RU2770877C1 - Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов - Google Patents
Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2770877C1 RU2770877C1 RU2021109827A RU2021109827A RU2770877C1 RU 2770877 C1 RU2770877 C1 RU 2770877C1 RU 2021109827 A RU2021109827 A RU 2021109827A RU 2021109827 A RU2021109827 A RU 2021109827A RU 2770877 C1 RU2770877 C1 RU 2770877C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hib
- type
- capsular polysaccharide
- haemophilic
- microbe
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 51
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 51
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 51
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 claims abstract description 32
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 21
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 13
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 claims abstract description 11
- 229940045808 haemophilus influenzae type b Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 11
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- BAWFJGJZGIEFAR-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)O[P@@](O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-DQQFMEOOSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 5
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims abstract description 5
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 5
- BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K hemin Chemical compound CC1=C(CCC(O)=O)C(C=C2C(CCC(O)=O)=C(C)\C(N2[Fe](Cl)N23)=C\4)=N\C1=C/C2=C(C)C(C=C)=C3\C=C/1C(C)=C(C=C)C/4=N\1 BTIJJDXEELBZFS-QDUVMHSLSA-K 0.000 claims abstract description 5
- 229940025294 hemin Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 claims abstract description 4
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000007330 chocolate agar Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 4
- -1 NaHPO4 Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 claims abstract 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims abstract 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract 2
- 229960001031 glucose Drugs 0.000 claims abstract 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims abstract 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract 2
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000001994 activation Methods 0.000 claims description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 9
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 4
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 claims description 3
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 claims description 3
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 claims description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 3
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 claims description 3
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 claims description 3
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 claims description 3
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 claims description 2
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 claims description 2
- 108010060123 Conjugate Vaccines Proteins 0.000 abstract description 5
- 229940031670 conjugate vaccine Drugs 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 229940032046 DTaP vaccine Drugs 0.000 abstract 2
- SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 1-[(1r,6r)-9-azabicyclo[4.2.1]non-4-en-5-yl]ethanone Chemical compound CC(=O)C1=CCC[C@@H]2CC[C@H]1N2 SGNXVBOIDPPRJJ-PSASIEDQSA-N 0.000 abstract 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 abstract 1
- 239000003948 anatoxin Substances 0.000 abstract 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 5
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 5
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000306 component Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- OIPPWFOQEKKFEE-UHFFFAOYSA-N orcinol Chemical compound CC1=CC(O)=CC(O)=C1 OIPPWFOQEKKFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 229940124847 Diphtheria-Tetanus vaccine Drugs 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- UBLXEEBHYISRFM-UHFFFAOYSA-M folin's reagent Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(S(=O)(=O)[O-])=CC(=O)C(=O)C2=C1 UBLXEEBHYISRFM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229960004443 hemophilus influenzae b vaccines Drugs 0.000 description 1
- 150000002402 hexoses Chemical class 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 238000012092 latex agglutination test Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицинской микробиологии. Описан способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания гемофильной типа b конъюгированной вакцины (Hib), а также комбинированных вакцин, содержащих АДС+Hib, АКДС+Hib. Культивируют штамм Haemophilus influenzae типа b (Hib) № В-7519 на шоколадном агаре с добавлением бацитрацина и последующим переводом на жидкую питательную среду следующего состава: солянокислотный гидролизат казеина, глюкоза, экстракт дрожжевой, никотинамиддинуклеотид (NAD), гемин, витамины группы В, NaHPO4, KH2PO4. Инактивируют культуру путем ее обработки 0,1% раствором формальдегида. Далее отделяют клетки Hib от культуральной жидкости путем фильтрации на пластинчатых мембранных фильтрах в тангенциальном потоке. При выделении капсульного полисахарида (КП) Hib используют цетилтриметиламмония бромид (цетавлон), при этом расчет количества цетавлона проводят с учетом содержания в концентрате КП по формуле: mЦ=Рх48, где mЦ - количество цетавлона, Ρ - количество фосфора в объеме концентрата ультрафильтрата, 48 - коэффициент пересчета. Очищают КП методом горячей фенольной обработки с последующим спиртовым осаждением. Для стадии конъюгации используют столбнячный анатоксин, активируя его карбодиимидным методом, присоединяя к нему молекулу-линкер ADH (дигидразид адипиновой кислоты). Конъюгацию осуществляют путем добавления к активированному столбнячному анатоксину очищенного капсульного полисахарида Hib, обработанного цианилирующим агентом. Изобретение позволяет создать антигенную конъюгированную субстанцию гемофильного типа b микроба для получения гемофильной типа b конъюгированной вакцины (Hib), а также комбинированных вакцин, содержащих АДС+Hib, АКДС+Hib. 6 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицинской микробиологии и касается способа получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания гемофильной типа b конъюгированной вакцины (Hib), а также комбинированных вакцин, содержащих АДС + Hib, АКДС + Hib.
