RU2720199C1 - Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами - Google Patents
Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами Download PDFInfo
- Publication number
- RU2720199C1 RU2720199C1 RU2019145640A RU2019145640A RU2720199C1 RU 2720199 C1 RU2720199 C1 RU 2720199C1 RU 2019145640 A RU2019145640 A RU 2019145640A RU 2019145640 A RU2019145640 A RU 2019145640A RU 2720199 C1 RU2720199 C1 RU 2720199C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- soil
- carried out
- strain
- degree
- Prior art date
Links
- 239000002689 soil Substances 0.000 title claims abstract description 115
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 title claims abstract description 49
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 title claims abstract description 49
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 23
- 241000192086 Staphylococcus warneri Species 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 52
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 abstract description 35
- 150000003464 sulfur compounds Chemical class 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 60
- 238000000034 method Methods 0.000 description 39
- 239000002283 diesel fuel Substances 0.000 description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 11
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 6
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 6
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 6
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 4
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 4
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 2
- 241001625930 Luria Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000003350 kerosene Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 108010080972 Catechol 2,3-dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 102100029115 Fumarylacetoacetase Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000006137 Luria-Bertani broth Substances 0.000 description 1
- 241000589614 Pseudomonas stutzeri Species 0.000 description 1
- 108010070996 Salicylate 1-monooxygenase Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003876 biosurfactant Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000001064 degrader Substances 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 108010022687 fumarylacetoacetase Proteins 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000010720 hydraulic oil Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 239000010705 motor oil Substances 0.000 description 1
- 239000003348 petrochemical agent Substances 0.000 description 1
- 230000003032 phytopathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
- B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
- B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/44—Staphylococcus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Soil Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии. С целью обеспечения эффективной очистки от различных углеводородов почв, загрязнение которых вызвано нефтью или нефтепродуктами с повышенным содержанием сернистых соединений. В качестве деструктора этих углеводородов предложен новый штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1. Штамм депонирован в Национальном биоресурсном центре Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов (ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра «Курчатовский институт») под регистрационным номером В-13521. Данный штамм обеспечивает высокую степень очистки почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами. 3 табл., 39 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды и представляет собой новый штамм бактерий, обладающий способностью к деструкции нефти и нефтепродуктов, который может быть использован в нефтяной промышленности и нефтехимии для очистки почвы и природных водоемов от нефти и нефтепродуктов (моторных топлив, минеральных масел, газовых конденсатов).
Несмотря на значительное количество работ, посвященных микробиологической утилизации нефтеотходов и биовосстановлению загрязненных углеводородами почв, данная проблема остается открытой для новых решений, при этом остро стоит вопрос биологической очистки почв, загрязнение которых вызвано нефтью с повышенным содержанием сернистых соединений.
Известен штамм микроорганизмов Pseudomonas stutzeri MEV-S1 в качестве деструктора углеводородов в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами [Патент РФ №2228952, опубл. 20.05.2004]. Недостатком этого биологического средства при применении в подобном качестве является сравнительно низкая степень очистки от различных углеводородов тех нефтезагрязненных почв, загрязнение которых вызвано нефтью с повышенным содержанием сернистых соединений.
Известен также штамм микроорганизмов Micrococcus luteus VKM Ac-2627D - деструктор углеводородов в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами [Патент РФ №2687131, опубл. 07.05.2019]. Недостатком данного биологического средства, которое по совокупности признаков и достигаемому техническому эффекту является наиболее близким к заявляемому нами объекту и взято нами за прототип, также является сравнительно низкая степень очистки от различных углеводородов тех нефтезагрязненных почв, загрязнение которых вызвано нефтью с повышенным содержанием сернистых соединений.
Таким образом, технической проблемой, на решение которой направлено изобретение, является расширение арсенала микробиологических деструкторов углеводородов, содержащихся в почвах при загрязнении нефтью и нефтепродуктами, а также увеличение степени очистки почв при утилизации нефтепродуктов и нефти с повышенным содержанием сернистых соединений, с помощью бактериальных штаммов микроорганизмов.
Техническим результатом изобретения является новый продукт, расширяющий номенклатуру штаммов, и способный очищать от различных углеводородов почвы, загрязнение которых вызвано нефтью или нефтепродуктами с повышенным содержанием сернистых соединений, с эффективностью, превышающей таковую для прототипа на 20-60%.
