RU2766147C2

RU2766147C2 - Применение ботулинических нейротоксинов в лечении

Info

Publication number: RU2766147C2
Application number: RU2019132648A
Authority: RU
Inventors: Соусан АБУШАКРА; Ваджди АХМАД; Фоад ХАСАН; Майкл ДЖАРП
Original assignee: Бонти, Инк.
Priority date: 2017-03-22
Filing date: 2018-03-22
Publication date: 2022-02-08
Also published as: AU2018237198A1; EP3600221A1; US20200046814A1; US11260114B2; AU2018237198B2; BR112019019743A2; BR112019019743B1; AU2022215253A1; CA3057302A1; CN110691579A; RU2022102750A; KR20190126894A; RU2019132648A; AU2025200598A1; JP2020511548A; JP2023076463A; MX2019011196A; MX394918B; WO2018175688A1; RU2019132648A3

Abstract

Группа изобретений относится к косметическому лечению. Способ осуществления косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины, включает введение пациенту путем инъекции общей дозы от приблизительно 0,2 нг до приблизительно 20 нг ботулинического нейротоксина серотипа Е, где общую дозу разделяют на пять приблизительно равных доз ботулинического нейротоксина серотипа Е, и указанные приблизительно равные дозы вводят путем внутримышечной инъекции в следующие мышцы: мышцу гордецов, левый медиальный корругатор, правый медиальный корругатор, левый боковой корругатор и правый боковой корругатор; и начало клинического эффекта косметического лечения наступает в течение 24 часов после введения ботулинического нейротоксина серотипа Е. Также раскрыты другие варианты косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины. Группа изобретений обеспечивает уменьшение межбровных морщин. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 1 табл., 9 пр., 4 ил.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к применению нейротоксинов в лечении.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Косметическая или пластическая хирургия включает хирургические и нехирургические процедуры, которые совершенствуют и изменяют формы тела, улучшая внешность и уверенность. Эти процедуры становятся все более популярными.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В данном документе раскрыты композиции и способы для применения в косметических лечениях. Например, раскрытые воплощения включают применение "быстродействующего" ботулинического токсина в лечении, например, межбровных морщин.

В данном документе раскрыты композиции и способы для применения в минимизации рубцевания. Например, раскрытые воплощения включают применение "быстродействующего" ботулинического токсина в снижении мышечного напряжения рядом с раной, что таким образом предотвращает или уменьшает рубцевание.

В вариантах осуществления мышечная активность рядом с кожным разрезом или разрывом снижается, таким образом, уменьшается или предотвращается образование рубцов.

В вариантах осуществления раскрытые способы включают дополнительные косметические процедуры. Например, раскрытые воплощения включают введение быстродействующего ботулинического нейротоксина в сочетании, например, с инъекцией кожного наполнителя, подтяжкой век, ринопластикой или тому подобным.

В вариантах осуществления ботулинический токсин представляет собой токсин короткого действия.

В вариантах осуществления "быстродействующий" ботулинический токсин является также токсином короткого действия.

В вариантах осуществления косметическое лечение может включать дополнительное введение ботулинического токсина после первоначального введения.

В вариантах осуществления раскрытые способы включают введение быстродействующего ботулинического нейротоксина в сочетании, например, с медленнодействующим нейротоксином.

В вариантах осуществления раскрытые способы включают введение ботулинического нейротоксина короткого действия в сочетании, например, с медленно восстанавливающимся нейротоксином.

В вариантах осуществления дозировка нейротоксина выражена в количестве белка.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фиг. 1 изображены места инъекций, используемые в косметической хирургической процедуре.

На фиг. 2 показана начальная эффективность исследования по лечению межбровных морщин.

На фиг. 3 показана вторичная эффективность исследования по лечению межбровных морщин.

На фиг. 4 показан эффект от однократного местного введения раскрытой композиции ботулинического токсина типа Е на крысиной модели послеоперационной боли.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Раскрытые в данном документе воплощения могут снижать местную мышечную активность и таким образом снижать появление косметических несовершенств или неровностей, например мимических морщин. В некоторых воплощениях косметические неровности могут включать межбровные морщины, лобные морщины, "кроличьи" морщины, неровности от улыбки, неровности подбородка, тяжи платизмы, морщины "марионетки", морщины у губ, гусиные лапки, неровности бровей, их сочетания и тому подобное.

Некоторые воплощения включают способы, включающие дерматологические хирургические процедуры, такие как лечение актинического кератоза, себорейного кератоза, базальноклеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы и других повреждений или подкожных кист.

Места введения, пригодные для применения на практике раскрытых воплощений, могут включать межбровный комплекс, включающий мышцу, сморщивающую бровь, и мышцу гордецов; круговую мышцу глаза; верхнелатеральные волокна круговой мышцы глаза; лобную мышцу; носовую мышцу; мышцу, поднимающую верхнюю губу и крыло носа; круговую мышцу рта; жевательную мышцу; мышцу, опускающую угол рта; и платизму. Иллюстративные места инъекций, пригодные для лечения межбровных морщин, показаны на Фиг. 1.

Воплощения включают лечение грубых морщин.

Раскрытые воплощения могут включать лечение, например, кожных расстройств, например, прыщей, и подобного. Раскрытые воплощения могут включать лечение воспалительных заболеваний кожи. Например, раскрытые воплощения могут включать лечение псориаза, экземы и подобного.

Воплощения, раскрытые в данном документе, могут снижать местную мышечную активность и тем самым уменьшать развитие рубцов, например рубцов, полученных в результате операции. В вариантах осуществления операция может включать косметическую операцию, например ринопластику, подтяжку век, подтяжку "живота" или подобное. В вариантах осуществления операция может включать другие виды медицинских процедур, например удаление аппендикса, трансплантацию органов и подобное. В вариантах осуществления способы включают введение раскрытых композиций рядом с раной.

Воплощения, раскрытые в данном документе, могут снижать местную мышечную активность и тем самым уменьшать развитие рубцов, например, рубцов, полученных в результате травмы. Например, после травматического повреждения раскрытые воплощения могут включать введение раскрытых композиций рядом с травмой, например разрывом или ампутацией.

Места введения, пригодные для применения на практике раскрытых воплощений, могут включать любую область, где мышечная активность должна быть снижена. Например, при использовании в сочетании с процедурами косметической хирургии лица раскрытые воплощения могут включать введение в межбровный комплекс, включающий мышцу, сморщивающую бровь, и мышцу гордецов; круговую мышцу глаза; верхнелатеральные волокна круговой мышцы глаза; лобную мышцу; носовую мышцу; мышцу, поднимающую верхнюю губу и крыло носа; круговую мышцу рта; жевательную мышцу; мышцу, опускающую угол рта; и платизму.

При использовании в сочетании с другими хирургическими процедурами раскрытые воплощения могут включать введение, например, в мышцы руки, ноги, туловища и подобные.

Раскрытые воплощения могут включать способы подготовки места операции перед процедурой, чтобы снизить мышечное напряжение рядом с надрезом.

Раскрытые воплощения могут способствовать выработке, например, эластина, коллагена и тому подобного. Раскрытые воплощения могут включать способы повышения эластичности кожи.

В вариантах осуществления композиции, раскрытые в данном документе, могут включать быстродействующие ботулинические токсины, например, типа Е.

В вариантах осуществления композиции, раскрытые в данном документе, могут включать ботулинические токсины короткого действия, например, типа Е.

В вариантах осуществления композиции, раскрытые в данном документе, могут включать быстродействующие, ботулинические токсины короткого действия, например, типа Е.

Определения:

"Введение" или "вводить" означает стадию подачи (т.е. поступления) фармацевтической композиции или активной ингредиента объекту. Фармацевтические композиции, раскрытые в данном документе, могут быть введены целым рядом подходящих способов, однако как описано в раскрытых способах, композиции вводят локально, например внутримышечными способами введения, такими как инъекция или применение имплантата.

"Ботулинический токсин" или "ботулинический нейротоксин" означает нейротоксин дикого типа, полученный из Clostridium botulinum, а также модифицированные, рекомбинантные, гибридные и химерные ботулинические токсины. Рекомбинантный ботулинический токсин может иметь легкую цепь и/или тяжелую цепь, полученную рекомбинантно из неклостридиальных образцов. "Ботулинический токсин", как используется в данном документе, охватывает ботулинический токсин серотипов А, В, С, D, Е, F, G и Н. "Ботулинический токсин", как используется в данном документе, также охватывает и комплекс ботулинических токсинов (т.е. комплексы 300, 600 и 900 кДа), и чистый ботулинический токсин (т.е. нейротоксическую молекулу приблизительно 150 кДа), все из которых полезны в практике настоящего изобретения. "Очищенный ботулинический токсин" означает чистый ботулинический токсин или комплекс ботулинических токсинов, который выделен, или по существу выделен, из других белков и примесей, которые могут сопутствовать ботулиническому токсину, поскольку он получен из культуры или в процессе ферментации. Таким образом, из очищенного ботулотоксина может быть удалено по меньшей мере 95%, и более предпочтительно по меньшей мере 99% белков, не относящихся к ботулиническому токсину, и примесей.

"Биосовместимый" означает, что существует незначительная воспалительная реакция в месте вживления имплантата.

"Клостридиальный нейротоксин" означает нейротоксин, полученный из или присущий бактерии рода Clostridium, такой как Clostridium botulinum, Clostridium butyricum или Clostridium beratti, а также клостридиальный нейротоксин, полученный рекомбинантно из неклостридиальных образцов.

"Полностью свободный" (в терминологии "состоящий из") означает, что в пределах диапазона детектирования используемого прибора или способа вещество не может быть обнаружено, или его присутствие не может быть подтверждено.

"По существу свободный" означает, что в пределах диапазона детектирования используемого прибора или способа могут быть обнаружены только следовые количества вещества.

"Быстродействующий", как используется в данном документе, относится к ботулиническому токсину, который оказывает на пациента более быстрые эффекты, чем эффекты, вызванные, например, ботулиническим нейротоксином типа А. Например, эффекты быстродействующего ботулинического токсина могут быть заметны в течение 36 часов.

Термин "короткого действия", как используется в данном документе, относится к ботулиническому токсину, эффекты которого у пациента ослабевают быстрее, чем эффекты, вызванные, например, ботулиническим нейротоксином типа А. Например, эффекты от ботулинического токсина короткого действия могут ослабевать в течение, например, 120 часов, 150 часов, 300 часов, 350 часов, 400 часов, 500 часов, 600 часов, 700 часов, 800 часов или т.п. Известно, что ботулинический токсин типа А может обладать эффективностью вплоть до 12 месяцев. Однако обычная продолжительность внутримышечной инъекции ботулинического нейротоксина типа А, как правило, составляет приблизительно от 3 до 4 месяцев.

