RU2701527C2 - Diagnostic technique for acute endometritis - Google Patents
Diagnostic technique for acute endometritis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2701527C2 RU2701527C2 RU2017131574A RU2017131574A RU2701527C2 RU 2701527 C2 RU2701527 C2 RU 2701527C2 RU 2017131574 A RU2017131574 A RU 2017131574A RU 2017131574 A RU2017131574 A RU 2017131574A RU 2701527 C2 RU2701527 C2 RU 2701527C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- endometritis
- discriminant
- values
- humoral immunity
- acute
- Prior art date
Links
- 201000004171 acute endometritis Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 claims abstract description 21
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 claims abstract description 18
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 13
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 19
- 208000004145 Endometritis Diseases 0.000 abstract description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 208000030373 chronic endometritis Diseases 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000669460 Homo sapiens Toll-like receptor 5 Proteins 0.000 description 2
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 2
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100039357 Toll-like receptor 5 Human genes 0.000 description 2
- 102100033117 Toll-like receptor 9 Human genes 0.000 description 2
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 238000013178 mathematical model Methods 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 2
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 241001633064 Atopobium vaginae Species 0.000 description 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 241000207201 Gardnerella vaginalis Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 241000204051 Mycoplasma genitalium Species 0.000 description 1
- 241000204048 Mycoplasma hominis Species 0.000 description 1
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 1
- 241001135215 Prevotella bivia Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000224527 Trichomonas vaginalis Species 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004037 cervical canal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000005168 endometrial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940023064 escherichia coli Drugs 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 231100001039 immunological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012067 mathematical method Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229940099990 ogen Drugs 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000002784 sclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 229940030998 streptococcus agalactiae Drugs 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 206010046901 vaginal discharge Diseases 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medical Treatment And Welfare Office Work (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики эндометрита у женщин на основе дискриминантного анализа клеточного иммунитета на системном уровне. The invention relates to medicine, namely to gynecology, and can be used to diagnose endometritis in women based on a discriminant analysis of cellular immunity at a systemic level.
Известен способ оценки микробного спектра эндометрия для этиологическойдиагностикихроническогоэндометрита (Патент РФ №2599479 Способ оценки микробного спектра эндометрия для этиологическойдиагностикихроническогоэндометрита. Гомболевская Н. А., Марченко Л.А., Муравьёва В.В., Припутневич Т.В. и др. Подача заявки 19.08.2015 Публикация 10.10.2016.). Способ заключается в том, что производят забор фрагмента слизистой оболочки полости матки, далее методом ПЦР в реальном времени количественно оценивают значение контроля взятия материала, при снижении данного показателя ниже 104 ГЭ/образец - результат считают недостоверным, общей бактериальной массы, положительный результат при значении более 103 ГЭ/образец, определяют количество геном-эквивалентов микроорганизмов и сравнивают его с пороговым значением (ПЗ), применяя диагностическую панель, включающую Lactobacillusspp., абсолютно- или условно-патогенные микроорганизмы, такие как Eubacteriumspp., Enterobacteriaceae, Escherichiacoli, Streptococcusspp., Streptococcusagalactiae, Staphylococcusspp., Staphylococcusaureus, Enterococcusspp., Peptostreptococcusspp., Prevotellabivia/Porphyromonasspp., Gardnerellavaginalis, Atopobiumvaginae, Mycoplasmahominis, Ureaplasmaspp., Candidaspp., Trichomonasvaginalis, Chlamydiatrachomatis, Neisseriagonorrhoeae, Mycoplasmagenitalium, Herpessimplex 1 и 2 типов, Cytomegalovirus; при выявлении абсолютно- или условно-патогенных микроорганизмов в количестве, превышающем пороговое значение, делают заключение о потенциальном значении данного микроорганизма в этиологической диагностике хронического эндометрита. A known method for evaluating the microbial spectrum of the endometrium for the etiological diagnosis of chronic endometritis (RF Patent No. 2599479 Method for evaluating the microbial spectrum of the endometrium for the etiological diagnosis of chronic endometritis. Gombolevskaya N. A., Marchenko L. A., Muraveva V. V., Priputnevich T. V. and others. .2015 Publication 10.10.2016.). The method consists in sampling a fragment of the mucous membrane of the uterine cavity, then real-time PCR quantitatively estimates the control value of the material taken, when this indicator decreases below 104 GE / sample, the result is considered unreliable, the total bacterial mass, a positive result with a value of more 103 GE / sample, determine the number of genome equivalents of microorganisms and compare it with a threshold value (PZ) using a diagnostic panel that includes Lactobacillusspp., Absolutely or conditionally pa ogen microorganisms such as Eubacteriumspp., Enterobacteriaceae, Escherichiacoli, Streptococcusspp., Streptococcusagalactiae, Staphylococcusspp., Staphylococcusaureus, Enterococcusspp., Peptostreptococcusspp., Prevotellabivia / Porphyromonasspp., Gardnerellavaginalis, Atopobiumvaginae, Mycoplasmahominis, Ureaplasmaspp., Candidaspp., Trichomonasvaginalis, Chlamydiatrachomatis, Neisseriagonorrhoeae , Mycoplasmagenitalium, Herpessimplex types 1 and 2, Cytomegalovirus; when revealing absolutely or conditionally pathogenic microorganisms in an amount exceeding the threshold value, a conclusion is drawn about the potential value of this microorganism in the etiological diagnosis of chronic endometritis.