Известен способ получения антигенного препарата Haemophilusinfluenzae типа b, который включает культивирование микроорганизмов на жидких питательных средах и извлечение полисахарида из полученной биомассы методом ультрафильтрации на молекулярных волоконных фильтрах.
Концентрат клеток обрабатывают 2,5%-ным раствором натрия хлорида с натриевой солью ЭДТА и из полученного экстракта ультрафильтрацией на молекулярных волоконных фильтрах выделяют капсульный полисахарид Hib в комплексе с белком, который соединяют с экзогенным полисахаридом Hib в соотношении 1:1 (см. патент России № RU 2185191 С1, МПК А61К 39/02, опубл. 20.07.2002).
Недостатками данного способа является то, что
- полученный антигенный препарат Haemophilusinfluenzae типа b не подвергается очистке от эндотоксинов, нуклеиновых кислот, белка, что может вызвать нежелательные реакции при введении готовой вакцины в организм человека;
- отсутствует процесс конъюгации полученного антигенного препарата с белком, в качестве которого используют столбнячный анатоксин.
В заявляемом же способе создания антигенной субстанции гемофильного типа b микроба, используется метод выделения и очистки капсульного полисахарида Hib, дополнительно применяется метод, который дает возможность осуществить конъюгацию столбнячного анатоксина и капсульного полисахарида Hib. Это позволяет получать вакцину со слабой реактогенностью и высокой иммунологической активностью, а также использовать антигенную конъюгированную субстанцию гемофильного типа b микроба для получения гемофильной типа b конъюгированной вакцины (Hib), а также комбинированных вакцин.
Известен также способ получения вакцины гемофильной типа b конъюгированной, который включает в себя следующие этапы:
- культивирование штамма Haemophilusinfluenzae типа b на жидкой питательной среде с добавлением рибозы;
- инактивацию культуры нагреванием до 55±5°С и выдерживанием 15±3 мин;
- отделение биомассы центрифугированием и выделение полирибозилрибитолфосфата (ПРФ) путем осаждения 10%-ным раствором цетилтриметиламмония бромида (ЦТАБ);
- концентрация, очистка, осветление, активация ПРФ и смешивание его со столбнячным анатоксином.
(см. патент России №2704452; МПК А61К 39/02; опубл. 28.10.2019 г.) Недостатками данного способа является то, что:
1) для извлечения капсульного антигена Hib в патенте используется 10% раствор цетилтриметиламмония бромида без учета содержания в полуфабрикате капсульного полисахарида, что делает процесс извлечения капсульного полисахарида плохо контролируемым, как в сторону завышения, так и в сторону уменьшения дозы цетавлона для оптимального извлечения капсульного полисахарида из культуральной жидкости полуфабриката;
2) в данной технологии для очистки капсульного полисахарида и конъюгата с белком носителем используются многоэтапные системы очистки фильтрационными методами и методом гель-хроматографии, что усложняет технологию, увеличивает время проведения и ведет к удорожанию технологического процесса очистки;
3) в технологическом процессе конъюгации капсульного полисахарида со столбнячным анатоксином не применяются линкеры, обеспечивающие улучшение конформационных свойств конъюгированных антигенов, что может оказывать влияние на биологические свойства конъюгатов. В мировой практике, как правило, используют технологии конъюгации с линкерами.
Цель изобретения. Разработка новых технологий при упрощении процесса получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба с сохранением уровня его высокой антигенной активности для создания вакцин.
Технический результат изобретения заключается в создании антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для получения гемофильной типа b конъюгированной вакцины (Hib), а также комбинированных вакцин, содержащих АДС + Hib, АКДС + Hib.
