RU2778515C2 - Eye drops in form of solution containing benzopyran derivative or its pharmaceutically acceptable salt - Google Patents
Eye drops in form of solution containing benzopyran derivative or its pharmaceutically acceptable salt Download PDFInfo
- Publication number
- RU2778515C2 RU2778515C2 RU2020125724A RU2020125724A RU2778515C2 RU 2778515 C2 RU2778515 C2 RU 2778515C2 RU 2020125724 A RU2020125724 A RU 2020125724A RU 2020125724 A RU2020125724 A RU 2020125724A RU 2778515 C2 RU2778515 C2 RU 2778515C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- eye drop
- amino
- drop composition
- eye
- detected
- Prior art date
Links
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 title claims abstract description 91
- 239000000243 solution Substances 0.000 title claims abstract description 76
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 25
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 title claims description 31
- 150000001562 benzopyrans Chemical class 0.000 title description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 80
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 75
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 16
- XPQNJJQQAZIHMI-QZNHQXDQSA-N (2r,3r,4s)-6-amino-4-[4-chloro-n-(1h-imidazol-2-ylmethyl)anilino]-2-(dimethoxymethyl)-2-methyl-3,4-dihydrochromen-3-ol Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1N([C@H]1C2=CC(N)=CC=C2O[C@@]([C@@H]1O)(C)C(OC)OC)CC1=NC=CN1 XPQNJJQQAZIHMI-QZNHQXDQSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims abstract description 9
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 16
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 claims description 14
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 claims description 12
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 claims description 12
- UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N disodium;3,7-dioxido-2,4,6,8,9-pentaoxa-1,3,5,7-tetraborabicyclo[3.3.1]nonane Chemical compound [Na+].[Na+].O1B([O-])OB2OB([O-])OB1O2 UQGFMSUEHSUPRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 claims description 12
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 claims description 12
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 claims description 9
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 7
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 7
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003333 chlorhexidine gluconate Drugs 0.000 claims description 3
- YZIYKJHYYHPJIB-UUPCJSQJSA-N chlorhexidine gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.C1=CC(Cl)=CC=C1NC(=N)NC(=N)NCCCCCCNC(=N)NC(=N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 YZIYKJHYYHPJIB-UUPCJSQJSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 claims description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 150000003398 sorbic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 206010025421 Macule Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 78
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 35
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 20
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 13
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 13
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 101150115477 Vldlr gene Proteins 0.000 description 8
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 8
- 229920001684 low density polyethylene Polymers 0.000 description 7
- 239000004702 low-density polyethylene Substances 0.000 description 7
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 7
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 description 5
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 2'-(4-ethoxyphenyl)-5-(4-methylpiperazin-1-yl)-2,5'-bibenzimidazole Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C1=NC2=CC=C(C=3NC4=CC(=CC=C4N=3)N3CCN(C)CC3)C=C2N1 PRDFBSVERLRRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)-1-[4-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]propan-1-one Chemical compound N1N=NC=2CN(CCC=21)CCC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F YLZOPXRUQYQQID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940076783 lucentis Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 2,4-Hexadienoic acid, potassium salt (1:1), (2E,4E)- Chemical compound [K+].CC=CC=CC([O-])=O CHHHXKFHOYLYRE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- TYJOQICPGZGYDT-UHFFFAOYSA-N 4-methylsulfonylbenzenesulfonyl chloride Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 TYJOQICPGZGYDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012110 Alexa Fluor 594 Substances 0.000 description 1
- 241000219726 Griffonia simplicifolia Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000034038 Pathologic Neovascularization Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004283 Sodium sorbate Substances 0.000 description 1
- 206010047050 Vascular anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102100039066 Very low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- 101710177612 Very low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- GDSCFOSHSOWNDL-UHFFFAOYSA-N Zolasepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C(N(N=C2C)C)=C2C=1C1=CC=CC=C1F GDSCFOSHSOWNDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229920001903 high density polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000004700 high-density polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000010241 potassium sorbate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004302 potassium sorbate Substances 0.000 description 1
- 229940069338 potassium sorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- LROWVYNUWKVTCU-STWYSWDKSA-M sodium sorbate Chemical compound [Na+].C\C=C\C=C\C([O-])=O LROWVYNUWKVTCU-STWYSWDKSA-M 0.000 description 1
- 235000019250 sodium sorbate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229960004175 xylazine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001366 zolazepam Drugs 0.000 description 1
Images
Abstract
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИFIELD OF TECHNOLOGY
[1] Настоящее изобретение относится к композиции глазных капель в форме раствора, содержащего производное бензопирана или его фармацевтически приемлемую соль. Точнее говоря, настоящее изобретение относится к композиции глазных капель в форме раствора, не только содержащего производное бензопирана или его фармацевтически приемлемую соль и особый стабилизирующий агент, но и характеризующегося определенным диапазоном pH.[1] The present invention relates to an eye drop composition in the form of a solution containing a benzopyran derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof. More specifically, the present invention relates to an eye drop composition in the form of a solution not only containing a benzopyran derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a particular stabilizing agent, but also having a certain pH range.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION
[2] Производное бензопирана Формулы 1 с химическим наименованием (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран известно как соединение, обладающее терапевтическим действием при раке, ревматоидном артрите и т.д. (патент Кореи № 10-0492252).[2] The benzopyran derivative of Formula 1 with the chemical name (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino]-3-hydroxy -2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran is known as a compound having a therapeutic effect in cancer, rheumatoid arthritis, etc. (Korean Patent No. 10-0492252).
[3] Формула 1[3] Formula 1
[4]
[5] Кроме того, соединение Формулы 1 может быть получено в виде композиции глазных капель на основе низкомолекулярного материала; и с пользой применено для профилактики и лечения дегенеративных процессов желтого пятна, без инъекции напрямую в пораженную область, как в случае с терапией с инъекцией антител (опубликованная патентная заявка Кореи № 10-2012-0112162). В опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162 раскрыта композиция глазных капель в форме раствора или суспензии. Например, в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162 раскрыта композиция глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в концентрациях 0,06 масс./об.% и 0,09 масс./об.%, изготовленное с использованием полиэтиленгликоля и глицерина в качестве растворителя. [5] In addition, the compound of Formula 1 can be obtained as an eye drop composition based on a low molecular weight material; and has been usefully used for the prevention and treatment of macular degenerative processes, without injection directly into the affected area, as in the case of antibody injection therapy (Korean Patent Publication No. 10-2012-0112162). Korean Published Patent Application No. 10-2012-0112162 discloses an eye drop composition in the form of a solution or suspension. For example, Korean Published Patent Application No. 10-2012-0112162 discloses an eye drop composition in the form of a solution containing a compound of Formula 1 at concentrations of 0.06 w/v% and 0.09 w/v%, made using polyethylene glycol and glycerin as a solvent.
[6] Между тем, для эффективного лечения дегенеративных процессов желтого пятна необходима композиция глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации, например, в концентрации 0,3 масс./об.% и выше (то есть в концентрации 3,0 мг/мл и выше). Однако, поскольку соединение Формулы 1 плохо растворяется в воде, недостаток композиции глазных капель в форме раствора, раскрытой в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162, заключается в том, что соединение Формулы 1 не может быть растворено в высокой концентрации 3,0 мг/мл и более. Кроме того, соединение Формулы 1 характеризуется низкой стабильностью в водной среде. Таким образом, если соединение Формулы 1 содержится в высокой концентрации 3,0 мг/мл и более, существенно возрастает образование продуктов распада.[6] Meanwhile, for the effective treatment of macular degenerative processes, an eye drop composition in the form of a solution containing a compound of Formula 1 at a high concentration, for example, at a concentration of 0.3 wt./vol.% and higher (that is, at a concentration of 3 0 mg/ml and above). However, since the compound of Formula 1 is poorly soluble in water, a disadvantage of the eye drop solution formulation disclosed in Korean Patent Application Publication No. 10-2012-0112162 is that the compound of Formula 1 cannot be dissolved in a high concentration of 3.0 mg/ml or more. In addition, the compound of Formula 1 is characterized by low stability in the aquatic environment. Thus, if the compound of Formula 1 is contained in a high concentration of 3.0 mg/ml or more, the formation of degradation products increases significantly.
