RU2794841C1 - Средство для лечения атопического дерматита - Google Patents
Средство для лечения атопического дерматита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2794841C1 RU2794841C1 RU2022106612A RU2022106612A RU2794841C1 RU 2794841 C1 RU2794841 C1 RU 2794841C1 RU 2022106612 A RU2022106612 A RU 2022106612A RU 2022106612 A RU2022106612 A RU 2022106612A RU 2794841 C1 RU2794841 C1 RU 2794841C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- skin
- histochrome
- atopic dermatitis
- mice
- treatment
- Prior art date
Links
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 title claims abstract description 40
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 title claims abstract description 40
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 abstract description 32
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 abstract description 12
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 abstract description 11
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 abstract description 11
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 abstract description 11
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 abstract description 10
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 abstract description 10
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 abstract description 9
- 230000036571 hydration Effects 0.000 abstract description 9
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 abstract description 7
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 abstract description 6
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 abstract description 5
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 abstract description 5
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 abstract description 5
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 abstract description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 4
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 abstract description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000009285 allergic inflammation Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 abstract description 2
- 230000031990 negative regulation of inflammatory response Effects 0.000 abstract 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 22
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000036572 transepidermal water loss Effects 0.000 description 11
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 3
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 3
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNRFNICCPHGYAX-UHFFFAOYSA-N 6-ethyl-2,3,5,7,8-pentahydroxynaphthalene-1,4-dione Chemical compound O=C1C(O)=C(O)C(=O)C2=C(O)C(CC)=C(O)C(O)=C21 DNRFNICCPHGYAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000037365 barrier function of the epidermis Effects 0.000 description 2
- 229940046731 calcineurin inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- NCFUWNUATANZPH-UHFFFAOYSA-N echinochrome A Natural products OC1=C(O)C(O)=C2C(=O)C(CC)=C(O)C(=O)C2=C1O NCFUWNUATANZPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- CILYIEBUXJIHCO-UHFFFAOYSA-N 102778-91-6 Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OC1C(O)C(OC2C(C(O)C(O)OC2CO)O)OC(CO)C1O CILYIEBUXJIHCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DVGKRPYUFRZAQW-UHFFFAOYSA-N 3 prime Natural products CC(=O)NC1OC(CC(O)C1C(O)C(O)CO)(OC2C(O)C(CO)OC(OC3C(O)C(O)C(O)OC3CO)C2O)C(=O)O DVGKRPYUFRZAQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000257465 Echinoidea Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 208000016988 Hemorrhagic Stroke Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- MZSGWZGPESCJAN-MOBFUUNNSA-N Melitric acid A Natural products O([C@@H](C(=O)O)Cc1cc(O)c(O)cc1)C(=O)/C=C/c1cc(O)c(O/C(/C(=O)O)=C/c2cc(O)c(O)cc2)cc1 MZSGWZGPESCJAN-MOBFUUNNSA-N 0.000 description 1
- CILYIEBUXJIHCO-UITFWXMXSA-N N-acetyl-alpha-neuraminyl-(2->3)-beta-D-galactosyl-(1->4)-beta-D-glucose Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@@]1(C(O)=O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)O)O[C@H](CO)[C@@H]1O CILYIEBUXJIHCO-UITFWXMXSA-N 0.000 description 1
- OIZGSVFYNBZVIK-UHFFFAOYSA-N N-acetylneuraminosyl-D-lactose Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1O OIZGSVFYNBZVIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 241000238711 Pyroglyphidae Species 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 208000004006 Tick-borne encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000010216 atopic IgE responsiveness Diseases 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- SBHXYTNGIZCORC-ZDUSSCGKSA-N eriodictyol Chemical compound C1([C@@H]2CC(=O)C3=C(O)C=C(C=C3O2)O)=CC=C(O)C(O)=C1 SBHXYTNGIZCORC-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- TUJPOVKMHCLXEL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol Natural products C1C(=O)C2=CC(O)=CC(O)=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 TUJPOVKMHCLXEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011797 eriodictyol Nutrition 0.000 description 1