Технический результат достигается тем, что способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов включает следующие стадии производства:
- культивирование штамма Haemophilusinfluenzae типа b (Hib) № В-7519 проводили на шоколадном агаре, с добавлением бацитрацина и последующим переводом на жидкую питательную среду следующего состава, г/л: солянокислотный гидролизат казеина - 12; глюкоза - 7; экстракт дрожжевой - 3,9; никотинамиддинуклеотид (NAD) - 0,05; гемин - 0,05; витамин В12 - 0,05; витамин B1 - 0,05; витамин В6 - 0,05; NaHPO4 - 2,4; КН2 РО4 - 0,27; рН среды - 7,5;
- инактивирование культуры осуществляли путем ее обработки 0,1% раствором формальдегида в течение 2 часов и отделение клеток Hib от культуральной жидкости путем фильтрации на пластинчатых мембранных фильтрах с диаметром пор 0,22 мкм в тангенциальном потоке;
- при выделении капсульного полисахарида (КП) Hib использовали цетилтриметиламмония бромида (цетавлон), при этом расчет количества цетавлона проводили с учетом содержания в концентрате КП по формуле: mЦ = Р х 48, где mЦ - количество цетавлона, Р - количество фосфора в объеме концентрата ультрафильтрата, 48 - коэффициент пересчета;
- очищение КП проводили методом горячей фенольной обработки с последующим спиртовым осаждением;
- стандартизацию продолжительности оптимального процесса активации столбнячного анатоксина проводили путем отслеживания суммарного изменения рН реакционной среды в зависимости от продолжительности реакции;
-конъюгацию осуществляли путем соединения столбнячного анатоксина с линкером ADH (дигидрозид адипиновой кислоты) карбодиимидным методом и добавляли к нему очищенный КП, обработанный цианилирующим агентом, в качестве которого применяли помимо BrCN(бромциан) также CDAP (1-циано-4-диметиламинопиридин тетрафлюороборат).
Сущность заявляемого способа в подробностях раскрывается следующим образом. Для достижения поставленной цели разработана и доведена до промышленного производства технология получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба, включающая следующие стадии производства:
1. Стадия культивирования и накопления биомассы производственного штамма Hib.
Операция 1.1. Используется производственный штамм Haemophilusinfluenzae типа b № В-7519, задепонированный 24.12.2013 в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур «ГКПМ-Оболенск» Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ).
Область применения штамма: получение вакцинного препарата для профилактики заболеваний, вызванных Haemophilusinfluenzae типа b. Особенностью штамма является его способность выделять в культуральную жидкую среду капсульный полисахарид.
Операция 1.2. Культивирование штамма Haemophilusinfluenzae типа b № В-7519 ведется последовательно на шоколадном агаре, с добавлением бацитрацина и последующим переводом на жидкую питательную среду следующего состава, г/л: солянокислотный гидролизат казеина - 12;глюкоза - 7; экстракт дрожжевой - 3,9; никотинамиддинуклеотид (NAD) - 0,05; гемин - 0,05; витамин В12 - 0,05; витамин В1 - 0,05; витамин В6-0,05; NaHPO4 - 2,4; КН2 РО4 - 0,27; рН среды - 7,5.
Бактериологическая чистота полученной биомассы оценивалась и подтверждалась методами: окраска по Граму, латекс-агглютинация, высев на мясо-пептонныйагар, наличие капсулообразования- окраской по Гинсу-Бури.
2. Стадия разделения клеточной биомассы Hib и культуральной жидкости, ее очистка и концентрирование.
Операция 2.1. Разделение клеточной биомассы и культуральной жидкости. Полученную жидкую биомассу Hib обрабатывают 0,1% раствором формальдегида в течение 2 часов и отделяют клетки Hib от культуральной жидкости с помощью фильтрации на пластинчатых мембранных полиамидных или полисульфоновых фильтрах с диаметром пор 0,22 мкм в тангенциальном потоке.
Операция 2.2. Очистка культуральной жидкости от ингредиентов питательной среды, формальдегида и ее концентрирование осуществляют путем тангенциальной ультрафильтрации на установке с полиамидными или полисульфоновыми полыми волокнами с молекулярными параметрами концентрирования с пределом задержания 100 кДа. В полуфабрикате определяют содержание фосфора, капсульного полисахарида, формальдегида, рибозы.
3. Стадия выделения и очистки капсульного полисахарида Hib.
