RU2841065C1 - Composition based on 2-((1s,2s,4s)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulphanylethanol for treating oral candidiasis and method of treating candidiasis - Google Patents
Composition based on 2-((1s,2s,4s)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulphanylethanol for treating oral candidiasis and method of treating candidiasis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2841065C1 RU2841065C1 RU2024137972A RU2024137972A RU2841065C1 RU 2841065 C1 RU2841065 C1 RU 2841065C1 RU 2024137972 A RU2024137972 A RU 2024137972A RU 2024137972 A RU2024137972 A RU 2024137972A RU 2841065 C1 RU2841065 C1 RU 2841065C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- candidiasis
- treatment
- composition
- treating
- oral
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Предлагаемая группа изобретений относится к области фармацевтики и ветеринарии и может быть использовано при лечении кандидоза полости рта животных. Возможно использовать при лечении кандидоза полости рта человека.The proposed group of inventions relates to the field of pharmaceuticals and veterinary medicine and can be used in the treatment of oral candidiasis in animals. It can be used in the treatment of oral candidiasis in humans.
Далее заявителем приведены термины, использованные в заявленном техническом решении.Below, the applicant provides the terms used in the declared technical solution.
Кандидоз - инфекционное заболевание, вызываемое дрожжеподобными грибками рода Candida (является представителем нормальной микробиоты кожи и слизистых оболочек человека, самый распространенный вид - Candida albicans), обусловлено активным размножением грибка на слизистых оболочках полости рта, половых и внутренних органов, и на коже. Candidiasis is an infectious disease caused by yeast-like fungi of the genus Candida (a representative of the normal microbiota of the skin and mucous membranes of humans, the most common species is Candida albicans ), caused by the active reproduction of the fungus on the mucous membranes of the oral cavity, genital and internal organs, and on the skin.
Хроническая форма кандидоза - медленное прогрессирование инфекционного заболевания. Chronic candidiasis is a slow progression of an infectious disease.
Острая форма кандидоза - заболевание, имеющее выраженные клинические симптомы и резкое начало. Acute candidiasis is a disease with pronounced clinical symptoms and a sudden onset.
Этиотропная терапия - лечение, направленное на устранение причины возникновения заболевания. Etiotropic therapy is treatment aimed at eliminating the cause of the disease.
Патогенетическая терапия - устранение или подавление механизмов развития болезни. Pathogenetic therapy is the elimination or suppression of the mechanisms of disease development.
Симптоматическая терапия - направлена на устранение или снижение проявления симптомов заболевания, негативно влияющих на качество жизни пациента. Symptomatic therapy is aimed at eliminating or reducing the manifestation of disease symptoms that negatively affect the patient’s quality of life.
Скрининговые исследования in vitro - начальный этап анализа соединений-кандидатов на биологическую активность в отношении тест-штаммов микроорганизмов. Screening studies in vitro - the initial stage of analysis of candidate compounds for biological activity against test strains of microorganisms.
Спейсер (молекулярный) - подвижная часть молекулы, осуществляющая связь между двумя другими частями молекулы. Spacer (molecular) - a mobile part of a molecule that provides a connection between two other parts of the molecule.
КОЕ - колониеобразующая единица. CFU - colony forming unit.
Кандидоз полости рта - это заболевание, которое возникает из-за поражения полости рта дрожжеподобными грибками рода Candida. Несмотря на то, что Candida относятся к естественным обитателям полости рта и обычно никак себя не проявляют, при снижении местного иммунитета или под воздействием агрессии факторов внешней среды они переходят в активную фазу роста, провоцируя воспалительный процесс в поражённой области. При этом грибы образуют биопленки, в составе которых они становятся более устойчивыми к антибиотикам и могут противостоять защитной системе организма человека. Oral candidiasis is a disease that occurs due to damage to the oral cavity by yeast-like fungi of the genus Candida . Despite the fact that Candida are natural inhabitants of the oral cavity and usually do not manifest themselves in any way, when local immunity decreases or under the influence of aggressive environmental factors, they enter an active growth phase, provoking an inflammatory process in the affected area. In this case, the fungi form biofilms, in which they become more resistant to antibiotics and can resist the human body's defense system.
По клиническому течению выделяют 2 формы кандидоза - острая и хроническая. Во многих случаях, острый процесс переходит в хронический вследствие неправильной диагностики и/или нерационального лечения.According to the clinical course, there are 2 forms of candidiasis - acute and chronic. In many cases, the acute process becomes chronic due to incorrect diagnosis and/or irrational treatment.
Лечение острого кандидоза слизистой оболочки полости рта требует комплексного подхода, включающего воздействие на грибы рода Candida (этиотропная терапия); купирование воспалительного процесса слизистой оболочки (патогенетическая терапия); устранение боли и облегчение состояния пациента (симптоматическая терапия). В связи с этим важной является проблема поиска новых надежных и в то же время безопасных противогрибковых средств, способных снижать вирулентную степень патогенного потенциала грибов Candida, что будет способствовать эффективной элиминации грибов со слизистой полости рта. Из-за высокой возможности появления резистентности грибов к антимикотикам важно выбирать средства, к которым не развивается устойчивость. Treatment of acute candidiasis of the oral mucosa requires a comprehensive approach, including action on Candida fungi (etiotropic therapy); relief of the inflammatory process of the mucosa (pathogenetic therapy); pain relief and relief of the patient's condition (symptomatic therapy). In this regard, the problem of finding new reliable and at the same time safe antifungal agents capable of reducing the virulent degree of the pathogenic potential of Candida fungi is important, which will facilitate the effective elimination of fungi from the oral mucosa. Due to the high possibility of fungal resistance to antimycotics, it is important to choose agents to which resistance does not develop.
Соединение структурной формулы I, 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол, описано в работах [Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Shevchenko O.G., Rubtsova S.A., Kuchin A.V. Synthesis and membrane protective activity of bis-sulfides derived from monoterpenoids and monosaccharides. Rus. J. Bioorg. Chem, 2017, 43, 302-310; Lodochnikova O.A., Islamov D.R., Gerasimova D.P., Zakharychev D.V., Saifina A.F., Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Rubtsova S.A., Pavelyev R.S., Rakhmatullin I.Z., Klochkov V.V., Ostolopovskaya O.V., Nikitina L.E., Rollin, P. Isobornanyl sulfoxides and isobornanyl sulfone: Physicochemical characteristics and the features of crystal structure. J. Mol. Struct., 2017, 1239, 130491]. Краткой сущностью известного источника является способы синтеза бис-сульфидов, имеющих в составе терпеновые и моносахаридные фрагменты, а также терпеновых субстратов - спиртов и хлоридов для их получения. Показано, что на мембранопротекторную и антиоксидантную активности при прочих равных условиях оказывает влияние число атомов серы в молекуле и наличие спейсера между ними, таким образом, возможно сделать логический вывод о том, что это повышает эффективность композиции при использовании по назначению.The compound of structural formula I, 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol, is described in the works [Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Shevchenko O.G., Rubtsova S.A., Kuchin A.V. Synthesis and membrane protective activity of bis-sulfides derived from monoterpenoids and monosaccharides. Rus. J. Bioorg. Chem, 2017, 43, 302-310; Lodochnikova O.A., Islamov D.R., Gerasimova D.P., Zakharychev D.V., Saifina A.F., Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Rubtsova S.A., Pavelyev R.S., Rakhmatullin I.Z., Klochkov V.V., Ostolopovskaya O.V., Nikitina L.E., Rollin, P. Isobornanyl sulfoxides and isobornanyl sulfone: Physicochemical characteristics and the features of crystal structure. J. Mol. Struct., 2017, 1239, 130491]. A brief summary of the known source is the methods for the synthesis of bis-sulfides containing terpene and monosaccharide fragments, as well as terpene substrates - alcohols and chlorides for their preparation. It has been shown that the membrane-protective and antioxidant activities, all other things being equal, are influenced by the number of sulfur atoms in the molecule and the presence of a spacer between them, thus, it is possible to draw a logical conclusion that this increases the effectiveness of the composition when used as intended.
