RU2796921C2 - Method for obtaining cannabinoids from technical hemp varieties - Google Patents
Method for obtaining cannabinoids from technical hemp varieties Download PDFInfo
- Publication number
- RU2796921C2 RU2796921C2 RU2020108066A RU2020108066A RU2796921C2 RU 2796921 C2 RU2796921 C2 RU 2796921C2 RU 2020108066 A RU2020108066 A RU 2020108066A RU 2020108066 A RU2020108066 A RU 2020108066A RU 2796921 C2 RU2796921 C2 RU 2796921C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hexane
- cbd
- solvent
- solution
- water
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 57
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 title claims abstract description 30
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 title claims description 24
- 235000012766 Cannabis sativa ssp. sativa var. sativa Nutrition 0.000 title claims description 19
- 235000012765 Cannabis sativa ssp. sativa var. spontanea Nutrition 0.000 title claims description 19
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 title claims description 19
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 title claims description 19
- 239000011487 hemp Substances 0.000 title claims description 19
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 title abstract description 13
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 266
- QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N cannabidiol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N 0.000 claims abstract description 105
- ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CC=C(C)C1 ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 102
- QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N Trans-Cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 101
- 229950011318 cannabidiol Drugs 0.000 claims abstract description 101
- PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N dihydrocannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)C)CCC(C)=C1 PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N 0.000 claims abstract description 101
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 93
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims abstract description 60
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 59
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 50
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 47
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 44
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 43
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 38
- UAEPNZWRGJTJPN-UHFFFAOYSA-N methylcyclohexane Chemical compound CC1CCCCC1 UAEPNZWRGJTJPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 38
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims abstract description 27
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims abstract description 27
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 26
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- GYNNXHKOJHMOHS-UHFFFAOYSA-N methyl-cycloheptane Natural products CC1CCCCCC1 GYNNXHKOJHMOHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 11
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000001993 wax Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims abstract description 5
- WVOLTBSCXRRQFR-DLBZAZTESA-N cannabidiolic acid Chemical compound OC1=C(C(O)=O)C(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 WVOLTBSCXRRQFR-DLBZAZTESA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 claims abstract description 3
- WVOLTBSCXRRQFR-SJORKVTESA-N Cannabidiolic acid Natural products OC1=C(C(O)=O)C(CCCCC)=CC(O)=C1[C@@H]1[C@@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 WVOLTBSCXRRQFR-SJORKVTESA-N 0.000 claims abstract 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 33
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 235000008697 Cannabis sativa Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 15
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 15
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 8
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- AAXZFUQLLRMVOG-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-2-(4-methylpent-3-enyl)-7-propylchromen-5-ol Chemical compound C1=CC(C)(CCC=C(C)C)OC2=CC(CCC)=CC(O)=C21 AAXZFUQLLRMVOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZLYNXDIDWUWASO-UHFFFAOYSA-N 6,6,9-trimethyl-3-pentyl-8,10-dihydro-7h-benzo[c]chromene-1,9,10-triol Chemical compound CC1(C)OC2=CC(CCCCC)=CC(O)=C2C2=C1CCC(C)(O)C2O ZLYNXDIDWUWASO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 4
- JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC.CCCCCC JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- RBEAVAMWZAJWOI-MTOHEIAKSA-N (5as,6s,9r,9ar)-6-methyl-3-pentyl-9-prop-1-en-2-yl-7,8,9,9a-tetrahydro-5ah-dibenzofuran-1,6-diol Chemical compound C1=2C(O)=CC(CCCCC)=CC=2O[C@H]2[C@@H]1[C@H](C(C)=C)CC[C@]2(C)O RBEAVAMWZAJWOI-MTOHEIAKSA-N 0.000 description 2
- ZROLHBHDLIHEMS-HUUCEWRRSA-N (6ar,10ar)-6,6,9-trimethyl-3-propyl-6a,7,8,10a-tetrahydrobenzo[c]chromen-1-ol Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 ZROLHBHDLIHEMS-HUUCEWRRSA-N 0.000 description 2
- TWKHUZXSTKISQC-UHFFFAOYSA-N 2-(5-methyl-2-prop-1-en-2-ylphenyl)-5-pentylbenzene-1,3-diol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1=CC(C)=CC=C1C(C)=C TWKHUZXSTKISQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YJYIDZLGVYOPGU-XNTDXEJSSA-N 2-[(2e)-3,7-dimethylocta-2,6-dienyl]-5-propylbenzene-1,3-diol Chemical compound CCCC1=CC(O)=C(C\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=C1 YJYIDZLGVYOPGU-XNTDXEJSSA-N 0.000 description 2
- AEMUKTQSTGYTRH-UHFFFAOYSA-N Cannabigerol monoethyl ether Natural products CCCCCc1cc(O)c(CC=C(/C)CCC=C(C)C)c(OCC)c1 AEMUKTQSTGYTRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N Cannabinol Chemical compound C1=C(C)C=C2C3=C(O)C=C(CCCCC)C=C3OC(C)(C)C2=C1 VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZROLHBHDLIHEMS-UHFFFAOYSA-N Delta9 tetrahydrocannabivarin Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCC)=CC(O)=C3C21 ZROLHBHDLIHEMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 2
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- QXACEHWTBCFNSA-SFQUDFHCSA-N cannabigerol Chemical compound CCCCCC1=CC(O)=C(C\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=C1 QXACEHWTBCFNSA-SFQUDFHCSA-N 0.000 description 2
- YJYIDZLGVYOPGU-UHFFFAOYSA-N cannabigeroldivarin Natural products CCCC1=CC(O)=C(CC=C(C)CCC=C(C)C)C(O)=C1 YJYIDZLGVYOPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 2
- SSNHGLKFJISNTR-DYSNNVSPSA-N (6ar,10ar)-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6a,7,8,10a-tetrahydrobenzo[c]chromen-1-ol;2-[(1r,6r)-3-methyl-6-prop-1-en-2-ylcyclohex-2-en-1-yl]-5-pentylbenzene-1,3-diol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1.C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 SSNHGLKFJISNTR-DYSNNVSPSA-N 0.000 description 1
- UVOLYTDXHDXWJU-UHFFFAOYSA-N Cannabichromene Chemical compound C1=CC(C)(CCC=C(C)C)OC2=CC(CCCCC)=CC(O)=C21 UVOLYTDXHDXWJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- REOZWEGFPHTFEI-JKSUJKDBSA-N Cannabidivarin Chemical compound OC1=CC(CCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 REOZWEGFPHTFEI-JKSUJKDBSA-N 0.000 description 1
- 102000018208 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050007331 Cannabinoid receptor Proteins 0.000 description 1
- IGHTZQUIFGUJTG-QSMXQIJUSA-N O1C2=CC(CCCCC)=CC(O)=C2[C@H]2C(C)(C)[C@@H]3[C@H]2[C@@]1(C)CC3 Chemical compound O1C2=CC(CCCCC)=CC(O)=C2[C@H]2C(C)(C)[C@@H]3[C@H]2[C@@]1(C)CC3 IGHTZQUIFGUJTG-QSMXQIJUSA-N 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- QXACEHWTBCFNSA-UHFFFAOYSA-N cannabigerol Natural products CCCCCC1=CC(O)=C(CC=C(C)CCC=C(C)C)C(O)=C1 QXACEHWTBCFNSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003453 cannabinol Drugs 0.000 description 1
- SVTKBAIRFMXQQF-UHFFFAOYSA-N cannabivarin Chemical compound C1=C(C)C=C2C3=C(O)C=C(CCC)C=C3OC(C)(C)C2=C1 SVTKBAIRFMXQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 235000020665 omega-6 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940033080 omega-6 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
Область техникиTechnical field
Настоящее изобретение относится к области экстракции каннабиноидов из растительного материала; в частности, оно относится к экстракции (-)-каннабидиола (CBD) и получению его в форме высокочистых кристаллов из сортов технической конопли.The present invention relates to the field of extraction of cannabinoids from plant material; in particular, it relates to the extraction of (-)-cannabidiol (CBD) and its preparation in the form of highly pure crystals from industrial hemp varieties.
Предшествующий уровень техникиPrior Art
Каннабиноиды или каннабинолы представляют собой химические вещества природного происхождения и биохимически классифицируются как терпенофенолы. Они представляют собой соединения, объединенные способностью взаимодействовать с каннабиноидными рецепторами.Cannabinoids or cannabinols are naturally occurring chemicals and are biochemically classified as terpenophenols. They are compounds united by the ability to interact with cannabinoid receptors.
Термином «каннабиноиды» обычно обозначают семейство химических соединений, присутствующих в Cannabis sativa.The term "cannabinoids" usually refers to a family of chemical compounds found in Cannabis sativa.