Указанная техническая проблема решается, и технический результат достигается тем, что получен новый штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 - деструктор углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами.
До настоящего времени штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 и его применение в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в литературе не описаны. Известно, однако, применение близкого к нему микробиологического объекта - штамма Staphylococcus warneri IEGM-KL-1 по иному назначению, а именно для ингибирования роста клеток грампозитивных бактерий [Патент РФ №2200195, опубл. 10.03.2003].
В связи с этим есть все основания полагать, что заявляемый нами объект соответствует критериальному признаку изобретения - новизна. Поскольку из уровня техники не выявлены решения, совпадающие с существенными признаками, характеризующими заявляемый новый объект, невозможно предсказать априори наличие у него указанных свойств, а именно существенного повышения степени очистки почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами с повышенным содержанием сернистых соединений, по сравнению с таковой для штамма-прототипа, то отмеченное обстоятельство позволяет сделать заключение, что заявляемый нами объект явным образом не следует из известного в данной отрасли техники уровня и ему присущ критериальный признак изобретения - изобретательский уровень. Подтверждением соответствия критерию промышленная применимость является указание, в какой области может быть использован заявляемый штамм микроорганизмов, показана возможность реализации назначения изобретения.
Штамм депонирован в Национальном биоресурсном центре Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов (ФГУП «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра «Курчатовский институт») под регистрационным номером В-13521, дата депонирования 16.12.2019.
Идентификация штамма была осуществлена на основании изучения его культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик по [Зенова, Г.М. Практикум по микробиологии почв / Г.М. Зенова, А.Л. Степанов, Н.А. Лихачева и др. // М.: Изд-во Моск. ун-та. - 2002. - 120 с.; Колешко, О.И. Экология микроорганизмов почвы. Лабораторный практикум / О.И. Колешко // Минск: Высшая школа. - 1981. - 175 с.; Методы почвенной микробиологии и биохимии / под ред. Д.Г. Звягинцева. М.: МГУ. - 1991. - 304 с.], а также идентификация штамма Staphylococcus warneri S1 до вида - с помощью анализа 16S РНК. По результатам проведенного анализа сиквенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК, тестируемый штамм наиболее близок к виду Staphylococcus warneri (99%).
Полученный штамм Staphylococcus warneri S1 характеризуется следующими признаками.
Видовое название штамма - Staphylococcus warneri S1.
Родословная штамма. Выделен из загрязненной нефтью черноземной почвы Азнакаевского муниципального района Республики Татарстан.
Способ получения штамма. Найден в естественных условиях, а именно выделен из загрязненной нефтью черноземной почвы Азнакаевского муниципального района Республики Татарстан в 2016 году коллективом авторов И.А. Дегтяревой, Е.А. Прищепенко, А.Я. Давлетшиной, Т.Ю. Мотиной, М.И. Султановым.
Культурально-морфологические особенности штамма.
Грамположительные кокки, неспорообразующие, диаметр клетки 0.8-1.0 мкм, неподвижные. Форма колоний на плотных питательных средах (мясопептонном агаре (МПА)) округлая, от 0.3 до 0.9 см, бежевого цвета, блестящие, консистенция однородная, полужидкая, колония легко снимается с агара, на жидких (мясопептонный бульон (МПБ)) - с равномерным помутнением.
Физиолого-биохимические признаки. Факультативный анаэроб. Хемоорганотроф.
Растет при рН 6,8-7,4 при температуре от +15° до +45°С.
Растет на питательных средах (среда МПА (г/л водопроводной воды): мясопептонный бульон (МПБ) - 200 мл; пептон - 8,0; NaCl - 3,0; агар-агар - 20,0; среда Лурия (г/л дистиллированной воды): дрожжевой экстракт - 5,0; пептон - 15,0; NaCl - 5,0; агар - 15,0. Стерилизация всех этих сред при 1 атм.), в том числе на средах с 5-10% NaCl. На жидких средах дает равномерное помутнение.
Способен расти в жидкой среде с углеводородами в среде Ворошиловой-Диановой (г/л водопроводной воды): KNO3 - 1,0; MgSO4×7H2O - 0,2; NaCl - 1,0; K2HPO4 - 1,0; углеводороды вносили после стерилизации. Стерилизация при 1 атм.