"Средней продолжительности действия", как используется в данном документе, относится к ботулиническому токсину, который создает эффекты медленнее, чем быстродействующий токсин.

"Нейротоксин" означает биологически активную молекулу со специфическим сродством к поверхностному рецептору нервных клеток. Нейротоксин включает клостридиальные токсины, как в виде чистого токсина, так и в виде комплекса с одним или более чем одним нетоксичным, токсин-ассоциированным белком.

"Пациент" означает человека или объект, не относящийся к человеку, получающий медицинскую или ветеринарную помощь.

"Фармацевтическая композиция" означает состав, в котором активный ингредиент может представлять собой ботулинический токсин. Слово "состав" означает, что существует по меньшей мере один дополнительный ингредиент (такой как, например, но не ограничиваясь этим, альбумин [такой как человеческий сывороточный альбумин или рекомбинантный человеческий альбумин] и/или хлорид натрия) в фармацевтической композиции в дополнение к активному ингредиенту ботулинического нейротоксина. Следовательно, фармацевтическая композиция представляет собой препарат, который подходит для диагностического, терапевтического или косметического введения объекту, такому как человеку-пациенту. Фармацевтическая композиция может находиться: в лиофилизированном или высушенном в вакууме состоянии, растворе, образованном после разведения лиофилизированной или высушенной в вакууме фармацевтической композиции, например, солевым раствором или водой; или в виде раствора, которому не требуется разведение. Как указано, фармацевтическая композиция может быть жидкой или твердой. Фармацевтическая композиция может не содержать животного белка.

"По существу свободный" означает присутствие на уровне менее 1 мас.% от культуральной среды, ферментационной среды, фармацевтической композиции или другого вещества, в котором оценивают массовый процент вещества.

"Дополнительное введение", как используется в данном документе, относится к введению ботулотоксина, которое следует за начальным введением нейротоксина.

"Терапевтический препарат" означает препарат, который можно использовать для лечения и тем самым облегчения расстройства или заболевания, и/или связанного с ним симптома, такого как расстройство или заболевание, отличающееся активностью периферической мышцы.

"Терапевтически эффективное количество" означает уровень, количество или концентрацию агента (например, такого как ботулинический токсин или фармацевтическая композиция, включающая ботулинический токсин), необходимую для лечения заболевания, расстройства или состояния, не вызывающую значительные отрицательные или нежелательные побочные эффекты.

"Лечить", "лечащий" или "лечение" означает облегчение или уменьшение (которое включает некоторое уменьшение, значительное уменьшение, почти полное уменьшение и полное уменьшение), устранение или предотвращение (временно или постоянно) заболевания, расстройства или состояния, чтобы достичь требуемого терапевтического или косметического результата, такого как заживление поврежденной или травмированной ткани, или преобразование, изменение, совершенствование, исправление, улучшение и/или украшение имеющегося или предполагаемого заболевания, расстройства или состояния.

"Единица" или "ед." означает количество активного БоНТ (ботулинический нейротоксин), стандартизированного, чтобы иметь эквивалентный нейромышечный блокирующий эффект, в виде единицы имеющегося в продаже ботулинического нейротоксина типа А.

Композиции нейротоксина

Воплощения, раскрытые в данном документе, включают композиции нейротоксина, например композиции быстродействующего нейротоксина, например композиции ботулинического токсина типа Е. Такие нейротоксины могут быть изготовлены в виде любого фармацевтически приемлемого препарата в любой фармацевтически приемлемой форме. Также можно использовать нейротоксин в любой фармацевтически приемлемой форме, поставляемой каким-либо производителем.

Воплощения, раскрытые в данном документе, включают композиции нейротоксина, например нейротоксины короткого действия. Такие нейротоксины могут быть изготовлены в виде любого фармацевтически приемлемого препарата в любой фармацевтически приемлемой форме. Также можно использовать нейротоксин в любой фармацевтически приемлемой форме, поставляемой каким-либо производителем.

Воплощения, раскрытые в данном документе, могут включать сложные нейротоксины. Например, в вариантах осуществления раскрытые композиции могут включать два типа нейротоксинов, например два типа ботулинических нейротоксинов, таких как быстродействующий и медленнодействующий нейротоксин, например типа Е и типа А. В вариантах осуществления раскрытые композиции могут включать фрагмент ботулинического нейротоксина, например, легкую цепь (LC) 50 кДа.

Нейротоксин может быть получен из бактерии рода Clostridium, такой как бактерия Clostridium botulinum, Clostridium butyricum или Clostridium beratti. Кроме того, нейротоксин может представлять собой модифицированный нейротоксин; а именно нейротоксин, у которого по меньшей мере одна из аминокислот удалена, модифицирована или заменена по сравнению с природным нейротоксином или нейротоксином дикого типа. Более того, нейротоксин может представлять собой рекомбинантно полученный нейротоксин или его производное или фрагмент.

В вариантах осуществления раскрытая композиция типа Е имеет 40% гомологию аминокислот по сравнению с типом А, и они имеют одну и ту же основную доменную структуру, состоящую из 2 цепей, тяжелой цепи (НС) 100 кДа и легкой цепи (LC) 50 кДа, соединенных дисульфидной связью (Whelan 1992). НС содержит рецептор-связывающий домен и домен транслокации, тогда как LC содержит синаптосомально-ассоциированный белок (SNAP, synaptosomal-associated protein), обладающий ферментативной активностью. Доменная структура является одинаковой для всех серотипов ботулинического нейротоксина.

В раскрытых воплощениях нейротоксин изготавливают в стандартной лекарственной форме; например, он может быть представлен в виде стерильного раствора во флаконе, или в виде флакона или саше, содержащего лиофилизированный порошок для разведения подходящим наполнителем, таким как солевой раствор для инъекции.

В вариантах осуществления ботулинический токсин получают в растворе, содержащем солевой раствор и пастеризованный человеческий сывороточный альбумин, который стабилизирует токсин и минимизирует потери в ходе неспецифической адсорбции. Раствор может быть стерильно фильтрован (0,2 мкм фильтр), налит в отдельные флаконы и затем высушен в вакууме с получением стерильного лиофилизированного порошка. При использовании порошок можно развести путем добавления стерильного обычного солевого раствора без консервантов (0,9% хлорид натрия для инъекции).

В одном из воплощений ботулинический токсин типа Е поставляется в стерильном растворе для инъекции в 5 мл флаконе с номинальной концентрацией 20 нг/мл в 0,03 М фосфате натрия, 0,12 М хлориде натрия и 1 мг/мл человеческом сывороточном альбумине (ЧСА) при рН 6,0.

В одном из воплощений ботулинический токсин типа Е поставляется в стерильном растворе для инъекции в 5 мл флаконе с номинальной концентрацией 10 нг/мл в 0,03 М фосфате натрия, 0,12 М хлориде натрия и 1 мг/мл ЧСА при рН 6,0.

В одном из воплощений ботулинический токсин типа Е поставляется в стерильном растворе для инъекции в 5 мл флаконе с номинальной концентрацией 5 нг/мл в 0,03 М фосфате натрия, 0,12 М хлориде натрия и 1 мг/мл ЧСА при рН 6,0.

В одном из воплощений ботулинический токсин типа Е поставляется в стерильном растворе для инъекции в 5 мл флаконе с номинальной концентрацией 1 нг/мл в 0,03 М фосфате натрия, 0,12 М хлориде натрия и 1 мг/мл ЧСА при рН 6,0.

Хотя композиция может содержать только один тип нейротоксина, такой как ботулинический токсин типа Е, раскрытые композиции могут включать два или более типов нейротоксинов, которые могут оказывать усиленные терапевтические эффекты на расстройства. Например, вводимая пациенту композиция может включать ботулинические токсины типов А и Е. Введение единственной композиции, содержащей два разных нейротоксина, может позволить эффективной концентрации каждого из нейротоксинов быть ниже, чем, если бы пациенту вводили один нейротоксин, при этом, тем не менее, достигаются требуемые терапевтические эффекты. Также вводимая пациенту композиция может содержать другие активные фармацевтические субстанции, такие как рецептор белков или модуляторы ионных каналов, в сочетании с нейротоксином или нейротоксинами. Эти модуляторы могут способствовать снижению нейротрансмиссии между разными нейронами. Например, композиция может содержать модуляторы рецептора гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) типа А, которые усиливают ингибирующие эффекты, опосредованные рецептором ГАМКд. Рецептор ГАМКд ингибирует нейрональную активность путем эффективного смещения текущего потока через клеточную мембрану. Модуляторы рецептора ГАМКд могут усиливать ингибирующие эффекты рецептора ГАМКд и понижать передачу электрического или химического сигнала от нейронов. Примеры модуляторов рецептора ГАМКд включают бензодиазепины, такие как диазепам, оксазепам, лоразепам, празепам, алпразолам, галазепам, хлордиазепоксид и клоразепат. Также композиции могут содержать модуляторы глутаматных рецепторов, которые уменьшают возбуждающие эффекты, опосредованные глутаматными рецепторами. Примеры модуляторов глутаматных рецепторов включают агенты, которые ингибируют текущий поток посредством АМРА (альфа-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазол-пропионовая кислота), NMDA (N-Meran-D-аспартат) и/или каинатных типов глутаматных рецепторов. Также композиции могут включать агенты, которые модулируют дофаминовые рецепторы, такие как антипсихотические средства, рецепторы норэпинефрина и/или серотониновые рецепторы. Также композиции могут включать агенты, которые воздействуют на поток ионов через потенциалзависимые кальциевые каналы, калиевые каналы и/или натриевые каналы. Таким образом, композиции, используемые в раскрытых воплощениях, могут включать один или более нейротоксинов, таких как ботулинические токсины, в дополнение к модуляторам рецепторов ионных каналов, которые могут снижать нейротрансмиссию.

Способы применения

Раскрытые в данном документе способы могут включать введение быстродействующего нейротоксина пациенту. В предпочтительном воплощении нейротоксин представляет собой ботулинический токсин типа Е.

Раскрытые в данном документе способы могут включать введение нейротоксина короткого действия пациенту. В предпочтительном воплощении нейротоксин представляет собой ботулинический токсин типа Е.