- SBHXYTNGIZCORC-UHFFFAOYSA-N eriodyctiol Natural products O1C2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)CC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 SBHXYTNGIZCORC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229940046533 house dust mites Drugs 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 208000020658 intracerebral hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- KASDHRXLYQOAKZ-ZPSXYTITSA-N pimecrolimus Chemical compound C/C([C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@]2(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)[C@@H](OC)C[C@@H](C)C/C(C)=C/[C@H](C(C[C@H](O)[C@H]1C)=O)CC)=C\[C@@H]1CC[C@@H](Cl)[C@H](OC)C1 KASDHRXLYQOAKZ-ZPSXYTITSA-N 0.000 description 1
- 229960005330 pimecrolimus Drugs 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 108060006613 prolamin Proteins 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 239000012132 radioimmunoprecipitation assay buffer Substances 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно дерматологии, и может быть использовано для лечения атопического дерматита. Гистохром применяют в качестве средства для лечения атопического дерматита, где гистохром наносят топически или вводят внутрибрюшинно. Использование изобретения позволяет устранить эпидермальные кожные поражения, снизить трансдермальную потерю воды и улучшить гидратацию рогового слоя, тем самым облегчая клинические симптомы атопического дерматита, такие как отек, эритема и сухость кожи за счет снижения экспрессии провоспалительных цитокинов интерферона-γ (ИНФ-γ), интерлейкина-4 (ИЛ-4) и интерлейкина-13 (ИЛ-13), играющих основную роль в поддержании аллергического воспаления в коже, и ингибирования индуцированной воспалительным ответом инфильтрации тучных клеток в пораженной коже под действием гистохрома. 7 ил., 1 табл., 6 пр.
Description
Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и касается применения гистохрома для профилактики и/или лечения атопического дерматита.
Атопический дерматит (АД) - это кожное заболевание, характеризующееся хроническим воспалением кожи, которое приводит к зуду, эритемам, нарушению функции кожного барьера, повышенной трансэпидермальной потере воды и иммунно-окислительно-восстановительным нарушениям [Cork M.J. et al. J. Investig. Dermatol. 2009, 129, 1892-1908; Leung, D.Y.M. Atopic dermatitis: More than a rash. Ann. Allergy Asthma Immunol. 2018, 120, 555-556; Souto E.B. et al. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 5659.]. АД выявляется во всех странах мира, у представителей обоего пола и разных возрастных категорий. Показатели распространенности АД за последние два десятилетия выросли более чем в 2 раза. По данным различных авторов атопический дерматит занимает от 20 до 40% в структуре кожных заболеваний. Показатели заболеваемости АД среди детей в мире колеблются до 10-20%, среди взрослых лиц - до 3%.
Патогенез атопического дерматита остается неясным, но, предполагают, что он связан как с генетическими факторами, такими как дисфункции иммунной системы, при которой Т-хелперные клетки 2 типа секретируют чрезмерное количество интерлейкина-4 (ИЛ-4) и интерлейкина-13 (ИЛ-13), интерферона-гамма (ИФН-γ), так и с факторами окружающей среды, например, клещи домашней пыли [Yoon, H.J.; et al. Protective effect of diet supplemented with rice prolamin extract against DNCB-induced atopic dermatitis in BALB/c mice. BMC Complement. Altern. Med. 2015, 15, 353.]. Кроме того, поражения АД обычно характеризуются чрезмерной инфильтрацией гранулированных тучных клеток, которые активируются антиген-специфическим иммуноглобулином Е (IgE), и которые имеют решающее значение для развития воспалительных заболеваний кожи [Ku J. М. et al. The prevention of 2,4-dinitrochlorobenzene-induced inflammation in atopic dermatitis-like skin lesions in BALB/c mice by Jawoongo. BMC Complement. Altern. Med. 2018, 18, 215], и способствуют реакциям гиперчувствительности кожи, высвобождая гистамин [Klubal R. et al. The high-affinity receptor for IgE is the predominant IgE-binding structure in lesional skin of atopic dermatitis patients. J. Investig. Dermatol. 1997, 108, 336-342., Galli S.J., Tsai M. IgE and mast cells in allergic disease. Nat. Med. 2012, 18, 693-704.; Park S.J. et al. Effect of eriodictyol on the development of atopic dermatitis-like lesions in ICR mice. Biol. Pharm. Bull. 2013, 36, 1375-1379.].
