RU2841609C2 - Cd19-направленные химерные антигенные рецепторы и пути их применения в иммунотерапии - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к полипептиду, который связывает CD19, содержащему CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), а также к клеткам, его экспрессирующим. Также раскрыты полинуклеотид, кодирующий указанный CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), а также способ получения популяции естественных киллерных (NK) клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR). Изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей множество естественных киллерных (NK) клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR). Изобретение эффективно для лечения субъекта, имеющего рак, при котором экспрессируется CD19. 11 н. и 19 з.п. ф-лы, 39 ил., 11 пр.

Description

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] В данной заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США № 62/814180, поданной 5 марта 2019 г., № 62/895910, поданной 4 сентября 2019 г., и № 62/932165, поданной 7 ноября 2019 г., полное содержание каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[0002] Некоторые варианты осуществления способов и композиций, предусмотренных в данном документе, относятся к CD19-направленным рецепторам. В некоторых вариантах осуществления рецепторы являются химерными. Некоторые варианты осуществления включают способы применения химерных рецепторов в иммунотерапии.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] По мере получения дополнительных знаний о различных видах рака и о характеристиках раковой клетки, которые можно применять, в частности, для отличения такой клетки от здоровой клетки, разрабатывают терапевтические средства, которые используют отличительные особенности раковой клетки. Виды иммунотерапии, при которых применяют сконструированные иммунные клетки, представляет собой один подход к лечению видов рака.

ВКЛЮЧЕНИЕ МАТЕРИАЛА ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ В ВИДЕ ТЕКСТОВОГО ФАЙЛА В ФОРМАТЕ ASCII

[0004] Данная заявка включает в себя посредством ссылки перечень последовательностей, содержащийся в следующем текстовом файле в формате ASCII, который подан одновременно с данной заявкой. Имя файла: NKT033WO_ST25.txt; созданный 8 февраля 2020 года, размером 434 КБ.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0005] Иммунотерапия представляет собой новое достижение технического прогресса в лечении заболеваний, при котором иммунные клетки конструируют с возможностью экспрессии определенных направленно воздействующих и/или эффекторных молекул, которые специфически идентифицируют пораженные или поврежденные клетки и реагируют на них. Это представляет собой многообещающее усовершенствование, связанное, по меньшей мере частично, с возможностью специфически направленно воздействовать на пораженные или поврежденные клетки, в отличие от более традиционных подходов, таких как химиотерапия, когда воздействию подвергаются все клетки, и требуемый результат состоит в том, чтобы выжило достаточное количество здоровых клеток для предоставления пациенту возможности остаться в живых. Одним подходом иммунотерапии является рекомбинантная экспрессия химерных рецепторов в иммунных клетках для достижения направленного распознавания и разрушения представляющих интерес аберрантных клеток.

[0006] В нескольких вариантах осуществления в данном документе предусмотрена иммунная клетка, а также популяции иммунных клеток, которые экспрессируют CD19-направленный химерный рецептор, причем химерный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В данном документе также предусмотрены полинуклеотиды (а также векторы для трансфекции ими клеток), кодирующие CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен.

[0007] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) из одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) и вариабельный домен легкой цепи (VL) из scFv, шарнир, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, субдомен CD3-дзета.

[0008] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) из одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) и вариабельный домен легкой цепи (VL) из scFv, где кодируемый домен VH содержит по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR) тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134 и SEQ ID NO: 135, где кодируемый домен VL содержит по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR) легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 128 и SEQ ID NO: 129, шарнирный домен, трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40 и субдомен CD3-дзета.

[0009] В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). Однако в некоторых вариантах осуществления для кодирования mbIL15 используют отдельный полинуклеотид. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен получен из трансмембранного домена CD8-альфа или содержит его. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен CD8-альфа кодируется последовательностью с SEQ ID NO: 3. В нескольких вариантах осуществления шарнир получен из шарнира CD8-альфа или содержит его. В нескольких вариантах осуществления шарнир CD8-альфа кодируется последовательностью с SEQ ID NO: 1. В нескольких вариантах осуществления субдомен OX40 кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 5. В нескольких вариантах осуществления субдомен CD3-дзета кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 7. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 11. В нескольких вариантах осуществления домен OX40 кодируется последовательностью с SEQ ID NO: 5, субдомен CD3-дзета кодируется последовательностью с SEQ ID NO: 7, и/или mbIL15 (независимо от того, кодируется ли он отдельно или бицистронно) кодируется последовательностью с SEQ ID NO: 11. В нескольких вариантах осуществления кодируемый субдомен OX40 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 6, кодируемый субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 8, и/или кодируемый mbIL15 (независимо от того, кодируется ли он отдельно или бицистронно) содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 12.

[0010] В нескольких вариантах осуществления домен VH содержит домен VH, выбранный из SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 123, и где домен VL содержит домен VL, выбранный из SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 и SEQ ID NO: 119. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует домен VL, содержащий по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR) легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 128 и SEQ ID NO: 129. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует домен VH, содержащий по меньшей мере одну определяющую комплементарность область (CDR) тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134 и SEQ ID NO: 135. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид разработан (например, сконструирован) таким образом, чтобы снизить потенциальную антигенность кодируемого белка и/или усилить одну или более характеристик кодируемого белка (например, характеристик распознавания и/или связывания мишени). Вследствие этого, в соответствии с несколькими вариантами осуществления связывающий CD19 фрагмент не содержит определенных последовательностей. Например, в соответствии с несколькими вариантами осуществления полинуклеотид не кодирует одну или более из SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54 или SEQ ID NO: 55. В нескольких вариантах осуществления кодируемый домен VH содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 120. В нескольких вариантах осуществления кодируемый домен VH содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 120. В нескольких вариантах осуществления кодируемый домен VL содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 118. В нескольких вариантах осуществления кодируемый домен VL содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 118. В нескольких вариантах осуществления домен VH получен из исходной аминокислотной последовательности и модифицирован из исходной последовательности. Например, мутации, усечения, удлинения, консервативные замены или другие модификации вводят для увеличения аффинности домена к его мишени, увеличения авидности к мишени и/или снижения потенциальной антигенности последовательности. В нескольких вариантах осуществления домен VH получают в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33. Аналогичным образом, в нескольких вариантах осуществления домен VL получают в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует CD19-направленный химерный антигенный рецептор, который содержит последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%) идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной под SEQ ID NO: 187. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует CD19-направленный химерный антигенный рецептор, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 187.

[0011] В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид не кодирует или иным образом не содержит домен DAP10. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид не кодирует или иным образом не содержит домен DAP12. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит дополнительные субдомены, которые преимущественно усиливают генерацию цитотоксических сигналов клетками, экспрессирующими эти конструкции. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует один или более из CD44 и CD27 в качестве сигнальных субдоменов. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид необязательно дополнительно кодирует метку для выявления или другой фрагмент (например, маркер), который позволяет выявлять экспрессию кодируемого полинуклеотидом белка(белков) клетками-хозяевами.

[0012] В данном документе также предусмотрены пути применения раскрытых полинуклеотидов в производстве лекарственного препарата для усиления цитотоксичности NK-клеток у млекопитающего, нуждающегося в этом, в производстве лекарственного препарата для лечения рака у млекопитающего, нуждающегося в этом, и/или в лечении рака у млекопитающего, нуждающегося в этом.

[0013] В данном документе также предусмотрены сконструированные иммунные клетки, которые экспрессируют CD19-направленные химерные антигенные рецепторы, кодируемые полинуклеотидами, раскрытыми в данном документе. В нескольких вариантах осуществления сконструированные иммунные клетки представляют собой естественные киллерные (NK) клетки. В некоторых вариантах осуществления сконструированные клетки представляют собой Т-клетки, хотя в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации NK-клеток и Т-клеток (и, необязательно, других типов иммунных клеток). В нескольких вариантах осуществления иммунные клетки являются аллогенными по отношению к субъекту, получающему клетки. В данном документе также предусмотрено применение иммунных клеток, которые экспрессируют CD19-направленные химерные антигенные рецепторы, кодируемые полинуклеотидами, раскрытыми в данном документе, для лечения рака у млекопитающего, нуждающегося в этом. В данном документе также предусмотрено применение иммунных клеток, которые экспрессируют CD19-направленные химерные антигенные рецепторы, кодируемые полинуклеотидами, раскрытыми в данном документе, для производства лекарственного препарата для лечения рака у млекопитающего, нуждающегося в этом.

[0014] В нескольких вариантах осуществления предусмотрены способы лечения рака с применением полинуклеотидов, раскрытых в данном документе. Например, в нескольких вариантах осуществления способы включают введение субъекту, имеющему рак, композиции, содержащей популяцию иммунных клеток, экспрессирующих CD19-направленные химерные антигенные рецепторы, которые раскрыты в данном документе. В нескольких вариантах осуществления CAR содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) из одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) и вариабельный домен легкой цепи (VL) из scFv, шарнир, такой как шарнир CD8-альфа, трансмембранный домен, такой как трансмембранный домен CD8-альфа; и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен OX40 и субдомен CD3-дзета, и где клетка также экспрессирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления субдомен OX40 кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 5, субдомен CD3-дзета кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 7, и/или mbIL15 кодируется последовательностью, характеризующейся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 11. В нескольких вариантах осуществления кодируемый домен VH содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 120, где кодируемый домен VL содержит аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 118. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует CD19-направленный химерный антигенный рецептор, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной под SEQ ID NO: 187. Как обсуждалось выше, в нескольких вариантах осуществления иммунные клетки, экспрессирующие такие конструкции CAR к CD19, представляют собой естественные киллерные (NK) клетки. В некоторых вариантах осуществления иммунные клетки представляют собой Т-клетки. В нескольких вариантах осуществления применяют комбинации NK- и Т-клеток (и необязательно других иммунных клеток). В нескольких вариантах осуществления клетки представляют собой аллогенные клетки, происходящие от донора, который не является субъектом. В нескольких вариантах осуществления клетки представляют собой аутологичные клетки, происходящие от субъекта. В некоторых вариантах осуществления также можно применять смеси аллогенных и аутологичных клеток. В нескольких вариантах осуществления вводимая популяция содержит приблизительно 2 x 10⁶ клеток на килограмм массы тела субъекта. В нескольких вариантах осуществления введение представляет собой внутривенное введение. В нескольких вариантах осуществления способ дополнительно включает введение субъекту одной или более доз интерлейкина 2. В нескольких вариантах осуществления способы также включают применение по отношению к субъекту другой терапии. Например, в нескольких вариантах осуществления способы включают применение по отношению к субъекту химиотерапевтического лечения до введения клеток. В нескольких вариантах осуществления химиотерапевтическое лечение вызывает у субъекта лимфодеплецию. В некоторых вариантах осуществления субъекту вводят комбинацию циклофосфамида и флударабина перед введением клеток. В нескольких вариантах осуществления циклофосфамид вводят в дозе от приблизительно 400 до приблизительно 600 мг/м². В нескольких вариантах осуществления флударабин вводят в дозе от приблизительно 25 до 25 мг/м². В нескольких вариантах осуществления химиотерапевтическую лимфодеплецию проводят за несколько дней до введения сконструированных иммунных клеток и, необязательно, проводят несколько раз. Например, в нескольких вариантах осуществления химиотерапевтическую лимфодеплецию проводят на по меньшей мере пятый, четвертый и/или третий день перед введением сконструированных иммунных клеток, раскрытых в данном документе.

[0015] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит гуманизированный связывающий CD19 фрагмент, костимулирующий домен и сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления костимулирующий домен предусматривает OX40. В нескольких вариантах осуществления гуманизированный связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированный scFv, где одна или более тяжелых и легких цепей гуманизированы. В нескольких вариантах осуществления одна или более CDR тяжелой и/или легкой цепей гуманизированы. Например, в нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), при этом домен VH предусматривает домен VH, выбранный из SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 123, а домен VL предусматривает домен VL, выбранный из SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 и SEQ ID NO: 119, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен.

[0016] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит одноцепочечное антитело или фрагмент одноцепочечного антитела, который содержит гуманизированный связывающий CD19 домен, трансмембранный домен, первичный внутриклеточный сигнальный домен, содержащий нативный внутриклеточный сигнальный домен CD3-дзета или его функциональный фрагмент, и костимулирующий домен, содержащий нативный внутриклеточный сигнальный домен белка, выбранный из группы, состоящей из OX40, CD27, CD28, ICOS и 4-1BB, или его функциональный фрагмент, где указанный связывающий CD19 домен содержит определяющую комплементарность область 1 легкой цепи (CDR1 LC) с SEQ ID NO: 124, 127 или 130, определяющую комплементарность область 2 легкой цепи (CDR2 LC) с SEQ ID NO: 125, 128 или 131, и определяющую комплементарность область 3 легкой цепи (CDR3 LC) с SEQ ID NO: 126, 129 или 132, и определяющую комплементарность область 1 тяжелой цепи (CDR1 HC) с SEQ ID NO: 133, 136, 139 или 142, определяющую комплементарность область 2 тяжелой цепи (CDR2 HC) с SEQ ID NO: 134, 137, 140 или 143 и определяющую комплементарность область 3 тяжелой цепи (CDR3 HC) с SEQ ID NO: 135, 138, 141 или 144.

[0017] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 117, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 197 или SEQ ID NO: 203.

[0018] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 118, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 199 или SEQ ID NO: 205.

[0019] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 119, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 201 или SEQ ID NO: 207.

[0020] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 120, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 187 или SEQ ID NO: 189.

[0021] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 121, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 195.

[0022] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 122, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 199 или SEQ ID NO: 201.

[0023] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 123, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 205 или SEQ ID NO: 207.

[0024] В нескольких вариантах осуществления предусмотренные полинуклеотиды также кодируют связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15).

[0025] В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен предусматривает субдомен OX40. Однако в нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит один или более из субдомена OX40, субдомена CD28, субдомена iCOS, субдомена CD28-41BB, субдомена CD27, субдомена CD44 или их комбинаций.

[0026] В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор содержит шарнир и трансмембранный домен, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа, где трансмембранный домен представляет собой либо трансмембранный домен CD8-альфа, либо трансмембранный домен NKG2D. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит домен CD3-дзета.

[0027] В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид не кодирует последовательность с SEQ ID NO: 112, 113 или 114. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид не кодирует последовательность с SEQ ID NO: 116.

[0028] В нескольких вариантах осуществления предусмотрены сконструированные NK-клетки, сконструированные T-клетки и/или смешанные популяции NK-клеток и T-клеток, которые экспрессируют один или более из гуманизированных CD19-направленных химерных антигенных рецепторов, предусмотренных в данном документе.

[0029] Также предусмотрены способы лечения рака у субъекта, включающие введение субъекту, имеющему рак, сконструированных NK- и/или Т-клеток, экспрессирующих химерные антигенные рецепторы, которые раскрыты в данном документе. Также предусмотрено применение полинуклеотидов, предусмотренных в данном документе, для лечения рака, а также применение полинуклеотидов, предусмотренных в данном документе, в производстве лекарственного препарата для лечения рака.

[0030] Также в данном документе в нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит scFv, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен CD28 и сигнальный домен CD3-дзета.

[0031] Также в данном документе в нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит scFv, шарнир, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит ITAM CD3-дзета.

[0032] Также в данном документе в нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, причем химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи из scFv или вариабельную область легкой цепи из scFv, шарнир, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа, трансмембранный домен, где трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8-альфа, и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит ITAM CD3-дзета.

[0033] В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8-альфа. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен NKG2D. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD28.

[0034] В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит или дополнительно содержит сигнальный домен CD28. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит или дополнительно содержит сигнальный домен 4-1BB. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит или дополнительно содержит домен OX40. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит или дополнительно содержит сигнальный домен 4-1BB. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит или дополнительно содержит домен, выбранный из ICOS, CD70, CD161, CD40L, CD44 и их комбинаций.

[0035] В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует усеченный рецептор эпидермального фактора роста (EGFRt). В нескольких вариантах осуществления EGFRt экспрессируется в клетке в виде растворимого фактора. В нескольких вариантах осуществления EGFRt экспрессируется в связанной с мембраной форме. В нескольких вариантах осуществления EGFRt действует с обеспечением функции «суицидного переключателя» в сконструированных NK-клетках. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В данном документе также предусмотрены сконструированные иммунные клетки (например, NK- или Т-клетки или их смеси), которые экспрессируют CD19-направленный химерный антигенный рецептор, кодируемый полинуклеотидом, раскрытым в данном документе. Дополнительно предусмотрены способы лечения рака у субъекта, включающие введение субъекту, имеющему рак, сконструированных иммунных клеток, экспрессирующих химерные антигенные рецепторы, раскрытые в данном документе. В нескольких вариантах осуществления предусмотрено применение полинуклеотидов, раскрытых в данном документе, в лечении рака и/или в производстве лекарственного препарата для лечения рака.

[0036] В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL). В нескольких вариантах осуществления домен VH характеризуется по меньшей мере 95% (например, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33. В нескольких вариантах осуществления домен VL характеризуется по меньшей мере 95% (например, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент получен из последовательностей VH и/или VL с SEQ ID NO: 33 или 32. Например, в нескольких вариантах осуществления последовательности VH и VL для SEQ ID NO: 33 и/или 32 подвергают процессу гуманизации и, следовательно, они экспрессируются легче и/или являются менее иммуногенными при введении субъектам-людям. Таким образом, в нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент не содержит SEQ ID NO: 32 и/или SEQ ID NO: 33. В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент содержит scFv, который целенаправленно воздействует на CD19, где scFv содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность с SEQ ID NO: 35 или последовательность, на по меньшей мере 95% (например, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентичную SEQ ID NO: 35. В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент содержит scFv, который целенаправленно воздействует на CD19, содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность с SEQ ID NO: 36 или последовательность, на по меньшей мере 95% (например, 95, 96, 97, 98 или 99%) идентичную SEQ ID NO: 36. В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент содержит CDR легкой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC), и/или CDR тяжелой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC). В зависимости от варианта осуществления применяют различные комбинации CDR LC и CDR HC. Например, в одном варианте осуществления связывающий CD19 фрагмент содержит CDR1 LC, CDR3 LC, CD2 HC и CDR3 HC. В некоторых вариантах осуществления применяют другие комбинации. В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 37 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 37. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 38 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% (например, 96, 97, 98 или 99%) гомологичную последовательности с SEQ NO: 38. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 39 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 39. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 40 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 40. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 41, 42 или 43 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 41, 42 или 43. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 44 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% (например, 96, 97, 98, 99 или 99%) гомологичную последовательности с SEQ NO: 44.

[0037] В нескольких вариантах осуществления также предусмотрен связывающий CD19 фрагмент, который содержит вариабельную область легкой цепи (VL) и вариабельную область тяжелой цепи (HL), причем VL-область содержит первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL), и VH-область содержит первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH). В нескольких вариантах осуществления VL-область содержит последовательность с SEQ ID NO: 45, 46, 47 или 48 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% (например, 96, 97, 98, 99 или 99%) гомологичную последовательности с SEQ NO: 45, 46, 47 или 48. В нескольких вариантах осуществления VH-область содержит последовательность с SEQ ID NO: 49, 50, 51 или 52 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% (например, 96, 97, 98, 99 или 99%) гомологичную последовательности с SEQ NO: 49, 50, 51 или 52.

[0038] В нескольких вариантах осуществления также предусмотрен связывающий CD19 фрагмент, который содержит CDR легкой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC). В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент дополнительно содержит CDR тяжелой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC). В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 53 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 53. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 54 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 54. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 55 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 55. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 56 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 56. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 57 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 57. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 58 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ NO: 58. В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент (и, таким образом, получаемый в результате CAR) сконструирован так, чтобы не включать определенные последовательности, такие как, например, те, которые могут обусловливать повышенный риск иммуногенности и/или побочных эффектов, таких как синдром высвобождения цитокинов Таким образом, в соответствии с несколькими вариантами осуществления связывающий CD19 фрагмент не содержит одну или более из SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 40, SEQ ID NO: 41, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 43, SEQ ID NO: 44, SEQ ID NO: 45, SEQ ID NO: 46, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48, SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51, SEQ ID NO: 52, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 55, SEQ ID NO: 32 или SEQ ID NO: 33.

[0039] В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен химерного рецептора содержит субдомен OX40. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен дополнительно содержит субдомен CD3-дзета. В нескольких вариантах осуществления субдомен OX40 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 16 (или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ ID NO: 16), и субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 8 (или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ ID NO: 8).

[0040] В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен содержит шарнирный домен CD8a. В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен CD8a содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 2 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ ID NO: 2).

[0041] В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка также экспрессирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления mbIL15 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 12 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ ID NO: 12.

[0042] В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор дополнительно содержит внеклеточный домен рецептора NKG2D. В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка экспрессирует второй химерный рецептор, содержащий внеклеточный домен рецептора NKG2D, трансмембранный домен, цитотоксический сигнальный комплекс и, необязательно, mbIL15. В нескольких вариантах осуществления внеклеточный домен рецептора NKG2D содержит функциональный фрагмент NKG2D, содержащий аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 26 или последовательность, на по меньшей мере приблизительно 95% гомологичную последовательности с SEQ ID NO: 26. В различных вариантах осуществления иммунная клетка, сконструированная для экспрессии химерного антигенного рецептора и/или химерных рецепторов, раскрытых в данном документе, представляет собой NK-клетку. В некоторых вариантах осуществления применяют Т-клетки. В нескольких вариантах осуществления применяют комбинации NK- и Т-клеток (и/или других иммунных клеток).

[0043] В нескольких вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы лечения рака у субъекта, включающие введение субъекту, имеющему рак, сконструированных иммунных клеток, целенаправленно воздействующих на CD19, которые раскрыты в данном документе. В данном документе также предусмотрено применение иммунных клеток, целенаправленно воздействующих на CD19, которые раскрыты в данном документе, для лечения рака. Аналогичным образом, в данном документе также предусмотрено применение иммунных клеток, целенаправленно воздействующих на CD19, которые раскрыты в данном документе, в производстве лекарственного средства для лечения рака. В нескольких вариантах осуществления рак, подвергаемый лечению, представляет собой острый лимфоцитарный лейкоз.

[0044] Некоторые варианты осуществления способов и композиций, описанных в данном документе, относятся к иммунной клетке. В некоторых вариантах осуществления иммунная клетка экспрессирует CD19-направленный химерный рецептор, содержащий внеклеточный фрагмент к CD19, шарнирный и/или трансмембранный домен и/или внутриклеточный сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой естественную киллерную (NK) клетку. В некоторых вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой Т-клетку.

[0045] В некоторых вариантах осуществления шарнирный домен содержит шарнирный домен CD8a. В некоторых вариантах осуществления шарнирный домен содержит SH-домен Ig4.

[0046] В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8a. В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD28. В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD3.

[0047] В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен OX40. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен 4-1BB. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен CD28. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен NKp80. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен CD16 IC. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3-дзета или ITAM CD3ζ. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен mbIL-15. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен содержит домен расщепления 2A. В некоторых вариантах осуществления сигнальный домен mIL-15 отделен от остальной или другой части CD19-направленного химерного рецептора доменом расщепления 2A.

[0048] Некоторые варианты осуществления относятся к способу, включающему введение иммунной клетки, описанной в данном документе, субъекту, нуждающемуся в этом. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет рак. В некоторых вариантах осуществления введение обуславливает лечение, ингибирование или предупреждение прогрессирования рака.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0049] На фигуре 1A представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0050] На фигуре 1B представлены изображения дополнительных неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0051] На фигуре 2 также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0052] На фигуре 3A также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0053] На фигуре 3B также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0054] На фигуре 3C также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов.

[0055] На фигуре 3D также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены.

[0056] На фигуре 3E также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены.

[0057] На фигуре 3F также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены.

[0058] На фигуре 3G также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены без маркерной последовательности.

[0059] На фигуре 3H также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены без маркерной последовательности.

[0060] На фигуре 3I также представлены изображения неограничивающих примеров CD19-направленных химерных рецепторов, содержащих гуманизированные связывающие CD19 домены без маркерной последовательности.

[0061] На фигуре 4 представлена схема неограничивающего протокола размножения NK-клеток.

[0062] На фигуре 5 показана схема экспериментального протокола оценки эффективности CD19-направленного химерного антигенного рецептора в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе.

[0063] На фигуре 6A представлены данные in vivo, относящиеся к противоопухолевому эффекту различных неограничивающих CD19-направленных химерных рецепторов.

[0064] На фигуре 6B представлены сводные данные, относящиеся к противоопухолевому эффекту различных неограничивающих CD19-направленных химерных рецепторов.

[0065] На фигуре 7 представлены данные, относящиеся к экспрессии различных конструкций CD19-направленного химерного рецептора NK-клетками.

[0066] На фигуре 8A представлены необработанные данные флуоресценции (средняя интенсивность флуоресценции, MFI), относящиеся к экспрессии выбранных CD19-направленных химерных рецепторов.

[0067] На фигуре 8B представлены данные, относящиеся к экспрессии выбранных CD19-направленных химерных рецепторов, отображаемые в виде процентного содержания NK-клеток, экспрессирующих указанный рецептор.

[0068] На фигурах 9A-9D представлены данные, относящиеся к цитотоксичности (в отношении клеток Nalm6 или Raji) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов.

[0069] На фигуре 9E представлены сводные данные, относящиеся к цитотоксичности (в отношении клеток Nalm6) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов при различных соотношениях эффектор:мишень.

[0070] На фигуре 9F представлены сводные данные, относящиеся к цитотоксичности (в отношении клеток Raji) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов при различных соотношениях эффектор:мишень.

[0071] На фигуре 10A представлены данные, относящиеся к степени повышения цитотоксичности (в отношении клеток Nalm6) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов через 7 дней после трансдукции.

[0072] На фигуре 10B представлены данные, относящиеся к степени повышения цитотоксичности (в отношении клеток Raji) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов через 7 дней после трансдукции.

[0073] На фигуре 10C представлены данные, относящиеся к степени повышения цитотоксичности (в отношении клеток Nalm6) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов через 14 дней после трансдукции.

[0074] На фигуре 10D представлены данные, относящиеся к степени повышения цитотоксичности (в отношении клеток Raji) для указанных CD19-направленных химерных рецепторов через 14 дней после трансдукции.

[0075] На фигурах 11A-11E представлены данные, относящиеся к высвобождению цитокинов NK-клетками, экспрессирующими различные CD19-направленные химерные рецепторы, при совместном культивировании с клетками Nalm6. На фигуре 11A представлено высвобождение гранзима B. На фигуре 11B представлено высвобождение перфорина. На фигуре 11C представлено высвобождение TNF-альфа. На фигуре 11D представлено высвобождение GM-CSF. На фигуре 11E представлено высвобождение гамма-интерферона.

[0076] На фигурах 12A-12E представлены данные, относящиеся к высвобождению цитокинов NK-клетками, экспрессирующими различные CD19-направленные химерные рецепторы, при совместном культивировании с клетками Raji. На фигуре 12A представлено высвобождение гранзима B. На фигуре 12B представлено высвобождение перфорина. На фигуре 12C представлено высвобождение TNF-альфа. На фигуре 12D представлено высвобождение GM-CSF. На фигуре 12E представлено высвобождение гамма-интерферона.

[0077] На фигуре 13 представлены данные визуализации in vivo, относящиеся к опухолевой нагрузке с течением времени у мышей, получавших PBS, нетрансдуцированные NK-клетки или NK-клетки, экспрессирующие указанные CD19-направленные химерные рецепторы, с указанным количеством введенных сконструированных NK-клеток (M = миллион клеток).

[0078] На фигуре 14A показаны необработанные данные, относящиеся к выявляемому флуоресцентному сигналу из данных in vivo, показанных на фигуре 13, с данными, отслеживаемыми в течение 25 дней после введения клеток Nalm6.

[0079] На фигуре 14B показаны представленные на фигуре 14A данные на логарифмической шкале.

[0080] На фигуре 14C показаны данные, относящиеся к экспрессии CD3 указанными клетками, экспрессирующими указанные конструкции.

[0081] На фигуре 14D показаны данные, относящиеся к экспрессии CD56 указанными клетками, экспрессирующими указанные конструкции.

[0082] На фигуре 14E показаны данные, относящиеся к опухолевым клеткам, экспрессирующим GFP, при контакте с указанными клетками, экспрессирующими указанные конструкции.

[0083] На фигуре 14F показаны данные, относящиеся к опухолевым клеткам, экспрессирующим CD19, при контакте с указанными клетками, экспрессирующими указанные конструкции.

[0084] На фигуре 15 представлены данные, относящиеся к выбранным функциональным характеристикам конструкций выбранных гуманизированных CAR к CD19.

[0085] На фигуре 16 представлены данные, относящиеся к экспрессии различных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в вариантах осуществления в данном документе.

[0086] На фигурах 17A-17E показаны данные цитотоксичности. На фигуре 17A показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от первого донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6. На фигуре 17A показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от первого донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji. На фигуре 17C показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от второго донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6. На фигуре 17D показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от третьего донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji. На фигуре 17E показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от третьего донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6.

[0087] На фигуре 18 показаны сводные (от 3 доноров) данные экспрессии для NK-клеток, экспрессирующих указанные неограничивающие конструкции CAR к CD19, через 3 дня после трансдукции.

[0088] На фигурах 19A-19D показаны данные цитотоксичности при повторной антигенной стимуляции. На фигуре 19A показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от первого донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 19B показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от первого донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6 при добавлении клеток Nalm6 к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 19C показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от второго донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 19D показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток от второго донора, сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6 при добавлении клеток Nalm6 к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14.

[0089] На фигурах 20A-20B показаны данные экспрессии. На фигуре 20A показаны данные флуоресценции в результате экспрессии неограничивающих примеров конструкций гуманизированных CAR к CD19 от двух доноров через 10 дней после трансдукции. На фигуре 20B показаны данные, относящиеся к процентной доле клеток, экспрессирующих CD19 (что указывает на эффективность экспрессии данного CAR к CD19.

[0090] На фигурах 21A-21B показаны данные цитотоксичности. На фигуре 21A показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от первого из двух доноров, указанных на фигуре 20), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 21B показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от второго из двух доноров, указанных на фигуре 20), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14.

[0091] На фигурах 22A-22E показаны данные, относящиеся к высвобождению цитокинов NK-клетками, экспрессирующими различные CD19-направленные химерные рецепторы, при совместном культивировании с клетками Raji. На фигуре 22A показано высвобождение гамма-интерферона. На фигуре 22B показано высвобождение GM-CSF. На фигуре 22C показано высвобождение фактора некроза опухоли. На фигуре 22D показано высвобождение перфорина. На фигуре 22E показано высвобождение гранзима.

[0092] На фигурах 23A-23D показаны данные, относящиеся к показателю выживания NK-клеток. На фигуре 23A показан анализ выживания NK-клеток от первого донора, сконструированных с возможностью экспрессии указанных неограничивающих вариантов осуществления конструкций CAR к CD19, в дни 7, 13, 19 и 26 после трансдукции. На фигуре 23B показан анализ выживания NK-клеток от второго донора, сконструированных с возможностью экспрессии указанных неограничивающих вариантов осуществления конструкций CAR к CD19, в дни 7, 13, 19 и 26 после трансдукции. На фигуре 23C показан анализ выживания NK-клеток от третьего донора, сконструированных с возможностью экспрессии указанных неограничивающих вариантов осуществления конструкций CAR к CD19, в дни 11, 19 и 26 после трансдукции. На фигуре 23D показан анализ выживания NK-клеток от четвертого донора, сконструированных с возможностью экспрессии указанных неограничивающих вариантов осуществления конструкций CAR к CD19, в дни 11, 19 и 26 после трансдукции. Для каждого эксперимента среду меняли дважды в неделю.

[0093] На фигуре 24 показаны данные, относящиеся к процентному содержанию NK-клеток, экспрессирующих указанные неограничивающие варианты осуществления конструкций CAR к CD19, через 11 дней после трансдукции.

[0094] На фигурах 25A-25I показаны данные, относящиеся к экспрессии CD19 NK-клетками, трансдуцированными различными неограничивающими вариантами осуществления конструкций CAR к CD19, раскрытых в данном документе. На фигуре 25A показаны NK-клетки, трансдуцированные GFP, в качестве контроля. На фигуре 25B показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19-1. На фигуре 25C показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-1. На фигуре 25D показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-2. На фигуре 25E показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-3. На фигуре 25F показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-4. На фигуре 25G показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-5. На фигуре 25H показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-11. На фигуре 25I показана экспрессия CD19 в NK-клетках, трансдуцированных NK19H-12.

[0095] На фигурах 26A-26D показаны данные цитотоксичности. На фигуре 26A показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от первого донора), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 26B показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от первого донора), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6 при добавлении клеток Nalm6 к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 26C показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от второго донора), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Raji при добавлении клеток Raji к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14. На фигуре 26D показаны данные, относящиеся к цитотоксичности NK-клеток (от второго донора), сконструированных с возможностью экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19, раскрытых в данном документе, в отношении клеток Nalm6 при добавлении клеток Nalm6 к культуре NK-клеток в день 7 и снова в день 14.

[0096] На фигурах 27A-27B показаны данные, относящиеся к экспрессии CD19 сконструированными NK-клетками. На фигуре 27A показаны данные проточной цитометрии для NK-клеток от донора, которые сконструировали с возможностью экспрессии различных неограничивающих конструкций CAR к CD19, раскрытых в данном документе. На фигуре 27B показаны соответствующие данные для NK-клеток, выделенных от дополнительного донора.

[0097] На фигурах 28A-28B показаны данные цитотоксичности. На фигуре 28A показано количество клеток Raji с течением времени при воздействии (при соотношении E:T, составляющем 1:1) NK-клеток (от первого донора, указанного на фигуре 27), экспрессирующих неограничивающие примеры указанных конструкций CAR к CD19. На фигуре 28B показано количество клеток Raji с течением времени при воздействии (при соотношении E:T, составляющем 1:1) NK-клеток (от второго донора, указанного на фигуре 27), экспрессирующих неограничивающие примеры указанных конструкций CAR к CD19.

[0098] На фигурах 29A-29E показаны данные, относящиеся к различным конструкциям гуманизированного CD19-направленного CAR и их эффективности на модели in vivo. На фигуре 29A показано схематическое изображение экспериментального протокола для оценки эффективности конструкций CD19-направленных CAR in vivo. На фигуре 29B показано биолюминесцентное изображение in vivo мышей, которым вводили опухолевые клетки NALM6 и которых лечили с помощью указанной конструкции. На фигуре 29C показан линейный график биолюминесцентных данных, собранных на основании фигуры 29B. На фигуре 29D представлена кривая выживания, показывающая дни, в течение которых выживали животные в каждой группе лечения. На фигуре 29E показан относительный уровень экспрессии указанных конструкций NK-клетками, измеренный с помощью MFI метки, включенной в конструкцию CAR к CD19.

[0099] На фигурах 30A-30F представлены данные, относящиеся к экспрессии указанных конструкций CD19-направленных CAR. На фигуре 30A показаны данные, относящиеся к экспрессии указанных конструкций в виде процентной доли от всех CD56-положительных клеток в образце крови мышей через 15 дней после введения NK-клеток (например, согласно схеме, представленной на фигуре 29A). На фигуре 30B показаны данные, относящиеся к экспрессии указанных конструкций в виде процентной доли от клеток, которые являются как CD56-положительными, так и экспрессируют Flag-метку (как часть конструкции CAR к CD19), также через 15 дней после введения NK-клеток. На фигуре 30C показаны данные, относящиеся к выявлению GFP+ опухолевых клеток в образцах от животных, которых лечили с применением указанных конструкций, также на 15 день после введения NK-клеток. На фигурах 30D, 30E и 30F показаны соответствующие данные через 32 дня после введения NK-клеток.

[00100] На фигурах 31A-31B показаны данные, относящиеся к экспрессии немеченых конструкций CAR к CD19. Как обсуждается в данном документе, в нескольких вариантах осуществления конструкции CAR к CD19 содержат метку Flag или другую метку с целью выявления. Однако все конструкции, раскрытые в данном документе как содержащие метку, также включены в данный документ как не содержащие метку. На фигуре 31A показаны данные, относящиеся к экспрессии выбранных конструкций гуманизированных CAR к CD19 без метки flag с течением времени. На фигуре 31B показаны соответствующие данные в отношении выявленной средней интенсивности флуоресценции для указанных конструкций.

[00101] На фигурах 32A-32D показаны данные, относящиеся к эксперименту с повторной антигенной стимуляцией in vitro, в котором первую популяцию опухолевых клеток совместно культивировали с NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, и NK-клетки подвергали «повторной антигенной стимуляции» дополнительной болюсной дозой опухолевых клеток. На фигуре 32A показаны данные, полученные через 10 дней после начала совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 32B показаны данные, относящиеся к клеткам Raji в последний контрольный момент времени, 14 дней. На фигуре 32C показаны данные, относящиеся к клеткам Nalm6 через 10 дней. На фигуре 32D показаны данные, относящиеся к клеткам Nalm6 через 14 дней.

[00102] На фигурах 33A-33J представлены данные, относящиеся к оценке продуцирования цитокинов NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции. На фигуре 33A показана экспрессия гамма-интерферона NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 33B показана экспрессия GM-CSF NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 33C показана экспрессия фактора некроза опухоли альфа NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 33D показана экспрессия перфорина NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 33E показана экспрессия гранзима B NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Raji. На фигуре 33F показана экспрессия гамма-интерферона NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Nalm6. На фигуре 33G показана экспрессия GM-CSF NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Nalm6. На фигуре 33H показана экспрессия фактора некроза опухоли альфа NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Nalm6. На фигуре 33I показана экспрессия перфорина NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Nalm6. На фигуре 33J показана экспрессия гранзима B NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, после совместного культивирования с клетками Nalm6.

[00103] На фигуре 34 показаны данные, относящиеся к жизнеспособности NK-клеток, экспрессирующих конструкции гуманизированных немеченых CAR к CD19, в течение четырех недель после трансдукции.

[00104] На фигурах 35A-35D показаны данные, относящиеся к различным конструкциям гуманизированных немеченных CD19-направленных CAR и их эффективности в модели in vivo. На фигуре 35A показано схематическое изображение экспериментального протокола для оценки эффективности конструкций гуманизированных немеченных CD19-направленных CAR in vivo. На фигуре 35B показано биолюминесцентное изображение in vivo мышей, которым вводили опухолевые клетки NALM6 и которых лечили с помощью указанной конструкции. На фигуре 35C показан линейный график биолюминесцентных данных, собранных на основании фигуры 35B. На фигуре 35D показан относительный уровень экспрессии указанных конструкций NK-клетками, измеренный путем выявления слитого белка CD19-Fc, который связывается с конструкцией CAR к CD19.

[00105] На фигурах 36A-36F представлены данные, относящиеся к экспрессии указанных конструкций CD19-направленных CAR. На фигуре 36A показаны данные, относящиеся к экспрессии указанных конструкций в виде процентной доли от всех CD56-положительных клеток в образце крови мышей через 13 дней после введения NK-клеток (например, согласно схеме, представленной на фигуре 35A). На фигуре 36B показаны данные, относящиеся к выявлению CD19+ опухолевых клеток в образцах от животных, которых лечили с применением указанных конструкций, также через 13 дней после введения NK-клеток. На фигуре 36C показаны данные, относящиеся к выявлению GFP+ опухолевых клеток в образцах от животных, которых лечили с применением указанных конструкций, также через 13 дней после введения NK-клеток. На фигурах 36D, 36E и 36F показаны соответствующие данные через 27 дней после введения NK-клеток.

[00106] На фигурах 37A-37C приведены данные, относящиеся к эффективности in vivo различных CD19-направленных CAR в соответствии с вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе. На фигуре 37A показано схематическое изображение экспериментального протокола для оценки эффективности гуманизированных NK-клеток, экспрессирующих различные конструкции CD19-направленных CAR in vivo. Указаны различные протестированные экспериментальные группы. В случае клеток с обозначением «IL12/IL18» клетки размножали в присутствии растворимого IL12 и/или IL18, как описано в предварительной заявке на патент США № 62/881311, поданной 31 июля 2019 г., и заявке № 62/932342, поданной 7 ноября 2019 г., каждая из которых полностью включена в данный документ посредством ссылки. На фигурах 37B и 37C показаны данные биолюминесценции животных, которым вводили дозу опухолевых клеток Nalm6 и лечили с применением указанной конструкции.