Перед введением композиций, раскрытых в данном документе, особое внимание уделяется анатомии места лечения. Например, в вариантах осуществления терапевтическая цель состоит в том, чтобы сделать инъекцию в область с наивысшей концентрацией нервно-мышечных соединений, если она известна. Например, в случае внутримышечного введения перед инъекцией в мышцу расположение иглы в мышце можно подтвердить путем приведения мышцы в ее диапазон движения и наблюдения за полученным в результате движением конца иглы. Общая анестезия, местная анестезия и седация используются в зависимости от возраста пациента, количества мест, в которые производится инъекция, и конкретных потребностей пациента. Для достижения требуемого результата может быть необходима более чем одна инъекция и/или мест инъекций. Также для некоторых инъекций в зависимости от мышцы, в которую производится инъекция, может потребоваться применение тонких, полых, покрытых TEFLON® игл под контролем электромиографии.

Введение раскрытых композиций может включать, например, инъекцию в или рядом с одной или более из следующих скелетных мышц, например, затылочно-лобную мышцу, носовую мышцу, круговую мышцу рта, опускающую угол рта мышцу, платизму, грудино-подъязычную мышцу, переднюю зубчатую мышцу, прямую мышцу живота, наружную косую мышцу, напрягатель широкой фасции бедра, плечелучевую мышцу, подвздошную мышцу, большую поясничную мышцу, гребенчатую мышцу, длинную приводящую мышцу, портняжную мышцу, тонкую мышцу, латеральную широкую мышцу бедра, прямую мышцу бедра, медиальную широкую мышцу бедра, сухожилие четырехглавой мышцы бедра, коленную чашечку, икроножную мышцу, камбаловидную мышцу, большеберцовую мышцу, длинную малоберцовую мышцу, переднюю большеберцовую мышцу, связку надколенника, подвздошно-большеберцовый тракт, мышцы гипотенара, мышцы тенара, локтевой сгибатель запястья, поверхностный сгибатель пальцев кисти, длинную ладонную мышцу, лучевой сгибатель запястья, плечелучевую мышцу, круглый пронатор, плечевую мышцу, двуглавую мышцу плеча, трехглавая мышцу плеча, большую грудную мышцу, дельтовидную мышцу, трапециевидную мышцу, грудино-ключично-сосцевидную мышцу, жевательную мышцу, круговую мышцу глаза, височную мышцу, сухожильный шлем, большую круглую мышцу, разгибатель пальцев, локтевой разгибатель запястья, локтевую мышцу, длинный разгибатель большого пальца, подошвенную мышцу, пяточное сухожилие, камбаловидную мышцу, большую приводящую мышцу, большую ягодичную мышцу, среднюю ягодичную мышцу, широчайшую мышцу спины, подостную мышцу и их сочетания, и т.п.

Введение раскрытых композиций может включать, например, инъекцию в или рядом с одним или более из следующих нервов, например, подмышечный нерв, диафрагмальный нерв, спинальный ганглий, спинной мозг, ганглии симпатического ствола, половой нерв, общие ладонные пальцевые нервы, локтевой нерв, глубокую ветвь локтевого нерва, седалищный нерв, малоберцовый нерв, большеберцовый нерв, подкожный нерв, межкостный нерв, поверхностный малоберцовый нерв, промежуточный тыльный кожный нерв, медиальный подошвенный нерв, медиальный тыльный кожный нерв, глубокий малоберцовый нерв, мышечные ветви большеберцового нерва, поднадколенниковую ветвь подкожного нерва, общий малоберцовый нерв, мышечные ветви бедренного нерва, передние кожные ветви бедренного нерва, мышечные ветви седалищного нерва, бедренный нерв, подвздошно-паховый нерв, терминальную нить, подвздошно-подчревный нерв, запирательный нерв, локтевой нерв, лучевой нерв, запирательный нерв, лучевой нерв, подреберный нерв, межреберный нерв, дорсальные ветви межреберного нерва, медиальные кожные ветви межреберного нерва, мышечный нерв, дельтовидную мышцу, блуждающий нерв, плечевое сплетение, надключичный нерв, лицевой нерв, ушно-височный нерв, их сочетания и т.п.

Гладкие мышцы, подходящие для введения раскрытых композиций, могут включать любую из стенок кровеносных сосудов, стенок желудка, мочеточник, кишечник, аорту (слой средней оболочки), радужную оболочку глаза, предстательную железу, желудочно-кишечный тракт, дыхательные пути, мелкие артерии, артериолы, половые пути (обоих полов), вены, клубочки почек (называемые мезангиальными клетками), мочевой пузырь, матку, выпрямляющие мышцы волос кожи, ресничную мышцу, сфинктер, трахею, желчные протоки и т.п.

Частоту и количество инъекций в соответствии с раскрытыми способами можно определить, исходя из природы и расположения конкретной области, подвергаемой лечению. Однако в определенных случаях может потребоваться повторная или дополнительная инъекция для достижения оптимальных результатов. Частоту и количество инъекций в каждом конкретном случае может определить специалист обычной квалификации в данной области техники.

В вариантах осуществления введение быстродействующего нейротоксина выполняют до хирургической процедуры. В вариантах осуществления введение выполняют, например, в течение 36 часов до процедуры, в течение 24 часов до процедуры, в течение 22 часов до процедуры, в течение 20 часов до процедуры, в течение 18 часов до процедуры, в течение 16 часов до процедуры, в течение 14 часов до процедуры, в течение 12 часов до процедуры, в течение 11 часов до процедуры, в течение 10 часов до процедуры, в течение 9 часов до процедуры, в течение 8 часов до процедуры, в течение 7 часов до процедуры, в течение 6 часов до процедуры, в течение 5 часов до процедуры, в течение 4 часов до процедуры, в течение 3 часов до процедуры, в течение 2 часов до процедуры, в течение 60 минут до процедуры, в течение 50 минут до процедуры, в течение 40 минут до процедуры, в течение 30 минут до процедуры, в течение 20 минут до процедуры, в течение 10 минут до процедуры, в течение 5 минут до процедуры, в течение 2 минут до процедуры или т.п.

В вариантах осуществления введение быстродействующего нейротоксина выполняют до хирургической процедуры. В вариантах осуществления введение выполняют, например, не менее чем за 36 часов до процедуры, не менее чем за 24 часа до процедуры, не менее чем за 22 часа до процедуры, не менее чем за 20 часов до процедуры, не менее чем за 18 часов до процедуры, не менее чем за 16 часов до процедуры, не менее чем за 14 часов до процедуры, не менее чем за 12 часов до процедуры, не менее чем за 11 часов до процедуры, не менее чем за 10 часов до процедуры, не менее чем за 9 часов до процедуры, не менее чем за 8 часов до процедуры, не менее чем за 7 часов до процедуры, не менее чем за 6 часов до процедуры, не менее чем за 5 часов до процедуры, не менее чем за 4 часа до процедуры, не менее чем за 3 часа до процедуры, не менее чем за 2 часа до процедуры, не менее чем за 60 минут до процедуры, не менее чем за 50 минут до процедуры, не менее чем за 40 минут до процедуры, не менее чем за 30 минут до процедуры, не менее чем за 20 минут до процедуры, не менее чем за 10 минут до процедуры, не менее чем за 5 минут до процедуры, не менее чем за 2 минуты до процедуры или т.п.

В вариантах осуществления введение быстродействующего нейротоксина выполняют одновременно с хирургической процедурой.

В вариантах осуществления введение быстродействующего нейротоксина выполняют после хирургической процедуры. Например, введение можно выполнить, в течение 1 минуты после процедуры, в течение 2 минут после процедуры, в течение 3 минут после процедуры, в течение 4 минут после процедуры, в течение 5 минут после процедуры, в течение 6 минут после процедуры, в течение 7 минут после процедуры, в течение 8 минут после процедуры, в течение 9 минут после процедуры, в течение 10 минут после процедуры, в течение 20 минут после процедуры, в течение 30 минут после процедуры, в течение 40 минут после процедуры, в течение 50 минут после процедуры, в течение 60 минут после процедуры, в течение 90 минут после процедуры, в течение 2 часов после процедуры, в течение 3 часов после процедуры, в течение 4 часов после процедуры, в течение 5 часов после процедуры, в течение 6 часов после процедуры, в течение 7 часов после процедуры, в течение 8 часов после процедуры, в течение 9 часов после процедуры, в течение 10 часов после процедуры, в течение 11 часов после процедуры, в течение 12 часов после процедуры или т.п.

Раскрытые в данном документе способы могут включать дополнительное введение быстродействующего нейротоксина пациенту после начального введения. Воплощения, включающие дополнительное введение, могут дополнительно включать оценку врачом или пациентом результатов предыдущего введения нейротоксина. Такая оценка может включать использование, например, фотографий, сканирования или подобного.

В вариантах осуществления оценку результатов начального введения нейротоксина можно выполнить в течение, например, 6 часов после начального введения, 8 часов после начального введения, 10 часов после начального введения, 12 часов после начального введения, 14 часов после начального введения, 16 часов после начального введения, 18 часов после начального введения, 24 часов после начального введения, 30 часов после начального введения, 36 часов после начального введения, 42 часов после начального введения, 48 часов после начального введения, 54 часов после начального введения, 60 часов после начального введения, 66 часов после начального введения, 72 часов после начального введения, 78 часов после начального введения, 84 часов после начального введения, 90 часов после начального введения, 96 часов после начального введения, 102 часов после начального введения, 108 часов после начального введения, 114 часов после начального введения, 120 часов после начального введения, 1 недели после начального введения, 2 недель после начального введения, 3 недель после начального введения, 4 недель после начального введения, 5 недель после начального введения, 6 недель после начального введения, 7 недель после начального введения, 8 недель после начального введения, 9 недель после начального введения, 10 недель после начального введения, 11 недель после начального введения, 12 недель после начального введения или т.п.

В вариантах осуществления, включающих дополнительное введение, введение дополнительной дозы можно выполнить, в течение, например, 6 часов после оценки, 8 часов после оценки, 10 часов после оценки, 12 часов после оценки, 14 часов после оценки, 16 часов после оценки, 18 часов после оценки, 24 часов после оценки, 30 часов после оценки, 36 часов после оценки, 42 часов после оценки, 48 часов после оценки, 54 часов после оценки, 60 часов после оценки, 66 часов после оценки, 72 часов после оценки, 78 часов после оценки, 84 часов после оценки, 90 часов после оценки, 96 часов после оценки, 102 часов после оценки, 108 часов после оценки, 114 часов после оценки, 120 часов после оценки, 1 недели после оценки, 2 недель после оценки, 3 недель после оценки, 4 недель после оценки, 5 недель после оценки, 6 недель после оценки, 7 недель после оценки, 8 недель после оценки, 9 недель после оценки, 10 недель после оценки, 11 недель после оценки, 12 недель после оценки или т.п.