Обычно терапевтические стратегии АД включают топическое (местное) использование кортикостероидов, ингибиторов кальциневрина и ингибиторов Т-клеток [Carr W.W. Topical calcineurin inhibitors for atopic dermatitis: Review and treatment recommendations. Paediatr. Drugs 2013, 15, 303-310.; Papp, K.A.;Werfel, Т.; Folster-Holst R. et al. Long-term control of atopic dermatitis with pimecrolimus cream 1% in infants and young children: A two-year study. J. Am. Acad. Dermatol. 2005, 52, 240-246.; Kang L.J. et al. 3'-Sialyllactose prebiotics prevents skin inflammation via regulatory T cell differentiation in atopic dermatitis mouse models. Sci. Rep.2020, 10, 5603.]. Однако известно, что длительное лечение этими препаратами вызывает побочные эффекты, такие как иммуносупрессия и дисфункция эпидермального барьера. Использование системных (инъекционных) кортикостероидов показано только при тяжелых случаях болезни, но время их использования ограничено из-за возможных побочных эффектов, так как кортикостероиды могут индуцировать лизис Т-клеток и блокировать транскрипцию генов противовоспалительных цитокинов IL-1, IL-6, TNFα.
Задача изобретения - расширение арсенала эффективных средств для профилактики и лечения атопического дерматита.
Задача решена применением гистохрома в качестве средства для профилактики и/или лечения атопического дерматита. При этом гистохром применяют топически и/или парентерально.
Технический результат состоит в реализации указанного назначения.
Препарат Гистохром® представляет собой лекарственную форму индивидуального вещества - природного хиноидного пигмента морских ежей эхинохрома А (2,3,5,6,8-пентагидрокси-7-этил-1,4-нафтохинон, номер государственной регистрации Р N002362/01-2003). В лекарственной форме раствор для внутривенного введения 10 мг/мл Гистохром® применяется в кардиологии при остром инфаркте миокарда (номер государственной регистрации Р N002363/01-2003) [RU 2137472 С1, 23.04.1999] и Гистохром® в лекарственной форме раствор для инъекций 0,2 мг/мл применяется в качестве средства для лечения глазных заболеваний (номер государственной регистрации Р N002363/02-2003) [RU 2134107 С1, 10.08.1999].
Известно применение гистохрома для лечения геморрагического инсульта [RU 2266737 С1, 27.12.2005], а также применение в качестве средства для лечения ишемии сосудов головного мозга при острых нарушениях мозгового кровообращения [RU 2625740 С1, 18.07.2017].
Известно применение гистохрома в качестве диуретического средства [RU 2408367 С1, 10.01.2011], в качестве противовирусного средства в отношении клещевого энцефалита и герпеса простого I типа [RU 2697887 С1, 21.08.2019], в качестве нейропротекторного средства [RU 2765956 С1, 07.02.2022].
Указание на использование гистохрома для профилактики и/или лечения атопического дерматита в доступной патентной и другой научно-технической литературе не обнаружено.
Эта новая функция гистохрома не вытекает с очевидностью из его известных свойств и состава.