К настоящему моменту идентифицировано около семидесяти таких соединений, из которых наиболее важными являются:About seventy such compounds have been identified so far, of which the most important are:
тетрагидроканнабинол (THC, Δ9-THC), каннабидиол (CBD), тетрагидроканнабиварин (THCV), каннабинол (CBN), каннабихромен (CBC), каннабициклол (CBL), каннабиелсоин (CBE), каннабигерол (CBG), каннабинодиол (CBND), каннабитриол (CBT), каннабиварин (CBV), каннабидиварин (CBDV), каннабихромеварин (CBCV), каннабигероварин (CBGV), и каннабигерола моноэтиловый эфир (CBGM).tetrahydrocannabinol (THC, Δ9-THC), cannabidiol (CBD), tetrahydrocannabivarin (THCV), cannabinol (CBN), cannabichromene (CBC), cannabicyclol (CBL), cannabielsoin (CBE), cannabigerol (CBG), cannabinodiol (CBND), cannabitriol (CBT), cannabivarin (CBV), cannabidivarin (CBDV), cannabichromevarin (CBCV), cannabigerovarin (CBGV), and cannabigerol monoethyl ether (CBGM).
Недавно на рынок был выведен Sativex – лекарственное средство, экстрагированное из Cannabis Sativa, со стандартизованным содержанием каннабиноидов (THC и CBD).Recently, Sativex was introduced to the market, a drug extracted from Cannabis Sativa with a standardized content of cannabinoids (THC and CBD).
Каннабиноиды находятся в растениях конопли Cannabis sativa в форме их карбоксильных производных, каннабиноидных карбоновых кислот, из которых получают так называемые “нейтральные каннабиноиды” посредством декарбоксилирования, т.е. отщепления CO2. Так, например, каннабидиол (CBD) образуется при декарбоксилировании каннабидиоловой кислоты (CBDA).Cannabinoids are found in Cannabis sativa in the form of their carboxyl derivatives, cannabinoid carboxylic acids, from which the so-called “neutral cannabinoids” are obtained by decarboxylation, i.e. elimination of CO 2 . For example, cannabidiol (CBD) is formed by decarboxylation of cannabidiolic acid (CBDA).
(-)-Каннабидиол (CBD) может находиться в растениях как в кислотной форме (CBDA), так и в декарбоксилированной форме (CBD). Большее или меньшее количество той или иной формы каннабиноида в биомассе может зависеть как от условий произрастания растений и от параметров окружающей среды, так и от условий, применяемых при дальнейшей переработке и хранении. В процессе переработки технической конопли биомасса может подвергаться сушке, которая вследствие нагревания может приводить к декарбоксилированию кислотной формы каннабиноида (CBDA) до его декарбоксилированной формы (CBD). Этот процесс декарбоксилирования может протекать даже при низкой температуре (при комнатной температуре), если биомасса хранится длительное время перед использованием.(-)-Cannabidiol (CBD) can be found in plants in both acidic (CBDA) and decarboxylated (CBD) forms. A greater or lesser amount of one or another form of cannabinoid in biomass may depend both on the growing conditions of plants and on environmental parameters, and on the conditions used during further processing and storage. During the processing of industrial hemp, the biomass can be dried, which, due to heating, can lead to the decarboxylation of the acid form of the cannabinoid (CBDA) to its decarboxylated form (CBD). This decarboxylation process can proceed even at low temperature (at room temperature) if the biomass is stored for a long time before use.
Процессы выделения нейтральных каннабиноидов, в частности CBD, известные в данной области техники (см., например, описание в US2015/0038567), довольно трудоемкие, и не всегда возможно получить их с высокой степенью чистоты посредством способов, легко применимых в промышленных масштабах.The processes for isolating neutral cannabinoids, in particular CBD, known in the art (see, for example, the description in US2015/0038567) are quite laborious and it is not always possible to obtain them in high purity by methods that are easily applied on an industrial scale.
Целью настоящего изобретения является разработка способа получения CBD или других нейтральных каннабиноидов из технических сортов конопли в высокочистой кристаллической форме.The aim of the present invention is to develop a method for obtaining CBD or other neutral cannabinoids from industrial hemp varieties in a highly pure crystalline form.
Краткое описание изобретенияBrief description of the invention
Настоящее изобретение позволяет решить указанные выше проблемы посредством способа получения CBD или других нейтральных каннабиноидов, где указанный способ включает:The present invention solves the above problems by means of a method for producing CBD or other neutral cannabinoids, where said method includes:
i) контактирование биомассы, содержащей CBD и/или CBDA, или указанный другой нейтральный каннабиноид или в форме карбоновой кислоты, с экстрагирующим растворителем в течение по меньшей мере 10 минут при температуре от 0°C до температуры кипения растворителя, с получением, после удаления биомассы, проэкстрагированного раствора; при этом указанный экстрагирующий растворитель выбран из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, октана, метилциклогексана, ацетона, пропанола, этанола, метанола, этилацетата, толуола, метиленхлорида и их смесей;i) contacting the biomass containing CBD and/or CBDA, or said other neutral cannabinoid or in the form of a carboxylic acid, with an extracting solvent for at least 10 minutes at a temperature from 0°C to the boiling point of the solvent, to obtain, after removal of the biomass , the extracted solution; wherein said extracting solvent is selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, octane, methylcyclohexane, acetone, propanol, ethanol, methanol, ethyl acetate, toluene, methylene chloride, and mixtures thereof;
продолжение согласно процессу (A), включающему:continuation according to process (A), including:
ii-a) контактирование проэкстрагированного раствора с водно-спиртовым раствором и доведение значения pH до 7,5-12,5 подходящим щелочным раствором, с получением, после разделения фаз, первой водно-спиртовой фазы и первой органической фазы; в случае когда экстрагирующий растворитель представляет собой смешивающийся с водой растворитель, добавляют также первый несмешивающийся с водой растворитель, выбранный из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, метилциклогексана и их смесей;ii-a) contacting the extracted solution with a water-alcohol solution and adjusting the pH to 7.5-12.5 with a suitable alkaline solution to obtain, after phase separation, a first water-alcohol phase and a first organic phase; in the case where the extracting solvent is a water-miscible solvent, a first water-immiscible solvent selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, methylcyclohexane and mixtures thereof is also added;
iii-a) контактирование первой водно-спиртовой фазы со вторым несмешивающимся с водой растворителем и кислым раствором, подходящим для доведения значения pH до 2,0-6,5 с получением второй органической фазы и второй водно-спиртовой фазы; указанный второй несмешивающийся с водой растворитель выбран из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, метилциклогексана и их смесей;iii-a) contacting the first aqueous-alcoholic phase with a second water-immiscible solvent and an acidic solution suitable to adjust the pH to 2.0-6.5 to obtain a second organic phase and a second aqueous-alcoholic phase; said second water-immiscible solvent is selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, methylcyclohexane and mixtures thereof;
iv-a) упаривание второй органической фазы и нагревание полученного масла при температуре между 65°C и 180°C в течение по меньшей мере 10 минут с достижением декарбоксилирования CBDA до CBD;iv-a) evaporation of the second organic phase and heating the resulting oil at a temperature between 65°C and 180°C for at least 10 minutes to achieve decarboxylation of CBDA to CBD;
или продолжение согласно процессу (B), включающему:or continuation according to process (B) comprising:
ii-b) упаривание проэкстрагированного раствора до получения проэкстрагированного масла, и контактирование полученного проэкстрагированного масла со спиртом при температуре ниже 20°C в течение по меньшей мере 10 минут с получением суспензии экстракта и восков, где указанный спирт выбран из группы, состоящей из метанола, этанола, пропанола и их смесей;ii-b) evaporating the extracted solution to obtain a extracted oil, and contacting the obtained extracted oil with an alcohol at a temperature below 20°C for at least 10 minutes to obtain a suspension of extract and waxes, where the specified alcohol is selected from the group consisting of methanol, ethanol, propanol and mixtures thereof;
iii-b) фильтрование и упаривание суспензии с получением освобожденного от воска проэкстрагированного масла и контактирование полученного освобожденного от воска проэкстрагированного масла с несмешивающимся с водой органическим растворителем и водно-спиртовым раствором, с получением органической фазы, содержащей освобожденный от воска и смолы экстракт, и водно-спиртовой фазы, содержащей смолы;iii-b) filtering and evaporating the slurry to obtain a dewaxed extracted oil and contacting the resulting dewaxed extracted oil with a water-immiscible organic solvent and an aqueous-alcoholic solution to obtain an organic phase containing the dewaxed and resinous extract and an aqueous -alcohol phase containing resins;
iv-b) упаривание органической фазы, содержащей освобожденный от воска и смолы экстракт, и хроматография полученного остатка на силикагеле с применением подходящего элюента со сбором фракций, содержащих CBD или другой нейтральный каннабиноид;iv-b) evaporation of the organic phase containing the dewaxed and resinous extract and chromatography of the resulting residue on silica gel using a suitable eluent to collect fractions containing CBD or another neutral cannabinoid;
и в заключениеin conclusion
v) кристаллизация CBD или другого нейтрального каннабиноида из третьего несмешивающегося с водой растворителя, выбранного из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, октана, метилциклогексана и их смеси.v) crystallization of the CBD or other neutral cannabinoid from a third water-immiscible solvent selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, octane, methylcyclohexane and mixtures thereof.