В вариантах осуществления дополнительное введение можно выполнить, например, в течение, например, 6 часов после начального введения, 8 часов после начального введения, 10 часов после начального введения, 12 часов после начального введения, 14 часов после начального введения, 16 часов после начального введения, 18 часов после начального введения, 24 часов после начального введения, 30 часов после начального введения, 36 часов после начального введения, 42 часов после начального введения, 48 часов после начального введения, 54 часов после начального введения, 60 часов после начального введения, 66 часов после начального введения, 72 часов после начального введения, 78 часов после начального введения, 84 часов после начального введения, 90 часов после начального введения, 96 часов после начального введения, 102 часов после начального введения, 108 часов после начального введения, 114 часов после начального введения, 120 часов после начального введения, 1 недели после начального введения, 2 недель после начального введения, 3 недель после начального введения, 4 недель после начального введения, 5 недель после начального введения, 6 недель после начального введения, 7 недель после начального введения, 8 недель после начального введения, 9 недель после начального введения, 10 недель после начального введения, 11 недель после начального введения, 12 недель после начального введения или т.п.

Раскрытые в данном документе способы могут оказывать быстронаступающие эффекты (например, при применении быстродействующего нейротоксина). Например, раскрытые воплощения могут оказывать видимый косметический эффект в течение, например, 30 минут после введения, 45 минут после введения, 60 минут после введения, 75 минут после введения, 90 минут после введения, 2 часов после введения, 3 часов после введения, 4 часов после введения, 5 часов после введения, 6 часов после введения, 7 часов после введения, 8 часов после введения, 9 часов после введения, 10 часов после введения, 11 часов после введения, 12 часов после введения, 13 часов после введения, 14 часов после введения, 15 часов после введения, 16 часов после введения, 17 часов после введения, 18 часов после введения, 19 часов после введения, 20 часов после введения, 21 часа после введения, 22 часов после введения, 23 часов после введения, 24 часов после введения, 30 часов после введения, 36 часов после введения, 42 часов после введения, 48 часов после введения, 3 дней после введения, 4 дней после введения, 5 дней после введения, 6 дней после введения, 7 дней после введения, 8 дней после введения, 9 дней после введения, 10 дней после введения, 11 дней после введения, 12 дней после введения или т.п.

Способы, раскрытые в данном документе, могут оказывать эффекты более короткой продолжительности (например, при применении нейротоксина короткого действия). Например, раскрытые воплощения могут оказывать видимый косметический эффект, который проходит в течение, например, 3 дней после введения, 4 дней после введения, 5 дней после введения, 6 дней после введения, 7 дней после введения, 8 дней после введения, 9 дней после введения, 10 дней после введения, 11 дней после введения, 12 дней после введения, 13 дней после введения, 14 дней после введения, 15 дней после введения, 16 дней после введения, 17 дней после введения, 18 дней после введения, 19 дней после введения, 20 дней после введения, 21 дня после введения, 22 дней после введения, 23 дней после введения, 24 дней после введения, 25 дней после введения, 26 дней после введения, 27 дней после введения, 28 дней после введения, 29 дней после введения, 30 дней после введения, 45 дней после введения, 60 дней после введения, 75 дней после введения, 90 дней после введения, 105 дней после введения или т.п.

Побочные эффекты могут быть связаны с инъекциями ботулинического токсина. Раскрытые воплощения могут обеспечивать лечения нейротоксином, которые приводят к меньшим побочным эффектам или побочным эффектам короткой продолжительности, чем традиционные лечения нейротоксином.

Например, раскрытые воплощения могут приводить к меньшим (или более короткой продолжительности) случаям двойного зрения или размытого зрения, паралича век (субъект не может поднять веко полностью), потери двигательных функций мышц лица, охриплости, потери контроля мочевого пузыря, затруднения дыхания, затрудненного глотания, затрудненной речи, смерти и т.п.

Настоящие способы особенно подходят для лечения косметических неровностей, которые обычно являются результатом старения, воздействия окружающей среды, потери веса, деторождения, травмы, хирургической операции или их сочетаний. Старение и воздействие окружающей среды часто вызывают морщины на разных участках кожи. С другой стороны, потеря веса и деторождение часто вызывают растяжки на разных участках кожи, особенно на животе, областях нижней части тела и ногах. Травма и хирургическая операция часто приводят к рубцам в местах травмы и операции. Определенные недостатки контура, подходящие для лечения раскрытыми способами, включают, но не ограничиваются этим, межбровные морщины, морщины тревоги, складки, гусиные лапки, морщины марионетки, растяжки, раны, травмы, укусы, хирургическую операцию или подобное. Особенно подходят для лечения согласно настоящему изобретению недостатки контура таких областей, как глаза, щеки, нос, губы, лоб и шея.

Дополнительно раскрытые воплощения могут обеспечивать пациентам косметические результаты более определенной продолжительности. Например, с наиболее длительно действующим нейротоксином 20% отклонение в продолжительности эффектов может приводить к месячной разнице в эффективной продолжительности. С раскрытыми нейротоксинами короткого действия это 20% отклонение дает намного меньшую разницу в эффективной продолжительности.

Дополнительные введения быстродействующего нейротоксина могут эффективно модифицировать или усиливать предыдущие косметические введения нейротоксина. Например, способы, раскрытые в данном документе, могут включать дополнительное введение для коррекции неравномерного косметического результата от предыдущего введения, или для увеличения косметических эффектов предыдущего введения, или для ускорения появления результатов по сравнению с теми, что достигнуты при использовании небыстродействующих нейротоксинов.

Раскрытые композиции быстродействующего нейротоксина можно вводить с использованием иглы или безыгольного устройства. В конкретных воплощениях способ включает подкожную инъекцию композиции объекту. Например, введение может включать инъекцию композиции с помощью иглы не более чем приблизительно 30 калибра. В конкретных воплощениях способ включает введение композиции, включающей ботулинический токсин типа Е.

Инъекцию композиций можно проводить с помощью шприца, катетеров, игл и других средств для инъекции. Инъекцию можно выполнять в любой области тела млекопитающего, которая нуждается в лечении, включая, но не ограничиваясь этим, лицо, шею, туловище, руки, кисти, ноги и ступни. Инъекция может быть в любое место в конкретной области, такой как эпидермис, дерма, жир, мышца или подкожный слой.

Частоту и количество инъекций в соответствии с раскрытыми способами можно определить, исходя из природы и расположения конкретной косметической неровности, подвергаемой лечению. Однако в определенных случаях может потребоваться повторная инъекция для достижения оптимальных результатов. Частоту и количество инъекций в каждом конкретном случае может определить специалист обычной квалификации в данной области техники.

Несмотря на то, что приведены примеры способов введения и дозировок, подходящий способ введения и дозировку, как правило, определяет лечащий врач в каждом конкретном случае. Такие определения являются рутинными для специалиста обычной квалификации в данной области техники. Например, способ и дозировку для введения клостридиального нейротоксина согласно настоящему раскрытому изобретению можно выбрать, исходя из таких критериев, как характеристики растворимости выбранного нейротоксина, а также выраженность и объем косметического состояния, подлежащего лечению.

Быстродействующий нейротоксин можно вводить в количестве между приблизительно 10^-3 ед./кг и приблизительно 35 ед./кг массы тела. В одном из воплощений нейротоксин вводят в количестве между приблизительно 10^-2 ед./кг и приблизительно 25 ед./кг. В другом воплощении нейротоксин вводят в количестве между приблизительно 10^-1 ед./кг и приблизительно 15 ед./кг. В другом воплощении нейротоксин вводят в количестве между приблизительно 1 ед./кг и приблизительно 10 ед./кг. Во многих случаях введение от приблизительно 1 единицы до приблизительно 500 единиц нейротоксина, такого как ботулинический токсин типа Е, дает эффективное терапевтическое улучшение. В одном из воплощений можно использовать от приблизительно 5 единиц до приблизительно 200 единиц нейротоксина, такого как ботулинический токсин типа Е, и в другом воплощении от приблизительно 10 единиц до приблизительно 100 единиц нейротоксина, такого как ботулинический токсин типа Е, можно вводить локально в ткань-мишень, такую как мышца.

В вариантах осуществления введение может включать дозу приблизительно 4 единицы нейротоксина, или приблизительно 5 единиц нейротоксина, или приблизительно 6 единиц нейротоксина, или приблизительно 7 единиц нейротоксина, или приблизительно 8 единиц нейротоксина, или приблизительно 10 единиц нейротоксина, или приблизительно 15 единиц нейротоксина, или приблизительно 20 единиц нейротоксина, или приблизительно 30 единиц нейротоксина, или приблизительно 40 единиц нейротоксина, или приблизительно 50 единиц нейротоксина, или приблизительно 60 единиц нейротоксина, или приблизительно 70 единиц нейротоксина, или приблизительно 80 единиц нейротоксина, или приблизительно 90 единиц нейротоксина, или приблизительно 100 единиц нейротоксина, или приблизительно 110 единиц нейротоксина, или приблизительно 120 единиц нейротоксина, или приблизительно 130 единиц нейротоксина, или приблизительно 140 единиц нейротоксина, или приблизительно 150 единиц нейротоксина, или приблизительно 160 единиц нейротоксина, или приблизительно 170 единиц нейротоксина, или приблизительно 180 единиц нейротоксина, или приблизительно 190 единиц нейротоксина, или приблизительно 200 единиц нейротоксина, или приблизительно 210 единиц нейротоксина, или приблизительно 220 единиц нейротоксина, или приблизительно 230 единиц нейротоксина, или приблизительно 240 единиц нейротоксина, или приблизительно 250 единиц нейротоксина, или приблизительно 260 единиц нейротоксина, или приблизительно 270 единиц нейротоксина, или приблизительно 280 единиц нейротоксина, или приблизительно 290 единиц нейротоксина, или приблизительно 290 единиц нейротоксина, или приблизительно 300 единиц нейротоксина, или приблизительно 310 единиц нейротоксина, или приблизительно 320 единиц нейротоксина, или приблизительно 330 единиц нейротоксина, или приблизительно 340 единиц нейротоксина, или приблизительно 350 единиц нейротоксина, или приблизительно 360 единиц нейротоксина, или приблизительно 370 единиц нейротоксина, или приблизительно 380 единиц нейротоксина, или приблизительно 390 единиц нейротоксина, или приблизительно 400 единиц нейротоксина, или приблизительно 410 единиц нейротоксина, или приблизительно 420 единиц нейротоксина, или приблизительно 430 единиц нейротоксина, или приблизительно 440 единиц нейротоксина, или приблизительно 450 единиц нейротоксина, или приблизительно 460 единиц нейротоксина, или приблизительно 470 единиц нейротоксина, или приблизительно 480 единиц нейротоксина, или приблизительно 490 единиц нейротоксина, или приблизительно 500 единиц нейротоксина, или т.п.

