RU2709539C1 - Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний - Google Patents
Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- RU2709539C1 RU2709539C1 RU2019125750A RU2019125750A RU2709539C1 RU 2709539 C1 RU2709539 C1 RU 2709539C1 RU 2019125750 A RU2019125750 A RU 2019125750A RU 2019125750 A RU2019125750 A RU 2019125750A RU 2709539 C1 RU2709539 C1 RU 2709539C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- haee
- peptide
- substance
- pharmaceutical composition
- blood
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 33
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 title claims abstract description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims abstract description 21
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 12
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 37
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 abstract description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 abstract description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 22
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 18
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 17
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 10
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 10
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 8
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 7
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 7
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 7
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 6
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 6
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 6
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 6
- SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N 3-Aminopropanesulfonate Chemical compound NCCCS(O)(=O)=O SNKZJIOFVMKAOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 5
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 5
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 4
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- -1 Zn (II) ions Chemical class 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000006886 spatial memory Effects 0.000 description 3
- 238000012549 training Methods 0.000 description 3
- 229960003570 tramiprosate Drugs 0.000 description 3
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 2
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 2
- 230000004572 zinc-binding Effects 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150090724 3 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000012186 Alzheimer disease 3 Diseases 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101000609947 Homo sapiens Rod cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000920026 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member EDAR Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 229940125647 RAED Drugs 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 102100039177 Rod cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 102100030810 Tumor necrosis factor receptor superfamily member EDAR Human genes 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002744 anti-aggregatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000005574 cross-species transmission Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- YNLAOSYQHBDIKW-UHFFFAOYSA-M diethylaluminium chloride Chemical compound CC[Al](Cl)CC YNLAOSYQHBDIKW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 208000025688 early-onset autosomal dominant Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 208000015756 familial Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000002682 neurofibrillary tangle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000035761 normovolemia Effects 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229920001977 poly(N,N-diethylacrylamides) Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 102000013498 tau Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010026424 tau Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/28—Compounds containing heavy metals
- A61K31/315—Zinc compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/07—Tetrapeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/38—Albumins
- A61K38/385—Serum albumin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Neurology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии и медицины и представляет собой фармацевтическую композицию для лечения нейродегенеративных заболеваний, содержащую эффективное количество пептида HAEE в эквимолярном комплексе HAEE-Zn-HSA с цинком и человеческим сывороточным альбумином в форме раствора для внутривенного введения с фармацевтически приемлемым носителем, выбранным из круга нейтральных носителей и разбавителей. Технический результат заключается в повышении стабильности и биодоступности активной субстанции - пептида HAEE, а также в улучшении когнитивных функций. 5 ил., 6 табл., 4 пр.
Description
Изобретение относится к биохимии и медицине и представляет собой фармацевтическую композицию, которая обеспечивает эффективную доставку тетрапептида [Acetyl]-His-Ala-Glu-Glu-[Amide] (HAEE), используемого в качестве лекарственной субстанции, через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) для лечения нейродегенеративных заболеваний, включая деменцию Альцгеймеровского типа (болезнь Альцгеймера). Авторами настоящего изобретения показано, что указанная композиция позволяет резко улучшить фармакокинетические характеристики и увеличить биодоступность лекарственной субстанции HAEE, что может значительно усилить терапевтический эффект от ее применения за счет предупреждения образования амилоидных бляшек путем полимеризации или агрегации в-амилоидных пептидов.
Болезнь Альцгеймера (далее БА) является самой распространенной нейродегенеративной патологией в мире и клинически сопровождается неуклонным снижением когнитивных функций (Гаврилова С.И. (2007). Фармакотерапия болезни Альцгеймера. Москва: Пульс.). Наследственные варианты болезни Альцгеймера составляют менее 1% всех случаев этой патологии и ассоциированы с мутациями в генах (Rogaev E.I., Sherrington R., Rogaeva E.A., Levesque G., Ikeda M., Liang Y., Chi H., Lin C., Holman K., Tsuda T., and Et Al. (1995) Familial Alzheimer's disease in kindreds with missense mutations in a gene on chromosome 1 related to the Alzheimer's disease type 3 gene. Nature. 376, 775-778), приводящими к конституциональному превышению физиологически нормального уровня бета-амилоида (Aβ), – короткого гетерогенного по С-концу полипептида длиной 39-43 аминокислотных остатков (Querfurth H.W., and Laferla F.M. (2010) Alzheimer's Disease. New England Journal of Medicine. 362, 329-344). Причины возникновения спорадических вариантов БА, которые охватывают более 95% пациентов, остаются неизвестными, но тесно связаны с аномальной агрегацией эндогенного Aβ. Существует три главных нейроморфологических признака, которые однозначно подтверждают (посмертно) диагноз для всех вариантов БА: - наличие в специфических отделах головного мозга характерных внеклеточных агрегатов, т.н. амилоидных бляшек, основными компонентами которых являются различные изоформы Aβ и ионы биометаллов цинка, а также меди и железа,
- внутриклеточные нейрофибриллярные клубки, где главный компонент – гиперфосфорилированный белок тау,
- дегенерация нейронов (Cummings J.L. (2004) Alzheimer's Disease. New England Journal of Medicine. 351, 56-67.). В настоящее время доступно лишь симптоматическое лечение БА, направленное на преодоление нейротрансмиттерного дефицита и замедляющее в среднем на 1-3 года переход пациента из относительно самостоятельного в абсолютно беспомощное состояние (Cummings J., Morstorf T., and Zhong K. (2014) Alzheimer's disease drug-development pipeline: few candidates, frequent failures. Alzheimer's Research & Therapy. 6, 37).