Авторами впервые обнаружена способность гистохрома снижать экспрессию провоспалительных цитокинов интерферона-γ (ИНФ-γ), интерлейкина-4 (ИЛ-4) и интерлейкина-13 (ИЛ-13), играющих основную роль в поддержании аллергического воспаления в коже. Показано, что гистохром проявляет противовоспалительный эффект на 2,4-динитрохлорбензол индуцированные атопические дерматитоподобные поражения на модели мышей NC/Nga, обладает свойством ингибировать индуцированную воспалительным ответом инфильтрацию тучных клеток в пораженной коже. Применение гистохрома, топически и/или парентерально, эффективно устраняет эпидермальные кожные поражения, снижает трансдермальную потерю воды и улучшает гидратацию рогового слоя, тем самым облегчает клинические симптомы атопического дерматита, такие как отек, эритема и сухость кожи.
Исследование способности гистохрома влиять на основные патофизиологические процессы атопического дерматита в коже мышей проводили на мышах инбредной линии Nc/Nga, выведенной в Японии в университете Нагоя в 1957 году и используемой в качестве модели атопического дерматита человека. Шестинедельные самцы мышей NC/Nga приобретены в Orient Bio (Тэджон, Корея). Мышей акклиматизировали при температуре 22±2°С и влажности 45±5% с чередованием темноты/света 12/12 часов в течение 1 недели. Исследование на животных было одобрено Комитетом по уходу и использованию животных Университета Инже.
Поражения кожи у мышей, подобные атопическому дерматиту, вызывали местным нанесением 100 мкл 1% 2,4-динитрохлорбензол а (ДНХБ), растворенного в смеси оливкового масла и ацетона (1:3) по схеме: три раза в неделю в течение 2 недель, после сенсибилизации продолжали наносить 0,4% раствор ДНХБ три раза в неделю в течение 5 недель.
Гистохром применяли местно, нанося на поврежденный участок кожи спины мыши, или вводя препарат внутрибрюшинно, в этом случае препарат попадал в системный кровоток.
В таблице 1 приведены обозначения экспериментальных групп животных и описание экспериментов.
При непосредственном воздействии этиологически значимого аллергена ДНХБ на кожу мышей происходит активация антиген-специфических клеток, инфильтрирующих эпидермис, которые несут на своей поверхности IgE-антитела. Последние мигрируют в лимфатические узлы, где активируют Th2-лимфоциты, секретирующие провоспалительные цитокины ИЛ-4, ИЛ-13, ИНФ-γ, играющие основную роль в поддержании аллергического воспаления в коже.
Описание экспериментальных методов исследования
Измерение уровней трансэпидермальной потери воды (ТЭПВ) и гидратации рогового слоя (ГРС)
После сенсибилизации мышей 1% и 0,4% ДНХБ по вышеприведенной схеме показатели ТПВ и ГРС измеряли с использованием датчиков Tewameter® и корнеометром Cutometer® MP А 580 (Courage + Khazaka Electronic GmbH, Кельн, Германия) каждые 2 недели. Измерительный зонд помещали на средний участок кожи спины мышей, которым вводили анестезию путем ингаляции изофлурана в низкой концентрации. Уровни ТЭПВ были проанализированы при выходе на плато оценочного графика, а уровни ГРС были приняты как среднее значение трех измерений
Наблюдение за состоянием кожи
За состоянием кожи участка спины, на котором вызван атопический дерматит, наблюдали каждые 2 недели, для этого делали фотографии с помощью камеры для дерматоскопии (DermLite™ DLCAM, DermLite, Сан-Хуан-Капистрано, Калифорния, США). Мышей фотографировали под наркозом, который вводили путем кратковременной ингаляции изофлурана.
