RU2702003C1 - Антистеатозное средство - Google Patents
Антистеатозное средство Download PDFInfo
- Publication number
- RU2702003C1 RU2702003C1 RU2019107707A RU2019107707A RU2702003C1 RU 2702003 C1 RU2702003 C1 RU 2702003C1 RU 2019107707 A RU2019107707 A RU 2019107707A RU 2019107707 A RU2019107707 A RU 2019107707A RU 2702003 C1 RU2702003 C1 RU 2702003C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- propanediamido
- sodium
- dibenzoate
- steatosis
- Prior art date
Links
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000003041 necroinflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- XJCRCPKBJWRZAX-UHFFFAOYSA-L disodium;dibenzoate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1.[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XJCRCPKBJWRZAX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 15
- -1 propanediamido Chemical group 0.000 claims description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract description 2
- YCGCXBYGFBBYJC-UHFFFAOYSA-L disodium;4-[[3-(4-carboxylatoanilino)-3-oxopropanoyl]amino]benzoate Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC(C(=O)[O-])=CC=C1NC(=O)CC(=O)NC1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 YCGCXBYGFBBYJC-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 8
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 6
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 6
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 6
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 5
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 5
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 description 5
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 4
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 231100000605 Toxicity Class Toxicity 0.000 description 3
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 3
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 3
- 239000002216 antistatic agent Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 210000000222 eosinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical group CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 102100031290 E3 UFM1-protein ligase 1 Human genes 0.000 description 1
- IYXGSMUGOJNHAZ-UHFFFAOYSA-N Ethyl malonate Chemical compound CCOC(=O)CC(=O)OCC IYXGSMUGOJNHAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 101100155298 Homo sapiens UFL1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006181 N-acylation Effects 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 231100000460 acute oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002075 anti-alcohol Effects 0.000 description 1
- 230000000879 anti-atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 235000019577 caloric intake Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 235000021233 hypercaloric diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000215 hyperchromic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 229940078552 o-xylene Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035322 succinylation Effects 0.000 description 1
- 238000010613 succinylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к применению 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия в качестве антистеатозного средства, поддерживающего балочное строение паренхимы печени, сохраняющего портальные тракты без фиброза, предупреждающего перипортальную некровоспалительную активность. Технический результат – расширение арсенала антистетозных средств, имеющих низкую токсичность, обладающих протективными и регенеративными свойствами, обуславливая существенно более выраженное и раннее репаративное и регенераторное воздействие на печень. 1 табл., 4 пр.
Description
Изобретение относится к медицине и фармации и касается нового антистеатозного средства 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия формулы I, которое может быть использовано в медицине в качестве потенциального средства для лечения неалкогольной жировой болезни печени.
Известно само соединение и его антиатеросклеротическое, антиалкогольное, антиоксидантное и гипотензивное свойства [А. с. 1773234 СССР, A61K 31/19; А. с. 1787030 СССР, A61K 31/19].
В настоящее время наблюдается неуклонное увеличение частоты заболеваний, в основе которых лежат ассоциированные нарушения углеводного и жирового обменов (метаболический синдром, сахарный диабет 2 типа, ожирение, дислипидемия, неалкогольная жировая болезнь печени). По данным Российского исследования DIREG 2 у 37,3% пациентов, обратившихся за помощью к терапевту, обнаружена неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП), в результате чего она заняла первое место среди заболеваний печени - 71,6% [В.Т. Ивашкин, О.М. Драпкина, И.В. Маев и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2015, 25(6), 31-38].
НЖБП представляет собой полиэтиологичное заболевание, в основе которого лежат нарушения углеводного и жирового обмена, как в самом органе, так и в организме в целом в рамках метаболического синдрома, ожирения, сахарного диабета. Проявляется НЖБП в виде стеатоза или стеатогепатита с исходами в цирроз или гепатоцеллюлярную карциному.
Эффективная фармакотерапия жирового гепатоза до настоящего времени не разработана. В качестве антистеатозных препаратов интерес представляют производные малоновой (метандикарбоновой) кислоты. 4,4'-(Пропандиамидо)дибензоат натрия, как производное малоновой кислоты, имеет определенное сходство с сукцинатом и благодаря чему может конкурентно препятствовать избыточному сукцинилированию регуляторных белков, наблюдающемуся при широком спектре метаболических заболеваний (ожирение, метаболический синдром, сахарный диабет, жировая болезнь печени).