[00107] На фигурах 38A-38J показаны графические изображения данных биолюминесценции на основании фигуры 37B. На фигуре 38A показана биолюминесценция (в виде потока фотонов в секунду) от животных, получавших нетрансдуцированные NK-клетки. На фигуре 38B показан поток, измеренный у животных, получавших PBS в качестве несущей среды. На фигуре 38C показан поток, измеренный у животных, получавших предварительно замороженные NK-клетки, экспрессирующие NK19 NF2 CAR (в качестве неограничивающего примера CAR). На фигуре 38D показан поток, измеренный у животных, получавших предварительно замороженные NK-клетки, экспрессирующие NK19 NF2 CAR (в качестве неограничивающего примера CAR), размноженные с применением IL12 и/или IL18. На фигуре 38E и на фигуре 38F показан поток, измеренный у животных, получавших свежие NK-клетки, экспрессирующие NK19 NF2 CAR (в качестве неограничивающего примера CAR). На фигуре 38G и на фигуре 38H показан поток, измеренный у животных, получавших ранее свежие NK-клетки, экспрессирующие NK19 NF2 CAR (в качестве неограничивающего примера CAR), размноженные с применением IL12 и/или IL18. На фигуре 38I показан линейный график, изображающий биолюминесценцию, измеренную в различных группах в течение первых 30 дней после инокуляции опухоли. На фигуре 38J показан линейный график, изображающий биолюминесценцию, измеренную в различных группах в течение первых 56 дней после инокуляции опухоли.

[00108] На фигуре 39 показаны данные, относящиеся к массе тела мышей с течением времени при получении указанной терапии.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

[00109] Некоторые варианты осуществления способов и композиций, предусмотренных в данном документе, относятся к CD19-направленным химерным рецепторам. В некоторых вариантах осуществления рецепторы экспрессируются в клетке, описанной в данном документе. Некоторые варианты осуществления включают способы применения композиций или клеток в иммунотерапии.

[00110] Термин «противораковый эффект» относится к биологическому эффекту, который может проявляться различными способами, включая без ограничения уменьшение объема опухоли, уменьшение количества раковых клеток, уменьшение количества метастазов, увеличение ожидаемой продолжительности жизни, уменьшение пролиферации раковых клеток, снижение выживаемости раковых клеток или уменьшение интенсивности различных физиологических симптомов, связанных с раковым состоянием. «Противораковый эффект» также может проявляться в способности SIR в первую очередь предупреждать возникновение рака.

Типы клеток

[00111] Некоторые варианты осуществления способов и композиций, предусмотренных в данном документе, относятся к клетке, такой как иммунная клетка. Например, иммунная клетка может быть сконструирована с включением химерного рецептора, такого как CD19-направленный химерный рецептор, или может быть сконструирована с включением нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный химерный рецептор, описанный в данном документе.

[00112] Традиционные виды противораковой терапии основаны на хирургическом подходе, лучевой терапии, химиотерапии или комбинации данных способов. Поскольку исследования привели к лучшему пониманию некоторых механизмов определенных видов рака, эти знания были использованы для разработки видов таргетной терапии рака. Таргетная терапия представляет собой лечение рака, при которой применяют определенные лекарственные средства, целенаправленно воздействующие на специфические гены или белки, обнаруживаемые в раковых клетках или клетках, поддерживающих рост рака (таких как клетки кровеносных сосудов), для уменьшения или остановки роста раковых клеток. В последнее время генная инженерия обеспечила возможность разработки подходов, использующих определенные аспекты иммунной системы для борьбы с видами рака. В некоторых случаях собственные иммунные клетки пациента модифицируют для специфического уничтожения типа рака у данного пациента. Можно применять различные типы иммунных клеток, такие как Т-клетки или естественные киллеры (NK-клетки), которые более подробно описаны ниже.

[00113] Для обеспечения осуществления видов иммунотерапии рака в данном документе предусмотрены полинуклеотиды, полипептиды и векторы, которые кодируют химерные антигенные рецепторы (CAR), которые содержат связывающий мишень фрагмент (например, внеклеточную связывающую часть лиганда или CD19-направленного химерного рецептора, экспрессируемых под влиянием раковой клетки) и цитотоксический сигнальный комплекс. Например, некоторые варианты осуществления включают полинуклеотид, полипептид или вектор, который кодирует CD19-направленный химерный рецептор для обеспечения осуществления целенаправленного воздействия иммунной клетки на рак и оказания цитотоксических эффектов в отношении раковой клетки. Также предусмотрены сконструированные иммунные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки), экспрессирующие такие CAR. В нескольких вариантах осуществления в данном документе также предусмотрены полинуклеотиды, полипептиды и векторы, которые кодируют конструкцию, содержащую внеклеточный домен, содержащий два или более субдомена, например первый субдомен, целенаправленно воздействующий на CD19, содержащий связывающий CD19 фрагмент, раскрытый в данном документе, и второй субдомен, содержащий лектиноподобный рецептор C-типа и цитотоксический сигнальный комплекс. Также предусмотрены сконструированные иммунные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки), экспрессирующие такие биспецифические конструкции. Также предусмотрены сконструированные иммунные клетки (например, Т-клетки или NK-клетки), экспрессирующие мультиспецифические конструкции и/или обладающие способностью связывать множество целевых маркеров. В данном документе также предусмотрены способы лечения рака и другие пути применения таких клеток для иммунотерапии рака.

Сконструированные клетки для иммунотерапии

[00114] В нескольких вариантах осуществления клетки иммунной системы сконструированы так, чтобы они оказывали повышенные цитотоксические эффекты в отношении клеток-мишеней, таких как опухолевые клетки. Например, клетка иммунной системы может быть сконструирована так, чтобы содержать CD19-направленный химерный рецептор, описанный в данном документе. В нескольких вариантах осуществления применяют белые кровяные тельца или лейкоциты, поскольку их естественная функция заключается в защите организма от роста аномальных клеток и инфекционных заболеваний. Существует множество типов белых кровяных телец, которые выполняют специфические задачи в иммунной системе человека и, следовательно, являются предпочтительной отправной точкой для конструирования клеток, описанных в данном документе. К белым кровяным тельцам относятся гранулоциты и агранулоциты (по наличию или отсутствию гранул в цитоплазме, соответственно). Гранулоциты включают базофилы, эозинофилы, нейтрофилы и тучные клетки. Агранулоциты включают лимфоциты и моноциты. Клетки, такие как приведенные ниже или описанные иным образом в данном документе, могут быть сконструированы так, чтобы содержать химерный рецептор, такой как CD19-направленный химерный рецептор, или нуклеиновую кислоту, кодирующую химерный рецептор, и/или сконструированы с возможностью совместной экспрессии костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

Моноциты для иммунотерапии

[00115] Моноциты представляют собой подтип лейкоцитов. Моноциты могут дифференцироваться в макрофаги и дендритные клетки миелоидного происхождения. Моноциты связаны с адаптивной иммунной системой и выполняют основные функции фагоцитоза, презентации антигена и выработки цитокинов. Фагоцитоз представляет собой процесс захвата клеточного материала или целых клеток с последующим перевариванием и разрушением поглощенного клеточного материала. В нескольких вариантах осуществления моноциты применяют вместе с одной или более дополнительными сконструированными клетками, раскрытыми в данном документе. Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе способов и композиций относятся к моноциту, который содержит CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую CD19-направленный химерный рецептор. Несколько вариантов осуществления раскрытых в данном документе способов и композиций относятся к моноцитам, сконструированным с возможностью экспрессии CD19-направленного химерного рецептора и костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

Лимфоциты для иммунотерапии

[00116] Лимфоциты, другой первичный подтип лейкоцитов, включают Т-клетки (клеточно-опосредованного, цитотоксического адаптивного иммунитета), естественные киллерные клетки (клеточно-опосредованного, цитотоксического врожденного иммунитета) и В-клетки (гуморального, регулируемого антителами адаптивного иммунитета). Хотя B-клетки сконструированы в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, несколько вариантов осуществления также относятся к сконструированным T-клеткам или сконструированным NK-клеткам (в некоторых вариантах осуществления применяют смеси T-клеток и NK-клеток). Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе способов и композиций относятся к лимфоциту, который содержит CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую CD19-направленный химерный рецептор. Несколько вариантов осуществления раскрытых в данном документе способов и композиций относятся к лимфоцитам, сконструированным с возможностью экспрессии CD19-направленного химерного рецептора и костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

Т-клетки для иммунотерапии

[00117] Т-клетки отличаются от других подтипов лимфоцитов (например, В-клеток или NK-клеток) за счет присутствия Т-клеточного рецептора на поверхности клетки. Т-клетки можно разделить на различные подтипы, включая эффекторные Т-клетки, хелперные Т-клетки, цитотоксические Т-клетки, Т-клетки памяти, регуляторные Т-клетки, Т-клетки - естественные киллеры, ассоциированные со слизистой оболочкой инвариантные Т-клетки и гамма/дельта-Т-клетки. В некоторых вариантах осуществления сконструирован конкретный подтип Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления сконструирован смешанный пул подтипов Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления отсутствует конкретный выбор типа Т-клеток, которые должны быть сконструированы с возможностью экспрессии цитотоксических рецепторных комплексов, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления применяют специфические методики, такие как стимуляция цитокинами, для повышения степени размножения/сбора Т-клеток со специфическим профилем маркеров. Например, в нескольких вариантах осуществления активация определенных Т-клеток человека, например CD4+ Т-клеток, CD8+ Т-клеток, достигается за счет применения CD3 и/или CD28 в качестве стимулирующих молекул. В нескольких вариантах осуществления предусмотрен способ лечения или предупреждения рака или инфекционного заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества Т-клеток, экспрессирующих цитотоксический рецепторный комплекс и/или хоминг-фрагмент, описанный в данном документе. В нескольких вариантах осуществления сконструированные Т-клетки являются аутологичными клетками, тогда как в некоторых вариантах осуществления Т-клетки являются аллогенными клетками. Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе способов и композиций относятся к Т-клетке, которая содержит CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую CD19-направленный химерный рецептор. Несколько вариантов осуществления раскрытых в данном документе способов и композиций относятся к Т-клеткам, сконструированным с возможностью экспрессии CD19-направленного химерного рецептора и костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

NK-клетки для иммунотерапии

[00118] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен способ лечения или предупреждения рака или инфекционного заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества естественных киллерных (NK) клеток, экспрессирующих цитотоксический рецепторный комплекс и/или хоминг-фрагмент, описанный в данном документе. В нескольких вариантах осуществления сконструированные NK-клетки являются аутологичными клетками, тогда как в некоторых вариантах осуществления NK-клетки являются аллогенными клетками. В нескольких вариантах осуществления NK-клетки являются предпочтительными, поскольку природный цитотоксический потенциал NK-клеток относительно высок. В нескольких вариантах осуществления неожиданно оказалось полезным, что сконструированные клетки, раскрытые в данном документе, могут дополнительно активировать цитотоксическое действие NK-клеток, что приводит к еще более эффективному действию против клеток-мишеней (например, опухолевых или других пораженных клеток). Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе способов и композиций относятся к NK, который предусматривает CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую CD19-направленный химерный рецептор. Несколько вариантов осуществления раскрытых в данном документе способов и композиций относятся к NK-клеткам, сконструированным с возможностью экспрессии CD19-направленного химерного рецептора и костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

Гемопоэтические стволовые клетки для иммунотерапии рака

[00119] В некоторых вариантах осуществления в раскрытых в данном документе способах иммунотерапии применяют гемопоэтические стволовые клетки (HSC). В нескольких вариантах осуществления клетки сконструированы с возможностью экспрессии хоминг-фрагмента и/или цитотоксического рецепторного комплекса. В нескольких вариантах осуществления HSC задействуют для использования их способности к приживлению для долгосрочного продуцирования клеток крови, которое может обеспечить устойчивый источник целенаправленно воздействующих противораковых эффекторных клеток, например, для борьбы с ремиссиями рака. В нескольких вариантах осуществления такое продолжающееся продуцирование помогает компенсировать иммунологическую толерантность или истощение других типов клеток, например, связанное с микроокружением опухоли. В нескольких вариантах осуществления применяют аллогенные HSC, тогда как в некоторых вариантах осуществления применяют аутологичные HSC. В нескольких вариантах осуществления HSC применяют в комбинации с одним или более дополнительными типами сконструированных клеток, раскрытыми в данном документе. Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе способов и композиций относятся к стволовой клетке, такой как гемопоэтическая стволовая клетка, которая содержит CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую CD19-направленный химерный рецептор. Несколько вариантов осуществления раскрытых в данном документе способов и композиций относятся к стволовым клеткам, таким как гемопоэтические стволовые клетки, которые сконструированы с возможностью экспрессии CD19-направленного химерного рецептора и костимулирующего домена связанного с мембраной интерлейкина 15 (mbIL15).

Внеклеточные домены (домены, связывающиеся с опухолью)

[00120] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит внеклеточный домен. В некоторых вариантах осуществления внеклеточный домен предусматривает опухоль-связывающий домен (также называемый антигенсвязывающим белком или антигенсвязывающим доменом), который описан в данном документе. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен получен из последовательности дикого типа или недикого типа антитела, фрагмента антитела, scFv, Fv, Fab, (Fab')2, однодоменного антитела (SDAB), домена vH или vL, домена VHH верблюдовых или неиммуноглобулинового остова, такого как DARPIN, аффитело, аффилин, аднектин, аффитин, белок repebody, финомер, альфа-тело, авимер, атример, центирин, пронектин, антикалин, домен Куница, белок с повторами Armadillo, аутоантиген, рецептор или лиганд, или содержит ее. В некоторых вариантах осуществления опухоль-связывающий домен содержит более одного антигенсвязывающего домена. В вариантах осуществления антигенсвязывающий домен функционально связан непосредственно или посредством необязательного линкера с NH2-концевой областью домена TCR (например, константными цепями TCR-альфа, TCR-бета, TCR-бета2, пре-TCR-альфа, пре-TCR-альфа-Del48, TCR-гамма или TCR-дельта).

Антигенсвязывающие белки

[00121] В нескольких вариантах осуществления предусмотрены антигенсвязывающие белки. Используемый в данном документе термин «антигенсвязывающий белок» будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к белку, содержащему антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с антигеном, и, необязательно, остову или каркасной части, которые позволяют антигенсвязывающему фрагменту принимать конформацию, которая способствует связыванию антигенсвязывающего белка с антигеном. В некоторых вариантах осуществления антиген представляет собой раковый антиген (например, CD19) или его фрагмент. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент содержит по меньшей мере одну CDR из антитела, которое связывается с антигеном. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент содержит все три CDR из тяжелой цепи антитела, которое связывается с антигеном, или из легкой цепи антитела, которое связывается с антигеном. Еще в некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент содержит все шесть CDR из антитела, которое связывается с антигеном (три из тяжелой цепи и три из легкой цепи). В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент содержит одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR из антитела, которое связывается с антигеном, и в нескольких вариантах осуществления CDR могут представлять собой любую комбинацию CDR тяжелой и/или легкой цепи. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент представляет собой фрагмент антитела.

[00122] Неограничивающие примеры антигенсвязывающих белков включают антитела, фрагменты антител (например, антигенсвязывающий фрагмент антитела), производные антител и аналоги антител. Дополнительные конкретные примеры включают без ограничения одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), нанотело (например, домен VH антител верблюдовых, состоящих из тяжелой цепи; фрагмент VHH), фрагмент Fab, фрагмент Fab', фрагмент F(ab')2, фрагмент Fv, фрагмент Fd и фрагмент определяющей комплементарность области (CDR). Эти молекулы можно получать из любого источника-млекопитающего, такого как человек, мышь, крыса, кролик или свинья, собака или животное семейства верблюдовых. Фрагменты антител могут конкурировать за связывание антигена-мишени с интактным (например, нативным) антителом, и фрагменты можно получать путем модификации интактных антител (например, путем ферментативного или химического расщепления) или синтезировать de novo с применением технологий рекомбинантных ДНК или пептидного синтеза. Антигенсвязывающий белок может содержать, например, альтернативный белковый остов или искусственный остов с привитыми CDR или производными CDR. Такие остовы включают без ограничения полученные из антител остовы, которые содержат мутации, введенные, например, для стабилизации трехмерной структуры антигенсвязывающего белка, а также полностью синтетические остовы, содержащие, например, биосовместимый полимер. В дополнение, можно применять пептидные миметики антител («PAM»), а также остовы на основе миметиков антител с использованием фибронектиновых компонентов в качестве остова.

[00123] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит один или более фрагментов антител, включенных в одну полипептидную цепь или в несколько полипептидных цепей. Например, антигенсвязывающие белки могут включать без ограничения диатело; интраантитело; доменное антитело (один домен VL или VH или два или более доменов VH, соединенных пептидным линкером); макситело (2 scFv, слитые с Fc-областью); триатело; тетратело; минитело (scFv, слитый с доменом CH3); пептид-ассоциированное антитело (один или более пептидов, присоединенных к Fc-области); линейное антитело (пара тандемных сегментов Fd (VH-CH1-VH-CH1), которые вместе с комплементарными полипептидами легкой цепи образуют пару антигенсвязывающих областей); иммунофармацевтическое средство на основе модульного белка малого размера и слитые белки на основе иммуноглобулина (например, IgG-scFv, IgG-Fab, 2scFv-IgG, 4scFv-IgG, VH-IgG, IgG-VH и Fab-scFv-Fc).

[00124] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок обладает структурой иммуноглобулина. Используемый в данном документе термин «иммуноглобулин» будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к тетрамерной молекуле, при этом каждый тетрамер содержит две идентичные пары полипептидных цепей, при этом каждая пара имеет одну «легкую» (приблизительно 25 кДа) и одну «тяжелую» цепь (приблизительно 50-70 кДа). Аминоконцевая часть каждой цепи включает в себя вариабельную область из приблизительно 100-110 или более аминокислот, в основном ответственных за распознавание антигена. Карбоксиконцевая часть каждой цепи определяет константную область, в основном отвечающую за эффекторную функцию.

[00125] В легкой и тяжелой цепях вариабельная (V) и константная области (C) соединены областью «J», состоящей из приблизительно 12 или более аминокислот, при этом тяжелая цепь также включает область «D», состоящую из приблизительно 10 дополнительных аминокислот. Вариабельные области каждой пары легкой/тяжелой цепей образуют сайт связывания антитела таким образом, что интактный иммуноглобулин содержит два сайта связывания.

[00126] Цепи иммуноглобулина демонстрируют аналогичную общую структуру относительно консервативных каркасных областей (FR), соединенных тремя гипервариабельными областями, также называемыми определяющими комплементарность областями или CDR. От N-конца к C-концу как легкие, так и тяжелые цепи содержат домены FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.

[00127] Легкие цепи человека классифицируют как каппа и лямбда легкие цепи. Термин «легкая цепь» антитела относится к меньшему из двух типов полипептидных цепей, которые присутствуют в молекулах антител в их встречающихся в природе конформациях. Каппа (K) и лямбда (λ) легкие цепи относятся к двум основным изотипам легкой цепи антитела. Легкая цепь может включать полипептид, содержащий от аминоконца к карбоксильному концу одну вариабельную область легкой цепи (VL) иммуноглобулина и один константный домен легкой цепи (CL) иммуноглобулина.

[00128] Тяжелые цепи классифицируют как мю (μ), дельта (Δ), гамма (γ), альфа (α) и эпсилон (ε) и изотип антитела определяют соответственно как IgM, IgD, IgG, IgA и IgE. Термин «тяжелая цепь» антитела относится к большему из двух типов полипептидных цепей, которые присутствуют в молекулах антител в их встречающихся в природе конформациях, и который обычно определяет класс, к которому принадлежит антитело. Тяжелая цепь может включать полипептид, содержащий от аминоконца к карбоксильному концу одну вариабельную область тяжелой цепи (VH) иммуноглобулина, константный домен 1 тяжелой цепи (CH1) иммуноглобулина, шарнирную область иммуноглобулина, константный домен 2 тяжелой цепи (CH2) иммуноглобулина, константный домен 3 тяжелой цепи (CH3) иммуноглобулина и необязательно константный домен 4 тяжелой цепи (CH4) иммуноглобулина.

[00129] Класс IgG дополнительно делится на подклассы, а именно IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Класс IgA дополнительно делится на подклассы, а именно IgA1 и IgA2. Класс IgM включает подклассы, в том числе без ограничения IgM1 и IgM2. Тяжелые цепи в антителах IgG, IgA и IgD содержат три домена (CH1, CH2 и CH3), тогда как тяжелые цепи в антителах IgM и IgE содержат четыре домена (CH1, CH2, CH3 и CH4). Константные домены тяжелой цепи иммуноглобулина могут принадлежать к любому изотипу иммуноглобулина, включая подтипы. Цепи антитела связаны друг с другом посредством межполипептидных дисульфидных связей между доменом CL и доменом CH1 (например, между легкой и тяжелой цепями) и между шарнирными областями тяжелых цепей антитела.

[00130] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок представляет собой антитело. Термин «антитело», используемый в данном документе, относится к последовательности белка или полипептида, полученной из молекулы иммуноглобулина, которая специфически связывается с антигеном. Антитела могут быть моноклональными или поликлональными, много- или одноцепочечными или интактными иммуноглобулинами и могут происходить из природных источников или из рекомбинантных источников. Антитела могут быть тетрамерами молекул иммуноглобулинов. Антитело может быть «гуманизированным», «химерным» или не являющимся человеческим. Антитело может включать интактный иммуноглобулин любого изотипа и включает, например, химерные, гуманизированные, человеческие и биспецифические антитела. Интактное антитело обычно содержит по меньшей мере две полноразмерные тяжелые цепи и две полноразмерные легкие цепи. Последовательности антител могут происходить исключительно от одного вида или могут быть «химерными», то есть разные части антитела могут происходить от двух разных видов, как дополнительно описано ниже. Если не указано иное, то термин «антитело» также включает антитела, содержащие две по сути полноразмерные тяжелые цепи и две по сути полноразмерные легкие цепи, при условии, что антитела сохраняют аналогичные или подобные свойства связывания и/или функцию как у антитела, состоящего из двух полноразмерных легких цепей и тяжелых цепей. Например, в определение включены антитела, предусматривающие замены, вставки или делеции 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных остатков на N-конце и/или C-конце тяжелой и/или легкой цепей, при условии, что антитела сохраняют аналогичные или подобные свойства связывания и/или функцию как у антитела, содержащего две полноразмерные тяжелые цепи и две полноразмерные легкие цепи. Примеры антител включают моноклональные антитела, поликлональные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела, биспецифические антитела и синтетические антитела. В некоторых вариантах осуществления предусмотрены моноклональные и поликлональные антитела. Используемый в данном документе термин «поликлональное антитело» будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к популяции антител, которые обычно широко различаются по составу и специфичности связывания. Используемый в данном документе термин «моноклональное антитело» («mAb») будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к одному или более из популяции антител, обладающих идентичными последовательностями. Моноклональные антитела связываются с антигеном на определенном эпитопе антигена.

[00131] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок представляет собой фрагмент или антигенсвязывающий фрагмент антитела. Термин «фрагмент антитела» относится по меньшей мере к одной части антитела, которая сохраняет способность специфически взаимодействовать (например, путем связывания, стерической изоляции, стабилизации/дестабилизации, пространственного распределения) с эпитопом антигена. Примеры фрагментов антител включают без ограничения фрагменты Fab, Fab’, F(ab’)2, Fv, фрагменты антител scFv, связанные дисульфидной связью Fv (sdFv), фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CHI, линейные антитела, однодоменные антитела, такие как sdAb (либо vL, либо vH), домены vHH верблюдовых, мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антитела, таких как бивалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области, и выделенную CDR или другие связывающие эпитоп фрагменты антитела. Антигенсвязывающий фрагмент также можно включать в однодоменные антитела, макситела, минитела, нанотела, интраантитела, диатела, триатела, тетратела, v-NAR и бис-scFv (см., например, Hollinger and Hudson, Nature Biotechnology 23: 1126-1136, 2005). Антигенсвязывающие фрагменты также можно прививать к остовам на основе полипептидов, таких как фибронектин III типа (Fn3) (см. патент США № 6703199, в котором описаны минитела на основе полипептида фибронектина). Фрагмент антитела может включать фрагмент Fab, Fab’, F(ab’)2 и/или Fv, который содержит по меньшей мере одну CDR иммуноглобулина, которой достаточно для обеспечения специфического антигенного связывания с раковым антигеном (например, CD19). Фрагменты антител можно получать с помощью технологий рекомбинантной ДНК или с помощью ферментативного или химического расщепления интактных антител.

[00132] В некоторых вариантах осуществления предусмотрены Fab-фрагменты. Fab-фрагмент представляет собой моновалентный фрагмент, характеризующийся доменами VL, VH, CL и CH1; фрагмент F(ab’)2 представляет собой бивалентный фрагмент, имеющий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; фрагмент Fd содержит домены VH и CH1; фрагмент Fv содержит домены VL и VH одного плеча антитела; и фрагмент dAb содержит домен VH, домен VL или антигенсвязывающий фрагмент домена VH или VL. В некоторых вариантах осуществления данные фрагменты антител можно включать в однодоменные антитела, одноцепочечные антитела, макситела, минитела, интраантитела, диатела, триатела, тетратела, v-NAR и бис-scFv. В некоторых вариантах осуществления антитела содержат по меньшей мере одну CDR, описанную в данном документе.

[00133] В нескольких вариантах осуществления в данном документе также предусмотрены одноцепочечные вариабельные фрагменты. Используемый в данном документе термин «одноцепочечный вариабельный фрагмент» («scFv») будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к слитому белку, в котором VL-область и VH-область соединены посредством линкера (например, синтетической последовательности аминокислотных остатков) с образованием непрерывной белковой цепи, где линкер имеет достаточную длину для обеспечения возможности белковой цепи укладываться в складку «на себя» и образовывать моновалентный антигенсвязывающий сайт). Во избежание разночтений, если не указано иное, то «одноцепочечный вариабельный фрагмент» не является антителом или фрагментом антитела в соответствии с определением в данном документе. Диатела представляют собой бивалентные антитела, содержащие две полипептидные цепи, где каждая полипептидная цепь содержит домены VH и VL, соединенные линкером, которому придают такую конфигурацию, которая уменьшает возможность или не допускает спаривания между двумя доменами на одной цепи, тем самым обеспечивая возможность каждому домену соединяться в пару с комплементарным доменом на другой полипептидной цепи. В соответствии с несколькими вариантами осуществления, если две полипептидные цепи диатела являются идентичными, то диатело, полученное в результате их спаривания, будет иметь два идентичных антигенсвязывающих сайта. Полипептидные цепи, содержащие разные последовательности, можно применять для создания диатела с двумя разными антигенсвязывающими сайтами. Аналогично, триатела и тетратела представляют собой антитела, содержащие соответственно три и четыре полипептидные цепи и образующие соответственно три и четыре антигенсвязывающих сайта, которые могут быть одинаковыми или разными.

[00134] В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит одну или более CDR. Используемый в данном документе термин «CDR» будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к определяющей комплементарность области (также называемой «минимальные единицы распознавания» или «гипервариабельная область») в вариабельных последовательностях антитела. CDR позволяют антигенсвязывающему белку специфически связываться с конкретным представляющим интерес антигеном. Существует три CDR вариабельной области тяжелой цепи (CDRH1, CDRH2 и CDRH3) и три CDR вариабельной области легкой цепи (CDRL1, CDRL2 и CDRL3). CDR в каждой из двух цепей обычно выравниваются по каркасным областям с образованием структуры, которая специфически связывается со специфическим эпитопом или доменом на белке-мишени. Встречающиеся в природе вариабельные области легкой и тяжелой цепей обычно находятся в соответствии со следующим порядком этих элементов от N-конца к C-концу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. Систему нумерации разработали для присвоения номеров аминокислотам, которые занимают положения в каждом из этих доменов. Данная система нумерации определена в Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (1987 and 1991, NIH, Bethesda, MD) или Chothia & Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196:901-917; Chothia et al., 1989, Nature 342:878-883. С помощью данной системы можно идентифицировать определяющие комплементарность области (CDR) и каркасные области (FR) заданного антитела. Другие системы нумерации аминокислот в цепях иммуноглобулинов включают IMGT® (международную информационную систему по иммуногенетике; Lefranc et al, Dev. Comp. Immunol. 29:185-203; 2005) и AHo (Honegger and Pluckthun, J. Mol. Biol. 309(3):657-670; 2001). Одну или более CDR можно включать в молекулу либо ковалентно, либо нековалентно для того, чтобы сделать ее антигенсвязывающим белком. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающие белки, предусмотренные в данном документе, содержат вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 104 и SEQ ID NO: 106. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающие белки, предусмотренные в данном документе, содержат вариабельную область легкой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 105 и SEQ ID NO: 107.

[00135] В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок модифицировали по сравнению с его исходной последовательностью, например, с целью улучшения экспрессии, функции или снижения потенциального иммунного ответа хозяина на антигенсвязывающий белок. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельную область легкой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 и SEQ ID NO: 119 и/или последовательностей, характеризующихся по меньшей мере 90% идентичностью и/или гомологией (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%). В нескольких вариантах осуществления вариабельная область легкой цепи отличается по последовательности от SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 или SEQ ID NO: 119 на более чем 5% (например, на 5-7%, 5-10%, 10-20% или больше), при этом лиганд-связывающая функция (или другие функциональные возможности) является аналогичной, по сути аналогичной или идентичной SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 или SEQ ID NO: 119. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельную область тяжелой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 123 и/или последовательностей, характеризующихся по меньшей мере 90% идентичностью и/или гомологией (например, 90-95%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%). В нескольких вариантах осуществления вариабельная область тяжелой цепи отличается по последовательности от SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 или SEQ ID NO: 123 на более чем 5% (например, на 5-7%, 5-10%, 10-20% или больше), при этом лиганд-связывающая функция (или другие функциональные возможности) является аналогичной, по сути аналогичной или идентичной SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 или SEQ ID NO: 123. В зависимости от варианта осуществления можно применять любую комбинацию областей тяжелой и легкой цепей (например, при сборке scFv). В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит одну или более CDR, выбранных из SEQ ID NO: 124, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 127, SEQ ID NO: 128, SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 130, SEQ ID NO: 131, SEQ ID NO: 132, SEQ ID NO: 133, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 134, SEQ ID NO: 136, SEQ ID NO: 137, SEQ ID NO: 138, SEQ ID NO: 139, SEQ ID NO: 140, SEQ ID NO: 141, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 143 и SEQ ID NO: 144.

[00136] В дополнительных вариантах осуществления CDR выбраны из SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 109, SEQ ID NO: 110, SEQ ID NO: 111, SEQ ID NO: 112, SEQ ID NO: 113, SEQ ID NO: 114 и SEQ ID NO: 115 в любой комбинации. В одном варианте осуществления CDR собирают с образованием CAR, направленного на CD19 и содержащего SEQ ID NO: 116.

[00137] В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит тяжелую цепь, характеризующуюся последовательностью с SEQ ID NO: 88. В нескольких вариантах осуществления данная тяжелая цепь связана (например, в виде scFv) с одной из легких цепей с SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90 и/или SEQ ID NO: 91. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит одну или более CDR, выбранных из SEQ ID NO: 92, SEQ ID NO: 93, SEQ ID NO: 94, SEQ ID NO: 95, SEQ ID NO: 96, SEQ ID NO: 97, SEQ ID NO: 98, SEQ ID NO: 99 и SEQ ID NO: 100.

[00138] В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит область легкой цепи антитела FMC63, которая характеризуется последовательностью с SEQ ID NO: 150. В нескольких вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит область легкой цепи антитела FMC63, которая характеризуется последовательностью с SEQ ID NO: 148. В нескольких вариантах осуществления между тяжелой и легкой цепями используют линкеры, и в некоторых вариантах осуществления линкер содержит последовательность с SEQ ID NO: 149. В нескольких вариантах осуществления такие тяжелые и легкие цепи применяют в сочетании с костимулирующим доменом CD28, таким как домен с SEQ ID NO: 153. Часто для разделения составных частей CAR применяют спейсер. Например, в нескольких вариантах осуществления применяют спейсер, содержащий последовательность с SEQ ID NO: 151. В нескольких вариантах осуществления применяют трансмембранный домен, характеризующийся последовательностью с SEQ ID NO: 152. В нескольких вариантах осуществления CAR содержит последовательность нуклеиновой кислоты, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 147.

[00139] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие белки, предусмотренные в данном документе, содержат одну или более CDR в виде части большей полипептидной цепи. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие белки ковалентно связывают одну или более CDR с другой полипептидной цепью. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие белки нековалентно включают одну или более CDR. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие белки могут содержать по меньшей мере одну из CDR, описанных в данном документе, включенную в биосовместимую каркасную структуру. В некоторых вариантах осуществления биосовместимая каркасная структура содержит полипептид или его часть, достаточную для образования конформационно стабильной структурной опоры или каркаса, или остова, способных воспроизводить одну или более последовательностей аминокислот, которые связываются с антигеном (например, CDR, вариабельную область и т. д.) в локализованной области поверхности. Такие структуры могут представлять собой встречающийся в природе полипептид или полипептидную «складку» (структурный мотив) или могут предусматривать одну или более модификаций, таких как добавления, делеции и/или замены аминокислот, по сравнению со встречающимся в природе полипептидом или складкой. В зависимости от варианта осуществления остовы могут происходить из полипептидов множества различных видов (или из более чем одного вида), таких как человек, отличный от человека примат или другое млекопитающее, другое позвоночное, беспозвоночное, растение, бактерии или вирус.

[00140] В зависимости от варианта осуществления биосовместимые каркасные структуры основаны на белковых остовах или скелетах, отличных от иммуноглобулиновых доменов. В некоторых таких вариантах осуществления данные каркасные структуры основаны на фибронектине, анкирине, липокалине, неокарциностаине, цитохроме b, цинковом пальце CP1, PST1, суперспирали, LACI-D1, домене Z и/или доменах тендамистата.

[00141] В некоторых вариантах осуществления также предусмотрены антигенсвязывающие белки с более чем одним сайтом связывания. В нескольких вариантах осуществления сайты связывания идентичны друг другу, в то время как в некоторых вариантах осуществления сайты связывания отличаются друг от друга. Например, антитело обычно содержит два идентичных сайта связывания, в то время как «биспецифическое» или «бифункциональное» антитело содержит два разных сайта связывания. Два сайта связывания биспецифического антигенсвязывающего белка или антитела будут связываться с двумя разными эпитопами, которые могут находиться на одном и том же или разных белках-мишенях. В нескольких вариантах осуществления это представляет собой особое преимущество, поскольку биспецифический химерный антигенный рецептор может придавать сконструированной клетке способность целенаправленно воздействовать на несколько опухолевых маркеров. Например, CD19 и дополнительный опухолевый маркер, такой как CD123, NKG2D или любой другой маркер, раскрытый в данном документе или признанный в уровне техники в качестве опухолеспецифического антигена или опухолеассоциированного антигена.

[00142] Используемый в данном документе термин «химерное антитело» будет иметь свое обычное значение и также будет относиться к антителу, которое содержит одну или более областей из одного антитела и одну или более областей из одного или более других антител. В некоторых вариантах осуществления одна или более CDR получены из антитела к раковому антигену (например, CD19). В нескольких вариантах осуществления все CDR получены из антитела к раковому антигену (такого как антитело к CD19). В некоторых вариантах осуществления CDR из более чем одного антитела к раковому антигену смешаны и сопоставлены в химерном антителе. Например, химерное антитело может содержать CDR1 из легкой цепи первого антитела к раковому антигену, CDR2 и CDR3 из легкой цепи второго антитела к раковому антигену и CDR из тяжелой цепи из третьего антитела к раковому антигену. Дополнительно, раскрытые в данном документе каркасные области антигенсвязывающих белков могут происходить из одного из одинаковых антител к раковому антигену (например, CD19), из одного или более различных антител, таких как человеческое антитело, или из гуманизированного антитела. В одном примере химерного антитела часть тяжелой и/или легкой цепи является идентичной с, гомологичной или полученной из антитела от определенного вида, или принадлежит к конкретному классу или подклассу антител, в то время как остальная часть цепи(цепей) является идентичной с, гомологичной или полученной из антитела или антител от другого вида, или принадлежит к другому классу или подклассу антител. Также в данном документе предусмотрены фрагменты таких антител, которые проявляют требуемую биологическую активность.

[00143] В некоторых вариантах осуществления предусмотрен антигенсвязывающий белок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 90% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33. В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций (например, с целью гуманизации) в аминокислотной последовательности домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, но сохраняет специфическое связывание с раковым антигеном (например, CD19). В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций в аминокислотной последовательности домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, но характеризуется улучшенным специфическим связыванием с раковым антигеном (например, CD19).

[00144] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 90% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций (например, с целью гуманизации) в аминокислотной последовательности домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32, но сохраняет специфическое связывание с раковым антигеном (например, CD19). В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций в аминокислотной последовательности домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32, но характеризуется улучшенным специфическим связыванием с раковым антигеном (например, CD19).

[00145] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 90% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, и вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 90% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, и вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, и вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32.

[00146] В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, и вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая на по меньшей мере 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности вариабельного домена легкой цепи с SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая на по меньшей мере 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности вариабельного домена тяжелой цепи в соответствии с SEQ ID NO: 33.

[00147] В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична полинуклеотидной последовательности под SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, который гибридизуется в умеренно жестких условиях с комплементарной последовательностью полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен легкой цепи в соответствии с последовательностью с SEQ ID NO: 32. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, который гибридизуется в жестких условиях с комплементарной последовательностью полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен легкой цепи в соответствии с последовательностью с SEQ ID NO: 32.

[00148] В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи содержит последовательность аминокислот, которая на по меньшей мере 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности вариабельного домена тяжелой цепи в соответствии с последовательностью с SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, который гибридизуется в умеренно жестких условиях с комплементарной последовательностью полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен тяжелой цепи в соответствии с последовательностью с SEQ ID NO: 33. В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи содержит последовательность аминокислот, которая кодируется полинуклеотидом, который гибридизуется в жестких условиях с комплементарной последовательностью полинуклеотида, который кодирует вариабельный домен тяжелой цепи в соответствии с последовательностью с SEQ ID NO: 33.

[00149] В нескольких вариантах осуществления предусмотрены дополнительные связывающие CD19 конструкции. Например, в нескольких вариантах осуществления предусмотрен scFv, который целенаправленно воздействует на CD19, где scFv содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность с SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена HCV, представленной под SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен тяжелой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена HCV, представленной под SEQ ID NO: 35. В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций (например, с целью гуманизации) в аминокислотной последовательности домена HCV, представленной под SEQ ID NO: 35, но сохраняет специфическое связывание с раковым антигеном (например, CD19). В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций в аминокислотной последовательности домена HCV, представленной под SEQ ID NO: 35, но характеризуется улучшенным специфическим связыванием с раковым антигеном (например, CD19).

[00150] Дополнительно, в нескольких вариантах осуществления scFv, который целенаправленно воздействует на CD19, содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность с SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена LCV, представленной под SEQ ID NO: 36. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий белок содержит вариабельный домен легкой цепи, характеризующийся по меньшей мере 96, 97, 98 или 99% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена LCV, представленной под SEQ ID NO: 36. В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи может предусматривать одну или более дополнительных мутаций (например, с целью гуманизации) в аминокислотной последовательности домена LCV, представленной под SEQ ID NO: 36, но сохраняет специфическое связывание с раковым антигеном (например, CD19). В нескольких вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи может содержать одну или более дополнительных мутаций в аминокислотной последовательности домена LCV, представленной под SEQ ID NO: 36, но характеризуется улучшенным специфическим связыванием с раковым антигеном (например, CD19).

[00151] В нескольких вариантах осуществления также предусмотрен связывающий CD19 фрагмент, который содержит CDR легкой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC). В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент дополнительно содержит CDR тяжелой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC). В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 37. В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 37. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 38. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 38. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 39. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 39. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 40. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 40. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 41, 42 или 43. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 41, 42 или 43. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 44. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 44.

[00152] В нескольких вариантах осуществления также предусмотрен связывающий CD19 фрагмент, который содержит вариабельную область легкой цепи (VL) и вариабельную область тяжелой цепи (HL), причем VL-область содержит первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 VL, CDR2 VL и CDR3 VL), и VH-область содержит первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 VH, CDR2 VH и CDR3 VH). В нескольких вариантах осуществления VL-область содержит последовательность с SEQ ID NO: 45, 46, 47 или 48. В нескольких вариантах осуществления VL-область содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 45, 46, 47 или 48. В нескольких вариантах осуществления VH-область содержит последовательность с SEQ ID NO: 49, 50, 51 или 52. В нескольких вариантах осуществления VH-область содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 49, 50, 51 или 52.

