RU2843549C1 - Способы лечения нейтропении, вызванной химиотерапией или лучевой терапией - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики нейтропении, вызванной химиотерапией, или нейтропении, вызванной лучевой терапией, у пациента, нуждающегося в этом, причем указанный способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента или лечения с использованием лучевой терапии. Настоящее изобретение обеспечивает разработку схемы приема эфлапеграстима длительного действия, которая позволяет снизить нагрузку на пациента, обеспечивая сопоставимую или повышенную эффективность лечения нейтропении. 13 з.п. ф-лы, 3 ил., 11 табл., 6 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[001] Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим белковые комплексы, и их применению в медицине для лечения или профилактики состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов, например, нейтропении. Белковый комплекс может быть образован путем связывания Fc-области иммуноглобулина с физиологически активным полипептидом посредством непептидильного полимера, причем указанный непептидильный полимер соединен с Fc-областью иммуноглобулина.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[002] Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор человека (ГКСФ) представляет собой гемопоэтический гликопротеин, продуцируемый стромальными клетками, макрофагами, эндотелиальными клетками, фибробластами и моноцитами. ГКСФ связывается с высоким сродством с рецептором ГКСФ, экспрессируемым на нейтрофильных клетках-предшественниках в костном мозге, и индуцирует их пролиферацию и дифференцировку в нейтрофилы, борющиеся с инфекцией, не оказывая значимого гемопоэтического эффекта на другие ростки клеток крови. Применение рекомбинантных препаратов ГКСФ является хорошо зарекомендовавшим себя терапевтическим подходом для ускорения восстановления костного мозга, для предотвращения начала тяжелой миелосупрессии и связанных с ней осложнений, а также для снижения фебрильной нейтропении (ФН) у пациентов с немиелоидными злокачественными новообразованиями при лучевой терапии или химиотерапии.

[003] Пегфилграстим (Neulasta®; Amgen Inc.) является наиболее популярной пегилированной формой рекомбинантного ГКСФ человека. Эфлапеграстим представляет собой ГКСФ длительного действия, разработанный для снижения тяжести и продолжительности тяжелой нейтропении, а также осложнений нейтропении, ассоциированных с применением миелосупрессивных противораковых лекарственных средств. В настоящее время рекомендованная схема приема эфлапеграстима (Rolontis®, НМ10460А) и пегфилграстима включает введение на следующий день после химиотерапии с применением цитотоксических агентов, что требует повторного перемещения в больницу пациентов, как правило, ослабленных и находящихся в состоянии дискомфорта после химиотерапии.

[004] Таким образом, существует неудовлетворенная потребность в разработке схемы приема ГКСФ длительного действия в тот же день, что позволит снизить нагрузку на пациента, обеспечивая сопоставимую или повышенную эффективность лечения нейтропении.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[005] В одном аспекте настоящего изобретения предложены способы увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[006] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложены способы лечения или профилактики состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов, у нуждающегося в этом пациента, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[007] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложены способы увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после получения лучевой терапии пациентом.

[008] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложены способы лечения или профилактики состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов, у нуждающегося в этом пациента, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента посредством лучевой терапии.

[009] В некоторых вариантах реализации состояние, характеризующееся нарушением продукции лейкоцитов, выбрано из группы, состоящей из: нейтропении, вызванной химиотерапией, нейтропении, вызванной лучевой терапией, сниженной гемопоэтической функции, сниженной иммунной функции, сниженного количества нейтрофилов, сниженной мобилизации нейтрофилов, мобилизации клеток-предшественников периферической крови, сепсиса, трансплантации костного мозга, инфекционных заболеваний, лейкопении, тромбоцитопении, анемии, усиления приживления костного мозга во время трансплантации, усиления восстановления костного мозга при лечении аплазии или миелосупрессии костного мозга, вызванной воздействием излучения, химических веществ или химиотерапией, аплазии или миелосупрессии костного мозга, вызванной лучевой терапией, и синдрома приобретенного иммунодефицита.

[0010] В некоторых вариантах реализации состояние, характеризующееся нарушением продукции лейкоцитов, представляет собой нейтропению, вызванную химиотерапией, или нейтропению, вызванную лучевой терапией.

[0011] В некоторых вариантах реализации указанный способ уменьшает продолжительность нейтропении, вызванной химиотерапией, или нейтропении, вызванной лучевой терапией, у нуждающегося в этом пациента.

[0012] В некоторых вариантах реализации способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в тот же день, когда пациенту вводят химиотерапевтический агент или выполняют лечение посредством лучевой терапии.

[0013] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 6 часов, приблизительно 12 часов или 24 часов.

[0014] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима предотвращает достижение абсолютного количества нейтрофилов у пациента, составляющего менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л.

[0015] В некоторых вариантах реализации при введении эффективного количества эфлапеграстима абсолютное количество нейтрофилов у пациента может увеличиваться с первого случая уровня нейтропении менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до уровня, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, в течение менее чем приблизительно четырех дней, приблизительно семи дней или приблизительно десяти дней.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0016] На ФИГУРЕ 1 показаны результаты хроматографии Fc-фрагмента иммуноглобулина, полученного путем расщепления иммуноглобулина папаином.

[0017] На ФИГУРЕ 2 показаны результаты электрофореза очищенного Fc-фрагмента иммуноглобулина в ДСН-ПААГ (М: маркер размера молекул, дорожка 1: IgG, дорожка 2: Fc).

[0018] На ФИГУРЕ 3 показано влияние НМ10460А и пегфилграстима на абсолютное количество нейтрофилов (ANC) после острой ТС-индуцированной нейтропении у здоровых крыс SD. 0 ч (А), +2 ч (В), +5 ч (С) и +24 ч (D) после химиотерапии.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0019] Как в целом описано в настоящем документе, настоящее изобретение относится к способам увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, продукции стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток у донора, или для лечения или профилактики состояния, характеризующегося снижением продукции лейкоцитов у нуждающегося в этом пациента, включающим введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента или лечения посредством лучевой терапии.

Определения

[0020] Для облегчения понимания настоящего изобретения ниже приведены определения ряда терминов и фраз.

[0021] При отсутствии иных определений все технические и научные термины, используемые в настоящей заявке, имеют значения, обычно подразумеваемые средним специалистом в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Сокращения, используемые в настоящем документе, имеют общепринятое значение в области химии и биологии. Химические структуры и формулы, приведенные в настоящем документе, построены в соответствии со стандартными правилами химической валентности, известными в области химии.

[0022] Во всем описании, где композиции и наборы описаны как включающие или содержащие конкретные компоненты, или где процессы и способы описаны как включающие или включающие конкретные этапы, следует иметь в виду, что, кроме того, существуют композиции и наборы согласно настоящему изобретению, состоящие по существу из или состоящие из перечисленных компонентов, и что существуют процессы и способы согласно настоящему изобретению, состоящие по существу из или состоящие из указанных этапов обработки.

[0023] В заявке, где утверждается, что элемент или компонент включен в перечень перечисленных элементов или компонентов и/или выбран из него, следует понимать, что указанный элемент или компонент может представлять собой любой из указанных элементов или компонентов, или указанный элемент или компонент может быть выбран из группы, состоящей из двух или более указанных элементов или компонентов.

[0024] Кроме того, следует понимать, что элементы и/или признаки композиции или способа, описанных в настоящем документе, можно комбинировать различными способами, явно или неявно указанными в настоящем документе, не отступая от сущности настоящего изобретения. Например, при приведении ссылки на конкретное соединение это соединение можно применять в различных вариантах реализации композиций согласно настоящему изобретению и/или в способах согласно настоящему изобретению, если из контекста не следует иное. Иными словами, в рамках настоящей заявки варианты реализации описаны и изображены таким образом, что позволяют написать и составить ясную и сжатую заявку, однако следует подразумевать и принимать во внимание, что варианты реализации изобретения по-разному объединены или отделены без отрыва от настоящих идей и изобретения(изобретений). Например, следует принимать во внимание, что все признаки, описанные и изображенные в настоящем документе, можно применять ко всем аспектам изобретения(изобретений), описанных и изображенных в настоящем документе.

[0025] Формы единственного числа используются в настоящем описании для обозначения одного или более чем одного (т.е. по меньшей мере одного) грамматического объекта статьи, если такой контекст не является неуместным. В качестве примера, «элемент» означает один элемент или более чем один элемент.

[0026] Термин «и/или» используют в настоящем описании для обозначения «и» или «или», если не указано иное.

[0027] Следует понимать, что выражение «по меньшей мере один из» включает по отдельности каждый из объектов, перечисленных после данного выражения, и различные комбинации двух или более из указанных объектов, если иное не следует из контекста и применения. Следует понимать, что выражение «и/или» в связи с тремя или более перечисленными объектами имеет такое же значение, если иное не следует из контекста.