Задачей предлагаемого изобретения является расширение арсенала антистеатозных средств, имеющих низкую токсичность.
Указанная задача достигается применением 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия в качестве антистеатозного средства.
Изобретение иллюстрируется примерами синтеза и исследования фармакологических свойств, описание включает одну таблицу и сопровождается двумя схемами синтеза.
Пример 1. Получение 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия (I).
Синтез проходит в две стадии.
Стадия 1. Получение N,N'-малонил-ди-п-аминобензойной кислоты (МПАБК).
Стадия является ключевой и заключается в N-ацилировании ПАБК малоновым эфиром с образованием целевой МПАБК. Процесс протекал в среде о-ксилола при температуре 145-150° в течение 8-10 часов.
Стадия 2. Получение натриевой соли МПАБК
Химизм процесса получения из МПАБК соответствующей натриевой соли под действием гидроксида натрия описывается следующей схемой:
Способ получения 4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия изучен и проведен в лабораторных условиях на стандартном товарном сырье.
Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом.
Брутто-формула: C17H12N2O6Na2. Найдено, %: С - 52.62, Н - 3.07, N -7.19. Вычислено %: С - 52.86, Н - 3.13, N - 7.25.
Строение синтезированного вещества было доказано спектральными методами анализа ЯМР 1Н и 13С, ИК-спектроскопией.
Пример 2. Определение острой токсичности.
Определение LD50 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия проводили при однократном внутривенном введении в различных экспериментальных дозах самцам и самкам лабораторных мышей и определения класса токсичности заявляемого вещества при однократном внутрижелудочном введении самцам и самкам лабораторных аутбредных крыс [Прозоровский В.Б. Статистическая обработка результатов фармакологических исследований // Психофармакология и биологическая наркология. 2007. - Т. 7. - №3-4. - С. 2090-2120].
Установлено, что при определении по методу Прозоровского 1ЛЭ50 заявляемого соединения при введении мышам внутривенно составляет 2060±160 мг/кг для самцов и 1900±170 мг/кг для самок. При определении острой токсичности по методике ОЭСР Тест №423 «Острая пероральная токсичность - метод определения класса острой токсичности» доза 2000 мг/кг не вызывала летального исхода при применении у животных обоих полов, что позволяет отнести заявляемое средство к классу токсичности «5 класс токсичности или не классифицируется».
Пример 3. Влияние заявляемого средства на содержание общих липидов в печени мышей с экспериментальным стеатозом.
Все эксперименты проводили в соответствии с Приказом Минздрава РФ от 01.04.16 г. №199н "Об утверждении правил надлежащей лабораторной практики". Животных содержали в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе со свободным доступом к воде.
Эвтаназию животных осуществляли путем усыпления углекислым газом в CO2-боксе THF3481-V01 (Bioscape, Германия).
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета программ «Statistica 6.0». Значимость различий при нормальном распределении количественных признаков оценивали с помощью t-критерия Стьюдента (для независимых выборок). Числовые данные представлены в виде: среднее арифметическое (М) ± стандартное отклонение (SD). Уровень доверительной вероятности был задан равным 95%.
Изучение содержания липидов в печени выполнены на 36 линейных мышах самцах C57bl/6 весом 20-28 г, полученных из питомника «Рапполово» (Ленинградская область). Для моделирования стеатоза печени была использована гиперкалорийная высокожировая диета при избытке легкоусваиваемых углеводов, которая создавалась путем добавления к стандартному корму (63%) топленого свиного жира (19%), сахарозы (10%) и изолированного соевого белка (8%) [Хи В.L. et al. Effects of caloric intake on learning and memory function in juvenile C57BL/6J mice // BioMed research international. - 2015. - T. 2015]. Такая диета способствует развитию у животных стеатоза печени и формированию дисгликемии. Животные были поделены на три группы по 12 мышей в каждой:
1. Интактная группа, получавшая стандартный корм и перорально воду очищенную;
2. Контрольная группа, получавшая высококалорийную высокожировую диету и перорально воду очищенную;
3. Опытная группа, получавшая высококалорийную высокожировую диету и перорально 4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия в дозе 10 мг/кг.
Через 24 недели моделирования патологии животных выводили из эксперимента и в ткани печени количественно определяли общие липиды по методу Фолча [Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен): Учебное пособие / под ред. М. Прохоровой. - Л.: изд-во ЛГУ, 1982. - 272 с. - С. 54-57].
