[go: up one dir, main page]

RU2773173C2 - Use of copaifera oleoresins in prostate pathologies - Google Patents

Use of copaifera oleoresins in prostate pathologies Download PDF

Info

Publication number
RU2773173C2
RU2773173C2 RU2019132832A RU2019132832A RU2773173C2 RU 2773173 C2 RU2773173 C2 RU 2773173C2 RU 2019132832 A RU2019132832 A RU 2019132832A RU 2019132832 A RU2019132832 A RU 2019132832A RU 2773173 C2 RU2773173 C2 RU 2773173C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
oleoresin
copaifera
diterpene
acids
fraction
Prior art date
Application number
RU2019132832A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2019132832A (en
RU2019132832A3 (en
Inventor
Кристель ФЬЁРИНИ-ПЮИБАРЕ
Original Assignee
Пьер Фабр Медикамент
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR1752284A external-priority patent/FR3063906B1/en
Application filed by Пьер Фабр Медикамент filed Critical Пьер Фабр Медикамент
Publication of RU2019132832A publication Critical patent/RU2019132832A/en
Publication of RU2019132832A3 publication Critical patent/RU2019132832A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2773173C2 publication Critical patent/RU2773173C2/en

Links

Abstract

FIELD: pharmaceutics; urology.
SUBSTANCE: group of present inventions relates to the field of pharmaceutics, namely to urology, and it is the use of Copaifera oleoresin as a medical product intended for the treatment or prevention of benign prostatic hyperplasia, where Copaifera is selected from C. officinalis and C. multijuga. The group of inventions also relates to a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of benign prostatic hyperplasia.
EFFECT: expansion of the arsenal of means of specific purpose.
4 cl, 5 tbl, 4 ex

Description

Настоящее изобретение относится к применению олеорезина Copaifera для предупреждения и/или лечения заболеваний простаты, в частности доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.The present invention relates to the use of Copaifera oleoresin for the prevention and/or treatment of diseases of the prostate, in particular benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Род Copaifera включает 35 видов, которые все представляют собой деревья из тропической Америки, т.е. Мексики, северной Аргентины и, главным образом, Бразилии. На данной территории имеется более чем 20 видов, причем самыми массовыми являются С. officinalis, С. reticulata, С. multijuga. Copaifera officinalis представляет собой дерево, обнаруживаемое, главным образом, в Бразилии, Колумбии и Венесуэле. Оно имеет красновато-коричневую древесину и вырастает до 25 м. Листья являются сложными, парноперистыми с 2-10 листочками, чередующимися или супротивными, короткоостроконечными и неравно закругленными в основании. Они имеют длину 3-8 см и ширину 2-4 см. Белые цветки, обычно сидячие, группируются в соцветия размером 7-14 см. Плоды представляют собой маленькие стручки, набухающие при созревании, с диаметром 20-25 мм, гладкие, короткоостроконечные, содержащие яйцевидное семя.The genus Copaifera includes 35 species, all of which are trees from tropical America, i.e. Mexico, northern Argentina and mainly Brazil. There are more than 20 species in this territory, and the most widespread are C. officinalis, C. reticulata, C. multijuga. Copaifera officinalis is a tree found mainly in Brazil, Colombia and Venezuela. It has reddish-brown wood and grows up to 25 m. The leaves are compound, paripinnate with 2-10 leaflets, alternate or opposite, short-spiky and unequally rounded at the base. They are 3-8 cm long and 2-4 cm wide. The white flowers, usually sessile, cluster in inflorescences 7-14 cm in size. The fruits are small pods that swell when ripe, 20-25 mm in diameter, smooth, short-pointed, containing ovoid seeds.

Олеорезин представляет собой вещество, получаемое надрезанием коры нескольких видов Copaifera. Располагается в переплетенных секреторных каналах вторичной древесины и мякоти, следовательно, его экстракция требует очень глубоких надрезов ствола, что обеспечивает его естественное вытекание из дерева.Oleoresin is a substance obtained by cutting the bark of several species of Copaifera. It is located in the intertwined secretory channels of secondary wood and pulp, therefore, its extraction requires very deep cuts in the trunk, which ensures its natural flow from the tree.

После паровой дистилляции или гидродистилляции становится возможным получение из олеорезина копайского эфирного масла, знаменитого в парфюмерии.After steam distillation or hydrodistillation, it becomes possible to obtain from oleoresin the essential oil of Copay, famous in perfumery.

Олеорезин копаибы использовался в медицине коренным населением Бразилии с XVI столетия. Он имеет длительную историю применения в традиционной бразильской медицине для лечения ран и удаления шрамов, в качестве жаропонижающего, антисептика мочевыводящих путей, против лейкореи и гонореи. При рассмотрении в качестве общего тонического средства, его показания были следующими: венерические заболевания, респираторные заболевания, астма, ревматизм, вторичные поражения кожи, язвы. В низких дозах он является стимулятором с прямым действием на желудок. Олеорезин копаибы снижает избыточную секрецию слизи, вызванную воспалением. В настоящее время олеорезин копаибы продается в капсулах в аптеках в Бразилии, где он показан для всех типов внутреннего воспаления и язв желудка. При местном нанесении он является мощным антисептическим и противовоспалительным заживляющим средством, он помогает излечивать самые сложные раны. Указывают на то, что олеорезин копаибы является очень эффективным при суставной боли, доброкачественных растяжениях связок, гематомах, тендините. Олеорезин наносят непосредственно на кожу. Олеорезин также используют в качестве массажного масла в отношении болезненных или воспаленных мышц и суставов.Copaiba oleoresin has been used medicinally by the indigenous population of Brazil since the 16th century. It has a long history of use in traditional Brazilian medicine for the treatment of wounds and scars, as an antipyretic, urinary tract antiseptic, against leukorrhea and gonorrhea. When considered as a general tonic, its indications were as follows: venereal diseases, respiratory diseases, asthma, rheumatism, secondary skin lesions, ulcers. In low doses, it is a stimulant with a direct effect on the stomach. Copaiba oleoresin reduces excess mucus secretion caused by inflammation. Copaiba oleoresin is currently sold in capsules in pharmacies in Brazil, where it is indicated for all types of internal inflammation and stomach ulcers. When applied topically, it is a powerful antiseptic and anti-inflammatory healing agent, it helps to heal the most difficult wounds. Copaiba oleoresin has been shown to be very effective for joint pain, benign sprains, hematomas, and tendinitis. Oleoresin is applied directly to the skin. Oleoresin is also used as a massage oil for painful or inflamed muscles and joints.

В предшествующем уровне техники раскрыто то, что белки-шапероны (такие как HSP27 (белок теплового шока 27)) способствуют резистентности к химиотерапии химическими средствами в раковых тканях, и, таким образом, описывается то, что хардвиковая кислота из масла Copaifera ингибирует HSP27. Исследование по данной теме нацелено на идентификацию других ингибиторов шаперонов в масле Copaifera (Phytochemistry Letters, 10 (2014); 65-75). В одном таком документе показано то, что некислотная фракция и только одна кислотная подфракция (без дитерпеновых кислот или сложных эфиров дитерпеновых кислот) данного масла имеет антипролиферативную активность. Другие подфракции (т.е. кислотные) демонстрируют антишаперонную активность. Данный документ, таким образом, нацелен на очень специфический случай, а именно на комбинацию масла Copaifera с химиотерапевтическим лечением химическим агентом для того, чтобы противодействовать резистентности раковых клеток к указанному лечению химическим средством. В данном документе делается заключение о том, что только хардвиковая кислота из масла Copaifera является активной в комбинации с антинеопластическим средством, которое представляет собой антираковое средство, для ингибирования белков-шаперонов, которые представляюет собой агенты, способствующие резистентности к указанному противораковому агенту.The prior art discloses that chaperone proteins (such as HSP27 (heat shock protein 27)) contribute to chemotherapy resistance in cancerous tissues, and thus describes that hardvic acid from Copaifera oil inhibits HSP27. Research on this topic aims to identify other chaperone inhibitors in Copaifera oil (Phytochemistry Letters, 10 (2014); 65-75). One such document shows that the non-acidic fraction and only one acidic subfraction (no diterpene acids or diterpene acid esters) of a given oil has anti-proliferative activity. Other subfractions (ie, acidic) show anti-chaperone activity. This document is thus aimed at a very specific case, namely the combination of Copaifera oil with chemotherapy treatment with a chemical agent in order to counteract the resistance of cancer cells to said treatment with a chemical agent. This document concludes that only hardvic acid from Copaifera oil is active in combination with an antineoplastic agent, which is an anti-cancer agent, to inhibit chaperone proteins, which are agents that promote resistance to said anti-cancer agent.