Неожиданно было обнаружено, что способ экстракции и выделения (-)-каннабидиола (CBD) по настоящему изобретению можно применять к “биомассе”, имеющей любое соотношение кислотной формы (CBDA) и декарбоксилированной формы (CBD), согласно любому из двух процессов, обозначенных в настоящем тексте как процесс А и процесс В.Surprisingly, it has been found that the (-)-Cannabidiol (CBD) extraction and isolation method of the present invention can be applied to "biomass" having any ratio of acid form (CBDA) to decarboxylated form (CBD), according to either of the two processes indicated in in this text as Process A and Process B.
Следует отметить, что благодаря своей особенной простоте процесс А показан для применения в области фармакологии, в которой действуют более ограничивающие правила.It should be noted that, due to its particular simplicity, process A is indicated for use in the field of pharmacology, where more restrictive regulations apply.
Помимо выделения CBD, процесс B можно применять также для получения других каннабиноидов (например, CBG, CBN и т.д.).In addition to isolating CBD, Process B can also be used to produce other cannabinoids (eg CBG, CBN, etc.).
Подробное описание изобретенияDetailed description of the invention
Согласно настоящему изобретению, растворители пентан, гексан, гептан и октан представляют собой н-пентан, н-гексан, н-гептан, н-октан или смеси их изомеров.According to the present invention, the solvents pentane, hexane, heptane and octane are n-pentane, n-hexane, n-heptane, n-octane or mixtures of their isomers.
Предпочтительно, согласно настоящему изобретению применяемое сырье (т.е. биомасса) представляет собой техническую коноплю (вид Cannabis Sativa; подвид Sativa). Как равноценно предпочтительная альтернатива могут применяться сорта технической конопли, например: Antal, Armanca, Beniko, Bialobrzeskie, Cannakomp, Carma, Carmagnola, Carmaleonte, Chamaeleon, Codimoro, CS, Dacia Sacuieni, Delta-Ilosa, Delta-405, Denise, Diana, Dioica 88, Eletta Campana, Epsilon 68, Fedora 17, Felina 32, Férimon, Fibranova, Fibrol, Finola, Futura 75, Ivory, KC Bonusz, KC Dora, KC Virtus, KC Zuzuna, Kompolti, KompoltiHibrid TC, Lipko, Lovrin 110, Marcello, Markant, Monica, Rajan, Ratza, Santhica 23, Santhica 27, Santhica 70, SecuieniJubileu, Silvana, Szarvasi, Tiborszallasi, Tisza, Tygra, Uniko B, Uso-31, Wielkopolkie, Wojko, Zenit.Preferably, according to the present invention, the raw material used (ie biomass) is industrial hemp (Cannabis Sativa species; Sativa subspecies). As an equally preferred alternative, technical hemp varieties can be used, for example: Antal, Armanca, Beniko, Bialobrzeskie, Cannakomp, Carma, Carmagnola, Carmaleonte, Chamaeleon, Codimoro, CS, Dacia Sacuieni, Delta-Ilosa, Delta-405, Denise, Diana, Dioica 88, Eletta Campana, Epsilon 68, Fedora 17, Felina 32, Férimon, Fibranova, Fibrol, Finola, Futura 75, Ivory, KC Bonusz, KC Dora, KC Virtus, KC Zuzuna, Kompolti, KompoltiHibrid TC, Lipko, Lovrin 110, Marcello , Markant, Monica, Rajan, Ratza, Santhica 23, Santhica 27, Santhica 70, SecuieniJubileu, Silvana, Szarvasi, Tiborszallasi, Tisza, Tygra, Uniko B, Uso-31, Wielkopolkie, Wojko, Zenit.
Биомассу предпочтительно тонко измельчают перед проведением экстракции растворителем согласно способу, описанному в настоящем изобретении.The biomass is preferably finely ground prior to solvent extraction according to the method described in the present invention.
Процесс AProcess A
Предпочтительно, экстракцию CBDA и CBD проводят путем введения конопли в контактирование с растворителем, выбранным из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, октана, метилциклогексана и их смесей; более предпочтительно в качестве экстрагирующего растворителя применяют гексан (н-гексан или смесь изомеров).Preferably, the extraction of CBDA and CBD is carried out by contacting the hemp with a solvent selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, octane, methylcyclohexane and mixtures thereof; more preferably, hexane (n-hexane or a mixture of isomers) is used as the extracting solvent.
Экстракцию согласно процессу A предпочтительно проводят при температуре между 0°C и 35°C, более предпочтительно между 10 и 25°C, в течение по меньшей мере 10 минут.The extraction according to process A is preferably carried out at a temperature between 0°C and 35°C, more preferably between 10 and 25°C, for at least 10 minutes.
Согласно процессу A по настоящему изобретению, кислотную форму (CBDA) отделяют от декарбоксилированной формы (CBD) и от примесей путем добавления водно-спиртового раствора, в котором спирт выбран из группы, состоящей из этанола, метанола, предпочтительно из метанола. Отделение проводят путем добавления при перемешивании подходящего щелочного раствора, предпочтительно применяют 30%-ный раствор NaOH, доводя pH до значения между 7,5 и 12,5, более предпочтительно между 8,0 и 8,5, еще более предпочтительно между 8,2 и 8,3. Было обнаружено, что pH 8,2-8,3 особенно предпочтительно для того, чтобы в водно-спиртовую фазу не экстрагировались также жирные кислоты, такие как омега-3 или омега-6 жирные кислоты, которые иногда присутствуют даже в значительных количествах в исходной биомассе.According to process A of the present invention, the acid form (CBDA) is separated from the decarboxylated form (CBD) and from impurities by adding an aqueous-alcoholic solution in which the alcohol is selected from the group consisting of ethanol, methanol, preferably methanol. The separation is carried out by adding a suitable alkaline solution with stirring, preferably using a 30% NaOH solution, adjusting the pH to between 7.5 and 12.5, more preferably between 8.0 and 8.5, even more preferably between 8.2 and 8.3. It has been found that a pH of 8.2-8.3 is particularly preferred so that fatty acids such as omega-3 or omega-6 fatty acids, which are sometimes present even in significant amounts in the starting material, are not also extracted into the aqueous-alcoholic phase. biomass.
Отделяют первую водно-спиртовую фазу и экстрагируют CBDA путем добавления при перемешивании второго более или менее неполярного несмешивающегося с водой растворителя, предпочтительно используют гексан (н-гексан или смесь изомеров), и раствора кислоты, предпочтительно используют раствор уксусной кислоты, доводя pH до значения между 6,5 и 2,0, предпочтительно между 4,5 и 5,5, еще более предпочтительно между 4,8 и 5,2.The first hydroalcoholic phase is separated and the CBDA is extracted by adding a second more or less non-polar water-immiscible solvent with stirring, preferably using hexane (n-hexane or a mixture of isomers) and an acid solution, preferably using an acetic acid solution, adjusting the pH to between 6.5 and 2.0, preferably between 4.5 and 5.5, even more preferably between 4.8 and 5.2.
Вторую органическую фазу упаривают до получения масла, и содержащийся в нем CBDA декарбоксилируют до CBD, выдерживая масло при температуре между 65°C и 180°C в течение по меньшей мере 10 минут.The second organic phase is evaporated to an oil and the CBDA contained therein is decarboxylated to CBD by keeping the oil at a temperature between 65°C and 180°C for at least 10 minutes.
Затем кристаллизуют CBD.Then the CBD is crystallized.
Процесс BProcess B
Экстракцию CBDA и CBD проводят путем введения конопли в контактирование с растворителем, предпочтительно выбранным из группы, состоящей из ацетона, пропанола, этанола, метанола, этилацетата, толуола, н-гексана или смеси изомеров гексана; более предпочтительно из метанола, при температуре кипения растворителя в течение по меньшей мере 10 минут. При необходимости суспензию перемешивают до полного декарбоксилирования CBDA в CBD.The extraction of CBDA and CBD is carried out by contacting the hemp with a solvent, preferably selected from the group consisting of acetone, propanol, ethanol, methanol, ethyl acetate, toluene, n-hexane or a mixture of hexane isomers; more preferably from methanol, at the reflux temperature of the solvent for at least 10 minutes. If necessary, the suspension is stirred until complete decarboxylation of CBDA to CBD.
Суспензию можно кипятить даже в течение 60 часов или больше.The suspension can be boiled even for 60 hours or more.
Биомассу отделяют фильтрованием или центрифугированием, и раствор, содержащий CBD, упаривают до получения масла.The biomass is separated by filtration or centrifugation and the solution containing CBD is evaporated to an oil.
Воска, содержащиеся в проэкстрагированном растворе, отделяют путем добавления спирта, предпочтительно используют метанол, поддерживая температуру ниже 20°C, предпочтительно 4-10°C, еще более предпочтительно 4°C, в течение по меньшей мере 10 минут. Суспензию фильтруют, и освобожденный от воска раствор упаривают с получением масла.The waxes contained in the extracted solution are separated by adding alcohol, preferably methanol is used, keeping the temperature below 20°C, preferably 4-10°C, even more preferably 4°C, for at least 10 minutes. The suspension is filtered and the wax-free solution is evaporated to give an oil.