Хранение возможно в эппендорфе, на жидкой среде (МПБ, Ворошиловой-Диановой (В-Д), LB бульоне и др.) с добавлением количества 10% диметилсульфоксида к стерильной среде.
Бактерии штамма обладают высокой биохимической активностью, образуют ферменты катехол-2,3-диоксигеназу, фумарилацетоацетат-гидролазу и салицилат-1-монооксигеназу, участвуют в биодеградации ароматических углеводородов. Углеводы ферментируют до кислоты без газа, разжижают желатин, образуют сероводород.
Штамм не является зоопатогенным или фитопатогенным, не представляет опасности и по каким-либо другим причинам.
Испытания заявляемого штамма микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов проведены на серых лесных почвах, черноземных, подзолистых, загрязненных нефтью, дизельным топливом, другими видами нефтепродуктов (керосином, газовым конденсатом). Во всех случаях были получены сравнимые результаты - в результате использования заявляемого штамма степень очистки почв, загрязненных такими веществами, возрастает на 20-60% по сравнению с таковой для штамма-прототипа.
Изобретение может быть проиллюстрировано посредством приведенных ниже примеров.
Пример 1 (получение штамма микроорганизмов Staphylococcus warneri S1)
Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 обнаружен авторами И.А. Дегтяревой, Е.А. Прищепенко, А.Я. Давлетшиной, Т.Ю. Мотиной, М.И. Султановым в естественных условиях, а именно выделен из загрязненной нефтью черноземной почвы Азнакаевского муниципального района Республики Татарстан в 2016 году.
Выращивание культуры данного микроорганизма осуществляют по методике [Saravanan V., Vijayakumar S. Isolation and screening of biosurfactant producing microorganisms from oil contaminated soil. J Acad Ind Res 2012; 1:264-8] в среде МПА следующего состава (г/л водопроводной воды): мясопептонный бульон (МПБ) - 200 мл; пептон - 8.0; NaCl - 3.0; агар-агар - 20.0; среде Лурия (г/л дистиллированной воды): дрожжевой экстракт - 5.0; пептон - 15.0; NaCl - 5.0; агар - 15.0; среде Ворошиловой-Диановой (г/л водопроводной воды): KNO3 - 1.0; MgSO4×7Н2О - 0.2; NaCl - 1.0; K2HPO4 - 1.0. Стерилизацию всех сред проводят при давлении 1 атм. Культурально-морфологические особенности полученного штамма: грамположительные кокки, диаметр клетки 0.8-1.0 мкм, факультативный анаэроб, неспорообразующий, форма колоний на плотных питательных средах округлая, выпуклая, на жидких с равномерным помутнением.
Пример 2
Отбирают образец серой лесной почвы массой 1.0 кг, в которую вводят высокосернистую нефть из Ромашкинского месторождения Республики Татарстан с массовой долей сернистых соединений 2.0% в количестве 50 г (5% от массы почвы) и тщательно перемешивают. В загрязненную почву вносят 20 мл водной дисперсии штамма Staphylococcus warneri Sic титром 2.5×109 клеток/см3, приготовленного по Примеру 1, после чего выдерживают полученную смесь при температуре +20°С в течение 10 суток.
Биологическую активность штамма в отношении его способности к очистке почв, загрязненных нефтью и/или нефтепродуктами, оценивают по степени снижения содержания углеводородов по истечении вышеуказанного периода времени (СО) в масс. %, которую определяют по формуле СО=100⋅[1-(Ct/Co)], где Co - содержание углеводородов (г/кг почвы) до введения дисперсии штамма микроорганизмов, Ct - содержание углеводородов (г/кг почвы) на момент завершения эксперимента (в данном случае - 10 суток). Определение содержания углеводородов в почве осуществляют ИК спектроскопическим методом в соответствии с методикой [Методика выполнения измерений массовой доли нефтепродуктов в почвах и донных отложениях методом ИК-спектрометрии. ПНД Ф 16.1:2.2.22-98. - Москва, 1998. 35 с]. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 6.5 масс. %.
Данные по степени очистки почвы от углеводородов нефти представлены в Таблице 1.
Пример 3 осуществляют в условиях примера 2, однако процесс очистки почвы ведут в течение 20 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 15.0 масс. %.
Пример 4 осуществляют в условиях примера 2, однако процесс очистки почвы ведут в течение 30 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 22.5 масс. %.
