[go: up one dir, main page]

RU2766750C1 - Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype - Google Patents

Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype Download PDF

Info

Publication number
RU2766750C1
RU2766750C1 RU2021111133A RU2021111133A RU2766750C1 RU 2766750 C1 RU2766750 C1 RU 2766750C1 RU 2021111133 A RU2021111133 A RU 2021111133A RU 2021111133 A RU2021111133 A RU 2021111133A RU 2766750 C1 RU2766750 C1 RU 2766750C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
pregnancy
karyotype
embryo
normal
developing
Prior art date
Application number
RU2021111133A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Елена Владимировна Кудрявцева
Владислав Викторович Ковалев
Николай Николаевич Потапов
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России)
Priority to RU2021111133A priority Critical patent/RU2766750C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2766750C1 publication Critical patent/RU2766750C1/en

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813Hybridisation assays
    • C12Q1/6827Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/686Polymerase chain reaction [PCR]
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to medicine, particularly to obstetrics, and aims at prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype. Woman’s medical history is determined: a history of infertility, adenomyosis, thrombocyte count. Analysis of polymorphisms is performed PAI1-675 5G/4G, MTHFR C677T, MTRR A66G, NOS3 C-786T. Partner’s spermogram is examined. Prognostic index Z is calculated by formula Z=1.8X1+1.8X2+0.008X3+0.3X4+X5+1.7X6+1.2X7-1.7X8-2.79. If Z > 0, a high risk of a missed pregnancy is predicted in the presence of an embryo with a normal karyotype; if Z < 0, a low risk is predicted.
EFFECT: invention provides more effective prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype, as well as ease of implementation.
1 cl, 2 dwg, 2 tbl, 3 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается способа прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе (хромосомном наборе) эмбриона.The present invention relates to medicine, namely to obstetrics, and concerns a method for predicting a non-developing pregnancy with a normal karyotype (chromosome set) of the embryo.

Неразвивающаяся беременность - это не только медицинская, но и социально-демографическая проблема. В 80-90% случаев неразвивающаяся беременность происходит в 1 триместре, и в 50-60% случаев ее причиной является наличие хромосомных аномалий у эмбриона [4]. Однако в 40-50% случаев потеря беременности происходит несмотря на нормальный кариотип эмбриона, то есть является предотвратимой. При своевременном прогнозировании потери беременности с генетически полноценным эмбрионом, возможно раннее начало профилактических мероприятий, пролонгирование беременности и рождение здорового ребенка.Non-developing pregnancy is not only a medical, but also a socio-demographic problem. In 80-90% of cases, non-developing pregnancy occurs in the 1st trimester, and in 50-60% of cases it is caused by the presence of chromosomal abnormalities in the embryo [4]. However, in 40-50% of cases, pregnancy loss occurs despite the normal karyotype of the embryo, that is, it is preventable. With timely prediction of pregnancy loss with a genetically complete embryo, it is possible to start preventive measures early, prolong pregnancy and give birth to a healthy child.

Несмотря на большое число исследований, вопрос об этиологии, патогенезе и прогнозировании невынашивания беременности находится в стадии научного поиска [4, 26].Despite a large number of studies, the question of the etiology, pathogenesis and prediction of miscarriage is at the stage of scientific research [4, 26].

Установить истинную причину «замершей» беременности удается не всегда. Наиболее часто в качестве основных причин неразвивающейся беременности рассматривают хромосомные аномалии эмбриона, анатомические дефекты (пороки развития матки), инфекционные заболевания, гормональные нарушения [1, 4, 7, 12, 15, 16, 26]. По данным Сидельниковой В.М. все факторы можно разделить на социально-биологические (возраст матери, условия труда, наличие профессиональных вредностей, характер отношений между супругами, наличие стрессовых ситуаций, вредных привычек, влияние климатических зон и т.д.) и медицинские (генетические, эндокринологические, инфекционные, иммунологические, анатомические) [16].It is not always possible to establish the true cause of a "frozen" pregnancy. Most often, chromosomal abnormalities of the embryo, anatomical defects (malformations of the uterus), infectious diseases, and hormonal disorders are considered as the main causes of non-developing pregnancy [1, 4, 7, 12, 15, 16, 26]. According to Sidelnikova V.M. all factors can be divided into socio-biological (mother's age, working conditions, the presence of occupational hazards, the nature of relations between spouses, the presence of stressful situations, bad habits, the influence of climatic zones, etc.) and medical (genetic, endocrinological, infectious, immunological , anatomical) [16].

В последние годы в генезе невынашивания беременности отмечено возрастание роли «мужского» фактора. В нескольких научных публикациях показано, что в парах, у которых в анамнезе были потери беременности, обязательно следует учитывать качество спермы, профессиональные вредности и образ жизни супруга [19, 22, 25, 27].In recent years, an increase in the role of the "male" factor has been noted in the genesis of miscarriage. Several scientific publications have shown that in couples with a history of pregnancy loss, it is imperative to take into account the quality of sperm, occupational hazards and lifestyle of the spouse [19, 22, 25, 27].

Ряд авторов говорит о возможной генетической предрасположенности к невынашиванию беременности у женщины. Чаще всего в этом аспекте изучаются гены тромбофилии, гены фолатного метаболизма, а также гены-регуляторы сосудистого тонуса. На фенотипическом уровне реализация генетических факторов часто приводит к формированию неблагоприятного гиперкоагуляционного фона, повышенной концентрации токсичных продуктов, патологии эндотелиальных клеток. Учитывая сложность метаболических систем, определяющих гармоничное взаимодействие матери и плода, функциональная ослабленность многих генов реализуется в процессе беременности [2, 3].A number of authors talk about a possible genetic predisposition to miscarriage in a woman. Most often, thrombophilia genes, genes of folate metabolism, as well as genes that regulate vascular tone are studied in this aspect. At the phenotypic level, the implementation of genetic factors often leads to the formation of an unfavorable hypercoagulable background, an increased concentration of toxic products, and endothelial cell pathology. Given the complexity of metabolic systems that determine the harmonious interaction between mother and fetus, the functional weakness of many genes is realized during pregnancy [2, 3].

В данный момент известен целый ряд полиморфизмов генов, ассоциированных с потерей плода на разных сроках беременности. Предполагается, что при тромбофилии нарушаются процессы адекватной имплантации оплодотворенной яйцеклетки, трансформации спиральных артерий и плацентации [2, 14].Currently, a number of gene polymorphisms associated with fetal loss at different stages of pregnancy are known. It is assumed that thrombophilia disrupts the processes of adequate implantation of a fertilized egg, transformation of spiral arteries, and placentation [2, 14].

Ген РАН расположен на 7 хромосоме. У гомозигот по аллелю 4G (генотип 4G/4G) повышение концентрации ингибитора активатора плазминогена-1 в плазме крови приводит к повышению риска тромбообразования, а при беременности - к увеличению риска невынашивания вследствие десинхронизации процессов фибринолиза и фибринообразования [8].The RAS gene is located on chromosome 7. In homozygotes for the 4G allele (genotype 4G/4G), an increase in the concentration of plasminogen activator-1 inhibitor in blood plasma leads to an increased risk of thrombosis, and during pregnancy, to an increased risk of miscarriage due to desynchronization of the processes of fibrinolysis and fibrin formation [8].