Недостатком данного способа является длительное время (около 2 суток), ориентирован только на исследование микроорганизмов на местном уровне – в слизистой оболочке полости матки и не возможность использовать для диагностики эндометрита системные патологические изменения и, в частности, показатели клеточного иммунитета. Кроме того, этот способ диагностики не позволяет установить степень тяжести эндометрита и неприменим при диагностике указанного заболевания в период беременности.The disadvantage of this method is a long time (about 2 days), it is focused only on the study of microorganisms at the local level - in the mucous membrane of the uterine cavity and the inability to use systemic pathological changes and, in particular, indicators of cellular immunity for the diagnosis of endometritis. In addition, this diagnostic method does not allow to establish the severity of endometritis and is not applicable in the diagnosis of this disease during pregnancy.
Известен способ ранней диагностики послеродового эндометрита (Патент РФ № 2477861 Способ ранней диагностики послеродового эндометрита. Лебедева О.П., Пахомов СП., Чурносов М.И., Попов В.Н. и др. Подача заявки 18.11.2011. Публикация 20.03.2013 Бюл. № 8). Изобретение относится к области медицины. Предложен способ ранней диагностики послеродового эндометрита, включающий выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала у женщин на поздних сроках беременности или на 3-4 сутки после родов, проведение обратной транскрипции с получением кДНК и определение экспрессии мРНК TLR5 с помощью количественной полимеразной цепной реакции. Снижение экспрессии мРНК TLR5 ниже 0,01202 у женщин на поздних сроках беременности и ниже 0,16938 на 3-4 сутки после родов свидетельствует о развитии послеродового эндометрита. A known method for the early diagnosis of postpartum endometritis (RF Patent No. 2477861 Method for the early diagnosis of postpartum endometritis. Lebedeva OP, Pakhomov SP., Churnosov MI, Popov VN and others. Submission of application 11/18/2011. Publication 20.03. 2013 Bul. No. 8). The invention relates to the field of medicine. A method is proposed for the early diagnosis of postpartum endometritis, including the isolation of RNA from cervical canal epithelial cells in women in late pregnancy or 3-4 days after delivery, reverse transcription to obtain cDNA and determination of TLR5 mRNA expression by quantitative polymerase chain reaction. A decrease in TLR5 mRNA expression below 0.01202 in women in late pregnancy and below 0.16938 3-4 days after delivery indicates the development of postpartum endometritis.
Недостатком данного способа ранней диагностики послеродового эндометрита является то, что он не может применяться при послеабортном эндометрите, требует инвазивного вмешательства в цервикальном канале для взятия эпителиальных клеток и не учитывает иммунных нарушений, играющих первостепенную роль как в развитии, так и диагностике эндометрита. The disadvantage of this method for the early diagnosis of postpartum endometritis is that it cannot be used in postabortion endometritis, it requires invasive intervention in the cervical canal to take epithelial cells and does not take into account immune disorders that play a primary role in both the development and diagnosis of endometritis.
В качестве ближайшего аналога принят способ диагностики и прогнозирования развития хронического эндометрита у женщин (Патент РФ №2587325 Способ диагностики и прогнозирования развития хронического эндометрита у женщин репродуктивного возраста по экспрессии toll-like рецепторов в эндометрии Коган Е.А., Гомболевская Н.А., Демура Т. А. и др. Подача заявки 11.06.2015. Публикация 20.06.2016). У женщин репродуктивного возраста с помощью иммуногистохимического окрашивания срезов эндометриальной ткани, по проценту позитивно окрашенных клеток эндометрия в баллах, определяют показатели локального врожденного иммунитета TLR2, TLR4, TLR9. Полученная иммуногистохимическая характеристика экспрессии TLR2, TLR4, TLR9 совместно с морфологической картиной эндометрия позволяет диагностировать либо отсутствие ХЭ, либо наличие факторов риска и предрасположенности к развитию ХЭ, либо наличие и прогрессирование ХЭ, либо наличие ХЭ в стадии ремиссии, либо наличие длительно существующего ХЭ, течение которого характеризуется развитием склеротических изменений сосудов и фиброзом стромы эндометрия различной степени выраженности. As the closest analogue, a method for diagnosing and predicting the development of chronic endometritis in women is adopted (RF Patent No. 2587325 Method for diagnosing and predicting the development of chronic endometritis in women of reproductive age by expression of toll-like receptors in the endometrium Kogan EA, Gombolevskaya NA, Demura T.A. et al. Application submission 06/11/2015. Publication 06/20/2016). In women of reproductive age, immunohistochemical staining of endometrial tissue sections, according to the percentage of positively stained endometrial cells in points, determines the indicators of local innate immunity TLR2, TLR4, TLR9. The obtained immunohistochemical characterization of the expression of TLR2, TLR4, TLR9 together with the morphological picture of the endometrium allows one to diagnose either the absence of CE, the presence of risk factors and a predisposition to the development of CE, the presence and progression of CE, or the presence of CE in remission, or the presence of a long-existing CE, course which is characterized by the development of sclerotic changes in blood vessels and fibrosis of the endometrial stroma of varying severity.