Гистологический анализ
Для получения образцов кожи спины мышей усыпляли, используя газ ССЬ. Части биоптатов дорсальной кожи фиксировали в 4% параформальдегиде, а затем переносили в 70% раствор этилового спирта на 24 ч при комнатной температуре. Образцы заливали парафином и разрезали на срезы по 4 мкм. Срезы кожи окрашивали гематоксилином и эозином (Н&Е) и толуидиновым синим. Окрашенные слайды изучали с помощью сканера слайдов NanoZoomer Digital Pathology и программного обеспечения HCImage (Hamamatsu Photonics, Милан, Италия).
Вестерн-блоттинг
Образцы эпидермальной дорсальной кожи лизировали буфером для анализа радиоиммунопреципитации (50 мМ Трис-HCl, рН 7,5, 150 мМ NaCl, 0,5% дезоксихолат натрия, 1% Тритон Х-100, 2 мМ ЭДТА и 0,1% натрия лаурилсульфата с добавлением 200 мМ фенилметилсульфонилфлуорида (PMSF). Концентрацию белка определяли с помощью анализа белка Bio-Rad DC (Bio-Rad Laboratories, Inc., Геркулес, Калифорния, США). Лизаты разделяли электрофорезом в 8-15% полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и переносили на нитроцеллюлозную мембрану (GE Healthcare, Чикаго, Иллинойс, США) на 100 мин при 110 W и 4°С. Мембраны блокировали 5% обезжиренным молоком в TBST буфере (20 ммоль/л Tris-HCl, рН 7,5, 50 ммоль/л NaCl и 0,1% Tween 20). После блокирования мембраны инкубировали в течение ночи с первичными антителами, разведенными до 1:1000-1:5000 в 3% бычьем сывороточном альбумине (БСА) в TBST. После трехкратной промывки в течение 15 мин мембраны инкубировали в течение 1 ч с вторичными антителами, меченными пероксидазой хрена, разведенными до 1:1000-1:5000 в 3% БСА. Полосы белка визуализировали с помощью набора для усиления хемилюминесценции (Santa Cruz Biotechnology, Даллас, Техас, США) и наблюдали с помощью визуализатора AI 600 (GE Healthcare, Чикаго, Иллинойс, США).
Статистический анализ
Все данные представлены как среднее значение по крайней мере трех независимых экспериментов. Статистические сравнения были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим тестом честной значимости Тьюки (Tukey's test) для множественных сравнений (GraphPad Prism 8.0, GraphPad Software Inc., Сан-Диего, Калифорния, США). Статистическая значимость была установлена на уровне р<0,05.
Изобретение иллюстрируется следующими фигурами:
- на фиг.1 представлены результаты дерматоскопического наблюдения за поражениями кожи дорсальной поверхности мышей у шести групп животных в течение всего эксперимента с периодичностью 2 недели;
- на фиг.2 представлен уровень иммуноглобулина IgE в сыворотке мышей экспериментальных групп;
- на фиг.3 представлен результат Вестерн-блот-анализа противовоспалительного эффекта гистохрома при поражениях кожи, вызванных ДНХБ; среднее значение ± SEM трех независимых экспериментов, * р<0,05;
- на фиг.4 представлен результат гистологического анализа среза кожи спины мыши, окрашенного толуидиновым синим - реагентом на тучные клетки, и статистический анализ количества тучных клеток; среднее значение ± SEM, *** р<0,001, масштабная линейка = 100 μм;
- на фиг.5 представлены результаты гистометрии и статистического анализа толщины эпидермиса в коже спины мышей; среднее значение ± стандартная ошибка среднего, *** р<0,001, * р<0,05, масштабная линейка = 100 мкм;
- на фиг.6 представлены данные измерения степени трансэпидермальной потери воды и гидратации рогового слоя в коже экспериментальных мышей; среднее значение ± SEM (n=6), ***р<0,001, * р<0,05.
- на фиг.7 представлена схема этапов развития атопического дерматита, инициированного 2,4-динитрохлорбензолом у мышей.
Изобретение иллюстрируются следующими примерами.