[0028] Использование термина «включать», «включает», «включая», «иметь», «имеет», «имеющий», «содержат», «содержит» или «содержащий», включая их грамматические эквиваленты, в общем случае следует понимать как открытые и неограничивающие термины, например, не исключающие дополнительные неперечисленные элементы или этапы, если иное специально не указано или не понятно из контекста.

[0029] Если использование термина «приблизительно» предшествует количественному значению, то настоящее изобретение также включает в себя это конкретное количественное значение, если специально не указано иное. В настоящем документе термин «приблизительно» относится к отклонению ±10% от номинального значения, если иное не указано или не вытекает из контекста.

[0030] В различных местах настоящего описания переменные или параметры описаны в виде групп или диапазонов. В частности, предполагается, что описание включает все возможные отдельные подкомбинации членов таких групп и диапазонов. В частности, например, предполагается, что целое число в диапазоне от 0 до 40 включает по отдельности 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 и 40, а целое число в диапазоне от 1 до 20 включает по отдельности 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 и 20.

[0031] Использование в настоящем документе всевозможных примеров или приведенных в качестве примера формулировок, например, «такой, как» или «включая», предназначено исключительно для лучшего иллюстрирования настоящего изобретения и не накладывает ограничений на сущность изобретения, если иное не указано в формуле изобретения. Ни одну формулировка в описании не следует интерпретировать как указание на то, что какой-либо элемент, не входящий в формулу изобретения, имеет важное значение для практической реализации настоящего изобретения.

[0032] Как правило, композиции, для которых указано процентное содержание, характеризуются процентным содержанием по массе, если не указано иное. Кроме того, если переменная не сопровождается определением, то действует предыдущее определение данной переменной.

[0033] В настоящем документе термин "тяжелая нейтропения" определяют как нейтропению с абсолютным количеством нейтрофилов менее 0,5 × 10⁹/л. Термины «тяжелая нейтропения» и «нейтропения 4 степени» можно использовать взаимозаменяемо.

[0034] В настоящем документе термин «фармацевтическая композиция» или «фармацевтический состав» относится к комбинации активного агента с носителем, инертным или активным, что делает композицию особенно подходящей для диагностического или терапевтического применения in vivo или ex vivo.

[0035] «Фармацевтически приемлемый» означает одобренный или заслуживающий одобрения нормативно-правовым органом федеральной или региональной власти или соответствующим органом в странах, отличных от Соединенных Штатов Америки, или приведенный в Фармакопее США или иной общепризнанной фармакопее для применения у животных и, в более конкретном случае, у людей.

[0036] В настоящем документе термин «фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» относится к веществу, способствующему введению активного агента субъекту и/или его всасыванию организмом субъекта, которое можно включать в композиции согласно настоящему изобретению без значимого токсикологического воздействия на пациента. Неограничивающие примеры фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ включают воду, NaCl, изотонические физиологические растворы, например, физиологический раствор с фосфатным буфером, эмульсии (например, эмульсии масло/вода или вода/масло), раствор Рингера с лактатом, изотонический раствор сахарозы, изотонический раствор глюкозы, связующие вещества, наполнители, разрыхлители, смазывающие вещества, покрытия, подсластители, вкусоароматические добавки, растворы солей (например, раствор Рингера), спирты, масла, желатины, углеводы, например, лактозу, амилозу или крахмал, сложные эфиры жирных кислот, гидроксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидин и красители, и т.п. Такие препараты можно стерилизовать и, при необходимости, смешивать со вспомогательными агентами, например, смазывающими веществами, консервантами, стабилизаторами, увлажнителями, эмульгаторами, солями для воздействия на осмотическое давление, буферами, окрашивающими и/или ароматическими веществами и т.п., которые не вступают в разрушительную реакцию с соединениями согласно настоящему изобретению. Примеры вспомогательных веществ см. в источнике Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publ. Co., Easton, PA (1975).

[0037] "Субъект", которому предполагается выполнять введение, включает людей (например, мужчину или женщину любой возрастной группы, например, субъекта детского возраста (например, младенца, ребенка, подростка) или взрослого субъекта (например, молодого взрослого человека, взрослого человека среднего возраста или пожилого человека)) и/или животное, не являющееся человеком, например, млекопитающее, например, приматов (например, яванских макаков, макаков-резусов), крупный рогатый скот, свиней, лошадей, овец, коз, грызунов, кошек и/или собак, но не ограничивается ими. В определенных вариантах реализации субъект представляет собой человека. В определенных вариантах реализации субъект представляет собой животное, не являющееся человеком.

[0038] В настоящем документе "введение" означает пероральное введение, введение в виде суппозитория, местный контакт, внутривенное введение, парентеральное введение, внутрибрюшинное введение, внутримышечное введение, внутриочаговое введение, интратекальное введение, внутричерепное введение, интраназальное введение или подкожное введение, или имплантацию субъекту устройства с замедленным высвобождением, например, миниосмотического насоса. Введение осуществляют любым путем, включая парентеральный и трансмукозальный (например, буккальный, подъязычный, небный, десневой, назальный, вагинальный, ректальный или трансдермальный). Парентеральное введение включает, например, внутривенное, внутримышечное, внутриартериальное, внутрикожное, подкожное, внутрибрюшинное, внутрижелудочковое и внутричерепное введение. Другие способы доставки включают применение липосомальных составов, внутривенное вливание, трансдермальные пластыри и т.д., но не ограничиваются ими. Под «совместным введением» подразумевают, что композицию, описанную в настоящем документе, вводят одновременно, непосредственно перед или непосредственно после введения одного или более дополнительных терапевтических средств (например, противоракового агента, химиотерапевтического средства, применения лучевой терапии или лечения нейродегенеративного заболевания). Эфлапеграстим вводят в виде монотерапии, либо его можно вводить пациенту совместно с другим средством. Предполагается, что совместное введение включает одновременное или последовательное введение соединения по отдельности или в комбинации (более чем одного соединения или агента). Таким образом, препараты при необходимости также можно объединять с другими активными веществами (например, для снижения метаболического разложения).

[0039] Термины «заболевание», «расстройство» и «состояние» используются в настоящем документе взаимозаменяемо.

[0040] В настоящем документе, если не указано иное, термины «лечить» и «лечение» подразумевают действие, происходящее, когда субъект страдает указанным заболеванием, расстройством или состоянием, и уменьшающее тяжесть заболевания, расстройства или состояния или задерживающее или замедляющее прогрессирование заболевания, расстройства или состояния (например, «терапевтическое лечение»).

[0041] В общем случае «эффективное количество» соединения относится к количеству, достаточному для того, чтобы вызвать желательную биологическую реакцию, например, для лечения уротелиальной карциномы верхних отделов мочевыводящих путей или рака мочевого пузыря без мышечной инвазии. Специалисты в данной области техники должны принимать во внимание, что эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению может варьироваться в зависимости от таких факторов, как желательный биологический конечный показатель, фармакокинетика соединения, заболевание, подлежащее лечению, способ введения и возраст, масса тела, состояние здоровья и состояние субъекта.

[0042] В настоящем документе термины «конъюгат белка» или «конъюгат» относятся к соединению, содержащему один или более физиологически активных полипептидов, один или более непептидных полимеров, содержащих реакционноспособную группу на обоих концах, и один или более Fc-фрагментов иммуноглобулина, причем указанные три компонента ковалентно связаны. Кроме того, следует отличать от «конъюгата» конструкт, содержащий лишь две различные молекулы, выбранные из физиологически активного полипептида, непептидного полимера и Fc-фрагмента иммуноглобулина, где указанные две молекулы ковалентно связаны друг с другом; такой конструкт обозначают как «комплекс».

[0043] В настоящем документе термин "Fc-фрагмент иммуноглобулина" относится к белку, содержащему константную область 2 тяжелой цепи (C_H2) и константную область 3 тяжелой цепи (C_H3) иммуноглобулина, но не содержащему вариабельные области тяжелой и легкой цепей, константную область 1 тяжелой цепи (C_H1) и константную область 1 легкой цепи (C_LI) иммуноглобулина. Он может дополнительно включать шарнирную область в константной области тяжелой цепи. Кроме того, Fc-фрагмент иммуноглобулина согласно настоящему изобретению может полностью или частично содержать константную область 1 тяжелой цепи (C_H1) и/или константную область 1 легкой цепи (C_L1), за исключением вариабельных областей тяжелой и легкой цепей. Кроме того, при условии наличия у него физиологической функции, по существу аналогичной или лучшей, чем у нативного белка, Fc-фрагмент IgG представляет собой фрагмент с делецией в относительно длинной части аминокислотной последовательности C_H2 и/или C_H3. Это означает, что Fc-фрагмент иммуноглобулина согласно настоящему изобретению может содержать 1) домен С_Н1, домен C_H2, домен C_H3 и домен C_H4, 2) домен C_H1 и домен C_H2, 3) домен C_H1 и домен C_H3, 4) домен C_H2 и домен C_H3, 5) комбинацию одного или более доменов и шарнирную область иммуноглобулина (или часть шарнирной области) и 6) димер каждого домена константных областей тяжелой цепи и константной области легкой цепи.