[00153] В нескольких вариантах осуществления также предусмотрен связывающий CD19 фрагмент, который содержит CDR легкой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 LC, CDR2 LC и CDR3 LC). В нескольких вариантах осуществления связывающий CD19 фрагмент дополнительно содержит CDR тяжелой цепи, содержащую первую, вторую и третью определяющие комплементарность области (соответственно CDR1 HC, CDR2 HC и CDR3 HC). В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 53. В нескольких вариантах осуществления CDR1 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 53. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 54. В нескольких вариантах осуществления CDR2 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 54. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит последовательность с SEQ ID NO: 55. В нескольких вариантах осуществления CDR3 LC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 55. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 56. В нескольких вариантах осуществления CDR1 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 56. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 57. В нескольких вариантах осуществления CDR2 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 57. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит последовательность с SEQ ID NO: 58. В нескольких вариантах осуществления CDR3 HC содержит аминокислотную последовательность, гомологичную на по меньшей мере приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или приблизительно 98% последовательности с SEQ NO: 58.

[00154] В уровне техники известны дополнительные связывающие CD19 фрагменты, такие как фрагменты, раскрытые, например, в патенте США № 8399645, публикации патента США № 2018/0153977, публикации патента США № 2014/0271635, публикации патента США № 2018/0251514 и публикации патента США № 2018/0312588, каждая из которых полностью включена в данный документ посредством ссылки.

Домены групп рецепторов нстественных киллеров, которые связывают опухолевые лиганды

[00155] В нескольких вариантах осуществления сконструированные иммунные клетки, такие как NK-клетки, используются в связи с их способностью распознавать и уничтожать опухолевые клетки. Например, сконструированная NK-клетка может включать CD19-направленный химерный рецептор или нуклеиновую кислоту, кодирующую указанный химерный рецептор. NK-клетки экспрессируют как ингибирующие, так и активирующие рецепторы на поверхности клетки. Ингибирующие рецепторы связывают собственные молекулы организма, экспрессируемые на поверхности здоровых клеток (тем самым предотвращая иммунные ответы против «собственных» клеток), в то время как активирующие рецепторы связывают лиганды, экспрессируемые на аномальных клетках, таких как опухолевые клетки. Когда баланс между активацией ингибирующих и активирующих рецепторов смещается в пользу активирующих рецепторов, происходит активация NK-клеток, и клетки-мишени (например, опухолевые) лизируются.

[00156] Представитель D группы 2 рецепторов естественных киллеров (NKG2D) представляет собой активирующий рецептор NK-клетки, который распознает множество лигандов, экспрессируемых на клетках. Поверхностная экспрессия различных лигандов NKG2D обычно низкая в здоровых клетках, но активируется, например, при злокачественной трансформации. Неограничивающие примеры лигандов, распознаваемых NKG2D, включают без ограничения MICA, MICB, ULBP1, ULBP2, ULBP3, ULBP4, ULBP5 и ULBP6, а также другие молекулы, экспрессируемые на клетках-мишенях, которые контролируют цитолитическую или цитотоксическую функцию NK-клеток. В нескольких вариантах осуществления Т-клетки сконструированы с возможностью экспрессии внеклеточного домена, который связывается с одним или более опухолевыми лигандами и активирует Т-лимфоциты. Например, в нескольких вариантах осуществления Т-клетки сконструированы с возможностью экспрессии рецептора NKG2D в качестве связывающего/активирующего фрагмента. В нескольких вариантах осуществления сконструированные клетки, раскрытые в данном документе, сконструированы с возможностью экспрессии другого представителя семейства NKG2, например NKG2A, NKG2C и/или NKG2E. В некоторых вариантах осуществления сконструированы комбинации таких рецепторов. Более того, в нескольких вариантах осуществления экспрессируются другие рецепторы, такие как иммуноглобулиноподобные рецепторы клеток-киллеров (KIR).

[00157] В нескольких вариантах осуществления клетки сконструированы с возможностью экспрессии цитотоксического рецепторного комплекса, содержащего полноразмерный NKG2D в качестве внеклеточного компонента для распознавания лигандов на поверхности опухолевых клеток (например, клеток печени). В одном варианте осуществления полноразмерный NKG2D характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 27. В нескольких вариантах осуществления полноразмерный NKG2D или его функциональный фрагмент представляет собой NKG2D человека.

[00158] В нескольких вариантах осуществления клетки сконструированы с возможностью экспрессии цитотоксического рецепторного комплекса, содержащего функциональный фрагмент NKG2D в качестве внеклеточного компонента для распознавания лигандов на поверхности опухолевых клеток или других пораженных клеток. В одном варианте осуществления функциональный фрагмент NKG2D характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 25. В нескольких вариантах осуществления фрагмент NKG2D на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95% гомологичен полноразмерному NKG2D дикого типа. В нескольких вариантах осуществления фрагмент может предусматривать одну или более дополнительных мутаций в SEQ ID NO: 25, но сохраняет или, в некоторых вариантах осуществления, обладает усиленной лиганд-связывающей функцией. В нескольких вариантах осуществления функциональный фрагмент NKG2D содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 26. В нескольких вариантах осуществления фрагмент NKG2D предусмотрен в виде димера, тримера или в другом конкатамерном формате, при этом такие варианты осуществления предусматривают повышенную лиганд-связывающую активность. В нескольких вариантах осуществления последовательность, кодирующая фрагмент NKG2D, является необязательно полностью или частично кодон-оптимизированной. В одном варианте осуществления последовательность, кодирующая кодон-оптимизированный фрагмент NKG2D, содержит последовательность с SEQ ID NO: 28. Предпочтительно, в соответствии с несколькими вариантами осуществления функциональный фрагмент лишен своих природных трансмембранных или внутриклеточных доменов, но сохраняет свою способность связывать лиганды NKG2D, а также трансдуцировать сигналы активации при связывании лиганда. Дополнительным преимуществом таких фрагментов является то, что для локализации NKG2D на клеточной мембране не требуется экспрессия DAP10. Таким образом, в нескольких вариантах осуществления цитотоксический рецепторный комплекс, кодируемый раскрытыми в данном документе полипептидами, не содержит DAP10. В нескольких вариантах осуществления иммунные клетки, такие как NK- или Т-клетки, сконструированы с возможностью экспрессии одного или более химерных рецепторов, целенаправленно воздействующих на CD19 и лиганд NGG2D. Такие клетки в нескольких вариантах осуществления также совместно экспрессируют mbIL15.

[00159] В нескольких вариантах осуществления цитотоксические рецепторные комплексы сконфигурированы с возможностью димеризации. Димеризация может включать гомодимеры или гетеродимеры, в зависимости от варианта осуществления. В нескольких вариантах осуществления димеризация приводит к улучшению распознаванию лиганда цитотоксическими рецепторными комплексами (и, следовательно, NK-клетками, экспрессирующими рецептор), что приводит к снижению (или отсутствию) нежелательных токсических эффектов. В нескольких вариантах осуществления в цитотоксических рецепторных комплексах применяют внутренние димеры или повторы одной или более компонентных субъединиц. Например, в нескольких вариантах осуществления цитотоксические рецепторные комплексы могут необязательно содержать первый внеклеточный домен NKG2D, связанный со вторым внеклеточным доменом NKG2D, и трансмембранную/сигнальную область (или отдельную трансмембранную область вместе с отдельной сигнальной областью).

[00160] В нескольких вариантах осуществления различные домены/субдомены разделены линкером, например используют линкер GS3 (SEQ ID NO: 15 и 16, нуклеотид и белок, соответственно) (или линкер GSn). Другие линкеры, применяемые в соответствии с различными вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, включают без ограничения линкеры, кодируемые последовательностями с SEQ ID NO: 17, 19, 21 или 23. Это обеспечивает возможность разделения различных составляющих частей рецепторного комплекса вдоль полинуклеотида, что может повысить экспрессию, стабильность и/или функциональность рецепторного комплекса.

Цитотоксический сигнальный комплекс

[00161] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит цитотоксический сигнальный комплекс. Как раскрывается в данном документе, в соответствии с несколькими вариантами осуществления, предусмотренные цитотоксические рецепторные комплексы содержат один или более трансмембранных и/или внутриклеточных доменов, которые инициируют цитотоксические сигнальные каскады при связывании внеклеточного домена(доменов) с лигандами на поверхности клеток-мишеней. Определенные варианты осуществления, раскрытые в данном документе, относятся к конструкциям химерного антигенного рецептора, где домен, целенаправленно воздействующий на опухоль (или CD19-направленный домен), связан с цитотоксическим сигнальным комплексом.

[00162] В нескольких вариантах осуществления цитотоксический сигнальный комплекс содержит по меньшей мере один трансмембранный домен, по меньшей мере один костимулирующий домен и/или по меньшей мере один сигнальный домен. В некоторых вариантах осуществления более чем одна составляющая часть составляет данный домен, например костимулирующий домен может содержать два субдомена. Более того, в некоторых вариантах осуществления домен может выполнять несколько функций, например трансмембранный домен также может выполнять функцию передачи сигналов.

Трансмембранные домены

[00163] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит трансмембранный домен. Некоторые варианты осуществления включают трансмембранный домен из NKG2D или другого трансмембранного белка. В нескольких вариантах осуществления, в которых применяют трансмембранный домен, используемая часть трансмембранного белка сохраняет по меньшей мере часть своего нормального трансмембранного домена.

[00164] Однако в нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит по меньшей мере часть CD8, трансмембранного гликопротеина, обычно экспрессируемого как на Т-клетках, так и на NK-клетках. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит CD8α. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен упоминается как «шарнир». В нескольких вариантах осуществления «шарнир» CD8α характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 1. В нескольких вариантах осуществления шарнир CD8α является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным CD8α, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 1. В нескольких вариантах осуществления «шарнир» CD8α содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 2. В нескольких вариантах осуществления CD8α может быть усеченным или модифицированным таким образом, что он на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичен последовательности с SEQ ID NO: 2.

[00165] В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранную область CD8α. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен CD8α характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 3. В нескольких вариантах осуществления шарнир CD8α является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным CD8α, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 3. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен CD8α содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 4. В нескольких вариантах осуществления шарнир CD8α является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным CD8α, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 4.

[00166] В совокупности в нескольких вариантах осуществления шарнирный/трансмембранный комплекс CD8 кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 13. В нескольких вариантах осуществления шарнирный/трансмембранный комплекс CD8 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным шарнирному/трансмембранному комплексу CD8, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 13. В нескольких вариантах осуществления шарнирный/трансмембранный комплекс CD8 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 14. В нескольких вариантах осуществления шарнир шарнирного/трансмембранного комплекса CD8 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным шарнирному/трансмембранному комплексу CD8, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 14.

[00167] В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD28 или его фрагмент. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен CD28 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 30. В нескольких вариантах осуществления шарнир комплекса трансмембранного домена CD28 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным трансмембранному домену CD28, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 30.

Костимулирующие домены

[00168] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит костимулирующий домен. В дополнение к различным трансмембранным доменам и сигнальному домену (и комбинации трансмембранных/сигнальных доменов) в нескольких вариантах осуществления могут предусматриваться дополнительные коактивирующие молекулы. Ими могут являться определенные молекулы, которые, например, дополнительно усиливают активность иммунных клеток. В некоторых вариантах осуществления можно применять цитокины. Например, в качестве неограничивающих примеров применяют определенные интерлейкины, такие как IL-2 и/или IL-15. В некоторых вариантах осуществления иммунные клетки для терапии сконструированы с возможностью экспрессии таких молекул в секретируемой форме. В дополнительных вариантах осуществления такие костимулирующие домены сконструированы так, чтобы они являлись мембраносвязанными, действуя как аутокринные стимулирующие молекулы (или даже как паракринные стимуляторы доставляемых соседних клеток). В нескольких вариантах осуществления NK-клетки сконструированы с возможностью экспрессии связанного с мембранной интерлейкина 15 (mbIL15). В таких вариантах осуществления экспрессия mbIL15 на NK усиливает цитотоксические эффекты сконструированной NK-клетки за счет увеличения пролиферации и/или продолжительности сохранения жизнеспособности NK-клеток. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 обладает последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 11. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 может быть усеченным или модифицированным таким образом, что он на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичен последовательности с SEQ ID NO: 11. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 12. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным mbIL15, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 12.

[00169] В некоторых вариантах осуществления CD19-направленный химерный рецептор или сконструированный цитотоксический рецепторный комплекс кодируется полинуклеотидом, который включает один или более сайтов расщепления цитозольной протеазой, например сайт расщепления T2A, сайт расщепления P2A, сайт расщепления E2A и/или сайт расщепления F2A. Такие сайты распознаются и расщепляются цитозольной протеазой, что может привести к разделению (и отдельной экспрессии) различных составляющих частей рецептора, кодируемого полинуклеотидом. В результате, в зависимости от варианта осуществления, различные составляющие части CD19-направленного химерного рецептора или сконструированного цитотоксического рецепторного комплекса можно доставлять в NK-клетку или Т-клетку в одном векторе или с помощью нескольких векторов. Таким образом, как схематично показано на фигурах, конструкция может кодироваться одним полинуклеотидом, но также включать сайт расщепления, так что нижележащие элементы конструкций экспрессируются клетками как отдельный белок (как в случае с IL-15 в некоторых вариантах осуществления). В нескольких вариантах осуществления используют сайт расщепления Т2А. В нескольких вариантах осуществления сайт расщепления T2A характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 9. В нескольких вариантах осуществления сайт расщепления T2A может быть усеченным или модифицированным таким образом, что он на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичен последовательности с SEQ ID NO: 9. В нескольких вариантах осуществления сайт расщепления T2A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 10. В нескольких вариантах осуществления сайт расщепления T2A является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным сайту расщепления T2A, обладающему последовательностью с SEQ ID NO: 10.

Сигнальные домены

[00170] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит сигнальный домен. Например, иммунные клетки, сконструированные в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, могут содержать по меньшей мере одну субъединицу рецепторного комплекса Т-клеток CD3 (или его фрагмент). В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен содержит дзета-субъединицу CD3. В нескольких вариантах осуществления CD3-дзета кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 7. В нескольких вариантах осуществления CD3-дзета может являться усеченной или модифицированной таким образом, что она на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологична CD3-дзета, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 7. В нескольких вариантах осуществления домен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 8. В нескольких вариантах осуществления домен CD3-дзета является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным домену CD3-дзета, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 8.

[00171] В нескольких вариантах осуществления неожиданно усиление передачи сигналов достигается за счет применения множества сигнальных доменов, активности которых проявляются синергетически. Например, в нескольких вариантах осуществления сигнальный домен дополнительно содержит домен OX40. В нескольких вариантах осуществления домен OX40 представляет собой внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен OX40 характеризуется последовательностью нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 5. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен OX40 может быть усеченным или модифицированным таким образом, что он на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичен OX40, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 5. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен OX40 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 16. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен OX40 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным внутриклеточному сигнальному домену OX40, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 6. В нескольких вариантах осуществления OX40 применяют в качестве единственного трансмембранного/сигнального домена в конструкции, однако в нескольких вариантах осуществления OX40 можно применять с одним или более другими доменами. Например, в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации OX40 и CD3-дзета. В качестве дополнительного примера в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации CD28, OX40, 4-1BB и/или CD3-дзета.

[00172] В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен содержит домен 4-1BB. В нескольких вариантах осуществления домен 4-1BB представляет собой внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен 4-1BB содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 29. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен 4-1BB является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным внутриклеточному сигнальному домену 4-1BB, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 29. В нескольких вариантах осуществления 4-1BB применяют в качестве единственного трансмембранного/сигнального домена в конструкции, однако в нескольких вариантах осуществления 4-1BB можно применять с одним или более другими доменами. Например, в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации 4-1BB и CD3-дзета. В качестве дополнительного примера в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации CD28, OX40, 4-1BB и/или CD3-дзета.

[00173] В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен содержит домен CD28. В нескольких вариантах осуществления домен CD28 представляет собой внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен CD28 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 31. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен CD28 является усеченным или модифицированным и на по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% гомологичным внутриклеточному сигнальному домену CD28, характеризующемуся последовательностью с SEQ ID NO: 31. В нескольких вариантах осуществления CD28 применяют в качестве единственного трансмембранного/сигнального домена в конструкции, однако в нескольких вариантах осуществления CD28 можно применять с одним или более другими доменами. Например, в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации CD28 и CD3-дзета. В качестве дополнительного примера в некоторых вариантах осуществления применяют комбинации CD28, OX40, 4-1BB и/или CD3-дзета.

Конструкции цитотоксического рецепторного комплекса

[00174] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к химерному рецептору, такому как CD19-направленный химерный рецептор, который содержит цитотоксический рецепторный комплекс или конструкцию цитотоксического рецепторного комплекса. В соответствии с вышеизложенным, в данном документе предусмотрены различные цитотоксические рецепторные комплексы (также называемые цитотоксическими рецепторами). Экспрессия данных комплексов в иммунных клетках, таких как Т-клетки и/или NK-клетки, позволяет целенаправленно воздействовать на определенные клетки-мишени, такие как раковые клетки, и разрушать их. Неограничивающие примеры таких цитотоксических рецепторных комплексов более подробно обсуждаются ниже.

Конструкции цитотоксического рецепторного комплекса химерного антигенного рецептора

[00175] В нескольких вариантах осуществления в данном документе предусмотрены различные цитотоксические рецепторные комплексы (также называемые цитотоксическими рецепторами) с общей структурой химерного антигенного рецептора. На фигурах 1A, 1B и 2 схематически изображены неограничивающие схемы конструкций, которые включают фрагмент к CD19, который связывается с опухолевыми антигенами или опухолеассоциированными антигенами, экспрессируемыми на поверхности раковых клеток, и активирует сконструированные клетки, экспрессирующие химерный антигенный рецептор. Как показано на фигурах, несколько вариантов осуществления химерного рецептора включают фрагмент к CD19, шарнирный домен CD8a, SH-домен Ig4 (или шарнир), трансмембранный домен CD8a, трансмембранный домен CD28, домен OX40, домен 4-1BB, домен CD28, домен или субдомен ITAM CD3ζ, домен CD3-дзета, домен NKp80, IC-домен CD16, сайт расщепления 2A и домен связанного с мембраной IL-15 (хотя, как указано выше, в нескольких вариантах осуществления применяют растворимый IL-15). В нескольких вариантах осуществления функции связывания и активации, как сконструировано, выполняются отдельными доменами. Несколько вариантов осуществления относятся к комплексам с более чем одним фрагментом к CD19 или другим связывающим/активирующим фрагментом. В некоторых вариантах осуществления связывающий/активирующий фрагмент целенаправленно воздействует на другие маркеры, помимо CD19, такие как мишень, представляющая собой раковый антиген, описанная в данном документе. В нескольких вариантах осуществления общая структура конструкции химерного антигенного рецептора включает шарнирный и/или трансмембранный домен. В некоторых вариантах осуществления они могут быть выполнены посредством одного домена, или в нескольких вариантах осуществления можно применять множество субдоменов. Рецепторный комплекс дополнительно содержит сигнальный домен, который трансдуцирует сигналы после связывания хоминг-фрагмента с клеткой-мишенью, что в конечном итоге приводит к проявлению цитотоксических эффектов в отношении клетки-мишени. В нескольких вариантах осуществления комплекс дополнительно содержит костимулирующий домен, который действует синергически, в нескольких вариантах осуществления, с усилением функции сигнального домена. Экспрессия данных комплексов в иммунных клетках, таких как Т-клетки и/или NK-клетки, позволяет целенаправленно воздействовать на определенные клетки-мишени, такие как раковые клетки, которые экспрессируют CD19, и разрушать их. Некоторые такие рецепторные комплексы содержат внеклеточный домен, содержащий фрагмент к CD19 или связывающий CD19 фрагмент, который связывает CD19 на поверхности клеток-мишеней и активирует сконструированные клетки. Субдомен ITAM CD3-дзета может действовать совместно в качестве сигнального домена. Домен IL-15, например домен mbIL-15, может действовать в качестве костимулирующего домена. Домен IL-15, например домен mbIL-15, может придавать иммунным клеткам (например, NK- или Т-клеткам), экспрессирующим его, особую эффективность против опухолевых клеток-мишеней. Следует принимать во внимание, что домен IL-15, такой как домен mbIL-15, можно, в соответствии с несколькими вариантами осуществления, кодировать в отдельной конструкции. Дополнительно, каждый из компонентов можно кодировать в одной или более отдельных конструкциях. В некоторых вариантах осуществления цитотоксический рецептор или CD19-направленный рецептор содержит последовательность аминокислот, которая на по меньшей мере 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% или в пределах диапазона, определяемого любыми двумя из вышеупомянутых процентных значений, идентична последовательности с SEQ ID NO: 34.

[00176] В одном варианте осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 1A, CD19-1a). Полинуклеотид содержит фрагмент у CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00177] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD8TM/OX40/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1A, CD19-1b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00178] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/Ig4SH-CD8TM/4-1BB/CD3-дзета (см. фигуру 1A, CD19-2a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00179] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/ Ig4SH-CD8TM/4-1BB/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1A, CD19-2b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00180] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD28TM/CD28/CD3-дзета (см. фигуру 1A, CD19-3a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, домен CD28 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00181] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD28TM/CD28/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1A, CD19-3b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, домен CD28, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00182] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/Ig4SH-CD28TM/CD28/CD3-дзета (см. фигуру 1A, CD19-4a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD28, домен CD28 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00183] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/Ig4SH-CD28TM/CD28/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1A, CD19-4b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD28, домен CD28, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00184] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/Ig4SH-CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 2A, CD19-5a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD8a, домен OX40 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00185] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/Ig4SH-CD8TM/OX40/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 2A, CD19-5b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, SH-домен Ig4, трансмембранный домен CD8a, домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00186] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD3αTM/CD28/CD3-дзета (см. фигуру 1B, CD19-6a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD3α, домен CD28 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00187] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD3αTM/CD28/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1B, CD19-6b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD3α, домен CD28, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00188] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD28TM/CD28/4-1BB/CD3-дзета (см. фигуру 1B, CD19-7a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, домен CD28, домен 4-1BB и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00189] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-CD28TM/CD28/4-1BB/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 1B, CD19-7b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, домен CD28, домен 4-1BB, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00190] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD8-альфа/4-1BB/CD3-дзета (см. фигуру 2, CD19-8a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00191] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD8-альфа/4-1BB/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 2, CD19-8b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00192] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/4-1BB/CD3-дзета (см. фигуру 2, CD19-39_5a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD3, домен 4-1BB и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00193] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/4-1BB/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 2, CD19-39_5b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00194] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/4-1BB/NKp80 (см. фигуру 2, CD19-39_6a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD3, домен 4-1BB и домен NKp80, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00195] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/4-1BB/NKp80/2A/mIL-15 (см. фигуру 2, CD19-39_6b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB, домен NKp80, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00196] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/внутриклеточный домен CD16/4-1BB (см. фигуру 2, CD19-39_10a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD3, внутриклеточный домен CD16 и домен 4-1BB, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00197] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8-альфа/TM CD3/CD16/4-1BB/2A/mIL-15 (см. фигуру 2, CD19-39_10b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, внутриклеточный домен CD16, домен 4-1BB, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00198] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/внеклеточный домен NKG2D/шарнир CD8-CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 2, CD19/NKG2D-1a). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, внеклеточный домен NKG2D (либо полноразмерный, либо фрагментный), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40 и домен CD3-дзета, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00199] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/EC домен NKG2D/шарнир CD8-CD8TM/OX40/CD3-дзета/2A/mIL-15 (см. фигуру 2, CD19/NKG2D-1b). Полинуклеотид содержит фрагмент к CD19, внеклеточный домен NKG2D (либо полноразмерный, либо фрагментный), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе, или содержит аминокислотную последовательность, полученную из комбинации последовательностей, раскрытых в данном документе. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержит последовательность в соответствии с одной или более последовательностями с SEQ ID NO, описанными в данном документе, как, например, такими, которые включены в данный документ в качестве примеров составляющих частей. В нескольких вариантах осуществления кодирующая последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность содержат последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью, полученной в результате комбинации одной или более последовательностей с SEQ ID NO, описанных в данном документе.

[00200] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/4-1BB/CD3-дзета/mbIL15 (см. фигуру 3A, NK19). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен 4-1BB и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 85. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 85. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 86. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 86. Предусмотрена схематически изображенная и используемая в нескольких вариантах осуществления конструкция NK19, в которой отсутствует домен mbIL15 (фигура 3A, вариант NK19)

[00201] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3A, NK19-1a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3A, NK19-1b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 59. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 59. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 60. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 60. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00202] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD28TM/CD28/CD3-дзета (см. фигуру 3A, NK19-2a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, сигнальный домен CD28 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3A, NK19-2b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD28, сигнальный домен CD28, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 61. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 61. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 62. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 62. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00203] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/ICOS/CD3-дзета (см. фигуру 3A, NK19-3a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен индуцибельного костимулятора (ICOS) и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3A, NK19-3b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен индуцибельного костимулятора (ICOS), домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 63. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 63. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 64. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 64. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00204] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD28/4-1BB/CD3-дзета (см. фигуру 3A, NK19-4a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD28, сигнальный домен 4-1BB и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3A, NK19-4b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD28, сигнальный домен 4-1BB, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 65. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 65. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 66. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 66. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00205] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/NKG2DTM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3B, NK19-5a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен NKG2D, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3B, NK19-5b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен NKG2D, сигнальный домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 67. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 67. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 68. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 68. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00206] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD40/CD3-дзета (см. фигуру 3B, NK19-6a). Полинуклеотид содержит вариабельную область тяжелой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3B, NK19-6b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит вариабельную область тяжелой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 69. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 69. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 70. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 70. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00207] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/OX40/CD3-дзета/2A/EGFRt (см. фигуру 3B, NK19-7a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и усеченную версию рецептора эпидермального фактора роста (EGFRt), или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3B, NK19-7b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A, усеченную версию рецептора эпидермального фактора роста (EGFRt), дополнительный сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 71. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 71. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 72. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 72. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00208] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD40/CD3-дзета (см. фигуру 3B, NK19-8a). Полинуклеотид содержит вариабельную область легкой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3B, NK19-7b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит вариабельную область легкой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 73. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 73. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 74. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 74. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00209] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD40/CD3-дзета (см. фигуру 3B, NK19-8a). Полинуклеотид содержит вариабельную область легкой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3B, NK19-7b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит вариабельную область легкой цепи scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 73. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 73. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 74. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 74. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00210] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD27/CD3-дзета (см. фигуру 3C, NK19-9a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD27 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3C, NK19-9b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD27, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 75. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 75. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 76. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 76. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00211] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD70/CD3-дзета (см. фигуру 3C, NK19-10a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD70 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3C, NK19-10b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD70, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 77. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 77. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 78. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 78. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00212] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD161/CD3-дзета (см. фигуру 3C, NK19-11a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD161 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3C, NK19-11b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD161, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 79. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 79. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 80. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 80. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00213] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD40L/CD3-дзета (см. фигуру 3C, NK19-12a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40L и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3C, NK19-12b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD40L, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 81. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 81. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 82. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 82. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00214] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD44/CD3-дзета (см. фигуру 3C, NK19-13). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD44 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3C, NK19-13b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен CD44, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 83. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 83. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 84. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 84. В нескольких вариантах осуществления scFv к CD19 не содержит метку Flag.

[00215] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3D, NK19H-1a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H1), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3D, NK19H-1b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H1), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 160. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 160. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 161. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 161.

[00216] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3D, NK19H-2a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H1), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3D, NK19H-2b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован, содержит вторую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H1) и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 162. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 162. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 163. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 162.

[00217] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3D, NK19H-3a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H1), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3D, NK19H-3b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H1), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 164. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 164. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 165. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 165.

[00218] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3D, NK19H-4a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3D, NK19H-4b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 166. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 166. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 167. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 167.

[00219] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NK19H-5a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NK19H-5b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 168. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 168. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 169. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 169.

[00220] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NK19H-6a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NK19H-6b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H2), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 170. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 170. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 171. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 171.

[00221] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NK19H-7a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L1/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NK19H-7b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L1/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A, усеченную версию рецептора эпидермального фактора роста (EGFRt), дополнительный сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 172. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 172. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 173. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 174.

[00222] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NK19H-8a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L2/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NKH19-8b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L2/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 174. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 174. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 175. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 175.

[00223] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NK19H-9a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L3/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NKH19-9b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L3/H3), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 176. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 176. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 177. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 177.

[00224] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3E, NKH19-10a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3E, NK19H-10b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 178. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 178. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 179. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 179.

[00225] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3F, NK19H-11a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3F, NK19H-11b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 180. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 180. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 181. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 181.

[00226] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3F NK19H-12a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3F, NK19H-12b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H4), и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 182. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 182. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 183. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 183.

[00227] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий химерный антигенный рецептор, который содержит гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19 и несколько костимулирующих доменов. Например, схематическая структура представляет собой фрагмент к CD19/трансмембранный домен/костимулирующий домен 1/костимулирующий домен 2/костимулирующий домен 3/сигнальный домен. Костимулирующие домены различаются по порядку в зависимости от варианта осуществления. Например, в нескольких вариантах осуществления костимулирующие домены («CSD») можно располагать как: CSD1/CSD2, CSD2/CSD1, CSD1/CSD2/CSD3, CSD1/CSD2/CSD3, CSD3/CSD2/CSD1 и т. д. В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD44/OX40/CD27/CD3-дзета (см. фигуру 3F, NK19H-13a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3F, NK19H-13b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них.

[00228] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3G, NK19H-NF-1a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3G, NK19H-NF-1b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 184. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 184. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 185. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 185.

[00229] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3G, NK19H—NF-2a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3G, NK19H-NF-2b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 186. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 186. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 187. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 187.

[00230] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3G, NK19H-NF-3a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3G, NK19H-NF-3b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и первую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H1), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 188. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 188. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 189. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 189.

[00231] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3G, NK19H-NF-4a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3G, NK19H-NF-4b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 190. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 190. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 191. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 191.

[00232] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3H, NK19H-NF-5a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NK19H-NF-5b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 192. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 192. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 193. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 193.

[00233] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3H, NK19H-NF-6a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NK19H-NF-6b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и вторую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H2), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 194. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 194. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 195. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 195.

[00234] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3G, NK19H-NF-7a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L1/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NK19H-NF-7b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L1/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 196. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 196. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 197. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 197.

[00235] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3H, NK19H-NF-8a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L2/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NKH19-NF-8b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит вариабельную область легкой цепи scFv к CD19, которая была гуманизирована, и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L2/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 198. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 198. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 199. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 199.

[00236] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3H, NK19H-NF-9a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L3/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NKH19-NF-9b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и третью гуманизированную тяжелую цепь (L3/H3), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 200. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 200. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 201. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 201.

[00237] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3H, NKH19-NF-10a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3H, NK19H-NF-10b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит первую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L1/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 202. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 202. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 203. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 203.

[00238] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3I, NK19H-NF-11a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3I, NK19H-NF-11b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит вторую гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L2/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 204. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 204. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 205. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 205.

[00239] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент к CD19/шарнир CD8/CD8TM/OX40/CD3-дзета (см. фигуру 3I NK19H-12a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3I, NK19H-NF-12b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит третью гуманизированную легкую цепь и четвертую гуманизированную тяжелую цепь (L3/H4), шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, сигнальный домен OX40 и домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления данный рецепторный комплекс кодируется молекулой нуклеиновой кислоты, характеризующейся последовательностью с SEQ ID NO: 206. В нескольких вариантах осуществления последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая химерный антигенный рецептор NK19, содержит последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 206. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 207. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор NK19 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 94%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичностью, гомологией и/или функциональной эквивалентностью последовательностей с последовательностью с SEQ ID NO: 207.

[00240] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий химерный антигенный рецептор, который содержит гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19 и несколько костимулирующих доменов. Например, схематическая структура представляет собой фрагмент к CD19/трансмембранный домен/костимулирующий домен 1/костимулирующий домен 2/костимулирующий домен 3/сигнальный домен. Костимулирующие домены различаются по порядку в зависимости от варианта осуществления. Например, в нескольких вариантах осуществления костимулирующие домены («CSD») можно располагать как: CSD1/CSD2, CSD2/CSD1, CSD1/CSD2/CSD3, CSD1/CSD2/CSD3, CSD3/CSD2/CSD1 и т. д. В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD44/OX40/CD27/CD3-дзета (см. фигуру 3I, NK19H-NF-13a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3I, NK19H-NF-13b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них.

[00241] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий химерный антигенный рецептор, который содержит гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19 и несколько костимулирующих доменов. Например, схематическая структура представляет собой фрагмент к CD19/трансмембранный домен/костимулирующий домен 1/костимулирующий домен 2/костимулирующий домен 3/сигнальный домен. Костимулирующие домены различаются по порядку в зависимости от варианта осуществления. Например, в нескольких вариантах осуществления костимулирующие домены («CSD») можно располагать как: CSD1/CSD2, CSD2/CSD1, CSD1/CSD2/CSD3, CSD1/CSD2/CSD3, CSD3/CSD2/CSD1 и т. д. В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий комплекс химерного антигенного рецептора, представляющий собой гуманизированный фрагмент с меткой Flag к CD19/шарнир CD8/CD8aTM/CD44/OX40/CD27/CD3-дзета (см. фигуру 3F, NK19H-13a). Полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27 и домен CD3-дзета или состоит из них. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор дополнительно содержит mbIL15 (см. фигуру 3F, NK19H-13b). В таких вариантах осуществления полинуклеотид содержит scFv к CD19, который был гуманизирован и содержит метку Flag, шарнир CD8a, трансмембранный домен CD8a, костимулирующий домен CD44, костимулирующий домен OX40, костимулирующий домен CD27, домен CD3-дзета, сайт расщепления 2A и домен mbIL-15, описанные в данном документе, или состоит из них.

[00242] Следует принимать во внимание, что для любой конструкции рецептора, описанной в данном документе, может возникать определенная вариабельность последовательности, удлинения и/или усечения раскрытых последовательностей при связывании последовательностей в результате, например, облегчения или обеспечения эффективности клонирования (например, для создания сайта рестрикции).

Способы лечения

[00243] Некоторые варианты осуществления относятся к способу лечения, уменьшения интенсивности, ингибирования или предупреждения рака с помощью клетки или иммунной клетки, содержащей химерный рецептор, такой как CD19-направленный химерный рецептор. В некоторых вариантах осуществления способ включает лечение или предупреждение рака. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение терапевтически эффективного количества иммунных клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный рецептор, описанный в данном документе. Примеры типов рака, которые можно лечить как таковые, описаны данном документе.

[00244] В определенных вариантах осуществления лечение субъекта с использованием генетически сконструированной клетки(клеток), описанной в данном документе, обеспечивает достижение одного, двух, трех, четырех или более из следующих эффектов, включая, например: (i) снижение или облегчение тяжести заболевания или связанного с ним симптома; (ii) снижение продолжительности симптома, связанного с заболеванием; (iii) защиту от прогрессирования заболевания или связанного с ним симптома; (iv) регресс заболевания или связанного с ним симптома; (v) защиту от развития или появления симптома, связанного с заболеванием; (vi) защиту от повторного появления симптома, связанного с заболеванием; (vii) снижение частоты госпитализации субъекта; (viii) снижение продолжительности госпитализации; (ix) увеличение выживания субъекта с заболеванием; (x) уменьшение количества симптомов, связанных с заболеванием; (xi) усиление, улучшение, поддержка, дополнение или увеличение профилактического или терапевтического эффекта(эффектов) другой терапии. Введение можно осуществлять различными путями, включая без ограничения внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутримышечную, внутрипеченочную, внутрибрюшинную и/или местную доставку в пораженную ткань.

Введение и доза

[00245] Дополнительно в данном документе предусмотрены способы лечения субъекта, имеющего рак, включающие введение субъекту композиции, содержащей иммунные клетки (такие как NK- и/или Т-клетки), сконструированные с возможностью экспрессии комплекса цитотоксического рецептора, раскрытого в данном документе. Например, некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к применению CD19-направленного химерного рецептора или к применению клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный рецептор, для лечения пациента, имеющего рак. Также предусмотрены пути применения таких сконструированных иммунных клеток для лечения рака.

[00246] В определенных вариантах осуществления лечение субъекта с использованием генетически сконструированной клетки(клеток), описанной в данном документе, обеспечивает достижение одного, двух, трех, четырех или более из следующих эффектов, включая, например: (i) снижение или облегчение тяжести заболевания или связанного с ним симптома; (ii) снижение продолжительности симптома, связанного с заболеванием; (iii) защиту от прогрессирования заболевания или связанного с ним симптома; (iv) регресс заболевания или связанного с ним симптома; (v) защиту от развития или появления симптома, связанного с заболеванием; (vi) защиту от повторного появления симптома, связанного с заболеванием; (vii) снижение частоты госпитализации субъекта; (viii) снижение продолжительности госпитализации; (ix) увеличение выживания субъекта с заболеванием; (x) уменьшение количества симптомов, связанных с заболеванием; (xi) усиление, улучшение, поддержка, дополнение или увеличение профилактического или терапевтического эффекта(эффектов) другой терапии. Каждое из данных сравнений приводится по отношению, например, к другой терапии заболевания, которая включает клеточную иммунотерапию заболевания с использованием клеток, которые не экспрессируют раскрытые в данном документе конструкции.

[00247] Введение можно осуществлять различными путями, включая без ограничения внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутримышечную, внутрипеченочную, внутрибрюшинную и/или местную доставку в пораженную ткань. Дозы иммунных клеток, таких как NK- и/или Т-клетки, можно легко определить для данного субъекта на основании его массы тела, типа заболевания и болезненного состояния, а также требуемой агрессивности лечения, но в зависимости от вариантов осуществления они находятся в диапазоне от приблизительно 10⁵ клеток на кг до приблизительно 10¹² клеток на кг (например, 10⁵-10⁷, 10⁷-10¹⁰, 10¹⁰-10¹² и в перекрывающихся диапазонах данных значений). В одном варианте осуществления применяют схему повышения дозы. В нескольких вариантах осуществления иммунные клетки, такие как NK- и/или Т-клетки, вводят в диапазоне доз, например, от приблизительно 1 x 10⁶ клеток/кг до приблизительно 1 x 10⁸ клеток/кг. В нескольких вариантах осуществления доза находится в диапазоне от приблизительно 2 x 10⁵ клеток/кг до приблизительно 2x10⁸ клеток/кг, включая приблизительно 2 x 10⁶ и 2 x 10⁷ клеток/кг. В нескольких вариантах осуществления дозу определяют по максимальному количеству жизнеспособных сконструированных клеток во время дозирования. Например, в некоторых вариантах осуществления однократная доза содержит максимальное количество от приблизительно 2 x 10⁵ до приблизительно 2 x 10⁹ жизнеспособных сконструированных клеток, включая приблизительно 2 x 10⁶, приблизительно 2 x 10⁷ или приблизительно 2 x 10⁸ жизнеспособных сконструированных клеток. В зависимости от варианта осуществления можно лечить различные типы рака. В нескольких вариантах осуществления лечению подвергают гепатоцеллюлярную карциному. Дополнительные варианты осуществления, предусмотренные в данном документе, включают лечение или предупреждение следующих неограничивающих примеров типов рака, включая без ограничения острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), адренокортикальную карциному, саркому Капоши, лимфому, рак желудочно-кишечного тракта, рак червеобразного отростка, рак центральной нервной системы, базальноклеточную карциному, рак желчных протоков, рак мочевого пузыря, рак кости, опухоли головного мозга (в том числе без ограничения астроцитомы, опухоли спинного мозга, глиому ствола головного мозга, глиобластому, краниофарингиому, эпендимобластому, эпендимому, медуллобластому, медуллоэпителиому), рак молочной железы, опухоли бронхов, лимфому Беркитта, рак шейки матки, рак ободочной кишки, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хронический миелогенный лейкоз (CML), хронические миелопролиферативные заболевания, протоковую карциному, рак эндометрия, рак пищевода, рак желудка, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточный лейкоз, почечно-клеточный рак, лейкоз, рак полости рта, рак носоглотки, рак печени, рак легких (в том числе без ограничения немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) и мелкоклеточный рак легкого), рак поджелудочной железы, рак кишечника, лимфому, меланому, рак глаза, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак гипофиза, рак матки и рак влагалища.

