RU2759722C2 - D-энантиомерные пептиды для терапии хронической и невропатической боли - Google Patents
D-энантиомерные пептиды для терапии хронической и невропатической боли Download PDFInfo
- Publication number
- RU2759722C2 RU2759722C2 RU2019118602A RU2019118602A RU2759722C2 RU 2759722 C2 RU2759722 C2 RU 2759722C2 RU 2019118602 A RU2019118602 A RU 2019118602A RU 2019118602 A RU2019118602 A RU 2019118602A RU 2759722 C2 RU2759722 C2 RU 2759722C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- peptide
- peptides
- sequence seq
- seq
- sequence
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 202
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 106
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 208000000094 Chronic Pain Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title abstract description 3
- 108010040923 D3 peptide Proteins 0.000 claims abstract description 51
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 41
- 108090000312 Calcium Channels Proteins 0.000 claims abstract description 33
- 102000003922 Calcium Channels Human genes 0.000 claims abstract description 33
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 108091001458 RD2 peptide Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 16
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 24
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 4
- 229940124641 pain reliever Drugs 0.000 claims description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 29
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 23
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 15
- BPKIMPVREBSLAJ-QTBYCLKRSA-N ziconotide Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]2C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CSSC2)C(N)=O)=O)CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CSSC3)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(N1)=O)CCSC)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 BPKIMPVREBSLAJ-QTBYCLKRSA-N 0.000 description 14
- 229960002811 ziconotide Drugs 0.000 description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 8
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 7
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 6
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 6
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N Gabapentin Chemical compound OC(=O)CC1(CN)CCCCC1 UGJMXCAKCUNAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XKMLYUALXHKNFT-UUOKFMHZSA-N Guanosine-5'-triphosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XKMLYUALXHKNFT-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 4
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 4
- 108091058550 ω-conotoxin Proteins 0.000 description 4
- KNJNGVKTAFTUFL-OCMUWRIYSA-N ω-conotoxin Chemical compound N([C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](CSSC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]1C(N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](CSSC1)C(N)=O)=O)=O)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@@H](N)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1 KNJNGVKTAFTUFL-OCMUWRIYSA-N 0.000 description 4
- JVVRJMXHNUAPHW-UHFFFAOYSA-N 1h-pyrazol-5-amine Chemical compound NC=1C=CNN=1 JVVRJMXHNUAPHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 3
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical group N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- UIAGMCDKSXEBJQ-IBGZPJMESA-N 3-o-(2-methoxyethyl) 5-o-propan-2-yl (4s)-2,6-dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydropyridine-3,5-dicarboxylate Chemical compound COCCOC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC(C)C)[C@H]1C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 UIAGMCDKSXEBJQ-IBGZPJMESA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 0 CC*CC*C(C(C)C1C(C*(C)*(CC)C(C(C)*(C)*C)C(*(C*)C(C)N=O)O)C1)S(C)C(C)(C)CC Chemical compound CC*CC*C(C(C)C1C(C*(C)*(CC)C(C(C)*(C)*C)C(*(C*)C(C)N=O)O)C1)S(C)C(C)(C)CC 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 2
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 2
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 108090000699 N-Type Calcium Channels Proteins 0.000 description 2
- 102000004129 N-Type Calcium Channels Human genes 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 206010047513 Vision blurred Diseases 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 2
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 2
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 2
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 2
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 2
- YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N capsaicin Chemical compound COC1=CC(CNC(=O)CCCC\C=C\C(C)C)=CC=C1O YKPUWZUDDOIDPM-SOFGYWHQSA-N 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 2
- 229960002870 gabapentin Drugs 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 description 2
- 229960000715 nimodipine Drugs 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 2
- AYXYPKUFHZROOJ-ZETCQYMHSA-N pregabalin Chemical compound CC(C)C[C@H](CN)CC(O)=O AYXYPKUFHZROOJ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 229960001233 pregabalin Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 229940020463 prialt Drugs 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- QUOGESRFPZDMMT-RXMQYKEDSA-N (2r)-2-amino-6-(diaminomethylideneamino)hexanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- ICASMSGEUGPHGI-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1h-pyrazole-5-carboxylic acid Chemical compound NC=1C=C(C(O)=O)NN=1 ICASMSGEUGPHGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWHHYOYVRVGJJY-QMMMGPOBSA-N 4-fluoro-L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(F)C=C1 XWHHYOYVRVGJJY-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 1
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102100031366 Ankyrin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100036818 Ankyrin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036817 Ankyrin-3 Human genes 0.000 description 1
- 101100029765 Arabidopsis thaliana PIA2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000237971 Conus magus Species 0.000 description 1
- 206010017577 Gait disturbance Diseases 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000796140 Homo sapiens Ankyrin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000928344 Homo sapiens Ankyrin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000928342 Homo sapiens Ankyrin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000004016 L-Type Calcium Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000420 L-Type Calcium Channels Proteins 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108091005975 Myofilaments Proteins 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 208000011644 Neurologic Gait disease Diseases 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical group NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108700012358 P/Q-type calcium channel Proteins 0.000 description 1
- 102000050761 P/Q-type calcium channel Human genes 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 206010003549 asthenia Diseases 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960002504 capsaicin Drugs 0.000 description 1
- 235000017663 capsaicin Nutrition 0.000 description 1
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000623 carbamazepine Drugs 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229940125400 channel inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 108050003126 conotoxin Proteins 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- -1 demethyl sulfoxide Chemical class 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 1
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 239000002767 noradrenalin uptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940127221 norepinephrine reuptake inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 206010029864 nystagmus Diseases 0.000 description 1
- 229940005483 opioid analgesics Drugs 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008533 pain sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000000063 presynaptic terminal Anatomy 0.000 description 1
- BPKIMPVREBSLAJ-UHFFFAOYSA-N prialt Chemical compound N1C(=O)C(CCSC)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(CCCCN)NC(=O)CNC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CSSC2)CSSCC(C(NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CO)C(=O)NCC(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CSSC3)C(N)=O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C2NC(=O)C3NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 BPKIMPVREBSLAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 238000006798 ring closing metathesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124834 selective serotonin reuptake inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012896 selective serotonin reuptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- HKYHBMLIEAMWRO-UHFFFAOYSA-N sy002454 Chemical compound OC(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=NN1 HKYHBMLIEAMWRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- CBXCPBUEXACCNR-UHFFFAOYSA-N tetraethylammonium Chemical compound CC[N+](CC)(CC)CC CBXCPBUEXACCNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000018405 transmission of nerve impulse Effects 0.000 description 1
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 1
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- 108091023044 voltage-gated calcium channel activity Proteins 0.000 description 1
- 102000038650 voltage-gated calcium channel activity Human genes 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 108091005957 yellow fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091058538 ω-conotoxin MVIIA Proteins 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1787—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for neuromediators, e.g. serotonin receptor, dopamine receptor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/06—Antimigraine agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K11/02—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof cyclic, e.g. valinomycins ; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Zoology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к применению композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида 5 D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные в качестве болеутоляющего средства, при обезболивающем лечении, при лечении хронических и/или невропатических болей и/или для ингибирования нейронных кальциевых каналов N-типа. 7 н. и 7 з.п. ф-лы, 8 ил., 3 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, для применения в качестве болеутоляющего средства (анальгетика), для применения при обезболивающем лечении, для применения при лечении хронических и/или невропатических болей и/или для ингибирования нейронных кальциевых каналов (НКК) N-типа. Изобретение относится далее к способу снижения выделения нейромедиаторов в сравнении с контролем, а также к способу ингибирования нейронного кальциевого канала N-типа с применением вышеуказанной композиции.