Операция 3.1. Выделение капсульного полисахарида Hib. Из полученного концентрата на стадии 2 выделяют капсульный полисахарид Hib путем использования методики комплексообразования фосфатной группы капсульного полисахарида Hib с цетилтриметиламмонием бромидом (цетавлоном). Расчет количества цетавлона брали с учетом содержания в концентрате капсульного полисахарида. Расчет количества цетавлона проводили по формуле: mЦ = Р х 48, где mЦ - количество цетавлона, Р - количество фосфора в объеме концентрата ультрафильтрата, 48 - коэффициент пересчета.
Выпавший осадок комплекса (цетавлон + капсульный полисахарид Hib) отделяли центрифугированием при 3000 об/мин на холоду (8±2°С) в течение 30 минут.
Осадок растворяли в 0,5 Μ растворе натрия хлорида. Полученную суспензию осаждали 5 объемами охлажденного (- 20°С) этилового спирта. Далее очистку капсульного полисахарида от белка, остаточных количеств цетавлона проводили методом горячей фенольной обработки с последующим спиртовым осаждением. После экстракции осуществляли центрифугирование на холоду при температуре 8±2°С в течение 30-40 минут при 6000 об/мин. Полученный осадок растворяли в 0,5 Μ растворе натрия хлорида и подвергали диализу против дистиллированной воды до отрицательной или слабо положительной реакции препарата с реактивом Фолина, подтверждающим очистку от остаточных количеств белка и фенола.
Полученный очищенный капсульный полисахарид Hib контролировали по показателям: «Фосфор», «Капсульный полисахарид», «Рибоза»,«Нуклеиновые кислоты», «Формальдегид», «Белок», «Стерильность», «Подлинность», «Токсичность», «Пирогенность».
Предлагаемое изобретение поясняется иллюстративным материалом.
На фиг. 1 в таблице 1 представлены результаты контроля очищенного капсульного полисахарида Hib.
Дополнительно, используя метод ядерно-магнитного резонанса, было подтверждено, что получаемый по разработанной технологии капсульный полисахарид Hib представляет собой по структуре полирибозилрибитол фосфат.
4. Стадия конъюгирования капсульного полисахарида Hib со столбнячным анатоксином.
Очищенный капсульный полисахарид Hib конъюгировали со столбнячным анатоксином производства НПО «Микроген» по схеме, представленной на фиг. 2, где 1 - капсульный полисахарид (полирибозилрибитолфосфат); 2 - дериват капсульного полисахарида; 3 - дигидразид адипиновой кислоты; 4 - столбнячный анатоксин; 5 - активированный столбнячный анатоксин; 6 - конъюгат активированного столбнячного анатоксина и капсульного полисахарида.
Химическая схема синтеза субстанции Hib включает:
- активацию карбоксильных групп столбнячного анатоксина с присоединением к нему линкера (дигидразида адипиновой кислоты) карбодиимидным методом; - получение деривата капсульного полисахарида обработкой капсульного полисахарида цианилирующим агентом, который обеспечивает связывание активированного столбнячного анатоксина с капсульным полисахаридом ковалентной связью;
Необходимо отметить, что были проведены работы по совершенствованию технологии конъюгации, которые заключались в том, что при получении деривата капсульного полисахарида в качестве цианилирующего агента, помимо BrCN (бромциан) применялся CDAP (1-циано-4-диметиламинопиридинтетрафлюороборат), который обладает меньшей токсичностью и более высокими конъюгирующими свойствами, чем BrCN.
Связывание столбнячного анатоксина и капсульного полисахарида подтверждается результатами аналитической гель-хроматографии на носителях Сефароза 4 В и ToyopearlH W65.
На фиг. 3 представлены результаты гель-хроматографии на Сефарозе 4 В препаратов до конъюгации.
На фиг. 4 представлены результаты гель-хроматографииконъюгата на Сефарозе 4 В. Где PSR - капсульный полисахарид Hib (по реакции на рибозу с орцином), АТХ - анатоксин столбнячный (по методу Лоури).
По нашему мнению, этот метод анализа более наглядно отражает процесс конъюгации, т.к. идет регистрация по двум показателям (содержание белка по методу Лоури и содержание рибозы с орциновым реактивом), в отличие от регистрации единого коэффициента поглощения при 260 нм, стандартной для систем ВЭЖХ.
