RU2727474C2

RU2727474C2 - Виды комбинированной терапии для лечения рака

Info

Publication number: RU2727474C2
Application number: RU2018109902A
Authority: RU
Inventors: Реза Фатхи; Дрор БЕН-АШЕР; Даниелль АБРАМСОН
Original assignee: Редхилл Байофарма Лтд.
Priority date: 2015-10-06
Filing date: 2016-10-06
Publication date: 2020-07-21
Also published as: US10463654B2; WO2017060771A3; JP6963545B2; US20180125831A1; MX2018004309A; HK1259342A1; US10946000B2; US20170095460A1; MX382754B; EP3359255A2; EP3359255B1; CA2997671A1; CN108136207A; US9844540B2; US20210128538A1; JP2018533560A; BR112018003232A2; US20200113881A1; AU2016336133B2; AU2016336133A1

Abstract

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для лечения рака. Для этого предложена комбинация соединений, описываемых структурными формулами II и IV, а также применения: соединения II одновременно или последовательно с соединением IV, соединения IV одновременно или последовательно с соединением II, и соединения I одновременно или последовательно с соединениями II и IV. Группа изобретений позволяет повысить эффективность лечения рака за счет синергетического эффекта комбинированного введения противоопухолевых агентов в более низкой дозе, чем при введении их по отдельности, при снижении их побочных эффектов. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 17 ил., 20 табл.

Description

РОДСТВЕННАЯ ЗАЯВКА

По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительной заявки на патент США № 62/237,925, поданной 6 октября 2015 г., полное описание которой полностью включено в настоящий документ путем ссылки.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Рак представляет собой группу заболеваний, характеризующихся неконтролируемым ростом и распространением аномальных клеток. Существуют много разных типов лечения рака, включая традиционные виды терапии (такие как хирургия, химиотерапия и радиационная терапия), более новые формы лечения (таргетная терапия), а также дополнительные и альтернативные виды терапии. Становится все более очевидно, что рак зависит от ряда измененных молекулярных путей, и при нем могут развиваться разнообразные механизмы резистентности к монотерапии. Следовательно, наибольшую надежду на действенные виды терапии с устойчивыми эффектами могут давать комбинированные схемы.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем документе описаны виды комбинированной терапии для лечения рака.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания для лечения рака обеспечивает преимущество, связанное с наличием улучшенных антиинвазионных эффектов на раковые клетки по сравнению с терапией, включающей в себя только введение одного соединения из комбинации.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания для лечения рака обеспечивает преимущество, связанное с наличием улучшенных антимиграционных эффектов на раковые клетки по сравнению с терапией, включающей в себя только введение одного соединения из комбинации.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания для лечения рака обеспечивает преимущество, связанное с наличием улучшенных антиметастатических эффектов на раковые клетки по сравнению с терапией, включающей в себя только введение одного соединения из комбинации.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания для лечения рака обеспечивает преимущество, связанное с наличием улучшенных антипролиферативных эффектов на раковые клетки по сравнению с терапией, включающей в себя только введение одного соединения из комбинации. В одном варианте осуществления улучшенные антипролиферативные эффекты на раковые клетки являются результатом способности одного или более соединений к уменьшению или прекращению продукции или сверхэкспрессии цитокинов в опухолевых клетках, стромальных клетках или обоих видах клеток. В одном варианте осуществления цитокином, на которое влияет соединение, является интерлейкин-6 (IL-6).

В одном варианте осуществления каждый агент настоящего изобретения сам по себе способен оказывать по меньшей мере один из антиинвазионных эффектов, антимиграционных эффектов, антиметастатических эффектов, антипролиферативных эффектов и апоптоза, а комбинация из двух или более агентов настоящего изобретения синергетически ингибирует рост клеток и усиливает апоптоз.

Предполагается, что комбинированная терапия настоящего описания может обеспечивать синергетические полезные эффекты с точки зрения цитотоксичности. Например, цитотоксичность комбинированного лечения может быть выше аддитивного эффекта индивидуального лечения соединениями, вводимыми по отдельности. Дополнительно или альтернативно комбинированная терапия настоящего описания может обеспечивать приемлемую цитотоксичность, но при более низкой дозе, чем при индивидуальном лечении соединениями по отдельности. Это может приводить к меньшему числу побочных эффектов во время протокола лечения при той же или более высокой эффективности в отношении рака, лечение которого осуществляется.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения содержит первый агент в комбинации с по меньшей мере вторым агентом, который выбирают из таблицы 1, или его аналогом и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. К потенциальным комбинациям противораковых агентов относятся разнообразные сочетания агентов, которые выбирают из таблицы 1, со стандартными средствами лечения (например, химиотерапией, таргетными агентами и иммуномодуляторами) или без них.

Способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту первого агента в комбинации со вторым агентом, который выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает в себя введение третьего агента, который выбирают из агентов в таблице 1. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает в себя введение четвертого агента, который выбирают из агентов в таблице 1. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает в себя введение пятого агента, который выбирают из агентов в таблице 1. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает в себя введение шестого агента, который выбирают из агентов в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту двух агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В некоторых вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту трех агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В некоторых вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту четырех агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В некоторых вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту пяти агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В некоторых вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту шести агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В настоящем описании авторы изобретения обнаружили, что клиническая комбинация из двух или более агентов, указанных в таблице 1, может действовать как более эффективный вариант одного лекарственного средства в отдельности. В некоторых вариантах осуществления желаемый (-ые) эффект (-ы) комбинаций противораковых агентов, перечисленных в таблице 1, включая различные сочетания агентов, которые выбирают из таблицы 1, является существенно более высоким, чем эффект каждого одного агента, вводимого в отдельности. Можно предложить гипотезу, что комбинированная терапия настоящего описания действует двумя общими путями: (a) один агент может усиливать действие другого агента или (b) два лекарственных средства могут комбинироваться, чтобы оказывать эффекты, отличные от действия каждого индивидуального соединения.

В одном варианте осуществления способ ограничения роста и пролиферации рака поджелудочной железы у пациента, имеющего или предположительно имеющего рак поджелудочной железы, включает в себя совместное введение пациенту по меньшей мере двух лекарственных средств из таблицы 1, причем количества лекарственных средств в комбинации являются эффективными для достижения ограничения роста и пролиферации раковых клеток. В одном варианте осуществления введение осуществляется одновременно. В одном варианте осуществления введение осуществляется последовательно.

В соответствии с аспектами, проиллюстрированными в настоящем документе, описана комбинированная терапия рака, включающая в себя введение эффективных количеств двух или более из рифабутина, клофазамина и кларитромицина нуждающемуся в таком лечении пациенту. В одном варианте осуществления эффективные количества рифабутина, клофазамина и кларитромицина вводят пациенту с раком, в сыворотке крови которого экспрессируются превышающие норму уровни IL-6, и после эффективного периода лечения рифабутином, клофазамином и кларитромицином концентрация IL-6 в сыворотке пациента снижается по сравнению с исходным уровнем, что приводит к снижению или прекращению прогрессирования рака.

В соответствии с аспектами, проиллюстрированными в настоящем документе, описана комбинированная терапия рака, включающая в себя по меньшей мере один антибиотик, который выбирают из группы, состоящей из рифабутина, клофазамина и кларитромицина, с по меньшей мере одним или более из ингибитора сериновой протеазы, аналога нуклеозида или ингибитора сфингозинкиназы. В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой соединение ариладамантана.

В соответствии с аспектами, проиллюстрированными в настоящем документе, способ лечения пациента, имеющего рак, включает в себя введение по меньшей мере одного из клофазимина, рифабутина или кларитромицина в комбинации с по меньшей мере одним из упамостата, бривудина или соединения ариладамантана субъекту, нуждающемуся в таком лечении. В одном варианте осуществления способ введения включает в себя введение пациенту терапевтически эффективных количеств агентов множество раз в день для достижения терапевтически эффективных доз. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество кларитромицина составляет от приблизительно 95 мг до приблизительно 1000 мг ежедневно. В одном варианте осуществления кларитромицин вводят перорально в виде твердой дозированной формы один или более раз в день. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество кларитромицина составляет до 1 грамма ежедневно для взрослого. В одном варианте осуществления вводят две дозы 500 мг кларитромицина в виде внутривенной (в/в) инфузии, используя раствор с концентрацией приблизительно 2 мг/мл. Дневную дозу 1 грамм кларитромицина можно вводить в виде в/в инфузии в течение периода от двух дней до пяти дней. В одном варианте осуществления дневную дозу 1 грамм кларитромицина можно вводить в виде в/в инфузии в течение периода трех дней. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество рифабутина составляет от приблизительно 45 мг до приблизительно 450 мг ежедневно. В одном варианте осуществления рифабутин вводят перорально в виде твердой дозированной формы один или более раз в день. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество клофазимина составляет от приблизительно 10 мг до приблизительно 1000 мг ежедневно. В одном варианте осуществления клофазимин вводят перорально в виде твердой дозированной формы один или более раз в день. Бривудин можно вводить в виде активного метаболита, соли, или в защищенной форме, или в пролекарственной форме. В одном варианте осуществления a терапевтически эффективное количество BVDU составляет до 600 мг/день. В одном варианте осуществления 600 мг вводят один раз в день в дозированной форме для однократного перорального введения. В одном варианте осуществления 600 мг вводят в виде дозированной формы 150 мг для одиночного перорального введения, принимаемой четыре раза в день. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество BVDU составляет до 500 мг/день для взрослого. В одном варианте осуществления 500 мг вводят один раз в день в дозированной форме для однократного перорального введения. В одном варианте осуществления 500 мг вводят в виде дозированной формы 125 мг для одиночного перорального введения, принимаемой четыре раза в день. В одном варианте осуществления настоящего описания упамостат вводят перорально в дозе от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 1,1 мг/кг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 400 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 150 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 250 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 300 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 350 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 400 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 450 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 500 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 450 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 350 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 300 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 250 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 750 мг до 1000 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 750 мг. В одном варианте осуществления терапевтически эффективное количество соединения ариладамантана составляет от 0,5 грамма до 3,5 грамма в день. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана вводят перорально в суточной дозе 1,5 грамма в день. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана вводят перорально в суточной дозе 2,0 грамма в день. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана вводят перорально в суточной дозе 2,5 грамма в день. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана вводят перорально в суточной дозе 3,0 грамма в день.

В одном варианте осуществления комбинация настоящего описания включает в себя соединение структуры (I)

или его фармацевтически приемлемую соль; и соединение структуры (II)

3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амид (II)

или его фармацевтически приемлемую соль. В одном варианте осуществления комбинация дополнительно включает в себя соединение структуры (III)

(III) или его фармацевтически приемлемую соль. В одном варианте осуществления комбинация дополнительно включает в себя соединение структуры (IV)

или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном варианте осуществления способ лечения рака или предотвращения рецидива или прогрессирования рака у нуждающегося в этом человека включает в себя одновременное или последовательное введение человеку терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного антибиотика и соединения ариладамантана.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

На ФИГ. 1 показана эффективность RHB-104 при монотерапии в четырех опухолевых моделях. Показаны минимальные значения T/C для всех экспериментов. В качестве критической точки было выбрано минимальное значение T/C 65% (верхний предел для границы противоопухолевой эффективности).

На ФИГ. 2A и 2B показана противоопухолевая эффективность RHB-104 при монотерапии (PDX: PAXF 546). На ФИГ. 2A показаны медианные относительные объемы опухолей в зависимости от времени. На ФИГ. 2B показаны индивидуальные относительные объемы опухолей на день 28 (день с мин. значением T/C) (включая значения LOCF).

На ФИГ. 3A и 3B показана противоопухолевая эффективность RHB-104 при монотерапии (PDX: PAXF 736). На ФИГ. 3A показаны медианные относительные объемы опухолей в зависимости от времени. На ФИГ. 3B показаны индивидуальные относительные объемы опухолей на день 28 (день с мин. значением T/C) (включая значения LOCF).

На ФИГ. 4A и 4B показана противоопухолевая эффективность RHB-104 при монотерапии (PDX: PAXF 1872). На ФИГ. 4A показаны медианные относительные объемы опухолей в зависимости от времени. На ФИГ. 4B показаны индивидуальные относительные объемы опухолей на день 28 (день с мин. значением T/C) (включая значения LOCF).

На ФИГ. 5A и 5B показана противоопухолевая эффективность RHB-104 при монотерапии (PDX: PAXF 1998). На ФИГ. 5A показаны медианные относительные объемы опухолей в зависимости от времени. На ФИГ. 5B показаны индивидуальные относительные объемы опухолей на день 28 (день с мин. значением T/C) (включая значения LOCF).

На ФИГ. 6A-6E показано влияние вариантов лечения на массы тела мышей. Показаны медианные относительные массы тела в группах с течением времени для всех экспериментов (ФИГ. 6A) и медианные относительные массы тела в группах с течением времени для каждого из четырех разных ксенотрансплантатов опухоли рака поджелудочной железы, полученных от пациентов (ФИГ. 6B-6E).

На ФИГ. 7 показана гистограмма, демонстрирующая концентрацию IL-6 в сыворотке крови мышей после введения несущей среды (отрицательный контроль), дексаметазона (положительный контроль) или RHB-104 с последующей инъекцией LPS самкам мышей C57BL/6.

На ФИГ. 8 показана гистограмма, демонстрирующая концентрацию ФНО в сыворотке крови мышей после введения несущей среды (отрицательный контроль), дексаметазона (положительный контроль) или RHB-104 с последующей инъекцией LPS самкам мышей C57BL/6.

На ФИГ. 9 показана гистограмма, демонстрирующая концентрацию IL-10 в сыворотке крови мышей после введения несущей среды (отрицательный контроль), дексаметазона (положительный контроль) или RHB-104 с последующей инъекцией LPS самкам мышей C57BL/6.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

При использовании в настоящем документе термин «агент» относится к соединению, обладающему фармакологической активностью или эффектом для пациента. Термины «агент», «активный ингредиент», «соединение» и «лекарственное средство» используются в настоящем документе на взаимозаменяемой основе.

Термин «введение» или «ввод» включает в себя способы введения соединений изобретения субъекту для выполнения соединениями предполагаемой для них функции. К примерам пригодных для использования способов введения относятся инъекция (подкожная, внутривенная, парентеральная, внутрибрюшинная, внутриоболочечная), пероральное введение, ингаляция, ректальное и чрескожное введение. Фармацевтические препараты могут даваться в формах, подходящих для каждого способа введения. Например, эти препараты вводят в форме таблеток или капсул, путем инъекций или ректально с помощью суппозиториев. Предпочтительно пероральное введение. Инъекция может представлять собой болюсную инъекцию или может представлять собой непрерывную инфузию. В зависимости от способа введения соединения изобретения могут быть покрыты или могут быть нанесены на выбранный материал для их защиты от естественных условий, способных разрушительно влиять на их способность осуществлять предполагаемую для них функцию. Соединения изобретения могут вводиться в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем. Более того, соединения изобретения могут также вводиться в пролекарственной форме, которая преобразуется в свой активный метаболит или в более активный метаболит in vivo.

«Апоптоз» (или запрограммированная гибель клеток) представляет собой процесс, играющий важную роль в предотвращении рака и в лечении рака при помощи агентов, индуцирующих апоптоз аномальных раковых клеток. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения обладают способностью индуцировать апоптоз у индивида. Для тестирования эффективности агента настоящего описания с точки зрения индукции апоптоза можно использовать несколько анализов in vitro, включая, без ограничений, проточную цитометрию, с выбором из одного из цитоплазматического, митохондриального, каспазного, ядерного апоптоза и многопараметрического апоптоза; микроскопию с выбором из одного из микроскопии каспазной активности, фрагментации и морфологии ДНК, окрашивания аннексина V, мембранного потенциала и других митохондриальных анализов; одновременный многопараметрический анализ и микропланшетный анализ, такой как популяционный анализ для измерения каспазной активности.

При использовании в настоящем документе термин «антиинвазионные эффекты» означает способность агента или агентов настоящего изобретения предотвращать инвазию рака или снижать частоту опухолевой инвазии у индивида. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 1% до приблизительно 99,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 5% до приблизительно 95,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 10% до приблизительно 90,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 20% до приблизительно 80,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 30% до приблизительно 70,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину от приблизительно 40% до приблизительно 60,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту опухолевой инвазии у индивида на величину приблизительно 50% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиинвазионные эффекты.

При использовании в настоящем документе термин «антимиграционные эффекты» означает способность агента или агентов настоящего изобретения предотвращать миграцию раковых клеток или снижать частоту миграции опухолевых клеток у индивида после того, как опухолевые клетки приобретают способность проникать в окружающие ткани, причем процесс инвазии инициируется, когда эти подвижные клетки проходят через базальную мембрану и экстраклеточный матрикс, прогрессируя до интравазации по мере того, как клетки проникают в лимфатическую или сосудистую систему. Затем метастатические клетки двигаются по системе кровообращения, проникая через базальную мембрану и экстраклеточный матрикс в процессе экстравазации. Наконец, эти клетки прикрепляются в новом месте и пролиферируют с образованием вторичной опухоли. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 1% до приблизительно 99,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 5% до приблизительно 95,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 10% до приблизительно 90,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 20% до приблизительно 80,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 30% до приблизительно 70,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину от приблизительно 40% до приблизительно 60,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту миграции опухолевых клеток у индивида на величину приблизительно 50% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антимиграционные эффекты.