Данные Немецкого общества по изучению боли (Deutsche Schmerzgesellschaft) свидетельствуют о том, что более 12 миллионов человек в Германии страдают продолжительными, хроническими болями и/или невропатическими болями. Невропатические боли появляются после повреждения или заболевания афферентных систем в периферической или центральной нервной системе. При фармакотерапии возможно 50-80%-ное уменьшение болей, однако полного отсутствия болей часто достичь не удается. При использовании всех возможных вариантов фармакотерапии примерно 20-40% пациентов лишь в недостаточной степени реагируют на подобное лечение (уменьшение боли менее 30%, так называемые пациенты, не отвечающие на лечение) или страдают от недопустимых побочных эффектов. Наряду с антидепрессантами (три-/тетрациклическими антидепрессантами, избирательно действующими ингибиторами обратного захвата серотонина/норадреналина), опиоидами длительного действия, противосудорожными средствами с действием на нейронные натриевые каналы (например, карбамазепином) и терапевтическими средствами для местного применения (пластырями с лидокаином, пластырями с капсаицином в высокой дозировке) используется лечение лекарственными средствами, оказывающими действие на нейронные кальциевые каналы, такими как габапентин, прегабалин и зиконотид (Ziconotide, торговое наименование Prialt®). При этом габапентин и прегабалин представляют собой специфические ингибиторы кальциевых каналов P/Q-типа, а зиконотид представляет собой единственный разрешенный к применению специфический ингибитор кальциевых каналов N-типа. Зиконотид представляет собой циклический пептид из 25 аминокислот и первоначально был выделен из яда конуса Conus magus в виде ω-конотоксина MVIIA.
Зиконотид используют для лечения пациентов, которые страдают крайне сильными болями и все иные возможные варианты лечения которых оказываются безуспешными. Разрешение на применение препарата Prialt® основано на результатах трех клинических исследований фазы III на более чем 1200 пациентах. Во всех исследованиях зиконотид оказался способен по сравнению с плацебо эффективно уменьшать боли, в том числе и сильные, не поддающиеся лечению хронические боли вследствие онкологического заболевания или СПИДа. Помимо всего прочего дополнительное интратекальное введение зиконотида позволило снизить необходимую дозу опиоидов. По сравнению с морфином зиконотид вызывает меньше нежелательных эффектов.
Однако интратекальное применение зиконотида таит в себе риск занесения потенциально серьезных инфекций, таких как менингит, которые могут быть опасными для жизни. Менингит, заражение которым происходит вследствие проникновения организмов вдоль катетера или случайного загрязнения инфузионной системы, является известным осложнением при интратекальном введении лекарственных средств, прежде всего с использованием внешних систем. Помимо этого зиконотид вызывает у 88% пациентов сильные побочные действия на центральную нервную систему, такие как головокружение, тошнота, нистагм, спутанность сознания, неуверенная походка, нарушения памяти, неясность зрения ("пелена перед глазами"), головные боли, астения, рвота и сонливость. Несмотря на крайне сложный и связанный с высоким риском путь введения и сильные побочные действия зиконотид используется для обезболивающего лечения, поскольку он является единственным разрешенным к применению специфическим ингибитором кальциевых каналов N-типа, который позволяет достигнуть успеха и при очень сильных болях, которые вызваны, например, опухолями или СПИДом и при которых даже морфин уже не приносит никакого облегчения.
В основу настоящего изобретения была положена задача преодолеть недостатки, присущие уровню техники. Задача изобретения состояла прежде всего в том, чтобы предложить композиции, которые обладали бы меньшими побочными действиями и в соответствии с этим специфически и избирательно ингибировали бы НКК N-типа, не оказывая влияния на функцию НКК L-типа. Такие композиции должны допускать возможность их введения в организм простым путем, предпочтительно пероральным путем. Помимо этого ингибирование НКК-каналов N-типа должно носить обратимый характер во избежание долговременного отсутствия болевой чувствительности и во избежание поражения. Желательно было бы, кроме того, наличие значения IC50 выше пикомолярного диапазона с целью обеспечить возможность применения композиций, которое не зависит от особенностей метаболизма, присущих организму конкретного реципиента. При значениях IC50 в пикомолярном диапазоне или ниже даже уже небольшие изменения концентрации действующего вещества приводят к значительным последствиям. Такие изменения могут легко стать причиной недостаточной или избыточной дозировки, которая может зависеть от особенностей метаболизма конкретного индивида и может приводить к нежелательным побочным действиям или долговременным поражениям.
Еще одна задача изобретения состояла в том, чтобы предложить композицию, содержащую действующие вещества, которые обеспечивают преодоление гематоэнцефалического барьера.
Еще одна задача изобретения состояла в том, чтобы предложить стабильные, вводимые в организм энтеральным, внутривенным, подкожным, внутрибрюшинным, интраназальным и/или пероральным путем композиции, которые проявляют свое действие по месту назначения, т.е. на НКК N-типа.
Указанные задачи решаются согласно одному из объектов изобретения с помощью композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, для применения в качестве болеутоляющего средства.
Еще одним объектом настоящего изобретения является композиция, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, для применения при обезболивающем лечении.
Объектом изобретения является далее композиция, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, для применения при лечении хронических и/или невропатических болей.
Еще одним объектом изобретения является композиция, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, для ингибирования нейронных кальциевых каналов (НКК) N-типа.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения пептид состоит в основном из D-аминокислот. Согласно настоящему изобретению выражение "в основном из D-аминокислот" означает, что используемые согласно изобретению пептиды содержат D-аминокислоты в количестве по меньшей мере 50%, 60%, предпочтительно 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, особенно предпочтительно 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, прежде всего 96%, 97%, 98%, 99%, 100%, или состоят из них на по меньшей мере 50%, 60%, предпочтительно 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, особенно предпочтительно 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, прежде всего 96%, 97%, 98%, 99%, 100%.
В сравнении с L-энантиомерными пептидами, такими как зиконотид, D-пептиды (in vivo) намного устойчивее к действию протеаз и поэтому предоставляют возможность их перорального приема с длительными периодами полувыведения. Помимо этого D-пептиды по большей части неиммуногенны или лишь незначительно иммуногенны.
Еще один вариант осуществления изобретения относится к вышеописанной композиции для применения в дозе от 1 мкг до 1 г на кг массы тела, предпочтительно от 100 мкг до 10 мг на кг массы тела, особенно предпочтительно от 0,5 до 5 мг на кг массы тела.
Один из вариантов осуществления изобретения относится к вышеописанной композиции для энтерального, внутривенного, подкожного, внутрибрюшинного, интраназального или перорального применения, предпочтительно перорального применения.
В предпочтительном варианте вышеописанная композиция проявляет значение IC50 (концентрация полумаксимального ингибирования) в отношении НКК N-типа от 1 нМ до 1 мМ, предпочтительно от 10 нМ до 100 мкМ, особенно предпочтительно от 100 нМ до 10 мкМ, прежде всего от 100 нМ до 1 мкМ.
Применяемая согласно изобретению композиция в одном из вариантов содержит пептиды или состоит из пептидов, которые выбраны из группы, состоящей из
ANK1; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirlvyhinr (SEQ ID NO: 8);
ANK2; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirl06yhinr (SEQ ID NO: 9);
ANK3; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirl06yhwnr (SEQ ID NO: 10);
ANK4; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirlvyhwnr (SEQ ID NO: 11);
ANK5; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrvrlvyhkkr (SEQ ID NO: 12);
ANK6; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirlvtkkkr (SEQ ID NO: 13);
ANK7; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrvrl02thikr (SEQ ID NO: 14);
ANK15; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rprvrl06yhwnr (SEQ ID NO: 15);
ANK16; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkr07rlvtkrnr (SEQ ID NO: 16);
ANK17; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rkrirl06yhikr (SEQ ID NO: 17);
ANK18; (свободный N-конец, предпочтительно амидированный С-конец): rpr07rlhtkkkr (SEQ ID NO: 18);
где 02 обозначает 4-фторфенилаланин (D), 06 обозначает фенилглицин (D), а 07 обозначает D-гомоаргинин, или содержащей указанные пептиды.
В одном из альтернативных вариантов производные применяемых согласно изобретению и описанных выше пептидов представляют собой циклизованные или амидированные пептиды.