В вариантах осуществления введение может включать дозу приблизительно 4 единицы ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 5 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 6 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 7 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 8 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 10 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 15 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 20 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 30 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 40 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 50 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 60 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 70 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 80 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 90 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 100 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 110 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 120 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 130 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 140 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 150 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 160 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 170 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 180 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 190 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 200 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 210 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 220 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 230 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 240 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 250 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 260 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 270 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 280 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 290 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 290 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 300 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 310 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 320 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 330 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 340 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 350 единиц нейротоксина, или приблизительно 360 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 370 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 380 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 390 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 400 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 410 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 420 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 430 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 440 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 450 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 460 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 470 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 480 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 490 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или приблизительно 500 единиц ботулинического нейротоксина типа Е, или т.п.

В данном документе раскрыты способы выражения дозировок нейротоксина и передачи количеств дозировок нейротоксина. В вариантах осуществления количество дозировки выражается в количестве белка, например нанограммах (нг). В вариантах осуществления нейротоксин может включать ботулинический токсин.

Раскрытые в данном документе способы могут включать введение нейротоксина, например быстродействующего нейротоксина, пациенту, при этом дозировка нейротоксина выражена в количестве белка, например количество белка на введение. В одном из воплощений быстродействующий нейротоксин представляет собой ботулинический токсин, например ботулинический токсин типа Е.

В вариантах осуществления доза нейротоксина выражена в количестве или концентрации белка. Например, в вариантах осуществления нейротоксин можно вводить в количестве между приблизительно 0,2 нг и 20 нг. В одном из воплощений нейротоксин вводят в количестве между приблизительно 0,3 нг и 19 нг, приблизительно 0,4 нг и 18 нг, приблизительно 0,5 нг и 17 нг, приблизительно 0,6 нг и 16 нг, приблизительно 0,7 нг и 15 нг, приблизительно 0,8 нг и 14 нг, приблизительно 0,9 нг и 13 нг, приблизительно 1,0 нг и 12 нг, приблизительно 1,5 нг и 11 нг, приблизительно 2 нг и 10 нг, приблизительно 5 нг и 7 нг и т.п. в ткань-мишень, такую как мышца.

В вариантах осуществления введение может включать общую дозу между 5 и 7 нг, между 7 и 9 нг, между 9 и 11 нг, между 11 и 13 нг, между 13 и 15 нг, между 15 и 17 нг, между 17 и 19 нг или т.п.

В вариантах осуществления введение может включать общую дозу не более 5 нг, не более 6 нг, не более 7 нг, не более 8 нг, не более 9 нг, не более 10 нг, не более 11 нг, не более 12 нг, не более 13 нг, не более 14 нг, не более 15 нг, не более 16 нг, не более 17 нг, не более 18 нг, не более 19 нг, не более 20 нг или т.п.

В вариантах осуществления введение может включать общую дозу не менее 5 нг, не менее 6 нг, не менее 7 нг, не менее 8 нг, не менее 9 нг, не менее 10 нг, не менее 11 нг, не менее 12 нг, не менее 13 нг, не менее 14 нг, не менее 15 нг, не менее 16 нг, не менее 17 нг, не менее 18 нг, не менее 19 нг, не менее 20 нг или т.п.

В вариантах осуществления введение может включать общую дозу приблизительно 0,1 нг нейротоксина, 0,2 нг нейротоксина, 0,3 нг нейротоксина, 0,4 нг нейротоксина, 0,5 нг нейротоксина, 0,6 нг нейротоксина, 0,7 нг нейротоксина, 0,8 нг нейротоксина, 0,9 нг нейротоксина, 1,0 нг нейротоксина, 1,1 нг нейротоксина, 1,2 нг нейротоксина, 1,3 нг нейротоксина, 1,4 нг нейротоксина, 1,5 нг нейротоксина, 1,6 нг нейротоксина, 1,7 нг нейротоксина, 1,8 нг нейротоксина, 1,9 нг нейротоксина, 2,0 нг нейротоксина, 2,1 нг нейротоксина, 2,2 нг нейротоксина, 2,3 нг нейротоксина, 2,4 нг нейротоксина, 2,5 нг нейротоксина, 2,6 нг нейротоксина, 2,7 нг нейротоксина, 2,8 нг нейротоксина, 2,9 нг нейротоксина, 3,0 нг нейротоксина, 3,1 нг нейротоксина, 3,2 нг нейротоксина, 3,3 нг нейротоксина, 3,4 нг нейротоксина, 3,5 нг нейротоксина, 3,6 нг нейротоксина, 3,7 нг нейротоксина, 3,8 нг нейротоксина, 3,9 нг нейротоксина, 4,0 нг нейротоксина, 4,1 нг нейротоксина, 4,2 нг нейротоксина, 4,3 нг нейротоксина, 4,4 нг нейротоксина, 4,5 нг нейротоксина, 5 нг нейротоксина, 6 нг нейротоксина, 7 нг нейротоксина, 8 нг нейротоксина, 9 нг нейротоксина, 10 нг нейротоксина, 11 нг нейротоксина, 12 нг нейротоксина, 13 нг нейротоксина, 14 нг нейротоксина, 15 нг нейротоксина, 16 нг нейротоксина, 17 нг нейротоксина, 18 нг нейротоксина, 19 нг нейротоксина, 20 нг нейротоксина или т.п.

В вариантах осуществления введение может включать дозу на инъекцию, например, приблизительно 0,1 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,2 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,3 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,4 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,5 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,6 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,7 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,8 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 0,9 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,0 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,1 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,2 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,3 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,4 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,5 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,6 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,7 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,8 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 1,9 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,0 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,1 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,2 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,3 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,4 нг нейротоксина, 2,5 нг нейротоксина, 2,6 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,7 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,8 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 2,9 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,0 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,1 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,2 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,3 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,4 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,5 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,6 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,7 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,8 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 3,9 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4,0 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4,1 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4,2 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4,3 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4.4 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 4,5 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 5 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 6 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 7 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 8 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 9 нг ботулинического нейротоксина типа Е, 10 нг ботулинического нейротоксина типа Е или т.п.

Однако в итоге, как количество вводимого токсина, так и частота его введения находятся на усмотрении врача, ответственного за лечение, и соизмеримы с вопросами безопасности и вызываемых токсином эффектов.

В описанных в данном документе воплощениях можно использовать систему с контролируемым высвобождением для доставки нейротоксина in vivo с заданной скоростью в течение определенного периода времени. Как правило, скорости высвобождения определяются конструкцией системы и могут быть в значительной мере независимы от условий окружающей среды, таких как рН. Известны системы с контролируемым высвобождением, которые могут доставлять лекарственное средство на протяжении нескольких лет. Наоборот, системы с замедленным высвобождением обычно доставляют лекарственное средство за 24 часа или менее, и факторы окружающей среды могут влиять на скорость высвобождения. Таким образом, скорость высвобождения нейротоксина из имплантированной системы с контролируемым высвобождением ("имплантат") зависит от физико-химических свойств материала носителя имплантата и самого лекарственного средства. Обычно, имплантат изготавливают из инертного материала, который вызывает незначительный ответ или не вызывает ответа организма-хозяина.

Система с контролируемым высвобождением может состоять из нейротоксина, включенного в носитель. Носитель может представлять собой полимер или биокерамический материал. Система с контролируемым высвобождением может быть введена инъекцией, помещена или имплантирована в выбранное место на теле пациента и находиться там в течение длительного периода, в ходе которого нейротоксин высвобождается имплантатом способом и в концентрации, которая обеспечивает требуемую терапевтическую эффективность.

Полимерные материалы могут высвобождать нейротоксины благодаря диффузии, химической реакции или активации растворителя, а также под влиянием магнитных, ультразвуковых факторов или факторов изменения температуры. Диффузия может происходить из резервуара или матрицы. Химическое регулирование может происходить в результате разрушения полимера или отщепления лекарственного средства от полимера. Активация растворителя может включать набухание полимера или осмотический эффект.

Имплантаты могут быть получены при смешивании требуемого количества стабилизированного нейротоксина с раствором подходящего полимера, растворенного в метиленхлориде. Раствор может быть получен при комнатной температуре. Затем раствор можно перенести в чашку Петри и метиленхлорид выпарить в вакуумном эксикаторе. В зависимости от требуемого размера имплантата и, следовательно, количества включенного нейротоксина подходящее количество высушенного включающего нейротоксин имплантата сжимают при приблизительно 8000 p.s.i. (фунт на квадратный дюйм) в течение 5 секунд или при 3000 p.s.i. в течение 17 секунд в форме с образованием дисков имплантатов, инкапсулирующих нейротоксин.

Предпочтительно используемый материал имплантата является по существу нетоксичным, неканцерогенным и неиммуногенным. Подходящие материалы имплантата включают полимеры, такие как поли(2-гидроксиэтилметакрилат) (поли-ГЭМА), поли(N-винилпирролидон) (поли-ВП)+, поли(виниловый спирт) (ПВС), поли(акриловая кислота) (ПАК), полидиметилсилоксаны (ПДМС), сополимеры этилен-винилацетата (СЭВА), сополимеры поливинилпирролидон/метилакрилата, полиметилметакрилат (ПММА), поли(молочная кислота) (ПМК), поли(гликолевая кислота) (ПГК), полиангидриды, поли(ортоэфиры), коллаген и целлюлозные производные, и биокерамические материалы, такие как гидроксиапатит (ГАЛ), трикальцийфосфат (ТКФ) и алюмокальций фосфат (АКФ). Для изготовления биоразлагаемых имплантатов можно использовать молочную кислоту, гликолевую кислоту и коллаген.

Материал имплантата может быть биоразлагаемым или биоэродируемым. Преимущество биоэродируемого имплантата состоит в том, что его не нужно удалять из пациента. Биоэродируемый имплантат может быть основан либо на мембранном, либо на матричном высвобождении биологически активного вещества. Для подкожного или внутримышечного введения известны биоразлагаемые микросферы, полученные из ПМК-ПГК.

Также настоящее изобретение охватывает набор для применения на практике раскрытых воплощений. Набор может включать иглу калибра 30 или меньше и соответствующий шприц. Также набор включает композицию клостридиального нейротоксина, такую как композиция ботулинического токсина типа Е. Композиция нейротоксина может находиться в шприце. Композицию инъецируют с помощью иглы. Наборы разработаны в разных формах, исходя из размеров шприца и игл и объема содержащейся в них инъецируемой композиции, который в свою очередь основан на конкретных косметических недостатках, для лечения которых разработан набор.

ПРИМЕРЫ

Следующие неограничивающие примеры приведены только в иллюстративных целях, чтобы облегчить наиболее полное понимание представленных воплощений. Не следует считать, что эти примеры ограничивают любое из воплощений, описанных в настоящем изобретении.