Ген MTHFR расположен на коротком плече первой хромосомы. Отмечается повышение частоты встречаемости аллеля 677Т у женщин с невынашиванием беременности [20, 23, 24, 28]. Ген MTHFR кодирует фермент метионинтетрагидрофолат редуктазу, которая является основным ферментом фолатного цикла. Снижение активности этого фермента из-за носительства полиморфного варианта гена MTHFR может приводить к нарушению пути реметилирования гомоцистеина (перехода гомоцистеина в метионин), к гипергомоцистеинемии и повреждению эндотелия.The MTHFR gene is located on the short arm of the first chromosome. There is an increase in the frequency of occurrence of the 677T allele in women with miscarriage [20, 23, 24, 28]. The MTHFR gene encodes the enzyme methiontetrahydrofolate reductase, which is the main enzyme of the folate cycle. A decrease in the activity of this enzyme due to the carriage of a polymorphic variant of the MTHFR gene can lead to disruption of the homocysteine remethylation pathway (transition of homocysteine to methionine), hyperhomocysteinemia, and endothelial damage.

Ген MTRR расположен на 5 хромосоме. Полиморфизм MTRR A66G в 4 раза снижает активность фермента метионинсинтазы редуктазы, что может приводить к развитию патологии, связанной с накоплением гомоцистеина в плазме [21].The MTRR gene is located on chromosome 5. The MTRR A66G polymorphism reduces the activity of the methionine synthase reductase enzyme by 4 times, which can lead to the development of a pathology associated with the accumulation of homocysteine in plasma [21].

Ген NOS3 кодирует фермент NO-синтазу 3-го типа, отвечающий за синтез оксида азота клетками эндотелия. Существуют данные, что полиморфизмы этого гена играют роль при привычном невынашивании беременности, особенно, в сочетании с другими неблагоприятными полиморфизмами (например, в генах тромбофилии и фолатного цикла) [18, 29, 30].The NOS3 gene encodes the type 3 NO synthase enzyme responsible for the synthesis of nitric oxide by endothelial cells. There is evidence that polymorphisms of this gene play a role in recurrent miscarriage, especially in combination with other unfavorable polymorphisms (for example, in the thrombophilia and folate cycle genes) [18, 29, 30].

Разработка новых методов прогнозирования невынашивания беременности является своевременной и актуальной. При этом необходимо учитывать клинико-анамнестические параметры как самой женщины, так и ее партнера. Именно подобные математические модели, учитывающие множественные факторы риска, могут быть эффективными для прогнозирования неразвивающейся беременности. Аналогами прогнозирования аномалий родовой деятельности явились:The development of new methods for predicting miscarriage is timely and relevant. In this case, it is necessary to take into account the clinical and anamnestic parameters of both the woman herself and her partner. It is these mathematical models that take into account multiple risk factors that can be effective for predicting non-developing pregnancy. Analogues of predicting anomalies of labor activity were:

1. Способ прогнозирования невынашивания первой половины беременности (пат. РФ №2566728, 2015). Пациенткам проводят генотипирование: анализ полиморфизма rs-4680 гена СОМТ.1. A method for predicting miscarriage in the first half of pregnancy (US Pat. RF No. 2566728, 2015). Patients undergo genotyping: analysis of the rs-4680 polymorphism of the COMT gene.

Недостатки метода: способ прогнозирования основан лишь на частоте встречаемости полиморфных вариантов одного единственного гена (СОМТ), не учитывается влияние других возможных факторов риска, что снижаетне чувствительность и специфичность способа.Disadvantages of the method: the prediction method is based only on the frequency of occurrence of polymorphic variants of a single gene (SOMT), the influence of other possible risk factors is not taken into account, which reduces the sensitivity and specificity of the method.

2. Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации (пат. РФ №2627472, 2017).2. A method for predicting miscarriage of an infectious genesis in the early stages of gestation (US Pat. RF No. 2627472, 2017).

В сыворотке крови беременных в 1 триместре (в сроке 6-11 недель) определяют уровень цитокина IL-288.In the blood serum of pregnant women in the 1st trimester (in the period of 6-11 weeks), the level of cytokine IL-288 is determined.

Недостатки метода: оценка риска проводится уже при беременности, причем в 6-11 недель (тогда как большинство потерь беременности в 1 триместре происходит в 6-7 недель), прогноз невынашивания беременности основывается только на одном показателе.Disadvantages of the method: risk assessment is carried out already during pregnancy, and at 6-11 weeks (whereas most pregnancy losses in the 1st trimester occur at 6-7 weeks), the prediction of miscarriage is based on only one indicator.

3. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности (пат. РФ №2689165, 2019). В 6-10 недель беременности в эпителиальных клетках цервикального канала определяется экспрессия TLR2, TLR10 и IDO методом ПНР и оценивается возраст менархе.3. A method for predicting a non-developing pregnancy (US Pat. No. 2689165, 2019). At 6-10 weeks of pregnancy in the epithelial cells of the cervical canal, the expression of TLR2, TLR10 and IDO is determined by the PNR method and the age of the menarche is estimated.

Недостатки метода: риск неразвивающейся беременности оценивается не при преконцепционной подготовке, а уже при наступившей беременности. В формулу изобретения включены параметры, для которых F-критерий <3,84, а р>0,05, то есть не доказано наличие дискриминирующих особенностей этих переменных.Disadvantages of the method: the risk of non-developing pregnancy is not assessed during preconception preparation, but already during the onset of pregnancy. The claims include parameters for which the F-criterion is <3.84, and p>0.05, that is, the presence of discriminating features of these variables has not been proven.

4. Способ прогнозирования невынашивания беременности в первом триместре беременности (пат. РФ №2341800, 2008). В первом триместре беременности в сыворотке крови определяют уровень субстанции Р и фактор некроза опухоли α.4. A method for predicting miscarriage in the first trimester of pregnancy (US Pat. RF No. 2341800, 2008). In the first trimester of pregnancy, the level of substance P and tumor necrosis factor α are determined in the blood serum.

Недостатки метода: не указана эффективность способа, способ используется уже при наступившей беременности, а не при преконцепционной подготовке.Disadvantages of the method: the effectiveness of the method is not indicated, the method is used already during the onset of pregnancy, and not during pre-conception preparation.

5. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности (пат. РФ №26560694, 2015). Оцениваются такие показатели как иммуноглобулины М и G к цитомегаловирусу, морфологический элемент «токсические бляшки» в сыворотке крови, уровень малонового диальдегида в менструальных выделениях, показатель уровня карбонильных групп белков в менструальных выделениях.5. A method for predicting a non-developing pregnancy (US Pat. RF No. 26560694, 2015). Such indicators as immunoglobulins M and G to cytomegalovirus, the morphological element "toxic plaques" in the blood serum, the level of malondialdehyde in menstrual secretions, the level of carbonyl groups of proteins in menstrual secretions are evaluated.