Противогрибковые свойства соединения 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол исследованы и описаны в ряде работ [Nikitina L.E., Lisovskaya S.А., Startseva V.A. Pavelyev R.S., Gilfanov I.R., Fedyunina I.V., Ostolopovskaya O.V., Akhverdiev R.F. Development of Novel Effective Agents Against Candida albicans Biofilms. BioNanoSci., 2019, 9, 539-544; Nikitina L.E., Lisovskaya S.A., Gilfanov I.R., Pavelyev R.S., Ostolopovskaya O.V., Fedyunina I.V., Kiselev S.V., Azizova Z.R., Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Rubtsova S.A., Akhverdiev R.F., Gerasimov A.V., Sarbazyan E.A., Shipina O.T., Boichuk S.V., Izmailov A.G. Thioterpenoids of the Bornane Series with Potent Activity Against Opportunistic Micromycetes. BioNanoSci., 2023, 13, 26-35]. В работах представлены скриннинговые исследования in vitro активности данного соединения на некоторые виды грибов - C. Albicans, Fusarium solani, Aspergillus niger, и их факторы патогенности. Противовоспалительная, антиоксидантная, антиагрегационная и антикоагуляционная активности соединения 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола описаны в ряде работ [Nikitina L.E., Pavelyev R.S., Gilfanov I.R., Kiselev S.V., Azizova Z.R., Ksenofontov A.A., Bocharov P.S., Antina E.V., Klochkov V.V., Timerova A.F., Rakhmatullin I.Z., Ostolopovskaya O.V., Khelkhal M.A., Boichuk S.V., Galembikova A.R., Andriutsa N.S., Frolova L.L., Kutchin A.V., Kayumov A.R. Unraveling the Mechanism of Platelet Aggregation Suppression by Monoterpenoids. Bioengineering, 2022, 9(1), 24; Ksenofontov A.A., Bocharov P.S., Antina E.V., Shevchenko O.G., Samorodov A.V., Gilfanov I.R., Pavelyev R.S., Ostolopovskaya O.V., Startseva V.A., Fedyunina I.V., Azizova Z.R., Gaysin S.I., Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Rubtsova S.A., Khelkhal M.A., Nikitina L.E. Thioterpenoids as Potential Antithrombotic Drugs: Molecular Docking, Antiaggregant, Anticoagulant and Antioxidant Activities. Biomolecules, 2022, 12, 1599].The antifungal properties of the compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol have been studied and described in a number of studies [Nikitina LE, Lisovskaya S.A., Startseva VA Pavelyev RS, Gilfanov IR, Fedyunina IV, Ostolopovskaya OV, Akhverdiev RF Development of Novel Effective Agents Against Candida albicans Biofilms. BioNanoSci., 2019, 9, 539-544; Nikitina LE, Lisovskaya SA, Gilfanov IR, Pavelyev RS, Ostolopovskaya OV, Fedyunina IV, Kiselev SV, Azizova ZR, Pestova SV, Izmest'ev ES, Rubtsova SA, Akhverdiev RF, Gerasimov AV, Sarbazyan EA, Shipina OT, Boichuk SV, Izmailov AG Thioterpenoids of the Bornane Series with Potent Activity Against Opportunistic Micromycetes. BioNanoSci., 2023, 13, 26-35]. The papers present in vitro screening studies of the activity of this compound on some types of fungi - C. albicans, Fusarium solani, Aspergillus niger , and their pathogenicity factors. Anti-inflammatory, antioxidant, antiaggregant and anticoagulant activities of the compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol are described in a number of studies [Nikitina LE, Pavelyev RS, Gilfanov IR, Kiselev SV, Azizova ZR, Ksenofontov AA, Bocharov PS, Antina EV, Klochkov VV, Timerova AF, Rakhmatullin IZ, Ostolopovskaya OV, Khelkhal MA, Boichuk SV, Galembikova AR, Andriutsa NS, Frolova LL, Kutchin AV, Kayumov AR Unraveling the Mechanism of Platelet Aggregation Suppression by Monoterpenoids. Bioengineering, 2022, 9(1), 24; Ksenofontov AA, Bocharov PS, Antina EV, Shevchenko OG, Samorodov AV, Gilfanov IR, Pavelyev RS, Ostolopovskaya OV, Startseva VA, Fedyunina IV, Azizova ZR, Gaysin SI, Pestova SV, Izmest'ev ES, Rubtsova SA, Khelkhal MA, Nikitina LE Thioterpenoids as Potential Antithrombotic Drugs: Molecular Docking, Antiaggregant, Anticoagulant and Antioxidant Activities. Biomolecules, 2022, 12, 1599].
Таким образом, в описанных выше источниках показаны противогрибковая, противовоспалительная, антиоксидантная, антиагрегационная и антикоагуляционная активности in vitro 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола, что позволяет заявителю провести дополнительные исследования на предмет возможности создания лекарственной композиции, которую будет возможно использовать для лечения кандидоза полости рта.Thus, the above-described sources demonstrate antifungal, anti-inflammatory, antioxidant, antiaggregatory and anticoagulant activities in vitro of 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol, which allows the applicant to conduct additional studies on the possibility of creating a medicinal composition that can be used to treat oral candidiasis.
Соединение 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол выбрано по показателю специфической чувствительности дрожжевых грибов [S. A. Lisovskaya, A.A. Ksenofontov, P.S. Bocharov, E.V. Antina, .G.B. Guseva, M.B. Berezin, I.R. Gilfanov, R.S. Pavelyev, M.O. Sabantsev, O.V. Ostolopovskaya, E.Y. Trizna, S.V. Pestova, E.S. Izmest'ev, S.A. Rubtsova, A.G. Izmailov, A.A. Rizvanov, L.E. Nikitina, A.R. Kayumov. The Repression of the Candida albicans Growth and Pseudomycelium Formation by Thiomonoterpenoid. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents. 2024, 38 (5): 3685-3698]. В скрининговом исследовании in vitro показано, что в отношении ряда клинических штаммов дрожжевых грибов Candida albicans вещество проявляло противогрибковую активность в отношении клинических и референтных штаммов. Соединение активно ингибирует ряд патогенных факторов (образование псевдомицелия и адгезию клеток к биотическим и абиотическим поверхностям). Соединение легко проникает через клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану грибов [G.B. Guseva, Y. Khrushkova, A.A. Ksenofontov, E.V. Antina, I.R. Gilfanov, S.A. Lisovskaya, E.Y. Trizna, A.R. Kayumov, O.B. Babaeva, S.V. Boichuk, P.D. Dunaev, V. Klochkov, I.Z. Rakhmatullin, L.E. Nikitina, A Novel Terpene-Bodipy Conjugates Based Fluorescent Probes:Synthesis, Spectral Properties, Stability, Penetration Efficiency into Bacterial, Fungal and Mammalian Cells. Available at SSRN: https://ssrn.com/abstract=4903045]. The compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol was selected based on the specific sensitivity of yeast fungi [SA Lisovskaya, AA Ksenofontov, PS Bocharov, EV Antina, GB Guseva, MB Berezin, IR Gilfanov, RS Pavelyev, MO Sabantsev, OV Ostolopovskaya, EY Trizna, SV Pestova, ES Izmest'ev, SA Rubtsova, AG Izmailov, AA Rizvanov, LE Nikitina, AR Kayumov. The Repression of the Candida albicans Growth and Pseudomycelium Formation by Thiomonoterpenoid. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents . 2024, 38 (5): 3685-3698]. In vitro screening study showed that the substance exhibited antifungal activity against a number of clinical strains of yeast fungi Candida albicans against clinical and reference strains. The compound actively inhibits a number of pathogenic factors (pseudomycelium formation and cell adhesion to biotic and abiotic surfaces). The compound easily penetrates the cell wall and cytoplasmic membrane of fungi [GB Guseva, Y. Khrushkova, AA Ksenofontov, EV Antina, IR Gilfanov, SA Lisovskaya, EY Trizna, AR Kayumov, OB Babaeva, SV Boichuk, PD Dunaev, V. Klochkov, IZ Rakhmatullin, LE Nikitina, A Novel Terpene-Bodipy Conjugates Based Fluorescent Probes: Synthesis, Spectral Properties, Stability, Penetration Efficiency into Bacterial, Fungal and Mammalian Cells. Available at SSRN: https://ssrn.com/abstract=4903045].