Известный способ диагностики хронического эндометрита не позволяет выявлять острые формы эндометрита. Кроме того, этот способ не учитывает иммунологические изменения на системном уровне, интенсивно развивающиеся у больных острым и хроническим эндометритом. Недостатком данного способа диагностики хронического эндометрита является то, что он проводится без оценки информативности иммунологических параметров, что делает его финансово затратным. Отбор показателей локального иммунитета для диагностики хронического эндометрита осуществляется субъективно без использования адекватных математических методов.A known method for the diagnosis of chronic endometritis does not allow to detect acute forms of endometritis. In addition, this method does not take into account immunological changes at the system level that are intensively developing in patients with acute and chronic endometritis. The disadvantage of this method for the diagnosis of chronic endometritis is that it is carried out without evaluating the informative value of immunological parameters, which makes it financially expensive. The selection of indicators of local immunity for the diagnosis of chronic endometritis is carried out subjectively without the use of adequate mathematical methods.
Технической задачей изобретения является разработка способа диагностики острого эндометрита на основе дискриминантного анализа, который обеспечит улучшение диагностики острого эндометрита по наиболее информативным показателям клеточного и гуморального иммунитета за счет сокращения числа определяемых показателей системного клеточного и гуморального иммунитета.An object of the invention is to develop a method for the diagnosis of acute endometritis based on discriminant analysis, which will improve the diagnosis of acute endometritis by the most informative indicators of cellular and humoral immunity by reducing the number of determined indicators of systemic cellular and humoral immunity.
Техническая задача решается посредством выполнения диагностического процесса по наиболее информативным показателям системного клеточного иммунитета, а именно по содержанию в периферической крови натуральных киллеров, Т-хелперов, и гуморального иммунитета по содержанию иммуноглобулинов Ig G, Ig M и ЦИК. Для поддержки принятия решений предлагается использовать дискриминантные функции, построенные по наиболее информативным показателям системного клеточного и гуморального иммунитета.The technical problem is solved by performing a diagnostic process on the most informative indicators of systemic cellular immunity, namely on the content in the peripheral blood of natural killers, T-helpers, and humoral immunity on the content of immunoglobulins Ig G, Ig M and CEC. To support decision-making, it is proposed to use discriminant functions built on the most informative indicators of systemic cellular and humoral immunity.
Способ диагностики острого эндометрита по определению высокоинформативных показателей клеточного и гуморального иммунитета на системном уровне, отличающийся построением дискриминантных классификационных функций на основе дискриминантного метода для больных острым эндометритом по наиболее информативным показателям клеточного иммунитета по формуле у = 206,149х1+108,559х2+20,239х3-359,274, где A method for diagnosing acute endometritis by determining highly informative indicators of cellular and humoral immunity at a systemic level, characterized by constructing discriminant classification functions based on the discriminant method for patients with acute endometritis by the most informative indicators of cellular immunity according to the formula y = 206.149x 1 + 108.559x 2 + 20.239x 3 -359,274 where
х1 – абсолютное число натуральных киллеров, х109/лx 1 - the absolute number of natural killers, x10 9 / l
х2 – абсолютное число Т-хелперов, х109/лx 2 - the absolute number of T-helpers, x10 9 / l
х3 – относительное число Т-хелперов, % x 3 - the relative number of T-helpers,%
и гуморального иммунитета по формуле у= - 34,77х4 - 6,91х5 + 67,03х6, где and humoral immunity according to the formula y = - 34.77x 4 - 6.91x 5 + 67.03x 6 , where
х4 – иммуноглобулины G, г/лx 4 - immunoglobulins G, g / l
х5 – иммуноглобулины М, г/лx 5 - immunoglobulins M, g / l
х6 – циркулирующие иммунные комплексы периферической крови, у.е., x 6 - circulating immune complexes of peripheral blood, cu
и при значениях дискриминантного уравнения клеточного иммунитета, равного 63172289647,364÷72832909647,445, и значениях дискриминантного уравнения гуморального иммунитета, равного 2238,60÷2578,74, диагносцируют острый эндометрит. and with values of the discriminant equation of cellular immunity equal to 63172289647.364 ÷ 72832909647.445, and values of the discriminant equation of humoral immunity equal to 2238.60 ÷ 2578.74, acute endometritis is diagnosed.