В патенте РФ № 2414925, публ.27.03.2011 представлено применение терапевтического человеческого альбумина для изготовления лекарственного средства для лечения пациентов, страдающих когнитивными расстройствами путем терапевтической плазмафильтрации. При этом, альбумин присутствует в среде замены при концентрации от 4% вплоть до 25 мас.%/об. При некоторых применениях альбумин присутствует при концентрации примерно от 4,5% до 5,5 мас.%/об. Причем независимо от концентрации бета-амилоида в крови, при применении терапевтической плазмафильтрации и замены объема нормоволемии альбумина с определенной частотой терапии происходит увеличение объема гиппокампа, которому сопутствует улучшение клинических симптомов болезни Альцгеймера. Это может быть следствием факторов, которые являются растворимыми и проницаемыми через гематоэнцефалический барьер. Однако способ плазмафильтрации часто вызывает осложнения и применим не для всех категорий пациентов.
Согласно широко принятой «амилоидной гипотезе», превращение физиологически нормального Aβ из мономерного состояния в растворимые нейротоксичные олигомеры, а затем в нерастворимые полимерные агрегаты, которые в конце концов накапливаются в виде амилоидных бляшек, является пусковым процессом патогенеза БА (Karran E., Mercken M., and De Strooper B. (2011) The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 10, 698-712.). Поэтому предотвращение церебрального амилоидогенеза путем ингибирования патологической олигомеризации Aβ, т.н. анти-амилоидная терапия, считается наиболее перспективной стратегией лечения БА (Schenk D., Basi G.S., and Pangalos M.N. (2012) Treatment Strategies Targeting Amyloid β-Protein. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine.). Было найдено, что синтетический пептид HAEE специфически связывается с металл-связывающим доменом 1-16 Aβ по участку 11-14, блокирует цинк-индуцированную димеризацию домена и замедляет агрегацию полноразмерного Aβ in vitro (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice. J Alzheimers Dis. 46, 849-853). Внутривенные инъекции пептида HAEE замедляли развитие церебрального амилоидогенеза у мышей линии B6C3-Tg(APPswe, PSEN1-dE9)85Dbo/j, которые используются в качестве животной модели БА: среднее число амилоидных бляшек на срезе мозга уменьшалось с 14.2 ± 3.1 (для контрольных животных) до 5.8 ± 2.1 (для животных, подвергнутых терапевтическому воздействию) (Tsvetkov P.O., Cheglakov I.B., Ovsepyan A.A., Mediannikov O.Y., Morozov A.O., Telegin G.B., and Kozin S.A. (2015) Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice. J Alzheimers Dis. 46, 849-853.). По этому показателю эффективность препарата HAEE значительно превосходит анти-амилоидное действие Alzhemed (Tramiprosate) - одного из самых известных анти-агрегационных лекарственных кандидатов для лечения болезни Альцгеймера (Aisen P.S., Gauthier S., Ferris S.H., Saumier D., Haine D., Garceau D., Duong A., Suhy J., Oh J., Lau W.C., and Sampalis J. (2011) Tramiprosate in mild-to-moderate Alzheimer's disease - a randomized, double-blind, placebo-controlled, multi-centre study (the Alphase Study). Arch Med Sci. 7, 102-111.). При использовании Alzhemed в трансгенных мышах линии TgCRND8 происходило уменьшение числа амилоидных бляшек на 30% по сравнению с контрольными животными (Gervais F., Paquette J., Morissette C., Krzywkowski P., Yu M., Azzi M., Lacombe D., Kong X., Aman A., Laurin J., Szarek W.A., and Tremblay P. (2007) Targeting soluble Aβ peptide with Tramiprosate for the treatment of brain amyloidosis. Neurobiology of Aging. 28, 537-547.). Таким образом, в настоящее время пептид HAEE является одним из самых эффективных антиамилодных препаратов в мире (Goyal D., Shuaib S., Mann S., and Goyal B. (2017) Rationally Designed Peptides and Peptidomimetics as Inhibitors of Amyloid-β (Aβ) Aggregation: Potential Therapeutics of Alzheimer’s Disease. ACS Combinatorial Science. 19, 55-80.). Молекулярный механизм антиамилоидного действия тетрапептида HAEE хорошо установлен (Козин С.А., Барыкин Е.П., Митькевич В.А., Макаров А.А. (2018) Антиамилоидная терапия болезни Альцгеймера: современное состояние и перспективы. Биохимия. 83, 1331-1342.), и для оказания своего терапевтического воздействия эта субстанция должна проникать сквозь гематоэнцефалический барьер (ГЭБ).