Пример 1

Применение ботулинического токсина типа Е для лечения межбровных морщин (ММ)

Это впервые проводимое с участием людей, рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, когортное исследование с нарастающей дозой включало 42 участника, которые получали ЕВ-001 (композиция ботулинического токсина типа Е, раскрытая в данном документе) (N=35) или плацебо (N=7). Первичный результат эффективности состоял в доли участников с 2-уровневым установленным исследователем (УИ-2) улучшением степени тяжести ММ при максимально нахмуренных бровях. Оценки безопасности включали нежелательные явления (НЯ), лабораторные тесты и физические осмотры. Ответ УИ-2 наблюдался, начиная с третьей когорты (ЕВ-001), с повышенными скоростями, наблюдаемыми при более высоких дозах. Начало клинического эффекта наступало в течение 24 часов с продолжительностью в диапазоне между 14 и 30 дней для наивысших доз. Возникновение НЯ было низким, самой распространенной была головная боль от слабой до умеренной. Не было серьезных НЯ или опущения века, и никаких клинически значимых изменений в других оценках безопасности.

В этом клиническом исследовании ММ ЕВ-001 проявил благоприятную безопасность и переносимость, и дозозависимую эффективность с частотой ответа 80% при наивысшей дозе. Максимальный клинический эффект от ЕВ-001 наблюдался в течение 24 часов и продолжался от 14 до 30 дней. Этот дифференцированный профиль ЕВ-001 подтверждает его разработку для эстетических и терапевтических применений, когда требуются быстрое наступление и короткая продолжительность эффекта.

Ботулинические нейротоксины, которые ингибируют пресинаптическое высвобождение ацетилхолина, являются одними из самых активных молекул в природе. При инъекции в мышцы ботулинические нейротоксины ингибируют нервно-мышечную передачу и дают дозозависимое местное расслабление мышц. Очищенные ботулинические нейротоксины, включая серотипы А и В, были разработаны в качестве инъекционных лекарственных средств и широко используются для лечения целого ряда нервно-мышечных состояний. Ботулинический нейротоксин серотипа Е представляет собой новый серотип, который до настоящего времени не разрабатывался для клинического применения. Ботулинический токсин типа Е имеет самое быстрое наступление и самую короткую продолжительность действия из всех ботулинических нейротоксинов. Тип Е имеет сходную доменную структуру с типом А, состоящую из 2 белковых цепей, тяжелую цепь 100 кДа и легкую цепь 50 кДа, соединенных дисульфид ной связью. Тип Е ингибирует нервно-мышечную передачу путем расщепления того же пресинаптического везикулярного белка (синаптосомально-ассоциированного белка 25), как и тип А, но в другом сайте расщепления. Два сайта связывания на двигательных аксонах опосредуют высокоаффинное распознавание нервных клеток ботулиническими нейротоксинами.

Связывание сначала опосредуют ганглиозиды клеточной поверхности и затем специфические белковые рецепторы. Эти рецепторы находятся на терминалях двигательных аксонов в нервно-мышечном соединении. Было показано, что ботулинические токсины типов А и Е связывают синаптический везикулярный белок 2 специфического рецептора, и только эти два серотипа связаны с этим рецептором. Это было первое клиническое исследование, в котором оценивали безопасность и эффективность нарастающих доз ботулинического токсина типа Е на участниках с ММ.

Это исследование представляло собой впервые проводимую с участием людей оценку безопасности и эффективности ЕВ-001 и было сфокусировано на лечении ММ от умеренных до тяжелых. ЕВ-001 является запатентованной очищенной формой ботулинического токсина типа Е, изготовленной в виде жидкости для инъекции (Bonti, Inc., Ньюпорт-Бич, Калифорния, США). Это было рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, когортное исследование с нарастающей дозой, проводимое в 2 экспертных клинических центрах (Steve Yoelin, MD Medical Associates, Ньюпорт-Бич, Калифорния, США; Центр дерматологических клинических исследований, Фримонт, Калифорния, США). Это исследование было одобрено Институциональным наблюдательным советом (Aspire Institutional Review Board, Санти, Калифорния, США) и проводилось в соответствии с нормативами, установленными Хельсинской декларацией. От всех участников было получено письменное информированное согласие до их участия.

Всего в исследование было включено 42 здоровых ранее не получавших токсин мужчин и женщин в возрасте от 18 до 60 лет. Участие каждого участника должно было длиться приблизительно 6 недель. Основные критерии включения состояли в: наличии двусторонне-симметричных ММ от умеренных до тяжелых, оцениваемых при максимально нахмуренных бровях, достаточной остроте зрения без использования очков (приемлемо использование контактных линз) для точной оценки морщин на лице, и способности соответствовать требованиям исследования. Основные критерии по исключению состояли в: любом неконтролируемом системном заболевании или другом медицинском показании, любом медицинском показании, которое может подвергнуть участника повышенному риску при воздействии ботулинического нейротоксина (включая диагностированную тяжелую миастению, синдром Итона-Ламберта, боковой амиотрофический склероз или любое другое состояние, которое нарушает нервно-мышечную функцию), текущем или прежнем лечении ботулиническим нейротоксином, известной иммунизации или гиперчувствительности к ботулиническому нейротоксину, ранее предписанных дерматологических процедурах в течение 3-12 месяцев исследования (неабляционное омоложение, косметические процедуры на лице, местная/пероральная ретиноидная терапия и т.п.), и предшествовавшей окологлазничной операции или лечении. Женщин не включали, если они были беременны, кормили грудью или планировали беременеть. Мужчины с партнером(ами) женского пола со способностью к деторождению были включены, если только они соглашались использовать двойные способы контрацепции в течение 3 месяцев после дозировки.

При скрининге регистрировали демографические данные участника, историю болезни и ранее назначенные и сопутствующие лекарственные препараты и проводили проверку на алкоголь/наркотики. Стандартизированное фотографирование лица осуществляли на исходном уровне до лечения и при каждом последующем посещении до конца исследования, но фотографии не использовали для оценок эффективности.

Семь когорт (6 участников на когорту) было зарегистрировано и получало нарастающие дозы ЕВ-001 или плацебо в соотношении 5:1. Максимальную рекомендуемую начальную дозу (с коэффициентом безопасности 10) в этом впервые проводимом с участием людей исследовании разрабатывали, исходя из уровней отсутствия наблюдаемых нежелательных эффектов из доклинического исследования безопасности и токсичности (неопубликованные данные). На основе этого рассчитывали базовую дозу (когорта 1) и определяли ее как субэффективную, и когорты 2-7 получали 3, 9, 12, 16, 21 и 28 раз базовую дозу, соответственно. Что представляло собой дозы ЕВ-001 от субэффективной до максимально эффективной. Общую дозу вводили в 5 местах инъекций в равных объемах (0,1 мл на место в мышцу гордецов, левый и правый медиальные корругаторы и левый и правый боковые корругаторы) стандартизированным образом (смотрите Фиг. 1). Расстояние между местами инъекций в боковые корругаторы составляло приблизительно 1 см выше надбровной дуги. ЕВ-001 поставлялся в стерильном растворе для инъекции в 5 мл флаконе. Плацебо поставлялся в таких же флаконах без ЕВ-001.

Каждый участник совершал посещения при скрининге (-30 до -1 день), исходном уровне/инъекция (0 день), в 1, 2, 7, 14 и 30 дни (конец исследования) и на 42 день (заключительное последующее наблюдение в целях безопасности).

Безопасность оценивали по нежелательным явлениям (НЯ), лабораторному тестированию, электрокардиограммам (ЭКГ), физическим осмотрам, показателям жизнедеятельности (частота пульса, частота дыхания и кровяное давление), тестам мочи на беременность (для женщин со способностью к деторождению) и направленным неврологическим осмотрам для оценки возможного распространения ботулинического нейротоксина. НЯ, возникшие в ходе лечения, (НЯВЛ) определяли, как любое НЯ, которое началось или усугубило степень тяжести после воздействия исследуемого лечения. НЯ и НЯВЛ были обобщены по классу системы органов и предпочтительному термину с использованием Медицинского словаря регуляторной деятельности (MedDRA, от англ. "Medical Dictionary for Regulatory Activities", версия 19.0). Также оценивали серьезные НЯ (СНЯ, или НЯ, которые удовлетворяли регуляторным критериям медицинской значимости) и прекращение исследования вследствие НЯ. Степень тяжести НЯ регистрировали как слабая, умеренная, тяжелая или угрожающая жизни. Перед включением каждой когорты дозирования комитет по оценке данных по безопасности собирался, чтобы проанализировать все данные по безопасности от предыдущей когорты(когорт).

При скрининге, исходном уровне ив 1,2, 7, 14и30 дни ММ участников оценивали при максимально нахмуренных бровях и в покое, используя шкалу морщин лица (FWS, от англ. "Facial Wrinkle Scale"). Оценки были выполнены исследователем и участником. FWS является широко распространенным измерением, используемым для оценки степени тяжести морщин на лице. В настоящем исследовании 4-балльная шкала, обозначающая степень тяжести ММ, представляла собой следующее: 0 = отсутствие, 1 = слабая, 2 = умеренная, 3 = тяжелая. Участники считались ответившими на лечение, если ими было достигнуто по меньшей мере 2-уравневое улучшение (уменьшение) на основе оценки FWS исследователем (УИ-2). Первичная переменная эффективности представляла собой долю ответивших на лечение участников УИ-2 при максимально нахмуренных бровях в ходе любого посещения после исходного уровня по 30 день. Представляющая интерес дополнительная конечная точка эффективности состояла в доли ответивших на лечение участников, достигших оцененной исследователем степени FWS ноль или слабой на 1, 2, 7, 14 или 30 день (проанализировано при посещении).