При использовании в настоящем документе термин «антиметастатические эффекты» означает способность агента или агентов настоящего изобретения предотвращать или снижать частоту по меньшей мере одного из следующих этапов метастатического процесса: (1) отделение раковых клеток от первичного очага, (2) индукция и инвазия в новые кровеносные сосуды, (3) выход из кровяного русла и (4) формирование новой колонии в удаленных очагах. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 1% до приблизительно 99,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 5% до приблизительно 95,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 10% до приблизительно 90,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 20% до приблизительно 80,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 30% до приблизительно 70,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину от приблизительно 40% до приблизительно 60,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту одного из этапов метастатического процесса у индивида на величину приблизительно 50% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антиметастатические эффекты. Для тестирования эффективности агента настоящего описания по предотвращению или задержке прогрессирования метастазов можно использовать несколько анализов in vitro, включая, без ограничений, анализы методом зарастания царапины или раны, анализы трансмембранной миграции (модифицированная камера Бойдена), анализы с закрытием промежутка или закрытой зоны, а также анализы миграции с использованием микропроточных устройств (MFD).

При использовании в настоящем документе термин «новообразование» относится к аномальному росту клеток или ткани и, как подразумевается, включает в себя доброкачественные, т. е. не раковые разрастания, и злокачественные, т. е. раковые разрастания. Термин «неопластический» означает новообразование или имеет отношение к новообразованию. Под термином «антинеопластический агент» понимается вещество, оказывающее антинеопластический эффект в ткани, системе, у животного, млекопитающего, человека или другого субъекта.

При использовании в настоящем документе термин «антипролиферативные эффекты» означает способность агента или агентов настоящего изобретения ингибировать рост раковых клеток и их деление или снижать частоту роста и деления раковых клеток у индивида. В одном варианте осуществления агент настоящего изобретения приводит к антипролиферативному эффекту, влияя на продукцию цитокинов. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 1% до приблизительно 99,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 5% до приблизительно 95,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 10% до приблизительно 90,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 20% до приблизительно 80,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 30% до приблизительно 70,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину от приблизительно 40% до приблизительно 60,0% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. В одном варианте осуществления агент или агенты настоящего изобретения снижают частоту роста и деления раковых клеток у индивида на величину приблизительно 50% по сравнению с существующим лекарственным средством, в отношении которого известны антипролиферативные эффекты. Для тестирования эффективности агента настоящего описания по предотвращению или задержке роста и деления клеток можно использовать несколько анализов in vitro, включая, без ограничений, анализы клеточной пролиферации, во время которых измеряется синтез ДНК, анализы клеточной пролиферации, во время которых измеряется метаболическая активность, анализы клеточной пролиферации, во время которых измеряются антигены, ассоциированные с клеточной пролиферацией, и анализы клеточной пролиферации, во время которых измеряется концентрация АТФ.

Термин «цитокин» относится к небольшим функциональным пептидам, которые в физиологических условиях контролируют межклеточное взаимодействие внутри различных тканей организма. Цитокины также называют интерлейкинами, монокинами, лимфокинами, хемокинами и факторами роста. Было отмечено, что локальные тканевые или циркуляционные уровни цитокинов при ряде видов рака изменяются, что может влиять на развитие/распространение, лечение и прогноз. Повышенные уровни цитокинов, например, были ассоциированы со снижением противораковой активности различных вариантов лечения. Также было продемонстрировано, что цитокины усугубляют токсические эффекты химиотерапии и влияют на метаболизм лекарственных средств. Воспалительные цитокины, такие как интерфероны и интерлейкины, продуцируемые в микроокружении опухоли, играют роль в стимуляции или ингибировании прогрессирования заболевания.

К заболеваниям, которые можно лечить с использованием соединений настоящего изобретения, относятся, без ограничений, раковые заболевания, такие как раковые опухоли. Термином «рак» обозначается любое заболевание, вызванное или приводящее к нецелесообразно высоким уровням деления клеток, нецелесообразно низким уровням апоптоза или обоим. В одном варианте осуществления рак является результатом инфекционного заболевания, такого как вирусная инфекция. В одном варианте осуществления рак является результатом инфекционного заболевания, такого как бактериальная или паразитарная инфекция. В одном варианте осуществления рак вызван генной мутацией. К подходящим для лечения видам рака относятся, без ограничений, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак почки, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак яичника, рак желудка, рак матки, карцинома in situ и лейкемия.

При использовании в настоящем документе термин «рак поджелудочной железы» означает любой рак, происходящий от клеток поджелудочной железы, и включает в себя метастатические и локальные формы рака поджелудочной железы. В 2012 г. раковые заболевания поджелудочной железы всех типов были седьмой по распространенности причиной смерти от рака, которая привела к 330 000 летальных случаев по всему миру. В США рак поджелудочной железы занимает четвертое по частоте место среди причин смертности от рака. В некоторых вариантах осуществления виды комбинированной терапии настоящего изобретения можно использовать для лечения конкретной субпопуляции пациентов с раком поджелудочной железы. Комбинацию агентов изобретения можно использовать для повышения эффективности и снижения количества любого агента, необходимого для достижения эффективности.

Термин «пациент» относится к любому животному, такому как примат, такому как человек. Способами и композицией настоящего изобретения можно лечить любое животное.

При использовании в настоящем документе термин «подходящий период времени» относится к периоду времени, начинающемуся, когда субъект начинает лечение по диагнозу рака с использованием способа настоящего описания, продолжающийся в ходе лечения и до того момента, когда субъект прекращает лечение. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 1 (одну) неделю. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 1 (одной) недели до 2 (двух) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 2 (две) недели. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 2 (двух) недель до 3 (трех) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 3 (три) недели. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 3 (трех) недель до 4 (четырех) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 4 (четыре) недели. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 4 (четырех) недель до 5 (пяти) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 5 (пять) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 5 (пяти) недель до 6 (шести) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 6 (шесть) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 6 (шести) недель до 7 (семи) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 7 (семь) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет от 7 (семи) недель до 8 (восьми) недель. В одном варианте осуществления подходящий период времени составляет 8 (восемь) недель.

Термин «терапевтически приемлемый» относится к тем соединениям (или соли, пролекарства, таутомеры, цвиттерионные формы и т. д.), которые подходят для применения в контакте с тканями пациентов без ненадлежащей токсичности, раздражения и аллергической реакции, соответствуют разумному соотношению преимущество/риск и являются эффективными для предполагаемого использования.

Под «эффективным количеством» или «терапевтически эффективным количеством» понимается количество соединения, отдельно или в комбинации с другой терапевтической схемой, необходимое для лечения пациента с раком клинически значимым образом. Это количество позволяет достигать цели снижения или устранения заболевания или расстройства. Достаточное количество активного соединения, используемого при практической реализации настоящего изобретения для терапевтического лечения состояний, вызванных раком, различается в зависимости от способа введения, возраста, массы тела и общего состояния здоровья пациента. В конечном счете решение о надлежащем количестве и схеме дозирования принимает назначающий препарат врач. При комбинированной терапии в соответствии с изобретением эффективное количество агента может быть меньше эффективного количества в случае, если агент вводят во время некомбинированной терапии (монотерапии). Кроме того, эффективное количество может представлять собой количество агента во время комбинированной терапии в соответствии с изобретением, которое является безопасным и эффективным для лечения пациента, имеющего рак, по каждому агенту в отдельности, как определено и утверждено регулирующим органом (таким как Агентство по пищевым продуктам и лекарственным препаратам США).

Под «более эффективным» понимается, что лечение демонстрирует более высокую эффективность или меньшую токсичность, большее удобство или меньшую стоимость по сравнению с другим лечением, с которым его сравнивают. Эффективность может измерить опытный практик, используя любой стандартный способ, подходящий для данного показания.

Термин «свести к минимуму», или «снижать», или их производные включает в себя полное или частичное ингибирование указанного биологического эффекта (который очевиден из контекста, в котором используется термин «свести к минимуму»).

Термин «модулировать» относится к увеличению или уменьшению, например, способности клетки к пролиферации в ответ на воздействие соединений изобретения, например, к ингибированию пролиферации по меньшей мере субпопуляции клеток у животного, так чтобы достичь конечный результат, например, терапевтический результат. В одном варианте осуществления модуляция представляет собой ингибирование. Термин «ингибирование» означает уменьшение, подавление, ослабление, сокращение, приостановку или стабилизацию целевой активности, например, пролиферации клеток.

Термин «комбинированная терапия» означает введение двух или более агентов настоящего изобретения для лечения рака. В одном варианте осуществления каждый из агентов нацеливается на разные участки сигнального пути в раковой клетке. В одном варианте осуществления каждый из агентов нацеливается на взаимосвязь раковой клетки с окружением ткани. В одном варианте осуществления один агент нацеливается на сигнальный путь в раковой клетке, и один агент нацеливается на взаимосвязь раковой клетки с окружением ткани. Такое введение охватывает совместное введение этих агентов по существу одновременно, например, в одной капсуле, имеющей фиксированное соотношение активных ингредиентов («фиксированная доза») или во множестве отдельных капсул или таблеток для каждого активного ингредиента. Кроме того, такое введение также охватывает последовательное использование каждого типа агента. В любом случае схема лечения обеспечит полезные эффекты комбинации лекарственных средств при лечении состояний или расстройств, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего изобретения включает в себя по меньшей мере одну комбинацию из двух или более агентов с фиксированной дозой. Фиксированная доза обеспечивает преимущества комбинированной терапии и снижает количество назначений и затраты, связанные с администрированием. В одном варианте осуществления в комбинированной терапии настоящего описания используются более низкие концентрации каждого лекарственного средства вследствие синергетических или аддитивных эффектов. В одном варианте осуществления использование более низких концентраций каждого лекарственного средства (по сравнению с монотерапией лекарственным средством) приводит к снижению нежелательных явлений и более высокому терапевтическому соотношению или индексу.

Термин «одновременно» означает (1) одновременно во времени или (2) в разные моменты времени в ходе курса лечения по совместной схеме.

Термин «последовательно» относится к введению одного активного агента, используемого в способе, с последующим введением другого активного агента. После введения одного активного агента следующий активный агент можно последовательно вводить сразу же после первого или же следующий активный агент можно вводить после эффективного периода времени за первым активным агентом; эффективный период времени представляет собой количество времени, отведенного на реализацию максимального полезного эффекта от введения первого активного агента.

Комбинированная терапия может обеспечивать «синергию» и оказываться «синергетической», т. е. эффект, достигаемый при совместном использовании активных ингредиентов, который больше суммы эффектов от использования соединений по отдельности. Синергетический эффект может достигаться, когда активные ингредиенты: (1) объединены и вводятся или доставляются одновременно в комбинированном лекарственном составе с однократной дозой; (2) добавляются с чередованием или параллельно в виде отдельных составов; или (3) по какой-либо другой схеме. При доставке во время чередующейся терапии синергетический эффект может достигаться, когда соединения вводят или добавляют последовательно, например, в разных инъекциях в отдельных шприцах, путем введения отдельных капсул или при отдельных инфузиях. В целом, во время чередующейся терапии эффективную дозу каждого активного ингредиента вводят последовательно, т. е. одну за другой, а во время комбинированной терапии эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят вместе.

Ожидается, что активные агенты настоящего изобретения будут особенно полезны в составе комбинированной терапии с существующими стандартными способами лечения рака. В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания включает в себя введение по меньшей мере двух агентов настоящего изобретения и дополнительно совместное введение агентов изобретения со стандартными химиотерапевтическими агентами. В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания включает в себя хирургическое удаление пораженной ткани, введение по меньшей мере двух агентов настоящего изобретения и дополнительно совместное введение агентов изобретения со стандартными химиотерапевтическими агентами или радиационной терапией. К текущим стандартным химиотерапевтическим агентам относятся, без ограничений, антиангиогенные агенты, цитостатические агенты и антипролиферативные/антинеопластические агенты, а также их комбинации. Например, к антинеопластическим агентам и комбинациям агентов, используемых в лечении карциномы поджелудочной железы, относятся, без ограничений, гемцитабин, гемцитабин/доцетаксел/капецитабин, гемцитабин/капецитабин, гемцитабин/альбумин-связанный паклитаксел, 5-фторурацил (5-FU), LV5-FU/оксалиплатин/иринотекан, паклитаксел/гемцитабин, эрлотиниб, эрлотиниб/гемцитабин и капецитабин, отдельно или в комбинации. Было показано, что такие агенты повышают выживаемость при раке поджелудочной железы. В одном варианте осуществления по меньшей мере два агента настоящего изобретения дополнительно вводят совместно с одним или более из этих стандартных химиотерапевтических агентов.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания включает в себя введение по меньшей мере двух агентов настоящего изобретения и дополнительно совместное введение агентов изобретения с иммуномодулятором. Иммуномодуляторы представляют собой активные агенты, используемые при иммунотерапии, которые модифицируют иммунный ответ иммунной системы и могут включать в себя разнообразный набор рекомбинантных, синтетических и природных препаратов. К примерам иммуномодуляторов относятся, без ограничений, интерлейкины, цитокины, хемокины и иммуномодуляторные имидные лекарственные средства.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания включает в себя введение по меньшей мере двух агентов настоящего изобретения и дополнительно совместное введение агентов изобретения с ингибитором иммунологических контрольных точек. Лекарственные средства или кандидаты в лекарственные средства, которые ингибируют/блокируют ингибиторные молекулы-контрольные точки, называют ингибиторами иммунологических контрольных точек.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания включает в себя введение по меньшей мере двух агентов настоящего изобретения и дополнительно совместное введение агентов изобретения с ингибитором матриксной металлопротеиназы (MMPI). MMPI ингибируют миграцию клеток и обладают потенциальными антиангиогенными эффектами. К примерам MMPI относятся экзогенные MMPI, включая, без ограничений, таномастат, приномастат, батимастат и маримастат.

Термины «совместное введение» или «совместный ввод» должны включать в себя одновременное или последовательное введение терапевтических средств. Например, совместное введение может включать в себя введение как нуклеозидного аналога настоящего изобретения, так и ингибитора сериновой протеазы в одной композиции. Также оно может включать в себя одновременное введение множества таких композиций. Альтернативно совместное введение может включать в себя введение множества таких композиций в разные моменты времени в один период времени.

Термин «аналог» агента или другой химической группы включает в себя, без ограничений, соединения, структурно аналогичные агенту или относящиеся к тому же общему химическому классу, что и агент, или. Аналог агента сохраняет аналогичное агенту химическое и/или физическое свойство (включая, например, функциональность) агента.

Фраза «фармацевтически приемлемый носитель» включает в себя фармацевтически приемлемый материал, композицию или несущую среду, такую как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или инкапсулирующий материал, участвующий в переносе или транспортировке активного вещества или активных веществ из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Каждый носитель является «приемлемым» с точки зрения совместимости с другими ингредиентами состава и безвредным для пациента. К некоторым примерам материалов, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, относятся, без ограничений: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетатцеллюлоза; (4) порошковую трагакантовую камедь; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) эксципиенты, такие как масло какао и свечные воски; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) многоатомные спирты, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферизующие агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатные буферные растворы; и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических составах.

При использовании в настоящем документе термины «лечение рака», «лечить» и «лечение» включают в себя, без ограничений, предотвращение или уменьшение развития рака, уменьшение симптомов рака, подавление или ингибирование развившегося рака, предотвращение метастазов и/или инвазии существующего рака, предотвращение или индукцию регрессии рака, ингибирование или подавление пролиферации раковых клеток, снижение ангиогенеза, уничтожение злокачественных или раковых опухолевых клеток или увеличение количества подвергшихся апоптозу раковых клеток. В некоторых вариантах осуществления соединения изобретения вводят субъекту, подверженному риску развития рака, с целью снижения риска развития рака. Фраза «ингибирование роста» или «ингибирование пролиферации» раковых клеток относится к замедлению, прекращению, приостановке или остановке их роста и метастазирования, а не обязательно указывает на полное уничтожение новообразования.

При использовании в настоящем документе термин «пациент, нуждающийся в лечении» означает пациента, для которого определена необходимость в лечении. Например, пациент, нуждающийся в лечении рака, представляет собой пациента, у которого выявлен рак или который подвержен риску развития рака. У пациента потребность в лечении может быть диагностирована медицинским специалистом и/или она может быть диагностирована по данным одного или более диагностических анализов. Например, пациент, нуждающийся в лечении рака, может представлять собой пациента, у которого медицинский специалист диагностировал рак или определил риск развития рака. Диагностические анализы для оценки того, имеется ли у пациента рак или риск развития рака, известны в данной области.

Если способы включают в себя введение пациенту более чем одного активного агента, агенты могут вводиться в пределах 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 дня; в пределах 24, 12, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 часа, в пределах 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5 или 1 минуты; или по существу одновременно. Способы изобретения могут включать в себя введение одного или более агентов пациенту пероральным, системным, парентеральным, местным, внутривенным, ингаляционным или внутримышечным способом.

Способы настоящего изобретения включают в себя введение пациенту первого агента в комбинации со вторым агентом, который выбирают из агентов в таблице 1 или их аналогов, в количестве, являющемся эффективным для лечения пациента. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает в себя введение третьего агента, который выбирают из агентов в таблице 1. В настоящем описании авторы обнаружили, что механизмы, благодаря которым агенты, перечисленные в таблице 1, работают вместе в клинической комбинации, могут действовать как более эффективный вариант введения одного агента. Можно предложить гипотезу, что комбинированная терапия настоящего описания действует двумя общими путями: (a) один агент может усиливать действие другого агента или (b) два лекарственных средства могут комбинироваться, чтобы оказывать эффекты, отличные от действия каждого индивидуального соединения.