Определение уровня натуральных киллеров, Т-хелперов в периферической крови проводили иммунофлюоресцентным методом с набором моноклональных антител у 132 больных острым эндометритом и 117 здоровых женщин. Забор периферической крови осуществлялся из локтевой вены шприцем 10 см3. Далее кровь переносили в стерильные пробирки, содержащие гепарин из расчета 20 ЕД/мл крови. В специальные кюветы вносили по 0,5 мл гепаринизированной крови, в каждую из которых добавляли набор сывороток Ig G, Ig M, Ig A. Исследования проводили на фотометре Multiskar Ascent (Финляндия) в диагнозе измерений 0,0-4,2 мг/мл с чувствительностью 0,021 мг/мл. Содержание в периферической крови Ig G, Ig M и ЦИК определяли методом радиальной иммунодиффузии посредством набора ОООНЦП «Медицинская иммунология» (г. Москва). При классификации больных и здоровых женщин использовался дискриминантный анализ и программа «Statistica 6.0»The level of natural killers, T-helpers in the peripheral blood was determined by the immunofluorescence method with a set of monoclonal antibodies in 132 patients with acute endometritis and 117 healthy women. The peripheral blood was taken from the ulnar vein with a 10 cm3 syringe. Next, the blood was transferred into sterile tubes containing heparin at the rate of 20 IU / ml of blood. 0.5 ml of heparinized blood was added to special cuvettes, each of which was supplemented with a set of Ig G, Ig M, Ig A sera. Studies were performed on a Multiskar Ascent photometer (Finland) with a diagnosis of measurements of 0.0-4.2 mg / ml with a sensitivity of 0.021 mg / ml. The content in the peripheral blood of Ig G, Ig M and CEC was determined by the method of radial immunodiffusion using a set of Medical Immunology Scientific and Practical Center, Moscow. When classifying patients and healthy women, a discriminant analysis and the Statistica 6.0 program were used
Содержание цитокинов в цельной крови и вагинально-цервикальном секрете определяли с помощью набора реагентов (ООО «Цитокин», г. Санкт-Питербург) методом твердофазного иммуноферментного анализа. Забор крови проводился аналогично описанному выше. Вагинальный секрет получали помощью стерильного шприц-тюбика. Исследуемый биоматериал помещали в стерильные пробирки, в каждую из которых добавляли соответствующие реагенты к определенным цитокинам. После этого исследования проводились на автоматическом анализаторе «Personallab» (Италия) в диапазоне 0,0-500 пг/мг с чувствительностью 1 пг/мл. Уровень цитокинов в крови и в вагинально цервикальном секрете исследовали методом радиальной иммунодиффузии посредством набора ОООНЦП «Медицинская иммунология» (г. Москва). Секреторный иммуноглобулин А (sIgA) во влагалищном отделяемом определяли методом иммуноферментного анализа с использованием тест-системы «sIgA-ИТА-БЕСТ-СТРИП» ЗАО «Вектор-Бест». The content of cytokines in whole blood and vaginal-cervical secretion was determined using a reagent kit (LLC "Tsitokin", St. Petersburg) by enzyme-linked immunosorbent assay. Blood sampling was carried out as described above. Vaginal secretions were obtained using a sterile syringe tube. The studied biomaterial was placed in sterile tubes, in each of which the corresponding reagents were added to specific cytokines. After this study, they were carried out on a Personallab automatic analyzer (Italy) in the range of 0.0-500 pg / mg with a sensitivity of 1 pg / ml. The level of cytokines in the blood and in the vaginally cervical secretion was studied by the method of radial immunodiffusion using a set of Medical Immunology Scientific and Production Center (Moscow). Secretory immunoglobulin A (sIgA) in the vaginal discharge was determined by enzyme immunoassay using the sIgA-ITA-BEST-STRIP test system of Vector-Best CJSC.