Предварительно были определены две аналитические выборки, выборка для оценки безопасности и для оценки эффективности. Участники, получающие плацебо, были объединены для всех анализов. Выборка для оценки безопасности включала всех участников, которые получали лечение согласно исследованию и имели после этого по меньшей мере оценку безопасности 1. Все НЯВЛ и СНЯ были обобщены по группам лечения. Исследователи рассматривали и оценивали на клиническую значимость все параметры безопасности, включая лабораторное тестирование, ЭКГ, физические обследования, показатели жизнедеятельности, тесты мочи на беременность и направленные неврологические осмотры. Выборка для оценки эффективности представляла собой модифицированную выборку, включающую всех участников, отобранных для лечения (mITT, от англ. "modified intent-to-treat"), определенную как все рандомизированные участники, которые получали по меньшей мере 1 дозу исследуемого лечения и имели по меньшей мере оценку эффективности 1 после исходного уровня. Анализ демографических данных и исходных характеристик выполняли на выборке mITT. История болезни основывалась на выборке для оценки безопасности и зашифровывалась с использованием MedDRA, и была обобщена по классу системы органов и предпочтительному термину. Ранее назначенные и сопутствующие лекарственные препараты основывались на выборке для оценки безопасности и зашифровывались с использованием кода анатомо-терапевтическо-химической классификации Всемирной организации здравоохранения, и были обобщены по классу лекарственного средства и лечебной группе. Анализы эффективности выполняли, используя выборку mITT. Степени FWS были обобщены по видам лечения и дням исследования с использованием частотных импульсов и скоростей ответа (%). Анализ сравнения доли ответивших на лечение участников УИ-2 в каждой когорте ЕВ-001 с плацебо (объединенные) выполняли, используя точный критерий Фишера с уровнем значимости 0,05.

Из 59 участников, которые были отобраны для исследования, 43 были включены в 1 из 7 когорт. Один участник не проходил лечение, и, следовательно, 42 участника были включены в выборку mITT и выборку для оценки безопасности (35 получали ЕВ-001 и 7 получали плацебо). Сорок один участник завершил исследование, при этом с 1 участником был утрачен контакт для последующего наблюдения. Демографические и исходные характеристики выборки mITT показаны в таблице 1. Средний возраст (диапазон) участников для групп ЕВ-001 (объединенные) в сравнении с плацебо (объединенные) составлял 47,9 (22 до 60) и 50,4 (32 до 57) лет, соответственно. Большинство участников были женского пола (ЕВ-001=91,4%; плацебо = 85,7%) и белыми (71,4% для обеих групп). Исходное значение оцененных исследователем ММ (среднеквадратическое отклонение [СКО]) при максимально нахмуренных бровях составляло 2,6 (0,50) и 2,9 (0,38) для групп ЕВ-001 и плацебо, соответственно. Группы ЕВ-001 и плацебо были хорошо сбалансированы без существенных межгрупповых различий.

Доли участников в выборке mITT, достигших ответа УИ-2 для степени тяжести ММ при максимально нахмуренных бровях при любом посещении после исходного уровня до 30 дня, представлены дозовыми когортами на фиг. 2. В когорте 3 40% участников представляли собой ответивших на лечение участников УИ-2. Это количество участников, ответивших на лечение, было одинаковым или большим во всех когортах с более высокими дозами, при этом когорты 6 и 7 имели 80% ответивших на лечение участников УИ-2. Когорты 6 и 7 показали значительно более высокие проценты ответивших на лечение участников УИ-2 в сравнении с плацебо (Р=0,046). На фиг. 3 обобщены доли участников в каждой когорте с установленными исследователем степенями FWS отсутствующих или слабых ММ при максимально нахмуренных бровях при любом посещении после исходного уровня до 30 дня. Когорты 2-7 (включительно) имели более высокие проценты ответивших на лечение участников по сравнению с плацебо, при этом показатели в 60% - 100% были достигнуты для когорт 3 и выше. В когортах 3-7 большинство нулевых или слабых ответов наблюдалось в 1, 2 и/или 7 дни. Один ответивший на лечение участник (20%) наблюдался на 14 день в когортах 3, 5, 6 и 7 и на 30 день в когортах 3 и 5. Результаты безопасности подтверждают безопасность всех оцененных доз ЕВ-001, вводимых в виде ВМ (внутримышечных) инъекций, в этой выборке. Никаких клинически значимых изменений относительно исходных значений в неврологических осмотрах, ЭКГ, физических осмотрах или лабораторных тестах не наблюдалось ни у одного участника.

Пять участников, получавших ЕВ-001, сообщили о НЯВЛ, и ни один в группе плацебо. Ни о каких СНЯ не сообщалось, и ни одно НЯВЛ не привело к прекращению исследования. Все НЯВЛ были слабой или умеренной степени тяжести. Считалось, что случаи боли в горле и гриппоподобные симптомы не связаны с лечением. Три участника сообщили о головной боли как НЯВЛ, 1 из которых считалась связанной с лечением. Не было связанного с дозой увеличения числа случаев головных болей. Не было случаев опущения века или другого НЯВЛ, возможно связанного с распространением токсина.

Насколько нам известно, это первое контролируемое клиническое испытание продукта ботулинического токсина типа Е в любом эстетическом или терапевтическом применении. Это впервые проводимое с участием людей исследование ЕВ-001, новой очищенной формы ботулинического токсина типа Е, вводимой ВМ, удовлетворило своим целям по оценке безопасности, переносимости и эффективного диапазон доз ЕВ-001. Наблюдался дозозависимый ответ с большими долями участников, ответивших на лечение, в когортах с более высокой дозировкой ЕВ-001. Ответ УИ-2 наблюдался, начиная с когорты 3, и увеличивался в когортах с более высокой дозой, из чего можно предположить, что эффективный диапазон доз ЕВ-001 может быть при дозах, используемых в когортах 4-7. Когорты 6 и 7 имели 80% ответивших на лечение участников УИ-2, частота ответа подобна разрешенным продуктам ботулинического токсина типа А. Участники, достигшие нулевых или слабых степеней FWS, наблюдались, начиная с когорты 2. Что касается наступления эффекта, то ответ на лечение наблюдался уже через 24 часа после дозирования, что подтверждает предыдущие сообщения о предположении, что ботулинический токсин типа Е имеет более быстрое начало действия, чем типа А.

Что касается продолжительности эффекта, определенного как доля участников, ответивших на лечение, с нулевой или слабой оценкой, то эффект наблюдался до 14 дня у 1 участника в большинстве из 5 когорт с более высокими дозами и до 30 дня у 1 участника в 2 из 5 когорт с более высокими дозами. Все дозы ЕВ-001 показали хорошую переносимость без местных реакций в местах инъекций. Не сообщалось о СНЯ или тяжелых НЯВЛ, и не было прекращений исследования вследствие НЯВЛ. Наиболее распространенным НЯВЛ была головная боль слабой или умеренной степени тяжести, и не было никаких других связанных с лечением НЯ. Не было случаев опущения века при любых уровнях доз, и никаких случаев, возможно связанных с распространением токсина. Следовательно, в этом исследовании профиль клинической безопасности и переносимости выглядит благоприятным. Профили эффективности и безопасности ЕВ-001 являются перспективными и подтверждают потенциал ЕВ-001 в качестве уникального варианта лечения при лечении ММ и при других эстетических применениях на лице. Быстрое наступление может удовлетворить неудовлетворенную потребность отдельных людей, ищущих быстрого лечения морщин на лице перед неожиданными общественными или профессиональными мероприятиями. Ограниченная продолжительность эффекта может быть выгодна для отдельных людей, которые в первый раз могут рассматривать применение лечения ботулиническим нейротоксином и не желают связывать себя долгосрочными обязательствами. Лечение ЕВ-001 позволило бы им оценить эстетический эффект за более короткую продолжительность эффекта по сравнению с 12-недельной продолжительностью эффекта продуктов ботулинического токсина типа А. В этом первом клиническом исследовании у участников с ММ ЕВ-001 показал благоприятную безопасность и переносимость во всех когортах. Пять из 7 когорт показали в числовом выражении более высокие частоты ответа по сравнению с плацебо, что подтверждает эффективность ЕВ-001 в снижении степени тяжести ММ. 2 наивысшие дозы обеспечили частоту ответа 80%, подобно разрешенным продуктам ботулинического токсина типа А. В отличие от известного периода действия продуктов типа А клинический эффект ЕВ-001 наблюдался в течение 24 часов (наступление) и длился 14-30 дней (продолжительность). Этот дифференцированный клинический профиль подтверждает дальнейшую разработку ЕВ-001 для эстетических и ключевых терапевтических применений на лице, когда требуются быстрое наступление и короткая продолжительность эффекта.

Пример 2

Применение ботулинического токсина типа Е в лечении гусиных лапок 57-летний мужчина с гусиными лапками, возникшими в результате многолетнего воздействия солнца, обращается за лечением к своему врачу. Врач рекомендует композицию, раскрытую в данном документе, которая вводится путем инъекции подкожно по обе стороны от глаз пациента. В каждое место инъекции вводят приблизительно по 3 единицы ботулинического токсина типа Е, при этом по несколько инъекций делают с обеих сторон глаза. Гусиные лапки исчезают в течение приблизительно 2 дней после лечения и остаются уменьшенными в течение двух месяцев.

Пример 3

Применение ботулинического токсина типа Е для подтяжки бровей У 60-летней женщины брови тянутся ниже лобной кости. Врач рекомендует композицию, раскрытую в данном документе, которая вводится путем инъекции подкожно над каждым глазом. В каждое место инъекции вводят приблизительно по 10 единиц ботулинического токсина типа Е, при этом по несколько инъекций делают по обе стороны глаза. Опущение бровей уменьшается в течение приблизительно 2 дней и по существу снижается в течение 3 месяцев после введения.

Пример 4

Применение ботулинического токсина типа Е для увеличения груди 30-летняя женщина решает делать операцию по увеличению груди. За 4 часа до процедуры ботулинический токсин типа Е вводят рядом с будущими хирургическими разрезами. Введение снижает мышечное напряжение в области разреза, что приводит к минимальному рубцеванию. Через две недели после процедуры вводится дополнительная доза.

Пример 5

Применение ботулинического токсина типа Е для реконструкции груди 30-летняя женщина решает делать операцию по реконструкции груди. За 14 часов до процедуры ботулинический токсин типа Е вводят рядом с будущими хирургическими разрезами. Введение снижает мышечное напряжение в области разреза, что приводит к минимальному рубцеванию. Через две недели после процедуры вводится дополнительная доза.

Пример 6

Применение ботулинического токсина типа Е в лечении после эпизиотомии 44-летняя женщина подвергается эпизиотомии. Сразу после процедуры 4 нг ботулинического токсина типа Е вводят в ткань, окружающую операционную область. В течение 20 часов мышечная и нервная активность вокруг раны значительно снижается.

Пример 7

Применение ботулинического токсина типа Е в лечении паховой грыжи 28-летний мужчина страдает от паховой грыжи. Его врач вводит 4 нг ботулинического токсина типа Е в ткань, окружающую грыжу. В течение 10 часов мышечная и нервная активность вокруг повреждения значительно снижается.

Пример 8

Применение ботулинического токсина типа Е в лечении разрыва плеча 48-летний мужчина страдает от разрыва плеча. Его врач вводит 4 нг ботулинического токсина типа Е в ткань, окружающую грыжу. В течение 16 часов мышечная и нервная активность вокруг повреждения значительно снижается.