[00248] В некоторых вариантах осуществления в данном документе также предусмотрены последовательности нуклеиновых кислот и аминокислот, которые характеризуются идентичностью или гомологией последовательностей, составляющими по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% (и находящимися в диапазонах данных значений) по сравнению с соответствующими последовательностями нуклеиновых кислот или аминокислот с SEQ ID NO: 1-207 (или комбинациями двух или более последовательностей с SEQ ID NO: 1-207), и которые также проявляют одну или более функций по сравнению с соответствующими последовательностями с SEQ ID NO: 1-207 (или комбинациями двух или более последовательностей с SEQ ID NO: 1-207), в том числе без ограничения (i) усиление пролиферации, (ii) усиление активации, (iii) усиление цитотоксической активности в отношении клеток, презентирующих лиганды, с которыми связываются NK-клетки, несущие рецепторы, кодируемые последовательностями нуклеиновых кислот и аминокислот, (iv) усиление хоминга в отношении опухолевых или инфицированных очагов, (v) снижение ненаправленного цитотоксического действия, (vi) усиление секреции иммуностимулирующих цитокинов и хемокинов (в том числе без ограничения IFNg, TNFa, IL-22, CCL3, CCL4 и CCL5), (vii) усиление способности стимулировать дополнительные врожденные и адаптивные иммунные ответы и (viii) их комбинации.

[00249] Дополнительно, в нескольких вариантах осуществления предусмотрены аминокислотные последовательности, которые соответствуют любой из нуклеиновых кислот, раскрытых в данном документе, с учетом вырожденности кода нуклеиновой кислоты. Более того, те последовательности (будь то последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность), которые отличаются от тех, которые явным образом раскрыты в данном документе, но имеют функциональное сходство или эквивалентность, как предполагается, также входят в объем настоящего изобретения. Вышеизложенное включает мутанты, усечения, замены или другие типы модификаций.

[00250] В нескольких вариантах осуществления полинуклеотиды, кодирующие раскрытые цитотоксические рецепторные комплексы или CD19-направленные химерные рецепторы, представляют собой mRNA. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой ДНК. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотид функционально связан с по меньшей мере одним регуляторным элементом экспрессии комплекса цитотоксического рецептора.

[00251] В соответствии с несколькими вариантами осуществления дополнительно предусмотрен вектор, содержащий полинуклеотид, кодирующий любой из полинуклеотидов, предусмотренных в данном документе, где полинуклеотиды необязательно функционально связаны по меньшей мере с одним регуляторным элементом экспрессии комплекса цитотоксического рецептора. В нескольких вариантах осуществления вектор представляет собой ретровирус.

[00252] Дополнительно в данном документе предусмотрены сконструированные иммунные клетки (такие как NK- и/или Т-клетки), содержащие полинуклеотид, вектор или цитотоксические рецепторные комплексы, раскрытые в данном документе. Дополнительно в данном документе предусмотрены композиции, содержащие смесь сконструированных иммунных клеток (таких как NK-клетки и/или сконструированные Т-клетки), причем каждая популяция содержит полинуклеотид, вектор или цитотоксические рецепторные комплексы, раскрытые в данном документе.

[00253] Дозы иммунных клеток, таких как NK-клетки или Т-клетки, можно легко определить для данного субъекта на основании его массы тела, типа заболевания и болезненного состояния, а также требуемой агрессивности лечения, но в зависимости от вариантов осуществления они находятся в диапазоне от приблизительно 10⁵ клеток на кг до приблизительно 10¹² клеток на кг (например, 10⁵-10⁷, 10⁷-10¹⁰, 10¹⁰-10¹² и в перекрывающихся диапазонах данных значений). В одном варианте осуществления применяют схему повышения дозы. В нескольких вариантах осуществления NK-клетки вводят в диапазоне доз, например, от приблизительно 1 x 10⁶ клеток/кг до приблизительно 1 x 10⁸ клеток/кг. В зависимости от варианта осуществления можно лечить различные типы рака или инфекционных заболеваний.

Типы рака

[00254] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к введению иммунных клеток, содержащих химерный рецептор, такой как CD19-направленный химерный рецептор, субъекту, имеющему рак. Различные варианты осуществления, предусмотренные в данном документе, включают лечение или предупреждение следующих неограничивающих примеров типов рака. Примеры рака включают ограничения острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), адренокортикальную карциному, саркому Капоши, лимфому, рак желудочно-кишечного тракта, рак червеобразного отростка, рак центральной нервной системы, базальноклеточную карциному, рак желчных протоков, рак мочевого пузыря, рак кости, опухоли головного мозга (в том числе без ограничения астроцитомы, опухоли спинного мозга, глиому ствола головного мозга, краниофарингиому, эпендимобластому, эпендимому, медуллобластому, медуллоэпителиому), рак молочной железы, опухоли бронхов, лимфому Беркитта, рак шейки матки, рак ободочной кишки, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хронический миелогенный лейкоз (CML), хронические миелопролиферативные заболевания, протоковую карциному, рак эндометрия, рак пищевода, рак желудка, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточный лейкоз, почечно-клеточный рак, лейкоз, рак полости рта, рак носоглотки, рак печени, рак легких (в том числе без ограничений, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) и мелкоклеточный рак легкого), рак поджелудочной железы, рак кишечника, лимфому, меланому, рак глаза, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак гипофиза, рак матки и рак влагалища.

Мишени, представляющие собой раковые антигены

[00255] Некоторые варианты осуществления описанных в данном документе композиций и способов относятся к иммунным клеткам, содержащим химерный рецептор, который направленно воздействует на раковый антиген. Неограничивающие примеры антигенов-мишеней включают: CD5, CD19; CD123; CD22; CD30; CD171; CS1 (также называемый CD2 подмножеством 1, CRACC, SLAMF7, CD319 и 19A24); лектинподобную молекулу-1 С-типа (CLL-1 или CLECL1); CD33; вариант III рецептора эпидермального фактора роста (EGFRviii); ганглиозид G2 (GD2); ганглиозид GD3 (aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(l-4)bDGlcp(l-l)Cer); представитель семейства рецепторов TNF антиген созревания В-клеток (BCMA); антиген Tn ((Tn Ag) или (GalNAca-Ser/Thr)); простатспецифический мембранный антиген (PSMA); подобный рецепторной тирозинкиназе орфанный рецептор 1 (ROR1); Fms-подобную тирозинкиназу 3 (FLT3); опухолеассоциированный гликопротеин 72 (TAG72); CD38; CD44v6; гликозилированный эпитоп CD43, экспрессируемый на клетках острого лейкоза или лимфомы, но не на гемопоэтических клетках-предшественниках, гликозилированный эпитоп CD43, экспрессируемый на негемопоэтических раковых клетках, канцероэмбриональный антиген (CEA); адгезивную молекулу эпителиальных клеток (EPCAM); B7H3 (CD276); KIT (CD117); субъединицу альфа-2 рецептора интерлейкина-13 (IL-13Ra2 или CD213A2); мезотелин; альфа-рецептор интерлейкина 11 (IL-llRa); антиген стволовых клеток предстательной железы (PSCA); сериновую протеазу 21 (тестизин или PRSS21); рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR2); антиген (Y) системы Льюис; CD24; бета-рецептор тромбоцитарного фактора роста (PDGFR-бета); стадиеспецифический эмбриональный антиген-4 (SSEA-4); CD20; альфа-рецептор фолиевой кислоты (FRa или FR1); бета-рецептор фолиевой кислоты (FRb); рецепторную тирозиновую протеинкиназу ERBB2 (Her2/neu); муцин 1, ассоциированный с клеточной поверхностью (MUC1); рецептор эпидермального фактора роста (EGFR); молекулу адгезии нервных клеток (NCAM); простазу; простатическую кислую фосфатазу (PAP); мутированный фактор элонгации 2 (ELF2M); эфрин B2; альфа-субъединицу белка активации фибробластов (FAP); рецептор инсулиноподобного фактора роста 1 (рецептор IGF-I), карбоангидразу IX (CAIX); субъединицу протеасомы (просома, макропаин) бета-типа 9 (LMP2); гликопротеин 100 (gp100); слитый белок онкогена, состоящий из кластерной области точечного разрыва (BCR) и гомолога 1 вирусного онкогена мышиного лейкоза Абельсона (Abl) (bcr-abl); тирозиназу; рецептор эфрина типа A 2 (EphA2); сиалированную молекулу адгезии системы Льюис (sLe); ганглиозид GM3 (aNeu5Ac(2-3)bDClalp(l-4)bDGlcp(l-l)Cer); трансглутаминазу 5 (TGS5); высокомолекулярный ассоциированный с меланомой антиген (HMWMAA); О-ацетилированный GD2 ганглиозид (OAcGD2); опухолевый эндотелиальный маркер 1 (TEM1/CD248); белок, связанный с опухолевым эндотелиальным маркером 7 (TEM7R); клаудин 6 (CLDN6); рецептор тиреостимулирующего гормона (TSHR); сопряженный с G-белком рецептор класса C группы 5, представитель D (GPRC5D); открытую рамку считывания 61 хромосомы X (CXORF61); CD97; CD179a; киназу анапластической лимфомы (ALK); полисиаловую кислоту; плацентаспецифический белок 1 (PLAC1); гексасахаридную часть гликоцерамида globoH (GloboH); антиген дифференцировки молочной железы (NY-BR-1); уроплакин 2 (UPK2); клеточный рецептор 1 вируса гепатита А (HAVCR1); бета-3-адренорецептор (ADRB3); паннексин 3 (PANX3); сопряженный с G-белком рецептор 20 (GPR20); лимфоцитарный антигенный комплекс 6, локус K 9 (LY6K); обонятельный рецептор 51E2 (OR51E2); белок альтернативной рамки считывания TCR-гамма (TARP); белок опухоли Вильмса (WT1); раково-тестикулярный антиген 1 (NY-ES0-1); раково-тестикулярный антиген 2 (LAGE-la); ассоциированный с меланомой антиген 1 (MAGE-A1); вариант транслокации гена ETS 6, расположенного на хромосоме 12p (ETV6-AML); белок спермы 17 (SPA17); представитель 1A семейства X-антигенов (XAGE1); ангиопоэтин-связывающий рецептор 2 поверхности клеток (Tie 2); раково-тестикулярный антиген меланомы-1 (MAD-CT-1); раково-тестикулярный антиген меланомы-2 (MAD-CT-2); Fos-родственный антиген 1; опухолевый белок p53 (p53); мутант p53; простеин; сурвивин; теломеразу; опухолевый антиген-1 карциномы предстательной железы (PCT A-l или галектин 8), антиген меланомы, распознаваемый Т-клетками 1 (MelanA или MARTI); мутантный белок саркомы крыс (Ras); теломеразу человека; обратную транскриптазу теломеразы человека (hTERT); транслокационный вариант антигена саркомы с точечными разрывами; меланомный ингибитор апоптоза (ML-IAP); ERG (слитый ген трансмембранной сериновой протеазы 2 (TMPRSS2) и ETS); N-ацетилглюкозаминилтрансферазу V (NA17); белок семейства спаренных боксов Pax-3 (PAX3); андрогеновый рецептор; циклин Bl; нейробластомный гомолог онкогена v-myc вируса миелоцитоматоза птиц (MYCN); представитель C семейства гомологов Ras (RhoC); связанный с тирозиназой белок 2 (TRP-2); цитохром P450 IB 1 (CYPIB 1); подобный фактору связывания CCCTC (белку с цинковыми пальцами) (BORIS или паралог регулятора импринтированных участков), антиген 3 плоскоклеточной карциномы, распознаваемый T-клетками (SART3); белок семейства спаренных боксов Pax-5 (PAX5); проакрозин-связывающий белок sp32 (OY-TES1); лимфоцит-специфическая протеинтирозинкиназа (LCK); якорный белок 4 А-киназы (AKAP-4); белок синовиальной саркомы, X с точечными разрывами 2 (SSX2); рецептор конечных продуктов усиленного гликирования (RAGE-1); почечный убиквитиновый антиген 1 (RU1); почечный убиквитиновый антиген 2 (RU2); легумаин; вирус папилломы человека E6 (HPV E6); вирус папилломы человека E7 (HPV E7); кишечную карбоксилэстеразу; мутированный белок теплового шока 70-2 (mut hsp70-2); CD79a; CD79b; CD72; ассоциированный с лейкоцитами иммуноглобулиноподобный рецептор 1 (LAIR1); Fc-фрагмент рецептора IgA (FCAR или CD89); лейкоцитарный иммуноглобулиноподобный рецептор подсемейства А, представитель 2 (LILRA2); представитель f семейства CD300-подобных молекул (CD300LF); представитель A семейства 12 белков с лектиновыми доменами C-типа (CLEC12A); антиген 2 стромальных клеток костного мозга (BST2); EGF-подобный, содержащий модули, муциноподобный, подобный гормональному рецептору белок 2 (EMR2); лимфоцитарный антиген 75 (LY75); глипикан-3 (GPC3); Fc-рецептор-подобный белок 5 (FCRL5) и подобный лямбда-цепи иммуноглобулина полипептид 1 (IGLLl), MPL, биотин, метка эпитопа c-MYC, CD34, LAMP1 TROP2, GFR-альфа-4, CDH17, CDH6, NYBR1, CDH19, CD200R, Slea (CA19.9; сиалированный антиген системы Льюис); фукозил-GMl, PTK7, gpNMB, CDH1-CD324, DLL3, CD276/B7H3, ILl lRa, IL13Ra2, CD179b-IGLll, TCR-гамма-дельта, NKG2D, CD32 (FCGR2A), Tn ag, Timl-/HVCR1, CSF2RA (GM-CSFR-альфа), TGF-бета-R2, Lews Ag, бета1-цепь TCR, бета2-цепь TCR, гамма-цепь TCR, дельта-цепь TCR, FITC, рецептор лютеинизирующего гормона (LHR), рецептор фолликулостимулирующего гормона (FSHR), рецептор гонадотропного гормона (CGHR или GR), CCR4, GD3, SLAMF6, SLAMF4, гликопротеин оболочки HIV1, HTLVl-Tax, CMV pp65, EBV-EBNA3c, KSHV K8.1, KSHV-gH, гемагглютинин вируса гриппа А (HA), GAD, PDL1, гуанилилциклазу C (GCC), аутоантитело к десмоглеину 3 (Dsg3), аутоантитело к десмоглеину 1 (Dsgl), HLA, HLA-A, HLA-A2, HLA-B, HLA-C, HLA-DP, HLA-DM, HLA-DOA, HLA-DOB, HLA-DQ, HLA-DR, HLA-G, IgE, CD99, Ras G12V, тканевый фактор 1 (TF1), AFP, GPRC5D, клаудин 18.2 (CLD18A2 или CLDN18A.2)), P-гликопротеин, STEAP1, Livl, нектин-4, белок Cripto, gpA33, BST1/CD157, хлоридный канал с низкой проводимостью и антиген, распознаваемый антителом TNT.

[00256] Дополнительно, в нескольких вариантах осуществления предусмотрена иммунная клетка, которая экспрессирует CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), причем домен VH содержит домен VH, характеризующийся по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, домен VL характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, и где клетка также экспрессирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен дополнительно содержит субдомен CD3-дзета. В нескольких вариантах осуществления субдомен OX40 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 6, и субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 7. В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен содержит шарнирный домен CD8a. В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен CD8a содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 2. В нескольких вариантах осуществления mbIL15 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 12. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор дополнительно содержит внеклеточный домен рецептора NKG2D. В нескольких вариантах осуществления внеклеточный домен рецептора NKG2D содержит функциональный фрагмент NKG2D, содержащий аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 26. В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой естественную киллерную (NK) клетку. В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой Т-клетку. В нескольких вариантах осуществления такие иммунные клетки вводят субъекту согласно способу лечения рака или иным образом используют для лечения рака, например, при получении лекарственного препарата для лечения рака. В нескольких вариантах осуществления рак представляет собой острый лимфоцитарный лейкоз.

[00257] В нескольких вариантах осуществления предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), причем домен VH характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, домен VL характеризуется по меньшей мере 95% идентичностью с аминокислотной последовательностью домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен дополнительно содержит субдомен CD3-дзета. В нескольких вариантах осуществления кодируемый субдомен OX40 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 16, кодируемый субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 8. В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен содержит шарнирный домен CD8a и содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 2. В нескольких вариантах осуществления кодируемый mbIL15 содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 12. В нескольких вариантах осуществления химерный рецептор дополнительно содержит внеклеточный домен рецептора NKG2D. В нескольких вариантах осуществления кодируемый внеклеточный домен рецептора NKG2D содержит функциональный фрагмент NKG2D, содержащий аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 26.

[00258] Также в данном документе предусмотрена иммунная клетка, которая экспрессирует CD19-направленный химерный рецептор, содержащий внеклеточный фрагмент к CD19, шарнирный и/или трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен. В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой NK-клетку. В нескольких вариантах осуществления иммунная клетка представляет собой Т-клетку. В нескольких вариантах осуществления шарнирный домен содержит шарнирный домен CD8a или SH-домен Ig4. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8a, трансмембранный домен CD28 и/или трансмембранный домен CD3. В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен содержит сигнальный домен OX40, сигнальный домен 4-1BB, сигнальный домен CD28, сигнальный домен NKp80, сигнальный домен CD16 IC, сигнальный домен CD3-дзета или ITAM CD3ζ и/или сигнальный домен mIL-15. В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен содержит домен расщепления 2A. В нескольких вариантах осуществления сигнальный домен mIL-15 отделен от остальной или другой части CD19-направленного химерного рецептора доменом расщепления 2A. В нескольких вариантах осуществления такие иммунные клетки вводят субъекту, имеющему рак, с целью лечения, ингибирования или предупреждения прогрессирования рака.

[00259] Также в данном документе предусмотрена сконструированная NK- или Т-клетка, которая экспрессирует CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), причем домен VH содержит домен VH, полученный в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, домен VL содержит домен VL, полученный в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, и где клетка также экспрессирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15).

[00260] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), причем домен VH содержит домен VH, полученный в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VH, представленной под SEQ ID NO: 33, домен VL содержит домен VL, полученный в результате гуманизации аминокислотной последовательности домена VL, представленной под SEQ ID NO: 32; шарнирный и/или трансмембранный домен,

[00261] внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15).

[00262] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит scFv; шарнир, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа; трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит ITAM CD3-дзета. В нескольких вариантах осуществления трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8-альфа, трансмембранный домен NKG2D и/или трансмембранный домен CD28. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит сигнальный домен CD28, сигнальный домен 4-1BB и/или домен OX40. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен может также содержать домен, выбранный из ICOS, CD70, CD161, CD40L, CD44 и их комбинаций.

[00263] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи из scFv или вариабельную область легкой цепи из scFv; шарнир, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа; трансмембранный домен, где трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8-альфа; и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит ITAM CD3-дзета. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует усеченный рецептор эпидермального фактора роста (EGFRt). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В данном документе предусмотрена сконструированная NK- или Т-клетка, которая экспрессирует такой CD19-направленный химерный антиген, а также способы лечения рака путем введения такой NK-клетки или Т-клетки. Также предусмотрено применение таких полинуклеотидов в лечении рака, например в производстве лекарственного препарата для лечения рака.

[00264] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL), причем домен VH предусматривает домен VH, выбранный из SEQ ID NO: 120, SEQ ID NO: 121, SEQ ID NO: 122 и SEQ ID NO: 123, домен VL предусматривает домен VL, выбранный из SEQ ID NO: 117, SEQ ID NO: 118 и SEQ ID NO: 119; шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит субдомен OX40, субдомен CD28, субдомен iCOS, субдомен CD28-41BB, субдомен CD27, субдомен CD44 или их комбинацию. В нескольких вариантах осуществления химерный антигенный рецептор содержит шарнир и трансмембранный домен, где шарнир представляет собой шарнир CD8-альфа, где трансмембранный домен представляет собой либо трансмембранный домен CD8-альфа, либо трансмембранный домен NKG2D. В нескольких вариантах осуществления внутриклеточный сигнальный домен содержит домен CD3-дзета.

[00265] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный химерный антигенный рецептор (CAR), где CAR содержит одноцепочечное антитело или фрагмент одноцепочечного антитела, которые содержат гуманизированный связывающий CD19 домен, трансмембранный домен, первичный внутриклеточный сигнальный домен, содержащий нативный внутриклеточный сигнальный домен CD3-дзета или его функциональный фрагмент, и костимулирующий домен, содержащий нативный внутриклеточный сигнальный домен белка, выбранный из группы, состоящей из OX40, CD27, CD28, ICOS и 4-1BB, или его функциональный фрагмент, где указанный связывающий CD19 домен содержит определяющую комплементарность область 1 легкой цепи (CDR1 LC) с SEQ ID NO: 124, 127 или 130, определяющую комплементарность область 2 легкой цепи (CDR2 LC) с SEQ ID NO: 125, 128 или 131, и определяющую комплементарность область 3 легкой цепи (CDR3 LC) с SEQ ID NO: 126, 129 или 132, и определяющую комплементарность область 1 тяжелой цепи (CDR1 HC) с SEQ ID NO: 133, 136, 139 или 142, определяющую комплементарность область 2 тяжелой цепи (CDR2 HC) с SEQ ID NO: 134, 137, 140 или 143 и определяющую комплементарность область 3 тяжелой цепи (CDR3 HC) с SEQ ID NO: 135, 138, 141 или 144. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид дополнительно содержит область, кодирующую связанный с мембраной интерлейкин 15 (mbIL15).

[00266] В данном документе предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 117, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 197 или SEQ ID NO: 203.

[00267] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 118, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 187, SEQ ID NO: 193, SEQ ID NO: 199 или SEQ ID NO: 205.

[00268] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен легкой цепи (VL) с SEQ ID NO: 119, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 189, SEQ ID NO: 195, SEQ ID NO: 201 или SEQ ID NO: 207.

[00269] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 120, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 163, SEQ ID NO: 165, SEQ ID NO: 185, SEQ ID NO: 187 или SEQ ID NO: 189.

[00270] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 121, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 167, SEQ ID NO: 169, SEQ ID NO: 171, SEQ ID NO: 191, SEQ ID NO: 193 или SEQ ID NO: 195.

[00271] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 122, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид также кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 173, SEQ ID NO: 175, SEQ ID NO: 177, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 199 или SEQ ID NO: 201.

[00272] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, где связывающий CD19 фрагмент содержит гуманизированную последовательность scFv, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с SEQ ID NO: 123, шарнирный и/или трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15). В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид кодирует гуманизированный химерный антигенный рецептор с SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 181, SEQ ID NO: 183, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 205 или SEQ ID NO: 207.

[00273] В нескольких вариантах осуществления предусмотренные полинуклеотиды не кодируют последовательности с SEQ ID NO: 112, 113, 114 или 116.

[00274] Предусмотрен полинуклеотид, кодирующий гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор, при этом химерный антигенный рецептор содержит внеклеточный связывающий CD19 фрагмент; шарнирный и/или трансмембранный домен; внутриклеточный сигнальный домен, и где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), и где полинуклеотид выбран из группы, состоящей из полинуклеотидов, характеризующихся по меньшей мере 95% идентичностью с последовательностью с SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 192 или SEQ ID NO: 200. В нескольких вариантах осуществления полинуклеотид обладает последовательностью с SEQ ID NO: 184, SEQ ID NO: 186, SEQ ID NO: 192 или SEQ ID NO: 200. В нескольких вариантах осуществления предусмотрены сконструированные NK- или Т-клетки, которые экспрессируют такой гуманизированный CD19-направленный химерный антигенный рецептор. Также предусмотрен способ лечения рака у субъекта, включающий введение субъекту, имеющему рак, таких сконструированных NK- и/или Т-клеток. Также предусмотрено применение таких полинуклеотидов в лечении рака, как, например в производстве лекарственного препарата для лечения рака.

ПРИМЕРЫ

[00275] Раскрытые в данном документе материалы и способы являются неограничивающими примерами, которые применяют в соответствии с определенными вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе.

[00276] В соответствии с несколькими вариантами осуществления NK-клетки выделяют из мононуклеарных клеток периферической крови и размножают с использованием питающей клеточной линии. Как более подробно рассматривается ниже, в нескольких вариантах осуществления питающие клетки сконструированы с возможностью экспрессии определенных стимулирующих молекул (например, интерлейкинов, CD3, 4-1BBL и т. д.) для содействия размножению и активации иммунных клеток. Сконструированные питающие клетки раскрыты, например, в международной заявке на патент PCT/SG2018/050138, которая полностью включена в данный документ посредством ссылки. В нескольких вариантах осуществления стимулирующие молекулы, такие как интерлейкин 12, 18 и/или 21, отдельно добавляют в среду для совместного культивирования, например, в определенное время и в конкретных количествах, для обеспечения усиленного размножения требуемой субпопуляции(субпопуляций) иммунных клеток.

[00277] NK-клетки, выделенные из PBMC, совместно культивировали с клетками K562, экспрессирующими связанный с мембраной IL15 и 4-1BBL, при этом в среду добавляли IL2. В случае одной группы сконструированных NK-клеток их размножали в среде, в которую добавляли (в день 0) комбинацию растворимого IL12 и растворимого IL18. Среду обновляли дополнительным количеством растворимого IL12 и растворимого IL18 в день 4. Дополнительные подробности о вариантах осуществления такой методики культивирования раскрыты в предварительной заявке на патент США № 62/881311, поданной 31 июля 2019 г. и полностью включенной в данный документ посредством ссылки. Вирусную трансдукцию конструкцией CD19-направленного химерного рецептора проводили в день 7. Полученные сконструированные NK-клетки оценивали через 14 или более дней от общего времени культивирования.

Пример 1

[00278] На фигуре 5 представлена схема экспериментальной модели для оценки противоопухолевой эффективности сконструированных NK-клеток, полученных в соответствии со способами, раскрытыми в данном документе. Мышам NOD-scid IL2Rgamma^null внутривенно в день 0 вводили 2 x 10⁵ клеток Nalm6 (линия клеток лейкоза из клеток-предшественников В-лимфоцитов). В день 4 одной группе мышей вводили 2,7 x 10⁷ NK-клеток, экспрессирующих NK19 CAR (см. фигуру 3A, хотя следует понимать, что можно применять другие CD19-направленные химерные рецепторы), в то время как другой группе вводили NK-клетки, которые размножали с применением растворимых IL12/IL18 (называемые клетками NK19-IL12/18). Лейкозную опухолевую нагрузку оценивали с помощью флуоресцентной визуализации, выполняемой в дни 3, 7, 11, 18 и 25. На фигуре 6A показаны результаты визуализации в дни 3, 7, 11 и 18. Как можно видеть, мыши, получавшие либо NK19, либо NK19 IL12/18, демонстрировали значительно меньшую опухолевую нагрузку, чем мыши, получавшие либо нетрансдуцированные NK-клетки, либо PBS в качестве контроля. На фигуре 6B показаны сводные данные визуализации в виде линейного графика (более высокие значения потока (фотоны/секунда) указывают на выявление большего флуоресцентного сигнала и большую опухолевую нагрузку). Обе группы NK19 и NK19 IL12/18 демонстрировали меньшую опухолевую нагрузку уже в день 7 после инъекции лейкозных клеток Nalm6. Эта разница еще более выражена в день 11, когда группы PBS и NT NK-клеток демонстрировали большой рост опухоли. Даже в день 18, когда опухолевая нагрузка в группах PBS и NT NK являлась обширной, группы NK19 и NK19 IL12/18 показывали гораздо меньшую опухолевую нагрузку. Неожиданно оказалось, что группы NK19 IL12/18 показывали меньшую опухолевую нагрузку, чем группы, получавшие конструкцию NK19. Это удивительно не только потому, что клетки NK19 весьма эффективны в предотвращении роста лейкозных клеток, так что дальнейшее усиление данного эффекта является неожиданным, но также потому, что предшествующая методика размножения клеток повлияла не только на само количество клеток, но также на уровень активности этих размноженных клеток.

Пример 2

[00279] Предпринимали эксперименты для определения того, используется ли данный стимулирующий домен (также называемый костимулирующими доменами, учитывая, что многие конструкции используют несколько «сигнальных» доменов тандемным, триплетным или другим мультиплексным образом) в экспрессии, на которую воздействует CAR (а также активности). NK-клетки получали путем трансдукции с помощью вирусов, кодирующих различные CAR, изображенные на фигурах 3A-3C (хотя в нескольких вариантах осуществления применяют другие конструкции). В качестве неограничивающего примера, NK-клетки представляли собой клетки, которые получали путем трансдукции с помощью бицистронного вируса, кодирующего scFv к CD19, внутриклеточный костимулирующий домен OX40, сигнальный домен CD3ζ и связанный с мембраной IL-15 (см. NK19, фигура 3A), который поддерживает длительное выживание и пролиферацию клеток. Другие протестированные конструкции CAR, NK19-1, 2, 3, 4, 5, 8, 9, 10, 11, 12 и NK19-13, трансдуцировали в NK-клетки аналогичным образом. Следует принимать во внимание, что для тех конструкций, которые используют домен Flag для определения экспрессии, в нескольких вариантах осуществления предусмотрены аналогичные конструкции, не включающие Flag (или домен другой метки).

[00280] На фигуре 7 обобщенно представлены данные экспрессии конструкций от NK 19-1 до NK5 и от NK8 до NK19-13, о которой свидетельствует выявление CD19Flag. Данные представлены в виде процентного содержания NK-клеток, экспрессирующих CD19-Flag, по отношению к общему количеству представленных NK-клеток. Данные собирали через 4 дня после трансдукции соответствующим вирусом, кодирующим CAR NK19-«X». Как свидетельствуют данные экспрессии, все конструкции экспрессировались по меньшей мере в 55% NK-клеток. Фактически, для восьми из одиннадцати конструкций, для которых получили данные, экспрессию выявляли приблизительно в 75% или более от общего числа NK-клеток, при этом несколько конструкций экспрессировались с эффективностью более 80%. Эти данные в отношении экспрессии указывают на то, что в соответствии с несколькими вариантами осуществления выбор специфических стимулирующих доменов может обеспечить более эффективную экспрессию CAR NK-клеткой. В нескольких вариантах осуществления это является предпочтительным, поскольку большая часть препарата на основе данных NK-клеток применима в клинической практике (например, меньшее количество вводимых NK-клеток требуется для получения клинически значимой дозы сконструированных NK-клеток).

[00281] Как рассматривается в данном документе, в химерных антигенных рецепторах, которые целенаправленно воздействуют на CD19 (или другие опухолевые маркеры), можно использовать различные костимулирующие домены. На фигуре 8A представлены данные, относящиеся к экспрессии CAR, целенаправленно воздействующих на CD19, при использовании различных костимулирующих доменов. В качестве неограничивающего примера костимулирующие домены могут включать без ограничения OX40, CD28, iCOS, CD28/41BB, CS27 и CD44). На фигуре 8A показаны данные средней интенсивности флуоресценции, представляющие экспрессию указанных конструкций CAR NK-клетками. Как свидетельствует низкий показатель MFI, выявленный для GFP-контроля, эти данные указывают на то, что данные конструкции (а) экспрессируются NK-клетками и (b) относительно стабильно экспрессируются NK-клетками в течение 4-недельного периода после трансдукции. На фигуре 8B показана эффективность экспрессии CAR с указанными костимулирующими доменами. Хотя существует некоторая вариабельность эффективности экспрессии в диапазоне от приблизительно 60% до приблизительно 80% эффективности, каждый из CAR с указанными костимулирующими доменами экспрессировался хорошо, а также экспрессировался относительно стабильно в течение по меньшей мере 4 недель.

[00282] Данные в отношении цитотоксической эффективности NK-клеток, экспрессирующих CD19-направленные CAR с использованием различных костимулирующих доменов, показаны на фигурах 9A-9F. Культивируемые клетки Nalm6 или Raji подвергали воздействию сконструированных NK-клеток, экспрессирующих указанные конструкции NK19, и совместно культивировали в течение указанного количества дней (ось X представляет дни) воздействия NK-клеток, экспрессирующих NK19-X. На фигуре 9A показаны цитотоксические эффекты указанных конструкций в отношении клеток Nalm6 через 7 дней после трансдукции NK-клеток от первого донора указанной конструкцией. Соотношение эффекторных клеток и клеток-мишеней для этого эксперимента составляло 1:1. Как показано на графиках, каждая из NK19-10, NK19-8, NK-1911, NK19-5 и NK19-12 допускала увеличение количества обнаруживаемых клеток Nalm6 наравне с таковым, обеспечиваемым NK-клетками, экспрессирующими только GFP в качестве контроля. Однако каждая из NK19-3, NK19-9, NK19-4, NK19-13, NK19-1 и NK19-2 показала значительно меньшее увеличение количества клеток Nalm6 (например, большую цитотоксичность). Следовательно, в нескольких вариантах осуществления такие конструкции экспрессируются в NK-клетках и используются для лечения В-клеточного лейкоза (или других типов опухолей). В нескольких вариантах осуществления один или более стимулирующих доменов из одной из конструкций встроены в другую конструкцию с другим стимулирующим доменом, что преимущественно приводит к синергической передаче сигналов и дополнительному усилению цитотоксичности. В качестве неограничивающего примера конструкция NK19-1 со стимулирующим доменом OX40 в некоторых вариантах осуществления дополнительно сконструирована с возможностью экспрессии стимулирующего домена CD44 в дополнение к OX40. В качестве дополнительного неограничивающего примера конструкция NK19-1 со стимулирующим доменом OX40 в некоторых вариантах осуществления дополнительно сконструирована с возможностью экспрессии стимулирующего домена CD44 и стимулирующего домена CD17 в дополнение к OX40.

[00283] На фигуре 9B показаны соответствующие данные цитотоксичности для сконструированных NK-клеток от второго донора в отношении клеток B-клеточного лейкоза Raji через 7 дней после трансдукции. Соотношение эффекторных клеток и клеток-мишеней в данном случае также составляло 1:1. Как показано, аналогично активности сконструированных конструкций в отношении клеток Nalm6, некоторые конструкции допускали увеличение количества клеток Raji. Однако каждая из NK19-13, NK 19-4, NK19-2, NK19-3, NK19-1 и NK19-9 в значительной степени предупреждали рост клеток Raji, при этом несколько конструкций приводили практически к отсутствию роста клеток Raji. Следовательно, в нескольких вариантах осуществления такие конструкции экспрессируются в NK-клетках и используются для лечения В-клеточного лейкоза (или других типов опухолей).

[00284] На фигуре 9C показаны данные для NK-клеток от донора 1 в отношении клеток Nalm6 через 14 дней после трансдукции. Соотношение эффекторных клеток и клеток-мишеней составляло 1:1. Как показано, даже через две недели после трансдукции NK-клетки, экспрессирующие NK19-13, NK19-4, NK19-3, NK19-2, NK19-1 и NK19-9, предупреждали рост фактически всех клеток Nalm6, что свидетельствует о высоком уровне их цитотоксического действия в отношении опухолевых клеток. Следовательно, в нескольких вариантах осуществления такие конструкции экспрессируются в NK-клетках и используются для лечения В-клеточного лейкоза (или других типов опухолей). Как рассматривалось выше, в нескольких вариантах осуществления получают конструкцию, в которой применяют комбинацию двух, трех или более стимулирующих доменов, что приводит к синергической стимуляции NK-клеток и повышению цитотоксичности.

[00285] На фигуре 9D показаны данные для NK-клеток от донора 2 в отношении клеток Raji через 14 дней после трансдукции. Соотношение эффекторных клеток и клеток-мишеней составляло 1:2. Как показано, NK-клетки, экспрессирующие только GFP, допускали рост клеток Raji по сути аналогичный росту необработанных клеток Raji. Напротив, NK-клетки, экспрессирующие каждую из NK19-3, NK19-1, NK19-4, NK19-13, NK19-2 и NK19-9, значительно замедляли рост клеток Raji, при этом несколько конструкций обеспечивали возможность незначительного роста или обеспечивали отсутствие роста клеток Raji. Следовательно, в нескольких вариантах осуществления такие конструкции экспрессируются в NK-клетках и используются для лечения В-клеточного лейкоза (или других типов опухолей). Как рассматривалось выше, в нескольких вариантах осуществления получают конструкцию, в которой применяют комбинацию двух, трех или более стимулирующих доменов, что приводит к синергической стимуляции NK-клеток и повышению цитотоксичности.

[00286] На фигуре 9E показаны сводные данные по цитотоксичности в отношении клеток Nalm6 при соотношении E:T, составляющем 1:1 и 1:2, через 7 дней после трансдукции. При соотношении E:T, составляющем 1:2, все конструкции NK19, кроме одной, продемонстрировали эквивалентную или более высокую цитотоксичность, чем NK-клетки, экспрессирующие только GFP. Фактически, даже при соотношении 1:2 шесть конструкций достигли цитотоксичности, составляющей ~ 50% или выше. При тестировании с E:T, составляющем 1:1, семь конструкций достигли цитотоксичности, составляющей ~ 50% или выше, однако пять конструкций (NK19-13, NK19-2, NK19-9, NK19-3 и NK19-1) показали цитотоксичность, превышающую 70%. На фигуре 9F показаны соответствующие данные для клеток Raji. Все протестированные конструкции показали повышенную цитотоксичность по сравнению с NK-клетками, экспрессирующими GFP, при соотношении E:T, составляющем как 1:2, так и 1:1. При E:T, составляющем 1:2, четыре конструкции превысили цитотоксичность в 40%, тогда как при 1:1, семь конструкций превысили данный показатель уничтожения. Более того, при E:T, составляющем 1:1, три конструкции показали цитотоксичность 60% или более, причем наиболее эффективная конструкция достигла почти 90% цитотоксичности. Взятые в совокупности, эти данные продемонстрировали, что различные CD19-направленные конструкции CAR могут не только экспрессироваться, но и стабильно экспрессироваться, а также эффективно индуцировать цитотоксичность в отношении нескольких типов злокачественных клеток, в некоторых случаях превышая 80%-ный показатель уничтожения. В соответствии с дополнительными вариантами осуществления получают конструкции, целенаправленно воздействующие на CD19, в которых применяют комбинации двух, трех или более стимулирующих доменов, что приводит к дополнительному усилению цитотоксичности экспрессирующих их NK-клеток. В нескольких вариантах осуществления CD19-направленные конструкции могут синергически взаимодействовать с NK-клетками, экспрессирующими рецепторы, направленные против других опухолевых маркеров, таких как лиганды NKG2D (такие NK-клетки, несущие химерный рецептор, описаны в PCT/US2018/024650, которая полностью включена в данный документ посредством ссылки). Например, химерный рецептор, содержащий связывающий домен, который связывает лиганды NKG2D, стимулирующий домен OX40 и сигнальный домен CD3-дзета, можно применять в сочетании с любой из раскрытых в данном документе конструкций, целенаправленно воздействующих на CD19. В нескольких вариантах осуществления такой химерный рецептор на по меньшей мере 90% идентичен последовательности нуклеиновой кислоты с SEQ ID NO: 145. В нескольких вариантах осуществления последовательность такого химерного рецептора на по меньшей мере 90% идентична аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 146.

[00287] Проводили дополнительные эксперименты для оценки цитотоксичности выбранных CD19-направленных конструкций CAR. NK-клетки, выделенные от трех разных доноров (двух доноров для 14-дневного эксперимента), трансдуцировали векторами, кодирующими указанные конструкции, NK19-1 (костимулирующий домен OX40); NK19-2 (костимулирующий домен CD28); NK19-3 (костимулирующий домен ICOS); NK19-4 (костимулирующий домен CD28-41BB); NK19-9 (костимулирующий домен CD27) и NK19-13 (костимулирующий домен CD44). В течение семи (n = 3) или 14 (n = 2) дней после трансдукции данные сконструированные NK-клетки культивировали совместно с клетками Nalm6 или Raji при соотношении E:T, составляющем 1:1. Результаты показаны на фигуре 10A (выражены как процентный показатель повышенной цитотоксичности по сравнению с NK-клетками, экспрессирующими GFP). В соответствии с данными, представленными на фигуре 9, каждая из протестированных конструкций демонстрировала усиленные цитотоксические эффекты в отношении клеток Nalm6, варьирующиеся от среднего увеличения на 40% в случае NK19-4 до общего среднего увеличения приблизительно на 50% в случае других 5 конструкций. На фигуре 10B показаны соответствующие данные в отношении клеток Raji. Опять же, каждая конструкция превосходила NK-клетки, экспрессирующие только GFP, со средним увеличением цитотоксичности по сравнению с экспрессирующими GFP NK-клетками, варьирующим от приблизительно 40% до приблизительно 50%. Используя клетки от двух доноров через 14 дней после трансдукции, протестировали NK19-1, NK19-9 и NK19-13 на клетках Nalm6 и Raji. На фигуре 10C показано рассчитанное повышение цитотоксичности данных конструкций по сравнению с экспрессирующими GFP NK-клетками, где среднее увеличение на почти 80% наблюдали для NK-клеток, экспрессирующих NK19-9, на приблизительно 75% для экспрессирующих NK19-1 клеток и более, чем на 60% для экспрессирующих NK19-13 клеток. Аналогичные результаты получили в отношении клеток Raji – клетки, экспрессирующие NK19-13, показали более чем 20% улучшение цитотоксичности, клетки, экспрессирующие NK19-1, продемонстрировали почти 60% усиление активности, и клетки, экспрессирующие NK19-9, продемонстрировали почти на 70% большую цитотоксическую активность в отношении клеток Raji. Данные результаты дополнительно подтверждают варианты осуществления, раскрытые в данном документе, где предусмотрены сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CD19-направленные CAR, а также способы их применения в лечении рака, в том, что иммунотерапия приводит к усилению цитотоксичности в отношении опухолевых клеток-мишеней.