РАСКРЫТИЕ DISCLOSURE
Техническая задача Technical task
[7] Авторами настоящего изобретения выполнены различные исследования с целью разработки композиции глазных капель в форме раствора, не только содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации (например, в концентрации 3,0 мг/мл и более) в водной среде, но и обладающего повышенной стабильностью. В итоге авторы настоящего изобретения обнаружили, что, контролируя pH раствора в определенном диапазоне (то есть, pH в диапазоне от 4,0 до pH 5,0) и используя особый стабилизирующий агент (то есть пропиленгликоль), можно получить композицию глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 в высокой концентрации и обладающего превосходной стабильностью. Кроме того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что если поместить полученную композицию глазных капель в светонепроницаемую тару, можно получить фармацевтический продукт, пригодный для хранения в течение длительного времени.[7] The present inventors have carried out various studies to develop an eye drop composition in the form of a solution not only containing the compound of Formula 1 at a high concentration (for example, at a concentration of 3.0 mg/ml or more) in an aqueous medium, but also having an increased stability. As a result, the present inventors found that by controlling the pH of the solution within a certain range (i.e., pH in the range of 4.0 to pH 5.0) and using a specific stabilizing agent (i.e., propylene glycol), it is possible to obtain an eye drop formulation in the form a solution containing a compound of Formula 1 at a high concentration and having excellent stability. In addition, the inventors of the present invention have found that if the obtained eye drop composition is placed in an opaque container, a pharmaceutical product suitable for storage for a long time can be obtained.
[8] Таким образом, задачей настоящего изобретения является разработка технологии получения композиции глазных капель в форме раствора, содержащего соединение Формулы 1 или его фармацевтически приемлемую соль, а также пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента, в котором композиция глазных капель имеет рН в диапазоне от 4,0 до 5,0.[8] Thus, the objective of the present invention is to develop a technology for producing an eye drop composition in the form of a solution containing a compound of Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as well as propylene glycol as a stabilizing agent, in which the eye drop composition has a pH in the range of 4, 0 to 5.0.
[9] Другой задачей настоящего изобретения является получение фармацевтического продукта для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемого путем помещения полученной композиции глазных капель в светонепроницаемую тару.[9] Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical product for the prevention or treatment of degenerative processes of the macula, obtained by placing the resulting composition of eye drops in an opaque container.
Техническое решениеTechnical solution
[10] Первым объектом настоящего изобретения является композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S) -6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента и регулирующий pH агент, в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.[10] The first object of the present invention is the composition of eye drops in the form of a solution containing (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl) amino]-3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof; propylene glycol as a stabilizing agent; and a pH adjusting agent, in an aqueous medium, wherein the eye drop formulation has a pH in the range of 4.0 to 5.0.
[11] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в концентрации 3 мг/мл и более, предпочтительно в концентрации от 3 мг/мл до 10 мг/мл. При этом пропиленгликоль может присутствовать в концентрации от 1 мг/мл до 20 мг/мл, предпочтительно от 5 мг/мл до 17 мг/мл, более предпочтительно от 10 мг/мл до 15 мг/мл. Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может иметь pH, предпочтительно, в диапазоне от 4,2 до 4,7, более предпочтительно, примерно 4,5.[11] In the eye drop formulation of the present invention, (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino]-3-hydroxy -2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof may be present at a concentration of 3 mg/ml or more, preferably at a concentration of 3 mg/ml to 10 mg/ml. Meanwhile, propylene glycol may be present in a concentration of 1 mg/ml to 20 mg/ml, preferably 5 mg/ml to 17 mg/ml, more preferably 10 mg/ml to 15 mg/ml. The eye drop composition of the present invention may have a pH preferably in the range of 4.2 to 4.7, more preferably about 4.5.
[12] Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может также содержать одно или несколько вспомогательных веществ из группы, содержащей вспомогательный стабилизирующий агент, буферный агент и консервант. Вспомогательный стабилизирующий агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соли и трометамин. Буферный агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей тетраборнокислый натрий, борную кислоту, фосфатную соль, лимонную кислоту, цитрат натрия и аминокапроновую кислоту. Консервант может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей хлорид бензалкония, глюконат хлоргексидина, сорбиновые кислоты, хлорбутанол и парабены.[12] The composition of eye drops according to the present invention may also contain one or more excipients from the group containing an auxiliary stabilizing agent, a buffering agent and a preservative. The auxiliary stabilizing agent may be one or more of the group consisting of ethylenediaminetetraacetic acid or its salts and tromethamine. The buffering agent may be one or more of the group consisting of sodium tetraborate, boric acid, phosphate salt, citric acid, sodium citrate and aminocaproic acid. The preservative may be one or more of the group consisting of benzalkonium chloride, chlorhexidine gluconate, sorbic acids, chlorobutanol and parabens.
[13] Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемый путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару. Предпочтительно, фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна согласно настоящему изобретению может быть получен путем помещения полученной композиции глазных капель в светонепроницаемую тару и последующей упаковки полученного продукта в картонную коробку.[13] Another object of the present invention is a pharmaceutical product for the prevention or treatment of degenerative processes of the macula, obtained by placing the composition of eye drops in an opaque container. Preferably, the pharmaceutical product for the prevention or treatment of macular degenerative processes of the present invention can be obtained by placing the resulting eye drop composition in an opaque container and then packaging the resulting product in a carton.
Технические результаты ИЗОБРЕТЕНИЯTechnical results of the INVENTION
[14] Рецептура глазных капель в форме раствора согласно настоящему изобретению может содержать соединение Формулы 1 в высокой концентрации, а также характеризуется высокой стабильностью. Кроме того, фармацевтический продукт согласно настоящему изобретению может храниться в течение длительного времени. Таким образом, рецептура глазных капель в форме раствора и фармацевтический продукт согласно настоящему изобретению можно эффективно использовать для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна.[14] The eye drop solution formulation of the present invention can contain the compound of Formula 1 at a high concentration and is also characterized by high stability. In addition, the pharmaceutical product of the present invention can be stored for a long time. Thus, the eye drop solution formulation and the pharmaceutical product of the present invention can be effectively used to prevent or treat macular degenerative processes.
ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙDESCRIPTION OF THE DRAWINGS
[15] На ФИГ. 1 показаны результаты оценки эффективности ингибирования транссудации, достигнутой при применении композиции глазных капель согласно настоящему изобретению, на животных с дегенеративными процессами желтого пятна.[15] FIG. 1 shows the results of evaluating the efficacy of extravasation inhibition achieved by using the eye drop composition of the present invention in animals with macular degenerative processes.
[16] На ФИГ. 2 показаны результаты оценки эффективности ингибирования патологического ангиогенеза в сетчатке, достигнутой при применении композиции глазных капель согласно настоящему изобретению, на животных с дегенеративными процессами желтого пятна.[16] FIG. 2 shows the results of evaluating the effectiveness of the inhibition of pathological angiogenesis in the retina, achieved using the composition of eye drops according to the present invention, in animals with macular degenerative processes.