Недостатки метода: способ оценивает риск неразвивающейся беременности в целом, не дифференцируя неразвивающуюся беременность связанную с ХА у эмбриона и неразвивающуюся беременность, при которой кариотип эмбриона в норме. При этом методы лечения и профилактики данной патологии должны быть совершенно различны в зависимости от того, нормальный хромосомный набор у эмбриона, либо присутствуют ХА, несовместимые с живорождением.Disadvantages of the method: the method assesses the risk of non-developing pregnancy in general, without differentiating non-developing pregnancy associated with CA in the embryo and non-developing pregnancy, in which the karyotype of the embryo is normal. At the same time, the methods of treatment and prevention of this pathology should be completely different depending on whether the embryo has a normal chromosome set, or there are CAs that are incompatible with live birth.

Прототипом предлагаемого метода является описанный в литературе способ определения наследственной предрасположенности к привычному невынашиванию беременности, при котором проводят генотипирование полиморфных вариантов FXIII, AGT, eNOS, PLA1/A2, GPIIIa, FVII, для каждого из полиморфизмов определены коэффициенты значимости (пат. РФ №2532367, 2014). Недостатки метода: оценка риска основана только на выявлении генетических полиморфизмов, без учета других показателей состояния здоровья женщины, не указаны чувствительность и специфичность способа. Кроме того, в предложенной формуле используются показатели только состояния здоровья женщины, не учитывается мужской фактор невынашивания беременности.The prototype of the proposed method is the method described in the literature for determining the hereditary predisposition to recurrent miscarriage, in which genotyping of polymorphic variants FXIII, AGT, eNOS, PLA1 / A2, GPIIIa, FVII is carried out, significance coefficients are determined for each of the polymorphisms (US Pat. RF No. 2532367, 2014). Disadvantages of the method: risk assessment is based only on the detection of genetic polymorphisms, without taking into account other indicators of the woman's health status, the sensitivity and specificity of the method are not indicated. In addition, the proposed formula uses only indicators of the woman's health status, and does not take into account the male factor of miscarriage.

В нашем изобретении мы прогнозируем риск неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона, и при этом используем анамнестические, молекулярно-генетические и лабораторные параметры как женщины, планирующей беременность, так и мужчины - ее партнера.In our invention, we predict the risk of non-developing pregnancy with a normal karyotype of the embryo, and at the same time we use the anamnestic, molecular genetic and laboratory parameters of both the woman planning the pregnancy and the man - her partner.

Поставленная задача - разработка способа прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона при преконцепционной подготовке.The task is to develop a method for predicting a non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype during preconception preparation.

Технический результат - Повышение эффективности прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона, а так же удобство исполнения.EFFECT: increased efficiency of predicting a non-developing pregnancy with a normal karyotype of the embryo, as well as ease of execution.

Способ основан на сборе анамнеза и выявлении факторов риска при преконцепционной подготовке, молекулярно-генетическом исследовании (анализ полиморфизмов РАН -675 5G/4G, MTHFR С677Т, MTRR A66G, NOS3 С-786Т у пациентки, планирующей беременность) и анализе спермограммы партнера с последующим подсчетом прогностического индекса. В предлагаемом способе прогнозирования неразвивающейся беременности впервые в акушерстве использованы данные как женщины, так и мужчины, планирующих деторождение, впервые рассчитывается риск неразвивающейся беременности именно с нормальным кариотипом эмбриона, впервые используются молекулярно-генетические показатели в сочетании с анамнестическими параметрами. Таким образом, предлагаемый способ соответствует критерию «изобретательский уровень».The method is based on the collection of anamnesis and identification of risk factors during preconception preparation, molecular genetic study (analysis of polymorphisms RAN -675 5G / 4G, MTHFR C677T, MTRR A66G, NOS3 C-786T in a patient planning a pregnancy) and analysis of the partner's spermogram with subsequent calculation predictive index. In the proposed method for predicting non-developing pregnancy, for the first time in obstetrics, data are used from both women and men planning childbearing, for the first time the risk of non-developing pregnancy is calculated with a normal embryo karyotype, and for the first time molecular genetic indicators are used in combination with anamnestic parameters. Thus, the proposed method meets the criterion of "inventive step".

Способ осуществляется следующим способом:The method is carried out in the following way:

При преконцепционной подготовке проводится сбор анамнеза - для расчета прогностического индекса необходима информация о наличии бесплодия в анамнезе у пациентки и о наличии аденомиоза (эндометриоза матки).During preconception preparation, an anamnesis is taken - to calculate the prognostic index, information is needed on the patient's history of infertility and the presence of adenomyosis (endometriosis of the uterus).

Далее пациентке проводится анализ уровня тромбоцитов и молекулярно-генетическое исследование - анализ полиморфизмов РАН -675 5G/4G, MTHFR С677Т, MTRR A66G, NOS3 С-786Т. Материалом для исследования служит венозная и периферическая кровь, полученная из локтевой вены или пальца пациента стандартизированным способом, в количестве 5 мл. Полученный материал подвергается ПЦР-амплификации в режиме реального времени с использованием реагентов и протоколов фирмы НПО «ДНК-Технология» (РФ) на приборе ДТ-96 той же фирмы.Next, the patient undergoes an analysis of the level of platelets and a molecular genetic study - analysis of polymorphisms RAS -675 5G / 4G, MTHFR C677T, MTRR A66G, NOS3 C-786T. The material for the study is venous and peripheral blood obtained from the patient's cubital vein or finger in a standardized way, in an amount of 5 ml. The resulting material is subjected to real-time PCR amplification using reagents and protocols from NPO DNA-Technology (RF) on a DT-96 device from the same company.

Для подготовки к сбору эякулята для анализа спермограммы партнера рекомендовалось половое воздержание в течение 2-5 дней. Сбор эякулята осуществлялся после мочеиспускания путем мастурбации в стерильный контейнер, избегая касания стенок и крышки контейнера руками.To prepare for the collection of ejaculate for analysis of the partner's spermogram, sexual abstinence for 2-5 days was recommended. The collection of ejaculate was carried out after urination by masturbation into a sterile container, avoiding touching the walls and lid of the container with hands.

Исследование проводили в соответствии с Руководством ВОЗ по исследованию эякулята. После разжижения проводили подсчет количества сперматозоидов, их концентрацию и подвижность с помощью сперманализатора Biola SCA, морфологию сперматозоидов и количество лейкоцитов (сегментоядерных нейтрофилов) определяли при 100х увеличении микроскопа в окрашенных препаратах. Образцы с концентрацией сперматозоидов более 14 млн/мл, прогрессивной подвижностью более 32% и/или общей подвижностью более 40%, количеством лейкоцитов менее 1 млн/мл, соответствовали критериям нормозооспермии.The study was carried out in accordance with the WHO Guidelines for the study of ejaculate. After liquefaction, the number of spermatozoa was counted, their concentration and motility using the Biola SCA sperm analyzer, the morphology of spermatozoa and the number of leukocytes (segmented neutrophils) were determined at 100x microscope magnification in stained preparations. Samples with a spermatozoa concentration of more than 14 million/ml, progressive motility of more than 32% and/or total motility of more than 40%, and a white blood cell count of less than 1 million/ml met the criteria for normozoospermia.