Смолы удаляют из полученного масла путем добавления при перемешивании подходящего растворителя, выбранного из группы, состоящей из толуола, пентана, гексана, гептана, октана и их смесей; предпочтительно применяют гексан (н-гексан или смесь изомеров); и водно-спиртового раствора, в котором спирт выбран из группы, состоящей из этанола и метанола; предпочтительно применяют метанол.Resins are removed from the resulting oil by adding with stirring a suitable solvent selected from the group consisting of toluene, pentane, hexane, heptane, octane and mixtures thereof; preferably hexane (n-hexane or a mixture of isomers) is used; and a water-alcohol solution in which the alcohol is selected from the group consisting of ethanol and methanol; preferably methanol is used.
Гексановую фазу упаривают с получением масла и загружают на колонку с силикагелем, применяя элюирующую фазу, предпочтительно смесь гексана (н-гексана или смеси изомеров) и этилацетата, предпочтительно в соотношении между 20:1 и 5:1, еще более предпочтительно 10:1.The hexane phase is evaporated to an oil and loaded onto a silica gel column using an eluent phase, preferably a mixture of hexane (n-hexane or mixture of isomers) and ethyl acetate, preferably in a ratio between 20:1 and 5:1, even more preferably 10:1.
Фракции, содержащие очищенный CBD, объединяют, упаривают до получения масла и кристаллизуют содержащийся в нем CBD.Fractions containing purified CBD are combined, evaporated to an oil, and the CBD contained therein is crystallized.
КристаллизацияCrystallization
Кристаллизация CBD, полученного из процесса А или из процесса В, протекает при добавлении при перемешивании 0,3-3 объемов, предпочтительно 0,5-1, еще более предпочтительно 0,6 объемов растворителя, относительно веса масла. Растворитель выбирают из группы, состоящей из пентана, гексана, гептана, октана и метилциклогексана, предпочтительно в качестве кристаллизационного растворителя применяют гексан или гептан (или смеси их изомеров) или метилциклогексан, при температуре ниже 30°C в течение по меньшей мере 10 минут. Опционально кристаллизацию стимулируют добавлением минимального количества кристаллов CBD.Crystallization of CBD obtained from process A or from process B proceeds by adding with stirring 0.3-3 volumes, preferably 0.5-1, even more preferably 0.6 volumes of solvent, relative to the weight of the oil. The solvent is selected from the group consisting of pentane, hexane, heptane, octane and methylcyclohexane, preferably hexane or heptane (or mixtures of their isomers) or methylcyclohexane is used as crystallization solvent, at a temperature below 30°C for at least 10 minutes. Optionally, crystallization is stimulated by adding a minimum amount of CBD crystals.
Эту стадию кристаллизации опционально можно повторять второй раз для получения продукта, имеющего еще более высокую чистоту, посредством добавления при перемешивании 0,3-3 объемов, предпочтительно 0,5-2,5, еще более предпочтительно 2 объемов растворителя, относительно веса масла.This crystallization step can optionally be repeated a second time to obtain an even higher purity product by adding 0.3-3 volumes, preferably 0.5-2.5, even more preferably 2 volumes of solvent, relative to the weight of the oil, with stirring.
Обеспечивающий преимущество аспект настоящего изобретения состоит в том, что процессы А и В можно интегрировать, потому что стадии от ii-b до iv-b можно применять к первой органической фазе, полученной со стадии ii-a в процессе A, для выделения содержащегося в ней CBD или другого нейтрального каннабиноида.An advantageous aspect of the present invention is that processes A and B can be integrated because steps ii-b to iv-b can be applied to the first organic phase obtained from step ii-a in process A to isolate the CBD or other neutral cannabinoid.
Настоящее изобретение будет более понятно в свете описанных далее вариантов осуществления.The present invention will be better understood in light of the embodiments described below.
Краткое описание чертежейBrief description of the drawings
Фиг. 1 – показаны диаграммы ВЭЖХ двух экстрактов конопли с разными соотношениями CBDA и CBD и соответствующие времена удерживания (RT).Fig. 1 - HPLC plots of two hemp extracts with different ratios of CBDA to CBD and corresponding retention times (RT) are shown.
Экспериментальная частьexperimental part
Материалы и методыMaterials and methods
ВЭЖХHPLC
Колонка = Thermo Accucore C18 (100 x 4,6 мм; 2,6 мкм).Column = Thermo Accucore C18 (100 x 4.6 mm; 2.6 µm).
Температура = 50°C.Temperature = 50°C.
Элюирующая фаза = градиент - вода (H3PO4 0,05%)/ацетонитрил.Eluting phase = gradient - water (H 3 PO 4 0.05%)/acetonitrile.
Детектор = УФ (200 - 210 нм).Detector = UV (200 - 210 nm).
Время удерживания RT (CBDA) = около 4 минутRetention time RT (CBDA) = about 4 minutes
Время удерживания RT (CBD) = около 5 минутRetention time RT (CBD) = about 5 minutes
Пример 1. Получение CBD из конопли, имеющей соотношение CBDA/CBD около 70/30, путем экстракции и отделения кислотной формы (CBDA) (процесс A) (тесты Q207D/394 и Q207D/396)Example 1 Production of CBD from hemp having a CBDA/CBD ratio of about 70/30 by extraction and separation of the acid form (CBDA) (process A) (tests Q207D/394 and Q207D/396)
Экстракция гексаном биомассы (тест Q207D/394)Hexane Extraction of Biomass (Test Q207D/394)
132 кг гексана и 40 кг тонко измельченной конопли помещали в 250-литровый стальной реактор, оснащенный мешалкой, и перемешивали при температуре 20°C в течение 4 часов.132 kg of hexane and 40 kg of finely ground hemp were placed in a 250 liter steel reactor equipped with a stirrer and stirred at 20° C. for 4 hours.
По прошествии указанного времени суспензию извлекали из реактора и фильтровали в вакууме в 2 порции. Биомассу, оставшуюся на фильтре от каждой порции, промывали 10 литрами гексана.After the specified time, the suspension was removed from the reactor and filtered under vacuum in 2 portions. The biomass remaining on the filter from each portion was washed with 10 liters of hexane.
Отфильтрованный раствор загружали в реактор и упаривали в вакууме при температуре <35°C до наименьшего возможного объема. Получали 7,48 кг упаренного раствора, содержащего 508,64 г CBDA + 125,7 г CBD (по данным ВЭЖХ анализа).The filtered solution was loaded into the reactor and evaporated in vacuum at a temperature <35°C to the smallest possible volume. Received 7.48 kg stripped off solution containing 508.64 g CBDA + 125.7 g CBD (according to HPLC analysis).
Упаренный раствор хранили при температуре <30°C для последующих стадий.The stripped off solution was stored at <30°C for subsequent steps.
Отделение CBDA от CBD (тест Q207D/396)Separation of CBDA from CBD (test Q207D/396)
1001,0 г упаренного раствора (содержит 77,7 г CBDA + 16,8 г CBD), 540 мл метанола, 810 мл деминерализованной воды и 5 г бисульфита натрия помещали в трехлитровую четырехгорлую стеклянную колбу, оснащенную мешалкой. Значение pH доводили до 12,0 при перемешивании путем добавления 30%-ного раствора NaOH (около 125 мл). Всю полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (1) от нижней водно-метанольной фазы (1).1001.0 g of the stripped off solution (contains 77.7 g CBDA + 16.8 g CBD), 540 ml of methanol, 810 ml of demineralized water and 5 g of sodium bisulfite were placed in a three-liter four-necked glass flask equipped with a stirrer. The pH was adjusted to 12.0 with stirring by adding a 30% NaOH solution (about 125 ml). The entire resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (1) from the lower water-methanol phase (1).
Обе фазы изымали из делительной воронки, не смешивая друг с другом, и переносили верхнюю гексановую фазу (1) обратно в четырехгорлую колбу, в которую при перемешивании добавляли 160 мл метанола, 240 мл деминерализованной воды и 5 г бисульфита натрия. Значение рН доводили до 12,5 путем добавления 30%-ного раствора NaOH.Both phases were removed from the separating funnel without mixing with each other, and the upper hexane phase (1) was transferred back into a four-necked flask, into which 160 ml of methanol, 240 ml of demineralized water and 5 g of sodium bisulfite were added with stirring. The pH was adjusted to 12.5 by adding 30% NaOH solution.
Полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (2) от нижней водно-метанольной фазы (2).The resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (2) from the lower water-methanol phase (2).
Две водно-метанольные фазы (1) и (2) объединяли в четырехгорлой колбе и добавляли 400 мл гексана. При перемешивании понижали значение рН до 5,5 путем добавления ледяной уксусной кислоты, и полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (3) от нижней водно-метанольной фазы (3).The two water-methanol phases (1) and (2) were combined in a four-necked flask and 400 ml of hexane was added. With stirring, the pH was lowered to 5.5 by adding glacial acetic acid, and the resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (3) from the lower water-methanol phase (3).
Гексановую фазу (2) переносили в четырехгорлую колбу и добавляли равный объем деминерализованной воды. При перемешивании понижали значение рН до 5,5 при перемешивании путем добавления ледяной уксусной кислоты, и полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (4) от нижней водной фазы (4).The hexane phase (2) was transferred to a four-necked flask and an equal volume of demineralized water was added. With stirring, the pH was lowered to 5.5 with stirring by adding glacial acetic acid, and the resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (4) from the lower aqueous phase (4).