Применяемые согласно изобретению пептиды в еще одном варианте осуществления изобретения ковалентно связаны на своем свободном С-конце со своим же свободным N-концом и в этом случае, соответственно, представлены в циклизованном виде. Преимущество замыкания цикла состоит также в последующем отсутствии карбоксильной группы на свободном С-конце. Подобные пептиды преимущественно имеют аминокислотную последовательность, в которой произошла циклизация линейной молекулы, например, путем образования ковалентной связи первой аминокислоты с последней, например, с помощью реакции конденсации. Очевидно, что существуют и другие возможности циклизации, при которой, например, между собой соединяют иные аминокислоты. Исключительно в качестве примера можно назвать соединение второй аминокислоты с последней аминокислотой. Точно так же допустимо каждое возможное иное соединение. Преимущество, связанное с соединением между собой первой и последней аминокислот пептида, состоит в отсутствии открытых концов в пептидной цепи (аминокислотной последовательности). Подобная мера приводит далее к тому, что все пептиды с линейными аминокислотными последовательностями, которые после циклизации образуют одинаковые, уже не отличимые друг от друга аминокислотные последовательности, в этом смысле идентичны.
В качестве примера можно рассмотреть следующий. Линейная аминокислотная последовательность известного пептида D3 представляет собой rprtrlhthrnr (SEQ ID NO: 2). Соответствующий циклизованный пептид "cD3", замкнутый путем образования амидной связи между N-концевой аминогруппой и С-концевой карбоксильной группой, более не отличим от циклизованных пептидов с последовательностью prtrlhthrnrr, rtrlhthrnrrp, trlhthrnrrpr, rlhthrnrrprt, lhthrnrrprtr, hthrnrrprtrl, thrnrrprtrlh, hrnrrprtrlht, rnrrprtrlhth, nrrprtrlhthr или rrprtrlhthrn. Из каждой из этих последовательностей, кроме того, также возможно образование циклического пептида cD3.
Аналогичным образом обстоит дело с пептидом RD2, который имеет последовательность ptlhthnrrrrr (SEQ ID NO: 1), с циклизованными пептидами с последовательностью tlhthnrrrrrp, lhthnrrrrrpt, hthnrrrrrptl, thnrrrrrptlh, hnrrrrrptlht, nrrrrrptlhth, rrrrrptlhthn, rrrrptlhthnr, rrrptlhthnrr, rrptlhthnrrr, rptlhthnrrrr и с обозначением "cRD2".
Получение циклизованных пептидов известно из уровня техники и может, например, осуществляться способом, описанным в DE 102005049537 А1.
Преимущество циклизации по первой и последней аминокислотам пептида состоит в последующем отсутствии "открытых" концов в пептидной цепи, которые часто являются местами атаки со стороны различного рода расщепляющих пептиды химически активных факторов в клетках, в организме животных или в организме человека, например, со стороны аминопептидаз и карбоксипептидаз.
Применяемые согласно изобретению пептиды в еще одном варианте его осуществления амидированы на свободном С-конце, в соответствии с чем вместо карбоксильной группы присутствует группа амида кислоты (амидная группа). Таким образом, на С-конце вместо карбоксильной группы (группы -СООН) расположена амидная группа (группа -CONH2). Таким образом, в особенно предпочтительном варианте пептид амидирован на своем свободном С-конце. Благодаря этому достигается еще одно важное преимущество, состоящее в наличии пептида, который не имеет отрицательного избыточного заряда и благодаря большему сродству с молекулой-мишенью способен легче связываться с ней и получение которого возможно простым путем.
В одном из альтернативных вариантов осуществления изобретения вместо карбоксильной группы присутствует группа, выбранная из СОН, COCl, COBr, CONH-алкильного остатка, CONH-алкиламинового остатка (положительный результирующий заряд), при этом перечень групп, которые могут присутствовать вместо карбоксильной группы, не ограничен указанными группами.
Помимо этого в еще одном варианте каждый из применяемых согласно изобретению пептидов удлинен или укорочен на N-конце и/или С-конце на соответственно одну или две аминокислоты по сравнению с исходной последовательностью. В альтернативном варианте один конец имеет одну или две дополнительные аминокислоты, тогда как другой конец имеет на одну или две аминокислоты меньше. В предпочтительном варианте пептиды удлиняют по сравнению с их исходной последовательностью на С-конце на одну аминокислоту, выбранную из группы аминокислот r, l, h и t, предпочтительно на аминокислоту r.
К предпочтительным производным относятся циклизованные (цикло-)пептиды, амидированные пептиды и/или пептиды, последовательность которых удлинена на С-конце на одну аминокислоту, предпочтительно на аргинин r, прежде всего пептид D3r с последовательностью rprtrlhthrnrr (SEQ ID NO: 5) и циклизованный пептид D3r. К следующим предпочтительным производным относятся циклизованные пептиды RD2, а также линейные амидированные формы каждого из них и/или их формы с последовательностью, которая удлинена на С-конце на одну аминокислоту, предпочтительно на аргинин r, т.е. пептид RD2r с последовательностью ptlhthnrrrrrr (SEQ ID NO: 19).
Объектом настоящего изобретения, таким образом, является также пептид RD2r с последовательностью ptlhthnrrrrrr (SEQ ID NO: 19), представляющий собой 13-мер на основе пептида RD2, который на С-конце удлинен на одну аминокислоту, предпочтительно на аминокислоту r. Объектом изобретения является также амидированная форма и/или циклизованная форма cRD2r (аналогично пептиду cRD2). Еще одним объектом изобретения является пептид RD2r, а также его амидированная форма и/или циклизованная форма, предпочтительно cRD2r, для применения в медицине, соответственно в качестве медикамента, предпочтительно для применения при обезболивающем лечении, соответственно при лечении боли, прежде всего хронической и невропатической болей. К следующим применяемым согласно изобретению пептидам относятся пептид RD2RD2 с последовательностью ptlhthnrrrrrptlhthnrrrrr (SEQ ID NO: 3), пептид RD2D3 с последовательностью ptlhthnrrrrrrprtrlhthrnr (SEQ ID NO: 4), пептид цикло-RD2RD2 с последовательностью ptlhthnrrrrrptlhthnrrrrr, пептид цикло-D3r с последовательностью rprtrlhthrnrr, пептид D3p с последовательностью rprtrlhthrnrp (SEQ ID NO: 6) и пептид цикло-D3p, а также пептид D3a с последовательностью rprtrlhthrnra (SEQ ID NO: 7) и цикло-D3a.
Термин "гомологичные последовательности" или "гомологи" согласно настоящему изобретению означает, что аминокислотная последовательность имеет идентичность, соответственно степень идентичности с одной из вышеуказанных аминокислотных последовательностей мономеров по меньшей мере 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%. Вместо термина "идентичность" в настоящем описании в синонимичном значении используется термин "гомологичный" или "гомология". Идентичность между двумя нуклеотидными последовательностями или аминокислотными последовательностями полипептидных цепей вычисляют путем сравнения с помощью программы BESTFIT, основанной на алгоритме, предложенном Smith T.F. и Waterman M.S. (Adv. Appl. Math. 2, 1981, cc. 482-489), при установке следующих параметров для аминокислот: штраф за создание гэпа ("gap creation penalty"): 8 и штраф за удлинение гэпа ("gap extension penalty"): 2, и следующих параметров для нуклеиновых кислот: штраф за создание гэпа: 50 и штраф за удлинение гэпа: 3. В предпочтительном варианте идентичность между двумя нуклеотидными последовательностями или аминокислотными последовательностями полипептидных цепей определяют по идентичности нуклеотидной последовательности/аминокислотной последовательности полипептидной цепи по всей соответствующей длине такой последовательности, вычисляя эту идентичность путем сравнения с помощью программы GAP, основанной на алгоритме, предложенном Needleman S.B. и Wunsch C.D. (J. Mol. Biol. 48, cc. 443-453), при установке следующих параметров для аминокислот: штраф за создание гэпа: 8 и штраф за удлинение гэпа: 2, и следующих параметров для нуклеиновых кислот: штраф за создание гэпа: 50 и штраф за удлинение гэпа: 3.
Две аминокислотные последовательности идентичны согласно настоящему изобретению, если они имеют одну и ту же последовательность.