Несмотря на то, что в ряде публикаций раскрываются противогрибковые свойства соединения 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол, все приведенные в указанных источниках примеры проведены в условии моделей in vitro на тест-штаммах и не описаны результатов действия соединения в условии живого макроорганизма. Despite the fact that a number of publications disclose the antifungal properties of the compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol, all examples given in the indicated sources were carried out in vitro models on test strains and did not describe the results of the compound's action in a living macroorganism.
Для решения описанных выше технических проблем необходима разработка технического решения, позволяющего оценить эффективность препарата in vivo, в условии живого макроорганизма, а именно - подобрать способ лечения данным соединением кандидоза полости рта. Поскольку успешное внедрение в клиническую практику новых методов лекарственного лечения предполагает наличие доказанной в соответствии с современными требованиями высокой степени эффективности и безопасности применения новых лекарств in vivo на лабораторных животных (модель острого кандидоза ротовой полости у крыс) по изучению эффективности соединения, согласно существующим рекомендациям [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.]. В настоящих Методических рекомендациях изложены стандартные методы изучения противогрибковой активности веществ в экспериментах in vivo, на животных, которые являются важным этапом, необходимым для проведения доклинических исследований лекарственных средств с целью регистрации или проведения клинических исследований лекарственного препарата в РФ, согласно Федеральному закону Российской Федерации об обращении лекарственных средств (ст. 4, 11) от 12 апреля 2010 года №61-ФЗ.To solve the technical problems described above, it is necessary to develop a technical solution that would allow evaluating the effectiveness of the drug in vivo , in a living macroorganism, namely, to select a method for treating oral candidiasis with this compound. Since the successful introduction of new methods of drug treatment into clinical practice requires a proven, in accordance with modern requirements, high degree of effectiveness and safety of using new drugs in vivo on laboratory animals (model of acute oral candidiasis in rats) to study the effectiveness of the compound, according to existing recommendations [Guidelines for conducting preclinical studies of drugs. Part one / edited by A.N. Mironov. - M .: Grif i K, 2012. - 944 p.]. These Methodological Recommendations set out standard methods for studying the antifungal activity of substances in in vivo experiments on animals, which are an important stage necessary for conducting preclinical studies of drugs for the purpose of registration or conducting clinical studies of a drug in the Russian Federation, in accordance with the Federal Law of the Russian Federation on the Circulation of Medicines (Articles 4, 11) dated April 12, 2010 No. 61-FZ.
На дату представления заявочных материалов заявителем выявлено, что для лечения кандидоза известны ряд препаратов растительного и синтетического происхождения, направленных на этиотропную или симптоматическую терапию. При этом также активно исследуются новые препараты, обеспечивающие комплексный подход к терапии этого заболевания. В клинической практике известны публикации по росту резистентности у грибов Candida albicans к широко применяемым для лечения кандидоза антимикотикам [Методические рекомендации «Диагностика и антимикробная терапия инфекций, вызванных полирезистентными штаммами микроорганизмов» (обновление 2022 г.), Иванова Л.В., Баранцевич Е.П., Шляхто Е.В Резистентность грибов-патогенов к антимикотикам (обзор) // Проблемы медицинской микологии. - 2011, Т.13, №1, С. 14-17]. As of the date of submission of the application materials, the applicant has revealed that a number of drugs of plant and synthetic origin aimed at etiotropic or symptomatic therapy are known for the treatment of candidiasis. At the same time, new drugs providing a comprehensive approach to the treatment of this disease are also actively being studied. In clinical practice, there are publications on the growth of resistance in Candida albicans fungi to antimycotics widely used to treat candidiasis [Methodological recommendations "Diagnostics and antimicrobial therapy of infections caused by multidrug-resistant strains of microorganisms" (updated 2022), Ivanova L.V., Barantsevich E.P., Shlyakhto E.V. Resistance of pathogenic fungi to antimycotics (review) // Problems of Medical Mycology. - 2011, Vol. 13, No. 1, pp. 14-17].
Из исследованного уровня техники заявителем выявлено изобретение «Способ лечения кандидоза слизистой оболочки полости рта» по патенту RU 2142267, сущностью является способ лечения кандидоза слизистой оболочки полости рта, включающий комплексное и местное лечение, при котором используют противомикотические средства, при комплексном - дифлюкан, при местном - нистатин, отличающийся тем, что дополнительно при местном лечении используют гель на основе тизоля с нистатином в соотношении тизоль - 10 мг, нистатин - 500000 ЕД, который используют в качестве аппликаций на очаг поражения 4-5 раз в сутки после еды курсом 7 дней, при необходимости повторяют.From the studied level of technology, the applicant has identified the invention "Method for treating candidiasis of the oral mucosa" according to patent RU 2142267, the essence of which is a method for treating candidiasis of the oral mucosa, including complex and local treatment, in which antifungal agents are used, with complex - diflucan, with local - nystatin, characterized in that in addition to local treatment, a gel based on tizol with nystatin is used in the ratio of tizol - 10 mg, nystatin - 500,000 U, which is used as applications to the lesion 4-5 times a day after meals for a course of 7 days, repeated if necessary.
Недостатком известного способа то, что используемые противогрибковые препараты обладают побочными эффектами, такими как токсическое воздействие на печень, формирование резистентности у штаммов C. albicans и т.д., что снижает его эффективность при использовании по назначению.The disadvantage of the known method is that the antifungal drugs used have side effects, such as toxic effects on the liver, the formation of resistance in C. albicans strains, etc., which reduces its effectiveness when used as directed.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Способ лечения кандидоза слизистой оболочки рта комплексным фитопрепаратом» по патенту RU 2470654, сущностью является способ для лечения кандидоза слизистой оболочки рта. Используют медицинское масло, получаемое извлечением оливковым маслом (в соотношении масло-сырье 1:10) растительного сбора из корневищ с корнями левзеи или травы смолевки татарской, цветков календулы, травы чистотела, взятых в равных массовых частях. Масло наносят на слизистую оболочку рта в виде аппликаций три раза в день в течение 14 дней.From the studied level of technology, the invention "Method for treating candidiasis of the oral mucosa with a complex herbal preparation" was identified under patent RU 2470654, the essence of which is a method for treating candidiasis of the oral mucosa. They use medical oil obtained by extracting with olive oil (in an oil-raw material ratio of 1:10) a herbal collection from the rhizomes with roots of leuzea or Tatar campion grass, calendula flowers, celandine grass, taken in equal mass parts. The oil is applied to the oral mucosa in the form of applications three times a day for 14 days.
Недостатком данного способа является рекомендация пациентам воздержаться от приема пищи и воды в течение одного часа после удаления аппликатора, что препятствует его широкому применению по назначению. The disadvantage of this method is the recommendation that patients refrain from eating and drinking for one hour after removing the applicator, which prevents its widespread use for its intended purpose.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Способ лечения кандидоза полости рта препаратами Лизобакт и Циклоферон при использовании съемных ортопедических конструкций» по патенту RU 2642053, сущностью является способ лечения кандидоза полости рта у пациентов со съемными ортопедическими конструкциями, включающий коррекцию базиса протеза, а также обработку воспаленных участков мягких тканей протезного ложа 3%-ным раствором перекиси водорода с последующим нанесением на обработанные участки 10%-ной метилурациловой эмульсии, отличающийся тем, что дополнительно назначают лизобакт местно по 1 таблетке 3 раза в сутки, медленно рассасывая препарат, в момент использования препарата ортопедические конструкции снимают; циклоферон принимают внутрь по 1 таблетке 1 раз в сутки за 30 мин до еды; длительность курса терапии две недели.From the studied level of technology, the invention "Method for treating oral candidiasis with the preparations Lizobact and Cycloferon using removable orthopedic structures" was identified under patent RU 2642053, the essence of which is a method for treating oral candidiasis in patients with removable orthopedic structures, including correction of the prosthesis base, as well as treatment of inflamed areas of the soft tissues of the prosthetic bed with a 3% hydrogen peroxide solution followed by application of 10% methyluracil emulsion to the treated areas, characterized in that Lizobact is additionally prescribed locally, 1 tablet 3 times a day, slowly dissolving the drug, at the time of using the drug, the orthopedic structures are removed; Cycloferon is taken orally, 1 tablet 1 time per day 30 minutes before meals; the duration of the course of therapy is two weeks.