[0044] В настоящем документе термин "дегликозилирование" относится к ферментативному удалению углеводных фрагментов из Fc-фрагмента, а термин "агликозилирование" означает, что Fc-фрагмент в негликозилированной форме продуцирует прокариотическая клетка, предпочтительно Е. coli.

[0045] В настоящем документе термин «комбинация» означает, что полипептиды, кодирующие одноцепочечные Fc-области иммуноглобулина одинакового происхождения, связаны с одноцепочечным полипептидом другого происхождения с образованием димера или мультимера. Это означает, что димер или мультимер образован из двух или более фрагментов, выбранных из группы, состоящей из Fc-фрагментов IgG1, Fc-фрагментов IgG2, Fc-фрагментов IgG3 и Fc-фрагментов IgG4.

[0046] В настоящем документе термин «гибридный» означает, что последовательности, кодирующие два или более Fc-фрагмента иммуноглобулина различного происхождения, присутствуют в одноцепочечном Fc-фрагменте иммуноглобулина.

[0047] В настоящем документе термин «непептидный полимер относится к биосовместимому полимеру, содержащему две или более повторяющихся единиц, связанных друг с другом ковалентной связью, за исключением пептидной связи.

[0048] В настоящем документе термины «физиологически активный полипептид», «физиологически активный белок», «активный полипептид», «полипептидное лекарственное средство» или «белковое лекарственное средство» являются взаимозаменяемыми по значению и отличаются тем, что они находятся в физиологически активной форме, проявляющей различные физиологические функции in vivo.

Эфлапеграстим

[0049] Эфлапеграстим, известный как Rolontis®, SPI-2012, НМ10460А и ^17,65S-ГКСФ, представляет собой гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (ГКСФ) длительного действия, разработанный для снижения тяжести и продолжительности тяжелой нейтропении, а также осложнений нейтропении, ассоциированных с применением миелосупрессивных противораковых лекарственных средств или лучевой терапии. Эфлапеграстим состоит из рекомбинантного аналога ГКСФ человека (ef-ГКСФ) и рекомбинантного фрагмента Fc-области иммуноглобулина G4 (IgG4) человека, связанных бифункциональным полиэтиленгликолевым линкером. В определенных вариантах реализации рекомбинантный аналог ГКСФ человека (ef-ГКСФ) отличается от ГКСФ человека (SED ID NO: 1) по положениям 17 и 65, которые замещены серином (SED ID NO: 2). Безотносительно к теоретическим представлениям, полагают, что Fc-область IgG4 человека увеличивает период полужизни ef-ГКСФ в сыворотке.

[0050] ef-ГКСФ получают в растворимой форме в периплазматическом пространстве трансформированной Е. coli. Fc-фрагмент отдельно продуцируют в трансформированной Е. coli в виде тельца включения. Ef-ГКСФ и Fc-фрагмент выделяют и очищают посредством последовательных этапов очистки независимо друг от друга. Затем очищенный ef-ГКСФ (SEQ ID NO: 2) и Fc-фрагмент (SEQ ID NO: 3 и 4) связывают с помощью молекулы ПЭГ молекулярной массой 3,4 кДа, конструкция которой предусматривала наличие реакционноспособных групп на обоих концах. Сам эфлапеграстим представляет собой молекулу, полученную в результате связывания линкера ПЭГ с N-концами ef-ГКСФ и Fc-фрагмента. Аналог ГКСФ конъюгирован с аналогом полиэтиленгликоля молекулярной массой 3,4 кДа, содержащим пропилальдегидные концевые группы на обоих концах (ОНССН₂СН₂(СОСН₂СН₂)_nOCH₂CH₂CHO), через атом азота своего N-концевого остатка Thr посредством восстановительного аминирования с образованием ковалентной связи. Затем полученный комплекс ГКСФ-ПЭГ связывают с атомом азота N-концевого Pro рекомбинантного Fc-фрагмента, продуцированного в клетке Е. coli, посредством восстановительного аминирования с получением конечного конъюгата эфлапеграстима.

[0051] В одном аспекте настоящего изобретения предложен эфлапеграстим для применения в способе увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0052] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен эфлапеграстим для применения при лечении или профилактике состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0053] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен эфлапеграстим для применения в способе увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента с использованием лучевой терапии.

[0054] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен эфлапеграстим для применения при лечении или профилактике состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента с использованием лучевой терапии.

Подробная информация, описанная ниже в разделах «Лечение нейтропении, вызванной химиотерапией» и «Лечение нейтропении, вызванной лучевой терапией», может относиться к эфлапеграстиму в настоящем документе.

Фармацевтические композиции

[0055] В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая эфлапеграстим и фармацевтически приемлемый носитель, для применения в способе увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0056] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая эфлапеграстим и фармацевтически приемлемый носитель, для применения при лечении или профилактике состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0057] В одном аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая эфлапеграстим и фармацевтически приемлемый носитель, для применения в способе увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток донора у пациента, нуждающегося в этом, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента с использованием лучевой терапии.

[0058] В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая эфлапеграстим и фармацевтически приемлемый носитель, для применения при лечении или профилактике патологического состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов у пациента, нуждающегося в этом, включающая введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента с использованием лучевой терапии.

[0059] В некоторых вариантах реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой физиологический раствор с фосфатным буфером. В некоторых вариантах реализации физиологический раствор с фосфатным буфером представляет собой физиологический раствор с фосфатным буфером по Дульбекко. В определенных вариантах реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой цитратный буфер.

[0060] Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, можно вводить различными способами, включая пероральное (энтеральное) введение, парентеральное введение (путем инъекции), ректальное введение, трансдермальное введение, внутрикожное введение, интратекальное введение, подкожное (п/к) введение, внутривенное (в/в) введение, внутримышечное (в/м) введение и интраназальное введение, но не ограничиваясь ими. В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, вводят парентерально. В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, вводят путем подкожного введения.

[0061] Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, представлены в виде стандартных лекарственных форм для облегчения точного введения дозы. Термин "стандартные лекарственные формы" относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для субъектов-людей и других млекопитающих, причем каждая единица содержит заранее определенное количество активного вещества, рассчитанное для получения желательного терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим вспомогательным веществом. Типичные стандартные лекарственные формы включают предварительно заполненные, предварительно отмеренные ампулы или шприцы с жидкими композициями или пилюли, таблетки, капсулы и т.п. в случае твердых композиций.

[0062] В определенных вариантах реализации фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, вводят пациенту в виде раствора для подкожных инъекций.

[0063] В определенных вариантах реализации соединения, предложенные в настоящем документе, можно вводить в качестве единственного активного агента или в комбинации с другими активными агентами.

[0064] Хотя описания фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, в основном относятся к фармацевтическим композициям, которые подходят для введения людям, специалист в данной области техники должен понимать, что такие композиции, как правило, подходят для введения любым животным. Модификация фармацевтических композиций, подходящих для введения людям, с целью сделать указанные композиции подходящими для введения различным животным, хорошо известна, и обычный ветеринарный фармаколог может разработать и/или выполнить такую модификацию с помощью обычных экспериментов. Общие соображения при составлении и/или производстве фармацевтических композиций можно найти, например, в Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21^st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005. Подробная информация, описанная ниже в разделах «Лечение нейтропении, вызванной химиотерапией» и «Лечение нейтропении, вызванной лучевой терапией», может относиться к фармацевтическим композициям в настоящем документе.

Способы применения и лечения Лечение нейтропении, вызванной химиотерапией

[0065] В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток у донора, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0066] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения или профилактики состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов, у нуждающегося в этом пациента, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента.

[0067] В некоторых вариантах реализации состояние, характеризующееся нарушением продукции лейкоцитов, выбрано из группы, состоящей из: нейтропении, вызванной химиотерапией, нейтропении, вызванной лучевой терапией, сниженной гемопоэтической функции, сниженной иммунной функции, сниженного количества нейтрофилов, сниженной мобилизации нейтрофилов, мобилизации клеток-предшественников периферической крови, сепсиса, трансплантации костного мозга, инфекционных заболеваний, лейкопении, тромбоцитопении, анемии, усиления приживления костного мозга во время трансплантации, усиления восстановления костного мозга при лечении аплазии или миелосупрессии костного мозга, вызванной воздействием излучения, химических веществ или химиотерапией, и синдрома приобретенного иммунодефицита.

[0068] В одном варианте реализации указанное состояние представляет собой нейтропению, вызванную химиотерапией. В одном варианте реализации указанный способ может снижать продолжительность нейтропении, вызванной химиотерапией, у нуждающегося в этом пациента.