Результаты (ВЭЖХ анализ)Results (HPLC analysis)
Декарбоксилирование CBDA, содержащегося в гексановой фазе (3)Decarboxylation of CBDA contained in the hexane phase (3)
Гексановую фазу (3) помещали в 500-миллилитровую 4-горлую колбу, оснащенную мешалкой и холодильником для сбора отгоняющегося гексана, и подвергали декарбоксилированию в глицериновой бане, нагретой до температуры 120°C, при перемешивании в течение примерно 7 часов. Упаренный до состояния масла раствор охлаждали до комнатной температуры, разбавляли добавлением 150 мл гексана и фильтровали через слой диатомита в вакууме.The hexane phase (3) was placed in a 500 ml 4-necked flask equipped with a stirrer and a condenser to collect the hexane that distilled off and subjected to decarboxylation in a glycerol bath heated to 120° C. with stirring for about 7 hours. The solution evaporated to an oily state was cooled to room temperature, diluted with 150 ml of hexane, and filtered through a bed of diatomaceous earth in vacuo.
Отфильтрованный раствор снова упаривали на роторном испарителе при температуре 45°C, получая 77,7 г масла (содержит 65,9 г CBD).The filtered solution was again evaporated on a rotary evaporator at a temperature of 45°C, obtaining 77.7 g of an oil (contains 65.9 g of CBD).
Кристаллизация CBDCBD Crystallization
Полученные 77,7 г масла переносили в 250-миллилитровую четырехгорлую колбу, оснащенную мешалкой, и добавляли 77 мл гексана. Полученную смесь перемешивали 3 часа в холодной комнате при 4°C. По прошествии указанного времени отфильтровывали кристаллическое твердое вещество (тоже в холодной комнате при 4°C) на стеклянном фильтре (G3) и промывали двумя порциями по 25 мл холодного гексана. Получали 46,5 г кристаллов, имеющих чистоту 98,9% по данным ВЭЖХ.The resulting 77.7 g of oil was transferred to a 250 ml four-necked flask equipped with a stirrer and 77 ml of hexane was added. The resulting mixture was stirred for 3 hours in a cold room at 4°C. After the indicated time, the crystalline solid was filtered off (also in a cold room at 4°C) on a glass filter (G3) and washed with two portions of 25 ml of cold hexane. 46.5 g of crystals were obtained, having a purity of 98.9% according to HPLC.
Выделение CBD из маточного раствора от кристаллизацииIsolation of CBD from mother liquor from crystallization
Маточные растворы, полученные на предшествующей стадии кристаллизации, упаривали на роторном испарителе при температуре 45°C, получая 31 г масла, которое переносили в 100-милилитровую четырехгорлую колбу (оснащенную мешалкой) в холодной комнате при 4°C. Добавляли в масло 15 мл гексана. Полученную смесь выдерживали при перемешивании 6 часов. По прошествии указанного времени отфильтровывали кристаллическое твердое вещество (тоже в холодной комнате при 4°C) на стеклянном фильтре (G3) и промывали тремя порциями по 5 мл холодного гексана. Получали 6,0 г кристаллов, имеющих чистоту 97,9% по данным ВЭЖХ.The mother liquors from the previous crystallization step were evaporated on a rotary evaporator at 45°C to give 31 g of an oil which was transferred to a 100 ml four neck flask (equipped with stirrer) in a cold room at 4°C. 15 ml of hexane was added to the oil. The resulting mixture was kept under stirring for 6 hours. After the indicated time, the crystalline solid was filtered off (also in a cold room at 4° C.) on a glass filter (G3) and washed with three 5 ml portions of cold hexane. 6.0 g of crystals were obtained, having a purity of 97.9% according to HPLC.
Пример 2. Выделение CBD и CBDA, присутствующих в первой гексановой фазе (процесс A), методом хроматографии (процесс B) (тест N° Q207F/594)Example 2 Isolation of CBD and CBDA Present in the First Hexane Phase (Process A) by Chromatography (Process B) (Test N° Q207F/594)
Удаление восковWax removal
87,7 г первой гексановой фазы, полученной по способу (A), содержащей 1,98 г CBD и 0,48 г CBDA, упаривали до получения масла на роторном испарителе в вакууме при температуре 50°C. Добавляли в масло 50 мл метанола, и полученную смесь охлаждали до -20°C на одну ночь.87.7 g of the first hexane phase obtained according to method (A), containing 1.98 g of CBD and 0.48 g of CBDA, was evaporated to an oil on a rotary evaporator in vacuum at a temperature of 50°C. Added to the
Суспензию фильтровали в вакууме на стеклянном фильтре (G3), и оставшиеся на фильтре воска промывали двумя порциями по 50 мл холодного метанола. Отфильтрованный продукт упаривали на роторном испарителе в вакууме при температуре 50°C, получая 8,1 г масла, содержащего 1,60 г CBD и 0,31 г CBDA.The suspension was vacuum filtered on a glass filter (G3) and the waxes remaining on the filter were washed with two 50 ml portions of cold methanol. The filtered product was evaporated on a rotary evaporator under vacuum at a temperature of 50°C, obtaining 8.1 g of an oil containing 1.60 g of CBD and 0.31 g of CBDA.
Хроматография на силикагеле:Chromatography on silica gel:
100 г силикагеля упаковывали в стеклянную колонку (диаметр 5 см, высота 20 см) и уравновешивали с применением 250 мл подвижной фазы (гексан-этилацетат 10:1).100 g of silica gel was packed into a glass column (diameter 5 cm, height 20 cm) and equilibrated using 250 ml of mobile phase (hexane-ethyl acetate 10:1).
8,1 г масла с предыдущей стадии загружали на колонку после разбавления примерно 8 миллилитрами подвижной фазы. Начинали элюирование под действием силы тяжести и собирали 12 фракций по 22 г каждая. Для фракций с 4-й по 12-ю (включительно) проводили ВЭЖХ анализ для подтверждения содержания CBD и относительной чистоты.8.1 g of the oil from the previous step was loaded onto the column after being diluted with about 8 ml of mobile phase. Gravity elution was started and 12 fractions of 22 g each were collected. For
Результатыresults
Объединяли фракции с 4-й по 9-ю включительно (фракции с высокой степенью чистоты) с общим содержанием CBD 1,41 г, и фракции с 10-й по 12-ю включительно (фракции со средней степенью чистоты), с общим содержанием CBD 0,138 г.
Пример 3. Получение CBD в лабораторном масштабе из конопли, имеющей соотношение CBDA/CBD около 90/10, путем экстракции и отделения кислотной формы (CBDA) (процесс A) (тест Q207E/515)Example 3 Laboratory Scale Production of CBD from Hemp Having a CBDA/CBD Ratio of About 90/10 by Extraction and Separation of the Acid Form (CBDA) (Process A) (Test Q207E/515)
Экстракция гексаном из биомассыExtraction with hexane from biomass
2 кг тонко измельченной конопли и 10 литров гексана (смесь изомеров) помещали в 15-литровую стеклянную колбу, оснащенную мешалкой. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 4 часа. После этого суспензию фильтровали через фильтровальную бумагу на воронке Бюхнера в вакууме, промывая биомассу на фильтре 6 литрами гексана. Отфильтрованный раствор упаривали на роторном испарителе в вакууме при температуре 30°C до объема 860 мл.2 kg of finely ground hemp and 10 liters of hexane (mixture of isomers) were placed in a 15 liter glass flask equipped with a stirrer. The resulting mixture was stirred at room temperature for 4 hours. After that, the suspension was filtered through filter paper on a Buchner funnel under vacuum, washing the biomass on the filter with 6 liters of hexane. The filtered solution was evaporated on a rotary evaporator in vacuum at a temperature of 30°C to a volume of 860 ml.
Отделение CBDA от CBDSeparation of CBDA from CBD
Отфильтрованный раствор, содержащий 21,23 г CBDA и 1,8 г CBD (значения определены методом ВЭЖХ анализа), помещали в трехлитровую четырехгорлую стеклянную колбу, оснащенную мешалкой, и добавляли 478 мл метанола и 360 мл деминерализованной воды.The filtered solution containing 21.23 g of CBDA and 1.8 g of CBD (values determined by HPLC analysis) was placed in a three-liter four-necked glass flask equipped with a stirrer, and 478 ml of methanol and 360 ml of demineralized water were added.
Значение pH повышали до 8,2 путем добавления при интенсивном перемешивании примерно 7 мл 30%-ного раствора NaOH.The pH was raised to 8.2 by adding approximately 7 ml of 30% NaOH solution with vigorous stirring.
Полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (1) от нижней водно-метанольной фазы (1).The resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (1) from the lower water-methanol phase (1).
Метально водную фазу (1) переносили обратно в четырехгорлую колбу и добавляли 740 мл гексана (смесь изомеров) при перемешивании. Значение pH доводили до 5,0 добавлением примерно 20 мл ледяной уксусной кислоты.The metallic aqueous phase (1) was transferred back to the four-necked flask and 740 ml of hexane (mixture of isomers) was added with stirring. The pH was adjusted to 5.0 by adding about 20 ml of glacial acetic acid.
