RU2719457C2 - Сложные эфиры стероидного лактама и производных бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты - Google Patents
Сложные эфиры стероидного лактама и производных бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2719457C2 RU2719457C2 RU2018103071A RU2018103071A RU2719457C2 RU 2719457 C2 RU2719457 C2 RU 2719457C2 RU 2018103071 A RU2018103071 A RU 2018103071A RU 2018103071 A RU2018103071 A RU 2018103071A RU 2719457 C2 RU2719457 C2 RU 2719457C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactam
- mmol
- mixture
- cancer
- steroid
- Prior art date
Links
- -1 steroid lactam Chemical class 0.000 title description 19
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 title description 9
- OKTKIXQQZUXWHY-UHFFFAOYSA-N ClCCN(CCCl)C(C(=O)O)(C)OC1=CC=CC=C1 Chemical class ClCCN(CCCl)C(C(=O)O)(C)OC1=CC=CC=C1 OKTKIXQQZUXWHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 claims abstract description 14
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 46
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 39
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 20
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 18
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 17
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 16
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 16
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 16
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 16
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 10
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AAVIPUSYYJOCPI-UHFFFAOYSA-N 3-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenoxy]propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCOC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 AAVIPUSYYJOCPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 8
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine hydrochloride Chemical compound Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 7
- 108700020463 BRCA1 Proteins 0.000 description 6
- 102000036365 BRCA1 Human genes 0.000 description 6
- 101150072950 BRCA1 gene Proteins 0.000 description 6
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 6
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 6
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010064218 Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Proteins 0.000 description 5
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 5
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OZGSEIVTQLXWRO-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trichlorobenzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=C(Cl)C=C(Cl)C=C1Cl OZGSEIVTQLXWRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 4
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QVHYXLRIRSZISL-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-chloro-3-(2-chloroethyl)-2-phenoxypentanoic acid Chemical compound ClCCC(C(C(=O)O)(OC1=CC=CC=C1)N)CCCl QVHYXLRIRSZISL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101001113440 Homo sapiens Poly [ADP-ribose] polymerase 2 Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 102100023652 Poly [ADP-ribose] polymerase 2 Human genes 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical group [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- JMZJBCNHUJOLER-AYQCGTONSA-N [(4as,4br,6as,8s,10as,10bs,12as)-10a,12a-dimethyl-2-oxo-3,4,4a,4b,5,6,6a,7,8,9,10,10b,11,12-tetradecahydro-1h-naphtho[2,1-f]quinolin-8-yl] 2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]acetate Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H]2CC[C@@H]3[C@@H]([C@]2(CC1)C)CC[C@]1([C@H]3CCC(=O)N1)C)C(=O)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JMZJBCNHUJOLER-AYQCGTONSA-N 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 3
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 3
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- GSCPDZHWVNUUFI-UHFFFAOYSA-N 3-aminobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(N)=C1 GSCPDZHWVNUUFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine Chemical class C1=2NC(N)=NC(=O)C=2NC(=O)N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036832 Adenocarcinoma of ovary Diseases 0.000 description 2
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 2
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 2
- 102100033215 DNA nucleotidylexotransferase Human genes 0.000 description 2
- 108010008286 DNA nucleotidylexotransferase Proteins 0.000 description 2
- 101000814380 Homo sapiens Protein Wnt-7b Proteins 0.000 description 2
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 2
- 102100039470 Protein Wnt-7b Human genes 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- LCOMQMDZABGLTI-ZTSOMDGRSA-N [(8s,9s,10r,13s,14s)-10,13-dimethyl-3,11-dioxo-2,6,7,8,9,12,14,15,16,17-decahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl] acetate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CCC(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2=O LCOMQMDZABGLTI-ZTSOMDGRSA-N 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 2
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 2
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 2
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000006588 ovary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 231100000057 systemic toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- WTPMRQZHJLJSBO-LZFPPVAXSA-N (8s,9s,10r,13s,14s)-17-hydroxy-10,13-dimethyl-2,6,7,8,9,12,14,15,16,17-decahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthrene-3,11-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)(C(CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WTPMRQZHJLJSBO-LZFPPVAXSA-N 0.000 description 1
- 102000010400 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RRQDYEMTBDVXQY-UHFFFAOYSA-N 3-(4-nitrophenoxy)propanoic acid Chemical class OC(=O)CCOC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 RRQDYEMTBDVXQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEYMMOKECZBKAC-UHFFFAOYSA-N 3-chloropropanoic acid Chemical class OC(=O)CCCl QEYMMOKECZBKAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTZZCYNQPHTPPL-UHFFFAOYSA-N 3-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 RTZZCYNQPHTPPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100032187 Androgen receptor Human genes 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000006237 Beckmann rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BFWJYPOOCSABSY-UHFFFAOYSA-N ClCCC1=C(C(=C(C=C1)O)N)CCCl Chemical group ClCCC1=C(C(=C(C=C1)O)N)CCCl BFWJYPOOCSABSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDKVWSBZALFPSJ-UHFFFAOYSA-N ClCCN(C1=CC=C(OCCC(=O)Cl)C=C1)CCCl Chemical compound ClCCN(C1=CC=C(OCCC(=O)Cl)C=C1)CCCl RDKVWSBZALFPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940126161 DNA alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 101000779418 Homo sapiens RAC-alpha serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N N-phenyl amine Natural products NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910019213 POCl3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 1
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100033810 RAC-alpha serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002295 alkylating antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 108010080146 androgen receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000000719 anti-leukaemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 1
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001589 lymphoproliferative effect Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 230000000247 oncostatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 1
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- DJPZSBANTAQNFN-PXQJOHHUSA-N testosterone acetate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 DJPZSBANTAQNFN-PXQJOHHUSA-N 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J73/00—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms
- C07J73/001—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom
- C07J73/005—Steroids in which the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton has been modified by substitution of one or two carbon atoms by hetero atoms by one hetero atom by nitrogen as hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В формуле (I) R1 выбран из группы, состоящей из
R2 представляет собой H, R3 представляет собой H. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, обладающей противораковой активностью. Технический результат: получены новые соединения формулы (I), которые могут применяться для лечения рака яичника, рака молочной железы, рака предстательной железы или лейкоза. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 табл., 8 пр.
Description
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к новым гомо-аза-стероидным сложным эфирам с алкилирующими горчицами, производными анилина, такими как бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановая кислота и замещенные производные.
Предпосылки к созданию изобретения
В наше время алкилирующие противораковые агенты, такие как азотные горчицы, все еще остаются эффективным классом противоопухолевых лекарственных средств в текущей клинической практике, терапевтические эффекты которой происходят из их способности присоединять алкильные группы к клеточной ДНК и приводить к значительному повреждению ДНК (Hurley LH, Nature Rev Cancer, 2002, 2:188-200; Brendel M and Ruhland A, Mutat Res, 1984; 133:51-85).
Стероидные конъюгаты ранее использовались в качестве носителей цитотоксических алкилирующих агентов, потому что они уменьшают системную токсичность и улучшают эффективность терапии рака (Wall ME et al, J Med Chem, 1969, 12:810-8; Catane R, Cancer Treat Rep, 1978; 62:1264-5). Стероидные алкилирующие агенты, такие как эстрамустин (сложный эфир эстрадиола и мехлорэтамина) и преднимустин (сложный эфир преднизолона и хлорамбуцила) в настоящее время применяются в терапии рака для лечения рака предстательной железы и лимфопролиферативных злокачественных новообразований, соответственно (Catane R, Cancer Treat Rep, 1978, 62:1264-5; Matsumoto K et al, Med Oncol, 2013, 30:717; IARC Monogr Eval Carcinog Risks Hum, 1990, 50:115-22; Hiddemann W, Eur J Cancer, 1995, 31A(13-14):2141-5).
Хотя эти лекарственные средства проявляют уменьшенную острую и системную токсичность вопреки намного более высокой токсичности, которую их алкилирующие компоненты проявляют индивидуально, их противораковая активность улучшается не так сильно, также как специфичность нацеливания для раковых клеток оказывается ограниченной, несмотря на начальные оценки. Однако, даже если главные молекулярные фармакологические механизмы, через которые проявляется противораковая активность эстрамустина и преднимустина, довольно отличаются от специфического действия на стероидные рецепторы, в целом они показывают хорошую и улучшенную терапевтическую эффективность в клинической практике.