Из уровня техники известно изобретение с целью лечения нейродегенеративных заболеваний, в частности болезни Альцгеймера, имеющее отношение к новому пептидному соединению Ra-R1-R2-R3-R4-Rb (I) или Ra-R4-R3-R2-R1-Rb (II), где Ra представляет собой N-концевую первичную аминную группу аминокислоты R1 или R4, либо свободную, либо замещенную аминозащитной группой, Rb представляет собой гидроксильную группу С-концевой карбоксильной группы аминокислоты R1 или R4, либо свободную, либо замещенную гидроксизащитной группой, и R1-R2-R3-R4 или R4-R3-R2-R1 представляют собой HADD, KADD, DDAK, RADD, DDAR, KAED, DEAK, RAED, DEAR, HADE, EDAH, KADE, EDAK, RADE, EDAR, HAEE, EEAH, KAEE, EEAK, RAEE и EEAR, главным образом используемому для связывания с в-амилоидными пептидами и/или предотвращения или уменьшения образования амилоидных бляшек, главным образом за счет ингибирования полимеризации вышеупомянутого амилоидного пептида в виде амилоидных бляшек. Причем, предпочтительно пептидное соединение, соответственно данному изобретению, выбрано из соединений с формулой (I) или (II), где R1-R2-R3-R4 или R4-R3-R2-R1, представлено одним из двух тетрапептидов HAEE и RADD. Наиболее предпочтительные пептидные соединения соответствуют формулам Ac-HAEE-NH2 и Ac-RADD-NH2. Также описана композиция для снижения или предотвращения связывания ионов Zn (II) с в-амилоидным пептидом, содержащая в качестве активного вещества указанное пептидное соединение, степень чистоты которого составляет по меньшей мере 98%, и фармацевтически приемлемый носитель для парентерального, чрескожного или чресслизистого введения. (патент РФ № 2588143 от 24.10.2011года, правообладатель КИМОНЕЛЛА ВЕНЧЕРС ЛТД (CY)).
Однако известно, что короткие заряженные пептиды типа HAEE имеют очень короткое время жизни в плазме крови (от нескольких секунд до нескольких минут) и с трудом проходят через ГЭБ, что существенно ослабляет эффективность их терапевтического воздействия (Fosgerau K., and Hoffmann T. (2015) Peptide therapeutics: current status and future directions. Drug Discovery Today. 20, 122-128; Wade J., and Otvos L. (2014) Current Challenges in Peptide-based Drug Discovery. Frontiers in Chemistry. 2.).
Задачей изобретения является создание фармацевтической композиции для лечения нейродегенеративных заболеваний с улучшенными фармакокинетическими характеристиками на основе субстанции HAEE.
Технический результат - увеличение биодоступности активной субстанции - пептида HAEE в мозге в пять раз за счет повышенной способности проходить ГЭБ; увеличение времени полувыведения субстанции HAEE из организма в два раза; улучшение когнитивных функций экспериментальных животных на 20%.
Поставленная задача достигается тем, что фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения нейродегенеративных деменций, в том числе болезни Альцгеймера, содержит эффективное количество субстанции HAEE в эквимолярном комплексе с цинком и человеческим сывороточным альбумином (HAEE-Zn-HSA) в форме раствора для внутривенного введения с фармацевтически приемлемым носителем, выбранным из круга нейтральных носителей и разбавителей.
Известно, что альбумин обеспечивает транспорт ряда пептидов, включая бета-амилоид, через ГЭБ (Boada M., Anaya F., Ortiz P., Olazaran J. (2017) Efficacy and Safety of Plasma Exchange with 5% Albumin to Modify Cerebrospinal Fluid and Plasma Amyloid-в Concentrations and Cognition Outcomes in Alzheimer's Disease Patients: A Multicenter, Randomized, Controlled Clinical Trial. Journal of Alzheimer's disease : JAD. 56, 129-143.) и образует стабильный комплекс с одним ионом цинка (Blindauer C.A., Harvey I., Bunyan K.E., Stewart A.J., Sleep D., Harrison D.J., Berezenko S., and Sadler P.J. (2009) Structure, Properties, and Engineering of the Major Zinc Binding Site on Human Albumin. Journal of Biological Chemistry. 284, 23116-23124.).
Неожиданно было обнаружено, что HAEE образует специфический эквимолярный комплекс с цинк-связанным альбумином - HAEE-Zn-HSA.
Авторами настоящего изобретения экспериментально доказано, что заявленная композиция HAEE-Zn-HSA в форме раствора для внутривенного введения, где фармацевтически приемлемым носителем является, например, физиологический раствор, по сравнению с чистым тетрапептидом HAEE позволяет при внутривенном введении экспериментальным животным:
˗ в два раза увеличить время полувыведения HAEE из организма;
˗ в пять раз увеличить биодоступность этой субстанции в мозге;
˗ на 20% улучшить когнитивные функции экспериментальных животных.