[0069] В одном варианте реализации указанный способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в тот же день, когда пациенту вводят химиотерапевтический агент.

[0070] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов. Конкретно, в некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов, приблизительно 12 часов или приблизительно 8 часов. Конкретнее, введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до приблизительно 1 часа, приблизительно 2 часов, приблизительно 3 часов, приблизительно 4 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 11 часов, приблизительно 12 часов, приблизительно 13 часов, приблизительно 14 часов, приблизительно 15 часов, приблизительно 16 часов, приблизительно 17 часов, приблизительно 18 часов, приблизительно 19 часов, приблизительно 20 часов, приблизительно 21 часа, приблизительно 22 часов, приблизительно 23 часов или приблизительно 24 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 12 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 8 часов.

[0071] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима предотвращает достижение абсолютного количества нейтрофилов у пациента, составляющего менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л.

[0072] В некоторых вариантах реализации нейтропения, вызванная химиотерапией, представляет собой тяжелую нейтропению с абсолютным количеством нейтрофилов менее 0,5 × 10⁹/л, и при введении эффективного количества эфлапеграстима абсолютное количество нейтрофилов у пациента увеличивается с первого случая уровня нейтропении с уровнем менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до уровня, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, в течение менее чем приблизительно четырех дней, приблизительно семи дней или приблизительно десяти дней. В частности, время восстановления абсолютного количества нейтрофилов у пациента от первого случая нейтропении с уровнем менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, составляет менее чем приблизительно десять дней, приблизительно семь дней или приблизительно четыре дня. В определенных вариантах реализации нейтропения, вызванная химиотерапией, представляет собой тяжелую нейтропению с абсолютным количеством нейтрофилов менее 0,5 × 10⁹/л, и время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л у пациента составляет менее приблизительно одного дня, приблизительно двух дней, приблизительно трех дней, приблизительно четырех дней, приблизительно пяти дней, приблизительно шести дней, приблизительно семи дней, приблизительно восьми дней, приблизительно девяти дней или приблизительно десяти дней

В некоторых вариантах реализации указанный способ предназначен для увеличения абсолютного количества нейтрофилов у пациента, нуждающегося в этом, и время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, у пациента составляет менее приблизительно десяти дней. Конкретно, время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, составляет менее приблизительно десяти дней, приблизительно семи дней или приблизительно четырех дней. В определенных вариантах реализации время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, у пациента составляет менее приблизительно одного дня, приблизительно двух дней, приблизительно трех дней, приблизительно четырех дней, приблизительно пяти дней, приблизительно шести дней, приблизительно семи дней, приблизительно восьми дней, приблизительно девяти дней или приблизительно десяти дней.

[0073] В одном варианте реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят одновременно с химиотерапевтическим агентом.

[0074] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, 1 часа, 2 часов, 3 часов, 4 часов, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов, 12 часов, 13 часов, 14 часов, 15 часов, 16 часов, 17 часов, 18 часов, 19 часов, 20 часов, 21 часа, 22 часов, 23 часов или 24 часов после введения химиотерапевтического агента.

[0075] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, приблизительно 1 часа, приблизительно 2 часов, приблизительно 3 часов, приблизительно 4 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 11 часов или приблизительно 12 часов после введения химиотерапевтического агента.

[0076] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, приблизительно 3 часов или приблизительно 5 часов после введения химиотерапевтического агента.

[0077] В одном варианте реализации химиотерапевтический агент представляет собой миелосупрессивный химиотерапевтический агент.

[0078] В определенных вариантах реализации миелосупрессивный химиотерапевтический агент выбран из группы, состоящей из доцетаксела, циклофосфамида, доксорубицина, этопозида, цисплатина, паклитаксела, топотекана, винкристина, метилпреднизолона, цитарабина и их комбинаций.

[0079] В определенных вариантах реализации пациент получает химиотерапевтический агент для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака молочной железы, немелко клеточного рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, рака яичников, саркомы, уротелиального рака, герминогенных опухолей и неходжкинской лимфомы.

[0080] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение пациенту в дозировке от приблизительно 2 до 18 мг эфлапеграстима. В одном варианте реализации дозировка может составлять приблизительно 13,2 мг эфлапеграстима в сутки.

[0081] В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение в дозе от приблизительно 2,0 до приблизительно 5,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 11,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 13,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 9,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 7,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 9,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 11,0 мг до приблизительно 13,0 мг или от приблизительно 15,0 до приблизительно 18,0 мг эфлапеграстима.

[0082] В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение приблизительно 12,0 мг, приблизительно 12,2 мг, приблизительно 12,4 мг, приблизительно 12,6 мг, приблизительно 12,8 мг, приблизительно 13,0 мг, приблизительно 13,2 мг, приблизительно 13,4 мг, приблизительно 13,6 мг, приблизительно 13,8 мг или приблизительно 14,0 мг эфлапеграстима. В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение приблизительно 13,2 мг эфлапеграстима.

[0083] Конкретно, дозировку эфлапеграстима можно вводить в виде разовой дозы или разделить на 1-5 доз в течение 24 часов после введения химиотерапевтического агента, необязательно в тот же день, когда пациенту вводят химиотерапевтический агент.

[0084] Лечение нейтропении, вызванной лучевой терапией

[0085] В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ увеличения абсолютного количества нейтрофилов, количества гранулоцитов у субъекта, подходящего для трансплантации костного мозга, получения стволовых клеток, гемопоэза, количества гемопоэтических клеток-предшественников или продукции стволовых клеток у донора, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента с использованием лучевой терапии.

[0086] В еще одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения или профилактики состояния, характеризующегося нарушением продукции лейкоцитов, у нуждающегося в этом пациента, включающие введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после лечения пациента посредством лучевой терапии.

[0087] В некоторых вариантах реализации состояние, характеризующееся нарушением продукции лейкоцитов, выбрано из группы, состоящей из: нейтропении, вызванной лучевой терапией, сниженной гемопоэтической функции, сниженной иммунной функции, сниженного количества нейтрофилов, сниженной мобилизации нейтрофилов, мобилизации клеток-предшественников периферической крови, сепсиса, трансплантации костного мозга, инфекционных заболеваний, лейкопении, тромбоцитопении, анемии, усиления приживления костного мозга во время трансплантации, усиления восстановления костного мозга при лечении аплазии или миелосупрессии костного мозга, вызванной воздействием излучения или лучевой терапией, и синдрома приобретенного иммунодефицита.

[0088] В одном варианте реализации указанное состояние представляет собой нейтропению, вызванную лучевой терапией. В одном варианте реализации указанный способ может снижать продолжительность нейтропении, вызванной лучевой терапией, у нуждающегося в этом пациента.

[0089] В одном варианте реализации указанный способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в тот же день, когда пациента подвергают лучевой терапии.

[0090] В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов. Конкретно, в некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов, приблизительно 12 часов или приблизительно 8 часов. Конкретнее, введение эффективного количества эфлапеграстима может снизить продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до приблизительно 1 часа, приблизительно 2 часов, приблизительно 3 часов, приблизительно 4 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 11 часов, приблизительно 12 часов, приблизительно 13 часов, приблизительно 14 часов, приблизительно 15 часов, приблизительно 16 часов, приблизительно 17 часов, приблизительно 18 часов, приблизительно 19 часов, приблизительно 20 часов, приблизительно 21 часа, приблизительно 22 часов, приблизительно 23 часов или приблизительно 24 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 24 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 12 часов. В одном варианте реализации введение эффективного количества эфлапеграстима снижает продолжительность поддержания абсолютного количества нейтрофилов на уровне менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 8 часов.

[0091] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима предотвращает достижение абсолютного количества нейтрофилов у пациента, составляющего менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л.

В некоторых вариантах реализации нейтропения, вызванная лучевой терапией, представляет собой тяжелую нейтропению с абсолютным количеством нейтрофилов менее 0,5 х 10⁹/л, и при введении эффективного количества эфлапеграстима абсолютное количество нейтрофилов у пациента увеличивается с первого случая уровня нейтропении с уровнем менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до уровня, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, в течение менее чем приблизительно четырех дней, приблизительно семи дней или приблизительно десяти дней. В частности, время восстановления абсолютного количества нейтрофилов у пациента от первого случая нейтропении с уровнем менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, составляет менее чем приблизительно десять дней, приблизительно семь дней или приблизительно четыре дня. В определенных вариантах реализации нейтропения, вызванная лучевой терапией, представляет собой тяжелую нейтропению с абсолютным количеством нейтрофилов менее 0,5 × 10⁹/л, и время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л у пациента составляет менее приблизительно одного дня, приблизительно двух дней, приблизительно трех дней, приблизительно четырех дней, приблизительно пяти дней, приблизительно шести дней, приблизительно семи дней, приблизительно восьми дней, приблизительно девяти дней или приблизительно десяти дней

В некоторых вариантах реализации указанный способ предназначен для увеличения абсолютного количества нейтрофилов у пациента, нуждающегося в этом, и время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, у пациента составляет менее приблизительно десяти дней. Конкретно, время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, составляет менее приблизительно десяти дней, приблизительно семи дней или приблизительно четырех дней.