Несколько гомо-аза- или лактамовых стероидных сложных эфиров (стероиды, содержащие группу лактама -NHC=O- в стероидном кольце/кольцах, конъюгированных с алкилирующими агентами) были ранее синтезированы и протестированы на токсичность и противораковую активность в преклинических исследованиях, как in vitro, так и in vivo (Wampler GL and Catsoulacos P, Cancer Treat Rep, 1977, 61:37-41; Catsoulacos P and Catsoulacos D, Anticancer Res, 1991, 11:1773-7; Catsoulacos P and Catsoulacos D, Anticancer Res, 1993, 13(4):1203-8; Catsoulacos P et al, Oncology, 1994, 51:74-8; Catsoulacos P and Catsoulacos D, Anticancer Res, 1994, 14(6B):2525-8; Camoutsis C and Trafalis DT, Invest New Drugs, 2003, 21:47-54; Koutsourea AI et al, Bioorg Med Chem, 2008, 16:5207-15).
Было показано, что сложные алкилирующие эфиры лактама и стероида генерируют значительно уменьшенную острую токсичность in vivo, тогда как они продемонстрировали улучшенную и очень перспективную противоопухолевую активность in vitro и in vivo, в то время как соответствующие немодифицированные (нелактамные) стероидные алкилирующие агенты проявляли значительно более низкую или слабую противораковую активность против соответствующих экспериментальных опухолевых систем. Кроме повреждения клеточной ДНК, молекулярные фармакологические механизмы, значительно улучшившие противораковое действие алкилирующих сложных эфиров лактама и стероида, все еще неизведаны. Кроме того, биологическая важность положения, в котором одна или более групп лактама включены в стероидную структуру, также неизвестна. Кроме того, алкилирующий агент, конъюгированный через сложноэфирную связь с лактамовым стероидом, играет значительную роль и модулирует пропорцию острой токсичности и противоопухолевой активности, и, следовательно, степени терапевтического индекса, который генерирует лактамный стероидный алкилирующий агент. До сих пор несколько активных лактамных стероидных алкилирующих агентов были синтезированы и протестированы, но те, которые показывали более высокую противоопухолевую активность, были более токсичными, а те, которые демонстрировали более низкую токсичность, были менее активными. Эти наблюдения показывают, что существует четкая потребность в разработке и получении новых активных лактам-стероидных алкилирующих конъюгатов, генерирующих оптимальную более низкую токсичность и более высокую противораковую активность, и поэтому оптимальный терапевтический индекс.
Предыдущие исследования алкилирующих лактам-стероидных сложных эфиров производных азотной горчицы показали, что 3бета-гидрокси-13альфа-амино-13,17-секо-5альфа-андростан-17-овый-13,17-лактам-[p-[бис(2-хлорэтил)амино]фенил]ацетат (ASE, NSC 290205) показывал очень хорошо сбалансированные эффекты в преклиническом тестировании острой токсичности in vivo и противоопухолевой активности in vitro и in vivo, поддерживая существенно высокий терапевтический индекс.
3бета-гидрокси-13альфа-амино-13,17-секо-5альфа-андростан-17-овый-13,17-лактам-[p-[бис(2-хлорэтил)амино]фенил]ацетат (ASE, NSC 290205)
Поэтому ASE представляет собой «золотой» стандарт для разработки новых молекул того же класса агентов и тестирования их в отношении терапевтической эффективности по сравнению с эффективностью ASE.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к новым сложным эфирам стероидных лактамов и алкилирующих агентов. Более конкретно, соединения согласно настоящему изобретению являются сложными эфирами стероидных лактамов с производными бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты. Эти соединения показывают более высокую противоопухолевую активность и сниженную острую токсичность по сравнению со сложными алкилирующими эфирами стероидных лактамов предшествующего уровня техники и могут быть использованы в качестве противоопухолевых средств и средств для терапии рака.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли
в которой
R1 выбран из группы, состоящей из
R2 выбран из группы, состоящей из H, -CH3, -CH=CH2, -CH2-CH3, -CH2CH2CH3,
R3 выбран из группы, состоящей из H, -OH, -NH2.
Предпочтительно, R1 выбран из группы, состоящей из
Более предпочтительно, R1 выбран из группы, состоящей из
Предпочтительно, R2 выбран из группы, состоящей из H, -CH3, -CH=CH2, -CH2-CH3, -CH2CH2CH3. Более предпочтительно, R2 обозначает H.
Предпочтительно, R3 обозначает H или NH2.
Гидроксильная группа бис(2-хлорэтил)аминофенольной группы соединений формулы (I) может быть в орто-, мета- или пара-положении относительно аминогруппы фенильного кольца.
Соединения формулы (I) содержат по меньшей мере один центр асимметрии. Если стереохимия центра асимметрии не определена, структура охватывает все отдельные стереоизомеры, а также их смеси.
Соединения формулы (I) содержат по меньшей мере одну основную функциональную группу и способны поэтому образовывать фармацевтически приемлемые соли в результате обработки подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают фармацевтически приемлемые неорганические и фармацевтически приемлемые органические кислоты. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат, фосфат, нитрат, ацетат, пропионат, бутират, малеат, фумарат, тартрат, цитрат, лактат, оксалат, сукцинат и бензоат.
Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли могут использоваться для лечения широкого диапазона раковых заболеваний. Предпочтительно, они используются для лечения рака яичника, молочной железы, предстательной железы или лейкоза.
Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли показывают более высокую противоопухолевую активность и пониженную острую токсичность по сравнению со сложными алкилирующими эфирами стероидных лактамов предшествующего уровня техники и могут быть использованы в качестве противоопухолевых средств и средств для терапии рака. Преклиническое тестирование на биологическую активность, раскрытое далее в примерах, демонстрирует превосходство новых алкилирующих стероидных сложных эфиров лактама в плане терапевтической эффективности в отношении рака над двумя положительными контролями, алкилирующим агентом (3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановой кислотой, pBCEAPOPA) индивидуально, и «золотым» стандартом описанного класса экспериментальных лактам-стероидных алкилирующих агентов, ASE (NSC 290205).
Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль. Такая фармацевтическая композиция может быть составлена для введения любым подходящим путем, таким как пероральный, назальный, топический или парентеральный путь. Например, фармацевтическая композиция может быть составлена как таблетка, капсула, порошок, раствор, суспензия, крем или гель. Такая композиция обычно содержит, в дополнение к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтически приемлемый носитель. Такой носитель включает эксципиенты, известные в данной области техники, такие как разбавители, связующие, наполнители, разрыхлители, лубриканты, растворители, суспендирующие агенты, загустители, буферы, консерванты. Эти композиции могут быть получены согласно способам, известным в данной области техники.
Настоящее изобретение относится также к способам получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.
Стероидные лактамы (аза-гомо стероиды) в соединениях формулы (I) несут одну или более функциональных амидных групп в кольцах основной стероидной структуры. Известно, что такие стероидные лактамы могут быть синтезированы из кетостероида через соответствующие оксимы и перегруппировку Бекмана (Koutsourea AI et al, Steroids, 2003, 68(7-8):659-66; Mazur RH, J Org Chem, 1963, 28(1):248-250; Morzycki JW et al, Bioorg Med Chem, 1996, 4(8): 1209-15; Camoutsis C and Catsoulacos P, J Heterocycl Chem, 1983, 20(4):1093-4; Huang Y et al, Molecules, 2013, 18(7):7436-47).
Общая процедура перегруппировки Бекмана
Оксимы (1 ммоль) растворяли в 17,5 мл сухого диоксана. Смесь охлаждали до 0 °C, и тионилхлорид (1,9 мл) добавляли по каплям. Смеси давали достигнуть комнатной температуры и перемешивали в течение 24 ч. Реакцию гасили с помощью NaHCO3, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который далее очищали хроматографией на SiO2.