Для ведущих параметров клеточного иммунитета, отражающих патологические изменения на системном уровне при остром эндометрите, дискриминантным методом получены следующие величины коэффициентов классификационных функций (табл. 1). С учетом параметров классификационныхфункций и констант синтезированы математические модели для второго класса (больные острым эндометритом) у2 = 206,149х1+108,559х2+20,239х3-359,274 и для первого класса (здоровые) у1 = 302,321х1+157,409х2+27,785х3-684,452.For the leading parameters of cellular immunity, reflecting pathological changes at the systemic level in acute endometritis, the following values of the classification function coefficients were obtained by the discriminant method (Table 1). Taking into account the parameters of classification functions and constants, mathematical models for the second class (patients with acute endometritis) y2 = 206.149x1 + 108.559x2 + 20.239x3-359.274 and for the first class (healthy) y1 = 302.321x1 + 157.409x2 + 27.785x3-684.452 were synthesized.
Таблица 1Table 1
Величины коэффициентов классификационных функций для показателей клеточного иммунитета в периферической кровиThe values of the coefficients of classification functions for indicators of cellular immunity in peripheral blood
Классифицируемые параметрыClassified parameters
клеточного иммунитета Коэффициенты функций Cell Immunity Function Coefficients
Пример 1. Пациент А. поступил 11.09.2015г. в клинику. Содержание в периферической крови натуральных киллеров составило 0,08*109/л, абсолютное число Т-хелперов – 0,43*109/л, относительное число Т-хелперов – 32,8%. У здоровой женщины содержание этих показателей соответственно составило 0,32*109/л, 0,81*109/л, 44,5%. Подставляя значения больной А. в дискриминантную модель у8(больные) получим у2=206,149*0,08*109/л+108,559*0,43*109/л +20,239*32,8%-359,274 = 63172289647,364. Аналогично рассчитываем величину у1(здоровые):у7= 302,321*0,32*109/л + 17,409*0,81*109/л + +27,785*44,5% - 684,452=224244009627,912Example 1. Patient A. was admitted on September 11, 2015. to the clinic. The content in the peripheral blood of natural killers was 0.08 * 109 / L, the absolute number of T-helpers was 0.43 * 10 9 / L, the relative number of T-helpers was 32.8%. In a healthy woman, the content of these indicators, respectively, was 0.32 * 10 9 / l, 0.81 * 10 9 / l, 44.5%. Substituting the values of patient A. into the discriminant model for 8 (patients), we get for 2 = 206.149 * 0.08 * 10 9 / L + 108.559 * 0.43 * 10 9 / L + 20.239 * 32.8% -359.274 = 63172289647, 364. Similarly, we calculate the value for 1 (healthy): for 7 = 302.321 * 0.32 * 10 9 / L + 17.409 * 0.81 * 10 9 / L + + 27.785 * 44.5% - 684.452 = 224244009627.912
Пример 2. Пациент Б. поступил 15.09.2015г. в клинику. Содержание в периферической крови натуральных киллеров составило 0,07*109/л, абсолютное число Т-хелперов – 0,48*109/л, относительное число Т-хелперов – 31,5%. У здоровой женщины содержание этих показателей соответственно составило 0,30*109/л, 0,76*109/л, 42,8%. Подставляя значения больной Б. в дискриминантную модель у8(больные) получим у2=206,149*0,07*109/л + 108,559*0,48*109/л +20,239*31,5%-359,274 =66538749647,101. Аналогично рассчитываем величину у7(здоровые): у1=302,321*0,30*109/л + 17,409*0,76*109/л +27,785*42,8% - 684,452=210327139327,440Example 2. Patient B. was admitted on September 15, 2015. to the clinic. The peripheral blood content of natural killers was 0.07 * 10 9 / L, the absolute number of T-helpers was 0.48 * 10 9 / L, the relative number of T-helpers was 31.5%. In a healthy woman, the content of these indicators, respectively, was 0.30 * 10 9 / l, 0.76 * 10 9 / l, 42.8%. Substituting the values of patient B. into the discriminant model in 8 (patients) we get in 2 = 206.149 * 0.07 * 10 9 / L + 108.559 * 0.48 * 10 9 / L + 20.239 * 31.5% -359.274 = 66538749647, 101. Similarly, we calculate the value for 7 (healthy): for 1 = 302.321 * 0.30 * 10 9 / L + 17.409 * 0.76 * 10 9 / L + 27.785 * 42.8% - 684.452 = 210327139327.440
Пример 3. Пациент В. поступил 16.09.2015г. в клинику. Содержание в периферической крови натуральных киллеров составило 0,09*109/л, абсолютное число Т-хелперов – 0,50*109/л, относительное число Т-хелперов – 33,2%. У здоровой женщины содержание этих показателей соответственно составило 0,27*109/л, 0,82*109/л, 41,7%. Подставляя значения больной В. в дискриминантную модель у8(больные) получим у2=206,149*0,09*109/л+108,559*0,50*109/л +20,239*33,2%-359,274 =72832909647,445. Аналогично рассчитываем величину у1(здоровые): у7= 302,321*0,27*109/л + 17,409*0,82*109/л + 27,785*42,7%-684,452 =210702049327,134.Example 3. Patient B. was admitted on September 16, 2015. to the clinic. The peripheral blood content of natural killers was 0.09 * 109 / L, the absolute number of T-helpers was 0.50 * 10 9 / L, the relative number of T-helpers was 33.2%. In a healthy woman, the content of these indicators, respectively, amounted to 0.27 * 10 9 / l, 0.82 * 10 9 / l, 41.7%. Substituting the values of patient B. in the discriminant model in 8 (patients) we get in 2 = 206.149 * 0.09 * 10 9 / L + 108.559 * 0.50 * 10 9 / L + 20.239 * 33.2% -359.274 = 72832909647, 445. Similarly, we calculate the value for 1 (healthy): for 7 = 302.321 * 0.27 * 10 9 / L + 17.409 * 0.82 * 10 9 / L + 27.785 * 42.7% -684.452 = 210702049327.134.