Таблица 1

Клофазамин (противовоспалительный)	Бактерицидный антибиотик (например, рифабутин)	Макролидный антибиотик (например, кларитромицин)
5'-замещенные нуклеозиды (например, бривудин)	Ингибиторы сфингозинкиназы (например, ABC294640)	Ингибиторы урокиназы (например, упамостат)

Агенты из таблицы 1 можно вводить в пределах 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 дня; в пределах 24, 12, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 часа, в пределах 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5 или 1 минуты; или по существу одновременно. Способы изобретения могут включать в себя введение агента из таблицы 1 пациенту пероральным, системным, парентеральным, местным, внутривенным, ингаляционным или внутримышечным способом. В одном варианте осуществления способы изобретения включают в себя введение агента из таблицы 1 пациенту пероральным способом.

В одном варианте осуществления в настоящем описании представлена комбинированная терапия рака, включающая в себя два или более агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1. В одном варианте осуществления два или более агентов присутствуют в количествах, которые при совместном введении пациенту с раком являются эффективными для лечения пациента. В одном варианте осуществления композиция состоит из активных ингредиентов и эксципиентов, а активные ингредиенты состоят из двух или более агентов, которые выбирают из агентов в таблице 1.

К активным ингредиентам или агентам, подходящим для использования в изобретении, относятся те, которые описаны в настоящем документе, в любых их фармацевтически приемлемых формах, включая их изомеры, соли, сольваты и полиморфные формы, а также рацемические смеси и пролекарства.

В одном варианте осуществления комбинированная терапия настоящего описания для лечения рака обеспечивает преимущество, связанное с наличием улучшенных антипролиферативных эффектов на раковые клетки по сравнению с терапией, включающей в себя только введение одного соединения из комбинации. В одном варианте осуществления улучшенные антипролиферативные эффекты на раковые клетки являются результатом способности одного или более соединений к уменьшению или прекращению продукции или сверхэкспрессии цитокинов в опухолевых клетках, стромальных клетках или обоих видах клеток. В одном варианте осуществления цитокином, на которое влияет соединение, является интерлейкин-6 (IL-6). Было показано, что IL-6 участвует в пролиферации и дифференцировке различных злокачественных опухолевых клеток. Кроме того, сверхэкспрессия IL-6 и его рецепторов (IL-6R и sIL-6R) была обнаружена при различных видах рака. Повышенные уровни IL-6 были обнаружены в культуральных супернатантах клеточных линий, обладающих резистентностью ко множеству лекарственных средств, и повышенные уровни IL-6 в сыворотке пациентов с раком ассоциируются с неблагоприятными клиническими исходами.

В одном варианте осуществления каждый агент настоящего изобретения сам по себе способен оказывать по меньшей мере один из антиинвазионных эффектов, антимиграционных эффектов, антиметастатических эффектов, антипролиферативных эффектов и индукцию апоптоза, а комбинация из двух или более агентов настоящего изобретения синергетически ингибирует рост клеток и усиливает апоптоз.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина и терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы. В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина и терапевтически эффективного количества аналога нуклеозида. В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина; терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы; и терапевтически эффективного количества аналога нуклеозида. В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина; терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы; и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества кларитромицина; терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы; терапевтически эффективное количество аналога нуклеозида; и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления аналог нуклеозида представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы и терапевтически эффективного количества аналога нуклеозида. В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества ингибитора сериновой протеазы и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества аналога нуклеозида и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение терапевтически эффективного количества аналога нуклеозида; терапевтически эффективного количества сериновой протеазы; и терапевтически эффективного количества соединения ариладамантана, являющегося ингибитором сфингозинкиназы, - либо сфингозинкиназы 1 (SK1), либо сфингозинкиназы 2 (SK2). В одном варианте осуществления аналогом нуклеозида является бривудин. В одном варианте осуществления ингибитор сериновой протеазы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид], также известное как «ABC294640». В одном варианте осуществления соединение ариладамантана представляет собой ABC294735.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения содержит два или более агентов в вместе с одним или более их фармацевтически приемлемыми носителями и необязательно с одним или более другими терапевтическими ингредиентами. Носитель должен быть «приемлемым» с точки зрения совместимости с другими ингредиентами состава и безвредным для принимающего его пациента. Надлежащий состав зависит от выбранного способа введения. Можно использовать любые из общеизвестных методик, носителей и эксципиентов, подходящих и известных в данной области; например, в публикации Remington's Pharmaceutical Sciences. Фармацевтические композиции настоящего описания можно изготовить таким образом, который известен сам по себе, например, посредством традиционных процессов смешивания, растворения, гранулирования, растирания, эмульгирования, инкапсуляции, захвата или прессования.

В одном варианте осуществления фармацевтическую композицию настоящего изобретения можно удобно представлять в виде формы с разовой дозой и можно получать любыми способами, хорошо известными в фармацевтической области. Все способы включают в себя этап приведения в связь агента, являющегося предметом описания, или его фармацевтически приемлемой соли, сложного эфира, аналога, пролекарства или сольвата («активного ингредиента») с носителем, который представляет собой один или более вспомогательных ингредиентов. По существу, композиции получают посредством непрерывного и равномерного приведения активного ингредиента в связь с жидкими носителями, или мелкодисперсными твердыми носителями, или обоими типами носителей и последующего (при необходимости) формования продукта с получением желательной композиции.

В одном варианте осуществления фармацевтические композиции настоящего описания, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде отдельных единиц, таких как капсулы, саше или таблетки, каждая из которых содержит определенное количество активных ингредиентов; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в жидкости на водной или неводной основе; или в виде жидкой эмульсии масла в воде или жидкой эмульсии воды в масле.

К фармацевтическим препаратам, которые могут использоваться перорально, относятся таблетки, твердые капсулы, изготовленные из желатина, а также мягкие запечатанные капсулы, изготовленные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. Таблетки могут быть изготовлены путем прессования или формования, необязательно с одним или более вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получить путем прессования в подходящей машине активного ингредиента, находящегося в свободнотекучей форме, такой как порошок или гранулы, и необязательно перемешанного со связующими веществами, инертными разбавителями или смазывающими поверхностно-активными или диспергирующими агентами. Формованные таблетки можно изготавливать путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного соединения, смоченной инертным жидким разбавителем. На таблетки необязательно может быть нанесено покрытие или желобок, и они могут быть выполнены с возможностью обеспечения медленного или контролируемого высвобождения содержащегося в них активного ингредиента. Все композиции для перорального введения должны присутствовать в дозах, подходящих для такого введения. Твердые капсулы могут содержать активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связующими веществами, такими как крахмалы, и/или смазывающими веществами, такими как тальк или стеарат магния, и необязательно стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли. Кроме того, могут быть добавлены стабилизаторы. Ядра драже обеспечивают подходящими покрытиями. Для этой цели можно использовать концентрированные растворы сахара, которые могут необязательно содержать гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, карбополовый гель, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лака и подходящие органические растворители или смеси растворителей. К покрытиям таблеток или драже можно добавлять красители или пигменты для идентификации или характеризации разных комбинаций доз активных соединений.

Агенты настоящего изобретения

5'-замещенные нуклеозиды

Ниже в качестве не имеющих ограничительного характера примеров 5'-замещенных нуклеозидов настоящего описания представлены следующие: 5-(2-бромвинил-2'-дезоксиуридин (BVDU), (E)-5-(2-бромвинил)-1-.бета.-D-арабинофуранозилурацил, (E)-5-(2-бромвинил-2'-дезокси-4'-тиоуридин, 5-йод-2'-дезоксицитидин, 5-йод-2'-дезоксиуридин и 2'-дезокси-5-трифторметилуридин. Особенно предпочтительными являются бривудин (BVDU) и (E)-5-(2-бромвинил-) урацил (BVU). BVDU можно использовать в форме его соли, в защищенной форме или в пролекарственной форме.

Бривудин (бромвинилдезоксиуридин или, кратко, BVDU) представляет собой аналог нуклеозида, который взаимодействует с двумя остатками фенилаланина (Phe29 и Phe33) в N-концевом домене HspB1. Полное химическое наименование лекарственного средства - (E)-5-(2-бромвинил)-2-дезоксиуридин. Было показано, что бривудин является эффективным веществом для предотвращения или снижения формирования резистентности к лечению цитостатическими агентами. Развитие «резистентности к лекарственному средству» является основной причиной отсутствия успеха при химиотерапии рака. Опухоли, которые первоначально чувствительно реагировали на цитостатические агенты, очень часто восстанавливаются через определенное время лечения и становятся резистентными к воздействиям различных типов антинеопластических лекарственных средств.

Не имеющий ограничительного характера пример пролекарственной формы BVDU представлен ниже:

Бривудин представлен ниже:

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя совместное введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, бривудина, его соли или BVDU в защищенной форме или в пролекарственной форме вместе с по меньшей мере одним дополнительным агентом, который выбирают из таблицы 1, и в комбинации с по меньшей мере одним цитостатическим агентом, который выбирают из одного или более из алкалоидов, алкилирующих агентов, антиметаболитов, антибиотиков или цисплатина. При использовании способа лечения рака комбинированной терапией, включающей в себя BVDU, BVDU можно вводить в количестве, эффективно обеспечивающем в крови концентрацию от 0,02 мкг/мл до 10,0 мкг/мл. При использовании способа лечения рака комбинированной терапией, включающей в себя BVDU, BVDU можно вводить в количестве, эффективно обеспечивающем в крови концентрацию от 0,05 мкг/мл до 5 мкг/мл.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания для снижения резистентности при цитостатическом лечении включает в себя доставку пациенту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного цитостатического агента, терапевтически эффективного количества BVDU, его соли или BVDU в защищенной форме или пролекарственной форме, а также терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного дополнительного агента, который выбирают из таблицы 1.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания для усиления апоптозного эффекта цитостатиков после химиотерапии включает в себя введение (E)-5-(2-бромвинил)-2'-дезоксиуридина (BVDU), соли BVDU или пролекарства BVDU или их смесей, причем введение выполняют без введения цитостатика, во время фазы восстановления после цикла цитостатической терапии, при этом цикл цитостатической химиотерапии включает в себя введение (a) BVDU, пролекарства общей формулы I, или соли BVDU, или их смеси и (b) по меньшей мере одного дополнительного агента, который выбирают из таблицы 1; и (c) цитостатика. В одном варианте осуществления во время цикла цитостатический химиотерапии вводимые количества цитостатика увеличиваются в течение периода цикла цитостатической химиотерапии, а вводимое количество BVDU, соли BVDU, пролекарства или их смеси является постоянным. В одном варианте осуществления цикл цитостатической химиотерапии имеет продолжительность от 7 до 60 дней. В одном варианте осуществления фаза восстановления имеет продолжительность от 3 до 10 дней.

Ингибиторы урокиназы

Было показано, что упамостат («WX-671» или «Mesupron») ингибирует систему активатора плазминогена урокиназного типа (uPA). Упамостат является ингибитором сериновой протеазы. После перорального введения ингибитор сериновой протеазы WX-671 преобразуется в активное вещество Nα-(2,4,6-триизопропилфенилсульфонил)-3-амидино-(L)-фенилаланин-4-этоксикарбонилпиперазид («WX-UK1»), которое ингибирует несколько сериновых протеаз, в особенности uPA. Полное химическое наименование лекарственного средства - (S)-этил 4-(3-(3-(N-гидроксикарбамимидоил)фенил)-2-(2,4,6-триизопропилфенилсульфонамидо)пропаноил) пиперазин-1-карбоксилат.

Упамостат представлен следующей формулой:

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя совместное введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, упамостата вместе с по меньшей мере одним дополнительным агентом, который выбирают из таблицы 1. При использовании способа лечения рака комбинированной терапией, включающей в себя упамостат, упамостат можно вводить перорально в дозе от приблизительно 0,5 мг/кг до приблизительно 1,1 мг/кг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 400 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 150 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 250 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 300 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 350 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 400 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 450 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 550 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 500 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 450 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 350 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 300 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 200 мг до 250 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 750 мг до 1000 мг. В одном варианте осуществления упамостат вводят перорально в суточной дозе от приблизительно 500 мг до 750 мг.

Клофазимин

Известно, что клофазимин, лекарственное средство против проказы, ингибирует дыхательную функцию и, следовательно, энергетический метаболизм у дрожжей и трансформированных фибробластов. Клофазимин представлен следующей формулой:

Было показано, что клофазимин ингибирует скорость роста опухолевых клеток как in vitro, так и in vivo. В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя совместное введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, клофазимина вместе с по меньшей мере одним дополнительным агентом, который выбирают из таблицы 1. В одном варианте осуществления клофазамин вводят перорально пациенту в качестве компонента твердой лекарственной формы для перорального введения. В одном варианте осуществления доза клофазамина в день составляет от приблизительно 50 мг/день до приблизительно 580 мг/день. В одном варианте осуществления максимальная доза клофазамина составляет 100 мг/день до восстановления.

Рифабутин

Рифабутин представлен следующей формулой:

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя совместное введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, рифабутина вместе с по меньшей мере одним дополнительным агентом, который выбирают из таблицы 1. В одном варианте осуществления рифабутин вводят перорально пациенту в качестве компонента твердой лекарственной формы для перорального введения. В одном варианте осуществления доза рифабутина в день составляет от приблизительно 80 мг/день до приблизительно 480 мг/день. В одном варианте осуществления максимальная доза рифабутина составляет 480 мг/день до восстановления. В одном варианте осуществления рифабутин вводят перорально в виде таблетки 150 мг два раза в день. В одном варианте осуществления рифабутин вводят перорально в виде таблетки 300 мг один раз в день. В одном варианте осуществления рифабутин вводят в качестве компонента твердой лекарственной формы для перорального введения, содержащей от 45 мг до 60 мг рифабутина на дозированную форму, до шести раз в день.

Кларитромицин

Кларитромицин представлен следующей формулой:

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя совместное введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, кларитромицина вместе с по меньшей мере одним дополнительным агентом, который выбирают из таблицы 1. В одном варианте осуществления кларитромицин вводят перорально пациенту в качестве компонента твердой лекарственной формы для перорального введения. В одном варианте осуществления кларитромицин вводят пациенту путем внутривенной инфузии.

В одном варианте осуществления доза кларитромицина в день составляет от приблизительно 180 мг/день до приблизительно 1000 мг/день до восстановления. В одном варианте осуществления максимальная доза кларитромицина составляет 980-1000 мг/день до восстановления. В одном варианте осуществления вводят две дозы 500 мг кларитромицина в виде внутривенной (в/в) инфузии, используя раствор с концентрацией приблизительно 2 мг/мл. В одном варианте осуществления 1 грамм кларитромицина ежедневно можно вводить в виде внутривенной (в/в) инфузии в течение периода от двух дней до пяти дней. В одном варианте осуществления 1 грамм кларитромицина в день можно вводить в виде внутривенной (в/в) инфузии в течение периода трех дней. В одном варианте осуществления кларитромицин вводят перорально в виде таблетки 500 мг два раза в день. В одном варианте осуществления кларитромицин вводят в качестве компонента твердой лекарственной формы для перорального введения, содержащей от 95 мг до 125 мг кларитромицина на дозированную форму.

В одном варианте осуществления комбинированная противораковая терапия настоящего описания включает в себя введение пациенту, имеющему рак и нуждающемуся в лечении, рифабутина, кларитромицина и клофазимина в виде одиночной твердой лекарственной формы для перорального введения. В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания содержит рифабутин, кларитромицин, клофазимин и фармацевтически приемлемый носитель, причем количество клофазимина составляет 5-18% мас./мас. относительно количества кларитромицина (например, 7-16%, 9-14%, 9-12%, 10-15% или 0-11% мас./мас.) и 10-25% мас./мас. относительно количества рифабутина (например, 12-25%, 12-23%, 15-25%, 15-23%, 18-25%, 18-23%, 20-25%, 20-23% или 21-23% мас./мас.).

В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания содержит рифабутин, кларитромицин и клофазимин в соотношении 8-10: 18-20: 1-2,5 мас./мас./мас. (например, в соотношении 8,5-9,5: 18,5-19,5: 1,5-2,5 мас./мас./мас. или соотношении 9: 19: 2, причем каждая переменная может варьировать в пределах ±0,5 или 0,25). В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания содержит рифабутин, кларитромицин и клофазимин в приблизительном соотношении 9: 19: 2 мас./мас./мас., причем каждая переменная может варьировать в пределах ±2, 1, 0,5 или 0,25 (например, 9 ± 0,5: 19 ± 5: 2 ± 0,5). Например, в одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания содержит 90 мг рифабутина (±30, 20, 10, 5, 2 или 1 мг), 190 мг кларитромицина (±60, 40, 20, 10, 5, 2 или 1 мг) и 20 мг клофазимина (±10, 7, 5, 2 или 1 мг). В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания содержит 45 мг рифабутина (±15, 10, 7, 5, 2 или 1 мг), 95 мг кларитромицина (±30, 20, 10, 5, 2 или 1 мг) и 10 мг клофазимина (±6, 5, 2 или 1 мг).

В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания, содержащая рифабутин, кларитромицин и клофазамин, дополнительно содержит усилитель всасывания, который может улучшать биодоступность одного или более активных ингредиентов. Количество усилителя всасывания может составлять 300-700% мас./мас. относительно количества клофазимина, включая 400-600%, или 450-550%, или 475-525%. В некоторых вариантах осуществления усилитель всасывания представляет собой полиэтиленгликоль (ПЭГ), например, полиэтиленгликоль со средней молекулярной массой 200-20 000, включая 1000-15 000, или 5000-12 000, или 7000-9000, или 7500-8500, например, ПЭГ 8000.