Недостатком данного способа является отсутствие достоверной информации для объективной оценки эффективности лечения грибковых заболеваний в целом и описания способа лечения кандидоза в частности, что не позволяет сделать какие либо выводы о его эффективности при использовании по назначению.The disadvantage of this method is the lack of reliable information for an objective assessment of the effectiveness of the treatment of fungal diseases in general and a description of the method of treating candidiasis in particular, which does not allow any conclusions to be made about its effectiveness when used as intended.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Фармацевтическое средство растительного происхождения в виде спрея» по патенту RU 2801872, сущностью является препарат в форме спрея, обладающий противомикробной активностью в отношении бактерий Staphylococcus aureus, Escherichia coli и грибов Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Basillus subtilis и Candida albicans, полученный из средства по п. 1, содержащий в 100 г препарата: спиртовой экстракт жмыха плодов малины - 5-15 г, полиэтиленгликоль - 1500 30-40 г, поливинилпирролидон - 2 г, 1,10-декамителен-бис (N,N-диметилметоксикарбонилметил) аммония дихлорид - 0,01-0,02 г, вода очищенная - 42-62 г.From the studied level of technology, the invention "Pharmaceutical agent of plant origin in the form of a spray" was identified according to patent RU 2801872, the essence of which is a preparation in the form of a spray, possessing antimicrobial activity against the bacteria Staphylococcus aureus , Escherichia coli and the fungi Proteus vulgaris , Pseudomonas aeruginosa , Basillus subtilis and Candida albicans , obtained from the agent according to claim 1, containing in 100 g of the preparation: alcoholic extract of raspberry fruit cake - 5-15 g, polyethylene glycol - 1500 30-40 g, polyvinylpyrrolidone - 2 g, 1,10-decamitelene-bis (N,N-dimethylmethoxycarbonylmethyl) ammonium dichloride - 0.01-0.02 g, purified water - 42-62 g.
Недостатком известного способа является низкая активность в отношении дрожжевых грибов рода Candida, поскольку в оценке активности препарата был применен только диско-диффузионный метод, являющийся недостаточным методом при оценке эффективности препарата в макроорганизме вследствие того, что даёт исключительно качественную оценку (есть эффект или нет), не учитывая штаммовые особенности грибов.The disadvantage of the known method is its low activity against yeast fungi of the genus Candida , since only the disk diffusion method was used to evaluate the activity of the drug, which is an insufficient method for evaluating the effectiveness of the drug in a macroorganism due to the fact that it provides an exclusively qualitative assessment (whether there is an effect or not), without taking into account the strain characteristics of the fungi.
Технической проблемой, решаемой настоящим изобретением, и его техническим результатом является расширение арсенала средств указанного назначения путем разработки композиции на основе 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола для лечения кандидоза полости рта и способа лечения кандидоза с использованием указанной композиции. The technical problem solved by the present invention and its technical result is the expansion of the arsenal of means for the specified purpose by developing a composition based on 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol for the treatment of oral candidiasis and a method for treating candidiasis using the specified composition.
Сущностью заявленного технического решения является композиция для лечения кандидоза полости рта, содержащая: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - 1 масс.%, эмульгатор твин-80 - 1,22 масс.%, дистиллированная вода - до 100 масс.%. Способ лечения кандидоза полости рта композицией по п.1, заключающийся в том, что берут 0,5 мл композиции и полностью смачивают ей слизистую полости рта 2 раза в сутки. The essence of the claimed technical solution is a composition for treating oral candidiasis, containing: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - 1 wt.%, emulsifier tween-80 - 1.22 wt.%, distilled water - up to 100 wt.%. A method for treating oral candidiasis with a composition according to claim 1, consisting in taking 0.5 ml of the composition and completely moistening the oral mucosa with it 2 times a day.
Заявленное техническое решение иллюстрируется Фиг. 1 - Фиг. 4.The claimed technical solution is illustrated in Fig. 1 - Fig. 4.
На Фиг. 1 представлены фотографии, показывающие изменение интенсивности воспалительной реакции в ходе эксперимента в очагах кандидоза ротовой полости, вызванного грибами Candida albicans от начала лечения до полного излечения: 1а - через 2 суток после заражения, б - через 4 суток после заражения, 1в - через 7 суток после заражения, 1г - через 12 суток после заражения. Fig. 1 shows photographs showing the change in the intensity of the inflammatory reaction during the experiment in foci of oral candidiasis caused by Candida albicans fungi from the beginning of treatment until complete recovery: 1a - 2 days after infection, b - 4 days after infection, 1c - 7 days after infection, 1d - 12 days after infection.
На Фиг. 2 представлен график оценки эффективности заражения и скорости микробной деконтаминации C. albicans при противогрибковой терапии путем подсчета КОЕ из мазков (Log10, КОЕ/мл), взятых из полости рта крыс, где по оси Х указаны дни эксперимента - до заражения и лечение, по оси Y - КОЕ из мазков (Log10, КОЕ/мл). Зеленые линии с квадратами С-1 обозначают заявленную композицию, синие с треугольником - препарат сравнения Кандид, красные с кружками - контрольный опыт без лечения. Fig. 2 shows a graph of the evaluation of the infection efficiency and the rate of microbial decontamination of C. albicans during antifungal therapy by counting CFU from smears (Log 10 , CFU/ml) taken from the oral cavity of rats, where the X-axis indicates the days of the experiment - before infection and treatment, and the Y-axis indicates CFU from smears (Log 10 , CFU/ml). Green lines with squares C-1 indicate the declared composition, blue lines with a triangle indicate the comparison drug Candid, red lines with circles indicate the control experiment without treatment.
На Фиг. 3 представлены результаты культурального исследования - образцы смывов со слизистой ротовой полости у крыс в динамике развития кандидоза ротовой полости, вызванного грибами Candida albicans, до и после заражения - с лечением с использованием заявленной композиции и в отсутствии лечения в течение всего эксперимента: 3а - до заражения, 3б/1 и 3б/2 - на 12 сутки после заражения, 3в/1 - на 4 сутки после начала лечения с использованием заявленной композиции, 3в/2 – на 4 сутки без лечения, 3г/1 - на 6 сутки после начала лечения с лечением с использованием заявленной композиции, 3в/2 - на 6 сутки без лечения. In Fig. 3The results of a cultural study are presented - samples of swabs from the oral mucosa of rats in the dynamics of the development of oral candidiasis caused by fungiCandida albicans, before and after infection - with treatment using the claimed composition and in the absence of treatment throughout the experiment: 3a - before infection, 3b/1 and 3b/2 - on the 12th day after infection, 3v/1 - on the 4th day after the start of treatment using the claimed composition, 3v/2 - on the 4th day without treatment, 3g/1 - on the 6th day after the start of treatment with treatment using the claimed composition, 3v/2 - on the 6th day without treatment.
На Фиг. 4 приведены гистологические срезы языка крыс: 4а - до заражения, 4б - в момент заражения, 4в - на 4 сутки без лечения, 4г - на 4 сутки после лечения с использованием заявленной композиции. Fig. 4 shows histological sections of the tongue of rats: 4a - before infection, 4b - at the time of infection, 4c - on the 4th day without treatment, 4d - on the 4th day after treatment using the claimed composition.