Следовательно, заявленное изобретение соответствует условию новизны и изобретательского уровня.
Изобретение иллюстрируется следующими фигурами.
Фиг. 1 - Фармакокинетические кривые «концентрация - время» в крови крыс, однократное внутривенное введение в дозах 50, 300 и 900 мкг/кг, где:
А - зависимость концентрация-время в прямых координатах;
Б - представление данных в полулогарифмических координатах. Сплошные линии - аппроксимация экспериментальных данных уравнениями убывающей биэкспоненциальной зависимости в диапазоне 4-30 мин (двухкомпартментная модель). Пунктирные линии – результаты линеаризации экспоненциальных участков кривой (10-30 мин; моноэкспоненциальная зависимость) для расчета ряда фармакокинетических параметров.
Фиг.2 - Зависимость значений максимальной концентрации препарата HAEE в крови (Сmax) и кажущейся максимальной концентрации пептида на экспоненциальном участке кривой концентрация-время (В), площади под фармакокинетической кривой от 0 до 30 минут (AUC(0-30)) и от 0 до бесконечности (AUC(0-∞)) в зависимости от дозы препарата при однократном внутривенном введении препарата HAEE крысам (средняя масса –350 г), где А – AUC(0-30); Б – AUC(0-∞); В– Сmax; Г – В (кажущаяся максимальная концентрация пептида на экспоненциальном участке кривой концентрация-время).
Фиг. 3 – Фармакокинетические кривые «концентрация HАЕЕ - время» в крови кролика, внутривенное введение в дозе 0,12 мг/кг, где А - Зависимость концентрация-время в прямых координатах; Б - Представление данных в полулогарифмических координатах.
Фигура 4 - Концентрация препарата HAEE в крови в зависимости от времени.
Фигура 5 – Результаты теста «Водный лабиринт Морриса». (* - p<0.05 в сравнении с 1-м днем тестирования для группы HAEE в сравнении с контрольными группами (интактные трансгенные мыши и мыши дикого типа; U-testMann–Whitney, n=10 для каждой группы).
Приведенные ниже примеры являются подтверждением соответствия заявленного изобретения условию промышленной применимости.
ПРИМЕР 1. Экспериментальное свидетельство способности HAEE образовывать стабильные цинк-опосредованные межмолекулярные комплексы с человеческим альбумином.
При экспериментальных процедурах для приготовления водных растворов (если не указано другое) использовался коммерчески доступный лиофилизированный препарат тетрапептида синтетического HAEE (чистота более 98%).
Образование межмолекулярных комплексов между HAEE (аналитом) и иммобилизованным на поверхности биосенсорного чипа человеческим альбумином (лигандом) в отсутствии и в присутствии ионов цинка в количестве 100 микромолей/Литр в буферной системе, было исследовано с помощью биосенсора на эффекте поверхностного плазмонного резонанса (БППР) «BIAcore 3000» (GE Healthcare, США) в водных буферных системах при физиологических значениях pH. По результатам таких экспериментов рассчитывается значение константы диссоциации (Кд) взаимодействия растворимого аналита и иммобилизованного лиганда. Если значение Кд равно или меньше 10-4 М, то такое взаимодействие рассматривается в качестве биологически значимого.
Сенсорный чип CM5 с гидрофильной карбоксиметилированной декстрановой матрицей, подходящий буфер HBS (10 мМ HEPES, pH 7.4, 150 мМ NaCl, 3 мМ EDTA, 0.005% ПВА P20), 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-25 carbodiimide (EDC), N-hydroxysuccinimide (NHS), 2-(2-pyridinyldithio)-ethaneamine (PDEA), используемые в анализах, были закуплены у компании-производителя (BIAcore, GE, USA). Иммобилизация лиганда проводилась в соответствие с протоколами компании-производителя и с использованием соответствующих рабочих растворов. БППР эксперименты были проведены на инструменте «BIAcore 3000» (GE Healthcare, США). Человеческий альбумин (ЧА) был использован в качестве лиганда, который иммобилизировали через свободные аминогруппы по стандартному протоколу производителя. Для получения сенсограмм в отсутствии и в присутствии ионов цинка в количестве 100 микромолей/Литр концентрации образцов растворов HAEE (аналита) были 0, 2, 5, 10, 15 и 20 микромолей/Литр. После математической обработки полученного набора сенсограмм была установлена константа диссоциации образующихся комплексов между аналитом и лигандом.
На основании полученных данных было найдено, что константа диссоциации цинк-опосредованных взаимодействий между HAEE и иммобилизованным ЧА составляет 8.3 ± 0.7Ч10-7 M. При этом в отсутствии ионов цинка взаимодействия между HAEE и ЧА не наблюдалось. Таким образом, доказано образование стабильных межмолекулярных комплексов между человеческим альбумином и тестируемым пептидом в присутствии ионов цинка. Следовательно, тетрапептид HAEE согласно изобретению представляет собой субстанцию, способную образовывать стабильный межмолекулярный комплекс с цинк-связанным человеческим альбумином.