[0092] В определенных вариантах реализации время восстановления от абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до абсолютного количества нейтрофилов, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, у пациента составляет менее приблизительно одного дня, приблизительно двух дней, приблизительно трех дней, приблизительно четырех дней, приблизительно пяти дней, приблизительно шести дней, приблизительно семи дней, приблизительно восьми дней, приблизительно девяти дней или приблизительно десяти дней.

[0093] В одном варианте реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят одновременно с сеансом лучевой терапии.

[0094] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, 1 часа, 2 часов, 3 часов, 4 часов, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов, 12 часов, 13 часов, 14 часов, 15 часов, 16 часов, 17 часов, 18 часов, 19 часов, 20 часов, 21 часа, 22 часов, 23 часов или 24 часов после сеанса лучевой терапии.

[0095] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, приблизительно 1 часа, приблизительно 2 часов, приблизительно 3 часов, приблизительно 4 часов, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 11 часов или приблизительно 12 часов после сеанса лучевой терапии.

[0096] В определенных вариантах реализации эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение приблизительно 0,5 часа, приблизительно 3 часов или приблизительно 5 часов после сеанса лучевой терапии.

[0097] В определенных вариантах реализации пациента подвергают лучевой терапии для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака молочной железы, немелко клеточного рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, рака яичников, саркомы, уротелиального рака, герминогенных опухолей и неходжкинской лимфомы.

[0098] В некоторых вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение пациенту в дозировке от приблизительно 2 до 18 мг эфлапеграстима. В одном варианте реализации дозировка может составлять приблизительно 13,2 мг эфлапеграстима в сутки.

[0099]

[00100] В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение в дозировке от приблизительно 2,0 до приблизительно 5,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 11,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 13,0 мг до приблизительно 15,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 9,0 мг, от приблизительно 5,0 мг до приблизительно 7,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 7,0 мг до приблизительно 9,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 13,0 мг, от приблизительно 9,0 мг до приблизительно 11,0 мг, от приблизительно 11,0 мг до приблизительно 13,0 мг или от приблизительно 15,0 до приблизительно 18,0 мг эфлапеграстима.

[00101] В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение приблизительно 12,0 мг, приблизительно 12,2 мг, приблизительно 12,4 мг, приблизительно 12,6 мг, приблизительно 12,8 мг, приблизительно 13,0 мг, приблизительно 13,2 мг, приблизительно 13,4 мг, приблизительно 13,6 мг, приблизительно 13,8 мг или приблизительно 14,0 мг эфлапеграстима. В определенных вариантах реализации введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение приблизительно 13,2 мг эфлапеграстима.

[00102] Конкретно, дозировку эфлапеграстима можно вводить в виде разовой дозы или разделить на 1-5 доз в течение 24 часов после сеанса лучевой терапии, необязательно в тот же день, когда пациента подвергают лучевой терапии.

ПРИМЕРЫ

[00103] Для большей понятности описания, изложенного в настоящем документе, приведены следующие примеры. Синтетические и биологические примеры, описанные в настоящей заявке, представлены для иллюстрации соединений, фармацевтических композиций и способов, предложенных в настоящей заявке, и их не следует интерпретировать как ограничивающие их сущность каким-либо образом.

Пример 1: Получение эфлапеграстима (^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc)

Этап 1: Получение Fc-фрагмента иммуноглобулина с использованием иммуноглобулина

[00104] Fc-фрагмент иммуноглобулина получали следующим образом.

[00105] 200 мг иммуноглобулина G (IgG) с молекулярной массой 150 кДа (Green Cross, Корея), растворенного в 10 мМ фосфатном буфере, обрабатывали 2 мг протеолитического фермента папаина (Sigma) при 37°С в течение 2 часов при аккуратном перемешивании.

[00106] После ферментативной реакции регенерированный таким образом Fc-фрагмент иммуноглобулина подвергали хроматографии для очистки с последовательным использованием колонки Superdex, колонки с белком А и катионообменной колонки. Более подробно, реакционный раствор загружали в колонку Superdex 200 (Pharmacia), уравновешенную 10 мМ натрий-фосфатным буфером (PBS, рН 7,3), и элюировали колонку тем же буфером при скорости потока 1 мл/мин. Непрореагировавшие молекулы иммуноглобулина (IgG) и F(ab')2, которые обладали относительно высокой молекулярной массой по сравнению с Fc-фрагментом иммуноглобулина, удаляли, используя их свойство элюироваться раньше, чем Fc-фрагмент Ig. Fab-фрагменты с молекулярной массой, аналогичной массе Fc-фрагмента Ig, удаляли с помощью колоночной хроматографии с белком А (ФИГУРА 1). Полученные фракции, содержащие Fc-фрагмент Ig, элюированный с колонки Superdex 200, загружали при скорости потока 5 мл/мин на колонку с белком А (Pharmacia), уравновешенную 20 мМ фосфатным буфером (рН 7,0), и промывали эту колонку тем же буфером для удаления белков, не связанных с колонкой. Затем колонку с белком А элюировали 100 мМ натрий-цитратным буфером (рН 3,0) для получения Fc-фрагмента иммуноглобулина высокой чистоты. Фракции Fc, собранные с колонки с белком А, окончательно очищали с использованием катионообменной колонки (polyCAT, PolyLC Company), причем эту колонку, загруженную фракциями Fc, элюировали линейным градиентом 0,15-0,4 М NaCl в 10 мМ ацетатном буфере (рН 4,5), таким образом получая фракции Fc высокой чистоты. Фракции Fc высокой чистоты анализировали с помощью электрофореза в 12% ДСН-ПААГ (дорожка 2 на ФИГУРЕ 2).

Этап 2: Получение комплекса ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ

[00107] Полиэтиленгликоль с молекулярной массой 3,4 кДа, содержащий альдегидную реакционноспособную группу на обоих концах, ALD-ПЭГ-ALD (Shearwater), смешивали с гранулоцитарным колониестимулирующим фактором человека (^17,65S-ГКСФ, MW: 18,6 кДа), растворяли в 100 мМ фосфатном буфере в количестве 5 мг/мл при молярном соотношении ^17,65S-ГКСФ:ПЭГ, равном 1:5. К этой смеси добавляли восстановитель цианборгидрид натрия (NaCNBH₃, Sigma) в конечной концентрации 20 мМ и оставляли реагировать при 4°С в течение 3 часов при аккуратном перемешивании для присоединения ПЭГ к N-концу ^17,65S-ГКСФ. Для получения комплекса ПЭГ и ^17,65S-ГКСФ в соотношении 1:1 реакционную смесь подвергали эксклюзионной хроматографии с использованием колонки Superdex^R (Pharmacia). Комплекс ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ элюировали с колонки с использованием 10 мМ калий-фосфатного буфера (рН6,0) в качестве элюирующего буфера, а ^17,65S-ГКСФ, не связанный с ПЭГ, непрореагировавший ПЭГ и димерные побочные продукты, в которых ПЭГ был связан с молекулами ^17,65S-ГКСФ, удаляли. Очищенный комплекс ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ концентрировали до 5 мг/мл. В ходе этого эксперимента обнаружили, что оптимальное молярное отношение ^17,65 S-ГКСФ к ПЭГ для реакции, обеспечивавшее максимальную реакционную способность при получении наименьшего количества побочных продуктов, например, димеров, составляло 1:5.

Этап 3: Получение конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc

[00108] Для связывания комплекса ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ, очищенного на предыдущем этапе 2, с N-концом Fc-фрагмента иммуноглобулина, Fc-фрагмент иммуноглобулина (приблизительно 53 кДа), полученный на этапе 1, растворяли в 10 мМ фосфатном буфере и смешивали с комплексом ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ при молярном соотношении ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ:Fc, равном 1:1, 1:2, 1:4 и 1:8. После доведения концентрации фосфатного буфера в реакционном растворе до 100 мМ к реакционному раствору добавляли восстановитель NaCNBH₃ в конечной концентрации 20 мМ и оставляли реагировать при 4°С в течение 20 часов при аккуратном перемешивании. В ходе этого эксперимента обнаружили, что оптимальное молярное отношение комплекса ^17,65 S-ГКСФ-ПЭГ к Fc для реакции, обеспечивавшее максимальную реакционную способность при получении наименьшего количества побочных продуктов, например, димеров, составляло 1:2.