В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания, содержащая рифабутин, кларитромицин и клофазамин, дополнительно содержит один или более дополнительных эксципиентов, таких как MCC-Tabulose типа 200, стеарат Mg, SLS-Emal 10Pwd HD, полисорбат (например, полисорбат 80) или их комбинацию, включая комбинацию всех перечисленных. В некоторых случаях настоящие композиции включают в себя как полиэтиленгликоль, так и полисорбат, такой как полисорбат 80, причем количество полисорбата составляет 30-120% мас./мас. относительно количества клофазимина (например, 50-100%, 50-85% или 60-75%).

В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания, содержащая рифабутин, кларитромицин и клофазамин, дополнительно содержит один или более дополнительных эксципиентов, таких как микрокристаллическая целлюлоза (MCC) TABULOSE® SC 200), стеарат Mg, лаурилсульфат натрия (SLS) EMAL® 10Pwd HD, полисорбат (например, полисорбат 80) или их комбинацию, включая комбинацию всех перечисленных. В некоторых случаях настоящие композиции включают в себя как полиэтиленгликоль, так и полисорбат, такой как полисорбат 80, причем количество полисорбата составляет 30-120% мас./мас. относительно количества клофазимина (например, 50-100%, 50-85% или 60-75%).

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения имеет капсулу, содержащую 10 мг клофазамина, 95 мг кларитромицина и 45 мг рифабутина вместе с различными эксципиентами, известную как RHB-104. В одном варианте осуществления капсула RHB-104 настоящего изобретения включает в себя следующие компоненты:

Композиция капсул RHB-104

Ингредиент (класс)	Функция
		мг на капсулу	%
Клофазимин (Фармакопея США/Европейская фармакопея).	Активное вещество	10,00	3,23
Рифабутин (Фармакопея США/Европейская фармакопея)	Активное вещество	45,00	14,53
Кларитромицин (Фармакопея США/Европейская фармакопея)	Активное вещество	95,00	30,67
Полиэтиленгликоль 8000 (Национальный формуляр США/Европейская фармакопея)	Диспергирующий агент	50,00	16,14
Полисорбат 80 (Национальный формуляр США/Европейская фармакопея)	Смачивающий агент	6,66	2,15
Микрокристаллическая целлюлоза 200 (Национальный формуляр США/Европейская фармакопея)	Разбавитель	28,00	9,04
Стеарат магния растительного происхождения (Национальный формуляр США/Европейская фармакопея)	Смазывающее вещество	4,68	1,51
Лаурилсульфат натрия (Национальный формуляр США/Европейская фармакопея)	Смачивающий агент	10,00	3,23
Микрокристаллическая целлюлоза 200	Разбавитель	60,42	19,51
Твердая желатиновая капсула (стандарт производителя)	-	1 шт.	-
Всего		309,76	100

В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания доступна в форме таблетки или капсулы, содержащей активное вещество в порошковой форме. В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания имеет форму таблетки или капсулы, содержащей активное вещество в микрокапсулированной форме. В одном варианте осуществления твердая лекарственная форма для перорального введения настоящего описания имеет форму таблетки или капсулы, содержащей активное вещество в микрогранулированной форме.

Ингибиторы сфингозинкиназы

Было показано, что соединение ариладамантана настоящего изобретения способно избирательно ингибировать активность SK2 in vitro. Примеры соединений ариладамантана настоящего изобретения по существу представлены формулой ниже:

или его фармацевтически приемлемыми солями, причем

L представляет собой связь или -C(R_3,R₄)-;

X представляет собой -C(R₃R₄)N(R₅)-, -C(O)N(R₄)-, -N(R₄)C(O)-, -C(R₄,R₅)-, -N(R₄)-, -O-, -S-, -C(O)-, -S(O)₂-, -S(O)₂N(R₄)- или -N(R₄)S(O)₂-;

R₁ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиларниноалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил;

R₂ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂. -CO₂(алкил). -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил, моно- или диалкилтиокарбамоил, алкил-S-алкил, -гетероарил-арил, -алкил-гетероарил-арил, -C(O)- NH-арил, -алкенил-гетероарил, -C(O)-гетероарил или -алкенил-гетероарил-арил;

R₃ представляет собой H, алкил, циклоалкил циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил, алканоил, оксо (=O), -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил;

причем алкильная и кольцевая часть каждой из вышеуказанных групп R₁, R₂ и R₃ необязательно содержит в качестве заместителей до 5 групп, независимо представляющих собой (C₁-C₆) алкил, галоген, галогеналкил, -OC(O)(C₁-C₆ алкил), -C(O)O(C₁-C₆ алкил), -CONR'Rʺ, -OC(O)NR'Rʺ, -NR'C(O)Rʺ, -CF₃, -OCF₃, -OH, C₁-C₆ алкокси, гидроксиалкил, -CN, -CO₂H, -SH, -S-алкил, -SOR'Rʺ, -SO₂R', -NO₂ или NR'Rʺ, при этом R' и Rʺ независимо представляют собой H или (C₁-C₆) алкил и при этом каждая алкильная часть заместителя необязательно содержит в качестве заместителей 1, 2 или 3 группы, которые независимо выбирают из галогена, CN, OH и NH₂; и

R₄ и R₅ независимо представляют собой H или алкил, при условии что, когда R₃ и R₄ находятся у одного атома углерода, а R₃ представляет собой оксо, то R₄ отсутствует.

К соединениям ариладамантана относятся соединения следующей формулы I-1:

или их фармацевтически приемлемые соли, причем:

R₁ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкилaминоалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил; и

R₂ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил, моно- или диалкилтиокарбамоил, алкил-S-алкил, -гетероарил-арил, -алкил-гетероарил-арил, -NH-арил, -алкенил-гетероарил, -гетероарил, -NH-алкил, -NH-циклоалкил или -алкенил-гетероарил-арил,

при этом алкильная и кольцевая часть каждой из вышеуказанных групп R₁ и R₂ необязательно содержит в качестве заместителей до 5 групп, независимо представляющих собой (C₁-C₆) алкил, галоген, галогеналкил, -OC(O)(C₁-C₆ алкил), -C(O)O(C₁-C₆ алкил), -CONR'Rʺ, -OC(O)NR'Rʺ, -NR'C(O)Rʺ, -CF₃, -OCF₃, -OH, C₁-C₆ алкокси, гидроксиалкил, -CN, -CO₂H, -SH, -S-алкил, -SOR'Rʺ, -SO₂R', -NO₂ или NR'Rʺ, при этом R' и Rʺ независимо представляют собой H или (C₁-C₆) алкил и при этом каждая алкильная часть заместителя необязательно содержит в качестве заместителей 1, 2 или 3 группы, которые независимо выбирают из галогена, CN, OH, NH₂.

К соединениям ариладамантана относятся соединения формулы II:

Y представляет собой -C(R₄R₅)-, -N(R₄)-, -O- или -C(O)-;

R₁ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидроксиалкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил;

R₂ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидрокси алкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил, моно- или диалкилтиокарбамоил, алкил-S-алкил, -гетероарил-арил, -алкил-гетероарил-арил, -C(O)- NH-арил, -алкенил-гетероарил, -C(O)-гетероарил или -алкенил-гетероарил-арил;

R₃ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидрокси алкил, алканоил, оксо (=O), -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил;

при этом алкильная и кольцевая часть каждой из вышеуказанных групп R₁, R₂ и R₃ необязательно содержит в качестве заместителей до 5 групп, независимо представляющих собой (C₁-C₆) алкил, галоген, галогеналкил, -OC(O)(C₁-C₆ алкил), -C(O)O(C₁-C₆ алкил), -CONR'Rʺ, -OC(O)NR'Rʺ, -NR'C(O)Rʺ, -CF₃, -OCF₃, -OH, C₁-C₆ алкокси, гидроксиалкил, -CN, -CO₂H, -SH, -S-алкил, -SOR'Rʺ, -SO₂R', -NO₂ или NR'Rʺ, при этом R' и Rʺ независимо представляют собой H или (C₁-C₆) алкил и при этом каждая алкильная часть заместителя необязательно содержит в качестве заместителей 1, 2 или 3 группы, которые независимо выбирают из галогена, CN, OH, NH₂; и

R₄ и R₅ независимо представляют собой H или алкил.

К соединениям формулы II относятся соединения, в которых:

Y представляет собой -C(R₄R₅)- или -N(R₄)-;

R₁ представляет собой H, алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, гетероалкил, арил, алкиларил, алкениларил, гетероциклил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероциклоалкил, алкил-гетероциклоалкил, ацил, ароил, галоген, галогеналкил, алкокси, галогеналкокси, гидрокси алкил, алканоил, -COOH, -OH, -SH, -S-алкил, -CN, -NO₂, -NH₂, -CO₂(алкил), -OC(O)алкил, карбамоил, моно- или диалкиламинокарбамоил, моно- или диалкилкарбамоил, моно- или диалкиламино, аминоалкил, моно- или диалкиламиноалкил, тиокарбамоил или моно- или диалкилтиокарбамоил;

при этом алкильная и кольцевая часть каждой из вышеуказанных групп R₁ и R₂ необязательно содержит в качестве заместителей до 5 групп, независимо представляющих собой (C₁-C₆) алкил, галоген, галогеналкил, -OC(O)(C₁-C₆ алкил), -C(O)O(C₁-C₆ алкил), -CONR₄R₅, -OC(O)NR₄R₅, -NR₄C(O)R₅, -CF₃, -OCF₃, -OH, C₁-C₆ алкокси, гидроксиалкил, -CN, -CO₂H, -SH, -S-алкил, -SOR₄R₅, -SO₂R₄R₅, -NO₂ или NR₄R₅ и при этом каждая алкильная часть заместителя необязательно содержит в качестве заместителей 1, 2 или 3 группы, которые независимо выбирают из галогена, CN, OH, NH₂;

R₃ представляет собой H, алкил или оксо (=O); и

R₄ и R₅ независимо представляют собой H или (C₁-C₆)алкил.

К характерным соединениям формулы II относятся:

Соед.	Химическое название	Y	R3	R1	R2
1	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты изопропиламид	NH	=O
2	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты циклопропиламид	NH	=O
3	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-этилсульфанилэтил)-амид	NH	=O
4	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты фениламид	NH	=O
5	адамантан-1-карбоновой кислоты (4-гидроксифенил)-амид	NH	=O	H
6	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (4-гидроксифенил)-амид	NH	=O
7	уксусной кислоты 4-{[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбонил]-амино}-фениловый эфир	NH	=O
8	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2,4-дигидроксифенил)-амид	NH	=O
9	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (3-гидроксиметилфенил)-амид	NH	=O
10	адамантан-1-карбоновой кислоты (4-цианометилфенил)-амид	NH	=O	H
11	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (4-цианометилфенил)-амид	NH	=O
12	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты бензиламид	NH	=O
13	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-трет-бутилбензиламид	NH	=O
14	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-метилсульфанилбензиламид	NH	=O
15	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3-трифторметилбензиламид	NH	=O
16	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-трифторметилбензиламид	NH	=O
17	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3,5-бис-трифторметилбензиламид	NH	=O
18	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3-фтор-5-трифторметилбензиламид	NH	=O
19	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 2-фтор-4-трифторметилбензиламид	NH	=O
20	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3,5-дифторбензиламид	NH	=O
21	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3,4-дифторбензиламид	NH	=O
22	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3,4,5-трифторбензиламид	NH	=O
23	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3-хлор-4-фторбензиламид	NH	=O
24	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-фтор-3-трифторметилбензиламид	NH	=O
25	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 2-хлор-4-фторбензиламид	NH	=O
26	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-хлор-3-трифторметилбензиламид	NH	=O
27	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3-аминометил-2,4,5,6-тетрахлорбензиламид	NH	=O
28	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [1-(4-хлорфенил)-этил]-амид	NH	=O
29	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [1-(4-бромфенил)-этил]-амид	NH	=O
30	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-метансульфонилбензиламид	NH	=O
31	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-диметиламинобензиламид	NH	=O
32	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-трифторметоксибензиламид	NH	=O
33	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3-трифторметоксибензиламид	NH	=O
34	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-феноксибензиламид	NH	=O
35	адамантан-1-карбоновой кислоты 3,4-дигидроксибензиламид	NH	=O	H
36	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 3,4-дигидроксибензиламид	NH	=O
37	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты фенэтиламид	NH	=O
38	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(4-фторфенил)-этил]-амид	NH	=O
39	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(4-бромфенил)-этил]-амид	NH	=O
40	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(4-гидроксифенил)-этил]-амид	NH	=O
41	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты 4-феноксибензиламид	NH	=O
42	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(3-бром-4-метоксифенил)-этил]-амид	NH	=O
43	адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(3,4-дигидроксифенил)-этил]-амид	NH	=O	H
44	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(3,4-дигидроксифенил)-этил]-амид	NH	=O
45	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-бензо[1,3]диоксол-5-илэтил)-амид	NH	=O
46	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(3-феноксифенил)-этил]-амид	NH	=O
47	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(4-феноксифенил)-этил]-амид	NH	=O
48	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (3-фенилпропил)-амид	NH	=O
49	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (бифенил-4-илметил)-амид	NH	=O
50	адамантан-1-карбоновой кислоты (1-метилпиперидин-4-ил)-амид	NH	=O	H
51	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (1-метилпиперидин-4-ил)-амид	NH	=O
52	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (4-метилпиперазин-1-ил)-амид	NH	=O
53	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (3-трет-бутиламинопропил)-амид	NH	=O
54	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (3-пирролидин-1-илпропил)-амид	NH	=O
55	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [3-(2-оксопирролидин-1-ил)-пропил]-амид	NH	=O
56	адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(1-метилпирролидин-2-ил)-этил]-амид	NH	=O	H
57	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [2-(1-метилпирролидин-2-ил)-этил]-амид	NH	=O
58	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-морфолин-4-илэтил)-амид	NH	=O
59	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-пиперазин-1-илэтил)-амид	NH	=O
60	адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амид	NH	=O	H
61	3-(4-фторфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амид	NH	=O
62	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амид	NH	=O
63	адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амид	NH	=O	H
64	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-пиридин-4-илэтил)-амид	NH	=O
65	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (3-имидазол-1-илпропил)-амид	NH	=O
66	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (2-метил-1H-индол-5-ил)-амид	NH	=O
67	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (1H-тетразол-5-ил)-амид	NH	=O
68	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (9-этил-9H-карбазол-3ил)-амид	NH	=O
69	адамантан-1-карбоновой кислоты [4-(4-хлорфенил)-тиазол-2-ил]амид	NH	=O	H
70	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты [4-(4-хлорфенил)-тиазол-2-ил]-амид	NH	=O
71	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты бензотиазол-2-иламид	NH	=O
72	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (5-хлорбензооксазол-2-ил)-амид	NH	=O
73	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (9H-пурин-6-ил)-амид	NH	=O
75	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-изопропиламин	NH	H
76	4- и -фенол	NH	H
77	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(4-трифторметилбензил)-амин	NH	H
78	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(2-фтор-4-трифторметилбензил)-амин	NH	H
79	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(4-фтор-3-трифторметилбензил)-амин	NH	H
80	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(4-трифторметоксибензил)-амин	NH	H
81	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-[2-(3-феноксифенил)-этил]-амин	NH	H
82	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(1-метилпиперидин-4-ил)-амин	NH	H
83	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(4-метилпиперазин-1-ил)-амин	NH	H
84	N-трет-бутил-N'-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-пропан-1,3-диамин	NH	H
85	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(3-пирролидин-1-илпропил)-амин	NH	H
86	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-[2-(1-метилпирролидин-2-ил)-этил]-амин	NH	H
87	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(2-морфолин-4-илэтил)-амин	NH	H
88	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-пиридин-4-илметиламин	NH	H
89	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-(9-этил-9H-карбазол-3-ил)-амин	NH	H
90	[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-илметил]-[5-(4-хлорфенил)-тиазол-2-ил]-амин	NH	H
91	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этиламин	NH	CH3		H
92	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-изопропиламин	NH	CH3
93	фенил-[1-(3-фениладамантан-1-ил)этил]-амин	NH	CH3
94	{1-[3-(4-фторфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-фениламин	NH	CH3
95	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-фениламин	NH	CH3
96	(1-адамантан-1-илэтил)-бензиламин	NH	CH3	H
97	бензил-[1-(3-фениладамантан-1-ил)-этил]-амин	NH	CH3
98	бензил-{1-[3-(4-фторфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-амин	NH	CH3
99	бензил-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]этил}амин	NH	CH3
100	(4-трет-бутилбензил)-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-амин	NH	CH3
101	[1-(4-бромфенил)-этил]-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-амин	NH	CH3
102	(1-адамантан-1-илэтил)-[2-(4-бромфенил)-этил]амин	NH	CH3	H
103	[2-(4-бромфенил)-этил]-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}амин	NH	CH3
104	(1-адамантан-1-илэтил)-(1-метилпиперидин-4-ил)-амин	NH	CH3	H
105	(1-метилпиперидин-4-ил)-[1-(3-фениладамантан-1-ил)-этил	NH	CH3
106	{1-[3-(4-фторфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(1-метилпиперидин-4-ил)-амин	NH	CH3
107	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(1-метилпиперидин-4-ил)-амин	NH	CH3
108	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(4-метилпиперазин-1-ил)-амин	NH	CH3
109	{1-[3-(фенил)-адамантан-1-ил]-этил}-пиридин-4-илметиламин	NH	CH3
110	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(6-хлорпиридин-3-илметил)-амин	NH	CH3
111	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(2-пиридин-4-илэтил)-амин	NH	CH3
112	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(3H-имидазол-4илметил)-амин	NH	CH3
113	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(2-метил-1H-индол-5-ил)-амин	NH	CH3
114	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(9-этил-9H-карбазол-3-ил)-амин	NH	CH3
115	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(9-этил-9H-карбазол-3-илметил)-амин	NH	CH3
116	9-этил-9H-карбазол-3-карбоновой кислоты {1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-амид	NH	CH3
117	1-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-3-(4-хлор-3-трифторметилфенил)-мочевина	NH	CH3
118	1-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-3-(4-хлор-3-трифторметилфенил)-мочевина	NH	CH3
119	(4-бромтиофен-2-илметил)-{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-амин	NH	CH3
120	{1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этил}-(4-фенилтиофен-2-илметил)-амин	NH	CH3

К характерным соединениям формулы I-1 относятся:

Соед.	Химическое название	R1	R2
121	3-фениладамантан-1-карбоновая кислота		OH
122	3-(4-фторфенил)-адамантан-1-карбоновая кислота		OH
123	3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновая кислота		OH
124	1-адамантан-1-илэтанон	H	CH3
125	1-(3-фениладамантан-1-ил)-этанон		CH3
126	1-[3-(4-фторфенил)-адамантан-1-ил]-этанон		CH3
127	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-этанон		CH3
128	2-(адамантан-1-карбонил)-малоновой кислоты диметиловый эфир	H
129	2-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбонил]-малоновой кислоты диметиловый эфир
130	3-(4-хлорфенил)-1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-пропенон
131	4-{3-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-оксопропенил}-бензонитрил
132	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-(4-гидроксифенил)-пропенон
133	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-нафталин-2-илпропенон
134	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-(6-хлорпиридин-3-ил)-пропенон
135	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-(1H-имидазол-4-ил)-пропенон
136	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-(9-этил-9H-карбазол-3-ил)-пропенон
137	1-[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-ил]-3-(4-фенилтиофен-2-ил)-пропенон

Особенно предпочтительное соединение ариладамантана настоящего изобретения проиллюстрировано ниже и называется ABC294640 [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амид]:

В одном варианте осуществления соединение ариладамантана настоящего изобретения выбирают из соединения формулы 8:

Формула 8

или его фармацевтически приемлемых солей, причем

o R₁ представляет собой H, Cl или F;

o R₂ представляет собой H или алкил;

o m представляет собой 0, 1 или 2;

o n представляет собой 1, 2, 3, 4 или 5;

o каждый R₃ независимо представляет собой H, -C(O)алкил, -C(O)CH₂CH₂C(O)OH, R₄, -C(O)NR₅R₆, -P(O)(OR₇)₂ или глюкозил, при условии что по меньшей мере один R₃ не является H,

o при этом

▪ R₄ представляет собой природную или неприродную аминокислоту, присоединенную через карбоксильный остаток в виде сложного эфира,

▪ R₅ представляет собой H или алкил,

▪ R₆ представляет собой H или алкил, и

каждый R₇ независимо представляет собой H или алкил.

