывки смол с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым).

После удаления группы Dde смолы обрабатывали, как описано в примерах 2-7, в соответствии с дериватизацией боковой цепи пептидной последовательности.

Отщепление пептидов от смолы проводили с помощью следующей смеси для отщепления: 87,5% TFA, 5% фенола, 5% воды, 2,5% TIPS в течение 2-2,5 часа. Смола, используемая в синтезе, характеризовалась тем, что С-конец отщеплялся от смолы в виде первичного амида.

Смесь отщепления собирали фильтрованием, неочищенные пептиды осаждали в метил-трет-бутиловом эфире, центрифугировали, надосадочную жидкость удаляли, к пептидам добавляли свежий диэтиловый эфир и повторно центрифугировали дважды; неочищенные пептиды затем лиофилизировали.

Пептиды анализировали с помощью аналитической UPLC и проверяли с помощью масс-спектрометрии ESI⁺. Неочищенные пептиды очищали с помощью стандартной процедуры очистки с помощью препаративной RP-HPLC.

Пример 19.2. Синтез пептида под SEQ ID NO: 187

Соединение под SEQ ID NO: 186 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 19.1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

В конце сборки N-конец пептида защищали и защитную группу Dde на Lys12 удаляли, как сообщалось в примере 19.1.

γ-Карбоксильный конец глутаминовой кислоты присоединяли к эпсилон-аминогруппе Lys с применением Fmoc-L-Glu-OtBu посредством способа DIC/HOAt (4-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Группу Fmoc на глутаминовой кислоте удаляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидина/DMF в течение 5 минут (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью NMP/DCM/NMP (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Присоединение связывающего альбумин фрагмента выполняли с помощью гексадекандиовой кислоты (HO-C(O)(CH₂)₁₄COOH) посредством способа DIC/HOAt (5-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в NMP. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью NMP/DCM/NMP (6/6/6 раз каждым).

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ A). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,84 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1213,97, которая соответствовала ожидаемому значению 1213,47.

Пример 19.3. Синтез пептида под SEQ ID NO: 198

Соединение под SEQ ID NO: 197 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 19.1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

Fmoc-AEEA-OH присоединяли к эпсилон-аминогруппе в Lys посредством способа DIC/HOAt (4-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Группу Fmoc на AEEA удаляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидина/DMF в течение 5 минут (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Вторую Fmoc-AEEA-OH присоединяли к аминогруппе со снятой защитой посредством способа DIC/HOAt в DMF, а затем снимали защиту с Fmoc, как указано выше.

γ-Карбоксильный конец глутаминовой кислоты присоединяли к аминогруппе со снятой защитой с применением Fmoc-L-Glu-OtBu посредством способа DIC/HOAt (4-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Группу Fmoc на глутаминовой кислоте удаляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидина/DMF в течение 5 минут (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью NMP/DCM/NMP (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ A). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,66 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1286,7, которая соответствовала ожидаемому значению 1286,05.

Пример 19.4. Синтез пептида под SEQ ID NO: 199

Соединение под SEQ ID NO: 198 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 19.1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

γ-Карбоксильный конец глутаминовой кислоты присоединяли к аминогруппе со снятой защитой с применением Fmoc-L-Glu-OtBu посредством способа DIC/HOAt (4-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Группу Fmoc на глутаминовой кислоте удаляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидина/DMF в течение 5 минут (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Вторую Fmoc-L-Glu-OtBu присоединяли к аминогруппе со снятой защитой посредством способа DIC/HOAt в DMF, а затем снимали защиту с Fmoc, как указано выше. Смолу промывали с помощью NMP/DCM/NMP (6/6/6 раз каждым).

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ A). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,50 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1318,70, которая соответствовала ожидаемому значению 1318,33.

Пример 19.5. Синтез пептида под SEQ ID NO: 204

Соединение под SEQ ID NO: 203 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 19.1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

γ-Карбоксильный конец глутаминовой кислоты присоединяли к эпсилон-аминогруппе Lys с применением Fmoc-L-Glu-OtBu посредством способа DIC/HOAt (4-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Группу Fmoc на глутаминовой кислоте удаляли путем ее двухкратной обработки с помощью 20% (об./об.) раствора пиперидина/DMF в течение 5 минут (25 мл каждого). Смолу промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым). Тест Кайзера на аликвоте смолы с пептидом после завершения снятия Fmoc-защиты был положительным.