Олеорезин копаибы, возможно подвергнутый перегонке, также используется в косметике, в изготовлении мыл, пен для ванны, детергентов и кремов, и в качестве фиксатора в парфюмерии. Олеорезин иногда используется в качестве корригента в пищевой промышленности. Олеорезин копаибы также используется в качестве вещества для художников, в частности, в рецептах масляных красок и в декоративной керамике.Copaiba oleoresin, possibly distilled, is also used in cosmetics, soaps, bath foams, detergents and creams, and as a fixative in perfumes. Oleoresin is sometimes used as a flavoring agent in the food industry. Copaiba oleoresin is also used as an artist's substance, particularly in oil paint recipes and in decorative pottery.

Олеорезин представляет собой бесцветную и легкоподвижную жидкость, которая с течением времени принимает масляную консистенцию и зеленовато-желтый цвет. Его консистенция и цвет слегка варьируют, в зависимости от дерева, из которого он происходит, и от эфирного масла, находящегося там. Его запах является сильным и неприятным, его вкус является горьким и жгучим. Олеорезин является нерастворимым в воде, полностью растворимым в спирте и в простом эфире.Oleoresin is a colorless and easily mobile liquid, which over time takes on an oily consistency and a greenish-yellow color. Its consistency and color vary slightly, depending on the tree it comes from and the essential oil found there. Its odor is strong and unpleasant, its taste is bitter and burning. Oleoresin is insoluble in water, completely soluble in alcohol and ether.

Олеорезин С. officinalis состоит из двух фракций, которые различаются их летучестью; каждая из фракций характеризуется следующими отличными химическими соединениями:The C. officinalis oleoresin consists of two fractions that differ in their volatility; each of the fractions is characterized by the following distinct chemical compounds:

- «летучее» эфирное масло, составляющее 50-90% олеорезина, которое, главным образом, состоит из сесквитерпенов. Среди данных сесквитерпенов могут быть различены, главным образом, гемакрен D, (Е)-β-кариофиллен, β- и δ-элемен, α-иланген, α-гурюнен, α-хумулен. Меньшая часть сесквитерпенов представляет собой α-кубепен, α-копаен, 7-эпи-сесквитуен, цис- и транс-α-бергамотен, сесквисабинен-А и -В, 4αН, 10αН-гуайя-1(5),6-диен, алло-аромаденрен, γ-ууролен, α-аморфен, β-селинен, бициклиосесквифилландрен, α-мууролен, β-бисаболен, γ-кадинен, δ-кадинен, цис-каламен, зонарен, какина-1'4-диен, α-кадинен, α-калакорен, селина-3,7(11)-диен, гермакрен В. Это летучее масло является очень прозрачным, бесцветным, с очень отчетливым запахом и вкусом,- "volatile" essential oil, constituting 50-90% oleoresin, which mainly consists of sesquiterpenes. Among these sesquiterpenes, mainly hemacrene D, (E)-β-caryophyllene, β- and δ-elemen, α-ylangen, α-gurunene, α-humulene can be distinguished. A minority of sesquiterpenes are α-cubepene, α-copaene, 7-epi-sesquituene, cis- and trans-α-bergamoten, sesquisabinen-A and -B, 4αH, 10αH-guaia-1(5),6-diene, allo-aromadenrene, γ-urolene, α-amorphene, β-selinene, bicycliosesquiphyllandrene, α-muurolene, β-bisabolene, γ-cadinene, δ-cadinene, cis-calamen, zonarene, kakina-1'4-diene, α- cadinene, α-calacorene, selina-3,7(11)-diene, germacrene B. This volatile oil is very clear, colorless, with a very distinct odor and taste,

- «нелетучая фракция», составляющая 10-50% олеорезина, которая, главным образом, состоит из следующих дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот: копаловая кислота, копаифероловая кислота, сложный диметиловый эфир агатендиоевой кислоты, агатовая кислота, сложный метиловый эфир 3β-гидроксиантикопаловой кислоты, хардвиковая кислота, 7α-ацетоксихардвиковая кислота. Этот остаток перегонки представляет собой вязкую жидкость с ароматическим запахом и темно-коричневым цветом.- the "non-volatile fraction", comprising 10-50% of oleoresin, which mainly consists of the following diterpene acids and/or diterpene acid esters: copalic acid, copaiferolic acid, agatendioic acid dimethyl ester, agate acid, 3β methyl ester -hydroxyanticopalic acid, hardvic acid, 7α-acetoxyhardvic acid. This distillation residue is a viscous liquid with an aromatic odor and a dark brown color.

Неожиданно, авторы данного изобретения показали то, что олеорезин Copaifera имеет особенно полезную анти-5α-редуктазную активность.Surprisingly, the present inventors have shown that Copaifera oleoresin has a particularly useful anti-5α-reductase activity.

Роль ингибиторов 5α-редуктазы устанавливается в патофизиологии простаты (Rittmaster, Journal of Andrology, vol. 18, no. 6, 1997), в частности, при доброкачественной гиперплазии простаты и при раке простаты.The role of 5α-reductase inhibitors is being established in the pathophysiology of the prostate (Rittmaster, Journal of Andrology, vol. 18, no. 6, 1997), in particular in benign prostatic hyperplasia and prostate cancer.

Простата представляет собой наибольшую экзокринную железу в мужской мочеполовой системе. Она располагается на пересечении половых и мочевыводящих путей. Наряду с семенными пузырьками, простата играет существенную роль в синтезе и высвобождении семенной жидкости. Она более опосредованно способствует циклу мочеиспускания-воздержания через ее гладкомышечный компонент. Наконец, простата окружена сосудистыми и нервными ножками, участвующими в мужской сексуальной реакции. С возрастом анатомические изменения в предстательной железе иногда могут быть причиной расстройств мочеиспускания и сексуальных дисфункций, которые приводят к снижению качества жизни.The prostate is the largest exocrine gland in the male genitourinary system. It is located at the intersection of the genital and urinary tracts. Along with the seminal vesicles, the prostate plays an essential role in the synthesis and release of seminal fluid. It contributes more indirectly to the urination-abstinence cycle through its smooth muscle component. Finally, the prostate is surrounded by vascular and neural peduncles involved in the male sexual response. With age, anatomical changes in the prostate gland can sometimes cause urinary disorders and sexual dysfunctions, which lead to a decrease in the quality of life.

Простата может быть местом трех главных заболеваний: простатита, аденомы простаты или доброкачественной гиперплазии простаты и рака простаты. Однако к настоящему времени известно то, что 5α-редуктаза участвует только в доброкачественной гиперплазии простаты и раке простаты.The prostate can be the site of three major diseases: prostatitis, prostate adenoma or benign prostatic hyperplasia, and prostate cancer. However, 5α-reductase is currently known to be involved only in benign prostatic hyperplasia and prostate cancer.

Доброкачественная гиперплазия простаты представляет собой обычное состояние, стимулируемое старением и связанное с развитием аденомы простаты, ответственной за хроническую обструкцию в отношении опустошения мочевого пузыря. Доброкачественная гиперплазия простаты отличается увеличением размера предстательной железы. Большая простата сдавливает мочеиспускательный канал при давлении на мочевой пузырь, приводя к частой потребности к мочеиспусканию и разным проблемам с мочеиспусканием, слабой и прерывающейся струе, боли и т.д. Почти все мужчины склонны к доброкачественной гиперплазии простаты по мере их старения. В самом деле, больше, чем 50% мужчин в возрасте 60 лет имеют ее, и 90% мужчин в возрасте старше 80 лет. Однако не все из них страдают от нее, так как один из двух мужчин обеспокоен симптомами, связанными с мочеиспусканием. Причины данного состояния ясно не установлены, возможно, имеется наследственная предрасположенность, но могут играть роль и другие факторы. Однако к данному состоянию не нужно относиться легкомысленно, так как есть несколько возможных осложнений, таких как инфекции мочевыводящих путей, острая задержка мочеиспускания, камни в мочевом пузыре и повреждение почек.Benign prostatic hyperplasia is a common condition stimulated by aging and associated with the development of prostate adenoma responsible for chronic obstruction in terms of bladder emptying. Benign prostatic hyperplasia is characterized by an increase in the size of the prostate gland. A large prostate compresses the urethra with pressure on the bladder, leading to frequent urination and various urinary problems, weak and intermittent flow, pain, etc. Almost all men are prone to benign prostatic hyperplasia as they age. In fact, more than 50% of men over the age of 60 have it, and 90% of men over the age of 80. However, not all of them suffer from it, as one in two men is concerned about symptoms associated with urination. The causes of this condition are not clearly established, there may be a hereditary predisposition, but other factors may play a role. However, this condition should not be taken lightly as there are several possible complications such as urinary tract infections, acute urinary retention, bladder stones and kidney damage.