В некоторых вариантах осуществления соединений формулы (I), описанных выше, остаток

представляет собой катехол с заместителем по меньшей мере одним катехол -OH. Например, в одном варианте осуществления остаток

имеет структуру

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления соединений формулы (I), описанных выше, остаток

имеет структуру

В одном особенно предпочтительном варианте осуществления изобретения соединения формулы (I) содержат R₁=Cl, R₂=H, m=2, n=2 и каждый R₃=-C(O)алкил, в особенности -C(O)CH₃.

Например, к соединениям изобретения относятся:

• уксусной кислоты 2-ацетокси-5-(2-{[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбонил]-амино}этил)фениловый эфир;

• пропионовой кислоты 2-пропионилокси-5-(2-{[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбонил]-амино} этил)фениловый эфир;

• масляной кислоты 2-бутирилокси-5-(2-{[3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбонил]-амино}этил])фениловый эфир;

• изомасляной кислоты 5-(2-{[3-(4-хлорфенил)адамантан-1-карбонил {амино}этил)-2-гидроксифениловый эфир и

2-амино-3-метилмасляной кислоты 5-(2-{[3-(4-хлорфенил)адамантан-1-карбонил]амино}этил)-2-гидроксифениловый эфир.

Особенно предпочтительное соединение ариладамантана настоящего изобретения проиллюстрировано ниже и называется ABC294735:

Твердые формы для перорального введения могут содержать фармацевтически приемлемые связующие вещества, подсластители, дезинтегрирующие агенты, разбавители, ароматизаторы, агенты для создания покрытий, консерванты, смазывающие вещества и/или задерживающие агенты. К подходящим связующим соединениям относятся акациевая камедь, желатин, кукурузный крахмал, трагакантовая камедь, альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза или полиэтиленгликоль (ПЭГ). К подходящим подсластителям относятся сахароза, лактоза, глюкоза, аспартам или сахарин. К подходящим дезинтегрирующим агентам относятся кукурузный крахмал, метилцеллюлоза, поливинилпирролидон, ксантановая камедь, бентонит, альгиновая кислота или агар. К подходящим разбавителям относятся лактоза, сорбит, маннит, декстроза, каолин, целлюлоза, карбонат кальция, силикат кальция и фосфат дикальция. К подходящим ароматизирующим агентам относятся масло перечной мяты, винтергреновое масло, вишневый, апельсиновый или малиновый ароматизатор. К подходящим агентам для создания покрытий относятся полимеры или сополимеры акриловой кислоты и/или метакриловой кислоты и/или их сложные эфиры, воски, жирные спирты, зеин, шеллак или глютен. К подходящим консервантам относятся бензоат натрия, витамин Е, альфа-токоферол, аскорбиновая кислота, метилпарабен, пропилпарабен или бисульфит натрия. К подходящим смазывающим веществам относятся стеарат магния, стеариновая кислота, олеат натрия, хлорид натрия или тальк. К подходящим задерживающим агентам относятся глицерилмоностеарат или глицерилддистеарат.

Соединения изобретения, которые, как определено, являются эффективными для предотвращения или лечения заболевания или расстройств у животных, например, у грызунов, собак и обезьян, также могут использоваться при лечении опухолей у людей. Специалистам в области лечения опухолей у людей на основании данных, полученных во время исследований на животных, будут очевидны дозы и способы введения соединений людям. По существу, ожидается, что доза и способ введения людям будут аналогичны дозе и способу у животных.

Способ оценки эффективности лечения субъекта включает в себя определение выраженности рака до лечения способами, хорошо известными в данной области (например, определение размера опухоли или скрининговое исследование на маркеры рака), и последующее введение субъекту средства настоящего изобретения для терапии рака. По прошествии эффективного периода лечения после введения комбинированной терапии (например, 1 дня, 1 недели, 2 недель, одного месяца, шести месяцев) выраженность рака определяют повторно. В одном варианте осуществления модуляция (например, снижение) степени инвазивности рака указывает на эффективность лечения. Выраженность или инвазивность рака можно определять периодически во время лечения. Например, выраженность или инвазивность рака можно определять каждые несколько часов, дней или недель для оценки дальнейшей эффективности лечения. Снижение выраженности или инвазивности рака указывает на то, что лечение является эффективным.

ПРИМЕРЫ

Скрининговое исследование in vivo избранных четырех взятых от пациентов ксенотрансплантатов рака поджелудочной железы на чувствительность к комбинированной противораковой терапии настоящего описания, включающей в себя рифабутин, кларитромицин и клофазамин

RHB-104 представляет собой капсулу с комбинированным лекарственным средством, содержащую три антибиотика - рифабутин, клофазамин и кларитромицин (RedHill Biopharma Ltd) и описанную выше. В данном исследовании проводили скрининг на противоопухолевую эффективность и переносимость RHB-104 in vivo на бестимусных мышах, которым подкожно имплантировали четыре разных взятых от пациентов ксенотрансплантата раковой опухоли поджелудочной железы (взятые от пациентов трансплантаты опухолей, PDX). Четыре модели PAXF были выбраны на основе экспрессии IL6 и IL8 и по чувствительности к стандартному соединению терапии (SoC) гемцитабину. Четырем экспериментам для изучения эффективности предшествовало исследование для подбора дозы на мышах без опухолей.

Целью исследований эффективности было изучение чувствительности опухоли к лечению с помощью RHB-104, применяемому в качестве монотерапии в четырех разных опухолевых моделях. Были выбраны следующие опухолевые модели: PAXF 546, PAXF 736, PAXF 1872 и PAXF 199. Каждый эксперимент состоял из двух групп по три животных, получавших перорально RHB-104 или несущую среду RHB-104. Обработку проводили перорально дважды в день в течение двух недель, после чего следовал двухнедельный период наблюдения. Вычисляли относительные объемы опухолей (RTV) у мышей из контрольной (C) группы и группы лечения (T). Вычисляли среднее значение RTV для мышей из контрольной группы и группы лечения в каждом исследовании, и минимальное значение T/C по RTV и группу, получавшую несущую среду, использовали для оценки противоопухолевой эффективности в день минимального T/C. В конце эксперимента опухоли собирали и быстро замораживали для дальнейшего анализа. Этот эксперимент позволял вычислить задержку роста опухоли.

План исследования для эксперимента по подбору дозы

ИД группы	Терапия	Общая суточная доза [мг/кг/день]	Схема [Дни введения]	Способ введ.	№ животных
1	Несущая среда	10 мл/кг/день	1-21 (ч 0)	п/о	3
2	RHB-104	36	1-21 (ч 0)	п/о	3
3	RHB-104	36/2 * 36/36 (72 мг/кг/день)	0 (ч 12)/1-20 (ч 0+12)/21 (ч 0)	п/о	3
4	RHB-104	54/2 * 54/54 (108 мг/кг/день)	0 (ч 12)/1-20 (ч 0+12)/21 (ч 0)	п/о	3

Несущая среда для RHB-104 - ORA-Plus®.

План исследования для экспериментов по оценке эффективности

ИД группы	Терапия	Общая суточная доза [мг/кг/день]	Схема [Дни введения]	Способ введения	№ животных
1	Несущая среда	10/2 * 10/10 мл/кг/день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	3
2	RHB-104	36/2 * 36/36 (72 мг/кг/день)	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	3

Несущая среда для RHB-104 - ORA-Plus®.

Данные о заборе проб

ИД группы	№ животных для забора проб	Тип пробы, фиксация	Время или временной промежуток после последней обработки	Проба, количество
Все	Все	Опухоли, SF	В конце периода наблюдения	Цельная опухоль

ORA-Plus® (суспендирующая несущая среда для перорального введения): предоставлен в виде раствора от компании Perrigo, Habari; поставка и хранение при температуре окружающей среды.

RHB-104 - предоставлен в виде пилюль от компании Corealis Pharma; поставка при температуре окружающей среды; пилюли давили в ступке с помощью пестика, порошок объединяли и хранили до использования при температуре окружающей среды.

RHB-104 (исследование эффективности) - раствор для введения с концентрацией 3,6 мг/мл, для введения RHB-104 в дозе 36 мг/кг/доза, получали ежедневно, растворяя 26,27 мг сухого вещества (соответствует 8,64 мг активного фармацевтического ингредиента) в 2,4 миллилитра ORA-Plus® и перемешивали (на встряхивателе) при комнатной температуре в течение 5 минут с последующей ультразвуковой обработкой до получения однородной суспензии. Раствор для введения хранили при температуре окружающей среды в защищенном от света месте и использовали в тот же день введения (с встряхиванием перед вторым введением).

RHB-104 (исследование по подбору дозы) - раствор для введения с концентрацией 3,6 мг/мл, для введения RHB-104 в дозе 36 мг/кг/доза, получали ежедневно, растворяя 39,4 мг сухого вещества (соответствует 12,96 мг активного фармацевтического ингредиента) в 3,6 мл ORA-Plus® и перемешивали (на встряхивателе) при комнатной температуре в течение 5 минут с последующей ультразвуковой обработкой до получения однородной суспензии. Раствор для введения хранили при температуре окружающей среды в защищенном от света месте и использовали в тот же день введения (с встряхиванием перед вторым введением).

RHB-104 (исследование по подбору дозы) - раствор для введения с концентрацией 5,4 мг/мл, для введения RHB-104 в дозе 54 мг/кг/доза, получали ежедневно, растворяя 39,4 мг сухого вещества (соответствует 12,96 мг активного фармацевтического ингредиента) в 2,4 мл ORA-Plus® и перемешивали (на встряхивателе) при комнатной температуре в течение 5 минут с последующей ультразвуковой обработкой до получения однородной суспензии. Раствор для введения хранили при температуре окружающей среды в защищенном от света месте и использовали в тот же день введения (с встряхиванием перед вторым введением).

Все растворы для введения вводили в объеме дозы 10 мл/кг.

Грызуны с иммунодефицитом позволяли провести ксенотрансплантацию и выращивание человеческих опухолей. Подкожная имплантация опухоли представляет собой хорошо описанный способ, позволяющий визуализировать и количественно оценивать рост опухоли. Как правило, использовали самок иммунодефицитных мышей NMRI-Foxn1 ^nu. Самцов использовали только в том случае, если это требовалось в опухолевой модели (например, рак предстательной железы) или по другим связанным с наукой причинам. Животных поставляли в возрасте от четырех до шести недель, и их использовали для имплантации после по меньшей мере одной недели карантина. Для участия в процедурах тестирования выбирали только животных с безукоризненным состоянием здоровья. Использованные животные относились к линии NMRI nu/nu.

Ксенотрансплантаты опухолей получали из образцов, взятых у пациентов с раком во время хирургических операций. После хирургического удаления фрагменты опухолей подкожно имплантировали иммунодефицитным мышам, поэтому они называются эксплантами опухоли пациента, привитыми голым мышам подкожно или взятыми от пациентов ксенотрансплантатами опухолей (PDX). Формирование и характеризацию PDX выполняли после первичной имплантации иммунодефицитным мышам (пассаж 1). Ксенотрансплантаты опухолей прививали до формирования устойчивого характера роста. В этот момент исходные культуры PDX ранних пассажей замораживали в жидком азоте. Как правило, конкретную партию культуры использовали только в ограниченном числе последующих пассажей.

Фрагменты опухолей получали от ксенотрансплантатов при последовательном пассаже голым мышам. После извлечения из мыши-донора опухоли разрезали на фрагменты (длина края 3-4 мм) и помещали в PBS, содержащий 10% пенициллин/стрептомицин. Животных-реципиентов анестезировали путем ингаляционного применения изофурана, и имплантаты опухоли вводили подкожно в бок с одной или с обеих сторон. Ксенотрансплантаты опухолей с коэффициентом приживаемости < 65% (таблица 2) имплантировали в виде одной или двух опухолей на мышь, и в случае двусторонней приживаемости одну из этих опухолей эксплантировали перед рандомизацией.

Таблица 2. Обзор экспериментов

Обозначение опухоли/пассаж ¹	Число (пол) животных	Число опухолей, имплантированных животному	Число животных	Медианный объем опухоли в группе²
-	12 (самки)	0	12	-
PAXF 546/8N4	12 (самки)	1	6	133,5-153,5
PAXF 736/9N2	12 (самки)	1	6	100,1-102,7
PAXF 1872/6N2	12 (самки)	1	6	105,0-107,6
PAXF 1998/5N2	12 (самки)	1	6	116,5-120,3

¹ Цифровое обозначение перед N представляет собой общее число пассажей, а цифровое обозначение после N представляет собой номер пассажа после последнего цикла замораживания/оттаивания.

² Диапазон в момент рандомизации [мм³]

Животных и имплантаты опухолей контролировали ежедневно до тех пор, пока у достаточного числа животных не стали отмечаться четкие признаки начала роста солидной опухоли. При рандомизации определяли объем растущих опухолей. Затем животных, удовлетворяющих критериям рандомизации (т. е. имеющих опухоли 50-250 мм³, предпочтительно 80-200 мм³), распределяли по экспериментальным группам, стремясь получить сопоставимые медианные и средние по группе объемы опухолей приблизительно 100-120 мм³. Нерандомизированных животных усыпляли. День рандомизации обозначен в эксперименте как день 0.

Процентная доля всех имплантатов опухолей, подходящих для рандомизации по стандартному объему, определяется как коэффициент приживаемости по следующему уравнению:

Медианную приживаемость вычисляли для целей характеризации (см. таблицу 3, где приведены медианные коэффициенты приживаемости PDX, использованных в настоящем исследовании). Для вычисления числа животных и фрагментов опухолей, необходимых для имплантации, учитывали медианный коэффициент приживаемости.

Время от имплантации до рандомизации при стандартном объеме опухоли, выраженное в днях, обозначали как «время индукции (IT)». Медианное значение IT вычисляли для целей характеризации (см. таблицу 2, где приведены медианные IT для PDX, использованных в настоящем исследовании).

Таблица 3. Характеристики ксенотрансплантатов человеческих опухолей

Опухоль Обозначение	Гистология/ дифференциация	Происхождение	Стадия	Возраст (пол) пациента	TR [%]	IT [дни]	Td [дни]
PAXF 546	аденосквамозная карцинома хорошо	Метастазы	M1 печень, брюшная полость	70 (самец)	75	18	6,5
PAXF 736	аденокарцинома, слабо	Рецидив	M1	65 (самец)	77	18	8,5
PAXF 1872	аденокарцинома, умеренно	Первичная	pT1pN1pMx	39 (самка)	80	20	6,1
PAXF 1998	аденокарцинома, умеренно	Первичная	pT3pN1pM1 (неблаго-приятная реакция на препарат (ADR))	74 (самец)	80	22	5,6

TR - коэффициент приживаемости; IT - время индукции; Td - время удвоения объема опухоли: типичные значения (медиана)

Животных взвешивали дважды в неделю или ежедневно, если регистрировали потерю массы тела более 15%. Относительные массы тела (RBW) индивидуальных животных вычисляли путем деления индивидуальной массы тела в день X (BW_x) на индивидуальную массу тела в день 0 (BW₀) и умножения на 100%:

.

Также вычисляли медианные относительные массы тела по группам, учитывая только животных, которые были живы в рассматриваемый день.