Присоединение связывающего альбумин фрагмента выполняли с применением пальмитиновой кислоты (HO-C(O)(CH₂)₁₄CH₃) посредством способа DIC/HOAt (5-эквивалентный избыток относительно нагрузки смолы) в DMF. Смесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и реакцию контролировали с помощью теста Кайзера. Смолу фильтровали и промывали с помощью DMF/DCM/DMF (6/6/6 раз каждым).

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ В). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,84 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1206,50, которая соответствовала ожидаемому значению 1205,98.

Пример 19.6. Синтез пептида под SEQ ID NO: 205

Соединение под SEQ ID NO: 204 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ В). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,45 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1279,0, которая соответствовала ожидаемому значению 1278,56.

Пример 19.7. Синтез пептида под SEQ ID NO: 206

Соединение под SEQ ID NO: 205 получали в соответствии с процедурой, описанной в примере 19.1. Применяли амидную смолу Ринка AM LL 0,29 ммоль/г (4-(2',4'-диметоксифенил-Fmoc-аминометил)-феноксиацетамидо-норлейциламинометиловая смола) от Novabiochem, 100-200 меш. Применяли стратегию автоматизированного Fmoc-синтеза с активацией DIC/Oxyma. В протоколе твердофазного синтеза в положении 12 применяли Fmoc-L-Lys(Dde)-OH.

Вторую Fmoc-L-Glu-OtBu присоединяли к аминогруппе со снятой защитой посредством способа DIC/HOAt в DMF, а затем снимали защиту с Fmoc, как указано выше.

Пептид отщепляли от смолы, как описано в примере 19.1. Неочищенный продукт очищали посредством препаративной RP-HPLC на Reprosil Gold C4 Prep (Dr Maisch), 250 × 40 см, 120 Å, 5 мкм, с применением градиента ацетонитрил/вода (с 0,1% TFA). Очищенный пептид анализировали с помощью LC/MS (способ В). (M/4+H)⁺ сигнал массы, обнаруженный под пиком со временем удерживания 3,30 мин, обеспечивал выявление массы пептида 1311,35, которая соответствовала ожидаемому значению 1310,83.

Пример 19.8. Синтез дополнительных пептидов

Следующие пептиды синтезировали в соответствии с процедурой, описанной в примерах 19,1-7. Рассчитанные и установленные значения массы и времени удерживания этих пептидов указаны в таблице 3 ниже, наряду с таковыми соединений из примеров 19,2-7.

Сокращения

«AA» относится к аминокислоте;

«Boc» относится к трет-бутилоксикарбонилу;

«tBu» относится к третичному бутилу;

«DCM» относится к дихлорметану;

«DMF» относится к диметилформамиду;

«MS» относится к масс-спектрометрии;

«NMP» относится к N-метил-2-пирролидону;

«OtBu» относится к O-трет-бутилу;

«Oxyma» относится к этилцианогидроксииминоацетату;

«TIPS» относится к триизопропилсилану;

«TFA» относится к трифторуксусной кислоте;

«Trt» относится к тритилу.

Пример 19.9. Оценивание активности в отношении α -рецептора CRF2 человека таких FА-модифицированных пептидов

Агонизм соединений в отношении 2α кортикотропин-высвобождающего фактора (рецептора CRF2α) человека определяли с помощью функционального анализа измерения cAMP-модуляции при обработке клеточной линии TeloHEAC, стабильно экспрессирующей рецептор CRF2α.

Соединения растворяли при 0,5 мM в 100% DMSO и серийно разбавляли (1:2) 100% DMSO 16 разбавлениями. Затем 20 нл каждого разбавления переносили в 384-луночный планшет для анализов с помощью прибора для звукового выталкивания капли. Затем в каждую лунку добавляли по 5 мкл буфера для соединений (1x HBSS; 20 мМ HEPES, 2 мМ IBMX, 0% или 0,2% HSA).