В одном из альтернативных вариантов гомологию, соответственно идентичность определяют по общей длине каждого из соответствующих пептидов. В другом альтернативном варианте сравнение и тем самым определение идентичности, соответственно гомологии осуществляют только по отдельным участкам, соответственно по отдельным фрагментам.
В этом альтернативном варианте используемые согласно изобретению полипептиды также имеют гомологию по меньшей мере 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%.
В еще одном варианте осуществления изобретения предлагаемая в нем композиция содержит полимеры или состоит из полимеров, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или другие вышеописанные пептиды либо состоят из указанных пептидов. Используемый согласно изобретению полимер содержит 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более описанных выше мономерных пептидов.
В предпочтительном варианте используют димеры, выбранные из группы, состоящей из пептида RD2D3, пептида D3RD2, пептида D3D3, пептида RD2RD2, их гомологов и производных или содержащей указанные пептиды.
Полимер может также образовывать любая комбинация из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более вышеописанных последовательностей в линейной или циклизованной форме.
Полимеры можно получать, например, путем химического синтеза, соответственно синтеза пептидов.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения пептиды могут быть соединены между собой в линейную цепь, прежде всего описанным выше образом. В другом варианте пептиды соединены между собой в разветвленную цепь с образованием используемого согласно изобретению полимера. Под разветвленным полимером может согласно изобретению подразумеваться дендример, у которого мономеры соединены между собой ковалентными или нековалентными связями. Альтернативно этому пептиды могут быть также связаны с базовой молекулой, так называемой молекулой-платформой (такой, например, как полиэтиленгликоль (ПЭГ) или углевод), и образовывать тем самым разветвленный полимер.
Мономерные пептиды линейно присоединены друг к другу в порядке "голова к голове", "хвост к хвосту" или "голова к хвосту" с дополнительными линкерами или без них, а в одном из альтернативных вариантов в целом циклизованы путем образования ковалентной связи между обоими оставшимися концами с дополнительными линкерами (например, одной или несколькими аминокислотами) или без них.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения используемые согласно ему пептиды ковалентно связаны с другими аминокислотами, линкерами, спейсерами и/или функциональными группами.
В одном из альтернативных вариантов осуществления настоящего изобретения эти другие аминокислоты, линкеры, спейсеры и/или функциональные группы не изменяют свойства пептида. В еще одном альтернативном варианте подобные другие аминокислоты, линкеры, спейсеры и/или функциональные группы изменяют свойства пептида. В подобном варианте повышаются/повышается избирательность и/или сродство используемых согласно изобретению полимеров в отношении НКК N-типа.
Под линкером подразумевается одна или несколько молекул, которые присоединены к пептидам ковалентными связями, причем эти линкеры могут быть соединены между собой также ковалентными связями.
Под функциональными группами подразумеваются молекулы, которые ковалентно связаны с пептидами. В одном из вариантов функциональные группы содержат биотиновые группы. Благодаря этому возможно образование сильной ковалентной связи со стрептавидином.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения пептиды содержат так называемые спейсеры. Под спейсером подразумевается молекула, которая ковалентными связями присоединена к пептиду и обладает определенными физическими и/или химическими свойствами, изменяющими свойства пептида. В одном из вариантов используют гидрофильные или гидрофобные спейсеры, предпочтительно гидрофильные спейсеры. Гидрофильные спейсеры выбирают из группы молекул, включающей полиэтиленгликоль, углевод, глицерин, поли-L-лизин и β-аланин.
Пептиды в одном из альтернативных вариантов связаны с еще одним веществом.
Под такими веществами в одном из вариантов подразумеваются лекарственные средства или действующие вещества согласно их определению, приведенному в параграфе 2, соответственно параграфе 4(19) действующего в Германии Закона об обращении лекарственных средств, по состоянию на сентябрь 2012 г.В одном из альтернативных вариантов действующие вещества представляют собой терапевтически активные вещества, применяемые в качестве лекарственных веществ.
В другом варианте под указанными веществами подразумеваются носители для контролируемого высвобождения действующего вещества (называемые также системами с носителями лекарственных средств ("drug carrier systems")). Цель при этом состоит, с одной стороны, в предотвращении быстрого выведения действующих веществ из организма. Большинство традиционных действующих веществ имеют молекулы малых размеров и поэтому лишь короткое время остаются в системе кровообращения, поскольку они из-за размера своих молекул находятся ниже почечного порога и по этой причине отделяются от крови и вновь выводятся из организма. С другой стороны, такими системами с носителями действующих веществ они направленно транспортируются в место вблизи определенных органов или клеток и контролируемо высвобождаются в этом месте.
Под указанными веществами в еще одном варианте подразумеваются вещества, которые усиливают действие пептидов. В одном из альтернативных вариантов подобными соединениями являются аминопиразол и/или его производные. К производным аминопиразола согласно изобретению относятся 3-аминопиразол-5-карбоновая кислота или 3-нитропиразол-5-карбоновая кислота, а также все производные, в которых гетероциклическая группа СН заменена на -CR-, -N-, -О- или -S-, и все полученные их них пептидные димеры, тримеры или тетрамеры, предпочтительно тример аминопиразола. В еще одном альтернативном варианте речь идет о соединениях, которые улучшают растворимость пептидов и/или преодоление гематоэнцефалического барьера.
Подобное вещество соединено с пептидом путем образования ковалентной связи или без ее образования. Соединение в данном случае осуществляется водородными мостиками, в результате гидрофильного, гидрофобного или электростатического взаимодействия, соответственно в результате образования гидрофильной, гидрофобной или электровалентной связи и/или путем стерической иммобилизации.
Следующим объектом настоящего изобретения является способ снижения выделения нейромедиаторов в сравнении с контролем, отличающийся тем, что композицию, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и пептида D3 или состоят из указанных пептидов, и которая предназначена для применения в качестве болеутоляющего средства, вводят в контакт с нейронным кальциевым каналом N-типа.
Предлагаемым в изобретении способом прежде всего снижают поступление кальция через нейронный кальциевый канал в сравнении с контролем.
Помимо этого объектом изобретения является также способ ингибирования нейронного кальциевого канала N-типа в сравнении с контролем, отличающийся тем, что нейронный кальциевый канал вводят в контакт с композицией, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, их гомологов с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производных пептида RD2 или пептида D3 или содержащей указанные пептиды, а также состоящей из полимеров или содержащей полимеры, которые содержат пептид RD2, пептид D3, их гомологи с по меньшей мере 50%-ной идентичностью и производные пептида RD2 и/или пептида D3.
Согласно изобретению выражение "вводят в контакт" означает наличие условий, обеспечивающих возможность взаимодействия между используемыми согласно изобретению пептидами и нейронным кальциевым каналом N-типа, прежде всего физических и/или химических взаимодействий, таких, например, как образование координационных связей или водородных мостиков.
Выбор контроля является стандартной частью экспериментального метода. В качестве контроля используют организм, который в одном из возможных вариантов идентичен исследуемому организму. Исследуемый организм подвергают действию предлагаемой в изобретении композиции, соответственно вводят в контакт с ней в наиболее широком смысле этого выражения, тогда как контроль (контрольный организм) не подвергают такой процедуре. Согласно изобретению термин "организм" охватывает также части организмов, ткани, пробы тканей, отдельные клетки или клеточные культуры, части клеток, такие как мембраны, содержащие НКК, предпочтительно N- или L-типа, или искусственные мембраны, такие, например, как двухслойная липидная мембрана, содержащие нейронные кальциевые каналы, предпочтительно N-типа и/или L-типа. Контроль, равно как и исследуемый организм выбирают из вышеуказанного перечня. В другом возможном варианте контроль определяется согласно заданным условиям клинических исследований, соответственно согласно заданным требованиям к ним.
Согласно изобретению термин "ингибирование" означает снижение активности нейронных кальциевых каналов, предпочтительно N-типа, под действием применяемой согласно изобретению композиции по отношению к контролю. Контроль согласно изобретению не вводят в контакт с этой композицией. Альтернативно этому контроль можно также вводить в контакт с известными ингибиторами.
Сравнив применение известных ингибиторов с применением используемой согласно изобретению композиции, можно также сделать вывод о ее эффективности.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения ингибирование определяют при концентрации, которая соразмерна значению IC50, соответственно равна ему.