Далее заявителем приведено описание заявленного технического решения.The applicant then provides a description of the claimed technical solution.
В заявленном техническом решении использовали следующие реагенты.The following reagents were used in the declared technical solution.
2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - получение соединения описано в работах Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Shevchenko O.G., Rubtsova S.A., Kuchin A.V. Synthesis and membrane protective activity of bis-sulfides derived from monoterpenoids and monosaccharides. Rus. J. Bioorg. Chem, 2017, 43, 302-310; Lodochnikova O.A., Islamov D.R., Gerasimova D.P., Zakharychev D.V., Saifina A.F., Pestova S.V., Izmest'ev E.S., Rubtsova S.A., Pavelyev R.S., Rakhmatullin I.Z., Klochkov V.V., Ostolopovskaya O.V., Nikitina L.E., Rollin, P. Isobornanyl sulfoxides and isobornanyl sulfone: Physicochemical characteristics and the features of crystal structure. J. Mol. Struct., 2017, 1239, 130491. 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - the preparation of the compound is described in the works of Pestova SV, Izmest'ev ES, Shevchenko OG, Rubtsova SA, Kuchin AV Synthesis and membrane protective activity of bis-sulfides derived from monoterpenoids and monosaccharides. Rus. J. Bioorg. Chem, 2017, 43, 302-310; Lodochnikova OA, Islamov DR, Gerasimova DP, Zakharychev DV, Saifina AF, Pestova SV, Izmest'ev ES, Rubtsova SA, Pavelyev RS, Rakhmatullin IZ, Klochkov VV, Ostolopovskaya OV, Nikitina LE, Rollin, P. Isobornanyl sulfoxides and isobornanyl sulfone: Physicochemical characteristics and the features of crystal structure. J. Mol. Struct., 2017, 1239, 130491.
Эмульгатор твин-80 - товарный продукт, страна-производитель: Индия. INCI: Polysorbat (Tween) - 80). Применяется в косметической, пищевой и фармацевтической промышленности и предназначен переводить гидрофобные органические соединения (масла) в водорастворимые, с сохранением свойств. Emulsifier tween-80 is a commercial product, country of origin: India. INCI : Polysorbate (Tween) - 80). It is used in the cosmetic, food and pharmaceutical industries and is designed to convert hydrophobic organic compounds (oils) into water-soluble ones, while maintaining their properties.
Кандид (клотримазол 1%) - лекарственный препарат, товарный продукт. Candid (clotrimazole 1%) is a medicinal product, a commercial product.
Вода дистиллированная - товарный продукт. Distilled water is a commercial product.
Заявленный технический результат достигается разработкой заявленного способа получения композиции на основе 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола для лечения кандидоза полости рта, композиции, полученной указанным способом, и способа лечения кандидоза.The claimed technical result is achieved by developing the claimed method for producing a composition based on 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol for treating oral candidiasis, a composition obtained by the said method, and a method for treating candidiasis.
Заявленный способ получения заявленной композиции на основе 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола для лечения кандидоза полости рта заключается в следующем. The claimed method for obtaining the claimed composition based on 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol for the treatment of oral candidiasis is as follows.
Берут 1 масс.% соединения 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол, добавляют 1,22 масс.% эмульгатора твин-80, добавляют дистиллированную воду до 100 масс.%, перемешивают при комнатной температуре до однородной массы.Take 1 wt.% of the compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol, add 1.22 wt.% of the emulsifier Tween-80, add distilled water to 100 wt.%, mix at room temperature until smooth.
Получают заявленную композицию, содержащую: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - 1 масс.%, эмульгатор твин-80 - 1,22 масс.%, дистиллированная вода - до 100 масс.%. The claimed composition is obtained, containing: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - 1 wt.%, emulsifier tween-80 - 1.22 wt.%, distilled water - up to 100 wt.%.
Указанное количественное содержание компонентов заявленной композиции является оптимальным и выбрано на основании многочисленных экспериментов.The specified quantitative content of the components of the claimed composition is optimal and was selected on the basis of numerous experiments.
Заявленный способ лечения кандидоза полости рта заключается в следующем. The stated method of treating oral candidiasis is as follows.
В ротовой полости зараженного животного проводят инстилляции заявленной композицией, содержащей 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - 1 масс.%, эмульгатор твин-80 - 1,22 масс.%, дистиллированная вода - до 100 масс.%, для чего берут 0,5 мл композиции, полностью смачивают ей слизистую полости рта 2 раза в сутки под контролем микрофлоры от начала лечения до клинического выздоровления и лабораторной санации. Instillations of the claimed composition containing 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - 1 wt.%, emulsifier tween-80 - 1.22 wt.%, distilled water - up to 100 wt.% are carried out in the oral cavity of the infected animal, for which 0.5 ml of the composition is taken, the oral mucosa is completely moistened with it 2 times a day under the control of microflora from the beginning of treatment until clinical recovery and laboratory sanitation.
Далее заявителем приведен пример осуществления заявленного технического решения. The applicant further provides an example of the implementation of the claimed technical solution.
ПримерExample . Осуществление способа лечения кандидоза полости рта с помощью заявленной композиции. Implementation of a method for treating oral candidiasis using the claimed composition
1. Получение заявленной композиции заявленным способом1. Obtaining the claimed composition by the claimed method
Берут 1 масс.%, например, 1 г соединения 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол, добавляют 1,22 масс.%, например, 1,22 г эмульгатора твин-80, добавляют дистиллированную воду до 100 масс.%, например, 97,78 г, перемешивают при комнатной температуре до однородной массы. Take 1 wt.%, for example, 1 g of the compound 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol, add 1.22 wt.%, for example, 1.22 g of the emulsifier Tween-80, add distilled water to 100 wt.%, for example, 97.78 g, stir at room temperature until smooth.
Получают заявленную композицию, содержащую: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - 1 масс.%, эмульгатор твин-80 - 1,22 масс.%, дистиллированная вода - до 100 масс.%. The claimed composition is obtained, containing: 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - 1 wt.%, emulsifier tween-80 - 1.22 wt.%, distilled water - up to 100 wt.%.
2. Лечение кандидоза полости рта с помощью заявленной композиции2. Treatment of oral candidiasis using the claimed composition
В качестве экспериментальных животных использовали 51 крысу линии Вистар, которых в произвольном порядке разделили на три группы по 17 особей в каждой:The experimental animals used were 51 Wistar rats, which were randomly divided into three groups of 17 individuals each:
1 группа - экспериментальная, лечили заявленным способом заявленной композицией.Group 1 - experimental, treated with the stated method and the stated composition.
2 группа - сравнения, лечили известным лекарственным препаратом Кандид.Group 2 - comparison, treated with the well-known drug Candid.
3 группа - контрольная, без лечения, смазывали дистиллированной водой. Group 3 - control, no treatment, lubricated with distilled water.
Для осуществления заявленного способа можно брать животных, зараженных естественным путем, или животных, зараженных искусственно in vivo.To implement the claimed method, one can take animals infected naturally or animals infected artificially in vivo .
Искусственное воспроизведение острого кандидоза ротовой полости in vivo (заражение) проводили следующим образом: в течение первых шести дней эксперимента крысам всех трех групп вводили per os (перорально) автоматическим дозатором, например, 1 мл суспензии грибов Candida albicans (3×105-3×107 бластоспор). Artificial reproduction of acute oral candidiasis in vivo (infection) was carried out as follows: during the first six days of the experiment, rats of all three groups were administered per os (orally) using an automatic dispenser, for example, 1 ml of a suspension of Candida albicans fungi (3×10 5 -3×10 7 blastospores).