Перед применением замороженные клетки быстро размораживали при 37°C и промывали (5 мин при 900 об/мин) в 20 мл буфера для клеток (1 × HBSS; 20 мМ HEPES). Клетки ресуспендировали в буфере для клеток и доводили до плотности 800000 клеток/мл.

Распределяли 5 мкл клеток (конечная плотность клеток: 4000 клеток/лунка) в содержащий соединения 384-луночный планшет для анализа и инкубировали в течение 30 минут при 37°C.

Уровень cAMP в обработанных клетках определяли с помощью набора Cisbio 62AM4PEC в соответствии с инструкцией производителя. Наконец, планшеты инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре перед измерением отношения флуоресценции между 665/620 нм.

Процентное значение активности (E%) рассчитывали, принимая 100 нМ урокортина 2 (UCN2) за 100%. Эффективность соединений in vitro количественно оценивали путем определения концентраций, которые вызывали 50% активацию максимального ответа (EC50) относительно урокортина 2.

Типичные значения EC50 представлены в таблице 18 ниже.

Пример 19.10. Оценивание активности в отношении антитела к целевому рецептору CFR1R соединений по настоящему изобретению

Клон 2 линии экспрессирующих CRF1R на высоком уровне клеток CHO-K1 приобретали у PerkinElmer.

Клетки выращивали в 10-сантиметровой чашке при 37°C/5% CO2 в среде (F12 (Hams)/10% FBS/400 мкг/мл G418) до близкого к конфлюэнтному состояния. На этой стадии клетки собирали, ресуспендировали до 10 миллионов/мл в культуральной среде без G418 и с 10% DMSO. Аликвоты во флаконах объемом 1 мл медленно замораживали до -80°C в изопропаноле, а затем переносили в жидкий азот для хранения. Эти флаконы применяли для проведения эксперимента в соответствии с процедурой, описанной в предыдущем параграфе, за исключением соединения, использованного в контрольной лунке для определения 100% активации (саувагин при 100 нМ).

Типичные значения EC50 и Emax представлены в таблице 19 ниже.

Примечательным в этой таблице является очевидный эффект присутствия свободной карбоновой кислоты в FA-модификации K12. См., например, сравнение пептидов 223, 225 и 226, включающих связывающий альбумин фрагмент -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄CH₃, например, с пептидами 222 и 224, включающими в качестве связывающих альбумин фрагментов соответственно -gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH и -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₈COOH. Это еще более очевидно при параллельном сравнении (таблица 20) пептидов, отличающихся друг от друга только присутствием указанной свободной карбоновой кислоты.

Также наблюдали (данные не показаны), что удлинение линкера, такого как -{AEEA}₂-gGlu- и -{AEEA}₂-(gGlu)₂-, из указанных связывающих альбумин фрагментов, включающих свободную карбоновую кислоту, еще больше улучшает селективность пептидов в отношении CRF2.

Пример 19.11. Протоколы DMPK и результаты таких FА-модифицированных пептидов

In vitro стабильность в плазме крови

In vitro метаболическую стабильность в плазме крови исследовали у самцов крыс Sprague Dawley и человека. Тестируемое соединение инкубировали при 3 мМ в течение 2 часов при 37°C. В каждой временной точке (0, 0,25, 1 и 2 ч) образцы получали для анализа посредством методики одноступенчатого осаждения белков, добавляя 150 мкл этанола, 0,1% муравьиной кислоты в 50 мкл аликвоты плазмы крови. Образцы перемешивали на вортексе до однородности, а затем подвергали центрифугированию при 14000 об./мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость (100 мкл) собирали, разбавляли 100 мкл воды, 0,1% муравьиной кислоты и анализировали с помощью LC-HRMS (TripleTOF 6600+, AB Sciex). Для каждого тестируемого соединения соотношения площадей в каждой временной точке сравнивали с соотношением площадей через 0 ч и переводили в процентное содержание оставшегося.

Типичные данные стабильности в плазме крови представлены в таблице 21 ниже.