Пример 1
Изменения АД-подобных симптомов, индуцированных ДНХБ, на спинной части кожи мышиной модели
Мыши Nc/Nga разделены на шесть групп, описание которых приведены в таблице 1. Каждые 2 недели эксперимента дерматоскопически наблюдали АД-подобные поражения кожи на дорсальной поверхности животных. Через 4 недели после создания экспериментального АД на дорсальной коже мышей групп Д, ФБ и ИФБ наблюдали легкий отек, раздражение, сухость и эритему. Через 6 недель появились более заметные отек, раздражение, сухость и эритема. В группах Г и ИГ и через 4, и 6 недель состояние кожи было значительно улучшено по сравнению с группами ФБ и ИФБ. Результаты представлены на слайдах (фиг.1).
Пример 2
Влияние гистохрома на уровень иммуноглобулина IgE в сыворотке экспериментальных животных
Иммуноферментным анализом (ИФА, ELISA) показано, что группы Г и ИГ имели более низкие уровни иммуноглобулина IgE в сыворотке по сравнению с группой Д (фиг.2). Эти результаты показывают, что гистохром, как топически, так и при системном введении (парентерально), снижает провоспалительный ответ при атопическом дерматите.
Пример 3
Противовоспалительный эффект гистохрома при поражениях кожи, вызванных ДНХБ
Чтобы проверить, подавляет ли гистохром экспрессию провоспалительных цитокинов, использовали иммуноблот-анализ экспрессии белков ИНФ-γ, ИЛ-4 и ИЛ-13, связанных с провоспалением. Обработка гистохромом показала противовоспалительный эффект на модели мышей с индуцированным АД (фиг.3А). Относительные интенсивности полос иммунных белков ИНФ-γ, ИЛ-4 и ИЛ-13, оцененные с помощью программы обработки изображений ImageJ представлены на фиг.3Б-Г. Уровни экспрессии ИФН-γ, ИЛ-4 и ИЛ-13, нормализованные по экспрессированному референсному белку β-актину, в группе Д были значительно повышены по сравнению с контролем (группа Н), а у животных групп Г и ИГ, эти показатели были значительно ниже нормы. Причем эффект гистохрома на экспрессию ИФН-γ оказался больше, когда препарат вводили внутрибрюшинно, по сравнению с местным его применением. Таким образом показано, что гистохром проявляет противовоспалительный эффект на модели мышей с индуцированным атопическим дерматитом, снижая уровень экспрессии провоспалительных цитокинов ИФН-γ, ИЛ-4 и ИЛ-13. Известно, что высокий уровень экспрессии ИФН-γ связан с развитием аутоиммунных заболеваний.
Пример 4
Исследование влияния гистохрома на инфильтрацию кожи тучными клетками у мышей с индуцированным АД
Гистологическое наблюдение срезов, окрашенных толуидиновым синим, показало снижение инфильтрации кожи тучными клетками в группах Г и ИГ по сравнению с группами Д, ФБ, ИФБ (фиг.4А). Количество инфильтрированных тучных клеток в окрашенных срезах кожи экспериментальных животных подсчитывали в пяти типичных полях с высоким увеличением с помощью цифрового сканера NanoZoomer (n=6) и программного обеспечения HCImage (Hamamatsu Photonics, Милан, Италия) (фиг.4Б).
Пример 5
Исследование влияния гистохрома на повреждения эпидермиса Когда возникает атопия, эпидермис затвердевает и увеличивается в толщине, что нарушает состояние кожи и снижает ее защитные свойства. На фиг.5 представлен результат сравнительного анализа толщины эпидермиса, измеренной с помощью цифрового сканера NanoZoomer. Гистологическими исследованиями кожных срезов, окрашенных гематоксилином и эозином (Н&Е, масштабная линейка = 100 мкм), показано, что гистохром как при местном, так и внутрибрюшинном введении, уменьшает толщину кожного эпидермиса (фиг.5А). Средние значения толщины эпидермиса всех групп экспериментальных животных представлены на фиг.5Б. Представленные данные позволяют сделать заключение о том, что при атопическом дерматите гистохром сохраняет защитные функции кожи, особенно при внутрибрюшинном введении, и облегчает лечение симптомов этого заболевания.