Полученную смесь переносили в делительную воронку для отделения верхней гексановой фазы (2) от нижней водно-метанольной фазы (2).The resulting mixture was transferred to a separating funnel to separate the upper hexane phase (2) from the lower water-methanol phase (2).
Декарбоксилирование CBDA, содержащегося в гексановой фазе (2)Decarboxylation of CBDA contained in the hexane phase (2)
Гексановую фазу (2) помещали в 1-литровую четырехгорлую колбу, оснащенную мешалкой и холодильником для сбора отгоняющегося гексана, и подвергали декарбоксилированию в глицериновой бане, нагретой до температуры 120°C, при перемешивании в течение примерно 4 часов. The hexane phase (2) was placed in a 1 liter four-necked flask equipped with a stirrer and a condenser to collect the hexane that distilled off and subjected to decarboxylation in a glycerol bath heated to 120° C. with stirring for about 4 hours.
Кристаллизация CBDCBD Crystallization
Раствор, содержащий CBD, упаривали на роторном испарителе в вакууме при температуре 50°C, получая 24,3 г масла, которое разбавляли добавлением 14,5 мл гексана (смесь изомеров) в холодной комнате при 4°C. По прошествии указанного времени суспензию фильтровали на стеклянном фильтре G3, и кристаллическое твердое вещество промывали двумя порциями по 6 мл холодного гексана. Получали 10,1 г влажных кристаллов CBD, имеющих чистоту 99,6%, и 42,2 г маточного раствора, содержащего 3,88 г CBD.The solution containing CBD was evaporated on a rotary evaporator under vacuum at a temperature of 50°C, obtaining 24.3 g of an oil, which was diluted with the addition of 14.5 ml of hexane (mixture of isomers) in a cold room at 4°C. After the indicated time, the suspension was filtered on a G3 glass filter and the crystalline solid was washed with two 6 ml portions of cold hexane. 10.1 g of wet CBD crystals were obtained, having a purity of 99.6%, and 42.2 g of a mother liquor containing 3.88 g of CBD.
Пример 4. Получение пилотной партии CBD из конопли, имеющей соотношение CBDA/CBD около 90/10, путем экстракции и отделения его кислотной формы (CBDA) (процесс A) (продукт P56/38/047)Example 4 Production of a pilot batch of CBD from hemp having a CBDA/CBD ratio of about 90/10 by extracting and separating its acidic form (CBDA) (Process A) (Product P56/38/047)
Экстракция гексаном из биомассыExtraction with hexane from biomass
150 кг тонко измельченной конопли и 700 литров гексана (смесь изомеров) помещали в стальной сушильный фильтр, оснащенный мешалкой. Эту смесь перемешивали 1 час при комнатной температуре. После этого перемешивание останавливали, и суспензию фильтровали под давлением азота. Отфильтрованный продукт, содержащий CBDA, собирали в емкость. Биомассу, оставшуюся на фильтре, промывали двумя порциями по 450 литров гексана, перемешивая при комнатной температуре в течение 1 часа и удаляя фильтрат каждый раз в накопительную емкость давлением азота.150 kg of finely ground hemp and 700 liters of hexane (mixture of isomers) were placed in a steel drying filter equipped with a stirrer. This mixture was stirred for 1 hour at room temperature. Thereafter, stirring was stopped and the suspension was filtered under nitrogen pressure. The filtered product containing CBDA was collected in a container. The biomass remaining on the filter was washed with two portions of 450 liters of hexane, stirring at room temperature for 1 hour and removing the filtrate each time in a holding tank under nitrogen pressure.
Отработанную биомассу удаляли из сушильного фильтра, в который загружали еще 150 кг конопли для второй экстракции.The spent biomass was removed from the drying filter, which was loaded with another 150 kg of hemp for the second extraction.
Предварительное концентрирование:Preconcentration:
Отфильтрованные растворы, полученные от двух экстракций по 150 кг конопли в каждой порции, объединяли в стальном реакторе, оснащенном рубашкой с регулируемой температурой, системой перемешивания и холодильником, и упаривали в вакууме при температуре 30°C до объема примерно 180 литров.The filtered solutions obtained from two extractions of 150 kg each of hemp were combined in a steel reactor equipped with a temperature controlled jacket, agitation system and a condenser and evaporated in vacuo at 30°C to a volume of about 180 liters.
Отделение CBDA от CBDSeparation of CBDA from CBD
180 литров предварительно сконцентрированного раствора загружали в 250-литровый стальной реактор, оснащенный рубашкой с регулируемой температурой, мешалкой и холодильником, и упаривали в вакууме при температуре между 16 и 20°C до финального объема около 130 литров. Загружали в реактор 54 литра питьевой воды и 57 литров метанола. Значение рН доводили до 8,2 при перемешивании, посредством добавления 30%-ного раствора гидроксида натрия. Выдерживали систему в покое 60 минут. Отдельно выгружали фазы, водно-спиртовую фазу снова загружали в реактор и добавляли 76,6 кг гексана (смесь изомеров). Значение pH при перемешивании доводили до 5,0 добавлением 3,75 литра ледяной уксусной кислоты, и смесь выдерживали в покое 1 час.180 liters of the preconcentrated solution was charged into a 250 liter steel reactor equipped with a temperature controlled jacket, stirrer and condenser and evaporated under vacuum at a temperature between 16 and 20° C. to a final volume of about 130 litres. Loaded into the reactor 54 liters of drinking water and 57 liters of methanol. The pH value was adjusted to 8.2 with stirring, by adding 30% sodium hydroxide solution. The system was kept at rest for 60 minutes. Separately, the phases were discharged, the water-alcohol phase was again loaded into the reactor and 76.6 kg of hexane (mixture of isomers) was added. The pH was adjusted to 5.0 with stirring by adding 3.75 liters of glacial acetic acid, and the mixture was kept still for 1 hour.
Нижнюю водно-спиртовую фазу (115 кг) переносили в танк для утилизации, а верхнюю гексановую фазу упаривали в вакууме при температуре около 50°C до финального веса около 27 кг, затем ее использовали в следующей стадии декарбоксилирования.The lower hydroalcoholic phase (115 kg) was transferred to a disposal tank and the upper hexane phase was evaporated in vacuo at about 50° C. to a final weight of about 27 kg, then it was used in the next decarboxylation step.
Декарбоксилирование CBDA, содержащегося в гексановой фазе (2)Decarboxylation of CBDA contained in the hexane phase (2)
4 гексановые фазы с предыдущих стадий, содержащие 14,48 кг CBDA (по данным ВЭЖХ анализа) объединяли в 250-литровом стальном реакторе, оснащенном рубашкой с регулируемой температурой и мешалкой, и упаривали при температуре 50°C до получения масла. Температуру доводили примерно до 120°C при перемешивании в течении 4 часов. После этого добавляли в реактор 13,6 кг гексана (смесь изомеров), и 30,3 кг раствора использовали в последующей стадии кристаллизации.The 4 hexane phases from the previous steps containing 14.48 kg of CBDA (as determined by HPLC analysis) were combined in a 250 liter steel reactor equipped with a temperature controlled jacket and stirrer and evaporated at 50° C. to an oil. The temperature was brought to about 120°C with stirring for 4 hours. Thereafter, 13.6 kg of hexane (mixture of isomers) was added to the reactor and 30.3 kg of the solution was used in the subsequent crystallization step.
1-я кристаллизация CBD1st CBD crystallization
30,3 кг раствора CBD с предыдущей стадии фильтровали через бумагу в вакууме на воронке Бюхнера и загружали в 25-литровый стеклянный реактор, оснащенный мешалкой. Раствор упаривали до получения масла в вакууме при температуре 50°C и, после охлаждения до 35°C, добавляли 6 кг гексана (н-гексана). Раствор охлаждали до 20°C и инициировали кристаллизацию добавлением 20 г кристаллического CBD.30.3 kg of the CBD solution from the previous step was filtered through paper under vacuum on a Buchner funnel and loaded into a 25 liter glass reactor equipped with a stirrer. The solution was evaporated to an oil in vacuo at 50° C. and, after cooling to 35° C., 6 kg of hexane (n-hexane) was added. The solution was cooled to 20°C and initiated crystallization by adding 20 g of crystalline CBD.
Через 30 минут температуру доводили до 4°C и перемешивали в течение 12 часов.After 30 minutes the temperature was brought to 4°C and stirred for 12 hours.
Суспензию фильтровали через бумажный фильтр в вакууме на воронке Бюхнера, и полученные кристаллы промывали 6 литрами холодного гексана (н-гексан). Получали 8,16 кг влажного кристаллического CBD с LOD = 0,33% и чистотой 98,6%, и 12,65 кг маточных растворов, содержащих 2,96 кг CBD.The suspension was filtered through a paper filter under vacuum on a Buchner funnel and the resulting crystals were washed with 6 liters of cold hexane (n-hexane). Received 8.16 kg of wet crystalline CBD with LOD = 0.33% and purity of 98.6%, and 12.65 kg of stock solutions containing 2.96 kg of CBD.