Этап 4: Выделение и очистка конъюгата ГКСФ-ПЭГ-Fc

[00109] После реакции во время вышеописанного этапа 3 реакционную смесь подвергали эксклюзионной хроматографии Superdex с целью удаления непрореагировавших веществ и побочных продуктов и очистки полученного белкового конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc. После концентрирования и загрузки реакционной смеси на колонку Superdex 10 мМ фосфатный буфер (рН 7,3) пропускали через колонку при скорости потока 2,5 мл/мин с целью удаления несвязанного Fc и непрореагировавших веществ с последующим элюированием колонки и сбором фракций белкового конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc. Поскольку собранные фракции белкового конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc содержали небольшое количество примесей, непрореагировавших димеров Fc и интерферона альфа, для удаления примесей выполняли катионообменную хроматографию. Фракции белкового конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc загружали на колонку PolyCAT LP (PolyLC), уравновешенную 10 мМ ацетатом натрия (рН 4,5), и элюировали колонку линейным градиентом 0-0,5 М NaCl в 10 мМ натрий-ацетатном буфере (рН 4,5) с использованием 1 М NaCl. Наконец, белковый конъюгат ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc очищали с использованием анионообменной колонки. Фракции белкового конъюгата ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc загружали на колонку PolyWAX LP (PolyLC), уравновешенную 10 мМ трис-HCl (рН 7,5), а затем колонку элюировали линейным градиентом 0-0,3 М NaCl в 10 мМ трис-HCl (рН 7,5) с использованием 1 М NaCl, таким образом выделяя белковый конъюгат ^17,65S-ГКСФ-ПЭГ-Fc в очень чистой форме.

Пример 2: Исследование эффективности эфлапеграстима при различных схемах введения у крыс с нейтропенией, вызванной доцетакселом/циклофосфамидом

[00110] Эффективность эфлапеграстима (НМ10460А), аналога ГКСФ длительного действия, сравнивали с пегфилграстимом при различных схемах введения на модели нейтропении, вызванной химиотерапией, у крыс.

[00111] В следующем исследовании эфлапеграстим получали по существу так, как описано в примере 1.

(i) Материалы для исследования

Получение растворов НМ10460А для подкожного введения

[00112] Получение 61,8 мкг/кг раствора НМ10460А для подкожного введения: 92,7 мкл рабочего раствора НМ10460А (6,0 мг/мл) разбавляли 17907,3 мкл DPBS.

[00113] Получение 372,0 мкг/кг раствора НМ10460А для подкожного введения: 558,0 мкл рабочего раствора НМ10460А (6,0 мг/мл) разбавляли 17442,0 мкл DPBS.

[00114] Получение 496,0 мкг/кг раствора НМ10460А для подкожного введения: 744,0 мкл рабочего раствора НМ10460А (6,0 мг/мл) разбавляли 17256,0 мкл DPBS.

[00115] Тестируемый образец получали, исходя из дозировки белка ГКСФ на этикетке лекарственного средства (НМ10460А).

[00116] Затем раствор НМ10460А для подкожного введения разбавляли DPBS до конечной концентрации дозы 2 мл/кг.

Получение растворов пегфилграстима для подкожного введения

[00117] Получение 103,3 мкг/кг раствора пегфилграстима для подкожного введения: 93,0 мкл исходного раствора пегфилграстима (10 мг/мл) разбавляли 17907,0 мкл DPBS.

[00118] Получение 620,0 мкг/кг раствора пегфилграстима для подкожного введения: 558,0 мкл исходного раствора пегфилграстима (10 мг/мл) разбавляли 17442,0 мкл DPBS.

[00119] Затем раствор пегфилграстима для подкожного введения разбавляли DPBS до конечной концентрации дозы 2 мл/кг.

Получение растворов агентов, индуцирующих нейтропению

[00120] Для индукции нейтропении крысам вводили доцетаксел/циклофосфамид с использованием 1/3 эквивалентной дозы для человека (доцетаксел 4 мг/кг и CPA 32 мг/кг) («ТС»).

[00121] Получение 32 мг/кг раствора циклофосфамида для подкожного введения: 2560,0 г порошка циклофосфамида (CPA, Sigma, США) разбавляли 80000,0 мкл дистиллированной воды (DW, Дайхан, Корея).

[00122] Получение 4 мг/кг раствора доцетаксела для подкожного введения: 29070,0 мкл Docel inj. (Hanmi Pharmaceutical, Корея) (42,68 мг/мл) разбавляли 30930,0 мкл коммерческого буфера для составов (FB, этанол 127,4 мг/мл в DW).

[00123] Затем растворы доцетаксела и циклофосфамида для подкожного введения разбавляли FB до конечной концентрации 1 мл/кг.НМ10460А и пегфилграстим разбавляли DPBS до конечной концентрации 2 мл/кг.

(ii) Способы

Система для испытаний

Уход за животными и их идентификация

Содержание животных

Введение дозы

Организация групп и уровень дозы

(iii) Наблюдения и измерения

Масса тела

[00124] Массу тела измеряли дважды в -1 день и 0 день один раз перед введением ТС и тестируемого вещества для расчета правильного вводимого объема.

Профиль ANC

[00125] Всю кровь животных собирали из яремной вены в -1 день перед химиотерапией и анализировали на предмет количества нейтрофилов (NEUT #). Это количество нейтрофилов использовали в качестве NEUT в день 0 перед введением дозы, а группировку выполняли на основании NEUT в 0 день. Кроме того, кровь собирали через 6 часов в 0 день и раз в день в течение 8 дней после введения исследуемого соединения с помощью 1 мл шприца 26 калибра. В общей сложности 0,2 мл крови отбирали и помещали в автоматический анализатор крови Sysmex, XN1000-V (Sysmex corp., Япония) для проверки ANC. Хотя ANC обычно рассчитывают по общему WBC × (%сегментоядерных + %палочкоядерных нейтрофилов), ANC можно рассчитать с помощью системы Sysmex, поскольку количество нейтрофилов, измеренное с помощью системы Sysmex, уже включает палочкоядерные нейтрофилы.

Продолжительность профиля нейтропении

[00126] Основной конечный показатель для этого исследования определяли по продолжительности нейтропении («DN»), которую определяли на основании пороговых значений уровня нейтрофилов, рассчитанных в изотонической среде-носителе (среднее значение общего уровня нейтрофилов).

(iv) Результаты

Профиль ANC

[00127] Временная динамика количества нейтрофилов показана на ФИГУРЕ 3. Количество нейтрофилов при введении 1/6 клинической дозы (103,3 мкг/кг пегфилграстима и 61,8 мкг/кг НМ10460А) достигло пикового значения на 8 день и через 5-6 дней после начала введения пегфилграстима и НМ10460А без каких-либо различий между схемами введения, соответственно. Кроме того, количество нейтрофилов при введении клинической дозы (620 мкг/кг пегфилграстима и 372 мкг/кг НМ10460А) достигло пикового значения на 5-8 день и через 6 дней после начала введения для пегфилграстима и НМ10460А, соответственно. Кроме того, пик количества нейтрофилов имел место между 6 и 7 днями для высокой дозы НМ10460А (496 мкг/кг) при всех временных схемах без изменений схемы введения. Профиль DN

[00128] При введении 1/6 клинической дозы (61,8 мкг/кг НМ10460А и 103,3 мкг/кг пегфилграстима) значение DN НМ10460А и пегфилграстима, вводимого через 24 часа после химиотерапии, определяли как 0,2 и 1,8 суток, соответственно (ТАБЛИЦА 9). Поскольку интервал между химиотерапией и введением тестируемого вещества становился короче (5 часов, 2 часа и совместное введение), DN пегфилграстима увеличивалось до 2,4 суток. Для сравнения, для НМ10460А наблюдалось лишь небольшое увеличение до 0,6 суток.

[00129] При введении клинической дозы (372 мкг/кг НМ10460А и 620 мкг/кг пегфилграстима) DN для НМ10460А и пегфилграстима, вводимых через 24 часа после химиотерапии, составляло 0 и 0,2 суток, соответственно (ТАБЛИЦА 10). Поскольку интервал между химиотерапией и введением тестируемого вещества становился короче (5 часов, 2 часа и совместное введение), DN пегфилграстима увеличивалось до 1,4 суток. DN в результате введения НМ10460А, с другой стороны, увеличилось лишь незначительно до 0,6 суток, как наблюдали при введении 1/6 клинической дозы.

[00130] Высокая доза НМ10460А (496 мкг/кг) демонстрировала сходный профиль (0,2 суток) независимо от времени введения, за исключением схемы Д0+2 ч (ТАБЛИЦА 11).