Абсолютные объемы опухолей (ATV) определяли путем двухмерного измерения штангенциркулем в день рандомизации, а затем дважды в неделю. Объемы опухолей вычисляли по формуле:

Объем опухоли=(a x b²) x 0,5,

где a представляет собой самый большой, а b - перпендикулярный диаметр опухоли, причем опухоль принимали за идеализированный эллипсоид.

Относительные объемы индивидуальных опухолей (индивидуальные RTV) в день Х вычисляли путем деления абсолютного индивидуального объема опухоли в день Х (T_x) на абсолютный индивидуальный объем этой же опухоли в день 0 (T₀) и умножения на 100%:

.

Медианные значения RTV по группам использовали для построения кривых роста и для оценки лечения, пока по меньшей мере 50% животных в группе оставались живыми, или минимум для трех животных.

Для вычисления медианных объемов опухолей по группам учитывали значения для животных, остававшихся живыми в рассматриваемый день. Кроме того, объемы опухолей у животных, которые были усыплены из-за их опухолевой нагрузки, переносили с использованием методологии переноса данных последнего наблюдения (Last-Observation-Carried-Forward, LOCF), пока это увеличивало медианный объем опухоли в группе.

Введение в настоящем исследовании проводили так, как описано в таблице 4. Первый день введения представляет собой либо день рандомизации (день 0, см. ниже), либо следующий день (день 1, но не позднее 24 часов после рандомизации), как видно из таблицы 4.

Время первой дозы в день введения обозначено как ч 0. Множество суточных доз одного реагента указаны временным интервалом между терапией, например ч 0+12. Терапия другими реагентами, там, где это применимо, указана относительно первой суточной дозы, например ч 8.

Таблица 4. Противоопухолевая эффективность

Терапия¹	Уровень дозы [мг/кг/ день]	Схема [день]	Введе-ния	Минимальное T/C [%] (день)²	Коэффициент эффектив-ности	Td [дни]	Tq [дни]
Опухолевая модель PAXF 546 - эксп. Q255
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/ день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	н/п	н/п	5,1	18,5
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	67,7 (28)	-	6,4	20,8
Опухолевая модель PAXF 736 - эксп. Q256
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/ день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	н/п	н/п	4,5	8,6
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	71,1 (10)	-	5,9	11,2
Опухолевая модель PAXF 1872 - эксп. Q257
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/ день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	н/п	н/п	3,7	8,2
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	58,3 (14)	+/-	6,0	10,4
Опухолевая модель PAXF 1998 - эксп. Q258
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/ день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	н/п	н/п	3,5	9,3
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	п/о	86,4 (16)	-	3,4	8,9

н/п - не применимо; н/д - не достигнуто (т. е. медианные значения RTV по группам всегда < 200%/400%)

Коэффициент эффективности: ++++: T/C < 5%, +++: T/C 5-< 10%; ++: T/C 10-< 25%; +: T/C 25-< 50%; +/-: T/C 50-65%;-: T/C≥65%

1 Несущая среда для RHB-104 - ORA-Plus®.

2 Минимальные значения T/C вычисляли на основе медианных значений.

Если при исследованиях эффективности отмечались существенные потери массы тела, предпринимались следующие меры:

терапия не проводилась для индивидуальных животных с потерей массы тела > 20%;

ежедневные измерения массы тела индивидуальных животных с потерей массы тела > 15%;

облегченный доступ к корму и воде для животных с потерей массы тела > 20%;

возобновление введения, когда индивидуальные животные восстанавливали относительную массу тела до по меньшей мере 85%.

Эксперименты по эффективности обычно завершали самое раннее через четыре недели после начала введения, включая стандартный двухнедельный период наблюдения после завершения лечения.

Максимальная переносимая доза (МПД) в настоящем документе определяется как доза, которая должна обеспечивать непрерывное лечение животного соответствующим соединением в соответствии с запланированным графиком без применения корректировок дозы или критериев прекращения. Это определение также применимо к схемам комбинированной терапии. Исследования по подбору доз проводили на животных без опухолей.

Коэффициент общей выживаемости (таблица 5) вычисляли путем подсчета в каждой группе числа животных, которые остались бы в живых после последнего дня эксперимента, и деления этого числа на общее число животных в группе. Животные в группе, которые погибли или были усыплены в последний день по причине, отличной от сбора проб или завершения работы с группой, не учитывались как выжившие. Скорректированный коэффициент выживаемости в таблице 6 вычисляли путем подсчета всех выживших животных, включая тех, которые были усыплены по причинам, связанным с опухолью, и деления на общее число животных в группе. Связанными с опухолью причинами для усыпления считали следующие: 1) опухоли, удовлетворяющие по объему критериям завершения, включая дополнительные опухоли, и 2) изъязвленные опухоли. Усыпление животных вследствие симптомов индуцированной опухолью кахексии не считалось связанным с опухолью.

Таблица 5. Потери массы тела и коэффициенты выживаемости

Терапия	Уровень дозы [мг/кг/день]	График [день]	Последний день для группы	Максимальная медианная BWL [%] (день)¹	Общий коэффициент выживаемости²
Контроль с несущей средой	10 мл/кг/день	0-21 (ч 0)	28	н/а	3/3 (100%)
RHB-104	36	0-21 (ч 0)	28	2,4 (1)	3/3 (100%)
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-20 (ч 0+12)/21 (ч 0)	28	н/а	3/3 (100%)
RHB-104	54/2 * 54/54	0 (ч 12)/1-20 (ч 0+12)/21 (ч 0)	28	н/а	3/3 (100%)

Несущая среда для RHB-104 - ORA-Plus®.

1 День, в который зарегистрирована минимальная медианная масса тела; н/а - не актуально, потеря массы тела не зарегистрирована (т. е. медианные RBW в группе всегда > 100%).

2 Число животных, которые остались бы в живых после последнего дня эксперимента, от общего числа животных в группе.

3 Коэффициент выживаемости, скорректированный на (т. е. не учитывающий) всех животных, усыпленных по причинам, связанным с опухолью.

Таблица 6. Медианные потери массы тела и скорректированные коэффициенты выживаемости

Терапия	Уровень дозы [мг/кг/ день]	Схема [день]	Последний день для группы	Максимальная медианная BWL [%] (день)¹	Общий коэффициент выживаемости²	Усыпление по причинам, связанным с опухолью (день)	Скорректированный коэффициент выживаемости³
Опухолевая модель PAXF 546* - эксп. Q255
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	6,8 (28)	2/3 (67%)	1 x TV > 2000 мм³(28)	100%
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	0,7 (21)	2/3 (67%)	1 x TV > 2000 мм³(28)	100%
Опухолевая модель PAXF 736 - эксп. Q256
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	н/а	1/3 (33%)	2 x TV > 2000 мм³(24,24)	100%
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	н/а	2/3 (67%)	1 x TV > 2000 мм³(21)	100%
Опухолевая модель PAXF 1872 - эксп. Q257
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	1,0 (7)	1/3 (33%)	2 x TV > 2000 мм³(21,21)	100%
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	28	н/а	2/3 (67%)	1 x TV > 2000 мм³(25)	100%
Опухолевая модель PAXF 1998 - эксп. Q258
Контроль с несущей средой	10/2 * 10/10 мл/кг/день	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	27	2,3 (13)	1/3 (33%)	2 x TV > 2000 мм³ (20,20)	100%
RHB-104	36/2 * 36/36	0 (ч 12)/1-13 (ч 0+12)/14 (ч 0)	27	н/а	1/3 (33%)	2 x TV > 2000 мм³ (20,20)	100%

Несущая среда для RHB-104 - ORA-Plus®.

Время двукратного/четырехкратного увеличения объема опухоли (Td/Tq) для тестовой и контрольной групп определяется как интервал времени (в днях), необходимый, чтобы группа достигла медианного RTV 200%/400%. Данные представлены в таблице 4.

Соотношение тестового и контрольного значений в конкретный день (T/C в %) вычисляется как соотношение медианных значений RTV тестовой и контрольной групп в день x, умноженное на 100%.

Минимальное значение T/C, зарегистрированное для конкретной тестовой группы во время эксперимента, представляет собой максимальную противоопухолевую эффективность соответствующего лечения. Минимальные значения T/C вычисляли, если по меньшей мере 50% и по меньшей мере трое из рандомизированных животных в тестовой и в контрольной группах оставались в живых в рассматриваемый день. Минимальные значения T/C всегда вычисляли без использования методологии LOCF.

Минимальные значения T/C в группах применяли в коэффициенте эффективности следующим образом:

-	Нет активности	T/C ≥ 65%
+/-	Пограничная эффективность	50% ≤ T/C < 65%
+	Умеренная эффективность	25% ≤ T/C < 50%
++	Высокая эффективность	10% ≤ T/C < 25%
++ +	Очень высокая эффективность	5% ≤ T/C < 10%
++ ++	Полная ремиссия	T/C < 5%

Статистическую значимость противоопухолевой эффективности оценивали при помощи непараметрического критерия Краскела - Уоллиса с последующим вторичным определением критерия Данна. Индивидуальные RTV для тестовой и контрольной групп сравнивали в те дни, когда в соответствующих тестовых группах достигались минимальные значения T/C. Как правило, статистический анализ проводят только в том случае, если по меньшей мере 50% исходно рандомизированных животных (и по меньшей мере четыре животных) в соответствующей группе остаются в живых, но в этом исследовании размер группы при рандомизации составил всего трое животных и, следовательно, результат статистической оценки менее достоверный, чем был бы в исследовании с группами большего размера. Принято, что значения p≤0,05 указывают на достоверное ингибирование опухоли.

Обзор экспериментов представлен в таблице 3. Результаты представлены в таблице 4 и на ФИГ. 1-5.

В этом исследовании противоопухолевую эффективность RHB-104 оценивали во время монотерапии на мышах с иммунодефицитом, которым подкожно имплантировали четыре разных панкреатических PDX. В группах из трех животных соединение вводили перорально дважды в день в течение двух недель, после чего следовал двухнедельный период наблюдения. В конце эксперимента опухоли от всех животных собирали и быстро замораживали для дальнейшего анализа. Противоопухолевую эффективность оценивали как минимальное значение T/C, которое вычисляли по медианным по группе относительным объемам опухолей (RTV) в группе лечения в сравнении с контрольной группой, получавшей несущую среду RHB-104 (ORA-Plus). Статистическую значимость ингибирования роста опухоли оценивали в день минимального T/C при помощи непараметрического критерия Краскелла - Уоллиса для относительных объемов опухолей с последующим вторичным определением критерия Данна. Экспериментам по эффективности предшествовало исследование по подбору дозы, проведенное на не имеющих опухолей мышах, в котором группы из трех мышей получали перорально RHB-104 в течение трех недель по трем разным схемам. Вводили либо дозу на уровне 36 мг/кг один раз в день, либо дозу на уровне 36 мг/кг или 54 мг/кг дважды в день. Кроме того, одной группе давали ORA-Plus®, несущую среду для RHB-104 (группа 1). Как проиллюстрировано на ФИГ. 6A-6E, RHB-104 хорошо переносился не имеющими опухолей мышами, если судить по потерям массы тела и коэффициентам выживаемости. Как показано на ФИГ. 6A, наблюдали небольшую BWL 2,4% в день 1 исследования в группе, получавшей обработку один раз в день дозой 36 мг/кг (группа 2), в других группах BWL не наблюдалась, и коэффициенты выживаемости составляли 100% во всех четырех группах. На основании этих наблюдений было принято решение в экспериментах по эффективности вводить мышам, являющимся носителями опухолей, RHB-104 в дозе на уровне 36 мг/кг дважды в день.

Наибольшую чувствительность к лечению RHB-104 наблюдали в опухолевой модели PAXF 1872, где в последний день лечения было достигнуто минимальное значение T/C 58,3%, классифицированное как противоопухолевая эффективность. Лечение при помощи RHB-104 в трех других опухолевых моделях приводило к минимальным значениям T/C 67,7%, 71,1% и 86,4% для опухолевых моделей PAXF 546, PAXF 736 и PAXF 1998 соответственно.

В таблице 4 и на ФИГ. 6A-6E представлены результаты по изменению массы тела, выживаемости и данным наблюдений. Лечение при помощи RHB-104 хорошо переносилось, при этом BWL≤0,7% и скорректированные коэффициенты выживаемости составляли 100% во всех четырех опухолевых моделях. Известно, что опухолевая модель PAXF 546 приводит к индукции кахексии, и в данном случае наблюдали умеренную BWL 6,8% в контрольной группе, получавшей несущую среду.

Лечение при помощи RHB-104 хорошо переносилось, причем BWL≤0,7% и скорректированные коэффициенты выживаемости составляли 100% во всех четырех опухолевых моделях.

RHB-104 тестировали при пероральном введении два раза в день в дозе на уровне 36 мг/кг группе из трех мышей, и противоопухолевую эффективность оценивали как минимальное значение T/C, вычисленное на основе медианных относительных объемов опухолей (RTV) по группам. Статистическую значимость оценивали в день минимального значения T/C при помощи непараметрического критерия Краскелла - Уоллиса для RTV в сравнении с контрольной группой, получавшей несущую среду RHB-104. Период лечения в экспериментах по эффективности длился две недели, за которыми следовал двухнедельный период наблюдения, после которого опухоли собирали и быстро замораживали для дальнейшего анализа. В эксперименте по подбору дозы лечение продолжалось три недели, и за ним следовал недельный период наблюдения. В исследовании по подбору дозы наблюдали хорошую переносимость RHB-104, причем RHB-104 тестировали в группах из трех мышей, получавших три разные схемы, и дополнительно использовали одну группу из трех мышей, получавших ORA-Plus®, несущую среду RHB-104. Во всех четырех группах наблюдали BWL≤2,4% и скорректированные коэффициенты выживаемости 100%.

Влияние RHB-104 на индуцированную LPS продукцию цитокинов у мышей C57BL/6

Данное исследование проводили для оценки влияния RHB-104 (как подробно описано выше), вводимого перорально при 108 мг/кг на индуцированную липополисахаридом (LPS) продукцию цитокинов у мышей. Модель с индуцированной LPS продукцией цитокинов у мышей часто используют для тестирования на способность соединений подавлять продукцию провоспалительных цитокинов ФНО и IL-6 in vivo.

В этой модели LPS вводят мышам внутрибрюшинно (в/б) или внутривенно. Через два часа после инъекции LPS концентрации IL-6 и ФНО в сыворотке крови получивших инъекцию мышей достигают пиковых уровней. В это время концентрация противовоспалительного цитокина IL-10 также возрастает, однако концентрация в сыворотке IL-10 достигает пика приблизительно через 6 часов после введения LPS.

30 самкам мышей C57BL/6 возрастом 11 недель однократно вводили RHB-104, после чего через 1 час вводили LPS. Через 2 часа после инъекции LPS у мышей забирали кровь и выделяли сыворотку. В сыворотке измеряли концентрацию цитокинов. В качестве положительного контроля подавления иммунного ответа вводили дексаметазон в дозе 5 мг/кг в/б. Дексаметазон подавляет продукцию провоспалительных цитокинов ФНО и IL-6 и усиливает продукцию противовоспалительного цитокина IL-10.

В исследовании использовали 3 группы в соответствии с таблицей 7 ниже.

Таблица 7. План исследования

Группа	№ мышей	Лечение	Доза	Способ	Частота	Объем	Цель
1	10	Несущая среда (Ora-Plus)	-	п/о	Однократно	15 мл/кг	Отрицательный контроль
2	10	Дексаметазон	5 мг/кг	в/б	Однократно	10 мл/кг	Положительный контроль
3	10	RHB-104	108 мг/кг	п/о	Однократно	15 мл/кг	Тест

Концентрации IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, ИФН-γ и ФНО в сыворотке измеряли, используя набор для анализа на цитокины с использованием микросфер (CBA) Th1/Th2/Th17 (Becton Dickinson). Концентрации цитокинов в сыворотке в разных группах сравнивали с использованием 2-стороннего t-критерия Стьюдента.

Концентрации IL-2, IL-4, IL-17 и ИФН-γ в сыворотке были ниже порога определения во всех группах, как и ожидалось для этой модели. Концентрации IL-6, ФНО и IL-10 в сыворотке представлены в таблице 8 ниже и на ФИГ. 7, 8 и 9.

Таблица 8. Концентрации цитокинов в сыворотке

Группа	Масса тела (г) ± СО	Значение P	IL-6 (пг/мл) ± СО	Значение P	ФНО (пг/мл) ± СО	Значение P	IL-10 (пг/мл) ± СО	Значение P
1	20,07 ± 0,89		5092 ± 1515		332 ± 148		76 ± 72
2	20,19 ± 0,84	0,7610	1259 ± 295	0,0000*	35 ± 10	0,0000*	106 ± 66	0,3451
3	20,09 ± 0,96	0,9620	2618 ± 962	0,0004*	154 ± 62	0,0025*	63 ± 40	0,6133

p < 0,05

В сыворотке получавших несущую среду мышей концентрации IL-6, ФНО и IL-10 были такими, как и ожидалось для этой модели (ФИГ. 7-9).

В группе, получавшей обработку дексаметазоном, концентрации в сыворотке провоспалительных цитокинов IL-6 и ФНО были существенно ниже, чем в группе, получавшей обработку несущей средой, как и ожидалось (ФИГ. 7 и 8). Концентрация IL-10 была выше, чем в группе, получавшей несущую среду, но разница не была статистически значимой (ФИГ. 9). Эти результаты подтверждают, что дексаметазон работает как положительный контроль.