Растворимость и химическая стабильность

Как и в примере 15 выше, также оценивали химическую стабильность типичных примеров этих FА-модифицированных пептидов с помощью LC-UV вместо светорассеяния. Растворимость и химическую стабильность исследовали в 100 мМ фосфатном буфере (pH 7,4) и 100 мМ ацетатном буфере (pH 4,5). Порошки тестируемых соединений растворяли в обоих буферах при целевой концентрации 10 мг/мл и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. После центрифугирования при 2500 кубических футов в условиях резервуара в течение 15 минут 10 мл надосадочной жидкости разбавляли с помощью 190 мл инкубационного буфера и анализировали с помощью LC-UV (Acquity UPLC-DAD, Waters). Растворимость рассчитывали путем сравнения площади пика тестируемого соединения в забуференном образце с площадью пика того же соединения, растворенного при 0,5 мг/мл в воде:ацетонитриле 1:1, 0,1% муравьиной кислоты.

Из центрифугированной надосадочной жидкости отбирали две дополнительные аликвоты объемом 80 мл и разбавляли с помощью 160 мл инкубационного буфера. Одну аликвоту хранили при 5°C, а другую хранили при 40°C. Через 28 дней образцы анализировали с помощью LC-UV. Химическую стабильность рассчитывали как % потери, используя следующие уравнения:

- химическая стабильность (как % потери) = [(чистота после 28 дней при 5°C) - (чистота после 28 дней при 40°C)] × 100/(чистота после 28 дней при 5°C);

- % чистоты = [(площадь пика соединения) × 100/(общая площадь пика)].

Типичные данные растворимости в буфере представлены в таблице 22 ниже.

Типичные данные химической стабильности представлены в таблице 23 ниже.

Все последовательности, раскрываемые в данном документе, перечислены в прилагаемом перечне последовательностей, полное содержание которого является частью данного описания.

Все публикации, заявки на патенты, патенты и другие ссылки, упомянутые в данном документе, включены с помощью ссылки во всей своей полноте. Кроме того, приведенные материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративные и не предназначены для ограничения. Если не определено иное, то все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют такое же значение, которое обычно понятно среднему специалисту в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Следует учитывать, что, хотя настоящее изобретение было описано во взаимосвязи с его подробным описанием, вышеупомянутое описание предназначено для иллюстрации и не ограничивает объем настоящего изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в пределах объема формулы изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> САНОФИ

<120> АГОНИСТЫ РЕЦЕПТОРА CRF2 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ТЕРАПИИ

<130> PAT20043-EP-EPA

<160> 186

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_1

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

<223> K* обозначает остаток модифицированного лизина в положении X12,

Ra обозначает связывающий альбумин фрагмент, Ra представляет собой

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

<223> C-концевой аминокислотный остаток является амидированным как

первичный амид

<400> 1

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 2

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_2

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 2

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 3

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 3

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 4

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_4

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 4

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Lys Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 5

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_5

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 5

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 6

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_6

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 6

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 7

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_7

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 7

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 8

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_8

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 8

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Ala Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 9

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_9

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

<223> C-концевой аминокислотный остаток является амидированным

как первичный амид

<400> 9

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Ala Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 10

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_10

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 10

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 11

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_11

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 11

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 12

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_12

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 12

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Arg Lys Gln Lys Gln Gln Ala Lys Thr Asn Ala

20 25 30

Lys Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 13

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_13

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 13

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Phe

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Gln Ile

35

<210> 14

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_14

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 14

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Arg Lys Gln Lys Gln Lys Ala Lys Thr Asn Ala

20 25 30

Lys Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 15

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_15

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 15

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Phe

1 5 10 15

Lys Gln Ala Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 16

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_16

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 16

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Ala Arg Val

35

<210> 17

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_17

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 17

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 18

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_18

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 18

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 19

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_19

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 19

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 20

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_20

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 20

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 21

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_21

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 21

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Xaa Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 22

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_22

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 22

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 23

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_23

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (D)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 26

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 23

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Xaa Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 24

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_24

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 24

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 25

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_25

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 25

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Lys Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 26

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_26

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 27

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 26

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Xaa Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 27

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_27

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 27

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 28

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_28

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (d)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 28

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Lys Ala Glu Lys Ala Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 29

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_29

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 27

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 29

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Xaa Ala Glu Lys Ala Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 30

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_30

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 30

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Ala Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 31