Пример 3: Введение эфлапеграстима людям с нейтропенией, вызванной доцетакселом/циклофосфамидом, через 0,5 часа

[00131] Фиксированную дозу эфлапеграстима 13,2 мг/0,6 мл (3,6 мг ГКСФ) вводили подкожно через 0,5 часа (±5 минут) после окончания в/в введения доцетаксела в дозе 75 мг/м², в/в вливания циклофосфамида в дозе 600 мг/м² в соответствии со стандартом медицинского обслуживания («SOC») учреждения для пациентов с раком молочной железы на ранней стадии.

Пример 4: Введение эфлапеграстима людям с нейтропенией, вызванной доцетакселом/циклофосфамидом, через 3 часа

[00132] Фиксированную дозу эфлапеграстима 13,2 мг/0,6 мл (3,6 мг ГКСФ) вводили подкожно через 3 часа (±15 минут) после окончания в/в введения доцетаксела в дозе 75 мг/м², в/в вливания циклофосфамида в дозе 600 мг/м² (в соответствии с SOC учреждения) для пациентов с раком молочной железы на ранней стадии.

Пример 5: Введение эфлапеграстима людям с нейтропенией, вызванной доцетакселом/циклофосфамидом, через 5 часа

[00133] Фиксированную дозу эфлапеграстима 13,2 мг/0,6 мл (3,6 мг ГКСФ) вводили подкожно через 5 часов (±15 минут) после окончания в/в введения доцетаксела в дозе 75 мг/м², в/в вливания циклофосфамида в дозе 600 мг/м² (в соответствии с SOC учреждения) для пациентов с раком молочной железы на ранней стадии.

Пример 6: Исследование продолжительности тяжелой нейтропении после введения эфлапеграстима в тот же день при различных графиках введения доз у пациентов с раком молочной железы, получающих доцетаксел и циклофосфамид

[00134] Продолжительность нейтропении 4 степени (абсолютное количество нейтрофилов (ANC)<0,5×10⁹/л) оценивали после 1 цикла лечения.

[00135] Кроме того, оценивали:

• долю пациентов с нейтропенией 4 степени (ANC<0,5×10⁹/л) в 1 цикле лечения

• время восстановления после тяжелой нейтропении до ANC≥1,5×10⁹/л в 1 цикле лечения

• частота возникновения фебрильной нейтропении 3 степени в 1 цикле лечения (ANC<1,0×10⁹/л и 1) при одной температуре >38,3°С (101,0°F) или 2) при устойчивой температуре ≥38,0°С (100,4°F) в течение более 1 часа

• фармакокинетика (ФК) эфлапеграстима в 1 цикле лечения

• частота нейтропенических осложнений, включая противоинфекционное применение и госпитализацию по причине нейтропении у пациентов в течение 1 цикла лечения

• безопасность схемы лечения эфлапеграстимом

• Количество CD34⁺ клеток в периферической крови

[00136] При введении в тот же день эфлапеграстим в фиксированной дозе 13,2 мг/0,6 мл (3,6 мг ГКСФ) подкожно (п/к) вводили в соответствии с различными графиками введения дозы после введения доцетаксела и циклофосфамида (ТС) пациентам с раком молочной железы на ранней стадии.

Цикл лечения 1

[00137] В 1 день 1 цикла после введения ТС вводили фиксированную дозу эфлапеграстима в один из следующих моментов времени после окончания введения ТС: 0,5 часа (±5 минут), 3 часа (±15 минут) и 5 часов (±5 минут).

[00138] Перед введением ТС пациенты могли получать премедикацию для химиотерапевтической профилактики в соответствии со стандартами медицинской помощи (SOC) учреждения. Внутривенное (в/в) введение ТС в 1 день каждого цикла лечения выполняли следующим образом:

• доцетаксел 75 мг/м² в/в, время вливания в соответствии с SOC учреждения;

• циклофосфамид 600 мг/м² в/в, время вливания в соответствии с SOC учреждения;

• изменение дозы доцетаксела и циклофосфамида в течение 1 цикла не допускалось.

[00139] В исследование включили до 45 пациентов, которых рандомизировали по одному из трех графиков введения доз эфлапеграстима, перечисленных выше, с использованием соотношения 1:1:1 в исследовании.

[00140] Кровь для общего анализа крови (OAK) и фармакокинетического (ФК) анализа выполняли отбор перед введением дозы ТС в 1 день и после введения дозы эфлапеграстима через 1 час (±15 мин), 3 часа (±15 мин), 6 часов (±15 мин), 8 часов (±15 мин), 24 часа (±2 часа), 48 часов (±2 часа), 72 часа (±2 часа), 144 часа (7 день ±1 день) и 192 часа (9 день ±1 день), а также в 1 день (22 день) 2 цикла перед введением дозы ТС. ОАК выполняли в клинической лаборатории.

Дополнительные образцы для ОАК

[00141] Отбор образцов для ОАК выполняли ежедневно с 4 по 10 день только в 1 цикле лечения. Если в 10 день ANC ≤1,0×10⁹/мл, образцы для ОАК отбирали ежедневно до достижения уровня ANC ≥1,5×10⁹/мл. CD34⁺ клетки в периферической крови в 1 цикле

[00142] Отбор образцов для определения количества CD34⁺ клеток в периферической крови выполняли со 2 по 10 день.

Визит для оценки безопасности в 1 цикле

[00143] В 1 день 2 цикла лечения (22 день), все необходимые оценки выполняли перед введением ТС для 2 цикла лечения.

Промежуточная оценка безопасности

[00144] Оценку безопасности выполняли после завершения 1 цикла лечения первыми 3 пациентами при каждом графике приема эфлапеграстима в ходе исследования (в общей сложности 9 пациентов). Оценка безопасности включала нежелательные явления (НЯ), определение количества ANC и лейкоцитов, продолжительность тяжелой нейтропении (DSN) и нейтропенических осложнений (госпитализация по причине нейтропении, фебрильная нейтропения, использование противоинфекционных средств).

[00145] После завершения оценки безопасности первых 3 пациентов при каждом графике введения доз эфлапеграстима пациентов включали в другие графики введения доз эфлапеграстима как рандомизированных при отсутствии данных, значимых с точки зрения безопасности, в любом из трех графиков введения доз Эфлапеграстима. Если по результатам анализа безопасности устанавливали необходимость прекращения приема эфлапеграстима в соответствии с одним или более графиками введения доз, всех вновь включенных в исследование пациентов перерандомизировали в продолжающиеся графики введения доз эфлапеграстима.

Правила прекращения

[00146] Безопасность оценивали у первых 3 пациентов в каждом графике введения доз эфлапеграстима в течение 1 цикла лечения. Дальнейшее включение в график введения доз эфлапеграстима прекращали при соблюдении одного из следующих критериев:

1) 2 из 3 пациентов сообщили о фебрильной нейтропении в 1 цикле лечения и/или любом НЯ 4 степени, связанном с применением эфлапеграстима

2) 2 из 3 пациентов сообщили о нейтропении 4 степени, a DSN составляло >2 суток

[00147] Безопасность контролировали на постоянной основе. После промежуточного мониторинга безопасности набор в когорту прекращали, если в общей сложности у 3 или более пациентов (суммарно в когорте) развивалась фебрильная нейтропения (ФН).

2-4 циклы

[00148] Эфлапеграстим в дозе 13,2 мг/0,6 мл (3,6 мг ГКСФ) вводили в течение 24 часов после окончания введения ТС при всех графиках введения доз эфлапеграстима. Для начала каждого из следующих циклов химиотерапии у пациентов должно было быть ANC ≥1,5×10⁹/л и количество тромбоцитов ≥100×10⁹/л. Пациенты находились под наблюдением на предмет безопасности.

Каждый цикл составлял 21 день.

[00149] Отбор образцов крови для ОАК во 2-4 циклах лечения выполняли в 1 день каждого цикла лечения перед химиотерапией в соответствии с SOC для данного цикла. Отбор образцов для ОАК выполняли во время визита в конце исследования через 35 (±5) дней после приема последней дозы исследуемого препарата (ТС или эфлапеграстима).

Продолжительность исследования

[00150] Период скрининга: До 30 дней.

[00151] Период лечения: До 4 циклов лечения (21 день на цикл лечения).

[00152] Визит в рамках последующего наблюдения для оценки безопасности в 1 цикле лечения: в 1 день 2 цикла лечения (22 день) перед введением ТС

[00153] Визит окончания исследования: 35 (±5) дней после приема последней дозы исследуемого препарата (ТС или эфлапеграстима)

Критерии включения

[00154] Пациент должен быть готов и способен дать письменное информированное согласие и должен быть в состоянии соблюдать график введения доз эфлапеграстима, отбора крови и соответствовать всем другим требованиям исследования.

[00155] У пациента должен быть недавно поставленный диагноз гистологически подтвержденного рака молочной железы на ранней стадии (ESBC), определяемого как операбельный рак молочной железы от I до IIIA стадии.

[00156] Пациент должен быть кандидатом для получения адъювантной или неоадъювантной химиотерапии ТС.