ЛУЧШИЙ ВАРИАНТTHE BEST OPTION
[17] Настоящим изобретением предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)- N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль в качестве стабилизирующего агента; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.[17] The present invention provides an eye drop formulation in the form of a solution containing (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino] -3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof; propylene glycol as a stabilizing agent; and a pH adjusting agent in an aqueous medium, wherein the eye drop composition has a pH in the range of 4.0 to 5.0.
[18] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению водная среда включает стерильную воду для инъекций, стерильную очищенную воду, физиологический раствор и прочие вещества.[18] In the eye drop composition of the present invention, the aqueous medium includes sterile water for injection, sterile purified water, saline, and the like.
[19] В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению (2R,3R,4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран имеет химическую структуру Формулы 1, как раскрыто выше. Фармацевтически приемлемая соль соединения Формулы 1 может представлять собой, в частности, кислотно-аддитивную соль, соль щелочного металла или соль щелочноземельного металла, раскрытую в опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162. В композиции глазных капель согласно настоящему изобретению соединение Формулы 1 может присутствовать в концентрации 3 мг/мл и более, предпочтительно в концентрациях от 3 до 10 мг/мл.[19] In the eye drop formulation of the present invention, (2R,3R,4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino]-3-hydroxy -2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran has the chemical structure of Formula 1 as disclosed above. The pharmaceutically acceptable salt of the compound of Formula 1 may be, in particular, an acid addition salt, an alkali metal salt or an alkaline earth metal salt disclosed in Korean Published Patent Application No. 10-2012-0112162. In the eye drop composition of the present invention, the compound of Formula 1 may be present at a concentration of 3 mg/ml or more, preferably at concentrations of 3 to 10 mg/ml.
[20] Согласно настоящему изобретению, использование пропиленгликоля в качестве стабилизирующего вещества при получении соединения Формулы 1 позволяет существенно повысить стабильность полученной композиции глазных капель. Пропиленгликоль может присутствовать в концентрации от 1 мг/мл до 20 мг/мл, предпочтительно от 5 мг/мл до 17 мг/мл, более предпочтительно от 10 мг/мл до 15 мг/мл, в частности примерно 13 мг/мл (то есть от 12 мг/мл до 14 мг/мл).[20] According to the present invention, the use of propylene glycol as a stabilizing agent in the preparation of the compound of Formula 1 can significantly improve the stability of the resulting eye drop composition. Propylene glycol may be present at a concentration of 1 mg/mL to 20 mg/mL, preferably 5 mg/mL to 17 mg/mL, more preferably 10 mg/mL to 15 mg/mL, in particular about 13 mg/mL (then there are 12 mg/ml to 14 mg/ml).
[21] Кроме того, согласно настоящему изобретению при регулировании pH композиции глазных капель в форме раствора в определенном диапазоне (то есть от 4,0 до 5,0) соединение Формулы 1 может быть растворено в высокой концентрации без образования осадка. Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может иметь pH, предпочтительно, в диапазоне от 4,2 до 4,7, более предпочтительно, примерно 4,5 (то есть от 4,4 до 4,6). Регулирование рН может осуществляться с использованием обычного средства регулирования рН, применяемого в области технологии получения глазных капель, например, в частности, хлороводородной кислоты и/или гидроксида натрия.[21] In addition, according to the present invention, by adjusting the pH of the eye drop composition in the form of a solution in a certain range (i.e., from 4.0 to 5.0), the compound of Formula 1 can be dissolved in a high concentration without precipitation. The eye drop composition of the present invention may have a pH preferably in the range of 4.2 to 4.7, more preferably about 4.5 (ie 4.4 to 4.6). The pH adjustment can be carried out using a conventional pH adjusting agent used in the field of eye drop technology, for example, in particular, hydrochloric acid and/or sodium hydroxide.
[22] Композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может также содержать одно или несколько вспомогательных веществ из группы, содержащей вспомогательный стабилизирующий агент, буферный агент и консервант. Количество вспомогательных веществ может быть выбрано специалистами в данной области техники с учетом соответствующих функций.[22] The composition of eye drops according to the present invention may also contain one or more excipients from the group containing an auxiliary stabilizing agent, a buffering agent and a preservative. The amount of excipients can be selected by those skilled in the art, taking into account the respective functions.
[23] Вспомогательный стабилизирующий агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соль (например, натриевую соль) и трометамин. Например, вспомогательный стабилизирующий агент может использоваться, в частности, в концентрации от 0,05 мг/мл до 10,0 мг/мл, но не ограничен этим диапазоном.[23] The auxiliary stabilizing agent may be one or more of the group consisting of ethylenediaminetetraacetic acid or a salt thereof (eg, sodium salt) and tromethamine. For example, the auxiliary stabilizing agent can be used, in particular, at a concentration of 0.05 mg/ml to 10.0 mg/ml, but is not limited to this range.
[24] Буферный агент может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей тетраборнокислый натрий, борную кислоту, фосфатную соль (например, фосфат натрия, гидрофосфат натрия, фосфат калия и т.д.), лимонную кислоту, цитрат натрия и аминокапроновую кислоту. Например, буферный агент может использоваться, в концентрации от 0,05 до 18,0 мг/мл, в зависимости от вида буферного агента.[24] The buffering agent may be one or more of the group consisting of sodium tetraborate, boric acid, phosphate salt (for example, sodium phosphate, sodium hydrogen phosphate, potassium phosphate, etc.), citric acid, sodium citrate, and aminocaproic acid. . For example, a buffering agent may be used at a concentration of 0.05 to 18.0 mg/mL, depending on the type of buffering agent.
[25] Консервант может представлять собой одно или несколько веществ из группы, содержащей хлорид бензалкония, глюконат хлоргексидина, хлорбутанол, сорбиновые кислоты (например, сорбиновую кислоту, сорбат калия, сорбат натрия и т.д.) и парабены (например, метилпарабен, пропилпарабен и т.д.). Например, консервант может использоваться, в частности, в концентрации от 0,01 мг/мл до 0,5 мг/мл, но не ограничен этим диапазоном.[25] The preservative may be one or more of the group consisting of benzalkonium chloride, chlorhexidine gluconate, chlorobutanol, sorbic acids (e.g., sorbic acid, potassium sorbate, sodium sorbate, etc.) and parabens (e.g., methylparaben, propylparaben etc.). For example, the preservative can be used in particular at a concentration of 0.01 mg/ml to 0.5 mg/ml, but is not limited to this range.
[26] При необходимости композиция глазных капель согласно настоящему изобретению может быть стерильно отфильтрована, например, бактериальным фильтром, в частности, мембранным фильтром 0,2 мкм, с последующим розливом в соответствующую тару.[26] If necessary, the composition of the eye drops according to the present invention can be sterile filtered, for example, a bacterial filter, in particular a 0.2 μm membrane filter, followed by filling into an appropriate container.
[27] Согласно одному из вариантов осуществления изобретения, предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил)амино]-3- гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран или его фармацевтически приемлемую соль; пропиленгликоль; этилендиаминтетрауксусную кислоту или ее соль; трометамин; тетраборнокислый натрий; борную кислоту; хлорид бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.[27] According to one of the embodiments of the invention, the proposed composition of eye drops in the form of a solution containing (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazole-2 -ylmethyl)amino]-3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof; propylene glycol; ethylenediaminetetraacetic acid or a salt thereof; tromethamine; sodium tetraborate; boric acid; benzalkonium chloride; and a pH adjusting agent in an aqueous medium, wherein the eye drop composition has a pH in the range of 4.0 to 5.0.