Рак простаты является обычным заболеванием, которое является вторым самым обычным мужским раковым заболеванием в промышленно развитых странах. Вероятно имеется генетическая предрасположенность. Большинство раковых заболеваний простаты прогрессирует очень медленно. Часто опухоль остается локализованной в предстательной железе и имеет ограниченное влияние на здоровье, иногда вызывая мочеиспускательную или эректильную дисфункцию. Однако некоторые раковые заболевания простаты могут прогрессировать и распространяться быстрее. Аденокарцинома является самой обычной формой рака простаты. Она представляет примерно 95% случаев. Тяжесть рака зависит от степени развития опухоли и от типа раковых клеток.Prostate cancer is a common disease, which is the second most common male cancer in industrialized countries. There is probably a genetic predisposition. Most prostate cancers progress very slowly. Often the tumor remains localized in the prostate gland and has limited health effects, sometimes causing urinary or erectile dysfunction. However, some prostate cancers can progress and spread more quickly. Adenocarcinoma is the most common form of prostate cancer. It represents approximately 95% of cases. The severity of cancer depends on the extent of the tumor and the type of cancer cells.

Тестостерон стимулирует рост простаты посредством одного из его метаболитов - дигидротестостерона. Тестостерон превращается в дигидротестостерон действием 5α-редуктазы. Дигидротестостерон имеет высокую аффинность связывания в отношении рецептора андрогена. По сравнению с тестостероном дигидротестостерон стимулирует транскрипционную активность клеток простаты в 2-10 раз. Дигидротестостерон имеет значительно более мощный стимулирующий эффект на рост опухоли простаты ex vivo, чем тестостерон. У мужчин с симптоматической доброкачественной гиперплазией простаты ингибирование 5α-редуктазы уменьшает объем простаты, улучшает симптомы и диурез, и снижает риск острой задержки мочеиспускания.Testosterone stimulates prostate growth through one of its metabolites, dihydrotestosterone. Testosterone is converted to dihydrotestosterone by the action of 5α-reductase. Dihydrotestosterone has a high binding affinity for the androgen receptor. Compared to testosterone, dihydrotestosterone stimulates the transcriptional activity of prostate cells by 2-10 times. Dihydrotestosterone has a significantly more potent ex vivo stimulating effect on prostate tumor growth than testosterone. In men with symptomatic benign prostatic hyperplasia, 5α-reductase inhibition reduces prostate volume, improves symptoms and urine output, and reduces the risk of acute urinary retention.

Имеются две изоформы 5α-редуктазы - 5αR1 и 5αR2, которые кодируются, соответственно, двумя отличными генами - SRD5A1 и SRD5A2, расположенными на отдельных хромосомах. Изозим 5αR2 встречается, главным образом, в мужских репродуктивных тканях, семенных пузырьках, эпидимисе и простате, тогда как изозим 5αR1 выявляется, главным образом, в печени и коже. 5αR2 присутствует в ткани простаты в высоких концентрациях и имеет высокую аффинность в отношении тестостерона. Финастерид является мощным ингибитором 5αR2 с полумаксимальной ингибирующей концентрацией (ИК50) 69 нМ, но который значительно менее эффективен в ингибировании 5αR1 - ИК50 360 нМ. В отличие от этого, дутастерид аналогично ингибирует и 5αR1, и 5αR2 - ИК50 6 нМ и 7 нМ соответственно. Дутастерид, по-видимому, является более эффективным, чем финастерид, соответственно, 94,7% относительно 70,8%, в снижении средних сывороточных уровней дигидротестостерона. Внутри простаты наблюдали большее снижение уровня дигидротестостерона при использовании дутастерида, свидетельствующее о том, что 5αR1, по-видимому, способствует синтезу дигидротестостерона внутри простаты. Роль 5α-редуктазы в ингибировании рака простаты была описана в животных моделях.There are two isoforms of 5α-reductase, 5αR1 and 5αR2, which are encoded by two distinct genes, SRD5A1 and SRD5A2, respectively, located on separate chromosomes. The 5αR2 isozyme occurs mainly in male reproductive tissues, seminal vesicles, epidymis and prostate, while the 5αR1 isozyme is found mainly in the liver and skin. 5αR2 is present in high concentrations in prostate tissue and has a high affinity for testosterone. Finasteride is a potent 5αR2 inhibitor with a half-maximal inhibitory concentration (IC 50 ) of 69 nM, but which is significantly less effective in inhibiting 5αR1 - IC 50 360 nM. In contrast, dutasteride similarly inhibits both 5αR1 and 5αR2 - IC 50 6 nM and 7 nM, respectively. Dutasteride appears to be more effective than finasteride, respectively, 94.7% vs. 70.8%, in reducing mean serum dihydrotestosterone levels. Within the prostate, a greater decrease in dihydrotestosterone levels was observed with dutasteride, indicating that 5αR1 appears to promote intraprostatic dihydrotestosterone synthesis. The role of 5α-reductase in the inhibition of prostate cancer has been described in animal models.

Согласно первому воплощению данное изобретение касается олеорезина Copaifera для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to a first embodiment, this invention relates to a Copaifera oleoresin for use as a medical product for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Во втором воплощении данное изобретение относится к олеорезину Copaifera для применения согласно первому воплощению, отличающемуся тем, что данный олеорезин происходит из видов Copaifera, выбранных из группы, состоящей из С. officinalis, С. multijuga, С. reticulata.In a second embodiment, this invention relates to a Copaifera oleoresin for use according to a first embodiment, characterized in that the oleoresin is derived from Copaifera species selected from the group consisting of C. officinalis, C. multijuga, C. reticulata.

В третьем воплощении данное изобретение относится к фракции дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина для применения согласно одному из воплощений 1 или 2, отличающейся тем, что она содержит по меньшей мере 90% масс. дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот.In a third embodiment, this invention relates to a fraction of diterpenic acids and/or esters of diterpenic acids of oleoresin for use according to one of embodiments 1 or 2, characterized in that it contains at least 90% of the mass. diterpenic acids and/or esters of diterpenic acids.

Четвертое воплощении данного изобретения относится к фармацевтической композиции, отличающейся тем, что она содержит в качестве активного агента олеорезин Copaifera согласно одному из воплощений 1 или 2, или фракцию согласно третьему воплощению и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты. Преимущественно олеорезин или данная фракция является единственным активным агентом в указанной композиции.The fourth embodiment of the present invention relates to a pharmaceutical composition, characterized in that it contains, as an active agent, a Copaifera oleoresin according to one of embodiments 1 or 2, or a fraction according to a third embodiment, and at least one pharmaceutically acceptable excipient for use as a medical product intended for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer. Advantageously, the oleoresin or this fraction is the only active agent in said composition.

Пятое воплощение данного изобретения касается фармацевтической композиции для применения согласно четвертому воплощению, отличающейся тем, что олеорезин происходит из видов Copaifera, выбранных из группы, состоящей из С. officinalis, С. multijuga, С. reticulata.The fifth embodiment of the present invention relates to a pharmaceutical composition for use according to the fourth embodiment, characterized in that the oleoresin is derived from Copaifera species selected from the group consisting of C. officinalis, C. multijuga, C. reticulata.

Шестое воплощение данного изобретения касается фармацевтической композиции для применения согласно одному из воплощений 4 или 5, отличающейся тем, что она содержит в качестве активного агента фракцию согласно третьему воплощению.The sixth embodiment of the present invention relates to a pharmaceutical composition for use according to one of embodiments 4 or 5, characterized in that it contains as active agent a fraction according to the third embodiment.