[00288] На фигурах 11A-11E представлены данные, относящиеся к профилям высвобождения цитокинов из NK-клеток при культивировании клеток Nalm6, связанные с механизмом, с помощью которого NK-клетки контролируют опухолевые и инфицированные вирусом клетки - посредством высвобождения цитотоксических гранул и провоспалительных цитокинов. На фигуре 11A показано, что по сравнению с контрольными или даже GFP-экспрессирующими NK-клетками, NK-клетки, экспрессирующие NK19-1, NK19-9 или NK19-13, все экспрессируют более высокие концентрации сериновой протеазы, гранзима B, которая присутствует в гранулах, высвобождаемых NK-клетками. NK-клетки, экспрессирующие данные CD19-направленные CAR, высвобождали приблизительно в 4 раза больше гранзима B, чем контрольные NK-клетки, экспрессирующие GFP. На фигуре 11B показаны данные, относящиеся к увеличению степени высвобождения перфорина сконструированными NK-клетками. Интересно отметить, что уровни перфорина существенно не превышали концентрации, обусловленные экспрессирующими GFP NK-клетками (хотя концентрация перфорина была повышена по сравнению с контролем). Перфорины оказывают воздействие совместно с гранзимом B (и другими гранзимами), при этом перфорины выполняют функцию образования пор в клеточной мембране, позволяя гранзимам пересекать мембрану, а затем оказывать их протеазные эффекты на внутриклеточные белковые мишени. Эти данные повышают вероятность того, что высвобождение перфорина, хотя и является примерно аналогичным или уменьшенным применительно к определенным конструкциям, фактически более эффективно при порообразовании, что обеспечивает аналогичную степень порообразования. В качестве альтернативы, если перфорины, высвобождаемые NK-клетками, экспрессирующими NK19, являются не более эффективными при образовании пор, это компенсируется повышением содержания гранзима B (и/или других гранзимов). Таким образом, повышение цитотоксичности все же достигается.

[00289] На фигуре 11C показано, что по сравнению с контрольными или даже GFP-экспрессирующими NK-клетками, все NK-клетки, экспрессирующие NK19-1, NK19-9 или NK19-13, высвобождают более высокие концентрации воспалительного цитокина TNF-альфа. На фигуре 11D показаны аналогичные данные для высвобождения GM-CSF NK-клетками, экспрессирующими NK19, а на фигуре 11E показаны аналогичные данные для высвобождения гамма-интерферона. Подобным образом, при тестировании на клетках Raji получают аналогичные схемы высвобождения, которые показаны на фигурах 12A-12E. Эти данные указывают на то, что клетки, экспрессирующие NK19, проявляют свои цитотоксические эффекты, по меньшей мере частично, посредством повышения высвобождения воспалительных цитокинов и/или цитотоксических гранул. Как упоминалось выше, в нескольких вариантах осуществления сконструированные CAR разработаны с содержанием комбинаций двух, трех или более костимулирующих доменов с синергическим повышением высвобождения цитокинов/гранул и цитотоксичности в отношении целевых типов рака.

[00290] Для дополнительного подтверждения усиленных эффектов конструкций NK19 в отношении прогрессирования опухоли, мышам NSG в день 0 внутривенно вводили 1 x 10⁵ клеток Nalm6 (экспрессирующих флуоресцентный репортер). В день 3 мышам вводили либо контрольный PBS, нетрансдуцированные NK-клетки («NTNK», 10 М), NK-клетки, экспрессирующие NK19-2 (10 миллионов клеток), экспрессирующие NK19-9 клетки (10 миллионов), экспрессирующие NK19-1 клетки (10 миллионов) либо экспрессирующие NK19-1 клетки (30 миллионов). Флуоресцентную визуализацию для выявления клеток Nalm6 выполняли в дни 3, 8, 11, 18 и 25 (данные визуализации не показаны). Данные представлены на фигуре 13. Как показано, инъекция NK-клеток, экспрессирующих любой вариант NK19, приводила к снижению прогрессирования роста Nalm6. NK-клетки, экспрессирующие NK19-2, показали незначительный рост Nalm6 в день 8, с увеличением роста Nalm6 ко дню 11 и значительным ростом ко дню 18 (однако, меньшему, чем в случае с клетками NTNK). Ни в случае экспрессирующих NK19-9, ни в случае экспрессирующих NK19-1 NK-клеток (в любой дозе) не наблюдали выявляемой опухолевой нагрузки в день 8 с помощью визуализации. У мышей, получавших NK-клетки, экспрессирующие NK19-9, действительно наблюдали некоторое увеличение роста клеток Nalm6 ко дню 11 с дальнейшим прогрессированием ко дню 18. В день 11 у мышей, получивших любую дозу клеток, экспрессирующих NK19-1, не наблюдали роста клеток Nalm6. В день 18 у мышей, получивших 10 миллионов клеток, экспрессирующих NK19-9, наблюдали некоторый рост опухоли. Однако при дозе 30 миллионов клеток у данных мышей, получивших NK-клетки, экспрессирующие NK19-9, наблюдали лишь незначительный рост клеток Nalm6.

[00291] На фигуре 14A представлен линейный график интенсивности биолюминесценции, выявленной у мышей (например, флуоресцентный сигнал, показанный на фигуре 13, следует отметить, что на фигуре 13 не показаны данные визуализации для дня 25). В соответствии с изображениями на фигуре 13, линейный график на фигуре 14A показывает увеличение количества клеток Nalm6 (что представлено увеличением BLI) для всех групп в день 25, при этом значительное количество клеток выявлено в группах PBS и NTNK и несколько меньшее в группах NK19-2, NK19-1 (10 М) и NK19-9. В группе NK19-1 (30 миллионов) наблюдали наименьшее увеличение, что свидетельствует о способности данной конструкции снижать уровень прогрессирования Nalm6 посредством цитотоксического воздействия на клетки Nalm6. При том, что каждая конструкция со временем допускает некоторый рост Nalm6, даже если он умеренный, протестированные конструкции NK19 задерживают начало этого роста, о чем свидетельствует плоская линия до дня 11 для кривых NK19. Для лучшей демонстрации этого аспекта данные перенесены на ось Y в логарифмической шкале на фигуре 14B, что обеспечивает возможность разделения кривых. Как показано, кривые NTNK и PBS показывают тенденцию к повышению после дня 3, что указывает на почти немедленный рост Nalm6. Напротив, кривые NK19-9, NK19-2 и обе кривые NK19-1 либо снижаются, либо лишь немного отклоняются вверх по день 7. В день 11, в соответствии с изображениями на фигуре 13, рост клеток Nalm6 обнаруживается в группах NK19-9, NK19-2 и NK19-1 (10 М). Напротив, группа NK19-1 (30 миллионов) все еще находится примерно на исходном уровне, что отражает отсутствие какого-либо значительного роста клеток Nalm6. Рост клеток изменяется в направлении повышения в группе NK19-9 (группа 30 миллионов) в день 18. Хотя происходит увеличение количества опухолевых клеток, даже при введении конструкций NK19, задержка начала роста может обеспечивать преимущество в нескольких вариантах осуществления. Например, это дает возможность повторно ввести пациенту другую дозу сконструированных NK-клеток, экспрессирующих конструкцию, направленную на CD19. В нескольких вариантах осуществления последующая доза (как и начальная доза) может необязательно содержать NK-клетки, в которые внесли изменения для уменьшения аллогенности, например, путем редактирования генов. Таким образом, в нескольких вариантах осуществления вводят две, три, четыре или более доз NK-клеток, экспрессирующих CD19-направленный CAR. Эта задержка роста опухолевых клеток предоставляет возможность последовательно (или одновременно) вводить дозы NK-клеток, экспрессирующих химерную конструкцию, направленную на другой опухолевый маркер, и/или применять некоторые другие разновидности противораковой терапии (например, ингибитор иммунных контрольных точек, терапию антителами, химиотерапию и т. д.). На фигуре 14C представлены данные, относящиеся к экспрессии CD3 клетками, трансдуцированными различными конструкциями, в образцах крови, полученных у мышей, подвергнутых обработке, указанной на оси X. CD3 представляет собой маркер Т-клеток. Как указано, но для Т-клеток, сконструированных с возможностью экспрессии конструкции NK19-1, и смешанной популяции NK-клеток и Т-клеток, экспрессия CD3 являлась по существу незначительной. На фигуре 14D представлены данные, относящиеся к экспрессии CD56, который является маркером NK-клеток человека. Несмотря на то, что присутствует небольшое количество фонового окрашивания, окрашивание образцов крови от мышей, обработанных NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции, относительно невелико (как и следовало ожидать, учитывая, что (i) кровь представляет собой образец крови мышей, и мышиные клетки составят большинство от общего количества, и (ii) CD56 выявляет только человеческие NK-клетки (например, введенные). Данные в этом отношении отличаются тем, что группа, обработанная с использованием 30 миллионов NK19-1, демонстрировала заметно большую экспрессию CD56, чем другие группы, а группы Т-клеток/NK + Т-клеток экспрессировали CD56 на фоновых уровнях. На фигуре 14E показаны данные, относящиеся к экспрессии GFP опухолевыми клетками. Образцы крови собирали через ~3 недели после начала эксперимента in vivo. Как показано (в соответствии с изображениями/данными BLI), контрольные группы PBS и NTNK демонстрируют более высокие процентные показатели экспрессии GFP (например, большую процентную долю от общего количества живых клеток крови в образце составляют опухолевые клетки). Каждая из сконструированных конструкций показывает значительно меньшую экспрессию GFP, основываясь на результатах сконструированных конструкций, контролирующих/снижающих рост опухолевых клеток. На фигуре 14F показаны данные, аналогичные данным на фигуре 14D, но экспрессию CD19 измеряли во всех живых клетках в данном образце крови мышей. Как и в случае с GFP, группы PBS и NKNT демонстрируют экспрессию CD19, составляющую приблизительно 10-12%, что означает, что 10-12% живых клеток в образце крови являются опухолевыми клетками, а остальные являются клетками крови мыши. Как показано в другой экспериментальной группе, экспрессия CD19 находится на намного более низком уровне, отражая тот факт, что сконструированные конструкции CAR ограничивают рост опухолевых клеток. Эти данные соответствуют вариантам осуществления, раскрытым в данном документе, где сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CD19-направленные CAR, обладают высокой цитотоксичностью и обеспечивают возможность лечения раковых опухолей.

Дополнительная оценка гуманизированных конструкций

[00292] Как подробно рассмотрено выше в нескольких вариантах осуществления, несколько вариантов осуществления CAR, раскрытых в данном документе, включают применение гуманизированных последовательностей, таких как внеклеточный связывающий фрагмент. В нескольких вариантах осуществления к одному или более аспектам данной области применяют подход гуманизации. В нескольких вариантах осуществления одну или более тяжелых и/или легких цепей антитела подвергают гуманизации, что (как рассматривалось выше) может обеспечить преимущества, в том числе без ограничения снижение иммуногенности, повышение стабильности, более длительную эффективность, повышенную активность и т. п.

Пример 3

[00293] На фигуре 15 показана схема серии гуманизированных конструкций в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе. Такие конструкции обозначены буквой «H» в их идентификаторе. В пояснение, NK19H-1 представляет собой гуманизированный CAR к CD19, в котором использован scFv, состоящий из первой легкой цепи и первой тяжелой цепи («L1H1»), в то время как в NK19H-3 использован scFv, состоящий из третьей легкой цепи и первой тяжелой цепи («L3H1»). На фигуре 15 также показаны данные, относящиеся к стабильности и агрегации различных комбинаций тяжелых и легких цепей после временной экспрессии и секреции клетками 293T. Показаны данные, относящиеся к средней интенсивности флуоресценции, выявленной с помощью проточной цитометрии, когда каждое антитело нагревали до 70^oC, а затем охлаждали обратно до комнатной температуры («нагревание»), по сравнению с тем же вариантом, выдержанным на льду («без нагревания»). После тепловой обработки варианты ScFv использовали в протоколе проточной цитометрии в различных концентрациях (0,4, 0,25 и 0,125 мкг/мл). Потеря интенсивности флуоресценции указывает на то, что ScFv либо утратил структурную целостность, либо подвергся агрегации в процессе нагревания. ScFv с наилучшей термостабильностью, на которые указывает сравнимый MFI в обоих условиях, являются предпочтительными для дальнейшей разработки в соответствии с некоторыми вариантами осуществления.

[00294] После оценки стабильности конструкций выбранные конструкции CAR к CD19 оценивали дополнительно. На фигуре 16 показаны сводные данные экспрессии указанных конструкций NK-клетками от 3 доноров (№ 140, № 9 и № 20). Как показано на фигуре, экспрессию оценивали путем выявления CD19Flag. Данные представлены в виде процентного содержания NK-клеток, экспрессирующих CD19-Flag, по отношению к общему количеству представленных NK-клеток. Данные собирали через 4 дня после трансдукции соответствующим вирусом, кодирующим CAR NK19H-«X». Как свидетельствуют данные экспрессии, каждая из выбранных конструкций экспрессировалась NK-клетками в разной степени. Уровни экспрессии варьировались от экспрессии в приблизительно 20% всех NK-клеток с NK19H-2, NK19H-11 и NK19H-12. Большинство других конструкций успешно экспрессировались в ~40%-60% NK-клеток, что находится на одном уровне с экспрессией негуманизированной конструкции NK19-1. Конструкция NK19H-5 экспрессировалась в более чем 80% NK-клеток. Несмотря на то, что некоторые конструкции могут экспрессироваться более эффективно, конструкции с более низкими уровнями экспрессии все же оценивались, поскольку, как в нескольких вариантах осуществления, такие конструкции все еще проявляют значительную цитотоксичность в отношении клеток-мишеней. Однако, в соответствии с несколькими вариантами осуществления, конструкции с более высокой эффективностью экспрессии могут являться предпочтительными, например, поскольку большая часть препарата на основе данных NK-клеток применима в клинической практике (например, меньшее количество вводимых NK-клеток требуется для получения клинически значимой дозы сконструированных NK-клеток).

[00295] На фигурах 17A-17E представлены такие данные по цитотоксичности. На фигуре 17A показана цитотоксичность NK-клеток от донора 20, трансдуцированных указанными конструкциями, направленными против CD19-положительной линии лейкозных клеток Nalm6 (при E:T, составляющем 1:1; 20 тыс. клеток на лунку). Данные показывают, что, несмотря на различные уровни экспрессии, большинство конструкций NK19H были способны проявлять цитотоксические эффекты в отношении клеток-мишеней Nalm6. NK19H-11 показала наименьшую эффективность, допуская рост клеток Nalm6 на уровнях чуть ниже контрольных. Напротив, NK19H-1 и NK19H-3 проявляли цитотоксичность наравне с негуманизированной конструкцией NK19-1, допуская некоторый рост клеток в более поздние моменты времени совместного культивирования. Примечательно, что NK19H-4 и NK19H-5 проявляли значительную цитотоксичность, допуская лишь весьма ограниченный рост Nalm6 на протяжении всего эксперимента.

[00296] На фигуре 17B показаны NK-клетки от донора 20, протестированные относительно CD19-положительной линии клеток лимфомы Беркитта Raji. Как и в случае с клетками Nalm6, различные гуманизированные конструкции к CD19 проявляли различную цитотоксичность в отношении клеток-мишеней. Аналогично данным на фигуре 17A, конструкция NK19H-11 показала ограниченную цитотоксичность, но все другие конструкции показали многообещающую цитотоксичность в отношении клеток-мишеней, при этом NK19H-1 действовала наравне с негуманизированной конструкцией NK19-1, и каждая из конструкций NK19H-3, 19H-4 и 19H-5 индуцировала более высокие уровни цитотоксичности, ограничивая рост клеток Raji до более поздних стадий совместного культивирования (при этом NK19H-5 допускала только очень ограниченный рост клеток Raji). На фигуре 17C показаны соответствующие данные для клеток Nalm6 от донора 140. В данном случае выявили аналогичный паттерн эффективности, при этом конструкция NK19H-11 допускала рост клеток Nalm6 приближающийся к отрицательному контролю. Однако каждая из конструкций NK19H-1, 19H-3 и 19H-4 индуцировала по меньшей мере такую же цитотоксичность, как негуманизированная NK19-1. Опять же, конструкция NK19H-5 показала значительную цитотоксичность, ограничивая рост клеток Nalm6 на протяжении всего эксперимента. На фигуре 17D показаны данные от донора 9 в отношении клеток Raji. Только конструкция NK19H-11 допускала сколько-нибудь существенный рост клеток Raji. Напротив, NK-клетки от этого донора экспрессировали негуманизированную NK19-1 или любую из гуманизированных конструкций NK19H-1, 19H-3, 19H-4 или 19H-5, подавляя любой рост клеток Raji за счет индуцирования цитотоксических эффектов. На фигуре 17E показаны данные для NK-клеток от донора 9 в отношении клеток Nalm6. В данном эксперименте цитотоксичность трех гуманизированных конструкций (NK19H-11, 19H-1 и 19H-3) являлась ограниченной. Существует некоторая вариабельность среди доноров, поскольку некоторые из данных конструкций индуцировали цитотоксичность при экспрессии NK-клетками других доноров. Конструкции NK19H-4 и 19H-5 демонстрировали значительные цитотоксические эффекты, практически ограничивая рост клеток Nalm6 до нуля в ходе эксперимента. Взятые в совокупности, эти данные дополняют данные по экспрессии и показывают, что в соответствии с несколькими вариантами осуществления гуманизированные конструкции CAR, целенаправленно воздействующие на CD19, эффективны при уничтожении опухолевых клеток, даже если они характеризуются различной эффективностью экспрессии. Дополнительно, в соответствии с некоторыми вариантами осуществления, эффективность экспрессии не коррелирует с цитотоксичностью, и даже конструкции с ограниченной эффективностью экспрессии могут демонстрировать значительную цитотоксичность.

Пример 4

[00297] Дополнительные эксперименты, аналогичные тем, которые рассматривались выше, выполняли с использованием NK-клеток от дополнительных доноров. На фигуре 18 показана эффективность экспрессии конструкции для трех доноров (№ 945, 137 и 138) в случае с указанными конструкциями. Как и в предыдущем эксперименте, предоставленные данные представляют количество CD19-Flag-положительных клеток от общего количества оценивавшихся NK-клеток. Данные для этих доноров показывают более высокую общую эффективность экспрессии для всех гуманизированных конструкций, кроме одной. Только NK19H-3 экспрессировалась в меньшей степени, чем негуманизированная конструкция NK19-1. В случае с NK-клетками этих доноров экспрессию гуманизированных конструкций обнаруживали приблизительно в 70-80% NK-клеток. Как указано выше, дополнительно к оценке экспрессии оценивали цитотоксичность в отношении клеток-мишеней, экспрессирующих CD19. На фигуре 19A показаны данные, относящиеся к NK-клеткам от донора (№ 137), экспрессирующим указанные конструкции и совместно культивированным с клетками Raji. В данном эксперименте сконструированные NK-клетки, экспрессирующие указанные конструкции, подвергали воздействию опухолевых клеток в двух моментах времени, через 7 дней, и дополнительную болюсную дозу опухолевых клеток добавляли через 14 дней после трансдукции. Стрелкой показано второе введение опухолевых клеток. Как показано, необработанные клетки Raji размножались на протяжении всего эксперимента. NK-клетки, экспрессирующие GFP или негуманизированную NK19-1, индуцировали некоторую цитотоксичность, о чем свидетельствует снижение роста клеток Raji по сравнению с контролем. NK-клетки, экспрессирующие NKH19-3 (гуманизированную конструкцию с самой низкой эффективностью экспрессии), также были способны снижать рост клеток Raji. Каждая из других гуманизированных NK-конструкций проявляла способность снижать рост клеток Raji по сравнению с контролями даже через 14 дней после трансдукции, что свидетельствует о повышенной персистенции сконструированных NK-клеток, раскрытых в данном документе. На фигуре 19B показаны соответствующие данные для NK-клеток донора 137 в отношении клеток Nalm6, при этом сконструированные NK-клетки снова добавляли в день 7 (день 0 эксперимента) и день 14 после трансдукции (~день 7 эксперимента). Цитотоксичность указанных конструкций являлась более вариабельной в данном конкретном эксперименте. Однако несколько гуманизированных конструкций, направленных против CD19, проявляли способность обеспечивать заметную цитотоксичность и снижать рост клеток Nalm6 по сравнению с контролем. Эти данные предполагают, что в соответствии с несколькими вариантами осуществления для определенных субъектов схема с более частым введением доз (например, каждые 2 дня, каждые 3 дня, каждые 4 дня, каждые 5 дней и т. д.) являлась бы предпочтительной. Преимущественно, в нескольких вариантах осуществления сконструированные NK-клетки, раскрытые в данном документе, являются аллогенными и могут легко использоваться в схемах с более частым введением доз. На фигуре 19C показаны соответствующие данные для донора 138 в отношении клеток Raji. В данном случае, многие из гуманизированных конструкций все еще проявляли значительные цитотоксические эффекты в отношении клеток Raji, даже при введении второй дозы клеток Raji через 14 дней после трансдукции. Шесть из 7 гуманизированных конструкций продемонстрировали такие характеристики и превзошли негуманизированную конструкцию NK19-1. На фигуре 19D показаны соответствующие данные для донора 138 в отношении клеток Nalm6. Несмотря на то, что дополнительная болюсная доза клеток Nalm6 привела к увеличению роста Nalm6 на последних стадиях эксперимента, почти все гуманизированные конструкции действовали лучше, чем контроли. Фактически, NK-клетки, несущие конструкцию NK19H-5, проявляли способность ограничивать рост Nalm6 до последних нескольких дней эксперимента (после второй дозы). Как указано выше, эти данные показывают, что гуманизированные конструкции CAR к CD19 могут не только экспрессироваться NK-клетками, но также могут проявлять цитотоксическую активность в отношении клеток-мишеней с повышенной пресистенцией. В нескольких вариантах осуществления это предоставляет возможность разделения многократного введения доз более длительными периодами времени, что может являться предпочтительным при лечении видов рака, ограничивая при этом потенциальную иммуногенность (по меньшей мере частично благодаря гуманизации и/или благодаря уменьшению частоты введения).

Пример 5

[00298] Дополнительные данные относительно различных гуманизированных конструкций собирали от дополнительных доноров. На фигурах 20A-20B показаны данные экспрессии различных конструкций CAR к CD19 в NK-клетках от двух дополнительных доноров. На фигуре 20A показана средняя интенсивность флуоресценции NK-клеток через 10 дней после трансдукции. Как указано, в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, каждая из гуманизированных конструкций CAR к CD19 демонстрировала повышенную общую экспрессию по сравнению с негуманизированной конструкцией CAR к CD19. На фигуре 20B показаны данные экспрессии CD19-Flag-положительных NK-клеток в виде процентного показателя от общего количества проанализированных NK-клеток. Как показано, каждая из гуманизированных конструкций CAR к CD19 экспрессировалась более эффективно, чем негуманизированная конструкция (которая уже экспрессировалась почти в 80% NK-клеток). Гуманизированные CAR экспрессировались в приблизительно от 85% до 95% NK-клеток, в зависимости от конструкции. На фигуре 21A показаны данные цитотоксичности для сконструированных NK-клеток от донора 703 (одного из двух доноров с фигуры 20) в отношении клеток Raji, совместно культивируемых с NK-клетками в день 7 после трансдукции и снова в день 14 после трансдукции. Как показано на фигуре, клетки Raji и NK-клетки, экспрессирующие только GFP, устойчиво росли до дня 7 и снова до дня 14. Негуманизированная конструкция CAR к CD19, NK19-1, проявляла способность подавлять рост клеток Raji до дня 7 и допускала относительно ограниченный рост до дня 14. Каждая из гуманизированных конструкций CAR к CD19 дополнительно подавляла рост клеток Raji, при этом несколько конструкций почти полностью подавляли рост клеток Raji. На фигуре 21B показаны соответствующие данные по цитотоксичности в отношении клеток Raji для NK-клеток, выделенных от донора 877. Эти данные демонстрируют тенденцию, аналогичную тенденции у предыдущего донора. Две контрольные группы допускали значительный рост клеток Raji, в то время как каждая из гуманизированных конструкций CAR к CD19 демонстрировала значительные цитотоксические эффекты.

[00299] На фигурах 22A-22E показаны профили высвобождения цитокинов из клеток Raji, совместно культивируемых с NK-клетками, экспрессирующими указанные конструкции. На фигуре 22A показано высвобождение IFNg NK-клетками, совместно культивированными с клетками Raji. Каждая из указанных гуманизированных конструкций приводила к увеличению высвобождения IFNg по сравнению с негуманизированной конструкцией NK19-1. Аналогично, как показано на фигуре 22B, гуманизированные конструкции к CD19 обеспечивали NK-клетки возможностью высвобождать большее количество GM-CSF по сравнению с контрольными NK-клетками. На фигуре 22C показано, что гуманизированные конструкции CAR к CD19 индуцируют повышенное высвобождение TNF из NK-клеток. Уровни перфорина существенно не различались для всех тестируемых конструкций, как показано на фигуре 22D. Подобным образом уровни гранзима являлись относительно постоянными для всех конструкций. Эти данные, взятые в совокупности, указывают на то, что в соответствии с некоторыми вариантами осуществления гуманизированные конструкции CAR к CD19, экспрессируемые на NK-клетках, обусловливают высвобождение этими NK-клетками большего количества одного или более цитокинов, которые приводят к оказанию цитотоксических эффектов на клетки-мишени.

Пример 6

[00300] Несмотря на то, что данные, представленные выше, показывают, что гуманизированные CAR к CD19 могут экспрессироваться NK-клетками и оказывать цитотоксическое действие на опухолевые клетки-мишени, проводили дополнительные эксперименты для определения продолжительности жизни сконструированных NK-клеток. Культивировали NK-клетки, экспрессирующие указанные конструкции CAR к CD19, и количество клеток измеряли в различные моменты времени, вплоть до 26 дней после трансдукции. На фигуре 23A показаны данные выживания NK-клеток от донора 137. Данные для GFP-экспрессирующих NK-клеток показывают, что количество клеток в день 7 являлось более высоким, чем количество клеток в любой другой момент времени, что позволяет предположить, что GFP не оказывает дополнительных эффектов, способствующих продолжительности жизни NK-клеток. Подобным образом, NK-клетки, экспрессирующие негуманизированную NK19-1, демонстрировали уменьшение количества клеток с течением времени. Несмотря на то, что каждая из гуманизированных конструкций демонстрирует некоторую вариабельность в отношении количества клеток, тенденция данных показывает, что экспрессия гуманизированных конструкций, направленных против CD19, приводит к меньшей гибели NK-клеток с течением времени. Аналогичная тенденция представлена в данных на фигуре 23B, на которой показана жизнеспособность клеток для NK-клеток от донора 138. Несмотря на то, что время анализа изменено, на фигуре 23C показаны данные, представляющие аналогичную тенденцию (для донора 703), в том смысле, что экспрессия гуманизированных конструкций приводит к более длительному выживанию NK-клеток в культуре с течением времени. На фигуре 23D показаны данные для NK-клеток от донора 877, где экспрессия гуманизированных конструкций CAR к CD19 обеспечивает возможность снижения степени гибели NK-клеток в культуре с течением времени.

[00301] Сводные данные по экспрессии различных конструкций CAR к CD19 показаны на фигуре 24, которая отображает эффективность экспрессии указанных конструкций в день 11 после трансдукции. Как и ожидалось, NK-клетки, трансдуцированные GFP, не проявляют экспрессии CD19-Flag, выступая в качестве отрицательного контроля. Подобным образом, негуманизированная конструкция NK19-1 выступает в качестве положительного контроля. Каждая из оценивавшихся гуманизированных конструкций показала повышенную эффективность экспрессии по сравнению с NK19-1, при этом эффективность варьировала от приблизительно 85% до приблизительно 95% (например, 85-95% всех протестированных NK-клеток экспрессировали помеченную Flag конструкцию CAR).

[00302] На фигурах 25A-25I показаны необработанные данные проточной цитометрии для одного донора, где измеряли экспрессию CD19-Flag (показывающую экспрессию CAR). На фигуре 25A показан GFP-контроль с небольшой экспрессией Flag или без нее. На фигуре 25B показано выявление Flag с использованием положительного контроля NK19-1. На фигурах 25C-25I показаны результаты выявления Flag для указанных гуманизированных конструкций CAR к CD19, при этом процентная доля клеток, экспрессирующих данные конструкции, варьирует от приблизительно 80% до приблизительно 95%. Как и в описанных выше экспериментах, эти данные подтверждают, что гуманизированные конструкции CAR к CD19 могут устойчиво экспрессироваться трансдуцированными NK-клетками.

Пример 7

[00303] Аналогично экспериментам, рассмотренным выше, клетки Raji подвергали воздействию NK-клеток от донора 103, которые трансдуцировали различными указанными конструкциями (см. фигуру 26A). Клетки Raji совместно культивировали в день 7 после трансдукции NK-клеток, и повторно вносили к NK-клеткам в день 14. Как и ожидалось, отдельно взятые клетки Raji демонстрировали непрерывный рост, в то время как GFP-трансдуцированные NK-клетки немного снижали этот клеточный рост. Напротив, негуманизированная конструкция NK19-1 в качестве положительного контроля снижала рост клеток Raji до самых поздних стадий эксперимента. Каждая из гуманизированных конструкций CAR к CD19 проявляла повышенную цитотоксичность в отношении клеток Raji. Три из данных конструкций (NK19H-2, H-3 и H-4) допускали незначительный рост клеток Raji на поздней стадии эксперимента, в то время как другие гуманизированные конструкции эффективно устраняли рост клеток Raji даже при их повторном внесении в день 14. На фигуре 26B показаны соответствующие данные относительно цитотоксичности NK-клеток от донора 103 в отношении клеток Nalm6. Как показано на фигуре, все конструкции CAR к CD19 (независимо от того, гуманизированы они или нет) демонстрировали значительную цитотоксичность в отношении клеток Nalm6 в течение 7 дней совместного культивирования. Однако рост Nalm6 увеличился во всех группах после повторного внесения в день 14. Несмотря на то, что кривые роста изначально были несколько пологими, позже скорость роста Nlam6 увеличилась. Эти данные предполагают, что в соответствии с некоторыми вариантами осуществления применяют стратегию более частого введения доз для предупреждения достижения пороговой скорости роста клетками-мишенями. В нескольких вариантах осуществления вводят большую дозу и/или дозу вводят чаще для предупреждения роста клеток-мишеней в физиологических условиях, эквивалентных «повторному внесению».

[00304] На фигуре 26C показаны данные для клеток Raji (как на фигуре 26A) с NK-клетками от донора 275. Аналогично конструкциям на фигуре 26A, каждая из конструкций CAR к CD19 проявляла значительную цитотоксичность в отношении клеток Raji и при этом допускала ограниченный рост клеток-мишеней даже при повторном внесении. На фигуре 26D показаны данные для клеток Nalm6 (как на фигуре 26B) с NK-клетками от донора 275. Результаты данного эксперимента также были аналогичны результатам для донора 103, с эффективным контролем клеток Nalm6 в течение 7 дней, но со снижением цитотоксичности после повторного внесения. Эти данные указывают на то, что стратегии введения доз в зависимости от варианта осуществления разрабатываются для конкретного донора и/или для конкретного целевого типа опухоли. Например, хотя клетки Nalm6 являются CD19-положительными, они могут экспрессировать меньше CD19, чем, например клетки Raji, что объясняет пониженную цитотоксичность NK-клеток от доноров 103 и 275 в отношении линии клеток Nalm6. Эффективность трансдуцированных NK-клеток в отношении клеток Raji указывает на то, что NK-клетки способны проявлять цитотоксичность, даже демонстрируя персистенцию в течение почти двух недель после трансдукции. Таким образом, в соответствии с несколькими вариантами осуществления дозу NK-клеток и/или частоту введения доз можно адаптировать к типу опухоли данного пациента, активности нативных NK-клеток и/или агрессивности/стадии рака для обеспечения устойчивой и непрекращающейся цитотоксичности в отношении клеток-мишеней и достижения контроля над опухолевой нагрузкой.

[00305] На фигурах 27A-27B показаны данные проточной цитометрии, характеризующие NK-клетки от двух доноров (276 на фигуре 17A и 877 на фигуре 27B), трансдуцированные неограничивающими примерами конструкций CAR к CD19, которые раскрыты в данном документе. На фигуре 27A и 27B показано, что NK-клетки, трансдуцированные GFP, незначительно экспрессируют или не экспрессируют CD19-Flag. Каждая из других панелей демонстрирует, что NK-клетки от данных доноров могут экспрессировать не только негуманизированную конструкцию NK19-1 положительного контроля, но также эффективно экспрессируют выбранные гуманизированные конструкции CAR к CD19. Это указывает на ограниченное влияние, которое гуманизация связывающего фрагмента к CD19 оказывает на характеристики экспрессии.

На фигурах 28A-28B показаны исходные данные по цитотоксичности NK-клеток этих двух доноров, указанных на фигуре 27, в отношении клеток Raji при соотношении E:T, составляющем 1:1. В соответствии с результатами, рассмотренными выше, каждая из выбранных гуманизированных конструкций CAR к CD19 наделяла трансдуцированные NK-клетки значительным цитотоксическим потенциалом в отношении клеток-мишеней Raji. Каждый из указанных неограничивающих примеров конструкций CAR к CD19 эффективно контролировал рост клеток Raji (эквивалентно или усиленно по сравнению с негуманизированной конструкцией NK19-1) с тенденцией к уменьшению количества клеток Raji даже до 70 часов после начала эксперимента. Аналогично, на фигуре 28B показано, что трансдуцированные NK-клетки от донора 877 также эффективно контролировали рост клеток Raji, эквивалентно негуманизированной конструкции NK19-1 или усиленно по сравнению с ней. Эти данные согласуются с данными, представленными для NK-клеток от других доноров, рассмотренными выше, и указывают на то, что в соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, трансдукция NK-клеток гуманизированными CAR к CD19 обеспечивает возможность сконструированным NK-клеткам проявлять значительные цитотоксические эффекты в отношении опухолевых клеток-мишеней и может эффективно контролировать рост опухолевых клеток. В соответствии с нескольким вариантами осуществления такие сконструированные NK-клетки к CD19 (аллогенные или аутологичные) предоставляют возможность проведения устойчивой и эффективной клеточной иммунотерапии для лечения рака.

Пример 8

[00306] Проводили дополнительные эксперименты для оценки гуманизированных конструкций CAR к CD19, раскрытых в данном документе. На фигуре 29A показана схема экспериментального протокола. Вкратце, мышам NSG в день 0 внутривенно вводили 1 x 10⁵ клеток Nalm6 (экспрессирующих флуоресцентный репортер). В день 1 мышам вводили либо контрольный PBS, нетрансдуцированные NK-клетки («NTNK», 10 М), 10 миллионов NK-клеток, экспрессирующих негуманизированную конструкцию CAR NK19-1, либо 10 миллионов NK-клеток, экспрессирующих одну из различных гуманизированных конструкций CAR к CD19. Сбор крови и флуоресцентную визуализацию выполняли, как указано. Данные биолюминесценции представлены на фигуре 29B. Как показано, инъекция NK-клеток, экспрессирующих любую конструкцию CAR к CD19, приводила к снижению прогрессирования роста клеток Nalm6. Каждая протестированная гуманизированная конструкция (NK19-H2, NK19-H5 и NK19H-9) показала значительную задержку роста клеток Nalm6 по сравнению с контролями. На фигуре 29C показан линейный график, представляющий биолюминесценцию, измерявшуюся в течение 31 дня. Как показано, каждая из гуманизированных конструкций, протестированных в данном эксперименте, демонстрировала снижение прогрессирования опухоли по сравнению с контролем и небольшое снижение по сравнению с негуманизированной конструкцией NK19-1. На фигуре 29D показана кривая выживания, которая отражает снижение прогрессирования опухоли, при этом мыши, обработанные NK19-1 или любой из выбранных гуманизированных конструкций, выживают дольше, чем мыши контрольных групп. На фигуре 29E показаны данные, относящиеся к оценке экспрессии каждой из гуманизированных конструкций на NK-клетках. Как показано, каждая из гуманизированных конструкций экспрессировалась более устойчиво, чем негуманизированная конструкция NK19-1. В соответствии с несколькими вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе, использование гуманизированной конструкции приводит к большей терапевтической эффективности, по меньшей мере частично благодаря повышенной экспрессии (и/или активности) CAR NK-клетками.

[00307] На фигурах 30A-30F представлены данные, относящиеся к характеристикам клеток в крови мышей, обработанных указанными конструкциями, в различные моменты времени в течение эксперимента. На фигуре 30A показана процентная доля клеток CD56+ человека в периферической крови мышей, которая представляет выживание введенных NK-клеток в течение первых пятнадцати дней эксперимента. Каждая из экспериментальных групп демонстрировала более высокую процентную долю клеток, при этом конструкция NK19-H2 демонстрировала наибольшую персистенцию среди протестированных конструкций. На фигуре 30B показаны аналогичные данные, основанные на выявлении экспрессии метки flag, используемой в данных конструкциях (хотя в некоторых вариантах осуществления метку не использовали). Эти данные показывают, что гуманизированные конструкции экспрессируются на более высоких уровнях, чем негуманизированные конструкции. На фигуре 30C показано выявление GFP-положительных опухолевых клеток через 15 дней. CAR-экспрессирующие NK-клетки показывали почти нулевую экспрессию GFP, что отражает ингибирование ими роста клеток Nalm6 в день 15. На фигурах 30D-30F показаны аналогичные данные в день 32. Эти данные показывают, что NK-клетки, экспрессирующие гуманизированные конструкции CAR к CD19, составляют большую процентную долю клеток, присутствующих в периферической крови тестированных мышей, что согласуется с повышенной эффективностью данных конструкций в контроле роста опухоли в более поздние моменты времени. На фигуре 30F показано, что существует небольшая разница в экспрессии между гуманизированными конструкциями CAR к CD19 в день 32. На фигуре 32F отображена повышенная способность NK-клеток, экспрессирующих гуманизированные конструкции CAR к CD19, контролировать рост опухоли, при этом количество обнаруженных GFP-положительных клеток являлось более низким в группах обработки гуманизированными конструкциями, даже по сравнению с животными, получавшими конструкцию NK19-1. В нескольких вариантах осуществления повышенная эффективность обусловлена, по меньшей мере частично, повышенной экспрессией гуманизированных конструкций CAR к CD19.

Пример 9

[00308] Как рассматривалось выше, в некоторых вариантах осуществления конструкции CAR содержат метку для выявления. Однако в некоторых вариантах осуществления метку не используют. Проводили эксперименты для оценки экспрессии немеченых гуманизированных CAR. В данном эксперименте использовали NK19H-NK-2, -5 и -9 в качестве неограничивающих примеров немеченых гуманизированных CAR. На фигурах 31A-31B показаны данные экспрессии (процентный показатель экспрессии на фигуре 31A, средняя флуоресценция на фигуре 31B) указанной конструкции NK-клетками от трех разных доноров, измеряемой каждую неделю в течение 4 недель. Эти данные демонстрируют, что немеченые версии конструкций CAR к CD19, предусмотренные в данном документе, экспрессируются относительно аналогично друг другу, но более устойчиво, чем негуманизированные конструкции. Каждая из немеченых гуманизированных конструкций экспрессировалась по меньшей мере приблизительно в 70-80% NK-клеток.