Мыши, получавшие обработку RHB-104, имели в сыворотке существенно более низкие концентрации IL-6 и ФНО, чем группа, получавшая обработку несущей средой (ФИГ. 7 и 8). Концентрация IL-10 существенно не отличалась от контрольных мышей, получавших несущую среду (ФИГ. 9).

Анализ цитотоксичности in vitro

Следующий эксперимент был проведен для оценки потенциальной способности комбинированных агентов настоящего описания ингибировать рост или пролиферацию клеток рака поджелудочной железы, включающей в себя приведение к контакт клеток рака поджелудочной железы с эффективными количествами агентов, по отдельности или в комбинации, с ингибированием таким образом роста или пролиферации клеток рака поджелудочной железы.

В настоящем исследовании изучали, будет ли комбинация кларитромицин+рифабутин+клофазамин (Combo) действовать синергетически с [3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)амидом] («ABC2640») в отношении клеток рака поджелудочной железы линий MIA PaCa-2, PANC-1 и Hs 766T. Hs 766T представляет собой клеточную линию, полученную из метастаза в лимфоузле у 64-летнего мужчины с карциномой поджелудочной железы. MIA PaCa-2 представляет собой клеточную линию, полученную из аденокарциномы поджелудочной железы 65-летнего мужчины, имеющего боль в брюшной полости в течение 6 месяцев и пальпируемую массу в верхней части брюшной полости. PANC-1 культивирована от 56-летнего мужчины с аденокарциномой в головке поджелудочной железы, которая проникла в стенку двенадцатиперстной кишки.

Анализ MTT часто применяют для определения цитотоксичности потенциальных медицинских агентов, поскольку ожидается, что материалы этих типов будут стимулировать или ингибировать жизнеспособность и рост клеток. Вкратце, клетки высевали в количестве 3000 клеток на лунку, 100 мкл/лунка. После ночи, перед анализом, из каждой лунки извлекали по 50 мкл супернатанта. Каждое лекарственное средство добавляли в 4-кратной концентрации относительно конечной концентрации (в 50 мкл). Общий объем каждой лунки составлял 200 мкл. 4 лунки использовали в качестве контроля, и они не содержали клеток. Планшету проявляли после инкубации в течение 3 дней при 37 °C. В каждую лунку добавляли по 20 мкл реагента Promega Substrate Cell Titer 96 Aqueous One Solution Reagent, инкубировали при 37 °C, и считывали оптическую плотность при 490 нм. Тест MTT основан на ферментативном восстановлении тетразолиевой соли MTT [3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолийбромид++ +] в живых метаболически активных клетках, но не в мертвых клетках. Реакцию проводят in situ в многолуночных планшетах, и продукт реакции, формазан пурпурного цвета, растворимый в диметилсульфоксиде, определяют колориметрически на считывателе для многолуночных планшет.

Результат для Hs 766T

Агент	Концентрация (мкМ)	Токсичность (%)
кларитромицин	100	29
рифабутин	70	20
Клофазамин	5	62
Combo	выше	59
ABC640	25	17
ABC640	50	72
UK-1	5	35
UK-1	10	28
UK-1	20	19
Combo+ABC₂₅	выше	96
Combo+ABC₅₀	выше	95
Combo+UK-1₅	выше	81
Combo+UK-1₁₀	выше	93
Combo+UK-1₂₀	выше	96
Combo+UK-1₁₀+ABC₂₅	выше	96
Combo+UK-1₁₀+ABC₅₀	выше	95

Результаты для MIA PaCa-2

Агент	Концентрация (мкМ)	Токсичность (%)
кларитромицин	100	0
рифабутин	35	8
Клофазамин	5	4
Combo	выше	64
ABC640	25	11
ABC640	50	92
UK-1	5	33
UK-1	10	0
UK-1	20	0
Combo+ABC₂₅	выше	96
Combo+ABC₅₀	выше	96
Combo+UK-1₅	выше	95
Combo+UK-1₁₀	выше	97
Combo+UK-1₂₀	выше	97
Combo+UK-1₁₀+ABC₂₅	выше	96
Combo+UK-1₁₀+ABC₅₀	выше	97

Результаты для PANC-1

Агент	Концентрация (мкМ)	Токсичность (%)
кларитромицин	100	7
рифабутин	70	0
Клофазамин	5	41
Combo	выше	79
ABC640	25	0
ABC640	50	68
UK-1	5	0
UK-1	10	0
UK-1	20	14
Combo+ABC₂₅	выше	86
Combo+ABC₅₀	выше	96
Combo+UK-1₅	выше	70
Combo+UK-1₁₀	выше	80
Combo+UK-1₂₀	выше	97
Combo+UK-1₁₀+ABC₂₅	выше	94
Combo+UK-1₁₀+ABC₅₀	выше	92

В анализах МТТ авторы изобретения обнаружили противоопухолевые взаимодействия протестированных агентов с характером от аддитивного до синергетического во всех трех клеточных линиях. Комбинированная терапия с использованием этих агентов может повышать долю ответов различных видов рака на эти лекарственные средства и может существенно снижать побочные эффекты, позволяя вводить более низкую терапевтическую дозу. Эти новые комбинации синергетически снижают рост раковых клеток, не увеличивая профиль токсичности в сравнении с индивидуальными лекарственными средствами.

Анализ in vivo WX-671, пролекарства для ингибитора uPA, с точки зрения распространения опухоли, роста опухоли и метастазирования опухоли у крыс

Модель рака молочной железы

Фрагменты опухоли молочной железы BN472 размером 10-25 мм³ (Kort et al., J. Natl. Cancer Inst 72, 709-713, 1984) от животного-донора имплантировали под жировое тело молочной железы в группах (n=15 на группу) самок норвежских коричневых крыс в возрасте 7-8 недель. Обработку начинали через 72 ч после имплантации опухоли и повторяли ежедневно до умерщвления животных через 30 дней. Контрольная группа (A) получала перорально через зонд 0,75 мл не содержащего вещества раствора носителя, состоящего из 5% этанола, 5% D-маннита и 5% Tween 20 в воде. Группы лечения (B и C) получали перорально через зонд либо 1 мг/кг (группа B), либо 5 мг/кг (группа C) WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл. Группа сравнения D получала 1 мг/кг WX-UK1, растворенного в 5% растворе D-маннита, путем внутрибрюшинной инъекции.

Рост инокулированных опухолей определяли по длине и ширине два раза в неделю, используя штангенциркуль. После умерщвления животных определяли конечные точки терапии, массу опухоли, массы подмышечных и внутрибрюшинных лимфоузлов, а также количество макроскопических метастазов в легких.

Во всех экспериментах обработка при помощи WX-671 обеспечивала существенное сокращение размера и, соответственно, массы опухолей, а также количества и, соответственно, массы метастазов по сравнению с контрольной группой. В модели опухоли молочной железы средние массы опухолей в конце обработки в группе, получавшей обработку WX-671, снижались более чем на 66% (п/о) по сравнению с контролем, а в/б обработка сопоставимым ингибирующим веществом WX-UK1 приводила лишь к снижению на приблизительно 5%. Число легочных очагов в группах, получавших обработку пролекарством ингибитора, снижалось более чем на 42% (п/о), а средние массы подмышечных лимфоузлов снижались более чем на 63% (п/о).

Повышение массы тела и сравнение масс органов в группах, получавших обработку ингибитором, и группах, получавших обработку несущей средой, не приводило к выявлению признаков возможной существенной токсичности ингибитора в описанных условиях.

Пример возможного использования анализа in vivo ингибитора SK2 (ABC294640) и WX-671, пролекарства ингибитора uPA, с точки зрения распространения опухоли, роста опухоли и метастазирования опухоли у крыс

Модель рака молочной железы

Фрагменты опухоли молочной железы BN472 размером 10-25 мм³ (Kort et al., J. Natl. Cancer Inst 72, 709-713, 1984) от животного-донора имплантируют под жировое тело молочной железы в группах (n=15 на группу) самок норвежских коричневых крыс в возрасте 7-8 недель. Обработку начинают через 72 ч после имплантации опухоли и повторяют ежедневно до умерщвления животных через 30 дней. Контрольная группа (A) получает перорально через зонд 0,75 мл не содержащего вещества раствора носителя, состоящего из 5% этанола, 5% D-маннита и 5% Tween 20 в воде. Группы лечения (B и C) получают перорально через зонд либо 50 мг/кг (группа B), либо 100 мг/кг (группа C) ABC294640 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл. Группы лечения (D и E) получают перорально через зонд либо 1 мг/кг (группа D), либо 5 мг/кг (группа E) WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл. Группы лечения (F и G) получают перорально через зонд либо 1 мг/кг WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл вместе с 50 мг/кг ABC294640 (группа F), либо 5 мг/кг WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл вместе со 100 мг/кг ABC294640 (группа G).

Рост инокулированных опухолей определяют по длине и ширине два раза в неделю, используя штангенциркуль. После умерщвления животных определяют конечные точки терапии, массу опухоли, массы подмышечных и внутрибрюшинных лимфоузлов, а также число макроскопических метастазов в легких.

Считается, что обработка при помощи комбинации WX-671 и ABC294640 обеспечит существенное сокращение размера и, соответственно, массы опухолей, а также числа и, соответственно, массы метастазов по сравнению с группами лечения, получавшими любой из агентов в отдельности. В некоторых вариантах осуществления комбинированная терапия приводила к снижению на приблизительно 10% или более, приблизительно 20% или более, приблизительно 30% или более, приблизительно 40% или более, приблизительно 50% или более, приблизительно 60% или более, приблизительно 70% или более, приблизительно 80% или более, приблизительно 90% или более, приблизительно 95% или более, приблизительно 99% или более размера и, соответственно, массы опухолей, а также числа и, соответственно, массы метастазов по сравнению с группами лечения, получавшими любой из агентов в отдельности.

Пример возможного использования анализа in vivo WX-671, пролекарства ингибитора uPA, и кларитромицина с точки зрения распространения опухоли, роста опухоли и метастазирования опухоли у крыс

Модель рака молочной железы

Фрагменты опухоли молочной железы BN472 размером 10-25 мм³ (Kort et al., J. Natl. Cancer Inst 72, 709-713, 1984) от животного-донора имплантируют под жировое тело молочной железы в группах (n=15 на группу) самок норвежских коричневых крыс в возрасте 7-8 недель. Обработку начинают через 72 ч после имплантации опухоли и повторяют ежедневно до умерщвления животных через 30 дней. Контрольная группа (A) получает перорально через зонд 0,75 мл не содержащего вещества раствора носителя, состоящего из 5% этанола, 5% D-маннита и 5% Tween 20 в воде. Группы лечения (B и C) получали перорально через зонд либо 1 мг/кг (группа B), либо 5 мг/кг (группа C) WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл. Группы лечения (D и E) получают перорально через зонд либо 10 мг/кг/сутки (группа D), либо 50 мг/кг/сутки (группа E) CAM. Группы лечения (F и G) получают перорально через зонд либо 1 мг/кг WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл вместе с 10 мг/кг CAM (группа F), либо 5 мг/кг WX-671 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл вместе со 50 мг/кг CAM (группа G).

Считается, что обработка при помощи комбинации WX-671 и CAM обеспечит существенное снижение размера и, соответственно, массы опухолей, а также числа и, соответственно, массы метастазов по сравнению с группами лечения, получавшими любой из агентов в отдельности.

В некоторых вариантах осуществления комбинированная терапия приводила к снижению на приблизительно 10% или более, приблизительно 20% или более, приблизительно 30% или более, приблизительно 40% или более, приблизительно 50% или более, приблизительно 60% или более, приблизительно 70% или более, приблизительно 80% или более, приблизительно 90% или более, приблизительно 95% или более, приблизительно 99% или более размера и, соответственно, массы опухолей, а также числа и, соответственно, массы метастазов по сравнению с группами лечения, получавшими любой из агентов в отдельности.

Пример возможного использования анализа in vivo ABC294640, ингибитора SK2, и кларитромицина с точки зрения распространения опухоли, роста опухоли и метастазирования опухоли у крыс

Модель рака молочной железы

Фрагменты опухоли молочной железы BN472 размером 10-25 мм (Kort et al., J. Natl. Cancer Inst 72, 709-713, 1984) от животного-донора имплантируют под жировое тело молочной железы в группах (n=15 на группу) самок норвежских коричневых крыс в возрасте 7-8 недель. Обработку начинают через 72 ч после имплантации опухоли и повторяют ежедневно до умерщвления животных через 30 дней. Контрольная группа (A) получает перорально через зонд 0,75 мл не содержащего вещества раствора носителя, состоящего из 5% этанола, 5% D-маннита и 5% Tween 20 в воде. Группы лечения (B и C) получают перорально через зонд либо 50 мг/кг (группа B), либо 100 мг/кг (группа C) ABC294640 в объеме вещества раствора-носителя 0,75 мл. Группы лечения (D и E) получают перорально через зонд либо 10 мг/кг/сутки (группа D), либо 50 мг/кг/сутки (группа E) CAM. Группы лечения (F и G) получают перорально через зонд либо 50 мг/кг ABC294640 вместе с 10 мг/кг/сутки CAM (группа F), либо 100 мг/кг ABC294640 вместе с 50 мг/кг/сутки CAM (группа G).

Считается, что обработка при помощи комбинации ABC294640 и CAM обеспечит существенное снижение размера и, соответственно, массы опухолей, а также числа и, соответственно, массы метастазов по сравнению с группами лечения, получавшими любой из агентов в отдельности.

Тест на эффективность WX-671 in vivo на модели карциномы толстой кишки CC531

Противоопухолевая эффективность WX-671 была продемонстрирована с использованием трансплантируемой крысиной карциномы толстой кишки CC531. Самки животных в возрасте шести-семи недель (n=18 на группу, диапазон масс тела 100-130 г, получали, начиная с дня 3 после инокуляции опухоли и далее, 0,03, 0,3 или 3,0 мг/кг WX-671. Контрольные животные получали несущую среду (5% этанол, 5% Tween2o, 5% D-маннит в воде). Через семь недель после имплантации опухолей животных умерщвляли и оценивали с точки зрения первичной массы опухоли и контрольных точек по метастазированию.

Итоговая медианная масса опухоли в группах лечения относительно группы, получавшей несущую среду, не изменилась в группе, получавшей WX-671 в дозе 0,03 мг/кг, незначительно снизилась на 6% в группе, получавшей WX-671 в дозе 0,3 мг/кг, и достоверно снизилась (p=0,015) на 15% в группе, получавшей обработку дозой 3 мг/кг. Однако разница между итоговыми размерами опухолей в группах, получавших 0,3 мг/кг, и в группе, получавшей 3,0 мг/кг, была незначимой. Что касается контрольных точек по метастазированию, то медианное число макроскопических очагов в легких значимо снизилось относительно контроля (P < 0,0001) на 37%, 64% и 57% в группах лечения, получавших 0,03, 0,3 и 3,0 мг/кг соответственно. Медианные массы внутрибрюшинных лимфоузлов в трех группах лечения снизились относительно контроля на 31%, 41% и 46%, причем последние два снижения были статистически значимыми (P < 0,001).

Высокозначимое снижение числа макроскопических очагов в легких было очевидным во всех группах лечения, причем при наименьшей дозе (0,03 мг/кг, снижение на 37%) оно было наименее эффективным. При дозе 0,3 мг/кг эффект был максимальным (снижение на 64%) и не улучшался (снижение на 57%) в группе, получавшей WX-671 в дозе в десять раз больше, т. е. 3,0 мг/кг. Аналогичная картина наблюдалась в отношении масс внутрибрюшинных лимфоузлов. Были достигнуты медианные снижения массы на 31% при 0,03 мг/кг (незначимо), а также на 41% и 46% при среднем и высоком уровне дозе соответственно.

Тест на эффективность in vivo WX-671 в модели аденокарциномы поджелудочной железы CA20948

Противоопухолевую эффективность WX-671 оценивали на модели метастазирующей опухоли поджелудочной железы у крыс, CA20948. В группах по восемнадцать крыс опухоль инокулировали путем внутрибрюшинной инъекции суспензии опухолевых клеток, полученной из солидной опухоли, взятой от крысы-донора.

В этой модели внутрибрюшинно трансплантированные клетки мигрируют к поджелудочной железе, формируя панкреатическую опухоль, тесно связанную с поджелудочной железой. В течение 3 недель опухоль распространяется, как правило, в печень, формируя метастатические поражения, которые можно подсчитать. Обработка при уровнях доз 0,03, 0,3 и 3,0 мг/кг один раз в день перорально применяли ежедневно с дня 3 и далее. Одна группа получала несущую среду в качестве контроля, а одна группа получала 0,3 мг/кг WX-UK1 путем внутрибрюшинной инъекции.

В таблице ниже указано соответствующее процентное снижение по медианным конечным точкам для опухоли относительно контроля. Все схемы обработки оказывали высокозначимый эффект на итоговую массу внутрибрюшинно трансплантированной опухоли и поджелудочной железы, а также на число макроскопических очагов в печени относительно контроля. Сокращение метастазов в печени, по-видимому, было дозозависимым.

Для оценки того, оказывает ли обработка воздействие не только на число очагов в печени, но и на скорость роста метастатических поражений, оценивали относительное число крупных метастазов (> 2 мм) в различных группах. Процентную долю крупных очагов в печени определяли путем деления числа крупных поражений на общее число поражений, обнаруженных в печени. Результаты представлены в таблице ниже. В группе, получавшей несущую среду, процентная доля крупных метастазов составляла 30,7%, а в группах лечения процентная доля крупных поражений в печени была равномерно ниже. Это указывает на то, что обработка при помощи WX-671 (и WX-UK1) не только снижала число очагов в печени, но и также, возможно, имели ингибиторное воздействие на скорость роста метастатических поражений.