Седьмое воплощение данного изобретения также касается фармацевтической композиции для применения согласно одному из воплощений 4-6, отличающейся тем, что она находится в подходящей для перорального или внутривенного введения форме.A seventh embodiment of the present invention also relates to a pharmaceutical composition for use according to one of embodiments 4-6, characterized in that it is in a form suitable for oral or intravenous administration.

Преимущественно олеорезин или фракция согласно настоящему изобретению представляет собой единственное активное начало, предназначенное для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты, в фармацевтических композициях для применения согласно данному изобретению.Advantageously, the oleoresin or fraction according to the present invention is the only active principle for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer in pharmaceutical compositions for use according to the present invention.

Другое воплощение данного изобретения относится к применению олеорезина Copaifera или фракции, как определено согласно одному из предшествующих воплощений, для изготовления медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.Another embodiment of this invention relates to the use of Copaifera oleoresin or a fraction as defined according to one of the previous embodiments, for the manufacture of a medical product intended for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты, включающему введение индивиду, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей или состоящей из олеорезина Copaifera или фракции согласно одному из предшествующих воплощений в качестве активного агента и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого эксципиента.The present invention also relates to a method for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer, comprising administering to an individual in need thereof a pharmaceutical composition containing or consisting of Copaifera oleoresin or a fraction according to one of the preceding embodiments as an active agent and according to at least one pharmaceutically acceptable excipient.

Преимущественно согласно способу по изобретению олеорезин или данная фракция является единственным противораковым активным началом в композиции.Advantageously, according to the method of the invention, the oleoresin or this fraction is the only anti-cancer active in the composition.

Для целей настоящего изобретения термин «олеорезин Copaifera» означает экссудат вида(дов) дерева(вьев) Copaifera, содержащий летучую фракцию, состоящую, главным образом, из сесквитерпеновых соединений, и нелетучую фракцию, состоящую, главным образом, из дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот.For the purposes of the present invention, the term "oleoresin Copaifera" means an exudate of the species(s) of tree(s) Copaifera containing a volatile fraction consisting mainly of sesquiterpene compounds and a non-volatile fraction consisting mainly of diterpene acids and/or complex esters of diterpenic acids.

Для целей настоящего изобретения термин «фракция дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина Copaifera» означает «нелетучую фракцию» олеорезина, полученную после полного или частичного удаления, предпочтительно полного удаления, эфирного масла, в частности, посредством гидродистилляции. Эта нелетучая фракция содержит по меньшей мере 80% по массе и предпочтительно 80-90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот.For the purposes of the present invention, the term "diterpene acid and/or diterpene acid ester fraction of Copaifera oleoresin" means the "non-volatile fraction" of the oleoresin obtained after complete or partial removal, preferably complete removal, of the essential oil, in particular by hydrodistillation. This non-volatile fraction contains at least 80% by weight and preferably 80-90% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters.

Данную смесь дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот также можно получать из олеорезина Copaifera или из «нелетучей» фракции олеорезина Copaifera, в частности, посредством экстракции жидкость-жидкость, пока не получается смесь, имеющая концентрацию дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот от 50 до 100% по массе, в частности, от 60 до 100% по массе, более конкретно от 80 до 100% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот на основе общей массы жидкой фракции, полученной после экстракции и удаления экстракционного растворителя. Эта жидкая фракция, полученная после экстракции и удаления данного растворителя, представляет собой указанную смесь.This mixture of diterpene acids and/or diterpene esters can also be obtained from the Copaifera oleoresin or from the "non-volatile" fraction of the Copaifera oleoresin, in particular by liquid-liquid extraction, until a mixture is obtained having a concentration of diterpene acids and/or diterpene esters acids from 50 to 100% by weight, in particular from 60 to 100% by weight, more specifically from 80 to 100% by weight of diterpene acids and/or esters of diterpenic acids, based on the total weight of the liquid fraction obtained after extraction and removal extraction solvent. This liquid fraction, obtained after extraction and removal of this solvent, is the specified mixture.

Данная смесь дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот содержит по меньшей мере 2 или по меньшей мере 3, или по меньшей мере 4, или по меньшей мере 5, или по меньшей мере 6, или по меньшей мере 7 дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, выбранных из группы, состоящей из следующих: копаловая кислота, копаифероловая кислота, сложный диметиловый эфир агатендиоевой кислоты, агатовая кислота, сложный метиловый эфир 3β-гидроксиантикопаловой кислоты, хардвиковая кислота, 7α-ацетоксихардвиковая кислота.This mixture of diterpene acids and/or diterpene acid esters contains at least 2 or at least 3 or at least 4 or at least 5 or at least 6 or at least 7 diterpene acids and/or diterpenic acid esters selected from the group consisting of the following: copalic acid, copaiferolic acid, agatendioic acid dimethyl ester, agate acid, 3β-hydroxyanticopalic acid methyl ester, hardvic acid, 7α-acetoxyhardvic acid.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Предпочтительно смесь дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот включает все из следующих дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот: копаловая кислота, копаифероловая кислота, сложный диметиловый эфир агатендиоевой кислоты, агатовая кислота, сложный метиловый эфир 3β-гидроксиантикопаловой кислоты, хардвиковая кислота, 7-альфа-ацетоксихардвиковая кислота.Preferably the mixture of diterpene acids and/or diterpene acid esters comprises all of the following diterpene acids and/or diterpene acid esters: copalic acid, copaiferolic acid, agatendioic acid dimethyl ester, agateic acid, 3β-hydroxyanticopalic acid methyl ester, hardvic acid , 7-alpha-acetoxyhardvic acid.

В одном воплощении данного изобретения олеорезин содержит, в процентах по массе, от 7,5 до 40% по массе семи дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, упомянутых выше, или предпочтительно от 10 до 30% по массе.In one embodiment of the present invention, the oleoresin contains, in percent by weight, from 7.5 to 40% by weight of the seven diterpene acids and/or esters of diterpenic acids mentioned above, or preferably from 10 to 30% by weight.

В одном воплощении настоящего изобретения олеорезин может представлять собой олеорезин, обогащенный дитерпеновыми кислотами и/или сложными эфирами дитерпеновых кислот, и содержание данных семи дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот такого обогащенного олеорезина будет составлять от 48 до 90% по массе, предпочтительно от 60 до 90% по массе, все же предпочтительно - от 60 до 85% по массе.In one embodiment of the present invention, the oleoresin may be an oleoresin enriched in diterpene acids and/or diterpene acid esters, and the content of these seven diterpene acids and/or diterpene acid esters of such an enriched oleoresin will be from 48 to 90% by weight, preferably from 60 to 90% by weight, still preferably 60 to 85% by weight.

Для целей настоящего изобретения термин «обогащенная смола» означает то, что олеорезин обрабатывали посредством способа, разработанного для концентрирования содержания данных семи дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот относительно других соединений и молекул данного олеорезина. Таким образом, соотношения между дитерпеновыми кислотами и/или сложными эфирами дитерпеновых кислот и другими молекулами модифицируются в направлении увеличения и представляют собой отличные соотношения относительно природных продуктов или продуктов, экстрагированных из дерева.For the purposes of the present invention, the term "enriched resin" means that the oleoresin has been processed by a process designed to concentrate the content of these seven diterpene acids and/or diterpene acid esters relative to other compounds and molecules of this oleoresin. Thus, the ratios between diterpene acids and/or diterpene acid esters and other molecules are modified in the direction of increase and represent excellent ratios relative to natural products or products extracted from wood.

Figure 00000003
Figure 00000003

Настоящее изобретение касается олеорезина Copaifera для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.The present invention relates to Copaifera oleoresin for use as a medical product for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно конкретному воплощению олеорезин происходит из видов Copaifera, выбранных из группы, состоящей из Copaifera officinalis, Copaifera multijuga или Copaifera reticulata, для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты. Предпочтительно олеорезин происходит из вида Copaifera officinalis.In a specific embodiment, the oleoresin is derived from a Copaifera species selected from the group consisting of Copaifera officinalis, Copaifera multijuga or Copaifera reticulata for use as a medicinal product for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer. Preferably the oleoresin is from the species Copaifera officinalis.