В результате установлено, что гиперкалорийная высокожировая диета приводит к достоверному увеличению содержания липидов в ткани печени на 6,3%. Под влиянием 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия наблюдалось достоверное (р<0,05) уменьшение общих липидов в печени на 16% (табл.).
Обозначения: * - достоверные отличия от соответствующего показателя интактной группы (р<0,05); **- достоверные отличия от соответствующего показателя контрольной группы (р<0,05).
На фоне гиперкалорийной высокожировой диеты увеличивается приток свободных жирных кислот в печень. Это создает не только предпосылки к развитию стеатоза, но и митохондриальной дисфункции, приводящей к потере клеточного контроля за процессами липопероксидации и активации перекисного окисления липидов, что в конечном итоге проводит к гибели гепатоцитов по механизму апоптоза или некроза, развитию воспалительной инфильтрации и фиброза печени [Черкашина Е.А., Петренко Л.В. Евстигнеева А.Ю. Неалкогольная жировая болезнь печени: патогенез, диагностика, лечение // Ульяновский медико-биологический журнал. - 2014. - №1. - С. 35-47]. Следовательно, даже небольшое уменьшение стеатоза печени является фактором, улучшающим прогноз течения заболевания.
Пример 4. Гистологическое исследование печени животных с экспериментальным стеатозом на фоне заявляемого средства.
Гистологическое исследование печени - современный «золотой стандарт» диагностики стеатоза, воспаления и оценки стадии фиброза при поражении в рамках жировой болезни печени [В.Т. Ивашкин, О.М. Драпкина, И.В. Маев и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2015, 25(6), 31-38]. Исследование влияния 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия на гистологическую картину печени проводили аналогично вышеописанному эксперименту. Дополнительно в качестве препарата сравнения использовали метформин (Sigma, США) в дозе 300 мг/кг/сут.
Образцы печени фиксировали 10% нормальным (рН-7,4) раствором формальдегида в течение 24 часов. Фиксированные образцы ткани последовательно инкубировали в изопропаноле с последующей имбибицией парафином на автоматическом гистопроцессоре ExelsiorES (Thermo, Великобритания). Обезвоженные и пропитанные парафином образцы ткани заливали парафином. Из приготовленных парафиновых блоков изготавливали срезы толщиной 4 мкм с использованием полуавтоматического ротационного микротома НМ340Е (Thermo, Германия) и окрашивали гематоксилином и эозином. Морфологические изменения изучали в проходящем свете с использованием исследовательского микроскопа AxioImagerA2 (Thermo, Германия), оснащенным цифровой цветной камерой и программным обеспечением для получения изображений при суммарном увеличении ×100, ×200, ×400.
Гистологическое исследование печени животных контрольной группы с экспериментальным стеатозом, показало сохранение структуры печеночной ткани, портальные тракты без фиброза, с разной степени выраженности лимфоцитарной или лимфо-макрофагальной инфильтрацией стромы. В перипортальных отделах печеночных долек выявлена преимущественно мелкоочаговая лимфо-гистиоцитарная инфильтрация, расположенная среди групп гепатоцитов с некробиотическими изменениями. Цитоплазма гепатоцитов, преимущественно в центролобулярных отделах печеночных долек, с явлениями выраженной белковой дистрофии в виде неравномерной просветленности, неоднородности, комковатости, часть гепатоцитов содержат в цитоплазме мелкие или средних размеров вакуоли.
В некоторых образцах, кроме того, имеются крупные очаги некроза, обильно инфильтрированные лимфоцитами, нейтрофильными и эозинофильными гранулоцитами, расположенные в паренхиме печени, преимущественно в непосредственной близости от стенок центральных (печеночных) вен. Помимо некротически-воспалительных изменений в цитоплазме гепатоцитов определялись мелкие капли жира.
Заявляемое соединение на фоне гиперкалорийной диеты позволило сохранить структуру печеночной ткани, портальные тракты без фиброза и преимущественно без патологической клеточной инфильтрации. Строма единичных портальных трактов очагово инфильтрирована лимфоцитами. Перипортальной некровоспалительной активности нет. Балочное строение паренхимы печени сохранено. Цитоплазма гепатоцитов с явлениями слабо выраженной белковой зернистой дистрофии. Внутри печеночных долек неравномерная распространенная, в целом - слабой степени выраженности, пролиферация купферовских клеток и мелкоочаговая лимфо-гистиоцитарная с примесью эозинофильных гранулоцитов инфильтрация. В некоторых образцах имеются мелкие фокусы пролиферации гепатоцитов в зонах повреждения паренхимы. Скудная неравномерная полиморфно-клеточная инфильтрация вокруг центральных (печеночных) вен.