Процентная доля крупных (> 2 мм) метастатических поражений в печени от общего числа поражений в печени в различных группах лечения.
Опухоль поджелудочной железы CA20948	процент крупных метастазов
Контроль с несущей средой	30,7%
WX-671 0,03 мг/кг	12,4%
WX-671 0,3 мг/кг	16,2%
WX-671 3,0 мг/кг	20,4%
WX-UK1 0,3 мг/кг	13,4%

Противоопухолевая эффективность внутрибрюшинного введения WX-UK1 в дозе 0,3 мг/кг была аналогична эффективности перорального введения WX-671 в такой же или более высокой дозе.

Профиль цитотоксичности ABC294640

Для оценки биологической эффективности ABC294640 в интактных клетках ABC294640 оценивали на цитотоксичность с использованием человеческих раковых клеточных линий. Эти эксперименты проводили в соответствии с широко используемыми способами. К протестированным клеточным линиям относились MCF-7, клетки человеческой аденокарциномы молочной железы и MCF-10A, нетрансформированные человеческие эпителиальные клетки молочной железы. Указанные клеточные линии обрабатывали различными дозами ABC294640 в течение 48 ч. Далее определяли выживание клеток, используя анализ со связыванием SRB (Skehan et al., 1990, J Natl Cancer Inst 82: 1107), и вычисляли концентрацию ABC294640, которая ингибировала пролиферацию на 50% (IC₅₀). В клетках человеческой аденокарциномы молочной железы MCF-7 величина IC₅₀ составила 17 мкМ (показано среднее ± СО для повторных испытаний). В нетрансформированных человеческих клетках эпителия молочной железы MCF-10A величина IC₅₀ составила 21 мкМ (показано среднее ± СО для повторных исследований). ABC294640 оказывает антипролиферативное воздействие в концентрациях от менее одного микромоля до нескольких микромоль. Трансформированные клетки MCF-7 были существенно более чувствительными, чем нетрансформированные клетки MCF-10A. Это указывает на то, что ABC294640 будет ингибировать рост опухолевых клеток, не оказывая токсического воздействия на нормальные клетки пациента. В целом, данные демонстрируют, что ABC294640 способен проходить в интактные клетки и предотвращать их пролиферацию.

Обзор противораковой активности ABC294640

Представленные выше данные демонстрируют способность ABC294640 ингибировать пролиферацию клеток человеческой карциномы молочной железы. Для определения диапазона противоракового эффекта определяли химиотерапевтическую эффективность ABC294640 в отношении ряда различных человеческих линий раковых клеток, относящихся к нескольким основным типам опухолей. Данные представлены ниже, и они демонстрируют, что ABC294640 обладает противораковой активностью в отношении широкого спектра видов рака.

Значения эффективности ингибиторов SK в отношении человеческих линий опухолевых клеток
Клеточная линия	Ткань	IC₅₀ (мкМ) Соединение 62
1025LU	меланома	33,7 ± 2,7
A-498	почка	12,2 ± 6,0
Caco-2	толстая кишка	11,8 ± 5,6
DU145	предстательная железа	21,9 ± 1,5
Hep-G2	печень	6,0 ± 2,6
HT-29	толстая кишка	48,1 ± 7,6
MCF-7	молочная железа, ER+	18,4 ± 7,4
MDA-MB-231	молочная железа, ER-	29,1 ± 11,1
Pane-1	поджелудочная железа	32,8 ± 0,1
SK-OV-3	яичник	10,5 ± 2,6
T24	мочевой пузырь	39,4 ± 7,4

Высеянные с низкой плотностью клетки обрабатывали ингибитором SK в течение 48 часов, определяли выживаемость клеток, используя окрашивание сульфородамином B, и сравнивали с клетками, обработанными носителем (ДМСО).

Значения представляют собой средние ± СО для по меньшей мере трех отдельных экспериментов.

Токсичность ABC294640 in vivo

Было обнаружено, что ABC294640 растворяется до концентрации по меньшей мере 15 мг/мл (~ 30-40 мМ) в ДМСО: PBS для внутрибрюшинного (в/б) введения или в ПЭГ400 для перорального введения. Исследования острой токсичности при в/б введении не продемонстрировали немедленной или отсроченной токсичности у самок мышей линии Swiss-Webster, получавших обработку до по меньшей мере 50 мг/кг ABC294640. Повторные инъекции, выполняемые той же мыши через день в течение 15 дней, показали аналогичное отсутствие токсичности. ABC294640 также можно вводить мышам перорально в дозах до по меньшей мере 100 мг/кг без заметной токсичности.

Противоопухолевая активность ABC294640

Противоопухолевую активность ABC294640 оценивали с использованием сингенной опухолевой модели, в которой используется клеточная линия мышиной аденокарциномы молочной железы JC, привитая иммунокомпетентным мышам линии Balb/c подкожно (Lee et al., 2003, Oncol Res 14: 49). Эти клетки экспрессируют повышенные уровни активности SK в сравнении с нетрансформированными клетками, а также фенотип с множественной лекарственной резистентностью вследствие активности P-гликопротеина.

Мышам Balb/c в возрасте 6-8 недель подкожно вводили 10⁶ клеток JC, суспендированных в фосфатно-солевом буферном растворе. ABC294640 растворяли в ПЭГ400 и вводили мышам через день в дозе 100 мг/кг. Ежедневно контролировали массы тела и объемы опухолей. Рост опухолей у животных, получавших обработку ABC294640, был существенно ниже снижение (> 70% к дню 16), чем рост опухоли у контрольных животных. ABC294640 ингибировал рост опухоли относительно контролей на 69%. Исследования зависимости доза-ответ для ABC294640 продемонстрировали, что соединение обладает противоопухолевой активностью при пероральном введении в дозах 35 мг/кг или выше.

Предотвращение формирования в опухолевых клетках человека и животных «множественной лекарственной резистентности» (MDR) в отношении лечения цитостатическими агентами путем одновременного введения BVDU

Человеческую линию опухолевых клеток K562-WT и линию опухолевых клеток F46-WT мыши (WT=дикий тип=чувствительная к обработке цитостатиками=без амплификации гена MDR) обрабатывали в течение нескольких недель адриамицином с поэтапным ростом концентраций. В процессе обработки клетки приобретают резистентность к такой обработке. У нерезистентных клеток адриамицин, вводимый в концентрации 20 нг/мл в течение 4 дней, оказывал очень сильный токсический эффект - после длительной обработки с поэтапным ростом концентрации клетки становились полностью нечувствительными к 20 нг/мл адриамицина. Формирование резистентности основано на амплификации гена MDR. В параллельных экспериментах с адриамицином, в которых одновременно вводят либо 0,5, либо 1 мкг/мл BVDU (BVDU оказывает токсический эффект на человеческие опухолевые клетки только в концентрации от приблизительно 10 мкг/мл, а на мышиные клетки - от приблизительно 8 мкг/мл, BVDU предотвращает формирование резистентности к адриамицину. Опухолевые клетки остаются чувствительными к цитостатической обработке и погибают. Эффект BVDU является таким сильным, что обработку необходимо прерывать стадиями восстановления (рост без веществ), чтобы эксперимент продолжался в течение более 6-8 недель.

Обработка BVDU+адриамицин приводит к значительному ослаблению амплификации гена MDR в сравнении с обработкой только адриамицином. К концу обработки остаются только клетки, которые приобрели по меньшей мере некоторую резистентность к обработке адриамицином. Те клетки, которые оставались нерезистентными в результате обработки BVDU, уже погибли ранее.

Поскольку формирование резистентности к цитостатической обработке у человеческих опухолей также основано на амплификации гена MDR, комбинация BVDU с необязательным цитостатическим агентом обеспечивает возможность проведения терапии с низкими дозами и в течение более длительных периодов времени, чем ранее.

Предотвращение формирования в опухолевых клетках «множественной лекарственной резистентности» (MDR) при обработке цитостатиками путем одновременного введения антирекомбиногенного BVDU

Линию опухолевых клеток F4-6-WT мыши (WT=дикий тип=чувствительная к лечению цитостатиками=без амплификации гена MDR) обрабатывали в течение нескольких недель адриамицином с поэтапным ростом концентрации. В процессе обработки клетки приобретают резистентность к такой обработке. Учитывая, что на нерезистентные клетки адриамицин, вводимый в концентрации 20 нг/мл в течение 4 дней, оказывал чрезвычайно токсический эффект, клетки после длительной обработки с поэтапным ростом концентраций становились полностью нечувствительными к 20 нг/мл адриамицина. Формирование резистентности основано на амплификации гена MDR. Также для сравнения анализировали уровни мРНК ß-актина, и ß-актин использовали в качестве внутреннего контроля для количества РНК.

В параллельных экспериментах адриамицин вводили с 1 мкг/мл BVDU, и он предотвращал формирование резистентности к адриамицину. Опухолевые клетки остаются чувствительными к цитостатической обработке и погибают. Эффект BVDU является таким сильным, что обработку необходимо было прерывать фазами восстановления (рост без веществ), чтобы эксперимент продолжался в течение более 6-8 недель.

Обработка BVDU повышает чувствительность клеток саркомы AH13r к индуцированному химиотерапией апоптозу. Эффект сохраняется даже после прекращения введения цитостатика, в так называемую фазу восстановления.

Клетки AH13r обрабатывали растущими дозами цитостатика митомицина C (MMC). BVDU, вводимый отдельно, не демонстрировал токсического эффекта. Обработка MMC+BVDU после трех циклов обработки приводила к снижению количества клеток в сравнении с обработкой только MMC. Ингибиторный эффект сохранялся даже после прекращения введения цитостатика в следующем цикле, в так называемую фазу восстановления. Клетки без MMC и BVDU продолжали расти без ингибирования. Однако рост тех клеток, которые продолжали обрабатывать BVDU, в значительной степени ингибировался. Соответствующие результаты были достигнуты и при использовании метотрексата (MTX), доксорубицина (DOX) и митоксантрона (MXA). То, что снижение количества клеток основано на апоптозе, определяли путем двойного окрашивания Hoechst 33258/йодид пропидия (Hopi).

Пример возможного использования: скрининговое исследование соединений изобретения для определения влияния на клеточный цикл и жизнеспособность клеток

Целью данного исследования было определение влияния агентов настоящего изобретения на клеточный цикл и жизнеспособность клеток в человеческих раковых клеточных линиях. Человеческие раковые клеточные линии обрабатывали каждым агентом в отдельности при различных концентрациях в течение 48, 72 и 96 часов. Жизнеспособность клеток контролировали с использованием методики, известной в данной области. Например, жизнеспособность клеток можно оценивать с использованием анализа на жизнеспособность CellTiter-Blue® Cell Viability Assay (#G8081, Promega, г. Мангейм, Германия), который обеспечивает однородный способ контроля жизнеспособности клеток, основанный на флуоресценции. Клеточный цикл можно анализировать проточной цитометрией, а апоптозные клетки можно идентифицировать путем введения концевой метки биотинилированным dUTP с использованием терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TUNEL) и DAPI.

Пример возможного использования: скрининговое исследование соединений изобретения для определения влияния на продукцию цитокинов

В данном эксперименте с использованием коммерческих наборов для твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) определяли уровни широкого спектра цитокинов, по меньшей мере некоторых из IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-17, IL-23 и ФНО-α, в супернатантах человеческих раковых клеточных линий. Более конкретно, проверяют, демонстрируют ли какие-либо человеческие раковые клеточные линии снижение способности к продукции цитокинов после инкубации с агентами настоящего изобретения в различных концентрациях.

В настоящем документе описаны новые стратегии лечения пациентов с раком, основанные на комбинации лекарственных средств.

Комбинация 5'-замещенного нуклеозида и по меньшей мере одного антибиотика для применения в лечении рака, причем (a) 5'-замещенный нуклеозид вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (c) периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления 5'-замещенный нуклеозид представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация 5'-замещенного нуклеозида и клофазамина, причем (a) 5'-замещенный нуклеозид вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (c) периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления 5'-замещенный нуклеозид представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация 5'-замещенного нуклеозида, клофазамина и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) 5'-замещенный нуклеозид вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (с) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (d) периоды a), b) и c) перекрываются. В одном варианте осуществления 5'-замещенный нуклеозид представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация 5'-замещенного нуклеозида, ингибитора сфингозинкиназы и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) 5'-замещенный нуклеозид вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (с) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (d) периоды a), b) и c) перекрываются. В одном варианте осуществления 5'-замещенный нуклеозид представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация 5'-замещенного нуклеозида, ингибитора сфингозинкиназы, ингибитора урокиназы и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) 5'-замещенный нуклеозид вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (с) ингибитор урокиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (d) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (e) указанные периоды a), b), c) и d) перекрываются. В одном варианте осуществления 5'-замещенный нуклеозид представляет собой бривудин. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления ингибитор урокиназы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора сфингозинкиназы и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (b) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (c) указанные периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора урокиназы и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (b) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (c) указанные периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор урокиназы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора сфингозинкиназы, клофазамина и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (с) по меньшей мере один антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (d) периоды a), b) и c) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора сфингозинкиназы и клофазамина, причем (a) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (c) периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора сфингозинкиназы, ингибитора урокиназы и по меньшей мере одного антибиотика для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор сфингозинкиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) ингибитор урокиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (с) антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (d) указанные периоды a), b) и c) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор сфингозинкиназы представляет собой ABC294640. В одном варианте осуществления ингибитор урокиназы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Комбинация ингибитора урокиназы и клофазамина для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор урокиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (b) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, и (c) указанные периоды a) и b) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор урокиназы представляет собой упамостат.

Комбинация ингибитора урокиназы, по меньшей мере одного антибиотика и клофазамина для использования в лечении рака, причем (a) ингибитор урокиназы вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели, (b) по меньшей мере один антибиотик вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере недели, (с) клофазамин вводят пациенту в одной или более дозах для установления терапевтически эффективной концентрации в плазме в течение периода по меньшей мере одной недели и (d) указанные периоды a), b) и c) перекрываются. В одном варианте осуществления ингибитор урокиназы представляет собой упамостат. В одном варианте осуществления по меньшей мере один антибиотик выбирают из одного из бактерицидного антибиотика или макролидного антибиотика. В одном варианте осуществления бактерицидный антибиотик представляет собой рифабутин. В одном варианте осуществления макролидный антибиотик представляет собой кларитромицин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит клофазамин. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один противораковый агент, который выбирают из группы, состоящей из химиотерапевтических агентов, цитотоксических агентов, цитостатических агентов, иммунотоксических агентов и радиотерапии.

Claims

1. Комбинация, предназначенная для лечения рака, содержащая эффективные количества:

(i) соединения структуры (II)

или его фармацевтически приемлемой соли; и

(ii) соединения структуры (IV):

или его фармацевтически приемлемой соли.

2. Комбинация по п. 1, дополнительно содержащая соединение структуры (I)

или его фармацевтически приемлемую соль.

3. Комбинация по п.1 или 2, где рак представляет собой солидную опухоль.

4. Комбинация по п.1 или 2, где рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака почки, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака яичника, рака желудка, рака матки, карциномы in situ и лейкемии.

5. Комбинация по п.1 или 2, где рак представляет собой рак поджелудочной железы.

6. Комбинация по п.1 или 2, предназначенная для лечения рака, которое включает совместное введение одного или более стандартных химиотерапевтических агентов, выбранных из антиангиогенных агентов, цитостатических агентов и антипролиферативных/антинеопластических агентов и их комбинаций.

7. Комбинация по п.1 или 2, предназначенная для лечения рака, которое включает совместное введение с иммуномодулятором.

8. Комбинация по п.1 или 2, предназначенная для лечения рака, которое включает совместное введение с ингибитором иммунологических контрольных точек.

9. Комбинация по п.1 или 2, где предназначенная для лечения рака, которое включает совместное введение с ингибитором матриксной металлопротеиназы.

10. Применение соединения структуры (II)

3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амида (II) или его фармацевтически приемлемой соли для лечения рака, где соединение структуры (II) или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно или последовательно с:

(i) соединением структуры (IV):

или его фармацевтически приемлемой солью.

11. Применение соединения структуры (IV):

или его фармацевтически приемлемой соли для лечения рака, где соединение структуры (IV) или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно или последовательно с:

(i) соединением структуры (II)

3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислотой (пиридин-4-илметил)-амида (II) или его фармацевтически приемлемой солью.

12. Применение соединения структуры (I)

или его фармацевтически приемлемой соли для лечения рака, где соединение структуры (I) или его фармацевтически приемлемую соль вводят одновременно или последовательно с:

(i) соединением структуры (II)

3-(4-хлорфенил)-адамантан-1-карбоновой кислоты (пиридин-4-илметил)-амида (II) или его фармацевтически приемлемую солью; и

(ii) соединением структуры (IV):

или его фармацевтически приемлемой солью.

13. Применение по любому одному из пп.10-12, где рак представляет собой солидную опухоль.

14. Применение по любому одному из пп.10-12, где рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака почки, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака яичника, рака желудка, рака матки, карциномы in situ и лейкемии.

15. Применение по любому одному из пп.10-12, где рак представляет собой рак поджелудочной железы.

16. Применение по любому одному из пп.10-12, где лечение рака включает совместное введение одного или более стандартных химиотерапевтических агентов, выбранных из антиангиогенных агентов, цитостатических агентов и антипролиферативных/антинеопластических агентов и их комбинаций.

17. Применение по любому одному из пп.10-12, где лечение рака включает совместное введение с иммуномодулятором.

18. Применение по любому одному из пп.10-12, где лечение рака включает совместное введение с ингибитором иммунологических контрольных точек.

19. Применение по любому одному из пп.10-12, где лечение рака включает совместное введение с ингибитором матриксной металлопротеиназы.