Производные бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты и соединений согласно настоящему изобретению могут быть получены следующим образом:
Замещенные 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановые кислоты синтезировали исходя из 4-нитрофенола. Алкилирование 4-нитрофенола различными 3-хлорпропановыми кислотами дало 3-(4-нитрофенокси)пропановые кислоты, которые далее восстанавливали до аминопроизводных с использованием H2 и Pd/C в качестве катализатора. Затем аминогруппу еще раз алкилировали этиленоксидом в CH3COOH, THF согласно известной процедуре (Valu et al, J Med Chem, 1990, 33 (11): 3014-19). Наконец, спиртовые группы превращали в соответствующие хлориды с использованием POCl3 в бензоле и нагревали, получая соответствующие 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановые кислоты. В некоторых случаях, когда присутствуют амино или гидроксильные группы, необходимы дополнительные стадии реакции присоединения и удаления защитных групп. Например, когда R3 обозначает группу NH2 или OH, используют Вос или ацетильные защитные группы, соответственно (Valu KK et al, J Med Chem, 1990, 33(11):3014-9). Согласно тому же способу, и исходя из 2-нитрофенола или 3-нитрофенола, могут быть синтезированы производные формулы (I), в которой гидроксильная группа находится в орто- или мета-положении относительно аминогруппы.
Для получения стероидных сложных эфиров лактама с алкилирующими агентами стероидные лактамы, содержащие группу OH, вводят в реакцию с ДНК-алкилирующим агентом. Например, стероидный лактам вводят в реакцию с 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановой кислотой, с DCC, DMAP или с 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропаноилхлоридом или со смешанным ангидридом 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановой кислоты для получения соответствующих сложных эфиров. Любой стероидный моно- или бис-лактам может быть дериватизован с использованием способа по изобретению.
Общая процедура A для этерификации стероидных лактамов
Спирт (1 ммоль) растворяли в 28 мл сухого дихлорметана. Затем добавляли кислоту (2 ммоль), DCC (2 ммоль) и каталитическое количество DMAP (3 мол.%). После перемешивания конечного раствора при комнатной температуре в течение 24 ч, растворитель выпаривали, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле.
Общая процедура B для этерификации стероидных лактамов
В круглодонной колбе 1 ммоль кислоты разбавляли в 3,3 мл сухого бензола. Добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (1,2 ммоль) и триэтиламин (2,4 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником в атмосфере Ar в течение 1 ч. К этой смеси добавляли раствор 50 мг стероидного спирта (1 ммоль) в 3,3 мл сухого бензола и каталитическое количество 4-диметиламинопиридина. Нагревание с обратным холодильником продолжали в течение 3 ч. Бензол полностью удаляли выпариванием в вакууме, и оставшийся остаток разбавляли CH2Cl2. Полученную смесь экстрагировали 5%-м водным раствором HCl, органический слой промывали 7%-м водным раствором NaHCO3 и наконец водой, высушивали над Na2SO4, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле.
Общая процедура C для этерификации стероидных лактамов
Смесь спирта (1 ммоль), Et3N (1,3 ммоль) и каталитического количества DMAP растворяли в CH2Cl2 (5 мл) с последующим добавлением бензоилхлорида (0,12 мл, 1,1 ммоль). Реакцию проверяли с помощью TLC, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем растворяли CH2Cl2 и гасили насыщенным водным раствором NH4Cl. Органический слой высушивали, и сырой продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле.
Следующие примеры служат для иллюстрации изобретения.
Пример 1
Схема 1
1: 3-Аза-17β-гидрокси-A-гомо-4α-андростен-4-он синтезировали модификацией (Camoutsis C и Catsoulacos P, J Heterocycl Chem, 1983, 20 (4):1093-4) процедуры в три стадии из тестостерон-17-β-ацетата. Тестостерон-17-β-ацетат (914 мг, 2,77 ммоль) растворяли в 10 мл сухого пиридина. Добавляли гидроксиламина гидрохлорид (461 мг, 6,64 ммоль), и раствор перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 6 ч. Раствор выливали в воду, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который далее очищали хроматографией на SiO2 (элюент; гексан-этилацетат=4/1) с получением 675 мг син- и анти-оксимов (74%) в форме твердого вещества белого цвета.
2: Син- и анти-оксимы тестостерон-17-ацетата (100 мг, 0,145 ммоль) растворяли в 3,5 мл сухого диоксана. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли по каплям тионилхлорид (0,6 мл). Смеси давали достигнуть комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Реакцию останавливали NaHCO3, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (этилацетат) с получением 63 мг 3-аза-17β-ацетокси-A-гомо-4α-андростен-4-она (63%) в форме твердого вещества белого цвета.
3-Аза-17β-ацетокси-A-гомо-4α-андростен-4-он 1 растворяли в 4,9 мл MeOH и добавляли по каплям LiOH (1н., 2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию останавливали NH4Cl, и смесь экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 87 мг 3-аза-17β-гидрокси-A-гомо-4α-андростен-4-она 2 с 74%-м выходом.
3: 3-аза-17β-гидрокси-A-гомо-4α-андростен-4-он 2 растворяли в 28 мл сухого дихлорметана. Затем добавляли 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановую кислоту (106 мг, 0,573 ммоль), DCC (119 мг, 0,574 ммоль) и каталитическое количество DMAP. После того, как конечный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, растворитель выпаривали, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (элюент; гексан-этилацетат=1/2) с получением конъюгата 3 (191 мг, 99%). 3: Т.пл.=53-56 ⁰C; [α]D 23 +10,5 (c=0,91 CHCl3); 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,92 (с, 1H), 6,83 (д, J=8,8 Гц, 2H), 6,66 (д, J=8,6 Гц, 2H), 5,72 (с, 1H), 4,66 (т, J=8,4 Гц, 1H), 4,17 (т, J=6,0 Гц, 2H), 3,63 (м, 4H), 3,59 (м, 4H), 3,32-3,04 (м, 2H), 2,75 (т, J=6,1 Гц, 2H), 2,48 (м, 1H), 2,27 (м, 1H), 2,15 (м, 2H), 1,50-1,98 (м, 10H), 1,33 (м, 2H), 1,14 (с, 3H), 1,05 (м, 1H), 0,80 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 171,0, 170,4, 161,3, 151,3, 140,8, 118,8, 116,3, 114,4, 82,7, 64,4, 54,2, 53,2, 50,2, 44,5, 42,7, 41,9, 40,7, 36,7, 36,2, 35,3, 33,8, 33,1, 27,5, 25,6, 24,9, 23,4, 21,3, 12,1; FT-IR: 3450, 2925, 1731, 1651, 1607, 1512, 1469, 1353, 1238, 1181, 1041, 869, 813.
Пример 2
Схема 2
4: Оксим эстрона синтезировали согласно ранее описанной процедуре (Ivanenko TI et al, Pharm Chem J, 1982, 16(10):751-6). К раствору эстрона (100 мг, 0,37 ммоль) в 2,2 мл абсолютного этанола добавляли гидроксиламин гидрохлорид (62 мг, 0,88 ммоль) и пиридин (1,2 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 часов. Затем добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; гексан: этилацетат=3:1) с получением 105 мг оксима эстрона (100%) в форме твердого вещества белого цвета.
5: Лактам 5 синтезировали согласно ранее описанной процедуре (Regan BM and Newton Hayes F, J Am Chem Soc, 1956, 78(3): 639-43). Оксим эстрона (108 мг, 0,376 ммоль) растворяли в 6,3 мл сухого диоксана. Смесь охлаждали до 0 °C, и тионилхлорид (0,7 мл) добавляли по каплям. Смеси давали достигнуть комнатной температуры и перемешивали в течение 24 ч. Реакцию останавливали NaHCO3, и смесь экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; гексан: этилацетат=2:1) с получением 42 мг лактама 5 (56% в расчете на рекуперированный исходный материал) вместе с рекуперированным исходным материалом [32 мг исходного материала (0,112 ммоль)].
6: Лактам 5 растворяли в 14 мл сухого DMF. Затем добавляли 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановую кислоту (90 мг, 0,293 ммоль), DCC (61 мг, 0,293 ммоль) и каталитическое количество DMAP. После того, как конечный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, растворитель выпаривали, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (элюент; дихлорметан/ацетон=2/1) с получением конъюгата 6 (56 мг, 68%). Конъюгат 6: [α]D 23+73,5 (c=0,90 CHCl3); 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 7,25 (д, J=6,0 Гц, 1H), 6,89 (д, J=8,8 Гц, 2H), 6,82 (с, 1H), 6,68 (д, J=8,8 Гц, 2H), 6,31 (с, 1H), 4,30 (т, J=6,1 Гц, 2H), 3,62 (дт, J=29,2, 6,6 Гц, 8H), 2,97 (дд, J=15,1, 9,0 Гц, 2H), 2,88 (м, 2H), 2,58-2,36 (м, 4H), 2,23-2,00 (м, 2H), 1,92-1,66 (м, 3H), 1,60-1,29 (м, 4H), 1,19 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 171,7, 169,8, 151,3, 148,5, 141,0, 137,8, 137,2, 126,1, 121,3, 118,7, 116,5, 114,5, 64,4, 54,4, 54,2, 46,6, 43,4, 40,7, 39,9, 38,9, 34,9, 30,5, 29,5, 26,5, 25,9, 22,1, 19,8; FTIR: 3329, 2927, 2850, 1757, 1626, 1577, 1512, 1437, 1311, 1244, 1157, 1088, 1045, 892.