В группе животных, получавших на фоне диеты метформин, структура печеночной ткани сохранена, портальные тракты без фиброза. Строма части портальных трактов инфильтрирована лимфоцитами. Балочное строение паренхимы печени сохранено. Ядра гепатоцитов умеренно полиморфны, чаще с просветленными ядрами и неравномерным размещением в них хроматина, с отчетливыми гиперхромными ядрышками. Цитоплазма гепатоцитов с явлениями слабо выраженной белковой дистрофии. Внутри печеночных долек неравномерная распространенная, в целом - слабой степени выраженности пролиферация купферовских клеток и мелкоочаговая лимфо-гистиоцитарная или с примесью эозинофильных гранулоцитов инфильтрация, расположенная преимущественно в непосредственной близости от центральных вен.
Таким образом, в группе животных, получавших высококалорийный корм преобладают явления повреждения паренхимы печени и более выраженная патологическая клеточная реакция, в то время как в группе мышей, получавших наряду с высококалорийным кормом 4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия преобладают проявления текущей организации (с макрофагальной продуктивной реакцией), а также регенераторные изменения гепатоцитов при очевидно менее выраженных явлениях повреждения паренхимы печени. Кроме того, следует отметить уменьшение жировой инфильтрации гепатоцитов при использовании фармакологического агента. По всей видимости (при прочих равных условиях), 4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия обладает протективными и регенераторными свойствами, обусловливая существенно более выраженное и раннее репаративное и регенераторное воздействие на печень. В отличие от заявляемого соединения, в группе, получавшей метформин, регенераторных изменений выявлено не было.
Таким образом, доказано наличие антистеатозной активности у 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия при моделировании экспериментального стеатоза печени у животных на основании изучения содержания общих липидов в печени и гистологического исследования органа. Установлено, что заявляемое соединение уменьшает количество общих липидов в ткани печени на 16% по сравнению с контролем. Сравнение имеющихся морфологических изменений позволяет предполагать преобладание продуктивных и пролиферативных (отражающих процессы репарации и регенерации) изменений в группе, получавшей на фоне высокожировой нагрузки заявляемое соединение над альтеративно-экссудативными изменениями (отражающими повреждение) в группе с экспериментальным стеатозом печени. По фармакологической активности заявляемое средство (4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия) превосходит препарат сравнения метформин. При однонаправленных результатах проведенных исследований 4,4'-(пропандиамидо)дибензоат натрия работает в эффективной дозе 10 мг/кг, в то время как для метформина требуется доза 300 мг/кг.
Областью применения заявляемого средства может быть лечение неалкогольной жировой болезни печени.
Claims (1)
- Применение 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия в качестве антистеатозного средства, поддерживающего балочное строение паренхимы печени, сохраняющего портальные тракты без фиброза, предупреждающего перипортальную некровоспалительную активность.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019107707A RU2702003C1 (ru) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | Антистеатозное средство |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019107707A RU2702003C1 (ru) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | Антистеатозное средство |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2702003C1 true RU2702003C1 (ru) | 2019-10-03 |
Family
ID=68170728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019107707A RU2702003C1 (ru) | 2019-03-18 | 2019-03-18 | Антистеатозное средство |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2702003C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU293806A1 (ru) * | Л. Б. Дашкевич, М. Л. Ткаченко , М. М. Самолетов Ленинградский химико фармацевтический институт | Способ получения n-алкил (apил)-n'- | ||
| EA201290389A1 (ru) * | 2009-11-26 | 2013-01-30 | Женфит | Применение 1,3-дифенилпроп-2-ен-1-оновых производных для лечения заболеваний печени |
| US20140128473A1 (en) * | 2011-12-08 | 2014-05-08 | Medicinova, Inc. | Method of treating non-alcoholic steatohepatitis |