Используемые согласно изобретению композиции ингибируют НКК N-типа на по меньшей мере 10%, 15%, 20%, 25%, предпочтительно на 30%, особенно предпочтительно на 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, прежде всего на 90% или 100%.
В одном из вариантов ингибирование определяют согласно изобретению так называемым методом пэтч-кламп (методом фиксации потенциала). При этом измеряют ионный ток через кальциевый канал при разных значениях напряжения. Ингибирование нейронного кальциевого канала, таким образом, определяют по уменьшению ионного тока. В одном из альтернативных вариантов ионный ток уменьшается на по меньшей мере 10%, 15%, 20%, 25%, предпочтительно на 30%, 35%, особенно предпочтительно на 40%, 42%, 44%, 46%, 48%, 50%, 52%, 54%, 56%, 58%, 60%, 70%, 80%, прежде всего на 90% или 100%. В предпочтительном варианте уменьшение ионного тока определяют при концентрации пептидов, равной значению IC50. В одном из вариантов измерение методом пэтч-кламп проводят при введении соответствующего канала в контакт с применяемой согласно изобретению композицией в концентрации 150нМ.
Предлагаемые в изобретении способы отличаются тем, что функция НКК L-типа не изменяется по отношению к контролю. Иными словами, поступление кальция через НКК L-типа не изменяется по отношению к контролю. Используемые согласно изобретению пептиды действуют специфично и/или избирательно на НКК N-типа.
Объектом настоящего изобретения является также применение используемых согласно изобретению пептидов в качестве замены конотоксину.
Так, в частности, введение в контакт с НКК, соответственно с содержащей их мембраной или с соответствующими содержащими их источниками можно осуществлять in vitro (ex vivo).
Изобретение относится также к лечению хронических и/или невропатических болей, т.е. к лечению, которое направлено на утоление болей и при котором в организм подвергаемого лечению индивида энтеральным, внутривенным, подкожным, внутрибрюшинным, интраназальным или пероральным путем, предпочтительно пероральным путем, вводят используемые согласно изобретению пептиды в количестве от 1 мкг до 1 г на кг массы тела.
Таким образом, изобретение относится также к способу, заключающемуся во включении используемых согласно изобретению пептидов в состав лекарственных (фармацевтических) препаратов распространенными, известными специалисту методами. В соответствии с этим объектом изобретения является также применение вышеописанных пептидов в лекарственных препаратах. Тем самым лекарственный препарат, содержащий используемые согласно изобретению и описанные выше пептиды, равным образом является объектом настоящего изобретения.
Объектом настоящего изобретения является далее применение композиции, заявленной в п.формулы изобретения, для приготовления болеутоляющего средства, лекарственного средства для применения при обезболивающем лечении и/или лекарственного средства для лечения хронических и невропатических болей.
Еще одним объектом изобретения является применение композиции, заявленной в п. 1 формулы изобретения, для ингибирования нейронных кальциевых каналов (НКК) N-типа.
При осуществлении предлагаемого в изобретении способа можно также использовать другие, описанные выше пептиды, их производные и гомологи.
Процедуры, описанные в последующих примерах, можно осуществлять с любым из вышеописанных пептидов.
Примеры
1. Пептид RD2 (амидированный на С-конце)
А. Белковые конструкции
Кодирующие области обоих разных пороформирующих субъединиц α1 (CaVα1) потенциалозависимого кальциевого канала лигировали с флуоресцентными белками с сохранением рамки считывания (лигирование по С-концам) следующим путем. Субъединицу из кролика CaV1.2 (UniProtKB:P15381) сшивали с желтым флуоресцентным белком YFP (CaV1.2-YFP), тогда как человеческую субъединицу CaV2.2 (UniProtKB:Q00975-l) сшивали с зеленым флуоресцентным белком GFP (CaV2.2-GFP). Одну β-субъединицу CaVβ2е (UniProtKB:Q8VGC3-2) присоединяли к мономерному красному флуоресцентному белку mRFP (CaVβ2e-mRFP), а другую β-субъединицу CaVβ4 (UniProtKB:O00305.2) присоединяли к мономерному красному флуоресцентному белку mCherry (CaVβ4-mCherry).
Б. Трансфекция клеток
Поскольку нормальная функция и поверхностная экспрессия субъединицы CaVα1 требует сборки (ассоциации) с субъединицей CaVβ, клетки линии tsA201 подвергали временной котрансфекции либо белковыми конструкциями CaV1 2-YFP и CaVβ2e-mRFP, либо белковыми конструкциями CaV2.2-GFP и CaVβ4-mCherry. Трансфекцию осуществляли посредством реагента Lipofectamine 2000™ (фирма Invitrogen) и успешно трансфицированные клетки идентифицировали на основании сигнала флуоресценции. Электрофизиологическую регистрацию отведений проводили через 24-48 ч после трансфекции.
В. Электрофизиологические исследования
Ионные токи измеряли методом пэтч-кламп в конфигурации "whole cell" ("целая клетка"), используя усилитель ЕРС-10 с установленным на нем программным обеспечением PatchMaster (фирма НЕКА Elektronik). В качестве носителя использовали барий. Микропипетки из боросиликатного стекла с сопротивлением от 0,9 до 2 МОм изготавливали на устройстве для их вытяжки (пуллере) Sutter Р-1000 (фирма Harvard Apparatus) и поверхность их кончиков подвергали термической полировке, используя микрокузницу MF-830 фирмы Narishige. В качестве внешнего раствора при измерениях использовали раствор следующего состава: ТЭА-MeSO3 в концентрации 140 мМ (ТЭА означает тетраэтиламмоний), BaCl2 в концентрации 10 мМ и HEPES (рН 7,3) в концентрации 10 мМ (HEPES означает N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновую кислоту), а в качестве внутреннего раствора использовали раствор следующего состава: Cs-MeSO3 в концентрации 135 мМ, EGTA в концентрации 10 мМ (EGTA означает этиленгликольтетрауксусную кислоту), CsCl2 в концентрации 5 мМ, MgCl2 в концентрации 1 мМ, MgATP в концентрации 4 мМ (АТР означает аденозинтрифосфат), Na2GTP в концентрации 0,4 мМ (GTP означает гуанозинтрифосфат) и HEPES (рН 7,3) в концентрации 10 мМ. Анализ данных проводили, используя комбинацию программного обеспечения FitMaster (фирма НЕКА), программного обеспечения Origin (фирма OriginLab) и программного обеспечения Excel (фирма Microsoft). Все данные представляли в виде среднего значения ± стандартная ошибка. Ионные токи корректировали, используя протокол Р/4 (вычитание утечки).
Для исследования фармакологического действия пептида RD2 клетки открепляли и переносили в перфузионный поток, который содержал испытуемое вещество или же не содержал его. Наблюдения осуществляли при постоянной перфузии с целью обеспечить постоянную концентрацию испытуемого вещества. Пептид RD2 растворяли в деметилсульфоксиде (ДМСО) с конечной концентрацией 1 мМ и незадолго до применения растворяли во внешнем растворе до концентрации 150 нМ. В экспериментах с контролем использовали известные блокаторы кальциевых каналов CaV1.2 и CaV2.2, а именно: нимодипин (в концентрации 10 мкМ) и ω-конотоксин (в концентрации 1нМ).