Для определения эффективности заражения крыс суспензией C. albicans проводили ежедневную оценку степени проявления клинических признаков острого кандидоза: нарушение пищевого поведения, появление белых налетов и эрозий на языке и слизистой оболочке полости рта. Данные представлены на фото на Фиг. 1:To determine the effectiveness of infecting rats with a C. albicans suspension, daily assessments were made of the degree of manifestation of clinical signs of acute candidiasis: disturbances in eating behavior, the appearance of white plaques and erosions on the tongue and oral mucosa. The data are presented in the photo in Fig. 1:
- через 2 суток после заражения (1а) наблюдается покраснение и воспаление слизистой, - 2 days after infection (1a) redness and inflammation of the mucous membrane is observed,
- через 4 суток после заражения (1б) наблюдается появление эрозий на языке, - 4 days after infection (1b) the appearance of erosions on the tongue is observed,
- через 7 суток после заражения (1в) наблюдается появление эрозий на языке,- 7 days after infection (1c) the appearance of erosions on the tongue is observed,
- через 12 суток после заражения (1г) наблюдается появление белого налета на слизистой оболочке корня языка, что указывает на присутствие грибов кандида. -12 days after infection (1g) observed the appearance of a white coating on the mucous membrane of the root of the tongue, which indicates the presence of Candida fungi.
Для определения эффективности заражения крыс суспензией C. albicans проводили определение изменение интенсивности воспалительной реакции в баллах (б): 0 б - отсутствие, 1 б - слабая, 2 б - умеренно выраженная, 3 б - выраженная, 4 б - резко-выраженная. Данные представлены в Таблице 1. To determine the effectiveness of infecting rats with a C. albicans suspension, the change in the intensity of the inflammatory reaction was determined in points (b): 0 b - absent, 1 b - weak, 2 b - moderately expressed, 3 b - expressed, 4 b - sharply expressed. The data are presented in Table 1.
Таблица 1. Изменение интенсивности воспалительной реакции по показателям полной балльной шкалы (M+m) в очагах кандидоза ротовой полости, вызванного грибами Candida albicans, при искусственном воспроизведении острого кандидоза ротовой полости in vivo (заражение)Table 1. Changes in the intensity of the inflammatory reaction according to the full score scale (M + m) in foci of oral candidiasis caused by Candida albicans fungi during artificial reproduction of acute oral candidiasis in vivo (infection)
В результате заражения можно было наблюдать максимальное проявление признаков острого кандидоза на 12 сутки заражения.As a result of infection, the maximum manifestation of signs of acute candidiasis could be observed on the 12th day of infection.
Для оценки обсемененности ротовой полости в ходе всего эксперимента проводили отбор материала из инфицированных особей. Для этого ватным стерильным тампоном осуществляли забор слизи и элементов эпителия с полости рта, после чего для количественной оценки жизнеспособных микроорганизмов подсчитывали количество КОЕ методом серийных разведений с последующим высевом на плотную агаризованную среду. To assess the contamination of the oral cavity, material was collected from infected individuals throughout the experiment. For this purpose, mucus and epithelial elements were collected from the oral cavity using a sterile cotton swab, after which, to quantify viable microorganisms, the number of CFU was counted using serial dilutions followed by seeding on a dense agar medium.
Динамика культивирования на питательной среде отражена на Фиг. 2 (левая часть, заражение) и Фиг. 3а, 3б/1, 3б/2 (до заражения, заражение).The dynamics of cultivation on a nutrient medium is shown in Fig. 2 (left part, infection) and Fig. 3a, 3b/1, 3b/2 (before infection, infection).
На Фиг. 2 (левая часть, заражение) представлен график оценки эффективности заражения путем подсчета КОЕ из мазков (Log10, КОЕ/мл), взятых из полости рта крыс. Полученные результаты подтвердили эффективность заражения, и количество КОЕ на 12 сутки заражения составило 107 КОЕ/мл, в то время как нормой является 102 КОЕ/мл (Наличие в микробиологическом посеве грибов рода Candida в количестве 101-2 КОЕ/мл не является патогенным, рассматривается как сапрофитное носительство и может наблюдаться даже у полностью здоровых животных [Сахарук Н.А. Микробная флора полости рта в норме и патологии. Морфология грибов рода Candida // Вестник ВГМУ. 2008. №2. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mikrobnaya-flora-polosti-rta-v-norme-i-patologii-morfologiya-gribov-roda-candida (дата обращения: 16.09.2024)]). Fig. 2 (left part, infection) shows a graph of the evaluation of the infection efficiency by counting CFU from swabs (Log 10 , CFU/ml) taken from the oral cavity of rats. The obtained results confirmed the effectiveness of the infection, and the number of CFU on the 12th day of infection was 10 7 CFU/ml, while the norm is 10 2 CFU/ml (The presence of Candida fungi in a microbiological culture in an amount of 10 1-2 CFU/ml is not pathogenic, it is considered as a saprophytic carriage and can be observed even in completely healthy animals [Sakharuk N.A. Microbial flora of the oral cavity in norm and pathology. Morphology of Candida fungi // Bulletin of VSMU. 2008. No. 2. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mikrobnaya-flora-polosti-rta-v-norme-i-patologii-morfologiya-gribov-roda-candida (date of access: 16.09.2024)]).
На Фиг. 3 представлены фото образцов смывов со слизистой ротовой полости у крыс в динамике развития кандидоза ротовой полости, вызванного грибами Candida albicans: 3а - до заражения, 3б/1 и 3б/2 - на 12 сутки после заражения,Fig. 3 shows photographs of samples of swabs from the oral mucosa of rats in the dynamics of the development of oral candidiasis caused by Candida albicans fungi: 3a - before infection, 3b/1 and 3b/2 - on the 12th day after infection,
Показано, что до заражения (3а) грибами Candida albicans, микрофлора слизистой была представлена бактериальной флорой, рост грибов в микробиологическом посеве отсутствовал.It was shown that before infection (3a) with Candida albicans fungi, the microflora of the mucous membrane was represented by bacterial flora; there was no fungal growth in the microbiological culture.
На 12 сутки после заражения (3б/1 и 3б/2) перед началом лечения наблюдался сплошной, экспоненциальный рост колоний грибов Candida albicans: выпуклых, блестящих, сметанообразных, белого цвета.On the 12th day after infection (3b/1 and 3b/2), before the start of treatment, a continuous, exponential growth of colonies of Candida albicans fungi was observed: convex, shiny, creamy, white in color.
Протекание воспалительного процесса контролировали с помощью гистологического метода, для чего проводили анализ гистологических срезов ткани слизистой полости рта на наличие или отсутствия воспалительных маркеров. Для этого путем случайной выборки отбирали по 2 особи из каждой группы для проведения биопсии. Крыс подвергали эвтаназии этиловым эфиром с применением ингаляционного метода. The progress of the inflammatory process was monitored using the histological method, for which histological sections of the oral mucosa tissue were analyzed for the presence or absence of inflammatory markers. For this purpose, 2 individuals from each group were randomly selected for biopsy. The rats were euthanized with ethyl ether using the inhalation method.
Гистологические срезы представлены на Фиг. 4а, 4б (до заражения, заражение). На 12 сутки заражения наблюдалось повышение количества лимфоцитов в связи с повышенным уровнем воспаления. Histological sections are shown in Fig. 4a, 4b (before infection, infection). On the 12th day of infection, an increase in the number of lymphocytes was observed due to an increased level of inflammation.
Далее производили лечение острого кандидоза ротовой полости по заявленному способу:Then, acute oral candidiasis was treated according to the stated method:
1 группа - экспериментальная: в ротовой полости зараженного животного проводили инстилляции заявленной композицией, содержащей 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанол - 1 масс.%, эмульгатор твин-80 - 1,22 масс.%, дистиллированная вода - до 100 масс.%, для чего берут 0,5 мл композиции, полностью смачивают ей слизистую полости рта 2 раза в сутки под контролем микрофлоры от начала лечения до клинического выздоровления и лабораторной санации. 1 group - experimental : instillations of the claimed composition containing 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol - 1 wt.%, emulsifier tween-80 - 1.22 wt.%, distilled water - up to 100 wt.% were carried out in the oral cavity of the infected animal, for which 0.5 ml of the composition is taken, the oral mucosa is completely moistened with it 2 times a day under the control of microflora from the beginning of treatment until clinical recovery and laboratory sanitation.