Пример 6
Исследование влияния гистохрома на показатели трансэпидермальной потери воды и гидратации рогового слоя у мышей с индуцированным атопическим дерматитом
Эпидермис представляет собой сложную структуру, его главным компонентом считается роговой слой, препятствующий проникновению экзогенных веществ через кожу. Важное значение для интегральной оценки состояния эпидермального барьера имеет количественное измерение кожных параметров, таких, как потеря трансэпидермальной воды и уровня гидратации рогового слоя. Для этого были применены неинвазивные методики исследования кожного барьера in vivo, приведенные в описании экспериментальных методов исследования.
На фиг.6 представлены данные по влиянию гистохрома на показатели трансэпидермальной потери воды (TEWL, фиг.6А) и гидратации рогового слоя (SCH, фиг.6Б) у мышей с индуцированным атопическим дерматитом. Уровни TEWL в эпидермисе кожи оценивали каждые 2 недели с помощью измерений Tewameter®. Оценку SCH определяли с помощью измерений Corneometer® каждые 2 недели эксперимента.
Как видно из приведенных графиков, показатели трансэпидермальной потери воды и гидратации рогового слоя были улучшены в группах мышей, обработанной гистохромом как местно, так и при внутрибрюшинном введении. Хотя эти показатели не доходили до базовых значений, но на всем протяжении эксперимента (6 недель) показатели трансэпидермальной потери воды в группах Г и ИГ были ниже, чем в группах Д, ФБ, ИФБ. И наоборот, показатели гидратации рогового слоя были выше в группах Г и ИГ, чем в группах Д, ФБ, ИФБ. Таким образом, эти результаты свидетельствуют об эффективном действии гистохрома на защитные функции кожи при экспериментальном атопическом дерматите.
Claims (1)
- Применение гистохрома в качестве средства для лечения атопического дерматита, где гистохром наносят топически или вводят внутрибрюшинно.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2794841C1 true RU2794841C1 (ru) | 2023-04-25 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2038088C1 (ru) * | 1990-08-01 | 1995-06-27 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Способ лечения ожогов глаз |
| RU2137472C1 (ru) * | 1998-10-12 | 1999-09-20 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Лекарственный препарат "гистохром" для лечения острого инфаркта миокарда и ишемической болезни сердца |
| RU2463998C2 (ru) * | 2009-02-16 | 2012-10-20 | Татьяна Евгеньевна Александрова | Способ лечения хориоретинальных дистрофий после перенесенного туберкулезного хориоретинита |
| WO2016167263A1 (ja) * | 2015-04-14 | 2016-10-20 | 中外製薬株式会社 | Ｉｌ－３１アンタゴニストを有効成分として含有する、アトピー性皮膚炎の予防用及び／又は治療用医薬組成物 |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2038088C1 (ru) * | 1990-08-01 | 1995-06-27 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Способ лечения ожогов глаз |
| RU2137472C1 (ru) * | 1998-10-12 | 1999-09-20 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Лекарственный препарат "гистохром" для лечения острого инфаркта миокарда и ишемической болезни сердца |
| RU2463998C2 (ru) * | 2009-02-16 | 2012-10-20 | Татьяна Евгеньевна Александрова | Способ лечения хориоретинальных дистрофий после перенесенного туберкулезного хориоретинита |
| WO2016167263A1 (ja) * | 2015-04-14 | 2016-10-20 | 中外製薬株式会社 | Ｉｌ－３１アンタゴニストを有効成分として含有する、アトピー性皮膚炎の予防用及び／又は治療用医薬組成物 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ПЕНКИНА Н. И. Анализ эффективности антиоксидантной терапии при обострении атопического дерматита у детей//Проблемы экспертизы в медицине, 2005. - N 18-2, С. 36-37. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | The suppressive effect of puerarin on atopic dermatitis-like skin lesions through regulation of inflammatory mediators in vitro and in vivo | |