Пример 3
Схема 3
7: 17-Гидроксиандрост-4-ен-3,11-дион (484 мг, 1,59 ммоль) растворяли в 2,2 мл уксусного ангидрида. Затем добавляли 4 мг (0,037 ммоль) DMAP и 0,25 мл сухого пиридина. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакцию останавливали водой, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; гексан: этилацетат=6:1) с получением 472 мг 17-ацетоксиандрост-4-ен-3,11-диона с 86%-м выходом. 7: Т.пл.=162-164°C [α]D 23+148,0 (c 1,68 CHCl3); 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 5,69 (с, 1H), 4,76 (т, J=8,6 Гц, 1H), 2,83-2,69 (м, 1H), 2,54-2,20 (м, 6H), 2,01 (д, J=1,2 Гц, 3H), 1,92 (м, 3H), 1,85-1,55 (м, 4H), 1,51-1,41 (м, 1H), 1,44-1,34 (м, 3H), 1,32-1,10 (м, 2H), 0,85-0,69 (м, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 208,3, 199,5, 170,8, 168,3, 124,6, 80,2, 62,6, 54,8, 49,4, 46,2, 38,2, 37,0, 34,7, 33,7, 32,1, 31,7, 27,6, 22,9, 20,9, 17,2, 12,8; FT-IR: 3443, 2958, 2935, 2850, 1732,1702, 1677, 1618, 1426, 1373, 1360, 1343, 1271, 1238, 1224, 1045, 1027
8: К раствору 17-ацетоксиандрост-4-ен-3,11-диона (465 мг, 1,35 ммоль) в 7 мл абсолютного этанола добавляли гидроксиламин гидрохлорид (100 мг, 1,44 ммоль) и сухой пиридин (4,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×40 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; дихлорметан: этилацетат=20:1) с получением 461 мг оксимов 8 (95%).
9: Оксим 8 (264 мг, 0,74 ммоль) растворяли в 13 мл сухого диоксана. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли по каплям тионилхлорид (1,4 мл). Смеси давали достигнуть комнатной температуры и перемешивали в течение 24 ч. Реакцию останавливали NaHCO3, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; этилацетат: метанол=1: 0,03) с получением 163 мг лактама 9 с 62%-м выходом. 9: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,39 (с, 1H), 5,75 (с, 1H), 4,78 (т, J=8,6 Гц, 1H), 3,35-3,18 (м, 1H), 3,09 (дт, J=14,7, 7,2 Гц, 1H), 2,67 (дд, J=14,9, 8,2 Гц, 1H), 2,48 (тд, J=13,6, 3,9 Гц, 1H), 2,34-2,20 (м, 3H), 2,14 (дд, J=9,3, 6,5 Гц, 1H), 2,03 (с, 3H), 2,01-1,86 (м, 2H), 1,83-1,53 (м, 5H), 1,48-1,37 (м, 1H), 1,38 (с, 3H), 1,28-1,08 (м, 1H), 0,76 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 209,0, 170,8, 169,5, 158,4, 120,1, 80,1, 62,4, 55,1, 49,9, 46,7, 43,6, 40,4, 36,8, 36,8, 35,5, 33,2, 27,6, 22,8, 21,1, 20,9, 12,8; FT-IR: 3428, 2971, 2920, 2878, 2364, 2341, 1736, 1701, 1664, 1639, 1599, 1444, 1375, 1339, 1245, 1127, 1089, 1046.
10: Лактам 9 76 мг (0,21 ммоль) растворяли в 3 мл MeOH и добавляли по каплям LiOH (1н., 1,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию останавливали NH4Cl, и смесь экстрагировали дихлорметаном (3×5 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением 67 мг лактама 10. 10: 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7,72 (с, 1H), 5,51 (с, 1H), 4,66 (д, J=4,7 Гц, 1H), 3,66 (дд, J=13,4, 8,4 Гц, 1H), 3,08-2,90 (м, 2H), 2,47-2,32 (м, 2H), 2,29 (д, J=11,5 Гц, 1H), 2,21 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,14-2,01 (м, 2H), 2,01-1,78 (м, 3H), 1,74-1,50 (м, 3H), 1,40 (м, 1H), 1,28 (с, 3H), 1,23 (с, 1H), 1,15-1,02 (м, 1H), 0,55 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, ДМСО) δ 210,2, 167,8, 157,3, 120,3, 78,1, 61,0, 54,5, 48,8, 47,1, 43,1, 40,4, 36,8, 35,5, 34,9, 33,1, 29,9, 22,3, 20,9, 11,8; FT-IR: 3423, 3262, 2952, 2923, 2853, 1693, 1647, 1609, 1458, 1407, 1375, 1353, 1261, 1062.
11: Лактам 10 растворяли в 8,2 мл сухого DCM. Затем добавляли 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановую кислоту (51 мг, 0,17 ммоль), DCC (51 мг, 0,25 ммоль) и каталитическое количество DMAP. После того, как конечный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, растворитель выпаривали, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (элюент; этилацетат) с получением конъюгата 11 (48,5 мг, 96%). Конъюгат 11: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,83 (д, J=9,0 Гц, 2H), 6,67 (д, J=9,0 Гц, 2H), 6,11 (с, 1H), 5,76 (с, 1H), 4,86 (т, J=8,6 Гц, 1H), 4,17 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,61 (м, 8H), 3,25 (м, 1H), 3,18-3,01 (м, 1H), 2,84-2,59 (м, 2H), 2,59-2,38 (м, 1H), 2,37-2,25 (м, 3H), 2,16 (м, 1H), 2,10-1,89 (м, 3H), 1,87-1,55 (м, 4H), 1,39 (с, 3H), 1,26 (м, 2H), 1,12 (м, 1H), 0,76 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 208,9, 170,9, 169,5, 158,7, 151,3, 140,9, 119,9, 116,2, 114,5, 80,4, 64,2, 62,4, 55,1, 54,3, 49,9, 46,8, 43,6, 40,7, 36,8, 35,5, 34,9, 33,9, 27,6, 25,6, 24,9, 22,8, 21,2, 12,8; FT-IR: 3432, 3328, 2927, 2850, 1733, 1701, 1664, 1626, 1599, 1513, 1444, 1389, 1369, 1310, 1273, 1243, 1179, 1087, 1041, 999.
Пример 4
Схема 4
13: К раствору 12 (100 мг, 0,28 ммоль) в 1,5 мл абсолютного этанола в закупоренную пробирку добавляли гидроксиламина гидрохлорид (21 мг, 0,31 ммоль) и сухой пиридин (0,9 мл). Смесь нагревали при 140°C в течение 7 дней. Затем добавляли воду, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×5 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
14: Сырые оксимы 13, описанные выше (0,28 ммоль), растворяли в 4,9 мл сухого диоксана. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли по каплям тионилхлорид (0,54 мл). Смеси давали достигнуть комнатной температуры и перемешивали в течение 24 ч. Реакцию останавливали NaHCO3, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении с получением сырого продукта, который затем очищали хроматографией на SiO2 (элюент; этилацетат: метанол=1: 0,1) с получением 52 мг лактама с 50%-м выходом. 14: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 7,00 (с, 1H), 5,77 (с, 1H), 5. 59 (с, 1H), 4,61 (т, J=8,3 Гц, 1H), 3,20 (м, 2H), 3,02 (дд, J=9,6, 5,0 Гц, 1H), 2,48-2,40 (м, 2H), 2,31 (д, J=13,7 Гц, 1H), 2,16 (м, 2H), 2,09-2,0-1,97 (м, 5H), 1,74-1,84 (м, 2H), 1,51-1,40 (м, 2H), 1,35-1,30 (м, 1H), 1,24 (с, 3H), 1,23 (м, 1H), 1,08 (м, 1H), 0,95 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 175,1, 170,9, 169,4, 156,3, 120,4, 80,1, 64,2, 55,5, 45,2, 44,6, 41,0, 40,8, 38,0, 36,3, 34,4, 31,0, 25,4, 25,2, 21,9, 21,0, 11,7.