Пример 10

[00309] Проводили эксперименты по оценке цитотоксичности NK-клеток, экспрессирующих гуманизированные, немеченые конструкции CAR к CD19. Проводили анализ с повторным внесением in vitro, описанный выше, с применением клеток Raji (фигуры 32A-32B) или клеток Nalm6 (фигуры 32C-32D) в качестве клеток-мишеней. На фигуре 32A показана процентная доля клеток Raji, совместно культивируемых с указанным вариантом обработки, измеренная как процент от количества клеток, измеренного в контрольной группе, содержащей только клетки Raji, в день 10 эксперимента. Как показано, каждая из конструкций CAR к CD19 независимо от того, гуманизированная или нет, и независимо от того, меченая или нет, по сути устраняла рост клеток Raji до дня 10. На фигуре 32B показан последний момент времени, в который остался ограниченный рост клеток Raji в каждой из экспериментальных групп с CAR к CD19, хотя данные показывают небольшую тенденцию к большему предупреждению роста клеток Raji в группах с NK19H-NF-2 и NK19H-NF-5. На фигурах 32C и 32D показаны соответствующие данные с использованием клеток Nalm6. На фигуре 32C показано, что, как и в случае с клеткам Raji, каждая из конструкций CAR к CD19 независимо от того, гуманизированная или нет, и независимо от того, меченая или нет, по сути устраняла рост клеток Nalm6 в течение 10 дней. В последний момент времени наблюдали рост клеток Nalm6 во всех группах, хотя данные показывают, что гуманизированные конструкции более эффективны в предупреждении роста.

[00310] На фигурах 33A-33J представлены данные, относящиеся к выявленному цитокиновому профилю NK-клеток, экспрессирующих указанные конструкции. Как рассматривалось выше, культуральные среды от каждой группы обработки анализировали на содержание гамма-интерферона (33A/33F), GM-CSF (33B/33G), TNF-альфа (33C/33H), перфорина (33D/33I) и гранзима B (33E/33J). На фигурах 33A-33E показаны данные от повторного внесения клеток Raji, а на фигурах 33F-33J показаны данные от повторного внесения клеток Nalm6. Как показано, NK-клетки, экспрессирующие немеченые гуманизированные конструкции CAR к CD19, высвобождают аналогичные уровни аналогичного количества IFN-гамма в среду, при этом данные уровни немного превышают количество, высвобождаемое NK-клетками, экспрессирующими негуманизированную конструкцию CAR NK19-1. Аналогично, высвобождение GM-CSF являлось довольно однородным среди NK-клеток, несущих гуманизированные немеченые CAR, и находилось на уровне, немного приближающемся к уровню экспрессирующих NK19-1 клеток. Высвобождение TNF-альфа демонстрировало аналогичную закономерность, в то время как высвобождение перфорина являлось однородным среди всех NK-клеток, экспрессирующих CAR к CD19, и находилось на уровне ниже уровня контрольных клеток. Наконец, с клетками Raji гранзим B показал аналогичную степень высвобождения в случае немеченых гуманизированных CAR к CD19 на уровне, немного превышающем уровень экспрессирующих NK19-1 клеток. Преимущественно, данные, собранные в эксперименте с клетками Nalm6, показали аналогичные закономерности. В соответствии с несколькими вариантами осуществления более высокая степень высвобождения опосредующих цитотоксичность цитокинов приводит к большей терапевтической эффективности. В некоторых вариантах осуществления более высокая степень высвобождения цитокинов обусловлена, по меньшей мере частично, усиленной экспрессией немеченых гуманизированных конструкций CAR к CD19 NK-клетками и/или, по меньшей мере частично, обусловлена повышенной персистентностью NK-клеток, экспрессирующих немеченые гуманизированные конструкции CAR к CD19. В качестве дополнительного подтверждения данных положений на фигуре 34 показаны данные, относящиеся к персистенции NK-клеток, экспрессирующих указанные немеченые гуманизированные конструкции, в течение четырех недель культивирования по сравнению с NK-клетками, экспрессирующими NK19-1. Несмотря на то, что общее количество клеток представляется одинаковым среди NK-клеток, экспрессирующих гуманизированные конструкции, количество клеток демонстрирует ту же основную закономерность, что и цитокины, то есть немного превышает количество NK-клеток, экспрессирующих негуманизированную NK19-1.

Пример 11

[00311] Аналогично описанным выше экспериментам, проводили in vivo оценку эффективности немеченых, гуманизированных конструкций. На фигуре 35A показана схема используемого протокола. На фигуре 35B показаны измерения биолюминесценции in vivo, которые показывают, что гуманизированные, немеченые конструкции, как оказалось, замедляют прогрессирование опухоли в большей степени, чем NK-клетки, экспрессирующие конструкцию NK19-1. На фигуре 35C обобщены данные визуализации в виде линейного графика, где усиленное ингибирование роста опухолевых клеток можно отчетливо наблюдать при введении мышам NK-клеток, экспрессирующих любую из немеченых гуманизированных конструкций CAR к CD19. На фигуре 35D отображена усиленная экспрессия немеченых гуманизированных конструкций NK-клетками. На фигурах 36A-36F представлены данные, относящиеся к персистенции NK-клеток, экспрессирующих указанные конструкции, на хронологической шкале эксперимента. На фигуре 36A указано, что NK-клетки, экспрессирующие немеченые гуманизированные конструкции CAR к CD19, являются более персистентными in vivo, составляя большую процентную долю от общего количества клеток CD56+ в периферической крови в день 13. На фигуре 36B продемонстрировано, что в день 13 NK-клетки, экспрессирующие любой CAR к CD19, ингибируют рост опухоли лучше, чем контрольные, при этом NK-клетки, экспрессирующие немеченые гуманизированные конструкции CAR к CD19, демонстрируют небольшое преимущество над NK-клетками, экспрессирующими NK19-1, в отношении ограничения роста опухолевых клеток CD19+. На фигуре 36C показаны данные, аналогичные данным на фигуре 36B, с использованием количества GFP-положительных опухолевых клеток в качестве сравнительного критерия. На фигуре 36D показаны данные персистенции в день 27, где NK-клетки, экспрессирующие NK19-NF-2 и -9, характеризуются повышенной численностью популяции по сравнению с другими группами, что указывает на повышенную персистенцию в течение более длительного периода времени. Аналогично предыдущему моменту времени, на фигурах 36E и 36F показано, что все конструкции CAR, целенаправленно воздействующие на CD19, являются эффективными в ограничении роста опухолевых клеток по сравнению с контрольными конструкциями. В соответствии с несколькими вариантами осуществления, предусмотренными в данном документе, экспрессия NK-клетками немеченого гуманизированного CAR, целенаправленно воздействующего на CD19, вызывает появление таких NK-клеток с повышенной персистентностью и цитотоксичностью in vivo.

Пример 12

[00312] Как рассматривается в данном документе, в нескольких вариантах осуществления сконструированные NK-клетки получают для аллогенной клеточной терапии. В связи с этим, в нескольких вариантах осуществления сконструированные NK-клетки, предназначенные для введения, получают и затем замораживают для последующего использования у субъекта. Проводили эксперименты, чтобы определить, окажет ли процесс криоконсервации с последующим оттаиванием нежелательное воздействие на сконструированные NK-клетки, например, за счет снижения их жизнеспособности, персистенции или цитотоксичности. На фигуре 37A показана схема примененного экспериментального протокола, а также экспериментальные группы и другие применявшиеся условия. В случае клеток с обозначением «IL12/IL18» клетки размножали в присутствии растворимого IL12 и/или IL18, как описано в предварительной заявке на патент США № 62/881311, поданной 31 июля 2019 г., и заявке № 62/932342, поданной 7 ноября 2019 г., каждая из которых полностью включена в данный документ посредством ссылки. На фигуре 37B и 37C показаны изображения биолюминесценции in vivo для указанных экспериментальных групп. На фигуре 38A-38H показаны линейные графики, отражающие интенсивность биолюминесценции с течением времени. Эти данные обобщены на фигуре 38I, на которой показаны данные первых 30 дней, и на фигуре 38J, на которой показаны данные за 56 дней. Не смотря на то, что на фигуре 38I показано четкое различие между NK-клетками, экспрессирующими CAR к CD19, и контрольными, существует номинальное разделение между экспериментальными группами. Однако на фигуре 38J показаны данные за 56 дней, и существует большее различие в способности экспрессирующих различные конструкции CAR и подвергнутых обработке в указанных условиях NK-клеток ингибировать рост опухолевых клеток. Следует отметить, что «пары» групп (одна и та же конструкция CAR, свежая и замороженная) проявляют довольно сходную противоопухолевую активность. Это указывает на то, что в соответствии с несколькими вариантами осуществления сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CAR к CD19, эффективны не только в том случае, если их получили и ввели в свежем виде. Дополнительно, в соответствии с несколькими вариантами осуществления сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CAR к CD19, эффективны не только в том случае, если их получили, заморозили, затем подвергли оттаиванию и ввели (например, как в случае с аллогенными клетками).

[00313] На фигуре 39 показан линейный график массы тела мышей, обработанных указанными конструкциями, за 56 дней эксперимента. Снижение массы тела коррелирует с усилением роста опухоли, например прогрессирование опухоли приводит к ухудшению здоровья мышей и соответствующей потере массы тела (например, истощению). Как показано, контрольные группы демонстрируют существенную потерю массы тела в течение 30 дней, в то время как в экспериментальных группах масса тела увеличивается на протяжении большей части эксперимента. Как и в случае с данными биолюминесценции, рассматривавшимися выше, существует заметная тенденция, согласно которой многие из свежих и замороженных препаратов при сравнении проявляют по существу сходное влияние на массу тела. В соответствии с несколькими вариантами осуществления сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CAR к CD19, эффективны не только в том случае, если их получили и ввели в свежем виде. Дополнительно, в соответствии с несколькими вариантами осуществления сконструированные NK-клетки, экспрессирующие CAR к CD19, эффективны не только в том случае, если их получили, заморозили, затем подвергли оттаиванию и ввели (например, как в случае с аллогенными клетками).

[00314] Предполагается, что можно выполнять различные комбинации или подкомбинации специфических признаков и аспектов вариантов осуществления, раскрытых выше, которые, тем не менее, будут попадать в рамки одного или более описаний согласно настоящему изобретению. Дополнительно, раскрытие в данном документе любого конкретного признака, аспекта, способа, свойства, характеристики, качества, атрибута, элемента или тому подобного в связи с вариантом осуществления можно применять во всех других вариантах осуществления, изложенных в данном документе. Соответственно, следует понимать, что различные признаки и аспекты раскрытых вариантов осуществления можно комбинировать или заменять друг другом с целью получения различных вариантов осуществления описаний согласно раскрытому изобретению. Таким образом, предполагается, что объем описаний согласно настоящему изобретению, раскрытому в данном документе, не должен ограничиваться конкретными раскрытыми вариантами осуществления, описанными выше. Более того, несмотря на то, что настоящее изобретение допускает различные модификации и альтернативные формы, его конкретные примеры показаны на графических материалах и подробно описаны в данном документе. Однако следует понимать, что настоящее изобретение не должно ограничиваться конкретными раскрытыми формами или способами, но наоборот, настоящее изобретение предназначено для охвата всех модификаций, эквивалентов и альтернативных вариантов, попадающих в рамки сути и объема различных описанных вариантов осуществления и приложенной формулы изобретения. Любые раскрытые в данном документе способы не требуют выполнения в указанном порядке. Раскрытые в данном документе способы включают определенные действия, предпринимаемые практикующим специалистом; однако, они также могут включать любые сторонние инструкции по данным действиям, прямо или косвенно. В дополнение, если признаки или аспекты настоящего изобретения описаны в терминах групп Маркуша, то специалисты в данной области поймут, что в изобретении описан таким образом любой отдельные представитель или подгруппа представителей группы Маркуша.

[00315] Раскрытые в данном документе диапазоны также охватывают любые возможные перекрытия, поддиапазоны и их комбинации. Такие выражения, как «до», «по меньшей мере», «более чем», «менее чем», «между» и т. п., включают в себя указанное число. Числа, которым предшествует такой термин, как «приблизительно» или «примерно», включают в себя указанное число. Например, «приблизительно 90%» включает «90%». В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 95% идентичность или гомология последовательности включает 96%, 97%, 98%, 99% и 100% идентичность или гомологию последовательности с эталонной последовательностью. Кроме того, когда последовательность описана как «содержащая» нуклеотидную или аминокислотную последовательность, такое упоминание также должно включать в себя, если не указано иное, что последовательность «содержит», «состоит из» или «состоит по сути из» указанной последовательности.

[00316] В нескольких вариантах осуществления предусмотрены аминокислотные последовательности, которые соответствуют любой из нуклеиновых кислот, раскрытых в данном документе, с учетом вырожденности кода нуклеиновой кислоты. Более того, те последовательности (будь то последовательность нуклеиновой кислоты или аминокислотная последовательность), которые отличаются от тех, которые явным образом раскрыты в данном документе, но имеют функциональное сходство или эквивалентность, как предполагается, также входят в объем настоящего изобретения. Вышеизложенное включает мутанты, усечения, замены или другие типы модификаций.

[00317] Любые заголовки или подзаголовки, используемые в данном документе, предназначены для организационных целей и не должны использоваться для ограничения объема раскрытых в данном документе вариантов осуществления.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Нкарта, Инк.

<120> CD19-НАПРАВЛЕННЫЕ ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И ПУТИ ИХ

ПРИМЕНЕНИЯ В ИММУНОТЕРАПИИ

<130> NKT.0033WO

<150> 62/814180

<151> 2019-03-05

<150> 62/895910

<151> 2019-09-04

<150> 62/932165

<151> 2019-11-07

<160> 207

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 135

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Шарнир CD8-альфа - ДНК

<400> 1

accacgacgc cagcgccgcg accaccaaca ccggcgccca ccatcgcgtc gcagcccctg 60

tccctgcgcc cagaggcgtg ccggccagcg gcggggggcg cagtgcacac gagggggctg 120

gacttcgcct gtgat 135

<210> 2

<211> 45

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Шарнир CD8a - белок

<400> 2

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp

35 40 45

<210> 3

<211> 63

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> TM CD8 - ДНК

<400> 3

atctacatct gggcgccctt ggccgggact tgtggggtcc ttctcctgtc actggttatc 60

acc 63

<210> 4

<211> 21

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> TM CD8 - белок

<400> 4

Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu

1 5 10 15

Ser Leu Val Ile Thr

20

<210> 5

<211> 111

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> OX40 - ДНК

<400> 5

cggagggacc agaggctgcc ccccgatgcc cacaagcccc ctgggggagg cagtttccgg 60

acccccatcc aagaggagca ggccgacgcc cactccaccc tggccaagat c 111

<210> 6

<211> 37

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> OX40 - белок

<400> 6

Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly

1 5 10 15

Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser

20 25 30

Thr Leu Ala Lys Ile

35

<210> 7

<211> 336

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CD3-дзета - ДНК

<400> 7

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 60

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc 336

<210> 8

<211> 112

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CD3-дзета - белок

<400> 8

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

1 5 10 15

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

20 25 30

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

35 40 45

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

50 55 60

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

65 70 75 80

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

85 90 95

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

100 105 110

<210> 9

<211> 63

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> T2A - ДНК

<400> 9

ggctctggcg agggaagggg ttccctgctt acttgcggcg acgtcgaaga gaatcccggt 60

ccg 63

<210> 10

<211> 21

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> T2A - белок

<400> 10

Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu

1 5 10 15

Glu Asn Pro Gly Pro

20

<210> 11

<211> 342

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> IL15 - ДНК

<400> 11

aactgggtca acgtgattag cgatttgaag aaaatcgagg accttataca gtctatgcat 60

attgacgcta cactgtatac tgagagtgat gtacacccgt cctgtaaggt aacggccatg 120

aaatgctttc ttctggagct ccaggtcatc agcttggagt ctggggacgc aagcatccac 180

gatacggttg aaaacctcat catccttgcg aacaactctc tctcatctaa tggaaacgtt 240

acagagagtg ggtgtaagga gtgcgaagag ttggaagaaa aaaacatcaa agaatttctt 300

caatccttcg ttcacatagt gcaaatgttc attaacacgt cc 342

<210> 12

<211> 114

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> IL15 - белок

<400> 12

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

1 5 10 15

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

20 25 30

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

35 40 45

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

50 55 60

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

65 70 75 80

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

85 90 95

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

100 105 110

Thr Ser

<210> 13

<211> 207

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Шарнир/TM CD8 - ДНК

<400> 13

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 60

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 120

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 180

ctctcactcg ttattacgct gtactgc 207

<210> 14

<211> 66

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Шарнир/TM CD8 - белок

<400> 14

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile

35 40 45

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

50 55 60

Ile Thr

65

<210> 15

<211> 30

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер 1 (используют после метки FLAG) - ДНК

<400> 15

ggcggtggtg gctctggtgg tggcggcagc 30

<210> 16

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер 1 (используют после метки FLAG) - белок

<400> 16

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 17

<211> 30

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер 2 - после связывющего домена отриц. контроля - ДНК

<400> 17

ggccaggccg gctccggagg aggaggatcc 30

<210> 18

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер 2 - после связывющего домена отриц. контроля - белок

<400> 18

Gly Gln Ala Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 19

<211> 12

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер после scFv - ДНК

<400> 19

ggccaggccg gc 12

<210> 20

<211> 4

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер после scFv - белок

<400> 20

Gly Gln Ala Gly

1

<210> 21

<211> 33

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер - ДНК

<220>

<221> другой признак

<223> Другой линкер - ДНК

<400> 21

ggcggcggcg gtagcggtgg tggcggctcc gga 33

<210> 22

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Другой линкер - белок

<400> 22

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10

<210> 23

<211> 18

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер - ДНК

<400> 23

ggccaggccg gctccgga 18

<210> 24

<211> 6

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Линкер - белок

<400> 24

Gly Gln Ala Gly Ser Gly

1 5

<210> 25

<211> 405

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Внеклеточный фрагмент NKG2D - ДНК

<400> 25

ttattcaacc aagaagttca aattcccttg accgaaagtt actgtggccc atgtcctaaa 60

aactggatat gttacaaaaa taactgctac caattttttg atgagagtaa aaactggtat 120

gagagccagg cttcttgtat gtctcaaaat gccagccttc tgaaagtata cagcaaagag 180

gaccaggatt tacttaaact ggtgaagtca tatcattgga tgggactagt acacattcca 240

acaaatggat cttggcagtg ggaagatggc tccattctct cacccaacct actaacaata 300

attgaaatgc agaagggaga ctgtgcactc tatgcctcga gctttaaagg ctatatagaa 360

aactgttcaa ctccaaatac gtacatctgc atgcaaagga ctgtg 405

<210> 26

<211> 135

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Внеклеточный фрагмент NKG2D - белок

<400> 26

Leu Phe Asn Gln Glu Val Gln Ile Pro Leu Thr Glu Ser Tyr Cys Gly

1 5 10 15

Pro Cys Pro Lys Asn Trp Ile Cys Tyr Lys Asn Asn Cys Tyr Gln Phe

20 25 30

Phe Asp Glu Ser Lys Asn Trp Tyr Glu Ser Gln Ala Ser Cys Met Ser

35 40 45

Gln Asn Ala Ser Leu Leu Lys Val Tyr Ser Lys Glu Asp Gln Asp Leu

50 55 60

Leu Lys Leu Val Lys Ser Tyr His Trp Met Gly Leu Val His Ile Pro

65 70 75 80

Thr Asn Gly Ser Trp Gln Trp Glu Asp Gly Ser Ile Leu Ser Pro Asn

85 90 95

Leu Leu Thr Ile Ile Glu Met Gln Lys Gly Asp Cys Ala Leu Tyr Ala

100 105 110

Ser Ser Phe Lys Gly Tyr Ile Glu Asn Cys Ser Thr Pro Asn Thr Tyr

115 120 125

Ile Cys Met Gln Arg Thr Val

130 135

<210> 27

<211> 645

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Цельный NKG2D человека - ДНК

<400> 27

gggtggattc gtggtcggag gtctcgacac agctgggaga tgagtgaatt tcataattat 60

aacttggatc tgaagaagag tgatttttca acacgatggc aaaagcaaag atgtccagta 120

gtcaaaagca aatgtagaga aaatgcatct ccattttttt tctgctgctt catcgctgta 180

gccatgggaa tccgtttcat tattatggta acaatatgga gtgctgtatt cctaaactca 240

ttattcaacc aagaagttca aattcccttg accgaaagtt actgtggccc atgtcctaaa 300

aactggatat gttacaaaaa taactgctac caattttttg atgagagtaa aaactggtat 360

gagagccagg cttcttgtat gtctcaaaat gccagccttc tgaaagtata cagcaaagag 420

gaccaggatt tacttaaact ggtgaagtca tatcattgga tgggactagt acacattcca 480

acaaatggat cttggcagtg ggaagatggc tccattctct cacccaacct actaacaata 540

attgaaatgc agaagggaga ctgtgcactc tatgcctcga gctttaaagg ctatatagaa 600

aactgttcaa ctccaaatac gtacatctgc atgcaaagga ctgtg 645

<210> 28

<211> 405

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Кодон-оптимизированный фрагмент NKG2D человека - ДНК

<400> 28

ctgttcaatc aggaagtcca gatccccctg acagagtctt actgcggccc atgtcccaag 60

aactggatct gctacaagaa caattgttat cagttctttg acgagagcaa gaactggtat 120

gagtcccagg cctcttgcat gagccagaat gcctctctgc tgaaggtgta cagcaaggag 180

gaccaggatc tgctgaagct ggtgaagtcc tatcactgga tgggcctggt gcacatccct 240

acaaacggct cttggcagtg ggaggacggc tccatcctgt ctccaaatct gctgaccatc 300

atcgagatgc agaagggcga ttgcgccctg tacgccagct ccttcaaggg ctatatcgag 360

aactgctcca cacccaatac ctacatctgt atgcagagga ccgtg 405

<210> 29

<211> 126

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> 4-1BB

<400> 29

aaacggggca gaaagaaact cctgtatata ttcaaacaac catttatgag accagtacaa 60

actactcaag aggaagatgg ctgtagctgc cgatttccag aagaagaaga aggaggatgt 120

gaactg 126

<210> 30

<211> 29

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Аминокислотная последовательность трансмембранного домена CD28

<400> 30

Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu

1 5 10 15

Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser

20 25

<210> 31

<211> 39

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Аминокислотная последовательность IC-домена CD28

<400> 31

Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg

1 5 10 15

Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg

20 25 30

Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser

35

<210> 32

<211> 123

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> VL Nicholson et al.

<400> 32

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr Arg Ala Asp Ala Ala

100 105 110

Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Asn

115 120

<210> 33

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> VH Nicholson et al.

<400> 33

Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 34

<211> 634

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Белковая искусственная последовательность химерного рецептора CD19R-дзета

<400> 34

Met Leu Leu Leu Val Thr Ser Leu Leu Leu Cys Glu Leu Pro His Pro

1 5 10 15

Ala Phe Leu Leu Ile Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser

20 25 30

Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser

35 40 45

Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly

50 55 60

Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val

65 70 75 80

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr

85 90 95

Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln

100 105 110

Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile

115 120 125

Thr Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser

130 135 140

Thr Lys Gly Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala

145 150 155 160

Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu

165 170 175

Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu

180 185 190

Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser

195 200 205

Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln

210 215 220

Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr

225 230 235 240

Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

245 250 255

Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Val Glu Pro Lys Ser

260 265 270

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

275 280 285

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

290 295 300

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

305 310 315 320

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

325 330 335

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

340 345 350

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

355 360 365

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

370 375 380

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

385 390 395 400

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

405 410 415

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

420 425 430

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

435 440 445

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

450 455 460

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

465 470 475 480

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

485 490 495

Ser Pro Gly Lys Met Ala Leu Ile Val Leu Gly Gly Val Ala Gly Leu

500 505 510

Leu Leu Phe Ile Gly Leu Gly Ile Phe Phe Arg Val Lys Phe Ser Arg

515 520 525

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

530 535 540

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

545 550 555 560

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

565 570 575

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

580 585 590

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

595 600 605

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

610 615 620

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

625 630

<210> 35

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HCV scFv к CD19

<400> 35

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 36

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HCV scFv к CD19

<400> 36

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 37

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 LC

<400> 37

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 38

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 LC

<400> 38

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 39

<211> 9

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 LC

<400> 39

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 40

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HC

<400> 40

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 41

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC

<400> 41

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 42

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC - альтернативный вариант

<400> 42

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 43

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC - альтернативный вариант 2

<400> 43

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 44

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HC

<400> 44

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 45

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 1 легкой цепи

<400> 45

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Lys His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 46

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 2 легкой цепи

<400> 46

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 47

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 3 легкой цепи

<400> 47

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Lys His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 48

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 4 легкой цепи

<400> 48

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Lys His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 49

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 1 тяжелой цепи

<400> 49

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 50

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 2 тяжелой цепи

<400> 50

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Phe Leu

65 70 75 80

Lys Met Ser Ser Leu Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 51

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 3 тяжелой цепи

<400> 51

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 52

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Вариабельная область 4 тяжелой цепи

<400> 52

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gly

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 53

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 LC

<400> 53

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys

1 5

<210> 54

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 LC

<400> 54

Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu

1 5

<210> 55

<211> 9

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 LC

<400> 55

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 56

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HC

<400> 56

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 57

<211> 14

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC

<400> 57

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

1 5 10

<210> 58

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HC

<400> 58

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 59

<211> 2210

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-1b ДНК

<400> 59

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1080

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1140

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1200

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1260

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1320

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1380

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1440

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1500

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1560

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1620

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1680

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1740

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1800

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1860

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1920

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1980

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 2040

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2100

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2160

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2210

<210> 60

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-1b белок

<400> 60

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 61

<211> 2231

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-2b ДНК

<400> 61

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgatt tttgggtgct ggtggtggtt 1020

ggtggagtcc tggcttgcta tagcttgcta gtaacagtgg cctttattat tttctgggtg 1080

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc 1140

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc 1200

tccagagtga agttcagcag gagcgcagac gcccccgcgt accagcaggg ccagaaccag 1260

ctctataacg agctcaatct aggacgaaga gaggagtacg atgttttgga caagagacgt 1320

ggccgggacc ctgagatggg gggaaagccg agaaggaaga accctcagga aggcctgtac 1380

aatgaactgc agaaagataa gatggcggag gcctacagtg agattgggat gaaaggcgag 1440

cgccggaggg gcaaggggca cgatggcctt taccagggtc tcagtacagc caccaaggac 1500

acctacgacg cccttcacat gcaggccctg ccccctcgcg gctctggcga gggaaggggt 1560

tccctgctta cttgcggcga cgtcgaagag aatcccggtc cgatggccct cccagtaact 1620

gccctccttt tgcccctcgc actccttctt catgccgctc gccccaactg ggtcaacgtg 1680

attagcgatt tgaagaaaat cgaggacctt atacagtcta tgcatattga cgctacactg 1740

tatactgaga gtgatgtaca cccgtcctgt aaggtaacgg ccatgaaatg ctttcttctg 1800

gagctccagg tcatcagctt ggagtctggg gacgcaagca tccacgatac ggttgaaaac 1860

ctcatcatcc ttgcgaacaa ctctctctca tctaatggaa acgttacaga gagtgggtgt 1920

aaggagtgcg aagagttgga agaaaaaaac atcaaagaat ttcttcaatc cttcgttcac 1980

atagtgcaaa tgttcattaa cacgtccact accacacccg ccccgaggcc acctacgccg 2040

gcaccgacta tcgccagtca acccctctct ctgcgccccg aggcttgccg gcctgcggct 2100

ggtggggcgg tccacacccg gggcctggat tttgcgtgcg atatatacat ctgggcacct 2160

cttgccggca cctgcggagt gctgcttctc tcactcgtta ttacgctgta ctgctaagcg 2220

gccgcgtcga c 2231

<210> 62

<211> 731

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-2b белок

<400> 62

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val

325 330 335

Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp

340 345 350

Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met

355 360 365

Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala

370 375 380

Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg

385 390 395 400

Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn

405 410 415

Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg

420 425 430

Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro

435 440 445

Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala

450 455 460

Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His

465 470 475 480

Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp

485 490 495

Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg

500 505 510

Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met

515 520 525

Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His

530 535 540

Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile

545 550 555 560

Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu

565 570 575

Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu

580 585 590

Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His

595 600 605

Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser

610 615 620

Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu

625 630 635 640

Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln

645 650 655

Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr

660 665 670

Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala

675 680 685

Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe

690 695 700

Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val

705 710 715 720

Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

725 730

<210> 63

<211> 2213

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-3b ДНК

<400> 63

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ctgttggctt 1080

acaaaaaaga agtattcatc cagtgtgcac gaccctaacg gtgaatacat gttcatgaga 1140

gcagtgaaca cagccaaaaa atctagactc acagatgtga ccctaagagt gaagttcagc 1200

aggagcgcag acgcccccgc gtaccagcag ggccagaacc agctctataa cgagctcaat 1260

ctaggacgaa gagaggagta cgatgttttg gacaagagac gtggccggga ccctgagatg 1320

gggggaaagc cgagaaggaa gaaccctcag gaaggcctgt acaatgaact gcagaaagat 1380

aagatggcgg aggcctacag tgagattggg atgaaaggcg agcgccggag gggcaagggg 1440

cacgatggcc tttaccaggg tctcagtaca gccaccaagg acacctacga cgcccttcac 1500

atgcaggccc tgccccctcg cggctctggc gagggaaggg gttccctgct tacttgcggc 1560

gacgtcgaag agaatcccgg tccgatggcc ctcccagtaa ctgccctcct tttgcccctc 1620

gcactccttc ttcatgccgc tcgccccaac tgggtcaacg tgattagcga tttgaagaaa 1680

atcgaggacc ttatacagtc tatgcatatt gacgctacac tgtatactga gagtgatgta 1740

cacccgtcct gtaaggtaac ggccatgaaa tgctttcttc tggagctcca ggtcatcagc 1800

ttggagtctg gggacgcaag catccacgat acggttgaaa acctcatcat ccttgcgaac 1860

aactctctct catctaatgg aaacgttaca gagagtgggt gtaaggagtg cgaagagttg 1920

gaagaaaaaa acatcaaaga atttcttcaa tccttcgttc acatagtgca aatgttcatt 1980

aacacgtcca ctaccacacc cgccccgagg ccacctacgc cggcaccgac tatcgccagt 2040

caacccctct ctctgcgccc cgaggcttgc cggcctgcgg ctggtggggc ggtccacacc 2100

cggggcctgg attttgcgtg cgatatatac atctgggcac ctcttgccgg cacctgcgga 2160

gtgctgcttc tctcactcgt tattacgctg tactgctaag cggccgcgtc gac 2213

<210> 64

<211> 725

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-3b белок

<400> 64

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Cys Trp

340 345 350

Leu Thr Lys Lys Lys Tyr Ser Ser Ser Val His Asp Pro Asn Gly Glu

355 360 365

Tyr Met Phe Met Arg Ala Val Asn Thr Ala Lys Lys Ser Arg Leu Thr

370 375 380

Asp Val Thr Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala

385 390 395 400

Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg

405 410 415

Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu

420 425 430

Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn

435 440 445

Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met

450 455 460

Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly

465 470 475 480

Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala

485 490 495

Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys

500 505 510

Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala

515 520 525

Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp

530 535 540

Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser

545 550 555 560

Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser

565 570 575

Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile

580 585 590

Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu

595 600 605

Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu

610 615 620

Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu

625 630 635 640

Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser

645 650 655

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

660 665 670

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

675 680 685

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile

690 695 700

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

705 710 715 720

Ile Thr Leu Tyr Cys

725

<210> 65

<211> 2357

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-4b ДНК

<400> 65

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgatt tttgggtgct ggtggtggtt 1020

ggtggagtcc tggcttgcta tagcttgcta gtaacagtgg cctttattat tttctgggtg 1080

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc 1140

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc 1200

tccaaacggg gcagaaagaa actcctgtat atattcaaac aaccatttat gagaccagta 1260

caaactactc aagaggaaga tggctgtagc tgccgatttc cagaagaaga agaaggagga 1320

tgtgaactga gagtgaagtt cagcaggagc gcagacgccc ccgcgtacca gcagggccag 1380

aaccagctct ataacgagct caatctagga cgaagagagg agtacgatgt tttggacaag 1440

agacgtggcc gggaccctga gatgggggga aagccgagaa ggaagaaccc tcaggaaggc 1500

ctgtacaatg aactgcagaa agataagatg gcggaggcct acagtgagat tgggatgaaa 1560

ggcgagcgcc ggaggggcaa ggggcacgat ggcctttacc agggtctcag tacagccacc 1620

aaggacacct acgacgccct tcacatgcag gccctgcccc ctcgcggctc tggcgaggga 1680

aggggttccc tgcttacttg cggcgacgtc gaagagaatc ccggtccgat ggccctccca 1740

gtaactgccc tccttttgcc cctcgcactc cttcttcatg ccgctcgccc caactgggtc 1800

aacgtgatta gcgatttgaa gaaaatcgag gaccttatac agtctatgca tattgacgct 1860

acactgtata ctgagagtga tgtacacccg tcctgtaagg taacggccat gaaatgcttt 1920

cttctggagc tccaggtcat cagcttggag tctggggacg caagcatcca cgatacggtt 1980

gaaaacctca tcatccttgc gaacaactct ctctcatcta atggaaacgt tacagagagt 2040

gggtgtaagg agtgcgaaga gttggaagaa aaaaacatca aagaatttct tcaatccttc 2100

gttcacatag tgcaaatgtt cattaacacg tccactacca cacccgcccc gaggccacct 2160

acgccggcac cgactatcgc cagtcaaccc ctctctctgc gccccgaggc ttgccggcct 2220

gcggctggtg gggcggtcca cacccggggc ctggattttg cgtgcgatat atacatctgg 2280

gcacctcttg ccggcacctg cggagtgctg cttctctcac tcgttattac gctgtactgc 2340

taagcggccg cgtcgac 2357

<210> 66

<211> 773

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-4b белок

<400> 66

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val

325 330 335

Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp

340 345 350

Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met

355 360 365

Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala

370 375 380

Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Lys Arg Gly Arg Lys Lys

385 390 395 400

Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln Thr Thr

405 410 415

Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu Glu Gly

420 425 430

Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala

435 440 445

Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg

450 455 460

Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu

465 470 475 480

Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn

485 490 495

Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met

500 505 510

Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly

515 520 525

Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala

530 535 540

Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys

545 550 555 560

Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala

565 570 575

Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp

580 585 590

Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser

595 600 605

Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser

610 615 620

Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile

625 630 635 640

Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu

645 650 655

Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu

660 665 670

Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu

675 680 685

Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser

690 695 700

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

705 710 715 720

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

725 730 735

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile

740 745 750

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

755 760 765

Ile Thr Leu Tyr Cys

770

<210> 67

<211> 2201

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-5b ДНК

<400> 67

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgatc catttttttt ctgctgcttc 1020

atcgctgtag ccatgggaat ccgtttcatt attatggtaa cacggaggga ccagaggctg 1080

ccccccgatg cccacaagcc ccctggggga ggcagtttcc ggacccccat ccaagaggag 1140

caggccgacg cccactccac cctggccaag atcagagtga agttcagcag gagcgcagac 1200

gcccccgcgt accagcaggg ccagaaccag ctctataacg agctcaatct aggacgaaga 1260

gaggagtacg atgttttgga caagagacgt ggccgggacc ctgagatggg gggaaagccg 1320

agaaggaaga accctcagga aggcctgtac aatgaactgc agaaagataa gatggcggag 1380

gcctacagtg agattgggat gaaaggcgag cgccggaggg gcaaggggca cgatggcctt 1440

taccagggtc tcagtacagc caccaaggac acctacgacg cccttcacat gcaggccctg 1500

ccccctcgcg gctctggcga gggaaggggt tccctgctta cttgcggcga cgtcgaagag 1560

aatcccggtc cgatggccct cccagtaact gccctccttt tgcccctcgc actccttctt 1620

catgccgctc gccccaactg ggtcaacgtg attagcgatt tgaagaaaat cgaggacctt 1680

atacagtcta tgcatattga cgctacactg tatactgaga gtgatgtaca cccgtcctgt 1740

aaggtaacgg ccatgaaatg ctttcttctg gagctccagg tcatcagctt ggagtctggg 1800

gacgcaagca tccacgatac ggttgaaaac ctcatcatcc ttgcgaacaa ctctctctca 1860

tctaatggaa acgttacaga gagtgggtgt aaggagtgcg aagagttgga agaaaaaaac 1920

atcaaagaat ttcttcaatc cttcgttcac atagtgcaaa tgttcattaa cacgtccact 1980

accacacccg ccccgaggcc acctacgccg gcaccgacta tcgccagtca acccctctct 2040

ctgcgccccg aggcttgccg gcctgcggct ggtggggcgg tccacacccg gggcctggat 2100

tttgcgtgcg atatatacat ctgggcacct cttgccggca cctgcggagt gctgcttctc 2160

tcactcgtta ttacgctgta ctgctaagcg gccgcgtcga c 2201

<210> 68

<211> 721

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-5b белок

<400> 68

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Pro Phe Phe Phe Cys Cys Phe Ile Ala Val

325 330 335

Ala Met Gly Ile Arg Phe Ile Ile Met Val Thr Arg Arg Asp Gln Arg

340 345 350

Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg Thr

355 360 365

Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys Ile

370 375 380

Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly

385 390 395 400

Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr

405 410 415

Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys

420 425 430

Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys

435 440 445

Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg

450 455 460

Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala

465 470 475 480

Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485 490 495

Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu

500 505 510

Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro

515 520 525

Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile

530 535 540

Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp

545 550 555 560

Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr

565 570 575

Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser

580 585 590

Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala

595 600 605

Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys

610 615 620

Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser

625 630 635 640

Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro

645 650 655

Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu

660 665 670

Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His

675 680 685

Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu

690 695 700

Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr

705 710 715 720

Cys

<210> 69

<211> 1805

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-6b ДНК

<400> 69

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacaa ccacgacgcc agcgccgcga 480

ccaccaacac cggcgcccac catcgcgtcg cagcccctgt ccctgcgccc agaggcgtgc 540

cggccagcgg cggggggcgc agtgcacacg agggggctgg acttcgcctg tgatatctac 600

atctgggcgc ccttggccgg gacttgtggg gtccttctcc tgtcactggt tatcaccctt 660

tactgccgga gggaccagag gctgcccccc gatgcccaca agccccctgg gggaggcagt 720

ttccggaccc ccatccaaga ggagcaggcc gacgcccact ccaccctggc caagatcaga 780

gtgaagttca gcaggagcgc agacgccccc gcgtaccagc agggccagaa ccagctctat 840

aacgagctca atctaggacg aagagaggag tacgatgttt tggacaagag acgtggccgg 900

gaccctgaga tggggggaaa gccgagaagg aagaaccctc aggaaggcct gtacaatgaa 960

ctgcagaaag ataagatggc ggaggcctac agtgagattg ggatgaaagg cgagcgccgg 1020

aggggcaagg ggcacgatgg cctttaccag ggtctcagta cagccaccaa ggacacctac 1080

gacgcccttc acatgcaggc cctgccccct cgcggctctg gcgagggaag gggttccctg 1140

cttacttgcg gcgacgtcga agagaatccc ggtccgatgg ccctcccagt aactgccctc 1200

cttttgcccc tcgcactcct tcttcatgcc gctcgcccca actgggtcaa cgtgattagc 1260

gatttgaaga aaatcgagga ccttatacag tctatgcata ttgacgctac actgtatact 1320

gagagtgatg tacacccgtc ctgtaaggta acggccatga aatgctttct tctggagctc 1380

caggtcatca gcttggagtc tggggacgca agcatccacg atacggttga aaacctcatc 1440

atccttgcga acaactctct ctcatctaat ggaaacgtta cagagagtgg gtgtaaggag 1500

tgcgaagagt tggaagaaaa aaacatcaaa gaatttcttc aatccttcgt tcacatagtg 1560

caaatgttca ttaacacgtc cactaccaca cccgccccga ggccacctac gccggcaccg 1620

actatcgcca gtcaacccct ctctctgcgc cccgaggctt gccggcctgc ggctggtggg 1680

gcggtccaca cccggggcct ggattttgcg tgcgatatat acatctgggc acctcttgcc 1740

ggcacctgcg gagtgctgct tctctcactc gttattacgc tgtactgcta agcggccgcg 1800

tcgac 1805

<210> 70

<211> 589

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-6b белок

<400> 70

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr

145 150 155 160

Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala

165 170 175

Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile

180 185 190

Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser

195 200 205

Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp

210 215 220

Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu

225 230 235 240

Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe

245 250 255

Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu

260 265 270

Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp

275 280 285

Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys

290 295 300

Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys

325 330 335

Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr

340 345 350

Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu

355 360 365

Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly

370 375 380

Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu

385 390 395 400

Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys

405 410 415

Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr

420 425 430

Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys

435 440 445

Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser

450 455 460

Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu

465 470 475 480

Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu

485 490 495

Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile

500 505 510

Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro

515 520 525

Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro

530 535 540

Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu

545 550 555 560

Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys

565 570 575

Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

580 585

<210> 71

<211> 3347

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-7b ДНК

<400> 71

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1080

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1140

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1200

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1260

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1320

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1380

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1440

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1500

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1560

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1620

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1680

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1740

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1800

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1860

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1920

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1980

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 2040

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2100

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2160

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgcggcagcg gcgccacaaa cttctctctg 2220

ctaaagcaag caggtgatgt tgaagaaaac cccgggccta tgcttctcct ggtgacaagc 2280

cttctgctct gtgagttacc acacccagca ttcctcctga tcccacgcaa agtgtgtaac 2340

ggaataggta ttggtgaatt taaagactca ctctccataa atgctacgaa tattaaacac 2400

ttcaaaaact gcacctccat cagtggcgat ctccacatcc tgccggtggc atttaggggt 2460

gactccttca cacatactcc tcctctggat ccacaggaac tggatattct gaaaaccgta 2520

aaggaaatca cagggttttt gctgattcag gcttggcctg aaaacaggac ggacctccat 2580

gcctttgaga acctagaaat catacgcggc aggaccaagc aacatggtca gttttctctt 2640

gcagtcgtca gcctgaacat aacatccttg ggattacgct ccctcaagga gataagtgat 2700

ggagatgtga taatttcagg aaacaaaaat ttgtgctatg caaatacaat aaactggaaa 2760

aaactgtttg ggacctccgg tcagaaaacc aaaattataa gcaacagagg tgaaaacagc 2820

tgcaaggcca caggccaggt ctgccatgcc ttgtgctccc ccgagggctg ctggggcccg 2880

gagcccaggg actgcgtctc ttgccggaat gtcagccgag gcagggaatg cgtggacaag 2940

tgcaaccttc tggagggtga gccaagggag tttgtggaga actctgagtg catacagtgc 3000

cacccagagt gcctgcctca ggccatgaac atcacctgca caggacgggg accagacaac 3060

tgtatccagt gtgcccacta cattgacggc ccccactgcg tcaagacctg cccggcagga 3120

gtcatgggag aaaacaacac cctggtctgg aagtacgcag acgccggcca tgtgtgccac 3180

ctgtgccatc caaactgcac ctacggatgc actgggccag gtcttgaagg ctgtccaacg 3240

aatgggccta agatcccgtc catcgccact gggatggtgg gggccctcct cttgctgctg 3300

gtggtggccc tggggatcgg cctcttcatg tgagcggccg cgtcgac 3347

<210> 72

<211> 1103

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-7b белок

<400> 72

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys Gly Ser Gly Ala Thr Asn Phe Ser Leu Leu Lys Gln