В соответствии с полученными величинами дискриминантных функций показателей клеточного иммунитета на системном уровне для класса больных острым эндометритом (у2) и здоровых женщин (у1) диагноз острого эндометрита ставится при значениях у2=63172289647,364÷72832909647,445, а диагноз здоров – при значениях у1=210327139327,440.In accordance with the obtained values of the discriminant functions of cellular immunity indices at the system level for the class of patients with acute endometritis ( 2 ) and healthy women ( 1 ), the diagnosis of acute endometritis is made at 2 = 63172289647.364 ÷ 72832909647.445, and the diagnosis is healthy - with the values of y 1 = 210327139327,440.
Диагностически значимые показатели гуморального иммунитетана системном уровне, отражающие проявления острого воспалительного процесса в эндометрии, в результате обработки дискриминантным методом, в отличие от показателей клеточного иммунитета, имеют преимущественно отрицательные значения классификационных функций (табл.2).Diagnostically significant indicators of humoral immunity at the system level, reflecting the manifestations of the acute inflammatory process in the endometrium, as a result of processing by the discriminant method, unlike indicators of cellular immunity, have predominantly negative values of the classification functions (Table 2).
Применяя обозначения показателей гуморального звена иммунитета в крови в соответствии с табл.2 и результаты дискриминантного анализа, получаем математическую модель у4 = - 34,77х4 - 6,91х5 + 67,03х6 - 2402,78 для пациенток с острым эндометритом и у3 =- 44,95х4 - 5,77х5 + 58,59х6 - 1611,06 для первого класса.Using the notation of indicators of the humoral immunity in the blood in accordance with Table 2 and the results of discriminant analysis, we obtain a mathematical model in 4 = - 34.77x 4 - 6.91x 5 + 67.03x 6 - 2402.78 for patients with acute endometritis and 3 = - 44.95x 4 - 5.77x 5 + 58.59x 6 - 1611.06 for the first class.
Таблица 2table 2
Коэффициенты классификационных функций параметров гуморального иммунитета в основной группе и контроле на системном уровнеCoefficients of classification functions of the parameters of humoral immunity in the main group and control at the system level
Пример 1. Пациент А. поступил 11.09.2016г. в клинику. Содержание в периферической крови IgG составило 25,6 г/л, IgM – 3,6 г/л, ЦИК – 86,3 у.е. У здоровой женщины эти показатели соответственно составили 10,2 г/л, 1,0 г/л, 60,4 у.е. Подставляя значения больной А. в дискриминантную модель у1(больные) получим у4=-34,77*25,6-6,91*3,6+67,03*86,3-2402,78=+2466,92. Аналогично рассчитываем величину у3(здоровые): у3=-44,95*10,2-5,77*1,0+58,59*60,4-1611,06=+1463,52Example 1. Patient A. was admitted on September 11, 2016. to the clinic. The content in the peripheral blood of IgG was 25.6 g / l, IgM - 3.6 g / l, CEC - 86.3 cu In a healthy woman, these indicators respectively amounted to 10.2 g / l, 1.0 g / l, 60.4 cu Substituting the values of patient A. into the discriminant model in 1 (patients), we obtain in 4 = -34.77 * 25.6-6.91 * 3.6 + 67.03 * 86.3-2402.78 = + 2466.92 . Similarly, we calculate the value for 3 (healthy): for 3 = -44.95 * 10.2-5.77 * 1.0 + 58.59 * 60.4-1611.06 = + 1463.52
Пример 2. Пациент Б. поступил 15.09.2016г. в клинику. Содержание в периферической крови IgG составило 26,2 г/л, IgM – 3,8 г/л, ЦИК – 88,3 у.е. У здоровой женщины эти показатели соответственно составили 8,5 г/л, 0,9 г/л, 61,2 у.е. Подставляя значения больной Б. в дискриминантную модель у1(больные) получим у4=-34,77*26,2-6,91*3,8+67,03*88,3-2402,78=+2578,74. Аналогично рассчитываем величину у3(здоровые): у3=-44,95*8,5-5,77*0,9+58,59*61,2-1611,06=+1587,38Example 2. Patient B. was admitted on September 15, 2016. to the clinic. The content in the peripheral blood of IgG was 26.2 g / l, IgM - 3.8 g / l, CEC - 88.3 cu In a healthy woman, these indicators respectively amounted to 8.5 g / l, 0.9 g / l, 61.2 cu Substituting the values of patient B. into the discriminant model in 1 (patients), we obtain in 4 = -34.77 * 26.2-6.91 * 3.8 + 67.03 * 88.3-2402.78 = + 2578.74 . Similarly, we calculate the value for 3 (healthy): for 3 = -44.95 * 8.5-5.77 * 0.9 + 58.59 * 61.2-1611.06 = + 1587.38