15: Лактам 14 28 мг (0,084 ммоль) растворяли в 1,2 мл MeOH и добавляли по каплям LiOH (1 Н, 0,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию останавливали NH4Cl, и смесь экстрагировали этилацетат (3×5 мл). Органические слои высушивали (Na2SO4) и концентрировали при пониженном давлении. Сырой продукт далее очищали хроматографией на SiO2 (элюент; этилацетат: метанол=1: 0,1) с получением 28 мг лактама 15 со 100%-м выходом. 15: 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7,75 (с, 1H), 6,13 (д, J=3,9 Гц, 1H), 5,53 (с, 1H), 4,66 (д, J=5,3 Гц, 1H), 3,40 (м, 2H), 3,11-2,93 (м, 2H), 2,44-2,34 (м, 1H), 2,29 (с, 2H), 2,04-1,72 (м, 5H), 1,65 (м, 2H), 1,24 (м, 3H), 1,20 (с, 3H), 0,89 (м, 1H), 0,66 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, ДМСО) δ 174,6, 167,7, 156,1, 120,1, 78,1, 69,8, 63,4, 44,9, 44,2, 41,2, 40,4, 37,7, 35,3, 33,7, 31,3, 27,7, 24,4, 20,9, 10,7.
16: Лактам 15 (30 мг, 0,09 ммоль) растворяли в 9 мл сухого DCM. Затем добавляли 3-(4-(бис(2-хлорэтил)амино)фенокси)пропановую кислоту (67 мг, 0,22 ммоль), DCC (60 мг, 0,29 ммоль) и каталитическое количество DMAP. После того, как конечный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, растворитель выпаривали, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (элюент; этилацетат/MeOH=10/1) с получением конъюгата 16 (39 мг, 70%). 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,85 (д, J=9,0 Гц, 2H), 6,76 (с, 1H), 6,65 (д, J=9,0 Гц, 2H), 5,79 (с, 1H), 5,46 (с, 1H), 4,68 (т, J=8,3 Гц, 1H), 4,17 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,60 (м, 4H), 3,51-3,42 (м, 1H), 3,18 (м, 2H), 3,02 (дд, J=9,5, 5,0 Гц, 1H), 2,85-2,67 (м, 2H), 2,51 (д, J=13,8 Гц, 1H), 2,44 (дд, J=13,6, 10,1 Гц, 1H), 2,33 (д, J=13,8 Гц, 1H), 2,25-2,06 (м, 2H), 2,07-1,73 (м, 5H), 1,73-1,28 (м, 5H), 1,25 (с, 3H), 1,17-1,03 (м, 2H), 0,96 (с, 3H); 13C ЯМР (126 МГц, cdcl3) δ 174,7, 170,9, 169,1, 155,6, 151,3, 140,9, 120,7, 116,3, 114,4, 80,5, 64,2, 64,1, 55,5, 54,2, 45,3, 44,5, 41,1, 40,7, 38,1, 36,3, 34,8, 34,4, 33,9, 31,0, 25,6, 25,5, 25,2, 24,9, 21,9, 11,8. FT-IR: 3410, 3330, 2926, 2850, 1734, 1654, 1627, 1577, 1513, 1445, 1349, 1273, 1243, 1180, 1133, 1110, 1087, 1044, 890.
Пример 5
Схема 5
Лактам 17 синтезировали согласно Koutsourea et al (Steroids, 2003, 68(7-8):659-66).
18: В круглодонной колбе 48 мг (0,157 ммоль) кислоты разбавляли в 0,5 мл сухого бензола. Добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (30 мкл, 0,189 ммоль) и триэтиламин (53 мкл, 0,378 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником под Ar в течение 1 ч. К этой смеси раствор добавляли стероидного спирта 50 мг (0,157 ммоль) в 0,5 мл сухого бензола и каталитическое количество 4-диметиламинопиридина. Нагревание продолжали в течение 3 ч. Бензол полностью удаляли выпариванием в вакууме, и остаток разбавляли CH2Cl2. Полученную смесь экстрагировали 5%-м водным раствором HCl, органический слой промывали 7%-м водным раствором NaHCO3 и наконец водой, высушивали над Na2SO4, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем (элюент; этилацетат/MeOH=100/1) с получением 46 мг конъюгата 18 с 48%-м выходом. Конъюгат 18: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,84 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,67 (д, J=8,5 Гц, 2H), 5,90 (с, 1H), 5,86 (с, 1H), 4,78 (м, 1H), 4,19 (м, 2H), 3,58-3,59 (м, 8H), 3,48 (м, 1H), 2,61-1,25 (18-й), 1,29 (с, 3H), 0,88 (с, 3H); [M+H]+ =605.
Пример 6
Схема 6
Лактам 19 синтезировали согласно Koutsourea et al (Steroids, 2003, 68(7-8):659-66).
20: В круглодонной колбе 46 мг (0,15 ммоль) кислоты разбавляли в 0,5 мл сухого бензола. Добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (28 мкл, 0,18 ммоль) и триэтиламин (50 мкл, 0,36 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником под Ar в течение 1 ч. К этой смеси добавляли раствор 50 мг (0,150 ммоль) стероидного спирта в 0,5 мл сухого бензола и каталитическое количество 4-диметиламинопиридина. Нагревание продолжали в течение 3 ч. Бензол полностью удаляли выпариванием в вакууме, и остаток разбавляли CH2Cl2. Полученную смесь экстрагировали 5%-м водным раствором HCl, органический слой промывали 7%-м водным раствором NaHCO3 и наконец водой, высушивали над Na2SO4, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем (элюент; этилацетат/MeOH=100/2) с получением 19 мг конъюгата 20 с 20%-м выходом. 20: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 7,18 (с, 1H), 6,84 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,65 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,60 (с, 1H), 5,82 (с, 1H), 4,80 (1H, m), 4,21 (2H, m), 3,50 (м, 8H), 3,20 (1H, m), 2,80-1,30 (19Н), 1,20 (с, 3H), 0,9 (с, 3H); [M+H]+=621.
Пример 7
Схема 7
Лактам 21 синтезировали согласно Koutsourea et al (Steroids, 2003, 68(7-8):659-66).
22: В круглодонной колбе 37 мг (0,12 ммоль) кислоты разбавляли в 0,4 мл сухого бензола. Добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (22 мкл, 0,144 ммоль) и триэтиламин (40 мкл, 0,288 ммоль), и смесь нагревали с обратным холодильником под Ar в течение 1 ч. К этой смеси добавляли раствор 50 мг (0,120 ммоль) стероидного спирта в 0,4 мл сухого бензола и каталитическое количество 4-диметиламинопиридина. Нагревание продолжали в течение 3 ч. Бензол полностью удаляли выпариванием в вакууме, и остаток разбавляли CH2Cl2. Полученную смесь экстрагировали 5%-м водным раствором HCl, органический слой промывали 7%-м водным раствором NaHCO3 и наконец водой, высушивали над Na2SO4, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем (элюент; этилацетат) с получением 34 мг конъюгата 22 с 40%-м выходом 22: 1H ЯМР (500 МГц, cdcl3) δ 6,84 (д, J=8,5 Гц, 2H), 6,60 (д, J=8,5 Гц, 2H), 5,90 (с, 1H), 5,79 (с, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,15 (м, 2H), 3,5 (м, 8H), 3,25 (м, 1H), 2,8-0,8 (22Н); [M+H]+=605.