725 730 735

Ala Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Leu Leu Leu Val Thr

740 745 750

Ser Leu Leu Leu Cys Glu Leu Pro His Pro Ala Phe Leu Leu Ile Pro

755 760 765

Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu Phe Lys Asp Ser Leu

770 775 780

Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys Asn Cys Thr Ser Ile

785 790 795 800

Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe Arg Gly Asp Ser Phe

805 810 815

Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu Asp Ile Leu Lys Thr

820 825 830

Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln Ala Trp Pro Glu Asn

835 840 845

Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu Ile Ile Arg Gly Arg

850 855 860

Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val Val Ser Leu Asn Ile

865 870 875 880

Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile Ser Asp Gly Asp Val

885 890 895

Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala Asn Thr Ile Asn Trp

900 905 910

Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr Lys Ile Ile Ser Asn

915 920 925

Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln Val Cys His Ala Leu

930 935 940

Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro Arg Asp Cys Val Ser

945 950 955 960

Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val Asp Lys Cys Asn Leu

965 970 975

Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn Ser Glu Cys Ile Gln

980 985 990

Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn Ile Thr Cys Thr Gly

995 1000 1005

Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His Tyr Ile Asp Gly

1010 1015 1020

Pro His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met Gly Glu Asn

1025 1030 1035

Asn Thr Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val Cys His

1040 1045 1050

Leu Cys His Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly Leu

1055 1060 1065

Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr

1070 1075 1080

Gly Met Val Gly Ala Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly

1085 1090 1095

Ile Gly Leu Phe Met

1100

<210> 73

<211> 1844

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-8b ДНК

<400> 73

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga ggtgaaactg caggagtcag gacctggcct ggtggcgccc 180

tcacagagcc tgtccgtcac atgcactgtc tcaggggtct cattacccga ctatggtgta 240

agctggattc gccagcctcc acgaaagggt ctggagtggc tgggagtaat atggggtagt 300

gaaaccacat actataattc agctctcaaa tccagactga ccatcatcaa ggacaactcc 360

aagagccaag ttttcttaaa aatgaacagt ctgcaaactg atgacacagc catttactac 420

tgtgccaaac attattacta cggtggtagc tatgctatgg actactgggg ccaaggaacc 480

tcagtcaccg tctcctcaac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 540

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 600

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 660

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 720

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 780

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 840

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 900

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 960

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1020

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1080

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1140

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1200

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1260

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1320

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1380

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1440

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1500

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1560

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1620

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 1680

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 1740

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 1800

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 1844

<210> 74

<211> 602

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-8b белок

<400> 74

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro

35 40 45

Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser

50 55 60

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro

65 70 75 80

Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr

85 90 95

Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn

100 105 110

Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp

115 120 125

Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr

130 135 140

Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr

145 150 155 160

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

165 170 175

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

180 185 190

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

195 200 205

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

210 215 220

Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys

225 230 235 240

Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala

245 250 255

Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser

260 265 270

Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu

275 280 285

Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg

290 295 300

Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln

305 310 315 320

Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr

325 330 335

Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp

340 345 350

Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala

355 360 365

Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly

370 375 380

Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala

385 390 395 400

Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala

405 410 415

Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu

420 425 430

Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser

435 440 445

Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu

450 455 460

Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp

465 470 475 480

Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn

485 490 495

Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu

500 505 510

Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met

515 520 525

Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro

530 535 540

Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys

545 550 555 560

Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala

565 570 575

Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu

580 585 590

Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

595 600

<210> 75

<211> 2243

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-9b ДНК

<400> 75

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccaacgaagg 1080

aaatatagat caaacaaagg agaaagtcct gtggagcctg cagagccttg tcgttacagc 1140

tgccccaggg aggaggaggg cagcaccatc cccatccagg aggattaccg aaaaccggag 1200

cctgcctgct cccccagagt gaagttcagc aggagcgcag acgcccccgc gtaccagcag 1260

ggccagaacc agctctataa cgagctcaat ctaggacgaa gagaggagta cgatgttttg 1320

gacaagagac gtggccggga ccctgagatg gggggaaagc cgagaaggaa gaaccctcag 1380

gaaggcctgt acaatgaact gcagaaagat aagatggcgg aggcctacag tgagattggg 1440

atgaaaggcg agcgccggag gggcaagggg cacgatggcc tttaccaggg tctcagtaca 1500

gccaccaagg acacctacga cgcccttcac atgcaggccc tgccccctcg cggctctggc 1560

gagggaaggg gttccctgct tacttgcggc gacgtcgaag agaatcccgg tccgatggcc 1620

ctcccagtaa ctgccctcct tttgcccctc gcactccttc ttcatgccgc tcgccccaac 1680

tgggtcaacg tgattagcga tttgaagaaa atcgaggacc ttatacagtc tatgcatatt 1740

gacgctacac tgtatactga gagtgatgta cacccgtcct gtaaggtaac ggccatgaaa 1800

tgctttcttc tggagctcca ggtcatcagc ttggagtctg gggacgcaag catccacgat 1860

acggttgaaa acctcatcat ccttgcgaac aactctctct catctaatgg aaacgttaca 1920

gagagtgggt gtaaggagtg cgaagagttg gaagaaaaaa acatcaaaga atttcttcaa 1980

tccttcgttc acatagtgca aatgttcatt aacacgtcca ctaccacacc cgccccgagg 2040

ccacctacgc cggcaccgac tatcgccagt caacccctct ctctgcgccc cgaggcttgc 2100

cggcctgcgg ctggtggggc ggtccacacc cggggcctgg attttgcgtg cgatatatac 2160

atctgggcac ctcttgccgg cacctgcgga gtgctgcttc tctcactcgt tattacgctg 2220

tactgctaag cggccgcgtc gac 2243

<210> 76

<211> 735

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-9b белок

<400> 76

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Gln Arg

340 345 350

Arg Lys Tyr Arg Ser Asn Lys Gly Glu Ser Pro Val Glu Pro Ala Glu

355 360 365

Pro Cys Arg Tyr Ser Cys Pro Arg Glu Glu Glu Gly Ser Thr Ile Pro

370 375 380

Ile Gln Glu Asp Tyr Arg Lys Pro Glu Pro Ala Cys Ser Pro Arg Val

385 390 395 400

Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn

405 410 415

Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val

420 425 430

Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg

435 440 445

Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys

450 455 460

Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg

465 470 475 480

Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys

485 490 495

Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser

500 505 510

Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn

515 520 525

Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala

530 535 540

Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp

545 550 555 560

Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr

565 570 575

Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met

580 585 590

Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp

595 600 605

Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn

610 615 620

Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys

625 630 635 640

Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val

645 650 655

His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro

660 665 670

Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu

675 680 685

Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg

690 695 700

Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly

705 710 715 720

Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

725 730 735

<210> 77

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-10b ДНК

<400> 77

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg catgccggag 1080

gagggttcgg gctgctcggt gcggcgcagg ccctatgggt gcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 78

<211> 704

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-10b белок

<400> 78

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Met Pro

340 345 350

Glu Glu Gly Ser Gly Cys Ser Val Arg Arg Arg Pro Tyr Gly Cys Arg

355 360 365

Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln

370 375 380

Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp

385 390 395 400

Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro

405 410 415

Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp

420 425 430

Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg

435 440 445

Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr

450 455 460

Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly

465 470 475 480

Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu

485 490 495

Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu

500 505 510

Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser

515 520 525

Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala

530 535 540

Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala

545 550 555 560

Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly

565 570 575

Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn

580 585 590

Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu

595 600 605

Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe

610 615 620

Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala

625 630 635 640

Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser

645 650 655

Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr

660 665 670

Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

675 680 685

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

690 695 700

<210> 79

<211> 2234

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-11b ДНК

<400> 79

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg catggaccaa 1080

caagcaatat atgctgagtt aaacttaccc acagactcag gcccagaaag ttcttcacct 1140

tcatctcttc ctcgggatgt ctgtcagggt tcaccttggc atcaatttgc cctgaaactt 1200

agctgtagag tgaagttcag caggagcgca gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac 1260

cagctctata acgagctcaa tctaggacga agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga 1320

cgtggccggg accctgagat ggggggaaag ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg 1380

tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc 1440

gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag 1500

gacacctacg acgcccttca catgcaggcc ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg 1560

ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta 1620

actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac 1680

gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca 1740

ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt 1800

ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa 1860

aacctcatca tccttgcgaa caactctctc tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg 1920

tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt 1980

cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc actaccacac ccgccccgag gccacctacg 2040

ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg 2100

gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg gattttgcgt gcgatatata catctgggca 2160

cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa 2220

gcggccgcgt cgac 2234

<210> 80

<211> 732

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-11b белок

<400> 80

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Met Asp

340 345 350

Gln Gln Ala Ile Tyr Ala Glu Leu Asn Leu Pro Thr Asp Ser Gly Pro

355 360 365

Glu Ser Ser Ser Pro Ser Ser Leu Pro Arg Asp Val Cys Gln Gly Ser

370 375 380

Pro Trp His Gln Phe Ala Leu Lys Leu Ser Cys Arg Val Lys Phe Ser

385 390 395 400

Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr

405 410 415

Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys

420 425 430

Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn

435 440 445

Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu

450 455 460

Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly

465 470 475 480

His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr

485 490 495

Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly

500 505 510

Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro

515 520 525

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

530 535 540

His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys

545 550 555 560

Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr

565 570 575

Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe

580 585 590

Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile

595 600 605

His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser

610 615 620

Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu

625 630 635 640

Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val

645 650 655

Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

660 665 670

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

675 680 685

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

690 695 700

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

705 710 715 720

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

725 730

<210> 81

<211> 2165

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-12b ДНК

<400> 81

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg catgatcgaa 1080

acatacaacc aaacttctcc ccgatctgcg gccactggac tgcccatcag catgaaaaga 1140

gtgaagttca gcaggagcgc agacgccccc gcgtaccagc agggccagaa ccagctctat 1200

aacgagctca atctaggacg aagagaggag tacgatgttt tggacaagag acgtggccgg 1260

gaccctgaga tggggggaaa gccgagaagg aagaaccctc aggaaggcct gtacaatgaa 1320

ctgcagaaag ataagatggc ggaggcctac agtgagattg ggatgaaagg cgagcgccgg 1380

aggggcaagg ggcacgatgg cctttaccag ggtctcagta cagccaccaa ggacacctac 1440

gacgcccttc acatgcaggc cctgccccct cgcggctctg gcgagggaag gggttccctg 1500

cttacttgcg gcgacgtcga agagaatccc ggtccgatgg ccctcccagt aactgccctc 1560

cttttgcccc tcgcactcct tcttcatgcc gctcgcccca actgggtcaa cgtgattagc 1620

gatttgaaga aaatcgagga ccttatacag tctatgcata ttgacgctac actgtatact 1680

gagagtgatg tacacccgtc ctgtaaggta acggccatga aatgctttct tctggagctc 1740

caggtcatca gcttggagtc tggggacgca agcatccacg atacggttga aaacctcatc 1800

atccttgcga acaactctct ctcatctaat ggaaacgtta cagagagtgg gtgtaaggag 1860

tgcgaagagt tggaagaaaa aaacatcaaa gaatttcttc aatccttcgt tcacatagtg 1920

caaatgttca ttaacacgtc cactaccaca cccgccccga ggccacctac gccggcaccg 1980

actatcgcca gtcaacccct ctctctgcgc cccgaggctt gccggcctgc ggctggtggg 2040

gcggtccaca cccggggcct ggattttgcg tgcgatatat acatctgggc acctcttgcc 2100

ggcacctgcg gagtgctgct tctctcactc gttattacgc tgtactgcta agcggccgcg 2160

tcgac 2165

<210> 82

<211> 709

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-12b белок

<400> 82

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Met Ile

340 345 350

Glu Thr Tyr Asn Gln Thr Ser Pro Arg Ser Ala Ala Thr Gly Leu Pro

355 360 365

Ile Ser Met Lys Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala

370 375 380

Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg

385 390 395 400

Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu

405 410 415

Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn

420 425 430

Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met

435 440 445

Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly

450 455 460

Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala

465 470 475 480

Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys

485 490 495

Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala

500 505 510

Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp

515 520 525

Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser

530 535 540

Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser

545 550 555 560

Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile

565 570 575

Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu

580 585 590

Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu

595 600 605

Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu

610 615 620

Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser

625 630 635 640

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

645 650 655

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

660 665 670

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile

675 680 685

Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val

690 695 700

Ile Thr Leu Tyr Cys

705

<210> 83

<211> 2315

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-13b ДНК

<400> 83

ggatccgaat tcgccgccac catggcctta ccagtgaccg ccttgctcct gccgctggcc 60

ttgctgctcc acgccgccag gccggactac aaagacgatg acgataaagg cggtggtggc 120

tctggtggtg gcggcagcga catccagatg acacagacta catcctccct gtctgcctct 180

ctgggagaca gagtcaccat cagttgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 240

tggtatcagc agaaaccaga tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 300

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta ttctctcacc 360

attagcaacc tggagcaaga agatattgcc acttactttt gccaacaggg taatacgctt 420

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 480

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctgaggtg aaactgcagg agtcaggacc tggcctggtg 540

gcgccctcac agagcctgtc cgtcacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 600

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccacga aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 660

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat catcaaggac 720

aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg aacagtctgc aaactgatga cacagccatt 780

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 840

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 900

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 960

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 1020

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg caacagtcga 1080

agaaggtgtg ggcagaagaa aaagctagtg atcaacagtg gcaatggagc tgtggaggac 1140

agaaagccaa gtggactcaa cggagaggcc agcaagtctc aggaaatggt gcatttggtg 1200

aacaaggagt cgtcagaaac tccagaccag tttatgacag ctgatgagac aaggaacctg 1260

cagaatgtgg acatgaagat tggggtgaga gtgaagttca gcaggagcgc agacgccccc 1320

gcgtaccagc agggccagaa ccagctctat aacgagctca atctaggacg aagagaggag 1380

tacgatgttt tggacaagag acgtggccgg gaccctgaga tggggggaaa gccgagaagg 1440

aagaaccctc aggaaggcct gtacaatgaa ctgcagaaag ataagatggc ggaggcctac 1500

agtgagattg ggatgaaagg cgagcgccgg aggggcaagg ggcacgatgg cctttaccag 1560

ggtctcagta cagccaccaa ggacacctac gacgcccttc acatgcaggc cctgccccct 1620

cgcggctctg gcgagggaag gggttccctg cttacttgcg gcgacgtcga agagaatccc 1680

ggtccgatgg ccctcccagt aactgccctc cttttgcccc tcgcactcct tcttcatgcc 1740

gctcgcccca actgggtcaa cgtgattagc gatttgaaga aaatcgagga ccttatacag 1800

tctatgcata ttgacgctac actgtatact gagagtgatg tacacccgtc ctgtaaggta 1860

acggccatga aatgctttct tctggagctc caggtcatca gcttggagtc tggggacgca 1920

agcatccacg atacggttga aaacctcatc atccttgcga acaactctct ctcatctaat 1980

ggaaacgtta cagagagtgg gtgtaaggag tgcgaagagt tggaagaaaa aaacatcaaa 2040

gaatttcttc aatccttcgt tcacatagtg caaatgttca ttaacacgtc cactaccaca 2100

cccgccccga ggccacctac gccggcaccg actatcgcca gtcaacccct ctctctgcgc 2160

cccgaggctt gccggcctgc ggctggtggg gcggtccaca cccggggcct ggattttgcg 2220

tgcgatatat acatctgggc acctcttgcc ggcacctgcg gagtgctgct tctctcactc 2280

gttattacgc tgtactgcta agcggccgcg tcgac 2315

<210> 84

<211> 759

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19-13b белок

<400> 84

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Glu Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser

165 170 175

Gln Ser Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe

225 230 235 240

Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn Ser

340 345 350

Arg Arg Arg Cys Gly Gln Lys Lys Lys Leu Val Ile Asn Ser Gly Asn

355 360 365

Gly Ala Val Glu Asp Arg Lys Pro Ser Gly Leu Asn Gly Glu Ala Ser

370 375 380

Lys Ser Gln Glu Met Val His Leu Val Asn Lys Glu Ser Ser Glu Thr

385 390 395 400

Pro Asp Gln Phe Met Thr Ala Asp Glu Thr Arg Asn Leu Gln Asn Val

405 410 415

Asp Met Lys Ile Gly Val Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

420 425 430

Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

435 440 445

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

450 455 460

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

465 470 475 480

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

485 490 495

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

500 505 510

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

515 520 525

Gln Ala Leu Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu

530 535 540

Thr Cys Gly Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val

545 550 555 560

Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro

565 570 575

Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile

580 585 590

Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His

595 600 605

Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln

610 615 620

Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu

625 630 635 640

Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val

645 650 655

Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile

660 665 670

Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn

675 680 685

Thr Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr

690 695 700

Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala

705 710 715 720

Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile

725 730 735

Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser

740 745 750

Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

755

<210> 85

<211> 6488

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19 ДНК

<400> 85

atgaaagacc ccacctgtag gtttggcaag ctagcttaag taacgccatt ttgcaaggca 60

tggaaaatac ataactgaga atagagaagt tcagatcaag gttaggaaca gagagacagc 120

agaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc tgccccggct cagggccaag 180

aacagatggt ccccagatgc ggtcccgccc tcagcagttt ctagagaacc atcagatgtt 240

tccagggtgc cccaaggacc tgaaatgacc ctgtgcctta tttgaactaa ccaatcagtt 300

cgcttctcgc ttctgttcgc gcgcttctgc tccccgagct caataaaaga gcccacaacc 360

cctcactcgg cgcgccagtc ctccgataga ctgcgtcgcc cgggtacccg tattcccaat 420

aaagcctctt gctgtttgca tccgaatcgt ggactcgctg atccttggga gggtctcctc 480

agattgattg actgcccacc tcgggggtct ttcatttgga ggttccaccg agatttggag 540

acccctgccc agggaccacc gacccccccg ccgggaggta agctggccag cggtcgtttc 600

gtgtctgtct ctgtctttgt gcgtgtttgt gccggcatct aatgtttgcg cctgcgtctg 660

tactagttag ctaactagct ctgtatctgg cggacccgtg gtggaactga cgagttctga 720

acacccggcc gcaaccctgg gagacgtccc agggactttg ggggccgttt ttgtggcccg 780

acctgaggaa gggagtcgat gtggaatccg accccgtcag gatatgtggt tctggtagga 840

gacgagaacc taaaacagtt cccgcctccg tctgaatttt tgctttcggt ttggaaccga 900

agccgcgcgt cttgtctgct gcagcgctgc agcatcgttc tgtgttgtct ctgtctgact 960

gtgtttctgt atttgtctga aaattagggc cagactgtta ccactccctt aagtttgacc 1020

ttaggtcact ggaaagatgt cgagcggatc gctcacaacc agtcggtaga tgtcaagaag 1080

agacgttggg ttaccttctg ctctgcagaa tggccaacct ttaacgtcgg atggccgcga 1140

gacggcacct ttaaccgaga cctcatcacc caggttaaga tcaaggtctt ttcacctggc 1200

ccgcatggac acccagacca ggtcccctac atcgtgacct gggaagcctt ggcttttgac 1260

ccccctccct gggtcaagcc ctttgtacac cctaagcctc cgcctcctct tcctccatcc 1320

gccccgtctc tcccccttga acctcctcgt tcgaccccgc ctcgatcctc cctttatcca 1380

gccctcactc cttctctagg cgccggaatt cgttaacctc gagcgggatc aattccgccc 1440

cccccctaac gttactggcc gaagccgctt ggaataaggc cggtgtgcgt ttgtctatat 1500

gttattttcc accatattgc cgtcttttgg caatgtgagg gcccggaaac ctggccctgt 1560

cttcttgacg agcattccta ggggtctttc ccctctcgcc aaaggaatgc aaggtctgtt 1620

gaatgtcgtg aaggaagcag ttcctctgga agcttcttga agacaaacaa cgtctgtagc 1680

gaccctttgc aggcagcgga accccccacc tggcgacagg tgcctctgcg gccaaaagcc 1740

acgtgtataa gatacacctg caaaggcggc acaaccccag tgccacgttg tgagttggat 1800

agttgtggaa agagtcaaat ggctctcctc aagcgtattc aacaaggggc tgaaggatgc 1860

ccagaaggta ccccattgta tgggatctga tctggggcct cggtgcacat gctttacatg 1920

tgtttagtcg aggttaaaaa aacgtctagg ccccccgaac cacggggacg tggttttcct 1980

ttgaaaaaca cgataatacc atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc 2040

ccatcctggt cgagctggac ggcgacgtaa acggccacaa gttcagcgtg tccggcgagg 2100

gcgagggcga tgccacctac ggcaagctga ccctgaagtt catctgcacc accggcaagc 2160

tgcccgtgcc ctggcccacc ctcgtgacca ccctgaccta cggcgtgcag tgcttcagcc 2220

gctaccccga ccacatgaag cagcacgact tcttcaagtc cgccatgccc gaaggctacg 2280

tccaggagcg caccatcttc ttcaaggacg acggcaacta caagacccgc gccgaggtga 2340

agttcgaggg cgacaccctg gtgaaccgca tcgagctgaa gggcatcgac ttcaaggagg 2400

acggcaacat cctggggcac aagctggagt acaactacaa cagccacaac gtctatatca 2460

tggccgacaa gcagaagaac ggcatcaagg tgaacttcaa gatccgccac aacatcgagg 2520

acggcagcgt gcagctcgcc gaccactacc agcagaacac ccccatcggc gacggccccg 2580

tgctgctgcc cgacaaccac tacctgagca cccagtccgc cctgagcaaa gaccccaacg 2640

agaagcgcga tcacatggtc ctgctggagt tcgtgaccgc cgccgggatc actctcggca 2700

tggacgagct gtacaagtaa agcggccgcg actctagagt cgacctgcag gcatgcaagc 2760

ttcaggtagc cggctaacgt taacaaccgg tacctctaga actatagcta gcatgcgcaa 2820

atttaaagcg ctgatatcga taaaataaaa gattttattt agtctccaga aaaagggggg 2880

aatgaaagac cccacctgta ggtttggcaa gctagcttaa gtaacgccat tttgcaaggc 2940

atggaaaata cataactgag aatagagaag ttcagatcaa ggttaggaac agagagacag 3000

cagaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc ctgccccggc tcagggccaa 3060

gaacagatgg tccccagatg cggtcccgcc ctcagcagtt tctagagaac catcagatgt 3120

ttccagggtg ccccaaggac ctgaaatgac cctgtgcctt atttgaacta accaatcagt 3180

tcgcttctcg cttctgttcg cgcgcttctg ctccccgagc tcaataaaag agcccacaac 3240

ccctcactcg gcgcgccagt cctccgatag actgcgtcgc ccgggtaccc gtgtatccaa 3300

taaaccctct tgcagttgca tccgacttgt ggtctcgctg ttccttggga gggtctcctc 3360

tgagtgattg actacccgtc agcgggggtc tttcatgggt aacagtttct tgaagttgga 3420

gaacaacatt ctgagggtag gagtcgaata ttaagtaatc ctgactcaat tagccactgt 3480

tttgaatcca catactccaa tactcctgaa atagttcatt atggacagcg cagaaagagc 3540

tggggagaat tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac acaacatacg agccggaagc 3600

ataaagtgta aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac tcacattaat tgcgttgcgc 3660

tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa 3720

cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg cgctcttccg cttcctcgct cactgactcg 3780

ctgcgctcgg tcgttcggct gcggcgagcg gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg 3840

ttatccacag aatcagggga taacgcagga aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag 3900

gccaggaacc gtaaaaaggc cgcgttgctg gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac 3960

gagcatcaca aaaatcgacg ctcaagtcag aggtggcgaa acccgacagg actataaaga 4020

taccaggcgt ttccccctgg aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt 4080

accggatacc tgtccgcctt tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc 4140

tgtaggtatc tcagttcggt gtaggtcgtt cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc 4200

cccgttcagc ccgaccgctg cgccttatcc ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta 4260

agacacgact tatcgccact ggcagcagcc actggtaaca ggattagcag agcgaggtat 4320

gtaggcggtg ctacagagtt cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaagaaca 4380

gtatttggta tctgcgctct gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct 4440

tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt 4500

acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct 4560

cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc 4620

acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa 4680

acttggtctg acagttacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta 4740

tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc 4800

ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat 4860

ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta 4920

tccgcctcca tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt 4980

aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt 5040

ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg 5100

ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc 5160

gcagtgttat cactcatggt tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc 5220

gtaagatgct tttctgtgac tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg 5280

cggcgaccga gttgctcttg cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga 5340

actttaaaag tgctcatcat tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta 5400

ccgctgttga gatccagttc gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct 5460

tttactttca ccagcgtttc tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag 5520

ggaataaggg cgacacggaa atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga 5580

agcatttatc agggttattg tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat 5640

aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc 5700

attattatca tgacattaac ctataaaaat aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg 5760

cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct 5820

tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc 5880

gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat 5940

atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat accgcatcag gcgccattcg 6000

ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc 6060

cagctggcga aagggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc 6120

cagtcacgac gttgtaaaac gacggcgcaa ggaatggtgc atgcaaggag atggcgccca 6180

acagtccccc ggccacgggg cctgccacca tacccacgcc gaaacaagcg ctcatgagcc 6240

cgaagtggcg agcccgatct tccccatcgg tgatgtcggc gatataggcg ccagcaaccg 6300

cacctgtggc gccggtgatg ccggccacga tgcgtccggc gtagaggcga ttagtccaat 6360

ttgttaaaga caggatatca gtggtccagg ctctagtttt gactcaacaa tatcaccagc 6420

tgaagcctat agagtacgag ccatagataa aataaaagat tttatttagt ctccagaaaa 6480

agggggga 6488

<210> 86

<211> 486

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> NK19 белок

<400> 86

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Asn Leu Glu Gln Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu

130 135 140

Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln Ser

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ile Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu Lys

210 215 220

Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Lys Arg Gly Arg

325 330 335

Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met Arg Pro Val Gln

340 345 350

Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe Pro Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Gly Gly Cys Glu Leu Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala

370 375 380

Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu

385 390 395 400

Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp

405 410 415

Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu

420 425 430

Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile

435 440 445

Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr

450 455 460

Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met

465 470 475 480

Gln Ala Leu Pro Pro Arg

485

<210> 87

<211> 6488

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> плазмида экспрессии MSCV-IRES-GFP

<400> 87

atgaaagacc ccacctgtag gtttggcaag ctagcttaag taacgccatt ttgcaaggca 60

tggaaaatac ataactgaga atagagaagt tcagatcaag gttaggaaca gagagacagc 120

agaatatggg ccaaacagga tatctgtggt aagcagttcc tgccccggct cagggccaag 180

aacagatggt ccccagatgc ggtcccgccc tcagcagttt ctagagaacc atcagatgtt 240

tccagggtgc cccaaggacc tgaaatgacc ctgtgcctta tttgaactaa ccaatcagtt 300

cgcttctcgc ttctgttcgc gcgcttctgc tccccgagct caataaaaga gcccacaacc 360

cctcactcgg cgcgccagtc ctccgataga ctgcgtcgcc cgggtacccg tattcccaat 420

aaagcctctt gctgtttgca tccgaatcgt ggactcgctg atccttggga gggtctcctc 480

agattgattg actgcccacc tcgggggtct ttcatttgga ggttccaccg agatttggag 540

acccctgccc agggaccacc gacccccccg ccgggaggta agctggccag cggtcgtttc 600

gtgtctgtct ctgtctttgt gcgtgtttgt gccggcatct aatgtttgcg cctgcgtctg 660

tactagttag ctaactagct ctgtatctgg cggacccgtg gtggaactga cgagttctga 720

acacccggcc gcaaccctgg gagacgtccc agggactttg ggggccgttt ttgtggcccg 780

acctgaggaa gggagtcgat gtggaatccg accccgtcag gatatgtggt tctggtagga 840

gacgagaacc taaaacagtt cccgcctccg tctgaatttt tgctttcggt ttggaaccga 900

agccgcgcgt cttgtctgct gcagcgctgc agcatcgttc tgtgttgtct ctgtctgact 960

gtgtttctgt atttgtctga aaattagggc cagactgtta ccactccctt aagtttgacc 1020

ttaggtcact ggaaagatgt cgagcggatc gctcacaacc agtcggtaga tgtcaagaag 1080

agacgttggg ttaccttctg ctctgcagaa tggccaacct ttaacgtcgg atggccgcga 1140

gacggcacct ttaaccgaga cctcatcacc caggttaaga tcaaggtctt ttcacctggc 1200

ccgcatggac acccagacca ggtcccctac atcgtgacct gggaagcctt ggcttttgac 1260

ccccctccct gggtcaagcc ctttgtacac cctaagcctc cgcctcctct tcctccatcc 1320

gccccgtctc tcccccttga acctcctcgt tcgaccccgc ctcgatcctc cctttatcca 1380

gccctcactc cttctctagg cgccggaatt cgttaacctc gagcgggatc aattccgccc 1440

cccccctaac gttactggcc gaagccgctt ggaataaggc cggtgtgcgt ttgtctatat 1500

gttattttcc accatattgc cgtcttttgg caatgtgagg gcccggaaac ctggccctgt 1560

cttcttgacg agcattccta ggggtctttc ccctctcgcc aaaggaatgc aaggtctgtt 1620

gaatgtcgtg aaggaagcag ttcctctgga agcttcttga agacaaacaa cgtctgtagc 1680

gaccctttgc aggcagcgga accccccacc tggcgacagg tgcctctgcg gccaaaagcc 1740

acgtgtataa gatacacctg caaaggcggc acaaccccag tgccacgttg tgagttggat 1800

agttgtggaa agagtcaaat ggctctcctc aagcgtattc aacaaggggc tgaaggatgc 1860

ccagaaggta ccccattgta tgggatctga tctggggcct cggtgcacat gctttacatg 1920

tgtttagtcg aggttaaaaa aacgtctagg ccccccgaac cacggggacg tggttttcct 1980

ttgaaaaaca cgataatacc atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc 2040

ccatcctggt cgagctggac ggcgacgtaa acggccacaa gttcagcgtg tccggcgagg 2100

gcgagggcga tgccacctac ggcaagctga ccctgaagtt catctgcacc accggcaagc 2160

tgcccgtgcc ctggcccacc ctcgtgacca ccctgaccta cggcgtgcag tgcttcagcc 2220

gctaccccga ccacatgaag cagcacgact tcttcaagtc cgccatgccc gaaggctacg 2280

tccaggagcg caccatcttc ttcaaggacg acggcaacta caagacccgc gccgaggtga 2340

agttcgaggg cgacaccctg gtgaaccgca tcgagctgaa gggcatcgac ttcaaggagg 2400

acggcaacat cctggggcac aagctggagt acaactacaa cagccacaac gtctatatca 2460

tggccgacaa gcagaagaac ggcatcaagg tgaacttcaa gatccgccac aacatcgagg 2520

acggcagcgt gcagctcgcc gaccactacc agcagaacac ccccatcggc gacggccccg 2580

tgctgctgcc cgacaaccac tacctgagca cccagtccgc cctgagcaaa gaccccaacg 2640

agaagcgcga tcacatggtc ctgctggagt tcgtgaccgc cgccgggatc actctcggca 2700

tggacgagct gtacaagtaa agcggccgcg actctagagt cgacctgcag gcatgcaagc 2760

ttcaggtagc cggctaacgt taacaaccgg tacctctaga actatagcta gcatgcgcaa 2820

atttaaagcg ctgatatcga taaaataaaa gattttattt agtctccaga aaaagggggg 2880

aatgaaagac cccacctgta ggtttggcaa gctagcttaa gtaacgccat tttgcaaggc 2940

atggaaaata cataactgag aatagagaag ttcagatcaa ggttaggaac agagagacag 3000

cagaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc ctgccccggc tcagggccaa 3060

gaacagatgg tccccagatg cggtcccgcc ctcagcagtt tctagagaac catcagatgt 3120

ttccagggtg ccccaaggac ctgaaatgac cctgtgcctt atttgaacta accaatcagt 3180

tcgcttctcg cttctgttcg cgcgcttctg ctccccgagc tcaataaaag agcccacaac 3240

ccctcactcg gcgcgccagt cctccgatag actgcgtcgc ccgggtaccc gtgtatccaa 3300

taaaccctct tgcagttgca tccgacttgt ggtctcgctg ttccttggga gggtctcctc 3360

tgagtgattg actacccgtc agcgggggtc tttcatgggt aacagtttct tgaagttgga 3420

gaacaacatt ctgagggtag gagtcgaata ttaagtaatc ctgactcaat tagccactgt 3480

tttgaatcca catactccaa tactcctgaa atagttcatt atggacagcg cagaaagagc 3540

tggggagaat tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac acaacatacg agccggaagc 3600

ataaagtgta aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac tcacattaat tgcgttgcgc 3660

tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa 3720

cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg cgctcttccg cttcctcgct cactgactcg 3780

ctgcgctcgg tcgttcggct gcggcgagcg gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg 3840

ttatccacag aatcagggga taacgcagga aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag 3900

gccaggaacc gtaaaaaggc cgcgttgctg gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac 3960

gagcatcaca aaaatcgacg ctcaagtcag aggtggcgaa acccgacagg actataaaga 4020

taccaggcgt ttccccctgg aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt 4080

accggatacc tgtccgcctt tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc 4140

tgtaggtatc tcagttcggt gtaggtcgtt cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc 4200

cccgttcagc ccgaccgctg cgccttatcc ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta 4260

agacacgact tatcgccact ggcagcagcc actggtaaca ggattagcag agcgaggtat 4320

gtaggcggtg ctacagagtt cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaagaaca 4380

gtatttggta tctgcgctct gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct 4440

tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt 4500

acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct 4560

cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc 4620

acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa 4680

acttggtctg acagttacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta 4740

tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc 4800

ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat 4860

ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta 4920

tccgcctcca tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt 4980

aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt 5040

ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg 5100

ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc 5160

gcagtgttat cactcatggt tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc 5220

gtaagatgct tttctgtgac tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagtgtatg 5280

cggcgaccga gttgctcttg cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga 5340

actttaaaag tgctcatcat tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta 5400

ccgctgttga gatccagttc gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct 5460

tttactttca ccagcgtttc tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag 5520

ggaataaggg cgacacggaa atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga 5580

agcatttatc agggttattg tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat 5640

aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc 5700

attattatca tgacattaac ctataaaaat aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg 5760

cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct 5820

tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc 5880

gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat 5940

atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat accgcatcag gcgccattcg 6000

ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc gctattacgc 6060

cagctggcga aagggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc agggttttcc 6120

cagtcacgac gttgtaaaac gacggcgcaa ggaatggtgc atgcaaggag atggcgccca 6180

acagtccccc ggccacgggg cctgccacca tacccacgcc gaaacaagcg ctcatgagcc 6240

cgaagtggcg agcccgatct tccccatcgg tgatgtcggc gatataggcg ccagcaaccg 6300

cacctgtggc gccggtgatg ccggccacga tgcgtccggc gtagaggcga ttagtccaat 6360

ttgttaaaga caggatatca gtggtccagg ctctagtttt gactcaacaa tatcaccagc 6420

tgaagcctat agagtacgag ccatagataa aataaaagat tttatttagt ctccagaaaa 6480

agggggga 6488

<210> 88

<211> 117

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> тяжелая цепь к CLDN6

<400> 88

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Met Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Asn Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Leu Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr Ile Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Tyr Gly Phe Val Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 89

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> легкая цепь 1 к CLDN6

<400> 89

Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Leu

20 25 30

His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Trp Val Tyr

35 40 45

Ser Thr Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Gly Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Met Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Ile Tyr Pro Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 90

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> легкая цепь 2 к CLDN6

<400> 90

Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ile Met Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Gly Ile Tyr

35 40 45

Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Arg

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Ala Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Tyr Pro Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 91

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> легкая цепь 3 к CLDN6

<400> 91

Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ile Met Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ser Pro Lys Leu Ser Ile Tyr

35 40 45

Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Arg

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Ala Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Tyr Pro Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 92

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 тяжелой цепи к CLDN6

<400> 92

Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Thr

1 5

<210> 93

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 тяжелой цепи к CLDN6

<400> 93

Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Gly Thr

1 5

<210> 94

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 тяжелой цепи к CLDN6

<400> 94

Ala Arg Asp Tyr Gly Phe Val Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 95

<211> 5

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 легкой цепи 1 к CLDN6

<400> 95

Ser Ser Val Ser Tyr

1 5

<210> 96

<211> 3

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 легкой цепи 1 к CLDN6

<400> 96

Ser Thr Ser

1

<210> 97

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 легкой цепи 1 к CLDN6

<400> 97

Gln Gln Arg Ser Ile Tyr Pro Pro

1 5

<210> 98

<211> 5

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 легкой цепи 2 к CLDN6

<400> 98

Ser Ser Val Ser Tyr

1 5

<210> 99

<211> 3

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 легкой цепи 2 к CLDN6

<400> 99

Ser Thr Ser

1

<210> 100

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 легкой цепи 2 к CLDN6

<400> 100

Gln Gln Arg Ser Asn Tyr Pro Pro

1 5

<210> 101

<211> 5

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 LC к CLDN6

<400> 101

Ser Ser Val Ser Tyr

1 5

<210> 102

<211> 3

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 LC3 к CLDN6

<400> 102

Ser Thr Ser

1

<210> 103

<211> 8

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 LC3 к CLDN6

<400> 103

Gln Gln Arg Ser Asn Tyr Pro Pro

1 5

<210> 104

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> вариабельная область тяжелой цепи к CD19

<400> 104

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 105

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> вариабельная область легкой цепи к CD19

<400> 105

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Ile Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ala Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys

100 105

<210> 106

<211> 450

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> вариабельная область тяжелой цепи к CD19

<400> 106

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly Lys

450

<210> 107

<211> 214

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> вариабельная область легкой цепи к CD19

<400> 107

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Ile Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Ala Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 108

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 LC к CD19

<400> 108

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 109

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 LC к CD19

<400> 109

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 110

<211> 9

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 LC к CD19

<400> 110

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 111

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HC к CD19

<400> 111

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 112

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC к CD19

<400> 112

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Ser Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 113