[28] В другом варианте осуществления изобретения предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего от 3 мг/мл до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил) амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 1 мг/мл до 20 мг/мл пропиленгликоля; от 0,01 мг/мл до 1,0 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; от 0,05 мг/мл до 10,0 мг/мл трометамина; от 1,0 мг/мл до 11,0 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,1 мг/мл до 18,0 мг/мл борной кислоты; от 0,01 мг/мл до 0,5 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.[28] In another embodiment, the invention provides a composition of eye drops in the form of a solution containing from 3 mg/ml to 10 mg/ml (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)- N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino]-3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof; 1 mg/ml to 20 mg/ml propylene glycol; 0.01 mg/ml to 1.0 mg/ml ethylenediaminetetraacetic acid or a salt thereof; 0.05 mg/ml to 10.0 mg/ml tromethamine; 1.0 mg/ml to 11.0 mg/ml sodium tetraborate; 0.1 mg/ml to 18.0 mg/ml boric acid; from 0.01 mg/ml to 0.5 mg/ml benzalkonium chloride; and a pH adjusting agent in an aqueous medium, wherein the eye drop composition has a pH in the range of 4.0 to 5.0.
[29] В еще одном варианте осуществления изобретения предложена композиция глазных капель в форме раствора, содержащего от 3 мг/мл до 10 мг/мл (2R, 3R, 4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1Н-имидазол-2-илметил) амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2Н-1-бензопирана или его фармацевтически приемлемой соли; от 10 мг/мл до 15 мг/мл пропиленгликоля; 0,5 мг/мл этилендиаминтетрауксусной кислоты или ее соли; 0,35 мг/мл трометамина; от 5,8 мг/мл до 5,9 мг/мл тетраборнокислого натрия; от 0,5 мг/мл до 0,6 мг/мл борной кислоты; от 0,05 мг/мл до 0,15 мг/мл хлорида бензалкония; и регулирующий pH агент в водной среде, причем композиция глазных капель имеет pH в диапазоне от 4,0 до 5,0.[29] In yet another embodiment, the invention provides an eye drop formulation in the form of a solution containing 3 mg/mL to 10 mg/mL (2R, 3R, 4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl) -N-(1H-imidazol-2-ylmethyl)amino]-3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran or a pharmaceutically acceptable salt thereof; 10 mg/ml to 15 mg/ml propylene glycol; 0.5 mg/ml ethylenediaminetetraacetic acid or its salt; 0.35 mg/ml tromethamine; 5.8 mg/ml to 5.9 mg/ml sodium tetraborate; 0.5 mg/ml to 0.6 mg/ml boric acid; from 0.05 mg/ml to 0.15 mg/ml benzalkonium chloride; and a pH adjusting agent in an aqueous medium, wherein the eye drop composition has a pH in the range of 4.0 to 5.0.
[30] Кроме того, настоящим изобретением предложен фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна, получаемый путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару. Предпочтительно, фармацевтический продукт для профилактики или лечения дегенеративных процессов желтого пятна согласно настоящему изобретению может быть получен путем помещения композиции глазных капель в светонепроницаемую тару и последующей упаковки полученного продукта в картонную коробку. К светонепроницаемой таре относится, в частности, непрозрачный контейнер из полиэтилена высокого давления (ПЭВД) и непрозрачный контейнер из полипропилена (ПП).[30] In addition, the present invention provides a pharmaceutical product for the prevention or treatment of macular degenerative processes obtained by placing an eye drop composition in an opaque container. Preferably, the pharmaceutical product for the prevention or treatment of macular degenerative processes of the present invention can be obtained by placing the eye drop composition in an opaque container and then packaging the resulting product in a carton. Opaque containers include, in particular, an opaque container made of high pressure polyethylene (LDPE) and an opaque container made of polypropylene (PP).
[31] Данное изобретение будет детально раскрыто со ссылкой на приведенные ниже примеры. Эти примеры приведены только для наглядности и не ограничивают защищаемый объем настоящего изобретения.[31] The present invention will be described in detail with reference to the following examples. These examples are for illustrative purposes only and do not limit the protected scope of the present invention.
[32] В приведенных ниже примерах рецептуры, примерах и экспериментальных образцах препарата HL217 означает (2R,3R,4S)-6-амино-4-[N-(4-хлорфенил)-N-(1H-имидазол-2-илметил)амино]-3-гидрокси-2-метил-2-диметоксиметил-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран.[32] In the formulation examples, examples, and test samples below, HL217 is (2R,3R,4S)-6-amino-4-[N-(4-chlorophenyl)-N-(1H-imidazol-2-ylmethyl) amino]-3-hydroxy-2-methyl-2-dimethoxymethyl-3,4-dihydro-2H-1-benzopyran.
[33] Пример изготовления 1: Оценка технологичности композиции глазных капель, отличающейся высокой концентрацией[33] Manufacturing Example 1: Evaluation of workability of an eye drop composition having a high concentration
[34] Технологичность композиции глазных капель в форме раствора оценивалась путем растворения HL217 одним и тем же образом, за исключением того, что использовали концентрацию 0,3 масс./об.% (то есть концентрации 3,0 мг/мл) HL217 в растворах глазных капель (0,06 масс./об.% и 0,09 масс./об.% растворов глазных капель), раскрытых в Примерах 1 и 2 композиций согласно опубликованной патентной заявке Кореи № 10-2012-0112162. Таким образом, в соответствии с компонентами и количествами, указанными в таблице 1, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, полиэтиленгликоль 400, глицерин, ЭДТК и борную кислоту. Уровень pН довели до 6,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 1 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.[34] The workability of the formulation of eye drops in the form of a solution was evaluated by dissolving HL217 in the same way, except that a concentration of 0.3 wt./vol.% (i.e. a concentration of 3.0 mg/ml) of HL217 in solutions was used eye drops (0.06% w/v and 0.09% w/v eye drop solutions) disclosed in Composition Examples 1 and 2 of Korean Published Patent Application No. 10-2012-0112162. Thus, in accordance with the components and amounts indicated in Table 1, HL217, polyethylene glycol 400, glycerin, EDTA and boric acid were added to sterile purified water with stirring. The pH was adjusted to 6.5 using aqueous hydrochloric acid and/or aqueous sodium hydroxide; after that, sterile purified water was added to the solution to obtain the final volume. The numbers in table 1 reflect the amount of each component per 1 ml of the total volume.
[35] Таблица 1[35] Table 1
[36] Как показано выше, при увеличении концентрации активного вещества HL217 до 3,0 мг/мл выпадал осадок, в результате чего не удавалось изготовить раствор.[36] As shown above, when the concentration of the active substance HL217 was increased to 3.0 mg/ml, a precipitate formed, resulting in a failure to prepare a solution.