Пример 5 осуществляют в условиях примера 2, однако процесс очистки почвы осуществляют в течение 45 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 36.5 масс. %.
Пример 6 осуществляют в условиях примера 2, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 2.8 масс. %.
Пример 7 осуществляют в условиях примера 3, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 7.5 масс. %.
Пример 8 осуществляют в условиях примера 4, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 12.5 масс. %.
Пример 9 осуществляют в условиях примера 5, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 20.5 масс. %.
Пример 10 осуществляют в условиях примера 2, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 6.0 масс. %.
Пример 11 осуществляют в условиях примера 3, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 13.5 масс. %.
Пример 12 осуществляют в условиях примера 4, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 21.0 масс. %.
Пример 13 осуществляют в условиях примера 5, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 34.3 масс. %.
Пример 14 осуществляют в условиях примера 5, однако процесс очистки почвы осуществляют, вводя в очищаемую почву 40 мл/кг водной дисперсии штамма Staphylococcus warneri S1 с тем же самым титром 2.5×109 клеток/см3. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 38.0 масс. %.
Пример 15 (сравнительный), осуществляют в условиях примера 2, однако в качестве деструктора углеводородов используют штамм микроорганизмов Micrococcus luteus М-171 (RCAM03279) в виде водной дисперсии с титром 2.5×109 клеток/см3. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 5.2 масс. %.
Пример 16 осуществляют в условиях примера 15, однако процесс очистки почвы ведут в течение 20 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 10.5 масс. %.
Пример 17 осуществляют в условиях примера 15, однако процесс очистки почвы ведут в течение 30 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 17.3 масс. %.
Пример 18 осуществляют в условиях примера 15, однако процесс очистки почвы ведут в течение 45 суток. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 29.0 масс. %.
Пример 19 осуществляют в условиях примера 18, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 16.2 масс. %.
Пример 20 осуществляют в условиях примера 18, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от углеводородов нефти составляет 28.1 масс. %.
Пример 21 осуществляют в условиях примера 2, однако в качестве объекта для очистки от углеводородов используют серую лесную почву, загрязненную нефтепродуктом - дизельным топливом, полученным из высокосернистой нефти Ромашкинского месторождения Республики Татарстан (зимняя солярка Танэко). Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 7.2 масс. %.
Все данные по степени очистки почвы от углеводородов дизельного топлива представлены в Таблице 2.
Пример 22 осуществляют в условиях примера 21, однако процесс очистки почвы ведут в течение 20 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 18.9 масс. %.
Пример 23 осуществляют в условиях примера 21, однако процесс очистки почвы ведут в течение 30 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 26.7 масс. %.
Пример 24 осуществляют в условиях примера 21, однако процесс очистки почвы ведут в течение 45 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 44.0 масс. %.
Пример 25 осуществляют в условиях примера 21, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 4.5 масс. %.
Пример 26 осуществляют в условиях примера 22, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 9.4 масс. %.
Пример 27 осуществляют в условиях примера 23, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 14.4 масс. %.
Пример 28 осуществляют в условиях примера 24, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 24.2 масс. %.
Пример 29 осуществляют в условиях примера 21, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 6.8 масс. %.
Пример 30 осуществляют в условиях примера 22, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 17.3 масс. %.
Пример 31 осуществляют в условиях примера 23, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 23.8 масс. %.
Пример 32 осуществляют в условиях примера 24, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 40.5 масс. %.
Пример 33 осуществляют в условиях примера 32, однако процесс очистки почвы осуществляют, вводя в очищаемую почву 40 мл/кг водной дисперсии штамма Staphylococcus warneri S1 с тем же самым титром 2.5×109 клеток/см3. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 48.5 масс. %.
Пример 34 (сравнительный), осуществляют в условиях примера 21, однако в качестве деструктора углеводородов используют штамм микроорганизмов Micrococcus luteus М-171 (RCAM03279) в виде водной дисперсии с титром 2.5×109 клеток/см3. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 6.0 масс. %.
Пример 35 осуществляют в условиях примера 34, однако процесс очистки почвы ведут в течение 20 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 11.8 масс. %.
Пример 36 осуществляют в условиях примера 34, однако процесс очистки почвы ведут в течение 30 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 18.8 масс. %.
Пример 37 осуществляют в условиях примера 34, однако процесс очистки почвы ведут в течение 45 суток. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 31.0 масс. %.