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC к CD19

<400> 113

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 114

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC к CD19

<400> 114

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 115

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HC к CD19

<400> 115

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 116

<211> 242

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CAR к CD19

<400> 116

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys

130 135 140

Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg

145 150 155 160

Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser

165 170 175

Glu Thr Thr Tyr Tyr Gln Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser

180 185 190

Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr

195 200 205

Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly

210 215 220

Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

225 230 235 240

Ser Ser

<210> 117

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> huFMC63VLv1

<400> 117

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

100 105

<210> 118

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VLV2

<400> 118

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

100 105

<210> 119

<211> 107

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VLV3

<400> 119

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

100 105

<210> 120

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VHV1

<400> 120

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 121

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VHV2

<400> 121

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 122

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VHV3

<400> 122

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 123

<211> 120

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> HUFMC63VHV4

<400> 123

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr

20 25 30

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 124

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 huFMC63VLv1

<400> 124

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 125

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 huFMC63VLv1

<400> 125

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 126

<400> 126

000

<210> 127

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VLV2

<400> 127

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 128

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VLV2

<400> 128

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 129

<211> 9

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VLV2

<400> 129

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 130

<211> 11

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VLV3

<400> 130

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 131

<211> 7

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VLV3

<400> 131

His Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 132

<211> 9

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VLV3

<400> 132

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr

1 5

<210> 133

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VHV1

<400> 133

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 134

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VHV1

<400> 134

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 135

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VHV1

<400> 135

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 136

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VHV2

<400> 136

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 137

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VHV2

<400> 137

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 138

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VHV2

<400> 138

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 139

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VHV3

<400> 139

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 140

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VHV3

<400> 140

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 141

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VHV3

<400> 141

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 142

<211> 10

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR1 HUFMC63VHV4

<400> 142

Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly Val Ser

1 5 10

<210> 143

<211> 16

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR2 HUFMC63VHV4

<400> 143

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 144

<211> 12

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CDR3 HUFMC63VHV4

<400> 144

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 145

<211> 1122

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NKG2D-Ox40-CD3z

<400> 145

atggccttac cagtgaccgc cttgctcctg ccgctggcct tgctgctcca cgccgccagg 60

ccgttattca accaagaagt tcaaattccc ttgaccgaaa gttactgtgg cccatgtcct 120

aaaaactgga tatgttacaa aaataactgc taccaatttt ttgatgagag taaaaactgg 180

tatgagagcc aggcttcttg tatgtctcaa aatgccagcc ttctgaaagt atacagcaaa 240

gaggaccagg atttacttaa actggtgaag tcatatcatt ggatgggact agtacacatt 300

ccaacaaatg gatcttggca gtgggaagat ggctccattc tctcacccaa cctactaaca 360

ataattgaaa tgcagaaggg agactgtgca ctctatgcct cgagctttaa aggctatata 420

gaaaactgtt caactccaaa tacgtacatc tgcatgcaaa ggactgtgac cacgacgcca 480

gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca 540

gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt 600

gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt 660

atcacccttt actgccggag ggaccagagg ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg 720

ggaggcagtt tccggacccc catccaagag gagcaggccg acgcccactc caccctggcc 780

aagatcagag tgaagttcag caggagcgca gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac 840

cagctctata acgagctcaa tctaggacga agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga 900

cgtggccggg accctgagat ggggggaaag ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg 960

tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc 1020

gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag 1080

gacacctacg acgcccttca catgcaggcc ctgccccctc gc 1122

<210> 146

<211> 341

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NKG2D-OX40-CD3z

<400> 146

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Leu Phe Asn Gln Glu Val Gln Ile Pro Leu Thr

20 25 30

Glu Ser Tyr Cys Gly Pro Cys Pro Lys Asn Trp Ile Cys Tyr Lys Asn

35 40 45

Asn Cys Tyr Gln Phe Phe Asp Glu Ser Lys Asn Trp Tyr Glu Ser Gln

50 55 60

Ala Ser Cys Met Ser Gln Asn Ala Ser Leu Leu Lys Val Tyr Ser Lys

65 70 75 80

Glu Asp Gln Asp Leu Leu Lys Leu Val Lys Ser Tyr His Trp Met Gly

85 90 95

Leu Val His Ile Pro Thr Asn Gly Ser Trp Gln Trp Glu Asp Gly Ser

100 105 110

Ile Leu Ser Pro Asn Leu Leu Thr Ile Ile Glu Met Gln Lys Gly Asp

115 120 125

Cys Ala Leu Tyr Ala Ser Ser Phe Lys Gly Tyr Ile Glu Asn Cys Ser

130 135 140

Thr Pro Asn Thr Tyr Ile Cys Met Gln Arg Thr Val Glu Ser Lys Tyr

145 150 155 160

Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala

165 170 175

Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

180 185 190

Arg Arg Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly

195 200 205

Gly Ser Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser

210 215 220

Thr Leu Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro

225 230 235 240

Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly

245 250 255

Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro

260 265 270

Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr

275 280 285

Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly

290 295 300

Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln

305 310 315 320

Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln

325 330 335

Ala Leu Pro Pro Arg

340

<210> 147

<211> 1467

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК FMC63_CD28_CAR

<400> 147

atgcttctcc tggtgacaag ccttctttac cacacccagc attcctcctg atcccagaca 60

tccagataca tcctccctgt ctgcctctct gggagacaga gtcaccgggc aagtcaggac 120

attagtaaat atttaaattg gtatcagctc tgtgagtgac acagacatca gttgcagcag 180

aaaccagatg gaactgttaa actcctgatc taccatacat caagattaca ctcaggagtc 240

ccatcaaggt tcagtggcag tgggtctgga acagattatt ctctcaccat tagcaacctg 300

gagcaagaag atattgccac ttacttttgc caacagggta atacgcttcc gtacacgttc 360

ggagggggga ctaagttgga aataacaggc tccacctctg gatccggcaa gcccggatct 420

ggcgagggat ccaccaaggg cgaggtgaaa ctgcaggagt caggacctgg cctggtggcg 480

ccctcacaga gcctgtccgt cacatgcact gtctcagggg tctcattacc cgactatggt 540

gtaagctgga ttcgccagcc tccacgaaag ggtctggagt ggctgggagt aatatggggt 600

agtgaaacca catactataa ttcagctctc aaatccagac tgaccatcat caaggacaac 660

tccaagagcc aagttttctt aaaaatgaac agtctgcaaa ctgatgacac agccatttac 720

tactgtgcca aacattatta ctacggtggt agctatgcta tggactactg gggtcaagga 780

acctcagtca ccgtctcctc agcggccgca attgaagtta tgtatcctcc tccttaccta 840

gacaatgaga agagcaatgg aaccattatc catgtgaaag ggaaacacct ttgtccaagt 900

cccctatttc ccggaccttc taagcccttt tgggtgctgg tggtggttgg gggagtcctg 960

gcttgctata gcttgctagt aacagtggcc tttattattt tctgggtgag gagtaagagg 1020

agcaggctcc tgcacagtga ctacatgaac atgactcccc gccgccccgg gcccacccgc 1080

aagcattacc agccctatgc cccaccacgc gacttcgcag cctatcgctc cagagtgaag 1140

ttcagcagga gcgcagacgc ccccgcgtac cagcagggcc agaaccagct ctataacgag 1200

ctcaatctag gacgaagaga ggagtacgat gttttggaca agagacgtgg ccgggaccct 1260

gagatggggg gaaagccgag aaggaagaac cctcaggaag gcctgtacaa tgaactgcag 1320

aaagataaga tggcggaggc ctacagtgag attgggatga aaggcgagcg ccggaggggc 1380

aaggggcacg atggccttta ccagggtctc agtacagcca ccaaggacac ctacgacgcc 1440

cttcacatgc aggccctgcc ccctcgc 1467

<210> 148

<211> 331

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК легкой цепи FCM63

<400> 148

gacatccaga tacatcctcc ctgtctgcct ctctgggaga cagagtcacc gggcaagtca 60

ggacattagt aaatatttaa attggtatca gctctgtgag tgacacagac atcagttgca 120

gcagaaacca gatggaactg ttaaactcct gatctaccat acatcaagat tacactcagg 180

agtcccatca aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattagcaa 240

cctggagcaa gaagatattg ccacttactt ttgccaacag ggtaatacgc ttccgtacac 300

gttcggaggg gggactaagt tggaaataac a 331

<210> 149

<211> 54

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК линкера FMC63

<400> 149

ggctccacct ctggatccgg caagcccgga tctggcgagg gatccaccaa gggc 54

<210> 150

<211> 360

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК тяжелой цепи FMC63

<400> 150

gaggtgaaac tgcaggagtc aggacctggc ctggtggcgc cctcacagag cctgtccgtc 60

acatgcactg tctcaggggt ctcattaccc gactatggtg taagctggat tcgccagcct 120

ccacgaaagg gtctggagtg gctgggagta atatggggta gtgaaaccac atactataat 180

tcagctctca aatccagact gaccatcatc aaggacaact ccaagagcca agttttctta 240

aaaatgaaca gtctgcaaac tgatgacaca gccatttact actgtgccaa acattattac 300

tacggtggta gctatgctat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca 360

<210> 151

<211> 117

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК спейсера CD28

<400> 151

attgaagtta tgtatcctcc tccttaccta gacaatgaga agagcaatgg aaccattatc 60

catgtgaaag ggaaacacct ttgtccaagt cccctatttc ccggaccttc taagccc 117

<210> 152

<211> 81

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК трансмембранной области

<400> 152

ttttgggtgc tggtggtggt tgggggagtc ctggcttgct atagcttgct agtaacagtg 60

gcctttatta ttttctgggt g 81

<210> 153

<211> 123

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК костимулирующего домена CD28

<400> 153

aggagtaaga ggagcaggct cctgcacagt gactacatga acatgactcc ccgccgcccc 60

gggcccaccc gcaagcatta ccagccctat gccccaccac gcgacttcgc agcctatcgc 120

tcc 123

<210> 154

<211> 336

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> CD3-дзета [повтор]

<400> 154

agagtgaagt tcagcaggag cgcagacgcc cccgcgtacc agcagggcca gaaccagctc 60

tataacgagc tcaatctagg acgaagagag gagtacgatg ttttggacaa gagacgtggc 120

cgggaccctg agatgggggg aaagccgaga aggaagaacc ctcaggaagg cctgtacaat 180

gaactgcaga aagataagat ggcggaggcc tacagtgaga ttgggatgaa aggcgagcgc 240

cggaggggca aggggcacga tggcctttac cagggtctca gtacagccac caaggacacc 300

tacgacgccc ttcacatgca ggccctgccc cctcgc 336

<210> 155

<211> 342

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Кодирующая последовательность mbIL15

<400> 155

aactgggtca acgtgattag cgatttgaag aaaatcgagg accttataca gtctatgcat 60

attgacgcta cactgtatac tgagagtgat gtacacccgt cctgtaaggt aacggccatg 120

aaatgctttc ttctggagct ccaggtcatc agcttggagt ctggggacgc aagcatccac 180

gatacggttg aaaacctcat catccttgcg aacaactctc tctcatctaa tggaaacgtt 240

acagagagtg ggtgtaagga gtgcgaagag ttggaagaaa aaaacatcaa agaatttctt 300

caatccttcg ttcacatagt gcaaatgttc attaacacgt cc 342

<210> 156

<211> 135

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК шарнира cd, обратная транскрипция с №: 157

<400> 156

accaccaccc cggcgccgcg cccgccgacc ccggcgccga ccattgcgag ccagccgctg 60

agcctgcgcc cggaagcgtg ccgcccggcg gcgggcggcg cggtgcatac ccgcggcctg 120

gattttgcgt gcgat 135

<210> 157

<211> 45

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Аминокислотная последовательность шарнира CD8

<400> 157

Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala

1 5 10 15

Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly

20 25 30

Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp

35 40 45

<210> 158

<211> 72

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> Последовательность ДНК TM CD8, обратная транскрипция с №: 159

<400> 158

atttatattt gggcgccgct ggcgggcacc tgcggcgtgc tgctgctgag cctggtgatt 60

accctgtatt gc 72

<210> 159

<211> 24

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность TM CD8

<400> 159

Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu

1 5 10 15

Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys

20

<210> 160

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-1

<400> 160

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat tattgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcctgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gggcaaaggc ctggaatgga ttggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaaaccagg tgagcctgaa actgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc ggtgtattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 161

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-1

<400> 161

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 162

<211> 2187

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-2

<400> 162

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat ttttgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcctgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gggcaaaggc ctggaatgga ttggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaaaccagg tgagcctgaa actgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc ggtgtattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgc 2187

<210> 163

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-2

<400> 163

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 164

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-3

<400> 164

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cggatggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attataccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat ttttgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcctgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gggcaaaggc ctggaatgga ttggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaaaccagg tgagcctgaa actgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc ggtgtattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 165

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-3

<400> 165

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Ile Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 166

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-4

<400> 166

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat tattgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcctgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gggcaaaggc ctggaatggc tgggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaagccagg tgagcctgaa actgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc ggtgtattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 167

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-4

<400> 167

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 168

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-5

<400> 168

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat ttttgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcctgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gggcaaaggc ctggaatggc tgggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaagccagg tgagcctgaa actgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc ggtgtattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 169

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-5

<400> 169

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 170

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-6

<400> 170

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgacatcca gatgacacag agcccgtcct ccctgtctgc ctctgtggga 180

gacagagtca ccatcacctg cagggcaagt caggacatta gtaaatattt aaattggtat 240

cagcagaaac cagacggaac tgttaaactc ctgatctacc atacatcaag attacactca 300

ggagtcccat caaggttcag tggcagtggg tctggaacag attacaccct caccattagc 360

agcctgcaac cggaagatat tgccacttac ttctgccaac agggtaatac gcttccgtac 420

acgttcggag gggggaccaa gctggagatc acaggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggagtcag gacctggcct ggtgaaaccc 540

tcacagactc tgtccctgac atgcactgtc tcaggggtct cattacccga ctatggtgta 600

agctggattc gccagcctcc aggtaagggt ctggagtggc tgggagtaat atggggtagt 660

gaaaccacat actataattc agctctcaaa tccagactga ccatctccaa ggacaactcc 720

aagagccaag tttccttaaa attaagtagt gttactgctg ctgacacagc cgtctactac 780

tgtgccaaac attattacta cggtggtagc tatgctatgg actactgggg ccaaggaacc 840

tcagtcaccg tctcctcaac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 171

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-6

<400> 171

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 172

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-7

<400> 172

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgacatcca gatgacacag agcccgtcct ccctgtctgc ctctgtggga 180

gacagagtca ccatcacctg cagggcaagt caggacatta gtaaatattt aaattggtat 240

cagcagaaac caggtggaac tgttaaactc ctgatctacc atacatcaag attacactca 300

ggagtcccat caaggttcag tggcagtggg tctggaacag atttcaccct caccattagc 360

agcctgcaac cggaagatat tgccacttac tactgccaac agggtaatac gcttccgtac 420

acgttcggag gggggaccaa gctggagatc acaggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggagtcag gacctggcct ggtgaaaccc 540

tcacagactc tgtccgtgac atgcactgtc tcaggggtct cattacccga ctatggtgta 600

agctggattc gccagcctcc aggtaagggt ctggagtggc tgggagtaat atggggtagt 660

gaaaccacat actataattc agctctcaaa tccagactga ccatctccaa ggacaactcc 720

aagagccaag tttccttaaa attaagtagt gttactgctg ctgacacagc cgtctactac 780

tgtgccaaac attattacta cggtggtagc tatgctatgg actactgggg ccaaggaacc 840

tcagtcaccg tctcctcaac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 173

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-7

<400> 173

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 174

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-8

<400> 174

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgacatcca gatgacacag agcccgtcct ccctgtctgc ctctgtggga 180

gacagagtca ccatcacctg cagggcaagt caggacatta gtaaatattt aaattggtat 240

cagcagaaac caggtggaac tgttaaactc ctgatctacc atacatcaag attacactca 300

ggagtcccat caaggttcag tggcagtggg tctggaacag atttcaccct caccattagc 360

agcctgcaac cggaagatat tgccacttac ttctgccaac agggtaatac gcttccgtac 420

acgttcggag gggggaccaa gctggagatc acaggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggagtcag gacctggcct ggtgaaaccc 540

tcacagactc tgtccgtgac atgcactgtc tcaggggtct cattacccga ctatggtgta 600

agctggattc gccagcctcc aggtaagggt ctggagtggc tgggagtaat atggggtagt 660

gaaaccacat actataattc agctctcaaa tccagactga ccatctccaa ggacaactcc 720

aagagccaag tttccttaaa attaagtagt gttactgctg ctgacacagc cgtctactac 780

tgtgccaaac attattacta cggtggtagc tatgctatgg actactgggg ccaaggaacc 840

tcagtcaccg tctcctcaac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 175

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-8

<400> 175

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 176

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-9

<400> 176

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgacatcca gatgacacag agcccgtcct ccctgtctgc ctctgtggga 180

gacagagtca ccatcacctg cagggcaagt caggacatta gtaaatattt aaattggtat 240

cagcagaaac cagacggaac tgttaaactc ctgatctacc atacatcaag attacactca 300

ggagtcccat caaggttcag tggcagtggg tctggaacag attacaccct caccattagc 360

agcctgcaac cggaagatat tgccacttac ttctgccaac agggtaatac gcttccgtac 420

acgttcggag gggggaccaa gctggagatc acaggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggagtcag gacctggcct ggtgaaaccc 540

tcacagactc tgtccgtgac atgcactgtc tcaggggtct cattacccga ctatggtgta 600

agctggattc gccagcctcc aggtaagggt ctggagtggc tgggagtaat atggggtagt 660

gaaaccacat actataattc agctctcaaa tccagactga ccatctccaa ggacaactcc 720

aagagccaag tttccttaaa attaagtagt gttactgctg ctgacacagc cgtctactac 780

tgtgccaaac attattacta cggtggtagc tatgctatgg actactgggg ccaaggaacc 840

tcagtcaccg tctcctcaac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 177

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-9

<400> 177

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 178

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-10

<400> 178

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat tattgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcgtgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gcgcaaaggc ctggaatggc tgggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaagccagg tgagcctgaa aatgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc gatttattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 179

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-10

<400> 179

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 180

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-11

<400> 180

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cgggcggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attttaccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat ttttgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcgtgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gcgcaaaggc ctggaatggc tgggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaagccagg tgagcctgaa aatgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc gatttattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 181

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-11

<400> 181

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 182

<211> 2204

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-12

<400> 182

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga ctacaaagac gatgacgata aaggcggtgg tggctctggt 120

ggtggcggca gcgatattca gatgacccag agcccgagca gcctgagcgc gagcgtgggc 180

gatcgcgtga ccattacctg ccgcgcgagc caggatatta gcaaatatct gaactggtat 240

cagcagaaac cggatggcac cgtgaaactg ctgatttatc ataccagccg cctgcatagc 300

ggcgtgccga gccgctttag cggcagcggc agcggcaccg attataccct gaccattagc 360

agcctgcagc cggaagatat tgcgacctat ttttgccagc agggcaacac cctgccgtat 420

acctttggcg gcggcaccaa actggaaatt accggtggcg gtggctcggg cggtggtggg 480

tcgggtggcg gcggatctca ggtgcagctg caggaaagcg gcccgggcct ggtgaaaccg 540

agccagaccc tgagcgtgac ctgcaccgtg agcggcgtga gcctgccgga ttatggcgtg 600

agctggattc gccagccgcc gcgcaaaggc ctggaatggc tgggcgtgat ttggggcagc 660

gaaaccacct attataacag cgcgctgaaa agccgcctga ccattagcaa agataacagc 720

aaaagccagg tgagcctgaa aatgagcagc gtgaccgcgg cggataccgc gatttattat 780

tgcgcgaaac attattatta tggcggcagc tatgcgatgg attattgggg ccagggcacc 840

agcgtgaccg tgagcagcac cacgacgcca gcgccgcgac caccaacacc ggcgcccacc 900

atcgcgtcgc agcccctgtc cctgcgccca gaggcgtgcc ggccagcggc ggggggcgca 960

gtgcacacga gggggctgga cttcgcctgt gatatctaca tctgggcgcc cttggccggg 1020

acttgtgggg tccttctcct gtcactggtt atcacccttt actgccggag ggaccagagg 1080

ctgccccccg atgcccacaa gccccctggg ggaggcagtt tccggacccc catccaagag 1140

gagcaggccg acgcccactc caccctggcc aagatcagag tgaagttcag caggagcgca 1200

gacgcccccg cgtaccagca gggccagaac cagctctata acgagctcaa tctaggacga 1260

agagaggagt acgatgtttt ggacaagaga cgtggccggg accctgagat ggggggaaag 1320

ccgagaagga agaaccctca ggaaggcctg tacaatgaac tgcagaaaga taagatggcg 1380

gaggcctaca gtgagattgg gatgaaaggc gagcgccgga ggggcaaggg gcacgatggc 1440

ctttaccagg gtctcagtac agccaccaag gacacctacg acgcccttca catgcaggcc 1500

ctgccccctc gcggctctgg cgagggaagg ggttccctgc ttacttgcgg cgacgtcgaa 1560

gagaatcccg gtccgatggc cctcccagta actgccctcc ttttgcccct cgcactcctt 1620

cttcatgccg ctcgccccaa ctgggtcaac gtgattagcg atttgaagaa aatcgaggac 1680

cttatacagt ctatgcatat tgacgctaca ctgtatactg agagtgatgt acacccgtcc 1740

tgtaaggtaa cggccatgaa atgctttctt ctggagctcc aggtcatcag cttggagtct 1800

ggggacgcaa gcatccacga tacggttgaa aacctcatca tccttgcgaa caactctctc 1860

tcatctaatg gaaacgttac agagagtggg tgtaaggagt gcgaagagtt ggaagaaaaa 1920

aacatcaaag aatttcttca atccttcgtt cacatagtgc aaatgttcat taacacgtcc 1980

actaccacac ccgccccgag gccacctacg ccggcaccga ctatcgccag tcaacccctc 2040

tctctgcgcc ccgaggcttg ccggcctgcg gctggtgggg cggtccacac ccggggcctg 2100

gattttgcgt gcgatatata catctgggca cctcttgccg gcacctgcgg agtgctgctt 2160

ctctcactcg ttattacgct gtactgctaa gcggccgcgt cgac 2204

<210> 183

<211> 724

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-12

<400> 183

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala

50 55 60

Ser Gln Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp

65 70 75 80

Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly

85 90 95

Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu

100 105 110

Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln

115 120 125

Gln Gly Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu

130 135 140

Ile Thr Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser

165 170 175

Gln Thr Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp

180 185 190

Tyr Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp

195 200 205

Leu Gly Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu

210 215 220

Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser

225 230 235 240

Leu Lys Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

245 250 255

Ala Lys His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

260 265 270

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg

275 280 285

Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg

290 295 300

Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly

305 310 315 320

Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr

325 330 335

Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg

340 345 350

Asp Gln Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser

355 360 365

Phe Arg Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu

370 375 380

Ala Lys Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr

385 390 395 400

Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg

405 410 415

Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met

420 425 430

Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu

435 440 445

Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys

450 455 460

Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu

465 470 475 480

Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu

485 490 495

Pro Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly

500 505 510

Asp Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu

515 520 525

Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val

530 535 540

Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met

545 550 555 560

His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys

565 570 575

Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser

580 585 590

Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile

595 600 605

Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser

610 615 620

Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe

625 630 635 640

Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr

645 650 655

Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser

660 665 670

Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly

675 680 685

Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp

690 695 700

Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile

705 710 715 720

Thr Leu Tyr Cys

<210> 184

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-1

<400> 184

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattatt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cctgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgggc aaaggcctgg aatggattgg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa accaggtgag cctgaaactg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcggtg 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 185

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-1

<400> 185

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 186

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-2

<400> 186

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattttt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cctgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgggc aaaggcctgg aatggattgg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa accaggtgag cctgaaactg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcggtg 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 187

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-2

<400> 187

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 188

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-3

<400> 188

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccgga tggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgatta taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattttt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cctgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgggc aaaggcctgg aatggattgg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa accaggtgag cctgaaactg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcggtg 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 189

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-3

<400> 189

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 190

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-4

<400> 190

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattatt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cctgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgggc aaaggcctgg aatggctggg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa gccaggtgag cctgaaactg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcggtg 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 191

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-4

<400> 191

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 192

<211> 2153

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-5

<400> 192

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattttt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg agtcaggacc tggcctggtg 480

aaaccctcac agactctgtc cctgacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 540

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccaggt aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 600

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat ctccaaggac 660

aactccaaga gccaagtttc cttaaaatta agtagtgtta ctgctgctga cacagccgtc 720

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 780

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcaga 1140

tctagcgcag acgcccccgc gtaccagcag ggccagaacc agctctataa cgagctcaat 1200

ctaggacgaa gagaggagta cgatgttttg gacaagagac gtggccggga ccctgagatg 1260

gggggaaagc cgagaaggaa gaaccctcag gaaggcctgt acaatgaact gcagaaagat 1320

aagatggcgg aggcctacag tgagattggg atgaaaggcg agcgccggag gggcaagggg 1380

cacgatggcc tttaccaggg tctcagtaca gccaccaagg acacctacga cgcccttcac 1440

atgcaggccc tgccccctcg cggctctggc gagggaaggg gttccctgct tacttgcggc 1500

gacgtcgaag agaatcccgg tccgatggcc ctcccagtaa ctgccctcct tttgcccctc 1560

gcactccttc ttcatgccgc tcgccccaac tgggtcaacg tgattagcga tttgaagaaa 1620

atcgaggacc ttatacagtc tatgcatatt gacgctacac tgtatactga gagtgatgta 1680

cacccgtcct gtaaggtaac ggccatgaaa tgctttcttc tggagctcca ggtcatcagc 1740

ttggagtctg gggacgcaag catccacgat acggttgaaa acctcatcat ccttgcgaac 1800

aactctctct catctaatgg aaacgttaca gagagtgggt gtaaggagtg cgaagagttg 1860

gaagaaaaaa acatcaaaga atttcttcaa tccttcgttc acatagtgca aatgttcatt 1920

aacacgtcca ctaccacacc cgccccgagg ccacctacgc cggcaccgac tatcgccagt 1980

caacccctct ctctgcgccc cgaggcttgc cggcctgcgg ctggtggggc ggtccacacc 2040

cggggcctgg attttgcgtg cgatatatac atctgggcac ctcttgccgg cacctgcgga 2100

gtgctgcttc tctcactcgt tattacgctg tactgctaag cggccgcgtc gac 2153

<210> 193

<211> 707

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-5

<400> 193

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln

370 375 380

Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu

385 390 395 400

Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly

405 410 415

Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu

420 425 430

Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly

435 440 445

Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser

450 455 460

Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro

465 470 475 480

Pro Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp

485 490 495

Val Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu

500 505 510

Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn

515 520 525

Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His

530 535 540

Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys

545 550 555 560

Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu

565 570 575

Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile

580 585 590

Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly

595 600 605

Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu

610 615 620

Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr

625 630 635 640

Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln

645 650 655

Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala

660 665 670

Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala

675 680 685

Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr

690 695 700

Leu Tyr Cys

705

<210> 194

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-6

<400> 194

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga catccagatg acacagagcc cgtcctccct gtctgcctct 120

gtgggagaca gagtcaccat cacctgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 180

tggtatcagc agaaaccaga cggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 240

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta caccctcacc 300

attagcagcc tgcaaccgga agatattgcc acttacttct gccaacaggg taatacgctt 360

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg agtcaggacc tggcctggtg 480

aaaccctcac agactctgtc cctgacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 540

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccaggt aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 600

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat ctccaaggac 660

aactccaaga gccaagtttc cttaaaatta agtagtgtta ctgctgctga cacagccgtc 720

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 780

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 195

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-6

<400> 195

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 196

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-7

<400> 196

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga catccagatg acacagagcc cgtcctccct gtctgcctct 120

gtgggagaca gagtcaccat cacctgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 180

tggtatcagc agaaaccagg tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 240

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagattt caccctcacc 300

attagcagcc tgcaaccgga agatattgcc acttactact gccaacaggg taatacgctt 360

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg agtcaggacc tggcctggtg 480

aaaccctcac agactctgtc cgtgacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 540

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccaggt aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 600

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat ctccaaggac 660

aactccaaga gccaagtttc cttaaaatta agtagtgtta ctgctgctga cacagccgtc 720

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 780

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 197

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-7

<400> 197

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 198

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-8

<400> 198

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga catccagatg acacagagcc cgtcctccct gtctgcctct 120

gtgggagaca gagtcaccat cacctgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 180

tggtatcagc agaaaccagg tggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 240

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagattt caccctcacc 300

attagcagcc tgcaaccgga agatattgcc acttacttct gccaacaggg taatacgctt 360

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg agtcaggacc tggcctggtg 480

aaaccctcac agactctgtc cgtgacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 540

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccaggt aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 600

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat ctccaaggac 660

aactccaaga gccaagtttc cttaaaatta agtagtgtta ctgctgctga cacagccgtc 720

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 780

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 199

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-8

<400> 199

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 200

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-9

<400> 200

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga catccagatg acacagagcc cgtcctccct gtctgcctct 120

gtgggagaca gagtcaccat cacctgcagg gcaagtcagg acattagtaa atatttaaat 180

tggtatcagc agaaaccaga cggaactgtt aaactcctga tctaccatac atcaagatta 240

cactcaggag tcccatcaag gttcagtggc agtgggtctg gaacagatta caccctcacc 300

attagcagcc tgcaaccgga agatattgcc acttacttct gccaacaggg taatacgctt 360

ccgtacacgt tcggaggggg gaccaagctg gagatcacag gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg agtcaggacc tggcctggtg 480

aaaccctcac agactctgtc cgtgacatgc actgtctcag gggtctcatt acccgactat 540

ggtgtaagct ggattcgcca gcctccaggt aagggtctgg agtggctggg agtaatatgg 600

ggtagtgaaa ccacatacta taattcagct ctcaaatcca gactgaccat ctccaaggac 660

aactccaaga gccaagtttc cttaaaatta agtagtgtta ctgctgctga cacagccgtc 720

tactactgtg ccaaacatta ttactacggt ggtagctatg ctatggacta ctggggccaa 780

ggaacctcag tcaccgtctc ctcaaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 201

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-9

<400> 201

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 202

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-10

<400> 202

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattatt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cgtgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgcgc aaaggcctgg aatggctggg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa gccaggtgag cctgaaaatg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcgatt 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 203

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-10

<400> 203

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 204

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-11

<400> 204

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccggg cggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgattt taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattttt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cgtgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgcgc aaaggcctgg aatggctggg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa gccaggtgag cctgaaaatg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcgatt 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 205

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-11

<400> 205

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<210> 206

<211> 2150

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> ДНК NK19H-NF-12

<400> 206

gaattcgccg ccaccatggc cttaccagtg accgccttgc tcctgccgct ggccttgctg 60

ctccacgccg ccaggccgga tattcagatg acccagagcc cgagcagcct gagcgcgagc 120

gtgggcgatc gcgtgaccat tacctgccgc gcgagccagg atattagcaa atatctgaac 180

tggtatcagc agaaaccgga tggcaccgtg aaactgctga tttatcatac cagccgcctg 240

catagcggcg tgccgagccg ctttagcggc agcggcagcg gcaccgatta taccctgacc 300

attagcagcc tgcagccgga agatattgcg acctattttt gccagcaggg caacaccctg 360

ccgtatacct ttggcggcgg caccaaactg gaaattaccg gtggcggtgg ctcgggcggt 420

ggtgggtcgg gtggcggcgg atctcaggtg cagctgcagg aaagcggccc gggcctggtg 480

aaaccgagcc agaccctgag cgtgacctgc accgtgagcg gcgtgagcct gccggattat 540

ggcgtgagct ggattcgcca gccgccgcgc aaaggcctgg aatggctggg cgtgatttgg 600

ggcagcgaaa ccacctatta taacagcgcg ctgaaaagcc gcctgaccat tagcaaagat 660

aacagcaaaa gccaggtgag cctgaaaatg agcagcgtga ccgcggcgga taccgcgatt 720

tattattgcg cgaaacatta ttattatggc ggcagctatg cgatggatta ttggggccag 780

ggcaccagcg tgaccgtgag cagcaccacg acgccagcgc cgcgaccacc aacaccggcg 840

cccaccatcg cgtcgcagcc cctgtccctg cgcccagagg cgtgccggcc agcggcgggg 900

ggcgcagtgc acacgagggg gctggacttc gcctgtgata tctacatctg ggcgcccttg 960

gccgggactt gtggggtcct tctcctgtca ctggttatca ccctttactg ccggagggac 1020

cagaggctgc cccccgatgc ccacaagccc cctgggggag gcagtttccg gacccccatc 1080

caagaggagc aggccgacgc ccactccacc ctggccaaga tcagagtgaa gttcagcagg 1140

agcgcagacg cccccgcgta ccagcagggc cagaaccagc tctataacga gctcaatcta 1200

ggacgaagag aggagtacga tgttttggac aagagacgtg gccgggaccc tgagatgggg 1260

ggaaagccga gaaggaagaa ccctcaggaa ggcctgtaca atgaactgca gaaagataag 1320

atggcggagg cctacagtga gattgggatg aaaggcgagc gccggagggg caaggggcac 1380

gatggccttt accagggtct cagtacagcc accaaggaca cctacgacgc ccttcacatg 1440

caggccctgc cccctcgcgg ctctggcgag ggaaggggtt ccctgcttac ttgcggcgac 1500

gtcgaagaga atcccggtcc gatggccctc ccagtaactg ccctcctttt gcccctcgca 1560

ctccttcttc atgccgctcg ccccaactgg gtcaacgtga ttagcgattt gaagaaaatc 1620

gaggacctta tacagtctat gcatattgac gctacactgt atactgagag tgatgtacac 1680

ccgtcctgta aggtaacggc catgaaatgc tttcttctgg agctccaggt catcagcttg 1740

gagtctgggg acgcaagcat ccacgatacg gttgaaaacc tcatcatcct tgcgaacaac 1800

tctctctcat ctaatggaaa cgttacagag agtgggtgta aggagtgcga agagttggaa 1860

gaaaaaaaca tcaaagaatt tcttcaatcc ttcgttcaca tagtgcaaat gttcattaac 1920

acgtccacta ccacacccgc cccgaggcca cctacgccgg caccgactat cgccagtcaa 1980

cccctctctc tgcgccccga ggcttgccgg cctgcggctg gtggggcggt ccacacccgg 2040

ggcctggatt ttgcgtgcga tatatacatc tgggcacctc ttgccggcac ctgcggagtg 2100

ctgcttctct cactcgttat tacgctgtac tgctaagcgg ccgcgtcgac 2150

<210> 207

<211> 706

<212> Белок

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой признак

<223> аминокислотная последовательность NK19H-NF-12

<400> 207

Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu

20 25 30

Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln

35 40 45

Asp Ile Ser Lys Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr

50 55 60

Val Lys Leu Leu Ile Tyr His Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro

65 70 75 80

Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly

100 105 110

Asn Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Thr

115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln

130 135 140

Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln Thr

145 150 155 160

Leu Ser Val Thr Cys Thr Val Ser Gly Val Ser Leu Pro Asp Tyr Gly

165 170 175

Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Arg Lys Gly Leu Glu Trp Leu Gly

180 185 190

Val Ile Trp Gly Ser Glu Thr Thr Tyr Tyr Asn Ser Ala Leu Lys Ser

195 200 205

Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu Lys

210 215 220

Met Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Lys

225 230 235 240

His Tyr Tyr Tyr Gly Gly Ser Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro

260 265 270

Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu

275 280 285

Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp

290 295 300

Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly

305 310 315 320

Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Arg Arg Asp Gln

325 330 335

Arg Leu Pro Pro Asp Ala His Lys Pro Pro Gly Gly Gly Ser Phe Arg

340 345 350

Thr Pro Ile Gln Glu Glu Gln Ala Asp Ala His Ser Thr Leu Ala Lys

355 360 365

Ile Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln

370 375 380

Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu

385 390 395 400

Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly

405 410 415

Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln

420 425 430

Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu

435 440 445

Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr

450 455 460

Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro

465 470 475 480

Arg Gly Ser Gly Glu Gly Arg Gly Ser Leu Leu Thr Cys Gly Asp Val

485 490 495

Glu Glu Asn Pro Gly Pro Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu

500 505 510

Pro Leu Ala Leu Leu Leu His Ala Ala Arg Pro Asn Trp Val Asn Val

515 520 525

Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile

530 535 540

Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val

545 550 555 560

Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu

565 570 575

Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu

580 585 590

Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys

595 600 605

Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln

610 615 620

Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser Thr Thr Thr

625 630 635 640

Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro

645 650 655

Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val

660 665 670

His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro

675 680 685

Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu

690 695 700

Tyr Cys

705

<---

Claims (86)

1. Полипептид, который связывает CD19, содержащий CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120; и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета.

2. Полипептид по п. 1, где субдомен ОХ40 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 6.

3. Полипептид по п. 1 или 2, где субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8.

4. Полипептид по любому из пп. 1-3, где шарнир предусматривает шарнир CD8-альфа.

5. Полипептид по любому из пп. 1-4, где трансмембранный домен CD8-альфа содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4.

6. Естественная киллерная (NK) клетка для экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), содержащая полинуклеотид, кодирующий полипептид по любому из пп. 1-5.

7. Естественная киллерная (NK) клетка для экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), содержащая:

(а) полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120; и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета; и

(b) полинуклеотид, кодирующий связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 12.

8. Естественная киллерная (NK) клетка для экспрессии химерного антигенного рецептора (CAR), содержащая полинуклеотид, кодирующий:

(а) CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120, и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета; и

(b) связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 12.

9. NK клетка по п. 7 или 8, где шарнир предусматривает шарнир CD8-альфа.

10. NK клетка по любому из пп. 7-9, где трансмембранный домен CD8-альфа содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4.

11. NK клетка по любому из пп. 7-10, где субдомен ОХ40 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 6.

12. NK клетка по любому из пп. 7-11, где субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8.

13. Применение полипептида по любому из пп. 1-5 или NK клетки по любому из пп. 6-12 при получении лекарственного препарата для лечения рака, при котором экспрессируется CD19.

14. Применение полипептида по любому из пп. 1-5 или NK клетки по любому из пп. 6-12 для лечения рака, при котором экспрессируется CD19.

15. Применение по п. 13 или 14, где рак представляет собой лимфому.

16. Полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), для применения при лечении рака, при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120, и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета;

где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 12.

17. Полинуклеотид по п. 16, где субдомен ОХ40 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 6.

18. Полинуклеотид по п. 16 или 17, где субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8.

19. Способ получения популяции естественных киллерных (NK) клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), для лечения рака, при этом способ включает:

(а) доставку во множество NK клеток вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный CAR, при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120,

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета;

где полинуклеотид дополнительно кодирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 12, за счет чего осуществляется создание популяции сконструированных NK клеток; и

(b) размножение сконструированных NK клеток в культуре до размера популяции, подходящего для необходимой дозы, с получением тем самым популяции NK клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный антигенный рецептор, для лечения рака.

20. Применение полипептида, содержащего CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при получении лекарственного препарата для лечения рака, при котором экспрессируется CD19, при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120; и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета.

21. Применение естественной киллерной (NK) клетки, содержащей полинуклеотид, кодирующий CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при получении лекарственного препарата для лечения субъекта, имеющего рак, при котором экспрессируется CD19, при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120; и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета.

22. Применение по п. 20 или 21, где рак представляет собой лейкоз.

23. Применение по п. 20 или 21, где рак представляет собой лимфому.

24. Применение по любому из пп. 20-23, где NK клетки являются аллогенными к субъекту.

25. Фармацевтическая композиция для применения при лечении опухоли, при которой экспрессируется CD19, при этом композиция содержит:

множество естественных киллерных (NK) клеток, экспрессирующих CD19-направленный химерный антигенный рецептор (CAR), при этом CAR содержит:

внеклеточный связывающий CD19 фрагмент, содержащий одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv), содержащий:

вариабельный домен тяжелой цепи (VH), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 120, и

вариабельный домен легкой цепи (VL), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 118;

шарнир;

трансмембранный домен CD8-альфа и

внутриклеточный сигнальный домен, содержащий субдомен ОХ40 и субдомен CD3-дзета.

26. Фармацевтическая композиция по п. 25, где субдомен ОХ40 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 6.

27. Фармацевтическая композиция по п. 25 или 26, где субдомен CD3-дзета содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8.

28. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-27, где шарнир предусматривает шарнир CD8-альфа.

29. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-28, где трансмембранный домен CD8-альфа содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 4.

30. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 25-29, где множество NK клеток дополнительно экспрессирует связанный с мембраной интерлейкин-15 (mbIL15), содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 12.