[37] Пример изготовления 2: Растворимость HL217 и оценка стабильности [37] Manufacturing Example 2: HL217 Solubility and Stability Evaluation
[38] (1) Растворимость HL217[38] (1) Solubility of HL217
[39] В отношении растворения HL217 в высокой концентрации (в концентрации 0,3 масс./об.% и более) оценивались различные физико-химические факторы. Поскольку согласно правилам Управления по контролю за продуктами и лекарствами США предельно допустимая концентрация полиэтиленгликоля 400 в рецептуре глазных капель составляет 50 мг/мл, для оценки растворимости HL217 количество полиэтиленгликоля 400 было скорректировано до 1/10 (то есть 15,0 мг) а количество глицерина, соответственно, также было скорректировано до 1/10 (то есть 12,0 мг). По результатам оценки влияния различных физико-химических факторов обнаружилось, что рН раствора оказывает большое влияние на растворимость HL217. Таким образом, при регулировке рН в диапазоне 4,5±0,5 среди различных факторов был получен прозрачный раствор без выпадения осадка. В частности, в соответствии с компонентами и количествами, указанными в таблице 2, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, полиэтиленгликоль 400, глицерин, ЭДТК и борную кислоту. pН довели до уровня 4,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 2 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.[39] In relation to the dissolution of HL217 at a high concentration (at a concentration of 0.3 wt./vol.% or more), various physico-chemical factors were evaluated. Because the US Food and Drug Administration has a US Food and Drug Administration limit of 50 mg/mL for polyethylene glycol 400, the amount of polyethylene glycol 400 was adjusted to 1/10 (i.e. 15.0 mg) and the amount of glycerin to evaluate the solubility of HL217 , respectively, was also corrected to 1/10 (i.e. 12.0 mg). Based on the results of evaluating the influence of various physicochemical factors, it was found that the pH of the solution has a great influence on the solubility of HL217. Thus, when adjusting the pH in the range of 4.5 ± 0.5, among various factors, a clear solution without precipitation was obtained. In particular, in accordance with the components and amounts indicated in Table 2, HL217, polyethylene glycol 400, glycerin, EDTA, and boric acid were added to sterile purified water with stirring. pH was adjusted to 4.5 using aqueous hydrochloric acid and/or aqueous sodium hydroxide; after that, sterile purified water was added to the solution to obtain the final volume. The numbers in table 2 reflect the amount of each component per 1 ml of the total volume.
[40] Таблица 2[40] Table 2
(pH 4,5)Manufacturing example 2-1
(pH 4.5)
(pH 4,5)Manufacturing example 2-2
(pH 4.5)
(pH 4,5)Manufacturing example 2-3
(pH 4.5)
[41] Как следует из результатов, приведенных в таблице 2, несмотря на то, что количество вспомогательных стабилизирующих веществ (то есть полиэтиленгликоля 400 и глицерина) составило 1/10, удалось получить прозрачные растворы без осадка при условии pH 4,5.[41] As shown in the results in Table 2, although the amount of stabilizing auxiliary substances (i.e., polyethylene glycol 400 and glycerin) was 1/10, it was possible to obtain clear solutions without sediment under the condition of pH 4.5.
[42] (2) Оценка стабильности[42] (2) Stability evaluation
[43] Растворы в Примерах изготовления 2-1, 2-2 и 2-3 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5%) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада. Количество продуктов распада измерялось как максимальное количество продуктов распада и общее количество продуктов распада с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) при следующих условиях.[43] The solutions in Manufacturing Examples 2-1, 2-2, and 2-3 were stored for 4 weeks refrigerated (5±3°C), at room temperature (25±2°C, 40±5% r.h.) and accelerated test conditions (40±2ºС, relative humidity 25%), respectively, in order to measure the amount of degradation products. The amount of degradation products was measured as the maximum amount of degradation products and the total amount of degradation products using high performance liquid chromatography (HPLC) under the following conditions.
[44] Условия ВЭЖХ[44] HPLC conditions
[45] - Детектор: спектрофотометр ультрафиолетовой и видимой области спектра (длина волны: 254 нм)[45] - Detector: UV-Visible spectrophotometer (wavelength: 254 nm)
[46] - Колонка: Luna C8 (4,6 * 250 мм, 5 мкм)[46] - Column: Luna C8 (4.6 * 250 mm, 5 µm)
[47] - Расход: 1,0 мл/мин.[47] - Flow rate: 1.0 ml/min.
[48] - Объем впрыска: 20 мкл[48] - Injection volume: 20 µl
[49] - Мобильная фаза: буферный раствор формиата аммония: ацетонитрил = 50 : 50[49] - Mobile phase: ammonium formate buffer solution: acetonitrile = 50 : 50
[50] (буферный раствор формиата аммония получили путем приведения pH раствора формиата аммония (10 мМ) к pH 5,5 с применением фосфорной кислоты)[50] (Ammonium formate buffer was prepared by adjusting the pH of an ammonium formate solution (10 mM) to pH 5.5 using phosphoric acid)
[51] - Температура колонки: примерно 30ºС[51] - Column temperature: approx. 30°C
[52] - Температура образца: примерно 4ºС[52] - Sample temperature: approx. 4°C
[53] Результаты, полученные раскрытым выше способом измерения количества продуктов распада, приведены ниже в таблицах 3-5.[53] The results obtained by the method of measuring the amount of degradation products disclosed above are shown in Tables 3-5 below.
[54] Таблица 3[54] Table 3
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-1Amount of Solution Decomposition Products in Manufacturing Example 2-1
[55] Таблица 4[55] Table 4
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-2Amount of Solution Decomposition Products in Manufacturing Example 2-2
[56] Таблица 5[56] Table 5
Количество продуктов распада раствора в Примере изготовления 2-3Amount of Solution Decomposition Products in Manufacturing Example 2-3
[57] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 3-5, растворы в Примерах изготовления 2-1, 2-2 и 2-3 демонстрируют значительное увеличение количества продуктов распада при любых условиях через 2 и 4 недели и потому не соответствуют допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и меньше, общее количество продуктов распада: 2% и меньше).[57] As follows from the results in Tables 3-5, the solutions in Manufacturing Examples 2-1, 2-2, and 2-3 show a significant increase in degradation products under all conditions after 2 and 4 weeks, and therefore do not meet the acceptable level. degradation products (maximum degradation products: 1% or less, total degradation products: 2% or less).
[58] Примеры 1 и 2: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217[58] Examples 1 and 2: Preparation of stable compositions of eye drops in the form of a solution containing HL217
[59] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора[59] (1) Preparation of eye drop compositions in the form of a solution
[60] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 6, были получены композиции глазных капель в форме раствора, содержащего пропиленгликоль вместо полиэтиленгликоля / глицерина. То есть в соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 6, в стерильную очищенную воду при перемешивании добавили HL217, пропиленгликоль, стабилизирующий агент или агенты (ЭДТК и/или трометамин), буферные агенты (борную кислоту и тетраборнокислый натрий) и хлорид бензалкония. pН довели до уровня 4,5 с использованием водного раствора хлористоводородной кислоты и/или водного раствора гидроксида натрия; после этого в раствор добавили стерильную очищенную воду до получения конечного объема. Количества в таблице 6 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.[60] In accordance with the components and amounts shown in table 6, were obtained compositions of eye drops in the form of a solution containing propylene glycol instead of polyethylene glycol/glycerin. That is, in accordance with the components and amounts shown in Table 6, HL217, propylene glycol, stabilizing agent or agents (EDTA and/or tromethamine), buffering agents (boric acid and sodium tetraborate) and benzalkonium chloride were added to sterile purified water with stirring. pH was adjusted to 4.5 using aqueous hydrochloric acid and/or aqueous sodium hydroxide; after that, sterile purified water was added to the solution to obtain the final volume. The numbers in table 6 reflect the amount of each component per 1 ml of the total volume.
[61] Таблица 6[61] Table 6
(pH 4,5)Example 1
(pH 4.5)
(pH 4,5)Example 2
(pH 4.5)
[62] (2) Оценка стабильности[62] (2) Stability evaluation
[63] Растворы в Примерах 1 и 2 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5% ) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 7 и 8.[63] The solutions in Examples 1 and 2 were stored for 4 weeks refrigerated (5±3°C), at room temperature (25±2°C, 40±5% r.h.) and under accelerated test conditions (40±2°C, r.h. humidity 25%), respectively, in order to measure the amount of decomposition products, performed similarly to paragraph (2) of Manufacturing Example 2. The results are shown in Tables 7 and 8 below.