Согласно одинаково преимущественному воплощению изобретения лишь фракция дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина используется в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты. Используемая фракция олеорезина состоит из по меньшей мере 90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, преимущественно по меньшей мере 92% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот или даже более преимущественно по меньшей мере 95% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот.According to an equally advantageous embodiment of the invention, only a fraction of the diterpene acids and/or diterpene acid esters of oleoresin is used as a medical product for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer. The oleoresin fraction used consists of at least 90% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, preferably at least 92% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, or even more preferably at least 95% by weight diterpenic acids and/or esters of diterpenic acids.

Один объект изобретения касается применения олеорезина Copaifera для изготовления медицинского продукта, предназначенного для предупреждения и/или лечения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.One object of the invention relates to the use of Copaifera oleoresin for the manufacture of a medical product intended for the prevention and/or treatment of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно предпочтительному воплощению данное изобретение касается применения олеорезина из Copaifera officinalis, С. multijuga или С. reticulate для изготовления медицинского продукта, предназначенного для предупреждения и/или лечения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to a preferred embodiment, the invention relates to the use of oleoresin from Copaifera officinalis, C. multijuga or C. reticulate for the manufacture of a medicinal product for the prevention and/or treatment of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно особенно предпочтительному воплощению данное изобретение касается применения олеорезина Copaifera officinalis для изготовления медицинского продукта, предназначенного для предупреждения и/или лечения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to a particularly preferred embodiment, the present invention relates to the use of Copaifera officinalis oleoresin for the manufacture of a medical product for the prevention and/or treatment of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно конкретному воплощению данное изобретение касается применения фракции дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина Copaifera, состоящей из по меньшей мере 90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, предпочтительно по меньшей мере 92% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот и более предпочтительно по меньшей мере 95% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, для изготовления медицинского продукта, предназначенного для предупреждения и/или лечения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to a particular embodiment, the invention relates to the use of a Copaifera oleoresin diterpene acid and/or diterpene acid ester fraction consisting of at least 90% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, preferably at least 92% by weight of diterpene acids and /or diterpene acid esters and more preferably at least 95% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, for the manufacture of a medical product for the prevention and/or treatment of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно настоящему изобретению термин «лечение» означает ингибирование прогрессирования, более конкретно регрессию, предпочтительно исчезновение гиперплазии простаты или опухоли простаты.According to the present invention, the term "treatment" means the inhibition of progression, more specifically regression, preferably the disappearance of prostate hyperplasia or prostate tumor.

Согласно настоящему изобретению «предупреждение» означает предупреждение или задержку развития гиперплазии или опухоли простаты.According to the present invention, "prevention" means preventing or delaying the development of prostate hyperplasia or tumor.

Лечение или предупреждение согласно данному изобретению означает лечение или предупреждение у человека или животных.Treatment or prevention according to this invention means treatment or prevention in humans or animals.

Настоящее изобретение, кроме того, относится к фармацевтической композиции, содержащей олеорезин Copaifera и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.The present invention further relates to a pharmaceutical composition containing Copaifera oleoresin and at least one pharmaceutically acceptable excipient.

В настоящем изобретении термин «фармацевтически приемлемый» означает тот, который является полезным при приготовлении фармацевтической композиции, который, в общем, является безопасным, не токсичным и ни биологически, ни иным образом нежелательным, и который является приемлемым для фармацевтического применения у человека.In the present invention, the term "pharmaceutically acceptable" means that which is useful in the preparation of a pharmaceutical composition, which is generally safe, non-toxic and neither biologically nor otherwise undesirable, and which is acceptable for pharmaceutical use in humans.

Термин «фармацевтически приемлемый эксципиент», при использовании в данном документе, включает любой адъювант или эксципиент, такой как растворители, солюбилизаторы, консерванты, эмульгаторы, агенты, придающие консистенцию, распределяющие агенты, водоудерживающие агенты, красители, корригенты, подсластители, причем применение данных эксципиентов хорошо известно специалисту.The term "pharmaceutically acceptable excipient", as used herein, includes any adjuvant or excipient such as solvents, solubilizers, preservatives, emulsifiers, bodying agents, spreading agents, water-retaining agents, colorants, flavoring agents, sweeteners, and the use of these excipients well known to the skilled person.

Настоящее изобретение, кроме того, относится к фармацевтической композиции для применения в качестве медицинского продукта.The present invention further relates to a pharmaceutical composition for use as a medical product.

Настоящее изобретение, кроме того, относится к фармацевтической композиции, отличающейся тем, что она содержит, в качестве активного агента, олеорезин Copaifera согласно данному изобретению или фракцию дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина Copaifera согласно данному изобретению и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.The present invention further relates to a pharmaceutical composition characterized in that it contains, as active agent, a Copaifera oleoresin according to the invention or a diterpene acid and/or diterpene acid ester fraction of the Copaifera oleoresin according to the invention and at least one pharmaceutically an acceptable excipient for use as a medicinal product for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно конкретному воплощению данного изобретения композиция содержит в качестве активного агента олеорезин из видов Copaifera, выбранных из группы, состоящей из С. officinalis, С. multijuga, С. reticulata, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to a specific embodiment of the present invention, the composition contains, as an active agent, an oleoresin from Copaifera species selected from the group consisting of C. officinalis, C. multijuga, C. reticulata, and at least one pharmaceutically acceptable excipient for use as a medical product intended for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Согласно другому воплощению данного изобретения композиция содержит в качестве активного агента фракцию дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот олеорезина, которая содержит по меньшей мере 90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, предпочтительно по меньшей мере 92% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот и более предпочтительно по меньшей мере 95% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент для применения в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты и/или рака простаты.According to another embodiment of the present invention, the composition contains as active agent a fraction of diterpenic acids and/or diterpene acid esters of oleoresin, which contains at least 90% by weight of diterpenic acids and/or diterpene acid esters, preferably at least 92% by weight diterpene acids and/or diterpene acid esters, and more preferably at least 95% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, and at least one pharmaceutically acceptable excipient for use as a medicinal product intended for the treatment and/or prevention of benign prostatic hyperplasia and/or prostate cancer.

Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены в подходящей форме для введения млекопитающим, включая человека. Дозировка варьирует согласно лечению и участвующему состоянию. Данные композиции разрабатываются для введения перорально, подъязычно, подкожно, внутримышечно, внутривенно, чрескожно, местно или ректально. В данном случае активный ингредиент может вводиться животным или человеку в стандартных лекарственных формах в смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Подходящие стандартные лекарственные формы включают пероральные формы, такие как таблетки, капсулы, порошки, гранулы и пероральные растворы или суспензии, подъязычные и щечные лекарственные формы, подкожные, местные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные лекарственные формы и ректальные лекарственные формы.Pharmaceutical compositions according to the present invention can be prepared in a suitable form for administration to mammals, including humans. The dosage varies according to the treatment and the condition involved. These compositions are designed for administration orally, sublingually, subcutaneously, intramuscularly, intravenously, transdermally, topically or rectally. In this case, the active ingredient may be administered to animals or humans in unit dosage forms in admixture with conventional pharmaceutical carriers. Suitable unit dosage forms include oral forms such as tablets, capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions, sublingual and buccal dosage forms, subcutaneous, topical, intramuscular, intravenous, intranasal or intraocular dosage forms, and rectal dosage forms.

При приготовлении твердой композиции в форме таблетки главный активный ингредиент смешивается с фармацевтическим носителем, таким как желатин, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, аравийская камедь, диоксид кремния или аналогичные носители. Таблетки могут быть покрыты сахарозой или другими подходящими веществами, или обработаны таким образом, что они имеют длительную или отложенную активность и непрерывное высвобождение заданного количества активного начала.When preparing a solid composition in the form of a tablet, the main active ingredient is mixed with a pharmaceutical carrier such as gelatin, starch, lactose, magnesium stearate, talc, gum arabic, silicon dioxide or similar carriers. Tablets may be coated with sucrose or other suitable substances, or processed in such a way that they have prolonged or delayed activity and continuous release of a given amount of the active principle.

Препарат капсулы получают смешиванием активного ингредиента с разбавителем и выливанием образующейся смеси в мягкие или твердые капсулы.A capsule preparation is prepared by mixing the active ingredient with a diluent and pouring the resulting mixture into soft or hard capsules.