Г. Результаты
Влияние пептида RD2 на опосредуемые кальциевыми каналами CaV2.2 ионные потоки
Кальциевые каналы CaV2.2 локализованы в пресинаптических нервных окончаниях и опосредуют передачу нервных импульсов на центральные синапсы. Опосредуемые кальциевыми каналами CaV2.2 ионные токи регистрировали на клетках линии tsA201, экспрессирующих CaV2.2/CaVβ4. Перфузия клеток внешним раствором, содержащим пептид RD2 (150 нМ), но не исключительно внешним раствором, приводила к значительному уменьшению ионного тока (см. фиг. 1А и 1Б, где на фиг.1А приведен репрезентативный график изменения силы тока, опосредуемого каналом CaV2.2, в ответ на подачу импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с начального потенциала покоя, равного -90 мВ, до потенциала, равного +20 мВ, до и после введения в контакт с композицией, содержащей пептид RD2 в концентрации 150 мМ, а на фиг.1Б приведена временная характеристика процесса ингибирования, зарегистрированного в репрезентативной клетке, при подаче последовательных импульсов каждые пять секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +20 мВ). Вольтамперная характеристика (зависимость тока I от напряжения V) свидетельствовала об уменьшении ионного тока при всех исследовавшихся значениях напряжения на величину вплоть до 55% (см. фиг. 1В, где в графическом виде представлено усредненное отношение силы тока к напряжению у клеток, экспрессирующих кальциевые каналы CaV2.2, в присутствии и в отсутствие пептида RD2 (n=7)). Подавление ионного тока не сопровождалось изменением потенциалозависимой активации канала, что приводит к предположению о наличии у пептида RD2 пороблокирующего механизма (см. фиг.1Г, где в графическом виде представлена доля активированных каналов в функции напряжения (кривая активации) для тех же клеток, что и на фиг.1В, в сравнении с контролем: тем самым не происходит никакого изменения функции или механизма действия канала, поскольку кривые накладываются друг на друга и не смещены друг относительно друга). Ионные токи прерываются после воздействия блокатором кальциевых каналов CaV2.2, а именно ω-конотоксином в концентрации 1 нМ, чем подтверждается тот факт, что ионные токи опосредовались каналом CaV2.2 (см. вставку на фиг.1А).
Влияние пептида RD2 на опосредуемые кальциевыми каналами CaV1.2 ионные токи
Белок CaVl.2 является кальциевым каналом L-типа, который экспрессируется преимущественно в сердце и ответственен за связь электрической активации кардиомиоцитов с сокращением миофиламентов. Ионные токи регистрировались на коэкспрессирующих CaV1.2 и CaVβ2е клетках и оставались почти неизменными после воздействия пептидом RD2 в концентрации 150 нМ (см. фиг.2А, где приведены репрезентативные графики изменения силы тока, опосредуемого каналом CaV1.2, в ответ на подачу импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с начального потенциала покоя, равного -90 мВ, до потенциала, равного +10 мВ, до и после введения в контакт с композицией, содержащей пептид RD2 в концентрации 150 мМ, и фиг.2Б, где приведена соответствующая временная характеристика, указывающая на отсутствие всякого изменения силы тока при перфузии раствором, содержащим пептид RD2 в концентрации 150 нМ). В отличие от этого перфузия раствором, содержащим нимодипин в концентрации 10 мкМ, который представляет собой известный блокатор канала CaV1.2, приводила к почти полному подавлению ионного тока. Таким образом, присутствие пептида RD2 не влияло на потенциалозависимость активации канала CaV1.2 (см. фиг.2В и 2Г).
Д. Выводы
Пептид RD2 исследовали в концентрации 150нМ на его способность подавлять (блокировать) ионные токи, опосредуемые каналами CaV2.2 и CaV1.2. Исследования проводили на клетках линии tsA201, экспрессирующих каналы CaV2.2 и CaV1.2, используя метод пэтч-кламп в конфигурации "whole cell".
Пептид RD2 блокирует канал CaV2.2, тогда как канал CaV1.2 невосприимчив к пептиду RD2 в исследовавшейся концентрации (фиг.3).
2. Пептид D3 (амидированный на С-конце)
A. Белковые конструкции
Кодирующую область человеческих пороформирующих субъединиц α1 (CaVα1) потенциалозависимого кальциевого канала CaV2.2 (UniProtKB:Q00975-1) сшивали с зеленым флуоресцентным белком GFP с получением конструкции CaV2.2-GFP. β-Субъединицу CaVβ4 (UniProtKB:O00305.2) сшивали с мономерным красным флуоресцентным белком mCherry с получением конструкции CaVβ4-mCherry.
Б. Трансфекция клеток
Поскольку нормальная функция и поверхностная экспрессия субъединицы CaVα1 требует сборки (ассоциации) с субъединицей CaVβ, клетки линии tsA201 подвергали временной котрансфекции белковыми конструкциями CaV2.2-GFP и CaVβ4-mCherry. Трансфекцию осуществляли посредством реагента Lipofectamine 2000™ (фирма Invitrogen) и успешно трансфицированные клетки идентифицировали на основании сигнала флуоресценции. Электрофизиологическую регистрацию отведений проводили через 24-48 ч после трансфекции.
B. Электрофизиологические исследования
Ионные токи измеряли методом пэтч-кламп в конфигурации "whole cell" ("целая клетка"), используя усилитель ЕРС-10 с установленным на нем программным обеспечением PatchMaster (фирма НЕКА Elektronik). В качестве носителя использовали барий. Микропипетки из боросиликатного стекла с сопротивлением от 0,9 до 2 МОм изготавливали на устройстве для их вытяжки (пуллере) Sutter Р-1000 (фирма Harvard Apparatus) и поверхность их кончиков подвергали термической полировке, используя микрокузницу MF-830 фирмы Narishige. В качестве внешнего раствора при измерениях использовали раствор следующего состава: ТЭА-MeSO3 в концентрации 140 мМ, BaCl2 в концентрации 10 мМ и HEPES (рН 7,3) в концентрации 10 мМ, а в качестве внутреннего раствора использовали раствор следующего состава: Cs-MeSO3 в концентрации 135 мМ, EGTA в концентрации 10 мМ, CsCl2 в концентрации 5 мМ, MgCl2 в концентрации 1 мМ, MgATP в концентрации 4 мМ, Na2GTP в концентрации 0,4 мМ и HEPES (рН 7,3) в концентрации 10 мМ. Анализ данных проводили, используя комбинацию программного обеспечения FitMaster (фирма НЕКА), программного обеспечения Origin (фирма OriginLab) и программного обеспечения Excel (фирма Microsoft). Все данные представляли в виде среднего значения ± стандартная ошибка. Ионные токи корректировали, используя протокол Р/4 (вычитание утечки).
Для исследования фармакологического действия пептида D3 клетки открепляли и переносили в перфузионный поток, который содержал испытуемое вещество или же не содержал его. Наблюдения осуществляли при постоянной перфузии с целью обеспечить постоянную концентрацию испытуемого вещества. Пептид D3 растворяли в ДМСО с конечной концентрацией 1 мМ и незадолго до применения растворяли во внешнем растворе до концентрации 150 нМ. В экспериментах с контролем использовали известный блокатор кальциевых каналов CaV2.2, а именно ω-конотоксин (в концентрации 1нМ).
Г. Результаты
Влияние пептида D3 на опосредуемые кальциевыми каналами CaV2.2 ионные потоки
Опосредуемые кальциевыми каналами CaV2.2 ионные токи регистрировали на клетках линии tsA201, экспрессирующих CaV2.2/CaBβ4. Перфузия клеток внешним раствором, содержащим пептид D3 (150 нМ), но не исключительно внешним раствором, приводила к значительному уменьшению ионного тока (см. фиг.4А и 4Б, где на фиг.4А приведен репрезентативный график изменения силы тока, опосредуемого каналом CaV2.2, в ответ на подачу импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с начального потенциала покоя, равного -90 мВ, до потенциала, равного +20 мВ, до и после введения в контакт с композицией, содержащей пептид D3 в концентрации 150 мМ, а на фиг.4Б приведена характеристика процесса индуцированного пептидом D3 ингибирования, которое носит обратимый характер после реперфузии внешним раствором Рингера; силу тока регистрировали при подаче последовательных импульсов каждые 5 секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +20 мВ). Вольтамперная характеристика (зависимость тока I от напряжения V) свидетельствовала об уменьшении ионного тока при всех исследовавшихся значениях напряжения на величину вплоть до 54% (см. фиг.4В). Подавление ионного тока не сопровождалось изменением потенциалозависимой активации канала, что приводит к предположению о наличии у пептида D3 пороблокирующего механизма (см. фиг.4Г). Ионные токи прерываются после воздействия блокатором кальциевых каналов CaV2.2, а именно ω-конотоксином в концентрации 1нМ, чем подтверждается тот факт, что ионные токи опосредовались каналом CaV2.2 (см. вставку на фиг.4А).