Пример 8
In vitro и in vivo биологическое тестирование на противораковая активность
A) In vitro противораковая активность
Девять устойчивых человеческих линий раковых клеток (таблица 1) обрабатывали для тестирования цитостатической и цитотоксической активности недавно синтезированных соединений. Клеточные линии получали из American Type Culture Collection (ATCC) и выращивали в другой культуральной среде согласно инструкциям. Тест с использованием MTT ((3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромид) является известным и стандартным методом для оценки цитостатической и цитотоксической активности лекарственных средств и химикатов (Trafalis DT et al, J BUON, 2003, 8:333-9; Trafalis DT et al, J BUON, 2004, 9(3):275-82; Trafalis DT et al, J BUON, 2005; 10:227-34; Trafalis DT et al, Breast Cancer Res Treat, 2006, 97:17-31). Кратко, клетки высевали в планшет с 96 лунками при плотности -3×104 клеток/мл на лунку и сохраняли в течение 72 ч при 37°C в инкубаторе с 5% CO2, и выращивали в виде монослоев или суспензий. Через 24 часа клетки обрабатывали 0,1-100 мкмоль/л соединений в течение 48 ч. Жизнеспособность культивируемых клеток оценивали с помощью метаболического теста MTT (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), как описано ранее. Поглощение конвертированного красителя измеряли при длине волны 540 нм на считывателе ELISA (Versamax, Орлеан, США). Средние концентрации каждого лекарственного средства, генерирующие 50% или общее (100%) ингибирование роста (GI50 и TGI, соответственно), а также концентрации лекарственного средства, приводящие к цитотоксичности против 50% культивируемых клеток [(половина максимальной цитотоксической концентрации (IC50)], вычисляли с помощью способа линейной регрессии. Используя семь измерений поглощения [время 24 ч (Ct24), контрольный рост 72 ч (Ct72) и тестовый рост в присутствии лекарственного средства на пяти уровнях концентрации (Tt72x)], процент роста вычисляли на каждом уровне концентраций лекарственного средства. Процент ингибирования роста вычисляли согласно National Cancer Institute (NCI) как: [(Tt72x)-(Ct24)/(Ct72)-(Ct24)] x 100 для концентраций, для которых Tt72x>Ct24 и [(Tt72x)-(Ct24)/Ct24] x 100 для концентраций, для который Tt72x<Ct24; GI50 вычисляли от [(Tt72x)-(Ct24)/(Ct72)-(Ct24)] x 100=50, TGI от [(Tt72x)-(Ct24)/(Ct72)-(Ct24)] x 100=0, и IC50 от [(Tt72x)-(Ct24)/Ct24] x 100=50. Все эксперименты проводили в трех экземплярах.
Таблица 1
| Тип рака | Обозначение линии клеток человека | Онкогены | Специальные характеристики |
| Овариальная аденокарцинома | SK-OV-3 (SKOV-3) | Фактор некроза опухоли; Дифтерийный токсин; Цисплатин и Адриамицин резистентная | |
| Эпителиальная овариальная аденокарцинома | NIH:OVCAR-3 | Андроген/Эстроген/Прогестерон рецептор-положительная; Адриамицин, Мелфалан и Цисплатин резистентная |
|
| Рак яичника | UWB1,289 | p53 + BRCA1 - (видоизмененный) |
Эстроген/Прогестерон рецептор-отрицательный |
| Рак яичника | UWB1,289+BRCA1 | p53 + BRCA1 + |
Эстроген/Прогестерон рецептор-отрицательный |
| Эпителиальная аденокарцинома молочной железы | MCF7 | WNT7B + | Эстроген рецептор-положительная Белки, связывающие инсулиноподобный фактор роста (IGFBP) BP 2; BP 4; BP 5 |
| Эпителиальная аденокарцинома молочной железы | T-47D | WNT7B + | кальцитонин; андроген рецептор, положительная; прогестерон рецептор, положительная; глюкокортикоид; пролактин; эстроген рецептор, положительная |
| Аденокарцинома предстательной железы | PC-3 | Гормонрезистентная | |
| Острый T-лимфобластный лейкоз | MOLT-4 | Экспрессируемый терминальной дезоксинуклеотидил трансферазой (TdT) | |
| Хронический миелогенный лейкоз | K-562 |
Результаты in vitro цитостатического (GI50, TGI) и цитотоксического эффектов (IC50) протестированных соединений в отношении человеческих линий раковых клеток представлены в Таблицах 2, 3, 4.
Таблица 2
| Соединения | ||||||||||||
| ЛИНИИ РАКОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА | pBCEAPOPA | ASE | 22 | |||||||||
| GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | ||||
| UWB1.289 | 20 | 76 | >100 | 16 | 30 | 54 | 80 | >100 | >100 | |||
| UWB1.289+BRCA1 | >100 | >100 | >100 | 80 | >100 | >100 | >100 | >100 | >100 | |||
| OVCAR-3 | 56 | 92 | >100 | 36 | 52 | 64 | >100 | >100 | >100 | |||
| SKOV-3 | 50 | >100 | >100 | 45 | 92 | >100 | >100 | >100 | >100 | |||
| MCF-7 | >100 | >100 | >100 | 29 | 57 | 96 | >100 | >100 | >100 | |||
| T-47D | 95 | >100 | >100 | 22 | 47 | 92 | 85 | >100 | >100 | |||
| PC-3 | 89 | >100 | >100 | 34 | 49 | 89 | 90 | >100 | >100 | |||
| MOLT-4 | 31 | 75 | >100 | 8 | 56 | 93 | 22 | 63 | >100 | |||
| K-562 | 46 | 91 | >100 | 9 | 78 | >100 | 36 | 94 | >100 | |||
Таблица 3
| Соединения | ||||||||||||
| ЛИНИИ РАКОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА | 18 | 20 | 6 | |||||||||
| GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | ||||
| UWB1.289 | 13 | 42 | 70 | 9 | 36 | 76 | 6 | 20 | 44 | |||
| UWB1.289+BRCA1 | 20 | 38 | 69 | 30 | 76 | >100 | 18 | 66 | 88 | |||
| OVCAR-3 | 20 | 47 | 70 | 54 | 82 | >100 | 30 | 40 | 56 | |||
| SKOV-3 | 24 | 46 | 68 | 42 | 78 | >100 | 12 | 76 | >100 | |||
| MCF-7 | 21 | 46 | 79 | 25 | 68 | >100 | 15 | 36 | 65 | |||
| T-47D | 14 | 32 | 72 | 26 | 59 | 98 | 10 | 30 | 55 | |||
| PC-3 | 23 | 36 | 70 | 29 | 44 | 68 | 16 | 29 | 51 | |||
| MOLT-4 | 5 | 38 | 76 | 11 | 46 | 85 | 5 | 28 | 50 | |||
| K-562 | 6 | 38 | 87 | 13 | 49 | 90 | 5 | 30 | 50 | |||
Таблица 4
| Соединения | ||||||||||||
| ЛИНИИ РАКОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА | 3 | 11 | 16 | |||||||||
| GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | GI50 | TGI | IC50 | ||||
| UWB1.289 | 3 | 8 | 20 | 6 | 20 | 25 | 3 | 28 | 40 | |||
| UWB1.289+BRCA1 | 12 | 25 | 40 | 22 | 31 | 42 | 12 | 32 | 50 | |||
| OVCAR-3 | 21 | 32 | 42 | 8 | 18 | 22 | 9 | 20 | 35 | |||
| SKOV-3 | 18 | 52 | 76 | 20 | 32 | 44 | 20 | 46 | 70 | |||
| MCF-7 | 17 | 38 | 70 | 25 | 68 | >100 | 15 | 36 | 65 | |||
| T-47D | 10 | 25 | 66 | 26 | 59 | 98 | 10 | 30 | 55 | |||
| PC-3 | 22 | 30 | 56 | 29 | 44 | 68 | 16 | 29 | 51 | |||
| MOLT-4 | 3 | 27 | 65 | 1,5 | 20 | 45 | 4 | 36 | 56 | |||
| K-562 | 3 | 30 | 71 | 2 | 35 | 55 | 7 | 47 | 65 | |||
B) In vivo острая токсичность
Для внутрибрюшинного (i.p.) лечения сток-растворы тестируемых соединений готовили непосредственно перед использованием. Их суспендировали в кукурузном масле в желаемой концентрации после начального растворения в 10%-м диметилсульфоксиде (DMSO). Эта концентрация отдельно не оказывала заметного токсического эффекта.
Самки мыши C57Bl/6 использовались для исследований токсичности. Мышей получали из экспериментальной секции Греческого Института Пастера.
Кратко, острую токсичность, вызванную тестируемыми соединениями, определяли, как ранее было очень хорошо описано (Catsoulacos P et al, Cancer Chemother Pharmacol, 1979, 3(1):67-70; Catsoulacos P et al, J Pharm Sci, 1978, 67(9):1342-3; Catsoulacos P et al, Anticancer Res, 1995; 15:827-30) после единственной внутрибрюшинной (i.p.) инъекции в группах из десяти (10) мышей C57Bl/6 в четырех различных дозировках; мышей наблюдали в течение 30 дней, и терапевтическую дозу соединений, обычно определяемую как LD10 (летальная доза для 10% животных), а также LD50 (летальная доза для 50% животных) определяли после графической оценки (30-дневные кривые). Токсичность протестированных соединений оценивали по летальности у мышей C57Bl/6. Значения LD50 и LD10 были оценены графически, где процент смертей вследствие токсичности каждой дозы был показан на оси ординат, в то время как введенные дозы были показаны на оси абсцисс (таблица 5).