В процессе выполнения исследования были усовершенствованы и стандартизованы и другие технологические процессы. Так, экспериментальным путем было установлено, что при избыточной продолжительности процесса активации столбнячного анатоксина происходит полимеризация со сшивкой отдельных молекул анатоксина между собой и снижение растворимости полученных продуктов, приводящее к снижению эффективности дальнейших этапов биохимического синтеза. В связи с этим потребовалось стандартизировать продолжительность процесса активации, чтобы не допустить сшивки молекул столбнячного анатоксина между собой.
Также было установлено, что в процессе активации столбнячного анатоксина реакционная среда защелачивается из-за участия карбоксильных групп столбнячного анатоксина в образовании связей с остатком ADH и корректируется внесением 0,1 Μ раствора HCl, при изменении рН на 0,05-0,1 от целевого значения (реакция идет при рН менее 6,0). На основании контроля изменения рН и регистрации объема вносимого раствора HCl для коррекции рН был составлен график зависимости суммарного изменения рН за единицу времени. В ходе насыщения изменение рН за единицу времени снижается и отражает скорость образования связей между столбнячным анатоксином и ADH.
Пример зависимости суммарного изменения рН реакционной среды от продолжительности реакции показан на фиг. 5.
Из графика видно, что более 95% изменений рН(в результате образования ковалентных связей СООН-группами белка) происходит за 100 минут. За оставшиеся 50 минут рН изменяется менее, чем на 0,05 единиц и дальнейшая реакция активации практически останавливается. Таким образом, отслеживание зависимости изменения рН за единицу времени позволяет установить степень связывания карбоксильными группами столбнячного анатоксина ADH и установить оптимальную продолжительность активации.
Продолжительность активации является критической точкой (КТ) данного процесса, контроль которой необходим, чтобы снизить время негативного воздействия кислой среды на столбнячный анатоксин, избежать частичной денатурации и повышения молекулярных параметров в результате сшивания компонентов субстанции.
Полученный конъюгат капсульного полисахарида Hib и столбнячного анатоксина, который является действующим веществом антигенной субстанции гемофильного микроба,в количестве трех экспериментальных серий был проконтролирован по показателям,представленным на фиг. 6 в табл. 2.
Результаты контроля свидетельствуют о том, что субстанция на основе конъюгата очищенного капсульного полисахарида Hib и столбнячного анатоксина обладает достаточной степенью конъюгации, не токсична, апирогенна и не содержит примесей и следов реагентов, применявшихся в процессе изготовления препарата.
Заключение
1. Полученный экзогенный антигенный капсульный полисахарид Hib, очищенный фенольной экстракцией, является химически чистым, а его структура представляет собой полирибозилрибитолфосфат.Данная технология позволяет очистить капсульный полисахарид Hib от белковых примесей, компонентов питательной среды, нуклеиновых кислот, гексозы. Подлинность субстанции, содержащей капсульный полисахарид Hib, подтверждена положительной реакцией латекс-агглютинации. Субстанция апирогенна и не токсична.
2. Разработана формула расчета количества цетавлона, необходимого для выделения капсульного полисахарида.
3. Полученные данные об экспериментальных сериях субстанции гемофильной типа b конъюгированной свидетельствуют о том, что предложенный способ получения антигенного капсульного полисахарида Haemophilusinfluenzae типа b (Hib) позволяет проводить синтез субстанции с заданными свойствами и характеристиками.
В процессе работы над изобретением был усовершенствован ряд технологических процессов:
- при получении деривата капсульного полисахарида в качестве цианилирующего агента, помимо BrCN, был применен CDAP;
- для определения оптимальной продолжительности активации столбнячного анатоксина использована корреляция, которая позволила установить степень связывания карбоксильными группами столбнячного анатоксина с ADH при изменении рН за единицу времени и стандартизовать время проведения реакции;
- разработан метод определения степени конъюгации столбнячного анатоксина и капсульного полисахарида Hib с использованием избирательного осаждения дезоксихолевой кислотой.
Анализируя результаты проведенного исследования, можно сказать, что, антигенная субстанция гемофильного типа b микроба применима как для получения моновакцин, так и комбинированных вакцин с конъюгированным типа b полисахаридом.
В настоящее время в связи с увеличением числа инфекционных заболеваний, контролируемых методами вакцинопрофилактики, актуальное значение приобретает разработка комбинированных вакцин.