Дискриминантные переменные для оценки риска неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона представлены в таблице 1. Всем пациенткам с неразвивающейся беременностью проведено цитогенетическое исследование абортивного материала, в группу исследования включались только пациентки, у которых был определен нормальный кариотип эмбриона.Discriminant variables for assessing the risk of non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype are presented in Table 1. All patients with non-developing pregnancy underwent a cytogenetic study of abortive material, the study group included only patients in whom a normal embryo karyotype was determined.

Figure 00000001
Figure 00000001

Использовался пошаговый дискриминантный анализ, основанный на минимизации коэффициента Уилькса (λ) после включения в уравнение регрессии каждого нового предиктора. В уравнение регрессии включались предикторы для которых значение F (F-статистика) было >3,84. Переменные, для которых р было >0,05 были исключены из анализа.A stepwise discriminant analysis was used based on minimizing the Wilks coefficient (λ) after each new predictor was included in the regression equation. The regression equation included predictors for which the F value (F-statistic) was >3.84. Variables for which p was >0.05 were excluded from the analysis.

Результаты пошагового включения переменных в разделяющие функции представлены в таблице 2.The results of the stepwise inclusion of variables in separating functions are presented in Table 2.

Figure 00000002
Figure 00000002

Сущность способа заключается в определении прогностического индекса Z по формуле:The essence of the method is to determine the prognostic index Z according to the formula:

Z=1,8Х1+1,8Х2+0,008Х3+0,ЗХ45+1,7Х6+1,2Х7-1,7Х8-2,79,Z=1.8X 1 +1.8X 2 +0.008X 3 +0.ZX 4 +X 5 +1.7X 6 +1.2X 7 -1.7X 8 -2.79,

где X1 - наличие бесплодия в анамнезе (да - 1, нет - 0);where X 1 - the presence of infertility in history (yes - 1, no - 0);

Х2 - наличие аденомиоза (да - 1, нет - 0);X 2 - the presence of adenomyosis (yes - 1, no - 0);

Х3 - число тромбоцитов, х109/л;X 3 - number of platelets, x10 9 /l;

Х4 - генотип РАН -675 5G/4G (5G5G - -1, 5G4G - 0,4G4G - 1);X 4 - genotype RAS -675 5G/4G (5G5G - -1, 5G4G - 0.4G4G - 1);

Х5 - генотип MTHFR С677Т (СС - -1, СТ - 0, ТТ - 4);X 5 - MTHFR C677T genotype (CC - -1, ST - 0, TT - 4);

Х6 - генотип MTRR A66G (АА - 0, AG - 0, GG - 1);X 6 - genotype MTRR A66G (AA - 0, AG - 0, GG - 1);

Х7 - генотип NOS3 С-786Т (СС - 0, СТ - 0, ТТ - 1);X 7 - genotype NOS3 C-786T (CC - 0, CT - 0, TT - 1);

Х8 - нормозооспермия у партнера (да - 1, нет - 0).X 8 - normozoospermia in a partner (yes - 1, no - 0).

При Z>0 - высокий риск неразвивающейся беременности при наличии эмбриона с нормальным кариотипом, Z<0 - низкий риск.When Z>0 - high risk of non-developing pregnancy in the presence of an embryo with a normal karyotype, Z<0 - low risk.

В группе 1Б показатель Z в среднем составил 1,29(-0,03-3,59), в группе 2 - -1,52(-2,54-0,75). Различия статистически значимы (р=0,0000). Графически значение расчетного показателя Z в исследуемых группах представлено на Фиг. 1.In group 1B, the Z index averaged 1.29 (-0.03-3.59), in group 2 - -1.52 (-2.54-0.75). The differences are statistically significant (p=0.0000). Graphically, the value of the calculated indicator Z in the studied groups is presented in Fig. one.

Чувствительность и специфичность классифицирующей модели была оценена при помощи ROC-анализа. По результатам построения ROC-кривой показатель AUC составил 0,834±0,038, ДИ 95% 0,759-0,909 при р=0,0000, что соответствовало высокому качеству модели. На Фиг. 2 представлена ROC-кривая модели прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона.The sensitivity and specificity of the classifying model was assessed using ROC analysis. According to the results of constructing the ROC-curve, the AUC was 0.834±0.038, 95% CI 0.759-0.909 at p=0.0000, which corresponded to the high quality of the model. On FIG. 2 shows the ROC-curve of the model for predicting non-developing pregnancy with a normal karyotype of the embryo.

Для оценки эффективности разработанного правила прогноза проведена его проверка на экзаменационной выборке, подобранной методом «скользящего» подбора. В результате проведенного анализа установлено, что чувствительность решающего правила составила 78,9%, специфичность 88,9%, эффективность 86%.To evaluate the effectiveness of the developed prediction rule, it was tested on an examination sample selected by the “sliding” selection method. As a result of the analysis, it was found that the sensitivity of the decision rule was 78.9%, specificity 88.9%, efficiency 86%.

Примеры практического использования заявляемого способа.Examples of the practical use of the proposed method.

Пример 1. Пациентка А., 33 года, обратилась с целью преконцепционной подготовки. Наследственность не отягощена, соматический анамнез не отягощен. Пациентка наблюдается у гинеколога с диагнозом «Бесплодие в браке 4 года, первичное, неясного генеза», других гинекологических заболеваний нет, готовится к программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), в программе ЭКО планирует проведение предимплантационного генетического тестирования (ПГТ), и желает оценить риск неразвивающейся беременности при нормальном хромосомном наборе у эмбриона. Пациентке проведен анализ генетических полиморфизмов. Получены следующие результаты: MTHFR С677Т: СТ; MTRR A66G: GA; РАН -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 Т-786С: ТТ. Сдан анализ коагулограммы, результаты в норме, уровень тромбоцитов 198х109/л. Супругу пациентки проведен анализ спермограммы: концентрация сперматозоидов 78 млн/мл, общее количество - 225 млн, прогрессивно подвижных - 44%, количество сперматозоидов с нормальной морфологией - 6%, заключение: нормозооспермия.Example 1 Patient A., aged 33, applied for preconception preparation. Heredity is not burdened, somatic history is not burdened. The patient is seen by a gynecologist with a diagnosis of "Infertility in marriage for 4 years, primary, of unknown origin", there are no other gynecological diseases, she is preparing for an in vitro fertilization (IVF) program, she plans to conduct pre-implantation genetic testing (PGT) in the IVF program, and wants to assess the risk of non-developing pregnancy with a normal chromosome set in the embryo. The patient underwent an analysis of genetic polymorphisms. The following results were obtained: MTHFR C677T: CT; MTRR A66G: GA; RAS -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 T-786S: TT. Passed the analysis of the coagulogram, the results are normal, the level of platelets 198x10 9 /l. The patient's wife underwent a semen analysis: the concentration of spermatozoa was 78 million/ml, the total number was 225 million, progressively mobile - 44%, the number of spermatozoa with normal morphology - 6%, conclusion: normozoospermia.