[64] Таблица 7[64] Table 7
Количество продуктов распада раствора в Примере 1The amount of decomposition products of the solution in Example 1
[65] Таблица 8[65] Table 8
Количество продуктов распада раствора в примере 2The amount of decomposition products of the solution in example 2
[66] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 6-8, при использовании пропиленгликоля и приведении рН раствора к рН 4,5 были получены прозрачные растворы без выпадения осадка, а образование продуктов распада заметно снижалось при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний). Таким образом, композиции глазных капель соответствуют допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее). Кроме того, раствор, полученный с дополнительным добавлением трометамина в качестве стабилизирующего вещества, характеризовался незначительным повышением стабильности в условиях ускоренных испытаний по сравнению с раствором, в который трометамин не добавлялся, хотя это и не имеет значения.[66] As follows from the results in Tables 6-8, using propylene glycol and adjusting the pH of the solution to pH 4.5, clear solutions were obtained without precipitation, and the formation of degradation products was markedly reduced under any conditions (i.e., in a chilled state , at room temperature and under accelerated test conditions). Thus, eye drop compositions comply with the acceptable level of degradation products (maximum degradation products: 1% or less, total degradation products: 2% or less). In addition, the solution prepared with the additional addition of tromethamine as a stabilizing agent showed a slight increase in stability under accelerated test conditions compared to the solution without the addition of tromethamine, although this is not significant.
[67] Примеры 3 и 4: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217[67] Examples 3 and 4: Preparation of stable compositions of eye drops in the form of a solution containing HL217
[68] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора[68] (1) Preparation of eye drop compositions in the form of a solution
[69] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 9, были получены композиции глазных капель в форме раствора. То есть композиции глазных капель в форме раствора были получены аналогично Примеру 2 с увеличением концентрации HL217 до 5,0 мг/мл и 10,0 мг/мл соответственно. Количества в таблице 9 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.[69] In accordance with the components and quantities shown in table 9, were obtained compositions of eye drops in the form of a solution. That is, eye drop compositions in the form of a solution were obtained similarly to Example 2 with an increase in the concentration of HL217 to 5.0 mg/ml and 10.0 mg/ml, respectively. The numbers in table 9 reflect the amount of each component per 1 ml of the total volume.
[70] Таблица 9[70] Table 9
(pH 4,5)Example 3
(pH 4.5)
(pH 4,5)Example 4
(pH 4.5)
[71] (2) Оценка стабильности[71] (2) Stability evaluation
[72] Растворы в Примерах 3 и 4 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5%) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 10 и 11.[72] The solutions in Examples 3 and 4 were stored for 4 weeks refrigerated (5±3°C), at room temperature (25±2°C, 40±5% r.h.) and under accelerated test conditions (40±2°C, r.h. humidity 25%), respectively, in order to measure the amount of decomposition products, carried out similarly to paragraph (2) of production example 2. The results are shown in tables 10 and 11 below.
[73] Таблица 10[73] Table 10
Количество продуктов распада раствора в Примере 3The amount of decomposition products of the solution in Example 3
[74] Таблица 11[74] Table 11
Количество продуктов распада раствора в Примере 4The amount of decomposition products of the solution in Example 4
[75] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 9-11, при использовании пропиленгликоля и приведении рН раствора к рН 4,5 были получены прозрачные растворы, содержащие HL217 в высокой концентрации (например, 10 мг/мл) и соответствующие допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее) при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний). [75] As follows from the results in Tables 9-11, when using propylene glycol and adjusting the pH of the solution to pH 4.5, clear solutions were obtained containing HL217 at a high concentration (for example, 10 mg / ml) and corresponding to the acceptable level of products degradation (maximum degradation products: 1% or less, total degradation products: 2% or less) under all conditions (i.e. chilled, at room temperature, and under accelerated test conditions).
[76] Примеры с 5 по 7: Получение стабильных композиций глазных капель в форме раствора, содержащего HL217[76] Examples 5 to 7: Preparation of stable eye drop compositions in the form of a solution containing HL217
[77] (1) Получение композиций глазных капель в форме раствора[77] (1) Preparation of eye drop compositions in the form of a solution
[78] В соответствии с компонентами и количествами, приведенными в таблице 12, были получены композиции глазных капель в форме раствора. То есть композиции глазных капель в форме раствора были получены аналогично Примеру 2 с изменением концентрации пропиленгликоля до 1,0 мг/мл, 5,0 мг/мл и 20,0 мг/мл соответственно. Количества в таблице 12 отражают количество каждого компонента на 1 мл общего объема.[78] In accordance with the components and amounts shown in table 12, were obtained compositions of eye drops in the form of a solution. That is, eye drop compositions in the form of a solution were obtained similarly to Example 2 with a change in the concentration of propylene glycol to 1.0 mg/ml, 5.0 mg/ml and 20.0 mg/ml, respectively. The numbers in table 12 reflect the amount of each component per 1 ml of the total volume.
[79] Таблица 12[79] Table 12
(pH 4,5)Example 5
(pH 4.5)
(pH 4,5)Example 6
(pH 4.5)
(pH 4,5)Example 7
(pH 4.5)
[80] (2) Оценка стабильности[80] (2) Stability evaluation
[81] Растворы в примерах с 5 по 7 хранили в течение 4 недель в охлажденном состоянии (5±3ºС), при комнатной температуре (25±2ºС, относит. влажность 40±5% ) и в условиях ускоренных испытаний (40±2ºС, относит. влажность 25%), соответственно, с целью измерения количества продуктов распада, выполняемого аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблицах 13-15.[81] The solutions in Examples 5 to 7 were stored for 4 weeks refrigerated (5±3°C), at room temperature (25±2°C, 40±5% r.h.) and under accelerated test conditions (40±2°C, relative humidity 25%), respectively, for the purpose of measuring the amount of decomposition products, performed similarly to item (2) of Manufacturing Example 2. The results are shown in Tables 13 to 15 below.
[82] Таблица 13[82] Table 13
Количество продуктов распада раствора в Примере 5The amount of decomposition products of the solution in Example 5
[83] Таблица 14[83] Table 14
Количество продуктов распада раствора в Примере 6The amount of decomposition products of the solution in Example 6
[84] Таблица 15[84] Table 15
Количество продуктов распада раствора в Примере 7The amount of decomposition products of the solution in Example 7
[85] Как следует из результатов, приведенных в таблицах 12-15, при использовании пропиленгликоля в концентрациях от 1 мг/мл до 20 мг/мл были получены прозрачные растворы без выпадения осадка, соответствующие допустимому уровню продуктов распада (максимальное количество продуктов распада: 1% и менее, общее количество продуктов распада: 2% и менее) при любых условиях (то есть в охлажденном состоянии, при комнатной температуре и в условиях ускоренных испытаний). [85] As follows from the results in tables 12-15, using propylene glycol at concentrations from 1 mg/ml to 20 mg/ml, clear solutions were obtained without precipitation, corresponding to the acceptable level of degradation products (maximum number of degradation products: 1 % or less, total degradation products: 2% or less) under all conditions (i.e. chilled, at room temperature, and under accelerated test conditions).