| Teramoto et al. | Annular erythema: a possible association with primary Sjögren's syndrome | |
| Leung et al. | Allergic and immunologic skin disorders | |
| Hegazi | Bee venom and propolis as new treatment modality in patients with localized plaque psoriasis. | |
| Chen et al. | Pseudoephedrine alleviates atopic dermatitis-like inflammatory responses in vivo and in vitro | |
| Filaretova et al. | Stress and the stomach: Corticotropin-releasing factor may protect the gastric mucosa in stress through involvement of glucocorticoids | |
| Song et al. | Alpinia officinarum water extract inhibits the atopic dermatitis-like responses in NC/Nga mice by regulation of inflammatory chemokine production | |
| Park et al. | Korean red ginseng water extract alleviates atopic dermatitis-like inflammatory responses by negative regulation of mitogen-activated protein kinase signaling pathway in vivo | |
| JP2019112405A (ja) | ＧＰＣＲ１９作用剤を有効成分として含有するアレルギー性皮膚疾患の予防又は治療用の組成物｛Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ｏｒ ｔｒｅａｔｉｎｇ ａｌｌｅｒｇｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ ＧＰＣＲ１９ ａｇｏｎｉｓｔ ａｓ ａｎ ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ｝ | |
| Yang et al. | Jageum-Jung improves 2, 4-dinitrochlorobenzene-induced atopic dermatitis-like skin lesions in mice and suppresses pro-inflammatory chemokine production by inhibiting TNF-α/IFN-γ-induced STAT-1 and NFκB signaling in HaCaT cells | |
| Arora et al. | Orally administered solasodine, a steroidal glycoalkaloid, suppresses ovalbumin-induced exaggerated Th2-immune response in rat model of bronchial asthma | |
| Jo et al. | Sensitization of GSH synthesis by curcumin curtails acrolein-induced alveolar epithelial apoptosis via Keap1 cysteine conjugation: a randomized controlled trial and experimental animal model of pneumonitis | |
| RU2794841C1 (ru) | Средство для лечения атопического дерматита | |
| Zachariae et al. | Cyclosporin A treatment of systemic sclerosis | |
| Zhao et al. | Knockdown of sodium channel Nax reduces dermatitis symptoms in rabbit skin | |
| Ahmed et al. | Role of oxytocin in deceleration of early atherosclerotic inflammatory processes in adult male rats | |
| Yang et al. | Cordyceps sinensis-derived fungus Isaria felina ameliorates experimental autoimmune thyroiditis in mice | |
| Labsi et al. | Beneficial effect of dimethyl fumarate on experimental autoimmune uveitis is dependent of pro-inflammatory markers immunomodulation | |
| US11311600B2 (en) | Methods for treating obesity | |
| Foulds et al. | A double‐blind trial of the H2 receptor antagonist cimetidine, and the H1 receptor antagonist promethazine hydrochloride in the treatment of atopic dermatitis | |
| US20150335617A1 (en) | Methods and compositions for treating psoriasis | |
| Al-juhaishi et al. | Effects of Montelukast on imiquimod-induced model of psoriasis in mice | |
| Quintanar-Stephano et al. | Neurointermediate pituitary lobectomy decreases the incidence and severity of experimental autoimmune encephalomyelitis in Lewis rats | |
| Lim et al. | Cirsium japonicum leaf extract attenuated lipopolysaccharide-induced acute respiratory distress syndrome in mice via suppression of the NLRP3 and HIF1α pathways | |
| Wei et al. | Effect of Chloroquine on Type 2 Inflammatory Response in MC903-Induced Atopic Dermatitis Mice |