C) In vivo противоопухолевая активность
Эксперимент инициировали в день 0 путем внутрибрюшинной (i.p.) имплантации 106 клеток асцита лимфолейкоза P388 согласно протоколу National Cancer Institute (NCI), США. Для i.p. лечения сток-растворы тестируемых соединений готовили непосредственно перед использованием. Противоопухолевую активность оценивали по онкостатическому параметру T/C%, который означает среднее время выживания (MST) обработанных лекарственным средством животных (T) по отношению к обработаному солевым раствором контролю (C). Согласно NCI (США), минимальный критерий активности составляет T/C выше, чем 125%. Кроме того, противоопухолевую активность оценивали по числу долговременно выживших (излечение: определенное как мыши, живые в течение 90 дней после инокуляции опухоли) (Golidim A et al, Nat Cancer Inst Monogr, 1980, 55: 25-26; NCI Monograph, NIH publication 1986, 55:80-193).
Самки мышей BALB/c scid использовались для оценки противоопухолевой активности. Эти животные несут тяжелую комбинированную мутацию иммунодефицита (scid) на фоне BALB/c, и они были получены от NCSR ʺDemokritosʺ, Институт Биологии. Мышей сохраняли в условиях постоянной температуры и влажности, в стерильных клетках, с водой и едой. Шесть мышей были включены в каждую группу лечения и восемь в контрольную группу.
Тестируемую терапевтическую дозу соединений определяли при соответствующей LD10 (мг/кг).
Таблица 5. Острая токсичность соединений у C57Bl/6. LD50 и LD10=летальные дозы для 50% и 10% популяции леченных мышей.
| СОЕДИНЕНИЯ | LD50 (мг/кг) | LD10 (мг/кг) | ||||||
| pBCEAPOPA | 20 | 15 | ||||||
| ASE | 50 | 30 | ||||||
| 3 | 150 | 130 | ||||||
| 6 | 100 | 80 | ||||||
| 18 | 110 | 85 | ||||||
| 20 | 135 | 110 | ||||||
| 22 | - | >300 | ||||||
| 11 | 130 | 100 | ||||||
| 16 | 165 | 140 | ||||||
Таблица 6. Антилейкозная активность тестируемых соединений против мышиного лимфолейкоза P388 in vivo.
| Соединения | Схема лечения |
Доза (LD10)
(мг/кг) |
MST ± SD
(дни) |
T/C% | Излечение |
| pBCEAPOPA | День 1 | 15 (IP) | 19 | 211* | 0/6 |
| ASE | День 1 | 30 (IP) | 24 | 267* | 0/6 |
| 3 | День 1 | 130 (IP) | 39 | 433* | 0/6 |
| 6 | День 1 | 80 (IP) | 36 | 400* | 0/6 |
| 18 | День 1 | 85 (IP) | 34 | 378* | 0/6 |
| 20 | День 1 | 110 (IP) | 32 | 356* | 0/6 |
| 11 | День 1 | 100 (IP) | 56 | 622* | 1/6 |
| 16 | День 1 | 140 (IP) | 44 | 489* | 0/6 |
| Контроль | День 1 | Солевой раствор | 9 ± 1,5 | 100 | 0/8 |
*p <0,001
Самки мышей BALB/c scid использовались для in vivo оценки противоопухолевой активности тестируемых соединений против рака яичника человека SCOV-3. Суспензии 3×106 раковых клеток SCOV-3/0,2 мл/мышь имплантировали подкожно в правый или левый бок каждого животного. Мышей содержали в условиях постоянной температуры и влажности в стерильных клетках с водой и едой. Десять мышей были включены в каждую группу лечения и контроля. Тестирование осуществляли согласно известным лабораторным протоколам. Эффективность лекарственных средств определяли по среднему изменению объема опухоли у подвергнутых лечению животных (T) по сравнению с контролем (C) (T/C%= TI, Ингибирование опухоли) и увеличению среднего времени выживания, согласно кинетике опухолевых клеток и биологическим свойствам. Объемы или массы опухоли вычисляли как 0,52×a 2 ×b, где a и b являются меньшей и большей осями опухоли, и данные выстраивали на полулогарифмическом графике как средние объемы опухоли ± стандартное отклонение от среднего (±SEM) по сравнению с временем после лечения. Когда опухоли достигали в объеме 0,085-0,1 мм3, мышей разделяли на контрольную группу и группу медикаментозного лечения (10 мышей/группа) со схожими средними объемами опухоли в каждой группе. Тестируемые соединения вводили внутрибрюшинно в дозах LD10/4 соответственно в дни 1, 5 и 9.
Для оценки противоопухолевого эффекта (a) определяли среднее изменение массы опухоли или объема опухоли за неделю, и ингибирование опухоли (TI) вычисляли формулой: TI(%)= [1)(TWT)TWZ)/(TWC)TWZ)]x100, где TWT определяется как масса опухоли (мг) или объем опухоли (мм3) у подвергнутых лечению животных во время оценки, TWZ определяется как масса опухоли (мг) или объем опухоли (мм3) во время инициирования лечения (нулевое время или день 1), TWC определяется как масса опухоли (мг) или объем опухоли (мм3) у не подвергнутых лечению животных (контроль) во время оценки, (b) процент выживших (OS %) в День 70, (c) процент выживших без развития опухоли (PFS %) в день 70. Результаты продемонстрированы в Таблице 7.
Таблица 7. Противоопухолевая активность тестируемых соединений против человеческого рака яичника SCOV-3 in vivo.
| Соединения | Схема лечения |
Доза (LD10/4)
(мг/кг) |
TI % в день 35 | OS% в день 70 | PFS% в день 70 |
| pBCEAPOPA | Дни 1,5,9 | 4 (IP) | 17 | 40 | 0 |
| ASE | Дни 1,5,9 | 8 (IP) | 34 | 80 | 40 |
| 3 | Дни 1,5,9 | 32 (IP) | 62 | 100 | 100 |
| 6 | Дни 1,5,9 | 20 (IP) | 56 | 100 | 100 |
| 18 | Дни 1,5,9 | 21 (IP) | 44 | 100 | 80 |
| 20 | Дни 1,5,9 | 28 (IP) | 41 | 100 | 70 |
| 11 | Дни 1,5,9 | 25 (IP) | 73 | 100 | 100 |
| 16 | Дни 1,5,9 | 37 (IP) | 55 | 100 | 100 |
| Контроль | Дни 1,5,9 | Солевой раствор | 0 | 0 | 0 |
Все различия в TI%, OS%, PFS% были значимыми на уровнях p<0,05-0,001
D) Фармакологические эффекты
Новые лактам-стероидные алкилирующие агенты оказывают значительное ингибирующее действие на активность поли(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP1/2), демонстрируя полумаксимальные ингибирующие концентрации (IC50) менее 1,7 мкM, лучше, чем известный ингибитор PARP1/2 3-аминобензамид (3-AB). Кроме того, новые лактам-стероидные алкилирующие агенты вызывают существенные изменения в транскрипции и экспрессии мРНК PARP1 и PARP2 зависимым от дозы и времени образом, in vitro и in vivo. Сначала или в более низких дозах они могут вызвать увеличение экспрессии мРНК PARP1 и PARP2, которое вплоть до 5-400 раз выше, чем контрольные значения, генерируя изменения внутриклеточной концентрации NAD+ и клеточное истощение ATФ, и позднее или в более высоких дозах они вызывают уменьшение экспрессии мРНК PARP1 и PARP2, которое может достигнуть значений, близких к 100%. Новые лактам-стероидные алкилирующие агенты вызывают значительное повреждение ДНК, сопоставимое с вызываемым одним только их алкилирующим компонентом, при оценке in vitro в тесте Сестринского хроматидного обмена (SCE) и in vivo путем продукции аддуктов 8-гидрокси-2'-дезоксигуанозина (8-OHdG) в сыворотке или моче, в то время как они генерируют значительно более высокую противоопухолевую активность. Кроме того, новые лактам-стероидные алкилирующие агенты значительно ингибируют (> 60%) фосфорилирование ERK1/2 и AKT1/2, и, следовательно, активацию молекулярных сигнальных путей PI3K и MAPK. Впервые молекулярные фармакологические эффекты лактам-стероидных алкилирующих агентов были исследованы подробно.