Препарат в виде сиропа или эликсира может содержать активный ингредиент в комбинации с подсластителем, антисептиком, корригентом и подходящим красителем.The preparation in the form of a syrup or elixir may contain the active ingredient in combination with a sweetener, antiseptic, flavor and a suitable coloring agent.

Диспергируемые в воде порошки или гранулы могут содержать активный ингредиент, смешанный с диспергентами или увлажнителями, или суспендирующими агентами, а также с агентами, корректирующими вкус или подсластителями.Water-dispersible powders or granules may contain the active ingredient mixed with dispersants or humectants or suspending agents, as well as flavoring agents or sweeteners.

Для ректального введения используются суппозитории, которые получают со связующими веществами, которые плавятся при ректальной температуре, такими как масло какао или полиэтиленгликоли.For rectal administration, suppositories are used, which are prepared with binders that melt at the rectal temperature, such as cocoa butter or polyethylene glycols.

Для парентерального (внутривенного, внутримышечного и т.д.), интраназального или внутриглазного введения используются водные суспензии, изотоничные физиологические растворы или стерильные инъецируемые растворы, содержащие фармакологически совместимые диспергирующие агенты и/или увлажнители.For parenteral (intravenous, intramuscular, etc.), intranasal or intraocular administration, aqueous suspensions, isotonic saline solutions or sterile injectable solutions containing pharmacologically compatible dispersants and/or humectants are used.

Активное начало также может быть приготовлено в виде микрокапсул, возможно с одним или более чем одним дополнительным носителем.The active principle may also be formulated as microcapsules, optionally with one or more additional carriers.

Преимущественно фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению находится в подходящей форме для перорального или внутривенного введения.Advantageously, the pharmaceutical composition according to the present invention is in a suitable form for oral or intravenous administration.

Композиция согласно настоящему изобретению может вводиться в комбинации, одновременно, раздельно или последовательно, с простатэктомией, лучевой терапией и/или гормональной терапией для лечения или предупреждения рака простаты.The composition according to the present invention may be administered in combination, simultaneously, separately or sequentially, with prostatectomy, radiation therapy and/or hormonal therapy for the treatment or prevention of prostate cancer.

Следующие примеры иллюстрируют данное изобретение без ограничения его объема.The following examples illustrate the invention without limiting its scope.

Пример 1. Влияния разных соединений на активность 5α-редуктазы фибробластов, полученных из фолликулов человеческих кожных сосочковExample 1 Effects of Various Compounds on 5α-Reductase Activity in Fibroblasts Derived from Human Dermal Papilla Follicles

Целью данного исследования была оценка потенциальной ингибирующей активности разных соединений на 5α-редуктазу.The aim of this study was to evaluate the potential inhibitory activity of various compounds on 5α-reductase.

Материалы и методыMaterials and methods

Данное исследование проводится на человеческих клетках, полученных из фолликулов кожных сосочков донора. Эта модель является привлекательной, так как кожные сосочки имеют такую же изоформу 5αR2, что и ткань простаты. Клетки высевают в 24-луночные планшеты и культивируют в течение 24 часов в культуральной среде DMEM (среда Игла, модифицированная по Дульбекко), дополненной L-глутамином (2 мМ), пенициллином (50 U/мл), стрептомицином (50 мкг/мл) и фетальной телячьей сывороткой (10%), при стандартных условиях культуры (37°С и 5% CO2). Данную культуральную среду затем заменяют на аналитическую среду DMEM, дополненную L-глутамином (2 мМ), пенициллином (50 U/мл), стрептомицином (50 мкг/мл) и фетальной телячьей сывороткой (1%). Данная аналитическая среда может содержать или может не содержать (контрольные условия) продукты, подлежащие тестированию, и соединение, используемое в качестве контроля - финастерид (10 мкМ) - в течение 24 ч предынкубации. Данные клетки затем обрабатывали аналитической средой, содержащей [С14]-тестостерон и содержащей или не содержащей (контрольные условия) тестируемые или контрольные продукты, и клетки инкубировали в течение 24 ч при данных условиях. После инкубации супернатанты отбирали для анализа метаболизма тестостерона. Все эксперименты проводили три раза. Молекулы стероидов экстрагировали из супернатантов с использованием смеси хлороформ/метанол. Отбирали органическую фазу, и разные молекулярные виды (метаболиты тестостерона) разделяли тонкослойной хроматографией с использованием системы растворителей, содержащей дихлорметан, этилацетат и метанол. Проводили ауторадиографию на хроматографии, и превращенный тестостерон оценивали денситометрическим анализом.This study is conducted on human cells obtained from donor dermal papilla follicles. This model is attractive because dermal papillae have the same 5αR2 isoform as prostate tissue. Cells are seeded in 24-well plates and cultured for 24 hours in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) culture medium supplemented with L-glutamine (2 mM), penicillin (50 U/ml), streptomycin (50 μg/ml) and fetal calf serum (10%) under standard culture conditions (37° C. and 5% CO 2 ). This culture medium is then replaced with DMEM assay medium supplemented with L-glutamine (2 mM), penicillin (50 U/ml), streptomycin (50 μg/ml) and fetal bovine serum (1%). This assay medium may or may not contain (control conditions) the products to be tested and the compound used as control - finasteride (10 μM) - during the 24 h pre-incubation. These cells were then treated with assay medium containing [C 14 ]-testosterone and with or without (control conditions) test or control products, and the cells were incubated for 24 h under these conditions. After incubation, supernatants were collected for analysis of testosterone metabolism. All experiments were carried out three times. Steroid molecules were extracted from the supernatants using a mixture of chloroform/methanol. The organic phase was taken and the different molecular species (testosterone metabolites) were separated by thin layer chromatography using a solvent system containing dichloromethane, ethyl acetate and methanol. Autoradiography was performed on chromatography and converted testosterone was evaluated by densitometric analysis.

Таким образом, метаболизм тестостерона до дигидротестостерона отражает 5α-редуктазную активность и оценивается по отношению дигидротестостерон/тестостерон.Thus, the metabolism of testosterone to dihydrotestosterone reflects 5α-reductase activity and is measured by the dihydrotestosterone/testosterone ratio.

Результатыresults

Первая группа экспериментов подчеркивает эффекты олеорезина Copaifera officinalis (Таблица 3 ниже). Неожиданно авторы изобретения продемонстрировали значимую и воспроизводимую активность ингибирования 5α-редуктазы посредством олеорезина Copaifera officinalis, причем данное ингибирование даже оказывается зависимым от концентрации. Сильное ингибирование данного фермента финастеридом, в самом деле, подтверждает все эти эксперименты.The first set of experiments highlights the effects of Copaifera officinalis oleoresin (Table 3 below). Surprisingly, the inventors have demonstrated a significant and reproducible 5α-reductase inhibition activity by Copaifera officinalis oleoresin, this inhibition even being concentration dependent. The strong inhibition of this enzyme by finasteride indeed confirms all these experiments.

Figure 00000004
Figure 00000004

Статистическое исследование проводится относительно контрольной группы (критерий Даннета).Statistical study is carried out relative to the control group (Dunnett's test).

Протестированный олеорезин получали согласно способу, описанному в Примере 2.The tested oleoresin was prepared according to the method described in Example 2.

В качестве сравнения в одном из данных экспериментов также тестировали экстракт Serenoa repens. Экстракт Serenoa repens, полученный из плодов сереноа ползучей, представляет собой самую исследованную растительную добавку и чаще всего прописываемую - одну или в комбинации - в частности, при лечении доброкачественной гиперплазии простаты (Gordon АЕ, Am. Fam. Physician, 67(06), 1281-1283, 2003). В концентрации 10 мкг/мл экстракт Serenoa repens не индуцирует значимого ингибирования 5α-редуктазы, однако, при 20 мкг/мл данный экстракт индуцирует 23%-ное ингибирование, достигающее статистической значимости (р меньше 0,05 относительно контроля).As a comparison, Serenoa repens extract was also tested in one of these experiments. Serenoa repens extract, derived from the fruit of the Saw Palmetto repens, is the most researched herbal supplement and the most commonly prescribed - alone or in combination - particularly in the treatment of benign prostatic hyperplasia (Gordon AE, Am. Fam. Physician, 67(06), 1281 -1283, 2003). At a concentration of 10 μg/ml, the Serenoa repens extract did not induce significant inhibition of 5α-reductase, however, at 20 μg/ml, this extract induces a 23% inhibition reaching statistical significance (p less than 0.05 relative to control).