Д. Выводы
Пептид D3 блокирует канал CaV2.2 (фиг.5).
3. Пептид с D3 (циклизованный пептид D3) и пептид cRD2 (циклизованный пептид RD2)
Эксперименты проводили аналогично примерам 1 и 2.
Обобщенные данные о влиянии пептидов cD3r и cRD2r на каналы CaV2.2 и CaV1.2 (фиг.6)
На обеих столбиковых диаграммах обобщены данные о средних ионных токах, при этом такие диаграммы отражают зависимость силы тока от напряжения, которое составляло +20 мВ в экспериментах с каналом CaV2.2 и +10 мВ в экспериментах с каналом CaV1.2. **р≤0,01
Влияние пептида cD3r на каналы CaV2.2 и CaV1.2 (фиг.7) Репрезентативные отведения ионного тока, опосредуемого каналом CaV2.2, регистрировали в течение импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с -90 мВ до +20 мВ до и после воздействия пептидом cD3r в концентрации 150нМ (левое изображение на фиг.7А). На правом изображении на фиг.7А приведена временная характеристика процесса подавления ионного тока в репрезентативной клетке при подаче последовательных импульсов каждые пять секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +20 мВ. На фиг.7Б в графическом виде представлены усредненное отношение силы тока к напряжению у клеток, экспрессирующих кальциевые каналы CaV2.2, в присутствии и в отсутствие пептида cD3r (n=8) и доля активированных каналов в функции напряжения (кривая активации). На фиг.7В в графическом виде представлены репрезентативные отведения ионного тока, опосредуемого каналом CaV2.1, по результатам их регистрации в течение импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с -90 мВ до +10 мВ до и после воздействия пептидом cD3r в концентрации 150 нМ (левое изображение на фиг.7В). На правом изображении на фиг.7В приведена временная характеристика процесса подавления ионного тока в репрезентативной клетке при подаче последовательных импульсов каждые пять секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +20 мВ. На фиг.7Г в графическом виде представлено усредненное отношение силы тока к напряжению в присутствии и в отсутствие пептида cD3r (n=8), а также приведена кривая активации для клеток, экспрессирующих кальциевые каналы CaV2.1 (n=7).
Влияние пептида cRD2r на каналы CaV2.2 и CaV1.2 (фиг.8)
На фиг.8А в графическом виде представлены репрезентативные отведения ионного тока, опосредуемого каналом CaV2.2, по результатам их регистрации в течение импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с -90 мВ до +20 мВ до и после воздействия пептидом cRD2r в концентрации 150 нМ (левое изображение на фиг.8А). На правом изображении на фиг.8А приведена временная характеристика процесса подавления ионного тока в репрезентативной клетке при подаче последовательных импульсов каждые пять секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +20 мВ. На фиг.8Б в графическом виде представлены усредненное отношение силы тока к напряжению у клеток, экспрессирующих кальциевые каналы CaV2.2, в присутствии и в отсутствие пептида cRD2r (n=7) и доля активированных каналов в функции напряжения (кривая активации). На фиг.8В в графическом виде представлены репрезентативные отведения ионного тока, опосредуемого каналом CaV2.1, по результатам их регистрации в течение импульса длительностью 40 мс с изменением потенциала с -90 мВ до +20 мВ до и после воздействия пептидом cRD2r в концентрации 150 нМ (левое изображение). На правом изображении на фиг.8В приведена временная характеристика процесса подавления ионного тока в репрезентативной клетке при подаче последовательных импульсов каждые пять секунд с изменением потенциала от -90 мВ до +10 мВ. На фиг.8Г в графическом виде представлено усредненное отношение силы тока к напряжению в присутствии и в отсутствие пептида cRD2r (n=8), а также приведена кривая активации для клеток, экспрессирующих кальциевые каналы CaV2.1 (n=6).
Claims (14)
1. Применение композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды в качестве болеутоляющего средства.
2. Применение композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды для обезболивающего лечения.
3. Применение композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды для лечения хронических болей.
4. Применение композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды для лечения невропатических болей.
5. Применение композиции, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды для ингибирования нейронных кальциевых каналов (НКК) N-типа.
6. Применение по одному из пп. 1-5, отличающееся тем, что пептиды состоят в основном из D-энантиомеров.
7. Применение по одному из пп. 1-5 в дозе от 1 мкг до 1 г на кг массы тела.
8. Применение по одному из пп. 1-5 для энтерального, внутривенного, подкожного, внутрибрюшинного, интраназального или перорального применения, предпочтительно перорального применения.
9. Применение по одному из пп. 1-5, отличающееся значением IC50 в отношении НКК N-типа от 1нМ до 1мМ.
10. Применение по одному из пп. 1-5, отличающееся тем, что пептиды, выбранные из группы, состоящей из пептида RD2, пептида D3, пептида cD3r, пептида cRD2r или содержащей указанные пептиды, связаны с другими аминокислотами, линкерами, спейсерами, функциональными группами и/или веществами.
11. Способ снижения выделения нейромедиаторов в сравнении с контролем, отличающийся тем, что композицию, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды, вводят в контакт с нейронным кальциевым каналом N-типа.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что снижают поступление кальция через нейронный кальциевый канал в сравнении с контролем.
13. Способ ингибирования нейронного кальциевого канала N-типа в сравнении с контролем, отличающийся тем, что нейронный кальциевый канал вводят в контакт с композицией, которая состоит из пептидов или содержит пептиды, которые выбраны из группы, состоящей из пептида RD2, который имеет последовательность SEQ ID NO: 1, пептида D3, который имеет последовательность SEQ ID NO: 2, пептида cD3r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 5 в циклизованной форме, cRD2r, который имеет последовательность SEQ ID NO: 19 в циклизованной форме, или содержащей указанные пептиды.