2 группа - сравнения: в ротовой полости зараженного животного проводили инстилляции 1% раствором лекарственного препарата Кандид для местного применения, для чего берут 0,5 мл препарата Кандид, полностью смачивают им слизистую полости рта 2 раза в сутки под контролем микрофлоры от начала лечения до клинического выздоровления и лабораторной санации. Group 2 - comparison : instillations of a 1% solution of the medicinal product Candid for local use were performed in the oral cavity of the infected animal, for which 0.5 ml of the drug Candid was taken, the oral mucosa was completely moistened with it 2 times a day under the control of microflora from the beginning of treatment until clinical recovery and laboratory sanitation.
3 группа - контрольная: в ротовой полости зараженного животного проводили инстилляции стерильной дистиллированной водой, полностью смачивая ей слизистую полости рта 2 раза в сутки под контролем микрофлоры от начала лечения до клинического выздоровления и лабораторной санации. Group 3 - control : instillations of sterile distilled water were performed in the oral cavity of the infected animal, completely wetting the oral mucosa with it 2 times a day under the control of microflora from the beginning of treatment until clinical recovery and laboratory sanitation.
Для оценки обсемененности ротовой полости в ходе всего эксперимента проводили отбор материала из инфицированных особей. Для этого ватным стерильным тампоном осуществляли забор слизи и элементов эпителия с полости рта, после чего для количественной оценки жизнеспособных микроорганизмов подсчитывали количество КОЕ методом серийных разведений с последующим высевом на плотную агаризованную среду.To assess the contamination of the oral cavity, material was collected from infected individuals throughout the experiment. For this purpose, mucus and epithelial elements were collected from the oral cavity using a sterile cotton swab, after which, to quantify viable microorganisms, the number of CFU was counted using serial dilutions followed by seeding on a dense agar medium.
Для определения эффективности лечения крыс проводили определение изменение интенсивности воспалительной реакции в баллах (М): 0 б - отсутствие, 1 б - слабая, 2 б - умеренно выраженная, 3 б - выраженная, 4 б - резко-выраженная. Данные представлены в Таблице 2. To determine the effectiveness of the treatment of rats, the change in the intensity of the inflammatory reaction was determined in points (M): 0 points - absence, 1 points - weak, 2 points - moderately expressed, 3 points - expressed, 4 points - sharply expressed. The data are presented in Table 2.
Таблица 2. Изменение интенсивности воспалительной реакции по показателям полной балльной шкалы (M+m) в очагах кандидоза ротовой полости, вызванного грибами Candida albicans, при леченииTable 2. Changes in the intensity of the inflammatory reaction according to the full score scale (M + m) in the foci of oral candidiasis caused by Candida albicans fungi during treatment
Из данных, приведенных в Таблице 2, видно, что обработка заявленной композицией привела к значительному снижению КОЕ на 6 сутки, сопоставимой с группой проходящей лечение препаратом Кандид. В группе 3 (без лечения) клинические проявления кандидоза оставались выражены к 6 суткам эксперимента. The data presented in Table 2 show that treatment with the claimed composition resulted in a significant reduction in CFU on day 6, comparable to the group undergoing treatment with Candid. In group 3 (without treatment), clinical manifestations of candidiasis remained pronounced by day 6 of the experiment.
Для оценки обсемененности ротовой полости в ходе всего эксперимента проводили отбор материала из инфицированных особей. Для этого ватным стерильным тампоном осуществляли забор слизи и элементов эпителия с полости рта, после чего для количественной оценки жизнеспособных микроорганизмов подсчитывали количество КОЕ методом серийных разведений с последующим высевом на плотную агаризованную среду. To assess the contamination of the oral cavity, material was collected from infected individuals throughout the experiment. For this purpose, mucus and epithelial elements were collected from the oral cavity using a sterile cotton swab, after which, to quantify viable microorganisms, the number of CFU was counted using serial dilutions followed by seeding on a dense agar medium.
Динамика культивирования на питательной среде отражена на Фиг. 2 (правая часть, лечение) и Фиг. 3в/1, 3в/2, 3г/1, 3г/2 (лечение на 4 и 6 сутки, без лечения на 4 и 6 сутки).The dynamics of cultivation on a nutrient medium is shown in Fig. 2 (right part, treatment) and Fig. 3b/1, 3b/2, 3g/1, 3g/2 (treatment on days 4 and 6, no treatment on days 4 and 6).
На Фиг. 2 (правая часть, лечение) представлен график оценки эффективности лечения путем подсчета КОЕ из мазков (Log10, КОЕ/мл), взятых из полости рта крыс. Полученные результаты подтвердили эффективность лечения, и количество КОЕ на 6 сутки лечения заявленной композицией составило 102 КОЕ/мл по сравнению с 107 КОЕ/мл до начала лечения. В группе сравнения при лечении Кандид на 6 сутки количество КОЕ грибов C. albicans составило 103 КОЕ/мл. В контрольной группе без лечения на 6 сутки количество КОЕ грибов C. albicans составило 105 КОЕ/мл. Fig. 2 (right side, treatment) shows a graph of the treatment efficiency evaluation by counting CFU from smears (Log 10 , CFU/ml) taken from the oral cavity of rats. The obtained results confirmed the efficiency of the treatment, and the CFU count on the 6th day of treatment with the claimed composition was 10 2 CFU/ml compared to 10 7 CFU/ml before the start of the treatment. In the comparison group, during the treatment of Candida, the CFU count of C. albicans fungi on the 6th day was 10 3 CFU/ml. In the control group without treatment, the CFU count of C. albicans fungi on the 6th day was 10 5 CFU/ml.
На Фиг. 3 представлены фото образцов смывов со слизистой ротовой полости у крыс в динамике лечения: 3в/1 - на 4 сутки после начала лечения с использованием заявленной композиции, 3в/2 - на 4 сутки без лечения, 3г/1 - на 6 сутки после начала лечения с использованием заявленной композиции, 3в/2 - на 6 сутки без лечения.Fig. 3 shows photographs of samples of swabs from the oral mucosa of rats in the dynamics of treatment: 3v/1 - on the 4th day after the start of treatment using the claimed composition, 3v/2 - on the 4th day without treatment, 3g/1 - on the 6th day after the start of treatment using the claimed composition, 3v/2 - on the 6th day without treatment.
На Фиг. 3 видно, что:In Fig. 3 it can be seen that:
- на 4 сутки после лечения заявленной композицией (Фиг. 3в/1) наблюдалась резкая убыль числа колоний гриба C. albicans по сравнению с контрольной группой без лечения (Фиг. 3в/2),- on the 4th day after treatment with the claimed composition (Fig. 3b/1), a sharp decrease in the number of colonies of the C. albicans fungus was observed compared to the control group without treatment (Fig. 3b/2),
- на 6 сутки после лечения заявленной композицией (Фиг. 3г/1) колония гриба C. albicans практически исчезла, в то время как в контрольной группой без лечения наблюдаются присутствие гриба C. albicans (Фиг. 3г/2).- on the 6th day after treatment with the claimed composition (Fig. 3g/1), the colony of the C. albicans fungus practically disappeared, while in the control group without treatment, the presence of the C. albicans fungus was observed (Fig. 3g/2).
Протекание воспалительного процесса контролировали с помощью гистологического метода, для чего проводили анализ гистологических срезов ткани слизистой полости рта на наличие или отсутствия воспалительных маркеров. Для этого путем случайной выборки отбирали по 2 особи из каждой группы для проведения биопсии. Крыс подвергали эвтаназии этиловым эфиром с применением ингаляционного метода. The progress of the inflammatory process was monitored using the histological method, for which histological sections of the oral mucosa tissue were analyzed for the presence or absence of inflammatory markers. For this purpose, 2 individuals from each group were randomly selected for biopsy. The rats were euthanized with ethyl ether using the inhalation method.