ПРИМЕР 2. Приготовление фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA.
В соответствии с настоящим изобретением фармацевтическая композиция HAEE-Zn-HSA в подходящей водной буферной системе, в диапазоне значений pH от 4 до 8, в присутствии или в отсутствии различных солей включает в себя эквимолярные количества субстанции HAEE, человеческого альбумина и ионов цинка, например, в форме хлорида цинка ZnCl2. При этом по каждому компоненту допускается отклонения в 20% (по массе). Например, для приготовления фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA, пригодной для проведения доклинических исследований 5 мг HAEE, 600 мг человеческого альбумина и 0,5 мг хлорида цинка (ZnCl2) растворяли в 20 миллилитрах физиологического раствора.
ПРИМЕР 3. Сравнительный анализ фармакокинетики препарата HAEE и субстанции HAEE из состава фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA.
Исследования фармакокинетики препарата HAEE, меченного тритием (радиохимическая чистота более 98%), выполнены на мышах линии C57Bl/6, крысах Wistar и кроликах породы Шиншилла. Определяли значения основных фармакокинетических показателей при однократном и многократном внутривенном введении данных препаратов, проверяли гипотезу линейности, т.е. зависимость значений фармакокинетических показателей от введенной дозы препарата, и изучали распределение субстанции HAEE между кровью и периферическими тканями.
Меченный пептид [3H] HAEE был получен в реакции высокотемпературного твердофазного каталитического изотопного обмена как было описано ранее (Yu.A. Zolotarev, A.K. Dadayan, Yu.A. Borisov, V.S. Kozik, // Solid State Isotope Exchange with Spillover Hydrogen in Organic Compounds. / Chemical Reviews, 2010, 110, 5425–5446).
Пример 3.1. Группе крыс (N=6) был однократно внутривенно введен препарат HAEE в дозах 50, 300 и 900 мкг/кг. Отобранные и взвешенные пробы крови и тканей после специальной пробоподготовки подвергали радиохроматографическому анализу с помощью ВЭЖХ. Фармакокинетический профиль субстанции HAEE после однократного внутривенного введения препарата HAEE крысам (N=6) в дозах 50, 300 и 900 мкг/кг приведен на фигуре 1.
Усредненные значения основных фармакокинетических показателей субстанции HAEE после однократного внутривенного введения крысам препарата HAEE в дозах 50, 300 и 900 мкг/кг сведены в таблице 1.
Таблица 1
где
AUC0-∞ - площадь под фармакокинетической кривой концентрация-время от нуля до бесконечности;
AUC0-30 - площадь под фармакокинетической кривой «концентрация-время» от нуля до 30 минут;
Clт – общий клиренс (объем плазмы, который очищается от препарата в единицу времени);
Cmax - максимальное измеренное значение концентрации вещества в плазме крови;
Cmax/AUC(0-∞) - относительная скорость всасывания;
D – введенная доза вещества;
fт – тканевая доступность фармакологического средства, fт = AUC(0-20)ткань/AUC(0-20)кровь;
Kd – кажущийся коэффициент распределения фармакологического средства;
Kel - константа скорости выведения вещества из крови;
MRT – среднее время удержания (среднее время пребывания соединения в крови);
N – количество измерений (или количество животных в экспериментальной группе);
r2 – коэффициент детерминации;
T1/2(el) - время полувыведения вещества из крови;
Tmax – время достижения максимальной концентрации вещества в плазме крови;
Th1 - T-лимфоциты хелперы 1 (эффекторы гиперчувствительности замедленного типа);
Vd - кажущийся объем распределения вещества в центральном компартменте.
Зависимость параметров, приведенных в таблице 1 от введенной дозы представлена на фигуре 2.
В диапазоне исследованных доз от 50 до 900 мкг/кг фармакокинетика препарата HAEE у крыс имеет дозозависимый линейный характер: значения показателей Cmax и AUC0→∞ возрастают линейно с увеличением дозы изучаемого препарата. При этом, значения фармакокинетических показателей Kel, и T1/2el, полученных в однокомпартментной модели и характеризующих выведение субстанции HAEE из крови крыс, имеют близкие значения для всех исследованных доз препарата HAEE. На основании выявленных линейных зависимостей значений фармакокинетических показателей AUC0-∞ и Cmax от величины введенной дозы сделан вывод о линейности фармакокинетики препарата HAEE у крыс при однократном внутривенном введении.
Пример 3.2.
Многократное внутривенное введение препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг крысам (N=36) через день на протяжении 28 дней.
Результаты усредненных значений фармакокинетических показателей субстанции HAEE после однократного и многократного внутривенного введения крысам препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг и его потенциальной аккумуляции приведены в таблице 2.
При сравнении значений фармакокинетических показателей субстанции HAEE после однократного и многократного внутривенного введения крысам препарата HAEE в дозе, близкой к терапевтической, не выявлено статистически значимых различий в значениях всех изученных показателей, следовательно, многократное внутривенное введение препарата HAEE не приводит к его аккумуляции и не вызывает изменения профиля фармакокинетики изучаемого препарата относительно его однократного введения.