2-я кристаллизация CBD2nd CBD crystallization
8,16 кг кристаллического CBD с предыдущей стадии загружали в 25-литровый стеклянный реактор, оснащенный мешалкой, добавляли 8,48 кг гексана (н-гексана) при 35°C при перемешивании до полной солюбилизации. Температуру доводили до 4°C постепенным снижением и выдерживали при этой температуре 12 часов.8.16 kg of crystalline CBD from the previous step was charged into a 25 liter glass reactor equipped with a stirrer, 8.48 kg of hexane (n-hexane) was added at 35°C with stirring until complete solubilization. The temperature was brought to 4°C by gradual decrease and maintained at this temperature for 12 hours.
Суспензию фильтровали на бумажном фильтре в вакууме на воронке Бюхнера, и кристаллы на фильтре промывали 6,7 литрами холодного гексана (н-гексана). Получали 6,94 кг влажных кристаллов с чистотой 99,4%, и 11,9 кг маточного раствора, содержащего 625 г CBD.The suspension was filtered on a paper filter under vacuum on a Buchner funnel and the filter crystals were washed with 6.7 liters of cold hexane (n-hexane). Received 6.94 kg of wet crystals with a purity of 99.4%, and 11.9 kg of a mother liquor containing 625 g of CBD.
Пример 5. Получение CBD методом хроматографии на силикагеле в промышленном масштабе (процесс B)Example 5 Industrial Scale Production of CBD by Silica Gel Chromatography (Process B)
Экстракция CBD метанолом из биомассы (см. FDL # 2728PF_01_01)Extraction of CBD with methanol from biomass (see FDL # 2728PF_01_01)
В 6000-литровый стальной реактор, оснащенный рубашкой для регулировки температуры и мешалкой, помещали 3500 кг метанола и, при перемешивании, 1000 кг тонко измельченной биомассы. Температуру доводили до 63-67°C при кипячении. Смесь перемешивали до момента, когда процентное содержание CBDA было ≤ 7% относительно CBD (примерно 60 часов). После понижения внутренней температуры реактора до 15–25°C, суспензию фильтровали центрифугированием через парусину при 450-500 об/мин в течение 20-25 минут, промывая биомассу 3 раза по 20 кг метанола, в течение 25-30 минут. Для удаления восковых компонентов, отфильтрованный раствор снова загружали в реактор и упаривали в вакууме при температуре 50°C, до получения подвижного маслянистого остатка, в который добавляли 300 литров метанола. Температуру реактора доводили до 63-67°C, осуществляя отгонку в вакууме при кипячении в течение 30 минут. После этого температуру понижали до -5 – -10°C и медленно перемешивали суспензию примерно 12 часов, по окончании которых температуру повышали до 5-10°C. Добавляли 22 кг диатомита при перемешивании, и суспензию фильтровали посредством центрифугирования через парусину при 450-500 об/мин в течение 60 минут, осуществляя 3 промывки примерно по 40 кг холодного метанола (5-10°C) каждая в течение 35-40 минут.In a 6000 liter steel reactor equipped with a temperature control jacket and a stirrer, 3500 kg of methanol and, with stirring, 1000 kg of finely divided biomass were placed. The temperature was brought to 63-67°C by boiling. The mixture was stirred until the percentage of CBDA was ≤ 7% relative to CBD (approximately 60 hours). After lowering the internal temperature of the reactor to 15–25°C, the suspension was filtered by centrifugation through canvas at 450–500 rpm for 20–25 minutes, washing the biomass 3 times with 20 kg of methanol for 25–30 minutes. To remove the waxy components, the filtered solution was reloaded into the reactor and evaporated in vacuo at 50°C until a mobile oily residue was obtained, to which 300 liters of methanol were added. The temperature of the reactor was brought to 63-67°C, carrying out the distillation in vacuum at boiling for 30 minutes. After that, the temperature was lowered to -5 - -10°C and the suspension was slowly stirred for about 12 hours, after which the temperature was raised to 5-10°C. 22 kg of diatomaceous earth was added with stirring, and the suspension was filtered by centrifugation through canvas at 450-500 rpm for 60 minutes, performing 3 washes of about 40 kg of cold methanol (5-10°C) each for 35-40 minutes.
Удаление смол (см. FDL # 2728PF_02_01)Resin removal (see FDL # 2728PF_02_01)
Отфильтрованный раствор снова загружали в реактор и упаривали в вакууме при температуре 50°C, до получения подвижного маслянистого остатка, в который добавляли 400 литров метанола. Температуру реактора доводили до 63-67°C, осуществляя отгонку в вакууме при кипячении в течение 30 минут. После этого температуру понижали до 15-25°C и загружали в реактор 150 кг гексана и 150 литров деминерализованной воды. Смесь выдерживали при перемешивании при температуре 15-25°C в течение 30 минут и затем в покое еще 30 минут, давая разделиться нижней водно-метанольной фазе (1) и верхней гексановой фазе (1). Водно-метанольную фазу (1) переносили во второй реактор, в который загружали также 75 кг гексана. Смесь выдерживали при перемешивании при температуре 15-25°C в течение 30 минут и затем в покое еще 30 минут, давая разделиться нижней водно-метанольной фазе (2) и верхней гексановой фазе (2). Водно-метанольную фазу (2) удаляли из реактора и загружали в реактор гексановую фазу (1). Объединенные таким образом две гексановые фазы упаривали в вакууме при температуре 50°C, получая 43 кг сконцентрированного раствора. Образец сконцентрированного продукта отбирали для определения содержания CBD.The filtered solution was again loaded into the reactor and evaporated in vacuum at a temperature of 50°C, until a mobile oily residue was obtained, to which 400 liters of methanol were added. The temperature of the reactor was brought to 63-67°C, carrying out the distillation in vacuum at boiling for 30 minutes. After that, the temperature was lowered to 15-25°C and loaded into the
Результатыresults
Сухой вес = 43,9 кгDry weight = 43.9 kg
Общее содержание CBD = 16,0 кгTotal CBD content = 16.0 kg
Соотношение CBD/сухой вес x 100 = 36,4%CBD/dry weight ratio x 100 = 36.4%
Хроматография на силикагеле (см. FLD # 2728PF_03A_01)Chromatography on silica gel (see FLD # 2728PF_03A_01)
В стальную колонку (диаметр 80 см, высота 200 см) упаковывали 400 кг силикагеля и уравновешивали 1000 литрами подвижной фазы (гексан-этилацетат 10:1) при скорости потока 250-300 литров/час.400 kg of silica gel was packed into a steel column (diameter 80 cm,
43,9 кг освобожденного от смол экстракта разбавляли гексаном (смесь изомеров) до общего веса 54 кг и загружали на колонку. Элюировали подвижной фазой (гексан-этилацетат 10:1) при скорости потока 250-300 литров/час. Собирали 11 фракций по 100 кг каждая и анализировали их методом ВЭЖХ для подтверждения содержания CBD и определения относительной чистоты.43.9 kg of the deresined extract was diluted with hexane (mixture of isomers) to a total weight of 54 kg and loaded onto the column. Elute with mobile phase (hexane-ethyl acetate 10:1) at a flow rate of 250-300 liters/hour. Collected 11 fractions of 100 kg each and analyzed them by HPLC to confirm the content of CBD and determine the relative purity.
Результатыresults
(% площади)Purity CBD
(% area)
Фракции, имеющие по данным ВЭЖХ чистоту от 86,6% до 91,7% (фракции с высокой степенью чистоты), объединяли для последующей кристаллизации. Фракции с чистотой от 81,1% до 84,7% объединяли (фракции со средней степенью чистоты) и очищали на колонке после объединения с другими фракциями, имеющими среднюю степень чистоты, от других хроматографических очисток.Fractions having HPLC purity between 86.6% and 91.7% (high purity fractions) were pooled for subsequent crystallization. Fractions with a purity of 81.1% to 84.7% were pooled (middle purity fractions) and purified on a column after being combined with other fractions having an average purity from other chromatographic purifications.
1-я кристаллизация CBD (см. FDL # 2728PF_01_02)1st CBD crystallization (see FDL # 2728PF_01_02)
69,5 кг объединенных фракций с высокой степенью чистоты от двух очисток на силикагеле, содержащие 25,27 кг CBD, собирали, фильтровали под вакуумом через парусину, загружали в 250-литровый стальной реактор, имеющий рубашку с регулируемой температурой и мешалку, и упаривали до получения масла в вакууме при температуре 45°C. В конце упаривания температуру повышали до 70°C при продолжающемся перемешивании на 3 часа. Затем понижали температуру до 30°C и добавляли 18 литров гексана (смесь изомеров). Температуру понижали до 15-21°C и инициировали кристаллизацию добавлением 20 г кристаллов CBD. Температуру далее понижали до 4°C, и смесь выдерживали при перемешивании 12 часов. Суспензию выгружали из реактора и отделяли «сырой» кристаллический CBD вакуумным фильтрованием через парусину, проводя три цикла промывки кристаллов холодным гексаном общим количеством 12,6 литров. Получали 20 кг влажного кристаллического CBD (имеющего чистоту по ВЭЖХ, равную 99,22%) с потерей при сушке 7,9%, что эквивалентно 18,4 кг высушенного продукта, и 32 кг маточного раствора от кристаллизации.69.5 kg of combined high purity fractions from two silica gel purifications containing 25.27 kg of CBD were collected, vacuum filtered through canvas, loaded into a 250 liter steel reactor equipped with a temperature controlled jacket and stirrer, and evaporated to obtaining oil in vacuum at a temperature of 45°C. At the end of evaporation, the temperature was raised to 70°C with continued stirring for 3 hours. The temperature was then lowered to 30° C. and 18 liters of hexane (mixture of isomers) were added. The temperature was lowered to 15-21°C and crystallization was initiated by adding 20 g of CBD crystals. The temperature was further lowered to 4°C, and the mixture was kept under stirring for 12 hours. The slurry was discharged from the reactor and the "crude" crystalline CBD was separated by vacuum filtration through canvas, performing three cycles of washing the crystals with cold hexane for a total of 12.6 liters. 20 kg of wet crystalline CBD (having a HPLC purity of 99.22%) was obtained with a loss on drying of 7.9%, equivalent to 18.4 kg of dried product, and 32 kg of mother liquor from crystallization.