При расчете индекс Z=-1,1 - низкий риск неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона.When calculating the index Z=-1.1 - low risk of non-developing pregnancy with a normal karyotype of the embryo.

В программе ЭКО после ПГТ проведен перенос 1 эмбриона, кариотип эмбриона нормальный, наступила одноплодная беременность. В сроке беременности 40-41 неделя родилась живая доношенная девочка, с весом 3250 грамм.In the IVF program after PGT, 1 embryo transfer was performed, the karyotype of the embryo was normal, a singleton pregnancy occurred. At 40-41 weeks of gestation, a live full-term girl was born, weighing 3250 grams.

Пример 2. Пациентка М., 26 лет. обратилась с целью преконцепционной подготовки. У сестры пациентки - привычное невынашивание беременности. Гинекологической и экстрагенитальной патологии не выявлено. Пациентке проведен анализ генетических полиморфизмов. Получены следующие результаты: MTHFR С677Т: СС; MTRR A66G: GA; РАН -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 Т-786С: ТС.Сдан анализ коагулограммы, результаты в норме, уровень тромбоцитов 287x109/л. Супругу пациентки проведен анализ спермограммы: концентрация сперматозоидов 45 млн/мл, общее количество - 112,5 млн, прогрессивно подвижных - 25%, количество сперматозоидов с нормальной морфологией - 11%, заключение: астенозооспермия.Example 2. Patient M., 26 years old. applied for the purpose of pre-conception preparation. The patient's sister has habitual miscarriage. Gynecological and extragenital pathology was not revealed. The patient underwent an analysis of genetic polymorphisms. The following results were obtained: MTHFR C677T: CC; MTRR A66G: GA; RAS -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 T-786C: TS. Coagulogram analysis was done, the results are normal, platelet count is 287x10 9 /L. The patient's wife underwent a semen analysis: the concentration of spermatozoa was 45 million/ml, the total number was 112.5 million, progressively mobile - 25%, the number of spermatozoa with normal morphology - 11%, conclusion: asthenozoospermia.

Проведен расчет индекса Z для оценки риска неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона. Индекс Z=-1,79, низкий риск неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона.The Z index was calculated to assess the risk of non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype. Index Z=-1.79, low risk of non-developing pregnancy with normal embryo karyotype.

Рекомендована стандартная преконцепционная подготовка, прием фолиевой кислоты обоим супругам 400 мкг/сут. Через 3 месяца наступила беременность, которая завершилась срочными родами в 39-40 недель рождением живой доношенной девочки.Recommended standard preconception preparation, folic acid intake for both spouses 400 mcg/day. After 3 months, pregnancy occurred, which ended in term delivery at 39-40 weeks with the birth of a live full-term girl.

Пример 3. Пациентка Н., 25 лет, с неразвивающейся беременностью в анамнезе обратилась с целью преконцепционной подготовки. При неразвивающейся беременности исследование кариотипа эмбриона не проведено. Гинекологической и экстрагенитальной патологии не выявлено.Example 3. Patient N., 25 years old, with a history of non-developing pregnancy, applied for preconception preparation. In non-developing pregnancy, the study of the karyotype of the embryo was not carried out. Gynecological and extragenital pathology was not revealed.

Пациентке проведен анализ генетических полиморфизмов. Получены следующие результаты: MTHFR С677Т: ТТ; MTRR A66G: GA; РАН -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 Т-786С: СС.Сдан анализ коагулограммы, результаты в норме, уровень тромбоцитов 380x109/л. Супругу пациентки проведен анализ спермограммы: концентрация сперматозоидов 58 млн/мл, общее количество - 197 млн, прогрессивно подвижных - 14%, количество сперматозоидов с нормальной морфологией - 3%, заключение: астенотератозооспермия.The patient underwent an analysis of genetic polymorphisms. The following results were obtained: MTHFR C677T: TT; MTRR A66G: GA; RAS -675 5G/4G: 5G4G; NOS3 Т-786С: СС. Coagulogram analysis was done, the results are normal, the platelet level is 380x10 9 /l. The patient's wife underwent a semen analysis: the concentration of spermatozoa was 58 million/ml, the total number was 197 million, progressively mobile - 14%, the number of spermatozoa with normal morphology - 3%, conclusion: asthenoteratozoospermia.

При расчете индекс Z=5,45 - высокий риск неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона.When calculating the Z index = 5.45 - a high risk of non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype.

Учитывая высокое значение индекса Z можно предположить, что при первой беременности у эмбриона был нормальный кариотип, и теоретически потеря беременности была предотвратимой.Given the high value of the Z index, it can be assumed that during the first pregnancy the embryo had a normal karyotype, and theoretically pregnancy loss was preventable.

При преконцепционной подготовке пациентке рекомендован прием дипиридамола 75 мг 2 раза в сутки (с целью снижения уровня тромбоцитов, коррекции микроциркуляции), поливитамины, содержащие метилфолат (учитывая полиморфизмы в генах фолатного метаболизма). Супругу пациентки рекомендована консультация андролога, по возможности - коррекция показателей спермограммы.During preconception preparation, the patient was recommended to take dipyridamole 75 mg 2 times a day (in order to reduce the level of platelets, correct microcirculation), multivitamins containing methylfolate (taking into account polymorphisms in the genes of folate metabolism). The patient's spouse was recommended to consult an andrologist, if possible - correction of spermogram parameters.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования эффективный, удобен в исполнении, обеспечивает быстрое получение необходимой информации. Способ дает возможность выявления беременных группы риска по неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона, оптимизировать преконцепционную подготовку и своевременно начать сохраняющую терапию. В случае, если у пациентки уже случилась неразвивающаяся беременность, и не было проведено кариотипирование эмбриона, также возможен расчет прогностического Z. И если Z<0, риск неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона наличия хромосомных аномалий у эмбриона, а если Z>0 - высока вероятность, что кариотип эмбриона при неразвивающейся беременности был нормальным, и в будущем возможна повторная потеря беременности - требуется подробное обследование пациентки. Thus, the proposed forecasting method is efficient, easy to implement, and provides fast obtaining of the necessary information. The method makes it possible to identify pregnant women at risk for non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype, to optimize preconception preparation and to start preconception therapy in a timely manner. If the patient has already had a non-developing pregnancy and no karyotyping of the embryo has been performed, it is also possible to calculate prognostic Z. And if Z<0, the risk of non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype of the presence of chromosomal abnormalities in the embryo, and if Z>0 is high the probability that the karyotype of the embryo during a non-developing pregnancy was normal, and in the future a repeated loss of pregnancy is possible - a detailed examination of the patient is required.