Пример 9

Применение ботулинического токсина типа Е в лечении разрыва ПКС (передней крестообразной связки) 23-летняя женщина страдает от разрыва ПКС. Через 6 часов после повреждения ее врач вводит 7 нг ботулинического токсина типа Е в мышцу, окружающую разорванную связку. В течение 30 часов мышечная и нервная активность вокруг раны значительно снижается.

В заключение, следует понимать, что хотя аспекты настоящего описания изобретения освещены посредством ссылок на конкретные воплощения, специалисту в данной области техники легко понять, что эти раскрытые воплощения только иллюстрируют принципы раскрытого в данном документе предмета. Следовательно, следует понимать, что раскрытый предмет никаким образом не ограничен конкретной методологией, протоколом и/или реагентом, и т.п., описанными в данном документе. По существу, разные модификации или изменения, или альтернативные конфигурации раскрытого предмета могут быть выполнены в соответствии с идеями данного документа, не отклоняясь от сущности настоящего описания изобретения. И наконец, используемая в данном документе терминология предназначена только для целей описания конкретных воплощений, и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения, который определяется исключительно формулой изобретения. Таким образом, воплощения настоящего изобретения не ограничиваются теми, что конкретно показаны и описаны.

В данном документе описаны конкретные воплощения, включающие лучший вариант, известный изобретателю для осуществления способов и устройств, описанных в данном документе. Конечно, варианты этих описанных воплощений станут очевидны специалистам обычной квалификации в данной области техники после прочтения вышеизложенного описания. Таким образом, это изобретение включает все модификации и эквиваленты предмета, изложенного в прилагаемой формуле изобретения, как это разрешено применяемым законом. Кроме того, изобретение охватывает любую комбинацию вышеописанных воплощений во всех возможных вариантах, если не указано иное в данном документе, или это иным образом явно не противоречит контексту.

Не следует рассматривать как ограничения группировки альтернативных воплощений, элементов или стадий настоящего изобретения. Каждый член группы может упоминаться и быть заявленным в отдельности или в любом сочетании с другими членами группы, раскрытыми в данном документе. Предполагается, что один или более членов группы могут быть включены или удалены из группы по соображениям удобства и/или патентоспособности. Когда происходит любое такое включение или исключение, считается, что описание изобретения содержит модифицированную группу, таким образом удовлетворяя письменному описанию всех групп Маркуша, использованных в прилагаемой формуле изобретения.

Если не указано иное, то все числа, выражающие характеристику, пункт, количество, параметр, свойство, термин и т.д., используемые в настоящем описании и формуле изобретения, следует понимать, как модифицированные во всех случаях с помощью термина "приблизительно". Как используется в данном документе, термин "приблизительно" означает, что характеристика, пункт, количество, параметр, свойство или термин, таким образом определенные, охватывает диапазон плюс или минус десять процентов выше и ниже значения заданной характеристики, пункта, количества, параметра, свойства или термина. Таким образом, если не указано противоположное, то числовые параметры, изложенные в описании и прилагаемой формуле изобретения, являются приблизительными величинами, которые могут меняться. По меньшей мере и не как попытка ограничить применение доктрины эквивалентов объемом формулы изобретения, каждое числовое указание по меньшей мере следует толковать с учетом количества приводимых значащих разрядов и используя обычные способы округления. Несмотря на то, что числовые диапазоны и значения, определяющие широкий объем изобретения, являются приблизительными величинами, числовые диапазоны и значения, изложенные в конкретных примерах, приводятся настолько точно, насколько возможно. Однако любой числовой диапазон или значение заведомо содержит конкретные ошибки, неизбежно являющиеся результатом среднеквадратического отклонения, найденного в их соответствующих проверочных измерениях. Перечисление числовых диапазонов значений в данном документе предназначено лишь для того, чтобы служить кратким способом ссылки в отдельности на каждое отдельное числовое значение, попадающее в диапазон. Если в данном документе не указано иное, то каждое отдельное значение числового диапазона включено в настоящее описание изобретения, как если бы оно было отдельно приведено в данном документе.

Формы единственного числа и подобные ссылки, используемые применительно к описанию изобретения (особенно в отношении следующей формулы изобретения), следует толковать, как охватывающие как единственное число, так и множественное число, если в данном документе не указано иное, или это явно не противоречит контексту. Все способы, описанные в данном документе, могут быть выполнены в любом подходящем порядке, если в данном документе не указано иное, или это иным образом явно не противоречит контексту. Использование любого и всех примеров, или типовой формулировки (например "такой как"), приводимых в данном документе, предназначено лишь для лучшего освещения изобретения и не ограничивает никаким образом заявленный объем. Ни одна формулировка в настоящем описании изобретения не должна рассматриваться как указывающая на любой незаявленный элемент, необходимый для практического осуществления воплощений, раскрытых в данном документе.

Конкретные воплощения, раскрытые в данном документе, могут быть дополнительно ограничены в формуле изобретения использованием формулировки "состоящий из" или "по существу состоящий из". При использовании в формуле изобретения, либо поданной, либо добавленной в соответствии с поправкой, переходный термин "состоящий из" исключает любой элемент, стадию или фармацевтическую субстанцию, не указанные в формуле изобретения. Переходный термин "по существу состоящий из" ограничивает объем пункта формулы изобретения указанными веществами или стадиями и теми, что не оказывают существенного влияния на основную и новую характеристику(и). Воплощения настоящего изобретения, заявленные таким образом, по сути или точно описаны и разрешены в данном документе.

Claims

1. Способ осуществления косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины, включающий введение пациенту путем инъекции общей дозы от приблизительно 0,2 нг до приблизительно 20 нг ботулинического нейротоксина серотипа Е,

где общую дозу разделяют на пять приблизительно равных доз ботулинического нейротоксина серотипа Е, и указанные приблизительно равные дозы вводят путем внутримышечной инъекции в следующие мышцы: мышцу гордецов, левый медиальный корругатор, правый медиальный корругатор, левый боковой корругатор и правый боковой корругатор, и

начало клинического эффекта косметического лечения наступает в течение 24 часов после введения ботулинического нейротоксина серотипа Е.

2. Способ по п. 1, где ботулинический нейротоксин серотипа Е представляет собой чистый ботулинический нейротоксин серотипа Е приблизительно 150 кДа.

3. Способ по п. 1, где общая доза включает количество от приблизительно 2 до приблизительно 10 нг.

4. Способ по п. 2, где общая доза составляет от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа.

5. Способ по п. 1, где клинический эффект включает изменение установленной исследователем степени по шкале морщин лица (FWS) при максимально нахмуренных бровях от умеренной до тяжелой до введения ботулинического нейротоксина серотипа Е до отсутствующей или слабой после введения ботулинического нейротоксина серотипа Е.

6. Способ по п. 5, где общая доза составляет от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа.

7. Способ по п. 1, где приблизительно 150 единиц чистого ботулинического нейротоксина типа E приблизительно 150 кДа вводят инъекцией в по меньшей мере одну мышцу.

8. Способ осуществления косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины от умеренных до тяжелых, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа,

где терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа,

где терапевтически эффективное количество вводят путем пяти внутримышечных инъекций, причем каждая инъекция содержит приблизительно равное количество чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа, где одну инъекцию делают в каждую из следующих мышц: мышца гордецов, левый медиальный корругатор, правый медиальный корругатор, левый боковой корругатор и правый боковой корругатор,

где начало клинического эффекта косметического лечения наступает в течение 48 часов после введения чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа, и

где клинический эффект включает изменение установленной исследователем степени по шкале морщин лица (FWS) при максимально нахмуренных бровях от умеренной или тяжелой до введения чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа до отсутствующей или слабой после введения чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа.

9. Способ осуществления косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины, включающий введение пациенту путем инъекции общей дозы от приблизительно 0,2 нг до приблизительно 20 нг ботулинического нейротоксина серотипа Е,

где общую дозу разделяют на пять приблизительно равных доз ботулинического нейротоксина серотипа Е, и приблизительно равные дозы вводят путем внутримышечной инъекции в следующие мышцы: мышцу гордецов, левый медиальный корругатор, правый медиальный корругатор, левый боковой корругатор и правый боковой корругатор,

где продолжительность клинического эффекта косметического лечения составляет от приблизительно 14 до приблизительно 30 дней после введения ботулинического нейротоксина серотипа Е, и

где клинический эффект включает изменение установленной исследователем степени по шкале морщин лица (FWS) при максимально нахмуренных бровях от умеренной или тяжелой до введения ботулинического нейротоксина серотипа Е до отсутствующей или слабой после введения ботулинического нейротоксина серотипа Е.

10. Способ по п. 9, где ботулинический нейротоксин серотипа Е представляет собой чистый ботулинический нейротоксин серотипа Е приблизительно 150 кДа.

11. Способ по п. 9, где общая доза включает количество от приблизительно 2 до приблизительно 10 нг ботулинического нейротоксина серотипа Е.

12. Способ по п. 10, где общая доза составляет от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа.

13. Способ по п. 9, где способ статистически значительно лучше по сравнению со способом, в котором плацебо вводят для достижения 2-уровневого (УИ-2), или выше, улучшения (снижения) оценки по шкале морщин лица (FWS) при максимально нахмуренных бровях через 1, 2, 7, 14 или 30 дней после указанного введения.

14. Способ по п. 13, где общая доза составляет от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа.

15. Способ по п. 9, где приблизительно 150 единиц чистого ботулинического нейротоксина типа E приблизительно 150 кДа вводят инъекцией в по меньшей мере одну мышцу.

16. Способ осуществления косметического лечения у человека-пациента, имеющего межбровные морщины от умеренных до тяжелых, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа,

где терапевтически эффективное количество включает общую дозу в количестве от приблизительно 2 до приблизительно 10 нг чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа, и

где терапевтически эффективное количество вводят путем пяти внутримышечных инъекций, причем каждая инъекция содержит приблизительно равное количество чистого ботулинического нейротоксина серотипа Е приблизительно 150 кДа, где одну инъекцию делают в каждую из следующих мышц: мышца гордецов, левый медиальный корругатор, правый медиальный корругатор, левый боковой корругатор и правый боковой корругатор.

17. Способ по п. 16, где способ статистически значительно лучше по сравнению со способом, в котором плацебо вводят для достижения 2-уровневого (УИ-2), или выше, улучшения (снижения) оценки по шкале морщин лица (FWS) при максимально нахмуренных бровях через 1, 2, 7, 14 или 30 дней после указанного введения.

18. Способ по п. 16, где приблизительно 150 единиц чистого ботулинического нейротоксина типа E приблизительно 150 кДа вводят инъекцией в по меньшей мере одну мышцу.