Пример 3. Пациент В. поступил 16.09.2016г. в клинику. Содержание в периферической крови IgG составило 22,7 г/л, IgM – 3,7 г/л, ЦИК – 81,4 у.е. У здоровой женщины эти показатели соответственно составили 9,5 г/л, 1,4 г/л, 62,7 у.е. Подставляя значения больной В. в дискриминантную модель у1(больные) получим у4=-34,77*22,7-6,91*3,7+67,03*81,4-2402,78=+2238,60. Аналогично рассчитываем величину у3(здоровые): у3=-44,95*9,5-5,77*1,4+58,59*62,7-1611,06=+1627,42Example 3. Patient B. was admitted on September 16, 2016. to the clinic. The content in the peripheral blood of IgG was 22.7 g / l, IgM - 3.7 g / l, CEC - 81.4 cu In a healthy woman, these indicators respectively amounted to 9.5 g / l, 1.4 g / l, 62.7 cu Substituting the values of patient B. in the discriminant model in 1 (patients) we get in 4 = -34.77 * 22.7-6.91 * 3.7 + 67.03 * 81.4-2402.78 = + 2238.60 . Similarly, we calculate the value for 3 (healthy): for 3 = -44.95 * 9.5-5.77 * 1.4 + 58.59 * 62.7-1611.06 = + 1627.42
В соответствии с полученными величинами дискриминантных функций показателей гуморального иммунитета на системном уровне для класса больных острым эндометритом (у4) и здоровых женщин (у3) диагноз острого эндометрита ставится при значении у4=2238,60÷2578,74, а диагноз здоров – при у3=1463,52÷1627,42.In accordance with the obtained values of the discriminant functions of the indicators of humoral immunity at the system level for the class of patients with acute endometritis (in 4 ) and healthy women (in 3 ), acute endometritis is diagnosed with a value of 4 = 2238.60 ÷ 2578.74, and the diagnosis is healthy - with y 3 = 1463.52 ÷ 1627.42.
В Российской Федерации за последние десять лет заболеваемость, обусловленная воспалительными процессами в эндометрии, неуклонно растет. Выявление эндометрита представляет значительные трудности вследствие полиморфизма клинической симптоматики. Сложность диагностики данной патологии обусловлена также неспецифичностью и широким диапазоном колебаний показателей лабораторных исследований, имеющих различную диагностическую значимость. Отсутствуют данные по количественной оценке информативности интермодальных изменений параметров иммунной и других систем, биохимического и общего анализа крови у больных острым эндометритом, что снижает результативность диагностического процесса и приводит к увеличению числа выполняемых лабораторных и инструментальных исследований. Это указывает на необходимость разработки новых методов диагностики эндометрита, учитывающих дискриминантные функции иммунологических показателей, позволяющих повысить качество диагностики эндометрита.In the Russian Federation over the past ten years, the incidence due to inflammatory processes in the endometrium has been steadily increasing. The detection of endometritis presents significant difficulties due to polymorphism of clinical symptoms. The complexity of the diagnosis of this pathology is also due to nonspecificity and a wide range of fluctuations in laboratory tests with different diagnostic significance. There is no data on a quantitative assessment of the information content of intermodal changes in the parameters of the immune and other systems, biochemical and general blood tests in patients with acute endometritis, which reduces the effectiveness of the diagnostic process and leads to an increase in the number of laboratory and instrumental studies. This indicates the need to develop new methods for the diagnosis of endometritis, taking into account the discriminant functions of immunological indicators, which can improve the quality of diagnosis of endometritis.