Использованная литература:References:

1. Акушерство: нац. рук. / под ред. Э.К. Айламазяна, В.И. Кулакова, В.Е. Радзинского и др.. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2017. 1200 с. 1. Obstetrics: nat. hands / ed. E.K. Ailamazyan, V.I. Kulakova, V.E. Radzinsky and others. Moscow: GEOTAR-Media, 2017. 1200 p.

2. Андреева М.Д., Капанадзе Д.Л., Самбурова Н.В. Акушерские и перинатальные исходы у пациенток с синдромом потери плода в анамнезе, генетическими и приобретенными формами тромбофилии. Акушерство, гинекология и репродукция. 2014; 8(4): 54-552. Andreeva M.D., Kapanadze D.L., Samburova N.V. Obstetric and perinatal outcomes in patients with a history of fetal loss syndrome, genetic and acquired forms of thrombophilia. Obstetrics, gynecology and reproduction. 2014; 8(4): 54-55

3. Баранов B.C. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины / под ред. В.С. Баранова. СПб.: Изд-во Н-Л, 2009. 528 с.3. Baranov B.C. Genetic passport - the basis of individual and predictive medicine / ed. V.S. Baranov. St. Petersburg: Publishing house N-L, 2009. 528 p.

4. Выкидыш в ранние сроки беременности: диагностика и тактика ведения. Клинические рекомендации. Москва. 2016.4. Miscarriage in early pregnancy: diagnosis and management. Clinical guidelines. Moscow. 2016.

5. Ганковская Л.В., Свитич О.А., Доброхотова Ю.Э., Бахарева И.В., Ритчер О.В., Малушенко С.В. Способ прогнозирования невынашивания беременности инфекционного генеза на ранних сроках гестации. Патент RU 2627472 С1, дата регистрации 04.07.2016, опубл. 08.08.2017.5. Gankovskaya L.V., Svitich O.A., Dobrokhotova Yu.E., Bakhareva I.V., Ritcher O.V., Malushenko S.V. A method for predicting miscarriage of infectious genesis in the early stages of gestation. Patent RU 2627472 C1, registration date 07/04/2016, publ. 08/08/2017.

6. Демидова Е.М., Садекова О.Н., Самоходская Л.М., Ткачук В.А., Яровая Е.Б. Способ определения наследственной предрасположенности к развитию привычного невынашивания беременности. Патент RU 2532367 С2, дата регистрации 18.10.2012, опубл. 10.11.20146. Demidova E.M., Sadekova O.N., Samohodskaya L.M., Tkachuk V.A., Yarovaya E.B. A method for determining hereditary predisposition to the development of habitual miscarriage. Patent RU 2532367 C2, registration date 10/18/2012, publ. 11/10/2014

7. Доброхотова Ю.Э., Мандрыкина Ж.А., Нариманова М.Р. Несостоявшийся выкидыш. Причины и возможности реабилитации. Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2016; 16(4): 85-90.7. Dobrokhotova Yu.E., Mandrykina Zh.A., Narimanova M.R. A failed miscarriage. Causes and possibilities of rehabilitation. Ros. vestn. obstetrician-gynecologist. 2016; 16(4): 85-90.

8. Кирющенков П.А., Ходжаева З.С., Тетруашвили Н.К., Донников А.Е., Белоусов Д.М., Андамова Е.В., и др. Значение полиморфизма ингибитора активатора плазминогена 1-го типа (SERPINE1: 5G>4G) при отслойках хориона и плаценты на ранних сроках беременности. Акушерство и гинекология. 2012; 5: 34-37.8. Kiryushchenkov P.A., Khodzhaeva Z.S., Tetruashvili N.K., Donnikov A.E., Belousov D.M., Andamova E.V., et al. Significance of type 1 plasminogen activator inhibitor polymorphism (SERPINE1: 5G>4G) with detachments of the chorion and placenta in early pregnancy. Obstetrics and gynecology. 2012; 5:34-37.

9. Кудрявцева Е.В., Ковалев В.В. «Тромбофилии в акушерстве: от генотипа к фенотипу»: учебное пособие для врачей. Екатеринбург: УГМУ. 20199. Kudryavtseva E.V., Kovalev V.V. "Thrombophilia in obstetrics: from genotype to phenotype": a textbook for physicians. Yekaterinburg: USMU. 2019

10. Лебедева О.П., Козаренко О.Н., Пахомов С.П., Жукова И.О., Дюмина Ю.В., Саушкина Т.И. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности. Патент RU 2689165 С1, дата регистрации 22.11.2018, опубл. 24.05.2019.10. Lebedeva O.P., Kozarenko O.N., Pakhomov S.P., Zhukova I.O., Dyumina Yu.V., Saushkina T.I. Method for predicting non-developing pregnancy. Patent RU 2689165 C1, registration date 11/22/2018, publ. 05/24/2019.

11. Левченко М.В., Орлов В.И. Способ прогнозирования невынашивания беременности в первом триместре беременности. Патент RU 2341800 С1, дата регистрации 24.08.2007, опубл. 20.12.2008.11. Levchenko M.V., Orlov V.I. A method for predicting miscarriage in the first trimester of pregnancy. Patent RU 2341800 C1, registration date 24.08.2007, publ. 12/20/2008.

12. Макаров И.О., Шешукова Н.А., Овсянникова Т.В. Особености прегравидарной подготовки у женщин с инфекционым генезом невынашивания беременности. Акушерство, гинекология и репродукция. - 2011; 1: 5-7.12. Makarov I.O., Sheshukova N.A., Ovsyannikova T.V. Features of preconception preparation in women with infectious genesis of miscarriage. Obstetrics, gynecology and reproduction. - 2011; 1:5-7.

13. Макаров О.В., Морозова К.В., Луценко Н.Н., Сальникова Л.Е., Хаджиева М.Б. Способ прогнозирования невынашивания первой половины беременности. Патент RU 2566728 С1, дата регистрации 21.03.2014, опубл. 27.10.2015.13. Makarov O.V., Morozova K.V., Lutsenko N.N., Salnikova L.E., Khadzhieva M.B. A method for predicting miscarriage in the first half of pregnancy. Patent RU 2566728 C1, registration date 03/21/2014, publ. 10/27/2015.

14. Макацария АД., Чевенак Ф.А., Бицадзе В.О. Беременность высокого риска. МИА, М-2015, 848-900.14. Makatsaria A.D., Chevenak F.A., Bitsadze V.O. High risk pregnancy. MIA, M-2015, 848-900.

15. Серов В.Н., Кожин А.А. Эколого-генеративный диссонанс и патофизиологические аспекты нарушений генеративной функции центрального генеза. Акушерство и гинекология. 1988; 8: 12-15.15. Serov V.N., Kozhin A.A. Ecological-generative dissonance and pathophysiological aspects of violations of the generative function of the central genesis. Obstetrics and gynecology. 1988; 8:12-15.

16. Сидельникова В.М. Подготовка и ведение беременности у женщин с привычным невынашиванием: метод. пособия и клин. протоколы. 3-е изд. - М.: МЕДпресс-информ, 2013. - 224 с.: ил.16. Sidelnikova V.M. Preparation and management of pregnancy in women with recurrent miscarriage: a method. grants and a wedge. protocols. 3rd ed. - M.: MEDpress-inform, 2013. - 224 p.: ill.