Вторую серию экспериментов проводили для оценки того, осуществлялась ли данная ингибирующая активность на 5α-редуктазу нелетучей фракцией или скорее летучей фракцией, соответствующей эфирному маслу. Результаты обобщаются в Таблице 4 ниже. Получение летучей и нелетучей фракций проводится согласно способу, описанному в Примере 4, с использованием сложного диэтилового эфира в качестве неполярного растворителя.A second set of experiments was carried out to evaluate whether a given 5α-reductase inhibitory activity was carried out by the non-volatile fraction or rather by the volatile fraction corresponding to the essential oil. The results are summarized in Table 4 below. The preparation of volatile and non-volatile fractions is carried out according to the method described in Example 4, using diethyl ether as a non-polar solvent.

Figure 00000005
Figure 00000005

Статистический анализ проводится относительно контрольной группы (критерий Даннета).Statistical analysis is carried out relative to the control group (Dunnett's test).

Оказывается то, что активность олеорезина Copaifera officinalis осуществляется нелетучей фракцией, в самом деле, не была выявлена активность летучей фракции. Ингибирование 5α-редуктазы нелетучей фракцией составляет только 14%, но данное снижение достигает статистической значимости (р меньше 0,05).It appears that the activity of the Copaifera officinalis oleoresin is carried out by the non-volatile fraction, in fact, the activity of the volatile fraction was not detected. The inhibition of 5α-reductase by the non-volatile fraction is only 14%, but this decrease reaches statistical significance (p less than 0.05).

Третью серию экспериментов проводили для демонстрации того, что другие виды Copaifera, в частности С. multijuga, также имели полезную активность в отношении ингибирования 5α-редуктазы. Авторы изобретения сосредоточились на нелетучей фракции, которая несет ингибирующую активность. Результаты обобщаются в Таблице 5 ниже.A third set of experiments was performed to demonstrate that other Copaifera species, in particular C. multijuga, also had beneficial 5α-reductase inhibitory activity. The inventors have focused on the non-volatile fraction which carries inhibitory activity. The results are summarized in Table 5 below.

Figure 00000006
Figure 00000006

Статистический анализ проводится относительно контрольной группы (критерий Даннета).Statistical analysis is carried out relative to the control group (Dunnett's test).

Получение летучей и нелетучей фракций проводится согласно способу, описанному в Примере 4, с использованием сложного диэтилового эфира в качестве неполярного растворителя.The preparation of volatile and non-volatile fractions is carried out according to the method described in Example 4, using diethyl ether as a non-polar solvent.

Данные результаты явно показывают то, что несколько видов Copaifera представляют интерес. В самом деле, нелетучая фракция вида С. multijuga достигает 31%-ного ингибирования 5α-редуктазы в концентрации 10 мкг/мл.These results clearly show that several species of Copaifera are of interest. Indeed, the non-volatile fraction of the species C. multijuga achieves 31% inhibition of 5α-reductase at a concentration of 10 µg/ml.

Все данные результаты приводят к заключению о том, что олеорезин Copaifera имеет крайне полезную ингибирующую активность в отношении 5α-редуктазы. Данная активность осуществляется нелетучей фракцией олеорезина. Наконец, авторы данного изобретения также показали то, что данная активность обнаруживается у нескольких видов Copaifera.All of these results lead to the conclusion that Copaifera oleoresin has a highly beneficial 5α-reductase inhibitory activity. This activity is carried out by the non-volatile fraction of oleoresin. Finally, the authors of the present invention also showed that this activity is found in several species of Copaifera.

Пример 2. Получение олеорезинаExample 2. Obtaining oleoresin

На коре ствола деревьев Copaifera officinalis и/или Copaifera multijuga, и/или Copaifera reticulata делаются надрезы для выделения олеорезина. Он затем гомогенизируется и стабилизируется под азотом.Incisions are made on the trunk bark of Copaifera officinalis and/or Copaifera multijuga and/or Copaifera reticulata trees to extract the oleoresin. It is then homogenized and stabilized under nitrogen.

Активное вещество представляет собой 100%-ный неочищенный олеорезин из ствола Copaifera officinalis и/или Copaifera multijuga, и/или Copaifera reticulata.The active substance is 100% crude oleoresin from the trunk of Copaifera officinalis and/or Copaifera multijuga and/or Copaifera reticulata.

Анализ ЖХ-МС (жидкостная хроматография-масс-спектрометрия) олеорезина Copaifera officinalisLC-MS (Liquid Chromatography-Mass Spectrometry) Analysis of Copaifera officinalis Oleoresin

Каждый образец анализировали посредством УВЭЖХ (ультравысокоэффективная жидкостная хроматография)-QTOFMS с использованием традиционного линейного градиента.Each sample was analyzed by UHPLC (ultra high performance liquid chromatography)-QTOFMS using a traditional linear gradient.

Разделение на системе УВЭЖХ Waters Acquity.Separation on a Waters Acquity UHPLC system.

- Колонка 100×2,1 мм, 1,7 мкм, Acquity ВЕН С18, оснащенная предколонкой;- Column 100×2.1 mm, 1.7 µm, Acquity BEN C18, equipped with a guard column;

- Подвижная фаза:- Mobile phase:

Подвижная фаза А: вода уровня качества для ЖХ-МС плюс 0,1% муравьиная кислотаMobile phase A: LC-MS grade water plus 0.1% formic acid

Подвижная фаза В: ацетонитрил уровня качества для ЖХ-МС плюс 0,1% муравьиная кислотаMobile phase B: LC-MS grade acetonitrile plus 0.1% formic acid

- Градиент:- Gradient:

Figure 00000007
Figure 00000007

Обнаружение:Detection:

УФ (ультрафиолетовая область спектра) 220 нмUV (ultraviolet) 220 nm

Figure 00000008
Figure 00000008

Figure 00000009
Figure 00000009

Пример 3. Получение нелетучей фракцииExample 3. Obtaining a non-volatile fraction

Олеорезин, полученный согласно Примеру 2, суспендируют в 10 объемах воды, нагретой до 100°С, в течение 4 ч для осуществления гидродистилляции. Летучее эфирное масло выделяется посредством конденсации. После гидродистилляции выделяют остаток дистилляции. После сушки посредством лиофилизации или других способов сушки остаток составляет нелетучую фракцию.The oleoresin obtained according to Example 2 is suspended in 10 volumes of water heated to 100° C. for 4 hours to effect hydrodistillation. The volatile essential oil is released through condensation. After hydrodistillation, the distillation residue is isolated. After drying by lyophilization or other drying methods, the residue is the non-volatile fraction.

Пример 4. Альтернативное получение нелетучей фракцииExample 4 Alternative Preparation of the Non-Volatile Fraction

Объем олеорезина Copaifera, полученный согласно Примеру 2, разводят в 8-10 объемах несмешивающегося с водой липофильного растворителя (такого как диэтиловый эфир, этилацетат). Данный раствор экстрагируется посредством экстракции жидкость/жидкость с использованием 5%-ного раствора гидроксида натрия (NaOH). Данную операцию повторяют 3 раза с использованием 4-5 объемов 5%-ного NaOH. Нижнюю фазу (основная водная фаза) подкисляют добавлением 1 н. соляной кислоты (HCl) и затем экстрагируют посредством экстракции жидкость/жидкость с использованием несмешивающегося с водой неполярного растворителя (такого как диэтиловый эфир, этилацетат). Фазу этилацетата промывают водой и затем сушат над Na2SO4. После удаления растворителя посредством ротационного испарителя или других способов сушки полученный сухой остаток соответствует смеси дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот согласно данному изобретению.The volume of Copaifera oleoresin prepared according to Example 2 is diluted in 8-10 volumes of a water-immiscible lipophilic solvent (such as diethyl ether, ethyl acetate). This solution is extracted by liquid/liquid extraction using 5% sodium hydroxide (NaOH) solution. This operation is repeated 3 times using 4-5 volumes of 5% NaOH. The lower phase (basic aqueous phase) is acidified by adding 1N. hydrochloric acid (HCl) and then extracted by liquid/liquid extraction using a water-immiscible non-polar solvent (such as diethyl ether, ethyl acetate). The ethyl acetate phase is washed with water and then dried over Na 2 SO 4 . After removal of the solvent by means of a rotary evaporator or other drying methods, the resulting dry residue corresponds to the mixture of diterpene acids and/or diterpene acid esters according to the present invention.