Проведены экспериментальные исследования по совместному введению лабораторным животным антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба и адсорбированной дифтерийно-столбнячной вакцины (выпускаемая в России АДС вакцина). Полученные экспериментальные данные показали, что комбинированный препарат, содержащий антигенную конъюгированную субстанцию гемофильного типа b микроба и АДС вакцины в человеко-дозе, не обладал токсичностью и не вызывал гибели животных. Патоморфологические методы исследования не выявили изменений в органах экспериментальных животных.
Данные иммунологических исследований на экспериментальных животных представлены на фиг. 7 и фиг. 8 в таблице 3, где СТА - столбнячный анатоксин, ДА -дифтерийный анатоксин, Hib - гемофильный капсульный полисахарид. На фиг. 7 показан уровень сероконверсии (%) к СТА, ДА, Hib.
Полученная иммуногенная субстанция гемофильного типа b микроба обеспечивает достаточный уровень антигенности и может использоваться при создании конъюгированных Hib-вакцин и как компонент в комбинированных вакцинах.
Claims (13)
1. Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов, характеризующийся тем, что он включает следующие стадии:
- культивирование штамма Haemophilus influenzae типа b (Hib) № В-7519 проводят на шоколадном агаре с добавлением бацитрацина и последующим переводом на жидкую питательную среду следующего состава: солянокислотный гидролизат казеина, глюкоза, экстракт дрожжевой, никотинамиддинуклеотид (NAD), гемин, витамины группы В, NaHPO4, KH2PO4;
- инактивирование культуры осуществляют путем ее обработки 0,1% раствором формальдегида и отделение клеток Hib от культуральной жидкости - путем фильтрации на пластинчатых мембранных фильтрах в тангенциальном потоке;
- при выделении капсульного полисахарида (КП) Hib используют цетилтриметиламмония бромид (цетавлон), при этом расчет количества цетавлона проводят с учетом содержания в концентрате КП по формуле: mЦ=Рх48, где mЦ - количество цетавлона, Ρ - количество фосфора в объеме концентрата ультрафильтрата, 48 - коэффициент пересчета;
- очищение КП проводят методом горячей фенольной обработки с последующим спиртовым осаждением;
- для стадии конъюгации используют столбнячный анатоксин, активируя его карбодиимидным методом, присоединяя к нему молекулу-линкер ADH (дигидразид адипиновой кислоты);
- конъюгацию осуществляют путем добавления к активированному столбнячному анатоксину очищенного капсульного полисахарида Hib, обработанного цианилирующим агентом.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что при культивировании штамма Haemophilus influenzae типа b (Hib) № В-7519 используют жидкую питательную среду следующего состава, г/л: солянокислотный гидролизат казеина - 12; глюкоза - 7; экстракт дрожжевой - 3,9; никотинамиддинуклеотид (NAD) - 0,05; гемин - 0,05; витамин В12 - 0,05; витамин В1 - 0,05; витамин В6 - 0,05; NaHPO4 - 2,4; KH2PO4 - 0.27; рН среды - 7,5.
3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что культуру при инактивировании обрабатывают 0,1% раствором формальдегида в течение 2 часов.
4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для фильтрации культуральной жидкости при отделении от нее клеток Hib используют пластинчатые мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм.
5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве цианилирующего агента используют BrCN (бромциан).
6. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве цианилирующего агента используют CDAP (1-циано-4-диметиламинопиридин тетрафлюороборат).
7. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что стандартизацию продолжительности оптимального процесса активации столбнячного анатоксина и капсульного полисахарида Hib проводят путем отслеживания суммарного изменения рН реакционной среды в зависимости от продолжительности реакции.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021109827A RU2770877C1 (ru) | 2021-04-08 | 2021-04-08 | Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021109827A RU2770877C1 (ru) | 2021-04-08 | 2021-04-08 | Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2770877C1 true RU2770877C1 (ru) | 2022-04-22 |
Family
ID=81306325
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021109827A RU2770877C1 (ru) | 2021-04-08 | 2021-04-08 | Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2770877C1 (ru) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185191C1 (ru) * | 2001-02-01 | 2002-07-20 | Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии | Способ получения антигенного препарата haemophilus influenzae типа b (hib) |
| EA013374B1 (ru) * | 2005-06-27 | 2010-04-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Способ изготовления вакцин |
| CN105431446A (zh) * | 2013-05-20 | 2016-03-23 | 桑塔生物科技私人有限公司 | 多糖蛋白质结合物的纯化 |
| CN103623404B (zh) * | 2012-08-28 | 2016-08-03 | 天士力制药集团股份有限公司 | 一种b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的制备方法 |
| RU2704452C1 (ru) * | 2019-04-22 | 2019-10-28 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства | Способ получения вакцины гемофильной тип b конъюгированной |
| RU2758090C2 (ru) * | 2016-03-15 | 2021-10-26 | Мсд Уэлком Траст Хиллеман Лабораторис Пвт. Лтд. | Новые конъюгаты полисахарида с белком и способ их получения |
-
2021
- 2021-04-08 RU RU2021109827A patent/RU2770877C1/ru active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185191C1 (ru) * | 2001-02-01 | 2002-07-20 | Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии | Способ получения антигенного препарата haemophilus influenzae типа b (hib) |
| EA013374B1 (ru) * | 2005-06-27 | 2010-04-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Способ изготовления вакцин |
| CN103623404B (zh) * | 2012-08-28 | 2016-08-03 | 天士力制药集团股份有限公司 | 一种b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的制备方法 |
| CN105431446A (zh) * | 2013-05-20 | 2016-03-23 | 桑塔生物科技私人有限公司 | 多糖蛋白质结合物的纯化 |
| RU2758090C2 (ru) * | 2016-03-15 | 2021-10-26 | Мсд Уэлком Траст Хиллеман Лабораторис Пвт. Лтд. | Новые конъюгаты полисахарида с белком и способ их получения |
| RU2704452C1 (ru) * | 2019-04-22 | 2019-10-28 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства | Способ получения вакцины гемофильной тип b конъюгированной |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| М.В. АБРАМЦЕВА, А.П. ТАРАСОВ и др. Гемофильная инфекция типа b. Заболеваемость и вакцинопрофилактика, БИО-препараты, профилактика, диагностика, лечение, 2017, т.17, N2, стр.78-86. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2008339553B2 (en) | Fermentation processes for cultivating Streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom | |
| US6146902A (en) | Purification of polysaccharide-protein conjugate vaccines by ultrafiltration with ammonium sulfate solutions | |
| RU2627156C2 (ru) | Высокоэффективный способ получения бактериального полисахарида, получение конъюгата на его основе и иммуногенная композиция | |
| KR840001512B1 (ko) | 백일해 톡소이드의 제조방법 | |
| CN105031634A (zh) | A群c群脑膜炎球菌多糖结合疫苗活化工艺 | |
| US8093034B2 (en) | Fed batch culture methods for streptococci | |
| CN101724085B (zh) | 一种荚膜多糖纯化方法 | |
| EP0407037A1 (en) | Process for removing bacterial endotoxin from gram-negative polysaccharides | |
| CN101081296A (zh) | 一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖制备方法及其联合疫苗 | |
| RU2770877C1 (ru) | Способ получения антигенной конъюгированной субстанции гемофильного типа b микроба для создания вакцинных препаратов | |
| RU2185191C1 (ru) | Способ получения антигенного препарата haemophilus influenzae типа b (hib) | |
| RU2704452C1 (ru) | Способ получения вакцины гемофильной тип b конъюгированной | |
| US10172928B2 (en) | Purification of streptococcal capsular polysaccharide | |
| CN117679500B (zh) | 一种四价流脑疫苗的制备方法 | |
| AU2013202943A1 (en) | Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom | |
| RU2407792C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ IgAl-ПРОТЕАЗЫ ИЗ КУЛЬТУРЫ NEISSERIA MENINGITIDIS СЕРОГРУППЫ А И ИММУНОГЕННЫЙ ПРЕПАРАТ НА ЕЕ ОСНОВЕ | |
| CN114867864A (zh) | 用于荚膜多糖聚核糖基-核糖醇-磷酸(prp)的生产、回收和纯化的方法及其用途 | |
| Kambrath et al. | Optimization of Media and Feeding Strategy for Improved Capsular Polysaccharide Yield for Neisseria meningitidis W-135 | |
| BR102015002980B1 (pt) | processo para purificar polissacarídeo bacteriano |