17. Тишкова О.Г., Дикарева Л.В., Воронина Л.П. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности. Патент RU 26560694 С1, дата регистрации 08.07.2014, опубл. 20.08.2015.17. Tishkova O.G., Dikareva L.V., Voronina L.P. Method for predicting non-developing pregnancy. Patent RU 26560694 C1, registration date 07/08/2014, publ. 08/20/2015.

18. Третьякова Т.Б., Башмакова Н.В., Демченко Н.С. Генетические предикторы акушерских осложнений: межгенные ассоциации. Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2012; 6(5): 23-28.18. Tretyakova T.B., Bashmakova N.V., Demchenko N.S. Genetic predictors of obstetric complications: intergenic associations. Ros. vestn. obstetrician-gynecologist. 2012; 6(5): 23-28.

19. Anifandis G., Bounartzi Т., Messini C.I., Dafopoulos K., Sotiriou S., Messinis I.E. The impact of cigarette smoking and alcohol consumption on sperm parameters and sperm DNA fragmentation (SDF) measured by Halosperm(®). Arch Gynecol Obstet. 2014; 290(4): 777-82.19. Anifandis G., Bounartzi T., Messini C.I., Dafopoulos K., Sotiriou S., Messinis I.E. The impact of cigarette smoking and alcohol consumption on sperm parameters and sperm DNA fragmentation (SDF) measured by Halosperm(®). Arch Gynecol Obstet. 2014; 290(4): 777-82.

20. Kamali M., Hantoushzadeh S., Boma S. et al. Association between trombophilic genes polymorphisms and recurrent pregnancy loss susceptibility in the Iranian population: a systematic review and meta-analysis. Iran Biomed J. 2017. 222(22): 78-89.20. Kamali M., Hantoushzadeh S., Boma S. et al. Association between thrombophilic genes polymorphisms and recurrent pregnancy loss susceptibility in the Iranian population: a systematic review and meta-analysis. Iran Biomed J. 2017. 222(22): 78-89.

21. Kurzawski M. et al. Association study of folate-related enzymes (MTHFR, MTR, MTRR) genetic variants with non-obstructive male infertility in a Polish population. Genet Mol Biol. 2015; 38(1): 42-47.21. Kurzawski M. et al. Association study of folate-related enzymes (MTHFR, MTR, MTRR) genetic variants with non-obstructive male infertility in a Polish population. Genet Mol Biol. 2015; 38(1): 42-47.

22. MacDonald A.A., Herbison G.P., Showell M., Farquhar С.М.. The impact of body mass index on semen parameters and reproductive hormones in human males: a systematic review with meta-analysis. Hum Reprod Update. 2010; 16(3): 293-311.22. MacDonald A.A., Herbison G.P., Showell M., Farquhar C.M. The impact of body mass index on semen parameters and reproductive hormones in human males: a systematic review with meta-analysis. Hum Reprod Update. 2010; 16(3): 293-311.

23. Mehandjiev T.R., Tenno N.M., Nakura Y., Georgiev T.P., Minekawa R., Wakimoto T. et al. Impact of maternal methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism on intervillous and decidual pathology with pregnancy loss. J Obstet Gynaecol Res. 2019; 45(1): 78-85. doi: 10.1111/jog.13798. Epub 2018 Aug 23. PMID: 30136429.23. Mehandjiev T.R., Tenno N.M., Nakura Y., Georgiev T.P., Minekawa R., Wakimoto T. et al. Impact of maternal methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism on intervillous and decidual pathology with pregnancy loss. J Obstet Gynaecol Res. 2019; 45(1): 78-85. doi: 10.1111/jog.13798. Epub 2018 Aug 23. PMID: 30136429.

24. Nan Y., Li H. MTHFR genetic polymorphism increases the risk of preterm delivery. Int J Clin Exp Pathol. 2015; 8(6): 7397-402.24. Nan Y., Li H. MTHFR genetic polymorphism increases the risk of preterm delivery. Int J Clinic Exp Pathol. 2015; 8(6): 7397-402.

25. Pacey A.A. Environmental and lifestyle factors associated with sperm DNA damage. Hum Fertil (Camb). 2010; 13: 189-93.25. Pacey A.A. Environmental and lifestyle factors associated with sperm DNA damage. Hum Fertil (Camb). 2010; 13:189-93.

26. Recurrent pregnancy loss. Guideline of the European Society of Reproducrion and Embryology. 2017.26. Recurrent pregnancy loss. Guideline of the European Society of Reproduction and Embryology. 2017.

27. Ruixue W., Hongli Z., Zhihong Z., Rulin D., Dongfeng G., Ruizhi L. The impact of semen quality, occupational exposure to environmental factors and lifestyle on recurrent pregnancy loss. J Assist Reprod Genet. 2013; 30(11): 1513-8.27. Ruixue W., Hongli Z., Zhihong Z., Rulin D., Dongfeng G., Ruizhi L. The impact of semen quality, occupational exposure to environmental factors and lifestyle on recurrent pregnancy loss. J Assist Reprod Genet. 2013; 30(11): 1513-8.

28. Shi X., Xie X., Jia Y. et al. Maternal genetic polymorphisms and unexplained recurrent miscarriage: a systematic review and meta-analysis. Clin Genet. 2017; 91(2): 265-284.28. Shi X., Xie X., Jia Y. et al. Maternal genetic polymorphisms and unexplained recurrent miscarriage: a systematic review and meta-analysis. Clin Genet. 2017; 91(2): 265-284.

29. Trifonova E.A., Swarovskaya M.G., Ganzha O.A. et al. The interaction effect of angiogenesis and endothelial dysfunction-related gene variants increases the susceptibility of recurrent pregnancy loss. J Assist Reprod Genet. 2019; 36(4): 717-726.29. Trifonova E.A., Swarovskaya M.G., Ganzha O.A. et al. The interaction effect of angiogenesis and endothelial dysfunction-related gene variants increases the susceptibility of recurrent pregnancy loss. J Assist Reprod Genet. 2019; 36(4): 717-726.