Figure 00000010
Figure 00000010

Figure 00000011
Figure 00000011

Claims (4)

1. Применение олеорезина Copaifera в качестве медицинского продукта, предназначенного для лечения или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты, где Copaifera выбрана из C. officinalis и C. multijuga.1. Use of Copaifera oleoresin as a medical product for the treatment or prevention of benign prostatic hyperplasia, wherein Copaifera is selected from C. officinalis and C. multijuga. 2. Применение по п. 1, где данный олеорезин представлен фракцией дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, которая содержит по меньшей мере 90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот.2. Use according to claim 1, wherein said oleoresin is a fraction of diterpene acids and/or diterpene acid esters which contains at least 90% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters. 3. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты, отличающаяся тем, что она содержит в качестве активного агента олеорезин Copaifera, содержащий нелетучую фракцию, состоящую, главным образом, из дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, где Copaifera выбрана из C. officinalis и C. multijuga, или олеорезиновую фракцию дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, которая содержит по меньшей мере 90% по массе дитерпеновых кислот и/или сложных эфиров дитерпеновых кислот, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, где фракция олеорезина представляет собой фракцию олеорезина Copaifera, где Copaifera выбрана из C.officinalis и C. multijuga.3. Pharmaceutical composition for the treatment or prevention of benign prostatic hyperplasia, characterized in that it contains as an active agent Copaifera oleoresin containing a non-volatile fraction consisting mainly of diterpene acids and/or diterpene acid esters, where Copaifera is selected from C officinalis and C. multijuga, or an oleoresin fraction of diterpene acids and/or diterpene acid esters, which contains at least 90% by weight of diterpene acids and/or diterpene acid esters, and at least one pharmaceutically acceptable excipient, where the fraction oleoresin is an oleoresin fraction of Copaifera, where Copaifera is selected from C. officinalis and C. multijuga. 4. Фармацевтическая композиция по п. 3, отличающаяся тем, что она находится в форме, подходящей для перорального или внутривенного введения.4. Pharmaceutical composition according to claim 3, characterized in that it is in a form suitable for oral or intravenous administration.
RU2019132832A 2017-03-20 2018-03-20 Use of copaifera oleoresins in prostate pathologies RU2773173C2 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1752284A FR3063906B1 (en) 2017-03-20 2017-03-20 USE OF COPAIFERA OLEORESIN IN PROSTATE DISEASES
FR1752284 2017-03-20
PCT/EP2018/057076 WO2018172380A1 (en) 2017-03-20 2018-03-20 Use of copaifera oleoresin in pathologies of the prostate

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2019132832A RU2019132832A (en) 2021-04-21
RU2019132832A3 RU2019132832A3 (en) 2021-06-11
RU2773173C2 true RU2773173C2 (en) 2022-05-31

Family

ID=

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012137209A1 (en) * 2011-04-07 2012-10-11 Lycored Ltd Synergistic compositions and methods
RU2470657C2 (en) * 2007-08-16 2012-12-27 Виридис Фармасьютикал Лимитед USE OF EXTRACTS OR EXTRACTIVE SUBSTANCES OF Piper cubeba L. AS ACTIVE INGREDIENTS IN DRUG FOR TREATING CANCEROUS DISEASES
WO2015000064A1 (en) * 2013-07-05 2015-01-08 Evans Donna Composition for treating pain and/or inflammation comprising eugenol and beta-caryophyllene

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2470657C2 (en) * 2007-08-16 2012-12-27 Виридис Фармасьютикал Лимитед USE OF EXTRACTS OR EXTRACTIVE SUBSTANCES OF Piper cubeba L. AS ACTIVE INGREDIENTS IN DRUG FOR TREATING CANCEROUS DISEASES
WO2012137209A1 (en) * 2011-04-07 2012-10-11 Lycored Ltd Synergistic compositions and methods
WO2015000064A1 (en) * 2013-07-05 2015-01-08 Evans Donna Composition for treating pain and/or inflammation comprising eugenol and beta-caryophyllene

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BILAL CHUGHTAI et al., "Role of Inflammation in Benign Prostatic Hyperplasia", REVIEWS IN UROLOGY, vol. 13, no. 3, 2011, pp. 147-150. V.F. VEIGA JUNIOR et al., "Chemical composition and anti-inflammatory activity of copaiba oils from Copaifera cearensis Huber ex Ducke, Copaifera reticulata Ducke and Copaifera multijuga Hayne - A comparative study". Journal of Ethnopharmacology, Volume 112, Issue 2, 13 June 2007, pp. 248-254. RATI LAMA et al., "Bioassay guided identification of small chaperone proteins [alpha]-crystal1in and Hsp27 inhibitors from Copaiba oil". PHYTOCHEMISTRY LETTERS, vol. 10, 1 December 2014 (2014-12-01), pages 65-75, XP055422813, AMSTERDAM, NL, ISSN: 1874-3900, DOI: 10.1016/j.phytol.2014.08.006. LIDIAM MAIA LEANDRO et al., "Chemistry and Biological Activities of Terpenoids from Copaiba (Copaifera spp.) Oleoresins", MOLECULES ONLINE, vol. 17, no. 12, 30 December 2012 (2012-12-30), pages 3866-3889, XP055313075, ISSN: 1433-1373, DOI: 10.3390/molecules17043866. Adriana Oli *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Asgarpanah et al. Chemistry, pharmacology and medicinal properties of Heracleum persicum Desf. Ex Fischer: A review
KR20180125612A (en) Avocado flesh and/or skin extract rich in polyphenols and cosmetic, dermatological and nutraceutical compositions comprising same
JP2006512330A (en) Preparation and use of triterpenoid sapogenin compounds extracted from bamboo
JP2016534982A (en) Lipid seed derived lipid extract
KR20180078344A (en) Extract of the above-ground parts of gynandropsis gynandra or cleome gynandra, and cosmetic, dermatological or pharmaceutical compositions including same
JP2023512791A (en) Compositions and methods for modulating chondrocyte, extracellular matrix, articular cartilage and arthritic phenotypic homeostasis
US10925915B2 (en) Use of a Copaifera extract to combat alopecia and seborrhea
JP2022510743A (en) A composition for treating or preventing benign prostatic hyperplasia or alopecia containing a salvia miltiorrhiza Bunge extract as an active ingredient.
CN115515614B (en) Compositions comprising extracts of Alpinia and other plants for improving joint health and treating arthritis
US11311591B2 (en) Use of copaifera oleoresin in pathologies of the prostate
RU2773173C2 (en) Use of copaifera oleoresins in prostate pathologies
JP7117030B2 (en) A composition for preventing, treating, or ameliorating prostatic disease, containing extracts of ragweed, lokon, and red pine as active ingredients
KR102272237B1 (en) Composition for improved atopy skin and skin moisturizing comprising natural extract
KR100420498B1 (en) New use of propolis and its constituent
HK40017918A (en) Use of copaifera oleoresin in pathologies of the prostate
KR20040011236A (en) Anti-allergic composition containing arctium lappa seed extract
Delbo et al. Assessment report on Centella asiatica (L.) Urban, herba
AU2014330796B2 (en) Extracts and compositions of Helichrysum odoratissimum for preventing and treating skin cancers
KR102563879B1 (en) Composition for preventing, improving or treating prostate disease comprising extract of Artemisia annua Linne as effective component
Argade et al. Unlocking the Potential of Carissa carandus Linn: A Comprehensive Review
Retnasamy et al. Evaluation of anti-obesity activity of Thespesia populnea (L.) and flavonoid isolated quercetin on high fat diet–induced obese rats
KR20240033979A (en) Composition for preventing and improving periodontal disease comprising lotus root extract as an active ingredient
CN115484835A (en) Compositions and methods for joint health
KR20190082698A (en) rubus coreanus and sanguiin H-6 having estrogenic activity and anti-cancer activity against breast cancer and menopausal or hormonal disorder
KR20180112729A (en) rubus coreanus and sanguiin H-6 having estrogenic activity and anti-cancer activity against breast cancer and menopausal or hormonal disorder