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_31

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 31

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Xaa

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 32

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_32

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 32

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 33

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_33

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)14CH3

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 33

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Thr

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 34

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_34

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 34

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 35

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_35

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 35

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 36

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_36

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 36

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 37

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_37

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 37

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 38

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_38

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 38

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 39

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_39

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 39

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 40

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_40

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 40

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 41

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_41

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 41

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 42

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_42

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 42

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 43

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_43

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 43

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Lys Leu Arg Ala Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 44

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_44

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 44

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Lys Glu Arg Ala Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 45

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_45

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 45

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Xaa Leu Lys Ala Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 46

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_46

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 46

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Xaa Leu Arg Ala Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 47

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_47

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 47

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Thr Lys Leu Lys Lys Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Lys Arg Xaa Glu Arg Glu Lys Ala Glu Lys Ala Ala

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 48

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_48

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 48

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 49

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_49

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 49

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 50

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_50

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 50

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Arg Xaa Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 51

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_51

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 51

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Gln Ile

35

<210> 52

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_52

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 52

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 53

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_53

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 53

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 54

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_54

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 54

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 55

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_55

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 55

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 56

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_56

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 56

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 57

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_57

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 57

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 58

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_58

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 58

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Phe

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Gln Ile

35

<210> 59

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_59

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 59

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Gln Ile

35

<210> 60

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_60

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 60

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 61

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_61

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 61

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 62

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_62

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 62

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 63

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_63

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 63

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 64

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_64

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 64

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 65

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_65

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 65

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 66

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_66

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 66

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Gln Lys Gln Lys Lys Glu Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Gln Leu Leu Glu Arg Val

35

<210> 67

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_67

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 67

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 68

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_68

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 68

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 69

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_69

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 14

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 69

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Xaa Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 70

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_70

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 70

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 71

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_71

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 14

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 71

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Xaa Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 72

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_72

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 72

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 73

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_73

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 73

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 74

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_74

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 74

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 75

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_75

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 75

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 76

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_76

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 76

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 77

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_77

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 77

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 78

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_78

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 78

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 79

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_79

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 79

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 80

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_80

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 80

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 81

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_81

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 81

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 82

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_82

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 82

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Val

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 83

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_83

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 83

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 84

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_84

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 84

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 85

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_85

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 85

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 86

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_86

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 86

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 87

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_87

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 87

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 88

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_88

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 88

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Lys Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 89

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_89

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 89

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Lys Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 90

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_90

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 90

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Lys Thr Asn Val

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 91

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_91

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 91

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Lys Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 92

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_92

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 92

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 93

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_93

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 93

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Lys Thr Asn Val

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 94

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_94

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 94

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 95

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_95

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 95

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 96

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_96

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 96

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Glu Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 97

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_97

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 97

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 98

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_98

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 98

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Lys Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 99

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_99

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 99

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 100

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_100

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 100

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Xaa

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 101

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_101

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 101

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Lys Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 102

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_102

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 102

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 103

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_103

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 103

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 104

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_104

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 104

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 105

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_105

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 105

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 106

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_106

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 106

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 107

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_107

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 107

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 108

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_108

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 108

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 109

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_109

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 109

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Lys Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 110

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_110

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 110

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 111

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_111

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 111

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 112

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_112

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 112

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 113

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_113

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 113

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 114

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_114

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 114

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 115

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_115

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 115

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 116

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_116

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 116

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 117

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_117

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 117

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 118

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_118

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 118

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 119

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_119

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 119

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Gln Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 120

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_120

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 120

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 121

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_121

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 121

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 122

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_122

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 122

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 123

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_123

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 123

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 124

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_124

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 124

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 125

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_125

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 125

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 126

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_126

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 126

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 127

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_127

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 127

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Lys Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 128

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_128

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 128

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 129

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_129

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 129

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 130

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_130

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 130

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 131

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_131

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 131

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 132

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_132

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 132

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 133

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_133

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 133

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 134

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_134

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 134

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 135

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_135

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 135

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 136

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_136

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 136

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Gln Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 137

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_137

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 137

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 138

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_138

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 138

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Glu Lys Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 139

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_139

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 139

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 140

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_140

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 140

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 141

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_141

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

Ra обозначает связывающий альбумин фрагмент, Ra представляет собой "-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 141