Пример 38 осуществляют в условиях примера 37, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +10°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 18.2 масс. %.
Пример 39 осуществляют в условиях примера 37, однако процесс очистки почвы ведут при температуре +30°С. Степень очистки почвы от дизельного топлива составляет 30.1 масс. %.
Как можно видеть из приведенных данных в Таблице 1 и 2, заявляемый в качестве деструктора углеводородов штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 позволяет существенно - на 22-43% повысить степень очистки почвы, загрязненной высокосернистой нефтью, и на 20-60% в случае загрязнения продуктом ее переработки - дизельным топливом, по сравнению с той степенью ее очистки, которая может быть достигнута при использовании с этой же целью штамма-прототипа.
Для наглядности в таблице 3 приведены данные примеров, описывающих эксперименты, произведенные в одинаковых условиях как для заявляемого штамма Staphylococcus warneri S1, так и для штамма Micrococcus luteus М-171 (RCAM03279) по прототипу для корректности сравнения.
Степень очистки почвы от углеводородов нефти:
для примеров 2 и 15 составляет 6.5% и 5.2% соответственно, что превышает данные прототипа на 25%,
для примеров 3 и 15 составляет 15.0% и 10.5% соответственно, что превышает данные прототипа на 43%,
для примеров 4 и 17 составляет 22.5% и 17.3% соответственно, что превышает данные прототипа на 30%,
для примеров 5 и 18 составляет 36.5% и 29.0% соответственно, что превышает данные прототипа на 26%,
для примеров 9 и 19 составляет 20.5% и 16.2% соответственно, что превышает данные прототипа на 26%,
для примеров 13 и 20 составляет 34.3% и 28.1% соответственно, что превышает данные прототипа на 22%.
Степень очистки почвы от углеводородов дизельного топлива:
для примеров 21 и 34 составляет 7.2% и 6.0% соответственно, что превышает данные прототипа на 20%,
для примеров 22 и 35 составляет 18.9% и 11.8% соответственно, что превышает данные прототипа на 60%,
для примеров 23 и 36 составляет 26.7% и 18.8% соответственно, что превышает данные прототипа на 42%,
для примеров 24 и 37 составляет 44.0% и 31.0% соответственно, что превышает данные прототипа на 42%,
для примеров 28 и 38 составляет 24.2% и 18.2% соответственно, что превышает данные прототипа на 33%,
для примеров 32 и 29 составляет 40.5% и 30.1% соответственно, что превышает данные прототипа на 34%.
Таким образом, можно сделать вывод, что заявляемый штамм Staphylococcus warneri S1 позволяет повысить степень очистки почвы на 22-43% от углеводородов нефти, и на 20-60% от углеводородов дизельного топлива по сравнению с прототипом.
Предложен новый продукт, расширяющий номенклатуру штаммов, преимуществом которого является то, что он обладает высокой утилизирующей способностью (превышающей таковую для прототипа на 20-60%) по отношению как к высокосернистой нефти, так и к продуктам ее переработки в относительно короткие сроки, в диапазоне температур от +10 до +30°С, который может быть использован для очистки объектов окружающей среды от загрязнений нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, масло моторное, масло гидравлическое, газовый конденсат, керосин авиационный, бензин).