У крыс при оценке результатов фармакокинетики после однократного внутривенного введения в нескольких дозах продемонстрирована линейность фармакокинетики субстанции HAEE на основании найденных линейных зависимостей фармакокинетических параметров AUC0-∞ и Cmax от величины введенной дозы. Значения периода полувыведения HAEE у крыс составили 22-25 минут в изученных дозах. При оценке результатов фармакокинетики пептида HAEE при многократном введении не выявлено его кумуляции в организме крыс, а также изменения характера фармакокинетики HAEE относительно его однократного введения.
Пример 3.3.
Однократное внутривенное введение препарата HAEE кроликам (N=3) в дозе 0,12 мг/кг.
Фармакокинетический профиль пептида HAEE в крови кроликов приведен на фигуре 3.
Усредненные значения основных фармакокинетических показателей субстанции HAEE после однократного внутривенного введения препарата HAEE кроликам в дозе 0,12 мг/кг приведены в таблице 3.
Таблица 3
У кроликов максимальная концентрация HAEE (255 нг/мл) в крови отмечается уже через 4 мин после внутривенного введения. Время полувыведения пептида HAEE из крови кролика составляет 20 минут. Субстанция HAEE характеризуется быстрым выведением из крови, которое обусловлено его быстрым распределением по тканям организма с последующим протеолитическим гидролизом.
Пример 3.4.
Однократное внутрибрюшинное введение мышам (N=36) препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг.
Результаты изучения распределения субстанции HAEE после однократного внутрибрюшинного введения препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг в крови мышей в зависимости от времени приведены на фигуре 4.
Значения концентрации субстанции HAEE в крови и тканях мышей после однократного внутрибрюшинного введения препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг в различных временных точках приведены в таблице 4.
Значения фармакокинетических показателей субстанции HAEE в крови и внутренних органах мышей после однократного внутрибрюшинного введения препарата HAEE в дозе 0,3 мг/кг приведены в таблице 5.
В исследовании распределения субстанции HAEE между кровью и периферическими тканями показано, что его максимальная концентрация зафиксирована в тканях почек мышей. Наименьшая концентрация субстанции HAEE отмечена в жировой ткани сальника. Для всех исследуемых органов изменение концентрации препарата HAEE во времени было пропорционально изменению его уровня в системном кровотоке. Также установлено, что исследуемый препарат способен преодолевать гематоэнцефалический барьер – для ткани мозга кажущийся коэффициент распределения пептида HAEE имел значение Kd = 0,173, где Kd = Сткань / Скровь.
Таким образом, по результатам изучения фармакокинетики препарата HAEE после однократного внутривенного введения крысам в нескольких дозах продемонстрирована линейность его фармакокинетики. При многократном введении препарата HAEE не выявлено его аккумуляции в организме крыс, а также изменения характера фармакокинетики субстанции HAEE относительно его однократного введения. Пептид HAEE характеризуется быстрым выведением из крови, которое обусловлено его быстрым распределением по тканям организма с последующим протеолитическим гидролизом. При оценке распределения между кровью и периферическими тканями мышей показано, что максимальная концентрация субстанции HAEE наблюдалась в тканях почек. Подтверждена способность субстанции HAEE преодолевать гематоэнцефалический барьер.
Пример 3.5.
Исследования фармакокинетики субстанции HAEE из фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA было проведено на мышах при однократном внутрибрюшинном введении данной композиции. В таблице 6 приведено сравнение биодоступности с использованием кажущегося коэффициента распределения для мозга Kd и времени полувыведения T1/2 субстанции HAEE в зависимости от формы инъецированного препарата (препарат HAEE или фармацевтическая композиция HAEE-Zn-HSA) при однократном внутрибрюшинном введении мышам линии C57Bl/6 (N= 36) в дозе 0,05 мг/кг в пересчете на субстанцию HAEE.
Таким образом, использование фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA по сравнению с препаратом HAEE примерно в два раза увеличивает период полувыведения активной субстанции HAEE из организма и примерно в пять раз увеличивает биодоступность этой субстанции в мозге.
ПРИМЕР 4. Сравнительный анализ влияния внутривенных инъекций препарата HAEE и композиции HAEE-Zn-HSA на когнитивные функции экспериментальных животных.
Для сравнительной оценки влияния HAEE и фармацевтической композиции HAEE-Zn-HSA на характеристики памяти и обучения экспериментальных животных была использована стандартная методика оценки пространственной памяти в водном лабиринте Морриса. Водный лабиринт Морриса является классическим инструментом для оценки пространственной памяти, зависящей от функции гиппокампа. Важно отметить, что именно в гиппокампе у пациентов при болезни Альцгеймера и у трасгенных мышей линии «AвPP/PS1» агрессивно развивается церебральный амилоидоз. Были использованы четыре группы семимесячных мышей:
- интактные животные линии «AвPP/PS1» (N «intact» = 10 голов),
- инъектированные препаратом HAEE мыши линии «AвPP/PS1» (N «HAEE» = 10 голов; препарат вводился внутривенно в дозе 0,05 мг/кг три раза - в возрасте 4, 5 и 6 месяцев),
- инъектированные препаратом HAEE-Zn-HSA мыши линии «AвPP/PS1» (N «HAEE-Zn-HSA» = 10 голов; препарат вводился внутривенно в дозе 0,05 мг/кг три раза - в возрасте 4, 5 и 6 месяцев),
- контрольные мыши дикого типа (N «wt» = 10 голов).