| RU2624729C1 (ru) * | 2016-06-21 | 2017-07-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФА Минздрава России) | Способ получения 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия |
-
2019
- 2019-03-18 RU RU2019107707A patent/RU2702003C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU293806A1 (ru) * | Л. Б. Дашкевич, М. Л. Ткаченко , М. М. Самолетов Ленинградский химико фармацевтический институт | Способ получения n-алкил (apил)-n'- | ||
| EA201290389A1 (ru) * | 2009-11-26 | 2013-01-30 | Женфит | Применение 1,3-дифенилпроп-2-ен-1-оновых производных для лечения заболеваний печени |
| US20140128473A1 (en) * | 2011-12-08 | 2014-05-08 | Medicinova, Inc. | Method of treating non-alcoholic steatohepatitis |
| RU2624729C1 (ru) * | 2016-06-21 | 2017-07-06 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФА Минздрава России) | Способ получения 4,4'-(пропандиамидо)дибензоата натрия |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Белых М.А., Оковитый С.В.: "Оценка эффективности нового производного малоновой кислоты в качестве антистеатозного средства при высокожировой диете у мышей"//V съезд фармакологии России "Научные основы поиска и создания новых лекарственных средств" (Материалы съезда), Экспериментальная и клиническая фармакология, издательский дом "Фолиум"- Москва, 2018, том.81, подписано в печать 16.04.2018, сс.28-29. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Piperno et al. | Inherited iron overload disorders | |
| Yang et al. | Phenotype analysis of aquaporin-8 null mice | |
| Colca et al. | Identification of a novel mitochondrial protein (“mitoNEET”) cross-linked specifically by a thiazolidinedione photoprobe | |
| Ibrahim | The mast cells of the mammalian central nervous system: Part 1. Morphology, distribution and histochemistry | |
| Jörs et al. | Lineage fate of ductular reactions in liver injury and carcinogenesis | |
| Sun et al. | Defect of mitochondrial respiratory chain is a mechanism of ROS overproduction in a rat model of alcoholic liver disease: role of zinc deficiency | |
| JP4977319B2 (ja) | 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子蛋白質阻害薬およびその使用方法 | |
| Cao et al. | Hepatic menin recruits SIRT1 to control liver steatosis through histone deacetylation | |
| Jayle et al. | Comparison of protective effects of trimetazidine against experimental warm ischemia of different durations: early and long-term effects in a pig kidney model | |
| Alimujiang et al. | Enhanced liver but not muscle OXPHOS in diabetes and reduced glucose output by complex I inhibition | |
| Traeger et al. | ALK3 undergoes ligand-independent homodimerization and BMP-induced heterodimerization with ALK2 | |
| Tubaro et al. | Acute oral toxicity in mice of a new palytoxin analog: 42-hydroxy-palytoxin | |
| Jghef et al. | Punicalagin attenuates myocardial oxidative damage, inflammation, and apoptosis in isoproterenol-induced myocardial infarction in rats: Biochemical, immunohistochemical, and in silico molecular docking studies | |
| Farhadi et al. | Neuroprotective effects of crocin against ethanol neurotoxicity in the animal model of fetal alcohol spectrum disorders | |
| Jin et al. | Serotonin 2A receptor function and depression-like behavior in rats model of hypothyroidism | |
| Perfilova et al. | Cardioprotective effects of a new glutamic acid derivative in chronic alcohol intoxication | |
| TWI832481B (zh) | 萜類化合物在治療或預防纖維化疾病中的用途 | |
| Feriod et al. | Inositol 1, 4, 5-trisphosphate receptor type II (InsP3R-II) is reduced in obese mice, but metabolic homeostasis is preserved in mice lacking InsP3R-II | |
| Hong et al. | Loss of ERdj5 exacerbates oxidative stress in mice with alcoholic liver disease via suppressing Nrf2 | |
| Carreño et al. | Immunomodulatory actions of a kynurenine-derived endogenous electrophile | |
| RU2702003C1 (ru) | Антистеатозное средство | |
| Saleh et al. | β-cell Smad2 null mice have improved β-cell function and are protected from diet-induced hyperglycemia | |
| Hofmeister et al. | Fluorescence isolation of mouse late distal convoluted tubules and connecting tubules: effects of vasopressin and vitamin D3 on Ca2+ signaling | |
| Elmoselhi | Advantages of understanding the Molecular mechanisms of Angiogenesis in various physiological and pathological conditions | |
| Shiga et al. | Acute toxicity of pierisin-1, a cytotoxic protein from Pieris rapae, in mouse and rat |