Claims (1)
- Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 депонирован под регистрационным номером ВКПМ В-13521, - деструктор углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019145640A RU2720199C1 (ru) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019145640A RU2720199C1 (ru) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2720199C1 true RU2720199C1 (ru) | 2020-04-27 |
Family
ID=70415501
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019145640A RU2720199C1 (ru) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2720199C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114525232A (zh) * | 2022-04-21 | 2022-05-24 | 江苏聚庚科技有限公司 | 一种沃式葡萄球菌及其在农药废水的生物强化降解中的应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2122980C1 (ru) * | 1996-06-07 | 1998-12-10 | Саксон Валерий Михайлович | Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от нефти и нефтепродуктов |
| RU2344170C2 (ru) * | 2006-03-10 | 2009-01-20 | Андрей Евгеньевич Филонов | Штамм бактерий pseudomonas putida, продуцирующий поверхностно-активные вещества, для деградации полициклических ароматических углеводородов и углеводородов нефти |
| RU2446900C2 (ru) * | 2010-07-13 | 2012-04-10 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии | Способ очистки мерзлотных почв от нефти спорообразующими бактериями bacillus subtilis |
| RU2687131C1 (ru) * | 2018-03-28 | 2019-05-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "Якутский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук" (ЯНЦ СО РАН) | ШТАММ БАКТЕРИЙ MICROCOCCUS LUTEUS VKM Aс-2627D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
-
2019
- 2019-12-30 RU RU2019145640A patent/RU2720199C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2122980C1 (ru) * | 1996-06-07 | 1998-12-10 | Саксон Валерий Михайлович | Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от нефти и нефтепродуктов |
| RU2344170C2 (ru) * | 2006-03-10 | 2009-01-20 | Андрей Евгеньевич Филонов | Штамм бактерий pseudomonas putida, продуцирующий поверхностно-активные вещества, для деградации полициклических ароматических углеводородов и углеводородов нефти |
| RU2446900C2 (ru) * | 2010-07-13 | 2012-04-10 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии | Способ очистки мерзлотных почв от нефти спорообразующими бактериями bacillus subtilis |
| RU2687131C1 (ru) * | 2018-03-28 | 2019-05-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр "Якутский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук" (ЯНЦ СО РАН) | ШТАММ БАКТЕРИЙ MICROCOCCUS LUTEUS VKM Aс-2627D - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114525232A (zh) * | 2022-04-21 | 2022-05-24 | 江苏聚庚科技有限公司 | 一种沃式葡萄球菌及其在农药废水的生物强化降解中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113215033A (zh) | 一种磺胺类抗生素降解菌及其应用 | |
| RU2093478C1 (ru) | Способ очистки воды и почвы от нефти, нефтепродуктов и полимерных добавок в буровой раствор | |
| RU2720199C1 (ru) | Штамм микроорганизмов Staphylococcus warneri S1 в качестве деструктора углеводородов, содержащихся в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами | |
| Okereke et al. | Microbial flora of oil-spilled sites in Egbema, Imo State, Nigeria | |
| RU2257409C1 (ru) | Штамм rhodococcus erythropolis для разложения нефти и нефтепродуктов | |
| RU2513702C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2553337C2 (ru) | ШТАММ Rhodococcus erythropolis ДЛЯ ОЧИСТКИ ВОДЫ, ПОЧВЫ, БЕРЕГОВОЙ ЗОНЫ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ И ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ ОТ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
| El-Tarrs et al. | In vitro screening for oil degrading bacteria and evaluation of their biodegradation potential for hydrocarbon | |
| Yasin et al. | Bioremediation of polluted water with crude oil in South Baghdad power plant | |
| RU2617950C1 (ru) | Штамм бактерий Stenotrophomonas maltophilia - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2300561C1 (ru) | Штамм rhodococcus globerulus h-42 для разложения нефти и нефтепродуктов | |
| RU2257410C1 (ru) | Штамм rhodococcus erythropolis для разложения нефти и нефтепродуктов | |
| RU2618838C1 (ru) | Штамм бактерий Rhodococcus jialingiae Б-М-1 ВКПМ Ас-1967 - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2687155C1 (ru) | Штамм бактерий microbacterium paraoxydans bkm ac-2619d - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2675940C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus sp. ВКМ В-2815D - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| Dhaegheem et al. | Biochemical, Molecular and Ecological characterization of Petroleum Biodegradable Bacteria in Misan Province/Iraq. | |
| RU2619183C1 (ru) | Штамм Pseudomonas libanensis B-3041D для очистки почвенных и водных сред от нефтяных углеводородов | |
| Pan et al. | Contribution to deterioration of polymeric materials by a slow-growing bacterium Nocardia corynebacterioides | |
| Almaki et al. | Identification of novel bacterial species capable of degrading dalapon using 16s rRNA sequencing | |
| RU2489485C1 (ru) | ШТАММ Rhodococcus Erythropolis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ РАЗЛОЖЕНИЯ НЕФТИ | |
| RU2675938C1 (ru) | Штамм бактерий Lisinibacillus fusiformis ВКМ В-2816D - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2558299C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Rhodococcus sp. - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
| RU2675941C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus simplex ВКМ В-2817D - деструктор нефти и нефтепродуктов | |
| RU2564105C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Exiguobacterium sp. -ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
| RU2687127C1 (ru) | Штамм бактерий rhodococcus erythropolis vkm aс-2628d - деструктор нефти и нефтепродуктов |