[86] Экспериментальный пример 1: Испытание на светоустойчивость[86] Experimental Example 1: Light fastness test
[87] Светоустойчивость композиции глазных капель оценивали с использованием прозрачной тары [PurellPE1810E natural (GERRESHEIMER)] из прозрачного полиэтилена низкой плотности (ПЭНП), непрозрачной тары [PurellPE1810E white (GERRESHEIMER)] из непрозрачного ПЭНП и картонной коробки, соответственно. То есть композицию глазных капель, полученная согласно Примеру 2, хранили в условиях, указанных в нижеследующей таблице 16. Каждую испытуемую группу помещали в светооблучаемую камеру и подвергали воздействию света ультрафиолетового спектра в течение 40 часов при 5 Вт/м2 или видимого спектра в течение 40 часов при 30000 люкс/ч. После воздействия в течение 40 часов, количество продуктов распада измеряли аналогично пункту (2) Примера изготовления 2. Результаты приведены ниже в таблице 17.[87] The lightfastness of the eye drop formulation was evaluated using a transparent low-density polyethylene (LDPE) [PurellPE1810E natural (GERRESHEIMER)] container, an opaque LDPE opaque container [PurellPE1810E white (GERRESHEIMER)], and a carton, respectively. That is, the eye drop composition obtained according to Example 2 was stored under the conditions indicated in the following table 16. Each test group was placed in a light-irradiated chamber and exposed to ultraviolet light for 40 hours at 5 W/m 2 or visible light for 40 hours at 30,000 lux/h. After exposure for 40 hours, the amount of degradation products was measured in the same manner as in (2) of Manufacturing Example 2. The results are shown in Table 17 below.
[88] Таблица 16[88] Table 16
[89] Таблица 17[89] Table 17
[90] Как следует из результатов, приведенных в таблице 17, предпочтительна фасовка композиции глазных капель с содержанием HL217 в непрозрачную тару; более предпочтительна фасовка глазных капель с содержанием HL217 в непрозрачную тару с последующим хранением в картонной коробке.[90] As follows from the results shown in Table 17, it is preferable to package the eye drop composition containing HL217 in an opaque container; it is more preferable to pack eye drops containing HL217 in an opaque container with subsequent storage in a cardboard box.
[91] Экспериментальный пример 2: Тестирование эффективности на животных[91] Experimental Example 2: Animal Efficacy Testing
[92] Эффективность ингибирования дегенеративных процессов желтого пятна продемонстрирована на мышах с нокаутом гена рецептора липопротеинов очень низкой плотности (vldlr) (мыши C57B1/6, Jackson Laboratory, США) в качестве животной модели возрастных дегенеративных процессов желтого пятна (AMD). Инъекция LucentisTM (Norvatis, Базель, Швейцария) использовалась для положительного контроля.[92] The efficacy of inhibition of macular degenerative processes was demonstrated in very low density lipoprotein receptor (vldlr) gene knockout mice (C57B1/6 mice, Jackson Laboratory, USA) as an animal model of age-related macular degenerative processes (AMD). An injection of Lucentis TM (Norvatis, Basel, Switzerland) was used as a positive control.
[93] В контрольной группе в каждый глаз нормальной мыши (n=8) закапывали по 1 капле стерильного физиологического раствора два раза в день в течение 3 недель. В группе с индуцированным AMD в каждый глаз мыши с нокаутом гена vldlr (мышь vldlr) закапывали по 1 капле стерильного физиологического раствора два раза в день в течение 3 недель. В группе положительного контроля в каждый глаз мыши vldlr вводили 1 мкл LucentisTM (содержащую ранибизумаб в количестве 50 нг/мкл) однократно интравитреально с использованием шприца Hamiltion (компания Hamilton, Рино, Невада, США). В испытуемой группе в каждый глаз мыши vldlr закапывали по 1 капле глазных капель согласно Примеру 2 два раза в день в течение 3 недель.[93] In the control group, 1 drop of sterile saline solution was instilled into each eye of a normal mouse (n=8) twice a day for 3 weeks. In the AMD-induced group, 1 drop of sterile saline solution was instilled into each eye of the vldlr knockout mouse (vldlr mouse) twice daily for 3 weeks. In the positive control group, 1 μl of Lucentis TM (containing ranibizumab at 50 ng/μl) was injected into each eye of vldlr mice once intravitreally using a Hamiltion syringe (Hamilton, Reno, Nevada, USA). In the test group, 1 drop of eye drops according to Example 2 was instilled into each eye of vldlr mice twice a day for 3 weeks.
[94] Для оценки любых аномалий сосудов сетчатки, в частности, образования ангиогенеза и аномальной проницаемости кровеносных сосудов, были проведены следующие эксперименты. При аутопсии выполнили анестезию внутрибрюшинной инъекцией золазепама (Zoletil, Virbac, Карро, Франция) в количестве 10 мг/кг и ксилазина гидрохлорида (Rumpun, Bayer, Франкфурт, Германия) в количестве 10 мг/кг. Для фиксации сердца разрезали брюшную полость и грудная клетку; после чего в левый желудочек ввели 50 мг/мл меченого флуоресцеином декстрана (молекулярная масса 10 кДа, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) и 10 мг/мл красителя Hoechst 33342 (Sigma) в стерильном фосфатно-солевом буфере (1 мл). По истечении 10 минут глаз извлекли и зафиксировали в 4% параформальдегиде на 2 часа для изоляции сетчатки. Изолированную сетчатку поместили на стекло, покрыли каплей водной заливочной среды (Fluoromount™, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), после чего наблюдали под флуоресцентным микроскопом. Для количественного анализа красителя из сердца взяли кровь через 10 минут после инъекции красителя со стерильным фосфатно-солевым буфером, предназначенным для удаления остаточного красителя из кровеносных сосудов, после чего извлекли глаза для изоляции сетчатки глаз. Изолированную сетчатку гомогенизировали 100 мкл фосфатно-солевого буфера, после чего центрифугировали для получения надосадочной жидкости, в которой спектрофлуорофотометром измерили количество FITC-декстрана. Интенсивность флуоресценции измерили в условиях возбуждения 485 нм и излучения 530 нм, и рассчитали с помощью калибровки значений флуоресценции FITC и концентрации ретиналевого белка в крови. Результаты представлены на ФИГ. 1.[94] The following experiments were performed to evaluate any retinal vascular anomalies, in particular angiogenesis formation and abnormal blood vessel permeability. Autopsy was anesthetized with an intraperitoneal injection of zolazepam (Zoletil, Virbac, Carro, France) at 10 mg/kg and xylazine hydrochloride (Rumpun, Bayer, Frankfurt, Germany) at 10 mg/kg. For fixation of the heart, the abdominal cavity and chest were cut; after which 50 mg/ml of fluorescein-labeled dextran (molecular weight 10 kDa, Sigma, St. Louis, MO, USA) and 10 mg/ml of
[95] Кроме того, для оценки субретинального ангиогенеза были проведены следующие эксперименты. Изолированную ткань сетчатки зафиксировали 4% параформальдегидом на 1 час, после чего в течение 2 часов ввели в реакцию с конъюгированным Griffonia bandeiraea simplicifolia изолектином В4 (IB4 Alexa Fluor 594, разбавление 1:100; молекулярные зонды, США). После достаточного промывания фосфатно-солевым буфером ткань сетчатки поместили на стекло и покрыли каплями водной заливочной среды (FluoromountTM, Sigma, Сент-Луис, Миссури, США). После достаточной просушки продукт реакции наблюдали под флуоресцентным микроскопом и фотографировали. Разрез сетчатки окрасили гематоксилин–эозином, после чего с помощью программного обеспечения ImageJ (Национальный институт здоровья Бетесда, Мэриленд, США) провели анализ субретинальной реваскуляризации. Результаты представлены на ФИГ. 2.[95] In addition, the following experiments were performed to evaluate subretinal angiogenesis. Isolated retinal tissue was fixed with 4% paraformaldehyde for 1 hour, after which it was reacted with Griffonia bandeiraea simplicifolia conjugated isolectin B4 (IB4 Alexa Fluor 594, dilution 1:100; molecular probes, USA) for 2 hours. After sufficient washing with phosphate-buffered saline, the retinal tissue was placed on glass and covered with drops of aqueous embedding medium (FluoromountTM, Sigma, St. Louis, MO, USA). After sufficient drying, the reaction product was observed under a fluorescent microscope and photographed. The retinal section was stained with hematoxylin-eosin, after which subretinal revascularization analysis was performed using ImageJ software (Bethesda National Institutes of Health, Maryland, USA). The results are shown in FIG. 2.