14. Способ по одному из пп. 11-13, отличающийся тем, что функция НКК L-типа не изменяется по отношению к контролю.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE102016125645.5 | 2016-12-23 | ||
| DE102016125645.5A DE102016125645A1 (de) | 2016-12-23 | 2016-12-23 | D-enantiomere Peptide zur Therapie von chronischem und neuropathischem Schmerz |
| PCT/EP2017/084199 WO2018115341A1 (de) | 2016-12-23 | 2017-12-21 | D-enantiomere peptide zur therapie von chronischem und neuropathetischem schmerz |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2019118602A RU2019118602A (ru) | 2021-01-25 |
| RU2019118602A3 RU2019118602A3 (ru) | 2021-01-29 |
| RU2759722C2 true RU2759722C2 (ru) | 2021-11-17 |
Family
ID=60953845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019118602A RU2759722C2 (ru) | 2016-12-23 | 2017-12-21 | D-энантиомерные пептиды для терапии хронической и невропатической боли |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11224632B2 (ru) |
| EP (1) | EP3558336A1 (ru) |
| JP (1) | JP7143304B2 (ru) |
| CN (1) | CN110167578A (ru) |
| BR (1) | BR112019012936A2 (ru) |
| DE (1) | DE102016125645A1 (ru) |
| MX (1) | MX2019007217A (ru) |
| RU (1) | RU2759722C2 (ru) |
| WO (1) | WO2018115341A1 (ru) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024259977A1 (zh) * | 2023-06-21 | 2024-12-26 | 南京安吉生物科技有限公司 | 经修饰的多肽及其在镇痛领域的应用 |
| DE102023119241A1 (de) * | 2023-07-20 | 2025-01-23 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verwendung von D-enantiomeren Peptiden für die Therapie von neuropathischem Schmerz |
| WO2025186220A1 (en) * | 2024-03-05 | 2025-09-12 | Priavoid Gmbh | Peptide for treatment of cognitive diseases |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2508295C2 (ru) * | 2012-03-22 | 2014-02-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Биофармокс" | Синтетические пептиды с ненаркотическим типом анальгетического действия |
| WO2015043567A1 (de) * | 2013-09-26 | 2015-04-02 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Amyloid-beta-bindende peptide und deren verwendung für die therapie und die diagnose der alzheimerschen demenz |
| US20150119336A1 (en) * | 2012-04-05 | 2015-04-30 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Polymers containing multivalent amyloid-beta-binding d-peptides and their use |
| DE102015003676A1 (de) * | 2015-03-20 | 2016-09-22 | Forschungszentrum Jülich GmbH Fachbereich Patente | Spezifisch A-Beta Spezies bindende Peptide für die Therapie und/oder die Diagnose der Alzheimerschen Demenz |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE0004056D0 (sv) * | 2000-11-06 | 2000-11-06 | Astrazeneca Ab | N-type calcium channel antagonists for the treatment of pain |
| DE10117281A1 (de) * | 2001-04-06 | 2002-10-24 | Inst Molekulare Biotechnologie | Peptid zur Diagnose und Therapie der Alzheimer-Demenz |
| US20040142325A1 (en) * | 2001-09-14 | 2004-07-22 | Liat Mintz | Methods and systems for annotating biomolecular sequences |
| DE102005049537B4 (de) | 2005-10-17 | 2010-04-22 | Forschungszentrum Karlsruhe Gmbh | Verfahren zur Herstellung zyklischer Peptide und Verwendung der derart hergestellten zyklischen Peptide |
| WO2011032233A1 (en) * | 2009-09-21 | 2011-03-24 | The University Of Queensland | Novel omega conotoxin peptides |
| DE102012108598A1 (de) * | 2012-09-14 | 2014-04-10 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Neue, von D3 abgeleitete D-enantiomere Peptide und deren Verwendung |
| DE102012102998B4 (de) * | 2012-04-05 | 2013-12-05 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Polymere, enthaltend multivalente Amyloid-Beta-bindende D-Peptide und deren Verwendung |
| DK2991664T3 (da) * | 2013-04-30 | 2019-12-02 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Midler til forebyggelse og behandling af følgesygdomme af HIV og andre virusinfektioner |
| DE102013016002A1 (de) * | 2013-09-26 | 2015-03-26 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Zyklische, Amyloid-Beta-bindende Peptide und deren Verwendung |
| DE102015003503A1 (de) * | 2015-03-20 | 2016-09-22 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Spezifisch Amyloid-Beta bindende Peptide und deren Verwendung für die Therapie und Diagnose der Alzheimerschen Demenz |
-
2016
- 2016-12-23 DE DE102016125645.5A patent/DE102016125645A1/de active Pending
-
2017
- 2017-12-21 BR BR112019012936A patent/BR112019012936A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2017-12-21 WO PCT/EP2017/084199 patent/WO2018115341A1/de not_active Ceased
- 2017-12-21 RU RU2019118602A patent/RU2759722C2/ru active
- 2017-12-21 US US16/470,616 patent/US11224632B2/en active Active
- 2017-12-21 CN CN201780080349.2A patent/CN110167578A/zh active Pending
- 2017-12-21 EP EP17826511.2A patent/EP3558336A1/de active Pending
- 2017-12-21 MX MX2019007217A patent/MX2019007217A/es unknown
- 2017-12-21 JP JP2019534338A patent/JP7143304B2/ja active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2508295C2 (ru) * | 2012-03-22 | 2014-02-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Биофармокс" | Синтетические пептиды с ненаркотическим типом анальгетического действия |
| US20150119336A1 (en) * | 2012-04-05 | 2015-04-30 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Polymers containing multivalent amyloid-beta-binding d-peptides and their use |
| WO2015043567A1 (de) * | 2013-09-26 | 2015-04-02 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Amyloid-beta-bindende peptide und deren verwendung für die therapie und die diagnose der alzheimerschen demenz |
| DE102015003676A1 (de) * | 2015-03-20 | 2016-09-22 | Forschungszentrum Jülich GmbH Fachbereich Patente | Spezifisch A-Beta Spezies bindende Peptide für die Therapie und/oder die Diagnose der Alzheimerschen Demenz |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JOSEPH G. MCGIVERN, "Targeting N-type and T-type calcium channels for the treatment of pain", DRUG DISCOVERY TODAY, 2006, vol. 11, no. 5-6, pages 245 - 253, doi:10.1016/S1359-6446(05)03662-7. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE102016125645A1 (de) | 2018-06-28 |
| MX2019007217A (es) | 2019-09-11 |
| RU2019118602A3 (ru) | 2021-01-29 |
| US11224632B2 (en) | 2022-01-18 |
| WO2018115341A1 (de) | 2018-06-28 |
| EP3558336A1 (de) | 2019-10-30 |
| BR112019012936A2 (pt) | 2019-12-10 |
| JP2020502243A (ja) | 2020-01-23 |
| RU2019118602A (ru) | 2021-01-25 |
| CN110167578A (zh) | 2019-08-23 |
| US20190314447A1 (en) | 2019-10-17 |
| JP7143304B2 (ja) | 2022-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI648401B (zh) | 生長分化因子１５（ｇｄｆ－１５）構築體 | |
| RU2759722C2 (ru) | D-энантиомерные пептиды для терапии хронической и невропатической боли | |
| US10889618B2 (en) | D-enantiomeric peptides derived from D3 and use thereof | |
| Lu et al. | P2X7 signaling promotes microsphere embolism-triggered microglia activation by maintaining elevation of Fas ligand | |
| KR20190067219A (ko) | 통증 예방, 경감 또는 치료에서의 신경 흥분성 상해 관련 폴리펩타이드의 용도 | |
| Lee et al. | A sulfonated reversible thermal gel for the spatiotemporal control of VEGF delivery to promote therapeutic angiogenesis | |
| US20150299280A1 (en) | Medical treatment use of cell-membrane-permeable fibroblast growth factor | |
| CN111471092B (zh) | 一种具有Nav1.9特异激活作用的蜘蛛多肽毒素及其应用 | |
| TWI708611B (zh) | 聚乙二醇化介白素-１１之組合物及方法 | |
| AU2017305946B2 (en) | C1q and HMGB1 fusion proteins and uses thereof | |
| US20240252660A1 (en) | Cargo molecule transduction domain rmmr1, variant thereof, recombinant cargo molecule, and method for transducing cargo molecule using same | |
| WO2014184564A1 (en) | Novel polymer conjugates | |
| KR102479847B1 (ko) | 새로운 단백질 수송 도메인, 이를 포함하는 융합 화합물 및 이 융합 화합물을 포함하는 약학 조성물 | |
| US20210087232A1 (en) | D-enantiomeric peptides for anti-inflammatory treatment of amyotropic lateral sclerosis (als) and other diseases driven by neuro-inflammation | |
| US20240207162A1 (en) | Cargo molecule transduction domain rmad1, variant thereof, recombinant cargo molecule, and method for transducing cargo molecule using same | |
| US20240010694A1 (en) | Hydrogels containing affibodies and uses thereof | |
| WO2024257119A1 (en) | Bispecific agonists (bas) toward il-7r and egfr promotes healing of the wounds | |
| DE102021005922A1 (de) | Inhibierung der Interaktion zwischen viralen Spike Proteinen von SARS-CoV-2 und dem humanen Angiotensin-konvertierenden Enzym 2 (hACE2) | |
| WO2025001976A1 (zh) | 新型补体抑制剂及其制备、应用和产品 | |
| CN101955543B (zh) | 与层粘连蛋白结合的神经生长因子及其编码基因与应用 | |
| WO2023015176A1 (en) | Compositions and methods for vascular protection after myocardial ischemia | |
| KR20240006722A (ko) | 화물분자 수송 도메인 sy1, 이를 포함하는 융합 화합물 및 이 융합 화합물을 포함하는 약학 조성물 | |
| Pan et al. | Disruption of NMDAR-CRMP-2 signaling protects against focal cerebral ischemic damage in the rat middle cerebral artery occlusion model | |
| KR20150114107A (ko) | Ｐｏｎ1 융합단백질을 포함하는 파킨슨병 예방 및 치료용 약학 조성물 | |
| Lee | Stromal Cell-derived Factor-1 Retention and Cardioprotection for Ischemic Myocardium |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20211223 |