Выделение CBD из маточного раствора от кристаллизации (см. FDL # 2728PF_01_02)Isolation of CBD from mother liquor from crystallization (see FDL # 2728PF_01_02)
23 кг маточного раствора от кристаллизации упаривали в стеклянном 25-литровом реакторе, снабженном рубашкой для регулировки температуры и вакуумной мешалкой, при температуре 50°C до объема 19 литров. Добавляли 5 литров гексана (смесь изомеров) и, после охлаждения до температуры 4°C, инициировали кристаллизацию добавлением 7 г кристаллического CBD, перемешивая при 4°C в течение ночи. Суспензию фильтровали в вакууме через фильтровальную бумагу и промывали полученные кристаллы 2 литрами холодного гексана (смесь изомеров).23 kg of the mother liquor from crystallization was evaporated in a 25 liter glass reactor equipped with a temperature control jacket and a vacuum stirrer at 50° C. to a volume of 19 litres. Added 5 liters of hexane (mixture of isomers) and, after cooling to a temperature of 4°C, initiated the crystallization by adding 7 g of crystalline CBD, stirring at 4°C overnight. The suspension was vacuum filtered through filter paper and the resulting crystals were washed with 2 liters of cold hexane (mixture of isomers).
Получали 3,2 кг влажных кристаллов (имеющих чистоту по ВЭЖХ, равную 95,94%). 3.2 kg of wet crystals (having a HPLC purity of 95.94%) were obtained.
Пример 6. Кристаллизация CBD в метилциклогексане (тест Q207F/576B)Example 6 Crystallization of CBD in Methylcyclohexane (Test Q207F/576B)
25 г кристаллического CBD, полученного согласно процессу A по примеру 4, растворяли при комнатной температуре при перемешивании в 250 мл гексана (смесь изомеров) в 500-миллилитровой стеклянной колбе, оснащенной магнитной мешалкой, и оставляли стоять на ночь. Раствор фильтровали дважды в вакууме через стеклянный пористый фильтр с пористостью 0,8 мкм и упаривали до получения масла на роторном испарителе при температуре 50°C.25 g of crystalline CBD, obtained according to the process A of example 4, was dissolved at room temperature with stirring in 250 ml of hexane (mixture of isomers) in a 500 ml glass flask equipped with a magnetic stirrer and left to stand overnight. The solution was filtered twice under vacuum through a glass porous filter with a porosity of 0.8 μm and evaporated to an oil on a rotary evaporator at a temperature of 50°C.
Добавляли в масло 50 мл метилциклогексана, и смесь выдерживали при температуре 4°C при перемешивании в течение ночи.Added to the
Суспензию фильтровали в вакууме через пористый стеклянный фильтр (G3), и полученные кристаллы промывали 20 миллилитрами холодного метилциклогексана.The suspension was vacuum filtered through a porous glass filter (G3) and the resulting crystals were washed with 20 ml of cold methylcyclohexane.
Было получено 16,9 г влажных кристаллов, имеющих чистоту по ВЭЖХ 99,05%, и 24 грамма маточного раствора.16.9 g of wet crystals were obtained having an HPLC purity of 99.05% and 24 g of a mother liquor.
Пример 7. Кристаллизация CBD в гептане (тест Q207F/584)Example 7 Crystallization of CBD in Heptane (Test Q207F/584)
22,1 г кристаллического CBD, полученного согласно процессу A по примеру 4, растворяли при перемешивании при температуре 38°C в 45 мл гептана в 100-миллилитровой стеклянной колбе, оснащенной магнитной мешалкой. Раствор охлаждали до 4°C и инициировали кристаллизацию добавлением кристаллического CBD на кончике шпателя, перемешивая смесь на магнитной мешалке в течение одной ночи.22.1 g of crystalline CBD, obtained according to the process A of example 4, was dissolved with stirring at a temperature of 38°C in 45 ml of heptane in a 100 ml glass flask equipped with a magnetic stirrer. The solution was cooled to 4°C and crystallization was initiated by adding crystalline CBD at the tip of a spatula while stirring the mixture on a magnetic stirrer for one night.
Суспензию фильтровали в вакууме через пористый стеклянный фильтр (G3), и полученные кристаллы промывали двумя порциями по 10 миллилитров холодного гептана.The suspension was vacuum filtered through a sintered glass filter (G3) and the resulting crystals were washed with two 10 ml portions of cold heptane.
Было получено 20,1 г влажных кристаллов, имеющих чистоту по ВЭЖХ, равную 99,2%, и 36,4 г маточного раствора.20.1 g of wet crystals were obtained having an HPLC purity of 99.2% and 36.4 g of a mother liquor.
Claims (22)
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT102017000085508 | 2017-07-26 | ||
| IT102017000085508A IT201700085508A1 (en) | 2017-07-26 | 2017-07-26 | METHOD FOR THE PRODUCTION OF CANNABINOIDS FROM VARIETY OF INDUSTRIAL HEMP |
| PCT/EP2018/070275 WO2019020738A1 (en) | 2017-07-26 | 2018-07-26 | Method for the production of cannabinoids from types of industrial hemp |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020108066A RU2020108066A (en) | 2021-08-26 |
| RU2020108066A3 RU2020108066A3 (en) | 2021-10-22 |
| RU2796921C2 true RU2796921C2 (en) | 2023-05-29 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016153347A1 (en) * | 2015-03-23 | 2016-09-29 | Echo Pharmaceuticals B.V. | Cannabidiol isolate from industrial-hemp and use thereof in pharmaceutical and/or cosmetic preparations |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016153347A1 (en) * | 2015-03-23 | 2016-09-29 | Echo Pharmaceuticals B.V. | Cannabidiol isolate from industrial-hemp and use thereof in pharmaceutical and/or cosmetic preparations |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018308925B2 (en) | Method for the production of cannabinoids from types of industrial hemp | |
| JP2648450B2 (en) | Method for recovering tocopherols and sterols | |
| Wang et al. | Determination of phenolic acids and flavonoids in raw propolis by silica-supported ionic liquid-based matrix solid phase dispersion extraction high performance liquid chromatography-diode array detection | |
| US20110046213A1 (en) | Production of Delta 9 Tetrahydrocannabinol | |
| JPH029590B2 (en) | ||
| AU2021281245A1 (en) | Purification and extraction of cannabinoids | |
| KR101393359B1 (en) | Grape seeds extracts obtainable by fractioning on a resin | |
| AU2004245874B2 (en) | Method for processing vegetable raw materials | |
| JP2021505210A (en) | Process for separation of gallate epicatechins (EGCG and ECG) from green tea extract or green tea grounds | |
| RU2796921C2 (en) | Method for obtaining cannabinoids from technical hemp varieties | |
| EP4244201B1 (en) | Production of cannabidiol from hemp using subcritical liquid carbon dioxide | |
| CN111072618A (en) | A kind of convenient and rapid method for purifying dihydromyricetin from grape leaves | |
| Outtrup et al. | Isolation of dihydromyricetin and dihydroquercetin from bark of Pinus contorta | |
| US20230373943A1 (en) | Extraction of cannabinoids from wet biomass | |
| TW201710232A (en) | Method for preparing, separating and purifying active ingredient artepillin C in propolis isolating the artepillin C component and the flavonoid component by separating the supercritical carbon dioxide fluid from the artepillin C and the flavonoid component in the propolis | |
| RU2046825C1 (en) | Method of oil producing from the plant raw | |
| US20230382884A1 (en) | Methods for separation and isolation of tetrahydrocannabivarin | |
| BR112020001704B1 (en) | METHOD FOR PRODUCTION OF CANNABINOIDS FROM INDUSTRIAL HEMP TYPES | |
| EP4431169A1 (en) | Method of purifying cannabinoid components from plant extracts | |
| JP2025534801A (en) | Method for preparing THC-free industrial cannabinoid oil | |
| WO2024036346A1 (en) | A method of extracting cannabinoids from plant waxes | |
| JPH11158196A (en) | Extraction of tall oil alcohol component contained in tall oil skimming | |
| JPH06212154A (en) | Production of oxidation-resistant substance |