Результаты анализа пространственной памяти животных, полученные в этом тесте и представленные на Фиг. 5, продемонстрировали значительную разницу между интактными и инъектированными мышами линии «AвPP/PS1». Начиная с 3-го дня обучения время, которое требовалось контрольным животным (дикого типа) и инъектированным препаратом HAEE трансгенным мышам для нахождения платформы, достоверно сокращалось. В то же время в группе интактных мышей линии «AвPP/PS1» это время оставалось таким же, как и на 1-й день обучения. Таким образом, было показано, что систематические внутривенные инъекции HAEE в дозах по 0,05 мг/кг приводили к улучшению способности животных к обучению и поддержанию долговременной памяти по сравнению с интактной контрольной группой трансгенных мышей, что свидетельствует о существенном когнитивно-стимулирующем эффекте этой субстанции.
При использовании для инъекций препарата на основе композиции HAEE-Zn-HSA эффект улучшения когнитивных функций, продемонстрированный инъекциями препарата HAEE, был существенно усилен, а именно, время нахождения платформы животными, которым вводился препарат на основе композиции HAEE-Zn-HSA, уменьшилось на 20% по сравнению с мышами, которым вводился препарат HAEE. Таким образом, фармацевтическая композиция HAEE-Zn-HSA повышает эффективность терапевтического действия пептида HAEE.
Claims (1)
- Фармацевтическая композиция для лечения нейродегенеративных заболеваний, содержащая эффективное количество пептида HAEE в эквимолярном комплексе HAEE-Zn-HSA с цинком и человеческим сывороточным альбумином в форме раствора для внутривенного введения с фармацевтически приемлемым носителем, выбранным из круга нейтральных носителей и разбавителей.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019125750A RU2709539C1 (ru) | 2019-08-15 | 2019-08-15 | Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019125750A RU2709539C1 (ru) | 2019-08-15 | 2019-08-15 | Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2709539C1 true RU2709539C1 (ru) | 2019-12-18 |
Family
ID=69007023
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019125750A RU2709539C1 (ru) | 2019-08-15 | 2019-08-15 | Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2709539C1 (ru) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2767030C1 (ru) * | 2021-05-20 | 2022-03-16 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Способ получения пептида Ac-His-Ala-Glu-Glu-NH2 |
| RU2777871C1 (ru) * | 2021-08-03 | 2022-08-11 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Способ лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014984A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Аммониевая соль пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014986A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Магниевый комплекс пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014982A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Медный комплекс пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014980A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Калиевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014983A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Цинковый комплес пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014981A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Натриевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014985A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Кальциевый комплекс пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5763576A (en) * | 1995-10-06 | 1998-06-09 | Georgia Tech Research Corp. | Tetrapeptide α-ketoamides |
| US20050037992A1 (en) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | John Lyons | Composition and method for treating neurological disorders |
| RU2588143C2 (ru) * | 2010-10-27 | 2016-06-27 | Кимонелла Венчерс Лтд | Пептидное соединение, полезное для ингибирования образования амилоидных бляшек |
-
2019
- 2019-08-15 RU RU2019125750A patent/RU2709539C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5763576A (en) * | 1995-10-06 | 1998-06-09 | Georgia Tech Research Corp. | Tetrapeptide α-ketoamides |
| US20050037992A1 (en) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | John Lyons | Composition and method for treating neurological disorders |
| RU2588143C2 (ru) * | 2010-10-27 | 2016-06-27 | Кимонелла Венчерс Лтд | Пептидное соединение, полезное для ингибирования образования амилоидных бляшек |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LU J. et al. Albumin as a zinc carrier: properties of its high-affinity zinc-binding site // Biochem. Soc. Trans. - 2008. - V. 36. - Part 6. - P. 1317-1321. * |
| TSVETKOV P. O. et al. Peripherally Applied Synthetic Tetrapeptides HAEE and RADD Slow Down the Development of Cerebral beta-Amyloidosis in AbetaPP/PS1 Transgenic Mice // Journal of Alzheimer's Disease. - 2015. - V. 46. - No. 4. - P. 849-853. * |
Cited By (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2767030C1 (ru) * | 2021-05-20 | 2022-03-16 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Способ получения пептида Ac-His-Ala-Glu-Glu-NH2 |