Гистологические срезы представлены на Фиг. 4в (лечение Кандидом на 4 сутки), 4г (лечение заявленной композицией на 4 сутки). В результате на 4 сутки при лечении препаратом Кандид наблюдалось уменьшение воспаления более чем в два раза. При лечении соединением I на 4 сутки воспаление снижалось в 1,5 раза, однако следует отметить выраженное формирование слоя слизистой оболочки языка.Histological sections are shown in Fig. 4c (treatment with Candid on day 4), 4d (treatment with the claimed composition on day 4). As a result, on day 4, when treating with Candid, a more than twofold decrease in inflammation was observed. When treating with compound I, on day 4, inflammation decreased by 1.5 times, however, a pronounced formation of a layer of the mucous membrane of the tongue should be noted.
Таким образом, из описанного выше можно сделать вывод, что заявителем решена выявленная техническая проблема и достигнут заявленный технический результат - расширен арсенал средств указанного назначения путем разработки способа получения композиции на основе 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил)сульфанилэтанола для лечения кандидоза полости рта, композиции, полученной указанным способом, и способа лечения кандидоза с использованием указанной композиции.Thus, from the above, it can be concluded that the applicant has solved the identified technical problem and achieved the stated technical result - expanded the arsenal of means for the specified purpose by developing a method for producing a composition based on 2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulfanylethanol for treating oral candidiasis, a composition obtained by the specified method, and a method for treating candidiasis using the specified composition.
При этом сопоставление полученных результатов в лечении животных заявленной композицией, содержащей соединение I (2-((1S,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил))сульфанилэтанол и препаратом сравнения Кандид, широко применяемым в клинической практике для лечения кандидоза, показало сопоставимые результаты, что указывает на промышленную применимость заявленного способа в лечении кандидоза ротовой полости животных и человека.In this case, a comparison of the results obtained in the treatment of animals with the claimed composition containing the compoundI (2-((1S,2S,4S)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl))sulfanylethanol and the comparison drug Candid, widely used in clinical practice for the treatment of candidiasis, showed comparable results, which indicates the industrial applicability of the claimed method in the treatment of oral candidiasis in animals and humans.
Изобретение направлено на расширение арсенала средств указанного назначения, что актуально ввиду отсутствия широкого спектра лицензированных коммерческих противогрибковых препаратов природного происхождения с низкой токсичностью, достоверно эффективное и безопасное лечение кандидоза ротовой полости. The invention is aimed at expanding the arsenal of means for the specified purpose, which is relevant due to the lack of a wide range of licensed commercial antifungal drugs of natural origin with low toxicity, reliably effective and safe treatment of oral candidiasis.
Claims (2)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2841065C1 true RU2841065C1 (en) | 2025-06-02 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2087888A (en) * | 1980-11-21 | 1982-06-03 | Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar | New bicyclo[2.2.1]heptane derivatives and their use as plant growth regulants |
| RU2190394C1 (en) * | 2001-11-08 | 2002-10-10 | ОАО Нижегородский химико-фармацевтический завод | Pharmaceutical composition possessing antimycotic activity and method of its production |
| WO2013079566A2 (en) * | 2011-11-30 | 2013-06-06 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Fungicidal n-bicycloalkyl and n-tricycloalkyl (thio)carboxamide derivatives |
| RU2765470C1 (en) * | 2021-03-23 | 2022-01-31 | Иршад Султанович Шарафутдинов | Antibacterial agent in form of gel based on gentamycin and 2(5h)-furanone derivative |
| RU2801872C1 (en) * | 2022-06-24 | 2023-08-17 | Иван Николаевич Полищук | Pharmaceutical agent of plant origin in the form of a spray |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2087888A (en) * | 1980-11-21 | 1982-06-03 | Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar | New bicyclo[2.2.1]heptane derivatives and their use as plant growth regulants |
| RU2190394C1 (en) * | 2001-11-08 | 2002-10-10 | ОАО Нижегородский химико-фармацевтический завод | Pharmaceutical composition possessing antimycotic activity and method of its production |
| WO2013079566A2 (en) * | 2011-11-30 | 2013-06-06 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Fungicidal n-bicycloalkyl and n-tricycloalkyl (thio)carboxamide derivatives |
| RU2765470C1 (en) * | 2021-03-23 | 2022-01-31 | Иршад Султанович Шарафутдинов | Antibacterial agent in form of gel based on gentamycin and 2(5h)-furanone derivative |
| RU2801872C1 (en) * | 2022-06-24 | 2023-08-17 | Иван Николаевич Полищук | Pharmaceutical agent of plant origin in the form of a spray |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LISOVSKAYA S.E. et al. The Repression of the Candida albicans Growth and Pseudomycelium Formation by Thiomonoterpenoid. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents. May 2024, V. 38 (5), pp. 3685-3698. [онлайн], [найдено 14.04.2025]. Найдено из Интернет: DOI:10.23812/j.biol.regul.homeost.agents.20243805.291. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sabarinath et al. | Phytochemical and Antibacterial screening on leaves of Solanum torvum | |
| Tjin et al. | Exposure time of virgin coconut oil against oral Candida albicans | |
| CN116650557B (en) | Antibacterial and anti-inflammatory agent, dressing and preparation method thereof | |
| Buzia et al. | Stability and microbiological analysis of aloe barbadensis and chamomilla matricaria pharmaceutical forms | |
| RU2841065C1 (en) | Composition based on 2-((1s,2s,4s)-1,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]hept-2-yl)sulphanylethanol for treating oral candidiasis and method of treating candidiasis | |
| Dhurve et al. | Formulations of Panchavalkala as Vrana Shodhana and Vrana Ropana: A brief review | |
| Radithia et al. | The effectiveness of essential oil from Citrus limon peel on Candida albicans biofilm formation: An experimental in vivo study | |
| CA2720030A1 (en) | Device for in situ production and topical administration of allicin | |
| Tsemenko | Antibacterial activity of phytosubstants from Vaccinium vitis-idaea leaves | |
| JP6667501B2 (en) | A preparation for treating dermatophytosis and yeast infections of the skin and mucous membranes, including a living fungal parasite microorganism picium origandrum, a method for determining the cell viability of the microorganism picidium origandrum, and a method for applying the preparation | |
| RU2535141C1 (en) | Gel composition of wide spectrum of biological action | |
| RU2372925C2 (en) | Sapropel balsamic liniment | |
| Тikhonov et al. | Creation of pharmaceutical compositions with the antifungal, antimicrobial and keratolytic activity | |
| RU2657785C1 (en) | Composition for intravaginal administration | |
| Naimat et al. | Formulation and evaluation of feminine wash for candidiasis with the extraction of Piper betle as antifungal effect | |
| RU2475245C1 (en) | Ointment for skin pecilomycosis | |
| RU2698201C1 (en) | Development of antifungal ointment based on salvin | |
| Saleh et al. | Study of The Effect of Combination of Some Medicinal Plant Extract Against Candida albicans Isolated From Clinical Sourse | |
| RU2391821C2 (en) | Terapeutic medication "fuzobakvelt" based on nanosomal substance | |
| US5512284A (en) | Method for treating bacterial infections | |
| RU2166314C2 (en) | Treatment-and-prophylactic preparation "geksikon" with antibacterial and antiseptic action | |
| Uronnachi et al. | Novel topical combo-therapeutic formulation integrating honey, neomycin and bacitracin for diabetic wound management | |
| UA159589U (en) | Method for determining the viability of candida glabrata fungi under the influence of subinhibitory concentrations of essential oils | |
| Al-Mashkoor et al. | Alcohol extract effect of raw Propolis in Acinetobacter baumannii isolated from diabetic foot ulcers | |
| Kyembeni et al. | Invitro Antimicrobial Efficacy of Jatropha Curcas Extracts on Escherichia Coli from Diabetic Females in Kitui County Kenya |