30. Zhao X., Li Q., Yu F. et al. Gene polymorphism associated with endothelial nitric xide synthase (4VNTR, G894T, C786T) and unexplained recurrent spontaneous abortion risk: A meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2019; 98(4): e1417530. Zhao X., Li Q., Yu F. et al. Gene polymorphism associated with endothelial nitric xide synthase (4VNTR, G894T, C786T) and unexplained recurrent spontaneous abortion risk: A meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2019; 98(4): e14175

Claims (12)

Способ прогнозирования неразвивающейся беременности при нормальном кариотипе эмбриона, характеризующийся тем, что определяют анамнестические данные женщины: наличие бесплодия в анамнезе, наличие аденомиоза, число тромбоцитов, осуществляют анализ полиморфизмов PAI1-675 5G/4G, MTHFR С677Т, MTRR A66G, NOS3 С-786Т, исследуют спермограмму партнера и вычисляют прогностический индекс Z по формуле:A method for predicting a non-developing pregnancy with a normal embryo karyotype, characterized in that the woman's medical history is determined: a history of infertility, the presence of adenomyosis, platelet count, the analysis of polymorphisms PAI1-675 5G / 4G, MTHFR C677T, MTRR A66G, NOS3 C-786T, the partner's spermogram is examined and the prognostic index Z is calculated using the formula: Z=1,8X1+1,8X2+0,008X3+0,3X4+X5+1,7X6+1,2X7-1,7X8-2,79,Z=1.8X 1 +1.8X 2 +0.008X 3 +0.3X 4 +X 5 +1.7X 6 +1.2X 7 -1.7X 8 -2.79, где Z - прогностический индекс;where Z - prognostic index; X1 - наличие бесплодия в анамнезе: да - 1, нет - 0;X 1 - the presence of infertility in history: yes - 1, no - 0; Х2 - наличие аденомиоза: да - 1, нет - 0;X 2 - the presence of adenomyosis: yes - 1, no - 0; Х3 - число тромбоцитов, 109/л;X 3 - the number of platelets, 10 9 /l; Х4 - генотип PAI1-675 5G/4G: 5G5G - -1, 5G4G - 0, 4G4G - 1;X 4 - PAI1-675 5G/4G genotype: 5G5G - -1, 5G4G - 0, 4G4G - 1; Х5 - генотип MTHFR С677Т: СС - -1, СТ - 0, ТТ - 4;X 5 - MTHFR C677T genotype: SS - -1, CT - 0, TT - 4; Х6 - генотип MTRR A66G: АА - 0, AG - 0, GG - 1;X 6 - genotype MTRR A66G: AA - 0, AG - 0, GG - 1; Х7 - генотип NOS3 С-786Т: СС - 0, СТ - 0, ТТ - 1;X 7 - genotype NOS3 C-786T: SS - 0, CT - 0, TT - 1; Х8 - нормозооспермия у партнера: да - 1, нет - 0,X 8 - normozoospermia in a partner: yes - 1, no - 0, и при Z>0 прогнозируют высокий риск неразвивающейся беременности при наличии эмбриона с нормальным кариотипом, при Z<0 - низкий риск.and at Z>0, a high risk of non-developing pregnancy is predicted in the presence of an embryo with a normal karyotype, at Z<0, a low risk.
RU2021111133A 2021-04-19 2021-04-19 Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype RU2766750C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021111133A RU2766750C1 (en) 2021-04-19 2021-04-19 Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021111133A RU2766750C1 (en) 2021-04-19 2021-04-19 Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2766750C1 true RU2766750C1 (en) 2022-03-15

Family

ID=80736654

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021111133A RU2766750C1 (en) 2021-04-19 2021-04-19 Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2766750C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2532367C2 (en) * 2012-10-18 2014-11-10 Общество с ограниченной ответственностью "Университетская медицина" Method for detecting genetic predisposition to recurrent pregnancy loss
WO2021032973A1 (en) * 2019-08-20 2021-02-25 The University Of Warwick Biomarkers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2532367C2 (en) * 2012-10-18 2014-11-10 Общество с ограниченной ответственностью "Университетская медицина" Method for detecting genetic predisposition to recurrent pregnancy loss
WO2021032973A1 (en) * 2019-08-20 2021-02-25 The University Of Warwick Biomarkers

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAO Y. et al. The association of idiopathic recurrent early pregnancy loss with polymorphisms in folic acid metabolism-related genes. Genes Nutr. 2014; 9 (3): 402. *
ФРОЛОВ А.Л. и др. Генетические факторы тромбофилии и состояние системы гемостаза у женщин, перенесших неразвивающуюся беременность. Российский вестник акушера-гинеколога. 2014; 14 (4): 24-28. *
ФРОЛОВ А.Л. и др. Генетические факторы тромбофилии и состояние системы гемостаза у женщин, перенесших неразвивающуюся беременность. Российский вестник акушера-гинеколога. 2014; 14 (4): 24-28. CAO Y. et al. The association of idiopathic recurrent early pregnancy loss with polymorphisms in folic acid metabolism-related genes. Genes Nutr. 2014; 9 (3): 402. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Tanacan et al. A cut‐off value for systemic immune‐inflammation index in the prediction of adverse neonatal outcomes in preterm premature rupture of the membranes
Conde‐Agudelo et al. Novel biomarkers for the prediction of the spontaneous preterm birth phenotype: a systematic review and meta‐analysis
Procházka et al. Factor V Leiden in pregnancies complicated by placental abruption
Elzanaty et al. The impact of epididymal and accessory sex gland function on sperm motility
Roqué et al. Maternal thrombophilias are not associated with early pregnancy loss
Turgut et al. Predicting miscarriage using systemic immune‐inflammation index
Nijs et al. Chromomycin A3 staining, sperm chromatin structure assay and hyaluronic acid binding assay as predictors for assisted reproductive outcome
McCowan et al. Inherited thrombophilias are not increased in “idiopathic” small-for-gestational-age pregnancies
Talbot et al. Fetal fraction of cell-free DNA in pregnancies after fresh or frozen embryo transfer following assisted reproductive technologies
Prochazka et al. Frequency of selected thrombophilias in women with placental abruption
Fjeldstad et al. Markers of placental function correlate with prevalence and quantity of nucleated fetal cells in maternal circulation in normotensive term pregnancies
Naglot et al. Male contributory factors in recurrent pregnancy loss
Du Plessis et al. Screening and diagnosis of women for chorioamnionitis: An integrative literature review
RU2766750C1 (en) Method for prediction of non-developing pregnancy in normal embryo karyotype
Pennings et al. Integrative data mining to identify novel candidate serum biomarkers for pre‐eclampsia screening
Štimac et al. The influence of pre‐eclampsia on fetal lung maturity
Richmond et al. The predictive value of serum uric acid for the occurrence, severity and outcomes of pre-eclampsia among parturients at Nnewi, Nigeria
Cho et al. A history of recurrent pregnancy loss is associated with increased perinatal complications, but not necessarily a longer birth interval: a population study spanning 18 years
Munné et al. Opinion: contemporary insights into the efficacy of Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidy (PGT-A) by mining the Society for Assisted Reproductive Technology (SART) database
Nakahara et al. Maternal risk score for the prediction of fetal inflammatory response syndrome after preterm premature rupture of membranes
Li et al. Association between higher levels of serum estradiol and elevated levels of fibrin (fibrinogen) degradation products in late pregnancy following assisted reproductive technology treatment
RU2760499C1 (en) Method for predicting non-developing pregnancy associated with chromosomal abnormalities of the embryo
Sattorov PREDICTION OF PREMATURE OUTFLOW OF AMNIOTIC FLUID IN PRETERM PREGNANCY
RU2819079C1 (en) Method for selection of tactics of preconception preparation based on individual prediction of early pregnancy loss
Li et al. The interaction effect between advanced paternal age and paternal obesity is associated with the low implantation rate in couples with unexplained recurrent pregnancy loss