[00157] Пациент (мужского или женского пола) должен быть не моложе 18 лет.

[00158] У пациента должна быть адекватная гематологическая функция, функция почек и печени, определяемая следующим образом:

• ANC≥1,5 × 10⁹/л

• Количество тромбоцитов ≥100×10⁹/л

• Гемоглобин ≥10 г/ дл

• Расчетный клиренс креатинина >50 мл/мин

• Общий билирубин ≤1,5 мг/дл

• Аспартатаминотрансфераза (АСТ)/глутаматоксалацетаттрансаминаза в сыворотке (SGOT) и аланинаминотрансфераза (АЛТ)/глутаматпируваттрансаминаза в сыворотке (SGPT) ≤2,5×ВГН и щелочная фосфатаза ≤2,0×ВГН

[00159] У пациента должен быть показатель общего состояния по шкале Восточной объединенной онкологической группы (ECOG) ≤2.

[00160] Эфлапеграстим поставляли в стерильном одноразовом заранее наполненном шприце с 13,2 мг/0,6 мл эфлапеграстима (3,6 мг ГКСФ) для п/к введения. Изменение дозы эфлапеграстима не допускалось.

Оценки

[00161] Оценивали продолжительность нейтропении 4 степени (ANC<0,5×10⁹/л) в 1 цикле лечения.

[00162] Оценивали долю пациентов с нейтропенией 4 степени (ANC<0,5×10⁹/л) в 1 цикле лечения

[00163] Оценивали время до восстановления после тяжелой нейтропении до ANC≥1,5×10⁹/л в 1 цикле лечения.

[00164] Оценивали частоту возникновения фебрильной нейтропении 3 степени в 1 цикле лечения (ANC<1,0×10⁹/л) при одной температуре ≥38,3°С (101,0°F) либо при устойчивой температуре ≥38,0°С (100,4°F) в течение более 1 часа.

[00165] Оценивали фармакокинетику (ФК) эфлапеграстима в 1 цикле лечения.

[00166] Оценивали частоту возникновения нейтропенических осложнений, включая применение противоинфекционных средств и госпитализацию пациентов по причине нейтропении в течение 1 цикла лечения.

[00167] Оценивали количество CD34⁺ клеток в периферической крови.

Оценки фармакокинетики

[00168] Каждый пациент начинал химиотерапию в 1 день с последующим введением фиксированной дозы эфлапеграстима в зависимости от графика введения доз эфлапеграстима. Отбор образцов крови для фармакокинетических измерений и OAK выполняли: 1 день 1 цикла

[00169] Перед введением дозы (перед введением ТС).

[00170] Через 1, 3, 6 и 8 часов (±15 мин) после введения эфлапеграстима.

[00171] Через 24, 48 и 72 (±2 часа) после введения дозы эфлапеграстима в 1 день.

[00172] Через 144 часа (7 день±1 день) и 192 часа (9 день±1 день) после введения дозы эфлапеграстима в 1 день.

Цикл 2 День 1

[00173] Перед введением ТС. Дополнительные образцы для OAK

[00174] Отбор образцов для OAK также выполняли ежедневно с 4 по 10 день только в 1 цикле. При ANC ≤1,0×10⁹/л на 10 день образцы для ОАК отбирали ежедневно до достижения уровня ANC≥1,5×10⁹/л.

Количество CD34⁺ клеток в периферической крови в 1 цикле

[00175] Количество CD34⁺ клеток в периферической крови определяли ежедневно со 2 по 10 день.

Оценки безопасности

[00176] Безопасность оценивали на протяжении всего исследования по зарегистрированным/выявленным НЯ, лабораторным исследованиям и физикальным обследованиям.

ВКЛЮЧЕНИЕ ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ

[00177] В настоящей заявке приведены ссылки на различные выданные патенты, опубликованные патентные заявки, статьи в журналах и другие публикации, все из которых включены в настоящую заявку посредством ссылок. При наличии противоречия между любой из включенных ссылок и настоящим описанием приоритет отдается описанию. Кроме того, любой конкретный вариант реализации настоящего изобретения, подпадающий под действие предшествующего уровня техники, явным образом исключен из любого одного или нескольких пунктов формулы изобретения. Поскольку считается, что такие варианты реализации известны специалисту в данной области техники, их исключают, даже если исключение непосредственно не изложено в настоящем документе. Любой конкретный вариант реализации настоящего изобретения может быть исключен из любого пункта формулы изобретения по любой причине, связанной или не связанной с наличием предшествующего уровня техники.

ЭКВИВАЛЕНТЫ

[00178] Изобретение реализовано в других конкретных формах без отступления от его сущности или важнейших характеристик. Таким образом, вышеприведенные варианты реализации следует рассматривать как во всех отношениях иллюстративные, а не ограничивающие изобретение, описанное в настоящей заявке. Таким образом, сущность настоящего изобретения указана в прилагаемой формуле изобретения, а не в вышеприведенном описании, и предполагается, что все изменения, которые подпадают под смысл и диапазон эквивалентности формулы изобретения, включены в нее.

ПЕРЕЧЕНЬ РАЗЛИЧНЫХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

SEQ ID NO: 1

TPLGP ASSLP QSFLL KCLEQ VRKIQ GDGAA LQEKL A TYKLC HPEEL VLLGH SLGIP WAPLS SCPSQ ALQLA GCLSQ LHSGL FLYQG 5 LLQAL EGISP ELGPT LDTLQ LDVAD FATTI WQQME ELGMA PALQP TQGAM PAFAS AFQRR AGGVL VASHL QSFLE VSYRV

LRHLA QP

SEQ ID NO: 2

TPLGP ASSLP QSFLL KSLEQ VRKIQ GDGAA LQEKL CATYK LCHPE ELVLL GHSLG IPWAP LSSCSQALQ LAGCL SQLHS GLFLY QGLLQ ALEGI SPELG PTLDT LQLDV ADFAT TIWQQ MEELG MAPAL QPTQG AMPAF ASAFQ RRAGG VLVAS HLQSF LEVSY

RVLRH LAQP

SEQ ID NO: 3

PSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

SEQ ID NO: 4

PSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

Claims (15)

1. Способ лечения или профилактики нейтропении, вызванной химиотерапией, или нейтропении, вызванной лучевой терапией, у пациента, нуждающегося в этом,

причем указанный способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в течение менее чем 24 часов после введения пациенту химиотерапевтического агента или лечения с использованием лучевой терапии.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный способ снижает продолжительность нейтропении, вызванной химиотерапией, или нейтропении, вызванной лучевой терапией, у пациента, нуждающегося в этом.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанный способ включает введение эффективного количества эфлапеграстима в тот же день, когда пациенту вводят химиотерапевтический агент или выполняют лечение с использованием лучевой терапии.

4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что введение эффективного количества эфлапеграстима уменьшает продолжительность поддержания уровня абсолютного количества нейтрофилов менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л у пациента до менее чем приблизительно 6 часов, менее чем приблизительно 12 часов или менее чем 24 часов.

5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что введение эффективного количества эфлапеграстима предотвращает достижение уровня абсолютного количества нейтрофилов у пациента менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л.

6. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что при введении эффективного количества эфлапеграстима абсолютное количество нейтрофилов у пациента увеличивается с первого случая нейтропении с уровнем менее чем приблизительно 0,5 × 10⁹/л до уровня, превышающего или равного приблизительно 1,5 × 10⁹/л, в течение менее чем приблизительно четырех дней, приблизительно семи дней или приблизительно десяти дней.

7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что эффективное количество эфлапеграстима вводят одновременно с химиотерапевтическим агентом или лучевой терапией.

8. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение 0,5 часа, 3 часов или 5 часов после введения химиотерапевтического агента или сеанса лучевой терапии.

9. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что эффективное количество эфлапеграстима вводят в течение 0,5 часа, 1 часа, 2 часов, 3 часов, 4 часов, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов или 12 часов после введения химиотерапевтического агента или сеанса лучевой терапии.

10. Способ по любому из пп. 3-9, отличающийся тем, что химиотерапевтический агент представляет собой миелосупрессивный химиотерапевтический агент.

11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что миелосупрессивный химиотерапевтический агент выбран из группы, состоящей из доцетаксела, циклофосфамида, доксорубицина, этопозида, цисплатина, паклитаксела, топотекана, винкристина, метилпреднизолона, цитарабина и их комбинаций.

12. Способ по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что пациент получает химиотерапевтический агент или подвергается лучевой терапии для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака молочной железы, немелкоклеточного рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, рака яичника, саркомы, уротелиального рака, герминогенных опухолей и неходжкинской лимфомы.

13. Способ по любому из пп. 1-12, отличающийся тем, что введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение от приблизительно 2 до 18 мг эфлапеграстима.

14. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что введение эффективного количества эфлапеграстима включает парентеральное введение приблизительно 13,2 мг эфлапеграстима.