Claims (14)
1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль
в которой R1 выбран из группы, состоящей из
R2 представляет собой H,
R3 представляет собой H.
2. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R1 выбран из группы, состоящей из
3. Соединение по п. 2 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R1 выбран из группы, состоящей из
4. Соединение по п. 2 или его фармацевтически приемлемая соль, в котором R1 выбран из группы, состоящей из
5. Соединение по любому из пп. 1-4 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения рака яичника, рака молочной железы, рака предстательной железы или лейкоза.
6. Фармацевтическая композиция, обладающая противораковой активностью, содержащая в качестве активного ингредиента соединение по любому из пп. 1-4 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP15386022.6 | 2015-06-29 | ||
| EP15386022 | 2015-06-29 | ||
| PCT/EP2016/065071 WO2017001439A1 (en) | 2015-06-29 | 2016-06-28 | Esters of steroidal lactam and bis(2-chloroethyl) aminophenoxy propanoic acid derivatives |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018103071A RU2018103071A (ru) | 2019-07-30 |
| RU2018103071A3 RU2018103071A3 (ru) | 2019-09-30 |
| RU2719457C2 true RU2719457C2 (ru) | 2020-04-17 |
Family
ID=53716416
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018103071A RU2719457C2 (ru) | 2015-06-29 | 2016-06-28 | Сложные эфиры стероидного лактама и производных бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10208083B2 (ru) |
| EP (1) | EP3186268B1 (ru) |
| JP (1) | JP6708670B2 (ru) |
| KR (1) | KR102647748B1 (ru) |
| CN (1) | CN107835817B (ru) |
| AU (1) | AU2016286205B8 (ru) |
| BR (1) | BR112017027850B1 (ru) |
| CA (1) | CA2990307C (ru) |
| CY (1) | CY1121264T1 (ru) |
| DK (1) | DK3186268T3 (ru) |
| ES (1) | ES2712429T3 (ru) |
| HK (1) | HK1248241A1 (ru) |
| HR (1) | HRP20190327T1 (ru) |
| HU (1) | HUE043468T2 (ru) |
| IL (1) | IL256456B (ru) |
| LT (1) | LT3186268T (ru) |
| MX (1) | MX369930B (ru) |
| PL (1) | PL3186268T3 (ru) |
| PT (1) | PT3186268T (ru) |
| RS (1) | RS58630B1 (ru) |
| RU (1) | RU2719457C2 (ru) |
| SI (1) | SI3186268T1 (ru) |
| TR (1) | TR201902369T4 (ru) |
| WO (1) | WO2017001439A1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU828970A3 (ru) * | 1976-02-19 | 1981-05-07 | Актиеболагет Лео (Фирма) | Способ получени сложных эноль-НыХ эфиРОВ СТЕРОидОВ |
| SU1361152A1 (ru) * | 1983-07-08 | 1987-12-23 | Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР | Сложные моноэфиры 5 @ -андростандиола-3 @ ,17 @ ,про вл ющие противоопухолевую и гормональную активность |
| WO2013142873A2 (en) * | 2012-03-23 | 2013-09-26 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Complex and structurally diverse compounds |
-
2016
- 2016-06-28 PL PL16739424T patent/PL3186268T3/pl unknown
- 2016-06-28 MX MX2017016679A patent/MX369930B/es active IP Right Grant
- 2016-06-28 CA CA2990307A patent/CA2990307C/en active Active
- 2016-06-28 LT LTEP16739424.6T patent/LT3186268T/lt unknown
- 2016-06-28 HR HRP20190327TT patent/HRP20190327T1/hr unknown
- 2016-06-28 ES ES16739424T patent/ES2712429T3/es active Active
- 2016-06-28 DK DK16739424.6T patent/DK3186268T3/en active
- 2016-06-28 WO PCT/EP2016/065071 patent/WO2017001439A1/en not_active Ceased
- 2016-06-28 SI SI201630188T patent/SI3186268T1/sl unknown
- 2016-06-28 JP JP2017567610A patent/JP6708670B2/ja active Active
- 2016-06-28 PT PT16739424T patent/PT3186268T/pt unknown
- 2016-06-28 HK HK18105389.8A patent/HK1248241A1/zh unknown
- 2016-06-28 RS RS20190229A patent/RS58630B1/sr unknown
- 2016-06-28 BR BR112017027850-2A patent/BR112017027850B1/pt active IP Right Grant
- 2016-06-28 KR KR1020187002060A patent/KR102647748B1/ko active Active
- 2016-06-28 US US15/738,328 patent/US10208083B2/en active Active
- 2016-06-28 AU AU2016286205A patent/AU2016286205B8/en active Active
- 2016-06-28 HU HUE16739424A patent/HUE043468T2/hu unknown
- 2016-06-28 TR TR2019/02369T patent/TR201902369T4/tr unknown
- 2016-06-28 CN CN201680038078.XA patent/CN107835817B/zh active Active
- 2016-06-28 RU RU2018103071A patent/RU2719457C2/ru active
- 2016-06-28 EP EP16739424.6A patent/EP3186268B1/en active Active
-
2017
- 2017-12-20 IL IL25645617A patent/IL256456B/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-02-13 CY CY20191100191T patent/CY1121264T1/el unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU828970A3 (ru) * | 1976-02-19 | 1981-05-07 | Актиеболагет Лео (Фирма) | Способ получени сложных эноль-НыХ эфиРОВ СТЕРОидОВ |
| SU1361152A1 (ru) * | 1983-07-08 | 1987-12-23 | Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР | Сложные моноэфиры 5 @ -андростандиола-3 @ ,17 @ ,про вл ющие противоопухолевую и гормональную активность |
| WO2013142873A2 (en) * | 2012-03-23 | 2013-09-26 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Complex and structurally diverse compounds |
Non-Patent Citations (8)
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE68917129T2 (de) | Wasserlösliche antineoplastische taxolderivate. | |
| AU780989B2 (en) | 3alpha-hydroxy-3beta methoxymethyl-21-heterocycle substituted steroids with anesthetic activity | |
| CN104955833B (zh) | 齐墩果酸的c17-烷二基与烯二基衍生物及其使用方法 | |
| HK1225383A1 (zh) | 二氮杂环庚烷衍生物及其用途 | |
| CN104768965A (zh) | 齐墩果酸的c17-杂芳基衍生物和其使用方法 | |
| JPS5829939B2 (ja) | 抗ウイルス剤 | |
| CN114989182A (zh) | 脂质化合物、包含其的组合物及应用 | |
| WO2020247054A1 (en) | Compounds, conjugates, and compositions of epipolythiodiketopiperazines and polythiodiketopiperazines and uses thereof | |
| RU2719457C2 (ru) | Сложные эфиры стероидного лактама и производных бис(2-хлорэтил)аминофеноксипропановой кислоты | |
| CN101365461A (zh) | 舒林酸（sulindac）衍生物、其用途和其制备 | |
| CZ301158B6 (cs) | Deriváty triterpenoidu pro lécbu nádorových onemocnení a farmaceutická kompozice je obsahující | |
| WO2019094732A1 (en) | Inhibitors of cyclic-amp response element-binding protein | |
| CN102227410B (zh) | 二[o-(14-苯甲酰乌头宁-8-基)]酯 | |
| FI80440B (fi) | Analogifoerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara afidkolanderivat. | |
| CN106565641A (zh) | 呋喃半日花烷二萜衍生物及其药物组合物和其在制药中的应用 | |
| EP1594886A1 (de) | Antitumor wirksame 2-substituierte d-homoestra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate | |
| TW200804400A (en) | Meridamycin analogues for the treatment of neurodegenerative disorders | |
| WO2024107075A1 (en) | Hybrid compounds of sclareol and doxorubicin, their synthesis and application | |
| KR20230114274A (ko) | 5α-하이드록시-6β-[2-(1H-이미다졸-4-일)에틸아미노]콜레스탄-3β-올의전구약물 및 암 치료에 사용하기 위한 이를 포함하는 약제학적 조성물 | |
| EP1594884A1 (de) | Antitumor wirksame 2-substituierte 18a-homoestra-1,3,5(10)-trien-3-yl sulfamate |