[96] Как показано на ФИГ. 1, у нормальных мышей граница кровеносных сосудов была четкой, и нормальная целостность сосудов поддерживалась на должном уровне. Однако у мышей vldlr флуоресцентный краситель, введенный в кровеносные сосуды, вытекал из кровеносных сосудов (белая стрелка) с увеличением интенсивности флуоресценции сетчатки. Кроме того, из кровеносных сосудов вытек окрашивающий материал Hoechst 33342, вызывающий синюю флуоресценцию, вследствие чего были отмечены многочисленные случаи транссудации; наблюдались области субретинальной реваскуляризации (красная стрелка). Тем не менее, в глазах, обработанных глазными каплями согласно примеру 2, транссудации и патологический ангиогенез были ингибированы. Группа положительного контроля показала значительную эффективность только на второй неделе введения препарата.[96] As shown in FIG. 1, in normal mice, the border of the blood vessels was clear, and the normal integrity of the vessels was maintained at the proper level. However, in vldlr mice, fluorescent dye injected into blood vessels leaked out of the blood vessels (white arrow) with increasing retinal fluorescence intensity. In addition, the
[97] Как показано на ФИГ. 2, при анализе окрашивания изолектином В4 у мышей vldlr были обнаружены субретинальные неоваскулярные пучки (белая стрелка) в разных местах, однако их площадь уменьшалась при введении глазных капель согласно Примеру 2. Кроме того, при анализе окрашивания разрезов сетчатки гематоксилин–эозином у мышей vldlr были обнаружены многочисленные аномальные реваскуляризации в субретинальной области (область стрелки), уменьшавшиеся при введении глазных капель согласно Примеру 2.[97] As shown in FIG. 2, analysis of isolectin B4 staining in vldlr mice revealed subretinal neovascular tufts (white arrow) at various locations, but their area decreased with the administration of eye drops according to Example 2. In addition, analysis of hematoxylin-eosin staining of retinal incisions in vldlr mice showed numerous abnormal revascularizations were found in the subretinal region (arrow area), which decreased with the introduction of eye drops according to Example 2.
Claims (14)
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2018-0024470 | 2018-02-28 | ||
| KR1020180024470A KR102478553B1 (en) | 2018-02-28 | 2018-02-28 | Eye drop formulation in a solution form comprising a benzopyran derivative or pharmaceutically acceptable salt therof |
| PCT/KR2019/001894 WO2019168289A1 (en) | 2018-02-28 | 2019-02-18 | Eye drops in form of solution comprising benzopyran derivative or pharmaceutically acceptable salt thereof |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2020125724A RU2020125724A (en) | 2022-03-28 |
| RU2020125724A3 RU2020125724A3 (en) | 2022-04-29 |
| RU2778515C2 true RU2778515C2 (en) | 2022-08-22 |
Family
ID=
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0930966A (en) * | 1995-07-24 | 1997-02-04 | Gakuzo Tamura | New pharmaceutical preparation for eye |
| EP2692345A2 (en) * | 2011-03-30 | 2014-02-05 | Korea Research Institute Of Chemical Technology | Pharmaceutical composition for preventing or treating macular degeneration |
| EP2818180A1 (en) * | 2012-02-24 | 2014-12-31 | Markov, Ilya Aleksandrovich | Antiviral eye drops |
| WO2015186713A1 (en) * | 2014-06-03 | 2015-12-10 | 株式会社明治 | Container, containerized enteral nutrient or containerized food or beverage, method for inspecting containerized enteral nutrient or containerized food or beverage, and method for manufacture thereof |
| WO2017018760A1 (en) * | 2015-07-29 | 2017-02-02 | 국제약품주식회사 | Non-irritant ophthalmic composition containing cyclosporin, and convenient preparation method |
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0930966A (en) * | 1995-07-24 | 1997-02-04 | Gakuzo Tamura | New pharmaceutical preparation for eye |
| EP2692345A2 (en) * | 2011-03-30 | 2014-02-05 | Korea Research Institute Of Chemical Technology | Pharmaceutical composition for preventing or treating macular degeneration |
| EP2818180A1 (en) * | 2012-02-24 | 2014-12-31 | Markov, Ilya Aleksandrovich | Antiviral eye drops |
| WO2015186713A1 (en) * | 2014-06-03 | 2015-12-10 | 株式会社明治 | Container, containerized enteral nutrient or containerized food or beverage, method for inspecting containerized enteral nutrient or containerized food or beverage, and method for manufacture thereof |
| WO2017018760A1 (en) * | 2015-07-29 | 2017-02-02 | 국제약품주식회사 | Non-irritant ophthalmic composition containing cyclosporin, and convenient preparation method |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KIM J et al. HL-217, a new topical anti-angiogenic agent, inhibits retinal vascular leakage and pathogenic subretinal neovascularization in Vldlr⁻/⁻ mice. Biochem Biophys Res Commun., 2015, 456(1):53-8. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2018202986B2 (en) | ANG-(1-7) derivative oligopeptides and methods for using and producing the same | |
| JP5914486B2 (en) | Caspofungin composition | |
| EA034839B1 (en) | Ophthalmic solution | |
| KR20170109976A (en) | Treatment of retinitis pigmentosa using hyaluronic acid-carbon nano material-photosensitizer complex | |
| JPWO2018235939A1 (en) | Ophthalmic composition containing clathrated antioxidant and use thereof | |
| RU2315623C2 (en) | Liquid preparation containing camptothecin derivative and pharmaceutical composition prepared by lyophilization of preparation | |
| RU2532354C1 (en) | INJECTABLE FORM OF 5α ANDROSTANE-3β,5,6β-TRIOL AND METHOD FOR PREPARING IT | |
| RU2404768C1 (en) | Eye drops | |
| JP7400180B2 (en) | Parenteral preparations and their use | |
| RU2778515C2 (en) | Eye drops in form of solution containing benzopyran derivative or its pharmaceutically acceptable salt | |
| US11771647B2 (en) | Eye drops in form of solution comprising benzopyran derivative or pharmaceutically acceptable salt thereof | |
| US20220411482A1 (en) | Stable formulations of silk-derived protein | |
| RU2513997C1 (en) | Combined ophthalmic preparation presented in form of eye drops and containing polyhexamethylene guanidine and taurine | |
| CN107660198B (en) | Surgical methods especially for ophthalmic surgery and dye molecules and dye preparations for staining proteins | |
| KR20230117342A (en) | Peptide preparations and ophthalmic uses thereof | |
| JPH0797331A (en) | Intraocular perfusate | |
| KR20170030494A (en) | Therapeutic agent for keratoconjunctive disorder | |
| JP5079503B2 (en) | Radical scavenger and active oxygen scavenger | |
| TW202426032A (en) | Pharmaceutical composition of echinocandin analogue and preparation method thereof | |
| CN101396361A (en) | Medicine composition containing L-carnosine for suspending the development of the cataract | |
| WO2017060923A1 (en) | Freeze dried parenteral formulation of micafungin sodium and to process thereof | |
| WO2024148131A1 (en) | Organic solvent free drug microcrystals | |
| JP2003313123A (en) | Composition for preventing and/or treating ophthalmopathy (excluding ophthalmopathy caused by dry eye) caused by apoptosis | |
| EP3220954A2 (en) | Process for preparation of parenteral formulation of anidulafungin | |
| CA3243814A1 (en) | Peptides and methods of use thereof in treating ocular disorders |