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 142

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_142

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 142

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 143

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_143

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 143

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Lys Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 144

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_144

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 144

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 145

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_145

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 145

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Thr Lys Ile Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 146

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_146

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 146

Phe Thr Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Lys Ala Lys Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 147

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_147

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 147

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 148

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_148

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 148

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 149

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_149

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 149

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 150

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_150

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 150

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 151

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_151

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 151

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 152

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_152

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 152

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 153

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_153

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 153

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 154

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_154

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 154

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 155

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_155

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 155

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Lys Gln Glu Lys Glu Lys Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 156

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_156

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 156

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Ala

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 157

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_157

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 157

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 158

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_158

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 158

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 159

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_159

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 159

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Glu Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 160

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_160

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 160

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Glu Xaa Glu Arg Glu Gln Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 161

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_161

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 161

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Glu Xaa Glu Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 162

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_162

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 162

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Glu Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 163

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_163

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 163

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile His Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 164

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_164

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 164

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 165

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_165

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 165

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 166

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_166

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 166

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 167

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_167

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 167

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Gly Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 168

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_168

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 168

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Glu Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 169

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_169

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 169

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Glu Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 170

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 1

<223> Ацетилирование

<220>

<223> соединение Seq_170

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 170

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Glu Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Glu Gln Glu Arg Gln Glu Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Glu

20 25 30

Gln Ile Leu Glu Gln Val

35

<210> 171

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_171

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 171

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 172

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_172

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 172

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 173

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_173

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)18COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 173

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 174

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_174

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 174

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 175

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_175

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)18COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 175

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 176

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_176

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 176

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 177

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_177

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-{gGlu}2-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 177

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 178

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_178

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)18COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 178

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 179

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_179

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

как первичный амид

<400> 179

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 180

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_180

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 180

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 181

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_181

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 181

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 182

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_182

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 182

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Glu Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 183

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_183

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 183

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Ala Arg Gln Lys Xaa Gln Arg Ala Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Arg Ile Leu Glu Arg Val

35

<210> 184

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_184

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 184

Ile Val Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Gln Arg Gln Gln Ala Glu Lys Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 185

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_185

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

"-{AEEA}2-gGlu-C(O)(CH2)16COOH

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> Модифицированная аминокислота

<222> 38

первичный амид

<400> 185

Ile Val Leu Ser Leu Asp Val Pro Ile Lys Leu Lys Gln Ile Leu Leu

1 5 10 15

Lys Gln Glu Arg Gln Lys Lys Xaa Arg Gln Lys Ala Glu Thr Asn Lys

20 25 30

Gln Ile Leu Ala Gln Val

35

<210> 186

<211> 38

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> соединение Seq_186

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 1

<223> изолейцин (I) или фенилаланин (F)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 2

<223> валин (V) или треонин (T)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 7

<223> валин (V) или D-валин (v)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 9

<223> изолейцин (I) или треонин (T)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 10

<223> лизин (K), глутамат (E), гистидин (H) или глицин (G)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 11

<223> изолейцин (I) или лейцин (L)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 12

<223> лизин (K), где эпсилон-аминогруппа боковой цепи лизина

ковалентно связана со связывающим альбумин фрагментом

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 13

<223> глутамин (Q) или лизин (K)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 14

<223> изолейцин (I), лизин (K) или 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 16

<223> лейцин (L) или фенилаланин (F)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 17

<223> глутамат (E) или лизин (K)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 19

<223> аланин (A), глутамат (E) или глутамин (Q)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 20

<223> лизин (K) или аргинин (R)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 21

<223> глутамин (Q) или лизин (K)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 22

<223> лизин (K), аргинин (R) или глутамат (E)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 23

<223> лизин (K) или 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 24

<223> глутамин (Q), 2-аминоизомасляная кислота (Aib), лейцин (L)

или глутамат (E)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 25

<223> аргинин (R), лизин (K) или 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 26

<223> аланин (A), глутамат (E), 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

или глутамин (Q)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 27

<223> глутамин (Q), 2-аминоизомасляная кислота (Aib) или лизин (K)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 29

<223> глутамат (E) или лизин (K)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 30

<223> лизин (K) или треонин (T)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 31