| RU2777871C1 (ru) * | 2021-08-03 | 2022-08-11 | Акционерное общество "Опытно-Экспериментальный завод "ВладМиВа" | Способ лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784319C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-23 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Цинковый комплекс пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784249C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-23 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Аммониевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784326C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-23 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Натриевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784425C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-24 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Калиевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784732C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-29 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Медный комплекс пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2784746C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-11-29 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Магниевый комплекс пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2785354C1 (ru) * | 2022-07-15 | 2022-12-06 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Кальциевый комплекс пептида для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014984A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Аммониевая соль пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014986A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Магниевый комплекс пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014982A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Медный комплекс пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014980A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Калиевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014983A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Цинковый комплес пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014981A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Натриевая соль пептида haee для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| WO2024014985A1 (ru) * | 2022-07-15 | 2024-01-18 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Кальциевый комплекс пептида наее для лечения нейродегенеративных заболеваний |
| RU2822602C1 (ru) * | 2023-03-03 | 2024-07-09 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Синтетический тетрапептид haee и его производные, предназначенные для защиты функции нейронов человека |
| RU2822603C1 (ru) * | 2023-03-03 | 2024-07-09 | Общество с ограниченной ответственностью "ЛАЙФМИССИЯ" | Синтетический тетрапептид haee и его производные, предназначенные для восстановления функции нейронов человека |
| RU2826728C1 (ru) * | 2024-06-11 | 2024-09-16 | Сергей Александрович Козин | ПЕПТИД Ac-His-Ala-Glu-Glu-NH2 И ЕГО ПРОИЗВОДНЫЕ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ДЕФИЦИТА ЭНДОГЕННОГО КОМПОНЕНТА КРОВИ ЧЕЛОВЕКА |
| RU2826726C1 (ru) * | 2024-06-11 | 2024-09-16 | Сергей Александрович Козин | ПЕПТИД Ac-His-Ala-Glu-Glu-NH2 И ЕГО ПРОИЗВОДНЫЕ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЕ ДЛЯ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ДЕФИЦИТА ЭНДОГЕННОГО КОМПОНЕНТА КРОВИ ЖИВОТНЫХ |
| RU2848765C1 (ru) * | 2025-03-03 | 2025-10-21 | Потребительский Кооператив "Серафим" | Пептидно-аминокислотные комплексы для восстановления дефицита эндогенного компонента крови животных и лечения заболеваний или нарушений здоровья животных, ассоциированных с нейровоспалением |
| RU2848768C1 (ru) * | 2025-03-03 | 2025-10-21 | Потребительский Кооператив "Серафим" | Пептидно-аминокислотные комплексы для восстановления дефицита эндогенного компонента крови человека и лечения заболеваний или нарушений здоровья человека, ассоциированных с нейровоспалением |
| RU2851848C1 (ru) * | 2025-03-14 | 2025-12-01 | Потребительский Кооператив "Серафим" | Пептидно-аминокислотные комплексы, предназначенные для терапии психических расстройств и расстройств поведения, ассоциированных с дефицитом эндогенного компонента крови |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2709539C1 (ru) | Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний | |
| Neuwelt | Mechanisms of disease: the blood-brain barrier | |
| JP7379615B2 (ja) | 補体活性のモジュレーター | |
| US10111843B2 (en) | Methods for treating brain injury | |
| CA3084043A1 (en) | Modulators of complement activity | |
| ES2428698T3 (es) | Utilización de albúmina humana terapéutica para la preparación de un medicamento para el tratamiento de pacientes afectados por desórdenes cognitivos | |
| CN107569675A (zh) | 预防或治疗缺血/再灌注损伤之后无复流的方法 | |
| WO2020185541A2 (en) | Modulators of complement activity | |
| Kozłowski et al. | Metallochemistry of neurodegeneration: biological, chemical and genetic aspects | |
| WO2003006044A1 (en) | Methods and compositions for controlling protein assembly or aggregation | |
| Ngwa et al. | Structurally altered, not wild-type, pentameric C-reactive protein inhibits formation of amyloid-β fibrils | |
| Sundaram et al. | Novel detox gel depot sequesters β-amyloid peptides in a mouse model of Alzheimer’s disease | |
| ES2247329T3 (es) | Prevencion de muerte celular utilizando segmentos de proteinas fibrilares neurales. | |
| JP2008526750A (ja) | 脳血流を増加させる方法 | |
| RU2777871C1 (ru) | Способ лечения нейродегенеративных заболеваний | |
| BR112021001739A2 (pt) | métodos para tratar distúrbios neurodegenerativos | |
| Banks et al. | The Blood-Brain Barrier in Aluminium Toxicity and Alzheimer's Disease | |
| WO2025049979A1 (en) | Hydrophobically interspaced charged peptides for preventing or treating apoe and/or amyloid beta pathologic interaction in alzheimer's disease and related dementias | |
| EP4186918A1 (en) | Inhibitory peptides for the diagnostic and/or treatment of tauopathies | |
| Schlichtmann et al. | Modified from a manuscript to be submitted to Advanced Healthcare Materials | |
| HK40084222A (en) | Modulators of complement activity | |
| WO2022177635A2 (en) | Compositions and methods for microbial disease treatment | |
| HK40031446B (en) | Modulators of complement activity | |
| HK40031446A (en) | Modulators of complement activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20200512 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20210220 |