Claims (9)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017131574A RU2701527C2 (en) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | Diagnostic technique for acute endometritis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017131574A RU2701527C2 (en) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | Diagnostic technique for acute endometritis |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017131574A RU2017131574A (en) | 2019-03-11 |
| RU2017131574A3 RU2017131574A3 (en) | 2019-05-21 |
| RU2701527C2 true RU2701527C2 (en) | 2019-09-27 |
Family
ID=65759263
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017131574A RU2701527C2 (en) | 2017-09-09 | 2017-09-09 | Diagnostic technique for acute endometritis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2701527C2 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010069335A2 (en) * | 2008-12-19 | 2010-06-24 | Københavns Universitet | Diagnosis of endometritis |
| RU2477861C1 (en) * | 2011-11-18 | 2013-03-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" | Early diagnostic technique in postpartum endometritis |
-
2017
- 2017-09-09 RU RU2017131574A patent/RU2701527C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010069335A2 (en) * | 2008-12-19 | 2010-06-24 | Københavns Universitet | Diagnosis of endometritis |
| RU2477861C1 (en) * | 2011-11-18 | 2013-03-20 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" | Early diagnostic technique in postpartum endometritis |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| WIESENFELD H.C. et al. Lower genital tract infection and endometritis: insight into subclinical pelvic inflammatory disease// Obstet Gynecol. 2002 Sep;100(3):456-63. * |
| КУПЕРТ М.А. и др. Эндометрит после родов (группы риска, особенности клиники и диагностики) // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2003. - Vol.4. - С.42-46. * |
| КУПЕРТ М.А. и др. Эндометрит после родов (группы риска, особенности клиники и диагностики) // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2003. - Vol.4. - С.42-46. WIESENFELD H.C. et al. Lower genital tract infection and endometritis: insight into subclinical pelvic inflammatory disease// Obstet Gynecol. 2002 Sep;100(3):456-63. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017131574A3 (en) | 2019-05-21 |
| RU2017131574A (en) | 2019-03-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Barton et al. | Placental growth factor predicts time to delivery in women with signs or symptoms of early preterm preeclampsia: a prospective multicenter study | |
| Endo et al. | Presepsin as a powerful monitoring tool for the prognosis and treatment of sepsis: a multicenter prospective study | |
| US20120270747A1 (en) | Method of predicting risk of pre-term birth | |
| Leow et al. | Preterm birth prediction in asymptomatic women at mid-gestation using a panel of novel protein biomarkers: the Prediction of PreTerm Labor (PPeTaL) study | |
| CN110305954B (en) | A predictive model for early and accurate detection of preeclampsia | |
| Creswell et al. | Preterm birth: screening and prediction | |
| Kim et al. | Inflammatory proteins in the amniotic fluid, plasma, and cervicovaginal fluid for the prediction of intra-amniotic infection/inflammation and imminent preterm birth in preterm labor | |
| Nakishbandy et al. | Level of C-reactive protein as an indicator for prognosis of premature uterine contractions | |
| Balu et al. | Bacterial vaginosis, vaginal fluid neutrophil defensins, and preterm birth | |
| Trilla et al. | First-trimester SARS-CoV-2 infection: clinical presentation, inflammatory markers, and obstetric outcomes | |
| Cobo et al. | Noninvasive prediction models of intra-amniotic infection in women with preterm labor | |
| Spencer et al. | Maternal PlGF and umbilical Dopplers predict pregnancy outcomes at diagnosis of early-onset fetal growth restriction | |
| de Guadiana-Romualdo et al. | Mortality prediction model from combined serial lactate, procalcitonin and calprotectin levels in critically ill patients with sepsis: A retrospective study according to Sepsis-3 definition | |
| US20220011311A1 (en) | Detection of bladder cancer | |
| RU2701527C2 (en) | Diagnostic technique for acute endometritis | |
| JP3897117B2 (en) | Method for determining and predicting the severity of pregnancy toxemia, and for evaluating fetal / placental function in pregnancy toxemia | |
| US11255861B2 (en) | Method for determining the risk of preterm birth | |
| Krasnyi et al. | Extracellular DNA levels and cytokine profiles in preterm birth: a cohort study | |
| TW202415952A (en) | Device, biomarker group for predicting, assessing or diagnosing preeclampsia risk and use thereof in preparing device for assessing preeclampsia risk | |
| Kılıçkıran et al. | Role of cystatin C levels as an inflammatory marker in predicting endometriosis | |
| CN120530207A (en) | Preeclampsia biomarkers and their uses | |
| RU2684287C1 (en) | Method for predicting the risk of developing type 2 psoriasis in postmenopausal women | |
| Hu et al. | Non-invasive prediction model of histologic chorioamnionitis with preterm prelabour rupture of membranes | |
| US20180306803A1 (en) | Systems and methods to predict risk for preterm labor and/or preterm birth | |
| RU2829052C1 (en) | Method for differential diagnosis of endometrial hyperplasia and endometrial cancer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190924 |