<223> аспарагин (N) или аланин (A)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 32

<223> лизин (K), аланин (A), валин (V), треонин (T), глутамат (E)

или 2-аминоизомасляная кислота (Aib)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 33

<223> аргинин (R), лизин (K) или глутамин (Q)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 34

<223> изолейцин (I) или лейцин (L)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 36

<223> аланин (A) или глутамат (E)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 37

<223> глутамин (Q) или аргинин (R)

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> 38

<223> изолейцин (I) или валин (V)

<400> 186

Xaa Xaa Leu Ser Leu Asp Xaa Pro Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Leu Xaa

1 5 10 15

Xaa Gln Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ala Xaa Xaa Xaa Xaa

20 25 30

Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa

35

<---

Claims

1. Соединение, которое представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность формулы (I),

где

X3 представляет собой лейцин (L);

X4 представляет собой серин (S);

X5 представляет собой лейцин (L);

X6 представляет собой аспартат (D);

X7 представляет собой валин (V) или D-валин (v);

X8 представляет собой пролин (P);

X15 представляет собой лейцин (L);

X18 представляет собой глутамин (Q);

X28 представляет собой аланин (A);

X35 представляет собой лейцин (L);

-Y-Z-C(O)R¹ (II),

где

или его фармацевтически приемлемую соль.

2. Соединение по п. 1, где

X1 представляет собой изолейцин (I);

X2 представляет собой валин (V);

X7 представляет собой валин (V) или D-валин (v)

X10 представляет собой лизин (K) или глицин (G);

X11 представляет собой лейцин (L);

X16 представляет собой лейцин (L);

X21 представляет собой глутамин (Q);

X31 представляет собой аспарагин (N);

X32 представляет собой лизин (K) или аланин (A);

X34 представляет собой изолейцин (I);

X35 представляет собой лейцин (L);

X38 представляет собой валин (V).

3. Соединение по п. 1 или 2, где

X7 представляет собой D-валин (v);

X25 представляет собой аргинин (R);

X37 представляет собой аргинин (R) или глутамин (Q); в частности глутамин (Q);

4. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где

X10 представляет собой лизин;

X24 представляет собой глутамин (Q);

X25 представляет собой аргинин (R);

X27 представляет собой глутамин (Q);

X30 представляет собой лизин (K);

X33 представляет собой глутамин (Q);

X36 представляет собой аланин (A); и

X37 представляет собой глутамин (Q).

5. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где аминокислотный остаток в положении X1 является ацетилированным, и где необязательно аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным; или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п. 5, где аминокислотный остаток в положении X38 является амидированным как С-концевой первичный амид.

7. Соединение по п. 1, где связывающий альбумин фрагмент выбран из следующих групп:

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₈COOH;

-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH;

-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH;

-{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH и

-{AEEA}₂-{gGlu}₂-C(O)(CH₂)₁₄COOH.

8. Соединение по п. 1, где связывающий альбумин фрагмент представляет собой -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₄COOH или -{AEEA}₂-gGlu-C(O)(CH₂)₁₆COOH.

9. Соединение по п. 1, где соединение представляет собой пептид под любым из SEQ ID NO: 1-227 или его фармацевтически приемлемую соль.

10. Соединение по п. 1, где соединение представляет собой пептид под любым из SEQ ID NO: 3, 7, 35, 83, 130, 135, 136, 137, 138, 139,140, 141, 142, 147, 149, 151, 152, 171, 172, 173 и 174 или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью агониста рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2), содержащая от 0,1% до 99,9% по весу соединения по любому из предыдущих пунктов и от 99,9% до 0,1% по весу фармацевтически приемлемых вспомогательного вещества, разбавителя или носителя.

12. Соединение по любому из пп. 1-10 или фармацевтическая композиция по п. 11 для применения в терапии.

13. Соединение по любому из пп. 1-10 или фармацевтическая композиция по п. 11 для применения в способе лечения или предупреждения сердечно-сосудистого заболевания, ожирения или диабета у пациента.

14. Соединение по любому из пп. 1-10 или фармацевтическая композиция по п. 11 для применения в качестве агониста рецептора 2 кортикотропин-высвобождающего фактора (CRF2).